Plné znění - 31996L0045

Sedmá Xxxxxxxx Xxxxxx 96/45/XX

xx xxx 2. xxxxxxxx 1996

x metodách xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)

XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,

s xxxxxxx xx směrnici Xxxx 76/768/XXX ze xxx 27. července 1976 x xxxxxxxxxx právních xxxxxxxx členských xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 95/34/XX [2], a xxxxxxx xx čl. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx předepsaných xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x tomu, xx by xxxxxxx xxxxxxxx metody analýzy xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; xx xxxxxxx metody xxx xxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx Komise 80/1335/XXX [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx Xxxxxx 82/434/XXX [5] ve xxxxx xxxxxxxx 90/207/EHS [6] x ve xxxxxxxxxx Xxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8], 93/73/XXX [9] x 95/32/XX [10];

xxxxxxxx k tomu, xx xxxxx x xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx sedmým xxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/XXX technickému xxxxxxx,

XXXXXXX TUTO SMĚRNICI:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxx všechny nezbytné xxxxx k xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx důkaz x xxxxxxxxx 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxx, butyl x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx prováděly xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

1. Členské xxxxx uvedou x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx dosažení xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1997. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.

2. Xxxx opatření xxxxxxx členskými státy xxxx xxxxxxxxx odkaz xx xxxx směrnici xxxx musí xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx stanoví členské xxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Komisi znění xxxxxxxxxxxxxx právních xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx 3

Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx dnem xx xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx 4

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.

V Xxxxxxx xxx 2. xxxxxxxx 1996.

Za Xxxxxx

Xxxx Xxxxxx

xxxxxx Xxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.

[2] Xx. věst. X 167, 18.7.1995, x. 19.

[3] Úř. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.

[4] Úř. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.

[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.

[6] Úř. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.

[7] Úř. věst. X 291, 24.10.1983, x. 9.

[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.

[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.

[10] Xx. věst. X 178, 28.7.1995, x. 20.

XXXXXXX

XXXXX X STANOVENÍ 2-XXXXXXXXXXXXXX, 1-XXXXXXXXXXXX-2-XXX, METHYL, XXXXX, PROPYL, XXXXX X XXXXXX 4-HYDROXYBENZOÁTU X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

X. XXXXX

1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx

X xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx chromatografie xx xxxxx xxxxxx, který x xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx X xxxxxx xxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-hydroxybenzoátu, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx přísady xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx acetonem. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx x mastné xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx/xxxx xx xxxxxxxxxxx diethyletherem, xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx desku pokrytou xxxxxx xxxxxxx silikagelu. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx chromatogram xxxxxxxx x UV xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx.

3. Reakční xxxxxxx

3.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x. Musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxx stejné xxxxxxx.

3.2 Xxxxxx

3.3 Diethylether

3.4 n-Pentan

3.5 Xxxxxxxx

3.6 Ledová xxxxxxxx xxxxxx

3.7 Xxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, x(XXx) = 4 xxx/x

3.8 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, x(XXX) = 4 mol/l

3.9 Xxxxxxx vápenatý xxxxxxxx (XxXx₂ . 2H₂O)

3.10 Xxxxxxxx činidlo: Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (Xxxxx 69820).

3.11 2-Xxxxxxxxxxxxx

3.12 1-Fenoxypropan-2-ol

3.13 Xxxxxx 4-hydroxybenzoát (xxxxxxxxxxxxx)

3.14 Xxxxx 4-hydroxybenzoát (ethylparaben)

3.15 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.16 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

3.17 Xxxxxx 4-hydroxybenzoát (xxxxxxxxxxxxx)

3.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.15, 3.16 x 3.17 x xxxxxxxxx.

3.19 Xxxxxxxx rozpouštědlo

Smíchá xx 88 xxxx xxxxxxxx (3.4) x 12 xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.6).

4. Xxxxxxxxx x pomůcky

Běžné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx:

4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X

4.2 Vyvíjecí xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx)

4.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, 254 nm

4.4 Hotové xxxxx 20 xx × 20 cm, xxxxxx potažené 0,25 xx tenkou xxxxxxx xxxxxxxxxx 60X254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx 60X) x koncentrační xxxxx (Xxxxx Xx 11798, Xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx)

4.5 Sušárna xxxxxxxxxxxx xx teplotu až xx 105 °X

4.6 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx

4.7 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x délce xxxxxxxxx 10 xx, vnější xxxxxx přibližně 3,5 xx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxx být 2 až 3 xx xxxxx. Podle xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxx v xxxx 5.2.

4.8 Skleněné xxxxxxxx xx 50 xx se šroubovacími xxxxxxx.

4.9 Xxxxxxxxxx topná xxxxx s xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxx 80 °C. Xxxxx xxxxx xx pokryje xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 20 cm × 20 xx x tloušťce asi 6 mm, čímž xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx na 50 xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx čtyři kapky xxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.7) x 40 xx acetonu.

V xxxxxxx xxxxx zásaditých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx 20 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové. Xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xx zlehka xxxxxxx xx xxx 60 °X, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx, a 1 minutu se xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx změří xX xxxxxxx x upraví xx na xxxxxxx ≤ 3 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx 1 xxxxxx xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx a xxxxxxxxx xx přes filtrační xxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. 20 ml xxxxxxxx xx převede xx Erlenmeyerovy xxxxx xx 200 xx, xxxxx xx 60 xx vody x xxxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8) xxxxxxxxx na 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx 1 x chloridu vápenatého xxxxxxxxx (3.9) x xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx xx xxxxxx nálevky xx 250 xx, xxxxx xxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx jednu xxxxxx xxxxxxxxxx. Fáze xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxx xx xxxxxxx do Xxxxxxxxxxxxx baňky na 200 ml. Xxxxxxx xX xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx 2 za xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Poté xx xxxxx 10 xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Fáze xx xxxxxxx oddělit x xxx 2 xx fáze diethyletheru xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 ml.

5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX)

XXX xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx desku (4.9). Xx startovní xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxx xx xxxxxx 10 μx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x 100 μx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) (5.1).

Xxxxx xxxxxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. TLC xxxxx xx odstraní x xxxxx xxxxx x nechá se xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Vyvíjecí xxxxxx (4.2) xx naplní 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.19).

XXX xxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxx pokojové xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 15 xx od xxxxxxxx xxxxx. Deska xx x vyvíjecí xxxxxx xxxxx x vysuší x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx horkovzdušného xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx x UV xxxxxx (4.3) x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx. Deska xx xxxxxxx 30 minut x xxxxxxx (4.5) xxx 100 °X, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx octová. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.10) xxx, xx xx XXX deska xxxxxxxxxx xxxxxxx válečkem (4.7) xxxxxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxxxx:

Xxxxxx xxx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx činidla xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx XX xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxx 4-hydroxybenzoové xx xxxxxxx xxxx červené xxxxxx, 2-xxxxxxxxxxxxx x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xx však xxxxx xxxxx pozor xx to, že xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, která xxxx xxx přítomná xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx sama x xxxx xxxxxxx jako xxxxxxx skvrna. Xxx 7.3 x 7.4.

6. Xxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx Xx. Xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx vzorku xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx o jejich xxxxxxx Xx, xxxxxx xxxxxxx x UV xxxxxx a xxxxx xx zviditelnění. Učiní xx xxxxxxxxx závěry x identitě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx xxx, xx xxxx přítomny xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xxxxxxxx x xxxxxx X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx xxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx x xxxxxxxx.

7. Xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx k xxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx xx nejvhodnější aplikovat xxxx činidlo xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx nedoporučuje.

7.2 Xxxx sloučeniny xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxx x Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Tabulka xxxxx a xxxxxx Xx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xxxxxxxx chromatografie xx xxxxx xxxxxx je xxxxxxx x xxxxx X. xx Xxxxxx, X. A. X. Xxxx, X. X. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx x X. Xxxxxxxx (1987): Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx X: Xxxx-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx the xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx products (X. Xxxxxxxxxxxxxx 410, 395-411).

7.3 Xxxxxxx Xx uvedené x xxxxxxxxxxx tabulce xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které lze xxxxxx:

7.4 X xxxxxxx xxxxxxxx 4-hydroxybenzoové x xxxxxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx nedochází x xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxx být potvrzen xxxxxxx XXXX xxxxxxxx x oddíle X x porovnáním xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

X. XXXXXXXXX

1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx

X xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-fenoxypropan-2-olu, methyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-hydroxybenzoátu, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx v kosmetických xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx se vyjádří x hmotnostních xxxxxxxxxx.

3. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx se xxxxxxx přidáním xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xx suspenduje xx xxxxx xxxxxxxx a xxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx isopropyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

4. Xxxxxxx xxxxxxx

4.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x. a xxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxx xxx XXXX. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

4.2 Ethanol, xxxxxxxxx

4.3 2-Xxxxxxxxxxxxx

4.4 1-Fenoxypropan-2-ol

4.5 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.6 Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (ethylparaben)

4.7 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (propylparaben)

4.8 Isopropyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxx)

4.9 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (butylparaben)

4.10 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.11 Xxxxxxxxxxxxxxx

4.12 Xxxxxxxx

4.13 Xxxxxxxxxxx

4.14 Roztok xxxxxxxx xxxxxx c(H₂SO₄) = 2 mol/l

4.15 Xxxx xxxxxxx/xxxx

Xxxxxx xx xxxxx dílů ethanolu (4.2) a xxxxx xxx xxxx.

4.16 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxx přibližně 0,25 x xxxxxxxxxxxxxxxxx (4.8), xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxx xx 500 xx, xxxxxxxx xx a xxxxxx xx směsí xxxxxxx/xxxx (4.15) xx xxxxx.

4.17 Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx

Xxxxxx se 5 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, 60 xxxx xxxx, 10 xxxx methanolu x 25 xxxx xxxxxxxxxxxx.

4.18 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxx baňky xx 100 ml xx přesně xxxxxx xxxxxxxxx 0,2 x 2-xxxxxxxxxxxxxx, 0,2 g 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxx a 0,025 x benzylparabenu, rozpustí xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx xx xxxxx.

Xxxxxx se uchovává x xxxxxxxx x xx xxxxxxxx 1 xxxxx.

4.19 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxx na 50 xx xx ze xxxxxxxxx xxxxxxx (4.18) xxxxxxx 20,00 ml, 10,00 xx, 5,00 xx, 2,00 ml x 1,00 ml. Xx xxxxx xxxxx xx xxxxx 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.16) a 1,0 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxx (4.14) x xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx na xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx čerstvé.

5. Přístroje x pomůcky

Běžné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x dále:

5.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx teplotu 60 °X ± 1 °X.

5.2 XXXX xxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx 280 xx

5.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxxxxxxxxxx xxxx, délka 25 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 mm (xxxx xxxxx 12,5 xx x vnitřní xxxxxx 4,6 xx), xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx 5C18, xxxx xxxxxxxxxxxxx sorbentem (xxx 10.1).

5.4 Xxxxxxxx zkumavky xx 100 xx xx šroubovacím uzávěrem

5.5 Xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2 xx 4 xx xxxx xxxxxxxxxxxx

6. Xxxxxx

6.1 Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1 Xxxxxxxx vzorku xxx přidání xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx xx 100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx asi 1,0 x xxxxxx. Do xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 1,0 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxx (4.14) a 50,0 xx směsi xxxxxxx/xxxx (4.15). Přidá se xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx kamínků (5.5), xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx nevznikne xxxxxxxxx xxxxxxxx. Protřepává xx xxxxxxx jednu xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xx 5 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.1) x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx studené xxxx x extrakt xx uloží xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 2 xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xx 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx metodou XXXX xx xxxxxxx xx 24 hodin.

6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 xx xx šroubovacím xxxxxxxx xx s xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1,0 x ± 0,1 x xxxxxx.

Xx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 1,0 xx xxxxxxx kyseliny sírové x 40,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx. Přidá xx xxxxxxxxx 1 x varných xxxxxxx (5.5) x xxxxxx 10,00 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Zkumavka xx xxxxxx a xxxxx xx protřepe, xxxxx xxxxxxxxx homogenní xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jednu minutu. Xxxxxxxx xx xxxxx xx 5 minut xx xxxxx xxxxx x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx do ethanolové xxxx.

Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx 5 xx vzorkovací lahvičky (xxxxxxxx roztok). Extrakt xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.

6.2 Xxxxxxxxxxxx kapalinová xxxxxxxxxxxxxx (HPLC)

6.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

- Mobilní fáze: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx (4.17)

- Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5 xx xx minutu

- Xxxxxxxx xxxxxx délka: 280 xx

6.2.2 Kalibrace

Nastříkne xx 10 μx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních přísad (4.19). Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxx píků xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxxxxx xxxxxx k xxxx xxxxxxxxx standardu. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx přísadu xx xxxxxxxx křivka xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx standardních xxxxxxx.

6.2.3 Stanovení

Do xxxxxxxxxxxxx xx nastříkne 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx standardu (6.1.1) x zaznamená xx chromatogram.

Nastříkne se 10 μx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.19) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx porovnají.

Není-li x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku (6.1.1) přítomen xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx retenční xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (doporučený xxxxxxx xxxxxxxx), pokračuje xx nastříknutím 10 μx xxxxxxx xxxxxx x vnitřním xxxxxxxxxx (6.1.2). Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx píků.

Je-li x xxxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx rušivý pík x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx být xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx tuto xxxxxxxxxxx přísadu použít xxxx xxxxxxx standard.

Vypočítají xx poměry xxxxx xxxx vyšetřovaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x výšce xxxx xxxxxxxxx standardu.

Je xxxxx ověřit, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx lineární.

Je xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx získané xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx odděleného xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Definice separace xxxx xx xxxxxxx xx obrázku 1.),

&xxxx;

Xxxxxxx 1: Separace xxxx

Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx by xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx by xxxx být xxxxxxx xxxxxxx fáze upraveno xxx, aby xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

- faktor xxxxxxxxx (Xx) xxxxx xxxxxxxxx píků xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Definice xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx účelem stanovení xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx rychlost posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 xx za xxxxxx,

&xxxx;

Xxxxxxx 2: Xxxxxx asymetrie xxxx

- základna musí xxx xxxxxxxx.

7. Výpočet

Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (6.2.2) x hodnoty xxxxxx xxxxx píků vyšetřovaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx (xx) 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, ethyl 4-hydroxybenzoátu, xxxxxx 4-hydroxybenzoátu, butyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (% x/x) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx:

%x_x(x/x) = x_x / (200 × x)

xxx

xx = koncentrace xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx zkušebním xxxxxxx (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxx křivky x

x = hmotnost xxxxxxxxxx xxxxxx (x).

8. Xxxxxxxxxxxxxx [1]

Xxx xxxxxxxx v xxxx 10.5.

9. Reprodukovatelnost [2]

Xxx xxxxxxxx x xxxx 10.5.

10. Xxxxxxxx

10.1 Xxxxxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx chování xxxxxxxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxxxxx XXXX výrazně xxxxxx xx xxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx fáze. Xxx xxx xxxxxx použít xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad, xxx xxxxxxx x výsledků xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx poznámky x xxxx 6.2.3). Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxx XXX x Xxxxxx ODS.

Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx složení mobilní xxxx.

10.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xx výsledky stanovení.

Tento xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx kontrolován.

10.3 Xxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxx popsaných x této metodě xx eluováno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx množství konzervačních xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx XX směrnice Xxxx týkající xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxx x xxxxx X. xx Kruijf, X. X. X. Xxxx, X. X. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx, X. Xxxxxxxx, (1989): Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx XX. Xxxx-xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx, 469, 317-398).

10.4 Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx vhodnou xxxxxxxxxx.

10.5 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx okružním pokusu, xx němž xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx analyzovány tři xxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx pro xxxxx ze xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x % x/x (m), xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx xxx xxxxxxx, které xxxx xx vzorcích xxxxxxxx:

[1] XXX 5725.

[2] XXX 5725.