Xxxxxxxx směrnice Komise 93/117/XX
xx xxx 17. xxxxxxxx 1993,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx krmiv
KOMISE XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx o xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX ze dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx Společenství xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nařízením (EHS) x. 3768/85 [2], x zejména xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx mají xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx předepsaných xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx použití xxxxx Společenství pro xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství;
vzhledem x tomu, xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx používání xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, xx xxx xxxxxxxxx provedených v xxxxx úředních xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx popsané x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 2
Členské xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx souladu s xxxxx xxxxxxxx nejpozději xx 30. xxxxxxxxx 1994. Neprodleně x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxx xx takový xxxxx učiněn při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx členské xxxxx.
Článek 3
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x platnost xxxxxx dnem po xxxxxxxxx v Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 17. xxxxxxxx 1993.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. věst. X 362, 31.12.1985, x. 8.
XXXXXXX
1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1,3-xxx [(4-xxxxxxxxxxxxxxx) amino]guanidin xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx a oblast xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x krmivech. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 mg/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx na xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx se eluuje x xxxxxx methanolem, xxxxxxxxxxx xx a xx xxxxxx objem xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx účinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xx xxxxxxxx xxxx pomocí XX detektoru.
3. Xxxxxxx
3.1 Xxxxxxxx
3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx 500 ml xxxxxxx xxxxx se xxxxx 4,0 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (P20c, 1,18 x/xx), doplní se xx xxxxxx methanolem (3.1.) x xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx těsně xxxx xxxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxxx, xxx XXXX
3.4 Molekulární xxxx
Xxx 3X, 8 xx 12 xxxx (1,6–2,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx, průměr xxxx 0,3 mm).
3.5 Xxxx xxxxxxx: kyselý, xxxxxx aktivity X xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
100 x oxidu xxxxxxxxx xx naváží xx xxxxxx nádoby x xxxxxxx xx 2 xx xxxx. Xxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xx přibližně 20 xxxxx. Xxxxxxxx se x xxxxx zazátkované xxxxxxx.
3.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, roztok c = 0,025 xxx/x
3,4 x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx rozpustí xx xxxx (xxx XXXX) x 1000 ml xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xx značku x xxxxxxxx.
3.7 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, xxxxxx x = 0, 025 xxx/x
3,55 x xxxxxxxxx (xxxx 4,45 x xxxxxxxxx, nebo 8,95 g xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx rozpustí ve xxxx (xxx XXXX) x 1000 xx xxxxxxx baňce. Doplní xx xx xxxxxx x xxxxxxxx.
3.8 Mobilní xxxx XXXX
Xxxxxx xx:
650 xx acetonitrilu (3.3.),
250 xx vody (pro XXXX),
50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx fosforečnanu draselného (3.6.),
50 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sodného (3.7.).
Xxxxxxxxx xx filtrem 0,22 μm (4.6.) x roztok xx xxxxxxxx (xxxx. ultrazvukem xx xxxx 10 xxxxx).
3.9 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx: 1.3-xxx [(4-chlorbenziliden) xxxxx] guanidin hydrochlorid, X 758.
3.9.1 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: 300 μg/ml:
Naváží se 30 mg xxxxxxxxxxxx xxxxx robenidinu (3.9.) x xxxxxxxxx 0,1 xx. Rozpustí xx x kyselém methanolu (3.2.) xx 100 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx se xx xxxxxx xxxxxxx rozpouštědlem x xxxxxxxx se. Xxxxx se obalí xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx v temnu.
3.9.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx standardní xxxxxx: 12 μx/xx
Xxxxxx xxx 10,0 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.1) do 250 xx xxxxxxx baňky, xxxxxx po značku xxxxxxx fází (3.8) x xxxxxxxx. Baňka xx obalí xxxxxxxxxxx xxxxx x uloží x temnu.
3.9.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx 50 xx odměrných xxxxx xx odměří 5.0, 10.0, 15.0, 20.0 x 25.0 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.2.). Doplní xx xx značku xxxxxxx xxxx (3.8.) x xxxxxxxx. Tyto xxxxxxx xxxxxxxxxx 1.2, 2.4, 3.6, 4.8 a 6.0 μx/xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx těsně xxxx použitím.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Skleněná xxxxxx
Xxxxxxxx z tmavého xxxx, vybavená uzavíracím xxxxxxxx a nádržkou xx xxxxxxxxx 150 xx. Xxxxxxx xxxxxx 10 – 15 xx, xxxxx 250 xx.
4.2 Ruční xxxxxxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xx vysoce účinnou xxxxxxxxxxx chromatografii (HPLC) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, anebo detektorem x xxxxxxxx polem, xxxxxxxxxx x xxxxx 250 - 400 xx
4.4.1 Kolona xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: 300 xx x 4 xx, X18, 10 μx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
4.5 Filtr xx xxxxxxxxxx xxxxxx (Xxxxxxx XX/X nebo xxxxxxx)
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,22 μx
4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,45 μm
5. Postup
Pozn.: Xxxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxx xxxx být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx nádobí x xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx krmivo xxx xxxxxxxxxxx robenidinu a xxxxxx, xxx neobsahuje xxxxxxxxx ani jiné xxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1.1.), xx xxxxxxx bylo xxxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx 60 xx/xx xx xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xxxxxxx 3 xx xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.9.1.). Xxxxxx se xxxxxx xxx xx xxxxx 0,5 xx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx se 15 x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx a xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx x extrakcí (5.2.).
Xxxx.: Xxx xxxx této xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx krmivo xxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx vzorek x xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xx 250 xx Erlenmeyerovy xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 15 x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 x, xxxxx xx 100 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxxx a hodinu xxxxx xx třepačce (4.2). Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx přes xxxxx xx skleněných xxxxxx (4.5) x celý xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xx 150 xx Xxxxxxxxxxxxx baňky. Xxxxx se 7,5 x xxxxxxxxxxxxx xxxx (3.4), xxxxxxxxx a xxx minut xx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx ze skleněných xxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (5.3).
5.3 Čištění
5.3.1 Xxxxxxxx kolony x xxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxx skleněné xxxxxx (4.1) se xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Naváží xx 11,0 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.5) x xxxxxx xx xx xxxxxx, pokud xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx. Oxid xxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx kolony.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx 5,0 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx x stěnu xxxxxx x extrakt xx nechá xxxxx xxxxxxxxxx oxidem hlinitým. Xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx pomocí 100 xx xxxxxxxxx (3.1) při xxxxxxxxx xxxxxxx 2 – 3 xx za xxxxxx x xxxxx xx xxxx xx 250 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xx redukovaného xxxxx x xxx teplotě 40xX xxxxxx do xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxx xx xxxxx rozpustí xx 3 – 4 ml xxxxxxx xxxx (3.8.) a xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 10 xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx několikrát xxxxxxxxx 1 – 2 xx xxxxxxx fáze x tyto xxxxxxx xx přidají do xxxxxxx xxxxx. Baňka xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx xxxxx (4.7). Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx XXXX xxxxxxxxx (5.4).
5.4 Stanovení xxxxxx účinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)
5.4.1 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.4.1),
xxxxxxx xxxx (3.8),
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxxxxx,
xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx: 317 xx,
xxxxx xxxxxxxx: 20–50 μx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx opakovaným nástřikem xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.3), xxxxx xxxxxxxx 3,6 μx/xx, xx do xxxxxxxx konstantních výšek xxxx x xxxxxxxxxx xxxx.
5.4.2 Kalibrační graf
Pro xxxxx kalibrační xxxxxx (3.9.3) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx (xxxxxx) píků xxx xxxxxx koncentraci. Kalibrační xxxxxx xx získá xxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnot xxxxx nebo xxxxx xxxx proti odpovídajícím xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků x μx/xx.
5.4.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, jako xxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (plochy) xxxx xxxxxxxxxx.
6. Výpočet x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxxxxxx xxxxxx výšek (xxxxx) xxxxxxxxxxxxxx píků x xxxxxxx vzorku xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx x μx/xx odečtením x xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.4.2).
x = (c × 200)/m,
ve kterém xx
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v roztoku xxxxxx x μx/xx,
x = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx.
7. Xxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx roztokem (3.9.3) xxxxxxxxxxx 6 μx/xx robenidinu.
7.1.1 Opakované xxxxxxxxx x xxxxxxxxx
X xxxxxxxx vzorku se xxxxx vhodného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.3). Xxxxxxxx přidaného robenidinu xx být xxxxxxx xxxx xx předpokládaný xxxxx v extraktu xxxxxx.
Xxxx by xx xxxxxx pouze xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx robenidinu x xxxxxx robenidinu x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx píku x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx i standardu xxxx být záznam xxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxx na xxxxxxxxxxxxx stejný s xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx detekčního xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx plus/minus 2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx mezi 220 x 350 xx xx xxxxx záznam xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx zaznamenaný xx xxxxxxx píku xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vykázána xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx nikde xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
x) xxx xxxxxx délce xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx xxxxxxxx vzestupu, xxxxxxx x sestupu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx od xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx v rozsahu 10 až 100 % xxxxxxxxx absorbance. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx maxima x xxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx spektry xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx vrcholu píku.
Jestliže xxxx dosaženo xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx analytu xxxx xxxxxxxxx.
7.2. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených xx xxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxxx 10 % xxxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu xxxxxxxxxx xxx 15 mg/kg.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx 85 %
8. Xxxxxxxx kruhového testu
Společenství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx kterém xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx ze vzorků xxx xxxxxxxx dvěma xxxxxxxxxx. Výsledky xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
xxxxxxx |
|||
|
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx krmivo |
Pelety |
|
|
Průměr (xx/xx) |
27,00 |
27,99 |
43,6 |
40,1 |
|
Xx (xx/xx) |
1,46 |
1,26 |
1,44 |
1,66 |
|
XXx (%) |
5,4 |
4,5 |
3,3 |
4,1 |
|
SR (xx/xx) |
4,36 |
3,36 |
4,61 |
3,91 |
|
XXX (%) |
16,1 |
12,0 |
10,6 |
9,7 |
|
Výtěžnost (%) |
90,0 |
93,3 |
87,2 |
80,2 |
Xx = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XX = xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
2. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX
(2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxx slouží k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx/xx.
2. Princip
Methylbenzochát xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, a xxxxxxxx xxx znovu xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx vysoce xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxx UV xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 Dichlormethan
3.2 Xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 Xxxxxxx fáze HPLC
Směs xxxxxxxxx (3.2.) x xxxx (pro XXXX) 75 + 25 (xxx.).
Xxxxxxxxxxx xx xxxx 0,22 μx filtr (4.5.) x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx po xxxx 10 xxxxx).
3.4 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σ = 2 %
20 ml kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x 1000 ml xxxxxxxxx (3.2.).
3.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx σ = 10 %
100 xx kyseliny chlorovodíkové (X20 c. 1,18x/xx) xx xxxxxxx x 1000 ml xxxx.
3.6 Xxxxx CG-120 (Na), 100 – 200 xxxx
Xxxx použitím xx xxxxxxxx katex xxxxx: 100 g iontoměniče xx rozmíchá v 500 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3,5) x xx stálého xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxx xx xxxxx xxxxx. Po xxxxxxxxxxx xx kyselina xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 500 xx xxxx x xxxxx 250 ml xxxxxxxxx (3.2). Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 250 xx methanolu x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx přes filtrační xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxx xxxxx: čistý xxxxxxxxxxxxxxx (2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)
3.7.1 Základní standardní xxxxxx benzochátu, 500 μx/xx
Xxxxxx xx 50 xx xxxxxxxxxx látky (3.7) x xxxxxxxxx 0,1 mg, xxxxxxxx xx ve 100 xx odměrné baňce x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.4), doplní xx xxxxxx a xxxxxxxx.
3.7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 50μx/xx
Xx 50 xx odměrné xxxxx se xxxxxxxxxx 5 ml základního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.1), doplní xx xxxxxxxxxx (3.2) po xxxxxx x xxxxxxxx.
3.7.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx 25 ml odměrných xxxxx xx xxxxxxxxxx 1, 2, 3, 4 a 5 xx xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.2). Xxxxxx xx xx xxxxxx mobilní xxxx (3.3) x xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx mají xxxxxxxxxxx 2, 4, 6, 8 x 10 μx/xx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx připravovat xxxxx xxxx xxxxxx použitím.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.2 Rotační xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx xxxxxx (250 x 15 xx) vybavená xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x nádržkou x xxxxxxxxx 200 xx
4.4 XXXX xxxxxxxx xxxxxxxx UV xxxxxxxxxx x měnitelnou xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx
4.4.1 Xxxxxx xxx kapalinovou chromatografii: 300 mm x 4 mm, X – 18, 10μm xxxx xxxxxx xxxxxxx
4.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,22 μx
4.5 Membránové xxxxxx 0,45μx
5. Postup
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx krmivo xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx analyzovat a xxxxxxxxxx xxx x xxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xxxx se provést xxxx výtěžnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxx krmiva, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx ve xxxxxx. X xxxxxxxxxxx na xxxxxx 1,5 xx/xx xx xxxxx xx 20 x modelového xxxxxx 600 μx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.1), xxxxxxxx xx x xx 10 xxxxx se započne x xxxxxxxx (5.2).
Pozn.: Xxxxxxxx krmivo xxx xxxxx účel by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, jako je xxxxxx, x xxx xxxx xxxxxxx by xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xx 250 xx Erlenmeyerovy xxxxx xx xxxxxx přibližně 20 g připraveného xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 x. Přidá xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx methansulfonové (3.4) x xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.1) xx xxxx 30 xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx (5.3).
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xx 500 ml xxxxxx nálevky, xxxxxxxxxx 100 xx roztoku xxxxxxxx chlorovodíkové (3.5) xx xxxxx 25 xx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx (5.2). Dále xx xx xxxxxxx xxxxx 100 xx dichlormethanu (3.1) x xxxxx xx dobu jedné xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xx odpustí xx 500 ml xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xx opakuje xx xxxxx xxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x tyto xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx s kulatým xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xx rotační xxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx 40 xX. Xxxxxxx xx rozpustí x 20–25 xx xxxxxxxxx (3.2), xxxxx xx zazátkuje x xxxx xxxxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx (5.4).
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx výměnou xxxxx
5.4.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.3) xx vloží xxxxxx xx skelné xxxx. Xxxxxxxx se suspense x 5 x xxxxxxxxxx xxxxxx a x 50 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.5). Xxxx xxxx se xxxxxx xx skleněné xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx až xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xx promývá vodou xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx papír. Xxxxx xx do kolony xx xxxxxx 50 xx xxxxxxxxx (3.2) x nechá se xxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xx kolonu xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.3). Xxxxx x kulatým xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 5 xx 10 ml xxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xx xxxx převede xx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx stéci xx k xxxxxxx xxxxxx. Kolona se xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxxxxxxxxx 5 xx za minutu. Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx z xxxxxx 150xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxx xx xxxx xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx baňky.
5.5 Extrakce xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx (5.4.2) xx převede xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx nálevky. Xxxxxxxxxxxxx baňka se xxxxxxxxxx 5 až 10 xx xxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Dále xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx 300 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 130 xx xxxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxx x potom xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx (dichlormethanová) xxxxxx xx odpustí xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx vodné xxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 70 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x tyto xxxxxxxx se smísí x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx s xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx dichlormethanu xx xxxxxx do xxxxx x rotační xxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx tlaku x xxxxxxx 40 °X. Xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx 5 ml xxxxxxxxx (3.2) a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx převede xx 10 xx xxxxxxx xxxxx. Baňka x xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx dvěma xxxxxxx xxxxxxx 1 až 2 ml methanolu x xxxx xx xxxxxxx xx odměrné xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx množství xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.6). Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx XXXX (5.6).
5.6 Analýza xxxxxx XXXX
5.6.1 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx podmínky xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx pokud xxxxxxx xx stejným xxxxxxxxx:
- xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx chromatografii (4.4.1),
- xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1–1,5 xx/xxxxxx,
- vlnová xxxxx xxxxxxxxx: 265 nm,
- xxxxx nástřiku: 20 xx 50μx.
Xxxxxxxxx chromatografického xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nástřikem xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.3) xxxxxxxxxxxx 4μx/xx, xx do xxxxxxxx konstantních xxxxx xxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx časů.
5.6.2 Xxxxxxxxxx graf
Pro xxxxx xxxxxxxxxx roztok (3.7.3) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx (plochy) xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx křivka se xxxxx vynesením xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x μx/xx.
5.6.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.5.) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx kalibrační xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) x píků xxxxxxxxxxxxxxxx.
6. Výpočet výsledků
Z xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) píků xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx určí xxxxxxxxxxx x roztoku vzorku x μg/ml xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2.).
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx w (xx/xx) xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx
x =(x x 40)/x,
xx xxxxxx xx
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx,
x = xxxxxxxx navážky xxxxxx x xxxxxxx.
7. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x přídavkem xxxxx xxxxxxxx detektoru x xxxxxxxx xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.7.3.), xxxxxxxxxxx 10 μx/xx xxxxxxxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxx vzorku xx xxxxxxxxxxx přidáním xxxxxxxx xxxxxxxx pracovního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.2.). Xxxxxxxx přidaného methylbenzochátu xx být podobné xxxx je xxxxxxxxxxxxx xxxxx methylbenzochátu v xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x ohledem jak xx xxxxxxx množství, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx píku x xxxxxxxx maximální xxxxx musí xxx xx xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx diodového xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx délce xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxx spektra xxxxxxxxxxx xx vrcholu xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx detekčního xxxxxxx. Pro xxxxxxxx x xxxxxxxx polem xx udává xxxx/xxxxx 2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx xxxxxx spektra zkoušeného xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vrcholu xxxx chromatogramu xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx nepřesahuje 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) při xxxxxx xxxxx mezi 220 x 350 xx xx nesmí xxxxxxxx xxxxxxxx, vrcholu x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx lišit od xxxxxxxxx x xxxx xxxxx spektra x xxxxxxx 10 xx 100 % relativní xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x jestliže xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx nepřesahuje xxxxx 15 % absorbance xxxxxxx ve vrcholu xxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx prokázána.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx mezi 4 x 20 xx/xx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx kruhového xxxxx
X deseti xxxxxxxxxxxx xxxx analyzováno pět xxxxxx. X každého xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx
|
Xxxxxxxx xxxxxx |
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx krmivo |
Pelety |
|
|
Průměr (xx/xx) |
Xxxxxxxxxx |
4,50 |
4,50 |
8,90 |
8,70 |
|
Xx (xx/xx) |
— |
0,30 |
0,20 |
0,60 |
0,50 |
|
XXx (%) |
— |
6,70 |
4,40 |
6,70 |
5,70 |
|
XX (xx/xx) |
— |
0,40 |
0,50 |
0,90 |
1,00 |
|
XXX |
— |
8,90 |
11,10 |
10,10 |
11,50 |
|
Xxxxxxxxx (%) |
— |
92,00 |
93,00 |
92,00 |
89,00 |
Xx = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
XX = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = xxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukovatelnosti