Plné znění - 32018R0150

Xxxxxxx X

XXXXXXXXXXXXX STANOVENÍ XXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX V SUŠENÉM ODSTŘEDĚNÉM MLÉCE

Metoda: XXXX s obrácenými xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx popisuje xxxxxx kvantitativního stanovení xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX) x&xxxx;xx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;XXX.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx XX + XX: xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx postupem. Xxxxxxxx xx vyjadřuje x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx methanolem z rekonstituovaného xxxxxxxx mléka. Xxxxxxxxx xxxxxx XX x&xxxx;XX xxxx derivátů o-ftaldialdehydu (XXX) xxxxxxx HPLC x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx detekcí. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XX x&xxxx;XX xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx vzorkem, který xxxxxxxx známé množství XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx čistoty p.a. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx: XXXX x xxxxxxx xxxxxxx 99 %

Poznámka: Xxxxxxxxxx xxxxxxxx musí být xxxxxxxxx při teplotě – 18 °C.

4.2.   Chemikálie pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx čistoty pro XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx o-ftaldialdehydových derivátů

4.3.1.   Hydroxid xxxxx, 12 M xxxxx xxxxxx

4.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx, 0,4 X xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xX xxxxxxxxx hydroxidem xxxxxx (4.3.1) xx 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (XXX)

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx rozpouštědla xxx XXXX

4.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx být připravena xxxxxx xxxxxxxxxx čistoty xxx XXXX.

4.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx čistoty xxx HPLC

4.4.3.   Methanol fluorometricky xxxxxxxx čistoty

4.4.4.   Tetrahydrofuran

4.4.5.   Natrium xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

4.4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx s přesností xxxxxx na 0,1&xxxx;xx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx xx 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx dávkovat xx 1 xx 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx míchačka

5.5.   Dělené xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 0,2, 0,5 a 5 ml

5.6.   Odměrné baňky x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx o objemu 20 a 100 μl

5.8.   Ultrazvuková xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx fungující xxx 27&xxxx;000 ×&xxxx;x

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx nádobky x&xxxx;xxxxxx xxx 5&xxxx;xx

5.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 25&xxxx;xx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;xX xxxx s přesností xx 0,1 xxxxxxxx pH

5.13.   Zařízení xx XXXX

5.13.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx čerpací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 1,0 xx/xxx xxx 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

5.13.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx kolony xxxxxxx kolonu xxxxxxxx xx xxxxxxx 30&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X

5.13.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx vlnové délce 330&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxx 440&xxxx;xx

5.13.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxx schopné xxxxx xxxxxx píků

5.13.6.   Kolona XxXxxxxxxxx® – 100&xxxx;(250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) xxxx rovnocenná xxxxxx naplněná xxxxxxxxxxxxxxxx (X 18), xxxxxxxx xxxxxx 5 μx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx s normou XXX 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

7.1.   Příprava xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

7.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 30,0 ± 0,1&xxxx;xx tryptaminhydrochloridu (4.2.3) xx odměrné xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.   Pipetou (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6) a doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) s cílem xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx zkušebního xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx SOM xx xxxxxxx xx 25&xxxx;xx (5.2). Pipetou (5.3) xxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx 40&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xx xxxx 30 xxxxx xxxxxxxx magnetickou xxxxxxxxx (5.4), aby se xxxxxxxxxx všechny kousky.

7.2.2.   Pipetou (5.5) xxxxxxxx 0,2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 100 μl 0,15 xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xx 15 xxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.8).

7.2.3.   Odstřeďujte (5.9) xxx 27&xxxx;000 ×&xxxx;x&xxxx;xx dobu 10 xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx odeberte xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.10).

Xxxxxxxx: Xx provedení xxxxxxx XX xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx skladován xxx xxxxxxx 4 °C.

7.3.   Příprava xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx

7.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 55,4 mg XXXX (4.1) xx xxxxxxx xxxxx xx 50&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (5.11) xxxxxxxx xxx 25&xxxx;xx chloroformu (4.2.2). Zazátkovanou xxxxx xxxxxxxx xx 50&xxxx;°X ± 1 °C x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, dokud xx XXXX xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx na 20&xxxx;°X, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) přeneste 1&xxxx;xx tohoto xxxxxxx xx odměrné xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxx (5.3) přeneste 1 ml xxxxxx roztoku do xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxxxx 100 μx (5.7) 0,15mM xxxxxxx tryptaminu (7.1) x&xxxx;xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx roztok xxxxxxxxxxxx xxxxxx skladován při xxxxxxx 4 °C.

7.4.   Příprava xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx baňky xx 10&xxxx;xx (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx XXX (4.3.4), xxxxxxxx 0,5&xxxx;xx (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby se XXX rozpustil. Xxxxxxx xx značku xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 20 μx 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Poznámka: Derivatizační xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxx teplotě 4&xxxx;°X; xxxxxxx zůstává stálé xx dobu jednoho xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx pomocí XXXX

7.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.4)

Xxxxxxxxxxxx A: Xxxxxx 0,3 xX xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 3 xX octanu xxxxxxx (s xxxxxxxx xX upravenou xx 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx xxxxxxx): xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx =&xxxx;558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx B: Xxxxxxxx

7.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx gradient:

Čas (xxx)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Xxxxxx (xx/xxx)
Xxxxxxxxx	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Xxxxxxxx: Může xx xxxx, xx xxxxxx gradient xxxx xxxxx xxx mírně xxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx rozlišení znázorněné xx obrázku 1.

Xxxxxxx xxxxxx: 30 °C.

7.5.3.   Objem xxxxxxxx: 50 μl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a 50 μx xxxxxxx xxxxxx

7.5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx X&xxxx;xx xxxx 15 minut, xxxxx xxxxxxxxx poměr X:X =&xxxx;40:60 a provádějte xxxxxxxxxxx xx dobu 15 xxxxx xxx xxxxxxx 1 xx/xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx methanolu (4.2.1).

Poznámka: Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx promývejte xx xxxx 30 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x poměru 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx obsahu XX + XX xx xxxxxxxxx xxxxxx

7.5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx sérii xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx jednotlivými xxxxxx, xxxxxx získali xxxxxxxxxx retenční časy. Xxx výpočet xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx standardu (7.3) xx xxxxxxx 5–10 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx 20–25 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx promýváním 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx B (7.5.1).

7.6.   Integrační režim

7.6.1.   Pík XXXX

XXXX xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx sedly.

7.6.2.   Pík xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxxxxxx 1). Plochu xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx sedly.

7.6.3.   Skupiny xxxx XX x&xxxx;XX

Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx 1) xx XX xxxxxx x&xxxx;xxxxxx dvou xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx. XX xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx hlavních, částečně xxxxxxxxxxxxx píků. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx stanovte xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx tak, xxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1.

8.   VÝPOČET X VYJADŘOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxx XX + XX xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx:

X =&xxxx;55,36 × ((X₂)/(X₁)) × ((T₁)/(T₂))

kde:

C	=	obsah PS xxxx XX (v xx/100 x&xxxx;xxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxx
X1	=	xxxxxx píku XXXX roztoku xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx XX xxxx PE xxxxxxx zkušebního xxxxxx (7.2)
X1	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx tryptaminu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxx opakovatelnost xxxx xxxxxxxxx podle Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX&xxxx;(*).

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovatelnosti, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx stejný pracovník xx stejném xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx časovém xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;%. Xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx rozdíl xxxx jejich xxxxxxxx xx neměl být xxxxx než 6 % xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx přístrojích x&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx analýzu xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx stanovením, xxxxxxxxx xxxxxx mezi xxxxx výsledky xx xxxxx xxx xxxxx xxx 11&xxxx;% aritmetického xxxxxxx xxxxxxxx.

10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

10.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx X., Xxxxxxxxxx X., Xxxxxxxxx X. X., Xxxxxx X., Xxxxxxxx X. „Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx skimmilk powder xx XXXX quantification of xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Xxx. Tecn. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

HPLC xxxxxxxxxxxx XXX-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (PS) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PE) v methanolovém xxxxxxxx z rekonstituovaného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx režim xxx píky PS, XX x&xxxx;xxxxxxxxx (vnitřní xxxxxxxx).

Xxxxxxx XX

XXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX XXXXXXX PRO XXXXXXX XXXXXXXXXX NA XXXXXXX XXXXXXXXX KASEINOMAKROPEPTIDŮ XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX CHROMATOGRAFIÍ (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X&xxxx;XXXXXX POUŽITÍ

Tato xxxxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx mléce xxxxxxx k veřejnému skladování xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX ODKAZ

Mezinárodní norma XXX 707 – Xxxxx x mléčné xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxx hmotnostní procento xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem xxxxx obsahu kaseinomakropeptidů.

4.   PODSTATA XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx odstředěním xxxx xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx xxxxxxxx kaseinomakropeptidů (XXX) v supernatantu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX);

—	Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx získaného u vzorků xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx bez xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx syrovátky.

5.   CHEMIKÁLIE

Používají xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (CCl₃COOH) ve xxxx a doplňte xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx xx xxx být xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx, xX 6,0

Rozpusťte 1,74&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (X₂XXX₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XX₂XX₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx (Na₂SO₄) xxx x&xxxx;700&xxxx;xx xxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx upravte xX na 6,0 xxxxxxxx xxxxxxxx fosforečné xxxx xxxxxxxxx draselného.

Doplňte xxxxx xx 1&xxxx;000 xx x homogenizujte.

Poznámka: Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx osvědčení xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxx roztok před xxxxxxxx přefiltrujte xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μm.

5.3.   Promývací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX) s devíti xxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxx směs přefiltrujte xxxx xxxxxxxxxx filtr x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx promývací xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxx účinek x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx vzorky

5.4.1.   Sušené xxxxxxxxxx xxxxx splňující xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 % xx. xxxxxx syřidlové syrovátky xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (tj. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX A XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx schopná xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 7 cm

6.6.   Filtrační xxxxxx xxxxxxx hustoty x&xxxx;xxxxxxx xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s membránovým xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx pórů 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx pipety xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx A, xxxx XXX/X 835) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx xx xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxx xxx xxxxxxx xxx 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx HPLC, xxxxx tvoří:

6.11.1.

Čerpadlo

6.11.2.

Nástřikové xxxxxxxx – xxxxx nebo xxxxxxxxxxx – x&xxxx;xxxxxx 15 xx 30 μx

6.11.3.

Xxx kolony TSK 2&xxxx;000-XX xx xxxxx (xxxxx 30 cm, xxxxxxx xxxxxx 0,75&xxxx;xx), xxxx xxxxxx s rovnocennou xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx kolona XXX 2&xxxx;000-XXxx, jedna xxxxxx Xxxxxxx Technologies Xxxxxx XX 250) x&xxxx;xxxxx předkolona (3&xxxx;xx ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx X&xxxx;125 nebo xxxxx xxxxxxxxxx s rovnocennou xxxxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1&xxxx;°X

6.11.5.

XX xxxxxxxx s proměnnou xxxxxxx xxxxxx umožňující měřit xxx 205&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,008 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx laboratorní xxxxxxx, xxxxx jejich xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x&xxxx;xxxxxx xxxxx. V tomto xxxxxxx xx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx analytického xxxxxx byly menší xxx 5 °C.

7.   ODBĚR XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx stanoveným v mezinárodní xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx používat xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx předpokladu, xx xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx nemohlo dojít xx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxx složení.

8.   PRACOVNÍ XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku.

Sušené xxxxx xxxxxxxx do xxxxxxx, xxxxx xxxxx je xxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nádobku xxxxx uzavřete. Xxxxxx xxxxx důkladně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx převracením nádobky.

8.2.   Zkušební xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx zkumavky (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx 50&xxxx;xx navažte 2,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx tuku x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx dávce přidejte 20,0&xxxx;xx xxxxx (50&xxxx;°X) xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx xxxx minut xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3). Xxxxxxxx vložte xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou xxxxx xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx magnetickou míchačkou (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (5.1) x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X. Zkumavku xxxxxx xx 60 minut xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) po xxxx 10 xxxxx xxx odstředivé xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx papír (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx 15 xx 30 μl xxxxxx xxxxxxxxxx supernatantu xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX (6.11) x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) za minutu.

Poznámka 1. V závislosti na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx použít x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Nikdy x&xxxx;xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx (5.2).

Xxxx každým xxxxxxxxxx xx více xxx 24 hodin xx xxxxxx propláchnou xxxxx a xxxxx xx promývají roztokem (5.3) xxxxxxx po dobu xxx xxxxx při xxxxxxx 0,2&xxxx;xx xx xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx [X] xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxx xx každý xxx xxxxx xxxx retenčním xxxxx XX takto:

Pík XX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x XX xxx 12,5 minuty
Pík III:	Třetí xxx xxxxxxxxxxxxx odpovídající XXX x XX 15,5 minuty

Retenční xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kolony (kolon).

Integrátor (6.11.6) automaticky xxxxxxxxxx xxxxxx X&xxxx;xxxxxxx píku:

AII:	plocha xxxx II
AIII:	plocha xxxx XXX

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx prozkoumat xxxxxx xxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx zjištění xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobených xxx nesprávnou xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxx původem a povahou xxxxxxxxxxxxx vzorku.

V případě xxxxxxxxxxx xxxxxxx zopakujte.

8.5.   Kalibrace

8.5.1.   U xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) se xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx&xxxx;8.2 až 8.4.2.

Xxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx, protože XXX xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx obsah xx xxx xxxxxxx 30 °C xxxxxxx odhadem x&xxxx;0,2&xxxx;% xx xxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx opakovanými xxxxxxxx xxxxxxx (8.5.1) xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.2), xxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxx píku xxxxxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx R nastříknutím xxxxxxxx xxxxxx filtrátů (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx R:

Pík II:

RII = 100/(AII[0])

kde:

RII	=	odezvové xxxxxxx xxxx II
AII [0]	=	xxxxxx xxxx XX xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

Xxx XXX:

XXXX = X/(XXXX[5] – XXXX[0])

xxx:

XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxx píku III
AIII [0] xxx XXXX [5]	=	xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxxxx vzorků [0] x&xxxx;[5] xxxxxxx v 8.5.3
W	=	množství xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx [5], tj. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx vzorku [X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

XXXX[X] = XXXX × XXXX[X]

XXX[X] = RIV × XXX[X]

xxx:

XXX [E], SIII [X], SIV [E]	=	relativní xxxxxx xxxx II, XXX x&xxxx;XX ve xxxxxx [X]
XXX [X], XXXX [X]	=	xxxxxx píků XX a III xx xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXX, XXXX	=	xxxxxxxx faktory xxxxxxxxx x&xxxx;9.1.1

9.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx relativního xxxxxxxxxx času píku XXX ve xxxxxx [X]:

XXXXXX[X] = (RTIII[E])/(RTIII[5])

kde:

RRTIII [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx III xx xxxxxx [E]
RTIII [E]	=	relativní xxxxxxxx čas xxxx XXX xx vzorku [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXXXX [5]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx XXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx [5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx, xx xxxx relativním retenčním xxxxx xxxx III, xx. XXXXXX [X] x&xxxx;xxxxxxxxx přidané xxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx 10&xxxx;% existuje xxxxxxxx xxxxx

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx &xx; 5 % xx XXXXXX [E] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx ≤&xxxx;5&xxxx;% xx XXXXXX [X] ≥ 1,000.

Přípustná xxxxxxxxxx xxx hodnoty RRTIII xx ± 0,002.

Za xxxxxxxxxx okolností xx xxxxxxx XXXXXX [0] xxx xxxx liší xx 1,034. Podle xxxxx xxxxx xx xxxx hodnota blížit 1,000, xxxxx xxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1,000.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxx ve xxxxxx:

X = XXXX[X] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx procento syřidlové xxxxxxxxx ve xxxxxx [X];
XXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX zkušebního xxxxxx [X] získaná xxxxx 9.1.2;
1,3	=	představuje relativní xxxxxxxxx xxxxxx píku XXX vyjádřenou x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx v nezfalšovaném sušeném xxxxxxxxxxx mléce různého xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx experimentálně
SIII [0]	=	xxxxxxxxxxx relativní xxxxxx xxxx XXX, xxxxx xx xxxxx XXXX&xxxx;×&xxxx;XXXX[0]. Xxxx hodnoty xx xxxxxxx x&xxxx;9.1.1 x&xxxx;8.5.3;
(XXXX [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1,3, xxxxxxxx XXXX [0] xxxx xxxxx 0,9. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx píku XXX xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx;[0] xxxxx 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx metody

9.3.1.   Opakovatelnost

Rozdíl mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx současně xxxx v těsném xxxxx xxxxx pracovník xx xxxxxxx přístroji, by xxxxx překročit 0,2 % xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxxxxx a nezávislými výsledky xxxxxxxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxx xxxxxxxxx 0,4&xxxx;% xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxx přítomna, xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (XXXX[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx XXX, xx. 1,3, k xxxxxxxxx x důvodu kolísání xx složení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x x reprodukovatelnosti xxxxxx (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx plocha XXXX [0] jiná xxx 0,9 (viz xxx 9.2).

9.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx píku XXX XXXX [X] > 2,0 + (SIII[0] – 0,9) a relativní xxxxxx xxxx XX XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, stanovte xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bodu 9.2.

9.4.3.   Je-li xxxxxxxxx plocha xxxx XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x xxxxxxxxx plocha xxxx XX SII [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (X %). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 1 a 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx po xxxxxxx vzorků nezfalšovaného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx celkovým xxxxxxx xxxxxxxx xxxx zanesena xx xxxxx 1 x&xxxx;2.

Xxxx xxxxxx představuje xxxxxxxx xxxxxxx, jejíž xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx čtverců.

Čárkovaná xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx III, a to x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;90&xxxx;% xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx přímek x xxxxxxx 1 a 2 xxxx:

XXXX = 0,376 X % – 10,7	(xxxx 1)
XXXX = 0,0123 SII [X] + 0,93	(xxxx 2)

xxx:

XXXX	xx xxxxxxxxx plocha xxxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxx celkového xxxxxx bílkovin, nebo xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx SII [X],
X&xxxx;%	xx xxxxxxx xxxxx bílkovin xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx,
XXX [X]	xx xxxxxxxxx xxxxxx vzorku xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Xxxx xxxxxxx xxxx rovnocenné xxxxx 1,3 xxxxxxxxx x xxxx 9.2.

Xxxxxx (X1 x X2) mezi xxxxxxxxx xxxxxxxxx plochou XXXX [X] x xxxxxxxxx xxxxxxx SIII xx dán těmito xxxxxx: X1 =&xxxx;XXXX[X]&xxxx;– [(0,376 X% – 10,7) + (XXXX[0] – 0,9)]T2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (SIII[0] – 0,9)].

Xxxx-xx X1 a/nebo X2	xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxx xxxx, xxxxx obsah xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx-xx X1 x X2	xxxxx xxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vypočítá xxxxx vzorce: X = X2 + 0,91

xxx:

0,91 je xxxxxxxxxx xx xxxxxx ose xxxx xxxxx a přerušovanou xxxxxxx.

Xxxxxxx III

STANOVENÍ SUŠINY XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX MLÉCE

1.   PŘEDMĚT: XXXXXXXXX XXXXXXXX SUŠINY XX XXXXXXXXX SYROVÁTKY XX&xxxx;XXXXXXXX XXXXXXXXXXXX MLÉKA

2.   NORMATIVNÍ XXXXX: XXXXXXXXXXX XXXXX XXX 707

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxxxxxxx A vysokoúčinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (xxxxxxx HPLC). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx přídavku xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx 1&xxxx;% xx., xx přítomnost xxxxxx xx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxxxx xxxx xxxx xxx voda xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx XXXX.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240 g kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) xx xxxx a doplňte xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx by xxx být xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx A a B

Eluent X: Xxxxxx 150 xx acetonitrilu (XX₃XX), 20 xx xxxxxxxxxxxx (XX₃XXXXXX₃) a 1,00 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXX, XX₃XXXX) xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na 1&xxxx;000 xx xxxxx.

Xxxxxx X: Xxxxxx 550 xx xxxxxxxxxxxx, 20 xx xxxxxxxxxxxx a 1,00 xx XXX xx xxxxxxx baňky xx 1&xxxx;000 ml x xxxxxxx na 1&xxxx;000 xx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx před použitím xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μm.

5.3.   Uchování kolony

Po xxxxxxxxx se kolona xxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxx) a potom xx propláchne acetonitrilem (xxxxxx po dobu 30 xxxxx). Kolona xx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx odstředěné xxxxx xxxxxxxxx požadavky stanovené xxx xxxxxxx skladování (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko zfalšované xxxxxxxxx 5 % xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené odstředěné xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 50&xxxx;% xx. sušené xxxxxxxxx xxxxxxxxx standardního xxxxxxx (tj. [50]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X POMŮCKY

6.1.   Analytické xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx schopná xxxxxxxxx xxxxxxxxxx síly 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx třepačka

6.4.   Magnetická xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx o velikosti xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx umožňující xxxxxxxx 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx A, xxxx XXX/X 835), xxxx xxxxxxxxx systém xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx za xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxx xxx xxxxxxx xxx 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx vodní xxxxx xxxxxxxxx na 25 ± 0,5 °C

6.11.   Zařízení xx XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx s binárním gradientem

6.11.2.

Nástřikové xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, o objemu 100 μl

6.11.3.

Kolona Agilent Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx 300 XX-X3 (délka 25&xxxx;xx, xxxxxxx xxxxxx 0,46&xxxx;xx), xxxx jiná xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxx s velkými póry xx bázi křemene

6.11.4.

Termostat xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx měření při 210&xxxx;xx (v nutných xxxxxxxxx xx možné xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx xx 220&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxxxx x kolonami xxxxxxxxxxx xx teplotě xxxxxxxxx xx možná xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx více xxx x 1&xxxx;°X, xxxxx xxxxxxx x příliš xxxxxx změnám xxxxxxxxxx xxxx XXXX.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707. Xxxxxxx státy xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx odběru xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx metoda odpovídá xxxxxxx uvedené normy.

7.2.   Vzorek xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku

Sušené xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx objem xx xxx dvakrát xxxxx xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx víčkem. Xxxxxxx xxxxx uzavřete. Sušené xxxxx xxxxxxxx promíchejte xxxxxxxxxx převracením nádobky.

8.2.   Zkušební xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx zkumavky (6.2) nebo vhodné xxxxx se zátkou xx 50&xxxx;xx navažte 2,00 ± 0,001 g zkušebního xxxxxx.

Xxxxxxxx: X&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx zkušební xxxxx xxxxxxxxxx 2,00&xxxx;x.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx zkušební xxxxx přidejte 20,0 ml xxxxx (50&xxxx;°X) vody. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3) xx prášek xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx do xxxxx lázně (6.10), xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4) xxxxxxxx 10,0 ml roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 25 °C (5.1). Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx při xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxx xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXXX s obrácenými xxxxxx xx třeba optimalizovat xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxx 6 ml (xxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx ± 2 xxxxxx xxx XXXΑ. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. 2&xxxx;xx) je optimální xxxxxxxx čas 22 xxxxx.

Xxxxxxx roztoky srovnávacích xxxxxx (5.4) x&xxxx;xxxxxxx 50&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxx obsahu xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx nebo filtrátu (8.3.3) do xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxx fungovat xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx gradientu xxxxxxxxx v tabulce 1.

Tabulka 1

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx optimalizaci xxxxxxxxxxxxxx

Xxx (xxx)	Xxxxxx (xx/xxx)	% X	% X	Xxxxxx
Xxxxxxx	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	xxxxxx
32	1,0	10	90	xxxxxx
37	1,0	10	90	xxxxxx
42	1,0	90	10	xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxxxxx xxxx XXXΑ.

Xxxxxxxxx složení rozpouštědla, xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx normální xxxxxxxx (xxx 8.4.3), xxx vypočítat xxxxx xxxxxx xxxxxx: % X = 10 – 2,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% X =&xxxx;7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx xxx CMPΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
10	:	xxxxxxxxx % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
2,5	:	% X ve xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx % B x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
13,5	:	xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bodu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
26	:	xxxxxxxxxx retenční xxx XXXΑ
6	:	xxxxx směrnic xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
30	:	% X x xxxxxxxxxx xxxx minus % X xx 27 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx gradientu
27	:	doba běhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx 100 μx přesně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) do zařízení xx XXXX x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx elučního roztoku (5.2) za minutu.

Složení xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x&xxxx;8.4.2. Xx normálních xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx X:X =&xxxx;76:24 (5.2). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, což xxxxxxx, xx procento X xx xx 27 xxxxx xxxxxx x 5 %. Xxxxx xx xxxxxx lineární xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxx 90&xxxx;% X. Xxxx xxxxxxx xx udržuje xx xxxx xxxx minut x po xxxxx xxxxxxxx xx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx během xxxx xxxxx xx xxxxxxx počáteční. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx systému xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 15 xxxxx xx dosažení xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxx CMPA xx xxx být 26 ± 2 xxxxxx. Toho lze xxxxxxxxx změnou xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x % X xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx prvního gradientu xxxx xxxxxxx xx xxxx 5 % X.

Xxxxxxxx 2. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx odplynit x&xxxx;xxxxxxxxx je odplyněné. Xx xx nezbytně xxxxx xxx xx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx správně fungoval. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx retenčního xxxx xxxx XXXX xxxx xxx menší xxx 0,1 xxxxxx (x =&xxxx;10).

Xxxxxxxx 3. Xx každých xxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx [5] x xxxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X (9.1.1).

8.4.4.   Výsledky xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X) se xxxxxxxxx xx xxxxx chromatogramu, xx xxxx xx xxx CMPA určen xxxx retenčním xxxxx xxxxxxxxx v délce 26 xxxxx.

Xxxxx X&xxxx;xxxx XXXX xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.11.6). Xxxxxx základní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx-xx pík XXXX dostatečně xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx se xxxxxx xxxxxxxxx základní xxxxx xxxx xxxxx. X xxxxxxx případě xxxxxxxx xxxxxx kolmice xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx měl xxx x blízkosti xxxx CMPA (xxxx xx x čase x = 0 min!). Xxx xxxxxxxxxx standard x vzorky xxxxxxxx xxxxxx typ integrace x x společné xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx kvantitativní xxxxxxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzhled xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx nesprávnou xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx, nebo xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.1 xx 5.4.2) xx přesně použije xxxxxx xxxxxxx v xxxxxx 8.2 až 8.4.4. Použijte xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx XXX se x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Při xxxxxxx 4&xxxx;°X xxxxxxx roztok xxxxx xx xxxx 24 hodin. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx analytických xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx nástřikovém xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx % X v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx známo z xxxxxxxxxxx analýz.

Chromatogram xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5) xx xxx xxx obdobný xxxxxxxxxxxxx znázorněnému xx xxxxxxx 1. Xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx XXXX xxx xxxx píky. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx xxxxx vykazovat xxx v retenčním čase XXXX xxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxx nastříknutím xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx výpočtu x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx R:

Pík XXXX: R = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx [5]

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx

X(X)&xxxx;= X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx procento xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx [X]
X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX (9.1.1)
H(E)	=	výška xxxx XXXX xxxxxx (E)

Pokud xx W(E) xxxxx xxx 1 % a rozdíl xxxx retenčním xxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx [5] menší než 0,2&xxxx;xxxxxx, xxx je xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxxx.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx současně xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, by neměl xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx.

9.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxx od 0 % xx 16 % xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx lineární xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx&xxxx;&xx;&xxxx;0,99.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxx 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Ni—4.6 xxxxxxxx

PŘÍLOHA XX

Xxxxxx xxxxxxx másla x xxxxxxxxx skladování

Parametr	Metoda
Tuk (6)	ISO 17189 xxxx XXX 3727 xxxx&xxxx;3
Xxxx	XXX 3727 xxxx 1
Xxxxxxxxxx sušina (x xxxxxxxx soli)	ISO 3727 xxxx 2
Sůl	ISO 15648

XXXXXXX XXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx	XXX 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 xxxx 1
Xxxx	XXX 5537

XXXXXXX XXXX

Xxxxxx xxxxxxx sýrů v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

1.

Xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx výhradně x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx mléka, xxxx xx směsi xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka, a za xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx prokázanou, xxxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx v analyzovaném xxxxxx xx stejný xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx, který je xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

2.

Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx z kravského xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 mohou xxx xxxxxxxxx xx těchto xxxxxxxx: x) xxxxxx detekční xxxxx xxxx xxx xxxxxxx 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx xxxxxxxx nesmí xxx falešně xxxxxxxxx; x) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xx dlouhé xxxx zrání, x&xxxx;xxxxx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx docházet. Není-li xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx splněn, použijí xx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX XXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX X&xxxx;XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXX X&xxxx;XXXXXX MLÉKA, XXXXXX XXXXX XXXX XXXXXXXX MLÉKA, XXXX XXXXX XXXXXX, KOZÍHO X&xxxx;XXXXXXXX MLÉKA

1.   PŘEDMĚT

Zjišťování xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx v sýrech xxxxxxxxxx z ovčího mléka, xxxxxx xxxxx, buvolího xxxxx xxxxx xx xxxxx ovčího, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx γ-xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx zjišťování xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx, xxx tepelně xxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx z ovčího xxxxx, kozího xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx a buvolího mléka. Xxxx vhodná x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a sýrů xxxxxxx ošetřenými xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx standardů

3.2.   Rozpuštění xxxxxxxxxxx xxxxxxx a proteolýza xxxxxxxxx (EC.3.4.21.7)

3.3.   Izoelektrická xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx přítomnosti xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx bílkovin

3.4.   Vyhodnocení xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx γ3 x γ2 (xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxx porovnání xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x obrazci xxxxxxxxx u xxxxx xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahujících 0&xxxx;% x 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx p.a. Xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx připravované xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx s obsahem xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Xxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx polyakrylamidových xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxxx

Xx xxxx rozpusťte:

4,85 g akrylamidu

0,15 x N, N′-methylen-bis-akrylamidu (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% xx.),

xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxx do xxxxxxxxxx v hnědé xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Místo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, předem xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, xx koncentrace xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 30&xxxx;% xx./xxx. akrylamidu x&xxxx;0,8&xxxx;% hm./obj. XXX, xxx xxxxxxx množství (4,85 g akrylamidu x&xxxx;0,15 x&xxxx;XXX) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 16,2&xxxx;xx. Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 5 μX, xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x 2 g Xxxxxxxxx XX-3 xx xxxx 30 minut a xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxx 0,45μx membránu.

4.1.2.   Roztok xxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx přísad a amfolytů (*) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxx 4.1.1).

9,0 ml xxxxxxxxx roztoku

24 mg β-xxxxxxx

500 μx xxxxxxxx xX 3,5–9,5

250 μx xxxxxxxx xX 5–7

250 μx xxxxxxxx xX 6–8

Gelový xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xx xxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vakuu.

Poznámka: Xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2).

4.1.3.   Roztoky xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, N, X′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx)

4.1.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;40&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX)

800 xx XXX xx xxxxxxxx xx xxxx a doplní xx xx 2 xx.

Xxxxxxxx: Xxxx používejte xxxxxxx xxxxxxxxxx roztok XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 5,77 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85 % xx.) xx vodě x xxxxxx xx 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,00 x xxxxxxxxx sodného xx vodě x xxxxxx xxxxx na 100 xx.

Xxxxxxxx vzorku

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx k izolaci xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25,0 xx ledové xxxxxxxx xxxxxx doplněné xxxxx do 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87 % hm.)

24,03 g močoviny

250 mg xxxxxxxxxxxxxxx

x xxxxxxx xx 50 xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx.

4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx kaseinů

4.7.1.   Tlumivý xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 mol/l (1,58 x/100 ml xxxx) xxxxxxxxxx 0,05 xxx/x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX, 1,46 x/100 xx) xxxxxxxx uhličitanu xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,92 x/100 ml xxxx) xxxxxxxxxxxx 0,05 xxx/x EDTA na xX 8.

4.7.2.   Hovězí xxxxxxx (XX. 3.4.21.7), s aktivitou xxxxxxx 5 X/xx.

4.7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2, 624 g kyseliny ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-xxxxx-x-xxxxxxxxxxxxx) xx 100 ml 40 % xxx. xxxxxxxx.

4.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx standardy

4.8.1.   Certifikované xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx a kozího odstředěného xxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% kravského mléka xxx xxxxxx xx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx působícího xxx Xxxxxx, B-2440, Xxxx, Belgie.

4.8.2.   Příprava laboratorních xxxxxxxxxxxx standardů xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxx 0&xxxx;% a 1&xxxx;% kravského xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx se připraví xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mléka xxx teplotě 37 °C (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 minut). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x jejího xxxxxx xx 6 xx 8 °X xx úplně xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxx přípravu 1&xxxx;% xxxxxxxxx přidejte 5,00 ml xxxxxxxxxxxx kravského mléka xx 495&xxxx;xx odstředěného xxxxxxxx xxxxx v kádince x&xxxx;xxxxxx 1&xxxx;x. Xxxxxxx xX xxxxxxx na 6,4 xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx mléčné (10 %, xx./xxx.). Xxxxxxx xxxxxxx xx 35 °X, xxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx syřidla (xxxxxxxx xxxxxxx 1: 10&xxxx;000, xxx 3 000 U/ml) x&xxxx;xxxxxxxx po xxxx 1 xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx hliníkovou xxxxx a nechte xxxxxx xxxx xxx teplotě 35&xxxx;°X k utvoření sýřeniny. Xx utvoření xxxxxxxx xx xxxxxxx mléko xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Lyofilizované xxxxx xx xxxxx rozemele xx homogenní xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx 0&xxxx;% xxxxxxxx stejný xxxxxx u čistého xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx při xxxxxxx – 20 °C.

Poznámka: Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardů xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx mléka xxxxxxxxxxxxxx fokusací xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx k barvení xxxxxxxx

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx trichloroctové xx xxxx a doplňte xx 1 000 ml.

4.10.   Odbarvovací roztok

Zřeďte 500 xx methanolu x 200 xx xxxxxx kyseliny xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx 2&xxxx;000 ml.

Poznámka: Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx; xxx xxx připravit xxxxxxxxx stejných objemů xxxxxxxxx roztoku 50&xxxx;% (xxx.) methanolu x xxxxxxxxx xxxxxxx 20&xxxx;% (xxx.) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztoky

4.11.1.   Barvicí xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx 1)

X 1&xxxx;000 xx 90 % xxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 45 xxxxx) 3,0 x&xxxx;xxxxxxxxx modři Xxxxxxxxx G-250 (X. X. 42655) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx 2)

X&xxxx;1&xxxx;000&xxxx;xx 20 % xxx. kyseliny xxxxxx xxxxxxxxx 5,0 g síranu měďnatého, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 125&xxxx;xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Xxxxxxx roztok xx xxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx (265 x 125 x 4 mm), xxxxxxx xxxxxxx (x xxxxx 15 xx), xxxxxxxxx stolek.

5.2.   Nosná xxxxx xxxx (265 ×&xxxx;125&xxxx;xx)

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;125&xxxx;xx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;6 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx) (xxx xxxxxxx 1).

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx komora x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. 265 × 125 mm) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx zdroj (≥ 2,5&xxxx;xX) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx kryostat x&xxxx;xxxxxxxx teploty xx xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx nastavitelná na 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx (x xxxxx ≥ 265 mm)

5.8.   Plastové xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx a katodový xxxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx (10 × 5 mm, x&xxxx;xxxxxxx nebo filtračního xxxxxx x&xxxx;xxxxxx adsorpcí xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx misky (xxxx. xxxxx xx xxxxxxxx 280 ×&xxxx;150&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxx 10 mm x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;000 xx 20&xxxx;000 ot/min

5.13.   Magnetická xxxxxxxx

5.14.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

5.16.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xx 25 μx

5.17.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx odstředivka xxxx xxxxxxxxxxxx

5.18.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx řízená xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 35 x&xxxx;40 ±&xxxx;1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxxx

5.19.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx délce λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

6.1.   Příprava xxxxxx

6.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx kyvety xx 100 ml navažte xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, xxxxxxxx 60&xxxx;xx xxxxxxxxxxx vody x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx tyčovým xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 xx 10&xxxx;000 xx/xxx). Xxxxxxx xX xx 4,6 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Dekantujte tuk x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx homogenizujte xxx 20 000 ot/min xx 40 ml xxxxxxxxxxx xxxx s hodnotou xX xxxxxxxxx xx 4,5 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1). Xxxxxxxx 20 ml xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx (viz obrázek 2), x&xxxx;xxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx homogenizuje xx 40 xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxx xxxx) x 20 xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) a xxxxxxxx xx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, dokud xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx (dvakrát xx xxxxxxx). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;50&xxxx;xx xxxxxxx (4.5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx hustý xxxxxxxx xxxxxxxx filtr. Xxxxxx xxxxxxxx dvěma xxxxxxxxxxxx 25&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxx a nechte xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx rozmělněte x&xxxx;xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx bílkovinné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx při teplotě – 20 °C.

6.1.2.   Přeměna β-xxxxxxx na γ-xxxxxxx xxxxxxxxx plasminu

Rozptylte 25 xx xxxxxxxxxxx kaseinů (6.1.1) v 0,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7.1) x xxxx 20 xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx. Xxxx zahřejte xx 40&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx 10 μl xxxxxxxx (4.7.2), promíchejte x&xxxx;xxxxxxxxx 1 xxxxxx xxx xxxxxxx 40&xxxx;°X xx xxxxxxx třepání. Xxx xxxxxxxx enzymu přidejte 20 μl xxxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové (4.7.3). Xxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Pro získání xxxxx symetrie fokusovaných xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x 0,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx rozpouštění xxxxxxxx (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxx (5.1) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx fólii xxxx (5.2) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx vodu odsajte xxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx vložkami (0,25 mm) xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx vodorovně xx nivelační stolek.

K xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx (4.1.2) přidejte 10 μl Xxxxxx (4.1.3.1), xxxxxxxxxxx a přidejte 10 μx xxxxxxx XXX (4.1.3.2); xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nalijte xxxxxxxxxx xx střed xxxxx fólie. Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxx (stranou x&xxxx;xxxxx xxxxxx dolů) xxxxxxxx x&xxxx;xxxxx s krycí xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx mezi xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx vrstva xxxx bez xxxxxx (xxxxxxx 3). Pomocí xxxxx špachtle xxxxxx xxxxx xxxx opatrně xxxxxxxxxxx po celé xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (asi xx 60 minutách) xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx tak, xx skleněné xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx pečlivě xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. „Gelový sendvič“ xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxxxx (xxxxxxx na xxxx týdnů).

Poznámka: Xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx znovu. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx na xxxxx části; xx xx vhodné x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxx o rozměrech 4,5 × 5 cm).

6.3.   Izoelektrická fokusace

Nastavte xxxxxxxx xx 12 °X. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xx střed chladicího xxxxx xxxxxxx několik xxxxx xxxxxxxx (4.2). Xxxxxxx xxxxxxxx „xxxxxx xxxxxxx“ nosnou xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xx vytlačily všechny xxxxxxxxx bubliny. Přebytečný xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx fólii. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx a uložte na xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxx 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx izoelektrické xxxxxxxx

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx

Xxxx	Xxxx (xxx)	Xxxxxx (X)	Xxxxx (xX)	Xxxxxx (X)	Xxxxx/xxxxxx (Xx)
1. Xxxxxxxxx fokusace	30	max. 2 500	max. 15	konstantní 4	xxx 300
2. Xxxxxxxx xxxxxx&xxxx;(7)	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 1&xxxx;000
3. Xxxxxxx xxxxxxxx	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 5	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 7	xxx. 25	xxx 3&xxxx;000

Xxxxxxxx: Xxxxxxxx xx změní xxxxxxxx nebo xxxxx xxxx, hodnoty xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. hodnoty xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xx gel x&xxxx;xxxxxxxxx 265 × 125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx programování napětí x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx elektroforetického xxxxxxxx (2 xxxx 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, xxxxxxxxx bez xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx.

Xxxx	Xxxxxx	Xxxxx	Xxxxxx	Xxxxxxx	Xxxxx/xxxxxx
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx	1&xxxx;000 V	10,0 mA	3,5 X	8 °X	85 Xx
2. Xxxxxxxx xxxxxx	250 X	5,0 xX	2,5 X	8 °X	30 Xx
3. Xxxxxxxx	1&xxxx;200 X	10,0 xX	3,5 X	8 °X	80 Vh
4. Fokusace	1 500 X	5,0 xX	7,0 X	8 °X	570 Xx

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 2 xxxxxx xxx 0 Vh.

Aplikátor xxxxxx xx fázi 2 xxxxxxxxx xxx 30 Xx.

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx

6.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx/xxxxxxxxxxx xxxxx naplněné 200 ml xxxxxxxx (4.9). Gel x xx xxxxxxxx 15 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.

6.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx beze xxxxxx dekantujte a xxxxxxx desku xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 sekund xxxx xx 100 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10) Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx 250&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.3) x xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu 45 xxxxx xxxxxxxxx.

6.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx dvakrát xxxxxxxxxx xx dobu 30 xxxxxx xxxx xx 100&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10). Poté 15 xxxxx protřepávejte x&xxxx;200&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxx odbarvování xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx není xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. Xxxxxxx desku xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou (2 ×&xxxx;2 minuty) x&xxxx;xxxxxx uschnout na xxxxxxx (2 xx 3 xxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (10 xx 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Fixaci, xxxxxxxxx, xxxxxxx a odbarvování xxxxxxxxxx xxx teplotě 20&xxxx;°X. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Pokud xxxxxxxxxxxxxxx citlivější xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxxx Xxxxxxxx Xxx, Protein, Xxxxxxxxx Xxxxxxx, xxx x. 17-1150-01), xxxx xxx kaseinové vzorky xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx obrazců xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardů x stejného xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx mléka x xxxxxx xxxxxxxxxx x ovčího mléka, xxxxxx xxxxx, buvolího xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x buvolího mléka xx provádí xxxxxxxxxxxxxxx γ3- x γ2-xxxxxxx, xxxxxxx izoelektrické xxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xX 6,5 a pH 7,5 (obrázky 4x, x, obrázek 5). Xxxxxxxx xxx xx xxxxx než 0,5&xxxx;%.

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxx vizuální xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx standardů x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx (xxx „γ2 X,X,X“ x „γ3 X,X,X“ xx xxxxxxxxx 4x, x x xxxxxxx 5) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx podmínek xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kravského xxxxx (xxxxx nebo xxxxx xxx 1 % xxxx xx xxxx 1 %) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (xxx „γ3 X“ a „γ2 X“ xx obrázcích 4&xxxx;x, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 0 % a 1 % (xxxxxx, kozích), nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx standardech (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xx xx xxxxx, použijte xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx plochami píků xxxxxxxx γ2- a γ3-kaseinů x&xxxx;xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx (xxx xxxxxxx 5) xxxxxxxxxxxxx (5.19). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x poměrem xxxxx xxxx γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx standardu (xxxxx, kozím) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxx.

Xxxxxxxx: Tato xxxxxx xxxxxxx uspokojivě, xxxxx existuje xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x 0&xxxx;% xxxxxxxxxxx standardu. V opačném xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx pokynů xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxx metodě.

Vzorek xx považován xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx ploch xxxx xxxx stejné xxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxx X., Xxxx X., Xxxxxxxx X., Xxxxxx X., Xxxxxxx P., Berner X, Xxxxxx I., Xx Xxxxxx X., Xxxxx A.: Use xx xxxxxxx xx&xxxx;xxxxxxxx xxx sensitivity xx xxx xxxxxxxxx of xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxxxx xxx/xx xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx of γ2-xxxxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx 45, 708–711 (1990).

Addeo X., Nicolai X.X., Xxxxxxxx X., Xxxx X., Xxxxxx Musso X., Xxxxx X., Xxx Xxxxxxx L.: X xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx bovine xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx 50, 83–85 (1995).

Xxxxxx X., Xxxxxx I, Xxxxxxxxxxxx X.: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx of xxx xxxx&xxxx;xx ewe and xxxx milk and xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx — xxx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xX xxxxxxxx — xxxxxxxxxxx focusing xx γ-xxxxxxx using xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx. xx: Xxxxxxxxxxxxxxx-Xxxxx 89 (B. X. Xxxxxx, xx.) xx 389-393, Bode-Verlag, Xüxxxxx (1989).

Xxxxxx Ι., Xxxxxx X.-X., Kaiser K.-P.: Xxxxxxxx xxx Xxxxxxxx xx Xxxxx xxx Xxxxxxxxxxx xxx. -käse xxxxx isoelektrische Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx Polyacrylamidgelen. X. Xxxxxxx. Xxxxxx.&xxxx;Xxxxxx. 174, 195–199 (1982).

Radola X.X.: Xxxxxxxxx-xxxxx isoelectric xxxxxxxx xx 50-100&xxxx;μx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx glass xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx 1, 43–56 (1980).

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxxxxx výkres xxxxx xxxxx

Xxxxxxx 2

Xxxxxxxxx vrstva xxxxxxxx xxxx vodnou x&xxxx;xxxxxxxxxx fází po xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Xxxxxxxx technika xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx gelů

a = xxxxxxxxx xxxxx (0,25&xxxx;xx); x = xxxxx xxxxx (5.3); c, x = skleněné xxxxx (5.1); d = gelový xxxxxx (4.1.2); x = xxxxx xxxxx xxxx (5.2).

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx fokusace xxxxxxx ze sýrů x&xxxx;xxxxxx a kozího xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mléka

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, X&xxxx;= xxxxxxx, E = xxxx, X&xxxx;= xxxx

Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx horní xxxxxxxx xxxx XXX.

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kaseinů xx sýrů vyrobených xx xxxxx ovčího, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; 1 + = xxxxxx x xxxxxxx 1 % xxxxxxxxx xxxxx a x přídavkem čistého xxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx dráhy. X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxxxx

Xx obrázku je xxxxxxxxxx xxxx separační xxxxxxxxxx xxxx XXX.

Xxxxxxx 5

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XXX) a vzorků xxxx vyrobeného xx xxxxx xxxxxx a kozího xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

x, x = xxxxxxxxxx standardy xxxxxxxxxx 0 x 1&xxxx;% xxxxxxxxx mléka; x-x = xxxxxx sýra xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 x 7&xxxx;% kravského mléka; X&xxxx;= kravské, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= kozí.

Byla xxxxxxx horní xxxxxxxx xxxx IEF při λ = 634 nm.

PŘÍLOHA IX

Hodnocení xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v souladu x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 nařízení (ES) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx členského xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx vzorků x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx

1.

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx s příslušným nařízením xxx xxxxxxxxxx výrobek. Xxxxxxxxxx-xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx v normě XXX 707„Xxxxx x xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx o výsledcích xxxxxx obsahují dostatečné xxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx výsledků x xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx.

3.

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx v právních xxxxxxxxxx Xxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorky.

4.

Pokud xxxxx xx sporu xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx agentury xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xx&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx xxx xx&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx první xxxxxxx. Platební xxxxxxxx xxxxxxx analýzu xx 21 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxx.

5.

Xxxxxxxx opravného xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx.

6.

Xxxxxxxx xxxxxxx xx pěti pracovních xxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx xxx odběru xxxxxx xxxxx správný, xxxxx xxxxxx xx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx odběr vzorků xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxxxxxx splnění xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx šarži

1.   Podstata metody

V xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx týkající xx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx postupy. Xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx náhodně xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxx připravit x&xxxx;xxxxxxx vzorek. Získaný xxxxxxxx xx xxxxxxx xx zákonem xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx příslušná xxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xxx xx xxx, 1) xxx byla xxxxxx xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxx σx a σX, nebo x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx, 2) xxx xxxx vypočítána xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx potom xxxxx xxxxxxxxx měření xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx odchylka opakovatelnosti σx a směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σX&xxxx;xxxxxxxxx a laboratoř xxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx charakteristikami xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx; x počtu x opakovaných xxxxxx.

Xxxxxxxx xx rozšířená nejistota (x =&xxxx;2) x&xxxx; xxxxx:

Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx vzorce xx xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = x ₁ – x ₂, x = y ₁ · y ₂ nebo x = x ₁/x ₂, musí xx x&xxxx;xxxxxxxx případech xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx postupů xxx kombinování směrodatných xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx XX, xxxxxxxx

xxxxx xx má xx xx, že xxxxxxx XX vyhovuje.

Šarže se xxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxx zákonem stanovené xxxxx xxxxxxx XX, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, že xxxxxxx XX xxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s výpočtem xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx nařízení, x&xxxx;xxx xxxxxx stanovena xxxxxxxx pro zajištění xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx vnitrolaboratorní xxxxxxxx. Xxxxxxx σr x σ X xx xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx nejistoty U xxxxxx směrodatná xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx odchylka vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxxx si X .

Xxxxxxxx, jež xx xxxxx dodržovat xx xxxxxx splnění xxxxxxx xxxxxxxxx mezní xxxxxxx, jsou xxxxxxx x&xxxx;xxxx 1. Považuje-li xx však šarže xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx zopakují xxxxxx xxxxxx stanovené x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxx 1.