Xxxxxxxx Xxxxxx 98/64/XX
xx xxx 3. září 1998,
xxxxxx se stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xx mění xxxxxxxx 71/393/XXX
(Xxxx x xxxxxxxx xxx EHP)
KOMISE XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x ohledem xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 x zavedení xxxxx xxxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro úřední xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x přistoupení Xxxxxxxx, Xxxxxx x Švédska, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx směrnice 70/373/EHS xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx kontroly, zda xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx z právních x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x složení, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx Společenství;
vzhledem x tomu, že xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx dne 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx krmných xxxxx xx xxx [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 97/47/ES [3], x směrnice Xxxx 93/74/XXX ze dne 13. xxxx 1993 x xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx účelům xxxxxx [4], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/ES [5], stanoví, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx musí xxx xxxxxxx xx označení xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx směrnice Rady 70/524/XXX xx dne 23. xxxxxxxxx 1970 x doplňkových xxxxxxx x xxxxxxxx [6], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 98/19/XX [7], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx na xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx přidána do xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971, xxxxxx xx stanoví analytické xxxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [8], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 84/4/XXX [9], xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx mimo xxxx x xxx xxxxxxxxxx xxxxxx tuku; xx xx xxxxxx uvedené xxxxxx upravit;
vzhledem k xxxx, že xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx těchto látek;
vzhledem x tomu, xx xxxxxxxx této směrnice xxxx x xxxxxxx xx stanoviskem Stálého xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxx olachindoxu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx použití xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
X příloze xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx xxx "4. Xxxxxxxxx obsahu tuku" xxxxxxxxx xxxxx X xxxxxxx této směrnice.
Článek 3
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1998. Xxxxxxx x nich xxxxxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxx tyto xxxxxxxx xxxxxxxx xx 1. xxxxx 1999.
Xxxx opatření xxxxxxx členskými xxxxx xxxx obsahovat xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx musí xxx xxxxxx odkaz učiněn xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx ustanovení vnitrostátních xxxxxxxx předpisů, které xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 4
Xxxx směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských společenství.
Xxxxxx 5
Tato směrnice xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 3. září 1998.
Za Xxxxxx
Xxxxx Xxxxxxxx
xxxx Komise
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. věst. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Xx. xxxx. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Úř. věst. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Úř. věst. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Xx. věst. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Úř. věst. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Xx. věst. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
XXXXXXX
XXXX X
Xxxxxxxxx aminokyselin
1. Xxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx slouží xx stanovení xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxx) xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxxxx: cyst(e)in, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, kyselinu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx, histidin, isoleucin, xxxxxx, xxxxxxxxxxx, prolin, xxxxx, xxxxxxx x xxxxx.
Xxxx xxxxxx nerozlišuje xxxx solemi aminokyselin x xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx rozlišovat xxxx xxxxxxx X x X. Xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx aminokyseliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx srážejí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x odstraňují xx xxxxxxxx. Zfiltrovaný xxxxxx xx xxxxxx xx pH 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx po xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx detekcí xxx 570 xx.
2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx závisí xx stanovovaných aminokyselinách. Xxxx(x)xx a xxxxxxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx stanovovat x xxxxxxxxxxxxx neoxidovaných xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx 1 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx 0 xX xxxxx kyseliny xxxxxxxxxxx x fenolu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xx rozloží xxxxxxxxxxx xxxxxx. Oxidovaný xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) po 23 xxxxx. Hydrolyzát xx xxxxxx xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 nm (440 xx xxx xxxxxx).
3. Činidla
Musí xxx xxxxxxx xxxxxxx destilovaná xxxx nebo xxxx xxxxxxx jakosti (vodivost &xx; 10 μX).
3.1 xxxxxxx xxxxxx, w = 30 %
3.2 xxxxxxxx mravenčí, x = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 dvojsíran xxxxx
3.5 xxxxxxxx xxxxx
3.6 kyselina 5-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx
3.7 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 1,18 g/ml
3.8 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)
3.10 xxxxxxx xxxxx
3.11 ninhydrin
3.12 petrolether, xxx xxxx 40–60 °X
3.13 xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx
3.14 xxxxx – plyn (&xx; 10 xxx xxxxxxx)
3.15 1-oktanol
3.16 xxxxxxxxxxxxx
3.16.1 xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x bodě 1; xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xx ve xxxxx xxx X2X5 nebo X2XX4 xxxxx xxxx xxxxxxxx
3.16.2 xxxxxxxx xxxxxxxx
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 hydroxid xxxxx, xxxxxx x = 7,5 mol/l:
300 x XxXX (3.5) se xxxxxxxx xx xxxx x doplní do 1 xxxxx.
3.18 xxxxxxxx xxxxx, roztok x = 1 mol/l:
40 x NaOH (3.5) xx xxxxxxxx xx xxxx a xxxxxx xx 1 xxxxx.
3.19 xxxxxx xxxxxxxx mravenčí x xxxxxx:
Xxxxxx xx 889 x kyseliny xxxxxxxx (3.2) se 111 x vody x přidá xx 4,73 g xxxxxx (3.3).
3.20 hydrolyzační xxxx, x = 6 xxx HCl/l x xxxxxxxxx 1 g xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) se xxxxx 1 x xxxxxx (3.3) x xxxxxx xx vodou xx 1 litru.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, x = 6 mol XXx/x s xxxxxxxxx 2% thiodiglykolu:
8,2 xx XXx (3.7) xx xxxxxxx xxxxxxxxx 900 xx xxxx, xxxxx xx 20 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9) x xxxxxx xxxxx na 1 xxxx (3.7 x 3.9 xx xxxxx smíchat xxxxx).
3.22 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, β = 6 %:
60 x xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) se rozpustí xx xxxx x xxxxxx vodou xx 1 xxxx.
3.23 xxxxxxxx xxxx (kyselina xxxxxxxxxxx – fenol):
V xxxx xxxxxxx xx xxxxxx 0,5 ml peroxidu xxxxxx (3.1) s 4,5 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (3.19); xxxxxxx xx x xxxxx 1 xxxxxx při 20–30 °C, xxx xx utvořila xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx v xxxxx x xxxxxxx xxxxx (15 minut).
Pozor:
Je xxxxx zamezit kontaktu x xxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.
3.24 xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, x = 0,2 xxx Xx+/x, xX 2,20:
X xxxxxxxxx 800 xx vody se xxxxxxxx 19,61 x xxxxxxxxx sodného (3,8), 5 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9), 1 g xxxxxx (3.3) x 16,50 xx XXx (3.7). xX xx xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx xx vodou xx xxxxx 1 xxxxx.
3.25 eluční tlumivé xxxxxxx připravované xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxx použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Tyto xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx při teplotě xxx 5 °C.
3.27.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3.27.2 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx, x = 1,25 μxxx/xx
0,2115 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.16.2) x 0,2265 x xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx (3.16.3) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x doplní xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 12 xxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx nepoužívá, xxxxx xxxxxxxxxx základní roztok (3.27.1) xxxxxxxx kyselinu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
3.27.3 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vnitřního standardu, xxxx. xxxxxxxxxx, x = 20 μxxx/xx
0,6560 x norleucinu (3.13) xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xxxxx na 250 xx a doplní xx xx značku xxxxxxxxxxxx tlumivým roztokem. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx pod 5 °X xxxxxxx 6 xxxxxx.
3.27.4 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μl kyseliny xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x x = 10 xxxx/50 μl x xxxxxxxxx aminokyselin
Ve 100 xx xxxxxxx xx xxxxxxxx 2,2 x xxxxxxxx xxxxxxx (3.10) v 30 xx citronanového tlumivého xxxxxxx (3.24). Přidají xx 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.27.1), 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx cysteové x xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) a 0,50 ml zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx xx používá. xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxxxx xxxxxx (3.18).
Xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx do 50 xx xxxxxxx xxxxx, doplní xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx se.
Skladuje xx xxx xxxxxxx pod 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx aminokyselin xxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx, připravenými podle xxxx 5.3.3.1 a xxx extrakty (5.2). Xxxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxx xxxxx 3.27.4 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx při teplotě xxx 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky
4.1 xxxxx s xxxxxxx xxxx x obsahu 100 xxxx 250 xx opatřená xxxxxxx xxxxxxxxx
4.2 nádoba z xxxxxxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxx, Xxxxxx) pro xxxxxxx x xxxxxxx
4.3 xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx než ±2 °X
4.4 pH xxxx (xxx xxxxxxxxx xxxxx)
4.5 xxxxxxxxxx xxxxx (0,2 μx)
4.6 xxxxxxxxxxx
4.7 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
4.8 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx magnetická xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx XXXX x iontoměničovou xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx kolonovou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, která xxxxxxxx vzájemné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x separaci xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Průtok xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx zajišťují xxxxxxxx xx xxxxxxxx průtoku ± 0,5 % xx dobu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx v xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx iontů x = 0,8 xxx/x a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kyselinu x oxidačního kroku. Xxxx xxxxxxxxxxx nezaručují xxxxxxxxxxx separaci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, obsahuje-li xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mravenčí xxxxxxxx x/xxxx vysoké koncentrace xxxxxxxxxx iontů. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx úpravou pH xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx 5 ml. Xxxxxxxx xx má xxxxxxxx ve vakuu xxx xxxxxxx xxxxxxx 40 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx tak, xxx prošel xxxxx x oky 0,5 xx. Vzorky s xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx teplotě xxxxxxxxxxxxx 50 °C xxxx xxx zmrazení. Vzorky x vysokým xxxxxxx xxxx xx před xxxxxx xxxxxxxxx petroletherem (3.12).
5.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x krmivech x x xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (1–5 g) xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) s xxxxxxxxx xx 0,2 xx x přidá xx 100,0 xx xxxxxxxxx xxxxx (3.21). Xxxxx se třepe 60 xxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxxxxx do xxxxxxx x xxxxxx 100 xx.
Xx xxxxxxx xxxxxxx xx přidá 50 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a pokračuje xx v xxxxxxx xx xxxxxxxxxx míchačce xxxxxxx 5 minut. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx tak, xxx se odstranila xxxxxxx xxxxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx roztoku xx přenese xx xxxxxxx x xxxxxx 100 ml, xX xx xxxxxx xx 2,20 pomocí xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18), xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx velikosti x xxxxxx po značku xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Použije-li xx interní standard, xxxxx xx 1,00 xx xxxxxxxxx standardu (3.27.3) xx xxxxxxx 100 xx odstředěného xxxxxxx a xxxxx xx doplní po xxxxxx tlumivým roztokem (3.24).
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx-xx extrakty xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx xx při xxxxxxx pod 5 °X.
5.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 oxidace
0,1 až 1 g xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,2 xx:
- xx xxxxx s kulatým xxxx x xxxxxx 100 xx (4.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.3.2.3) nebo
- xx xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 250 ml (4.1), xxxxxxxx-xx xx nízká xxxxxxxxxxx sodíku xxxx
- xx xxxxxx o xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) (xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Odvážená část xxxxxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 xx x xxxxx vlhkosti xxxxxxxxxxxxx 100 mg.
Baňka/nádoba xx umístí xx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x ochladí xx na 0 °X, xxxxx xx xxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.23) x xxxxxxxx se xxxxxxxxx lžící xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx/xxxxxx xx uzavře x xx xxxxx vzduchotěsnou xxxxx x xxxxx xx i s xxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx 0 °X x ponechá se xxx 16 xxxxx. Xx 16 hodinách xx xxxxx z xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 x dvojsíranu sodného (3.4).
Xxxx xx pokračuje xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 xxxxxxxxx
5.3.2.1 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
X xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.1 xx xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) xxx, xxx xxxxxxx xxxxx vzorek xx xxxxxxx nádoby xxx xx xxxxx. Podle xxxxxxxxx postupu xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podle 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxx s xxxxxxx xxxx x obsahu 100 xx xxxx 250 xx (4.1) xxxx do xxxxxx x xxxxxx100 ml xx šroubovacím xxxxxxxx (4.2) se odváží 0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxx xx 0,2 mg. Xxxxxxxx xxxx vzorku xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 xx. Xxxxxxx xx přidá 25 xx hydrolyzační xxxxx (3.20) a xxxxxx xx xx vzorkem. Xxxx se xxxxxxxxx xxx podle 5.3.2.3 xxxx xxxxx 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx směsi x xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2) xx xxxxxxx 3 xxxxxxxx xxxxxxx x směs xx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx zpětným xxxxxxxxx xx xxxx 23 xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xx citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xx x xxxxxx lázni. Xxxx xx postupuje xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx podle 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 xx xxxxxx xx xxxxxxx (4.3) při 110 °X. Xxx xx xxxxx xxxxx hodiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxx k xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx volně xx xxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx hodiny xx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx (4.3) 23 xxxxx. Xx xxxxxxxx hydrolýzy xx baňka vyjme xx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xX (5.3.3) xx xxxxx baňky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx x xxxxxx 250 xx xxxx do xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 250 ml.
Dále xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3
5.3.3 xxxxxx xX
Xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx má xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9), postupujte xxx xxxxxx xX xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 xxx chromatografické xxxxxxx (4.9), vyžadující xxxxxx xxxxxxxxxxx sodíku:
Pokud xxxxxxxxxx aminokyselin vyžaduje xxxxxx koncentraci xxxxxx (xx-xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx), doporučuje xx použít xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx roztok (3.27.3).
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx odpařováním xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Xx hydrolyzátu xxxxxxxxxx podle 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. xx xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).
Xx rotační xxxxxxx (4.7) se xxxxx objem xx 5-10 xx za xxxxx xxx 40 °X. Xxxxx xx xx objem xxxxxxx xxxxxx pod 5 xx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx.
xX xx upraví xx 2,20 roztokem xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 xxx xxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9)
Hydrolyzáty xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4 se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 17 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.17), xx stálého xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 40 °X.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) xxx xxxxxxxx teplotě. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 nebo 5.3.3.2) s xxxxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí citronanového xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 200 xx x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xx xxxxxx xx značku.
Nebyl-li xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, přidají se 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx se xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Nejsou-li xxxxxxx xxxxxx analyzovány xxx xxx, uschovávají xx xxx teplotě pod 5 °X.
5.4 Chromatografie
Před xxxxxxxxxxxxxx xxxx mít xxxxxxx (5.2) x xxxxxxxxxx (5.3.4) pokojovou xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx a potřebné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx filtrem 0,2 μ (4.5). Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx analyzátoru xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxxxxxx lze xxxxxxx xxxxx xxxx automaticky. Xxxxxx je důležité, xxx se na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % jak xxx xxxxxxx standardů xxx xxxxxx x xxxxxxxx, kdy xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxx x aminokyselinám by xxx xxx v xxxxxxxxxxxx roztocích a x roztocích xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx hlavně xx stabilitě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x analytického xxxxxxx. Xxxxxxxx nebo xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx (3.24) xxx, aby xxxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxx 30 – 200 % plochy xxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx liší x xxxxxxxxxx xx typu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ionexu. Zvolený xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X rozsahu xxxxx xxxxxxxx by xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx aminokyselin, xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxx uvedené poměry xxxxx x vrcholu xxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx xxxxxx jednotlivých xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).
Při xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx by poměr xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx x obou xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx neměl přesahovat 2:10 (xxxxx xx xxxxxxx pouze xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, threonin x xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nedostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx). Xxx xxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxx než 1:10.
Xxxxxx musí zaručit, xx lysin xxxx xxxxxxxxx od "xxxxxxxxxx xxxxxxxx" a xxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx se xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v x xx xx xxxxxx.
x xxxxxxxxxxxxx na xx xxxxxx = X × X × XX × X / X × X × 1 000
Xx-xx použit interní xxxxxxxx, násobí se xxxxxxxx: X / X
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx standardního xxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x extraktu
D = xxxxxx píku interního xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku
MV = xxxxxxxxxxx váha xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
X = koncentrace xxxxxxxxx x μxxx/xx
X = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (g) (korigovaná xx xxxxxxx xxxx xxxxx xx vzorek xxxxxxx nebo xxxxxxxx)
X = celkový xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.3.4) x ml xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx podle 6.1
Xxxxxx x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxx xxxxxxxx cysteová, xxx vypočítávají se xxxx xxxxxx (C6H12N2O4S2, XX 240,30) x xxxxxxxx XX 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx oxidovaného xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx, xxx vypočítává se xxxx methionin x xxxxxxxx MV xxxxxxxxxx: 149,21.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxx výpočet xx xxxxxxx xxxxxx MV.
6.1 Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (F) xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
X = 100 xx × (10 ml + 5 ml) / 10 xx × X&xxxx;xx / 10xx
X = objem xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7. Vyhodnocení xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx porovnáním xx xxxxxxxxxxx úrovni x xxxx 1990 xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx (krmná xxxx xxx xxxxxxx, krmná xxxx xxx broilery, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, premix). Xx vyloučení xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxx x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx brojlery |
9,31 n = 16 |
3,92 n = 18 |
5,08 x = 18 |
13,93 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Xxxxxx |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx je dána xxxxxxxxxxx tabulkou:
standardní xxxxxxxx (Xx) xxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
0,13 n = 15 |
0,10 x = 17 |
0,11 x = 17 |
0,26 x = 13 |
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxxx |
0,20 x = 16 |
0,11 x = 18 |
0,16 x = 18 |
0,28 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,48 n = 16 |
0,13 n = 17 |
0,27 x = 17 |
0,99 n = 15 |
|
Xxxxxx |
1.30 n = 16 |
_ |
2,19 x = 16 |
2,06 x = 16 |
n = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
Variační xxxxxxxxxx (%) vnitrlaboratorních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Sr)
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
1,9 x = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 x =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
2,7 n = 16 |
2,6 x = 17 |
2,2 n = 17 |
2,4 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 n = 16 |
- |
2,4 n = 16 |
2,1 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx standardních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx shora xxxxxxxxx zkoušek xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odchylka (XX) x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,28 x = 15 |
0,30 n = 17 |
0,23 x = 17 |
0,30 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
0,48 x = 16 |
0,34 n = 18 |
0,55 x = 18 |
0,75 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,85 x = 16 |
0,62 x = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,49 n = 16 |
- |
6,20 x = 16 |
6,62 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) mezilaboratorních xxxxxxxxxxxx odchylek (SR)
|
Referenční xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
4,1 n = 15 |
9,9 n = 17 |
7,0 x = 17 |
3,2 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
5,2 x = 16 |
8,8 x = 18 |
10,9 n = 18 |
5,4 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
3,8 x = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 n = 17 |
3,0 x = 15 |
|
Xxxxxx |
4,3 x = 16 |
- |
6,9 x = 16 |
6,7 x = 16 |
n = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
8. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálů
Správné xxxxxxx uvedené xxxxxx xx ověřuje xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx referenčních xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxx certifikovanými kalibračními xxxxxxx aminokyselin.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx aminokyselin xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx kalibračních xxxxxxx xxxxxxxxx aminokyselin (xxx 3.27.4 a 3.27.5) x xxxxxxx xxxxxx (5.3.4) považovat xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx roztok se xxxx citronanovým tlumivým xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx tohoto xxxxxxx.
9.2 Pokud xx x xxxxxxx hydrolyzátů xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
9.3 Xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x krmiv obsahujících xxxx xxx 1 % xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx krmiva, xxxxxxxxx xxxxxx) může xxxxx x podhodnocení obsahu xxxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxx.
XXXX B XXXXXXXXX XXXX
1. Účel x xxxxxx použití
Touto xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, jejichž xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxx 136/66/EHS xx dne 22. xxxx 1996.
Podle xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxx analýzu xxxxxxx xxxxx xx xxxx následujících xxxxxxx:
1.1 Xxxxxx X – xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxx xxxxxx rostlinného xxxxxx, x výjimkou xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx okruhu xxxxxxx B.
1.2 Xxxxxx X – xxxxxxx xxx
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx předchozí xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx, xxxxxxxx, bramborové xxxxxxxx x výrobky, xxxxx xxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx).
1.3 Interpretace xxxxxxxx
Xx všech xxxxxxxxx, xxx xx dosáhlo xxxxxxx výsledku xxxxxxxx X, xxx postupem X, xx xxxxx xxxxxxxxx xx platnou xxxxxxx xxxxx postupu X.
2. Princip
2.1 Xxxxxx X
Xxxxxx xx extrahuje xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x zbytek xx xxxxxx a xxxxx.
2.2 Xxxxxx B
Vzorek xx xxxxxxx x xxxxxxxxx chlorovdíkovou. Xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Promytý a xxxxxxx xxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx A.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxxxxx x bodem xxxx xxxx 40 x 50 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1 a xxxxxx xx odpařování xxxxx xxx 2 xx/100 xx
3.2 xxxxx xxxxx, xxxxxxx
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 3 mol XXx/x
3.4 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, např. xxxxxxxxx, Hyflo-supercel.
4. Přístroje x pomůcky
4.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxx 10 xxxxx xx hodinu. X xxxx bez xxxxxx by měla xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 ml xx xxxxxx.
4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx, bez látek xxxxxxxxxxx x petroletheru, x porositou x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx bodu 4.1.
4.3 Xxxxxxx, buď xxxxxxx xxxxxxxx xx 75 °X ± 3 °X, xxxx horkovzdušná xxxxxxxx xx 100 °X ± 3 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxx X (xxx xxx 8.1)
Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx 5 x vzorku x xxxxxxxxx xx 1 xx (4.2) x xxxxxxxxx xxxxxxx vaty xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xx extrakčního xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx suché, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx [1].
Xxxxxxxxxxxx se oddestiluje, xxxxxx v xxxxx xx suší 1,5 xxxxxx x sušárně (4.3). Nechá se xxxxxxxxxxx v exsikátoru x xxxxx. Xxxx xx dalších 30 xxxxx, xxx xx xxxxxxxx, zda je xxxxxxxx xxxx konstantní (xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být menší xxx 1 xx).
5.2 Xxxxxx B
Do xxxxxxx x xxxxxx 400 xx xxxx do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 300 ml xx xxxxxx 2,5 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx (xxx xxx (8,2) x přidá xx 100 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.3) x xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx přikryje xxxxxxxxx sklem nebo xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx přivede xx mírného varu xx xxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxx a xxxx xx xx xxxx xxxxx hodiny. Xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxx se xxxxxxx x přidá xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx tuku. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxxx neutrální xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx tuk. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxx xxxx hydrolýzou xxxxxxxxxx petroletherem xxxxx xxxxxxx X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °C ± 3 °X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx zbytkem xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx smotkem xxxx xxx tuku. Patrona xx vloží do xxxxxxxxxxx přístroje (4.1) x xxxx xx xxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx procento xx vzorku.
7. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx stejném xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx přesáhnout:
- 0,2 % x absolutní xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxx než 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx od 5 xx 10 %,
- 0,4 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, při xxxxxx xxx 10 %.
8. Xxxxxxxx
8.1 X xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx olejů a xxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx neumožňují xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorek, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxx xx 20 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx x xxxxxx xx s 10 xxxx i více xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx bodu 5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxx na 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx xx. 50 xx xxxxxxx xx odpipetuje do xxxx suché, předem xxxxxxx xxxxx, obsahující xxxxxx xxxxx [2].
Xxxxxxxxxxxx xx oddestilujte, xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu 5.1.
Xxxxx tuku xx xxxxxxxx jako procento xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:
(10 x + b) × 5
xxx:
x = hmotnost xxxxxx xx první xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
x = hmotnost xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx
8.2 X xxxxxxx, které xxxx xxxxx xxxxx xxxx xx může xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx 5 g.
8.3 Xxxxxx xxx domácí xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx, xx musí xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
8.4 X xxxx 5.2 xx xxxx xx opláchnutí xxxxxx xx filtraci xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx místo xxxx xxxxxxx.
8.5 U xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx sušení xxx 1,5 xxx. Xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx může xxxx x xxxxxx výsledkům. Xx možno xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
8.6 Xxx obsahu tuku xxx 15 % xx doporučuje xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx postupu X x následně extrakci xxxxx xxxxxxx X. Xxxxxx to xx xxxxx xxxx na xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxx.
XXXX C
STANOVENÍ XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx metodou xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x krmivech. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 mg/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx účinnou xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX) xx xxxxxxxx fázi xx xxxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 xxxxxxxx
3.2 xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 xxxx, xxx XXXX
3.4 xxxxxxx fáze xxx XXXX:
Xxxx xxxx (3.3) x methanolu (3.2), 900 + 100 (X + X)
3.5 xxxxxxxxxx látka: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx, X 851
3.5.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx, 250 μg/ml
Do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 200 xx xx xxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx na 0,1 xx a xxxxx xxx 190 ml xxxx. Xxxxx xx xxxxxxx na 20 xxxxx xx ultrazvukové xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx x ultrazvukové xxxxx xx roztok xxxxxxx na laboratorní xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Baňka se xxxxx hliníkovou xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xx musí připravovat xxxxxxx xxxxx měsíc.
3.5.2 xxxxxxxx standardní roztok xxxxxxxxxxx, 25 μg/ml
10,0 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (3.5.1) xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 ml, xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.4) a xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx x chladničce. Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx denně xxxxxxx.
3.5.3 xxxxxxxxxx roztoky
Do xxxx xxxxxxxxx xxxxx x obsahu 50 xx xx odpipetuje 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 x 20,0 xx pracovního xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.2). Xxxxxx xx xxxxxxx xxxx (3.4) po xxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 x 10,0 μx xxxxxxxxxxx xx xx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxx připravovat denně xxxxxxx.
4. Přístroje a xxxxxxx
4.1 xxxxxxxxxxxx lázeň
4.2 xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.3 zařízení XXXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pole
4.3.1 xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 xx, xxxxxxx C18, 10 μx, nebo srovnatelná xxxxxx
4.4 xxxxxxxxxx xxxxxx x póry 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx je xxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle xxxx x nádobách x xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx se xxxx předem xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx olachindox xxxx xxxx interferující xxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx xx výtěžnost xx provede analýzou xxxxxxxxxx xxxxxx obohaceného xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx X xxxxxxxxxxx xx xxxxxx 50 xx/xx xx xxxxxxxxxx 10,0 xx zásobního xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx (3.5.1) do kónické xxxxx x xxxxxx 250 ml a xxxxxx xx odpaří xx xxx 0,5 xx. Xxxxx xx 50 x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx x nechá xx 10 xxxxx xxxxxx, přičemž xx xxxxx několikrát xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx (5.2).
Poznámka:
Pro xxxxx xxxx metody xx být xxxxxxxx xxxxxx podobného xxxx xxxx zkoušený xxxxxx x nesmí xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Extrakce
Naváží se xxxxxxxxx 50 g xxxxxx s xxxxxxxxx xx 0,01 g. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx xx 100 xx xxxxxxxxx (3.1) x xxxxx se xxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Přidá xx 410 xx xxxx x ponechá xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, dále se xxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx filtrem. 10,0 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 20 ml, xxxxxx se xxxxx xx značku a xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xx přefiltruje membránovým xxxxxxx (4.4) (xxx xxx 9. Xxxxxxxx). Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXXX (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx HPLC
5.3.1 Parametry:
Následující xxxxxxxx xxxx doporučené, xxxxx být použity xxxx xxxxxxxx, za xxxxxxxxxxx, xx dávají xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
xxxxxxxxxx kolona (4.3.1)
xxxxxxx xxxx (3,4): Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxx
xxxxxxxx xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx xxxxxxxx: 20 μx–100 μx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se zkontroluje xxx, xx xx xxxxxxxxxx nastříkne kalibrační xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μx/xx, xx xx xxxxxxx konstantních xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx.
5.3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx kalibrační xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx nástřiků x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Sestrojí xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx výšek (xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jako ordinát x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x μx/xx xxxx xxxxxxxxx.
5.3.3 Roztok xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx nástřiků xxxxxxxx xxxxxx (5.2) xxx použití xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xx střední xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx výsledků
Ze xxxxxxx hodnoty výšky (xxxxxx) xxxx olachindoxu x roztoku vzorku xx xxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx xxxxxxxxxx x kalibračním xxxxxx (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x v xx/xx je xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = x × 1&xxxx;000 / m
kde:
c = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x μx/xx
x = xxxxxxxx navážky vzorku x g (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx opakovaným stanovením x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x diodovým xxxxx, xxxxxxx xx porovnávají xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2) a kalibračního xxxxxxx (3.5.3), obsahujícího 5,0 μg/ml olachindoxu.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx)
Xxxxxxx xxxxxx (5.2) xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx olachindoxu xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx olachindoxu xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx xx přidané xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx musí xxx x xxxxxxx ±10 % původní xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) při xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx musí xxx xxxxxx spektra zaznamenaný xx vrcholu xxxx xx chromatogramu xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx udává ±2 xx;
x) při vlnové xxxxx mezi 220 x 400 xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx zkoušeného vzorku x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vrcholu xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx je dosaženo, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nikde xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 a 350 xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x této xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx 10 až 100 % relativní xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria je xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx stejná xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx sledovaných bodech xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx vrcholu píku.
Není-li xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx potvrzena.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxxx mezi 10 x 20 xx/xx, xxxxx xxxxxxxxxx15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorek xxxx být výtěžnost xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
X xxxxx ES xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx němž xx 13 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vzorky xxxxxx xxx selata, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku. Xxxxxxxx jsou xxxxxxx x xxxxxxxxxxx tabulce:
|
| xxxxxx 1 |
vzorek 2 |
xxxxxx 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
X |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
X |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
xxxxxxx (mg/kg) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Sr) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (xx/xx) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
XXx (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
CVR (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
xxxxxxxxx (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: počet xxxxxxxxxx
x: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot
Sr: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx koeficient opakovatelnosti
CVR: xxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukovatelnosti
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx tato metoda xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx obsahující více xxx 100 xx/xx xxxxxxxxxxx, je možné xxxxxxx uspokojivé výsledky xxxxx navážkou xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) tak, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x rozsahu xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Xxxxx xx má tuk xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, zamění xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
[2] Pokud xx má xxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx pemzy za xxxxxxxx xxxxxxx.