Xxxxx směrnice Xxxxxx 95/32/XX
xx dne 7. xxxxxxxx 1995
x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx s xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX xx xxx 27. července 1976 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx států xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 94/32/XX [2], a xxxxxxx xx xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx směrnice,
vzhledem k xxxx, xx se xx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxx úřední xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředků x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx předpisy Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xx všechny xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; že xxxxxxx xxxxxx již xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx znění xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx 82/434/EHS [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/EHS [8] x 93/73/XXX [9];
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxx x stanovení xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx salicylové a xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx směrnice jsou x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Výboru xxx xxxxxxxxxxxx směrnice 76/768/EHS xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx státy xxxxx všechny xxxxxxxx xxxxx k zajištění xxxx, xxx se xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- důkaz x stanovení xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx a kyseliny xxxxxxxxxx,
- důkaz x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metodami xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx právní x xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Neprodleně x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx přijatá xxxxxxxxx státy xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxxx nebo xxxx takový xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx vyhlášení. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx členské xxxxx.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx znění vnitrostátních xxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx dnem xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxx směrnice xx xxxxxx členským xxxxxx.
V Xxxxxxx dne 7. července 1995.
Za Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Komise
[1] Úř. věst. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Úř. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. věst. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Úř. věst. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Úř. věst. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. věst. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Úř. věst. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Úř. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
XXXXXXX
X. DŮKAZ X XXXXXXXXX XXXXXXXX BENZOOVÉ, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXXXXX X KYSELINY XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xx použitelná xxx xxxxx a xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x kyseliny xxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx těchto xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x kyseliny xxxxxxxx.
2. Definice
Množství xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx se vyjádří x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
X. DŮKAZ
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx extrakt xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ("derivatizace xx xxxxx"). X xxxxxxxxxx xx výsledcích xx důkaz potvrdí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX) xxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx propionové, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx xxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Aceton
2.3 Diethylether
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxx
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 4 M
2.9 Xxxxxxxx draselný, 4 X vodný xxxxxx
2.10 Xxxxxxx xxxxxxxx, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Kyselina 4hydroxybenzoová
2.14 Xxxxxxxx salicylová
2.15 Kyselina xxxxxxxx
2.16 Kyselina xxxxxxx
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Referenční xxxxxxx
Xxxxxxxx se 0,1 % (m/V) xxxxxxx (100 xx/100 xx) xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx přísad (2.13 xx 2.17) v xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Derivatizační činidlo
0,5 % roztok 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) x xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 xx/10 xx). Xxxxx roztok xx xxx být xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
2.20 Roztok xxxxxxxxxxxx
0,3 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxxxx lithného (2.11) xx vodě (300 xx/100 xx). Xxxxx xxxxxx by měl xxx připravován xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx rozpouštědlo
Toluen (2.5)/xxxxxx (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Tekutý xxxxxxx (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
3.1 Xxxxx lázeň nastavitelná xx xxxxxxx 60 °X
3.2 Vyvíjecí xxxxxx
3.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx 254 a 366 xx
3.4 Xxxxxx desky xxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx vrstvě, Xxxxxxxxx 60, xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 cm, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 mm x xxxxxxxxxxxx zónou 2,5 × 20 xx (Merk 11845 xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx xx 25 μx
3.7 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 105 °X
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 x 200 ml xx xxxxxxxxxxx xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxx xxxxx, průměr 90 xx, Xxxxxxxxxx &xxx; Xxxüxx, Weissband Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Univerzální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pH 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx na 5 xx
3.12 Rotační xxxxxxx xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxx ekvivalentní)
3.13 Xxxxx xxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.8) xx odváží xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8) x 40 xx xxxxxxx (2.2). X silně xxxxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx být xxxxxxx 20 xxxxx 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Pomocí indikátorového xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxxx a xx xxxx xxxxx minuty xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx extrakci xxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxx fáze, směs xx opatrně xxxxxxx xx xxx 60 °X, aby xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx přes filtrační xxxxx (3.9) xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 ml xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 xx, xxxxx se 20 xx xxxx x xxxxxxxx se. xX xxxxx xx upraví xxxxxxxxx xx 10 xxxxxx 4 M xxxxxxxxx draselného (2.9) xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10).
Přidá xx 1 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx xxxxxx nálevky xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) x xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x vodná xxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky na 250 xx. Xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx. Xx použití xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) se xX vodného xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx 2 xxxxxxxxxx 4 X xxxxxxxxx chlorovodíkovou (2.8). Xxxxx se 10 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3), xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx jednu xxxxxx; xxxxxx xx nechají xxxxxxx a etherová xxxxxx xx xxxxxxx xx rotační odparky (3.12). Xxxxx vrstva xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx odpaří téměř xx xxxxx x xxxxxx xx znovu xxxxxxxx v 1 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3). Xxxxxx xx převede xx vzorkovací lahvičky (3.11).
4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx (3.4) se do xxxx, xxxxxxx počet xxxxxxxx xxxxx referenčních xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, které mají xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx (3.5) ve xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx 3 μx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.20) x xxxxxx xx x xxxxxx studeného xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx deska xx xxxxxxx na xxxxxx xxxxx (3.13) xxxxxxxx xx 40 °X, xxx xx skvrny xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx startovní linii xxxxx xxxxxx xxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku (2.18) x xxxxxxx vzorku (4.1) xxxxxx xx xxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxx, xxx xxxx naneseny xxxxxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx přibližně 15 μx derivatizačního xxxxxxx (2.19) (roztok 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (3.7) 45 minut xxx 80 °C. Xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx (3.2), která xxxx (xxx vyložení xxxxxxxxxx xxxxxxx) 15 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 80 xxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx studeného xxxxxxx x xxxxxxx skvrny xx xxxxxxxxx pod XX světlem (3.3). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx tekutého xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Důkaz
Pro xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx Xx.
Xxxxxxx Xx x xxxxxxx xxxxxx xxx XX xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxx referenčních xxxxxx.
Xxxxx xx předběžné závěry x přítomnosti x xxxxxx konzervačních xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx popsaná x xxxxxx B, xxxx xxxxxxx-xx se, xx xx přítomna xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx X. Xxxxxxx retenční xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx XXX x HPLC nebo XX se xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX BENZOOVÉ, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX X KYSELINY XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxxx metody
Vzorek xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ethanolu x xxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx musí xxx xxxxxxx x.x. a xxxx být xxxxxx xxx XXXX. Musí xxx použita destilovaná xxxx nebo voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx
2.3 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Kyselina xxxxxxx
2.7 Xxxxx sodný, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Kyselina xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 X
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X xxxxx roztok
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Směs xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxx (2.2) xx smíchá x xxxxxx xxxxx xxxx (2:1)
2.14 Xxxxxx xxxxxxxxx standardu
Připraví xx xxxxxx obsahující 1 x kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxx (2.12) v 500 xx směsi ethanol/voda (2.13).
2.15 Mobilní fáze xxx XXXX
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: do 1 xxxxx vody xx xxxxx 6,35 g xxxxxx xxxxxxx (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx octové (2.8) x xxxxxx xx.
2.15.2 Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxx smícháním devíti xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (2.15.1) a xxxxxxx xxxx acetonitrilu (2.9).
2.16 Xxxxxxx roztok konzervačních xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx přesně xxxxxx xxx 0,05 g xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx (2.3), 0,2 g kyseliny xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x xxxxxxxx benzoové (2.5) x 0,05 x kyseliny xxxxxxx (2.6) x xxxxx xx doplní xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Roztok xx xxxxxxxx xxxxx týden.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx odměří 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 xx xxxxxxxxx roztoku (2.16). Xx xxxxx xxxxx xx xxxxx 10,00 xx roztoku vnitřního xxxxxxxxx (2.14) x 0,5 xx 2 X kyseliny xxxxxx (2.10). Objem xx xxxxxx xxxxx ethanol/voda (2.13). Xxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx x xxxx:
3.1 Xxxxx xxxxx, nastavená na 60 °X
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx smyčkou.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 12,5 až 25 cm, xxxxxxx xxxxxx 4,6 mm, xxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18 xxxx xxxxxxxxxxxx náplní.
3.4 Xxxxxxxxx papír, průměr: 90 mm, Schleicher xxx Schüll, Weissband Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx
3.7 Xxxxx kamínky, karborundum, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx vzorku
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu
Do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 xx (3.5) xx xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Erlenmeyerovy xxxxx se xxxxxxxxxx 10 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 40 xx směsi ethanol/voda (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx se xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx extrakce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx minut na xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °C.
Erlenmeyerova xxxxx xx xxxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxx a xxxxxxx xx na xxxxxx xxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx se xxxxxxxx xxx 5 °X x stanovení xxxxxx XXXX se xxxxxxx xx 24 hodin.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 50 ml (3.5) xx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx (x gramů). Xxxxxxx se přidá 1,00 ml 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 30,0 xx xxxxx ethanol/voda (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx kamínků (3.7) x 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx x silně xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx protřepává, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx pět minut xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx vody x xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxx papír (3.4). Xxx 2 ml xxxxxxxx se xxxxxxxx xx vzorkovací lahvičky (3.6). Extrakt xx xxxxxxxx xxx 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx XXXX xx xxxxxxx do 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx fáze: xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxx (2.15).
Průtok xxxxxxx xxxx kolonou xx xxxxxxx xx 2,0 ± 0,5 ml/min. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx nastaví xx 240 xx.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx po 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.17). Xxx každý xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx píku xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x výšce píku xxxxxxxxx standardu xxxxxxxxx x chromatogramů. Xxx xxxxxx konzervační xxxxxxx xx sestrojí graf xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, xx xxx xxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx extraktu vzorku (4.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Nastříkne xx 10 μx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx. Není-li v xxxxxxxxxxxxx extraktu xxxxxx (4.1.1) xxxxx pík x přibližně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jako xxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx standard), xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxxxxx chromatografu 10 μx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.1.2) a xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x chromatogramu xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx 2methoxybenzoová, měl xx být xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxx-xx jedna x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx použít xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.)
Xx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx uvedena xx xxxxxxx 1)
Obrázek 1: Xxxxxxxx píků
Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx kolona xxxx xx mělo xxx složení xxxxxxx xxxx upraveno xxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx pohybovat xx 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx doporučená xxxxxxxx posuvu papíru xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Xxxxxx asymetrie xxxx
- Základna musí xxx xxxxxxxx.
5. Výpočet
Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx výšek xxxx xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx 2methoxybenzoové (xxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxx procentech (xx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (m/m) = (100x 20 x x) / (106 x a) = x / (500 x a)
kde
a = hmotnost xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (x),
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx z kalibračního xxxxx.
6. Opakovatelnost [1]
Při xxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx kyseliny benzoové 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,050 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx salicylové 0,50 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,045 %.
Při xxxxxx kyseliny sorbové 0,60 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Výsledky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx kyseliny xxxxxx přidané xx xxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxxx je rozhodující x množství xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xxx x xxxxxxxxxxx rozmezí.
7.2 Je-li xx xxxxxxx, xxx xxxxxx vhodnou xxxxxxxxx xxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Rozsah x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx stanovená touto xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxx hmotnosti (% x/x) výrobku.
3. Xxxxxxxx metody
Po xxxxxxxx xxxxxxxx propionové x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx chromatografií xx použití xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx jako vnitřního xxxxxxxxx.
4. Reakční xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x; xxxx být použita xxxxxxxxxxx voda nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Ethanol, 96 % (X/X)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Kyselina 2methylpropionová
4.4 Xxxxxxxx trihydrogenfosforečná, 10 % (m/V)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx se xxxxxx xxxxxx 1 x (x xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx standardu
Do odměrné xxxxx na 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 x (x xxxxx) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
5.1 Běžné xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
5.2 Xxxxxxx chromatograf x plamenovým ionizačním xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx (20 × 150 xx) se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Xxxxx lázeň xxxxxxxxx xx 60 °X
5.5 Skleněná xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 10 xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxx 0,45 μx)
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx vzorku
6.1.1 Příprava xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx skleněné xxxxxxxx (5.3) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Přidá se 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx se zkumavka xx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx na 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Zkumavka xx xxxxxx zchladí xxx xxxxxxx vodou. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxxx xxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s vnitřním xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) se x xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx místa xxxxxx 1 ± 0,1 x vzorku. Xxxxx xx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4), 0,50 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)a 9 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx to xxxxxxxx, xxxxxx xx zkumavka xx xxx minut xx vodní lázně xxxxxxx na 60 °X (5.4), xxx xx zcela xxxxxxxxxx xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx rychle zchladí xxx xxxxxxx vodou. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx den.
6.2 Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx chromatografii
Doporučují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Xxxxx: 10 % SP™ 1000 (xxxx ekvivalentní) + 1 % X3XX4 xx Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °X
Xxxxxx: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °C
Nosný xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 25 xx/xxx
6.3 Xxxxxxxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx na 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 a 4,00 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx (4.5). Xx xxxxx odměrné xxxxx xx xxxxxxxxxx 1,00 xx roztoku vnitřního xxxxxxxxx (4.6); doplní xx na objem xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x mg/ml (xx xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx x = 1,000) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x/4, x/2, x, 2x, 4x xx/xx (xx znamená 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 xx/xx, xx-xx x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxx roztoků x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2methylpropionové xx xxx x x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx píků na xxx x.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx roztoku a xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu vzorku 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x chromatogramem xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Má-li xxx přibližně xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx vnitřní xxxxxxxx. Není-li pozorován xxxxx rušivý vliv, xxxxxxxxx se 1 μx xxxxxxxx vzorku 6.1.2 x xxxxx xx plochy xxxx xxxxxxxx propionové x xxxx vnitřního standardu.
Nastříknou xx 3 dávky x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx poměrů ploch xxxx.
7. Výpočty
7.1 Z xxxxxxxxxx křivky xxxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.1 xx odečte xxxxx xxxxxxxxx (X), který xxxxxxxx poměru ploch xxxx vypočtenému x xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx kyseliny xxxxxxxxxx xx xxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxx procentech xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x x) =X(x / x)
xxx
X = xxxxx xxxxxxxxx x xxxx 7.1,
x = hmotnost vnitřního xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 4.6,
a = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx podle xxxx 6.1.2,
Výsledky xx xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
8. Opakovatelnost [2]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx neměl xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,12 %.
II. XXXXX X STANOVENÍ XXXXXXXXXXXX, HYDROCHINONMONOMETHYLETHERU, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX V XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
X. XXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X metodě je xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx hydrochinonu, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX).
3. Reakční xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
3.2 Xxxxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (X/X)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (x420 = 0,91 g/ml)
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
3.7 Hydrochinon
3.8 Hydrochinonmonomethylether
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (monobenzon)
3.11 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx jeden den.
3.11.1 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonu (3.7). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx dělené zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx se 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx xx objem 10 ml (3.1).
3.11.3 Xx dělené zkumavky xx 10 ml xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se amoniak (3.5), dokud není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx na objem 10 xx (3.1).
3.11.4 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.10). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Kyselina xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Chlorid xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx činidla
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (x/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxxxx amoniak (3.5), xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx nerozpustí.
Upozornění:
Při xxxxxx xxxxx xx v xxxxxxx tvoří výbušné xxxxxxxxxx x xxx xx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (x/X) roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx xx 1 % (x/X) xxxxx xxxxxx kyanoželezitanu draselného (3.14) x 2 % (x/X) vodný xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15). Xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx díly xxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx, x dále:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx xxx chromatografii xx xxxxx xxxxxx
4.2 Xxxxxx desky xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx XXX/XX254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 cm (Xxxxxxx, Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx 0,25 mm.
4.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.4 Odstředivka
4.5 XX xxxxx, 254 nm
5. Xxxxxx
5.1 Příprava xxxxxx
Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx se xxxxxx 3 g xxxxxx. Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 ml xxxxxxxx (3.1). xX xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx xx doplní xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Xxxxxxxx xx uzavře xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx 10 xxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx. Zfiltruje xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxx 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.4).
5.2.2 Xx desku xx xxxxxx xx 2 μl referenčních xxxxxxx (3.11) x 2 μx roztoku xxxxxx (5.1). Xxxxxx xx ve xxx xxx teplotě xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzdálenosti 15 xx xx startu.
5.2.3 Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx vyschnout xxx pokojové xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxx xx xxxxxxxx xxx UV xxxxxx xxx 254 xx x xxxxxx xxxxx se xxxxxx.
5.3.2 Xxxxx xx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxx stříbrným (3.16.1), xxxx
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); xxxxxxx xx xx xxx 120 °X, xxxx
- roztokem xxxxxxxxxxxxxxx draselného a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Důkaz
Spočítá se xxxxxxx Xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx získané xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxx hodnoty Xx, barvu xxxxx x UV xxxxxx x xxxxx skvrn xx xxxxxxxxxxxx detekčním xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (X) x porovnají xx retenční časy xxxxxxx xxx xxx (xxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx časy píků xxxxxxxxxxxx roztoků.
Výsledky x XXX x XXXX xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx přítomnost xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx Rf:
hydrochinon: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,55
hydrochinonmonobenzylether: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Rozsah x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx je specifikován xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx prostředcích xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx je extrahován xxxxx voda/methanol xx xxxxxxx zahřátí, xxxxxx xx rozpustí tukový xxxxxxxx. Xxxxxxxxx analytů xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x XX xxxxxxx.
3. Xxxxxxx xxxxxxx
3.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
3.2 Methanol
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Hydrochinonmonomethylether
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (monobenzon)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx pro XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Smíchá xx xxxxx xxx xxxx x xxxxx díl xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx 45:55 (X/X). Xxxxxx xx 45 dílů xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 55 xxxx xxxx.
3.10 Xxxxxxxxxx roztok
Do odměrné xxxxx na 50 xx xx xxxxxx 0,06 g xxxxxxxxxxxx (3.3), 0,08 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Rozpustí xx x xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxxx (3.2). Referenční xxxxxx xx připraví xxxxxxxx 10 ml xxxxxx roztoku xx 50 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Tyto xxxxxxx xx připravují xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x dále:
4.1 Vodní xxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vlnovou xxxxxx x 10μx nastřikovací xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx kolona:
Chromatografická xxxxxx z korozivzdorné xxxxx, xxxxx 250 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 mm, xxxxxx Xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxx XXX, uzavřená xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), velikost částic 6 μm, nebo xxxxxxxxxxxx náplní. Nepoužívá xx xxxxxxxx kolona, x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Weissband Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx x přesností xx tři desetinná xxxxx naváží 1 ± 0,1 x (x xxxxx) vzorku. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx 25 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx xxxxxx x silně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx alespoň xxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxx na xxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °C, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xx xx objem xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (4.4). Xxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 hodin xx xxxxxxxx extraktu.
5.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx mobilní xxxx (3.9) xx xxxxxx xx 1,0 xx/xxx x vlnová xxxxx xxxxxxxxx se nastaví xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xx 10 μx roztoku xxxxxx xxxxxxxxx podle xxxx 5.1 x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx píků. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.2.3. Xxxxxxxxx xx chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx výpočet xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx odezvy (RF) xxxxxxxxx podle xxxx 5.2.3.
5.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 10 μx referenčního xxxxxxx (3.10) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx odezvy XXx (i je xxxxxx xxxxxxx XX):
XXx = xx /ci
kde
pi = plocha xxxx xxx xxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethylether, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx hydrochinonmonobenzylether, x
xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 xx).
Xx třeba xxxxxx, zda xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1.).
Obrázek 1: Xxxxxxxx píků
Není-li požadované xxxxxxxx xxxxxxxx, měla xx být buď xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxx složení mobilní xxxx upraveno xxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Faktor xxxxxxxxx Xx xxxxx získaných xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx 2.) Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx papíru xxxxxxx 2 cm/min.
Obrázek 2:Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx
- Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx.
6. Xxxxxxx
Xxx výpočet xxxxxxxxxxx xxxxxxx (koncentrací xxxxxxx) xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ve vzorku xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xi) xx xxxxxxx pomocí xxxxxx
xx % (x/x) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = hmotnost xxxxxx v xxxxxxx,
xx = plocha xxxx xxxxxxx x xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx obsahu hydrochinonu 2,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (různé laboratoře, xxxxx experimentátoři, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) překročit 0,37 %.
8.2 Při obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx rozdílu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx laboratoře, různí xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx přístroje xxxx xxxxx doba) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx podmínek (různé xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx doba) překročit 0,19 %.
8.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxx rozdílu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx různých xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, různé xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) překročit 0,11 %.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx zjištěn obsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyšší xxx 2 % x xx xxxxxxxxx xxxxxx odhad xxxxxx, xxx xx být xxxxxxx vzorku (5.1) xxxxxx na podobnou xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 % xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xx xxxx být opakováno.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx vysokých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ležet hodnota xxxxxxxxxx mimo lineární xxxxxx detektoru.)
9.2 Xxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx hydrochinonu x xxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zajistí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx X18 x xxxxxxxx mobilní xxxx.
X této xxxxxx xxxx snadno dochází x xxxxxxxx xxxxx xxxx řady xxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx xxxxxxxxx mělo xxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2 x 3:
Xxxxxx: Zorbax XXX, 4,6 xx × 25 xx xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 ml/min
mobilní xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 5/95 (X/X)
xxx hydrochinonmonomethylether: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (V/V)
pro hydrochinonmonobenzylether: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Xxxxxxxxxx X5XXX xxxx ekvivalentní:
mobilní xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx [6].
[1] ISO 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] XXX 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, M., Xxxxx X.-X., Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx de x’xxxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dans xxx produits xxxxxxxxxxx xxxx blanchir xx xxxx. Xxx. J. Xxxxxx. Xxx., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, J., Xxx X., Determination xx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx creams, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.