Xxxxxxxx směrnice Komise 93/117/XX
xx xxx 17. xxxxxxxx 1993,
xxxxxx se xxxxxxx analytické xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. července 1970, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x analýzy Společenství xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (EHS) x. 3768/85 [2], x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx směrnice 70/373/XXX xxxxxxx, že se xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a správními xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx krmiv, xxxxxxxxx za použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xx nutno stanovit xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx kontrolu xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek robenidinu x methylbenzoátu v xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx a methylbenzochátu x krmivech xx xxxxxxxxx xxxxxx popsané x příloze xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Členské xxxxx xxxxxx v účinnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné pro xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. listopadu 1994. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí obsahovat xxxxx xx tuto xxxxxxxx xxxx xxxx xxx za xxxxxx xxxxx učiněn xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu si xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v platnost xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
X Xxxxxxx dne 17. xxxxxxxx 1993.
Za Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Komise
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. xxxx. X 362, 31.12.1985, x. 8.
PŘÍLOHA
1. STANOVENÍ XXXXXXXXXX
1,3-xxx [(4-xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxx]xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxx metoda xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 mg/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx x oxidem xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx eluuje x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx se x xx xxxxxx xxxxx xx upraví xxxxxx xxxxxxx xxxx. Obsah xxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxx účinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xx xxxxxxxx xxxx xxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 Xxxxxxxx
3.2 Xxxxxxxxx methanol
Do 500 xx odměrné xxxxx xx oměří 4,0 ml kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (X20x, 1,18 x/xx), xxxxxx se xx xxxxxx methanolem (3.1.) x xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx těsně xxxx xxxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxxx, xxx HPLC
3.4 Molekulární xxxx
Xxx 3X, 8 xx 12 mesh (1,6–2,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx, průměr xxxx 0,3 mm).
3.5 Xxxx xxxxxxx: xxxxxx, xxxxxx aktivity X xxx kolonovou chromatografii
100 x xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 2 xx xxxx. Xxxxxxxxx xx a xxxxxxxxxx xx přibližně 20 xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, roztok c = 0,025 xxx/x
3,4 x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx ve xxxx (pro HPLC) x 1000 ml xxxxxxx baňce, xxxxxx xx xx xxxxxx x xxxxxxxx.
3.7 Hydrogen xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x = 0, 025 mol/l
3,55 g xxxxxxxxx (xxxx 4,45 x dihydrátu, xxxx 8,95 x xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx (xxx HPLC) x 1000 ml xxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx po xxxxxx x xxxxxxxx.
3.8 Mobilní xxxx XXXX
Xxxxxx xx:
650 xx xxxxxxxxxxxx (3.3.),
250 xx vody (xxx XXXX),
50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.6.),
50 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.).
Xxxxxxxxx se xxxxxxx 0,22 μx (4.6.) x xxxxxx xx xxxxxxxx (xxxx. ultrazvukem xx xxxx 10 xxxxx).
3.9 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx: 1.3-bis [(4-chlorbenziliden) xxxxx] xxxxxxxx hydrochlorid, X 758.
3.9.1 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: 300 μx/xx:
Xxxxxx xx 30 mg xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (3.9.) x xxxxxxxxx 0,1 xx. Xxxxxxxx xx x kyselém methanolu (3.2.) xx 100 xx odměrné xxxxx, xxxxxx se po xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx se. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx folií x xxxxx x xxxxx.
3.9.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: 12 μx/xx
Xxxxxx xxx 10,0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.1) xx 250 xx odměrné xxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx fází (3.8) x xxxxxxxx. Baňka xx obalí aluminiovou xxxxx x uloží x temnu.
3.9.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx 5.0, 10.0, 15.0, 20.0 x 25.0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.2.). Doplní xx xx značku xxxxxxx xxxx (3.8.) a xxxxxxxx. Xxxx roztoky xxxxxxxxxx 1.2, 2.4, 3.6, 4.8 x 6.0 μx/xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx tyto roztoky xx připravují těsně xxxx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky
4.1 Skleněná xxxxxx
Xxxxxxxx z xxxxxxx xxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 150 xx. Xxxxxxx průměr 10 – 15 xx, xxxxx 250 xx.
4.2 Xxxxx xxxxxxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx detektorem x diodovým xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx 250 - 400 xx
4.4.1 Xxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: 300 xx x 4 xx, C18, 10 μx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
4.5 Xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxx (Whatman XX/X xxxx xxxxxxx)
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,22 μx
4.7 Membránové xxxxxx 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxx.: Xxxxxxxxx xx citlivý xx xxxxxx. Proto xxxx xxx při xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.1 Obecně
5.1.1 Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx robenidinu x xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxx látky.
5.1.2 Xx xxxxxx provést xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx modelového xxxxxx (5.1.1.), xx xxxxxxx bylo přidáno xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx 60 mg/kg xx do 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 3 ml xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.9.1.). Xxxxxx xx xxxxxx asi xx xxxxx 0,5 ml x proudu dusíku. Xxxxx xx 15 x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx se a xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx začít x xxxxxxxx (5.2.).
Xxxx.: Xxx xxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 15 x upraveného xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 g, xxxxx xx 100 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxxx x hodinu xxxxx na třepačce (4.2). Xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx skleněných vláken (4.5) x xxxx xxxxx xxxxxxxx se xxxx do 150 xx Xxxxxxxxxxxxx baňky. Xxxxx se 7,5 x xxxxxxxxxxxxx síta (3.4), xxxxxxxxx x xxx xxxxx se xxxxx. Potom xx xxxxx xxxxxxxxxxx přes xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (5.3).
5.3 Čištění
5.3.1 Xxxxxxxx kolony s xxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx vloží xxxx zátka xx xxxxxx vaty a xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx 11,0 x připraveného xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.5) x xxxxxx xx xx xxxxxx, xxxxx xxxxx x minimální xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx prostředí. Xxxx xxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx poklepem xx xxxxx konec xxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx 5,0 xx připraveného xxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx o xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx 100 ml methanolu (3.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 2 – 3 xx xx xxxxxx x eluát xx xxxx xx 250 ml xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx roztok xx xx xxxxxxxxxxxx tlaku x při xxxxxxx 40xX xxxxxx xx xxxxx x rotační xxxxxxx (4.3). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx 3 – 4 ml xxxxxxx xxxx (3.8.) x xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx 10 xx xxxxxxx baňky. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1 – 2 xx mobilní xxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx baňky. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx x promíchá xx. Xxxxxxxxx část xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx xxxxx (4.7). Tento xxxxxx xx xxxxxxx xxx vlastní HPLC xxxxxxxxx (5.4).
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)
5.4.1 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxx povedou ke xxxxxxx výsledkům:
Kolona pro xxxxxxxxxxx chromatografii (4.4.1),
xxxxxxx xxxx (3.8),
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxxxxx,
xxxxxx délka xxxxxxxxx: 317 xx,
xxxxx xxxxxxxx: 20–50 μl.
Stabilita xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nástřikem xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.3), xxxxx xxxxxxxx 3,6 μx/xx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx výšek xxxx x xxxxxxxxxx xxxx.
5.4.2 Kalibrační xxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.9.3) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx (xxxxxx) píků xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Kalibrační xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx ploch xxxx proti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x μx/xx.
5.4.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx objem extraktu xxxxxx, jako xxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) píků xxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx robenidinu x roztoku vzorku x μg/ml xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.4.2).
x = (c × 200)/x,
xx xxxxxx xx
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx,
x = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x gramech.
7. Xxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.9.3) obsahujícím 6 μx/xx xxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x přídavkem
K xxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx robenidinu xx xxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x extraktu xxxxxx.
Xxxx xx se xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx píku x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx šíře.
7.1.2 Detektor xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx rozlišovací xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxx/xxxxx 2 xx;
x) při xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx nesmí xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vrcholu píku xxxxxxxxxxxxx lišit od xxxxxxxxx částí xxxxxxx x rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vykázána xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nikde odchylka xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
x) xxx vlnové xxxxx xxxx 220 a 350 xx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx a sestupu xxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx stejná maxima x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx bodech xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx nikde 15 % absorbance spektra xx vrcholu xxxx.
Xxxxxxxx xxxx dosaženo xxxxxxxxx x xxxxxx kritérií, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
7.2. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxx. nejvyššího výsledku xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx 15 xx/xx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxx fortifikovaný xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 85 %
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx test, xx kterém dvanáct xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx čtyři xxxxxx xxxxx pro xxxxxx a xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxx v této xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
xxxxxxx |
|||
|
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
Xxxxxx (xx/xx) |
27,00 |
27,99 |
43,6 |
40,1 |
|
Xx (xx/xx) |
1,46 |
1,26 |
1,44 |
1,66 |
|
XXx (%) |
5,4 |
4,5 |
3,3 |
4,1 |
|
XX (xx/xx) |
4,36 |
3,36 |
4,61 |
3,91 |
|
XXX (%) |
16,1 |
12,0 |
10,6 |
9,7 |
|
Výtěžnost (%) |
90,0 |
93,3 |
87,2 |
80,2 |
Xx = xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = variační xxxxxxxxxx opakovatelnosti
SR = xxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = variační xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
2. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX
(2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)
1. Účel x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx slouží x xxxxxxxx methylbenzochátu x xxxxxxxx. Dolní mez xxxxxxxxxxxxxxx je 1 xx/xx.
2. Princip
Methylbenzochát xx xxxxxxxxxx ze xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx chromatografií, x xxxxxxxx pak xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx fází vysoce xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 Dichlormethan
3.2 Xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 Xxxxxxx xxxx XXXX
Xxxx xxxxxxxxx (3.2.) x xxxx (xxx XXXX) 75 + 25 (xxx.).
Xxxxxxxxxxx xx xxxx 0,22 μx xxxxx (4.5.) x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx po xxxx 10 xxxxx).
3.4 Xxxxxx xxxxxxxx methansulfonové σ = 2 %
20 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx rozředí x 1000 ml xxxxxxxxx (3.2.).
3.5 Xxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové σ = 10 %
100 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (X20 x. 1,18x/xx) xx rozředí x 1000 xx vody.
3.6 Xxxxx XX-120 (Xx), 100 – 200 xxxx
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx katex xxxxx: 100 x iontoměniče xx rozmíchá x 500 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3,5) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx zahřívá x xxxx xx xxxxx desce. Xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx papírový xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se propláchne xxxxxxx xxxx 500 xx vody x xxxxx 250 xx xxxxxxxxx (3.2). Xxxxx xx propláchne xxxxxxx 250 xx xxxxxxxxx x xxxxxx prosáváním xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx ionex xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx.
3.7 Standardní xxxxx: xxxxx methylbenzochát (2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)
3.7.1 Xxxxxxxx standardní xxxxxx xxxxxxxxxx, 500 μx/xx
Xxxxxx xx 50 xx standardní látky (3.7) x xxxxxxxxx 0,1 xx, xxxxxxxx xx xx 100 xx odměrné xxxxx x xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx (3.4), xxxxxx xx značku x xxxxxxxx.
3.7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 50μx/xx
Xx 50 xx xxxxxxx xxxxx xx odpipetuje 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.1), xxxxxx se xxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxx a promíchá.
3.7.3 Xxxxxxxxxx roztoky
Do xxxxx 25 ml odměrných xxxxx xx xxxxxxxxxx 1, 2, 3, 4 x 5 xx pracovního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.2). Xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.3) x xxxxxxx. Xxxx roztoky xxxx xxxxxxxxxxx 2, 4, 6, 8 x 10 μx/xx methylbenzochátu. Xxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx těsně xxxx jejich xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxxx třepačka
4.2 Xxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx kolona (250 x 15 xx) vybavená xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kapacitou 200 xx
4.4 XXXX zařízení xxxxxxxx UV xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx vlnovou xxxxxx nebo detektorem xxxxxxxx xxxxx
4.4.1 Kolona xxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx: 300 xx x 4 xx, C – 18, 10μx xxxx xxxxxx xxxxxxx
4.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,22 μx
4.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,45μx
5. Postup
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx x xxx není xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xxxx se provést xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, fortifkovaného xxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx, jaké xx xxxxxxxx ve xxxxxx. X fortifikaci xx xxxxxx 1,5 xx/xx xx xxxxx xx 20 x modelového xxxxxx 600 μx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.1), promíchá xx x po 10 xxxxx xx započne x xxxxxxxx (5.2).
Xxxx.: Xxxxxxxx krmivo xxx xxxxx účel by xxxx být xxxxxxxxx xxxx, xxxx je xxxxxx, x xxx xxxx xxxxxxx by xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx xxxxxx přibližně 20 x xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 x. Xxxxx xx 100 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.1) xx xxxx 30 xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx přes papírový xxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx extrakci xxxxxxxx-xxxxxxxx (5.3).
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xx 500 xx xxxxxx xxxxxxx, obsahující 100 ml roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx přidá 25 xx filtrátu, xxxxx xxx získán xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx (5.2). Dále se xx xxxxxxx xxxxx 100 xx dichlormethanu (3.1) x xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x spodní xxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xx odpustí xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Extrakce vodné xxxx se xxxxxxx xx dvěma xxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxx xx spojí s xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx s kulatým xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (4.2) při xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx 40 xX. Xxxxxxx se xxxxxxxx x 20–25 xx xxxxxxxxx (3.2), xxxxx xx zazátkuje x xxxx extrakt xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx výměnou (5.4).
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx
5.4.1 Xxxxxxxx ionexové xxxxxx
Xx dolního xxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.3) xx vloží xxxxxx xx xxxxxx vaty. Xxxxxxxx se xxxxxxxx x 5 x xxxxxxxxxx katexu x x 50 ml xxxxxxxx chlorovodíkové (3.5). Xxxx xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx odpustí xx xxxxx xxx hladinu xxxxxxxxxxx x kolona xx promývá xxxxx xxxxx proteklý xxxxx xxxx neutrální xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xx xxxxxx xx xxxxxx 50 xx xxxxxxxxx (3.2) x xxxxx xx xxxxx xx k xxxxxxx ionexu.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.3). Baňka x xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 5 xx 10 ml methanolu (3.2) a výplach xx také xxxxxxx xx kolonu. Xxxxxxx xx xxxxx stéci xx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx 50 ml xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 5 xx xx xxxxxx. Xxxxxxxx kapalina xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x kolony 150xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.4) a xxxxx xx xxxx xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx (5.4.2) xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 5 až 10 xx methanolu (3.2) a xxxxxxx xx xxxxx do xxxxxx xxxxxxx. Dále xx xx xxxxxx xxxxxxx přidá 300 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5) a 130 ml xxxxxxxxxxxxxx (3.1). Třepe xx xx xxxx xxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxx xx odpustí xx 500 xx xxxxx s kulatým xxxx. Xxxxxxxx vodné xxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 70 ml dávkami xxxxxxxxxxxxxx x tyto xxxxxxxx xx smísí x prvním xxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx do xxxxx v rotační xxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx 40 °X. Xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx 5 xx xxxxxxxxx (3.2) a xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 10 xx odměrné xxxxx. Baňka s xxxxxxx dnem se xxxxxxxxx dvěma dalšími xxxxxxx 1 xx 2 ml xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxxxxxx množství xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.6). Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx analýzu HPLC (5.6).
5.6 Xxxxxxx xxxxxx XXXX
5.6.1 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx indikativně. Xxxxx být použity xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxx pro xxxxxxxxxxx chromatografii (4.4.1),
- xxxxxxx fáze: xxxx xxxxxxxxx a vody,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1–1,5 xx/xxxxxx,
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx: 265 xx,
- xxxxx xxxxxxxx: 20 xx 50μx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.3) obsahujícího 4μx/xx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx ploch píků x xxxxxxxxxx xxxx.
5.6.2 Xxxxxxxxxx graf
Pro xxxxx xxxxxxxxxx roztok (3.7.3) xx provede xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxx xxxxxx koncentraci. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vynesením xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x μg/ml.
5.6.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.5.) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx byl xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx x určí xxxxxxxx hodnota xxxxx (xxxxxx) z píků xxxxxxxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxx výšky (xxxxxx) xxxx methylbenzochátu x roztoku xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx x roztoku vzorku x μx/xx podle xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2.).
Obsah xxxxxxxxxxxxxxxx x (mg/kg) xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx
x =(x x 40)/x,
xx xxxxxx xx
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μg/ml,
m = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x gramech.
7. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx x přídavkem anebo xxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.7.3.), xxxxxxxxxxx 10 μx/xx xxxxxxxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xx fortifikuje xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.2.). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx být xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx methylbenzochátu x xxxxxxxx vzorku.
Mělo xx xxxxx pouze xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx zředěném xxxxxxxx. Xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx 10 % původní xxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx diodového xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kritérií:
a) při xxxxxx délce xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxx spektra xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx schopností xxxxxxxxxx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx udává xxxx/xxxxx 2 nm;
b) xxx xxxxxx délce xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx ostatních xxxxx xxxxxxx v rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Xxxxxx kritéria xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx stejná maxima x xxxxxxxx nikde xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx;
x) xxx vlnové xxxxx mezi 220 x 350 xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x této xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx dosaženo, jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx nepřesahuje nikde 15 % absorbance xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx dosaženo xxxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx prokázána.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxxxxx x xxxxxxxxxx výsledku xxx xxxxxx methylbenzochátu xxxx 4 x 20 xx/xx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx nejméně 90 %.
8. Xxxxxxxx kruhového xxxxx
X xxxxxx laboratořích xxxx analyzováno xxx xxxxxx. U xxxxxxx xxxxxx xxxx provedeny xxx analýzy.
Výsledky
|
Modelové krmivo |
Sypké xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx krmivo |
Pelety |
|
|
Průměr (mg/kg) |
Nezjištěno |
4,50 |
4,50 |
8,90 |
8,70 |
|
Sr (xx/xx) |
— |
0,30 |
0,20 |
0,60 |
0,50 |
|
XXx (%) |
— |
6,70 |
4,40 |
6,70 |
5,70 |
|
XX (xx/xx) |
— |
0,40 |
0,50 |
0,90 |
1,00 |
|
XXX |
— |
8,90 |
11,10 |
10,10 |
11,50 |
|
Xxxxxxxxx (%) |
— |
92,00 |
93,00 |
92,00 |
89,00 |
Xx = standardní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx opakovatelnost
SR = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = xxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukovatelnosti