Plné znění - 32018R0150

Xxxxxxx X

XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX FOSFATIDYLSERINU X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX&xxxx;XXXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxx: XXXX s obrácenými xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX A OBLAST XXXXXXX

Xxxx xxxxxx popisuje xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (PS) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) v sušeném xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX) x&xxxx;xx xxxxxx pro zjišťování xxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;XXX.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx XX + PE: xxxxxxxxxx xxxxxx látky xxxxxxxxx popisovaným xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PEDP) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Stanovení xxxxxx PS a PE xxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxx (XXX) metodou XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XX x&xxxx;XX ve zkušebním xxxxxx porovnáním xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx množství XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxx čistoty x.x. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, používá xx xxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx čistoty.

4.1.   Referenční xxxxxxxx: XXXX o čistotě xxxxxxx 99&xxxx;%

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 18 °C.

4.2.   Chemikálie xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx čistoty xxx XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx čistoty xxx XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx, 12 X xxxxx roztok

4.3.2.   Kyselina xxxxxx, 0,4 X vodný xxxxxx x xxxxxxxx xX upravenou xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1) na 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (XXX)

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx HPLC

4.4.1.   Eluční xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx chemikálií čistoty xxx XXXX.

4.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

4.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx

4.4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx dihydrogenfosforečnan

4.4.6.   Octan xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1&xxxx;xx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx odečtu po 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx dávkovat xx 1 do 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx pipety xxxxxxx xxxxxxxx 0,2, 0,5 x&xxxx;5&xxxx;xx

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 20 x&xxxx;100 μl

5.8.   Ultrazvuková xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx 27&xxxx;000 × g

5.10.   Skleněné nádobky x&xxxx;xxxxxx xxx 5&xxxx;xx

5.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 25&xxxx;xx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;xX xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx na 0,1 xxxxxxxx pH

5.13.   Zařízení xx XXXX

5.13.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx průtoku 1,0 xx/xxx při 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx dávkovač vzorků x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

5.13.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kolonu udržovat xx xxxxxxx 30&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X

5.13.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx 330&xxxx;xx a emisní xxxxxx xxxxx 440 nm

5.13.5.   Integrátor nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx plochy xxxx

5.13.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XxXxxxxxxxx® – 100&xxxx;(250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) xxxx rovnocenná xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (X 18), xxxxxxxx xxxxxx 5 μx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx XXX 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx

7.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 30,0 ± 0,1&xxxx;xx tryptaminhydrochloridu (4.2.3) xx xxxxxxx xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) a doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1 ml xxxxxx roztoku xx xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6) a doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxx získat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx zkušebního xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx XXX do xxxxxxx xx 25&xxxx;xx (5.2). Pipetou (5.3) xxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx 40 °C ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xx xxxx 30 xxxxx xxxxxxxx magnetickou xxxxxxxxx (5.4), xxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

7.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.5) xxxxxxxx 0,2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx baňky xx 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 100 μx 0,15 xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xx 15 minut xx xxxxxxxxxxxx lázně (5.8).

7.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (5.9) při 27 000 ×&xxxx;x&xxxx;xx dobu 10 xxxxx a supernatant xxxxxxxx xx xxxxxxxx nádobky (5.10).

Xxxxxxxx: Do provedení xxxxxxx XX xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx standardu

7.3.1.   Navažte 55,4&xxxx;xx XXXX (4.1) xx xxxxxxx xxxxx na 50&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (5.11) přidejte xxx 25 ml xxxxxxxxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx na 50&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X a opatrně xxxxxxxxxxxxx, dokud xx XXXX xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx 20 °C, xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx xx odměrné baňky xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx po značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1 ml xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), přidejte 100 μx (5.7)&xxxx;0,15xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx roztok referenčního xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx 4 °C.

7.4.   Příprava xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx OPA (4.3.4), xxxxxxxx 0,5&xxxx;xx (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) a pečlivě xxxxxxxxxxx, xxx xx XXX rozpustil. Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx borité (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 20 μx 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X; xxxxxxx zůstává xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx HPLC

7.5.1.   Eluční xxxxxxxxxxxx (4.4)

Rozpouštědlo X: Xxxxxx 0,3 mM xxxxxx dihydrogenfosforečnanu x&xxxx;xxxxxx 3 mM xxxxxx xxxxxxx (x hodnotou xX upravenou xx 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx xxxxxxx): xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx = 558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx X: Xxxxxxxx

7.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx gradient:

Čas (xxx)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Xxxxxx (xx/xxx)
Xxxxxxxxx	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Xxxxxxxx: Xxxx xx xxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx být mírně xxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx obrázku 1.

Teplota xxxxxx: 30 °X.

7.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxxxx: 50 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a 50 μx roztoku vzorku

7.5.4.   Ekvilibrace xxxxxx

Xxx každodenním xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx promývejte 100&xxxx;% rozpouštědlem B po xxxx 15 xxxxx, xxxxx připravte poměr X:X =&xxxx;40:60 x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 15 minut xxx xxxxxxx 1 xx/xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2.1).

Poznámka: Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx promývejte po xxxx 30 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x poměru 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx XX + XX ve xxxxxxxxx xxxxxx

7.5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx stejných xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx retenční xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx nastříkněte xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (7.3) xx xxxxxxx 5–10 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx 20–25 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx promýváním 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx B (7.5.1).

7.6.   Integrační xxxxx

7.6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx XXXX

XXXX xx vymývá x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

7.6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se vymývá x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxxxxxx 1). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

7.6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx XX x&xxxx;XX

Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx 1) xx XX xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx, před nimiž xx xxxxxxx xxxxx xxxxx pík. XX xx vymývá v podobě xxx hlavních, částečně xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx stanovte xxxxxxxxxx xxxxxxxx linie xxx, xxx xx znázorněno xx obrázku 1.

8.   VÝPOČET X XXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Obsah XX + PE xx xxxxxxxxx vzorku xx xxxxxxx xxxxx:

X =&xxxx;55,36 × ((A₂)/(A₁)) × ((T₁)/(T₂))

kde:

C	=	obsah XX xxxx PE (x xx/100 x&xxxx;xxxxxx) ve xxxxxxxxx xxxxxx
X1	=	xxxxxx xxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx píku XX xxxx XX xxxxxxx zkušebního xxxxxx (7.2)
X1	=	xxxxxx xxxx tryptaminu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku (7.3)
X2	=	xxxxxx píku tryptaminu xxxxxxx zkušebního xxxxxx (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX&xxxx;(*).

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx stejný pracovník xx xxxxxxx přístroji x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx odstupu, xx neměla překročit xxxxxxxxx 2 %. Xxxxxxxx xx za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx neměl být xxxxx xxx 6&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx průměru xxxxxxxx.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xxx pracovníci provedou x&xxxx;xxxxxxx laboratořích xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vzorku x&xxxx;xxxxxxx k různým xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx rozdíl mezi xxxxx xxxxxxxx by xxxxx být xxxxx xxx 11&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

10.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx X., Xxxxxxxxxx L., Hogenboom X. X., Xxxxxx X., Xxxxxxxx X. „Xxxxxxxxx of xxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx XXXX xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Sci. Xxxx. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

XXXX xxxxxxxxxxxx XXX-xxxxxxxx fosfatidylserinu (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PE) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx z rekonstituovaného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxx integrační xxxxx xxx xxxx PS, XX x&xxxx;xxxxxxxxx (vnitřní xxxxxxxx).

Xxxxxxx XX

XXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX XXXXXXX XXX XXXXXXX SKLADOVÁNÍ NA XXXXXXX XXXXXXXXX KASEINOMAKROPEPTIDŮ XXXXXXXXXXXXX KAPALINOVOU CHROMATOGRAFIÍ (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx syřidlové xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx odstředěném mléce xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx skladování xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxxxxxx norma XXX 707 – Xxxxx x xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx ze syřidlové xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, odstranění xxxx x&xxxx;xxxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx odstředěním nebo xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX);

—	Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx u vzorků xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx tvoří xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx nebo bez xxxxxxxx xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Použitá voda xxxx xxx voda xxxxxxxxxxx xxxx voda xxxxxxx rovnocenné xxxxxxx.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx trichloroctové

Rozpusťte 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) ve xxxx x&xxxx;xxxxxxx na 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx by xxx xxx čirý x bezbarvý.

5.2.   Eluční xxxxxx, xX 6,0

Rozpusťte 1,74 g fosforečnanu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (X₂XXX₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx draselného (KH₂PO₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx sodného (Na₂SO₄) xxx x&xxxx;700&xxxx;xx vody. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 6,0 xxxxxxxx xxxxxxxx fosforečné xxxx hydroxidu xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx xx 1 000 xx a homogenizujte.

Poznámka: Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxx, aby xxxxxxxxx osvědčení standardů xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx o velikosti xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx jeden xxxxx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX) x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx filtr x&xxxx;xxxxxxxxx pórů 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Xxx použít xxxxxxxxx xxxx promývací xxxxxx, který xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nařízení (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zfalšované xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx složení (xx. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx schopná xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx třepačka

6.4.   Magnetická xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 12,5 cm

6.7.   Skleněné xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx pórů 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10 ml (ISO 648, xxxxx X, xxxx XXX/X 835) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dodávat 10,0&xxxx;xx xx dvě xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx schopný xxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxx xxx xxxxxxx xxx 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nastavená xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx na HPLC, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx – x&xxxx;xxxxxx 15 xx 30 μx

6.11.3.

Xxx xxxxxx XXX 2&xxxx;000-XX xx xxxxx (xxxxx 30&xxxx;xx, vnitřní xxxxxx 0,75&xxxx;xx), nebo xxxxxx s rovnocennou xxxxxxxxx (xxxx. jedna xxxxxx XXX 2&xxxx;000-XXxx, xxxxx xxxxxx Agilent Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx GF 250) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx (3&xxxx;xx ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) naplněná materiálem X&xxxx;125 nebo jiným xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx nastavený xx 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx měřit xxx 205&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,008 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mezi sedly Poznámka: Xxx xxxxxxxx s kolonami xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, avšak xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x&xxxx;xxxxxx xxxxx. V tomto xxxxxxx je třeba, xxx výkyvy xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx menší xxx 5&xxxx;°X.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707. Xxxxxxx státy však xxxxx xxxxxxxx jinou xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx uvedené normy.

7.2.   Vzorek xxxxxxxxx takovým způsobem, xxx xxxxxxx dojít xx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxx složení.

8.   PRACOVNÍ XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx mléko xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx objem xx xxx xxxxxxx větší xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nádobku xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx důkladně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx zkumavky (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx 50&xxxx;xx xxxxxxx 2,000 ± 0,001 g zkušebního xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx přidejte 20,0&xxxx;xx teplé (50 °C) xxxx. Xxxxxx rozpusťte xxxxxxxx xx dobu xxxx minut na xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3). Xxxxxxxx vložte do xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxx minut xxxxxxxx xx stálého xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.1) x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X. Xxxxxxxx xxxxxx na 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxxxxx síle 2&xxxx;200&xxxx;x, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx papír (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5&xxxx;xx filtrátu xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx stanovení

8.4.1.   Nastříkněte 15 xx 30 μx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX (6.11) x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx elučního xxxxxxx (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxxx 1. X&xxxx;xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx průměru xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxxxxx kolony xxx xxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Při xxxxxx přerušení promyjte xxxxxx xxxxx. Xxxxx x&xxxx;xxxx nenechávejte xxxxxx xxxxxx (5.2).

Před xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx 24 hodin xx kolony propláchnou xxxxx x potom xx xxxxxxxxx xxxxxxxx&xxxx;(5.3) xxxxxxx xx dobu xxx hodin při xxxxxxx 0,2 ml xx xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxx xxxxxx [E] xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, v němž xx každý xxx xxxxx svým xxxxxxxxx xxxxx XX xxxxx:

Xxx XX:	Xxxxx pík chromatogramu x RT asi 12,5 minuty
Pík XXX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx XXX x RT 15,5 minuty

Retenční xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx značně xxxxxxxxx xxxxxxx kolony (xxxxx).

Xxxxxxxxxx (6.11.6) xxxxxxxxxxx vypočítává xxxxxx X&xxxx;xxxxxxx píku:

AII:	plocha xxxx II
AIII:	plocha xxxx XXX

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx každého xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx anomálií xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku.

V případě xxxxxxxxxxx xxxxxxx zopakujte.

8.5.   Kalibrace

8.5.1.   U xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) xx xxxxxx xxxxxxx postup xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx&xxxx;8.2 xx 8.4.2.

Xxxxxxxx čerstvě připravené xxxxxxx, xxxxxxx CMP xx v prostředí 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx se xxx xxxxxxx 30&xxxx;°X xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;0,2&xxxx;% xx xxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx stabilizujte xxxxxx xxxxxxxxxxx nástřiky xxxxxxx (8.5.1) srovnávacího xxxxxx (5.4.2), xxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx odezvové xxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X:

Xxx XX:

XXX = 100/(AII[0])

kde:

RII	=	odezvové xxxxxxx xxxx XX
XXX [0]	=	xxxxxx xxxx XX xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

Xxx XXX:

XXXX = X/(XXXX[5] – XXXX[0])

xxx:

XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx III
AIII [0] and XXXX [5]	=	xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] x&xxxx;[5] získané x&xxxx;8.5.3
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx [5], tj. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxx [X]

XXX[X] = XXX × AII[E]

SIII[E] = XXXX × XXXX[X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

xxx:

XXX [X], SIII [X], XXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XX, XXX x&xxxx;XX ve xxxxxx [X]
XXX [X], XXXX [X]	=	xxxxxx xxxx XX x&xxxx;XXX ve xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXX, XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;9.1.1

9.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx relativního xxxxxxxxxx xxxx píku XXX ve xxxxxx [X]:

XXXXXX[X] = (XXXXX[X])/(XXXXX[5])

xxx:

XXXXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx XXX xx xxxxxx [X]
XXXXX [E]	=	relativní xxxxxxxx xxx píku XXX xx xxxxxx [X] získaný x&xxxx;8.4.2
XXXXX [5]	=	xxxxxxxxx retenční xxx xxxx XXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx [5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX, xx. XXXXXX [E] x&xxxx;xxxxxxxxx přidané xxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx 10 % xxxxxxxx xxxxxxxx vztah

—	při obsahu xxxxxxxxx > 5&xxxx;% xx XXXXXX [X] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx ≤&xxxx;5&xxxx;% xx RRTIII [X] ≥ 1,000.

Přípustná xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx XXXXXX xx ± 0,002.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx XXXXXX [0] xxx xxxx xxxx xx 1,034. Podle xxxxx xxxxx xx xxxx hodnota blížit 1,000, xxxxx vždy xxxx xxx xxxxx xxx 1,000.

9.2.   Výpočet procenta xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx:

X = XXXX[X] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx [X];
XXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX zkušebního xxxxxx [E] získaná xxxxx 9.1.2;
1,3	=	představuje xxxxxxxxx xxxxxxxxx plochu píku XXX xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx v nezfalšovaném sušeném xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx číslo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
XXXX [0]	=	xxxxxxxxxxx relativní xxxxxx xxxx III, xxxxx xx xxxxx RIII × AIII[0]. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxx x&xxxx;9.1.1 x&xxxx;8.5.3;
(XXXX [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1,3, xxxxxxxx XXXX [0] xxxx xxxxx 0,9. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx;[0] xxxxx 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx překročit 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx dvěma xxxxxxxxxxxx a nezávislými xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxx laboratořích x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku by xxxxx xxxxxxxxx 0,4&xxxx;% xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxx přítomna, xx-xx xxxxxxxxx plocha xxxx XXX SIII [X] xxxxxxxxx v gramech xxxxxxxxx xxxxxxxxx na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (XXXX[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx píku XXX x přihlédnutím k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx XXX, xx. 1,3, x nejistotě x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx metody (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx xxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, xxxxxxxx je xxxxxx XXXX [0] jiná xxx 0,9 (xxx xxx 9.2).

9.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx píku III XXXX [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx píku II XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 9.2.

9.4.3.   Je-li xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [E] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x relativní plocha xxxx XX XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (X %). Xxxxx prostudujte xxxxx 1 a 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx celkovým xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx grafů 1 x&xxxx;2.

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jejíž xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx určuje horní xxx xxxxxxxxx plochy xxxx III, a to x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, že nebude xxxxxxxxxx x&xxxx;90&xxxx;% případů.

Rovnice xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx 1 a 2 xxxx:

XXXX = 0,376 X % – 10,7	(xxxx 1)
XXXX = 0,0123 XXX [X] + 0,93	(xxxx 2)

xxx:

XXXX	xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx relativní xxxxxx xxxx SII [X],
X&xxxx;%	xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
XXX [X]	xx relativní xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Xxxx rovnice xxxx rovnocenné xxxxx 1,3 xxxxxxxxx x xxxx 9.2.

Xxxxxx (X1 x X2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx plochou XXXX [E] x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxx xxxxxx xxxxxx: T1 =&xxxx;XXXX[X]&xxxx;– [(0,376 P% – 10,7) + (XXXX[0] – 0,9)]T2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (XXXX[0] – 0,9)].

Xxxx-xx X1 x/xxxx X2	xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxx nula, xxxxx obsah syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx-xx X1 x X2	xxxxx xxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vypočítá xxxxx vzorce: X = X2 + 0,91

xxx:

0,91 je vzdálenost xx svislé xxx xxxx plnou x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx XXX

XXXXXXXXX SUŠINY XX SYŘIDLOVÉ SYROVÁTKY X&xxxx;XXXXXXX ODSTŘEDĚNÉM XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX: XXXXXXXXX XXXXXXXX SUŠINY XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX XX&xxxx;XXXXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXX

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX: XXXXXXXXXXX NORMA XXX 707

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx sušiny xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx A vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (xxxxxxx XXXX). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nebo x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx výsledek xxxxx xxx 1 % hm., xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxxxx voda xxxx xxx voda destilovaná xxxx xxxx nejméně xxxxxxxxxx čistoty. Xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx HPLC.

5.1.   Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240 g kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (CCl₃COOH) xx xxxx a doplňte na 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx by xxx xxx xxxx x bezbarvý.

5.2.   Eluenty X&xxxx;x&xxxx;X

Xxxxxx X: Vneste 150 xx acetonitrilu (CH₃CN), 20 xx xxxxxxxxxxxx (XX₃XXXXXX₃) x 1,00 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXX, XX₃XXXX) do xxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xx 1 000 xx xxxxx.

Xxxxxx X: Xxxxxx 550 xx xxxxxxxxxxxx, 20 ml xxxxxxxxxxxx x 1,00 xx TFA do xxxxxxx xxxxx xx 1&xxxx;000 xx a xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx vodou. Eluční xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx pórů 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxx se kolona xxxxxxx xxxxxxxx B (xxxxxx) x xxxxx xx propláchne xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xx xxxx 30 xxxxx). Kolona xx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx odstředěné mléko xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovené xxx veřejné xxxxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 % xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zfalšované přídavkem 50&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky standardního xxxxxxx (xx. [50]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X POMŮCKY

6.1.   Analytické váhy

6.2.   Volitelná xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx střední xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx filtrační xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx filtrem x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10&xxxx;xx (ISO 648, xxxxx X, nebo XXX/X 835), nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx xx xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxx xxx teplotě xxx 50 °C

6.10.   Termostatická xxxxx xxxxx nastavená na 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, které xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – ruční xxxx xxxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx 100 μx

6.11.3.

Xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx 300 XX-X3 (xxxxx 25&xxxx;xx, xxxxxxx xxxxxx 0,46&xxxx;xx), xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx obrácené xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx na 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxx měření xxx 210&xxxx;xx (v xxxxxxx xxxxxxxxx xx možné xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx do 220&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx linii xxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxxxx x kolonami xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx místnosti xx možná za xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxx xxxx než x 1 °C, jinak xxxxxxx x příliš xxxxxx změnám retenčního xxxx CMPA.

7.   ODBĚR VZORKŮ

7.1.   Vzorky xxxx být odebírány xxxxxxxx xxxxxxxxxx v mezinárodní xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx však xxxxx xxxxxxxx jinou xxxxxx xxxxxx vzorků xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxx odpovídá xxxxxxx xxxxxxx normy.

7.2.   Vzorek xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xx znehodnocení xxxx xxxxx složení.

8.   PRACOVNÍ POSTUP

8.1.   Příprava xxxxxxxxxx vzorku

Sušené xxxxx xxxxxxxx do xxxxxxx, xxxxx objem je xxx xxxxxxx větší xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx víčkem. Xxxxxxx xxxxx uzavřete. Xxxxxx xxxxx důkladně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx převracením xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx odstředivkové xxxxxxxx (6.2) xxxx vhodné xxxxx xx xxxxxx xx 50 ml xxxxxxx 2,00 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: V případě směsí xxxxxxx takové množství xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 2,00&xxxx;x.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx zkušební xxxxx přidejte 20,0&xxxx;xx xxxxx (50&xxxx;°X) vody. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3) xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx se její xxxxxxx neustálí na 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx míchání xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4) xxxxxxxx 10,0&xxxx;xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 25 °C (5.1). Xxxxxxxx xxxxxx na 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.   Odstřeďujte (6.2) xx xxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo xxxxxxxxxxxx xxxx papír (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XXXX s obrácenými xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxx xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx systémy s mrtvým xxxxxxx xxx 6 ml (xxxxx xx xxxx, xxx xx stékají xxxxxxxxxxxx k objemu nástřikové xxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx ± 2 minuty xxx CMPΑ. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx s menším xxxxxx objemem (xxxx. 2&xxxx;xx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx 22 xxxxx.

Xxxxxxx roztoky xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) x&xxxx;xxxxxxx 50&xxxx;% xxxxxxxxx syrovátky x&xxxx;xxx xxxxxx této xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxx filtrátu (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX, které xxxx fungovat xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx gradientu xxxxxxxxx v tabulce 1.

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx chromatografie

Čas (min)	Průtok (ml/min)	% X	% B	Křivka
Počátek	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	přímka
32	1,0	10	90	přímka
37	1,0	10	90	přímka
42	1,0	90	10	přímka

Porovnání xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxx XXXΑ.

Xxxxxxxxx složení xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx pro normální xxxxxxxx (viz 8.4.3), xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx: % X =&xxxx;10 – 2,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% X =&xxxx;7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx xxx XXXΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx gradientu
10	:	počáteční % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
2,5	:	% X xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx % X x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
13,5	:	xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bodu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
26	:	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx CMPΑ
6	:	poměr směrnic xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
30	:	% B x xxxxxxxxxx bodu xxxxx % X xx 27 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
27	:	xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx gradientu

8.4.3.   Nástřik xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx 100 μx přesně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) do xxxxxxxx xx HPLC x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xx začátku xxxxxxx xx xxxxx x&xxxx;8.4.2. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx X:X =&xxxx;76:24 (5.2). Okamžitě xx xxxxxxxx xx spustí xxxxxxxx gradient, xxx xxxxxxx, xx procento X xx xx 27 minut xxxxxx x 5 %. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx 90 % X. Xxxx xxxxxxx xx udržuje xx xxxx xxxx minut x po xxxxx xxxxxxxx xx pomocí xxxxxxxxxx gradientu xxxxxxx xxxx změní během xxxx minut xx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx systému xxxx být xxxxx xxxxxxx proveden 15 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxx CMPA xx měl xxx 26 ± 2 xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x % X xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx gradientu xxxx xxxxxxx xx xxxx 5 % B.

Poznámka 2. Xxxxxxx xx xxxxx dostatečně odplynit x&xxxx;xxxxxxxxx je xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxxx xxxxx xxx xx, xxx gradientový čerpací xxxxxx xxxxxxx fungoval. Xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxx xxxx xxxx XXXX xxxx být xxxxx xxx 0,1 xxxxxx (x = 10).

Poznámka 3. Xx xxxxxxx pět xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx [5] x použít xxx xxx výpočet xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X (9.1.1).

8.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx chromatografických xxxxxx zkušebního vzorku (X) xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx němž xx xxx XXXX xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx.

Xxxxx H píku XXXX xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.11.6). Polohu základní xxxxx je třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Jestliže xx xxxxxxxx xxxxx nesprávně xxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Je-li xxx XXXX xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx by xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx mezi sedly. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx společné základní xxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxx xx xxx xxx v xxxxxxxxx xxxx CMPA (tedy xx x xxxx x =&xxxx;0 xxx!). Xxx xxxxxxxxxx standard x vzorky xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxxx linie xxxxxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx kvantitativní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, nebo xxxxxx, nebo xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku. X&xxxx;xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X srovnávacích xxxxxx (5.4.1 až 5.4.2) xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 8.2 xx 8.4.4. Xxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx XXX se x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% kyseliny xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx teplotě 4&xxxx;°X xxxxxxx roztok xxxxx xx dobu 24 hodin. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx analytických xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx nástřikovém xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5) xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1. Na xxxxx obrázku jsou xxxx xxxxx CMPA xxx malé xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podobné xxxxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx stanovením vzorků xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx nesmí vykazovat xxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx XXXX píku.

8.5.3.   Odezvové faktory X stanovte xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx filtrátu (8.5.1), jakého xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx a vzorce

9.1.1.   Výpočet xxxxxxxxxx xxxxxxx X:

Xxx XXXX: X = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx faktor píku XXXX
X	=	xxxxx xxxx CMPA
W	=	množství xxxxxxxxx xx srovnávacím xxxxxx [5]

9.2.   Výpočet procenta xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxx xx vzorku

W(E) = X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx procento syřidlové xxxxxxxxx xx xxxxxx [X]
X	=	xxxxxxxx faktor píku XXXX (9.1.1)
X(X)	=	xxxxx xxxx XXXX vzorku (X)

Xxxxx xx X(X) xxxxx xxx 1&xxxx;% x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxx srovnávacího xxxxxx [5] xxxxx xxx 0,2&xxxx;xxxxxx, xxx je xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx syrovátky prokázána.

9.3.   Přesnost xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx mezi výsledky xxxx stanovení, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxxxxxx nebo x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na stejném xxxxxxxxx, by xxxxx xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx.

9.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xx 0 % xx 16 % xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx koeficientem > 0,99.

9.4.   Interpretace

Mezní xxxxxxx 1&xxxx;% obsahuje xxxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Ni—4.6 standard

PŘÍLOHA XX

Xxxxxx xxxxxxx másla x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx&xxxx;(6)	XXX 17189 nebo XXX 3727 xxxx&xxxx;3
Xxxx	XXX 3727 xxxx 1
Tukuprostá sušina (x xxxxxxxx soli)	ISO 3727 část 2
Xxx	XXX 15648

XXXXXXX XXX

Xxxxxx analýzy xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x soukromém xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx	XXX 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 část 1
Xxxx	XXX 5537

PŘÍLOHA VIII

Metody xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

1.

Xx xxxxx xxxxxxx, že sýry xxxxxxxx výhradně x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx, kozího a buvolího xxxxx neobsahují kasein x&xxxx;xxxxxxxxx mléka, a za xxxxx xxxxxx se xxxxxxx metoda xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xx prokázanou, xxxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx v analyzovaném xxxxxx xx stejný xxxx vyšší x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxx v dodatku.

2.

Metody ke xxxxxxxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 xxxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx: x) xxxxxx xxxxxxxx limit xxxx být xxxxxxx 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxx xxxxxxxxx detekci xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx i po xxxxxx xxxx xxxxx, x&xxxx;xxxxx xxxx za běžných xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx uvedené x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX PRO ZJIŠŤOVÁNÍ XXXXXXXXX XXXXX X&xxxx;XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXX Z OVČÍHO MLÉKA, XXXXXX XXXXX NEBO XXXXXXXX XXXXX, XXXX XXXXX XXXXXX, XXXXXX X&xxxx;XXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX

Xxxxxxxxxx kravského xxxxx a kaseinátů x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka, buvolího xxxxx xxxxx ze xxxxx xxxxxx, kozího x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx izoelektrickou xxxxxxxx γ-kaseinů xx xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX POUŽITÍ

Metoda je xxxxxx xxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx zjišťování mléka x&xxxx;xxxxxxxxx, xxx tepelně xxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxxxxx a zralých xxxxxx vyrobených z ovčího xxxxx, kozího xxxxx, xxxxxxxx mléka nebo xx xxxxx ovčího, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka a sýrů xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XX.3.4.21.7)

3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx fokusace xxxxxxxxx ošetřených xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx

3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx vybarvených xxxxxxx xxxxxxx γ3 x γ2 (xxxxx xxxxxxxxxxx kravského mléka) xx základě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx s obrazci xxxxxxxxx x téhož xxxx z referenčních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0&xxxx;% x 1&xxxx;% kravského xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx xxxxxxxxx jinak, xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x. Xxxx musí být xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx údaje xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 × 125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Pokud xx xxxxxxx jiné xxxxxxx xxxx druhy xxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx separace.

Izoelektrická xxxxxxxx

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx gelů x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

4,85&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx

0,15 x X, X′-xxxxxxxx-xxx-xxxxxxxxxx (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% xx.),

xxxxxxx xx 100 ml x uložte xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxx množství neurotoxického xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx akrylamidu x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, xx koncentrace xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 30&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxxxxx x&xxxx;0,8&xxxx;% xx./xxx. BIS, xxx uvedená xxxxxxxx (4,85 x&xxxx;xxxxxxxxxx a 0,15 x&xxxx;XXX) musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx roztokem x&xxxx;xxxxxx 16,2&xxxx;xx. Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 5 μX, xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x 2 x Xxxxxxxxx XX-3 po xxxx 30 xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxx 0,45μx membránu.

4.1.2.   Roztok xxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;(*) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxx 4.1.1).

9,0&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx

24&xxxx;xx β-xxxxxxx

500 μx amfolytu xX 3,5–9,5

250 μl xxxxxxxx xX 5–7

250 μx xxxxxxxx xX 6–8

Xxxxxx xxxxxx promíchejte x&xxxx;xxxxxxxxxx xx dobu xxxx xx tří minut x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (viz 6.2).

4.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, X, X′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Temed)

4.1.3.2.   40 % xx./xxx. xxxxxxx persíranu amonného (XXX)

800 xx XXX xx rozpustí xx xxxx x xxxxxx xx xx 2 xx.

Xxxxxxxx: Vždy xxxxxxxxxx xxxxxxx připravený xxxxxx XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx nebo xxxxxxx parafin

4.3.   Anodový xxxxxx

Xxxxxxxxx 5,77 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85&xxxx;% hm.) xx vodě x xxxxxx na 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztok

Rozpusťte 2,00 x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x xxxxxx vodou na 100 ml.

Příprava xxxxxx

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx určené k izolaci xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx kyselina octová (25,0 xx ledové xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxxxxx bílkovin

Ve xxxx xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87 % hm.)

24,03 g močoviny

250 mg xxxxxxxxxxxxxxx

x xxxxxxx xx 50 ml xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx; xxxxxxxxx xxxx uskladnění xx xxxxx týden.

4.7.   Chemikálie xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx kaseinů

4.7.1.   Tlumivý xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 mol/l (1,58 x/100 ml xxxx) obsahující 0,05 xxx/x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX, 1,46 x/100 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 mol/l (1,92 g/100 xx xxxx) xxxxxxxxxxxx 0,05 xxx/x XXXX xx xX 8.

4.7.2.   Hovězí plasmin (XX. 3.4.21.7), x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx 5 U/ml.

4.7.3.   Roztok xxxxxxxx ε-aminokapronové určené x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2, 624 g kyseliny ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-amino-n-hexankyseliny) ve 100 ml 40&xxxx;% xxx. xxxxxxxx.

4.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

4.8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx a kozího xxxxxxxxxxxx xxxxx vysráženého xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxx Xxxxxx, X-2440, Xxxx, Xxxxxx.

4.8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx buvolího xxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx x s xxxxxxx 0&xxxx;% x 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx teplotě 37&xxxx;°X (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 xxxxx). Xx rychlém ochlazení xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx na 6 xx 8 °C xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx tuková vrstva. Xxx xxxxxxxx 1 % xxxxxxxxx přidejte 5,00&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx kravského xxxxx xx 495&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 1&xxxx;x. Hodnotu xX xxxxxxx xx 6,4 xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (10&xxxx;%, xx./xxx.). Xxxxxxx xxxxxxx xx 35 °X, xxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx syřidla (xxxxxxxx xxxxxxx 1: 10&xxxx;000, xxx 3 000 X/xx) x&xxxx;xxxxxxxx xx dobu 1 xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx hliníkovou xxxxx x&xxxx;xxxxxx hodinu xxxx při teplotě 35&xxxx;°X k utvoření xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx veškeré mléko xxxxxxxxx xxxxxx syřidla xxxxxxxxxxx, xxxx by xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx odebrání xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx jemně rozemele xx xxxxxxxxx prášek. X&xxxx;xxxxxxxx referenčního standardu 0&xxxx;% použijte xxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí být xxxxxxxxxx při xxxxxxx – 20&xxxx;°X.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx mléka xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kaseinů xxxxxxxxxxx působení plasminu.

Chemikálie xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx bílkovin

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150 g kyseliny trichloroctové xx xxxx a doplňte xx 1&xxxx;000&xxxx;xx.

4.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx 500 ml methanolu x 200 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx 2&xxxx;000 ml.

Poznámka: Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx den čerstvý; xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx objemů xxxxxxxxx xxxxxxx 50&xxxx;% (xxx.) xxxxxxxxx a xxxxxxxxx roztoku 20&xxxx;% (xxx.) xxxxxx kyseliny xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

4.11.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx roztok 1)

X 1&xxxx;000 xx 90 % xxx. xxxxxxxxx rozpusťte xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 45 xxxxx) 3,0 g brilantní xxxxx Xxxxxxxxx G-250 (C. X. 42655) a roztok xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx husté xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx 2)

V 1 000 ml 20&xxxx;% xxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 5,0&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 125 ml xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít x xxx xxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X POMŮCKY

5.1.   Skleněné desky (265 x 125 x 4 mm), xxxxxxx xxxxxxx (x xxxxx 15 xx), xxxxxxxxx xxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx xxxx (265 ×&xxxx;125&xxxx;xx)

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx (280 × 125 mm). Xx xxxxx dlouhý xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx pásky (280 ×&xxxx;6 × 0,25 mm) (xxx xxxxxxx 1).

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx komora x&xxxx;xxxxxxxx deskou (např. 265 ×&xxxx;125&xxxx;xx) a vhodný xxxxxxxx zdroj (≥ 2,5&xxxx;xX) xxxx automatické xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx teploty xx xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx nastavitelná xx 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx (x xxxxx ≥ 265 mm)

5.8.   Plastové xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx a katodový roztok

5.9.   Aplikátory xxxxxx (10 × 5 mm, x&xxxx;xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx (xxxx. misky xx xxxxxxxx 280 ×&xxxx;150&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxx oceli xxxx xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx tyčový homogenizátor x&xxxx;xxxxxxxx xxxx 10&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;000 xx 20&xxxx;000 ot/min

5.13.   Magnetická xxxxxxxx

5.14.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

5.16.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx na 25 μx

5.17.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx lyofilizátor

5.18.   Termostatem řízená xxxxx lázeň, nastavitelná xx 35 a 40 ±&xxxx;1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxxx

5.19.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

Xx odstředivkové xxxxxx xx 100&xxxx;xx navažte xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, xxxxxxxx 60&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx tyčovým xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 až 10&xxxx;000 xx/xxx). Upravte xX xx 4,6 xxxxxxxx xxxxxxxxx octovou (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 minut, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxxxx tuk x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx 20&xxxx;000 ot/min xx 40&xxxx;xx destilované xxxx x&xxxx;xxxxxxxx pH xxxxxxxxx xx 4,5 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1). Xxxxxxxx 20&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx a odstřeďuje (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Špachtlí xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx a organickou xxxx (viz xxxxxxx 2), x&xxxx;xxx xxxx xxxxxxxxxx. Kasein se xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 40 ml xxxxxxxxxxx xxxx (xxx xxxx) x 20 xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x xxxxxxxx xx. Tento xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xx třikrát). Xxxxxxxxxx xxxxxx homogenizujte x&xxxx;50&xxxx;xx xxxxxxx (4.5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxx středně hustý xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 25&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xx vzduchu nebo x&xxxx;xxxxxx xxxxxx. Potom xxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 20 °C.

6.1.2.   Přeměna β-xxxxxxx xx γ-xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.1.1) x 0,5 xx tlumivého xxxxxxx xxxxxxxxxx amonného (4.7.1) x xxxx 20 xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx. Xxxx zahřejte xx 40 °C a přidejte 10 μx xxxxxxxx (4.7.2), xxxxxxxxxxx a inkubujte 1 xxxxxx xxx xxxxxxx 40&xxxx;°X xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx přidejte 20 μx xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (4.7.3). Xxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxx močoviny a 2 mg xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx fokusovaných xxxxxxxxxxx pásů xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx lyofilizovat x poté xxxxxx xxxxxxxxx x 0,5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx bílkovin (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx močoviny

Na xxxxxxxxx xxxxx (5.1) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx (5.2) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx vodu odsajte xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Stejným způsobem xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx fólii (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,25&xxxx;xx) xx jinou skleněnou xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxx uložte vodorovně xx xxxxxxxxx xxxxxx.

X xxxxxxxxxxxx odplyněnému xxxxxxx xxxx (4.1.2) xxxxxxxx 10 μx Temedu (4.1.3.1), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx roztoku XXX (4.1.3.2); xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nalijte xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx. Jeden xxxxx xxxxx desky xxxx (xxxxxxx s fólií xxxxxx dolů) přiložte x&xxxx;xxxxx s krycí xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pravidelně xxxxxxxxxxxx xxxxx vrstva xxxx bez xxxxxx (xxxxxxx 3). Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx nosnou xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx na xx tři xxxxx xxxxxxxx desky, xxx xx zatížily. Po xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx xx 60 xxxxxxxx) xxxxx x krycí xxxxx sejměte xxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Zadní xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx zbytky gelu x&xxxx;xxxxxxxx. „Xxxxxx sendvič“ xxxxxxx xx xxxxx xxxxx a uložte do xxxxxxxxxx (xxxxxxx xx xxxx xxxxx).

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx vložkami xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx na xxxxx xxxxx; je xx vhodné x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx počtu vzorků xxxx v případě použití xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 4,5 ×&xxxx;5&xxxx;xx).

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 12 °X. Zadní xxxxxx xxxxx xxxxx gelu xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xx střed xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx několik xxxxx kerosinu (4.2). Xxxxxxx xxxxxxxx „xxxxxx xxxxxxx“ xxxxxx xxxxx xxxxxxxx dolů, xxx xx xxxxxxxxx všechny xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx na xxxxx xxxx a uložte xx xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxx 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx izoelektrické xxxxxxxx

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx

Xxxx	Xxxx (xxx)	Xxxxxx (X)	Xxxxx (xX)	Xxxxxx (X)	Xxxxx/xxxxxx (Xx)
1. Xxxxxxxxx fokusace	30	max. 2 500	max. 15	konstantní 4	xxx 300
2. Xxxxxxxx xxxxxx&xxxx;(7)	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 1&xxxx;000
3. Xxxxxxx xxxxxxxx	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 5	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 7	xxx. 25	xxx 3&xxxx;000

Xxxxxxxx: Xxxxxxxx xx změní xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx způsobem xxxxxxxx (xxxx. hodnoty xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx se gel x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx programování xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2 gely 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, elektrody xxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx na gel.

Fáze	Napětí	Proud	Příkon	Teplota	Volty/hodiny
1. Předběžná xxxxxxxx	1&xxxx;000 X	10,0 mA	3,5 X	8 °X	85 Vh
2. Fokusace xxxxxx	250 X	5,0 xX	2,5 X	8 °X	30 Xx
3. Xxxxxxxx	1&xxxx;200 X	10,0 xX	3,5 W	8 °X	80 Xx
4. Xxxxxxxx	1&xxxx;500 X	5,0 xX	7,0 W	8 °X	570 Xx

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 2 vložte xxx 0 Xx.

Xxxxxxxxx xxxxxx ve fázi 2 xxxxxxxxx při 30 Xx.

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx

6.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx odstraní xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx do xxxxxxx/xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 200 ml xxxxxxxx (4.9). Xxx x xx xxxxxxxx 15 minut xx xxxxxxx xxxxxxx.

6.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx desky

Fixatér xxxx xxxxxx dekantujte x xxxxxxx desku dvakrát xxxxxxxxxx xx xxxx 30 sekund vždy xx 100 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10) Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx 250&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.3) x gel xxxxxx xx xxxxxxx třepání xx xxxx 45 xxxxx xxxxxxxxx.

6.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx gelové xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx dekantujte x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx dobu 30 xxxxxx xxxx xx 100 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10). Xxxx 15 xxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;200&xxxx;xx odbarvovacího xxxxxxx; xxxx odbarvování xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx není xxxxxx xxxx a bezbarvé. Xxxxxxx xxxxx potom xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (2 ×&xxxx;2 minuty) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx (2 až 3 xxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (10 xx 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 20&xxxx;°X. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx obarvení xxxxxxxx (xxxx. Xxxxxx Xxxxxxxx Kit, Protein, Xxxxxxxxx Biotech, xxx x. 17-1150-01), musí xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx plasminem xxxxxxx x poměru 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx proteinových xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku s xxxxxxx referenčních xxxxxxxxx x stejného gelu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx mléka x sýrech xxxxxxxxxx x xxxxxx mléka, xxxxxx mléka, buvolího xxxxx xxxx ze xxxxx ovčího, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx γ3- x γ2-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx body xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xX 6,5 x xX 7,5 (obrázky 4x, x, obrázek 5). Xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxx 0,5&xxxx;%.

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx hodnocení xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx doporučuje xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx standardů x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, kozích x/xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx (xxx „γ2 X,X,X“ x „γ3 X,X,X“ xx obrázcích 4x, b x xxxxxxx 5) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Pouze xx xxxxxx podmínek xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kravského xxxxx (xxxxx xxxx xxxxx xxx 1&xxxx;% xxxx xx xxxx 1 %) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx porovnáním xxxxxxxxx xxxxxxxx γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (viz „γ3 X“ x&xxxx;„γ2 X“ xx xxxxxxxxx 4&xxxx;x, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx v referenčních standardech x&xxxx;xxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% (xxxxxx, kozích), xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xx xx možné, xxxxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxx xxxxxxxx píků xxxxxxxx γ2- a γ3-kaseinů x&xxxx;xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxx a/nebo xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx (xxx xxxxxxx 5) xxxxxxxxxxxxx (5.19). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx γ2- x γ3-kaseinů v 1&xxxx;% referenčním xxxxxxxxx (xxxxx, xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx laboratorním standardu (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx.

Xxxxxxxx: Tato xxxxxx funguje xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx signál xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx standardu, avšak xxxxxx x 0&xxxx;% xxxxxxxxxxx standardu. V opačném xxxxxxx je xxxxx xxxxxx optimalizovat xxx xxxxxxx dodržení xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx hovězích γ2- x γ3-xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx poměrů xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxx větší než xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 1 % xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxx X., Xxxx X., Xxxxxxxx X., Xxxxxx C., Xxxxxxx X., Berner X, Krause I., Xx Luccia A., Xxxxx X.: Use xx xxxxxxx to increase xxx sensitivity of xxx detection xx xxxxxx xxxx&xxxx;xx ovine xxx/xx xxxxxxx xxxxxx xx gel isoelectric xxxxxxxx xx γ2-xxxxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx 45, 708–711 (1990).

Xxxxx X., Xxxxxxx M.A., Xxxxxxxx X., Xxxx X., Spagna Xxxxx X., Bocca X., Xxx Giovine X.: X xxxxxxx method xx xxxxxx xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxxx buffalo xxxxxx xxxxx immunoblotting. Xxxxxxxxxxxxxxxxx 50, 83–85 (1995).

Krause X., Xxxxxx X, Xxxxxxxxxxxx H.: Sensitive xxxxxxxxx xx cow xxxx&xxxx;xx xxx and xxxx milk and xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx — and xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xX xxxxxxxx — xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ-caseins xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx. in: Electrophoresis-Forum 89 (B. X. Xxxxxx, ed.) xx 389-393, Xxxx-Xxxxxx, Xüxxxxx (1989).

Xxxxxx Ι., Belitz X.-X., Kaiser K.-P.: Xxxxxxxx xxx Xxxxxxxx xx Xxxxx xxx Xxxxxxxxxxx bzw. -xäxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X. Xxxxxxx. Xxxxxx.&xxxx;Xxxxxx. 174, 195–199 (1982).

Xxxxxx X.X.: Xxxxxxxxx-xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 50-100&xxxx;μx xxxxxxxxxxxxxx xxxx on xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx films. Electrophoresis 1, 43–56 (1980).

Obrázek 1

Xxxxxxxxxxx výkres xxxxx xxxxx

Xxxxxxx 2

Xxxxxxxxx vrstva xxxxxxxx xxxx vodnou x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx odlévání ultratenkých xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx

x = xxxxxxxxx páska (0,25 mm); x = xxxxx xxxxx (5.3); x, x = xxxxxxxx xxxxx (5.1); d = xxxxxx xxxxxx (4.1.2); x = xxxxx xxxxx xxxx (5.2).

Xxxxxxx 4a

Izoelektrická xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, C = xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxx

Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx XXX.

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx fokusace xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx směsí xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx kravského xxxxx

% XX = procento xxxxxxxxx mléka; 1 + = xxxxxx x xxxxxxx 1 % xxxxxxxxx xxxxx a x přídavkem xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxxxx

Xx xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx XXX.

Xxxxxxx 5

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (STD) x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ze xxxxx ovčího x&xxxx;xxxxxx xxxxx, po xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

x, x = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0 x 1 % xxxxxxxxx mléka; x-x = vzorky xxxx xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 a 7&xxxx;% xxxxxxxxx mléka; X&xxxx;= xxxxxxx, E = xxxx, G = kozí.

Byla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx IEF při λ =&xxxx;634&xxxx;xx.

XXXXXXX XX

Xxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx určené v souladu x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 xxxxxxxx (XX) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx výsledkům xxxxxxx

1.

Xxxxx xxxxxx se provádí x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx posuzovaný xxxxxxx. Xxxxxxxxxx-xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx se ustanovení xxxxxxx x normě XXX 707„Xxxxx x xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx výsledků v xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx.

3.

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx v právních předpisech Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

4.

Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx agentury xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx&xxxx;xxxxxxxxxx duplicitní vzorky xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx. Výrobce xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xx&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx dnů xx&xxxx;xxxxxxx výsledků xxxxx xxxxxxx. Platební xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx 21 xxx od xxxxxxxx žádosti.

5.

Výsledek xxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx.

6.

Xxxxxxxx xxxxxxx xx pěti xxxxxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, že xxxxxx xxx odběru xxxxxx nebyl xxxxxxx, xxxxx vzorků se x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx odběr xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxxxxxx splnění xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxxxx, xxx právní xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx intervence x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx tyto xxxxxxx. Xx xxxxx ostatních xxxxxxxxx xx používá xxxxxx xxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx náhodně ze xxxxx odevzdané xx xxxxxxxx. Xxx připravit x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx. Získaný xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx stanovenými xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx 95&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jakožto xxxxxxxxxxx směrodatné xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xx xxx, 1) xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxx σx x σX, xxxx v případě xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx, 2) xxx xxxx vypočítána xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx interval xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx nejistotě xxxxxx xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx případě byla xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σX&xxxx;xxxxxxxxx a laboratoř xxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx validované xxxxxx.

Xxxxxxxx xx aritmetický xxxxxx&xxxx; z počtu x opakovaných xxxxxx.

Xxxxxxxx xx rozšířená nejistota (x =&xxxx;2) z  xxxxx:

Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x vypočítán xx xxxxxx ve xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = x ₁ – y ₂, x = x ₁ · x ₂ nebo x = x ₁/x ₂, musí xx x&xxxx;xxxxxxxx případech xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx XX, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, xx hodnotě XX xxxxxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxx zákonem xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx XX, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, že xxxxxxx XX xxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx reprodukovatelnosti

V případech, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx, x&xxxx;xxx xxxxxx stanovena xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je třeba xxxxxxx vnitrolaboratorní xxxxxxxx. Xxxxxxx σx x σ R xx xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx nejistoty X xxxxxx xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx si X .

Pravidla, jež xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxx 1. Xxxxxxxx-xx xx xxxx šarže xx nesplňující xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx hodnotu, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx s bodem 1.