Plné znění - 32018R0150

Xxxxxxx X

XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX&xxxx;XXXXXXXXXXX MLÉCE

Metoda: XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X OBLAST XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX) x&xxxx;xx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;XXX.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx XX + XX: xxxxxxxxxx zlomek látky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX METODY

Extrakce xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx PS x&xxxx;XX xxxx xxxxxxxx o-ftaldialdehydu (XXX) xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx (RP) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxx XX x&xxxx;XX xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xxxxxxxx známé množství XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se pouze xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxx xxxx uvedeno xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx destilovaná xxxx xxxx xxxx nejméně xxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx materiál: XXXX x xxxxxxx xxxxxxx 99&xxxx;%

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 18&xxxx;°X.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx pro XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx, 12 X xxxxx roztok

4.3.2.   Kyselina boritá, 0,4 X xxxxx xxxxxx x hodnotou xX xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1) na 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (XXX)

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx HPLC

4.4.1.   Eluční xxxxxxxxxxxx xxxx xxx připravena xxxxxx chemikálií xxxxxxx xxx HPLC.

4.4.2.   Voda čistoty xxx HPLC

4.4.3.   Methanol fluorometricky xxxxxxxx čistoty

4.4.4.   Tetrahydrofuran

4.4.5.   Natrium dihydrogenfosforečnan

4.4.6.   Octan xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx s přesností xxxxxx xx 0,1&xxxx;xx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx odečtu xx 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx míchačka

5.5.   Dělené xxxxxx xxxxxxx dávkovat 0,2, 0,5 a 5 ml

5.6.   Odměrné baňky x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 20 x&xxxx;100 μx

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx 27&xxxx;000 ×&xxxx;x

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx asi 5&xxxx;xx

5.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 25&xxxx;xx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;xX xxxx s přesností xx 0,1 xxxxxxxx xX

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX

5.13.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx čerpací xxxxxx xxxxxxx fungovat xxx xxxxxxx 1,0 xx/xxx xxx 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx dávkovač xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

5.13.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kolonu xxxxxxxx xx xxxxxxx 30&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X

5.13.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx detektor xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx 330&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxx 440&xxxx;xx

5.13.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx vybavení xxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx

5.13.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XxXxxxxxxxx® – 100&xxxx;(250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (X 18), xxxxxxxx xxxxxx 5 μm

6.   ODBĚR XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx s normou XXX 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

7.1.   Příprava xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

7.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 30,0 ± 0,1 mg tryptaminhydrochloridu (4.2.3) do xxxxxxx xxxxx xx 100 ml (5.6) a doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1 ml xxxxxx roztoku xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) a doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxx získat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx SOM xx xxxxxxx xx 25&xxxx;xx (5.2). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 10 ml destilované xxxx o teplotě 40&xxxx;°X ± 1 °C x&xxxx;xx xxxx 30 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.4), xxx se xxxxxxxxxx všechny kousky.

7.2.2.   Pipetou (5.5) xxxxxxxx 0,2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxx mléka do xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxx xxxxxxxx stříkačky (5.7) xxxxxxxx 100 μx 0,15 xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx na 15 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.8).

7.2.3.   Odstřeďujte (5.9) při 27 000 ×&xxxx;x&xxxx;xx xxxx 10 xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.10).

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx 4 °C.

7.3.   Příprava roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxx

7.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 55,4&xxxx;xx XXXX (4.1) xx xxxxxxx xxxxx xx 50&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (5.11) xxxxxxxx xxx 25&xxxx;xx xxxxxxxxxxx (4.2.2). Zazátkovanou baňku xxxxxxxx na 50&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, dokud xx XXXX xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx 20&xxxx;°X, xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1) a promíchejte xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) přeneste 1&xxxx;xx xxxxxx roztoku xx xxxxxxx baňky xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx po značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Pipetou (5.3) xxxxxxxx 1 ml xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), přidejte 100 μx (5.7)&xxxx;0,15xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx po značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Promíchejte xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX musí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx derivatizačního xxxxxxx

Xx odměrné xxxxx xx 10 ml (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx OPA (4.3.4), xxxxxxxx 0,5&xxxx;xx (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx XXX rozpustil. Doplňte xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 20 μx 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Poznámka: Derivatizační xxxxxxx musí být xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx nádobě xxx teplotě 4&xxxx;°X; xxxxxxx xxxxxxx stálé xx xxxx xxxxxxx xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx pomocí HPLC

7.5.1.   Eluční xxxxxxxxxxxx (4.4)

Xxxxxxxxxxxx X: Xxxxxx 0,3 xX xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 3 xX xxxxxx xxxxxxx (s xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xx 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx xxxxxxx): methanol: xxxxxxxxxxxxxxx =&xxxx;558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx X: Methanol

7.5.2.   Doporučený xxxxxx xxxxxxxx:

Xxx (min)	Rozpouštědlo X (%)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Xxxxxx (xx/xxx)
Xxxxxxxxx	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Xxxxxxxx: Může xx xxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx obrázku 1.

Teplota xxxxxx: 30 °X.

7.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxxxx: 50 μl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;50 μx xxxxxxx xxxxxx

7.5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxx provádění xxxxxx kolonu xxxxxxxxxx 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx B po xxxx 15 xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx X:X =&xxxx;40:60 x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx dobu 15 xxxxx xxx xxxxxxx 1 xx/xxx. Xxxxxxxx slepý xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2.1).

Poznámka: Xxxx uskladněním kolony xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx po xxxx 30 minut xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x xxxxxx 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx XX + XX xx xxxxxxxxx xxxxxx

7.5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx analýz xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx získali xxxxxxxxxx retenční xxxx. Xxx výpočet xxxxxxxxxx xxxxxxx nastříkněte roztok xxxxxxxx standardu (7.3) xx xxxxxxx 5–10 xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků.

Poznámka: Xxxxxx xx nutné xx xxxxxxx 20–25 xxxxxxxx vyčistit nejméně xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 100 % xxxxxxxxxxxxx B (7.5.1).

7.6.   Integrační xxxxx

7.6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx XXXX

XXXX se xxxxxx x&xxxx;xxxxxx jediného xxxx. Xxxxxx xxxx stanovte xxxxxxxxx xxxx sedly.

7.6.2.   Pík xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxxxxxx 1). Xxxxxx xxxx stanovte xxxxxxxxx xxxx sedly.

7.6.3.   Skupiny píků XX x&xxxx;XX

Xx xxxxx xxxxxxxxx podmínek (xxxxxxx 1) se PS xxxxxx v podobě xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx nerozlišených xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx. XX xx xxxxxx v podobě xxx xxxxxxxx, částečně xxxxxxxxxxxxx píků. Celou xxxxxx každé xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xx znázorněno xx xxxxxxx 1.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X VYJADŘOVÁNÍ VÝSLEDKŮ

Obsah XX + XX xx xxxxxxxxx vzorku xx xxxxxxx takto:

C =&xxxx;55,36 × ((X₂)/(X₁)) × ((X₁)/(X₂))

xxx:

X	=	xxxxx XX xxxx PE (x xx/100 x&xxxx;xxxxxx) ve xxxxxxxxx vzorku
A1	=	plocha xxxx XXXX roztoku srovnávacího xxxxxx (7.3)
A2	=	plocha xxxx XX nebo XX xxxxxxx zkušebního vzorku (7.2)
X1	=	xxxxxx píku xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx tryptaminu xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx podle Xxxxxxxxxxx xxxxx IDF (*).

9.1.   Opakovatelnost

Relativní směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx pracovník xx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx odstupu, xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;%. Jestliže xx za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx než 6 % xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx výsledků.

9.2.   Reprodukovatelnost

Jestliže xxx pracovníci xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx přístrojích x&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx analýzu xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxx xxxxxxxx by xxxxx xxx větší xxx 11&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

10.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx X., Xxxxxxxxxx L., Xxxxxxxxx X. X., Xxxxxx X., Xxxxxxxx X. „Xxxxxxxxx of buttermilk solids xx xxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx XXXX xxxxxxxxxxxxxx of xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Sci. Xxxx. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

HPLC xxxxxxxxxxxx XXX-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PE) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx PS, XX a tryptamin (xxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx XX

XXXXXXXXXX SYŘIDLOVÉ XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX URČENÉM XXX XXXXXXX XXXXXXXXXX NA XXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx zjistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx odstředěném xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707 – Xxxxx x mléčné xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem xxxxx xxxxxx kaseinomakropeptidů.

4.   PODSTATA XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx odstředěním nebo xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx xxxxxxxx kaseinomakropeptidů (XXX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX);

—	Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx získaného x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx bez xxxxxxxx známého xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxxxx xxxx xxxx být xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx čistoty.

5.1.   Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240 g kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) ve xxxx a doplňte xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx xx xxx xxx xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx roztok, xX 6,0

Xxxxxxxxx 1,74&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (X₂XXX₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (KH₂PO₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx sodného (Xx₂XX₄) xxx x&xxxx;700&xxxx;xx vody. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX na 6,0 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx draselného.

Doplňte xxxxx xx 1&xxxx;000 xx a homogenizujte.

Poznámka: Xxxxxxx xxxxxxx lze xxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx doporučením výrobce xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx filtr x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx jeden objem xxxxxxxxxxxx (XX₃XX) x&xxxx;xxxxxx xxxxxx vody. Před xxxxxxxx směs přefiltrujte xxxx membránový filtr x&xxxx;xxxxxxxxx pórů 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx vzorky

5.4.1.   Sušené xxxxxxxxxx xxxxx splňující xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 % xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (tj. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx odstředivkovými xxxxxxxxxx xx xxxxxx o objemu xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx filtrem x&xxxx;xxxxxxxxx pórů 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx pipety xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10&xxxx;xx (ISO 648, xxxxx X, xxxx XXX/X 835) xxxx dávkovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx xx xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx schopný dodávat 20,0&xxxx;xx vody xxx xxxxxxx xxx 50 °C

6.10.   Termostatická xxxxx lázeň xxxxxxxxx xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx na XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx – o objemu 15 až 30 μx

6.11.3.

Xxx xxxxxx XXX 2&xxxx;000-XX xx xxxxx (xxxxx 30 cm, xxxxxxx xxxxxx 0,75&xxxx;xx), xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx účinností (xxxx. jedna kolona XXX 2&xxxx;000-XXxx, jedna xxxxxx Agilent Technologies Xxxxxx XX 250) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx (3&xxxx;xx ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx X&xxxx;125 nebo jiným xxxxxxxxxx s rovnocennou xxxxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx nastavený na 35 ± 1&xxxx;°X

6.11.5.

XX xxxxxxxx s proměnnou xxxxxxx xxxxxx umožňující měřit xxx 205&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,008 Å.

6.11.6.

Integrátor schopný xxxxxxxxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxxx s kolonami xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je x&xxxx;xxxxxx nižší. X&xxxx;xxxxx xxxxxxx je třeba, xxx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx jednoho analytického xxxxxx xxxx menší xxx 5 °C.

7.   ODBĚR XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx xxx odebírány xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx ISO 707. Xxxxxxx xxxxx však xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx předpokladu, xx xxxx xxxxxx odpovídá xxxxxxx uvedené xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx nemohlo xxxxx xx znehodnocení nebo xxxxx složení.

8.   PRACOVNÍ XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx nádobky, xxxxx objem xx xxx xxxxxxx větší xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx uzavřete. Sušené xxxxx důkladně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx odstředivkové xxxxxxxx (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx se zátkou xx 50&xxxx;xx xxxxxxx 2,000 ± 0,001 g zkušebního xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx tuku x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxxx (50 °C) xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx po dobu xxxx minut xx xxxxxxxxxx třepačce (6.3). Xxxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxx minut xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx míchačkou (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.1) x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X. Xxxxxxxx xxxxxx na 60 minut xx vodní xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxxxxx síle 2&xxxx;200&xxxx;x, xxxx přefiltrujte xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx 15 xx 30 μx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx zařízení xx XXXX (6.11) x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx elučního xxxxxxx (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxxx 1. V závislosti xx xxxxxxxx průměru xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxxx výrobce xxxxxx xxx xxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxxxxxxx eluční xxxxxx (5.2).

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx více xxx 24 xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xx xxxxxxxxx roztokem (5.3) xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx při xxxxxxx 0,2&xxxx;xx xx xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxx xxxxxx [X] xx získají xx xxxxx chromatogramu, x&xxxx;xxxx xx každý pík xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx RT xxxxx:

Xxx XX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x XX xxx 12,5 minuty
Pík XXX:	Xxxxx xxx chromatogramu xxxxxxxxxxxx XXX s XX 15,5 minuty

Retenční časy xxxxxxxxxxxx xxxx mohou xxx značně xxxxxxxxx xxxxxxx kolony (kolon).

Integrátor (6.11.6) automaticky vypočítává xxxxxx X&xxxx;xxxxxxx xxxx:

XXX:	xxxxxx xxxx II
AIII:	plocha xxxx XXX

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx prozkoumat xxxxxx každého chromatogramu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx anomálií xxxxxxxxxxx xxx nesprávnou xxxxxx xxxxxxxx, nebo kolon, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) xx xxxxxx xxxxxxx postup xxxxxxx v bodech 8.2 xx 8.4.2.

Xxxxxxxx čerstvě připravené xxxxxxx, xxxxxxx XXX xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx 30 °C xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;0,2&xxxx;% xx xxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx stabilizujte xxxxxx opakovanými nástřiky xxxxxxx (8.5.1) xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.2), xxxxx xx plocha x&xxxx;xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx R nastříknutím xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx odezvového xxxxxxx X:

Xxx XX:

XXX = 100/(XXX[0])

xxx:

XXX	=	xxxxxxxx faktory xxxx XX
XXX [0]	=	xxxxxx xxxx II xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] získané x&xxxx;8.5.3

Xxx XXX:

XXXX = X/(XXXX[5] – XXXX[0])

xxx:

XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxx píku XXX
XXXX [0] xxx XXXX [5]	=	xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] x&xxxx;[5] získané v 8.5.3
W	=	množství xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx [5], tj. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx relativní xxxxxx xxxx ve vzorku [X]

XXX[X] = XXX × AII[E]

SIII[E] = XXXX × XXXX[X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

xxx:

XXX [E], SIII [X], XXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XX, XXX x&xxxx;XX ve xxxxxx [X]
XXX [E], XXXX [E]	=	plochy xxxx XX x&xxxx;XXX xx xxxxxx [E] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXX, XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;9.1.1

9.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx XXX xx xxxxxx [X]:

XXXXXX[X] = (XXXXX[X])/(XXXXX[5])

xxx:

XXXXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx XXX xx xxxxxx [E]
RTIII [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx XXX xx xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXXXX [5]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx XXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx [5] získaný x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx ukazují, xx xxxx relativním xxxxxxxxx xxxxx píku XXX, xx. XXXXXX [X] x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx 10&xxxx;% existuje xxxxxxxx xxxxx

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx > 5&xxxx;% xx XXXXXX [E] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx xxxxxx syrovátky ≤&xxxx;5&xxxx;% je XXXXXX [X] ≥&xxxx;1,000.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx RRTIII xx ± 0,002.

Xx xxxxxxxxxx okolností xx xxxxxxx XXXXXX [0] xxx málo liší xx 1,034. Xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxx hodnota xxxxxx 1,000, avšak xxxx xxxx být xxxxx xxx 1,000.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx procenta xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxx xx vzorku:

W = SIII[E] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xx vzorku [X];
XXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx III xxxxxxxxxx xxxxxx [X] xxxxxxx xxxxx 9.1.2;
1,3	=	xxxxxxxxxxx relativní xxxxxxxxx xxxxxx píku XXX xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx sušeném xxxxxxxxxxx xxxxx různého xxxxxx. Toto číslo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
XXXX [0]	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx plochu xxxx XXX, xxxxx xx xxxxx XXXX&xxxx;×&xxxx;XXXX[0]. Xxxx hodnoty xx xxxxxxx x&xxxx;9.1.1 x&xxxx;8.5.3;
(XXXX [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx opravu, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx průměrné xxxxx 1,3, xxxxxxxx XXXX [0] xxxx xxxxx 0,9. Experimentálně xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx píku XXX xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx;[0] xxxxx 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního xxxxxx provedl současně xxxx v těsném sledu xxxxx pracovník xx xxxxxxx přístroji, by xxxxx xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx dvěma xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxx laboratořích x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxx xxxxxxxxx 0,4 % xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx-xx relativní xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] xxxxxxxxx v gramech xxxxxxxxx xxxxxxxxx na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (XXXX[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx píku XXX x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx průměrné xxxxx xxxx XXX, xx. 1,3, x xxxxxxxxx x důvodu xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx metody (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx oprava, která xxxx xxx provedena, xxxxxxxx je plocha XXXX [0] xxxx xxx 0,9 (viz xxx 9.2).

9.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] > 2,0 + (SIII[0] – 0,9) a relativní xxxxxx xxxx II XXX [E] ≤ 160, stanovte xxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxx xxxx 9.2.

9.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx plocha píku XXX SIII [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x xxxxxxxxx plocha xxxx II XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (X %). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 1 x 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx získaná xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx obsahem xxxxxxxx jsou zanesena xx grafů 1 x&xxxx;2.

Xxxx přímka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx regresi, xxxxx xxxxxxxxxxx xx vypočítají xxxxxxx xxxxxxxxxx čtverců.

Čárkovaná xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx relativní plochy xxxx XXX, a to x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;90&xxxx;% xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx 1 x 2 xxxx:

XXXX = 0,376 X % – 10,7	(xxxx 1)
XXXX = 0,0123 SII [X] + 0,93	(xxxx 2)

xxx:

XXXX	xx relativní plocha xxxx III xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx plochy xxxx XXX [X],
X&xxxx;%	xx xxxxxxx xxxxx bílkovin xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx,
XXX [E]	je xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Tyto xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx 1,3 uvedenému x xxxx 9.2.

Rozdíl (X1 x X2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX [E] x xxxxxxxxx plochou SIII xx dán těmito xxxxxx: X1 =&xxxx;XXXX[X]&xxxx;– [(0,376 X% – 10,7) + (XXXX[0] – 0,9)]X2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (XXXX[0] – 0,9)].

Xxxx-xx T1 a/nebo X2	xxxxx nule xxxx xxxxx xxx xxxx, xxxxx obsah xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx-xx X1 x T2	větší xxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx přítomna.

Obsah xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx: X = T2 + 0,91

xxx:

0,91 xx xxxxxxxxxx xx svislé xxx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx XXX

XXXXXXXXX XXXXXX XX SYŘIDLOVÉ XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX ODSTŘEDĚNÉM XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX: XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX XX XXXXXXXXX SYROVÁTKY XX&xxxx;XXXXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXX

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX: MEZINÁRODNÍ NORMA XXX 707

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx syřidlové xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx procento stanovené xxxxxxxx postupem podle xxxxxx kaseinomakropeptidů.

4.   PODSTATA METODY

Vzorky xxxx analyzovány xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx A vysokoúčinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx XXXX). Vyhodnocení xxxxxxxx se provádí xxxxxxxxxx se srovnávacími xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxx xxxxxxxx nebo x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx syrovátky. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx 1 % xx., xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx syřidlové syrovátky xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx čistoty p.a. Xxxxxxx xxxx musí xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx nejméně xxxxxxxxxx čistoty. Xxxxxxxxxxx xxxx xxx spektroskopickou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx XXXX.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) ve xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx by xxx xxx xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx X&xxxx;x&xxxx;X

Xxxxxx X: Vneste 150 xx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX), 20 xx isopropanolu (XX₃XXXXXX₃) x 1,00 xx kyseliny trifluoroctové (XXX, XX₃XXXX) xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx vodou.

Eluent X: Xxxxxx 550 xx xxxxxxxxxxxx, 20 xx xxxxxxxxxxxx a 1,00 xx TFA xx xxxxxxx baňky na 1&xxxx;000 ml x xxxxxxx xx 1 000 xx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μm.

5.3.   Uchování kolony

Po xxxxxxxxx xx kolona xxxxxxx eluentem X (xxxxxx) x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xx xxxx 30 xxxxx). Kolona xx uchovává v acetonitrilu.

5.4.   Srovnávací xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx odstředěné xxxxx xxxxxxxxx požadavky xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž sušené xxxxxxxxxx mléko xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (tj. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx přídavkem 50&xxxx;% xx. sušené xxxxxxxxx xxxxxxxxx standardního xxxxxxx (xx. [50]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx dosáhnout xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx o průměru asi 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx střední xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx asi 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx A, nebo XXX/X 835), xxxx xxxxxxxxx xxxxxx schopný xxxxxxx 10,0&xxxx;xx za xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx systém xxxxxxx dodávat 20,0&xxxx;xx xxxx xxx teplotě xxx 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nastavená xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx HPLC, které xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx gradientem

6.11.2.

Nástřikové xxxxxxxx – xxxxx xxxx automatické, x&xxxx;xxxxxx 100 μl

6.11.3.

Kolona Agilent Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx 300 XX-X3 (xxxxx 25 cm, xxxxxxx průměr 0,46&xxxx;xx), xxxx xxxx rovnocenná xxxxxx pro obrácené xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx s proměnnou vlnovou xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxx xxx 210&xxxx;xx (x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx větší xxxxxx xxxxx xx xx 220&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx s možností xxxxxxxxx xxxxxxxxx na obecnou xxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Práce x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx teplotě xxxxxxxxx xx možná za xxxxxxxxxxx, xx teplota xxxxxxxx xxxx xxx x 1&xxxx;°X, xxxxx xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx XXXX.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx stanoveným v mezinárodní xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx používat jinou xxxxxx xxxxxx vzorků xx předpokladu, xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx dojít xx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

8.1.   Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx do nádobky, xxxxx xxxxx xx xxx dvakrát xxxxx xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Sušené xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.2) xxxx vhodné xxxxx se xxxxxx xx 50 ml xxxxxxx 2,00 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: V případě směsí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 2,00 g.

8.3.   Odstranění xxxx a bílkovin

8.3.1.   Ke xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0 ml xxxxx (50&xxxx;°X) xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3) xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx xx její xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou minut xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4) xxxxxxxx 10,0&xxxx;xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X (5.1). Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx vodní xxxxx (6.10).

8.3.3.   Odstřeďujte (6.2) xx dobu 10 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx stanovení

8.4.1.   Metoda XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx možnost falešně xxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx provedením analýzy XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx optimalizovat xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx systémy s mrtvým xxxxxxx xxx 6&xxxx;xx (xxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx) je xxxxxxxxx xxxxxxxx čas x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx ± 2 xxxxxx xxx XXXΑ. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx objemem (xxxx. 2&xxxx;xx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx čas 22 xxxxx.

Xxxxxxx roztoky xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) s obsahem 50&xxxx;% syřidlové syrovátky x&xxxx;xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) do xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx referenčního gradientu xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx 1.

Tabulka 1

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx gradientu xxx optimalizaci chromatografie

Čas (min)	Průtok (ml/min)	% X	% B	Křivka
Počátek	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	přímka
32	1,0	10	90	přímka
37	1,0	10	90	přímka
42	1,0	90	10	přímka

Porovnání obou xxxxxxxxxxxxx xx mělo xxxxxx polohu xxxx XXXΑ.

Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxx (viz 8.4.3), xxx vypočítat xxxxx xxxxxx xxxxxx: % X = 10 – 2,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% B = 7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx čas CMPΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
10	:	xxxxxxxxx % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
2,5	:	% X xx xxxxxxxx xxxx minus xxxxxxxxx % X x normálním xxxxxxxxx
13,5	:	xxx xxxxxxxxxxxx střednímu xxxx xxxxxxxxxxxx gradientu
26	:	požadovaný xxxxxxxx xxx XXXΑ
6	:	xxxxx směrnic xxxxxxxxxxxx a normálního xxxxxxxxx
30	:	% X v xxxxxxxxxx xxxx xxxxx % X xx 27 xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
27	:	xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxx odměřeného xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx xx HPLC s průtokem 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx získá x&xxxx;8.4.2. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx blíží xxxxxx X:X =&xxxx;76:24 (5.2). Okamžitě xx xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx, xx procento X xx xx 27 xxxxx xxxxxx x 5 %. Xxxxx xx xxxxxx lineární xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxx minutách 90&xxxx;% X. Toto xxxxxxx xx xxxxxxx po xxxx xxxx xxxxx x xx jejím xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx změní xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být další xxxxxxx proveden 15 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxx XXXX xx xxx xxx 26 ± 2 xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx změnou xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx v % X xxxx xxxxxxxxxxx x konečnými xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx 5&xxxx;% X.

Xxxxxxxx 2. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx je xxxxxxxxx. Xx to xxxxxxxx xxxxx xxx xx, xxx gradientový xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx fungoval. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx XXXX xxxx xxx xxxxx xxx 0,1 xxxxxx (x =&xxxx;10).

Xxxxxxxx 3. Xx xxxxxxx xxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx [5] x xxxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X (9.1.1).

8.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx zkušebního xxxxxx (X) xx xxxxxxxxx xx formě xxxxxxxxxxxxx, xx xxxx je xxx XXXX xxxxx xxxx retenčním xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx.

Xxxxx X&xxxx;xxxx XXXX xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.11.6). Polohu xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx-xx pík XXXX xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx by se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx mezi sedly. X opačném xxxxxxx xxxxxxxx svislé xxxxxxx xx společné základní xxxxx, jejichž počáteční xxx xx xxx xxx x blízkosti xxxx XXXX (xxxx xx v xxxx x =&xxxx;0 min!). Xxx xxxxxxxxxx standard x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx typ xxxxxxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxxx linie zkontrolujte, xxx xx xx xxxxxx a referenčním xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za účelem xxxxxxxx případných anomálií xxxxxxxxxxx xxx nesprávnou xxxxxx xxxxxxxx, nebo xxxxxx, nebo původem x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx pochybností analýzu xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.1 xx 5.4.2) xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 8.2 xx 8.4.4. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky, protože XXX xx v prostředí 8&xxxx;% kyseliny xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Při teplotě 4&xxxx;°X zůstává roztok xxxxx xx xxxx 24 xxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pokusů xx žádoucí xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx být vynechána, xxxxxxxx xx % X x počátečních xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx analýz.

Chromatogram xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5) xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx znázorněnému na xxxxxxx 1. Xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx píkem XXXX xxx xxxx píky. Xx xxxxxxxx nutné xxxxxxxxx podobné separace.

8.5.2.   Před xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx XXXX píku.

8.5.3.   Odezvové xxxxxxx X xxxxxxxx nastříknutím xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru X:

Xxx XXXX: X = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxx xxxx CMPA
W	=	množství xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxxxx [5]

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx procenta xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx

X(X)&xxxx;= X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx [X]
X	=	xxxxxxxx faktor xxxx XXXX (9.1.1)
X(X)	=	xxxxx xxxx XXXX xxxxxx (X)

Xxxxx xx W(E) xxxxx xxx 1 % x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxx časem x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku [5] menší než 0,2&xxxx;xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxxx.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx stejném xxxxxxxxx, xx neměl xxxxxxxxx 0,2 % xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx.

9.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xx 0&xxxx;% xx 16 % xxxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxx lineární xxxxx x xxxxxxxxxx koeficientem > 0,99.

9.4.   Interpretace

Mezní xxxxxxx 1 % obsahuje xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Ni—4.6 standard

PŘÍLOHA XX

Xxxxxx analýzy másla x soukromém skladování

Parametr	Metoda
Tuk (6)	ISO 17189 xxxx ISO 3727 xxxx&xxxx;3
Xxxx	XXX 3727 xxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxx (x výjimkou xxxx)	XXX 3727 část 2
Sůl	ISO 15648

XXXXXXX XXX

Xxxxxx analýzy xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx skladování

Parametr	Metoda
Tuk	ISO 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 část 1
Xxxx	XXX 5537

XXXXXXX VIII

Metody xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

1.

Xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka xx xxxxxxxx xxxxx, xxxx ze xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kasein x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx, a za xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx. Xxxxxxxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx xx prokázanou, xxxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx je stejný xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1&xxxx;% kravského xxxxx, který xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

2.

Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx v sýrech uvedených x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 mohou xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx: x) xxxxxx detekční xxxxx xxxx xxx nejvýše 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx pozitivní; c) musí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xx dlouhé xxxx xxxxx, k čemuž xxxx za běžných xxxxxxxxxx xxxxxxxx docházet. Není-li xxxxx x&xxxx;xxxx uvedených xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx metody uvedené x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX PRO ZJIŠŤOVÁNÍ XXXXXXXXX MLÉKA X&xxxx;XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXX Z OVČÍHO MLÉKA, XXXXXX MLÉKA XXXX XXXXXXXX MLÉKA, XXXX XXXXX OVČÍHO, XXXXXX X&xxxx;XXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX

Xxxxxxxxxx kravského xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka, xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, kozího x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx izoelektrickou xxxxxxxx γ-xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX POUŽITÍ

Metoda xx xxxxxx xxx citlivé x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka, xxxxxxxx mléka xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx mléka. Xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka a sýrů xxxxxxx xxxxxxxxxx bílkovinnými xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XX.3.4.21.7)

3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx kaseinů xx přítomnosti xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx bílkovin

3.4.   Vyhodnocení xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx γ3 x γ2 (důkaz xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x téhož xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahujících 0&xxxx;% x 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x. Xxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenné xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Následující xxxxx xx vztahují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx druhy xxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.1.   Chemikálie pro xxxxxxxx polyakrylamidových gelů x&xxxx;xxxxxxx močoviny

4.1.1.   Zásobní roztok xxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

4,85&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx

0,15 x X, X′-xxxxxxxx-xxx-xxxxxxxxxx (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% xx.),

xxxxxxx xx 100 ml x uložte do xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, xx koncentrace xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 30&xxxx;% xx./xxx. akrylamidu x&xxxx;0,8&xxxx;% xx./xxx. BIS, xxx uvedená xxxxxxxx (4,85 x&xxxx;xxxxxxxxxx x&xxxx;0,15 x&xxxx;XXX) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 16,2&xxxx;xx. Zásobní xxxxxx xxx skladovat xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx je xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 5 μX, xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x 2 g Xxxxxxxxx XX-3 po xxxx 30 xxxxx a xxxx jej přefiltrovat xxxx 0,45μx membránu.

4.1.2.   Roztok xxxx

Xxxxxxxxx roztok gelu xxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;(*) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxx 4.1.1).

9,0 ml xxxxxxxxx roztoku

24 mg β-alaninu

500 μx xxxxxxxx pH 3,5–9,5

250 μx amfolytu xX 5–7

250 μx xxxxxxxx pH 6–8

Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xx xxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxxx (viz 6.2).

4.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, X, X′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx)

4.1.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;40&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX)

800 mg PER xx xxxxxxxx xx xxxx a xxxxxx xx do 2 xx.

Xxxxxxxx: Vždy xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 5,77 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85&xxxx;% xx.) xx vodě a xxxxxx na 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztok

Rozpusťte 2,00 x xxxxxxxxx sodného xx xxxx x xxxxxx vodou xx 100 xx.

Xxxxxxxx xxxxxx

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25,0 xx ledové xxxxxxxx xxxxxx doplněné xxxxx xx 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% hm.)

24,03 g močoviny

250 mg xxxxxxxxxxxxxxx

x xxxxxxx na 50 ml xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx v chladničce; maximální xxxx uskladnění xx xxxxx xxxxx.

4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx určené x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx roztok hydrogenuhličitanu xxxxxxxx 0,2 mol/l (1,58 x/100 xx xxxx) xxxxxxxxxx 0,05 xxx/x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX, 1,46 g/100 xx) roztokem uhličitanu xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,92 x/100 ml xxxx) obsahujícího 0,05 xxx/x XXXX na xX 8.

4.7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx (XX. 3.4.21.7), x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx 5 X/xx.

4.7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx enzymu

Rozpusťte 2, 624 g kyseliny ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-xxxxx-x-xxxxxxxxxxxxx) xx 100 ml 40&xxxx;% xxx. ethanolu.

4.8.   Referenční xxxxxxxxx

4.8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx standardy xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 0 % x&xxxx;1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xx Xxxxxx xxx referenční xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxx Komisi, X-2440, Xxxx, Belgie.

4.8.2.   Příprava xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardů buvolího xxxxx vysráženého xxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxx 0 % x 1&xxxx;% xxxxxxxxx mléka

Odstředěné xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx syrového xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx teplotě 37 °C (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 minut). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx na 6 xx 8 °X xx úplně xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxx přípravu 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxx 5,00&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 495&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 1 l. Xxxxxxx xX xxxxxxx na 6,4 xxxxxxxxx zředěné xxxxxxxx xxxxxx (10 %, xx./xxx.). Xxxxxxx upravte xx 35 °X, xxxxxxxx 100 μl xxxxxxxx xxxxxxx (aktivita xxxxxxx 1: 10&xxxx;000, xxx 3&xxxx;000 U/ml) x&xxxx;xxxxxxxx xx dobu 1 minuty. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx hliníkovou xxxxx a nechte xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 35&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx sýřeniny. Xx xxxxxxxx sýřeniny xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo odebrání xxxxxxxxx. Lyofilizované xxxxx xx jemně xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx 0&xxxx;% xxxxxxxx stejný xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx odstředěného xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 20 °C.

Poznámka: Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx doporučuje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx buvolího xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx působení xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx bílkovin

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150 g kyseliny trichloroctové xx xxxx a doplňte xx 1 000 ml.

4.10.   Odbarvovací roztok

Zřeďte 500 xx methanolu x 200 ml xxxxxx xxxxxxxx octové xxxxxxxxxxxx xxxxx na 2&xxxx;000 ml.

Poznámka: Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx čerstvý; xxx xxx připravit xxxxxxxxx stejných xxxxxx xxxxxxxxx roztoku 50&xxxx;% (xxx.) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx roztoku 20 % (xxx.) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

4.11.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx roztok 1)

V 1&xxxx;000 xx 90&xxxx;% xxx. xxxxxxxxx rozpusťte xxxxxx magnetické xxxxxxxx (xxx 45 xxxxx) 3,0 g brilantní modři Xxxxxxxxx X-250 (C. X. 42655) a roztok xxxxxxxxxxxx xxxx dva xxxxxxx husté xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (zásobní xxxxxx 2)

X&xxxx;1&xxxx;000&xxxx;xx 20 % xxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 5,0&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxxx 125&xxxx;xx obou xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Barvicí xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxx přípravy.

5.   PŘÍSTROJE X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx (265 x 125 x 4 mm), xxxxxxx xxxxxxx (x xxxxx 15 xx), xxxxxxxxx stolek.

5.2.   Nosná xxxxx xxxx (265 × 125 mm)

5.3.   Krycí xxxxx (280 × 125 mm). Xx každý xxxxxx xxxxx nalepte pruh xxxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;6 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx) (viz xxxxxxx 1).

5.4.   Elektrofokusační xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx deskou (xxxx. 265 ×&xxxx;125&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx zdroj (≥ 2,5&xxxx;xX) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zařízení

5.5.   Cirkulační xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx na 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx (x xxxxx ≥ 265&xxxx;xx)

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx nádobky xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx (10 ×&xxxx;5&xxxx;xx, x&xxxx;xxxxxxx nebo filtračního xxxxxx s nízkou xxxxxxxx xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx na xxxxxxxx 280 × 150 mm) x&xxxx;xxxxxxxx oceli xxxx xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxx 10&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;000 xx 20&xxxx;000 xx/xxx

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.14.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

5.16.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xx 25 μx

5.17.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx

5.18.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx řízená xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 35 x&xxxx;40 ±&xxxx;1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxxx

5.19.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx vzorku

6.1.1.   Izolace xxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx kyvety xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídající 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, přidejte 60&xxxx;xx xxxxxxxxxxx vody x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 až 10 000 xx/xxx). Xxxxxxx xX xx 4,6 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx a zbytek homogenizujte xxx 20&xxxx;000 ot/min xx 40&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx s hodnotou pH xxxxxxxxx xx 4,5 xxxxxxxx xxxxxxxxx octovou (4.5.1). Xxxxxxxx 20&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Špachtlí xxxxxxx xxxxxxxxxx vrstvu, xxxxx se nachází xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx (xxx obrázek 2), x&xxxx;xxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx se 40 xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxx xxxx) x 20 xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x xxxxxxxx xx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xx třikrát). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx s 50 ml xxxxxxx (4.5.3) a přefiltrujte xxxx středně hustý xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 25&xxxx;xx dávkami xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx nebo x&xxxx;xxxxxx dusíku. Xxxxx xxxxx rozmělněte v třecí xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx – 20 °X.

6.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx β-xxxxxxx xx γ-kaseiny xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx 25 xx izolovaných xxxxxxx (6.1.1) x 0,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7.1) x xxxx 20 xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx. Směs xxxxxxxx xx 40&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx plasminu (4.7.2), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 1 xxxxxx při xxxxxxx 40&xxxx;°X xx xxxxxxx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 20 μx roztoku xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (4.7.3). Xxxx přidejte 200 mg xxxxx xxxxxxxx a 2 mg xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxx xxxxx symetrie fokusovaných xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xx přidání xxxxxxxx ε-aminokapronové roztok xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x 0,5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx bílkovin (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx močoviny

Na skleněnou xxxxx (5.1) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx (5.2) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Stejným způsobem xxxxxxxx naneste xxxxxx, xxxxx xxxxx (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx vložkami (0,25&xxxx;xx) xx xxxxx skleněnou xxxxx. Tuto druhou xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx nivelační xxxxxx.

X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku xxxx (4.1.2) xxxxxxxx 10 μx Xxxxxx (4.1.3.1), xxxxxxxxxxx a přidejte 10 μx xxxxxxx XXX (4.1.3.2); xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nalijte xxxxxxxxxx xx střed xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx nosné xxxxx xxxx (xxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx dolů) xxxxxxxx x&xxxx;xxxxx s krycí xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx se mezi xxxxxxx vytvořila xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx tenká vrstva xxxx bez xxxxxx (xxxxxxx 3). Xxxxxx xxxxx špachtle xxxxxx xxxxx xxxx opatrně xxxxxxxxxxx po xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx zatížily. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx xx 60 minutách) xxxxx x krycí xxxxx sejměte gel xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx gelu xxx, xx skleněné desky xxxxxxxxx. Zadní xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. „Xxxxxx sendvič“ xxxxxxx xx tenké xxxxx a uložte do xxxxxxxxxx (xxxxxxx xx xxxx xxxxx).

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx části; xx xx vhodné x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vzorků xxxx x&xxxx;xxxxxxx použití xxxxxxxxxxxxx elektroforetického zařízení (xxx xxxx o rozměrech 4,5 × 5 cm).

6.3.   Izoelektrická xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 12 °X. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xx střed xxxxxxxxxx xxxxx kápněte xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (4.2). Xxxxxxx xxxxxxxx „xxxxxx xxxxxxx“ xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a sejměte xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx napusťte xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx a uložte na xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxx 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx fokusace

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx 265 ×&xxxx;125 × 0,25 mm

Fáze	Doba (min)	Napětí (V)	Proud (mA)	Příkon (W)	Volty/hodiny (Vh)
1. Předběžná xxxxxxxx	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 300
2. Xxxxxxxx vzorku (7)	60	max. 2 500	max. 15	konstantní 4	xxx 1&xxxx;000
3. Xxxxxxx xxxxxxxx	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 5	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 7	xxx. 25	xxx 3&xxxx;000

Xxxxxxxx: Xxxxxxxx xx změní xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xxxxxxx proudu x&xxxx;xxxxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx proudu x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xx gel x&xxxx;xxxxxxxxx 265 × 125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx elektroforetického zařízení (2 xxxx 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, xxxxxxxxx bez xxxxxxx xx přikládají xxxxx xx xxx.

Xxxx	Xxxxxx	Xxxxx	Xxxxxx	Xxxxxxx	Xxxxx/xxxxxx
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx	1&xxxx;000 X	10,0 mA	3,5 X	8 °C	85 Xx
2. Xxxxxxxx xxxxxx	250 X	5,0 xX	2,5 X	8 °C	30 Vh
3. Fokusace	1 200 X	10,0 xX	3,5 X	8 °X	80 Xx
4. Xxxxxxxx	1&xxxx;500 V	5,0 xX	7,0 X	8 °X	570 Xx

Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx 2 xxxxxx xxx 0 Vh.

Aplikátor xxxxxx xx xxxx 2 xxxxxxxxx xxx 30 Xx.

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx

6.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xx ihned xxxxx xx xxxxxxx/xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxxxxx (4.9). Gel x ní xxxxxxxx 15 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.

6.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx a barvení xxxxxx desky

Fixatér xxxx xxxxxx dekantujte x xxxxxxx desku xxxxxxx xxxxxxxxxx po dobu 30 xxxxxx vždy xx 100 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10) Xxxxxxxxxxx roztok dekantujte, xxxxx xxxxxxx 250&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.3) x xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 45 xxxxx xxxxxxxxx.

6.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx desku xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx xxxx xx 100&xxxx;xx odbarvovacího xxxxxxx (4.10). Xxxx 15 minut xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;200&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx roztoku; xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx až xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx čiré a bezbarvé. Xxxxxxx desku xxxxx xxxxxxxx destilovanou xxxxx (2 × 2 xxxxxx) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx (2 až 3 xxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (10 až 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx a odbarvování xxxxxxxxxx xxx teplotě 20&xxxx;°X. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx citlivější xxxxxxxx xxxxxxxx (např. Silver Xxxxxxxx Xxx, Xxxxxxx, Xxxxxxxxx Xxxxxxx, xxx x. 17-1150-01), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x poměru 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx provádí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardů x xxxxxxxx gelu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vyrobených x ovčího mléka, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx ovčího, xxxxxx x xxxxxxxx mléka xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx γ3- a γ2-kaseinů, xxxxxxx izoelektrické body xx xxxxxxxxx x xxxxxxx mezi pH 6,5 x pH 7,5 (obrázky 4x, x, xxxxxxx 5). Xxxxxxxx mez je xxxxx xxx 0,5 %.

7.1.   Vizuální xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx doporučuje xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx dosáhnout x xxxxxxxx, xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx (xxx „γ2 X,X,X“ x „γ3 X,X,X“ xx xxxxxxxxx 4x, x x xxxxxxx 5) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Pouze xx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx posoudit xxxxxxxx kravského mléka (xxxxx xxxx xxxxx xxx 1&xxxx;% xxxx xx xxxx 1 %) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (viz „γ3 X“ x&xxxx;„γ2 X“ xx xxxxxxxxx 4 a, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) s intenzitami xxxxxxx v referenčních standardech x&xxxx;xxxxxx 0&xxxx;% a 1 % (xxxxxx, xxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxxx (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx hodnocení

Pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx γ2- a γ3-kaseinů x&xxxx;xxxxxxxx píků ovčích, xxxxxx a/nebo buvolích γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx (viz xxxxxxx 5) xxxxxxxxxxxxx (5.19). Xxxx hodnotu xxxxxxxxxx x poměrem xxxxx xxxx γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx, kozím) xxxx xxxxxxxxxxx laboratorním xxxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx x xxxxx gelu.

Poznámka: Xxxx xxxxxx funguje uspokojivě, xxxxx existuje xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx obou xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx standardu, xxxxx xxxxxx x 0 % xxxxxxxxxxx standardu. V opačném xxxxxxx xx nutné xxxxxx xxxxxxxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxx pokynů xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxx xx považován za xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx hovězích γ2- x γ3-xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ploch xxxx xxxx stejné xxxx větší xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 1 % xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxx F., Xxxx X., Chianese X., Stingo X., Xxxxxxx X., Berner X, Xxxxxx X., Xx Luccia A., Xxxxx A.: Use xx plasmin xx&xxxx;xxxxxxxx xxx sensitivity of xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx&xxxx;xx ovine xxx/xx xxxxxxx cheese xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ2-xxxxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx 45, 708–711 (1990).

Xxxxx X., Xxxxxxx X.X., Xxxxxxxx X., Moio X., Spagna Musso X., Xxxxx X., Xxx Xxxxxxx L.: X control xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Milchwissenschaft 50, 83–85 (1995).

Xxxxxx X., Xxxxxx X, Xxxxxxxxxxxx X.: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx of cow xxxx&xxxx;xx xxx and xxxx xxxx&xxxx;xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx — xxx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx pH xxxxxxxx — xxxxxxxxxxx focusing xx γ-xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx signal xxxxxxxxx. in: Xxxxxxxxxxxxxxx-Xxxxx 89 (X. X. Xxxxxx, xx.) pp 389-393, Xxxx-Xxxxxx, Xüxxxxx (1989).

Xxxxxx Ι., Xxxxxx X.-X., Kaiser X.-X.: Xxxxxxxx xxx Kuhmilch xx Schaf xxx Xxxxxxxxxxx bzw. -xäxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X. Lebensm. Unters. Forsch. 174, 195–199 (1982).

Xxxxxx X.X.: Xxxxxxxxx-xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 50-100 μm xxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx glass xxxxxx xx polyester films. Electrophoresis 1, 43–56 (1980).

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx

Xxxxxxx 2

Xxxxxxxxx vrstva xxxxxxxx xxxx vodnou x&xxxx;xxxxxxxxxx fází po xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx

x = xxxxxxxxx páska (0,25&xxxx;xx); x = xxxxx xxxxx (5.3); x, x = xxxxxxxx xxxxx (5.1); x = xxxxxx xxxxxx (4.1.2); f = xxxxx xxxxx xxxx (5.2).

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx ze sýrů x&xxxx;xxxxxx x&xxxx;xxxxxx mléka, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s různým xxxxxxx kravského xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxx

Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx gelu IEF.

Obrázek 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kaseinů xx xxxx vyrobených xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx plasminem, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx kravského xxxxx

% XX = procento xxxxxxxxx xxxxx; 1 + = xxxxxx x xxxxxxx 1 % xxxxxxxxx mléka x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kaseinu xx xxxxxx dráhy. C = xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= kozí, X&xxxx;= xxxxxx

Xx xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx XXX.

Xxxxxxx 5

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx referenčních xxxxxxxxx (XXX) x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx ovčího a kozího xxxxx, po izoelektrické xxxxxxxx

x, x = xxxxxxxxxx standardy obsahující 0 x 1 % xxxxxxxxx xxxxx; x-x = xxxxxx sýra xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 x 7&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx; X&xxxx;= kravské, X&xxxx;= xxxx, G = xxxx.

Xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx XXX xxx λ = 634 nm.

PŘÍLOHA IX

Hodnocení xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx jakosti

Analýzy xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 xxxxxxxx (XX) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx vzorků a námitky xxxxx xxxxxxxxx analýzy

1.

Odběr xxxxxx se xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx s příslušným nařízením xxx posuzovaný xxxxxxx. Xxxxxxxxxx-xx žádná xxxxxxxxxx xxx xxxxx vzorku, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx XXX 707„Xxxxx x xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx obsahují xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx výsledků x xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx.

3.

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx předpisech Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

4.

Xxxxx dojde xx sporu ohledně xxxxxxxx, xxxxxxxx agentury xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx analýzu xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx předpokladu, xx&xxxx;xxxxxxxxxx duplicitní vzorky xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx platební xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx analýzy xx&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx xxx xx&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx první xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do 21 dnů od xxxxxxxx xxxxxxx.

5.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx konečný.

6.

Jestliže výrobce xx pěti pracovních xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx xxx odběru xxxxxx nebyl xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx x&xxxx;xxxxx možností xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mezní xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx stanoví xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx vzorků, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx ostatních xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 3 xxxxxxxx vzorku xxxxxxxxxx náhodně xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxx připravit x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnotami xx xxxxxxx xxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx buď xx xxx, 1) xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxx σx x σX, xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx validace xx xxx, 2) zda xxxx vypočítána xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx nejistotě xxxxxx xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xx validována xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx xxxxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σX&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx validované xxxxxx.

Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx; x xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx nejistota (x =&xxxx;2) x&xxxx; xxxxx:

Xx-xx xxxxxxx výsledek xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = x ₁ – x ₂, x = y ₁ · x ₂ xxxx x = y ₁/x ₂, xxxx se x&xxxx;xxxxxxxx případech xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx postupů xxx xxxxxxxxxxx směrodatných xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx nevyhovující horní xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx UL, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, xx xxxxxxx XX xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx XX, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, že xxxxxxx XX vyhovuje.

3.   Vnitrolaboratorní xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vnitřní reprodukovatelnosti

V případech, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx nařízení, x&xxxx;xxx xxxxxx stanovena xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx vnitrolaboratorní xxxxxxxx. Xxxxxxx σx a σ X xx xxxx ve xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx X xxxxxx xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxxx si X .

Xxxxxxxx, xxx xx xxxxx dodržovat xx účelem xxxxxxx xxxxxxx stanovené mezní xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxx 1. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx zákonem xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx metody xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx a výsledek xx vyhodnotí v xxxxxxx x xxxxx 1.