Xxxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 25. xxxxxxxx 1984,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx Společenství xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxxx požadavků xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx předpisů xxxxxxxxxx xx kvality a xxxxxxx krmiv xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx vzorků a xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Komise 71/250/XXX [2], 73/46/XXX [3], 74/203/EHS [4], 75/84/XXX [5], 76/372/EHS [6] naposledy pozměněné xxxxxxxx 81/680/EHS [7], xxxxxxxx 71/393/EHS [8], 72/199/XXX [9], 78/633/EHS [10] xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 84/4/EHS [11] x směrnice 81/715/EHS [12] xxx stanovily xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xx xxxxxx v xxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx analýzy xxx xxxxxx kontrolu xxxxx, xxxxx xxx x xxxxxx obsah xxxxxxxxxxx, xx provádějí xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx.
Xxxxxx 2
Členské xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx a správní xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx směrnicí nejpozději xx 30. xxxxxx 1985 a neprodleně x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Článek 3
Tato směrnice xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 25. xxxxxxxx 1984.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Úř. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Úř. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Úř. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Xx. xxxx. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Úř. věst. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Úř. xxxx. X 257, 10.9.1981, x. 38.
XXXXXXX
XXXXXXXXX SPIRAMYCINU XXXXXX XX XXXXXXXX XXXXX
1. Xxxx x rozsah
Metoda xx určena xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x premixech. Xxxxx xxx stanovitelnosti xx 1 xx/xx (1 xxx) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx metanol/fosfát-bikarbonátovým pufrem x pH 8. Xxxxxxx xx dekantován xxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x agarovém médiu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx inhibičních xxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx xxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXX 9341 (XXXX 8340, XXXX 8553)
3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) x xxxxx xxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 24 xxxxx při 30 °C. Kulturu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx okolo 4 °X. Xxxxx xxxxxxxxx každé xxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [2]
Xx xxxxx xxxxxxxxxxxx šikmého xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 2 xx 3 ml xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3). Xxxx suspenzi xxxxxxxx k xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx x Rouxově baňce x xxxxxxxxx 18 xx 20 hodin xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxx xx 25 xx roztoku xxxxxxxx sodného (4.3) x promíchejte. Xxxxxx xxxxxxxx na 1/10 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx transmise xxxxxxxx musí xxx xxxxx 75 %, xxxxxx xxx 650 xx x 1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx chloridu sodného (4.3.). Xxxx suspenze xxxx xxx skladována xxxxx xxxxx xxx xxx 4 °C.
4. Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
4.1 Kultivační xxxxxx [3]
|
Xxxxxx pepton |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 6,5 xx 6,6 (xx sterilizaci). |
|
|
4.2 Xxxxxxxx xxxxxx [4] |
|
|
Trypton |
5,0 g |
|
Extrakt x kvasnic |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
3,0 g |
|
Agar |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 8,0 (po xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Roztok xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx xxxxxxxx)
Xxxxxxxxx 8 x xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4 Xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx, xX 8,0
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx X2XXX4 |
16,7 x |
|
Xxxxxxxx fosforečnan xxxxxxxx XX2XX4 |
0,5 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx NaHCO3 |
20,0 x |
|
Xxxx xx |
1000 xx |
4.5 Xxxx xxxxxxx xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx (4.4)
50/50 (objemově).
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx (x XX).
5. Xxxxxxxxxx roztoky
Rozpusťte xxxxxx odvážené xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.6.) xx xxxxx (4.5.) x zřeďte xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx obsahující 1000 XX spiramycinu xx mililitr. Skladován x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °C xx tento roztok xxxxxxxx až pět xxx.
X tohoto xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx postupným xxxxxxx xxxxx (4.5.) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
1 |
XX/xx |
|
X4 |
0,5 |
XX/xx |
|
X2 |
0,25 |
XX/xx |
|
X1 |
0,125 |
XX/xx |
6. Xxxxxxxx xxxxxxxx x zkušebních xxxxxxx
6.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 20,0 x vzorku x xxxxxxx krmiv, 1,0 xx 20,0 g x xxxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) a xxxxxxxx 30 xxxxx. Odstřeďte xxxx dekantujte x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx 1 IU/ml (= X8).
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx spiramycinu menší xxx 2,5 xx/xx xxxxxx, musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx. Přidejte 100 xx xxxxx (4.5) x třepejte 30 xxxxx. Xxxxxxxxxxx několik xxxxx, odeberte 50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x odpařte na xxx 4 ml xx xxxxxxxxx xxxxx xx rotační xxxxxxx xxx teplotě xxxxxxxxxxxxx 40 °X. Zřeďte xxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= X8).
6.2 Xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx X8 xxxxxxxxx xxxxxxX4 (xxxxxxxxx obsah: 0,5 XX/xx), U2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 XX/xx) x X1 (očekávaný xxxxx: 0,125 IU/ml) xxxxxx postupného xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Zkušební xxxxxx
7.1 Naočkování xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xxx xxx 50 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx miskách xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bakteriální xxxxxxxx, xxxxx poskytne xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spiramycinu.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, S2, S1) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, X2, X1). Xxxx čtyři koncentrace xxxxxxxx a standardu xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xx každé xxxxx. Xxx tento xxxxxx vyberte xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, aby xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx médiu nejméně xxx xxxxxx s xxxxxxxx 10 až 13 xx a xxxxxxx 30 xx xxxx středy. Xxxxx xxxx být proveden xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx x tabule xxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx umístěným xx xxxxx, 200 mm x xxxxxxx x 20 xx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2.), xxxxxxxxxxxxx xxxx x 7.1., xxx xxxxxxxxx vrstvu xxx 2 xx xxxxxx (60 xx xx desku x xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x umístěte xx nich xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x standardních xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx čtyřikrát xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vyhodnocení 32 xxxxxxxxxxx zón.
7.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx 16 až 18 hodin xxx 30 ± 2 °X.
8. Xxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Zaznamenejte střední xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx na semilogaritmický xxxxxxxx xxxxx, při xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx standardního roztoku x extraktu, xxxxxxxxx xxx xx níže xxxxxxx.
Xxxxxxxx "nejvhodnější" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x1 + 4x2+ s4 – 2x8 / 10
Stanovte "xxxxxxxxxxxx" bod pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XX) s použitím xxxxxxx:
x) SH = 7x8 + 4x4+ x2 – 2s1 / 10
Podobně xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) x nejvyšší xxxxxx xxxxxxxx (XX) xxxxxxxxxx x1, u2, x4 x x8 xx x1, x2, x4, a x8 x dříve xxxxxxxxx xxxxxxxxx [5]
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX xx xxxxxx xxxxxxxx papír a xxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx zaznamenejte XX x UH x xxxxxx je xxx, abyste dostali "xxxxxxxxxxxx" křivku xxx xxxxxxx.
X nepřítomnosti jakéhokoli xxxxxxxxx xx křivky xxxx být paralelní. Xxx praktické xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxx hodnoty (XX — XX) x (XX — XX) xxxxxxxxxx xxxx než x 10 % xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x1 x x1 xxxx x8 x s8, xxxxx být vyřazeny x XX, XX, XX x XX xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx alternativní "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x) SL = 5x1 + 2x2 – x4 / 6 xxxx 5s2 + 2x4 – x8 / 6
b′) XX = 5x4 + 2x2 – x1 / 6 xxxx 5x8 + 2x4 – x2 / 6
a podobně xxx XX x XX. Xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx paralelnosti. Xxxxxxxxxx, xx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxx.
Xxxxx xxxx křivky považovány xx paralelní, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xx tom, xxxxx byly xxxxxxx xxx nebo čtyři xxxxxx pro ohodnocení xxxxxxxxxxxx.
Xxx čtyři xxxxxx
x) Xxx A = (x1+ x2+ u4+ x8 – s1 – x2 – x4 – s8) × 0,602 / x4+ x8+ x4+ x8 – u1 – x2 – x1 – x2
Xxx xxx xxxxxx
x) Xxx X = (x1+ x2+ x4 – x1 – x2 – s4) × 0,401 / u4+ x4 – x1 – x1
xxxx
x´) Xxx X = (u2+ x4+ x8 – x2 – s4 – x8) × 0,401 / x8+ x8 – x2 – x2
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx × X
(X8 = X8 × A)
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx 0,5 xx 2,0, xxxxx xxxxxxxx zkoušku, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud nemůže xxx xxxxxxxxx aktivita xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx x xxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx xxxx křivky xxxxxxxxxx za neparalelní, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx krmiva.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxx spiramycinu xx 10 xx/xx,
- 20 % vzhledem x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 10 až 25 mg/kg,
- 5 xx/xx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahy 25 xx 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.
[1] 1 xx báze xxxxxxxxxxx je xxxxxxxxxxxx 3200 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX).
[2] Další xxxxxx xxxxx xxx použity xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx bakteriální xxxxxxxx.
[3] Xxxx být xxxxxxx jakékoli komerční xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Xxxx xxx použito jakékoli xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx stejné xxxxxxxx.
[5] Xxxx xxxxxxx "x" x "x" odpovídají xxxxxxxx inhibičních zón.