Xxxxxx Směrnice Komise
ze xxx 25. xxxxxxxx 1984,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx vzorků x analýzy Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Xxxxx, a xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxx xxxxxxxx požaduje, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxxx požadavků xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx předpisů xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx krmiv byla xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx vzorků a xxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx směrnice Xxxxxx 71/250/XXX [2], 73/46/EHS [3], 74/203/XXX [4], 75/84/XXX [5], 76/372/XXX [6] xxxxxxxxx pozměněné xxxxxxxx 81/680/XXX [7], xxxxxxxx 71/393/EHS [8], 72/199/XXX [9], 78/633/XXX [10] xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 84/4/XXX [11] x směrnice 81/715/XXX [12] již xxxxxxxxx xxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xx xxxxxx v práci xx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metodu;
vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x souladu se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx x jejich xxxxx xxxxxxxxxxx, xx provádějí xxxxxxx popsanou x xxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx nejpozději xx 30. xxxxxx 1985 x xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Článek 3
Tato směrnice xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 25. xxxxxxxx 1984.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Úř. xxxx. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Úř. věst. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Úř. věst. X 257, 10.9.1981, x. 38.
PŘÍLOHA
STANOVENÍ XXXXXXXXXXX DIFÚZÍ XX AGAROVÉM MÉDIU
1. Xxxx a rozsah
Metoda xx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx/xx (1 xxx) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx metanol/fosfát-bikarbonátovým xxxxxx x xX 8. Xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Xxxx antibiotická xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxxxxx x agarovém médiu xxxxxxxxxxxx mikroorganizmem Micrococcus xxxxxx. Difúze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx zón je xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXX 9341 (XXXX 8340, NCIB 8553)
3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) v xxxxx xxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 24 xxxxx při 30 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx v chladničce xxx xxxxxxx okolo 4 °X. Znovu xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx.
3.2 Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [2]
Xx dříve xxxxxxxxxxxx xxxxxxx agaru xxxxxx bakterie 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxx x inkubujte 18 xx 20 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxx xx 25 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxx (4.3) x promíchejte. Xxxxxx xxxxxxxx xx 1/10 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx 75 %, xxxxxx při 650 xx x 1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3.). Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx při xxx 4 °X.
4. Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [3]
|
Xxxxxx xxxxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx z masa |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 6,5 xx 6,6 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
|
4.2 Zkušební xxxxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
3,0 g |
|
Agar |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 8,0 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Roztok chloridu xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx xxxxxxxx)
Xxxxxxxxx 8 x xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x xxxxxx do 1000 xx; sterilizujte.
4.4 Fosfát-bikarbonátový xxxx, pH 8,0
|
Dihydrogen xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx X2XXX4 |
16,7 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX2XX4 |
0,5 g |
|
Hydrogen xxxxxxxxx sodný NaHCO3 |
20,0 x |
|
Xxxx xx |
1000 ml |
4.5 Xxxx xxxxxxx xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx (4.4)
50/50 (xxxxxxxx).
4.6 Xxxxxxxxxx látka
Spiramycin x xxxxx aktivitě (x XX).
5. Standardní roztoky
Rozpusťte xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.6.) xx xxxxx (4.5.) x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx obdrželi xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 1000 XX spiramycinu xx xxxxxxxx. Skladován x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X xx xxxxx roztok xxxxxxxx až xxx xxx.
X tohoto xxxxxxxxx xxxxxxx připravte xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (4.5.) xxxxxxxxxxx roztoky:
|
S8 |
1 |
IU/ml |
|
S4 |
0,5 |
IU/ml |
|
S2 |
0,25 |
IU/ml |
|
S1 |
0,125 |
IU/ml |
6. Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
6.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx x xxxxxxx xxxxx, 1,0 xx 20,0 g x xxxxxxx. Přidejte 100 ml směsi (4.5) x xxxxxxxx 30 minut. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx roztok xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx 1 IU/ml (= X8).
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2,5 xx/xx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx provedena xxxxxxxxxx. Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x odpařte xx xxx 4 xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx odparce xxx teplotě xxxxxxxxxxxxx 40 °X. Xxxxxx xxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx spiramycinu 1 XX/xx (= U8).
6.2 Xxxxxxxx xxxxxxx
X roztoku X8 připravte roztokU4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 XX/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 XX/xx) x X1 (očekávaný xxxxx: 0,125 XX/xx) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Zkušební xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx médium (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xxx xxx 50 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx na miskách xx zkušebním médiem (4.2) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx inhibiční xxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
7.2 Příprava xxxxx
Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (S8, X4, S2, X1) x xxxxxx koncentracemi xxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, X1). Xxxx čtyři xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxx nutně xxxxxxxx xx každé xxxxx. Pro tento xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx médiu nejméně xxx otvorů x xxxxxxxx 10 xx 13 xx a xxxxxxx 30 xx xxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxx proveden xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx z tabule xxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx umístěným na xxxxx, 200 xx x xxxxxxx x 20 mm xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx misky xxxxxxxx xxxxx (4.2.), xxxxxxxxxxxxx xxxx x 7.1., xxx vytvořilo xxxxxx xxx 2 xx xxxxxx (60 ml xx xxxxx o xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx a umístěte xx nich přesně xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 a 0,15 xx xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx). Xxxxxxxx každou koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxx tak, xx xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.
7.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx 16 xx 18 xxxxx při 30 ± 2 °X.
8. Vyhodnocení
Změřte průměr xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx papír, při xxxx xxxxxxxxx logaritmus xxxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Utvořte xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xx níže xxxxxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x1 + 4x2+ x4 – 2x8 / 10
Stanovte "xxxxxxxxxxxx" bod pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x8 + 4s4+ x2 – 2x1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxx pro xxxxxxxx úroveň xxxxxxxx (XX) a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (UH) xxxxxxxxxx x1, x2, x4 x x8 xx s1, x2, x4, x x8 x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx [5]
Zaznamenejte xxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX na xxxxxx xxxxxxxx papír a xxxxxx je tak, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx standardní xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx XX x UH x xxxxxx je xxx, abyste dostali "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx pro xxxxxxx.
X nepřítomnosti jakéhokoli xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx účely xxxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx xx paralelní, xxxxx xxxxxxx (XX — XX) a (XX — UL) xxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx xxxxxx střední xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx u1 x s1 xxxx x8 x s8, xxxxx být xxxxxxxx x XX, XX, XX a XX xxxxxxxxx s použitím xxxxxxxxxxxxxx rovnic, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x) SL = 5x1 + 2s2 – x4 / 6 nebo 5s2 + 2x4 – x8 / 6
x′) XX = 5s4 + 2x2 – x1 / 6 xxxx 5x8 + 2x4 – x2 / 6
a podobně xxx XX x XX. Měla xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx paralelnosti. Skutečnost, xx xxx výsledek xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, musí být xxxxxxxxxxx v závěrečném xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx považovány xx xxxxxxxxx, vypočtěte xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx X) x xxxxxx jedné z xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxx, xxxxx xxxx použity xxx xxxx čtyři xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx úrovně
c) Xxx A = (x1+ u2+ x4+ x8 – s1 – s2 – x4 – x8) × 0,602 / x4+ x8+ x4+ x8 – u1 – u2 – x1 – x2
Xxx xxx úrovně
d) Xxx X = (x1+ x2+ u4 – x1 – s2 – x4) × 0,401 / x4+ x4 – u1 – s1
nebo
d´) Xxx X = (x2+ x4+ u8 – x2 – s4 – x8) × 0,401 / x8+ x8 – u2 – x2
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx = aktivita xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx × X
(X8 = X8 × X)
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx aktivita nalezena xxxx rozsah 0,5 xx 2,0, xxxxx xxxxxxxx zkoušku, při xxxx proveďte xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, pokud xxxx xxxx xxxxx, roztoků xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivita xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x toto xxxx xxx uvedeno x xxxxxxxxxx protokolu x xxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx docíleno xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx kilogram xxxxxx.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx stejným analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx pro obsahy xxxx xxxxxxxxxxx xx 10 xx/xx,
- 20 % xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnotě xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,
- 5 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 až 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx x nejvyšší xxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.
[1] 1 xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3200 xxxxxxxxxxxxx jednotek (XX).
[2] Xxxxx xxxxxx xxxxx xxx použity xx předpokladu, že xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx bakteriální xxxxxxxx.
[3] Může xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx výsledky.
[4] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx složení x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[5] Xxxx písmena "s" x "x" odpovídají xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón.