Xxxxxxxx Komise 98/64/XX
xx xxx 3. září 1998,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aminokyselin, xxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx 71/393/XXX
(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s ohledem xx Xxxxxxx o xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/EHS xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx vzorků x analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x přistoupení Xxxxxxxx, Xxxxxx a Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx požadavky xxxxxxxxxxx z právních x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se jejich xxxxxxx x složení, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx a analýzy xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx dne 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxx [2], xxxxxxxxx pozměněná směrnicí Xxxxxx 97/47/XX [3], x xxxxxxxx Xxxx 93/74/XXX xx xxx 13. září 1993 x xxxxxxxx určených xx zvláštním účelům xxxxxx [4], naposledy xxxxxxxxx směrnicí 96/25/XX [5], stanoví, xx xxxxx aminokyselin a xxxx musí xxx xxxxxxx na označení xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx směrnice Xxxx 70/524/XXX xx xxx 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx látkách x xxxxxxxx [6], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 98/19/XX [7], xxxxxxx, xx obsah xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx je tato xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, že xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/EHS xx dne 18. xxxxxxxxx 1971, kterou xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [8], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 84/4/EHS [9], xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx; xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx v xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx krmiva,
PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx analýzy xxx xxxxxx kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 2
V příloze xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx xxx "4. Xxxxxxxxx obsahu xxxx" xxxxxxxxx částí X xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 3
1. Xxxxxxx xxxxx uvedou x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 31. xxxxxxxx 1998. Xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxx tyto xxxxxxxx xxxxxxxx xx 1. xxxxx 1999.
Tato xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx tuto směrnici xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxx státy xxxxx Komisi xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx této směrnice.
Článek 4
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Článek 5
Tato xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 3. září 1998.
Xx Xxxxxx
Xxxxx Xxxxxxxx
xxxx Komise
[1] Úř. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Xx. věst. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Xx. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Úř. věst. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Xx. věst. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Úř. věst. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Úř. xxxx. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
XXXXXXX
XXXX A
Stanovení xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx metoda slouží xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (syntetických x xxxxxxxxxxx) x vázaných (xxxxxxx vázané x xxxxx) xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxx aminokyselin. Metoda xx použitelná xxx xxxx aminokyseliny: xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, lysin, xxxxxxxx, xxxxxx, arginin, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamovou, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxx, prolin, xxxxx, tyrosin x xxxxx.
Xxxx metoda xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx formami X x X. Není xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. Princip
2.1 Xxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx aminokyseliny xx extrahují xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Současně xxxxxxxxxxx dusíkaté makromolekuly xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx a odstraňují xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se upraví xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx se separují xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx.
2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx proces xxxxxx xx stanovovaných xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxx(x)xx x xxxxxxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx methioninsulfon. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx aminokyseliny xxxxxxx x bodě 1 mohou xxx xxxxxxxxxx buď v xxxxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx 0 xX směsí kyseliny xxxxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) xx 23 xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx (440 xx pro xxxxxx).
3. Xxxxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx dvakrát xxxxxxxxxxx xxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx &xx; 10 μX).
3.1 xxxxxxx xxxxxx, x = 30 %
3.2 xxxxxxxx mravenčí, x = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 xxxxxxxxx sodný
3.5 xxxxxxxx sodný
3.6 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx
3.7 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 1,18 x/xx
3.8 xxxxxxxx sodný, dihydrát
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)
3.10 xxxxxxx xxxxx
3.11 xxxxxxxxx
3.12 petrolether, xxx varu 40–60 °X
3.13 xxxxxxxxx nebo xxxx sloučenina xxxxxxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx
3.14 xxxxx – plyn (&xx; 10 xxx xxxxxxx)
3.15 1-xxxxxxx
3.16 aminokyseliny
3.16.1 xxxxxxxxxx látky xxxxxxx x xxxx 1; xxxxx sloučeniny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vodu. Vysuší xx xx xxxxx xxx P2O5 xxxx X2XX4 týden před xxxxxxxx
3.16.2 xxxxxxxx cysteová
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 hydroxid xxxxx, xxxxxx x = 7,5 xxx/x:
300 g XxXX (3.5) se xxxxxxxx xx vodě x xxxxxx xx 1 xxxxx.
3.18 hydroxid xxxxx, xxxxxx x = 1 xxx/x:
40 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx ve xxxx a xxxxxx xx 1 litru.
3.19 xxxxxx kyseliny xxxxxxxx x xxxxxx:
Xxxxxx xx 889 x kyseliny xxxxxxxx (3.2) xx 111 g vody x přidá xx 4,73 g xxxxxx (3.3).
3.20 xxxxxxxxxxxx xxxx, x = 6 xxx HCl/l x xxxxxxxxx 1 x xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) xx xxxxx 1 x xxxxxx (3.3) a xxxxxx se xxxxx xx 1 xxxxx.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, c = 6 xxx XXx/x x xxxxxxxxx 2% thiodiglykolu:
8,2 xx XXx (3.7) se xxxxxxx přibližně 900 xx xxxx, přidá xx 20 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9) x xxxxxx xxxxx xx 1 xxxx (3.7 x 3.9 xx xxxxx xxxxxxx přímo).
3.22 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, β = 6 %:
60 x kyseliny 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) xx rozpustí xx vodě a xxxxxx vodou xx 1 xxxx.
3.23 oxidační xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxx – xxxxx):
X xxxx xxxxxxx xx xxxxxx 0,5 ml peroxidu xxxxxx (3.1) s 4,5 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (3.19); xxxxxxx xx v klidu 1 xxxxxx xxx 20–30 °C, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx ochladí v xxxxx s xxxxxxx xxxxx (15 xxxxx).
Xxxxx:
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x kůží x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.
3.24 xxxxxxxxxxx tlumivý xxxxxx, x = 0,2 xxx Xx+/x, pH 2,20:
X xxxxxxxxx 800 xx xxxx xx xxxxxxxx 19,61 x xxxxxxxxx xxxxxxx (3,8), 5 ml thiodiglykolu (3.9), 1 x xxxxxx (3.3) a 16,50 xx XXx (3.7). xX xx xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx xx vodou xx xxxxx 1 xxxxx.
3.25 xxxxxx tlumivé xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 ninhydrinové xxxxxxx připravované podle xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Standardní xxxxxxx aminokyselin. Tyto xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
3.27.1 xxxxxxx standardní xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xxx xxxxxxx x xxxxxxxx připravené.
3.27.2 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxx xxxxxxxx cysteové x xxxxxxxxxxxxxxxx, x = 1,25 μmol/ml
0,2115 g xxxxxxxx cysteové (3.16.2) x 0,2265 x xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx (3.16.3) x citronanovém xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx odměrné xxxxx x doplní xx po značku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx pod 5 °X nejdéle 12 xxxxxx. Tento xxxxxx xx nepoužívá, pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.27.1) obsahuje kyselinu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
3.27.3 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx, c = 20 μxxx/xx
0,6560 x norleucinu (3.13) xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx tlumivém xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xxxxx na 250 xx x doplní xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx pod 5 °X xxxxxxx 6 xxxxxx.
3.27.4 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x x = 10 nmol/50 μl x xxxxxxxxx aminokyselin
Ve 100 xx xxxxxxx xx xxxxxxxx 2,2 x xxxxxxxx xxxxxxx (3.10) x 30 xx citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxxxx xx 4,00 xx xxxxxxxxx standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.27.1), 4,00 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) x 0,50 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx xx používá. xX se upraví xx 2,20 xxxxxxxxxx xxxxxx (3.18).
Roztok xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 50 xx odměrné xxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx se.
Skladuje se xxx teplotě pod 5 °X nejdéle 3 xxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.3.3.1 a xxx extrakty (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx podle 3.27.4 x xxxxxxxxxx chloridu xxxxxxx.
Xxxxxxxxx při teplotě xxx 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 xxxxx s xxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 nebo 250 xx opatřená xxxxxxx xxxxxxxxx
4.2 xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxx, Xxxxxx) xxx xxxxxxx v xxxxxxx
4.3 xxxxxxx x nuceným xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx než ±2 °X
4.4 xX metr (xxx xxxxxxxxx místa)
4.5 xxxxxxxxxx xxxxx (0,2 μx)
4.6 xxxxxxxxxxx
4.7 xxxxxxx xxxxxxx odparka
4.8 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx XXXX x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx derivatizaci x xxxxxxxxxxxxx detektorem.
Kolona xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x separaci xx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx čerpadla xx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xx xxxx zahrnující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx i xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx je možno xxxxxx v případě, xx xxxxxxxxxx vykazuje xxxxxxxxxxx sodíkových xxxxx x = 0,8 xxx/x x obsahuje xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x oxidačního xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx určitých xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx objem xxxxxxxx xxxx xxxxxxx pH xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx 5 xx. Xxxxxxxx xx má xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 40 °C.
5. Postup
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx tak, xxx xxxxxx sítem x oky 0,5 xx. Vzorky x xxxxxxx vlhkostí se xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxx teplotě nepřesahující 50 °X xxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx se před xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.12).
5.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x v premixech
Do xxxxxxx xxxxx se xxxxxx příslušné množství (1–5 x) upraveného xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxx xx 0,2 xx a xxxxx xx 100,0 xx xxxxxxxxx směsi (3.21). Xxxxx se xxxxx 60 minut xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8). Po xxxxxxx sedimentu xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxxxxx do xxxxxxx x xxxxxx 100 xx.
Xx stálého xxxxxxx xx xxxxx 50 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a pokračuje xx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx míchačce xxxxxxx 5 xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx odstředí tak, xxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. 10,0 xx odstředěného roztoku xx přenese xx xxxxxxx x xxxxxx 100 xx, pH xx upraví na 2,20 pomocí roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18), xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx pomocí citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx baňky xxxxxxxxx velikosti a xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Použije-li xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx 1,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) na xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx po xxxxxx tlumivým xxxxxxxx (3.24).
Xxxx xx pokračuje xxxxx xxxx 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx-xx extrakty xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx pod 5 °X.
5.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 oxidace
0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxxxx s xxxxxxxxx 0,2 xx:
- xx xxxxx x kulatým xxxx x obsahu 100 xx (4.1) xxx otevřenou xxxxxxxxx (5.3.2.3) xxxx
- xx xxxxx s xxxxxxx xxxx o xxxxxx 250 ml (4.1), xxxxxxxx-xx xx nízká xxxxxxxxxxx sodíku xxxx
- xx nádoby x xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxxx uzávěrem (4.2) (xxx uzavřenou xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx měla xxx xxxxx dusíku xxx 10 mg x obsah xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 100 xx.
Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x ledovou xxxxx x xxxxxxx xx na 0 °X, xxxxx xx xxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.23) x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Baňka/nádoba xx uzavře i xx lžící xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx x x xxxxx s ledovou xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx 0 °X x xxxxxxx xx xxx 16 hodin. Xx 16 hodinách xx vyjme z xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 x dvojsíranu xxxxxxx (3.4).
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 xxxxxxxxx
5.3.2.1 xxxxxxxxx oxidovaných vzorků
K xxxxxxxxxxx xxxxxx připravenému xxxxx 5.3.1 xx xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) xxx, aby xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xx xxxx 250 ml (4.1) xxxx xx nádoby x xxxxxx100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) xx odváží 0,1 až 1 x upraveného xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxx xx 0,2 xx. Xxxxxxxx xxxx vzorku xx xxxx mít xxxxx xxxxxx xxx 10 mg. Xxxxxxx xx přidá 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) x xxxxxx xx se xxxxxxx. Xxxx xx postupuje xxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx podle 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx hydrolýza
Ke xxxxx x xxxxx (připravené xxxxx 5.3.2.1 nebo 5.3.2.2) xx xxxxxxx 3 skleněné xxxxxxx x xxxx xx xxxxx do xxxxxxx xxxx pod xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 23 hodin. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xx citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxx xx odpojí x xxxxxxx xx x xxxxxx lázni. Xxxx xx postupuje xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx směsí xxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 xx xxxxxx do sušárny (4.3) xxx 110 °X. Aby xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx narůstání xxxxx (x xxxxxxxx vyvíjení xxxxxxxx látek) a xxxxxxx x výbuchu, xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx volně na xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx zašroubuje x xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx (4.3) 23 hodin. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx vyjme xx xxxxxxx, opatrně xx xxxxxxxxxx xxxxxx x postaví xx xx lázně s xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xX (5.3.3) xx obsah xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx x xxxxxx 250 xx xxxx xx xxxxx s xxxxxxx xxxx x obsahu 250 xx.
Xxxx xx xxxxxxxxx podle 5.3.3
5.3.3 xxxxxx pH
Podle xxxx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9), postupujte xxx úpravě pH xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxxxxx koncentraci sodíku:
Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx xx snížit xxxxx xxxxxxx), doporučuje xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx standardní xxxxxx (3.27.3).
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx hydrolyzátu 2,00 xx vnitřního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. se xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).
Xx xxxxxxx xxxxxxx (4.7) xx xxxxx objem na 5-10 ml xx xxxxx xxx 40 °X. Xxxxx xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 5 xx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) x xxxxxxxxx xx podle xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 pro xxxxxxx xxxxxxx analyzátory xxxxxxxxxxxx (4.9)
Hydrolyzáty xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 17 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx (3.17), xx xxxxxxx xxxxxxx x xxx zajištěné xxxxxxx pod 40 °X.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.18) xxx pokojové xxxxxxx. Xxxx xx pokračuje xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) s upraveným xX xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 200 xx a xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xx xxxxxx po značku.
Nebyl-li xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, přidají se 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Xxxxxx-xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxx xxx 5 °C.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxx (5.2) a xxxxxxxxxx (5.3.4) pokojovou xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx x potřebné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx filtrem 0,2 μ (4.5). Xxxxxxxx xxxx roztok xx xxxxxxx xxxxxxxx chromatografii xx xxxxxxxxxxx aminokyselin (4.9).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx, kdy xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx sodíku x xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxx v xxxxxxxxxxxx roztocích a x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx se ředí xxxxxxxxxxxx tlumivým roztokem (3.24) xxx, xxx xxxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxx 30 – 200 % xxxxxx xxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxx liší x xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx i xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X rozsahu xxxxx xxxxxxxx by xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat xx xxxxx xxxxxx aminokyselin xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxx equimolárního roztok xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, by xxxx být dosaženy xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx musí obsahovat xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx přesně xxxxxxxxx xx použitém xxxxxxxxxxx aminokyselin (4.9).
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx by xxxxx xxxxx sedla x xxxxxxx píku xxxxxxx x obou xxxxxxxxxxxxxx xx aminokyselin xx xxxxxxxxxxxxx neměl přesahovat 2:10 (pokud xx xxxxxxx pouze xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nedostatečnou xxxxxxxx přilehlých píků). Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxx xxx 1:10.
Xxxxxx musí zaručit, xx xxxxx bude xxxxxxxxx od "xxxxxxxxxx xxxxxxxx" x ornithinu.
6. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx se množství xxxxxxxxxxxxx x x xx kg vzorku.
g xxxxxxxxxxxxx xx kg xxxxxx = A × X × XX × F / X × X × 1 000
Xx-xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx: X / X
X = plocha xxxx hydrolyzátu xxxx xxxxxxxx
X = plocha xxxx kalibračního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
X = plocha xxxx xxxxxxxxx standardu x hydrolyzátu xxxx x xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx interního xxxxxxxxx x kalibračním xxxxxxxxxxx roztoku
MV = xxxxxxxxxxx xxxx stanovovaných xxxxxxxxxxxx
X = koncentrace xxxxxxxxx x μxxx/xx
X = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (x) (korigovaná xx xxxxxxx váhu xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
X = xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx roztoku (5.3.4) x xx xxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 6.1
Xxxxxx a xxxxxxx xx v hydrolyzátech xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx cystin (X6X12X2X4X2, XX 240,30) x xxxxxxxx XX 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XX xxxxxxxxxx: 149,21.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx výpočet se xxxxxxx xxxxxx XX.
6.1 Xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxxxx (F) xxx xxxxxxxxx volných xxxxxxxxxxxx (5.2) se xxxxxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
X = 100 xx × (10 ml + 5 xx) / 10 ml × X&xxxx;xx / 10xx
X = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7. Vyhodnocení xxxxxx
Xxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx 1990 xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx (krmná xxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxx broilery, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, premix). Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx uvedeny x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxx x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro prasata |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx brojlery |
9,31 x = 16 |
3,92 x = 18 |
5,08 x = 18 |
13,93 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Premix |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
x = počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx vnitrolaboratorní standardní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxxx odchylka (Xx) opakovatelnosti x xxxxxxxxxx v g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs pro xxxxxxx |
0,13 n = 15 |
0,10 x = 17 |
0,11 n = 17 |
0,26 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,20 x = 16 |
0,11 x = 18 |
0,16 x = 18 |
0,28 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,48 n = 16 |
0,13 x = 17 |
0,27 n = 17 |
0,99 x = 15 |
|
Xxxxxx |
1.30 n = 16 |
_ |
2,19 n = 16 |
2,06 x = 16 |
x = xxxxx zúčastněných laboratoří
Variační xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xx)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
1,9 a = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 n =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Krmná xxxx pro brojlery |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Proteinový xxxxxxxxxx |
2,7 x = 16 |
2,6 x = 17 |
2,2 x = 17 |
2,4 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 x = 16 |
- |
2,4 x = 16 |
2,1 x = 16 |
x = počet xxxxxxxxxxxx laboratoří
7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx standardních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x následující xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odchylka (XX) v x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,28 x = 15 |
0,30 n = 17 |
0,23 x = 17 |
0,30 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
0,48 x = 16 |
0,34 x = 18 |
0,55 x = 18 |
0,75 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,85 x = 16 |
0,62 x = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 n = 15 |
|
Premix |
2,49 n = 16 |
- |
6,20 n = 16 |
6,62 n = 16 |
n = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odchylek (XX)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
4,1 x = 15 |
9,9 x = 17 |
7,0 x = 17 |
3,2 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
5,2 x = 16 |
8,8 n = 18 |
10,9 x = 18 |
5,4 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
3,8 x = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 x = 17 |
3,0 n = 15 |
|
Xxxxxx |
4,3 x = 16 |
- |
6,9 n = 16 |
6,7 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
8. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx metody xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx certifikovanými xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx aminokyselin xx xx xxxx xxxxxxx koncentrace kalibračních xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 3.27.4 x 3.27.5) x xxxxxxx xxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx pro všechny xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo ploch xxxx uprostřed xxxxxx xxxxxxx.
9.2 Xxxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx xxxxxxx optimalizovány x xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
9.3 Xxx xxxxxxx této metody x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx než 1 % xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx) xxxx dojít x xxxxxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx postup.
ČÁST B XXXXXXXXX XXXX
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, jejichž xxxxxxxx xx řídí podle xxxxxxxx Rady 136/66/XXX xx dne 22. xxxx 1996.
Podle xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx jeden xx xxxx následujících xxxxxxx:
1.1 Xxxxxx A – xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxx krmiva rostlinného xxxxxx, s výjimkou xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx do okruhu xxxxxxx X.
1.2 Xxxxxx X – xxxxxxx xxx
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx xxx krmiva xxxxxxxxxxx původu x xxx xxxxxxx krmné xxxxx. Xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. xxxxx, xxxxxxxx, bramborové proteiny x xxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx).
1.3 Interpretace xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xx dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx postupem X, než xxxxxxxx X, je xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx xxxxx postupu X.
2. Xxxxxxx
2.1 Postup X
Xxxxxx se extrahuje xxxxxxxxxxxxx. Rozpouštědlo xx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
2.2 Postup B
Vzorek xx xxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xx ochladí x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx 40 x 50 °X. Xxxxxxx bromového xxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1 x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 2 xx/100 xx
3.2 síran xxxxx, xxxxxxx
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, c = 3 mol XXx/x
3.4 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky
4.1 Extrakční xxxxxxxx, xx sifonem (Xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxx 10 xxxxx xx hodinu. X xxxx bez xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx rychlost xxx 10 xx xx xxxxxx.
4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx, bez xxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx, x porositou v xxxxxxx x požadavky xxxxx bodu 4.1.
4.3 Xxxxxxx, xxx vakuová xxxxxxxx na 75 °X ± 3 °X, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 °X ± 3 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxx X (xxx xxx 8.1)
Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx naváží 5 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx (4.2) x xxxxxxxxx smotkem xxxx xxx tuku.
Patrona se xxxxxx xx extrakčního xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx suché, předem xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx úlomky xxxxx [1].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxx xx suší 1,5 xxxxxx v xxxxxxx (4.3). Xxxxx xx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x zváží. Suší xx xxxxxxx 30 xxxxx, aby xx xxxxxxxx, xxx je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx následujícími xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1 xx).
5.2 Xxxxxx X
Xx xxxxxxx x xxxxxx 400 xx xxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 300 xx xx odváží 2,5 x vzorku x xxxxxxxxx xx 1 xx (xxx xxx (8,2) x xxxxx xx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) x xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx přikryje xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx přivede xx xxxxxxx varu xx xxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xx po dobu xxxxx xxxxxx. Během xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xx xxxxxxx x přidá se xxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx ztrátám tuku. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx dojitý filtrační xxxxx zbavený tuku. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, až xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx. Xxxx xxxxxxxxxx ukazuje, xx se xxxxxx xxxx xxxx hydrolýzou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxx X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx položí xx xxxxxxxx xxxx x xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °X ± 3 °X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx extrakční xxxxxxx (4.2) a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx. Patrona xx vloží do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxx xx xxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
7. Opakovatelnost
Rozdíl xx xxxxxxxxxx dvou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx prováděných xx xxxxxxx vzorku xxxxxxx pracovníkem xx xxxxx xxxxxxxxxx:
- 0,2 % x absolutní xxxxxxx, při xxxxxx xxxx xxxxxx než 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx výsledku xxx xxxxxx xx 5 xx 10 %,
- 0,4 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxx 10 %.
8. Xxxxxxxx
8.1 U xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx olejů x xxxx, xxxxx se xxxxxxx xxxx nebo xxxxx neumožňují xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxx xx 20 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx x smíchá xx x 10 xxxx x více xxxxx bezvodého síranu xxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx bodu 5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx 500 xx petroletherem (3.1) x xxxxxxxx se. 50 ml xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx [2].
Rozpouštědlo xx oddestilujte, xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu 5.1.
Xxxxx tuku se xxxxxxxx xxxx procento xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
(10 x + b) × 5
xxx:
x = xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
x = xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x gramech
8.2 X xxxxxxx, které xxxx xxxxx obsah xxxx xx xxxx navážka xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx 5 x.
8.3 Xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx a extrakcí xxxxx postupu B xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
8.4 V xxxx 5.2 se xxxx xx opláchnutí xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
8.5 X xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx 1,5 hod. Xx xxxx xxxxx xxxxxxx přílišnému vysoušení, xxxxx xxxx vést x xxxxxx výsledkům. Xx možno použít x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
8.6 Xxx obsahu xxxx xxx 15 % xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx B. Xxxxxx xx xx xxxxx míry xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxx.
XXXX X
XXXXXXXXX OLACHINDOXU
(2-[N-2-(hydroxyethyl)karbamoyl]-3-methylchinoxalin-N1,N4-dioxid)
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx olachindoxu x xxxxxxxx. Dolní xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx a methanolu. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx vysoce účinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx reverzní xxxx xx použití UV xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxx
3.2 xxxxxxxx, pro HPCL
3.3 xxxx, xxx HPLC
3.4 xxxxxxx xxxx xxx XXXX:
Xxxx vody (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
3.5 xxxxxxxxxx látka: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[N-2-(hydroxyethyl)karbomoyl]-3-methylchinoxalin-N1,N4-dioxid, X 851
3.5.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 250 μx/xx
Xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 200 ml xx xxxxxx 50 mg xxxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx xx 0,1 xx x xxxxx xxx 190 xx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xx 20 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na laboratorní xxxxxxx, xxxxxx vodou xx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx musí připravovat xxxxxxx každý xxxxx.
3.5.2 xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx, 25 μx/xx
10,0 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (3.5.1) xx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 ml, xxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.4) x xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx fólií x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
3.5.3 xxxxxxxxxx roztoky
Do xxxx odměrných xxxxx x obsahu 50 xx xx xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 x 20,0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.2). Xxxxxx xx mobilní xxxx (3.4) xx xxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 x 10,0 μx xxxxxxxxxxx xx xx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 xxxxxxxxxxxx lázeň
4.2 xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.3 xxxxxxxx XXXX x proměnnou xxxxxxx délkou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
4.3.1 xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 mm, xxxxxxx X18, 10 μx, xxxx srovnatelná xxxxxx
4.4 xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx postupy se xxxx provádět xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx krmivo se xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx olachindox xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx krmiva xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx ve xxxxxx K fortifikaci xx xxxxxx 50 xx/xx xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx (3.5.1) xx kónické xxxxx o xxxxxx 250 xx a xxxxxx se xxxxxx xx xxx 0,5 xx. Přidá xx 50 g modelového xxxxxx, řádně se xxxxxxxx x xxxxx xx 10 xxxxx xxxxxx, přičemž xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx přejde x xxxxxxxx (5.2).
Poznámka:
Pro xxxxx xxxx xxxxxx xx xxx modelové xxxxxx podobného typu xxxx zkoušený xxxxxx x xxxxx obsahovat xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx 50 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,01 x. Xxxxxxx se do xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 xx, xxxxx xx 100 xx xxxxxxxxx (3.1) x xxxxx xx xxxxxx xx xxx xxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xxxxx xx 410 xx xxxx a xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Baňka se xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxx 30 xxxxx xx třepačce (4.2) x potom xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. 10,0 ml xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 20 xx, xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xx přefiltruje xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (viz xxx 9. Xxxxxxxx). Xxxx xx pokračuje xxxxxxxxxx HPLC (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx XXXX
5.3.1 Xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx xxxx podmínky, xx xxxxxxxxxxx, xx dávají xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
xxxxxxxxxx kolona (4.3.1)
xxxxxxx xxxx (3,4): Xxxx xxxx (3.3) x methanolu (3.2), 900 + 100 (X + X)
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxx
xxxxxxxx xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx xxxxxxxx: 20 μx–100 μx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μx/xx, xx xx dosáhne konstantních xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx časů.
5.3.2 Kalibrační xxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxx (xxxxx) xxxx kalibračních xxxxxxx jako ordinát x příslušných xxxxxxxxxxx x μx/xx xxxx xxxxxxxxx.
5.3.3 Xxxxxx vzorku
Provede xx několik xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx se xxxxxxx xxxxx (plocha) xxxx xxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx výsledků
Ze xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx koncentrace x xxxxxxx vzorku x μx/xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx grafem (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x x xx/xx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = x × 1&xxxx;000 / x
xxx:
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x μx/xx
x = xxxxxxxx xxxxxxx vzorku x x (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx) xxxxx využitím xxxxxxxxx x xxxxxxxx polem, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3), xxxxxxxxxxxx 5,0 μg/ml xxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (co-chromatography)
Extrakt vzorku (5.2) se obohatí xxxxxxxxx přiměřeného množství xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx mělo odpovídat xxxxxxxx olachindoxu xxxxxxxxxx x extraktu xxxxxx.
X xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx a zředění xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Šířka píku x xxxxxxxx jeho xxxxx musí být x xxxxxxx ±10 % původní šířky xxxx olachindoxu x xxxxxxxxxxxx extraktu vzorku.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xx vyhodnocují xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx xxxxx maximální xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxx zaznamenaný xx vrcholu píku xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx schopností detekčního xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x diodovým polem xx udává ±2 xx;
x) při vlnové xxxxx xxxx 220 x 400 xx xx xxxxx záznam xxxxxxx zkoušeného xxxxxx x standardu xxxxxxxxxxx xx vrcholu xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx maxima x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx spektry xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 nm xx xxxxx spektrum vzestupu, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx ostatních x této částí xxxxxxx v rozsahu 10 až 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx stejná maxima x jestliže xx xxxxx xxxxxxxxxxx bodech xxxxxxxx xxxx spektry xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxx-xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, přítomnost xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx souběžných xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx stejném xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mezi 10 x 20 mg/kg, xxxxx přesáhnout15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx modelový xxxxxx xxxx xxx výtěžnost xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx kruhového testu
V xxxxx ES byl xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx němž až 13 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vzorky xxxxxx xxx selata, včetně xxxxxxx modelového vzorku. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
| xxxxxx 1 |
vzorek 2 |
xxxxxx 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
L |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
A |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
střední (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (mg/kg) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
CVr (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
CVR (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx obsah (mg/kg) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
výtěžnost (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: xxxxx laboratoří
n: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot
Sr: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx
XX: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx xxxxxxxxxx opakovatelnosti
CVR: xxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukovatelnosti
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx tato metoda xxxxxx ověřena xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx 100 xx/xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Pokud xx xx xxx xxxxxxxx zkoušet xx xxxxxxx, zamění xx xxxxxx pemzy za xxxxxxxx kuličky.
[2] Xxxxx xx má tuk xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxx pemzy xx xxxxxxxx xxxxxxx.