Plné znění - 31981L0715

Devátá xxxxxxxx Xxxxxx

xx xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxx kontrolu xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx na Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x ohledem xx směrnici Xxxx 70/373/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx zavádí xxxxxx xxxxxx xxxxxx x analýzy Společenství xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Aktem o xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx jakost a xxxxxxx krmiv, xx xxxxxxxxx xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství;

vzhledem x tomu, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 71/393/XXX [3], 72/199/XXX [4], 73/46/EHS [5], 74/203/XXX [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] x 78/633/XXX [9], naposledy pozměněné xxxxxxxx xx xxx 30. xxxxxxxx 1981, xxx řadu analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xx stav xx xx doby xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx metod;

vzhledem k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx krmiva,

PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:

Článek 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx provádějí xxxxxxxx popsanými v xxxxxxx.

Článek 2

Členské státy xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné pro xxxxxxxx souladu x xxxxx směrnicí xx 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Článek 3

Tato směrnice xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X Bruselu dne 31. července 1981.

Xx Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Úř. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Xx. věst. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

PŘÍLOHA

1. STANOVENÍ XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x medikovaných xxxxxxxxx. Xxxxxx hranice stanovitelnosti xx 2 xx/xx (2 xxx). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xx stanovení působit xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx vzorek. Xxxxxxx xx xxxxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx měřením xxxxxx xxxxxxxxxx x agarovém xxxxxxxxxxx xxxxx naočkovaném xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Uchovávání xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxxxx zkumavkách xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx a přes xxx xx xxx 30 °C inkubuje. Xxxxxxx xx uchovává x chladničce xxx xxx 4 °X x xxxxx xxxxx xx znovu xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [1]

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx xxxxx 2-3 xx sterilní vody. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx láhev, xxxxx obsahuje 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 xxx se xxxxxxxx xxx 30 °X. Po kontrole xxxxxx spór xxx xxxxxxxxxxx xx kultura xxxxx do 15 xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx suspenze xxxx xxx uchována xxxxxxxxx 5 měsíců xxx 4 °X.

4. KULTIVAČNÍ XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx médium [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx xxxxx 800 ml xxxx.

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, 2M.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 M:

dihydrogenfosforečnan xxxxxxxx, XX₂ PO₄: 13,6 g

voda: 1000 xx

xX xxxxxxx na 4,5.

4.6 Xxxx xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx

5. XXXXXXXXXX ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx xxxxxxxx asi 10 mg xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.5) x xxxxx xxxxxx naředí, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxx v 1 xx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxx 4 °X, xxxxxxx xxxxx roztok xxxxxxxxxx 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxx roztoku se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Xxx xxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX ROZTOKU

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxx, xxxxx obsahuje 10-100 xx xxxxxxxxxx, xx x xxxxxxx baňce x obsahu 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x 60 xx xxxxx (4.6) xx xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxx x pokud xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) na hodnotu 2. Směsí (4.6) xx xxxxxx xxxxx x homogenizuje xx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx přefiltruje xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. Whatman x. 1) x xxxxxxx 5 xx filtrátu xx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx x pH se xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (4.4) xxxxxx na xxxxxxx 4,5. Tento xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx pufrem (4.5), xxx xx dosáhlo xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 4 μg/ml ( = X₈).

X tohoto xxxxxxx xx postupným xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) připraví xxxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx) x X₁ (očekávaný xxxxx: 0,5 μg/ml).

6.2 Krmiva

Vzorek x xxxxxxxxx 50 x xx xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx dobu 30 xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx zkumavkách). Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xX xx xxxxxxxx hydroxidu sodného (4.4) upraví xx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), aby xx xxxxxx roztok X8 (viz. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X xxxxxx xxxxxxx xx postupným rozřeďováním (1+1) xxxxxxxxxx pufrem (4.5) připraví roztoky X4 (očekávaný xxxxx: 1,0 μx/xx), U₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) x U₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxx množství xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx ale xxxxx ostré inhibiční xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx misek

Test se xxxxxx jako xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, S₂, X₁) a testovacího xxxxxxx (U8, U4, X2, X1).Xx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx bezpodmínečně xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx musí xxx miska xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx osm xxxxxx x průměru 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Test xx xxx xxx prováděn xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx jsou xxxxxxxx xx skleněné desky, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx přibližně 2 xx (60 xx xx misku x xxxxxxx 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx otvory, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx otvor, podle xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxx se xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxx 16 xx 18 xxxxx při 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx inhibičních xxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx xx zanáší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Pro xxxxxxxxxx roztok xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx nejpříhodnější xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx nejnižší xxxxxx standardního xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7S₈ + 4X₄ + X₂ – 2S₁ / 10

Nejvhodnější bod xxx nejvyšší xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

SH = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx body xxx xxxxxxxx (XX) a xxxxxxxx xxxxxx (UH) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxxx uvedených xxxxxx dosadí U₁, X₂, X₄ x X₈ xxxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty SL x SH xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Spojením xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx hodnoty XX x UH x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx nevyskytují rušivé xxxxxxx, měly xx xxx přímky rovnoběžné. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx více než x 10 % xx xxxxxxx hodnoty.

Pokud xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx X₁ x X₁ xxxx X₈ x X₈. Pak xx xxxxxxx XX, XX, XX x XX xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx xx provede xxx hodnoty XX x XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx zkontroluje xxxxxxxxxxxx. Výsledky, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (xxx X) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – S₁ – S₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ –

Pro 3 úrovně

(d) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / U₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) log X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – S₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = předpokládaná xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx leží xxxx rozsah hodnot 0,5–2,0, zkouška xx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací extraktu xxxx. standardních xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x rozsahu xxxxxxxxxxxx xxxxxx, výsledek xx xxxxx považovat za xxxxxxxxx, x xx xx mělo xxx xxxxxxxxxxx xx protokolu x analýze.

Pokud není xxxxx přímky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, zkouška xx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx považovat xx xxxxxxxxxxxx.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoho xxxxxxxxx xxx jedné x xxxx zkoušce by xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx obsahu 10 xx 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx obsahu nad 50 xx/xx.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX DIFÚZÍ X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX POUŽITÍ

Metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx monensinu sodného x xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 10 mg/kg (10 xxx) [3].

2. XXXXXXX

Xxxxxx xx extrahuje 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx difúze xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx naočkovaném xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx prokáže xxxxxxxxxxxx inhibičními xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xx x rozsahu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx považován xx xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx antibiotika. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX SUBTILIS XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační médium (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus subtilis x přes xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxx xx uchovává v xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x xxxxx xxxxx xx xxxxx naočkuje.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx (3.1) v xxxxx xxxxxxxx se xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx kultivačního xxxxx (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx při 30 °X. Po xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx přidá xx 15 xx ethanolu (4.3) x xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °C.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 ml ethanolu xx xxxxx 800 xx xxxx.

4.4 Methanol, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (x/x): 900xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (v/v): 500xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 xxxx; xxxxxxxxx xxxxxxx XX1: X. Xxxxxxxxx xxx Xx., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxx sodný x xxxxx aktivitě (xxxx xxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Xxxxxx KT15 3XX, Velká Británie).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x 250xx xxxxxxx baňkou.

5.2 Skleněná xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx průměr: 25 xx, xxxxx: 400 xx, s otvorem x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: přibližně 300 xx, x otvorem x průměru 2 xx na xxxxxx xxxxx.

6. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx standardní xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.4) x naředí, xxx vznikl xxxxxxx xxxxxx x obsahem xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Při xxxxxxxx x xxxxxxxx láhvi x xxx 4 xX, zůstane xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X tohoto xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx rozřeďováním 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx roztoky:

7. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX ROZTOKU

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 2,0 xx xx přidá x 100 ml 90 %-xxxx methanolu (4.5), xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, x xxxxx podíl monensinu xxxx xxxxx než 50 ppm

Vzorek x xxxxxxxxx 10 až 20 g xx xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx protřese x xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx trubičkou xx xxxxxx xx výše 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx hlinitého x xxxxxxx se xxxxxxx. 30 xx xxxxxxxx xx xxxxx 50 xx vody. Hned xxxx xx zředí 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Krmiva u xxxxx xxxxx monensinu xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx o xxxxxxxxx 10 až 20 x se xxxxx x 100 ml 90 %-ního xxxxxxxxx (4.5), 15 minut xxxxxxxx x odstřeďuje xxxxx se xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx 20 xxx xx xxxxxxx 40 xx xxxxxx; xxx 10 ppm se xxxxxxx 80 ml. Xxxxxx se xxxxxx xx vakuu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx xxxxxxxx x 10 xx 90 %-xxxx methanolu.

Vatová zátka xx xxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x za lehkého xxxxxxx se trubička xxxxxx xx xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx filtrát se xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx se xxxxxx xx vakuu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx v 10 xx bezvodého xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Roztok se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 4000 ot/min. Xxxx poté xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, aby bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx roztok

Z xxxxxxx X8 xx xxxxxxxxx rozřeďováním (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx U4 (xxxxxxxxx podíl: 4 μx/xx), U2 (očekávaný xxxxx: 2 μg/ml), X1 (xxxxxxxxx podíl: 1 μx/xx).

8. POSTUP XXXXX

8.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx 50 xx 60 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx vykáže xx možná xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zóny x xxxxxxx xxxxxxxxx koncentracemi xxxxxxxxx sodného.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁). Na xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx bezpodmínečně xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx standardu x xxxxxxxx. X xxxx důvodu xxxx xxx miska takové xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx s xxxxxxxxxx xxxxxx minimálně 30 xx. Xxxx by xxx xxx prováděn xxxxxxxxx na miskách, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx skleněné xxxxx, xx nichž xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx se xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx xx vytvořila xxxxxx xxxxx přibližně 2 mm (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx xx xxxxxx ztuhne, xxxxxxxx xx xxxxxx, do xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx musí být xxxxxxx minimálně čtyřikrát, xxxxx xxx každý xxxx se xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxx 18 xxxxx xxx 35 až 37 °X.

9. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx zón xx xxxxx x přesností xx 0,1 mm. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx střední hodnoty xxxxxxx do semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx logaritmus koncentrace xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímky, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx bod xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₁ + 4S₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Nejvhodnější xxx xxx nejvyšší xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

b) XX = 7X₈ + 4X₄+ S₂ + 2S₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx nejnižší (XX) x nejvyšší xxxxxx (XX) extraktu, xxxxxxx xx do výše xxxxxxxxx xxxxxx dosadí X₁, X₂, X₄ x U₈ namísto X₁, X₂, X₄ x S₈.

Vypočítané xxxxxxx XX x XX xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Spojením xxxx xxxx vznikne xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx. Totéž xx provede xxx xxxxxxx XX x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx faktory, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, pokud se xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx U1 x S1 nebo X8 a S8. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, UL x XX xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 5X₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5S₂ + 2X₄ – X₈ / 6

b ) XX = 5X₄ + 2S₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Xxxxx se xxxxxxx pro hodnoty XX x UH. X xxxxxx alternativních xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx do protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (log X) xxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx vzorců:

Pro 4 xxxxxx

x) log A = (U₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – S₂ – S₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – S₁ – X₂

Xxx 3 úrovně

d) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ S₄ – X₁ – S₁

nebo

d) xxx A = (X₂+ X₄+ X₈ – S₂ – X₄ – S₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxx příp. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx relativní xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot, xxxxxxxx xx třeba považovat xx přibližný, a xx xx mělo xxx zaznamenáno xx xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx se ani xxx nedosáhne xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx neuspokojivý.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxx zkoušce xx neměly xxxxxxxxxxx:

- 20 % vyšší xxxxxxx výsledku při xxxxxx monensinu sodného 10 xx 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx hodnoty xxx xxxxxx 25 až 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 mg/kg.

[1] Xxxxx xxx použity xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sporovou xxxxxxxx.

[2] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx xxxxxxxxx sodného xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Může xxx použito jakékoli xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx složení, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx výsledky.