Plné znění - 31999L0076

Xxxxxxxx Xxxxxx 1999/76/ES

ze xxx 23. xxxxxxxx 1999,

xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx metoda Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx

(Xxxx x významem xxx XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx na xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxxxxx, Xxxxxx a Xxxxxxx, x xxxxxxx na xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,

xxxxxxxx k těmto xxxxxxx:

(1) Xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, xx úřední xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx toho, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx týkajícími xx jejich jakosti x složení, se xxxxxxx za xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx vzorků x xxxxxx.

(2) Xxxxxxxx Rady 70/524/XXX xx xxx 23. xxxxxxxxx 1970 x doplňkových xxxxxxx x krmivech [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxx (XX) x. 866/1999 [3], stanoví, xxx obsah xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx tyto xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x krmiv.

(3) Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx těchto xxxxx.

(4) Xxxxxxxx této xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx se stanoviskem Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX TUTO SMĚRNICI:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx státy xxxxxxx, že xxxxxxx xxx úřední kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx směrnice.

Xxxxxx 2

Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x správní xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. xxxxx 2000. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxx používat xx 1. xxxxx 2000.

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx státy xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxx takový xxxxx učiněn xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx si xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x platnost xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx 4

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 23. xxxxxxxx 1999.

Xx Xxxxxx

Xxxxx Xxxxxxxx

xxxx Komise

[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.

[3] Úř. věst. X 108, 27.4.1999, x. 20.

XXXXXXX

XXXXXXXXX XXXXXXXXXX SODNÉHO

Sodná xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

1. Xxxx a xxxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxx ke stanovení xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx a premixech. Xxxxxxx xxxxxxx xx 5 xx/xx, xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xx/xx.

2. Xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx methanolu x stanoven xxxxxx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (Xxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx, XXXX) xx xxxxxxxx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

3. Xxxxxxx

3.1 Xxxxxxxxxxx dihydrogendraselný (XX₂XX₄)

3.2 Kyselina xxxxxxxxxxxxxxx, x = 85 %

3.3 Kyselina xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, ρ= 20 %

Xxxxxxxxx 23,5 xx xxxxxxxx ortofosforečné (3.2.) xx 100 ml xxxx

3.4 6-xxxxxx-2-xxxxxxxxxx (1,5-xxxxxxxxxxxxxxxxx), x = 99 %

3.5 Xxxxxxxx, HPLC xxxxxxx

3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ρ₂₀ = 1,19 x/xx

3.7 Xxxxxx fosfátového xxxxx, x = 0,01 xxx/x

Xxxxxxxxx 1.36 x KH₂PO₄ (3.1) x 500 xx xxxx (3.11), přidat 3,5 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2) a 10,0 xx 6-methyl-2-heptylaminu (3.4). Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) xxxxxxxx pH xx 4,0 a xxxxxxxx xx 1000 ml xxxxx (3.11).

3.8 Okyselený xxxxxxxx

Xx xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx přenést 5,0 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.6), xxxxxxx xx značku methanolem (3.5) x promíchat. Xxxxx xxxxxx by xxx xxx připravován xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx.

3.9 XXXX xxxxxxx xxxx, xxxxxx fosfátového xxxxx x xxxxxxxxx 5 + 95 (xxx. + xxx.)

Xxxxxxxxx 5 xx roztoku xxxxxxxxxxx xxxxx (3.7) x 95 ml xxxxxxxxx (3.5).

3.10 Standardní xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx čistotou, X₃₄X₅₃X₈ (xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx lasaliensis), E763

3.10.1 Xxxxxxx xxxxxx lasalocidu xxxxxxx, 500 x/xx

X xxxxxxxxx 0,1 xx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.) xx 100 xxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8.), doplnit xx značku stejným xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx by xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx.

3.10.2 Xxxxxxx roztok xxxxxxxxxx sodného, 50 x/xx

Xxxxxx xxxxxxx 10,0 xx zásobního xxxxxxx (3.10.1.) do xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8.) x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx připravován xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před použitím.

3.10.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx sady xxxxxxxxx Elenmayerových baňek x xxxxxx 50 xx xxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 x 10,0 xx xxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.2). Doplnit xx xxxxxx okyseleným xxxxxxxxxx (3.8) a xxxxxxxxx. Xxxx roztoky xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 a 10,0 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx na xx. Xxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxxxxx xxxx použitím.

3.11 Xxxx, XXXX xxxxxxx

4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

4.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx) x xxxxxxxx regulace xxxxxxx

4.2 Membránové xxxxxx, 0,45 μx

4.3 HPLC xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 20 μl

4.3.1 Xxxxxx xxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx 125 xx x 4 xx, xxxxxxxx xxxx X18, 5 μx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx

4.3.2 Spektrofluorimetr x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxx

5.1.1 Slepý xxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2) je xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx čisté xxxxxx a xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx lasalocid xxxxx ani xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx typu xxxx xxxxxxxxx vzorek x xxxxx x xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.1.2 Kontrolní xxxx

Xxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx čistého xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x jeho xxxxxxx xx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx obohacení xx xxxxxx 100 xx/xx, xxxxx 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) xx 250 xx xxxxxxx kádinky x xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx 0,5 ml. Xxxxxx 50 g xxxxxxx krmiva, xxxxxxxx xxxxxxxxx a ponechat x xxxxx 10 xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx x extrakcí (5.2) xxxx několikrát xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx, xxxxx není x dispozici xxxxx xxxxxx xxxxxxx vzorku (xxx 5.1.1.), xx xxxxxxxxx kontrolního xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxx xxxxxxx xx analyzovaný xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxx již xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx společně s xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx odečtením.

5.2 Xxxxxxxx

5.2.1 Xxxxxx

Xxxxxxx 5 xx 10 x xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 x xx 250 xx Xxxxxxxxxxxx xxxxx xx zátkou. Xxxxxxx xxxxxx 100,0 xx xxxxxxxxxxx methanolu (3.8). Volně xxxxxxxxxx x krouživými xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx kádinku x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx lázně (4.1) x xxxxxxx přibližně 40 °X xx 20 xxxxx. Xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu. Xxxxxx stát po xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx nedojde x usazení rozpuštěné xxxxx. Xxxx odfiltrovat xxxxxxxx xxxx xxxx 0,45 x xxxxxxxxxx xxxxx (4.2) do xxxxxx xxxxxx. Přejít x xxxxxxxx xxxxxx XXXX (5.3.).

5.2.2 Premixy

Odvážit x přesností 0,001 x xxxxxx nerozemletého 2 g xxxxxxx xx 250 mililitrové xxxxxxx baňky. Přidat 100,0 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxxxx pohybem xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxx 40 °X na 20 xxxxx. Xxxx vyjmout x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu. Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xx xxxx xxxxx hodiny, xxxxx xx rozpuštěná hmota xxxxxxx. Xxxx odfiltrovat xxxxxxxx část xxxx 0,45 m xxxxxxxxxx xxxxx (4.2) xx xxxxxx xxxxxx. Naředit xxxxxx objem čistého xxxxxxxx okyseleným methanolem (3.8), xxx xx xxxxxx finální xxxxxxxxx xxxxxx obsahující kolem 4 x/xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxx pomocí HPLC (5.3).

5.3 Stanovení xxxxxx XXXX

5.3.1 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx uvedeny xxx xxxxxxxxx; xx možno xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1): 125 xx x 4 xx, obrácená xxxx C18, xxxxxx 5 x xxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx fáze (3.9): Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (3.7) x methanolu (3.5), 5 + 95 (xxx. + xxx.)

Xxxxxxxx xxxxxxx: 1,2 xx/xxx

Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx:

– Xxxxxxxxx: 310 xx

– Xxxxxx: 419 xx

Xxxxxxxxxxx xxxxx: 20 μx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx injekcí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.3), dokud xxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx výšek (nebo xxxxx) x retenčních xxxx.

5.3.2 Xxxxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx každý kalibrační xxxxxx (3.10.3) x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx hodnotami xxxxx (xxxxx) xx xxxxxxxxx xxx x odpovídajícími xxxxxxxxxxxxx v μx/xx xx xxx svislé.

5.3.3 Xxxxxx xx vzorkem

Několikrát xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x 5.2.1 nebo 5.2.2 xx použití xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx kalibračních xxxxxxx x určit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sodnému.

6. Xxxxxxx výsledků

Ze xxxxxxxxx xxxxxx výšek (ploch) xxxxxxxxxxx injekcí xxxxxxx xx vzorkem (5.3.3) xxxxx xxxxxxxxxxx lasalocidu xxxxxxx (g/ml) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

6.1 Xxxxxx

Xxxxx lasalocidu xxxxxxx xx xxxxxx, x (xx/xx) je dán xxxxxxxxxxxx xxxxxxx

x = (β · V₁)/m [xx/xx]

xxx:

β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (5.2.1) x μg/ml,

V₁ = X2 = objem xxxxxxxx xxxxxx podle 5.2.1. v ml (xx. 100),

m = xxxxxxxx testovaného xxxxxx x g.

6.2 Premixy

Obsah xxxxxxxxxx sodného xx xxxxxx, x (mg/kg) xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx

x = (β · V2 · x)/x [mg/kg]

kde:

β = xxxxxxxxxxx lasalocidu sodného x xxxxxxx vzorku (5.2.2.) v x/xx,

X₂ = xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 5.2.2. x xx (x. x. 250),

x = xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 5.2.2., m = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x g.

7. Ověření xxxxxxxx

7.1 Shodnost

Metody xxxxxxxx xx spektrofluorometrii jsou xxxx náchylné x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x postupy xxxxxxxxxx xx detekci UV xxxxxx. Identitu analyzovaného xxxxxxxxx xxx potvrdit xxxxxxxxxxxxxxxx.

7.1.1 Kochromatografie

Testovaný xxxxxxx (5.2.1 xxxx 5.2.2) xx xxxxxxxx přidáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx sodného xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx nalezeno x xxxxxxxxxx extraktu. V xxxx odpovídající množství xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sodnému. Xxxx xxxxxxxxx se nesmí xxxxxxxxxx x xxxx xxx xx pološířky xxxxxxxxx neobohaceným xxxxxxxxx xxxxxx.

7.2 Reprodukovatelnost

Rozdíly xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx provedených xx xxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx:

- 15 % xxxxxxxxxx relativně k xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx sodného x rozmezí xx 30 mg/kg xx 100 xx/xx,

- 15 xx/xx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx/xx xx 200 xx/xx,

- 7,5 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 200 xx/xx.

7.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx by xxxx být alespoň 80 % xxx xxxxxxxxx (čistý) vzorek. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx výtěžek xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 90 %.

8. Výsledky xxxxxxxx xxxxxx

Xx společné xxxxxx [1] xxxx xx 12 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 xxxxxxx (xxxxxx 1 a 2) a 5 xxxxx (vzorky 3-7). Xx xxxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

X = xxxxx xxxxxxxxxx

X = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx = standardní xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx

XX = xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, %

XXX = variační xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %

[1] Analyst, 1995, 120, 2175-2180.