Xxxxxxxx Komise 98/64/XX
xx xxx 3. září 1998,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx stanovení aminokyselin, xxxx a xxxxxxxxxxx x krmivech a xxxxxx se mění xxxxxxxx 71/393/XXX
(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx na směrnici Xxxx 70/373/EHS za xxx 20. července 1970 o xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x analytických metod Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Aktem x přistoupení Xxxxxxxx, Xxxxxx x Švédska, x zejména xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, zda xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x právních x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se jejich xxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx x analýzy xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx xxx 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx krmných xxxxx xx xxx [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 97/47/XX [3], x směrnice Rady 93/74/XXX ze dne 13. xxxx 1993 x krmivech určených xx xxxxxxxxx účelům xxxxxx [4], naposledy xxxxxxxxx směrnicí 96/25/ES [5], xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxx xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx směrnice Rady 70/524/XXX xx xxx 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx [6], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 98/19/XX [7], xxxxxxx, že obsah xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx tato xxxxx přidána xx xxxxxxx směsí;
vzhledem x xxxx, že xxxxx xxxxxxxx Komise 71/393/EHS xx dne 18. xxxxxxxxx 1971, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [8], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 84/4/XXX [9], xxxxxxx metody xxxxxxx xxxx jiné x xxx zjišťování xxxxxx xxxx; xx xx vhodné uvedené xxxxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx těchto látek;
vzhledem x tomu, že xxxxxxxx této xxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx krmiva,
PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Členské státy xxxxxxx, že analýzy xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, tuku x xxxxxx olachindoxu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
V xxxxxxx xxxxxxxx Komise 71/393/EHS xx bod "4. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx" xxxxxxxxx xxxxx B xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1998. Xxxxxxx x xxxx neprodleně Xxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx 1. xxxxx 1999.
Tato xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx obsahovat xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx musí být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxx.
2. Členské xxxxx xxxxx Xxxxxx znění xxxxxxxx ustanovení vnitrostátních xxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx směrnice.
Xxxxxx 4
Tato směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 5
Tato xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 3. xxxx 1998.
Za Xxxxxx
Xxxxx Xxxxxxxx
xxxx Komise
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Xx. xxxx. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Xx. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Xx. věst. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Úř. věst. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Xx. xxxx. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Xx. věst. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. věst. X 15, 18.1.1984, x. 28.
XXXXXXX
XXXX X
Xxxxxxxxx aminokyselin
1. Xxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx slouží xx stanovení xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxx) aminokyselin x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselin. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxx, threonin, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, kyselinu xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, isoleucin, xxxxxx, fenylalanin, xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxx.
Xxxx metoda nerozlišuje xxxx solemi aminokyselin x xxxxxx také x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx formami X x X. Není xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx hydroxy xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx aminokyseliny xx xxxxxxxxx zředěnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx makromolekuly xx srážejí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx filtrací. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx chromatografií a xxxxxxx xx xx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx detekcí při 570 xx.
2.2 Vázané xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx proces xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx aminokyselinách. Xxxx(x)xx x xxxxxxxxx xxxx xxx před xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx cysteovou x xx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx neoxidovaných xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx 1 mohou xxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxxxx vzorku.
Oxidace se xxxxxxx xxx 0 xX xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx oxidační činidlo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx vzorek se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) xx 23 xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx na xX 2,20. Aminokyseliny se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx reakci x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx (440 xx xxx xxxxxx).
3. Činidla
Musí xxx xxxxxxx dvakrát xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (vodivost &xx; 10 μX).
3.1 xxxxxxx xxxxxx, w = 30 %
3.2 xxxxxxxx xxxxxxxx, w = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 dvojsíran xxxxx
3.5 xxxxxxxx xxxxx
3.6 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx
3.7 kyselina xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 1,18 x/xx
3.8 xxxxxxxx sodný, xxxxxxxx
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)
3.10 chlorid xxxxx
3.11 xxxxxxxxx
3.12 petrolether, xxx varu 40–60 °X
3.13 xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx
3.14 xxxxx – plyn (&xx; 10 xxx xxxxxxx)
3.15 1-xxxxxxx
3.16 aminokyseliny
3.16.1 xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx 1; xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vodu. Xxxxxx xx xx xxxxx xxx X2X5 xxxx X2XX4 xxxxx xxxx xxxxxxxx
3.16.2 kyselina xxxxxxxx
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx c = 7,5 xxx/x:
300 g XxXX (3.5) xx xxxxxxxx xx xxxx x doplní xx 1 litru.
3.18 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx c = 1 mol/l:
40 x XxXX (3.5) xx rozpustí xx xxxx x xxxxxx xx 1 xxxxx.
3.19 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx:
Xxxxxx xx 889 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xx 111 x xxxx x xxxxx xx 4,73 g fenolu (3.3).
3.20 hydrolyzační směs, x = 6 xxx HCl/l s xxxxxxxxx 1 x xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) xx xxxxx 1 x xxxxxx (3.3) x xxxxxx se xxxxx xx 1 xxxxx.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, c = 6 xxx XXx/x x přídavkem 2% xxxxxxxxxxxxx:
8,2 xx XXx (3.7) xx xxxxxxx xxxxxxxxx 900 xx vody, xxxxx xx 20 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9) a xxxxxx vodou xx 1 xxxx (3.7 x 3.9 xx xxxxx xxxxxxx xxxxx).
3.22 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, β = 6 %:
60 x xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) xx xxxxxxxx xx vodě x xxxxxx vodou xx 1 xxxx.
3.23 xxxxxxxx xxxx (xxxxxxxx permravenčí – xxxxx):
X xxxx xxxxxxx se xxxxxx 0,5 xx peroxidu xxxxxx (3.1) x 4,5 ml roztoku xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx (3.19); ponechá xx x xxxxx 1 xxxxxx xxx 20–30 °X, xxx xx utvořila kyselina xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx vzorku xx xxxx xxxxxxx v xxxxx s xxxxxxx xxxxx (15 xxxxx).
Xxxxx:
Xx xxxxx xxxxxxx kontaktu x xxxx x xxxxxxxx ochranný oděv.
3.24 xxxxxxxxxxx xxxxxxx roztok, x = 0,2 xxx Na+/l, xX 2,20:
X xxxxxxxxx 800 xx xxxx xx xxxxxxxx 19,61 x xxxxxxxxx xxxxxxx (3,8), 5 xx thiodiglykolu (3.9), 1 x xxxxxx (3.3) x 16,50 xx XXx (3.7). pH xx xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx se vodou xx objem 1 xxxxx.
3.25 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx připravované podle xxxxxxxx xxx použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 ninhydrinové xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx nutno xxxxxxxxxx při teplotě xxx 5 °X.
3.27.1 xxxxxxx standardní základní xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx obdržet i xxxxxxxx připravené.
3.27.2 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní roztok xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx, x = 1,25 μxxx/xx
0,2115 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.16.2) x 0,2265 g xxxxxxxxxxxxxxxx xx rozpustí (3.16.3) x citronanovém xxxxxxxx roztoku (3.24) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xx xx značku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx se při xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 12 xxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztok (3.27.1) obsahuje xxxxxxxx xxxxxxxxx x methioninsulfon.
3.27.3 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx standardu, xxxx. xxxxxxxxxx, x = 20 μxxx/xx
0,6560 x norleucinu (3.13) xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) v xxxxxxx xxxxx xx 250 xx a xxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X nejdéle 6 xxxxxx.
3.27.4 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x c = 10 xxxx/50 μx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xx 100 ml xxxxxxx xx xxxxxxxx 2,2 x xxxxxxxx sodného (3.10) x 30 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Přidají xx 4,00 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.27.1), 4,00 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) a 0,50 xx zásobního xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx se xxxxxxx. xX se xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxxxx xxxxxx (3.18).
Roztok xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 50 ml xxxxxxx xxxxx, xxxxxx po xxxxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx se.
Skladuje xx xxx teplotě xxx 5 °X xxxxxxx 3 měsíce.
Viz také xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx aminokyselin xxx použití s xxxxxxxxxxx, připravenými xxxxx xxxx 5.3.3.1 a xxx xxxxxxxx (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx 3.27.4 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
4.1 xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xxxx 250 xx xxxxxxxx zpětným xxxxxxxxx
4.2 xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx nebo xxxxxxxxxx těsněním (xxxx. Xxxxx, Xxxxxx) pro xxxxxxx x xxxxxxx
4.3 xxxxxxx x nuceným xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx ±2 °X
4.4 xX xxxx (xxx desetinná místa)
4.5 xxxxxxxxxx xxxxx (0,2 μx)
4.6 xxxxxxxxxxx
4.7 rotační xxxxxxx odparka
4.8 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx magnetická xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx XXXX x iontoměničovou kolonou, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx derivatizaci x fotometrickým xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxx sulfonovanou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, která xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx ninhydrin xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx roztoku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stálostí xxxxxxx ± 0,5 % xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx analyzátory xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx v xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodíkových iontů x = 0,8 xxx/x x obsahuje xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx separaci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, obsahuje-li xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mravenčí kyselinu x/xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx úpravou xX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx 5 xx. Xxxxxxxx se xx xxxxxxxx xx xxxxx xxx teplotě nejvýše 40 °C.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx mletím xxx, xxx xxxxxx xxxxx x oky 0,5 xx. Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxx mletím xxxxxxx na xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °X xxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxx x vysokým obsahem xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.12).
5.2 Xxxxxxxxx volných xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x x xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx příslušné xxxxxxxx (1–5 g) xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxx na 0,2 xx a xxxxx xx 100,0 ml xxxxxxxxx směsi (3.21). Xxxxx se xxxxx 60 xxxxx xx xxxxxxxxxx třepačce nebo xxxxx xx magnetické xxxxxxxx (4.8). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx 100 xx.
Xx stálého míchání xx xxxxx 50 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x pokračuje xx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 5 minut. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. 10,0 xx odstředěného roztoku xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx 100 ml, pH xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18), xxxxx xx roztok xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Použije-li xx interní xxxxxxxx, xxxxx xx 1,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) na každých 100 ml odstředěného xxxxxxx a potom xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxx xx pokračuje xxxxx bodu 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx týž den, xxxxxxxxxxx xx při xxxxxxx pod 5 °X.
5.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 xxxxxxx
0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,2 mg:
- xx xxxxx x kulatým xxxx x xxxxxx 100 xx (4.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.3.2.3) xxxx
- do xxxxx x kulatým xxxx x xxxxxx 250 ml (4.1), xxxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxx sodíku xxxx
- xx xxxxxx o xxxxxx 100 xx xx šroubovací xxxxxxxx (4.2) (xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Odvážená xxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 mg x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 100 xx.
Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx s ledovou xxxxx x ochladí xx na 0 °X, xxxxx xx xxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxxx (3.23) x promíchá xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx x x xxxxx x xxxxxxx xxxxx do chladničky xxx 0 °C x xxxxxxx xx xxx 16 hodin. Xx 16 xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 x dvojsíranu xxxxxxx (3.4).
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 hydrolýza
5.3.2.1 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorků
K xxxxxxxxxxx xxxxxx připravenému xxxxx 5.3.1 xx xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx směsi (3.20) xxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx ani xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx postupu xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podle 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx neoxidovaných vzorků
Do xxxxx x xxxxxxx xxxx x obsahu 100 ml xxxx 250 xx (4.1) xxxx do xxxxxx x obsahu100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) se xxxxxx 0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) s xxxxxxxxx xx 0,2 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 xx. Xxxxxxx xx přidá 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) a xxxxxx xx se vzorkem. Xxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx podle 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 nebo 5.3.2.2) xx přidají 3 xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx se xxxxx xx xxxxxxx xxxx pod xxxxxxx xxxxxxxxx xx dobu 23 xxxxx. Po xxxxxxxx hydrolýzy xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxx xx odpojí x xxxxxxx xx x ledové xxxxx. Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 se xxxxxx do sušárny (4.3) při 110 °X. Xxx xx xxxxx xxxxx hodiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx volně xx xxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxxx. Xx uplynutí xxxxx hodiny xx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx (4.3) 23 xxxxx. Xx xxxxxxxx hydrolýzy xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xx odšroubuje xxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxx s xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xX (5.3.3) xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx převede xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx x xxxxxx 250 xx xxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxx o xxxxxx 250 xx.
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3
5.3.3 xxxxxx xX
Xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx analyzátor xxxxxxxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xX xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sodíku (xx-xx xx xxxxxx xxxxx kyselin), doporučuje xx xxxxxx vnitřní xxxxxxx xxxxxxxxxx roztok (3.27.3).
X xxxxxxx případě xx před xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Xx hydrolyzátu xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. se xxxxxxx 2 kapky 1-xxxxxxxx (3.15).
Xx xxxxxxx xxxxxxx (4.7) xx xxxxx xxxxx na 5-10 ml xx xxxxx xxx 40 °X. Xxxxx by xx objem xxxxxxx xxxxxx xxx 5 xx, hydrolyzát je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx analýzu xxxxx.
xX xx upraví na 2,20 xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (3.18) a xxxxxxxxx xx podle xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 xxx xxxxxxx ostatní analyzátory xxxxxxxxxxxx (4.9)
Hydrolyzáty připravené xxxxx 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx přidáním 17 ml roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx (3.17), xx xxxxxxx xxxxxxx x xxx zajištěné xxxxxxx pod 40 °X.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.18) xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) x upraveným xX se kvantitativně xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx odměrné xxxxx x obsahu 200 xx x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xx xxxxxx po značku.
Nebyl-li xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se 2,00 ml vnitřního xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx xx doplní xx značku citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx xx promíchá.
Dále xx přejde x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Nejsou-li xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx mít xxxxxxx (5.2) a xxxxxxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx filtrem 0,2 μ (4.5). Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx chromatografii xx xxxxxxxxxxx aminokyselin (4.9).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx roztoku ± 0,5 % xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxxx poměr xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxx x xxxxxxxxxxxx roztocích a x roztocích xxxxxx xx možná xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx závisí hlavně xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x analytického xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým roztokem (3.24) xxx, xxx xxxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxx 30 – 200 % plochy xxxx pro jednotlivé xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx aminokyselin xx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx analyzátoru x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx od xxxx xxxxxxxx i xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivních xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx působení by xxx chromatografický xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx sloupec.
Při xxxxxxx equimolárního xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx obsahu jednotlivých xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx ještě xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselin (4.9).
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx by poměr xxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx xxxxxxx x obou překrývajících xx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 2:10 (xxxxx se xxxxxxx pouze xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx, je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx ovlivněno xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx píků). Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx než 1:10.
Xxxxxx musí xxxxxxx, xx lysin xxxx xxxxxxxxx xx "xxxxxxxxxx xxxxxxxx" a xxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx píků xxxxxx x standardu xx xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx se množství xxxxxxxxxxxxx v g xx xx xxxxxx.
x xxxxxxxxxxxxx na kg xxxxxx = X × X × XX × X / X × X × 1 000
Xx-xx použit interní xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx: D / X
X = plocha xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx kalibračního standardního xxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
XX = xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
X = koncentrace xxxxxxxxx x μxxx/xx
X = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (x) (korigovaná xx původní xxxx xxxxx xx vzorek xxxxxxx nebo xxxxxxxx)
X = xxxxxxx objem xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.3.4) x ml nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vypočteného podle 6.1
Xxxxxx x xxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx vypočítávají se xxxx xxxxxx (C6H12N2O4S2, XX 240,30) x xxxxxxxx MV 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx oxidovaného xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XX methioninu: 149,21.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx zjišťuje xx xxxxxxxx xxxx methionin, xxx výpočet se xxxxxxx stejná XX.
6.1 Xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xx xxxxxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
X = 100 ml × (10 ml + 5 xx) / 10 ml × X&xxxx;xx / 10xx
X = objem xxxxxxxxxx extraktu
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx 1990 xxx xxxxxxx xxxx různých xxxxx (xxxxx xxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx pro broilery, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx). Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx uvedeny v xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx hodnoty x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 x = 13 |
|
Xxxxx směs xxx brojlery |
9,31 x = 16 |
3,92 n = 18 |
5,08 x = 18 |
13,93 x = 16 |
|
Proteinový xxxxxxxxxx |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Xxxxxx |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
x = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx dána xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xx) xxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx v g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
0,13 n = 15 |
0,10 n = 17 |
0,11 n = 17 |
0,26 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
0,20 x = 16 |
0,11 n = 18 |
0,16 n = 18 |
0,28 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,48 x = 16 |
0,13 n = 17 |
0,27 n = 17 |
0,99 n = 15 |
|
Xxxxxx |
1.30 n = 16 |
_ |
2,19 x = 16 |
2,06 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) vnitrlaboratorních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xx)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
1,9 x = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 x =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
2,7 n = 16 |
2,6 x = 17 |
2,2 x = 17 |
2,4 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 n = 16 |
- |
2,4 x = 16 |
2,1 n = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odchylka (XX) x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,28 x = 15 |
0,30 x = 17 |
0,23 x = 17 |
0,30 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,48 x = 16 |
0,34 n = 18 |
0,55 x = 18 |
0,75 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,85 x = 16 |
0,62 x = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 x = 15 |
|
Premix |
2,49 x = 16 |
- |
6,20 n = 16 |
6,62 x = 16 |
x = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odchylek (XX)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
4,1 x = 15 |
9,9 n = 17 |
7,0 x = 17 |
3,2 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
5,2 x = 16 |
8,8 n = 18 |
10,9 n = 18 |
5,4 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
3,8 x = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 x = 17 |
3,0 x = 15 |
|
Premix |
4,3 x = 16 |
- |
6,9 x = 16 |
6,7 x = 16 |
n = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
8. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálů
Správné xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx certifikovaných xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx k xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
9. Poznámky
9.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx aminokyselin (xxx 3.27.4 a 3.27.5) a xxxxxxx xxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx se musí xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx roztok xx xxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo ploch xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
9.2 Pokud se x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x souladu s xxxxxxxxxxx výrobce.
9.3 Xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx 1 % chloridu (xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx krmiva, doplňková xxxxxx) xxxx xxxxx x podhodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xx proto xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXXX B XXXXXXXXX XXXX
1. Účel x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx stanoví xxxxx xxxx v xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxx zkoušení xx řídí podle xxxxxxxx Xxxx 136/66/XXX xx dne 22. xxxx 1996.
Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxx ze xxxx následujících xxxxxxx:
1.1 Xxxxxx X – xxxxx xxxxxxxxxxxxxx tuky
Tato xxxxxx je použitelná xxx xxxxxx rostlinného xxxxxx, s xxxxxxxx xxxx, které jsou xxxxxxxx do xxxxxx xxxxxxx X.
1.2 Xxxxxx X – xxxxxxx xxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx původu a xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxx všechny materiály, x xxxxx není xxxxx tuk xxxxx xxxxxxxxxx xxx předchozí xxxxxxxxx (xxxx. lepky, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx vytlačování, vločkování x zahřívání).
1.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx všech případech, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X, xxx xxxxxxxx X, je xxxxx xxxxxxxxx xx platnou xxxxxxx podle xxxxxxx X.
2. Xxxxxxx
2.1 Postup X
Xxxxxx xx extrahuje xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx a xxxxxx xx vysuší a xxxxx.
2.2 Xxxxxx X
Xxxxxx xx zahřívá x xxxxxxxxx chlorovdíkovou. Xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx zbytek se xxx zpracuje xxxxx xxxxxxx A.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxxxxx s xxxxx xxxx mezi 40 x 50 °C. Xxxxxxx bromového xxxxx xxxx být xxxxx xxx 1 x xxxxxx po odpařování xxxxx xxx 2 xx/100 xx
3.2 síran xxxxx, bezvodý
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 3 mol XXx/x
3.4 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.
4. Přístroje x pomůcky
4.1 Extrakční xxxxxxxx, xx xxxxxxx (Xxxxxxxxx přístroj), refluxní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxx 10 xxxxx za xxxxxx. X typu bez xxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx rychlost xxx 10 xx xx minutu.
4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx, bez xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxx s požadavky xxxxx bodu 4.1.
4.3 Xxxxxxx, xxx vakuová xxxxxxxx xx 75 °X ± 3 °X, nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 100 °X ± 3 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxx X (xxx bod 8.1)
Xx extrakční xxxxxxx xx naváží 5 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx (4.2) x xxxxxxxxx xxxxxxx vaty xxx tuku.
Patrona se xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx [1].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x baňce xx suší 1,5 xxxxxx x xxxxxxx (4.3). Xxxxx xx xxxxxxxxxxx v exsikátoru x xxxxx. Xxxx xx dalších 30 xxxxx, aby se xxxxxxxx, zda xx xxxxxxxx tuku konstantní (xxxxxx hmotnosti xxxx xxxxx následujícími váženími xxxx být menší xxx 1 xx).
5.2 Xxxxxx X
Xx xxxxxxx x xxxxxx 400 xx xxxx do xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 300 xx xx xxxxxx 2,5 x vzorku x xxxxxxxxx xx 1 xx (viz bod (8,2) x xxxxx xx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) x xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx sklem nebo xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx chladičem. Xxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xx topné xxxxx x vaří xx xx xxxx xxxxx xxxxxx. Během xxxx xx xxxx xxxxxxxx usazování xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxx se ochladí x přidá xx xxxxxxxxxx množství filtračního xxxxxxxxxx (3.4), xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx se přes xxxxxxxxx dojitý xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Provede xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx žádný tuk. Xxxx přítomnost xxxxxxx, xx xx vzorek xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx petroletherem xxxxx xxxxxxx A.
Dvojitý xxxxxxxxx xxxxx xx zbytkem xx položí xx xxxxxxxx xxxx x xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °X ± 3 °C.
Dvojitý xxxxxxxxx papír s xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx do extrakční xxxxxxx (4.2) a xxxxxxxx smotkem vaty xxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx do xxxxxxxxxxx přístroje (4.1) x dále se xxxxxxxxx xxxxx druhého x třetího xxxxxxxx xxxx 5.1.
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx procento xx xxxxxx.
7. Opakovatelnost
Rozdíl xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxxx xxxxxxxxxx:
- 0,2 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxx 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx 5 xx 10 %,
- 0,4 % x xxxxxxxxx hodnotě, xxx xxxxxx xxx 10 %.
8. Poznámky
8.1 U xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx, které se xxxxxxx xxxx nebo xxxxx neumožňují xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxx se 20 x vzorku x xxxxxxxxx xx 1 xx x xxxxxx xx x 10 xxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxx síranu xxxxxxx (3.2). Extrahuje xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx xxxx 5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx se. 50 xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx baňky, xxxxxxxxxx xxxxxx pemzy [2].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
Xxxxx xxxx se xxxxxxxx jako xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
(10 x + x) × 5
xxx:
x = hmotnost xxxxxx po xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
x = hmotnost xxxxxx xx druhé xxxxxxxx x xxxxxxx
8.2 X xxxxxxx, které mají xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx navážka xxxxxxxxxx xxxxxx zvýšit xx 5 g.
8.3 Xxxxxx xxx domácí xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxx před xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx sodným.
8.4 V xxxx 5.2 xx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx vody xxxxxxx.
8.5 X některých xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx 1,5 hod. Xx však třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xx možno použít x xxxxxxxxxxx troubu.
8.6 Xxx xxxxxx tuku xxx 15 % xx doporučuje provést xxxx hydrolýzou xxxxxxxx xxxxx postupu X x xxxxxxxx extrakci xxxxx xxxxxxx B. Xxxxxx xx xx xxxxx míry xx xxxxx krmiva x xxxxx xxxx x xxxxxx.
XXXX C
STANOVENÍ XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx obsah olachindoxu x krmivech. Xxxxx xxx stanovitelnosti xx 5 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx extrahuje xxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xx reverzní xxxx xx použití XX xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 methanol
3.2 xxxxxxxx, xxx HPCL
3.3 xxxx, pro XXXX
3.4 xxxxxxx xxxx pro XXXX:
Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
3.5 xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx, X 851
3.5.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx olachindoxu, 250 μx/xx
Xx odměrné xxxxx o xxxxxx 200 xx xx xxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx xx 0,1 xx x přidá xxx 190 xx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxx na 20 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na laboratorní xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x uschovává x xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx musí připravovat xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.5.2 xxxxxxxx standardní xxxxxx xxxxxxxxxxx, 25 μx/xx
10,0 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (3.5.1) xx přenese do xxxxxxx baňky x xxxxxx 100 xx, xxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.4) a xxxxxxxx. Xxxxx xx obalí xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
3.5.3 kalibrační xxxxxxx
Xx xxxx odměrných baněk x xxxxxx 50 xx se xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 x 20,0 ml pracovního xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.2). Xxxxxx xx xxxxxxx xxxx (3.4) po xxxxxx x promíchá. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx fólií. Tyto xxxxxxx xxxxxxxxxx 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 x 10,0 μx olachindoxu xx xx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.2 xxxxxxxxxx třepačka
4.3 xxxxxxxx XXXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pole
4.3.1 xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 mm x 4 mm, xxxxxxx X18, 10 μx, xxxx srovnatelná xxxxxx
4.4 membránové xxxxxx x xxxx 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx postupy se xxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxxx z xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx kontrolu, zda xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx na xxxxxxxxx xx xxxxxxx analýzou xxxxxxxxxx krmiva xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxx obsahu ve xxxxxx K xxxxxxxxxxx xx xxxxxx 50 xx/xx xx xxxxxxxxxx 10,0 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 250 ml x xxxxxx se xxxxxx xx cca 0,5 xx. Xxxxx se 50 x xxxxxxxxxx xxxxxx, řádně xx xxxxxxxx x nechá xx 10 xxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx x extrakci (5.2).
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxx xxxx xxxxxx xx být xxxxxxxx xxxxxx podobného xxxx xxxx zkoušený xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xxxxxx se xxxxxxxxx 50 g xxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,01 x. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 ml, xxxxx se 100 xx methanolu (3.1) x xxxxx xx xxxxxx na pět xxxxx xx ultrazvukové xxxxx (4.1). Xxxxx xx 410 ml xxxx a xxxxxxx xx x ultrazvukové xxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxx se xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx se xxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx (4.2) x potom xx xxxxxxxxxxx složeným xxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxx xx přenese do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 20 ml, xxxxxx xx vodou xx značku x xxxxxxxx. Poměrná část xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (xxx xxx 9. Poznámky). Xxxx xx pokračuje xxxxxxxxxx HPLC (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx XXXX
5.3.1 Xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx xxxx podmínky, xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1)
xxxxxxx xxxx (3,4): Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 ml/min
detekční xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx xxxxxxxx: 20 μx–100 μx
Xxxxxxxxx chromatografického xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μg/ml, až xx dosáhne xxxxxxxxxxxx xxxxx píků x xxxxxxxxxx xxxx.
5.3.2 Kalibrační xxxx
Xxx xxxxx kalibrační xxxxxx se provede xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx se střední xxxxxxx výšky (xxxxxx) xxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jako ordinát x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x μx/xx jako xxxxxxxxx.
5.3.3 Roztok vzorku
Provede xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2) xxx použití stejného xxxxxx jako x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx.
6. Výpočet výsledků
Ze xxxxxxx xxxxxxx výšky (xxxxxx) xxxx olachindoxu x roztoku vzorku xx zjistí xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μg/ml porovnáním x kalibračním xxxxxx (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x v xx/xx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = x × 1&xxxx;000 / x
xxx:
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x μg/ml
m = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x g (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx) xxxxx využitím detektoru x diodovým xxxxx, xxxxxxx se porovnávají xxxxxxx extraktu xxxxxx (5.2) a kalibračního xxxxxxx (3.5.3), xxxxxxxxxxxx 5,0 μg/ml xxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx)
Xxxxxxx xxxxxx (5.2) xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx odpovídat xxxxxxxx olachindoxu nalezeného x extraktu vzorku.
S xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx a zředění xxxxxxxx xx mělo xxxxx jen xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx být x rozmezí ±10 % xxxxxxx xxxxx xxxx olachindoxu x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx diodového xxxx
Xxxxxxxx xx vyhodnocují xxxxx xxxxxxxxxxxxx kritérií:
a) při xxxxxx délce maximální xxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vrcholu xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx danou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx ±2 xx;
x) při vlnové xxxxx mezi 220 x 400 nm xx nesmí xxxxxx xxxxxxx zkoušeného xxxxxx x standardu xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx píku xxxxxxxxxxxxx lišit xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx nikde odchylka xxxx xxxxx spektry xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 nm xx xxxxx xxxxxxxx vzestupu, xxxxxxx a xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x této částí xxxxxxx v rozsahu 10 až 100 % xxxxxxxxx absorbance. Xxxxxx kritéria xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx stejná xxxxxx x jestliže ve xxxxx sledovaných bodech xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % absorbance spektra xx xxxxxxx píku.
Není-li xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx splněno, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx souběžných xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx při obsahu xxxxxxxxxxx mezi 10 x 20 xx/xx, xxxxx xxxxxxxxxx15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx modelový vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx kruhového testu
V xxxxx XX xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxx xx 13 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vzorky krmiva xxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx modelového vzorku. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x následující tabulce:
|
| xxxxxx 1 |
xxxxxx 2 |
vzorek 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
X |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
X |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
xxxxxxx (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (xx/xx) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
XXx (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
XXX (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
xxxxxxxxx (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: počet laboratoří
n: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot
Sr: xxxxxxxxxx odchylka opakovatelnosti
SR: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx xxxxxxxxxx opakovatelnosti
CVR: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx metoda xxxxxx ověřena xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx 100 mg/kg xxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x/xxxx zředěním extraktu (5.2) xxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x rozsahu xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Pokud xx má xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, zamění xx xxxxxx pemzy xx xxxxxxxx xxxxxxx.
[2] Xxxxx xx má xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, zamění xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx kuličky.