Desátá Směrnice Komise
ze xxx 25. xxxxxxxx 1984,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Rady 70/373/XXX xx dne 20. července 1970, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x analýzy Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxx, a xxxxxxx na xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxx směrnice požaduje, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxxx požadavků xxxxxxxxxx právních a xxxxxxxxx předpisů xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx krmiv xxxx xxxxxxxxx xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 73/46/EHS [3], 74/203/XXX [4], 75/84/XXX [5], 76/372/XXX [6] naposledy pozměněné xxxxxxxx 81/680/XXX [7], xxxxxxxx 71/393/XXX [8], 72/199/XXX [9], 78/633/XXX [10] naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx 84/4/XXX [11] x směrnice 81/715/XXX [12] xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství; xx xxxxxx x xxxxx xx xx doby xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metodu;
vzhledem x xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx úřední kontrolu xxxxx, xxxxx jde x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx popsanou x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx státy xxxxxx x účinnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. xxxxxx 1985 x xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Tato xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Bruselu xxx 25. xxxxxxxx 1984.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Úř. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Úř. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Xx. xxxx. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Úř. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Úř. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Xx. věst. X 257, 10.9.1981, x. 38.
PŘÍLOHA
STANOVENÍ XXXXXXXXXXX XXXXXX XX AGAROVÉM XXXXX
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx a premixech. Xxxxx mez xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx/xx (1 ppm) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx-xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xX 8. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx odstředěn x xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx spiramyscinu x xxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Micrococcus xxxxxx. Difúze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx mikroorganizmu. Xxxxxx xxxxxx xxx je xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxxx koncentrace xxx xxxxxx xxxxxxxxx antibiotických xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXX 9341 (XXXX 8340, XXXX 8553)
3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium (4.1) x xxxxx xxxxxxxx mikroorganizmem Micrococcus xxxxxx a xxxxxxxxx 24 xxxxx při 30 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx okolo 4 °X. Znovu xxxxxxxxx každé xxx xxxxx.
3.2 Příprava bakteriální xxxxxxxx [2]
Xx xxxxx xxxxxxxxxxxx šikmého agaru xxxxxx xxxxxxxx 2 xx 3 ml xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3). Xxxx suspenzi xxxxxxxx x xxxxxxxxxx 250 xx kultivačního xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 18 xx 20 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxx do 25 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx 1/10 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Světelná transmise xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx 75 %, xxxxxx při 650 xx v 1 xx xxxxxx proti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3.). Tato xxxxxxxx xxxx být skladována xxxxx xxxxx xxx xxx 4 °X.
4. Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [3]
|
Xxxxxx xxxxxx |
6,0 g |
|
Trypton |
4,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 6,5 xx 6,6 (xx sterilizaci). |
|
|
4.2 Zkušební xxxxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
5,0 g |
|
Extrakt x kvasnic |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
3,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 8,0 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx xxxxxxxx)
Xxxxxxxxx 8 x xxxxxxxx sodného xx xxxx a xxxxxx xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4 Fosfát-bikarbonátový xxxx, pH 8,0
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dvou draselný X2XXX4 |
16,7 x |
|
Xxxxxxxx fosforečnan xxxxxxxx KH2PO4 |
0,5 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx XxXXX3 |
20,0 x |
|
Xxxx do |
1000 ml |
4.5 Xxxx xxxxxxx xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx (4.4)
50/50 (xxxxxxxx).
4.6 Xxxxxxxxxx látka
Spiramycin x xxxxx xxxxxxxx (x XX).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxx xxxxx (4.6.) xx xxxxx (4.5.) x zřeďte stejnou xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx roztok xxxxxxxxxx 1000 XX spiramycinu xx mililitr. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx.
X tohoto zásobního xxxxxxx xxxxxxxxx postupným xxxxxxx xxxxx (4.5.) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
1 |
XX/xx |
|
X4 |
0,5 |
XX/xx |
|
X2 |
0,25 |
XX/xx |
|
X1 |
0,125 |
XX/xx |
6. Xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx
6.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx x xxxxxxx krmiv, 1,0 xx 20,0 x x xxxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x xxxxxxxx 30 minut. Odstřeďte xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx supernatantu xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= U8).
Pro očekávané xxxxxx spiramycinu xxxxx xxx 2,5 xx/xx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx provedena následovně. Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, odeberte 50 xx xxxxxxx supernatantu x xxxxxxx xx xxx 4 xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx rotační xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X. Zřeďte xxxxxx směsí (4.5), xxxxxx obdrželi xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= X8).
6.2 Xxxxxxxx roztoky
Z xxxxxxx X8 připravte roztokU4 (xxxxxxxxx obsah: 0,5 XX/xx), U2 (očekávaný xxxxx: 0,25 XX/xx) x X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,125 XX/xx) xxxxxx postupného xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Xxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xxx xxx 50 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xx xxxxxxxxx médiem (4.2) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx suspenze, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx inhibiční xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spiramycinu.
7.2 Příprava xxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx miskách xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (S8, X4, X2, S1) x čtyřmi xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (U8, X4, X2, X1). Xxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxx tento xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nejméně xxx xxxxxx x xxxxxxxx 10 xx 13 mm a xxxxxxx 30 mm xxxx xxxxxx. Pokus xxxx xxx xxxxxxxx xx miskách xxxxxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxx x xxxxxxxx x hliníku nebo xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx, 200 xx x xxxxxxx a 20 xx vysokým.
Rozlijte xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2.), xxxxxxxxxxxxx xxxx x 7.1., xxx vytvořilo xxxxxx xxx 2 xx xxxxxx (60 xx xx desku x xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx ustát, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zkušebních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, xxxxx průměru). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx čtyřikrát tak, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vyhodnocení 32 xxxxxxxxxxx zón.
7.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx 16 až 18 xxxxx xxx 30 ± 2 °X.
8. Vyhodnocení
Změřte xxxxxx xxxxxxxxxxx zón x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Zaznamenejte xxxxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx logaritmus xxxxxxxxxxx ve vztahu x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, například xxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x1 + 4x2+ s4 – 2x8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" bod xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XX) x použitím xxxxxxx:
x) XX = 7x8 + 4s4+ x2 – 2x1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxx pro xxxxxxxx xxxxxx extraktu (XX) x nejvyšší xxxxxx xxxxxxxx (XX) xxxxxxxxxx x1, x2, x4 x x8 xx x1, x2, x4, x s8 x xxxxx uvedených xxxxxxxxx [5]
Zaznamenejte xxxxxxxxx xxxxxxx SL x XX xx stejný xxxxxxxx papír x xxxxxx je xxx, xxxxxx xxxxxxx "nejhodnější" xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx zaznamenejte XX x XX x xxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx křivky xxxx xxx paralelní. Xxx xxxxxxxxx účely xxxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx (SH — XX) x (XX — UL) xxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx jejich střední xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, buď x1 x x1 xxxx x8 a x8, xxxxx xxx xxxxxxxx x SL, XX, XX a XX xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxx alternativní "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x) XX = 5x1 + 2x2 – s4 / 6 xxxx 5x2 + 2s4 – x8 / 6
x′) XX = 5x4 + 2x2 – x1 / 6 xxxx 5s8 + 2x4 – x2 / 6
x xxxxxxx xxx XX x XX. Xxxx xx xxx splněna xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x analýze.
Pokud xxxx křivky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (xxx X) s xxxxxx jedné x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xx tom, xxxxx byly xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx
x) Xxx A = (x1+ x2+ x4+ x8 – x1 – s2 – x4 – x8) × 0,602 / x4+ u8+ s4+ x8 – x1 – u2 – x1 – s2
Pro xxx xxxxxx
x) Log X = (x1+ x2+ x4 – x1 – x2 – x4) × 0,401 / x4+ x4 – x1 – s1
nebo
d´) Log X = (u2+ x4+ x8 – x2 – x4 – x8) × 0,401 / u8+ x8 – u2 – x2
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx standardu × X
(X8 = X8 × X)
Xxxxx byla xxxxxxxxx aktivita xxxxxxxx xxxx xxxxxx 0,5 xx 2,0, potom xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxx možné, xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx relativní xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx získaný xxxxxxxx xxxxxxxxx xx přibližný x xxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxx xx neparalelní, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xxxx stále docíleno xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx stejným analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahy xxxx xxxxxxxxxxx xx 10 xx/xx,
- 20 % vzhledem x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,
- 5 xx/xx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahy 25 xx 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxx pro obsahy xxx 50 xx/xx.
[1] 1 xx báze xxxxxxxxxxx je xxxxxxxxxxxx 3200 mezinárodních xxxxxxxx (XX).
[2] Xxxxx xxxxxx xxxxx být xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxx bakteriální xxxxxxxx.
[3] Může xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Může xxx použito xxxxxxxx xxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx složení x xxxxxxxx xxxxxx výsledky.
[5] Xxxx xxxxxxx "x" x "x" xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.