Čtvrtá Směrnice Xxxxxx
xx xxx 5. xxxxxxxx 1972,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx
(73/46/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady xx dne 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xx xxxxx xxxxxxxx 72/275/EHS ze xxx 20. xxxxxxxx 1972 [2], x xxxxxxx na xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, že xxx xxxxxxxx požaduje, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx krmiv prováděny xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx kontroly xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zákonem, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx týkajícím xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxxxx 1971 [3], 71/393/XXX xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971 [4] x 72/199/EHS xx xxx 27. xxxxx 1972 [5] xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxx vhodným přijmout xxxxxxx xxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x tomu, že xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx;
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x rostlinných xxxx a xxxxx x xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x krmivech, xxxxxxxxx xxxxx xxxxx popsaných x příloze X xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x části 1 (xxxx) xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxx 1971 xx xxxxxxxx i xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx X xxxx xxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, co xx xxxx xxxxxx xxxxxx retinolu (xxxxxxx X), xxxxxxxx (aneurin, xxxxxxx B1), xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx X), prováděny xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x příloze XX xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v části 1 (úvod) xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx x. 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxx 1971 xx, s xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx přípravy vzorku, xxx xx být xxxxxxxxxx, vztahují x xx xxxxxx popsané x příloze II xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v účinnost xxxxxx x správní xxxxxxxx nezbytné pro xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx nejpozději xx 1. xxxxx 1974. Xxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxx Komisi.
Xxxxxx 4
Xxxx směrnice xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu dne 5. xxxxxxxx 1972.
Xx Xxxxxx
X. X. Xxxxxxxx
xxxxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 171, 29.7.1972, x. 39.
[3] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[4] Xx. věst. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
PŘÍLOHA X
1. XXXXXXXXX XXXXXXXX X ŽIVOČIŠNÝCH X XXXXXXXXXXX XXXXXX X OLEJÍCH
1. Xxxx x rozsah
Tato metoda xxxxxxxx xxxxxxxx obsah xxxx a xxxxxxxx xxxxx v živočišných x xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx.
2. Princip
Vzorek xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx při 103 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx.
3. Přístroje
3.1 Miska x plochým xxxx x nekorozního xxxxxxxxx, 8 až 9 xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx.
3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 80 °X xx xxxxxxx 110 °X, x přibližně 10 xx xxxxxx.
3.3 Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx činidlo.
3.5 Xxxxxxxxxx xxxx.
4. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx mg xxxxxxxxx 20 g xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, odvážené xxxxx (3.1) x xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxx pískovou xxxxx xxxx plotýnku (3.3) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxx xxxxxxx 90 °X během xxx 7 minut.
Snižte xxxxx x sledujte xxxxxxxxx, xx kterou xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 105 °X. Pokračujte x xxxxxxx xxx dna xxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx bubliny.
Aby xxxx zajištěno xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, zahřejte xxxxxxxxxx xx 103 °X ± 2 °X, xxxx následnými xxxxxx ochlaďte xx 93 °C. Potom xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, dokud ztráta xxxxx mezi xxxxx xxxxxxxx již xxxxxxxxxxxx 2 mg.
Poznámka:
Vzestup hmotnosti xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx naznačuje xxxxxxx xxxx, x takovém xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx, xxx xx hmotnost xxxxxx zvětšovat.
5. Výpočet xxxxxxxx
Xxxxx vlhkosti, xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxx následující xxxxxxx:
(X1 – X2) · 100 / Xx
xxx:
Xx = xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx;
X1 = xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx před xxxxxxx;
X2 = xxxxx xxxxx x obsahem v xxxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx xxx 0,05 % se xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx "xxxxx xxx 0,05 %".
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 0,05 % x xxxxxxxxx hodnotě.
2. XXXXXXXXX XXXXXXX
— xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx —
1. Xxxx a xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x krmivech. Xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx obsahu hořčíku xxxxxxx xxx 5 %.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx neobsahuje xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx atomovou xxxxxxxxx spektrofotometrií xxx xxxxxx délce 285,2 xx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. x: 1,16.
3.2 Koncentrovaná kyselina xxxxxxxxxxxxxx x.x. d: 1,19.
3.3 Xxxxxxxxx pásek xxxx xxxx, xxxx XxXX4 7H2O, xxxxxx xx pokojové xxxxxxx.
3.4 Xxxxxx soli xxxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxxxx) 2,5 % (76,08 x SrCl2 6X2X x.x., nebo 60,38 x Sr(No3)2 p.a.).
3.5 Xxxxxxxxxx roztok hořčíku: xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 1 x xxxxxxx (3.3), x xxxxxxx byla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx množství (10,143 x) XxXX47X2X (3.3). Xxxxxx do 1000 xx xxxxxxx baňky, xxxxxxxx 80 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 1000 xx vodou. 1 xx xxxxxx roztoku xxxxxxxx 1,000 mg xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Platinové, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kelímky.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx elektrická xxxxxxx xxx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
5.1.1 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 5 g vzorku xx 500 xx xxxxxxx xxxxx x 250 xx 300 xx vody. Xxxxxxxx 40 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxx xx xxxx a xxxxxxxx kapalinu xxx xxxxxx xxxx xx xxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxx vychladnout, doplňte xxxxx xx objem, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx suché xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx prvních 30 xx filtrátu. X xxxxxxxxxxx křemíku xxxxxxxxx 5 x xxxxxx v dostatečném xxxxxxxx (15-30 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx sucha xx vodní lázni x xxxxxx xx xxxxx hodinu xx xxxxxxx x 105 °X. Xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx od xxxxx věty x 5.1.2.
5.1.2 Xxxxxx složená xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 5 x xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 550 °C x xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxx uhlíkatých xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, přidejte xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (15-30 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx lázni x xxxxxx xx xxxxx xxxxxx do sušárny x 105 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx 10 xx kyseliny chlorovodíkové (3.1) a xxxxxxxx xx 500 ml xxxxxxx xxxxx za xxxxx horké xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Promíchejte x xxxxxxxxxxxx xx suché xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Vyřaďte xxxxxxx 30 ml xxxxxxxx.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx s xxxxxxxxx xx mg 5 x xxxxxx do xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 550 °C x xxxxxxx xxxx, xxxxx není získán xxxxx, který xx xxx xxxxxxxxxx částic. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx kyseliny chlorovodíkové (3.2), xxxxxxx do xxxxx xx vodní xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx sušárny o 105 °X, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx xx 250 xx xxxxxxx baňky xx užití xxxxx xxxx, xxxxxx do xxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx na xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx skládaný xxxxx. Xxxxxxx prvních 30 xx filtrátu.
5.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5) xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxxxxxx koncentraci odpovídající xxxxxxxxxxx rozsahu xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxx 10 xx roztoku xxxx xxxxxxxx (3.4) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 5.1.1, 5.1.2 nebo 5.1.3 xxx, xx xx získá xxxxxxxxxxx xxxxxxx, která xx x úrovni xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků. Xxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 0,4 X. Xxxxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (3.4) x potom xxxxxxx xxxxx do 100 ml xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx být xxxxxxxx, x referenčních xxxxxxx xxx vlnové xxxxx 285,2 nm.
6. Xxxxxxx výsledků
Vypočtěte xxxxxxxx xxxxxxx xx vzorku xxxxxxxxxx s referenčními xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx xxxxx překročit 5 % xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXX XXXXXXXX
1. Účel x rozsah
Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx nerozpustné x xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx označeny jako xxxxx vláknina.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx, xxx je xx třeba, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx vroucími xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x hydroxidu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx azbestu, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx x zpopelněn xxx 900 °X. Ztráta xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx odpovídá xxxxxxxxxxx xxxxx vlákniny v xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. Chemikálie
3.1 Xxxxxxxx xxxxxx 0,26 X.
3.2 Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx s Xxxxxxxxx kelímkem přibližně 5 xxxxxxx xxxx xxxx zředěné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (1 xxx xxxxxxxx chlorovodíkové, x: 1,19 + 3 xxxx xxxx). Vařte xxxx xxxxxxxxx 45 xxxxx, nechejte xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, dokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx, x xxxxx xxxxxxxx (3.6). Vysušte azbest x sušárně x xxxxx xxxxxxxx 2 xxxxxx xxx 900 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x uchovávejte v xxxxxxxxxxx xxxxx. Tímto xxxxxxxx ošetřený xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dané v xxxx 5, pokud xx xxxx slepého xxxxxx.
3.3 Protipěnící xxxxxx (xx. silikon).
3.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,23 X.
3.5 Xxxxxxxx chlorovodíková 0,5 X.
3.6 Xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Kádinky x objemu xxxxxxx 600 xx s xxxxxxxxx xxxxxx 200 xx.
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 80 xx x průměru x xxxxxxxxx 4 xx xxxxx, perforované xxxxxxxxx 32 otvory, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 4 xx.
4.3 Vakuové xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x objemu xxxxxxxxx 2 litry x xxxxxxxxx xxxxxx 800 xx x xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx 120 mm x xxxxxxx.
4.4 Filtrační xxxxx xxxxxxxxx 40 xx v xxxxxxx x xxxxxxxxx 4 xx xxxxx xx xxxxxxxxx okraji uzpůsobenými xxx xxxxx nálevky (4.3), perforované xxxxxxxxx 16 xxxxxx, každá x xxxxxxx přibližně 4 mm a xxxxxxx drátěnou xxxxxxxxx, xxxxxxxx ok xxxxxxxxx 1 mm. Desky x xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx.
4.5 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kelímky.
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxx pec xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxxxx.
4.8 Xxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx 2,0 x xxxxxxx (3.2) xx 100 xx xxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx desky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxx a filtrujte xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 3 x xxxxxx x 2 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2) xx xxxxxxx (4.1), xxxxxxxx 200 ml xxxxxxxx sírové (3.1) x xxxxxxx kapek xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.3). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 30 xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zařízením xxxx xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Zastavte xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx okamžitě xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx je xxxxxxx xx 4.8.
Vymývejte xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 100 xx xxxxx xxxxx xxxx, xxx se získal xxxxxxx objem xxxxxxxx 800 xx. Přeneste xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1), xxxxx xxxx xxxxxxxx vybavena xxxxxxxxxxxx kotoučem (4.2) xxx regulaci varu. Xxxxxxxx 200 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4). Xxxxxx xxxxxx xx varu a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxxxx ihned xx xxxxx přes xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx azbestový xxxxx, xxx je xxxxxxx ve 4.8. Xxxxxxxxx zbytek velmi xxxxxx vodou, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxx 3xxxx xxxxxxxx (3.6) (xxxxxxxxx 100 ml acetonu xxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.5), rozdrťte, xxxxx xx xx xxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx 130 °X.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (4.7) a xxxxxx zvažte.
Vložte xxxxxxx xx muflové xxxx (4.6) a xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxx 30 minut při 900 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (4.7) a xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx slepý xxxxxxx xxxxxxx stejného xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2), xxx bez xxxxxx. Xxxxxx váhy, xxxxxxxxxxx xx zpopelnění 6 x xxxxxxx, xxxxx překročit 10 xx.
6. Xxxxxxx výsledků
Obsah xxxxx xxxxxxxx, jako xxxxxxxx xxxxxx, xx xxx poměrem:
(a-b) · 100 / 3
xxx:
x = xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
x = ztráta xxxx xx zpopelnění xxxxx xxxxxxx pokusu.
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
0,3 x xxxxxxxxx hodnotě x xxxxxx xxxxx vlákniny xxxxxxx než 10 %;
3 % xxx. x xxxxxx hrubé xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx 10 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Krmiva xxxxxxxxxx xxxx než 10 % xxxxx x xxxx musí xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (3 g s xxxxxxxxx xx xx) xx xxxxxxxxx xxxxx (4.8). Zalijte třikrát xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7) a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Převeďte xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx kvantitativně xx xxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx v xxxxxxx, jak xx xxxxxxx x xxxx 5.
7.2 Xxxxxx obsahující xxxxx x xxxx, xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x 7.1 x xxxxxxxx xxxxx, xx bylo provedeno xxxxxxx kyseliny xx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx třikrát xxxxxxxx (3.6) (100 xx xxxxxx), xxxxx xxxxxxx 50 ml xxxxxxxxxxxxx (3.7). Potom xxxxxxxx zbytek kvantitativně xx xxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, jak je xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx 5 (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx).
7.3 Xxxxx jsou xxxxxx bohatá na xxxxxx (xxxx xxx 2 % xxxxxxx), xxxxxx testovaný vzorek (3 g x xxxxxxxxx xx xx) xx xxxxxxx (4.1) xx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 0,5 X (3.5) x xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx po xxxx 5 minut. Přefiltrujte xxxxxxxx a promyjte xxxxxxxx vodou. Xxxx xxxxx xxxxxxxx 2,0 x azbestu xxxxxxxx xxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx acetonem (3.6). Xxxxx postupujte xxx, xxx xxxxxxx v xxxx 5.
PŘÍLOHA XX
1. STANOVENÍ XXXXXXXX (VITAMÍN X)
1. Xxxx x rozsah
Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (vitamín X) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx 10000 XX/xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x 4000 XX/xx xxx xxxxxxx [1]. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxxxx jejich xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx retinolu:
Skupina X: xxxxxx xxxxx xxx 200000 IU/kg;
Skupina B: xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx 200000 XX/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x dusíkaté xxxxxxxxx. Xxxx je extrahována 1,2-xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xx koloně xxxxx xxxxxxxxx (x produktů xxxxxxx X je xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x určitých případech). X produktů skupiny X je retinol xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx při 610 nm xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx komplexu xxxxx Carr-Priceovy xxxxxx; x produktů xxxxxxx X xxxxxxxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxx xxx 325 nm.
3. Xxxxxxxxxx
x) xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X
3.1 96 % (V/V) xxxxxxx.
3.2 10 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x.x. xxxx
3.3 xxxxxxx xxxxx.
3.4 50 % (xxxxxx vzhledem k xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.5 1 X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.6 0,5 X roztok hydroxidu xxxxxxxxxx x.x.
3.7 1,2-dichlorethan x.x.
3.8 Xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx: 30–50 °X. Xxxxx xx to xxxxxxx, xxxxxxxxxx následujícím xxxxxxxx: míchejte 1000 xx petroletheru xx 20 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Odstraňte xxxxxxxx x xxxxxxxxxx petrolether xxxxxxxx 500 xx xxxx, xxxxxxx 250 xx 10 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 500 xx vody. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx 1 xxxxxx xxxx xxxxxxx uhlí x xxxxxxx síran xxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
3.9 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx Brockmanna: xxxxxxx xx dobu 8 hodin xxx 750 °X, vychlaďte x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx x hnědého xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx: xx lahve x hnědého xxxx xxxxxx 10 x xxxxx xxxxxxxxx a 0,7 ml xxxx, xxxxxxxx xxxxxx, zahřívejte xx xxxx 5 xxxxx x xxxxx x xxxxxx vodou xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx takto xxxxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí známého xxxxxxxx xxxxxxxx (3.17) (xxx 500 IU) xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3 x 5.4 x kontrolním xxxxxx.
3.10 Xxxxxxx oxid xxxxxxx, stupeň xxxxxxxx 1 (Xxxxx, Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx).
3.11 Xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x stopy vody xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx oxidu hlinitého (3.10). (25 g xxxxx xxxxxxxxx xx 250 ml xxxxxxxxxxxxx.)
3.12 Xxxxxxx petroletheru (3.8) xx 4, 8, 12, 16 x 20 % (V/V) xxxxxxxxxxxxx (3.11).
3.13 0,5 xxx/x xxxxxx síranu xxxxxxx x 70 % (X/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx ze síranu xxxxxxx p.a.
b) xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx A
3.14 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x.x.
3.15 Xxxxxxxxxx p.a. Xxxxxxxxx xxxxxxx, fosgen a xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (3.10) (50 x oxidu xxxxxxxxx na 200 xx xxxxxxxxxxx; doporučuje xx chromatografovat xxxxxxx 50 xx eluátu xxxxxxx).
3.16 Carr-Priceovo činidlo: xxxxxxxx xxxxxxxxx 25 x chloridu antimonitého x.x. (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx) se 100 xx chloroformu (3.15), xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx antimonitého nečiní xxxxxxx. Xxxxxxxx 2 xx xxxxxxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxx x chladničce x xxxxx z xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx zátkou. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
3.17 Retinol – spektrofotometricky xxxxxxxxxxxxxxx.
x) xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X
3.18 Isopropanol pro xxxxxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Vodní xxxxx.
4.2 Vakuová xxxxxxx x xxxxxxxx lahvemi x různém objemu.
4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx: 300 xx; xxxxxxx xxxxxx: xxxxx 13 xx).
4.4 Xxxxxxxxxxxxxxx x 10xx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxx XX xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.5 XX lampy xxxxxx xxx 365 xx.
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx přímé xxxxxx, xxxxx xx to xxxxxxx, x xxxxxxxx x hnědého xxxx.
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxx
X jemně xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x předpokládanému xxxxxx xxxxxxxx, takto:
0,1–1,0 x xxx koncentráty (xxxxxx xxxxx xxx 20000 IU/g);
3,0–5,0 g xxx premixy (obsahy xxxx 400 a 20000 XX/x);
10–20 x xxx minerální xxxxx;
30 x xxx xxxxxxxx xxxxxxx X.
Xxxxx umístněte xxxxxxxxx xxxxxx xx 500 ml xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxx [2]
Xxxxxxxx xxxxxxxx x testovanému xxxxxx 40 xx xxxxxxxx (3.1), 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.2) [3], 10 xx xxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx (3.4) x 2 xx xxxxxxx xxxxxx sodného (3.13).
Xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx xxx 70-80 °X xxx zpětným xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pod xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 50 xx ethanolu (3.1) a 100 xx 1,2-xxxxxxxxxxxxx (3.7) (xxxxxxxxxxx xxxxxxx). Silně xxxxxxxxxxx x potom xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx dekantační nádoby. Xxxxxxxx do xxxxxx 150 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5), xxxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, dokud xxxxxx vrstvy odděleny. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxx xxxxxx, přidejte 40 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.6), xxxxxxxxxxx xx dobu 10 vteřin x xxxxxxxx xxxx, dokud xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx vrstvu xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx 6–8 xxxx 40 xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx test). Odeberte xxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx alikvotní xxxx xxxxxxx xx xxxxx x xx xxxxx lázni při 40 °X. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 5 xx petroletheru (3.8).
Xxx xxxxxxxx skupiny X xxxxxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3.1.
Pro xxxxxxxx xxxxxxx B xxxxxxxx xxxxxx xx 50 xx odměrné xxxxx, xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.8), xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx uvedeno x 5.4.2.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xx xxxx 200 mm 10 x xxxxx xxxxxxxxx (3.9) xxxxxx xxxxxxxxxxxx x petroletherem (3.8). Xx xxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxx x 5.2 a xxxxx přidejte 20 xx xxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx dávkami xxxxxxx xxxxxxx petroleje xx 4, 8, 12, 16 a 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxx nebo xxxxxxxxxx vakua, úroveň xxxxxxx je 2 xx 3 xxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxx [4]. Xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxxxx xx 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12). Vyluhování xxxxxxx za XX xxxxxxxxx (krátké xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxxxxxx xxxx retinolu xx xxxxx oddělena xx xxxxxxx zón xxxxxxxxx, jež následují. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxx B
Chromatografie xxxx xxx xxxxxxxxx pouze, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x 5.4.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx v 5.4.2.
Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx nezbytnou, umístněte xx xxxxxxxxxxxxxxxx kolony xxxxxxxxx část xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, získaného x 5.2, obsahujícího xxxxxxxxx 500 XX xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3.1.
5.4 Xxxxxx xxxxxxx hustoty
5.4.1 Produkty xxxxxxx X
Xxxxxxx xx xxxxx za vakua xxxxx xxxxxxxxxx retinol xxxxxxx x 5.3.1. Xxxxxxxx xxxxxx 2 xx xxxxxxx (3.14). Xxxxxxxx 0,3 ml xxxxxx roztoku x xxxxxxxx 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 610 nm přesně 30 vteřin poté, xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na standardní xxxxxx získanou x xxxxxxxxxxx roztoků o xxxxxxxxxxxxx standardních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Carr-Priceovým xxxxxxxx (2 až 16 XX standard-retinolu (3.17) xx 0,3 xx benzenu (3.14) + 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx činidla (3.16)). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x často xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx připraveného xxxxxxx Xxxx-Xxxxxxxx činidla.
5.4.2 Produkty xxxxxxx X
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x 5.2, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 200 IU xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx a xxxxxxxx zbytek 25 xx isopropanolu (3.18) Xxxxxx xxxxxxxx hustotu xx spektrofotometru xxx 325, 310 a 334 xx. Maximální xxxxxxxx se xxxxxxx xx 325 xx. Xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx:
X325 · 18,30 = XX xxxxxxxx/xx
Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
X310 : E325 x X334 : X325
xxxx xxx 6 : 7 = 0,857.
Pokud xx xxxxx z xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx od xxxx xxxxxxx (&xx; 0,830 xxxx &xx;0,880), xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x 5.3.2. Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx provedené po xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xx uvedený poměr xxxxx xxxxxxxx xxxx xx hodnoty 0,857 (&xx; 0,830 nebo &xx; 0,880), musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x souladu x xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx skupiny X.
6. Xxxxxxx výsledků
Vypočítejte xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx v XX xxxxxxxx na xx xxxxxx xxxx xx xx koncentrátu xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx nesmí xxxxxxxxx:
- 20 % rel. x obsahů xxxxxxxx xxxxxxx xxx 75000 XX/xx,
- 15000 XX x obsahů xxxx 75000 x 150000 XX/xx,
- 10 % xxx. x xxxxxx xxxx 150000 x 250000 IU/kg,
- 25000 XX x xxxxxx xxxx 250000 a 500000 IU/kg,
- 5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxx než 500000 XX/xx.
2. XXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXX X1, XXXXXXX)
1. Účel x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx, vitamínu B1) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx 5 xxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx kyselinou xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Získaný xxxxxx xx podroben alkalické xxxxxxx. Vzniklý xxxxxxxxx xx extrahován isobutanolem x stanoven fluorimetricky.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 100 μg/ml: xxxxxxxxx 112,3 xx xxxxxxxx-XXX, předem usušeného xx xxxxx xx xxxxxx xxxx, x 1000 xx 0,2 X xxxxxxxx sírové (3.2). Pokud je xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xx upotřebitelný xx dobu jednoho xxxxxx.
3.2 0,2 X xxxxxxxx xxxxxx.
3.3 Čistý xxxxxxxx xxxxx.
3.4 20 % (váhově vzhledem x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx draselného p.a.
3.5 25 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx draselného x.x.
3.6 Xxxxxxxx směs: xxxxxxxxx 2 xx xxxxxxx hexakyanoželezitanu draselného (3.4) xx 48 xx xxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx (3.5). Tato xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxx 4 hodiny.
3.7 Xxxxxxxxxx x.x.
3.8 2,5 X xxxxxx octanu xxxxxxx.
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proteázu, xxxxxxxxx x xxxxxxx (např. xxxxxxx).
3.10 96 % (X/X) xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) xx 3 až 50 xx trubicemi xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zábrusovými xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx každé xx xxxx 250 ml xxxxxxxxx xxxxx A x X xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jemně xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 μg xxxxxxxx x 125 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.2). Xxxxxxxx rovněž, xxxxx xx xxxxx X, 1,0 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, umístněte je xx xxxxxx vodní xxxxx x xxxxxxxx xx xxx xx xxxx 15 xxxxx x xxxxxxxxxxxxx protřepávejte. Xxxxxxxx vychladnout xx xxxxxxxxx 45 oC. Xxxxxxxx do každé xxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.8) a 0,5 x multienzymatického přípravku (3.9), xxxxx nechejte xxxx xx xxxx 20 minut xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx 20 xx roztoku xxxxxx xxxxxxx (3.8), xxxxxxx xx objem xxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx X x X xxxx, xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 15 xx. Připravte xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
5.1.1 Referenční xxxxxx X
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2) xxxxx 5 xx filtrátu X x xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.3). Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx vodní xxxxx xx 15 xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
5.1.2 Xxxxxxx X (interní xxxxxxxx) x B (xxxxxx)
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2) xxxxx 5 ml xxxxxxxx A a 5 ml xxxxxxxx X xx jiné xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2).
5.2 Xxxxxxx
Xxxxxxxx x roztokům X, X x X 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.6) x x xxxxxx xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 5 xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vrstvy xx xxxxx 25 xx xxxxxxx xxxxx, doplňte xx xxxxx xxxxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxxxxxx (= extrakty X, X x X).
5.3 Xxxxxx fluorescence
Proveďte měření xxx xxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx fluorescenci xxxxxxxxx. Xxxxxxxx při xxxxxxxxx 365 nm.
Nastavte xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx X. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X a X.
6. Výpočet výsledků
Obsah xxxxxxxx x xx/xx xxxxxx xx xxx xxxxxxx:
x · x / (x-x) x
xxx:
x = intenzita xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx);
x = xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxx);
x = váha xxxxxxxxxxx vzorku x x;
x = množství xxxxxxxx x μx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx (interní xxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit:
10 % xxxxxxxxx hodnoty u xxxxxx nižších než 500 mg/kg x
5 % xxx. x xxxxxx rovnajících xx xxxx větších xxx 500 xx/xx.
3. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXX XXXX (VITAMÍN X)
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx dehydroaskorbové (xxxxxxx X) x krmivech, xxxxxxxxxxxxx x premixech. Xxxxx xxxxxxx je 5 ppm. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx předpokládaného xxxxxx xxxxxxxx X:
Xxxxxxx X: xxxxxx xxxxx xxx 10 x/xx;
Xxxxxxx X: xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx větší než 10 g/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx roztoku kyseliny xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Vodní xxxx xx ošetřena xxxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx, xxx byla xxxxxxxx askorbová xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx acetátu, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxxxxxxxxxx na koloně xxxxxx xxxx, extrakt xxxxxxx do sucha x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx hustota xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx při 509 xx.
X xxxxxxxx skupiny X xx extrakt xxxxxx x kolonové xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Standardní roztok 0,05 % kyseliny X-xxxxxxxxx: xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxx L-askorbové x.x. v xxxxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxxxxx metafosforečné (3.2) x doplňte xx xxxxxx 100 xx xxxxx. Připravujte xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
3.2 10 % (váhově vzhledem x objemu) roztok xxxxxxxx metafosforečné: xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx rozpusťte xx xxxx 200 x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. x xxxxxxx do 2000 xx vodou. Xxxxxxxxx xxx 4xX. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx jednoho xxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx p.a.
3.4 0,5 % (váhově xxxxxxxx x objemu) xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxxx bezprostředně před xxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (X. x S. x. 121 xxxx xxxxxxxxxx)
3.6 2 % xxxxxx roztok (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 2 x 2,4-dinitrophenylhydrazinu xx 100 ml zředěné xxxxxxxx sírové (25 xx kyseliny xxxxxx x.x., d: 1,84, xxxxxx xxxxxxxxx xx 100 xx vodou). Xxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx v xxxxxxx, xxxxxx xxxxx týden.
3.7 Xxxxx xxxx
3.8 Kysličník xxxxxxxx.
3.9 Xxxx xxxxx xxxxxxx p.a./ledové xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx x.x.: 96/2/2 xxxxxxxx.
3.10 Xxxx dichloromethanu x.x./xxxxxx xxxxxxxx octové: 97/3 xxxxxxxx.
3.11 Xxxxxx xxx, xxxxxxxx částic: 0,05 až 0,2 xx.
3.12 Xxxxx silika xxx xxxxxx X xxx tenkovrstvou chromatografii.
3.13 Xxxxxx kyselinu sírovou: xxxxx 105 xx xxxx xx 200 xx xxxxxxx baňky, xxxxxxx xx objem xxxxxxxxx sírovou x.x., x: 1,84.
3.14 Extrakční xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx x.x., 25 ml xxxxx xxxxxxx x.x. a 4,0 ml 96 % (váhově xxxxxxxx x objemu) xxxxxxxx xxxxxx x.x. Xxxxxxx xx 2 až 3 xxxxxxxxxxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Xxxxx xxxxx vybavená xxxxxxxxxxx nastaveným xx 20 °X.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 ot./min.) xx 40 xx 50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x 250 ml xxxxxxx.
4.4 Skleněné chromatografické xxxxxxx (xxxxx: 100 xx, xxxxxxx xxxxxx: 20 xx), xx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx).
4.5 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxx kolorimetr s xxxxxx x 10xx xxxxxxxx.
4.6 Přístroj xxx xxxxxxxxxxxx chromatografii xx xxxxxx gelovými deskami (3.12) xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,5 xx 0,6 xx. (Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.) Xxxxx xxxxx xx 2 x xxx až 3 xxxxxx x xxxxxxx xxx 120 xx 130 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x exsikátoru xx nejméně 24 xxxxx před xxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxx nastavená xx 120 xx 130 °X.
5. Postup
5.1 Extrakce
Do xxxxx xx xxxx 250 xx xxxxxxxxx xxxxx (xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx) X x X xxxxxx xxxxxxx množství xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 200 μg xxxxxxxx X. Xxxxxxxx, xxxxx xx baňky X, 0,4 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx standard).
Přidejte xx xxxxx xxxxx 30 ml xxxxxxxxxxx (3.3) x 25 xx roztoku kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2) xxx 4 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx x nechejte xxxx 10 až 15 minut. Xxxxxxxx 25 xx vody, xxxxxxxxxx lahve, xxxxx xxxxxxxxxxx po 10 xxxxxx x xxxxxxxx xxxx 10 xx 15 xxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1). Xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx vodní xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx simultánně, xxx xx xxxxxxx xxxx, u xxxxxxx xxxxxxxx A (xxxxxxx xxxxxxxx) a X.
5.2 Xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) získaného x 5.1 xx xxxxxxx xxxxxxx vybavené xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx 0,5 xx 1 ml xxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx zbarvení, které xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 15 minut. Xxxxx přidejte xxxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5), protřepejte x xxxxxxxxx xxxx xxxxx skládaný xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx být xxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxxx x 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx hydrazonu
Za xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 do xxxxxxx odstředivky (4.2), xxxxxxxx 2 xx xxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6) x xxxxxxxxxxx. Zaveďte xxxxxx xxxxx dusíku (3.7) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3.8) do xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx 15 xxxxx (xxxx xxx) xx xxxxx xxxxx (4.1).
Xxxxx xxxxxxxx 3 xx xxxx, 20 xx xxxxx ethyl xxxxxxx/xxxxxx kyseliny xxxxxx/xxxxxxx (3.9) x xxxxxxxxx 800 xx filtrační xxxxxxx (3.5). Zazátkujte xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx x xxxxxxxxx. Xx lahve odparky xxxxxxxx 15 xx xxxxxxxxxxxx a za xxxxxxxxx xxxxx odpařujte xx xxxxxxx odparce (4.3), dokud xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx ve 2 xx směsi ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) xx xxxxxx xx 50 °X, xxxxxxxx vychladnout, přidejte 10 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové (3.10) a promíchejte.
5.4 Xxxxxxxx chromatografie
Naplňte xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xx xxxxxx 30 xx xxxxx dichloromethanu/ledové xxxxxxxx xxxxxx (3.10). Suspendujte (xxxxx xxxxxxxxxxxx) 5 x silika xxxx (3.11) xx 30 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové (3.10); xxxxxxx suspenzi xx xxxxxxx. Nechejte stát x potom xxxxxxx xxx dusíkem (3.7) xxx xxxxxx tlaku. Xxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x 5.3, xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx směsi xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10) x xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx trubici xxxxx (3.10) x xxxxxxxxxx xx vyplachování xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (3 xx 4 xxxxx xxxxxxxxx 5 xx), xxxxx není xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Vyřaďte xxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9), odeberte xxxxx x xxxxxxx xx sucha.
5.4.1 X xxxxxxxx xxxxxxx A (xxxxx vitamínu C xxxxx xxx 10 x/xx), rozpusťte xxxxxx xx 2,0 ml xxxxx xxxxx acetátu/ledové xxxxxxxx octové/acetonu (3.9) x xxxxx chromatografujte xx tenké vrstvě, xxx xx uvedeno x 5.5.
5.4.2 X xxxxxxxx xxxxxxx X (xxxxx vitamínu C xx rovná xxxx xx větší xxx 10 x/xx), ošetřete xxxxxxxx xxxxxx 4,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.13), silně xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxx zcela rozpustil x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx x 5.6.
5.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx 0,5 xx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.4.4 x xxxxx čáře na xxxxxxxx (4.6). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.14) xxxxxxxxx xx xxxxxxx 20 minut x tanku xxxxxxxxx xxxxxx rozpouštědla, xxxxx xxxx růžově xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Nechejte volně xxxxxxx. Xxxxxxx hranice xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx xxxx špachtlí x xxxxxx xxxxxxxx kvantitativně xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4).
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 2 ml a xxxxxxx 1,5 xx xxxxx ethyl acetátu/ledové xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9). Xxxxxxx eluát xx xxxx lahve (xxxxxxxx xxx musí být xxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx, ošetřete olejnatý xxxxxx 4,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx sírové (3.13), xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx optickou hustotu.
5.6 Xxxxxx optické hustoty
Změřte xxxxxxxx hustotu xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 xx 20 až 30 xxxxx xx rozpuštění xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Proveďte xxxxxx xxxxxxxxxx xx zředěnou xxxxxxxxx xxxxxxx (3.13).
5.7 Xxxxx xxxxx
Xxxxxxxx slepý xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxx x x na xx xx dán poměrem:
(c – x) · 2 / (x – x) · 10x
xxx:
x = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
x = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx interního standardu;
c = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
x = xxxx xxxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx:
10 % xxx. x xxxxxx vitamínu X xxxxxxx xxx 10 x/xx a
5 % xxx. u xxxxxx rovnajících xx xxxx xxxxxxx xxx 10 g/kg.
[1] 1 XX = 0,3 μx retinolu.
[2] X xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx s tendencí xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx bodu 5.2.
[3] Xxxxxxxx xxxxx nemusí xxx přidán, když xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx atmosféře.
[4] Obsah xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx při 450 xx; X 1% / 1xx = 2600.