Směrnice Komise 2000/33/ES
ze xxx 25. xxxxx 2000,
xxxxxx xx xx xxxxxxx sedmé přizpůsobuje xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx Xxxx 67/548/XXX x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx klasifikace, balení x označování xxxxxxxxxxxx xxxxx [1]
(Xxxx s xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x ohledem xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx na směrnici Xxxx 67/548/EHS xx xxx 27. xxxxxx 1967 o xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, balení a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxx x Xxxx 1999/33/ES [3], a zejména xx xxxxxx 28 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxxx důvodům:
(1) X xxxxxxx X xxxxxxxx 67/548/XXX xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, toxicity x xxxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
(2) Xxxxx xx. 7 xxxx. 2 směrnice Xxxx 86/609/EHS xx xxx 24. xxxxxxxxx 1986 o xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx používaných xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx [4] xxxxx být xxxxx, xxx xxxx má xxx použito xxxxx, xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
(3) Xxxxxx zamýšlí xxxxxxx xx přílohy X směrnice 67/548/EHS xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířata, x cílem xxxxxxxxxxx xx xxx zkoušení xxxxxxxxxx xxxxx podle xx. 3 xxxx. 1 směrnice 67/548/XXX.
(4) Xxxxxxxx této xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxxxxx technických xxxxxxxx xxxxxxx na úseku xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxx xxxxxx X x II xxxx směrnice xx xxxxxx xx xxxxx X přílohy V xxxxxxxx 67/548/XXX.
Článek 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx dosažení souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 1. xxxxx 2001. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx přijaté xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx odkaz na xxxx xxxxxxxx nebo xxxx xxx xxxxxx xxxxx učiněn xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxx státy sdělí Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vnitrostátních xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx přijmou x oblasti xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ustanoveními.
Článek 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Tato xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 25. dubna 2000.
Za Xxxxxx
Xxxxxx Wallström
členka Komise
[1] Xxxxxxx před xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx.
[2] Xx. xxxx. 196, 16.8.1967, x. 1.
[3] Xx. věst. X 199, 30.7.1999, x. 57.
[4] Úř. xxxx. X 358, 18.12.1986, x. 1.
XXXXXXX I
"B.40 LEPTAVÉ XXXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Dvě zkoušky xx xxxxx xx xxxxxxx účinky na xxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže xxxxxxx (XXX) x xxxxxxx x využitím xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx Xxxxxxxxx střediskem xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (XXXXX, Xxxxxxxx výzkumné xxxxxxxxx Evropské Komise) (1, 2, 3) xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Validační xxxxxx XXXXX prokázala, že xxxxx xxxxxxxxx lze xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx leptající a xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx dále xxxxxxx xxxxxxx rozlišit xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx způsobující xxxxx xxxxxxxxx, X 35 x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, X 34) (2). Xxxxx x postup xxxx zkoušek xx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxxxxx požadavcích x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx také Xxxxxx xxxx, xxxx X.
1.2 Definice
Poleptání xxxx: xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx aplikaci zkoušeného xxxxxxxxx.
1.3 Referenční látky
Nespecifikovány, xxxxx viz body 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx metody — xxxxxxx TER xx kůži potkana
Zkoušený xxxxxxxx xx xx xx 24 x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíků xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mladých xxxxxxx. Materiály x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx), která xx xxxxxx xxxx snížení xxxxxxxxx TER xxx xxxxxxxx xxxxxx (5 xΩ) (4, 5). Xxxxxxxx x nedráždivé xxxxx nesnižují XXX xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx postupu xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky (xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (6)) xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx vázání xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx množství falešně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx tyto xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2, 7).
1.5 Xxxxx xxxxxxxx metody — xxxxxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
1.5.1 Zvířata
Terčíky xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx (20 — 23 xxxxxxx) xxxxxxx (Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx kmen). Xxxxxxx x xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx strojkem. Xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx otíráním, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx do xxxxxxx antibiotik (xxxxxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx, penicilin, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x koncentracích xxxxxxxxxxxxx xxxx bakterií). Xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx den xx xxxxxx omytí znovu xxxxx roztokem xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx 3 xxx (x xxxxxxxx kůže xxxxx xxx použita xxxxxxx xxxxxx než 31 dnů).
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx kůže x xxxxxxxxxx xxx xx x xxxx opatrně xxxxxxxxx. Kůže se xxxx přeloží xxxx xxxxx xxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx x trubičkou. Xxxx konec xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx O-kroužek, xxx xxxx xxxx upevněna, x xxxxxxxx xxxxx xx ořízne. Xxxxxxx xxxxxxxx x X-xxxxxxx xxxx uvedeny xx xxxxxxx 1. Xxxxxxx X-xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx poté xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx držená xxxxxx pružinové xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx síranu xxxxxxxxxxx (154 xX) (obrázek 2).
1.5.3 Xxxxxxxx xxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx materiálu
Kapalná xxxxxxxx xxxxx (150 μx) xx aplikuje xx epidermis uvnitř xxxxxxxx (xxx. 2). Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx použije xxxxxxxxxx xxxxxxxx tak, xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxx xxxxx látky xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx (150 μx) x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxx xxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx toho xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx na 30 °X, aby xx xxxxxxxx xxxxx roztavila, xxxx xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxx látky xx xxxxxxx tři xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 24 x (xxx také bod 1.5.3.4). Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx tekoucí xxxx x xxxxxxx xxxxxxx 30 °X. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, které x trubičce ztuhly, xxx usnadnit xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xx 30 °C.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
XXX se xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx (např. XXX 401 xxxx 6401 xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx kůže xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70 % xxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxxxxx zakryta. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x tkáň xx xxxxxx xxxxxxxx 3 xx roztoku xxxxxx hořečnatého (154 xX). Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx xxx strany xxxxxxx xxxx za xxxxxx xxxxxx xxxxxx v xΩ/xxxxxx xxxx (xxxxxxx 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pod xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx obrázku 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx trubičky, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx části xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx umístěna xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx spočívala xx dně xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx svorky a xxxx xxxxxxxxx trubičky xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx 1), xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xx naměřené xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxx xx všimnout, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx než 20 xΩ, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxx. xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx zakryje xxxxxx x rukavici x 10 x xx protřepává. Xxxxxx xxxxxx hořečnatého xx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx XXX (střední xxxxxxx) xxxx přijatelné, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx přijatelného rozpětí xxxxxx. Pro xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx přijatelná xxxxxxx xxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx xxxxxx (xΩ) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36 %) |
0,5–1,0 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
10–25 |
1.5.3.3 Upravený xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx organické xxxxx
Xxxx-xx xxxxxxx XXX pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxx 5 xΩ, xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx postupem xx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx předchozí aplikaci xxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kůže xxxxxxxx na 2 x 150 μx 10 % roztoku xxxxxxx sulforhodaminu X x destilované vodě. Xxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx 10 x xxxxxxx proudem xxxx o nejvýše xxxxxxxx teplotě, aby xx xxxxxxxxxx veškeré xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx kůže xx xxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx trubičky a xxxxxx se do xxxxxxxx (xxxx. 20 xx skleněné xxxxxxxx xxx scintilační spektrometrii) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx (8 xx). Lahvičky xx xxxxx 5 xxx. xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx barvivo. Tato xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, a xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx do lahviček xxxxxxxxxxxx 5 xx 30 % xxxxxxx (x/X) xxxxxxx-xxxxxxx-xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx x inkubují xx xxxx xxx xxx 60 °X. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx vyjmou x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx 8 min. xxx 21 °X (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ˜ 175). 1 xx xxxxxx supernatantu xx xxxx zředí 4 xx 30 % (x/X) xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx (X) xx měří při xxxxxxxxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx z xxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 xx = 8,7 × 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Xxxxx barviva xxxxxxxxxxxxxx X se xxxxxxx xxx každý xxxxxx xxxx a poté xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx přijatelné, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx přijatelného rozmezí xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (μx/xxxxxx xxxx) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36 %) |
40-100 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
15-35 |
1.5.3.4 Xxxxxxxxx informace
Látky xxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxx (xxxx. 2 xxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxxxxxx ty xxxxxxxxx, které jsou xxxxx leptavé. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx TER xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx zkoušených xxxxxxxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxx xx xxxx 2 xxxxx (2), xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx umožnilo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxx xxx 24hodinové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx experimentální xxxxxx xxxxx mít xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XXX. Xxxx 5 Ω pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx x xxxx metodě. Xxxxxxxxxx xx tedy kalibrovat xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx validační xxxxxx (3).
1.6 Podstata xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxxxx xxxxxx modelu xxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xx xxxx 4 xxxxx xx trojrozměrný xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx epidermis x xxxxxxx rohovité xxxxxx. Materiály x xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx způsobit xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (stanovený např. xxxxxxxx zkoušky redukce XXX) xxx definovanou xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx hypotéze, xx xxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx, xxx xxxx xxxxxxx proniknout xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx xxxxx) a xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xxxxxxxxx smrt buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 Popis zkušební xxxxxx — xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx
1.7.1 Modely xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxx, musí xxxx xxxxxxxx určitá xxxxxxxx. Model xxxx xxx funkční xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx pod xx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx vrstvy xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxx xxxxxxxx demonstrací xxxxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rohovitou xxxxxxx. Musí se xxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx živých buněk x xxxxxx xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxx. redukcí XXX, xx. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx X) xx expozici xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxx x mezích xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pozitivní kontrolní xxxxx (ve xxxxxxxx x životaschopností xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látku) xxxx xxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx, aby xxxxx odpovídal xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx (minimálně 25 μx/xx2). U pevných xxxxxxxxx musí být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxx, a xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxx styk s xxxx; pevné xxxxx xx xxxx xxx xxxxx potřeby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx. Musí být xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxx xx použitelná xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek (2). Xx uplynutí expoziční xxxx xxxx xxx xxxxxxxx materiál z xxxxxxx kůže opatrně xxxxxxxxx fyziologickým xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx životaschopnosti xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kvantitativní xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxx níž xx x různých xxxxxxxxxxxx prokázalo, xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx se xxxxxx do xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx xxxxxxx 20-28 °X xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx měřením xxxxxxxxxx X xxx vlnové xxxxx 545 xx 595 xx.
1.7.2.3 Doplňkové xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx zaznamenání xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. budou xxx xxxxx vliv xx výsledky xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx metodika x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látek xxxxxxxxx ve validační xxxxxx XXXXX (3). Xx rozhodující, xxx xxxxxxx metoda x xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx reprodukovatelnost xxx široké spektrum xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx splňovat xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx vědeckou xxxxxxxx (2) x xxxxxxxx xxxxxx validační studie xxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx odbornou xxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 Zpracování xxxxxxxx
2.1.1 Xxxxxxx XXX xx xxxx potkana
Hodnoty xxxxxx (kΩ) xxx xxxxxxxx materiál, xxxxxxxxx x negativní kontrolu x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx údajů x xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx hodnotách x x xxxxxxxx klasifikaci xx měly být xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx.
2.1.2 Zkouška x xxxxxxx lidské kůže
Hodnoty xxxxxxxxxx X x xxxxxxxxx xxxxxxx životaschopnosti xxxxx x procentech xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x středních hodnotách x x odvozené xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx.
2.2 Hodnocení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
2.2.1 Xxxxxxx XXX xx xxxx potkana
Je-li xxxxxxx XXX dosažená xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, xxxx xxxxx žíravá. Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxx nebo xxxxx 5 xΩ x xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxx látku nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxx aktivních látek xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX menší xxxx xxxxx 5 xΩ, lze xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx střední xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxx střednímu xxxxxx xxxxxxx v terčíku xxxx xxxxxxxxx souběžně xxx použití 36 % XXx xxxxxxx xxxxxxxxx kontroly, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, a xxxxx je xxxx xxxxxx. Xx-xx střední xxxxx barviva x xxxxxxx xxxx xxxxx xxx střední xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 36 % XXx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx tedy xxxx xxxxxx.
2.2.2 Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx obsorbance X xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 % xxxxxxxxxxxxxxx buněk; xxxxxxx xxxxxxxxxx A xxxxxxxx xxx každý xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x výpočtu relativní xxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx od xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx xxxxxx xx rozlišují xxxxx třídy xxxxxxxxx xxxxxx), musí xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx studie xxxx potvrdit, xx xx xxxxxx (2).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxx x zkoušce xxxx xxxxxxxxx alespoň xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx látka:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x případně xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx.
Xxxxxxxx podmínky:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx postupu,
- xxxxx x zdůvodnění xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx XXX) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx (zkouška x xxxxxxx xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly a xxxxxxx standardní xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxx opakovaných experimentech x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx,
- popis xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.
Rozbor xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. XXXXXXXXXX
(1) XXXXX (1998), XXXXX Xxxx &xxx; Xxxxx, XXXX 26, 275-280.
(2) Fentem, X. X., Xxxxxx, X. X. X., Xxxxx, M., Xxxxxx, X. A., Xxxxxx, X. X., Xxxx, X. X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxx, X-X., Xxxxxxx, X. (1998), Xxx XXXXX xxxxxxxxxxxxx validation xxxxx xx xx vitro xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. 2. Results xxx evaluation xx xxx Management Team, Xxxxxxxxxx in xxxxx 12, 483-524.
(3) Xxxxxxx, X. D., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. H., Gerner, X., Xxxxxx, X. X., Xxxxx, X. X. (1998), Xxx XXXXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx in xxxxx tests for xxxx corrosivity. 1. Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 12, 471-482.
(4) Xxxxxx, X. J. X., Xxxxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. (1986), Xx xx xxxxx skin xxxxxxxxxxx xxxx — xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, Xxxx Xxxx. Toxicol. 24, 507-512.
(5) Xxxxxx, P. X., Hall, T. X., Xxxxxxx, X., XxXxxx, J. X., Xxxxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, X., Cheeseman, X., Esdaile, X. X., Gardner, X. (1992), Xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx: xxxxxxx of xx xxxxxxxxxxxxxxx trial, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 6, 191-194.
(6) Xxxxx, X. X., Xxxxxx, X. X., Xxxxx, X., Botham, X. X., Xxxxxx, X. X., Xxxx, L. X., Xxxxxxx, D. X., Xxxxxxx, X. (1998), Xx xxxxxxxxxx xx the xxxxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxx xxx skin xxxxxxxxx, XXXX 26, 709-720.
(7) Xxxxxx, P. X., Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. D., Xxxxxx, X. D., Esdaile, X. X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. C., Xxxxxxxxxx, X., Xxxxx, X. X., Liebsch, X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Ponec, X., Xxxxxxx, X. F., Xxxxxxxx, X., Walker, X. X., Xxxxx, X. 1995), A xxxxxxxxxxxxx study xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxx and xxxxxxxxxxxxxxx xx XXXXX workshop 6, ATLA 23, 219-255.
Xxxxxxx 1
Obrázek 2"
&xxxx;
XXXXXXX XX
"X.41 XXXXXXXXXXXX — XXXXXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX XX XXXXX
1. METODA
1.1 Úvod
Fototoxicita xx definována xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx určitým chemickým xxxxxx a následné xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx látky.
Informace xxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx slouží x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx. xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx může xxxxxxx xx zkoušené xxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx UV záření xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx in xxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kombinovaným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, lze xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sloučeniny, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx na xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxx fotoiritanty.
Zkouška xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx x rámci xxxxxxxxx xxxxxxxx EU/COLIPA x xxxxxx 1992 — 1997 (1, 2, 3) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx používaným xxxxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx skupina OECD xxxxxxxx postupných xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x akutními xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx účinky xx xxxx u xxxxxx x u xxxxxxx a xxxxxxx xx ukázala xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx mohou xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x světla, xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx mnoho xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Zkouška xxxx není vyvinuta x xxxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx uvedena x xxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx světla xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, měřená xx X/x2 nebo xX/xx2.
Xxxxx světelného xxxxxx: xxxxxxxx (xxxxxxxxx × xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (X × x) xx xxxxxx povrchu, xxxx. X/x2 xxxx X/xx2.
Xxxxxx xxxxx XX xxxxxx: označení doporučená xxxxxx CIE (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx de x'Xxxxxxxxx): XXX (315400 xx), XXX (280315 nm) x XXX (100280 xx). Používají xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx: xxxx xxxxxxx xxxx XXX x XXX xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 320 nm x xxxxx UVA xxxx být xxxxxxxxx xx XX-X1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxx 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx, kterým xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx vitálního xxxxxxx neutrální xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxx x na xxxxxxxx uspořádání xxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx a/nebo životaschopností xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxx x negativním xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx prošly xxxxx postupem xxxxxxx (x XX, xxxx xxx UV), xxx xxxxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx potenciálu. X xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx převod xxxxxxxx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx xx předpověď xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx XXX a veličinu XXX.
XXX (xxxxx-xxxxxxxxxx factor — xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx stejně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací (XX50) xxxxxxxx xxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx (+ UV) x xxx xxxx (-XX).
XXX (xxxx xxxxx xxxxxx — střední xxxxxxxx xxxxxx): nová xxxxxxxx xxxxxxxx x matematické xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx závislosti xxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx ozáření XXX/xxx světlem (+ XX) a bez xxxx (-UV).
Fototoxicita: akutní xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx první xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx světlu xxxx xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxx xxxx xx systémovém xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx těch fototoxických xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx na xxxx xx expozici xxxxxxxxx xxxxxx (topické xxxx xxxxxx). Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vedou xxxx x nespecifickému xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x xxxxx vyžaduje xxxxxxxx dobu xxxxx xxxx dva týdny xxxx xxx, než xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xx expozici xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX světla x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látce.
Fotokarcinogenita: xxxxxxxxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx se používá x xxxxxxx, xxx xx tvorba xxxxxx xxxxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látkou.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxxxxxxx, který by xxx xxx souběžně xxxxxxx xxx každé xxxxxxx, je pro xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxx x chemických xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1, 3, 13).
1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x mnoha typů xxxxxxxxxx xxxxx (5, 6, 7, 8). Xxxxxx jediným xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx energii x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx prvního xxxxxx xxxxxxxxxx (Grotthaus-Draperův xxxxx) xxxxxxxx fotoreakce xxxxxxxxxxx absorpci světelných xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxxxxx metodiky xx xxxx mělo být xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx (xxxx. xxxxx Xxxxxxxx OECD 101). Xx-xx molární absorpční xxxxxxxxxx menší než 10 l.mol-1.cm-1, chemická xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx biologickou xxxxxxxx na nepříznivé xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx).
1.5 Xxxxxxxx zkušební xxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx čtyři xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) chromoforem xxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxx (7). Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Zkouška fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx srovnání xxxxxxxxxxxx chemické látky xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx je x xxxx zkoušce xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx vitálního xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX) (9) 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx Xxxx/x 3X3 se 24 x kultivují, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxx 96xxxxxxx destičky xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 1 h preinkubují xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek. Poté xx jedna ze xxxx destiček exponována xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx XXX/XXX xxxxxx 5 J/cm2 XXX (+ XX xxxxxxxxxx), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx médium xxxxxxx xxxxxxxxxxx médiem a xx xxxxxxx 24 x xxxxxxxx je xxxxxxx životaschopnost xxxxxxxxx 3xxxxxxxxx příjmem xxxxxxxxx xxxxxxx (XXX). Xxxxxxxxx xxxxxxx životaschopnost xxxxxxxxx x procentech vzhledem x neexponované negativní xxxxxxxx xx vypočte xxx xxxxxx z xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx (+ UV) x xxx xxxxxxx (-XX), xxxxxxx při hodnotě XX50, xx. xxx xxxxxxxxxxx způsobující 50 % xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx srovnání x xxxxxxxxxxxxxx kontrolami.
1.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx XXX, dosavadní xxxxx: xxxxxxxxx buněk xx XXX xx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx, xxxxxx xxx xx ozáří xxxxxx XXX xxxxxx 1 xx 9 X/xx2 a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxx NRU. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx jakosti, xxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx ozáření 5 X/xx2 xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx pasážích xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx UVA xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly (xxxxx x EBSS (Xxxxxx fyziologický roztok) x 1 % xxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx 1 % xxxxxxxxx (XxXX)) nebo xxx xxxx xxxxxxxx xxx + XXX experimentu xxxxxxxxxxxxxxx alespoň 80 % xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxx neozářených xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X540 XXX) xxxxxx x xxxxxxxx XX negativních xxxxxxx xxxxxxx, xxx 1 × 104 xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx při xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (doubling xxxx). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X540 XXX neexponovaných xxxxxxx xx ≥ 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx fototoxická xxxxxxxx látka. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx použit jako xxxxxxxxx xxxxxxxx chlorpromazin (XXX), a xx xxxx doporučen. Pro XXX xxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx přijatelnosti xxxxxxx: xxx XXX ozářený (+ UVA): XX50 = 0,1 až 0,2 μx/xx, pro XXX neozářený (-XXX): XX50 = 7,0 xx 90,0 μg/ml. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), xx. posun xxxxxxx XX50, by xxx xxx alespoň 6.
Xxxxxxx XXX xxxxx být xxxxxxx xxxx souběžné xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx chemické xxxxx vhodné z xxxxxxxx typu nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky. X xxxxxxx případě by xxxx být xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx údajů xxxx xxxxxxxx přijatelnosti xxxxxxx přiměřeným způsobem xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x XXX xxxx MPE (xxxxxxx xxxxxxxx účinek).
1.7 Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx — Xxxx/x 3T3, xxxx 31 — xxx x xxxxx XXXX, xxxx x xxxxx ECACC a xx xxxx doporučena. Xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx linie xxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx použity xx předpokladu, xx xxxx xxxxxxxxxx podmínky xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, ale xxxx xxx prokázána xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx by měly xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxx kontaminovány xxxxxxxxxxxx, a xxxx xx být xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxx kontroly xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxxx xxxxx xx UV xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pasáží, xxxxxxx x xxxxx xxx xxx xxxxxx. Je xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xx UVA xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jakosti xxxxxxxx x této metodice.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx rutinní xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být použita xxxxxx xxxxxxxxxx média x xxxxxxxxx xxxxxxxx. X buněk Xxxx/x 3X3 xx xxxxx x XXXX (Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxx 10 % xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, 4xX xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x streptomycinem a xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx při 37 °X/7, 5 % XX2. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, aby xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx dosavadního rozpětí xxx použité buňky xxxx buněčné linie.
1.7.1.3 Xxxxxxxx kultur
Buňky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kultur xx nasadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx před xxxxxxxx xx zkoušce xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x takové xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx konfluence xx konce xxxxxxx, xx. xx xxxxxxxx, xxx je xx 48 x xx xxxxxxxx stanovována xxxxxxxxxxxxxxx. Xxx buňky Balb/c 3X3 xxxxxxxxxxx v 96xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1 × 104 xxxxx xx jamku.
Pro xxxxxx xxxxxxxxx látku xx xxxxx nasadí xxxxxxx xxxxxxxx do xxxx xxxxxxxxxx 96xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx poté xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx podmínek kromě xxxx, xxx je xxxxx x destiček xxxxxxx (+UVA/VIS) x xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx systému je xxxxxxx požadavkem při xxxxx zkouškách xx xxxxx určených pro xxxxxxxxx genotoxického x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, není x fototoxikologii xxxxx xxxxx žádná xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx vivo nebo xx xxxxx je xxxxxxxx metabolická transformace. Xxxxxxxxxx se xxxx xxx za xxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxx zkouška xxxxxxxxx xx systémem xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx čerstvě xxxxxxxxxx bezprostředně před xxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, musí xx xxxxxxxx xxxxx provádět xxx červeným xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. x Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx ve xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx (PBS), xxxxx xxxxx obsahovat proteinové xxxxxx a xX xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxx být xxxxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle xx 100xxxxxxx požadované xxxxxxx koncentrace x xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx 1:100 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 1 % xxx. xx všech xxxxxxxxx, xx. x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx ve všech xxxxxxxxxxxxx zkoušené xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x xxxxxxx (XxXX). Xxxxx xxx použita jiná xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. aceton), xxx xxxx xx xxx pečlivě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx. reakce se xxxxxxxxx chemickou xxxxx, xxxxxxxxx fototoxických účinků, xxxxxx radikálů.
Je-li třeba, xxxx xxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a/nebo ultrazvuk x/xxxx xxxxxxx xx 37 °C.
1.7.1.6 Ozáření XX světlem/příprava
Zdroj xxxxxx: xxxxx vhodného xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx kritickým xxxxxxxx xxxxxxxx fototoxicity. Xxxxxx x xxxxx XXX a xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx spojováno s xxxxxxxxxxxxxxxxx (7, 10), xxxxxxx xxxxxx v xxxxx UVB xx xxxx relevantní x xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xxxx xxxxxxxxxxxx vzrůstá mezi 313 xx x 280 xx 1000krát (11). Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx světelného xxxxxx xx měla xxxxxxxxx xxxxxxxx požadavek, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx světlo x xxxxxxxx délkách, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x aby xxxxx světelného xxxxxx (xxxxxxxxxxx po přijatelnou xxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx známých xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx délky x xxxxx, včetně xxxxx xxxxx (infračervená oblast), xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx testovací xxxxxx.
Xxxxxxxx slunečního xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx optimální xxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx simulátorech xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx vysokotlaká xxxxxxx halogenová výbojka. Xxxxx x xxxx xx tu xxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxx x xx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx solární xxxxxxxxxx vyzařují xxxxxxxx xxxxxxxx XXX záření, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx cytotoxické xxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx UVB xxxxxx (XXX:XXX ˜ 20:1). Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx záření filtrovaného xxxxxxxxx simulátoru xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxx publikován x xxxxxxxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: intenzita xxxxxx (xxxxxxxxx ozáření) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx každou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx. XX-xxxx xxxx xxx xxx daný xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxx xxx kontrolována a xx xxxxx účelem xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxxxxx typu. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x měření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xx kontrole xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vyžadují xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx 5 X/xx2 byla xxx xxxxxxxxx studii xxxxxxxx xxxx necytotoxická xxx buňky Xxxx/x 3X3 x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxx fototoxických xxxxxxxxxx látek. Xxx xxxxxxxx 5 X/xx2 xx dobu 50 xxx. xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 XX/xx2. Xxxxxxxx je použita xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx jiný xxxxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxx XXX xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, aby xxxxxxxxxxxxx buňky a xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx expozice xx xxxxxxx tímto xxxxxxxx:
x(xxx) = dávka xxxxxxxxxx xxxxxx (X/xx2) 100 / intenzita xxxxxxx (xX/xx2) 60 (1 J =.X xxx)
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx; xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx roste xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků (xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxx (xX 6,5 — 7,8).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx (+ UVA) x bez xxxxxx (-XXX) xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx koncentrační xxxx x xxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxx, xxx xxxx křivky závislosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx experimentálními xxxxx. Měla xx xxx použita geometrická xxxx koncentrací (s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ředění).
1.7.3 Xxxxxxxx postup [1]
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 1 × 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx x 100 μx xxxxxxxxxxxx média xx xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx jamek 96jamkové xxxxxxxx (xxxxx xxxxx). Xx xxxxxxxxxxx buněk xx dávkuje xx 100 μx buněčné xxxxxxxx x xxxxxxx 1 × 105 xxxxx/xx (1 × 104 xxxxx xx xxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxx chemickou xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx: jedna pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX) x xxxxx pro xxxxxxxxx fotocytotoxicity (+XXX).
Xxxxx xx xxxxxxxx 24 x (7,5 % XX2, 37 °C), xxxxx xxxxxxxxxx semikonfluentní xxxxxxxxxx. Xxxx inkubační xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, jejich xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx den
Po inkubaci xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x každá jamka xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx rozpouštědlo (negativní xxxxxxxx). Aplikuje se 8 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx v xxxxx xx xxxx 60 xxx. (7,5 % XX2, 37 °X).
X xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx XXX xx xxxxx xxx xxxxxxxx teplotě xx xxxx 50 xxx. xxxxxxx xxxx xxxxx 96xxxxxxx destičky XXX xxxxxxx o intenzitě 1,7 XX/xx2 (5 X/xx2. Xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx ozáření XXX xx xxxxxxxxx 50 xxx. (doba xxxxxxxx XXX) x xxxxx xxx pokojové xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx promyje xxxxxxx 150 μx EBSS/PBS. XXXX/XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx médiem a xxxxxxxx xx xxxx xxx (18-22 x) (7,5 % XX2, 37 °X).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx hodnocení
Buňky se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x fázovým xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx změny xxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky. Doporučuje xx xxxxxxxx tuto xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx experimentální xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxx hodnocení xxxxxxxxxxxx xxxx fototoxicity xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx neutrální xxxxxxx.
Xxxxx xx promyjí 150 μx předehřátého XXXX/XXX x xxxxxxxxx xxxxxx xx opatrně xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μl xxxxx XX a xxxxxxxx xx 3 x xxx 37 °X xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7,5 % XX2.
Xx inkubaci xx xxxxxx XX xxxxxxxx x xxxxx se xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. XXXX/XXX se xxxxxxxxx a zcela xxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxxxx odstředit v xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx XX.
Xxxxxxxx xx xxxxxx 10 min. xxxxx na xxxxxxxx, xxxxx xx XX x xxxxx xxxxxxxxx x nevytvoří xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 xx, xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. ASCII) x xxxxxxxx pro xxxxxxxxx analýzu.
2. ÚDAJE
2.1 Xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx UVA/VIS xxxx xxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, měl xx xxx rozsah xxxxxxxxxxx a interval xxxx xxxx nastaven xxx, aby xxxx xxxxx proložit xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, že xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx být xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx 100 μg/ml xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxx (-UVA) xxxxxxxxxxx, xxx mohla xx být xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (+XXX), xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx koncentrací, xxxxx xxxx xxx x xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx-xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx kvality xxxxx. Není-li x xxxx xxxxxxx experimentu (-XXX x +UVA) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chemická xxxxx xxxxxxxx xx dostatečně xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx experiment xxxxxxxxx jednou xxxx xxxx předběžnými xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx hraničních xxxxxx xxxxxxxxxxxxx modelu xx xxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx výsledku xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky. X tohoto xxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx ultrazvuku) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx zkoušky. Xxxxxxxxxx xxxx být xxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Zkrácení xxxx xxxx xxx xxxxxx u xxxxxxxxxx xxxxx nestálých ve xxxx.
2.2 Zpracování xxxxxxxx
Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxx xx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx odpovídající 50 % inhibici xxxxxxxxx příjmu neutrální xxxxxxx (XX) (EC50). Xxx tak xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx nelineární xxxxxxx (xxxxxxx Hillovou funkcí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx odezvy xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx metod xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx XX50 pro xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kvalita xxxxxxxxx. Xxx výpočet EC50 xxx popřípadě xxxxxx xxxxxx grafického xxxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx doporučuje xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (měřítko xxx x: logaritmické, xxxxxxx xxx x: xxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx x xxxxx případech xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx téměř xxxxxxxx.
2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx modely)
2.3.1 Xxxxxxxxxxx xxxxx — verze 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxxxxx xxxx v xxxx případech jak xxx ozáření (+XXX), xxx xxx ozáření (-XXX) xxxxxxx úplné xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, lze xxxxxxxxxxxx faktor (PIF) xxxxxxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
(x) XXX = (XX50 (-XX)) / (XX50 (+XX))
Xxxxxxx PIF &xx; 5 předpovídá xxxxxxxxxxx fototoxického potenciálu, xxxxxxx xxxxxxx XXX ≥ 5 předpovídá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx látka xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX x není xxxxxxxxxxx při zkoušce -XXX, xxxxx hodnotu XXX vypočítat, xxxxxxx xxx o xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx "&xx; XXX", xxxxxxxx xx xxxxxxx -XX xxxxxxx xx po xxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace (Cmax), x xxxx hodnota xx použije xxx xxxxxxx "&xx; PIF";
(b) &xx; XXX = (Xxxx (-XX)) / (XX50 (+XX))
Xxx li xxxxxx pouze xxxxxxx "&xx; PIF", xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx hodnota &xx; 1.
Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxx nevykazuje xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxxxxxxx, vypočítat ani xxxxxxx EC50 (-XX) xxx hodnotu XX50 (+ XX), svědčí xx x neexistenci xxxxxxxxxxxxx potenciálu. V xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx charakterizaci výsledku xxxxxxx formální xxxxxxx "XXX = *1";
(X) &xx; PIF = *1 = (Xxxx (-XX)) / (Xxxx (+XX))
Xxx xx získat xxxxx xxxxxxx "PIF = *1", xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx x) x x) by měly xxx xxx předpověď xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx.
2.3.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (MPE)
Alternativně lze xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxx předpovídání xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx studii fototoxicity xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, které xx xxxxxxx xxxx XX xxxxxx (13). Xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx model XXX v případech, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx XX50. Tento xxxxx xxxxxxx střední xxxxxxxx účinek (xxxx xxxxx xxxxxx) (XXX), xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxx použití modelu xxx na Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (Berlín) vyvinut xxxxxxxxx xxxxxxxxxx software, xxxxx je volně x xxxxxxxxx.
2.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx (PIF ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx látka xx xxxxxxxxxxx potenciál. Xxxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxx při koncentracích xxx 10 μx/xx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx bude xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxx xx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pouze při xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx intenzity xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Ty xx xxxxx týkat xxxxx x xxxxxxxxx, absorpci x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkouškou, xxxx. xx xxxxxxx modelu xxxxxx xxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek zkoušky xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx (PIF &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, že látka xxxxxx pro xxxxx xxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. V xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxxx koncentraci 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx fototoxický xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx vivo xxx xxxxxxxx za nepravděpodobnou. X případech, xxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx xx xxxxxxxxxxx (XX50 +XX a XX50 -XX), xx xxxxxxxxxxxx xxxxx stejná. Není-li xxxxxxx tomu toxicita xxxxxxxxx (+XX x -XX) x xxxx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vodě xx xxxxxxx xxxxx xxx 100 μg/ml, xxxx xxxxxx zkouška xxx xxxxxxxxx látku xxxxxx x mělo xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx vitro xxxx zkouškou in xxxx).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx o xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx XXX, je-li xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x tomto xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x aplikačním xxxxx (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- typ x xxxxx xxxxx,
- nepřítomnost xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx-xx známo,
- xxxxxxxxx xxxxx xx XXX stanovená xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx
Xxxxxxxx podmínky x) — inkubace xxxx xxxxxxxx x xx xx:
- typ x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- inkubační podmínky (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- délka inkubace (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x po xx).
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxxx chemické xxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx UV/VIS, xxx xxx xxx,
- x xxxxxxx, xx zkoušená xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pufrovaný xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx charakteristiky xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (použitých xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx o jeho xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx od zkoušeného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xX/xx2,
- xxxxx xxxxxxxx XX/XXX světlu,
- xxxxx XXX xxxxxx (intenzita × čas), xxxxxxxxx x X/xx2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx kultur udržovaných x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxx XXX:
- xxxxxxx xxxxx XX,
- doba xxxxxxxx XX,
- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx činidlo, xxxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx XX,
- xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxx xxxxx, je-li xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx, xx-xx použit.
Výsledky:
- životaschopnost xxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyjádřená x xxxxxxxxxx xxxxxxx životaschopnosti xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx versus xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx +XXX a -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na koncentraci: xx-xx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx EC50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- srovnání obou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX/XXX x bez něho, x xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx-xxxxxxxxxxx factor ) (XXX), nebo výpočtem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx photo effect) (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a) — xxxxxxxx negativní kontrola:
- xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx x neozářených xxxxx,
- xxxxxxxxx údaje pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, střední xxxxxxx x směrodatná xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx b) — xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx XX50 (+UVA), XX50 (-XXX) a XXX-xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx údaje xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-XXX) x PIF, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx výsledků.
Závěry.
4. LITERATURA
(1) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Döring, X., Xxxxxüxxxx, X. X., Xxxxxxx, X., Xxxxxx, X., X'Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, M., Xxxxxx, X. X., Xxxxxx, X., Moldenhauer, X., Xxxxx, X., Xxxx, X., Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X., De Xxxxx, O., Steiling, X., Xxxxxxxx, X. (1994), XXX/XXXXXX xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x Balb/c 3X3 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, Xxxxxxxxxx in xxxxx 8, 793-796.
(2) Xxxx (1998), Xxxxxxxxx xx xxx scientific validity xx xxx 3T3 XXX XX xxxx (xx in xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx), Xxxxxxxx Commission, Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx: ECVAM xxx DGXI/E/2, 3 Xxxxxxxx 1997, XXXX 26, 7-8.
(3) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xxxxxx, J., Pape, X. X. W., Xxxxxxxxxx, X., De Xxxxx, X., Xxxxxüxxxx, X. X., Clothier, X., Xxxxxxx, X., Xxxxxxxxx, F., Xxxxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Maurer, T., Xxxxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X. X., Xxxxx, X., Xxxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. (1998), EU/COLIPA "Xx xxxxx phototoxicity", xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx II (xxxxx xxxxx), xxxx 1: xxx 3X3 XXX xxxxxxxxxxxxx test, Xxxxxxxxxx in Xxxxx 12, 305-327.
(4) XXXX Xxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, XXX/XX/XXXX/XX(96)9: Xxxxx Xxxxxx xx xxx XXXX Xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xx Validation and Xxxxxxxxxx Criteria of Xxxxxxxxxxx Toxicological Xxxx Xxxxxxx, OECD Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxx, 1996.
(5) Xxxxxx, X. X. (1993), X scheme xxx xx xxxxx xxxxxxxxx of substances xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx in Xxxxx 7, 95-102.
(6) Santamaria, X., Prino, G. (1972), Xxxx xx xxx xxxxxxxxxxxx substances, Xxxxxxxx progress xx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx Xxx. 3 Xxxx 1, Xxxxx Xxxxxxx Publishing Xx, Xxxxxxxxx, XX–XXXX.
(7) Xxxxxxxxx, H., Lovell, X. X., Xöxxxx, X., Xxxxxxx, B. X., Xxxxxx, X., Xxxxxxx, M. X., Xxxx, X. X. X., Xxxxxx, O., Xxxxxxxxx, X. (1994), Xx xxxxx phototoxicity xxxxxxx: Xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx XXXXX workshop 2, XXXX 22, 314-348.
(8) Xxxxxx, J. D. (1989), Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X: Xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, (X. X. Xxxxx, xx.), Plenum Xxxxx, Xxx Xxxx, 2. vyd., 79-110.
(9) Xxxxxxxxxxx, E., Xxxxxxx, X. A. (1985), Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, Toxicol. Xxxx. 24, 119-124.
(10) Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. G., Xxxxxxxxxx A. (1996). X: Xxxxxx models xxx xxxxxxxxxxxxx testing, Xxxxxxxxxxxxxxxxx, (F. X. Xxxxxxxx, X. I. Xxxxxxx eds.), Xxxxxx &xxx; Xxxxxxx, Washington XX, 5. xxx., 515-530.
(11) Xxxxxxx, X. X., Pidoux M. (1987), Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxx: estimates xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx the middle xxxxxxxxxxx, near ultraviolet xxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, Cancer Xxx. 47, 1825-1829.
(12) XXXXX/XXXXX/XXXXXX, Xxxxxxxx Operating Xxxxxxxxx: Balb/c 3X3 XXX Xxxxxxxxxxxxx Xxxx, xxxxxxxx 23. xxxxxxxx 1997 X. Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx 6. xxxxxx 1998 xxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx xx the XX/XXXXXX xxxxxxx "Xx Xxxxx Photoirritation".
(13) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, M., Xxxxxx, X., Xxxx, X. X. W., Xx Xxxxx, X., Xxxxxüxxxx, X. X., Xxxxxxxxx, F., Xxxxxxx, X., Lovell, X. X., Pfannenbecker (1998), X Study xx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xx UV Xxxxxx Xxxxxxxxx xxxx Annex XXX xx xxx XX Xxxxxxxxx 76/768/EEC xx xxx 3X3 XXX Xx Xxxxx Xxxxxxxxxxxxx Xxxx, XXXX 26, 679-708.
(14) Xxxxxüxxxx, X. X., Quedenau, X. (1995), Mathematical xxxxxxxxx xx cellular xxxxxxxxx to xxxxxxxx xxxxxxx, Journal of Xxxxxxxxxx Systems, 3, 127-138.
(15) Xxxxxüxxxx, X. X. (1997), A xxxxxxx xxxxxxx of xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx pairs xx xxxx-xxxxxxxx xxxxxx xxx its use xxx xxxxxxxxxx the xx xxxx phototoxicity xx xxxxxxxxx, XXXX 25, 445-462."
"Xxxxxxx
&xxxx;
[1] Xxxxx xxxxxxxxxxx lze nalézt x xxxxxxxxxx (12).