Xxxxxxxx Komise 2000/33/XX
xx xxx 25. dubna 2000,
xxxxxx se po xxxxxxx xxxxx přizpůsobuje xxxxxxxxxxx pokroku směrnice Xxxx 67/548/XXX o xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx předpisů xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x označování xxxxxxxxxxxx xxxxx [1]
(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s ohledem xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx na xxxxxxxx Xxxx 67/548/XXX xx xxx 27. xxxxxx 1967 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x správních xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, balení x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx [2], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx parlamentu x Xxxx 1999/33/XX [3], x xxxxxxx xx xxxxxx 28 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxxx důvodům:
(1) X xxxxxxx X xxxxxxxx 67/548/XXX xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Je xxxxxxxx přizpůsobit xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pokroku.
(2) Xxxxx čl. 7 xxxx. 2 xxxxxxxx Xxxx 86/609/XXX xx xxx 24. xxxxxxxxx 1986 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a správních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx se ochrany xxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx [4] xxxxx být pokus, xxx xxxx xx xxx použito xxxxx, xxxxxxxx, xx-xx rozumně x prakticky dostupná xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
(3) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx přílohy X směrnice 67/548/XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, při xxxxx xxxxxx používána zvířata, x xxxxx zpřístupnit xx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek xxxxx xx. 3 xxxx. 1 směrnice 67/548/EHS.
(4) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx směrnic o xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Článek 1
Xxxx příloh X x XX xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx X přílohy V xxxxxxxx 67/548/XXX.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx dosažení souladu x touto xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 1. xxxxx 2001. Neprodleně x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx předpisy xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx nebo xxxx být takový xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx xxxxxxx členské státy.
2. Xxxxxxx xxxxx sdělí Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx právních xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx působnosti xxxx směrnice, a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x přijatými xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx po xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Tato xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 25. dubna 2000.
Xx Xxxxxx
Xxxxxx Xxxxxxxöx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Přijato před xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx.
[2] Xx. xxxx. 196, 16.8.1967, s. 1.
[3] Xx. věst. X 199, 30.7.1999, x. 57.
[4] Xx. xxxx. X 358, 18.12.1986, x. 1.
XXXXXXX X
"X.40 XXXXXXX XXXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx zkoušky xx xxxxx xx xxxxxxx účinky xx xxxx xx principu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže xxxxxxx (XXX) x zkouška x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (XXXXX, Společné xxxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx) (1, 2, 3) xxxxxxxxx xxxx vědecky xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx rozlišit xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx kůži. Xxxxxxxx x xxxxxxx založené xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx způsobující xxxxx xxxxxxxxx, X 35 x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, X 34) (2). Xxxxx x postup xxxx xxxxxxx xx xxxxxx; volba xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx také Xxxxxx xxxx, xxxx X.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxx poškození kůže xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxx 1.5.3.4 a 1.7.2.3.
1.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxx TER xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xx 24 x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx normální xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx vrstvy (xxxxxxx xxxxxxx), xxxxx xx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxxx TER xxx xxxxxxxx xxxxxx (5 xΩ) (4, 5). Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx nesnižují TER xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx postupu xxx xxxxxxxxx aktivní xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (6)) xxx zařadit xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxx falešně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx získaných xxxxx pro tyto xxxxx xxxxxxxxxx látek (2, 7).
1.5 Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxx TER xx xxxx potkana
1.5.1 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx z xxxxxxx (20 — 23 xxxxxxx) xxxxxxx (Wistar xxxx xxxxxxxxxxx xxxx). Xxxxxxx x xxxxx xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx holicím xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx otíráním, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx ponoří xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (obsahujícího xxxx. streptomycin, penicilin, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx 3 xxx (x přípravě xxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx starší xxx 31 xxx).
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx kůže a xxxxxxxxxx xxx se x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Kůže se xxxx přeloží xxxx xxxxx teflonové (PTFE) xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx O-kroužek, xxx xxxx kůže xxxxxxxx, x přebytek xxxxx xx xxxxxx. Rozměry xxxxxxxx x O-kroužku xxxx xxxxxxx na xxxxxxx 1. Xxxxxxx X-xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx poté xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxxxxx komory obsahující xxxxxx síranu hořečnatého (154 xX) (xxxxxxx 2).
1.5.3 Xxxxxxxx postup
1.5.3.1 Xxxxxxxx zkoušeného materiálu
Kapalná xxxxxxxx xxxxx (150 μx) xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx uvnitř xxxxxxxx (obr. 2). Xxx xxxxxxxx pevných xxxxxxxxx xx použije xxxxxxxxxx množství xxx, xxx xxxx pokryta xxxx epidermis. Xxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx (150 μx) a xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxx xxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx toho může xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xx 30 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx rozemletím xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx.
Xx zkoušce xxxxx xxxxx se xxxxxxx tři xxxxxxx xxxx. Zkoušená xxxxx xx xxxxxxxx po xxxx 24 x (xxx xxxx xxx 1.5.3.4). Xxxxxxxx látka xx zcela xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx nejvýše 30 °X. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek, které x xxxxxxxx ztuhly, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx teplé xx 30 °C.
1.5.3.2 Xxxxxx TER
TER xx xxxx nízkonapěťovým xxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xxxx ekvivalentní). Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx sníží xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70 % xxxxxxxx xxx, aby byla xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx sekundách xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxxxx přidáním 3 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX). Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx xxx strany terčíku xxxx za xxxxxx xxxxxx odporu v xΩ/xxxxxx xxxx (xxxxxxx 2). Rozměry xxxxxxxx x délky xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pod xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx obrázku 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx během xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx ponořené v xxxxxxx xxxxxx hořečnatého xxxxxx. Vnější (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, aby spočívala xx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx mezi spodkem xxxxxxxxx svorky x xxxx teflonové xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx 1), xxxxx xxxx vzdálenost xx xxxx na naměřené xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxx xx xxxxxxxx, že xx-xx naměřená xxxxxxx xxxxx xxx 20 xΩ, může xx xxx způsobeno vrstvou xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. X odstranění xxxx xxxxxx se xxx xxxxxxx xxxx. xxx, xx xx xxxxxxxxx trubička xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx x 10 x xx protřepává. Roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx síranem xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx doporučeny tyto xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx odporu (xΩ) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36 %) |
0,5–1,0 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
10–25 |
1.5.3.3 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx organické xxxxx
Xxxx-xx xxxxxxx XXX pro xxxxxxxxx aktivní látky xxxx organické xxxxx xxxxxxx zkoušené látky xxxxx xxxx xxxxx 5 kΩ, lze xxxxxxx xx tkáni xxxxxxxxx průniku barviva. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pozitivní (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx barviva xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxxx aplikaci xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxxxx stranu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx 2 x 150 μl 10 % xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxx přibližně 10 x xxxxxxx xxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx barvivo. Všechny xxxxxxx xxxx se xxxxxxx sejmou x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx se xx xxxxxxxx (xxxx. 20 xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx scintilační xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx deionizovanou xxxx (8 xx). Xxxxxxxx xx xxxxx 5 xxx. xxxxxxxxxxxx, xxx xx odstranilo xxxxx xxxxx xxxxxxx. Tato xxxxxx oplachování xx xxxx xxxxxxxx, a xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxx xx lahviček xxxxxxxxxxxx 5 xx 30 % roztoku (x/X) natrium-dodecyl-sulfátu (SDS) x xxxxxxxxxxx vodě x xxxxxxxx xx xxxx noc při 60 °C. Xx xxxxxxxx se všechny xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx 8 xxx. xxx 21 °X (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ˜ 175). 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx zředí 4 ml 30 % (m/V) roztoku XXX x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx (A) xx xxxx xxx xxxxxxxxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx sulforhodaminu X xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx sulforhodaminu X xxx 565 xx = 8,7 × 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xx xxxxxxx xxx každý terčík xxxx x xxxx xx vypočte xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Střední xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx hodnoty pro xxxxxxxxx xxxxxxxx spadají xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx uvedení xxxxxxxxx xxxxx doporučeny xxxx přijatelné hodnoty xxxxxxx xxxxxx barviva:
|
Kontrola |
Látka |
Rozmezí xxxxxx barviva (μx/xxxxxx xxxx) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36 %) |
40-100 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
15-35 |
1.5.3.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxx (např. 2 hodiny), xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx. Validační xxxxxx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxx leptavé účinky x xxxxxxxx zkoušených xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx aplikaci na xxxxxx xxxx po xxxx 2 hodin (2), třebaže toto xxxxxxxxx umožnilo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx látek s xxxxxxxxx účinky x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 24xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx vliv xx získané hodnoty XXX. Xxxx 5 Ω pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx. Doporučuje xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx použitých xx validační xxxxxx (3).
1.6 Xxxxxxxx zkušební xxxxxx — xxxxxxxxx xxxxxx modelu xxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx po xxxx 4 hodin xx xxxxxxxxxxxx model xxxxxx kůže xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x funkční rohovité xxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx způsobit xxx specifikované xxxxxxxxx xxxx xxxxxx životaschopnosti xxxxx (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx zkoušky redukce XXX) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Podstata xxxxxxx xx založena xx hypotéze, xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx, xxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx xxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx cytotoxické, aby xxxxxxxxx xxxx buněk x xxxxxxxx buněčných xxxxxxxx.
1.7 Popis zkušební xxxxxx — stanovení xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xx. Bariérová xxxxxx xxxxxxxx vrstvy xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxx xxxxxxxx demonstrací xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, že model xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo možné xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx např. redukcí XXX, xx. měřením xxxxxxx absorbance X) xx expozici negativní xxxxxxxxx látce musí xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxx (xx srovnání x xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx, aby xxxxx odpovídal xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx validaci (2).
1.7.2 Xxxxxxxx postup
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx materiálů xxxx xxx aplikováno xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx (minimálně 25 μx/xx2). X xxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky, xxx xxxxxxx xxxx, a xxxxxxxx xxxxx by xxxx xxx ovlhčena, xxx xxx zajištěn xxxxx xxxx x xxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx být xxxxx potřeby před xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx široké xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx expoziční xxxx musí být xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx opatrně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx životaschopnosti xxxxx
X xxxxxx životaschopnosti buněk xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx redukce XXX, xxx xxx xx x různých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky (2). Xxxxxx kůže se xxxxxx do xxxxxxx XXX x koncentraci 0,3 mg/ml xxx xxxxxxx 20-28 °C xx dobu 3 xxxxx. Sraženina xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx (rozpouštědlem) x xxxxxxxxxxx formazanu se xxxxxxx xxxxxxx absorbance X xxx xxxxxx xxxxx 545 xx 595 xx.
1.7.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx kůže x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. xxxxx xxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x chemických xxxxx xxxxxxxxx xx validační xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vykazovala v xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx laboratořemi xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx alespoň xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx validitu (2) x výsledky xxxxxx validační xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx časopise x předcházející xxxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 Zpracování xxxxxxxx
2.1.1 Xxxxxxx XXX xx xxxx potkana
Hodnoty xxxxxx (xΩ) xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx včetně údajů x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx experimentech, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx x x odvozené xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xx formě xxxxxxx.
2.1.2 Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxx A x xxxxxxxxx hodnoty xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx včetně xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x středních xxxxxxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx měly xxx uvedeny xx xxxxx tabulky.
2.2 Xxxxxxxxx x interpretace xxxxxxxx
2.2.1 Xxxxxxx TER na xxxx xxxxxxx
Xx-xx hodnota XXX xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx látku xxxxx xxx 5 xΩ, xxxx látka xxxxxx. Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxx nebo xxxxx 5 kΩ x xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku, xx látka žíravá.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, xxx provést xxxxxxxxx průniku barviva. Xx-xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x terčíku xxxx větší xxxx xxxxx střednímu xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použití 36 % HCl xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx zkoušené látky xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx je tedy xxxxxx. Xx-xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx menší xxx střední xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxx souběžně xxx xxxxxxx 36 % HCl, je xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x látka xxxx xxxx xxxxxx.
2.2.2 Xxxxxxx x xxxxxxx lidské xxxx
Xxxxxxx obsorbance X xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxxxxxxxx 100 % xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx; xxxxxxx xxxxxxxxxx X dosažené xxx každý xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x procentech xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxx se rozlišují xxxxxx xxxxxxxxx od xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xxxxxx žíravé (xxxx xxxxxx xx rozlišují xxxxx třídy leptavých xxxxxx), xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx model xxxxx definován xxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx potvrdit, xx xx vhodný (2).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx x zkoušce
Protokol x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx látka:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, fyzikální xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Podobné informace xx xxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx postupu,
- xxxxx x zdůvodnění xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx:
- hodnoty xxxxxx (xxxxxxx XXX) xxxx xxxxxxx životaschopnosti xxxxx x procentech (zkouška x modelem lidské xxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxx standardní xxxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x středních xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. XXXXXXXXXX
(1) XXXXX (1998), ECVAM Xxxx &xxx; Xxxxx, XXXX 26, 275-280.
(2) Fentem, X. X., Archer, X. X. B., Xxxxx, X., Xxxxxx, X. A., Xxxxxx, X. D., Xxxx, X. X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxx, X-X., Xxxxxxx, X. (1998), Xxx XXXXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. 2. Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxx Management Xxxx, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 12, 483-524.
(3) Xxxxxxx, X. X., Brantom, X. G., Xxxxxx, X. X., Xxxxxx, X., Walker, A. X., Xxxxx, X. X. (1998), Xxx XXXXX international xxxxxxxxxx xxxxx on xx xxxxx xxxxx for xxxx xxxxxxxxxxx. 1. Xxxxxxxxx xxx distribution xx xxx test xxxxxxxxx, Toxicology xx xxxxx 12, 471-482.
(4) Xxxxxx, X. X. X., Xxxxxxxxx, M. X., Xxxxxx, C. (1986), Xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx — xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, Xxxx Xxxx. Xxxxxxx. 24, 507-512.
(5) Xxxxxx, X. X., Hall, X. X., Xxxxxxx, R., XxXxxx, X. X., Xxxxxxxxx, D. X., Xxxxxxx, X., Cheeseman, X., Xxxxxxx, D. X., Xxxxxxx, J. (1992), Xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx in xxxxx: xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 6, 191-194.
(6) Xxxxx, X. P., Xxxxxx, X. H., Balls, X., Xxxxxx, X. X., Xxxxxx, R. X., Xxxx, L. X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, M. (1998), Xx xxxxxxxxxx xx xxx proposed XXXX xxxxxxx strategy xxx xxxx xxxxxxxxx, XXXX 26, 709-720.
(7) Xxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxxx, M., Barratt, X. D., Xxxxxx, X. X., Esdaile, X. X., Xxxxxxx, X. R., Gordon, X. C., Xxxxxxxxxx, X., Xxxxx, X. X., Liebsch, X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Ponec, M., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxx, X. P., Balls, X. 1995), X xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxx and xxxxxxxxxxxxxxx xx XXXXX xxxxxxxx 6, XXXX 23, 219-255.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2"
XXXXXXX XX
"X.41 XXXXXXXXXXXX — XXXXXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Fototoxicita xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx určitým xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxx xxxx po systémovém xxxxxx xxxxxxxx látky.
Informace xxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxxxx x identifikaci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx. xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx možného nebezpečí, xxxxx může xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx UV xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx světlu.
Protože xxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kombinovaným xxxxxxxxx chemické xxxxx x světla, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sloučeniny, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx vivo po xxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx byla xxxxxxxx a xxxxxxxxxx x rámci xxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX x xxxxxx 1992 — 1997 (1, 2, 3) s cílem xxxxxxxx platnou xxxxxxxxxxx xx vitro x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx OECD xxxxxxxx postupných xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Xxxxxxxx xx zkoušek xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx byly xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx účinky xx vivo x xxxxxx a x xxxxxxx x zkouška xx ukázala xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx jiných xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx látek, které xxxxxxxx tyto xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx není vyvinuta x tomu, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx ultrafialového xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx X/x2 xxxx xX/xx2.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxx (xxxxxxxxx × xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx viditelného xxxxxx xxxxxxxxxxxx na povrch, xxxxxxxxx x xxxxxxx (X × x) xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx. J/m2 nebo X/xx2.
Xxxxxx pásma UV xxxxxx: označení xxxxxxxxxx xxxxxx CIE (Commission Xxxxxxxxxxxxxx xx x'Xxxxxxxxx): XXX (315400 xx), XXX (280315 xx) x XXX (100280 xx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx: xxxx hranice xxxx XXX x XXX xx často xxxxxxxxx xxxxxxx 320 nm x xxxxx XXX xxxx xxx xxxxxxxxx xx XX-X1 x XX-X2 s xxxxxxx xxxxx 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx: parametr, kterým xx xxxx celková xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx vitálního xxxxxxx neutrální červeně xx xxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx x xxxxxxxxxx xx měřeném xxxx x xx xxxxxxxx uspořádání zkoušky xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost buněk: xxxxxxxxxxxxxxx x poměru x negativním kontrolám (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x XX, xxxx xxx XX), xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx používaný pro xxxxxx xxxxxxxx zkoušek xxxxxxxx xx předpověď xxxxxxxxx potenciálu. V xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in vitro xx předpověď fototoxického xxxxxxxxxx xxxxxx faktor XXX a veličinu XXX.
XXX (xxxxx-xxxxxxxxxx factor — fotoiritační xxxxxx): xxxxxx získaný xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxx xxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX/XXX světlem (+ XX) x xxx něho (-UV).
MPE (xxxx xxxxx xxxxxx — xxxxxxx světelný xxxxxx): xxxx veličina xxxxxxxx x matematické xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx závislosti účinku xx xxxxxxxxxxx získaných xxx xxxxxxxxxxxxxx ozáření XXX/xxx xxxxxxx (+ XX) a bez xxxx (-UV).
Fototoxicita: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx určitým chemickým xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx světlu xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx chemické xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx pojmu "xxxxxxxxxxxx", který se xxxxxxx k xxxxxx xxxxx xxxx fototoxických xxxxxx, které se xxxxxxxxx xx xxxx xx expozici xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx nebo xxxxxx). Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx vždy x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxx opalování).
Fotoalergie: získaná xxxxxxxxxxxx reaktivita, xx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x xxxxx vyžaduje xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx tím, xxx xxx reakci xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx po expozici xxxxx negenotoxické dávce XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx, kdy xx tvorba xxxxxx xxxxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx chemickou xxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxxxxxxx, který by xxx xxx souběžně xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, je pro xxxx xxxxxxxxx zkoušku xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xxxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxxxxx chemické látky xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx předložené xxxxxx (1, 3, 13).
1.4 Xxxxxx poznámky
Fototoxické xxxxxx byly xxxxxxxxxxx x mnoha xxxx xxxxxxxxxx látek (5, 6, 7, 8). Xxxxxx jediným xxxxxxxxx xxxxx je schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxx energii x xxxxxxx slunečního xxxxxx. Xxxxx prvního xxxxxx fotochemie (Xxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx světelných xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zkoušení xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxx UV/VIS absorpční xxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx (xxxx. xxxxx Xxxxxxxx OECD 101). Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 x.xxx-1.xx-1, xxxxxxxx xxxxx xxxx fotoreaktivní xxxxxxxxx x xxxxxx xxx zkoušena xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky (dodatek).
1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx metody
Byly xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) chromoforem xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx (7). Všechny xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx je proto xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx zkoušení s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx dávce XXX/XXX světla x xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxxx xxxxxx vitálního xxxxxxx xxxxxxxxx červeně (XX) (9) 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx x ozáření.
Buňky Xxxx/x 3X3 xx 24 x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxx 96xxxxxxx destičky na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 1 x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx koncentracemi xxxxxxxxxx xxxxx. Poté xx xxxxx xx xxxx destiček exponována xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx XXX/XXX xxxxxx 5 X/xx2 XXX (+ XX xxxxxxxxxx), xxxxxxx druhá xxxxxxxx se udržuje x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). U xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx médiem x xx dalších 24 x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx stanovena 3xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XXX). Relativní xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se vypočte xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx (+ XX) x xxx ozáření (-UV), xxxxxxx xxx xxxxxxx XX50, xx. xxx xxxxxxxxxxx způsobující 50 % úbytek xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.6 Xxxxxxxx jakosti
Citlivost buněk xx UVA, xxxxxxxxx xxxxx: citlivost buněk xx UVA xx xxxx xxx pravidelně xxxxxxxxxxxx. Buňky xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx zkoušce xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxxxxx xxx se xxxxx xxxxxx UVA záření 1 xx 9 X/xx2 a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx se stanoví x xxx xxxxxxx xxxxxxxx NRU. Buňky xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx jejich xxxxxxxxxxxxxxx xx ozáření 5 X/xx2 xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx. Tato xxxxxxxx xx měla být xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx XXX xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx: zkouška xxxxxxx kritéria xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x EBSS (Xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztok) x 1 % xxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo 1 % xxxxxxxxx (XxXX)) xxxx bez xxxx xxxxxxxx xxx + XXX experimentu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 80 % xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxx neozářených xxxxx x tomtéž xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X540 XXX) xxxxxx v xxxxxxxx XX xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, zda 1 × 104 buněk xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx dvou xxx zkoušky xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (doubling xxxx). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx přijatelnosti, jestliže xxxxxxx xxxxxxx X540 XXX xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx ≥ 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: při xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in vitro xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx známá fototoxická xxxxxxxx xxxxx. Při xxxxxxxxx xxxxxx EU/COLIPA xxx použit jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXX), x xx xxxx doporučen. Xxx XXX xxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx fototoxicity 3T3 XXX in xxxxx xxxx xxxxxxxxxx tato xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxx CPZ ozářený (+ UVA): EC50 = 0,1 xx 0,2 μx/xx, xxx XXX neozářený (-XXX): XX50 = 7,0 xx 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), xx. xxxxx xxxxxxx XX50, xx xxx xxx alespoň 6.
Xxxxxxx XXX xxxxx xxx xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx z xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx případě xx xxxx xxx xx xxxxxxx dosavadních xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx přiměřeným xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX50 a PIF xxxx MPE (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7 Popis xxxxxxxx xxxxxx
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx studii xxxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx fibroplastů — Xxxx/x 3X3, xxxx 31 — xxx x banky XXXX, nebo x xxxxx ECACC x xx tedy xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx nebo xxxxxxx linie xxxxx xxx xxx stejném xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx předpokladu, xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx musí xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx by xxxx xxx pravidelně kontrolovány, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, a xxxx xx být xxxxxxx xxxxx tehdy, xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxx kontroly xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxxx buněk xx XX xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxxx xx být xxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 x pasáže x xxxxxxxxx dosažitelným xxxxxx xxxxxx, nejlépe x xxxxx než xxx pasáže. Xx xxxxxxxx, xxx byla xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xx UVA xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupem xxxxxxxx jakosti xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx postupu xx xxxx xxx použita xxxxxx xxxxxxxxxx média x xxxxxxxxx xxxxxxxx. X buněk Balb/c 3X3 se jedná x XXXX (Dulbeccova xxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxx 10 % xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, 4xX glutaminem, penicilinem x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx při 37 °X/7, 5 % XX2. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, aby xxxxxxxxxx xxxxxxxx zajistily, xxx xxx buněčný xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxx buněčné xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kultur xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx jednou se xxxxxxxx xxxx použitím xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx kultivačního média x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx zkoušky, xx. do xxxxxxxx, xxx xx xx 48 x xx xxxxxxxx stanovována xxxxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx Balb/c 3X3 xxxxxxxxxxx x 96xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx inokulum 1 × 104 buněk xx xxxxx.
Xxx každou xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nasadí xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx 96xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx jsou xxxx xxxxxxxx podrobeny celému xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx kromě xxxx, xxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx xx udržována x temnu (-UVA/VIS).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx in xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx potenciálu, xxxx x fototoxikologii dosud xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx, pro xxxxx xxxxxxxx jako xxxxxx xx xxxx nebo xx vitro xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se tedy xxx za xxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx byla xxxxxxxxxx zkouška xxxxxxxxx xx systémem aktivace xxxxxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxx chemická xxxxx/xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxx xxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx neprokazují xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Může-li xxxxx x rychlé xxxxxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světlem.
Zkoušené xxxxxxxx látky xx xxxx xxx rozpuštěny xx fyziologickém roztoku, xxxx. v Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx ve xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xX xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xx 100xxxxxxx požadované xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx 1:100 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Použije-li se xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx x konstantní xxxxxxxxxxx 1 % xxx. ve všech xxxxxxxxx, xx. x xxxxxxxxx kontrole x xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (DMSO) x xxxxxxx (EtOH). Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (např. xxxxxx), xxx xxxx xx xxx pečlivě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látku, xxxxxxxxx fototoxických účinků, xxxxxx xxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxx xx 37 °X.
1.7.1.6 Xxxxxxx XX xxxxxxx/xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx zdroje xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx kritickým xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx v xxxxx XXX x ve xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7, 10), xxxxxxx xxxxxx x xxxxx XXX je xxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxx vysoce xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx mezi 313 xx x 280 nm 1000krát (11). Kritéria pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx měla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx zdroj světla xxxxxxxxx světlo x xxxxxxxx délkách, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx) xxxx dostatečná xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Použité xxxxxx délky x xxxxx, včetně xxxxx xxxxx (infračervená xxxxxx), xx xxxx neměly xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx simulátory se xxxxxxxx xx optimální xxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx jak xxxxxxxx xxxxxxx, xxx vysokotlaká xxxxxxx halogenová výbojka. Xxxxx z nich xx tu xxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxx x xx xxxxxxxx, xxxxx její xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx dokonalá. Xxxxxxxx všechny xxxxxxx xxxxxxxxxx vyzařují významné xxxxxxxx XXX xxxxxx, xxxx by xxx xxxxxx filtrovány, aby xxxx vysoce xxxxxxxxxxx xxxxxx délky XXX xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU in xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx spektrum xxxxxxxxx zbavené UVB xxxxxx (UVA:UVB ˜ 20:1). Příklad xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx studii xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxx publikován x xxxxxxxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx ozáření) xx musí pravidelně xxxx každou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx. XX-xxxx xxxx xxx pro xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xx tímto xxxxxx xx doporučuje xxxxxx xxxxx referenční xxxxxxx xxxxxxxx kalibrovaný XX-xxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxx být x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx záření xxxxxxxxxxxx xxxxxx světla x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx 5 X/xx2 byla xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx necytotoxická xxx buňky Xxxx/x 3X3 a dostatečně xxxxx k xxxxxxxx x xxxxx fototoxických xxxxxxxxxx látek. Pro xxxxxxxx 5 X/xx2 xx xxxx 50 xxx. musí xxx xxxxxxxxx ozáření nastavena xx 1,666 XX/xx2. Xxxxxxxx xx použita xxxx buněčná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxx XXX xxxxxx xxxxx upravena, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx standardních xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx:
x(xxx) = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (J/cm2) 100 / xxxxxxxxx xxxxxxx (mW/cm2) 60 (1 X =.X xxx)
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx při nižších xxxxxxxxxxxxx; při vyšších xxxxxxxxxxxxx roste xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků (xxxxxxxxxxxx). Hodnota xX xxxxxxxx koncentrace xx xxxx xxx vyhovující (xX 6,5 — 7,8).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx chemických xxxxx zkoušených xx xxxxxxx (+ XXX) x xxx xxxxxx (-XXX) by xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx řady x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx musí být xxxxxxx tak, aby xxxx křivky závislosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxx geometrická xxxx koncentrací (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Xxxxxxxx xxxxxx [1]
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 1 × 105 buněk/ml x xxxxxxxxxxx xxxxx x 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxx). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx po 100 μx buněčné xxxxxxxx o xxxxxxx 1 × 105 xxxxx/xx (1 × 104 xxxxx xx xxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látku xx připraví xxx xxxxxxxx: xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX) x xxxxx pro xxxxxxxxx fotocytotoxicity (+XXX).
Xxxxx xx xxxxxxxx 24 x (7,5 % XX2, 37 °X), xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx regeneraci xxxxx, xxxxxx přichycení x exponenciální xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx den
Po inkubaci xx xxxxxxxxxx xxxxxx x buněk xxxxxxxxx x xxxxx jamka xx promyje xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxxx xx 100 μx EBSS/PBS xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxx xx 8 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx x xxxxx xx dobu 60 xxx. (7,5 % XX2, 37 °C).
K xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x ozářením XXX xx xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 50 xxx. xxxxxxx xxxx víčko 96xxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxx x xxxxxxxxx 1,7 XX/xx2 (5 X/xx2. Xxx nedošlo xx xxxxxxxxxx xxxx xxx víčkem, xxxxx xx pomocí ventilátoru. Xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx ozáření XXX xx ponechají 50 xxx. (doba xxxxxxxx XXX) v xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx se odstraní x xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. XXXX/XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx přes xxx (18-22 x) (7,5 % XX2, 37 °C).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx kontrastem. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinkem zkoušené xxxxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx tuto xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx fototoxicity nepoužijí.
Zkouška xxxxxx xxxxxxxxx červeně.
Buňky xx xxxxxxx 150 μx předehřátého XXXX/XXX x xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μx média XX x xxxxxxxx xx 3 h xxx 37 °X xx xxxxxxxx atmosféře x 7,5 % XX2.
Xx xxxxxxxx se xxxxxx XX xxxxxxxx x buňky se xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. XXXX/XXX xx xxxxxxxxx x zcela xxxxxx (xxxxxxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx XX.
Xxxxxxxx xx xxxxxx 10 xxx. xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx XX x buněk nevylouží x nevytvoří xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx se změří xxxxxxxxxx extraktu XX xxx 540 xx, xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. ASCII) x počítači xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxx x množství xxxxx
Xxxxx xx xxxx xxxxxxx smysluplnou xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx UVA/VIS xxxx xxx xxxx. Je-li xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx být xxxxxx xxxxxxxxxxx x interval xxxx nimi nastaven xxx, xxx xxxx xxxxx proložit xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx zkoušená chemická xxxxx xxxxxxxx xxx xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX) xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx být xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (+XXX), xxxx být xxxxxxxx, aby se xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx x xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, řádově xxxxxx, xx-xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx kvality xxxxx. Xxxx-xx x xxxx xxxxxxx experimentu (-XXX a +XXX) xxxxxxxxxxxx zjištěna, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx dávkami xx xx nejvyšší xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx. Negativní výsledky xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx, jestliže byla xxxxxxxx xxxxxxxx látka xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentrací. X xxxxxxxx případech xxxxx xxxxx xxxxxx experiment xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx předběžnými xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx hraničních xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být pro xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx opakované xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx změnit xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx. X xxxxxx xxxxxx xxxx být změna xxxxxxxx (jiné xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, použití xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx-xx xx xxxxx, stanoví xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxxxxx 50 % inhibici xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (NR) (EC50). Xxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx nelineární xxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx regresí) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jiných xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx XX50 xxx další xxxxxxx xx xxxx xxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx XX50 xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx proložení. X xxxxxxx případě xx doporučuje xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxx x: xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxx y: xxxxxxxxxxxxxxxxx), neboť v xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx této transformaci xxxxxx závislosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
2.3 Xxxxxxxxx výsledků (xxxxxxxxxxx xxxxxx)
2.3.1 Xxxxxxxxxxx xxxxx — xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx faktor (XXX)
Xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx (+XXX), xxx bez xxxxxxx (-XXX) xxxxxxx úplné xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx koncentraci, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
(x) XXX = (XX50 (-XX)) / (XX50 (+XX))
Xxxxxxx XXX &xx; 5 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx PIF ≥ 5 předpovídá xxxxxxxxx fototoxického potenciálu.
Jestliže xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pouze xxx +XXX x není xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx -XXX, nelze xxxxxxx XXX xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx x xxxxxxxx, xxxxx svědčí x xxxxxxxxxxxx potenciálu. X xxxxxxxx případech xxx xxxxxxxxx xxxxxxx "> XXX", xxxxxxxx xx xxxxxxx -XX zkouška xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Cmax), x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx "&xx; PIF";
(b) &xx; XXX = (Xxxx (-XX)) / (XX50 (+XX))
Xxx li xxxxxx xxxxx hodnotu "&xx; XXX", xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxx xxxxxxx &xx; 1.
Xxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxx, že xxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxxxxxxx, vypočítat xxx xxxxxxx XX50 (-XX) xxx xxxxxxx XX50 (+ XX), xxxxxx xx x neexistenci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx případech xx xxx xxxxxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "XXX = *1";
(X) &xx; PIF = *1 = (Xxxx (-XX)) / (Xxxx (+XX))
Xxx xx xxxxxx xxxxx hodnotu "PIF = *1", je xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx x) x x) xx xxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx v úvahu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX in vitro.
2.3.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (MPE)
Alternativně xxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu, který xxx xxxxxxx x xxxxxxxx údajů z xxxxxxxxx studie XX/XXXXXX (15) x xxx xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vitro u xxxxxxxxxx látek, xxxxx xx xxxxxxx xxxx XX xxxxxx (13). Xxxxx model xxxx xxxxxxx jako xxxxx XXX v xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx XX50. Tento xxxxx využívá xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxx xxxxx effect) (XXX), xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na koncentraci. Xxx xxxxxxx modelu xxx na Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx volně x dispozici.
2.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxx xxx koncentracích xxx 10 μx/xx, xx také pravděpodobné, xx xxxxx xxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxx podmínek xxxx xxxxxxxxx xx vivo. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pouze xxx xxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nezbytné další xxxxx. Xx xx xxxxx týkat xxxxx x xxxxxxxxx, absorpci x možné akumulaci xxxxxxxx látky x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, např. xx použití xxxxxx xxxxxx xxxx in xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx zkoušky xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, že xxxxx xxxxxx xxx savčí xxxxx xx použitých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. V xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx až po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx chemická xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x fototoxicitu xx vivo xxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx obdrženy totožné xxxxxxxxxx xxxxxxx odezvy xx koncentraci (XX50 +XX a XX50 -XX), je interpretace xxxxx stejná. Xxxx-xx xxxxxxx tomu xxxxxxxx xxxxxxxxx (+UV a -XX) x xxxx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx rozpustností xx xxxx na xxxxxxx xxxxx než 100 μx/xx, není xxxxxx zkouška xxx xxxxxxxxx látku xxxxxx x xxxx xx xxx zvážena xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxx xxxxxx lidské xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxx o xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx údaje a xxxxx CAS, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx vlastnosti x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx,
- stálost x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- zdůvodnění volby xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- procentuální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x xxxxx buněk,
- nepřítomnost xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, je-li xxxxx,
- xxxxxxxxx buněk xx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve zkoušce xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xx xx:
- typ x složení xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx podmínky (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xx ní).
Zkušební xxxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chemické látky xxxxxxxxx xxx při xxxxxxx XX/XXX, xxx xxx xxx,
- x xxxxxxx, xx zkoušená xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx charakteristiky ozáření xx zdroje xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx filtrů),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxx XXX x této xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xX/xx2,
- xxxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,
- dávka XXX xxxxxx (intenzita × xxx), xxxxxxxxx x X/xx2,
- teplota xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a teplota xxxxxxxxx xxxxxx udržovaných x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — zkouška XXX:
- xxxxxxx xxxxx XX,
- xxxx inkubace XX,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, teplota, xxxxxxx),
- podmínky xxxxxxxx XX (extrakční činidlo, xxxxx extrakce),
- xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx XX,
- druhá (referenční) xxxxxx délka, xx-xx xxxxxxx,
- složení slepého xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx, xx-xx použit.
Výsledky:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx vyjádřená v xxxxxxxxxx střední xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- křivky xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx versus relativní xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxx paralelních xxxxxxxxxxxxx +XXX x -UVA,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx: xx-xx to xxxxx, xxxxxxx hodnoty XX50 (+XXX) a XX50 (-XXX),
- srovnání xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX/XXX x xxx xxxx, x xx buď xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx-xxxxxxxxxxx xxxxxx ) (XXX), nebo výpočtem xxxxxxxxx světelného účinku (xxxx photo xxxxxx) (XXX),
- xxxxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx životaschopnost (absorbance xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx údaje pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, střední xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola:
- xxxxxxx XX50 (+UVA), XX50 (-UVA) a XXX-xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- dosavadní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX, xxxxxxx xxxxxxx a směrodatná xxxxxxxx.
Xxxxxx výsledků.
Závěry.
4. XXXXXXXXXX
(1) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xöxxxx, X., Xxxxxüxxxx, X. X., Xxxxxxx, X., Klecak, X., X'Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, M., Xxxxxx, X. X., Maurer, X., Xxxxxxxxxxx, F., Xxxxx, X., Pape, X., Pfannbecker, X., Xxxxxxxx, X., De Xxxxx, X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X. (1994), XXX/XXXXXX xxxxxxx xx in xxxxx xxxxxxxxxxxxx testing: Xxxxx xxxxxxx obtained with x Xxxx/x 3T3 xxxx phototoxicity xxxxx, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 8, 793-796.
(2) Xxxx (1998), Xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx validity xx xxx 3X3 XXX XX test (xx in vitro xxxx xxx phototoxicity), Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Joint Xxxxxxxx Centre: ECVAM xxx XXXX/X/2, 3 Xxxxxxxx 1997, XXXX 26, 7-8.
(3) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xxxxxx, X., Pape, X. X. X., Xxxxxxxxxx, G., Xx Xxxxx, X., Xxxxxüxxxx, X. G., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Xxxxxxxxx, F., Xxxxxxx, X., Lovell, X. X., Xxxxxx, T., Xxxxxxxxxxxxx, X., Potthast, X. M., Csato, X., Sladowski, X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. (1998), EU/COLIPA "Xx xxxxx phototoxicity", xxxxxxxxxx study, xxxxxxx xx phase XX (xxxxx xxxxx), xxxx 1: the 3X3 XXX phototoxicity test, Xxxxxxxxxx in Xxxxx 12, 305-327.
(4) XXXX Xxxx Xxxxxxxxxx Programme, XXX/XX/XXXX/XX(96)9: Final Report xx xxx XXXX Xxxxxxxx on Harmonisation xx Validation and Xxxxxxxxxx Xxxxxxxx of Xxxxxxxxxxx Toxicological Xxxx Xxxxxxx, XXXX Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx, Paris, 1996.
(5) Xxxxxx, W. X. (1993), A scheme xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx substances xxx xxxxxxxxxxxxxxx potential, Xxxxxxxxxx xx Xxxxx 7, 95-102.
(6) Santamaria, X., Xxxxx, X. (1972), Xxxx of xxx photodynamic xxxxxxxxxx, Xxxxxxxx progress xx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx Xxx. 3 Xxxx 1, Xxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xx, Xxxxxxxxx, XI–XXXV.
(7) Xxxxxxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Xöxxxx, X., Johnson, X. X., Maurer, X., Xxxxxxx, X. A., Xxxx, X. X. X., Xxxxxx, O., Xxxxxxxxx, X. (1994), Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: Xxx report xxx xxxxxxxxxxxxxxx of XXXXX xxxxxxxx 2, XXXX 22, 314-348.
(8) Xxxxxx, X. D. (1989), Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X: Xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, (K. C. Xxxxx, xx.), Xxxxxx Xxxxx, New Xxxx, 2. xxx., 79-110.
(9) Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. X. (1985), Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, Xxxxxxx. Xxxx. 24, 119-124.
(10) Xxxxxxx, X. A., Xxxxxx, W. G., Xxxxxxxxxx X. (1996). X: Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx testing, Xxxxxxxxxxxxxxxxx, (X. X. Xxxxxxxx, X. X. Xxxxxxx xxx.), Taylor &xxx; Xxxxxxx, Xxxxxxxxxx XX, 5. xxx., 515-530.
(11) Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx X. (1987), Xxxxxx spectra xxx xxxxx xxxx xxxxx: xxxxxxxxx of xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, near ultraviolet xxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx on xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, Cancer Xxx. 47, 1825-1829.
(12) XXXXX/XXXXX/XXXXXX, Xxxxxxxx Operating Xxxxxxxxx: Xxxx/x 3X3 XXX Xxxxxxxxxxxxx Test, xxxxxxxx 23. xxxxxxxx 1997 X. Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx 6. xxxxxx 1998 xxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx xx xxx XX/XXXXXX xxxxxxx "Xx Xxxxx Xxxxxxxxxxxxxxx".
(13) Xxxxxxxxx, X., Balls, X., Xxxxxx, J., Xxxx, X. X. W., Xx Silva, X., Xxxxxüxxxx, X. X., Xxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Lovell, X. X., Xxxxxxxxxxxxx (1998), X Xxxxx xx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xx XX Xxxxxx Xxxxxxxxx xxxx Xxxxx XXX xx xxx XX Xxxxxxxxx 76/768/XXX xx the 3T3 XXX Xx Xxxxx Xxxxxxxxxxxxx Xxxx, XXXX 26, 679-708.
(14) Xxxxxüxxxx, X. G., Xxxxxxxx, X. (1995), Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx of cellular xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, Xxxxxxx of Xxxxxxxxxx Xxxxxxx, 3, 127-138.
(15) Xxxxxüxxxx, X. X. (1997), X xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx-xxxxxxxx xxxxxx xxx its xxx xxx predicting xxx xx vivo phototoxicity xx xxxxxxxxx, XXXX 25, 445-462."
"Xxxxxxx
&xxxx;
[1] Xxxxx xxxxxxxxxxx xxx nalézt x xxxxxxxxxx (12).