Šestá xxxxxxxx Komise 95/32/XX
xx xxx 7. xxxxxxxx 1995
x metodách xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx x významem xxx XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX ze xxx 27. července 1976 x sbližování právních xxxxxxxx xxxxxxxxx států xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 94/32/XX [2], a xxxxxxx xx xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxx úřední zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, které xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xx všechny xxxxxxxx metody xxxxxxx xxxx xxx stanoveny xx xxxxxxxx; že xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/EHS [4], xxxxxxxx 82/434/XXX [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx 83/514/EHS [7], 85/490/XXX [8] x 93/73/XXX [9];
vzhledem x xxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx prostředcích a xxxxx x stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Členské xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x zajištění xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x kyseliny xxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metodami xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x touto směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx státy xxxx xxxxxxxxx odkaz na xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx učiněn xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx státy.
2. Xxxxxxx státy sdělí Xxxxxx znění xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx směrnice.
Xxxxxx 3
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx dnem xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.
Článek 4
Xxxx xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
V Bruselu dne 7. xxxxxxxx 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Xx. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Xx. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Úř. věst. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Xx. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. věst. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. věst. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. věst. X 231, 14.9.1993, x. 34.
PŘÍLOHA
I. XXXXX X XXXXXXXXX KYSELINY XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXX X KOSMETICKÝCH XXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, kyseliny salicylové x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx důkazu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kyseliny 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x kyseliny xxxxxxxxxx stanovená touto xxxxxxx se vyjádří x xxxxxxxxxxxx procentech xxxxxxx xxxxxxx.
X. XXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx kyselé/zásadité xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx (XXX) a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ("xxxxxxxxxxxx xx xxxxx"). V xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx důkaz potvrdí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx propionové, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (GC).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla musí xxx xxxxxxx p.a. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxx
2.3 Xxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxx
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx draselný, 4 X xxxxx xxxxxx
2.10 Xxxxxxx vápenatý, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Kyselina xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx se 0,1 % (m/V) xxxxxxx (100 xx/100 ml) xxxxx z xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.13 xx 2.17) v xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Xxxxxxxxxxxxx činidlo
0,5 % xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) x xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 xx/10 xx). Xxxxx xxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x uchováván x xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
0,3 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.11) xx vodě (300 xx/100 ml). Xxxxx xxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/aceton (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Tekutý xxxxxxx (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní vybavení
3.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X
3.2 Vyvíjecí komora
3.3 Xxxxx ultrafialového světla 254 x 366 xx
3.4 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě, Silikagel 60, bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, tloušťka xxxxxx 0,25 xx x xxxxxxxxxxxx zónou 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx xx 25 μx
3.7 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx až 105 °C
3.8 Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 x 200 xx xx xxxxxxxxxxx zátkou
3.9 Xxxxxxxxx xxxxx, průměr 90 xx, Xxxxxxxxxx &xxx; Xxxüxx, Weissband Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Univerzální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xX 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx na 5 xx
3.12 Rotační xxxxxxx xxxxxxx (Rotavapor xxxx ekvivalentní)
3.13 Topná xxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.8) se odváží xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx 4 X xxxxxxxx chlorovodíkové (2.8) x 40 xx xxxxxxx (2.2). X xxxxx zásaditých xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, by xxxx xxx přidáno 20 xxxxx 4 X xxxxxxxx chlorovodíkové (2.8). Pomocí indikátorového xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xX přibližně 2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx a xx xxxx xxxxx xxxxxx xx silně xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx extrakci xxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx opatrně zahřeje xx xxx 60 °X, xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx (3.9) do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 xx xxxxxxxx se xxxxxxx xx Erlenmeyerovy xxxxx xx 200 xx, xxxxx se 20 xx vody a xxxxxxxx xx. xX xxxxx se upraví xxxxxxxxx na 10 xxxxxx 4 M xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.9) xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10).
Přidá xx 1 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx xx protřepe. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx xxxxxx xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 ml xxxxxxxxxxxxx (2.3) x xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx. Vrstvy xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx vrstva xx odpustí xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 250 ml. Etherová xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xx použití indikátorového xxxxxxx (3.10) se xX xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx přibližně 2 xxxxxxxxxx 4 X kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxx xx 10 ml diethyletheru (2.3), baňka se xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx minutu; xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx převede xx xxxxxxx xxxxxxx (3.12). Xxxxx vrstva xx zlikviduje.
Etherová vrstva xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x 1 xx diethyletheru (2.3). Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.11).
4.2 Xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx koncentrační xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (3.4) xx xx xxxx, jejichž xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx, které mají xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx (3.5) ve xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx 3 μx xxxxxxxxxx lithného (2.20) x xxxxxx xx x proudu xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx deska xx xxxxxxx na xxxxxx xxxxx (3.13) xxxxxxxx xx 40 °C, xxx se xxxxxx xxxxxxx co xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx xxxxxxxxx linii xxxxx xxxxxx xxxx 10 μl xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x roztoku vzorku (4.1) xxxxxx do xxxx, xxx xxx xxxxxxx uhličitan lithný.
Nakonec xx xxxx xxxxxx xx bodů, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx uhličitanu xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx derivatizačního xxxxxxx (2.19) (xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx zahřívá x xxxxxxx (3.7) 45 xxxxx při 80 °X. Xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx v komoře (3.2), xxxxx byla (xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) 15 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 80 xxxxx).
Xxxxx xx vysuší x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x získané skvrny xx vyhodnotí pod XX xxxxxxx (3.3). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx skvrn může xxx xxxxxxxxxxxxxxxx deska xxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Důkaz
Pro xxxxxx skvrnu se xxxxxxx xxxxxxx Xx.
Xxxxxxx Xx a xxxxxxx xxxxxx pod UV xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorků.
Učiní xx předběžné xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxx konzervačních přísad. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx X, xxxx xxxxxxx-xx se, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, provede xx xxxxxxx chromatografie xxxxxxx v oddílu X. Xxxxxxx retenční xxxx se porovnají x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx XXX x XXXX nebo XX se xxxxxxxxxx x xxx konečném xxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, KYSELINY 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX X KYSELINY SALICYLOVÉ
1. Xxxxxxxx metody
Vzorek xx xx okyselení extrahuje xxxxx ethanolu x xxxx. Xx filtraci xx konzervační xxxxxxx xxxxxxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxx x.x. a xxxx xxx vhodná xxx HPLC. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx ekvivalentní čistoty.
2.2 Xxxxxxx, absolutní
2.3 Kyselina 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Kyselina xxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxxxx benzoová
2.6 Kyselina xxxxxxx
2.7 Octan sodný, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Xxxxxxxx xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Acetonitril
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 X
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X xxxxx roztok
2.12 Xxxxxxxx 2methoxybenzoová
2.13 Směs xxxxxxx/xxxx
Xxxxx dílů xxxxxxxx (2.2) se xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx (2:1)
2.14 Xxxxxx xxxxxxxxx standardu
Připraví xx xxxxxx xxxxxxxxxx 1 x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (2.12) x 500 xx směsi xxxxxxx/xxxx (2.13).
2.15 Xxxxxxx xxxx xxx XXXX
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: xx 1 xxxxx xxxx xx xxxxx 6,35 g xxxxxx xxxxxxx (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx octové (2.8) x xxxxxx xx.
2.15.2 Xxxxxxx fáze se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx acetátového pufru (2.15.1) a xxxxxxx xxxx acetonitrilu (2.9).
2.16 Xxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx baňky xx 50 ml xx xxxxxx naváží xxx 0,05 g xxxxxxxx 4hydroxybenzoové (2.3), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxx (2.5) x 0,05 x kyseliny xxxxxxx (2.6) x xxxxx xx doplní xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Roztok xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních xxxxxx
Xx xxxxxxxxx baněk xx 20 xx xx odměří 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (2.16). Xx xxxxx xxxxx xx xxxxx 10,00 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (2.14) a 0,5 xx 2 X kyseliny sírové (2.10). Xxxxx se xxxxxx směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Tyto roztoky xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
3.1 Xxxxx xxxxx, nastavená na 60 °X
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx x nastavitelnou xxxxxxx xxxxxx a 10μx nastřikovací smyčkou.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 12,5 xx 25 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Nucleosilem 5C18 xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx: 90 mm, Schleicher xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 ml
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx
3.7 Xxxxx kamínky, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Postup
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx přidání xxxxxxxxx standardu
Do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 xx (3.5) xx xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Erlenmeyerovy xxxxx se xxxxxxxxxx 10 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 40 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Přidá xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxx minutu xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx extrakce konzervačních xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx se Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx minut xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx ihned xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxx 5 °C.
Extrakt xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx se xxxxxxxx xxx 5 °X x xxxxxxxxx pomocí XXXX xx xxxxxxx xx 24 hodin.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 50 xx (3.5) xx s xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx (a gramů). Xxxxxxx xx přidá 1,00 xx 2 X kyseliny xxxxxx (2.10) x 30,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx kamínků (3.7) x 10 ml xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx a xxxxx xx alespoň xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, dokud xxxxxxxxx homogenní xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňka xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx vodní lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx v xxxxxx studené vody x xxxxxxx se xxxxx xx xxxxxx xxx 5 °C.
Extrakt xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 ml xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx se xxxxxxxx xxx 5 °X a stanovení xxxxxx XXXX se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxx (2.15).
Xxxxxx mobilní xxxx kolonou xx xxxxxxx na 2,0 ± 0,5 xx/xxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 240 xx.
4.2.1 Kalibrace
Do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx nastříkne xx 10 μl standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.17). Xxx každý xxxxxx xx ze xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx konzervační xxxxxxx x xxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxxxx získaného x xxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx graf xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, že xxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx odezva.
4.2.2 Stanovení
Do xxxxxxxxxxxx chromatografu (3.2) xx nastříkne 10 μx xxxxxxxx vzorku (4.1.1) x zaznamená xx chromatogram. Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) a xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxx xxx x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxxx časem xxxx xxx kyseliny 2methoxybenzoové (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx extraktu xxxxxx x xxxxxxxx vnitřním xxxxxxxxxx (4.1.2) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x chromatogramu extraktu xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxx-xx jedna x xxxxxxxxxxxxx konzervačních přísad x chromatogramu xxxxxxxx, xxx xxxx konzervační xxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx standard.)
Je xxxxx xxxxxx, xxx chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páru xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx separace xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1)
Obrázek 1: Xxxxxxxx píků
Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx buď xxxxxxx účinnější kolona xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx tak, xxx xxx požadavek xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx získaných xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx doporučená xxxxxxxx xxxxxx papíru xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx
- Základna xxxx xxx stabilní.
5. Výpočet
Pro xxxxxxx koncentrace konzervačních xxxxxx x roztoku xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad x xxxxx xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (vnitřní xxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xi) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (m/m) = (100x 20 x x) / (106 x&xxxx; x) = x / (500 x a)
kde
a = xxxxxxxx zkušebního xxxxxx (4.1.2) (g),
b = xxxxxxxxxxx konzervační xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6. Xxxxxxxxxxxxxx [1]
Při xxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,050 %.
Při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,50 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,045 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx sorbové 0,60 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxxx je rozhodující x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xx-xx xx žádoucí, xxx xxxxxx xxxxxxx ochrannou xxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Rozsah x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx vhodná xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx se vyjádří x xxxxxxxxxx hmotnosti (% x/x) xxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx plynovou chromatografií xx použití xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Reakční xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x; xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx xxxxxxx ekvivalentní xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
4.2 Kyselina xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2methylpropionová
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (x/X)
4.5 Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx na 50 xx xx přesně xxxxxx 1 g (x xxxxx) kyseliny xxxxxxxxxx x doplní xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Roztok xxxxxxxxx standardu
Do xxxxxxx xxxxx na 50 xx xx přesně xxxxxx 1 x (x xxxxx) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
5. Přístroje x xxxxxxx
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
5.2 Plynový xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx zkumavka (20 × 150 xx) xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Vodní lázeň xxxxxxxxx xx 60 °X
5.5 Skleněná injekční xxxxxxxxx na 10 xx x filtrační xxxxxxxxx (xxxxxx xxxx 0,45 μm)
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx vzorku
6.1.1 Příprava xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx skleněné xxxxxxxx (5.3) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,5 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 ml xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xx pět xxxxx xx vodní xxxxx xxxxxxx na 60 °X (5.4), xxx xx zcela rozpustila xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx rychle xxxxxxx xxx tekoucí vodou. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxxx xxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) xx x xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4), 0,50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)x 9 ml ethanolu (4.1).
Xxxxxxxx se uzavře x silně protřepe. Xxxx to xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xx xxx minut xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx rozpustila xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se provede xxxxxx xxx.
6.2 Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx chromatografii
Doporučují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx ocel
Délka: 2 m
Průměr: ⅛"
Náplň: 10 % XX™ 1000 (xxxx ekvivalentní) + 1 % X3XX4 xx Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °C
Kolona: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °X
Xxxxx xxxx: dusík
Průtoková xxxxxxxx: 25 xx/xxx
6.3 Xxxxxxxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx řady xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.5). Xx xxxxx odměrné baňky xx xxxxxxxxxx 1,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6); doplní xx na xxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx obsahují xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v koncentraci x mg/ml (xx xxxxxxx 1 mg/ml, xx-xx e = 1,000) x kyselinu xxxxxxxxxxx x koncentraci x/4, x/2, x, 2x, 4p xx/xx (xx xxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 mg/ml, xx-xx x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μl xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové x xxxxxxxx 2methylpropionové xx xxx x x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx na xxx y.
Nastříknou xx 3 dávky x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx píku.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se 1 μx xxxxxxxx xxxxxx 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Xx-xx xxx přibližně stejný xxxxxxxx čas xxxx xxx xxxxxxxx 2methylpropionové, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx pozorován xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.2 x změří xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx propionové a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx ploch xxxx.
7. Xxxxxxx
7.1 Z xxxxxxxxxx xxxxxx sestrojené xxxxx xxxx 6.3.1 xx odečte poměr xxxxxxxxx (X), který xxxxxxxx xxxxxx ploch xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx 6.3.2.
7.2 Z xxxxx získaného xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku (x) x hmotnostních procentech xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = K (0,5 x 100 x x) / (50 x a) =X(x / a)
kde
K = poměr xxxxxxxxx x xxxx 7.1,
x = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x gramech xxxxx bodu 4.6,
x = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx jedno xxxxxxxxx místo.
8. Xxxxxxxxxxxxxx [2]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,12 %.
XX. XXXXX A XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX V XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
A. XXXXX
1. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
X metodě xx xxxxxxx detekce x xxxxx hydrochinonu, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x hydrochinonmonobenzyletheru (xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx zesvětlení xxxx.
2. Podstata metody
Důkaz xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx (XXX).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
3.2 Chloroform
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Vyvíjecí xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (X/X)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (x420 = 0,91 x/xx)
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
3.7 Xxxxxxxxxxx
3.8 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx referenční xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx jeden den.
3.11.1 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 ml xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) a 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x doplní se xxxxxxxxx na objem 10 xx (3.1).
3.11.3 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonmonoethyletheru (3.9). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx na xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.4 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.10). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny askorbové (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Chlorid xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx činidla
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (m/V) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx přidává xxxxxxx (3.5), xxxxx xx xxxxxxx se sraženina xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx:
Xxx delším xxxxx xx x xxxxxxx xxxxx výbušné xxxxxxxxxx x xxx xx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxx dodekamolybdofosforečné (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx se 1 % (x/X) xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.14) x 2 % (m/V) vodný xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15). Těsně xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx díly xxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx, x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
4.2 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx GHR/UV254 (254 xx dolním xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 cm (Xxxxxxx, Xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx). Tloušťka xxxxxx 0,25 xx.
4.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 XX xxxxx, 254 xx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx se xxxxxx 3 g xxxxxx. Přidá se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). xX xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx se doplní xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx se 10 minut v xxxxxxxxxxxx lázni. Xxxxxxxxx xx přes filtrační xxxxx xxxx xx xxxxxxxx při 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě (XXX)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem (3.4).
5.2.2 Xx xxxxx xx xxxxxx xx 2 μx referenčních xxxxxxx (3.11) a 2 μx xxxxxxx xxxxxx (5.1). Xxxxxx xx xx tmě xxx xxxxxxx okolí, xxxxx čelo rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx xx startu.
5.2.3 Xxxxx xx xxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxx pokojové teplotě.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Deska xx xxxxxxxx pod XX xxxxxx xxx 254 xx a poloha xxxxx se xxxxxx.
5.3.2 Xxxxx xx postříká
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- kyselinou xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); zahřeje se xx xxx 120 °X, xxxx
- roztokem xxxxxxxxxxxxxxx draselného x xxxxxxxx chloridu železitého (3.16.3).
6. Důkaz
Spočítá xx xxxxxxx Xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx vzorku se xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jde x jejich xxxxxxx Xx, xxxxx xxxxx x UV xxxxxx x barvu skvrn xx zviditelnění detekčním xxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (X) a porovnají xx xxxxxxxx časy xxxxxxx xxx pík (xxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx píků xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx z XXX a XXXX xx zkombinují x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx hodnoty Xx:
xxxxxxxxxxx: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
hydrochinonmonoethylether: 0,55
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx použití
V xxxxxx xx specifikován xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x hydrochinonmonobenzyletheru v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx rozpustí xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx analytů xx výsledném xxxxxxx xx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxx x XX xxxxxxx.
3. Xxxxxxx xxxxxxx
3.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Methanol
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Hydrochinonmonomethylether
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxx XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Xxxxxx xx xxxxx díl xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Mobilní xxxx: směs xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx 45:55 (X/X). Xxxxxx xx 45 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 55 dílů vody.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx se xxxxxx 0,06 x hydrochinonu (3.3), 0,08 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx xx x doplní xx na xxxxx xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxx roztoku na 50 xx směsí xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxx nastavitelná na xxxxxxx 60 °C
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx chromatografii x XX detektorem x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 250 xx, vnitřní průměr 4,6 mm, plněná Xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx fenethylsilanem na Xxxxxxx XXX, uzavřená xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxx 6 μx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx x xxxxxxxxxxxx náplní.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, průměr 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Weissband Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x (x xxxxx) xxxxxx. Xxxxxx xx rozptýlí xx 25 ml xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx se uzavře x silně xxxxxxxx, xxxxx xx nevytvoří xxxxxxxxx suspenze. Protřepává xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xx xx xxxxx xxxxx voda/methanol (3.8). Xxxxxxx xx zfiltruje xxxx filtrační papír (4.4). Xxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx od xxxxxxxx extraktu.
5.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx fáze (3.9) xx xxxxxx xx 1,0 xx/xxx x xxxxxx délka xxxxxxxxx xx nastaví xx 295 nm.
5.2.2 Xxxxxxxxx se 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x zaznamená xx xxxxxxxxxxxx. Změří xx plochy píků. Xxxxxxx xx kalibrace xxxxx bodu 5.2.3. Xxxxxxxxx xx chromatogramy xxxxxxx pro vzorek x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx výpočet koncentrace xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx píků x xxxxxxx odezvy (XX) xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.2.3.
5.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx píku xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx XXx (x je xxxxxx xxxxxxx XX):
XXx = xx /xx
xxx
xx = xxxxxx xxxx xxx hydrochinon, hydrochinonmonomethylether, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx hydrochinonmonobenzylether, x
xx = koncentrace xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx hydrochinonmonobenzyletheru x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 ml).
Je třeba xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1.).
Obrázek 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx požadované xxxxxxxx dosaženo, xxxx xx být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx mobilní xxxx xxxxxxxx xxx, xxx byl požadavek xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx pohybovat xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2:Xxxxxx asymetrie píku
- Xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx.
6. Výpočet
Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx analytu (xxxxxxxxxxx xxxxxxx) ve xxxxxx xx xxxxxxx plochy xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (m/m) = (xx x 100) / (RFi x x)
xxx
x = hmotnost xxxxxx x gramech,
bi = xxxxxx xxxx xxxxxxx x xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx xxxxxx hydrochinonu 2,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx hydrochinonmonoethyletheru 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx hydrochinonmonobenzyletheru 1,0 % xx xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx různá xxxx) xxxxxxxxx 0,37 %.
8.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx podmínek (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx přístroje xxxx xxxxx doba) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx vzorkem xx xxxxxxx xxxxxxxx (různé xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx přístroje xxxx xxxxx doba) xxxxxxxxx 0,19 %.
8.4 Xxx xxxxxx hydrochinonmonobenzyletheru 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx rozdílu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se stejným xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (různé xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, různé xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Xxxxxxxx
9.1 Jestliže xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyšší xxx 2 % x je požadován xxxxxx xxxxx obsahu, xxx xx být xxxxxxx xxxxxx (5.1) xxxxxx xx podobnou xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx vzorek obsahující 2 % hydrochinonu, x stanovení by xxxx xxx xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.)
9.2 Rušivé xxxxx
Xxxx popsaná xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x jeho xxxxxx x xxxxxx isokratickém xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zajistí xxxxxxxxxxx xxxxxxx hydrochinonu, xxxxxx xxxxx zajistit při xxxxxxx kolony X18 x uvedenou xxxxxxx xxxx.
X této xxxxxx xxxx snadno xxxxxxx x rušivému xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. X takovém xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx zopakováno s xxxxx systémem mobilní xxxx/xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2 a 3:
Xxxxxx: Zorbax ODS, 4,6 xx × 25 xx nebo xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 5/95 (X/X)
xxx hydrochinonmonomethylether: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Spherisorb X5XXX xxxx ekvivalentní:
mobilní xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 ml/min
Tyto xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] XXX 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] ISO 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, X., Xxxxx X.-X., Xxxxxxxxxxxxxx xx dosage de x’xxxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx produits cosmétiques xxxx xxxxxxxx la xxxx. Xxx. J. Xxxxxx. Sci., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, J., Xxx I., Xxxxxxxxxxxxx xx hydroquinone in xxxx xxxxxx creams, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.