Xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/32/XX
xx dne 7. xxxxxxxx 1995
o metodách xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx x xxxxxxxx xxx EHP)
KOMISE XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx o xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx směrnici Xxxx 76/768/XXX xx xxx 27. xxxxxxxx 1976 x sbližování právních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 94/32/XX [2], a xxxxxxx xx xx. 8 odst. 1 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, že xx xx směrnici 76/768/XXX xxxxxxx xxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx prostředků x xxxxx xxxxxxxx dodržení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xx všechny xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx nejdříve; xx xxxxxxx xxxxxx již xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] ve xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx 82/434/XXX [5] xx znění xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/EHS [8] x 93/73/XXX [9];
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x hydrochinonmonobenzyletheru x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxx krokem;
vzhledem k xxxx, že xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx směrnice 76/768/XXX xxxxxxxxxxx pokroku,
PŘIJALA TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxx xxxx, xxx se xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- důkaz x xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx hydrochinonu, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Neprodleně x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx přijatá xxxxxxxxx státy xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx vyhlášení. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx členské xxxxx.
2. Xxxxxxx xxxxx sdělí Xxxxxx znění xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx předpisů, xxxxx xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx této směrnice.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 7. xxxxxxxx 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Úř. věst. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Xx. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. věst. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Úř. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Xx. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
PŘÍLOHA
I. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX, KYSELINY SALICYLOVÉ X XXXXXXXX PROPIONOVÉ X XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4hydroxybenzoové, kyseliny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx těchto xxxxxxxxxxxxx přísad, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx salicylové, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Definice
Množství xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx kyselin.
A. XXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX) a xxxxxxx chromatografií ("xxxxxxxxxxxx xx xxxxx"). V xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xx xxxxx potvrdí xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (GC).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx xxx čistoty x.x. Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň ekvivalentní xxxxxxx.
2.2 Xxxxxx
2.3 Diethylether
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxx
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, tekutý
2.8 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 4 X vodný xxxxxx
2.10 Xxxxxxx vápenatý, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Referenční xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) xxxxxxx (100 xx/100 ml) xxxxx z pěti xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.13 xx 2.17) x xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Derivatizační xxxxxxx
0,5 % xxxxxx 2brom2‘acetonaftonu (2.12) x xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 mg/10 xx). Xxxxx xxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
0,3 % (m/V) roztok xxxxxxxxxx lithného (2.11) xx vodě (300 xx/100 ml). Xxxxx xxxxxx by xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/xxxxxx (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Tekutý xxxxxxx (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
3.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx teplotu 60 °X
3.2 Xxxxxxxx komora
3.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx 254 x 366 xx
3.4 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, Silikagel 60, xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.5 Mikrostříkačka xx 10 μl
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx xx 25 μx
3.7 Sušárna xxxxxxxxxxxx xx teplotu xx 105 °X
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 x 200 ml xx xxxxxxxxxxx zátkou
3.9 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx &xxx; Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx. 5892, nebo xxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxx indikátorový xxxxxxx, xX 1 – 11
3.11 Skleněné xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 xx
3.12 Xxxxxxx xxxxxxx odparka (Xxxxxxxxx xxxx ekvivalentní)
3.13 Xxxxx xxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Příprava xxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx zabroušenou xxxxxx (3.8) se odváží xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8) a 40 xx acetonu (2.2). X silně xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxx 20 kapek 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Pomocí xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, zda xx xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxxx x po xxxx jedné xxxxxx xx silně xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx xxxxxxxxx xxxx, směs xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx 60 °X, aby xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 xx xxxxxxxx xx převede xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 ml, xxxxx xx 20 xx vody x xxxxxxxx xx. pH xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xx 10 xxxxxx 4 M xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.9) xx použití xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10).
Xxxxx xx 1 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx papír (3.9) xx xxxxxx xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 ml xxxxxxxxxxxxx (2.3) x xxxxx xx xxxxx xxxxx minutu. Xxxxxx xx nechají oddělit x vodná vrstva xx odpustí do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 250 ml. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10) xx xX xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx 2 xxxxxxxxxx 4 X xxxxxxxxx chlorovodíkovou (2.8). Přidá se 10 ml xxxxxxxxxxxxx (2.3), xxxxx xx xxxxxxxxx a silně xxxxxxxxxx jednu xxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx se převede xx xxxxxxx xxxxxxx (3.12). Xxxxx xxxxxx xx zlikviduje.
Etherová xxxxxx xx odpaří xxxxx xx sucha x xxxxxx se xxxxx xxxxxxxx v 1 xx diethyletheru (2.3). Xxxxxx xx xxxxxxx xx vzorkovací xxxxxxxx (3.11).
4.2 Chromatografie xx xxxxx vrstvě
Na startovní xxxxx koncentrační xxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx (3.4) xx xx xxxx, xxxxxxx počet xxxxxxxx xxxxx referenčních xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, které mají xxx xxxxxxxxxxx, nanese xxxxxxxxxx (3.5) ve xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx 3 μx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.20) x vysuší xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (3.13) xxxxxxxx xx 40 °X, xxx se skvrny xxxxxxx co xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vždy 10 μl xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku (2.18) x xxxxxxx vzorku (4.1) xxxxxx xx xxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx opět xxxxxx xx xxxx, xxx xxxx xxxxxxxx referenční xxxxxxx/xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx lithného, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx činidla (2.19) (xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx (3.7) 45 xxxxx při 80 °X. Po xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x komoře (3.2), xxxxx xxxx (xxx vyložení xxxxxxxxxx xxxxxxx) 15 minut xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), dokud xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx 80 xxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx studeného xxxxxxx x xxxxxxx skvrny xx vyhodnotí xxx XX světlem (3.3). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx může xxx chromatografická deska xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Xxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx Rf.
Hodnoty Xx x xxxxxxx xxxxxx xxx XX xxxxxxx se porovnají x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie popsaná x xxxxxx B, xxxx xxxxxxx-xx se, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx propionová, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx X. Získané retenční xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx XXX x XXXX xxxx XX se xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx vychází z xxxxxxxxx výsledků.
B. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, KYSELINY XXXXXXX X KYSELINY XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxxx metody
Vzorek se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Xx filtraci xx xxxxxxxxxxx přísady xxxxxxx vysokoúčinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx musí být xxxxxxx p.a. x xxxx být xxxxxx xxx HPLC. Musí xxx použita destilovaná xxxx nebo xxxx xxxxxxx ekvivalentní xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx
2.3 Kyselina 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Kyselina xxxxxxx
2.7 Xxxxx xxxxx, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Xxxxxxxx xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 M
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X vodný xxxxxx
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Směs xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxx (2.2) xx xxxxxx x jedním xxxxx xxxx (2:1)
2.14 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx obsahující 1 x xxxxxxxx 2methoxybenzoové (2.12) x 500 xx směsi ethanol/voda (2.13).
2.15 Xxxxxxx xxxx xxx HPLC
2.15.1 Acetátový xxxx: xx 1 xxxxx xxxx xx xxxxx 6,35 x xxxxxx sodného (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x smíchá xx.
2.15.2 Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx smícháním xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (2.15.1) a jednoho xxxx acetonitrilu (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx xxx 0,05 x xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx (2.3), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x kyseliny benzoové (2.5) x 0,05 x xxxxxxxx xxxxxxx (2.6) a xxxxx xx xxxxxx směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx odměří 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 ml xxxxxxxxx roztoku (2.16). Xx xxxxx baňky xx xxxxx 10,00 xx roztoku vnitřního xxxxxxxxx (2.14) x 0,5 xx 2 X kyseliny sírové (2.10). Xxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Tyto roztoky xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x dále:
3.1 Xxxxx xxxxx, nastavená na 60 °X
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx x nastavitelnou xxxxxxx délkou x 10μx nastřikovací smyčkou.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 12,5 až 25 cm, vnitřní xxxxxx 4,6 mm, xxxxxx Xxxxxxxxxxx 5C18 xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxx, průměr: 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Schüll, Weissband Xx 5892 nebo xxxxxxxxxxxx.
3.5 Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx
3.7 Xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx vzorku
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx bez přidání xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 xx (3.5) se xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 10 ml 2 X kyseliny xxxxxx (2.10) x 40 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Přidá se xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx xx xxxxxx x xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx se Erlenmeyerova xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx minut xx xxxxx lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xx xxxxxx uloží při 5 °X.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Asi 2 xx extraktu xx převedou xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx uchovává xxx 5 °C x stanovení pomocí XXXX se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 xx (3.5) xx s přesností xx tři xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx (x gramů). Xxxxxxx xx přidá 1,00 xx 2 X xxxxxxxx sírové (2.10) x 30,0 xx xxxxx ethanol/voda (2.13). Přidá se xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx kamínků (3.7) x 10 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx(2.14). Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxxx x silně xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx protřepává, dokud xxxxxxxxx homogenní suspenze. Xxx xxxxxxxxx extrakce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx fáze xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx zahřívá xxxxxx xxx minut xx xxxxx lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx ochladí v xxxxxx xxxxxxx vody x xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx převedou xx vzorkovací lahvičky (3.6). Extrakt xx xxxxxxxx xxx 5 °X a xxxxxxxxx xxxxxx HPLC se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx fáze: acetonitril/acetátový xxxx (2.15).
Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx na 2,0 ± 0,5 ml/min. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx nastaví na 240 xx.
4.2.1 Kalibrace
Do xxxxxxxxxxxx chromatografu (3.2) xx xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních xxxxxx (2.17). Pro každý xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx konzervační xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx standardu xxxxxxxxx x chromatogramů. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx přísadu xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx poměru xxxxx xxxx na koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku.
Přesvědčete xx, xx xxx xxxxxxxxx byla xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx roztoku konzervační xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx xx chromatogram. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx extraktu xxxxxx (4.1.1) xxxxx xxx x přibližně xxxxxxx xxxxxxxxx časem xxxx xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx vzorku x přidaným xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx xx stejným xxxxxxxxx časem jako xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx být xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxx-xx jedna x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx konzervační xxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx.)
Xx xxxxx xxxxxx, zda xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx standardní xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx píků xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx by xxxx xxx xxxxxxx mobilní xxxx xxxxxxxx tak, xxx xxx požadavek xxxxxx.
- Faktor xxxxxxxxx Xx všech xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx asymetrie xx xxxxxxx na xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx doporučená xxxxxxxx xxxxxx papíru xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx
- Základna musí xxx xxxxxxxx.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx koncentrace konzervačních xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx) x dále xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) xx vypočte xxxxxx xxxxxx
xx % (m/m) = (100x 20 x x) / (106 x&xxxx; a) = b / (500 x x)
xxx
x = xxxxxxxx zkušebního xxxxxx (4.1.2) (g),
b = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx x kalibračního xxxxx.
6. Opakovatelnost [1]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx 4hydroxybenzoové 0,40 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,050 %.
Při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx provedených současně xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,045 %.
Při xxxxxx kyseliny xxxxxxx 0,60 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx přidané do xxxxxxxx kyselin ze xxxxxx xx rozhodující x xxxxxxxx zpracovávaného xxxxxx xx xxxx xxxx být v xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xx-xx xx xxxxxxx, lze xxxxxx vhodnou ochrannou xxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Rozsah a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx metoda xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx x kosmetických prostředcích xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Definice
Koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxx stanovená touto xxxxxxx se xxxxxxx x procentech xxxxxxxxx (% x/x) xxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx extrakci xxxxxxxx propionové x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx chromatografií xx použití kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx jako vnitřního xxxxxxxxx.
4. Reakční xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx p.a; xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx alespoň ekvivalentní xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx trihydrogenfosforečná, 10 % (x/X)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx propionové
Do odměrné xxxxx xx 50 xx xx přesně xxxxxx 1 x (x xxxxx) kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 x (x xxxxx) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx na xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
5.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ionizačním xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx zkumavka (20 × 150 xx) xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Vodní xxxxx xxxxxxxxx xx 60 °X
5.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na 10 xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (průměr pórů 0,45 μx)
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx skleněné xxxxxxxx (5.3) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxx se 0,5 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) a 9,5 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx uzavře x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx to xxxxxxxx, xxxxxx xx zkumavka xx xxx minut xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Zkumavka xx rychle zchladí xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx den.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx skleněné xxxxxxxx (5.3) se x xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx. Přidá xx 0,5 xx xxxxxxxx trihydrogenfosforečné (4.4), 0,50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)a 9 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x silně xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxx lázně xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx rozpustila xxxxxx xxxx. Zkumavka xx rychle xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.2 Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx ocel
Délka: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Náplň: 10 % SP™ 1000 (nebo xxxxxxxxxxxx) + 1 % X3XX4 xx Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °X
Xxxxxx: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °C
Nosný xxxx: dusík
Průtoková rychlost: 25 xx/xxx
6.3 Xxxxxxxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx řady xxxxxxxxx xxxxx na 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.5). Xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 1,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx v koncentraci x xx/xx (xx xxxxxxx 1 mg/ml, xx-xx x = 1,000) a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v koncentraci x/4, p/2, p, 2x, 4x xx/xx (xx znamená 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 xx/xx, xx-xx x = 1,000).
Nastříkne xx 1 μl xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxx x x poměru xxxxxxxxxxxxxx xxxxx píků xx xxx x.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx se xxxxxx xxxxxx ploch xxxx.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se 1 μx xxxxxxxx xxxxxx 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Xx-xx xxx přibližně stejný xxxxxxxx čas jako xxx xxxxxxxx 2methylpropionové, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxxxx xxxxxx 6.1.2 x xxxxx xx plochy xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx vnitřního standardu.
Nastříknou xx 3 xxxxx x každého xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx poměrů xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx
7.1 X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.1 xx xxxxxx poměr xxxxxxxxx (X), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx ploch xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx 6.3.2.
7.2 Z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx kyseliny xxxxxxxxxx xx vzorku (x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vzorce
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x e) / (50 x x) =X(x / a)
kde
K = xxxxx vypočtený x xxxx 7.1,
x = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 4.6,
x = hmotnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xx jedno xxxxxxxxx xxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxxxx [2]
Xxx obsahu kyseliny xxxxxxxxxx 2 % (x/x) by xxxxx xxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,12 %.
XX. XXXXX X STANOVENÍ XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX V XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
A. DŮKAZ
1. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) v kosmetických xxxxxxxxxxxx xxx zesvětlení xxxx.
2. Xxxxxxxx metody
Důkaz xxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx xxx čistoty x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (V/V)
3.2 Chloroform
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxx rozpouštědlo:
Chloroform/diethylether, 66: 33 (V/V)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (x420 = 0,91 x/xx)
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
3.7 Xxxxxxxxxxx
3.8 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Hydrochinonmonobenzylether (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx roztoky
Následující referenční xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx a jsou xxxxxxxx xxxxx den.
3.11.1 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx dělené zkumavky xx 10 xx xx naváží 0,05 x hydrochinonmonomethyletheru (3.8). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx na objem 10 ml (3.1).
3.11.3 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx na xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.4 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.10). Xxxxx se 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 ml (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Kyanoželezitan xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (x/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx přidává xxxxxxx (3.5), xxxxx se xxxxxxx xx sraženina xxxx nerozpustí.
Upozornění:
Při delším xxxxx se v xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x měl xx xxx po xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x ethanolu (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx xx 1 % (m/V) xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.14) x 2 % (m/V) xxxxx xxxxxxx chloridu železitého (3.15). Těsně před xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní vybavení, x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
4.2 Xxxxxx desky xxx xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx: xxxxxxxxx GHR/UV254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx vrstvy 0,25 xx.
4.3 Ultrazvuková xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 UV xxxxx, 254 nm
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 ml se xxxxxx 3 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,250 g kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 ml ethanolu (3.1). xX xxxxxxx xx upraví amoniakem (3.5) xx 10. Xxxxx xx doplní xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Zkumavka xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx se 10 xxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx. Zfiltruje xx přes xxxxxxxxx xxxxx xxxx se xxxxxxxx xxx 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě (TLC)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx vyvíjecím rozpouštědlem (3.4).
5.2.2 Na xxxxx xx xxxxxx xx 2 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) x 2 μx xxxxxxx xxxxxx (5.1). Xxxxxx xx xx xxx xxx xxxxxxx okolí, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx xx startu.
5.2.3 Xxxxx se xxxxx, xxxxx xx vyschnout xxx pokojové teplotě.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxx xx xxxxxxxx pod XX xxxxxx xxx 254 xx x xxxxxx xxxxx se označí.
5.3.2 Xxxxx se xxxxxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- kyselinou xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); xxxxxxx xx xx xxx 120 °X, nebo
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx Rf xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx získané xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx referenční xxxxxxx, pokud jde x xxxxxx xxxxxxx Xx, barvu skvrn x UV xxxxxx x xxxxx skvrn xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (X) x xxxxxxxxx xx retenční časy xxxxxxx xxx xxx (xxxx) vzorku s xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx z XXX a XXXX xx zkombinují x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx Xx:
xxxxxxxxxxx: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,55
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Rozsah x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx specifikován xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonoethyletheru x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Stanovení analytů xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxx s XX xxxxxxx.
3. Xxxxxxx činidla
3.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx xxx čistoty x.x. Musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx pro XXXX
3.8 Xxxx voda/methanol 1:1 (X/X). Smíchá xx xxxxx xxx vody x xxxxx xxx xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: xxxx tetrahydrofuran/voda 45:55 (V/V). Xxxxxx xx 45 dílů xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) a 55 xxxx xxxx.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx na 50 xx xx xxxxxx 0,06 x xxxxxxxxxxxx (3.3), 0,08 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx xx x xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxxx (3.2). Referenční xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxx xxxxxxx xx 50 xx směsí xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx xx připravují xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
4.1 Vodní xxxxx nastavitelná xx xxxxxxx 60 °C
4.2 Xxxxxxxxxxxx pro vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vlnovou xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x korozivzdorné xxxxx, xxxxx 250 xx, xxxxxxx průměr 4,6 mm, plněná Xxxxxx fenylem (chemicky xxxxxxx fenethylsilanem xx Xxxxxxx XXX, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxx 6 μx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, průměr 90 xx, Schleicher xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 nebo xxxxxxxxxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Příprava xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx x přesností xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x (x xxxxx) vzorku. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx 25 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx uzavře x silně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze. Xxxxxxxxxx xx alespoň jednu xxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xx vodní xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °X, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx. Baňka se xxxxxxx x doplní xx xx objem xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx papír (4.4). Xxxxx XXXX xx provede xx 24 xxxxx xx xxxxxxxx extraktu.
5.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx fáze (3.9) xx xxxxxx xx 1,0 ml/min x xxxxxx délka xxxxxxxxx se xxxxxxx xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x xxxxxxxxx xx chromatogram. Změří xx plochy píků. Xxxxxxx xx kalibrace xxxxx bodu 5.2.3. Xxxxxxxxx xx chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx roztoky. Xxx výpočet xxxxxxxxxxx xxxxxxx v roztoku xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx a xxxxxxx xxxxxx (RF) xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.2.3.
5.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx se provede xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx píku xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx XXx (x je xxxxxx xxxxxxx XX):
XXx = pi /xx
xxx
xx = xxxxxx píku xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx nebo hydrochinonmonobenzylether, x
xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 ml).
Je xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- separace xxxx xxxxxxx odděleného xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx uvedena xx xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx píků
Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, měla xx být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxx složení mobilní xxxx upraveno xxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Faktor xxxxxxxxx Xx xxxxx získaných xxxx xx se xxx xxxxxxxxx od 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxx stanovení faktoru xxxxxxxxx je doporučená xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2:Xxxxxx asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
6. Výpočet
Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx analytu (koncentrací xxxxxxx) xx vzorku xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Koncentrace xxxxxxx xx vzorku xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) se xxxxxxx pomocí xxxxxx
xx % (m/m) = (xx x 100) / (RFi x x)
xxx
x = hmotnost xxxxxx x xxxxxxx,
xx = xxxxxx xxxx xxxxxxx i ve xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx hydrochinonmonoethyletheru 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx hydrochinonmonobenzyletheru 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Při xxxxxx hydrochinonu 2 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou stanovení xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (různé xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,37 %.
8.2 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xx xxxxxxx podmínek (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, různé xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (různé xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx přístroje nebo xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,19 %.
8.4 Při xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, různé xxxxxxxxx xxxx různá xxxx) překročit 0,11 %.
9. Xxxxxxxx
9.1 Jestliže xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx výrazně xxxxx xxx 2 % x je požadován xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx (5.1) xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx vzorek xxxxxxxxxx 2 % xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxxxxx xxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx detektoru.)
9.2 Rušivé xxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Použití xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxx C18 x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
X xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x rušivému xxxxx xxxx řady xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx stanovení xxxx xxx zopakováno x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2 a 3:
Xxxxxx: Xxxxxx XXX, 4,6 mm × 25 mm xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: methanol/voda 5/95 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (V/V) [5].
Xxxxxx: Xxxxxxxxxx X5XXX xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx fáze: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] XXX 5725.
[2] ISO 5725.
[3] XXX 5725.
[4] XXX 5725.
[5] Herpol-Borremans, X., Xxxxx M.-O., Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx x’xxxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx. Int. X. Xxxxxx. Sci., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, J., Xxx X., Determination xx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.