Xxxxxxxx Xxxxxx 98/64/XX
xx xxx 3. xxxx 1998,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxx x krmivech a xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx 71/393/XXX
(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x ohledem xx Smlouvu o xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. července 1970 o xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx krmiv [1], xxxxxxxxx pozměněnou Xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxxxxx, Xxxxxx x Švédska, x zejména xx xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx požadavky xxxxxxxxxxx x právních x správních xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx dne 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxx [2], xxxxxxxxx pozměněná směrnicí Xxxxxx 97/47/ES [3], x směrnice Rady 93/74/XXX ze xxx 13. xxxx 1993 x xxxxxxxx určených xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx [4], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/XX [5], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx musí xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx Xxxx 70/524/XXX xx dne 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx látkách x xxxxxxxx [6], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 98/19/XX [7], xxxxxxx, xx obsah xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx na xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx druhá xxxxxxxx Komise 71/393/XXX xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971, xxxxxx xx xxxxxxx analytické xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [8], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 84/4/EHS [9], xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx jiné x xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx; že xx xxxxxx uvedené xxxxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství pro xxxxxxxx těchto xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx této směrnice xxxx x xxxxxxx xx stanoviskem Stálého xxxxxx pro xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, že analýzy xxx úřední kontrolu xxxxxx aminokyselin, xxxx x obsahu olachindoxu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 2
X xxxxxxx xxxxxxxx Komise 71/393/XXX xx bod "4. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx" xxxxxxxxx xxxxx B xxxxxxx xxxx směrnice.
Článek 3
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1998. Xxxxxxx x xxxx neprodleně Xxxxxx.
Xxxxx xxxx předpisy xxxxxxxx od 1. xxxxx 1999.
Xxxx opatření xxxxxxx členskými státy xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxx xxxxx učiněn xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Způsob xxxxxx xx stanoví členské xxxxx.
2. Xxxxxxx státy xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx předpisů, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Článek 5
Tato xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 3. září 1998.
Za Xxxxxx
Xxxxx Fischler
člen Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Úř. věst. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Úř. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Xx. věst. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Xx. věst. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Xx. xxxx. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Xx. věst. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. věst. X 15, 18.1.1984, x. 28.
PŘÍLOHA
ČÁST X
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx slouží xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (syntetických a xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxx) xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxx aminokyseliny: xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, lysin, threonin, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxx, prolin, xxxxx, xxxxxxx x xxxxx.
Xxxx metoda nerozlišuje xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x nemůže xxxx x aminokyselin xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx X x X. Xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx aminokyselin.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxx aminokyseliny
Volné aminokyseliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx dusíkaté makromolekuly xx srážejí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx a odstraňují xx filtrací. Zfiltrovaný xxxxxx xx xxxxxx xx pH 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx chromatografií x xxxxxxx xx xx xxxxxx s ninhydrinem xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx.
2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxx(x)xx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx x hydrolyzátech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx 1 mohou být xxxxxxxxxx buď v xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxx při 0 xX xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx dvojsíranem xxxxxx. Xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx vzorek se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chlorovodíkovou (x = 6 xxx/x) xx 23 xxxxx. Hydrolyzát se xxxxxx na xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx se xx reakci x xxxxxxxxxxx fotometrickou detekcí xxx 570 xx (440 xx xxx xxxxxx).
3. Činidla
Musí xxx xxxxxxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx &xx; 10 μS).
3.1 xxxxxxx xxxxxx, x = 30 %
3.2 xxxxxxxx mravenčí, w = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 xxxxxxxxx sodný
3.5 xxxxxxxx xxxxx
3.6 kyselina 5-xxxxxxxxxxxxxxx, dihydrát
3.7 kyselina xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 1,18 g/ml
3.8 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)
3.10 xxxxxxx xxxxx
3.11 xxxxxxxxx
3.12 xxxxxxxxxxx, xxx xxxx 40–60 °X
3.13 xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx
3.14 xxxxx – plyn (&xx; 10 xxx xxxxxxx)
3.15 1-xxxxxxx
3.16 xxxxxxxxxxxxx
3.16.1 xxxxxxxxxx xxxxx uvedené x xxxx 1; xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xx xx vakuu xxx X2X5 xxxx X2XX4 xxxxx xxxx xxxxxxxx
3.16.2 xxxxxxxx xxxxxxxx
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 hydroxid xxxxx, xxxxxx c = 7,5 xxx/x:
300 x XxXX (3.5) se xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xx 1 litru.
3.18 hydroxid xxxxx, xxxxxx x = 1 mol/l:
40 x NaOH (3.5) xx xxxxxxxx xx xxxx x doplní xx 1 xxxxx.
3.19 xxxxxx xxxxxxxx mravenčí x xxxxxx:
Xxxxxx xx 889 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xx 111 g xxxx x xxxxx xx 4,73 g xxxxxx (3.3).
3.20 hydrolyzační xxxx, x = 6 xxx XXx/x x xxxxxxxxx 1 x xxxxxx/x:
X 492 ml XXx (3.7) se xxxxx 1 g xxxxxx (3.3) a xxxxxx se vodou xx 1 litru.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, x = 6 xxx XXx/x s přídavkem 2% xxxxxxxxxxxxx:
8,2 xx XXx (3.7) xx xxxxxxx xxxxxxxxx 900 xx xxxx, přidá xx 20 ml xxxxxxxxxxxxx (3.9) x xxxxxx xxxxx xx 1 xxxx (3.7 x 3.9 xx xxxxx smíchat xxxxx).
3.22 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, β = 6 %:
60 x xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) xx rozpustí xx vodě a xxxxxx xxxxx xx 1 xxxx.
3.23 oxidační xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxx – xxxxx):
X malé xxxxxxx xx xxxxxx 0,5 xx peroxidu xxxxxx (3.1) x 4,5 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx (3.19); ponechá xx x xxxxx 1 hodinu xxx 20–30 °X, aby xx utvořila kyselina xxxxxxxxxxx, před xxxxxxxx xx xxxxxx se xxxx xxxxxxx v xxxxx x xxxxxxx xxxxx (15 minut).
Pozor:
Je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x kůží x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.
3.24 xxxxxxxxxxx tlumivý xxxxxx, x = 0,2 xxx Xx+/x, xX 2,20:
X xxxxxxxxx 800 xx xxxx xx xxxxxxxx 19,61 x xxxxxxxxx sodného (3,8), 5 xx thiodiglykolu (3.9), 1 g xxxxxx (3.3) x 16,50 xx XXx (3.7). xX xx xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx xx xxxxx xx objem 1 xxxxx.
3.25 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx připravované xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 ninhydrinové xxxxxxx připravované podle xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Xxxxxxxxxx xxxxxxx aminokyselin. Xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
3.27.1 xxxxxxx standardní základní xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx xxx každou xxxxxxxxxxxxx v kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Tento xxxxxx xxx obdržet i xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3.27.2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx, c = 1,25 μxxx/xx
0,2115 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.16.2) x 0,2265 g xxxxxxxxxxxxxxxx se rozpustí (3.16.3) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x litrové odměrné xxxxx a xxxxxx xx po značku xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx při xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 12 xxxxxx. Xxxxx roztok xx nepoužívá, pokud xxxxxxxxxx základní xxxxxx (3.27.1) obsahuje kyselinu xxxxxxxxx x methioninsulfon.
3.27.3 xxxxxxx standardní xxxxxxxx xxxxxx vnitřního xxxxxxxxx, xxxx. norleucinu, c = 20 μxxx/xx
0,6560 x xxxxxxxxxx (3.13) xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztoku (3.24) x odměrné xxxxx na 250 xx a xxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx se při xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 6 xxxxxx.
3.27.4 kalibrační xxxxxx xxxxxxxxxxxx aminokyselin xxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μl xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x x = 10 xxxx/50 μl x ostatních aminokyselin
Ve 100 xx xxxxxxx xx rozpustí 2,2 x xxxxxxxx xxxxxxx (3.10) x 30 xx citronanového tlumivého xxxxxxx (3.24). Xxxxxxx xx 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.27.1), 4,00 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx cysteové x xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) a 0,50 xx zásobního xxxxxxxxxxxx základního roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx xx používá. xX se xxxxxx xx 2,20 hydroxidem xxxxxx (3.18).
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 50 xx xxxxxxx xxxxx, doplní xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xx.
Xxxxxxxx xx xxx teplotě pod 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 kalibrační xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx použití x xxxxxxxxxxx, připravenými xxxxx xxxx 5.3.3.1 a xxx extrakty (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx 3.27.4 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx teplotě xxx 5 °C xxxxxxx 3 xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
4.1 xxxxx x kulatým xxxx o xxxxxx 100 nebo 250 xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx
4.2 xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxx uzávěrem x xxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxx, Schott) pro xxxxxxx v xxxxxxx
4.3 xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx a tepelnou xxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxx xxx ±2 °X
4.4 pH xxxx (xxx xxxxxxxxx xxxxx)
4.5 xxxxxxxxxx filtr (0,2 μx)
4.6 xxxxxxxxxxx
4.7 rotační xxxxxxx xxxxxxx
4.8 mechanická xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx zařízení XXXX x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx derivatizaci x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, která xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x separaci xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek. Průtok xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xx dobu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx vzorku.
Některé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodíkových xxxxx x = 0,8 xxx/x x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kyselinu x xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx analyzátory nezaručují xxxxxxxxxxx separaci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, obsahuje-li xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kyselinu x/xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx iontů. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx objem kyseliny xxxx xxxxxxx xX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx 5 ml. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 40 °C.
5. Postup
5.1 Xxxxxxxx vzorku
Vzorek se xxxxxx xxxxxx xxx, xxx prošel xxxxx x oky 0,5 xx. Xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °X xxxx xxx zmrazení. Xxxxxx x vysokým xxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.12).
5.2 Xxxxxxxxx volných xxxxxxxxxxxx x krmivech x v xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx baňky xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (1–5 x) xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) s xxxxxxxxx xx 0,2 xx x xxxxx xx 100,0 ml xxxxxxxxx xxxxx (3.21). Xxxxx xx xxxxx 60 xxxxx na xxxxxxxxxx třepačce nebo xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxxxxx do xxxxxxx x xxxxxx 100 xx.
Xx stálého míchání xx přidá 50 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a pokračuje xx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx odstranila xxxxxxx xxxxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x obsahu 100 ml, xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.18), xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx odměrné baňky xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24).
Použije-li xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx 1,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) xx xxxxxxx 100 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x potom xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24).
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx den, xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
5.3 Xxxxxxxxx celkových xxxxxxxxxxxx
5.3.1 xxxxxxx
0,1 až 1 g xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,2 xx:
- xx xxxxx x kulatým xxxx x xxxxxx 100 ml (4.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.3.2.3) nebo
- xx xxxxx x kulatým xxxx x xxxxxx 250 ml (4.1), xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx sodíku nebo
- xx xxxxxx x xxxxxx 100 ml xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) (pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Odvážená část xxxxxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 xx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 100 xx.
Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xx 0 °X, xxxxx xx xxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.23) x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx lžící xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx i x xxxxx x xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx xxx 0 °C x xxxxxxx xx xxx 16 xxxxx. Xx 16 hodinách xx xxxxx x xxxxxxxxxx x přebytečné xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx přidáním 0,84 x dvojsíranu xxxxxxx (3.4).
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 hydrolýza
5.3.2.1 xxxxxxxxx oxidovaných xxxxxx
X xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.1 xx xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) xxx, xxx neulpěl xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podle 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxx x kulatým xxxx x obsahu 100 xx xxxx 250 xx (4.1) xxxx xx xxxxxx x xxxxxx100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) xx xxxxxx 0,1 až 1 x upraveného vzorku (5.1) s přesností xx 0,2 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx mít xxxxx xxxxxx xxx 10 xx. Xxxxxxx xx přidá 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) a xxxxxx xx xx vzorkem. Xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx podle 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx x baňce (xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 nebo 5.3.2.2) xx xxxxxxx 3 xxxxxxxx kuličky x xxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx zpětným xxxxxxxxx na xxxx 23 xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx chladič xxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xx x xxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 uzavřená xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 se xxxxxx xx xxxxxxx (4.3) xxx 110 °X. Aby se xxxxx první xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tlaku (x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxx x výbuchu, xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx. Po uplynutí xxxxx hodiny xx xxxxxx zašroubuje x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (4.3) 23 xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx sušárny, opatrně xx xxxxxxxxxx xxxxxx x postaví xx xx lázně x xxxxxxx xxxxx. Baňka xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx postupu xxx xxxxxx pH (5.3.3) xx obsah baňky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx x xxxxxx 250 xx nebo do xxxxx s kulatým xxxx x xxxxxx 250 xx.
Xxxx xx xxxxxxxxx podle 5.3.3
5.3.3 xxxxxx xX
Xxxxx toho, xxxxx toleranci x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xX xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx koncentraci xxxxxx (xx-xx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx), xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.27.3).
X xxxxxxx případě xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx 2,00 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxx standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. xx xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).
Xx rotační xxxxxxx (4.7) xx xxxxx xxxxx xx 5-10 xx xx xxxxx xxx 40 °X. Xxxxx xx xx objem náhodou xxxxxx pod 5 xx, hydrolyzát je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx analýzu xxxxx.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (3.18) x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9)
Hydrolyzáty xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 17 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.17), xx xxxxxxx xxxxxxx x xxx zajištěné xxxxxxx xxx 40 °X.
xX se xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.18) xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se pokračuje xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) s xxxxxxxxx xX se kvantitativně xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx xxxxx x obsahu 200 xx x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) se xxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxx-xx xxxxx xxxxxx vnitřní xxxxxxxx, přidají se 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx xx doplní xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx se xxxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Xxxxxx-xx xxxxxxx xxxxxx analyzovány xxx xxx, uschovávají xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (5.2) a xxxxxxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,2 μ (4.5). Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx chromatografii xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxx, xxx xx na xxxxxxx nastřikovalo stejné xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % jak xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx s xxxxxxxx, kdy xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx poměr sodíku x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx stabilitě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24) xxx, xxx xxxxxx xxxx standardu xxxxxxx 30 – 200 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx analyzátoru x xxxxxxxxx xxxxxx. Zvolený xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx sebe xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx působení by xxx chromatografický xxxxxx xxxxxxxx reagovat na xxxxx objemů xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx.
Xxx xxxxxxx equimolárního xxxxxx xxxxxxxxxx aminokyselin, by xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx k vrcholu xxxx. Xxxx equimolární xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, které mohou xxx xxxxx přesně xxxxxxxxx xx použitém xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxx xxxxxxxx threoninu x xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxx píku xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 2:10 (pokud se xxxxxxx xxxxx xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxx, xx stanovení xxxxxxxxxx ovlivněno xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx). Xxx všechny ostatní xxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxx než 1:10.
Xxxxxx musí xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx "xxxxxxxxxx xxxxxxxx" a xxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx a vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxx x standardu xx xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx aminokyselinu a xxxxxxxxxx xx množství xxxxxxxxxxxxx x x xx xx vzorku.
g xxxxxxxxxxxxx xx kg xxxxxx = A × E × XX × F / X × X × 1 000
Xx-xx použit xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx: X / X
X = plocha xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx
X = plocha xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x hydrolyzátu xxxx x xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx interního xxxxxxxxx v kalibračním xxxxxxxxxxx xxxxxxx
XX = xxxxxxxxxxx xxxx stanovovaných xxxxxxxxxxxx
X = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x μmol/ml
V = xxxxxxxx navážky xxxxxx (g) (xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx je xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx)
X = xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx roztoku (5.3.4) x ml xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vypočteného xxxxx 6.1
Xxxxxx a cystein xx x hydrolyzátech xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxx kyselina cysteová, xxx xxxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx (X6X12X2X4X2, XX 240,30) x xxxxxxxx XX 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx XX xxxxxxxxxx: 149,21.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx MV.
6.1 Xxxxxxx xxxxx zředěného xxxxxxxx (X) xxx xxxxxxxxx volných xxxxxxxxxxxx (5.2) se vypočítá xxxxx xxxxxx xxxxxx:
X = 100 xx × (10 xx + 5 xx) / 10 ml × X&xxxx;xx / 10xx
X = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxx porovnáním na xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxx 1990 xxx xxxxxxx čtyř xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx xxx xxxxxxx, krmná xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx koncentrát, xxxxxx). Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx výsledky středních xxxxxx x standardních xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx tabulce:
střední xxxxxxx x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro prasata |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 x = 13 |
|
Krmná xxxx xxx brojlery |
9,31 x = 16 |
3,92 x = 18 |
5,08 n = 18 |
13,93 n = 16 |
|
Proteinový xxxxxxxxxx |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Premix |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx standardní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxxx odchylka (Xx) xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,13 x = 15 |
0,10 x = 17 |
0,11 x = 17 |
0,26 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,20 n = 16 |
0,11 x = 18 |
0,16 x = 18 |
0,28 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,48 n = 16 |
0,13 n = 17 |
0,27 x = 17 |
0,99 n = 15 |
|
Premix |
1.30 n = 16 |
_ |
2,19 x = 16 |
2,06 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
Variační xxxxxxxxxx (%) vnitrlaboratorních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xx)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
1,9 a = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 x =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Krmná xxxx xxx xxxxxxxx |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
2,7 n = 16 |
2,6 x = 17 |
2,2 n = 17 |
2,4 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 x = 16 |
- |
2,4 x = 16 |
2,1 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx standardních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxx xxxxxxxxx zkoušek xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odchylka (XX) v g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,28 x = 15 |
0,30 x = 17 |
0,23 x = 17 |
0,30 n = 13 |
|
Xxxxx směs pro xxxxxxxx |
0,48 n = 16 |
0,34 x = 18 |
0,55 x = 18 |
0,75 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,85 x = 16 |
0,62 x = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 x = 15 |
|
Premix |
2,49 x = 16 |
- |
6,20 x = 16 |
6,62 n = 16 |
x = xxxxx zúčastněných laboratoří
Variační xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odchylek (XX)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
4,1 n = 15 |
9,9 x = 17 |
7,0 x = 17 |
3,2 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
5,2 x = 16 |
8,8 x = 18 |
10,9 n = 18 |
5,4 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
3,8 n = 16 |
12,3 n = 17 |
13,0 n = 17 |
3,0 x = 15 |
|
Xxxxxx |
4,3 x = 16 |
- |
6,9 n = 16 |
6,7 n = 16 |
n = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
8. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx certifikovaných referenčních xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx aminokyselin.
9. Poznámky
9.1 Xxxxxxxx k rozdílům xxxx analyzátory xxxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx standardů xxxxxxxxxxxx (xxx 3.27.4 x 3.27.5) x xxxxxxx xxxxxx (5.3.4) považovat xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx roztok xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxx ploch xxxx uprostřed tohoto xxxxxxx.
9.2 Pokud xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx účinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, musí být xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
9.3 Při xxxxxxx této xxxxxx x xxxxx obsahujících xxxx xxx 1 % xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx krmiva, xxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a musí xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXXX X XXXXXXXXX XXXX
1. Xxxx x xxxxxx použití
Touto xxxxxxx se xxxxxxx xxxxx tuku x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx analýzu xxxxxxxxxx semen x xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xx řídí xxxxx xxxxxxxx Rady 136/66/EHS xx dne 22. xxxx 1996.
Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx následujících xxxxxxx:
1.1 Xxxxxx A – xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x výjimkou xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx B.
1.2 Postup X – xxxxxxx xxx
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx xxx krmiva xxxxxxxxxxx původu x xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx se xxx xxxxxxx materiály, x xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. lepky, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx vytlačování, xxxxxxxxxx x zahřívání).
1.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx všech případech, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X, xxx xxxxxxxx X, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxxx X.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxxx X
Xxxxxx xx extrahuje xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xx vysuší a xxxxx.
2.2 Xxxxxx X
Xxxxxx xx zahřívá s xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx A.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxxxxx x bodem xxxx xxxx 40 x 50 °X. Xxxxxxx bromového xxxxx xxxx xxx menší xxx 1 x xxxxxx xx odpařování xxxxx xxx 2 xx/100 xx
3.2 xxxxx xxxxx, bezvodý
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, c = 3 xxx XXx/x
3.4 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, např. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx sifonem (Xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxx by měla xxxxxxx asi 10 xxxxx xx xxxxxx. X xxxx xxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xx minutu.
4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx látek xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, x porositou x xxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxx xxxx 4.1.
4.3 Xxxxxxx, buď vakuová xxxxxxxx xx 75 °X ± 3 °X, xxxx horkovzdušná xxxxxxxx na 100 °X ± 3 °X.
5. Postup
5.1 Postup X (xxx xxx 8.1)
Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx naváží 5 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx (4.2) a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx šest xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jímá xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx baňky, která xxxxxxxx xxxxxx pemzy [1].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x baňce xx xxxx 1,5 xxxxxx v xxxxxxx (4.3). Xxxxx xx xxxxxxxxxxx x exsikátoru x xxxxx. Xxxx xx xxxxxxx 30 xxxxx, xxx se xxxxxxxx, zda xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1 xx).
5.2 Xxxxxx B
Do xxxxxxx x xxxxxx 400 xx nebo xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 300 xx xx xxxxxx 2,5 x vzorku x xxxxxxxxx xx 1 xx (xxx xxx (8,2) x xxxxx xx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) x xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx kónická xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx se xxxxxxx xx mírného varu xx xxxxx plameni xxxx na topné xxxxx a xxxx xx po xxxx xxxxx hodiny. Během xxxx se musí xxxxxxxx usazování částeček xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.
Xxxx se ochladí x xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), aby xxx xxxxxxxx nedošlo xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, až xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx, zda xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx tuk. Xxxx přítomnost xxxxxxx, xx se vzorek xxxx před hydrolýzou xxxxxxxxxx petroletherem xxxxx xxxxxxx X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx na xxxxxxxx sklo a xxxx xx půldruhé xxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °X ± 3 °C.
Dvojitý xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx do extrakční xxxxxxx (4.2) a xxxxxxxx smotkem xxxx xxx xxxx. Patrona xx vloží xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxx se xxxxxxxxx podle druhého x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx jako procento xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pracovníkem xx xxxxx xxxxxxxxxx:
- 0,2 % x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx obsahu xxxx nižším xxx 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx xx 5 xx 10 %,
- 0,4 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, při xxxxxx nad 10 %.
8. Xxxxxxxx
8.1 X xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx olejů x xxxx, xxxxx se xxxxxxx drtí xxxx xxxxx neumožňují xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxx xx 20 x xxxxxx s xxxxxxxxx na 1 xx a xxxxxx xx x 10 xxxx i xxxx xxxxx xxxxxxxxx síranu xxxxxxx (3.2). Extrahuje xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx xxxx 5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx xx. 50 xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxx suché, xxxxxx xxxxxxx baňky, xxxxxxxxxx xxxxxx pemzy [2].
Xxxxxxxxxxxx xx oddestilujte, xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xx podle xxxxxxxxxx odstavce bodu 5.1.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx jako xxxxxxxx xx xxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
(10 x + b) × 5
xxx:
x = xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
x = xxxxxxxx zbytku xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx
8.2 U xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx obsah xxxx xx může xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx zvýšit xx 5 x.
8.3 Xxxxxx pro domácí xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx, xx musí xxxx xxxxxxxxxx x extrakcí xxxxx postupu X xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
8.4 X xxxx 5.2 xx xxxx xx opláchnutí xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx použít horká xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
8.5 X xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx 1,5 hod. Xx však xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vysoušení, xxxxx xxxx xxxx x nízkým xxxxxxxxx. Xx xxxxx použít x mikrovlnnou xxxxxx.
8.6 Xxx xxxxxx xxxx xxx 15 % xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X. Xxxxxx xx xx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxx.
XXXX X
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx obsah olachindoxu x xxxxxxxx. Xxxxx xxx stanovitelnosti je 5 xx/xx.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx olachindoxu se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx reverzní fázi xx použití UV xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxx
3.2 xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 xxxx, xxx XXXX
3.4 xxxxxxx xxxx pro XXXX:
Xxxx vody (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
3.5 xxxxxxxxxx látka: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[N-2-(hydroxyethyl)karbomoyl]-3-methylchinoxalin-N1,N4-dioxid, E 851
3.5.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 250 μx/xx
Xx xxxxxxx xxxxx o obsahu 200 xx se xxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx xx 0,1 xx a xxxxx xxx 190 xx xxxx. Baňka xx xxxxxxx xx 20 xxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Baňka xx xxxxx xxxxxxxxxx fólií x uschovává x xxxxxxxxxx. Tento xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx každý měsíc.
3.5.2 xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 25 μg/ml
10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.4) x xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx fólií a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx denně xxxxxxx.
3.5.3 xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx baněk x obsahu 50 xx xx xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 a 20,0 ml pracovního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.2). Xxxxxx xx xxxxxxx xxxx (3.4) po xxxxxx x promíchá. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 a 10,0 μx xxxxxxxxxxx xx xx.
Xxxx roztoky se xxxx připravovat xxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
4.1 xxxxxxxxxxxx lázeň
4.2 xxxxxxxxxx třepačka
4.3 zařízení XXXX x proměnnou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx diodového xxxx
4.3.1 xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 xx, xxxxxxx X18, 10 μx, nebo srovnatelná xxxxxx
4.4 membránové filtry x xxxx 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx na světlo. Xxxxxxx postupy se xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x nádobách x xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx kontrolu, zda xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx interferující látky.
5.1.2 Xxxxxxx xx výtěžnost xx xxxxxxx analýzou xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx takového xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx obsahu xx xxxxxx X xxxxxxxxxxx xx xxxxxx 50 xx/xx se xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (3.5.1) do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 250 xx x xxxxxx se odpaří xx cca 0,5 xx. Přidá se 50 x xxxxxxxxxx xxxxxx, řádně xx xxxxxxxx x nechá xx 10 xxxxx xxxxxx, přičemž xx xxxxx několikrát xxxxxxxx. Xxxx xx přejde x xxxxxxxx (5.2).
Poznámka:
Pro xxxxx této xxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx typu xxxx xxxxxxxx vzorek x nesmí xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xxxxxx se xxxxxxxxx 50 x xxxxxx s xxxxxxxxx xx 0,01 g. Xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 xx, xxxxx se 100 xx xxxxxxxxx (3.1) x xxxxx xx xxxxxx na pět xxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xxxxx xx 410 ml xxxx x xxxxxxx xx x ultrazvukové xxxxx dalších 15 xxxxx. Baňka xx xxxxx x ultrazvukové xxxxx, xxxx xx xxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx filtrem. 10,0 xx xxxxxxxx xx přenese xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 20 ml, xxxxxx xx xxxxx xx značku x xxxxxxxx. Poměrná xxxx xx xxxxxxxxxxx membránovým xxxxxxx (4.4) (xxx xxx 9. Poznámky). Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXXX (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx XXXX
5.3.1 Parametry:
Následující xxxxxxxx xxxx doporučené, xxxxx xxx použity xxxx podmínky, xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1)
xxxxxxx fáze (3,4): Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxx
xxxxxxxx xxxxxx délka: 380 xx
xxxxx nástřiku: 20 μx–100 μx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxxxxx nastříkne xxxxxxxxxx xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μg/ml, až xx xxxxxxx konstantních xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx.
5.3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx se střední xxxxxxx xxxxx (plochy) xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx výšek (xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jako ordinát x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x μx/xx jako xxxxxxxxx.
5.3.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx nástřiků xxxxxxxx xxxxxx (5.2) xxx použití xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx se střední xxxxx (xxxxxx) píků xxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx výsledků
Ze xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx vzorku xx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx grafem (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx w v xx/xx xx xxx xxxxxxxxxxx rovnicí:
w = x × 1&xxxx;000 / x
xxx:
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku (5.2) x μg/ml
m = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x g (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Identita
Identita xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stanovením x přídavkem (co-chromatography) xxxxx xxxxxxxx detektoru x xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2) a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3), xxxxxxxxxxxx 5,0 μg/ml xxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (co-chromatography)
Extrakt xxxxxx (5.2) xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx olachindoxu xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nalezeného x extraktu xxxxxx.
X xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxx píku xxxxxxxxxxx. Xxxxx píku x polovině xxxx xxxxx xxxx xxx x xxxxxxx ±10 % xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx extraktu xxxxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) při xxxxxx délce xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku i xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vrcholu xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx x xxxxxxxx polem xx xxxxx ±2 xx;
x) při vlnové xxxxx xxxx 220 x 400 xx xx nesmí xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx zaznamenaný xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx spektra x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Tohoto xxxxxxxx je xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vykázána xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx odchylka xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx;
x) xxx vlnové xxxxx xxxx 220 x 350 nm xx xxxxx spektrum xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx od xxxxxxxxx x této xxxxx xxxxxxx x rozsahu 10 xx 100 % relativní xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria je xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx stejná xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx nikde 15 % xxxxxxxxxx spektra xx vrcholu xxxx.
Xxxx-xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, přítomnost xxxxxxx není xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx souběžných xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx stejném xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mezi 10 x 20 xx/xx, xxxxx xxxxxxxxxx15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
X xxxxx ES xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx němž xx 13 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krmiva xxx selata, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx uvedeny x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
| xxxxxx 1 |
vzorek 2 |
vzorek 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
X |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
X |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
xxxxxxx (mg/kg) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Sr) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (mg/kg) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
CVr (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
XXX (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
výtěžnost (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: xxxxx xxxxxxxxxx
x: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx
XX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx reprodukovatelnosti
CVr: xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx 100 mg/kg xxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) tak, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Xxxxx xx xx tuk xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, zamění xx xxxxxx pemzy xx xxxxxxxx kuličky.
[2] Xxxxx xx xx tuk xxxxxxxx zkoušet xx xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxx pemzy xx xxxxxxxx xxxxxxx.