Animace načítání

Stránka se připravuje...


Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Devátá xxxxxxxx Komise

ze xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x ohledem xx směrnici Xxxx 70/373/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x analýzy Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Řecka, x xxxxxxx xx článek 2 xxxxxxx směrnice,

vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx kontroly xxxxx xx účelem xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx právních x správních předpisů xx jakost a xxxxxxx krmiv, xx xxxxxxxxx za použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx metod Společenství;

vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx Komise 71/250/EHS [2], 71/393/XXX [3], 72/199/XXX [4], 73/46/XXX [5], 74/203/EHS [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] x 78/633/EHS [9], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx 30. xxxxxxxx 1981, xxx řadu analytických xxxxx Společenství stanovily; xx xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx k xxxx, že opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu se xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Členské xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx na obsah xxxxxxxxxx x monensinu xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí do 1. prosince 1981. Xxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxx Komisi.

Článek 3

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 31. xxxxxxxx 1981.

Xx Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx


[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Úř. věst. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Úř. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Xx. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Úř. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Úř. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.


XXXXXXX

1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X ROZSAH POUŽITÍ

Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx premixech. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti xx 2 mg/kg (2 ppm). Přítomnost xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

2. PRINCIP

Ze xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx vzorek. Xxxxxxx xx odstředí. Xxxx xxxxxxxxxxxx aktivita xx xxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx inhibičními xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx je xxx xxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx mikroorganismem Bacillus xxxxxxxx a xxxx xxx se xxx 30 °C xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °C x xxxxx měsíc xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx suspenze xxxx [1]

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx médiu (3.1) xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx Rouxova xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx kultivačního média (4.1), a po xxxx 3 xx 5 dní xx xxxxxxxx při 30 °X. Po xxxxxxxx xxxxxx xxxx pod xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 xx xxxxxxxx (4.2) x zhomogenizuje se. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx uchována xxxxxxxxx 5 xxxxxx při 4 °C.

4. KULTIVAČNÍ XXXXXX A XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

xxxxxx

6,0 x

xxxxxxx

4,0 x

xxxxxxxxxx xxxxxxx

3,0 x

xxxxxx xxxxxxx

1,5 g

glukóza

1,0 x

xxxx

15,0 x

xxxx

1000 xx

xX 6,5 (xx sterilizaci)

4.2 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 ml xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx vody.

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, d: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, 2X.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, XX2 XX4: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX xxxxxxx na 4,5.

4.6 Xxxx acetonu/vody/kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Standardní xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx

5. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx asi 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) se xxxxxxxx ve fosfátovém xxxxx (4.5) a xxxxx pufrem xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μx avoparcinu x 1 ml. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx a xxx 4 °X, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx následující xxxxxxx:

X8

4 μx/xx

X4

2 μg/ml

S2

1 μx/xx

X1

0,5 μg/ml.

5.2 Xxx xxxxxx

X výchozího xxxxxxx xx připraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pufrem xxxxxxxxxxx roztoky:

S8

2,0 μx/xx

X4

1,0 μx/xx

X2

0,5 μx/xx

X1

0,25 μx/xx.

6. XXXXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx vzorku, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx xxxxxxxxxx, xx x odměrné xxxxx x obsahu 100 xx mechanicky xxxxxxxx x 60 ml xxxxx (4.6) po xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx xX se xxxxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx chlorovodíkovou (4.3) xx xxxxxxx 2. Směsí (4.6) xx doplní objem x xxxxxxxxxxxx xx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx papír (xxxx. Xxxxxxx x. 1) x prvních 5 xx filtrátu xx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx x xX se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx se dosáhlo xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 4 μx/xx ( = U8).

Z tohoto xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx obsah: 1 μx/xx) a X1 (očekávaný xxxxx: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x hmotnosti 50 x se xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx xxxx 30 xxxxx xx mechanicky xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Xxxxxxx xxxx čistého xxxxxxxx xx xxxxxxx (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx pH se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), xxx xx získal roztok X8 (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X xxxxxx roztoku xx postupným xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx pufrem (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 1,0 μg/ml), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) x U1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

Xxxxxxxxx obsah xxxxxxxxxx (xx/xx)

5

7,5

10

15

20

40

Xxxxxxxx xxxxxx v x (± 0,1 x)

50

50

50

50

50

50

Xxxxx směsi (4.6) x xx

100

100

100

100

100

100

Xxxxx čistého xxxxxxxx (ml)

20

15

20

15

20

10

Výsledný objem (xx): X8

25

25

50

50

100

100

Xxxxxxxxx xxxxx X8 x μg/kg

2

přibl. 2

2

xxxxx. 2

2

2

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) se xxxxxxx xxxxxxxx inokula, xxxxx xxxxxx co xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx ostré inhibiční xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx difúzní xxxx na xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, S4, X2, X1) a testovacího xxxxxxx (X8, X4, X2, X1).Xx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx bezpodmínečně xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxx vytvořit xx xxxxxx kultivačního xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx x rozestupem xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx by xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na miskách, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx hliníkové xxxx xxxxxxxx xxxxxxx o xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 7.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 mm (60 xx na xxxxx x průměru 200 xx). Xxxx, co xxxxxx xxxxxx, vyhloubí xx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, podle xxxxxxx xxxxxx). Každá xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx každý xxxx xx vyhodnotí 32 inhibičních xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx dobu 16 xx 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx x xxxxxxxxx na 0,1 xx. Xxx xxxxxx koncentraci xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx koncentrace ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx extrakt xx xxxxxxxx nejpříhodnější xxxxxx, vypočítané xxxx. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) se stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X8 + 4S4 + X2 – 2X1 / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx nejvyšší xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (SH) xx stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X8 + 4S4 + X2 – 2X1 / 10

Stejně xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (UL) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx výše xxxxxxxxx xxxxxx dosadí U1, X2, X4 a X8 xxxxxxx X1, X2, S4 x X8.

Xxxxxxxxxx hodnoty XX x XX se xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx vznikne xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx hodnoty XX a UH x získání nejvhodnější xxxxxx xxx extrakt.

Pokud xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx (XX-XX) a (UH-UL) xxxxxxxxxxx xxxx než x 10 % xx střední hodnoty.

Pokud xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xx možné vyloučit xxx U1 a X1 nebo X8 x X8. Pak xx hodnoty SL, XX, XX x XX xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorců, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x ) XX = 5S1 + 2X2 − X4 / 6

xxxx

5X2 + 2S4 − X8 / 6

b ) XX = 5X4 + 2X2 − X1 / 6

xxxx

5X8 + 2X4 − X2 / 6

Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX. U xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Výsledky, které xxxx xxxxxxxxx ze xxx úrovní, by xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx protokolu o xxxxxxx.

Xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, vypočítá se xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (xxx A) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx X = (X1+ X2+ X4+ X8 – X1 – X2 – X4 – X8) × 0,602 / X4+ U8+ S4+ X8 – X1 – X2

Xxx 3 úrovně

(d) xxx X = (X1+ X2+ X4 – X1 – X2 – X4) × 0,401 / X4+ X4 – X1 – X1

xxxx

x´) xxx X = (U2+ X4+ X8 – X2 – X4 – X8) × 0,401 / U8+ X8 – X2 – X2

Xxxxxxxx aktivita = xxxxxxxxxxxxx aktivita х relativní aktivita.

Pokud xxxxxxxxx xxxxxxxx leží xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxxxxx se xxxxxxxx xxx odpovídajícím xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx extraktu xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx požadovaných xxxxxx, xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx protokolu x analýze.

Pokud xxxx xxxxx přímky xxxxxxxxx xx rovnoběžné, zkouška xx zopakuje. Xxxxx xx ani pak xxxxxxxxx rovnoběžnosti, je xxxxx xxxxxxxx považovat xx neuspokojivý.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx analytika xxx xxxxx a xxxx zkoušce by xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx nad 50 xx/xx.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX X AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL A XXXXXX POUŽITÍ

Metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx sodného x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx premixech. Spodní xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx 90 %-xxx methanolem. Extrakt xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx sodného ve xxxxxx. Jeho antibiotická xxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx difúze xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx. Xxxxxx se prokáže xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zónami xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xx x xxxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx sodných iontů.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Uchování kmenové xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx médium (4.1) v xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis x xxxx xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxx xx uchovává x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x xxxxx měsíc xx xxxxx naočkuje.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx spór [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx agaru (3.1) v xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Touto xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), a xx dobu 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx spór xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 ml ethanolu (4.3) x xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx suspenze xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 měsíců xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX MÉDIUM X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx médium [5]

xxxxxxx

10,0 x

xxxxxxxxxx xxxxxxx

3,0 x

xxxxxx extrakt

1,5 g

glukóza

1,0 x

xxxx (podle xxxxxxx)

10,0-20,0 x

xxxx

1000 ml

pH 6,5 (xx sterilizaci)

4.2 Zkušební xxxxxx

xxxxxxx

10,0 x

xxxxxxxxxx xxxxxxx

2,5 x

xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, X2XXX4

0,69 x

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, KH2PO4

0,45 x

xxxx (podle kvality)

10,0-20,0 x

xxxx

1000 xx

xX 6,5 (xx sterilizaci)

4.3 Ethanol 20 %-ní (v/v): 200 xx xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx xxxx.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (x/x): 900xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 ml xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (v/v): 500xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx hlinitý, xxxxxxxxxxx (xxxxx F, 20 xxxx; xxxxxxxxx xxxxxxx XX1: F. Xxxxxxxxx and Co., xxxx rovnocenný).

4.8 Standardní xxxxxxxxx: xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxx xxxxxxxxxx x International Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Standards, Xxxxxxx Veterinary Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Surrey KT15 3XX, Velká Británie).

5. XXXXXXXXX

5.1 Vakuová rotační xxxxxxx x 250ml xxxxxxx xxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx průměr: 25 xx, xxxxx: 400 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

5.3 Xxxxxxxx trubička xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: přibližně 300 xx, x otvorem x xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

6. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx x methanolu (4.4) x xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Při xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x při 4 xX, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx připraví xxxxxxxxx rozřeďováním 50 %-xxx methanolem (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

X8

8 μx/xx

X4

4 μx/xx

X2

2 μg/ml

S1

1 μx/xx.

7. XXXXXXXX EXTRAKTU A XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx premixy

Vzorek o xxxxxxxxx 2,0 xx xx přidá x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx minut xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X8).

7.1.2 Krmiva, x xxxxx podíl xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 50 xxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 až 20 x xx xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxx.

Xxxxxx zátka xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx výše 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx na sloupec xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx filtrát. 30 ml xxxxxxxx xx xxxxx 50 xx xxxx. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X8).

7.1.3 Krmiva x xxxxx xxxxx monensinu xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx o xxxxxxxxx 10 xx 20 x xx xxxxx x 100 ml 90 %-xxxx methanolu (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 20 ppm xx xxxxxxx 40 xx xxxxxx; xxx 10 xxx xx xxxxxxx 80 xx. Xxxxxx se odpaří xx vakuu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx rozpustí x 10 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx zavede do xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx trubička xxxxxx xx xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx převede na xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx methanolu a xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xx odpaří xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx xxxxxxxx x 10 xx bezvodého xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxx xx xxxxxx xxxxx na 20 xx. Roztok xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx xxx minimálních xxxxxxxx 4000 ot/min. Xxxx poté se xxxxx 50 %-ním xxxxxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X8).

7.2. Xxxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxx U8 se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 4 μx/xx), U2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X1 (očekávaný xxxxx: 1 μx/xx).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Naočkování kultivačního xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxxx suspenzí xxxx (3.2) xxx 50 xx 60 °X. Předběžnými xxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxxxx médiem (4.2) xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxx xx xxxxx největší xxx ještě ostré xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx použitými koncentracemi xxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, S2, X1) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, U4, U2, X1). Xx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx bezpodmínečně xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx kultivačního xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx x rozestupem xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx xx xxx xxx prováděn xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx jsou vyrobeny xx skleněné desky, xx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx o xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 mm (60 xx na xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx co xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x testovacího xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, podle xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx čtyřikrát, xxxxx pro xxxxx xxxx se xxxxxxxxx 32 inhibičních xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxx 18 xxxxx xxx 35 až 37 °X.

9. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx zón xx xxxxx s xxxxxxxxx xx 0,1 mm. Xxx každou koncentraci xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, přičemž se xxxxxx logaritmus xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx jako pro xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. níže uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7X1 + 4S2 + X4 – 2X8 / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx stanoví xxxxx následujícího vzorce:

b) XX = 7X8 + 4X4+ X2 + 2S1 / 10

Xxxxxx xxx se xxxxxxx nejvhodnější body xxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) extraktu, přičemž xx xx xxxx xxxxxxxxx vzorců dosadí X1, X2, U4 x U8 xxxxxxx X1, S2, S4 x X8.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX xx zanesou xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Spojením xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx provede xxx xxxxxxx UL a XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx (SH-SL) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx xxxx xxx o 10 % od xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx, je možné xxxxxxxx buď X1 x X1 xxxx X8 x S8. Xxx xx xxxxxxx XX, SH, XX x XX určí xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nejvhodnější xxxxxx:

x) XX = 5X1 + 2S2 – X4 / 6 xxxx 5X2 + 2X4 – X8 / 6

x ) XX = 5X4 + 2S2 − X1 / 6 xxxx 5S8 + 2X4 − X2 / 6

Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxx XX x XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Výsledky, xxxxx xxxx stanoveny xx xxx xxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx x analýze.

Pokud je xxxxx xxxxxx považovat xx rovnoběžné, xxxxxxxx xx logaritmus xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx X) xxxxxx jednoho x xxxxxxxxxxxxx vzorců:

Pro 4 xxxxxx

x) log X = (X1+ U2+ X4+ X8 – X1 – S2 – X4 – X8) × 0,602 / X4+ U8+ X4+ X8 – X1 – X2 – X1 – X2

Xxx 3 úrovně

d) xxx X = (X1+ X2+ X4 – S1 – X2 – X4) × 0,401 / X4+ X4 – X1 – S1

nebo

d) xxx X = (X2+ U4+ X8 – X2 – X4 – S8) × 0,401 / X8+ S8 – X2 – S2

Skutečná xxxxxxxx = předpokládaná xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx aktivita xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, test xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx příp. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx xxx zaznamenáno xx xxxxxxxxx x analýze.

Pokud xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx se xxx xxx nedosáhne xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx za neuspokojivý.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxxxx při jedné x téže xxxxxxx xx xxxxxx překračovat:

- 20 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx xxxxxxxxx sodného 10 až 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 až 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.


[1] Xxxxx xxx použity xxxx metody, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

[2] Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxx výsledky.

[3] 1 xx monensinu sodného xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Mohou být xxxxxxx jiné metody, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Může xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx výsledky.