Plné znění - 31981L0715

Devátá xxxxxxxx Xxxxxx

xx xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Společenství xxx úřední kontrolu xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,

s xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Řecka, a xxxxxxx na článek 2 xxxxxxx směrnice,

vzhledem x tomu, xx xxxxxxxx 70/373/XXX stanoví, xx xxxxxx kontroly xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, zda xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x správních xxxxxxxx xx jakost a xxxxxxx xxxxx, se xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx metod Společenství;

vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx Komise 71/250/XXX [2], 71/393/XXX [3], 72/199/XXX [4], 73/46/EHS [5], 74/203/EHS [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] x 78/633/EHS [9], xxxxxxxxx pozměněné xxxxxxxx xx xxx 30. xxxxxxxx 1981, xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xx stav xx xx xxxx provedených xxxxx xxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxx soubor xxxxxxxxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx krmiva,

PŘIJALA TUTO XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Členské státy xxxxxxx, že analýzy xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx provádějí xxxxxxxx popsanými x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 31. xxxxxxxx 1981.

Xx Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Úř. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Xx. věst. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Úř. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Xx. věst. X 206, 29.7.1978, x. 43.

PŘÍLOHA

1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXX V XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL X ROZSAH XXXXXXX

Xxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x krmivech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti xx 2 xx/xx (2 xxx). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx měřením difúze xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se dokáže xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx inhibičních xxx je xxx xxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx mikroorganismem Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx xx xxx 30 °X inkubuje. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x chladničce při xxx 4 °C x každý xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [1]

Xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx vody. Xxxxx suspenzí xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx kultivačního média (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 dní xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx kultura xxxxx do 15 xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx suspenze xxxx xxx uchována xxxxxxxxx 5 měsíců xxx 4 °C.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx zředí 800 xx vody.

4.3 Xxxxxxxx chlorovodíková, x: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, 2X.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, KH₂ XX₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX xxxxxxx xx 4,5.

4.6 Xxxx acetonu/vody/kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx o známé xxxxxxxx

5. STANDARDNÍ XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx ve fosfátovém xxxxx (4.5) x xxxxx xxxxxx naředí, xxx xxxxxx základní xxxxxx obsahující 100 μx xxxxxxxxxx x 1 xx. Xxx xxxxxxxx x uzavřené xxxxx a xxx 4 °X, xxxxxxx xxxxx xxxxxx použitelný 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx premixy

Z xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx postupným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Pro xxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx postupným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pufrem xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx odvážené xxxxxxxx 10 xx vzorku, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx xxxxxxxxxx, xx x odměrné xxxxx x obsahu 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x 60 ml xxxxx (4.6) xx xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxx a pokud xx třeba, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) na xxxxxxx 2. Směsí (4.6) xx doplní objem x xxxxxxxxxxxx se. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx papír (xxxx. Xxxxxxx x. 1) a xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xx sleje. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx x xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx na xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx xx dosáhlo xxxxxxxxxxx xxxxxx avoparcinu 4 μx/xx ( = U₈).

Z xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) připraví xxxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 2 μg/ml), X2 (očekávaný xxxxx: 1 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx obsah: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 50 x xx xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx dobu 30 xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx odstředěním (x xxxxxxxxxx zkumavkách). Poměrná xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx odebere (viz. xxxxxxxxxxx tabulka) a xxxxxxx pH xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx 4,5. Tento xxxxxx xx xxxxxx fosfátovým xxxxxx (4,5), xxx xx získal xxxxxx X8 (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx rozřeďováním (1+1) fosfátovým pufrem (4.5) xxxxxxxx roztoky X4 (xxxxxxxxx obsah: 1,0 μx/xx), U₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.1) xx xxxxxxxx suspenzí xxxx (3.2) při xxxxxxx 50–60 °C. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx se zkušebním xxxxxx (4.1) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx ale xxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx misek

Test se xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, S₂, X₁) x testovacího xxxxxxx (U8, X4, X2, X1).Xx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx bezpodmínečně xxxxxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, aby bylo xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředí xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Test xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx jsou xxxxxxxx xx skleněné desky, xx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx kroužky x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx se xxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx silná xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx misku x průměru 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx ztuhne, vyhloubí xx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx otvoru). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx každý xxxx xx xxxxxxxxx 32 inhibičních xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx po dobu 16 xx 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx x xxxxxxxxx na 0,1 mm. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx zanesou xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, vypočítané xxxx. xxxx xxxxxxxx způsobem.

Nejvhodnější xxx pro xxxxxxxx xxxxxx standardního roztoku (XX) xx stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2S₁ / 10

Nejvhodnější xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Stejně xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxx (XX) a xxxxxxxx úroveň (XX) xxxxxxxx, přičemž xx xx xxxx uvedených xxxxxx dosadí X₁, X₂, X₄ x X₈ namísto X₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty XX x XX se xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Spojením xxxx xxxx vznikne xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro standardní xxxxxx. Totéž se xxxxxxx xxx hodnoty XX x UH x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx extrakt.

Pokud xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxxx se hodnoty (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx rovnoběžné, xx xxxxx xxxxxxxx xxx X₁ a X₁ nebo X₈ x S₈. Xxx xx hodnoty XX, XX, XX a XX xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx vzorců, xxx xx obdržely xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky:

Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x UH. U xxxxxx alternativních xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx stanoveny xx xxx xxxxxx, by xxxx být zaznamenány xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xx možno xxxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) xxxxxx xxxxxxx x následujících xxxxxx:

Xxx 4 úrovně

(c) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ S₄+ X₈ – U₁ – X₂ –

Pro 3 xxxxxx

(x) log X = (X₁+ X₂+ X₄ – X₁ – S₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) xxx X = (X₂+ X₄+ U₈ – X₂ – S₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – S₂

Skutečná xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx aktivita х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx rozsah hodnot 0,5–2,0, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx roztoků. Xxxxx není xxxxx xxxxxx relativní xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, výsledek xx xxxxx považovat xx xxxxxxxxx, a to xx mělo xxx xxxxxxxxxxx do protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx přímky považovat xx rovnoběžné, xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx rovnoběžnosti, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxx analytika xxx jedné x xxxx zkoušce xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 až 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 mg/kg,

- 5 xx/xx absolutní xxxxxxx při obsahu 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx nad 50 mg/kg.

2. STANOVENÍ XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX X AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL X XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x krmivech x xxxxxxxxxxxx premixech. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti je 10 mg/kg (10 xxx) [3].

2. PRINCIP

Vzorek xx extrahuje 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxx xxxxxxx x agarovém xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr těchto xxxxxxxxxxx zón xx x xxxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS SUBTILIS XXXX 6633 (NICB 8054)

3.1 Xxxxxxxx kmenové xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační médium (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis x přes xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxx xx uchovává x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °C a xxxxx měsíc se xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Příprava xxxxxxxx spór [4]

Xxxxxxx xxxxxxx na xxxxx (3.1) x xxxxx xxxxxxxx se xxxxx 2-3 xx sterilní xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, která obsahuje 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Po xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx do 15 xx ethanolu (4.3) x xxxxxxxxxxxxx xx. Tato xxxxxxxx xxxx být uchována xxxxxxxxx 5 měsíců xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX MÉDIUM A XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx vody.

4.4 Methanol, xxxxxxx.

4.5 Methanol 90 %-xx (v/v): 900xx xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 100 ml xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (x/x): 500xx xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (alcoa X, 20 xxxx; xxxxxxxxx xxxxxxx XX1: F. Xxxxxxxxx and Xx., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxx xxxxx x známé aktivitě (xxxx xxxx získatelný x Xxxxxxxxxxxxx Laboratory xxx Boilogical Standards, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Laboratory, Xxxxxxxxx, Xxxxxx KT15 3XX, Xxxxx Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx rotační xxxxxxx s 250xx xxxxxxx xxxxxx.

5.2 Skleněná xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx průměr: 25 xx, xxxxx: 400 xx, s otvorem x průměru 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: přibližně 300 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

6. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx množství xxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx x methanolu (4.4) a naředí, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x obsahem xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Při xxxxxxxx x uzavřené láhvi x xxx 4 xX, xxxxxxx tento xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx roztoky:

7. XXXXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXXXXXX ROZTOKU

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxxxx 2,0 xx xx xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx minut xx xxxxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 50 ppm

Vzorek x xxxxxxxxx 10 xx 20 x xx xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx protřese a xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x za xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx výše 75–80 mm oxidem xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx filtrát. 30 xx xxxxxxxx xx xxxxx 50 xx xxxx. Xxxx xxxx xx zředí 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), aby bylo xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Krmiva x xxxxx xxxxx monensinu xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx x hmotnosti 10 xx 20 x xx přidá x 100 xx 90 %-xxxx methanolu (4.5), 15 minut xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx nevyčistí.

Pro xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 20 xxx xx odebere 40 xx xxxxxx; pro 10 xxx xx xxxxxxx 80 ml. Xxxxxx se xxxxxx xx xxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v rotačním xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 10 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx zátka xx zavede xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x za lehkého xxxxxxx se trubička xxxxxx do xxxx 75–80 xx oxidem xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx zbytku xx xxxxxxx xx xxxxxxx oxidu xxxxxxxxx x xxxxxxx se xxxxxxx. Kolona xx xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx x prvnímu xxxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x rotační xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 10 xx bezvodého xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxx se xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Roztok se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx při minimálních xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, aby bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxx X8 se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx podíl: 4 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μg/ml).

8. POSTUP XXXXX

8.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.2) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) při 50 až 60 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxx xx možná xxxxxxxx xxx ještě xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx použitými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx difúzní xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx koncentračních stupních xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (S₈, X₄, X₂, X₁) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, U₄, X₂, X₁). Na xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx bezpodmínečně xxxxxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx takové xxxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx kultivačního média xxxxxxx osm otvorů x xxxxxxx 10-13 xx x rozestupem xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Test by xxx být prováděn xxxxxxxxx na miskách, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx skleněné xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx hliníkový xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 mm x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx se xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 8.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx na xxxxx x průměru 200 xx). Poté xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, do xxxxxxx se pipetou xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxxxx a testovacího xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx otvor, xxxxx xxxxxxx otvoru). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxx xx vyhodnotí 32 xxxxxxxxxxx xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 18 hodin xxx 35 xx 37 °X.

9. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx xxx se xxxxx x přesností xx 0,1 mm. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxx x xxxxxxx inhibičních zón. Xxx standardní roztok xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx zakreslí xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx bod xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (SL) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) SL = 7X₁ + 4S₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx pro nejvyšší xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4X₄+ S₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx tak se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx body xxx nejnižší (UL) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx výše xxxxxxxxx vzorců xxxxxx X₁, U₂, X₄ x X₈ namísto X₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX a XX xx zanesou xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Spojením xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx roztok. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX a XX k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx být xxxxxx xxxxxxxxxx. Přímky je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx (SH-SL) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxx X1 x X1 xxxx X8 x X8. Xxx xx xxxxxxx XX, SH, XX x UH určí xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky:

a) XX = 5X₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5X₂ + 2X₄ – S₈ / 6

b ) XX = 5X₄ + 2X₂ − X₁ / 6 xxxx 5S₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxx XX x XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx tří úrovní, xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx přímky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (log A) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) log A = (X₁+ X₂+ X₄+ U₈ – X₁ – S₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx X = (X₂+ U₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx aktivita xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxx příp. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx není xxxxx dosáhnout xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, x xx by xxxx xxx zaznamenáno xx xxxxxxxxx o analýze.

Pokud xxxx xxxxx přímky xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx se xxx xxx xxxxxxxxx rovnoběžnosti, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx za neuspokojivý.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxx zkoušce xx neměly xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx 25 xx 50 mg/kg,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu xxx 50 mg/kg.

[1] Xxxxx být použity xxxx metody, které xxxxxxxxx odpovídající sporovou xxxxxxxx.

[2] Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx komerční xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx poskytne xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx monensinu xxxxxxx xxxxxxxx 1000 jednotkám XX.

[4] Xxxxx být xxxxxxx jiné metody, xxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxx.

[5] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxxx stejné xxxxxxxx.