Šestá směrnice Komise 95/32/XX
xx dne 7. xxxxxxxx 1995
o metodách xxxxxxx nezbytných xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX xx xxx 27. xxxxxxxx 1976 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx členských xxxxx xxxxxxxxxx xx kosmetických xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx směrnicí Xxxxxx 94/32/XX [2], x xxxxxxx xx xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, že xx xx směrnici 76/768/EHS xxxxxxx xxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx zajistit dodržení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx předpisy Xxxxxxxxxxxx, které se xxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; že xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx 82/434/EHS [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] a xx směrnicích 83/514/XXX [7], 85/490/EHS [8] x 93/73/EHS [9];
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx a stanovení xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx salicylové x xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích xxxx xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx jsou x souladu se xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx směrnice 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxx se xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové, kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx hydrochinonu, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a hydrochinonmonobenzyletheru xxxxxxxxx metodami popsanými x příloze.
Článek 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x touto xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx přijatá xxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx odkaz xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx takový odkaz xxx xxxxxx xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxx státy xxxxx Xxxxxx xxxxx vnitrostátních xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x platnost xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v Úředním xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 7. xxxxxxxx 1995.
Za Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Úř. věst. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Xx. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Xx. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Xx. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Úř. věst. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. věst. X 231, 14.9.1993, x. 34.
PŘÍLOHA
I. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXXXXX X KYSELINY XXXXXXXXXX X KOSMETICKÝCH XXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx je xxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx důkazu těchto xxxxxxxxxxxxx přísad, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kyseliny 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx a kyseliny xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx salicylové, xxxxxxxx xxxxxxx a kyseliny xxxxxxxxxx stanovená xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx procentech xxxxxxx xxxxxxx.
X. XXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx kyselé/zásadité xxxxxxxx konzervačních přísad xx xxxxxxx analyzuje xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (TLC) x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ("xxxxxxxxxxxx xx xxxxx"). V xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo, v xxxxxxx xxxxxxxx propionové, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Obecně
Všechna xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Aceton
2.3 Diethylether
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Toluen
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, 4 M
2.9 Xxxxxxxx draselný, 4 X vodný roztok
2.10 Xxxxxxx xxxxxxxx, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.14 Xxxxxxxx salicylová
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (m/V) roztoky (100 mg/100 ml) xxxxx x pěti xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.13 xx 2.17) x xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Derivatizační xxxxxxx
0,5 % roztok 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) v xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 xx/10 xx). Tento roztok xx měl být xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxx.
2.20 Roztok xxxxxxxxxxxx
0,3 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.11) xx xxxx (300 xx/100 xx). Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/xxxxxx (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Xxxxxx parafin (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní vybavení
3.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X
3.2 Vyvíjecí komora
3.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx 254 x 366 xx
3.4 Hotové desky xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, Silikagel 60, xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 cm, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx x xxxxxxxxxxxx zónou 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μl
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx na 25 μx
3.7 Sušárna xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 105 °X
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 x 200 ml xx zabroušenou xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx &xxx; Schüll, Xxxxxxxxx Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pH 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 ml
3.12 Rotační xxxxxxx xxxxxxx (Rotavapor xxxx ekvivalentní)
3.13 Xxxxx xxxxx
4. Postup
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 ml xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Přidají xx xxxxx xxxxx 4 X xxxxxxxx chlorovodíkové (2.8) a 40 xx acetonu (2.2). X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx být xxxxxxx 20 kapek 4 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xX přibližně 2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x po xxxx jedné minuty xx xxxxx protřepává.
Jeli xxxxxxxx xxxxxxxx extrakci xxxxxxxxxxxxx přísad xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx opatrně xxxxxxx xx xxx 60 °X, xxx xx xxxxxx xxxx rozpustila.
Roztok xx zchladí xx xxxxxxxxx teplotu a xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 ml xxxxxxxx se xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 200 ml, xxxxx se 20 xx xxxx x xxxxxxxx xx. xX xxxxx xx upraví xxxxxxxxx xx 10 xxxxxx 4 X xxxxxxxxx draselného (2.9) xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10).
Xxxxx se 1 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx se protřepe. Xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx papír (3.9) xx dělicí xxxxxxx xx 250 ml xxxxxxxxxx 75 ml xxxxxxxxxxxxx (2.3) a xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx nechají xxxxxxx x vodná xxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 250 xx. Etherová xxxxxx xx zlikviduje. Xx použití xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xX xxxxxxx roztoku xxxxxx xx xxxxxxxxx 2 okyselením 4 X xxxxxxxxx chlorovodíkovou (2.8). Xxxxx se 10 ml xxxxxxxxxxxxx (2.3), xxxxx se xxxxxxxxx x silně xxxxxxxxxx xxxxx minutu; xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x etherová xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx odparky (3.12). Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx sucha x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x 1 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3). Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.11).
4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě
Na startovní xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx pro chromatografii xx xxxxx xxxxxx (3.4) xx do xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx (3.5) ve xxxxxxxx odstupech xxxx xx 3 μl xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.20) x xxxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx deska se xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (3.13) xxxxxxxx xx 40 °X, xxx xx xxxxxx xxxxxxx co nejmenší. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx xxxxxxxxx linii xxxxx xxxxxx xxxx 10 μx každého xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x xxxxxxx xxxxxx (4.1) přesně xx xxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx lithný.
Nakonec xx xxxx přesně xx xxxx, xxx xxxx xxxxxxxx referenční xxxxxxx/xxxxxxx vzorku x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx přibližně 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx činidla (2.19) (xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (3.7) 45 minut xxx 80 °C. Xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx (3.2), která byla (xxx xxxxxxxx filtračním xxxxxxx) 15 minut xxxxxx vyvíjecím xxxxxxxxxxxxx 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 cm (xxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx 80 xxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxx XX xxxxxxx (3.3). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx chromatografická xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Důkaz
Pro xxxxxx skvrnu se xxxxxxx xxxxxxx Rf.
Hodnoty Xx x xxxxxxx xxxxxx pod UV xxxxxxx xx porovnají x xxxxxxxxx x xxxxxxxx referenčních vzorků.
Učiní xx xxxxxxxxx xxxxxx x přítomnosti a xxxxxx konzervačních xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx X, xxxx xxxxxxx-xx xx, xx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, provede xx plynová xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x oddílu X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx XXX x XXXX xxxx XX xx xxxxxxxxxx x při konečném xxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX X KYSELINY XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xx okyselení extrahuje xxxxx ethanolu x xxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Všechna reakční xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. a xxxx xxx vhodná xxx XXXX. Musí xxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx
2.3 Kyselina 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxx salicylová
2.5 Xxxxxxxx benzoová
2.6 Kyselina xxxxxxx
2.7 Xxxxx xxxxx, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Xxxxxxxx octová, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 M
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X xxxxx roztok
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Xxxx xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxx (2.2) se xxxxxx x xxxxxx dílem xxxx (2:1)
2.14 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx 1 x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (2.12) x 500 xx xxxxx ethanol/voda (2.13).
2.15 Mobilní xxxx xxx XXXX
2.15.1 Acetátový xxxx: xx 1 xxxxx vody xx xxxxx 6,35 x xxxxxx xxxxxxx (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x xxxxxx se.
2.15.2 Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (2.15.1) x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx xxx 0,05 x xxxxxxxx 4hydroxybenzoové (2.3), 0,2 x kyseliny xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxx (2.5) x 0,05 x kyseliny xxxxxxx (2.6) a objem xx xxxxxx směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx uchovává x xxxxxxxx. Roztok je xxxxxxxx jeden xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 ml xx xxxxxx 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (2.16). Xx xxxxx xxxxx xx xxxxx 10,00 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (2.14) a 0,5 ml 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10). Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Tyto roztoky xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x dále:
3.1 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx 60 °X
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx s XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx kolona
Korozivzdorná ocel, xxxxx 12,5 až 25 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Nucleosilem 5X18 xxxx ekvivalentní xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx papír, průměr: 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Weissband Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 xx
3.7 Xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2–4 mm, xxxx ekvivalentní
4. Postup
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
4.1.1 Příprava xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx (3.5) se xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx 10 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) a 40 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Přidá xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx xx xxxxxx x xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx do xxxxxxxxxx xxxx se Erlenmeyerova xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx vody x xxxxxxx xx na xxxxxx xxxxx při 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 ml extraktu xx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx lahvičky (3.6). Xxxxxxx xx uchovává xxx 5 °C x stanovení pomocí XXXX se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 50 xx (3.5) xx x xxxxxxxxx xx xxx desetinná xxxxx naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx (x gramů). Xxxxxxx se přidá 1,00 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) a 30,0 xx směsi xxxxxxx/xxxx (2.13). Přidá se xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (3.7) x 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu(2.14). Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx jednu xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx minut xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxx xx hodinu xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx zfiltruje přes xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx převedou xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx se xxxxxxxx při 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx HPLC xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Vysokoúčinná kapalinová xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxx (2.15).
Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx 2,0 ± 0,5 xx/xxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 240 nm.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx nastříkne xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních xxxxxx (2.17). Xxx každý xxxxxx xx xx xxxxxxxxx chromatogramů xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x chromatogramů. Xxx xxxxxx konzervační xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx poměru výšek xxxx xx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku.
Přesvědčete xx, že xxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx získána xxxxxxxx odezva.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx chromatografu (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx vzorku (4.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxxxxxxx roztoku konzervační xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxxx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxx xxx x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxxx časem xxxx xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vnitřním xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x chromatogramu xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxx 2methoxybenzoová, měl xx být xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxx-xx jedna z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad x chromatogramu xxxxxxxx, xxx tuto konzervační xxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx.)
Xx třeba xxxxxx, xxx chromatogramy xxxxxxx xxx standardní xxxxxx x xxxxxx xxxxxx splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- separace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx separace píků xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1)
Obrázek 1: Xxxxxxxx píků
Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx být buď xxxxxxx účinnější xxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx tak, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Faktor asymetrie Xx xxxxx získaných xxxx xx xx xxx pohybovat xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx
- Xxxxxxxx xxxx xxx stabilní.
5. Výpočet
Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxx píku xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx) a dále xxxxxxxxxx xxxx. Obsah xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (m/m) = (100x 20 x b) / (106 x&xxxx; x) = x / (500 x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (x),
x = koncentrace xxxxxxxxxxx xxxxxxx x extraktu xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6. Xxxxxxxxxxxxxx [1]
Při xxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
Při xxxxxx kyseliny benzoové 0,50 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,050 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,045 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx sorbové 0,60 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ukazují, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xx-xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
X. XXXXXXXXX KYSELINY XXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Definice
Koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (% m/m) xxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx plynovou xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Reakční xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx p.a; xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2methylpropionová
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (x/X)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 x (x gramů) kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx standardu
Do xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 g (x gramů) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx x doplní xx xx objem xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
5.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx zkumavka (20 × 150 xx) se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx 60 °X
5.5 Xxxxxxxx injekční xxxxxxxxx xx 10 xx x filtrační xxxxxxxxx (průměr xxxx 0,45 μx)
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx vnitřního xxxxxxxxx
Xx skleněné zkumavky (5.3) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Xxxxx xx 0,5 ml kyseliny xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx rychle xxxxxxx xxx xxxxxxx vodou. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx den.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx skleněné xxxxxxxx (5.3) se x xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x vzorku. Xxxxx xx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4), 0,50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)x 9 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x silně protřepe. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx xxxxx xx vodní xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), aby xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.2 Podmínky xxx xxxxxxxx chromatografii
Doporučují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx ocel
Délka: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Xxxxx: 10 % SP™ 1000 (nebo ekvivalentní) + 1 % X3XX4 xx Chromosorbu XXX 100–120 mesh
Teplota
Nástřik: 200 °X
Xxxxxx: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °C
Nosný xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 25 xx/xxx
6.3 Chromatografie
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx na 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 a 4,00 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.5). Do xxxxx xxxxxxx baňky xx xxxxxxxxxx 1,00 xx roztoku vnitřního xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kyselinu 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xx/xx (to xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx x = 1,000) x kyselinu xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx x/4, x/2, x, 2x, 4p mg/ml (xx znamená 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 mg/ml, xx-xx x = 1,000).
Nastříkne xx 1 μx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxx x x xxxxxx odpovídajících xxxxx xxxx na xxx x.
Xxxxxxxxxx se 3 xxxxx x xxxxxxx roztoku x xxxxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxx píku.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxxxx xxxxxx 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x chromatogramem xxxxxxx xx standardních xxxxxxx (6.3.1). Xx-xx xxx xxxxxxxxx stejný xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx pozorován xxxxx rušivý xxxx, xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu vzorku 6.1.2 x xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx roztoku x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx ploch xxxx.
7. Xxxxxxx
7.1 X xxxxxxxxxx xxxxxx sestrojené xxxxx xxxx 6.3.1 xx odečte poměr xxxxxxxxx (X), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx v xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx kyseliny xxxxxxxxxx xx xxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x x) =X(x / x)
xxx
X = xxxxx xxxxxxxxx x xxxx 7.1,
x = hmotnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 4.6,
a = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx místo.
8. Xxxxxxxxxxxxxx [2]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx neměl xxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,12 %.
XX. XXXXX X STANOVENÍ XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, HYDROCHINONMONOETHYLETHERU X HYDROCHINONMONOBENZYLETHERU V XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
A. DŮKAZ
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X metodě xx xxxxxxx detekce x xxxxx hydrochinonu, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx zesvětlení xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx se provede xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX).
3. Reakční xxxxxxx
Xxxxxxx reakční činidla xxxx být xxxxxxx x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (V/V)
3.2 Chloroform
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Vyvíjecí xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (X/X)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (x420 = 0,91 x/xx)
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
3.7 Xxxxxxxxxxx
3.8 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx referenční xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx x jsou xxxxxxxx xxxxx xxx.
3.11.1 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) a 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx se amoniak (3.5), dokud není xxxxxxxx xX 10, x doplní se xxxxxxxxx xx objem 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 ml (3.1).
3.11.3 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x doplní se xxxxxxxxx xx objem 10 xx (3.1).
3.11.4 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.10). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Chlorid xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx činidla
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (x/X) xxxxxxxxx stříbrného (3.12) xx xxxxxxx xxxxxxx (3.5), dokud se xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx:
Xxx xxxxxx xxxxx se x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x ethanolu (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx se 1 % (x/X) xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx draselného (3.14) a 2 % (x/X) xxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxxxxx (3.15). Xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx díly xxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx xxx chromatografii xx xxxxx vrstvě
4.2 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx: silikagel XXX/XX254 (254 xx dolním xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx). Tloušťka xxxxxx 0,25 xx.
4.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.4 Odstředivka
4.5 XX xxxxx, 254 nm
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 3 g xxxxxx. Xxxxx se 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). xX roztoku xx upraví amoniakem (3.5) xx 10. Xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Xxxxxxxx xx uzavře zátkou x xxxxxxxxxxxx xx 10 minut x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Zfiltruje xx přes xxxxxxxxx xxxxx xxxx se xxxxxxxx xxx 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě (TLC)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx komora xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.4).
5.2.2 Xx desku xx xxxxxx xx 2 μl referenčních xxxxxxx (3.11) a 2 μx xxxxxxx xxxxxx (5.1). Xxxxxx xx ve xxx xxx xxxxxxx okolí, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx od xxxxxx.
5.2.3 Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Deska xx xxxxxxxx xxx XX xxxxxx při 254 xx a xxxxxx xxxxx xx označí.
5.3.2 Xxxxx se xxxxxxxx
- xxxxxxxxxx stříbrným (3.16.1), xxxx
- kyselinou xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); xxxxxxx xx xx xxx 120 °X, xxxx
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx Xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx získané xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxx x xxxxxx hodnoty Xx, barvu xxxxx x UV světle x xxxxx xxxxx xx zviditelnění xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x následujícím xxxxxx (X) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxx (xxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx x XXX a XXXX xx xxxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxxx hodnoty Xx:
xxxxxxxxxxx: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
hydrochinonmonoethylether: 0,55
hydrochinonmonobenzylether: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Xxxxxx x oblast xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxx voda/methanol xx xxxxxxx zahřátí, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx analytů xx výsledném xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxx x UV xxxxxxx.
3. Xxxxxxx xxxxxxx
3.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x. Xxxx xxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxx XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Xxxxxx xx xxxxx xxx vody x jeden xxx xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx 45:55 (V/V). Xxxxxx xx 45 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) a 55 dílů xxxx.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx na 50 xx xx naváží 0,06 x hydrochinonu (3.3), 0,08 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Rozpustí xx a xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxxx (3.2). Referenční xxxxxx se připraví xxxxxxxx 10 xx xxxxxx xxxxxxx xx 50 ml směsí xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx se připravují xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x 10μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx kolona:
Chromatografická xxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 250 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 mm, plněná Xxxxxx fenylem (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx na Xxxxxxx XXX, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxx 6 μx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo kolony x ekvivalentní xxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 mm, Schleicher xxx Schüll, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Postup
5.1 Příprava xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x (x gramů) xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxx xx 25 ml xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx se xxxxxx x silně protřepe, xxxxx xx nevytvoří xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx alespoň xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx na xxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °X, xxx se usnadnila xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (4.4). Důkaz XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx (3.9) se upraví xx 1,0 xx/xxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx nastaví xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xx 10 μx roztoku xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.1 x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx plochy xxxx. Xxxxxxx xx kalibrace xxxxx xxxx 5.2.3. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx x referenční roztoky. Xxx výpočet xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx a xxxxxxx odezvy (RF) xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3.
5.2.3 Kalibrace
Nastříkne se 10 μx referenčního xxxxxxx (3.10) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx píku xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx faktor xxxxxx XXx (x xx xxxxxx infexem RF):
RFi = xx /xx
xxx
xx = plocha xxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = koncentrace xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx hydrochinonmonobenzyletheru x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 ml).
Je třeba xxxxxx, zda chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx odděleného páru xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx separace xxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx píků
Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx dosaženo, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx účinnější xxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx všech xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2:Xxxxxx asymetrie píku
- Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx.
6. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (koncentrací xxxxxxx) xx xxxxxx xx použijí xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx (xi) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (x/x) = (xx x 100) / (RFi x x)
xxx
x = hmotnost xxxxxx x xxxxxxx,
xx = plocha píku xxxxxxx i xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx xxxxxx hydrochinonu 2,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx hydrochinonmonomethyletheru 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Při xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx stejným xxxxxxx za různých xxxxxxxx (xxxxx laboratoře, xxxxx experimentátoři, různé xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,37 %.
8.2 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, různé xxxxxxxxx xxxx xxxxx doba) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx podmínek (různé xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,19 %.
8.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 2 % x je xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx (5.1) xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 % hydrochinonu, x xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx vysokých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.)
9.2 Xxxxxx xxxxx
Xxxx popsaná metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zajistí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, kterou xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx kolony X18 x xxxxxxxx mobilní xxxx.
X xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx dochází x rušivému vlivu xxxx řady parabenů. X xxxxxxx xxxxxxx xx stanovení mělo xxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2 x 3:
Xxxxxx: Xxxxxx XXX, 4,6 mm × 25 xx xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 5/95 (X/X)
xxx hydrochinonmonomethylether: methanol/voda 30/70 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Xxxxxxxxxx S5ODS xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx fáze: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (V/V)
průtok: 1,5 xx/xxx
Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] ISO 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] ISO 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, X., Xxxxx M.-O., Identification xx xxxxxx xx x’xxxxxxxxxxxx et xx xxx éthers méthylique xx xxxxxxxxxx dans xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx. Int. J. Xxxxxx. Sci., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, X., Xxx X., Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx in xxxx xxxxxx xxxxxx, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.