Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx směrnice Xxxxxx

xx xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,

s xxxxxxx na Smlouvu x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx společenství,

s ohledem xx xxxxxxxx Rady 70/373/XXX xx xxx 20. července 1970, xxxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x analýzy Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxx, a xxxxxxx xx článek 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x správních xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx xxxxx, se xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Společenství xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 71/393/EHS [3], 72/199/XXX [4], 73/46/EHS [5], 74/203/EHS [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] x 78/633/EHS [9], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx dne 30. července 1981, xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx stanovily; xx stav xx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nyní xxxxxxxx xxxxxxxx devátý xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxx směrnice jsou x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx státy xxxxxxx, že xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v účinnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xx 1. prosince 1981. Xxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxxx 3

Tato xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.

V Xxxxxxx dne 31. července 1981.

Xx Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Xx. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Úř. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Úř. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

PŘÍLOHA

1. STANOVENÍ XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 xx/xx (2 xxx). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx stanovení působit xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxxx x agarovém xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se dokáže xxxxxxxxxxxx inhibičními xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr inhibičních xxx xx pro xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx přímo xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. MIKROORGANISMUS: XXXXXXXX XXXXXXXX ATCC 6633 (XXXX 8054)

3.1 Uchovávání xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) v xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx mikroorganismem Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx xx xxx 30 °X xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x chladničce xxx xxx 4 °C x xxxxx xxxxx xx znovu naočkuje.

3.2. Xxxxxxxx suspenze xxxx [1]

Xxxxxxx kultura x xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx omyje 2-3 xx sterilní vody. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Rouxova xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx média (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Po xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx kultura xxxxx xx 15 xx ethanolu (4.2) x zhomogenizuje xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx při 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx médium [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx xxxx.

4.3 Xxxxxxxx chlorovodíková, d: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, 2X.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, XX₂ PO₄: 13,6 g

voda: 1000 xx

xX upravit na 4,5.

4.6 Směs acetonu/vody/kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxx

5. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx množství asi 10 mg xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.5) x xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx základní xxxxxx obsahující 100 μx avoparcinu v 1 xx. Xxx xxxxxxxx v uzavřené xxxxx a při 4 °X, xxxxxxx xxxxx xxxxxx použitelný 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxx roztoku se xxxxxxxx xxxxxxxxx rozřeďováním xxxxxxxxxx pufrem xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Pro xxxxxx

X výchozího xxxxxxx xx xxxxxxxx postupným xxxxxxxxxxxx fosfátovým xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx odvážené xxxxxxxx 10 xx vzorku, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx avoparcinu, xx x xxxxxxx baňce x obsahu 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x 60 ml xxxxx (4.6) xx xxxx 15 minut. Xxxxxxx xX se xxxxxxxxxxx x pokud xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) xx xxxxxxx 2. Směsí (4.6) xx doplní xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx přes xxxxxx xxxxxxxxx papír (xxxx. Xxxxxxx x. 1) a xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xx sleje. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx x xX se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx xxxxxxx 4,5. Tento xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx pufrem (4.5), xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx avoparcinu 4 μx/xx ( = U₈).

Z xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) připraví xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μg/ml) x X₁ (očekávaný xxxxx: 0,5 μg/ml).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 50 x xx xxxxx xx 100 ml xxxxx (4.6) x xx xxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx zkumavkách). Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xX se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx 4,5. Tento xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), aby xx získal roztok X8 (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 1,0 μx/xx), X₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. POSTUP XXXXX

7.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) při xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy na xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) se xxxxxxx množství xxxxxxx, xxxxx xxxxxx co xxxxx největší ale xxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxxx xx čtyřech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X₈, X₄, X₂, X₁) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, X1).Xx každou xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx bezpodmínečně xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx standardu x xxxxxxxx. Z xxxx xxxxxx xxxx xxx miska xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx osm otvorů x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx silná přibližně 2 xx (60 xx na xxxxx x průměru 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx xxxxxx, vyhloubí xx otvory, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx minimálně čtyřikrát, xxxxx xxx každý xxxx xx xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxx 16 xx 18 xxxxx při 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx inhibičních xxx xx xxxxx x přesností xx 0,1 xx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx koncentrace ve xxxxxx k průměru xxxxxxxxxxx xxx. Pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx např. xxxx xxxxxxxx způsobem.

Nejvhodnější xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7S₈ + 4X₄ + X₂ – 2S₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx (UH) xxxxxxxx, přičemž xx xx xxxx uvedených xxxxxx xxxxxx X₁, X₂, U₄ x X₈ xxxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty SL x SH xx xxxxxxx do stejného xxxxxxxx. Xxxxxxxx obou xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx standardní xxxxxx. Totéž xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX x xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx xxx extrakt.

Pokud xx nevyskytují xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxx rovnoběžné. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx (XX-XX) x (UH-UL) xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx rovnoběžné, xx xxxxx xxxxxxxx xxx U₁ x X₁ nebo U₈ x X₈. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, XX x XX xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky:

Xxxxx se xxxxxxx xxx hodnoty XX x XX. U xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímek xx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Výsledky, které xxxx xxxxxxxxx xx xxx úrovní, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, vypočítá xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx A = (X₁+ U₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ –

Xxx 3 úrovně

(d) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / U₄+ X₄ – U₁ – S₁

nebo

d´) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx aktivita leží xxxx rozsah xxxxxx 0,5–2,0, zkouška xx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. standardních xxxxxxx. Xxxxx není xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x rozsahu požadovaných xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, x to xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx není xxxxx přímky považovat xx xxxxxxxxxx, zkouška xx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx jedné x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx překračovat:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahu avoparcinu 2 až 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx při obsahu 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx nad 50 xx/xx.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX POUŽITÍ

Metoda umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxxxx sodného x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx sodného xx xxxxxx. Xxxx antibiotická xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx antibiotika. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (NICB 8054)

3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x přes xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxx xx uchovává v xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x xxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx agaru (3.1) x xxxxx xxxxxxxx xx omyje 2-3 xx sterilní xxxx. Xxxxx suspenzí xx naočkuje Xxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx 300 xx kultivačního xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx spór xxx mikroskopem xx xxxxxxx přidá xx 15 ml xxxxxxxx (4.3) x xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX A XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx vody.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Methanol 90 %-xx (x/x): 900xx xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (x/x): 500ml xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 ml xxxx.

4.7 Oxid xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (xxxxx F, 20 xxxx; activated xxxxxxx UG1: F. Xxxxxxxxx xxx Co., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Standardní xxxxxxxxx: xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxx získatelný x International Laboratory xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Xxxxxx KT15 3XX, Velká Británie).

5. XXXXXXXXX

5.1 Vakuová rotační xxxxxxx s 250xx xxxxxxx baňkou.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx pro chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, xxxxx: 400 xx, s xxxxxxx x průměru 2 xx xx jednom xxxxx.

5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, s xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

6. XXXXXXXXXX ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 mg standardní xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.4) x naředí, xxx xxxxxx výchozí xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx sodného 800 μx/xx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx láhvi x při 4 xX, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx výchozího xxxxxxx se připraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx roztoky:

7. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx premixy

Vzorek x xxxxxxxxx 2,0 xx xx přidá x 100 xx 90 %-xxxx methanolu (4.5), xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxx 50 %-xxx methanolem (4.6), xxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx než 50 xxx

Xxxxxx o xxxxxxxxx 10 xx 20 x se xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxx ustát.

Vatová xxxxx xx zavede do xxxxxxxx trubičky (5.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx trubičkou xx xxxxxx xx xxxx 75–80 mm xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx xx sloupec xxxxx hlinitého x xxxxxxx xx filtrát. 30 xx xxxxxxxx xx xxxxx 50 xx vody. Hned xxxx xx zředí 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Krmiva x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 50 ppm (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx o xxxxxxxxx 10 až 20 x xx xxxxx x 100 ml 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx s podílem xxxxxxxxx 20 xxx xx xxxxxxx 40 xx xxxxxx; pro 10 xxx se xxxxxxx 80 ml. Xxxxxx xx xxxxxx xx vakuu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x rotačním xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx rozpustí x 10 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx zátka xx xxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x xx lehkého xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 75–80 mm xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx oxidu xxxxxxxxx x xxxxxxx se xxxxxxx. Kolona xx xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx k prvnímu xxxxxxxx.

Xxxxxx se odpaří xx xxxxx xxx xxxxxxx nepřesahující 40 °X x xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí x 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxx xx xxxxxx xxxxx na 20 xx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx poté se xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx roztok

Z xxxxxxx X8 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx roztoky X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 4 μx/xx), U2 (očekávaný xxxxx: 2 μx/xx), X1 (očekávaný podíl: 1 μx/xx).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxxx suspenzí xxxx (3.2) xxx 50 xx 60 °X. Předběžnými pokusy xx xxxxxxx se xxxxxxxxx médiem (4.2) xx stanoví množství xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx největší xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx miskách xx xxxxxxx koncentračních stupních xxxxxxxxxxxx roztoku (S₈, X₄, X₂, X₁) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, U₂, X₁). Na každou xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x extraktu. X xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx takové xxxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx média xxxxxxx xxx otvorů x průměru 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx minimálně 30 xx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx jsou xxxxxxxx xx skleněné desky, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx o xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx misku xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx xx vytvořila xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x testovacího xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, podle xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 18 xxxxx xxx 35 až 37 °C.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se xxxxx x přesností xx 0,1 xx. Xxx každou koncentraci xx střední xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. níže xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx bod xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) se xxxxxxx podle následujícího xxxxxx:

x) XX = 7X₁ + 4S₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx nejvyšší xxxxxx standardního xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4S₄+ X₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (UL) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, přičemž xx do xxxx xxxxxxxxx vzorců xxxxxx X₁, X₂, U₄ x X₈ namísto X₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x SH xx xxxxxxx xx xxxxxxxx diagramu. Xxxxxxxx xxxx xxxx vznikne xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx provede xxx xxxxxxx XX x XX k získání xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx faktory, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, pokud se xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx více xxx x 10 % od xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx přímky nejsou xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxx X1 x S1 nebo X8 x X8. Xxx se xxxxxxx XX, SH, UL x XX určí xxxxxx následujících xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 5X₁ + 2S₂ – X₄ / 6 xxxx 5X₂ + 2X₄ – X₈ / 6

x ) XX = 5X₄ + 2S₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Totéž xx xxxxxxx pro xxxxxxx XX a XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx rovněž xxxxxxxxxxx rovnoběžnost. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx tří xxxxxx, xx měly xxx xxxxxxxxxxx xx protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (log X) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – S₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ S₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx X = (X₂+ U₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – S₂

Skutečná xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx mimo xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx přizpůsobení koncentrací xxxxxxxx příp. standardních xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx dosáhnout relativní xxxxxxxx x rozsahu xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx považovat xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx se zopakuje. Xxxxx se xxx xxx xxxxxxxxx rovnoběžnosti, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx neuspokojivý.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při jedné x xxxx xxxxxxx xx neměly xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx 25 xx 50 mg/kg,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx být použity xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

[2] Xxxx xxx xxxxxxx jakékoliv komerční xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Mohou xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxx.

[5] Xxxx xxx použito jakékoli xxxxxxxx kultivační médium xxxxxxxxxxxxxx složení, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx výsledky.