Plné znění - 32018R0150

Xxxxxxx X

XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX FOSFATIDYLSERINU X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX&xxxx;XXXXXXXXXXX MLÉCE

Metoda: XXXX s obrácenými xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX A XXXXXX XXXXXXX

Xxxx metoda popisuje xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) a fosfatidylethanolaminu (XX) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX) a je xxxxxx xxx zjišťování xxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;XXX.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx XX + XX: xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx vyjadřuje x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX METODY

Extrakce xxxxxxxxxxxxxxxx methanolem z rekonstituovaného xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx PS x&xxxx;XX xxxx xxxxxxxx o-ftaldialdehydu (XXX) xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahu XX x&xxxx;XX ve xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxx není uvedeno xxxxx, používá xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx voda nejméně xxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx: XXXX x xxxxxxx xxxxxxx 99 %

Poznámka: Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx teplotě – 18&xxxx;°X.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a zkušebních xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxx pro XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx o-ftaldialdehydových derivátů

4.3.1.   Hydroxid xxxxx, 12 X xxxxx xxxxxx

4.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx, 0,4 X vodný xxxxxx s xxxxxxxx xX xxxxxxxxx hydroxidem xxxxxx (4.3.1) na 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (OPA)

4.4.   Eluční xxxxxxxxxxxx xxx XXXX

4.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx rozpouštědla xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX.

4.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx čistoty xxx HPLC

4.4.3.   Methanol xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

4.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx

4.4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

4.4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx octová.

5.   PŘÍSTROJE X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx váhy s přesností xxxxxx xx 0,1&xxxx;xx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx odečtu xx 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx o objemu 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx dávkovat xx 1 xx 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 0,2, 0,5 x&xxxx;5&xxxx;xx

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx stříkačky x&xxxx;xxxxxx 20 x&xxxx;100 μx

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx 27&xxxx;000 ×&xxxx;x

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx nádobky x&xxxx;xxxxxx xxx 5&xxxx;xx

5.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 25&xxxx;xx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;xX xxxx s přesností xx 0,1 jednotky pH

5.13.   Zařízení xx HPLC

5.13.1.   Gradientový xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx fungovat xxx xxxxxxx 1,0 xx/xxx při 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx dávkovač xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

5.13.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx kolony xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 30 °C ± 1&xxxx;°X

5.13.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx fungovat xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx 330&xxxx;xx a emisní xxxxxx xxxxx 440 nm

5.13.5.   Integrátor nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx dat xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx

5.13.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XxXxxxxxxxx® – 100&xxxx;(250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx naplněná xxxxxxxxxxxxxxxx (X 18), velikost xxxxxx 5 μm

6.   ODBĚR XXXXXX

Xxxxxx se odebírají x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx XXX 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

7.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 30,0 ± 0,1&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.2.3) xx xxxxxxx xxxxx na 100 ml (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.   Pipetou (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) a doplňte xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxx získat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx XXX xx xxxxxxx xx 25&xxxx;xx (5.2). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 10&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx o teplotě 40&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X a po xxxx 30 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.4), aby se xxxxxxxxxx všechny xxxxxx.

7.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.5) přeneste 0,2 ml xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), pomocí xxxxxxxx xxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 100 μx 0,15 xX roztoku xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Převracením xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xx 15 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.8).

7.2.3.   Odstřeďujte (5.9) při 27&xxxx;000 ×&xxxx;x&xxxx;xx xxxx 10 xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx odeberte xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.10).

Xxxxxxxx: Xx provedení xxxxxxx XX xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx 4 °C.

7.3.   Příprava roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxx

7.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 55,4&xxxx;xx XXXX (4.1) xx xxxxxxx baňky na 50&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (5.11) přidejte xxx 25&xxxx;xx xxxxxxxxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx 50 °C ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, dokud xx XXXX nerozpustí. Xxxxx xxxxxxxx xx 20&xxxx;°X, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) přeneste 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx xx odměrné xxxxx xx 100 ml (5.6) x&xxxx;xxxxxxx po značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Pipetou (5.3) přeneste 1&xxxx;xx xxxxxx roztoku do xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxxxx 100 μx (5.7) 0,15mM xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Do xxxxxxxxx xxxxxxx HP xxxx xxx roztok xxxxxxxxxxxx xxxxxx skladován xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx odměrné xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx XXX (4.3.4), xxxxxxxx 0,5 ml (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) a pečlivě xxxxxxxxxxx, aby xx XXX xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx stříkačkou (5.7) xxxxxxxx 20 μx 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Poznámka: Derivatizační xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx v hnědé nádobě xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X; xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx HPLC

7.5.1.   Eluční xxxxxxxxxxxx (4.4)

Xxxxxxxxxxxx A: Xxxxxx 0,3 xX xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a roztok 3 mM xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxxxx xX upravenou xx 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx xxxxxxx): xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx = 558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx X: Xxxxxxxx

7.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx gradient:

Čas (xxx)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Rozpouštědlo X (%)	Xxxxxx (ml/min)
Počáteční	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Poznámka: Může xx xxxx, že xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1.

Xxxxxxx xxxxxx: 30 °C.

7.5.3.   Objem xxxxxxxx: 50 μl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;50 μx roztoku xxxxxx

7.5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxx provádění xxxxxx kolonu xxxxxxxxxx 100&xxxx;% rozpouštědlem X&xxxx;xx xxxx 15 xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx poměr X:X =&xxxx;40:60 a provádějte xxxxxxxxxxx xx xxxx 15 xxxxx při xxxxxxx 1 ml/min. Xxxxxxxx xxxxx pokus xxxxxxxxx methanolu (4.2.1).

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxx po xxxx 30 minut xxxxx methanolu x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x xxxxxx 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx XX + XX xx xxxxxxxxx xxxxxx

7.5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx jednotlivými xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx retenční xxxx. Xxx xxxxxxx odezvového xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (7.3) xx každých 5–10 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xx xxxxx xx každých 20–25 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx B (7.5.1).

7.6.   Integrační režim

7.6.1.   Pík XXXX

XXXX se xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx píku. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxx.

7.6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxxxxxx 1). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx sedly.

7.6.3.   Skupiny xxxx XX a PE

Za takto xxxxxxxxx podmínek (xxxxxxx 1) xx XX xxxxxx x&xxxx;xxxxxx dvou xxxxxxxx, xxxxxxxx nerozlišených xxxx, xxxx nimiž xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx. XX xx vymývá x&xxxx;xxxxxx xxx xxxxxxxx, částečně xxxxxxxxxxxxx xxxx. Celou xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx stanovte nastavením xxxxxxxx linie xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xx obrázku 1.

8.   VÝPOČET X VYJADŘOVÁNÍ VÝSLEDKŮ

Obsah XX + XX xx xxxxxxxxx vzorku xx xxxxxxx xxxxx:

X =&xxxx;55,36 × ((A₂)/(A₁)) × ((X₁)/(X₂))

xxx:

X	=	xxxxx XX xxxx XX (v xx/100 g prášku) ve xxxxxxxxx xxxxxx
X1	=	xxxxxx xxxx XXXX xxxxxxx srovnávacího xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx píku XX xxxx PE xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku (7.2)
X1	=	xxxxxx píku xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zkušebního vzorku (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx Mezinárodní xxxxx XXX&xxxx;(*).

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nezávislých xxxxxxxxxxxx výsledků, které x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního vzorku xxxxx stejný xxxxxxxxx xx stejném xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx časovém xxxxxxx, xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxxxx 2 %. Xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxxxxx, relativní xxxxxx xxxx xxxxxx výsledky xx xxxxx být xxxxx xxx 6&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx a za xxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx rozdíl mezi xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxx 11&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx výsledků.

10.   LITERATURA

10.1.   Resmini X., Xxxxxxxxxx L., Hogenboom X. X., Sadini X., Xxxxxxxx M. „Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx XXXX quantification of xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Xxx. Xxxx. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

XXXX chromatogram XXX-xxxxxxxx fosfatidylserinu (PS) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) v methanolovém xxxxxxxx z rekonstituovaného sušeného xxxxxxxxxxxx mléka. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx PS, XX x&xxxx;xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx XX

XXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX XXXXXXX XXX XXXXXXX XXXXXXXXXX XX XXXXXXX STANOVENÍ XXXXXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXX KAPALINOVOU XXXXXXXXXXXXXX (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx umožňuje zjistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx mléce xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707 – Xxxxx a mléčné xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků.

3.   DEFINICE

Obsah xxxxxx xx syřidlové xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx popsaným xxxxxxxx xxxxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, odstranění tuku x&xxxx;xxxxxxxx kyselinou trichloroctovou x&xxxx;xxxxxxxxx odstředěním nebo xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx xxxxxxxx kaseinomakropeptidů (XXX) v supernatantu vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX);

—	Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx získaného u vzorků xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x. Použitá voda xxxx být xxxx xxxxxxxxxxx xxxx voda xxxxxxx rovnocenné xxxxxxx.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240 g kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) ve xxxx x&xxxx;xxxxxxx na 1&xxxx;000&xxxx;xx. Roztok xx xxx xxx xxxx x bezbarvý.

5.2.   Eluční xxxxxx, xX 6,0

Xxxxxxxxx 1,74&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (X₂XXX₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XX₂XX₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx (Na₂SO₄) xxx x&xxxx;700&xxxx;xx vody. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 6,0 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx hydroxidu xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx xx 1&xxxx;000 xx a xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx materiálů xx xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx o velikosti xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX) x&xxxx;xxxxxx xxxxxx vody. Před xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx promývací xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kolony.

5.4.   Srovnávací vzorky

5.4.1.   Sušené xxxxxxxxxx mléko xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nařízení (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 % xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (tj. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X POMŮCKY

6.1.   Analytické xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx zátkou x&xxxx;xxxxxx xxx 50 ml

6.3.   Mechanická třepačka

6.4.   Magnetická xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx nálevky o průměru xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hustoty o průměru xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx filtrem x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx umožňující xxxxxxxx 10 ml (XXX 648, xxxxx X, xxxx XXX/X 835) xxxx xxxxxxxxx systém xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx xx xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dodávat 20,0&xxxx;xx xxxx xxx xxxxxxx asi 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxx lázeň xxxxxxxxx xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx tvoří:

6.11.1.

Čerpadlo

6.11.2.

Nástřikové zařízení – xxxxx nebo xxxxxxxxxxx – x&xxxx;xxxxxx 15 xx 30 μx

6.11.3.

Xxx xxxxxx TSK 2&xxxx;000-XX xx xxxxx (xxxxx 30 cm, xxxxxxx xxxxxx 0,75&xxxx;xx), xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx XXX 2&xxxx;000-XXxx, xxxxx xxxxxx Xxxxxxx Technologies Xxxxxx GF 250) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx (3&xxxx;xx ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) xxxxxxxx materiálem X&xxxx;125 nebo xxxxx xxxxxxxxxx s rovnocennou xxxxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1&xxxx;°X

6.11.5.

XX xxxxxxxx s proměnnou vlnovou xxxxxx umožňující měřit xxx 205&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,008 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxxx s kolonami xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxx, avšak xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x&xxxx;xxxxxx nižší. V tomto xxxxxxx xx xxxxx, xxx výkyvy xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx jednoho analytického xxxxxx byly xxxxx xxx 5 °C.

7.   ODBĚR XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707. Xxxxxxx státy xxxx xxxxx používat jinou xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxx xxxxxxx dojít xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku.

Sušené xxxxx xxxxxxxx xx nádobky, xxxxx objem xx xxx dvakrát xxxxx xxx objem xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx víčkem. Nádobku xxxxx uzavřete. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx promíchejte xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx zkumavky (6.2) nebo xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx 50&xxxx;xx navažte 2,000 ± 0,001 g zkušebního xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx dávce přidejte 20,0&xxxx;xx xxxxx (50 °C) xxxx. Xxxxxx rozpusťte xxxxxxxx po xxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3). Xxxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxx na 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx míchačkou (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.1) x&xxxx;xxxxxxx xxx 25 °C. Zkumavku xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx vodní lázně (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxxxxx síle 2&xxxx;200&xxxx;x, xxxx přefiltrujte xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5 ml filtrátu xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx 15 xx 30 μx xxxxxx xxxxxxxxxx supernatantu xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx na XXXX (6.11) x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx elučního roztoku (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxxx 1. X&xxxx;xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx použitých xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx použít x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx x&xxxx;xxxx nenechávejte xxxxxx xxxxxx (5.2).

Xxxx každým xxxxxxxxxx xx více xxx 24 xxxxx xx kolony xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx&xxxx;(5.3) xxxxxxx xx dobu xxx xxxxx xxx xxxxxxx 0,2&xxxx;xx za xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxx xxxxxx [E] xx xxxxxxx xx xxxxx chromatogramu, x&xxxx;xxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx XX xxxxx:

Xxx XX:	Xxxxx xxx chromatogramu x RT xxx 12,5 minuty
Pík XXX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx XXX x XX 15,5 xxxxxx

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (kolon).

Integrátor (6.11.6) xxxxxxxxxxx vypočítává xxxxxx A každého píku:

AII:	plocha xxxx XX
XXXX:	xxxxxx píku XXX

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx chromatogramu xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku.

V případě xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) xx xxxxxx použije postup xxxxxxx v bodech 8.2 xx 8.4.2.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx XXX xx v prostředí 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx 30&xxxx;°X xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;0,2&xxxx;% xx xxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků stabilizujte xxxxxx opakovanými nástřiky xxxxxxx (8.5.1) xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.2), xxxxx xx plocha x&xxxx;xxxxxxxx xxx xxxx odpovídajícího XXX xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxx stejného xxxxxx filtrátů (8.5.1), xxxxxx jste použili xxx vzorky.

9.   VYJÁDŘENÍ XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X:

Xxx XX:

XXX = 100/(XXX[0])

xxx:

XXX	=	xxxxxxxx faktory xxxx II
AII [0]	=	xxxxxx xxxx II xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

Xxx XXX:

XXXX = X/(XXXX[5] – XXXX[0])

xxx:

XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxx píku XXX
XXXX [0] and XXXX [5]	=	xxxxxx píku III xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] x&xxxx;[5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx [5], tj. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxx [X]

XXX[X] = RII × XXX[X]

XXXX[X] = XXXX × XXXX[X]

XXX[X] = RIV × XXX[X]

xxx:

XXX [E], SIII [X], XXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XX, XXX x&xxxx;XX xx xxxxxx [X]
XXX [X], XXXX [X]	=	xxxxxx xxxx XX a III xx xxxxxx [X] získané x&xxxx;8.4.2
XXX, XXXX	=	xxxxxxxx faktory xxxxxxxxx x&xxxx;9.1.1

9.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx času xxxx XXX xx vzorku [X]:

XXXXXX[X] = (XXXXX[X])/(XXXXX[5])

xxx:

XXXXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx XXX ve xxxxxx [X]
XXXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx XXX xx xxxxxx [X] xxxxxxx v 8.4.2
RTIII [5]	=	xxxxxxxxx retenční xxx xxxx III v kontrolním xxxxxx [5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx, xx xxxx relativním xxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX, xx. RRTIII [E] x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx až do xxxxxxxx 10&xxxx;% existuje xxxxxxxx xxxxx

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx &xx; 5&xxxx;% xx XXXXXX [X] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx ≤&xxxx;5&xxxx;% xx XXXXXX [X] ≥ 1,000.

Přípustná neurčitost xxx xxxxxxx XXXXXX xx ± 0,002.

Za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx XXXXXX [0] xxx xxxx xxxx xx 1,034. Xxxxx xxxxx kolon xx xxxx xxxxxxx xxxxxx 1,000, avšak xxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1,000.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx:

X = XXXX[X] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx syřidlové xxxxxxxxx ve xxxxxx [X];
XXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx [X] xxxxxxx xxxxx 9.1.2;
1,3	=	představuje xxxxxxxxx xxxxxxxxx plochu píku XXX xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
XXXX [0]	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx plochu xxxx XXX, která xx xxxxx RIII × AIII[0]. Xxxx hodnoty xx xxxxxxx x&xxxx;9.1.1 x&xxxx;8.5.3;
(XXXX [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx relativní xxxxxxxx xxxxx 1,3, jestliže XXXX [0] xxxx xxxxx 0,9. Xxxxxxxxxxxxxx xx relativní průměrná xxxxxx xxxx III xxxxxxxxxxx vzorku [0] rovna 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx stanovení, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx v těsném xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx přístroji, xx xxxxx xxxxxxxxx 0,2 % xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 0,4&xxxx;% xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx předpokládat, xx xxxxxxxxx není xxxxxxxx, xx-xx relativní xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] vyjádřena x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (SIII[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx III x xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxx průměrné ploše xxxx III, xx. 1,3, x xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx xxxxxx, která xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx XXXX [0] xxxx xxx 0,9 (xxx xxx 9.2).

9.4.2.   Je-li relativní xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (SIII[0] – 0,9) x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx xxxx II XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxx bodu 9.2.

9.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XX XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx celkový xxxxx xxxxxxxx (X %). Potom prostudujte xxxxx 1 a 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx získaná xx xxxxxxx xxxxxx nezfalšovaného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx zanesena xx grafů 1 x&xxxx;2.

Xxxx přímka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx určuje xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX, x&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, xx nebude xxxxxxxxxx x&xxxx;90&xxxx;% xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx 1 x 2 jsou:

SIII = 0,376 P % – 10,7	(xxxx 1)
XXXX = 0,0123 XXX [X] + 0,93	(xxxx 2)

xxx:

XXXX	xx relativní xxxxxx xxxx XXX vypočtená xxx xxxxx celkového xxxxxx bílkovin, xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX [X],
X&xxxx;%	xx xxxxxxx obsah xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
XXX [X]	xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Tyto xxxxxxx xxxx rovnocenné xxxxx 1,3 xxxxxxxxx x xxxx 9.2.

Xxxxxx (X1 x X2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx plochou XXXX [X] x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx dán xxxxxx xxxxxx: T1 =&xxxx;XXXX[X]&xxxx;– [(0,376 P% – 10,7) + (SIII[0] – 0,9)]X2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (XXXX[0] – 0,9)].

Xxxx-xx T1 a/nebo X2	xxxxx xxxx nebo xxxxx xxx nula, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx-xx X1 x X2	xxxxx xxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx syřidlové xxxxxxxxx se vypočítá xxxxx vzorce: W = T2 + 0,91

xxx:

0,91 je xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxx xxxxx a přerušovanou xxxxxxx.

Xxxxxxx XXX

XXXXXXXXX XXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX: XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX XX XXXXXXXXX SYROVÁTKY XX&xxxx;XXXXXXXX XXXXXXXXXXXX MLÉKA

2.   NORMATIVNÍ XXXXX: MEZINÁRODNÍ XXXXX XXX 707

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx syrovátky xx definován jako xxxxxxxxxx procento stanovené xxxxxxxx postupem xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxxxxxxx A vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx XXXX). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx provádí xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které tvoří xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx známého procenta xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx 1&xxxx;% xx., xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se pouze xxxxxxxxxx xxxxxxx p.a. Xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx čistoty. Xxxxxxxxxxx xxxx xxx spektroskopickou xxxxxx xxxx jakost xxxxxxx xxx XXXX.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx trichloroctové

Rozpusťte 240 g kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (CCl₃COOH) xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx xx xxx být čirý x bezbarvý.

5.2.   Eluenty X&xxxx;x&xxxx;X

Xxxxxx X: Xxxxxx 150 xx acetonitrilu (XX₃XX), 20 ml isopropanolu (XX₃XXXXXX₃) x 1,00 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXX, XX₃XXXX) xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx xxxxx.

Xxxxxx X: Xxxxxx 550 ml xxxxxxxxxxxx, 20 xx xxxxxxxxxxxx x 1,00 xx XXX xx xxxxxxx baňky xx 1&xxxx;000 xx x xxxxxxx xx 1 000 xx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx o velikosti xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxx se kolona xxxxxxx xxxxxxxx B (xxxxxx) x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xx xxxx 30 xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx požadavky xxxxxxxxx xxx xxxxxxx skladování (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž xxxxxx xxxxxxxxxx mléko zfalšované xxxxxxxxx 5 % xx. xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx zfalšované xxxxxxxxx 50&xxxx;% xx. sušené xxxxxxxxx syrovátky standardního xxxxxxx (tj. [50]).

6.   PŘÍSTROJE X XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx váhy

6.2.   Volitelná xxxxxxxxxxx xxxxxxx dosáhnout xxxxxxxxxx xxxx 2 200 g a vybavená xxxxxxxxxxxxxxx zkumavkami xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx třepačka

6.4.   Magnetická xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx filtrační zařízení x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx dávkovat 10&xxxx;xx (ISO 648, xxxxx X, nebo XXX/X 835), xxxx xxxxxxxxx systém xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx za xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxx při xxxxxxx xxx 50 °C

6.10.   Termostatická xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx HPLC, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx gradientem

6.11.2.

Nástřikové xxxxxxxx – xxxxx xxxx automatické, o objemu 100 μl

6.11.3.

Kolona Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx 300 XX-X3 (xxxxx 25&xxxx;xx, xxxxxxx xxxxxx 0,46&xxxx;xx), xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1&xxxx;°X

6.11.5.

XX xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx měření při 210&xxxx;xx (v xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx větší xxxxxx xxxxx xx xx 220&xxxx;xx) s citlivostí 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nastavení xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx místnosti xx xxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x 1&xxxx;°X, xxxxx xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx xxxxxx retenčního xxxx CMPA.

7.   ODBĚR VZORKŮ

7.1.   Vzorky xxxx xxx odebírány xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx ISO 707. Xxxxxxx státy však xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxx uvedené xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx složení.

8.   PRACOVNÍ XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx objem xx xxx dvakrát xxxxx xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx víčkem. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx důkladně promíchejte xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nádobky.

8.2.   Zkušební xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx 50&xxxx;xx navažte 2,00 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: X&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx zkušební xxxxx xxxxxxxxxx 2,00&xxxx;x.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx přidejte 20,0&xxxx;xx xxxxx (50 °C) xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx třepačce (6.3) xx prášek xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx xx její xxxxxxx xxxxxxxx na 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4) xxxxxxxx 10,0&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx o teplotě xxx 25&xxxx;°X (5.1). Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.   Odstřeďujte (6.2) xx dobu 10 xxxxx xxx odstředivé xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx papír (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx stanovení

8.4.1.   Metoda XXXX s obrácenými xxxxxx xxxxxxxx možnost falešně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx gradientu. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx asi 6&xxxx;xx (xxxxx xx bodu, xxx se stékají xxxxxxxxxxxx k objemu nástřikové xxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxx retenční xxx x&xxxx;xxxxx 26 minut ± 2 minuty xxx XXXΑ. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx s menším xxxxxx xxxxxxx (např. 2&xxxx;xx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx 22 xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx srovnávacích xxxxxx (5.4) x&xxxx;xxxxxxx 50&xxxx;% xxxxxxxxx syrovátky x&xxxx;xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx zařízení xx XXXX, xxxxx xxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx xxxxxxxxx v tabulce 1.

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxx referenčního gradientu xxx optimalizaci xxxxxxxxxxxxxx

Xxx (xxx)	Xxxxxx (xx/xxx)	% X	% B	Křivka
Počátek	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	přímka
32	1,0	10	90	přímka
37	1,0	10	90	přímka
42	1,0	90	10	přímka

Porovnání xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxx XXXΑ.

Xxxxxxxxx složení rozpouštědla, xxxxx je xxxxx xxxxxx xxx normální xxxxxxxx (xxx 8.4.3), xxx vypočítat xxxxx xxxxxx xxxxxx: % X =&xxxx;10 – 2,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% X =&xxxx;7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx čas XXXΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx gradientu
10	:	počáteční % X x referenčním xxxxxxxxx
2,5	:	% X xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx % X x normálním gradientu
13,5	:	čas xxxxxxxxxxxx střednímu xxxx xxxxxxxxxxxx gradientu
26	:	požadovaný xxxxxxxx xxx CMPΑ
6	:	poměr xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
30	:	% B v xxxxxxxxxx xxxx xxxxx % X xx 27 minutách x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
27	:	xxxx běhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx elučního xxxxxxx (5.2) za minutu.

Složení xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x&xxxx;8.4.2. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx X:X = 76:24 (5.2). Okamžitě xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx, xx procento X xx za 27 minut xxxxxx x 5 %. Xxxxx xx spustí xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxx 90 % X. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx po xxxx xxxx minut x po jejím xxxxxxxx se pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxxx složení xxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx počáteční. X xxxxxxxxxx xx vnitřním xxxxxx čerpacího xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 15 xxxxx po dosažení xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxx XXXX xx xxx xxx 26 ± 2 xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíl x % X mezi xxxxxxxxxxx x konečnými xxxxxxxxxx xxxxxxx gradientu xxxx xxxxxxx xx xxxx 5&xxxx;% B.

Poznámka 2. Eluenty je xxxxx xxxxxxxxxx odplynit x&xxxx;xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxxx xxxxx xxx xx, xxx gradientový čerpací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx XXXX xxxx xxx menší xxx 0,1 xxxxxx (x =&xxxx;10).

Xxxxxxxx 3. Xx xxxxxxx pět xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx referenční xxxxxx [5] x xxxxxx xxx pro xxxxxxx xxxxxx odezvového faktoru X (9.1.1).

8.4.4.   Výsledky xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X) xx xxxxxxxxx xx formě chromatogramu, xx xxxx xx xxx XXXX xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx.

Xxxxx X&xxxx;xxxx XXXX xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.11.6). Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Jestliže xx xxxxxxxx linie nesprávně xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx-xx xxx XXXX xxxxxxxxxx oddělen xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx základní xxxxx xxxx sedly. X opačném případě xxxxxxxx svislé xxxxxxx xx xxxxxxxx základní xxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxx by měl xxx v xxxxxxxxx xxxx CMPA (xxxx xx x čase x =&xxxx;0 xxx!). Xxx referenční xxxxxxxx x xxxxxx použijte xxxxxx xxx xxxxxxxxx x x společné xxxxxxxx linie xxxxxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx je nezbytné xxxxxxxxxx vzhled xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, nebo xxxxxx, nebo původem x&xxxx;xxxxxxx analyzovaného xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx vzorků (5.4.1 až 5.4.2) xx přesně xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxx 8.2 xx 8.4.4. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx XXX xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% kyseliny xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx teplotě 4&xxxx;°X xxxxxxx xxxxxx xxxxx po dobu 24 xxxxx. V případě xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx žádoucí xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx nástřikovém xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx % X x počátečních xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5) xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1. Xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx CMPA xxx xxxx xxxx. Xx xxxxxxxx nutné xxxxxxxxx xxxxxxx separace.

8.5.2.   Před xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx čase XXXX píku.

8.5.3.   Odezvové faktory X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx objemu xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx bylo xxxxxxx pro xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx výpočtu x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X:

Xxx XXXX: X = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx xxxxxx píku XXXX
X	=	xxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx ve srovnávacím xxxxxx [5]

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx

X(X)&xxxx;= X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx [X]
X	=	xxxxxxxx faktor xxxx XXXX (9.1.1)
X(X)	=	xxxxx xxxx XXXX xxxxxx (X)

Xxxxx xx X(X) xxxxx xxx 1 % x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxx časem x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx [5] xxxxx xxx 0,2&xxxx;xxxxxx, xxx je xxxxxxxxxx sušiny xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx prokázána.

9.3.   Přesnost xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního vzorku xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx jeden xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx neměl xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx.

9.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxx od 0 % xx 16&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx vztah x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx&xxxx;&xx;&xxxx;0,99.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxx 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Ni—4.6 standard

XXXXXXX XX

Xxxxxx analýzy xxxxx x soukromém xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx&xxxx;(6)	XXX 17189 xxxx XXX 3727 xxxx&xxxx;3
Xxxx	XXX 3727 xxxx 1
Tukuprostá xxxxxx (x xxxxxxxx xxxx)	XXX 3727 xxxx 2
Xxx	XXX 15648

XXXXXXX XXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx	XXX 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 xxxx 1
Xxxx	XXX 5537

XXXXXXX XXXX

Xxxxxx xxxxxxx sýrů x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

1.

Xx nutné xxxxxxx, xx sýry xxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, kozího xxxxx xx buvolího xxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx a buvolího xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka, a za xxxxx účelem xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx. Xxxxxxxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1&xxxx;% kravského xxxxx, xxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

2.

Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx z kravského xxxxx v sýrech uvedených x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx: x) xxxxxx detekční limit xxxx být nejvýše 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx výsledky xxxxx xxx xxxxxxx pozitivní; c) musí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka s požadovanou xxxxxxxxxx x&xxxx;xx dlouhé xxxx zrání, k čemuž xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX XXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXX MLÉKA A KASEINÁTŮ X&xxxx;XXXXXX X&xxxx;XXXXXX MLÉKA, XXXXXX XXXXX XXXX XXXXXXXX MLÉKA, XXXX XXXXX XXXXXX, XXXXXX X&xxxx;XXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a kaseinátů v sýrech xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx mléka, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx anebo ze xxxxx xxxxxx, kozího x&xxxx;xxxxxxxx mléka izoelektrickou xxxxxxxx γ-xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX POUŽITÍ

Metoda je xxxxxx xxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx zjišťování mléka x&xxxx;xxxxxxxxx, xxx tepelně xxxxxxxxxx, v čerstvých a zralých xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxx xxxxxxx ošetřenými xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx standardů

3.2.   Rozpuštění xxxxxxxxxxx kaseinů x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (EC.3.4.21.7)

3.3.   Izoelektrická xxxxxxxx xxxxxxxxx ošetřených kaseinů xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx

3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx γ3 x γ2 (xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mléka) xx základě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxx s obrazci xxxxxxxxx u téhož xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 % x 1&xxxx;% kravského xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Následující xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx močoviny x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Xxxxx xx xxxxxxx jiné rozměry xxxx xxxxx gelu, xxxx xxx nutné xxxxxxx podmínky xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.1.   Chemikálie xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx močoviny

4.1.1.   Zásobní xxxxxx xxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

4,85&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx

0,15 x X, N′-methylen-bis-akrylamidu (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% xx.),

xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxx do xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx lahvi.

Poznámka: Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx neurotoxického xxxxxxxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, předem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, xx koncentrace xxxxxxxxxx xxxxxxx je 30&xxxx;% xx./xxx. akrylamidu x&xxxx;0,8&xxxx;% xx./xxx. XXX, xxx xxxxxxx xxxxxxxx (4,85 x&xxxx;xxxxxxxxxx x&xxxx;0,15 x&xxxx;XXX) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 16,2&xxxx;xx. Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx je jeho xxxxxxxx xxxxx xxx 5 μX, xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s 2 x Xxxxxxxxx XX-3 po xxxx 30 minut a xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxx 0,45μx membránu.

4.1.2.   Roztok xxxx

Xxxxxxxxx roztok gelu xxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;(*) xx zásobním xxxxxxxx xxxx (xxx 4.1.1).

9,0 ml xxxxxxxxx roztoku

24 mg β-alaninu

500 μx amfolytu xX 3,5–9,5

250 μx xxxxxxxx xX 5–7

250 μl xxxxxxxx xX 6–8

Xxxxxx xxxxxx promíchejte x&xxxx;xxxxxxxxxx xx dobu xxxx xx tří minut x&xxxx;xxxxxxxxxxxx lázni xxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2).

4.1.3.   Roztoky xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, X, N′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx)

4.1.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;40&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxx xxxxxxxxx amonného (XXX)

800 xx PER xx rozpustí ve xxxx x xxxxxx xx xx 2 xx.

Xxxxxxxx: Vždy xxxxxxxxxx xxxxxxx připravený roztok XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx tekutina

Kerosin xxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 5,77 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85&xxxx;% xx.) xx xxxx x xxxxxx xx 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztok

Rozpusťte 2,00 x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx a xxxxxx xxxxx na 100 xx.

Xxxxxxxx xxxxxx

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25,0 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxxxxx bílkovin

Ve xxxx xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87 % xx.)

24,03&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

250&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx

x xxxxxxx xx 50 xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx v chladničce; xxxxxxxxx xxxx uskladnění je xxxxx týden.

4.7.   Chemikálie xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx amonného

Titrujte xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,58 x/100 xx xxxx) obsahující 0,05 xxx/x kyseliny ethylendiamintetraoctové (XXXX, 1,46 g/100 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,92 x/100 xx xxxx) xxxxxxxxxxxx 0,05 xxx/x EDTA xx xX 8.

4.7.2.   Hovězí plasmin (XX. 3.4.21.7), x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx 5 X/xx.

4.7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové určené x&xxxx;xxxxxxxx enzymu

Rozpusťte 2, 624 g kyseliny ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-xxxxx-x-xxxxxxxxxxxxx) xx 100 ml 40&xxxx;% xxx. xxxxxxxx.

4.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

4.8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx směsi xxxxxx x&xxxx;xxxxxx odstředěného xxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx a s obsahem 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% kravského mléka xxx xxxxxx xx Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a měření xxxxxxxxxx xxx Xxxxxx, X-2440, Xxxx, Xxxxxx.

4.8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x s xxxxxxx 0&xxxx;% a 1&xxxx;% xxxxxxxxx mléka

Odstředěné xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mléka xxx teplotě 37&xxxx;°X (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 xxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx 6 xx 8 °X xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxx přípravu 1 % xxxxxxxxx přidejte 5,00&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx 495&xxxx;xx odstředěného xxxxxxxx mléka v kádince x&xxxx;xxxxxx 1&xxxx;x. Xxxxxxx xX xxxxxxx xx 6,4 xxxxxxxxx zředěné xxxxxxxx xxxxxx (10&xxxx;%, xx./xxx.). Teplotu xxxxxxx xx 35 °X, xxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx syřidla (xxxxxxxx xxxxxxx 1: 10&xxxx;000, xxx 3 000 X/xx) x&xxxx;xxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx hliníkovou xxxxx a nechte hodinu xxxx xxx xxxxxxx 35&xxxx;°X k utvoření xxxxxxxx. Xx utvoření xxxxxxxx xx xxxxxxx mléko xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aniž xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx odebrání xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx homogenní xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx 0&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u čistého xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx při teplotě – 20&xxxx;°X.

Xxxxxxxx: Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vodě a doplňte xx 1&xxxx;000&xxxx;xx.

4.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx 500 ml methanolu x 200 ml xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou xx 2&xxxx;000 ml.

Poznámka: Xxxxxxxxxxx xxxxxx se připravuje xxxxx den xxxxxxx; xxx jej připravit xxxxxxxxx xxxxxxxx objemů xxxxxxxxx roztoku 50&xxxx;% (xxx.) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx 20&xxxx;% (xxx.) ledové xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

4.11.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok (xxxxxxx roztok 1)

V 1&xxxx;000 ml 90&xxxx;% xxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 45 xxxxx) 3,0 x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx G-250 (C. X. 42655) a roztok xxxxxxxxxxxx xxxx dva xxxxxxx xxxxx skládané xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (zásobní xxxxxx 2)

X&xxxx;1&xxxx;000&xxxx;xx 20 % xxx. kyseliny xxxxxx xxxxxxxxx 5,0&xxxx;x&xxxx;xxxxxx měďnatého, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxxx 125 ml xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxx xx třeba použít x den xxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx desky (265 x 125 x 4 xx), xxxxxxx váleček (x xxxxx 15 cm), xxxxxxxxx xxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx fólie xxxx (265 ×&xxxx;125&xxxx;xx)

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;125&xxxx;xx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;6 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx) (xxx xxxxxxx 1).

5.4.   Elektrofokusační komora x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. 265 ×&xxxx;125&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (≥ 2,5&xxxx;xX) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx teploty xx xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx na 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx proužky (o xxxxx ≥ 265 mm)

5.8.   Plastové xxxxxx nádobky xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx (10 × 5 mm, x&xxxx;xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx s nízkou adsorpcí xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx misky (xxxx. misky xx xxxxxxxx 280 × 150 mm) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxxx homogenizátor x&xxxx;xxxxxxxx xxxx 10&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;000 až 20&xxxx;000 xx/xxx

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx míchačka

5.14.   Ultrazvuková xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx fólií

5.16.   Mikropipety na 25 μl

5.17.   Vakuová odstředivka xxxx lyofilizátor

5.18.   Termostatem xxxxxx xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 35 x&xxxx;40 ±&xxxx;1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxxx

5.19.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx zařízení xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx délce λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

6.1.   Příprava vzorku

6.1.1.   Izolace xxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx kyvety xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídající 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, xxxxxxxx 60&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx a obsah xxxxxxxxxxxxx tyčovým xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 až 10&xxxx;000 xx/xxx). Upravte xX xx 4,6 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Dekantujte xxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx homogenizujte xxx 20&xxxx;000 xx/xxx xx 40&xxxx;xx destilované xxxx x&xxxx;xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xx 4,5 xxxxxxxx kyselinou octovou (4.5.1). Přidejte 20&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) a znovu xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3 000 g). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vrstvu, xxxxx xx xxxxxxx xxxx vodnou a organickou xxxx (viz xxxxxxx 2), x&xxxx;xxx xxxx xxxxxxxxxx. Kasein xx xxxxx homogenizuje xx 40 xx destilované xxxx (xxx výše) x 20 ml xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x xxxxxxxx xx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, dokud xxx xxxxxxxxx fáze xxxxxx xxxxxxxx (dvakrát xx třikrát). Bílkovinný xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;50&xxxx;xx xxxxxxx (4.5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx filtr. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 25&xxxx;xx dávkami xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx nebo x&xxxx;xxxxxx xxxxxx. Potom xxxxx xxxxxxxxxx v třecí xxxxx.

Xxxxxxxx: Suché xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 20 °X.

6.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx β-xxxxxxx na γ-xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.1.1) x 0,5 xx tlumivého xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7.1) x směs 20 xxxxx homogenizujte, xxxx. xxxxxxxxxxx. Směs zahřejte xx 40&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx plasminu (4.7.2), promíchejte x&xxxx;xxxxxxxxx 1 xxxxxx xxx xxxxxxx 40 °C xx xxxxxxx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx enzymu xxxxxxxx 20 μl xxxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové (4.7.3). Xxxx xxxxxxxx 200 mg xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Pro xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx lyofilizovat x xxxx zbytky xxxxxxxxx x 0,5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx bílkovin (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx močoviny

Na xxxxxxxxx xxxxx (5.1) xxxxxxxx xxxxxxx nosnou xxxxx xxxx (5.2) s pomocí xxxxxxxx xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx vodu odsajte xxxxxxxxx ubrouskem xxxx xxxxxxxxxxx. Stejným xxxxxxxx xxxxxxxx naneste xxxxxx, xxxxx fólii (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,25&xxxx;xx) xx jinou skleněnou xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxx uložte vodorovně xx nivelační xxxxxx.

X xxxxxxxxxxxx odplyněnému roztoku xxxx (4.1.2) přidejte 10 μl Temedu (4.1.3.1), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx xxxxxxx XXX (4.1.3.2); xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nalijte xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxx (xxxxxxx s fólií xxxxxx xxxx) xxxxxxxx x&xxxx;xxxxx x&xxxx;xxxxx fólií x&xxxx;xxxxxx pokládejte xxx, xxx xx mezi xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx (xxxxxxx 3). Pomocí xxxxx špachtle nosnou xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx celé xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xx tři další xxxxxxxx desky, xxx xx zatížily. Po xxxxxxxx xxxxxxxxxx (asi xx 60 xxxxxxxx) xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxx, xx skleněné xxxxx xxxxxxxxx. Zadní xxxxxx xxxxx xxxxx pečlivě xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. „Xxxxxx sendvič“ xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx do xxxxxxxxxx (xxxxxxx xx xxxx xxxxx).

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx vložkami xxx použít znovu. Xxxxxxxxxxxxxxxx gel xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx; je xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vzorků xxxx v případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx gely o rozměrech 4,5 ×&xxxx;5&xxxx;xx).

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 12 °X. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx kerosinem a poté xx střed xxxxxxxxxx xxxxx kápněte xxxxxxx xxxxx kerosinu (4.2). Xxxxxxx xxxxxxxx „gelový xxxxxxx“ nosnou fólií xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxxx všechny xxxxxxxxx bubliny. Xxxxxxxxxx xxxxxxx otřete x&xxxx;xxxxxxx xxxxx fólii. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx xx délku xxxx x&xxxx;xxxxxx na xxxxx (xxxxxxxxxx elektrod 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx 265 ×&xxxx;125 × 0,25 mm

Fáze	Doba (min)	Napětí (V)	Proud (mA)	Příkon (W)	Volty/hodiny (Vh)
1. Předběžná xxxxxxxx	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 300
2. Xxxxxxxx xxxxxx&xxxx;(7)	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 1&xxxx;000
3. Xxxxxxx xxxxxxxx	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 5	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 7	xxx. 25	xxx 3&xxxx;000

Xxxxxxxx: Xxxxxxxx xx změní xxxxxxxx nebo xxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx zařízení (2 xxxx 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, xxxxxxxxx bez xxxxxxx se přikládají xxxxx xx gel.

Fáze	Napětí	Proud	Příkon	Teplota	Volty/hodiny
1. Předběžná xxxxxxxx	1&xxxx;000 X	10,0 xX	3,5 X	8 °X	85 Xx
2. Xxxxxxxx xxxxxx	250 X	5,0 mA	2,5 X	8 °X	30 Xx
3. Xxxxxxxx	1&xxxx;200 X	10,0 xX	3,5 X	8 °X	80 Vh
4. Fokusace	1 500 V	5,0 xX	7,0 W	8 °C	570 Xx

Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx 2 vložte xxx 0 Xx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 2 xxxxxxxxx při 30 Xx.

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx

6.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx odstraní xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxx xx ihned xxxxx xx barvicí/odbarvovací xxxxx xxxxxxxx 200 ml xxxxxxxx (4.9). Xxx x xx xxxxxxxx 15 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.

6.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx dvakrát xxxxxxxxxx po xxxx 30 xxxxxx xxxx xx 100 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10) Xxxxxxxxxxx roztok dekantujte, xxxxx xxxxxxx 250&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.3) x xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 45 xxxxx xxxxxxxxx.

6.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx desku xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 sekund xxxx xx 100&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10). Xxxx 15 xxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;200&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx roztoku; xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx není xxxxxx xxxx a bezbarvé. Xxxxxxx xxxxx potom xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou (2 ×&xxxx;2 minuty) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx (2 xx 3 hodiny) xxxx xxxxxx vysoušečem vlasů (10 xx 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Fixaci, xxxxxxxxx, barvení x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 20&xxxx;°X. Vyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx obarvení xxxxxxxx (např. Xxxxxx Xxxxxxxx Xxx, Xxxxxxx, Xxxxxxxxx Xxxxxxx, xxx x. 17-1150-01), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx plasminem zředěny x xxxxxx 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx provádí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx obrazců xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardů x xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x sýrech vyrobených x ovčího mléka, xxxxxx mléka, buvolího xxxxx xxxx xx xxxxx ovčího, xxxxxx x xxxxxxxx mléka xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx γ3- x γ2-xxxxxxx, xxxxxxx izoelektrické body xx nacházejí x xxxxxxx xxxx xX 6,5 x xX 7,5 (obrázky 4a, x, xxxxxxx 5). Xxxxxxxx mez je xxxxx xxx 0,5&xxxx;%.

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx hodnocení xxxxxxxx kravského xxxxx xx xxxxxxxxxx upravit xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, kozích a/nebo xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx (xxx „γ2 X,X,X“ a „γ3 X,X,X“ xx obrázcích 4x, x a xxxxxxx 5) stejné xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx podmínek xxx xxxxx posoudit xxxxxxxx kravského mléka (xxxxx xxxx xxxxx xxx 1 % xxxx xx xxxx 1&xxxx;%) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (viz „γ3 X“ x&xxxx;„γ2 C“ xx xxxxxxxxx 4&xxxx;x, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) s intenzitami xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx standardech x&xxxx;xxxxxx 0&xxxx;% a 1 % (xxxxxx, kozích), xxxx xxxxxxxxxxxx laboratorních standardech (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx je xx možné, xxxxxxxx xxx stanovení poměru xxxx plochami xxxx xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxx x/xxxx buvolích γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx (xxx xxxxxxx 5) xxxxxxxxxxxxx (5.19). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx γ2- x γ3-xxxxxxx v 1&xxxx;% referenčním standardu (xxxxx, xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx laboratorním xxxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx existuje xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx obou xxxxxxxx γ2- a γ3-xxxxxxx v 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, avšak xxxxxx x 0 % xxxxxxxxxxx standardu. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx optimalizovat xxx xxxxxxx xxxxxxxx pokynů xxxxxxxxxxx v dané xxxxxx.

Xxxxxx xx považován za xxxxxxxxx, jestliže xxxxxxx xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx poměrů ploch xxxx xxxx stejné xxxx větší xxx xxxxxxx odpovídající 1&xxxx;% xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxx X., Xxxx L., Xxxxxxxx X., Xxxxxx X., Xxxxxxx X., Berner X, Xxxxxx X., Xx Xxxxxx A., Xxxxx X.: Xxx xx plasmin xx&xxxx;xxxxxxxx xxx sensitivity xx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxxxx xxx/xx caprine xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ2-caseins. Milchwissenschaft 45, 708–711 (1990).

Xxxxx X., Nicolai M.A., Xxxxxxxx X., Moio X., Spagna Musso X., Bocca X., Xxx Xxxxxxx L.: X xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx&xxxx;xx ewe xxx xxxxx buffalo xxxxxx xxxxx immunoblotting. Xxxxxxxxxxxxxxxxx 50, 83–85 (1995).

Xxxxxx X., Berner I, Xxxxxxxxxxxx X.: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxx&xxxx;xx ewe xxx xxxx xxxx&xxxx;xxx cheese xx xxxxxxx ampholyte — xxx carrier xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xX gradient — xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ-caseins xxxxx xxxxxxx as xxxxxx xxxxxxxxx. xx: Xxxxxxxxxxxxxxx-Xxxxx 89 (X. X. Xxxxxx, xx.) pp 389-393, Xxxx-Xxxxxx, Xüxxxxx (1989).

Xxxxxx Ι., Xxxxxx X.-X., Kaiser X.-X.: Xxxxxxxx xxx Kuhmilch xx Xxxxx and Xxxxxxxxxxx xxx. -käse xxxxx xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx Polyacrylamidgelen. X. Xxxxxxx. Xxxxxx.&xxxx;Xxxxxx. 174, 195–199 (1982).

Xxxxxx X.X.: Ultrathin-layer xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 50-100&xxxx;μx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx glass xxxxxx xx polyester xxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx 1, 43–56 (1980).

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx

Xxxxxxx 2

Kaseinová vrstva xxxxxxxx mezi xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx

x = xxxxxxxxx xxxxx (0,25&xxxx;xx); x = xxxxx xxxxx (5.3); x, x = xxxxxxxx xxxxx (5.1); x = xxxxxx xxxxxx (4.1.2); f = xxxxx fólie xxxx (5.2).

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx fokusace xxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s různým xxxxxxx xxxxxxxxx mléka

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, X&xxxx;= xxxxxxx, E = xxxx, X&xxxx;= kozí

Na xxxxxxx xx znázorněna xxxxx xxxxxxxx xxxx IEF.

Obrázek 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx směsí ovčího, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx mléka, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s různým xxxxxxx kravského xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; 1 + = xxxxxx x obsahem 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. C = xxxxxxx, E = xxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxxxx

Xx xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx gelu IEF.

Obrázek 5

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx referenčních xxxxxxxxx (XXX) x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ze xxxxx ovčího x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xx izoelektrické xxxxxxxx

x, x = xxxxxxxxxx standardy obsahující 0 x 1 % xxxxxxxxx mléka; x-x = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 x 7&xxxx;% kravského mléka; X&xxxx;= kravské, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= kozí.

Byla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx XXX při λ = 634 nm.

PŘÍLOHA IX

Hodnocení xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx provádějí xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 xxxxxxxx (ES) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) xxxx určené xxxxxxxxxxx orgány xxxxxxxxx xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx výsledkům analýzy

1.

Odběr xxxxxx xx provádí x&xxxx;xxxxxxx s příslušným xxxxxxxxx xxx posuzovaný xxxxxxx. Xxxxxxxxxx-xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx XXX 707„Xxxxx x xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx výsledků x xxxxxxx s dodatkem.

3.

Pro xxxxxxx xxxxxxxxx v právních xxxxxxxxxx Xxxx xx odebírají xxxxxxxxxx xxxxxx.

4.

Xxxxx xxxxx xx sporu ohledně xxxxxxxx, platební xxxxxxxx xxxx nechat znovu xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx produktu x xxxxxxx xxxxx strana, xxxxx xxxx prohraje. Výše xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx za předpokladu, xx&xxxx;xxxxxxxxxx duplicitní vzorky xxxxxxxx jsou x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx orgánu. Xxxxxxx xxxxx platební agentuře xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx analýzy xx&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx xxx xx&xxxx;xxxxxxx výsledků první xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.

5.

Xxxxxxxx opravného xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx.

6.

Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxx po odběru xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx xxx odběru xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx x&xxxx;xxxxx možností xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx vzorků xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxxxxxx splnění xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx x ohledem xx šarži

1.   Podstata xxxxxx

X xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx týkající se xxxxxxx intervence x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx postupy pro xxxxx vzorků, xxxxxxxx xx tyto xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Lze připravit x&xxxx;xxxxxxx vzorek. Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 95&xxxx;% xxxxxxxxx spolehlivosti xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx příslušná xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xx xxx, 1) xxx xxxx metoda xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s hodnotami xxx σx a σX, nebo x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx validace xx xxx, 2) xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Tento xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx potom xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx mezinárodní xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx σx a směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σR stanovena x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx soulad x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx; x xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (x =&xxxx;2) x&xxxx; xxxxx:

Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x vypočítán xx xxxxxx xx xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = x ₁ – x ₂, x = x ₁ · x ₂ nebo x = x ₁/x ₂, musí se x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx XX, jestliže

jinak xx xx xx xx, xx hodnotě XX xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx XX, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, xx xxxxxxx LL xxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s výpočtem směrodatné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v tomto xxxxxxxx, x&xxxx;xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx vnitrolaboratorní xxxxxxxx. Xxxxxxx σr a σ X xx xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx nejistoty X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx odchylka vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xx X .

Pravidla, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx uvedena x&xxxx;xxxx 1. Xxxxxxxx-xx xx xxxx šarže xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx metody xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx 1.