Rozhodnutí Xxxxxx
xx xxx 14. února 1991,
kterým xx stanoví některé xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx syrového mléka x xxxxxxx ošetřeného xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. srpna 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx obchodu x tepelně xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx xx xx. 10 xxxx. 2 uvedené směrnice,
vzhledem x xxxx, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, které xx mají xxxxxxxx xxx kontrolu dodržování xxxxx pro xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxx mléko je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x přítomnosti antibiotik;
vzhledem x xxxx, že xxx pasterované xxxxx xx nezbytné xxxxxxxx xxxxxxx metody pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patogenů, xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií, xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx antibiotik x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a XXX xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxx mají xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; že xx xxxxxxx nezbytné pokračovat x prošetřování podmínek, xx kterých xx xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx; xx x očekávání xxxxxxxx xxxxxx šetření xxxxx xxxxxxx xxxxx xx to, aby xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx zahrnuje x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x kriterií xxxxxxxxxxxxx xxx zajištění xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX TOTO ROZHODNUTÍ:
Článek 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx syrové xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx somatických buněk,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx XXX mléko x sterilizované xxxxx xxxx tyto:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Použití referenčních xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxx xxxxx pravidel xxxxxxxxxxx v xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 jsou xxxxxxx x xxxxxxx II.
Xxxxxx 6
Toto rozhodnutí xxxx xxxxxxxxxxx do 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx zohlednil xxxxx vědeckých x xxxxxxxxxxx znalostí.
Článek 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 14. xxxxx 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. věst. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Odběr xxxxxx xxxxxxxx a tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx ustanovení xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx členských států x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx tato ustanovení.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxx, ředění xxxx xxxx musí xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx mikrobiologické xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx popsaných testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" nebo "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "xxxxxx vodou".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek
Příslušný seznam xxxxxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxx referenční xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx zvláštnímu xxxxxxx x se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" se rozumí xxxx x přesností xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xxxxxxx xx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, které splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx není xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x reprodukovatelnost
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx uvedená pro xxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) je xxxxxxx, xxx kterou se xxxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xxxxx byly získány xxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx laboratoř, krátké xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Reprodukovatelnost (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx samostatných xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx za odlišných xxxxxxxx (xxxxx pracovníci, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx x/xxxx různé xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, uváděné x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx pokusy, xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx případě xxxx xxxxxxx opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x nezbytné xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx pokyny.
6. Xxxxxx x testování
Zpráva x xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx musí xxxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx vzorků xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx dodané xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx skladované xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nádržích.
Postupy xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 se použijí xxx odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Obecně
Odběr xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, nádržích xxxx. provedou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vyškoleni.
Pokud to xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x metodách xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx příslušné orgány xxxx testovací laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx zaměstnance xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx musí být xxxxx zhotoveno z xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx vhodného, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx musí být xxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Plunžry x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx vzniku xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx vzorků x jakékoli xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx naběračky xxxx xxx alespoň 50 ml.
Vzorkovnice x xxxxx musí xxx xxxxxxxx, kovová xxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx (včetně nádob x víček) nesmí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která xx xxxxxxxxx xxxxxxxx testů. Xxxxxxx materiál a xxxxxx xx xxxxxx xxxx mít čistý, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx trhlin x xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Vybavení xxx xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx) xxxx splňovat xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx vzorků xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxx testovací laboratoř xxxx příslušný xxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx odběru vzorků
4.1 Xxxxxx údaje
Bez xxxxxx xx xxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, xxxxx musí být xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxx ihned xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx ještě x xxxxxx.
Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx různé xxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx musí xxxxxxxxx potřebám testování. Xxxxx xxxxxxxxx nádob xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxx tyto xxxxxx téměř xxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxx xxxx možné xxxxx promíchat xxxxx xxxx testováním, xxxx xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx stloukání másla xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx vzorků
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x věder x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx promíchání xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx a xxxx, xxxxxxx dbát na xx, xxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxx xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx smetana. Vzorek, xxxxx je reprezentativní xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx z chlazených xxxxxx xx xxxxx x zemědělském xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx ručně.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx řádně xxxxxxxxxx, když se xxxxxx xx xxxxx xxx. Za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxxxx další ruční xxxx xxxxxxxxxx míchání. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx xx xx xxxxxxx vzorek, xxxxxxxx kapacitu xxxxx xxx, xxxxxxx reprezentativní xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx množství xxxxx, u něhož xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, rozděleno xx xxxx xxxxx, x xxxxx nádoby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxxxx množství xxxxx xxx xxxxx vzor. Xxxxx vzorky z xxxxx xxxxxx nemusí xxx xxxxxxxx testovány, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx těchto xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x množství, xxxxx xx nachází x xxxxxx, xx které xxx každý xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) vzorek (xxxxxx) x těchto xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx z xxxxxxx xxxxx – skladovací xxxxxx, xxxxxxxxxx kamiony, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx.
X promíchání obsahu xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových xxxxxxx xxxx cisternových xxxxxx xx xxxxxxxxxx mechanické xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx prokázáno, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x jednotlivých xxxxxxx xx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx promíchání značně xxxxxxxxx shodu xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď x xxxxxxx xxxxx xxxxx, nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx mléka z xxxxx. Způsob xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx účinný, pokud xx rozdíl xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx odebraných za xxxxxx xxxxxxxx menší xxx 0,1 %.
Ve xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx části xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx promíchání není xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxxxxx odběr vzorků x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě odběru xxxxxx x vypouštěcího xxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx obsahu xxxxxxx nádob xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx míchačkou xxxxxxxxxxx xx nádoby x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx je ponořena x xxxxx,
- x xxxxxxx cisternových xxxxxxx xxxx cisternových vagónů xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- filtrovaným, stlačeným x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx minimální xxxx x objem xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx žluklé xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx mléka dodaného xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoří xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx x xxxxx používání podrobeno xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx odpovědný orgán. Xxxxxxxx postupů odběru xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx s cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku),
- schopnost xxxxxxxxxx reprezentativní vzorek x šarže po xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx může příslušný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, ze xxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- maximální přenos,
- xxxxxxxxx, xxxxx může xxx provedeno, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného mléka xxxxxxxx x přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx k přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx, zapečetěných xxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx xxxxxxxx, x xx, pokud je xx xxxxx, ihned xx zpracování (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx tepelně xxxxxxxxxx xxxxx (pasterovaného, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x sterilizovaného) xx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být provedena, x to xxxxx xxxxxx poskytnutých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx podle xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx vzorku
Vzorek xx měl být xxxxxxx identifikačním xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx souhlasem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx se xxxxx x podmínek xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxx x době xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx x testování, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Je-li xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx skladován ve xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx testování xxxx xxx přepravovány x xxxxxxxxxx při xxxxxxxxx 0 xX až 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx musí xxx xx nejkratší a x žádném případě xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Xxxxxxxxx orgán xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 oC až 6 xX, není-li xxxx xxxx xxxxxxx x testováním delší xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x skladovány xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx x testováním xxxx být xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 hodin,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx syrového xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy musí xxx skladovány x xxxxxxxxx zařízení laboratoře x doba xxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx musí být xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx v popisu xxxxxxx použitelných postupů.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Stanovení xxxx mrznutí
II. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Stanovení xxxxxxxx peroxidázy
IV. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °C
V. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 21 °X
XX. Stanovení xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxx mrznutí plnotučného, xxxxxxxxxxx, odstředěného, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (termistorového xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx ochlazována xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízením x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx typy xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx bod xxxxxxx na xxxxx xxxxxx mrznutí, kdežto xxxxx xxx je x xxxxxxxxxx důvodů xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx mrznutí xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x tomu, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx různých druhů xxxxx, ale i xxxxxx bodu xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, tento referenční xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx plató. Xxxxxxxxx x pevně xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx lze xxxxxx xxx xxxxx podílu xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx není xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx na 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx xxxxx: hodnota xxxxxxxx x souladu x xxxxxxxx xxxxxxxx x vyjádřená xx xxxxxxxx Xxxxxx (°C).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxxx xx přístroji xxxxxxxxx xx xxxxxxx teplotu x xxxxxxxxxxx vibrací xx vyvolá xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx, které odpovídá xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx vzorky xxxxx xxxxxxx přesné xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx plató xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx chladicí xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx odporového xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx na vyvolání xxxxxxx, xxxxx i xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx dva xxxx xxxxxxxx lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x kapalině xxxxx xxxxx xxx 0,2 °C. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °X xx nominální xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Je xxxxxxxx, xxx x lázni xxxx udržována xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx značkou xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx typ
Kolem zkumavky xx xxxxxx proudí xxxxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx nominální hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx xx 33 % (V/V) xxxxx xxxxxx 1,2-ethandiolu (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x maximálním xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx a x xxxxxxx xxxxxx maximálně 0,31 mm. Časová xxxxxxxxx termistoru musí xxx xxxxx než 2 xxxxxxx x xxxxxxx b (xxx xxxxxxxx) musí xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx stoupla xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx tolerance xxxxxx může být ± 5 %.
Když xx xxxxx x xxxxxxxxx x pracovní xxxxxx, konec xxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx v ose xxxxxxxx na xxxxxx x x xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 mm xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (viz obrázek xx xxxxxx 15). Xx xxxxx dodat xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx nastavení sondy xx této xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / dT × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx ve stupních Xxxxxxx
X xx xxxxx x ohmech xxx xxxxxxx X,
− dR / xX × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx materiálu použitém xxx xxxxxx termistoru. X běžné praxi xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx než 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip měření
Použitý xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx prvního xxxxx na xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx část xxxxxx, xxx teplota zůstane xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx dobu xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor xxxxxxxxxx xx vyrovnává Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (vyrovnávací) xxxxx xx nesmí xxxxxxxx xx linearity x xxxxx xxxxxxx x xxxx než x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx odpory xxxxxxx.
Xxxxxx stupnice xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx zařízení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °C xx –1 °C.
Stabilita xxxxxxxxxxx zařízení x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být taková, xxx xxxxxxxx xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx než 0,001 °C.
Linearita xxxxxx xxxx xxx taková, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °X do – 0,600 °C xxxxx xxxxx než ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, který xxxxxxxxx s xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx měla být xxxxxxxxx xx rozkmit x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx úrovni xxxxx xxxxx termistoru. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx je asi 1,5 mm xxx xx xxx touto xxxxxxx.
Xxxxxxxx vibruje bočně x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výrobce (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx zajištěna xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx nesmí x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx vyvolání xxxxxxx
Xxxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. X xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx; jedním xxxxxxxx xx zvětšení xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx na vzorky
Zkumavky xx xxxxxx (viz xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 mm xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx nesmí xxxxx x xxxx xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx xxx xxxxxx xxxxxx vzdálenou xx xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx dnem xxxxxxxx), xxxxx xxxxx objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx napětí musí xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx zdroj kolísá x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 xx, xxxxx X.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, nastavitelná xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx pec, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx destilovaná x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 20 ± 2 °X, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx oxid xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, čistoty x.x., jemně xxxxx, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x elektrické peci xxxx nejméně 24 xxxxx xxx teplotě 130 ± 1 °X x xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx chloridu xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Rozpustit x xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 xx a xxxxxxx xx značku xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx nejdéle xxx xxxxxx xxx xxx 5 °X x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxx xxx 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx xxxxxxxx xx standardní roztok xxxxxxx xxxxxxxx protřepáním x xxxxxxxxxxx otočením xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, aby xx xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx do suché x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxx, xxxxx xxxx ze xxx čtvrtin xxxxxxx, x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxx xxxx měsíců, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx nastaven xxx, xxx xx okolní xxxxxxx nelišila x xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Kryoskop xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx než 26–27 °X.
Xxxxxxx se, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx výrobce x xx xxx xxxxxx xxxxxxx 12 hodin xxxx xxxxxxxxx. Zkontrolovat xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx chladicích kapalin.
Vybrat xxx standardní xxxxxxx (xxx tabulka xxxx), xxxxxxx xxx mrznutí xx xxxxx nad xxxx xxxxx pod xxxxxxxxxx hodnotou xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxx mrznutí xxxx roztoků by xxxxxxx neměl xxx xxxxx xxx – 0,100 °C.
(U xxxxxxxxx xxxx v současné xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx xx dané hodnotě xxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. V těchto xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx tento bod xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx postup; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx do xxxxx a xxxxx xxxxxxxx xx vzorky, xxxx měřit pomocí xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxx (xxxxxx druh xxxx, xxxxx a xxxxxxxxxx demineralizovanou vodou). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxx xxxxxx jako xxxxxxx vzorků mléka.
Podle xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kalibrace, xxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx postup x druhým standardním xxxxxxxx x xxxxxxxx xx provádět takovým xxxxxxxx, dokud xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx roztok xxxxxxxxxx správné xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxxx xx xxxx nutná xxxxxxxxx nastavení. Kryoskop xx tedy xxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx bod xxxxxxx vzorku xxxxx, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx testovacího xxxxxx
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx teplotě xxxx 0 °X x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx je nezbytné xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx tělíska xxxx xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx xx xxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x mlékem a xxxx být účinný xx laboratorní xxxxxxx.
7.3 Xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx xx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testování. Xx xxxx nezbytné xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx teplotu.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Vzorky, jejichž xxxxxxxx přesahuje 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx nejméně 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v otevřené xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda xxxxxxx x xxxxxxx chladicí xxxxxxxx jsou x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx zda xx xxxxx termistoru xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx kryoskop x xxxxxxx xx, xxx xx chladicí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Pokud xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx chladicí xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx rozkmit jeho xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebudou xxxxx x více xxx 0,001 °X. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx kalibrujte, xxx xx xxxxxxx x xxxx 6.
Pokud se xxxxxxxx používá nepřetržitě, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx nejméně xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx výrobce.
8.3 Stanovení xxxx xxxxxxx mléka
Promíchat xxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otáčením. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Ujistit xx, xx jsou xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, čistou x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx a mrznutí xx xxxxxx při xxxxxxx určené xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °C.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx tuto xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x ručních xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx se ručička xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx je dosaženo xxxxxxxxxxx teplotního xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxx vzorek xxxxxx xxxxxx xxxx dosažením xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx 45 °X a 5 xxxxx se udržuje xx této teplotě, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx zchladit xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x ihned xxxxxxx testování. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dosažené xxxxx xxxx doby x xxxx xxxxxxx xx nutné zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx, a xxxxxx interval xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxx xxxx x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx teplotu.
Když xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x otřít xxxxx x xxxxxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x chlupy xxxxxxxxxxxx látkou x xxxxxxx xxxxx stanovení x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx je xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxx stanovení xxxxxx xx 0,004 °X, zapíší xx x použijí xx xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx sondy
Po xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xx xxxxx xxx vzorky a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx zůstala x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx možné; x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx ujistit, xxx je xxxxx xxxx začátkem xxxxxx xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx slepých xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx provedení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrzena, xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx obou xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx získaných xxx xxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx součet xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx hodnotu, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
4.1 (poloha xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. STANOVENÍ AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Definice
2.1 Aktivita xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxx podmínek.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx ve vzorku xxxxxx fenol z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx fenol reaguje x dibromchinonchlorimidem x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx při 610 xx. Poté xx provádí xxxxxxxxx xx vzorkem, jehož xxxxx fosfatázy byl xxxxxx.
4. Činidla
4.1 Tlumivý xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Rozpustit xx xxxx 50,0 x hydroxidu xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit xx xxxx 22,0 g xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 ml xxxxxxx xxxxxxx na 50 °X, xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxx na 20 °X, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Přefiltrovat. Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx objemem xxxx.
4.2 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x methaboritanu xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x NaBO2.4H2O x 20,0 g xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx na 1000 xx.
4.3 Tlumivý roztok xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 g xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx roztoku (4.1.3) xxxx 0,5 x fenylfosfátu xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx stát 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x odstranit xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx zabarvení x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx substrát xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x to xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (ZnSO4 · 7X2X) a 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x doplnit na 100 xx.
4.6 Roztok 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (roztok BQC)
Rozpustit x 10 xx 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx v xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx je xxxxxx xxx jeden xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 g xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) a xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 mg xxxxxxx xxxxxxxxx fenolu x xxxxxx do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 ml xxxxxxxxx roztoku, doplnit xx 100 xx x promíchat. 1 xx obsahuje 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré pomůcky xx xxxx, xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx typy plastových xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenolů a xxxxxx používání xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx odečty xx xxxxxx délce 610 nm.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 xx x 10 xx.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx nejméně 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Postup
Poznámky:
a) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Stopy xxxx xxxx xxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx se xxx xxxxxxx. Je proto xxxxx věnovat xxxxxxxx xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Testování xxxxxxx ihned po xxxxxx vzorků. V xxxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxx v chladničce, xxxxx ne xxxx xxx dva xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx pipety xxxxxx 1 xx xxxxxx do xxxxx xx dvou xxxxxxxx (5.4), jednu xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx vzorek xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx; xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx hliníkovou xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x xxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx vodní xxxxx (5.2) x občas (xxxxxxx čtyřikrát) promíchat xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx x xxxx 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx xx vroucí xxxx. Xxxxxx zchladit xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx zkumavky xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx mililitry x v případě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx čirý; shromáždit 5 ml ve xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx zabarvení při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx absorbanci při xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx absorbanci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 20 μx fenolu xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Připravit xxxxxxx smícháním objemu xxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx opatrně xxxxx xx xxxx, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Sestrojení kalibrační xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Xx každé x xxxx zkumavek xxxxxx xxxxxx pipety 1 ml vody x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Do xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx roztoku síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx tlumivého roztoku xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 ml xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet zabarvení 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx slepým xxxxxxx xxxxxx absorbanci při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx základě xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx regresní xxxxxx xxxxxxx nejmenších xxxxxxx.
7. Vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx přímky (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
Aktivita fosfatázy = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx fenolu x μg získané xxxxx bodu 7.1.1;
D xx xxxxxx xxxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.10 (x případě xxxxxxx xxxxxxx D = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 xx testovacího xxxxxx) – xxx 6.2 ve xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (předběžně) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx podle 6.3.10, limity xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, který xxxxxx xx xxxxxxxx pasterace.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, do 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx reakce xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx neobjeví xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vodíku. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx parafenylendiamin xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Štorchův xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx přímo úměrná xxxxxxxxxxx enzymu.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x teplé xxxx (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx skladovat v xxxxxx x temnu, x tmavě xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx jednoho xx xxxx dní xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx vytvoří xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx 9 ml 30 % xxxxxxxx vodíku x doplnit xx 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx peroxidu xxxxxx xx stálý asi xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxx, x láhvi xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx styku x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx vzorku xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx peroxidu xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx zabavení xxxxxx xxxx xxx 30 xxxxxx po xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C. Postup xx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, UHT mléko xxxx xxxxxxxxxxxxx mléko, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí organismy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx vzorku xxxxx x kultivačním médiem x Xxxxxxx miskách x nechat xxxxxxxxx 72 xxxxx při 30 °X. Spočítat xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx sterilizovaného xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx vybavení, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx teploty, xxxxxx na ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Mechanické xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x pracující xx xxxxxxxx excentrické xxxxxx xxxxxx zkumavky.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x dostatečným xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx o xxxxxx 20 xx xxx skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nominálním xxxxxx 1 ml, x xxxxxxxxx otvorem x xxxxxxx 1,75 xx 3 mm.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx z xxxxxx, xxxxxxxxxx skla xxxx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, dno xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 xx 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx mít xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1), nejméně jednu xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při použití xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, uzávěry nebo xxxxx by xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – agar xx sušeným mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10–15 g xxxxx želírovacích vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxx srovnávacími xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx inhibiční látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx kvasnicový xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x nakonec sušené xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx postup. Xxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx nerozpustí, xxxx zahřívat v xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x množstvích xx 100 xx 150 ml do xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky a xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx z komerčního xxxxxxxxxxxxx kultivačního média. Xxxxxxx pokyny výrobce, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit pH xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X metodou podle xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (NaCl) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pH-metrem (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx upravit xX roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx obsahovala 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx než 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx připravovat z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx prášku. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Upravit xX metodou podle xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx rychle xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx vodní xxxxx (4.1.5) na 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx nádoby xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx překročit xxx xxxxxx.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx získat další xxxxxxxxx ředění xx xxxxx postup xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho misek
7.5.1 Xxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx misky (4.2.4) 1 ml xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx vhodnou misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx při 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, příloha X xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx mléka (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx naočkované misky xxxxx asi 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx rotací Petriho xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, podle druhu xxxxx, testovacího vzorku xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx médiem nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx misky do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Neskládat xx xxxx xxxx xxx xxxx misek. Sloupky xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx dotýkat, xxx xxx v xxxxxxxx xx stěnami a xxxxxx částí inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx k záměně xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx tvořící povlak xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx misku. Xxxxx kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Syrové x xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, kde:
n1 xx počet misek xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx misek xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx získány xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pět, xxxxxxxxxxx tak, aby xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 10, uvést, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xx "nižší xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx a vynásobit xxx převrácenou xxxxxxxx xxxxxxx zředění. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xx".
8.2 UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °X
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx mléce, které xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx při 6 xX x cílem xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx množit se x mléce při 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx pasterované xxxxx xxx xxx xxx 6 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx všech bodech xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, přesný na ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx rozmíchat 1 xx vzorku xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rotace xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx uzávěry a xxxxxxxxxxx objemem, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx ředění nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx nebo xxxxxxxx x objemu 20 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx hrotem, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx nutné xxxx xx to, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje x nádobách, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxx xx měly být xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx dextróza |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10-15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx vodě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx a nakonec xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxxx. Poté přidat xxxx a uvést xx varu za xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx agar xxxxx xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx x xxxx asi 30 minut.
Pokud je xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx papír.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, upravit xX, xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx od 100 xx 150 xx xx baněk nebo xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °C, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx složkou xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx rozdělit, sterilizovat x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve vodě, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx je nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, aby xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx při xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne déle xxx 1 xxxxx xx jeho přípravě.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx. Upravit pH xxxxxxxx xxxxx bodu 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxx rozpustit potřebné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Příprava xxxxxx xxxxx
7.2.1 Inkubovat x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, reprezentativní vzorek x xxxxxx nejméně 100 xx xx xxxx 120 ± 2 hodin při 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx inkubaci xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x to 25 rychlými otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx přijít xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx přibližně xxxxxx jako teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx ředění míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
S xxxxx xxxxxx xxxxx desetinná xxxxxx xx tento xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx ředění. Xxx xxxxx ředění (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx misku.
7.6 Nalévání xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx promíchat xxxxxx Petriho xxxxx, xxx xx inkubaci xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x kultivačním xxxxxx xxxxx překročit 15 minut.
Nechat stát xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx sebe xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Petriho miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx tlumeném xxxxxx. Xxx usnadnění počítání xxx použít zvětšovací xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx to, aby xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. X xxxxxxx pochybností provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla s xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx považují za xxxxx kolonii. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx v nepostižené xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx celou xxxxx. Xxxxx kolonie tvořící xxxxxx pokrývají více xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 kolonií (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 n2)d xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 je počet xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx byly získány xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Pokud xxxx všechny počty xxxxx než 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na mililitr xx "xxxxx než 10 × x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 300 x počítání je xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx na ml".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx testů xxxxx xxxxxx x dispozici.
VI. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x pasterovaném xxxxx xxxxxxxxx počítání xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Definice
"Koliformními xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx při 30 °X vytvářejí xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx necharakteristické xxxxxxx, xxx jsou xx popsaných xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kolonie x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx jehla xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx uzávěry x objemem 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx trubičky xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx selektivního xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné vatou), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx hrotem, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, bezbarvého xxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx xxxxxxx:
x) v xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170 – 175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu je xxxxx dbát xx xx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, tyto xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx víčka by xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety musí xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx (VRBL xxxx). Sušené xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 g |
|
Chlorid xxxxx (NaCl) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 g |
|
Neutrální červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Suspendovat x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx minut. Xxxx xxxxxxxx promíchat.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx do xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx po xxxxxxxxxx 100 až 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx zchladit xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx médium xx xxx hodin po xxxx přípravě.
5.2 Xxxxxx xxxx x brilantovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx zeleň |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx a uvést xx varu.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, upravit pH xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx kyseliny chlorovodíkové, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky nesmějí xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (VRBL xxxx) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx vzorku xxxxx do xxxxx xx xxx misek (4.2.4) a tím xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx asi 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx po nalití xxxxx xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x smícháním s xxxxxxxxxxx médiem nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx misku x 12 xx xxxxx VRBL agaru, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx misky.
Nechat xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX xxxxx (6.1) xx povrch xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Petriho misek
Přenést xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx xx sebe xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °C.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 mm, x xxxx xxx sraženiny xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Pokud xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. jinou xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx sraženin xxxxxxxx x charakteristickým xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx údajů v xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx počtu (xxxx. 3 až 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxx, xx xx pomocí xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx agar x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx takové xxxxxxx, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Pokud xx xxxxxxx konfirmační xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx koliformních bakterií xx základě procentuálního xxxxxx xxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 ml).
Počet xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx 100 xxxxxxx. Když xx zaokrouhlovaná xxxxxxx xxx, zaokrouhlit xxx, xxx sousední xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií na 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx ještě nejsou x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX BUNĚK
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx postupy xxx xxxxxxxxx somatických buněk.
A. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Mikroskopická xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x syrovém xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx za xxxxxx kalibrace x xxxxxxxx správnosti fluoro-opto-elektronické xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx a epitelové xxxxx, xxxxxxx jádra xx xxxxx zřetelně xxxxxxx methylenovou xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 povrchu xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx vysuší x xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxx mikroskopem. Xxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx se vynásobí xxxxxxxxx faktorem, s xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
|
1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx modř, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 hodin xxxxxxx x chladničce xxx 4 °C x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 10 až 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx vytvoření xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx použitím roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
5.1 Mikroskop umožňující xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující xxxxxxxxx xx 0,01 ml x xxxxxxxxx nejméně ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxx standardní xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 × 5 xx pro xxxxxx xxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) pro xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Vodní xxxxx, nastavitelná xx 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx mléka.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx mléka xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx po xxxxxx vzorku. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx teplota xxxxxx překročit 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx x laboratoři
Zahřát xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 až 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Zchladit na xxxxxxx, při xxxxx xxxx kalibrována xxxxxxxxxxxxxx (5.2), například 20 °X.
6.3 Předběžné xxxxxxxx xxxxxxxxxx sklíček
Vyčistit podložní xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, vysušit xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx prach, xxxxxxxx plamenem x xxxxxxxx. Skladovat x xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxx prachem.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx vrstvy
Mikrostříkačkou (5.2) odebrat 0,01 xx mléka xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx uvedeno xxxx. Xxxxxxx očistit vnější xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx do xxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx obkreslit xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 mm). Xxxx xx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx horizontální xxxxxxxxx xxxxx (5.4) až xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Barvení tenkých xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx barvícího xxxxxxx (4). Sušit x, pokud je xx xxxxxxxx, vysoušení xxxxxxxx ventilátorem (5.5). Xxxxxxx tenké vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xx přebytečné xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx sušit a xxxxxxx xxx, aby xxx chráněn xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx mikroskop (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx taková xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x z xxxxx je v xxxxxxxxxxxxxx poli xxxxxxxxx xxxxxxx polovina. Xxxxxxx xxxx xxxx pole xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx vrstvy a xxxxxxxxx ty xxxx xxxx pole, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxx vrstev x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy. Počítání xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mikroskopických polí xxxxxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx všechny xxxxx xxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx počtu xxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxx
Xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a mechanických xxxxxxx počítání, variační xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vzorků xxxxx xxx xxxxx než xxxxxxxx koeficient elektronického xxxxxxxxx. Variační xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x obsahem 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx překročit 5 %.
Xxxxx somatických xxxxx, xxxxx xx xxxxx v každém xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx podle Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, aby xxxx xxxxxxx kritérium xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx rozdělení:
M = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x je xxxxxxxxxx odchylka.
Variační koeficient xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / s nebo XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (buněk), xxxxx xxxx spočítány (xxxxxxxxx 400 xxx CV = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx 5 xx. Xxxxx xxxx xxxxxxxx průměru xxxxxxxxxxxxxxx pole, jak xx stanoven xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx faktor = 20 × 100 / x × b
kde:
d je xxxxxx mikroskopického xxxx x mm, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
b xxxxxxx xxxxx spočítaných xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx mikroskopických xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x celkový xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx obsahu buněk
S xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx ml xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 a 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx, který xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx kalibraci (xxx X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx bez xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Definice
Pro xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx rozumějí xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX minimální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx důkladně xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Xxxx xxxx xxxxx se xxxx přenese xx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx disk, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx elektrický impuls, xxxxx se zesiluje x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx mililitr.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx použít xxxxxxx čistoty x.x.. Xxxxxxx voda xx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, xxxx xx to xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx draselný |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx draselný |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx vodou na 10000 ml. |
Příprava:
Smíchat jednotlivé xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx překročit xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (zásobní xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx vodou na 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx chráněné xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx dva měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1) tak, aby xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx by xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx sedm xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit vodou xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx složky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení xxxx xxx před xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Tím xx xxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxx částic, které xx xxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx níž xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx xx použití vzorků, xxxxxxx xxxxx buněk xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (A).
5.2 Vodní xxxxx, s xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx na 40 ± 1 °X.
5.3 Zkumavka, x xxxxxxx uzávěrem, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx být skladován xxx xxxxx teplotě xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx provést xx xx uplynutí 24 xxxxx xx xxxxxxxx, neboť xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx nízký. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx musí xxx provedena co xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická konzervace xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxxxx prostředků:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx než 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx konzervovaný xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx teplotě 6 xx 12 °X;
- dvojchroman xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx dvojchromanu draselného xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,2 g na 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 72 hodin xxx xxxxxxx 6 xx 12 °C;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx může být xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx na teplotu 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx odběru x xxxxxxxx xx 48 xxxxx po jeho xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx konzervován xxxxxxxxxx x xxxxxxx koncentraci 0,05 x/100 ml, xxxxx je xxxxxx xxxxxxxx na teplotu 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx do 72 xxxxx po jeho xxxxxx.
6.2.2 Vzorek, xxxxx xxx byl konzervován xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx xxxxx konzervován xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx draselným.
Poznámka:
Pokud xxx o xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vod.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné ošetření xxxxxx
Xxxxx, které xx xx vyšetřit, xx xx xxxxxxxx skladuje xxxxxxx 24 hodin xxx xxx 2-6 °X. Počítání xxxxxx x xxx nadojení xx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx nutné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx být xxxxxxxxx ošetřován nejméně xxx xxxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxx xxx starý xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) na xxx 40 °C. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx pokojové teplotě xx xx počítání.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) do 15 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Bezprostředně xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx co xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx ředění x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 až 500&xxxx;000 xxxx:
- směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx, který xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx referenční xxxxxxxxxx.
XXXX. DETEKCE ANTIBIOTIK X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekce xxxxxxxxxx x sulfonamidů x xxxxxxx xxxxx a x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx mléka, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Popisovaný xxxxxx je jedním x xxxxxxxx postupů, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx organismu. Xxxxx postup xxx xxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx xxx takovéto xxxxx.
X. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx kvalitativního xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx penicilinu x xxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx postup
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx mléce x x xxxxxxx ošetřeném xxxxx, jejichž koncentrace xxxx xxxxx než xxxxxx xxxxxxx x xxxx tabulce:
Detektovatelné xxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx [1]
|
Citlivost xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 g |
|
|
Voda |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Upravit pH xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx xx 100 xx do xxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Agarové xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx vodě, s xxxxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx uvést do xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 mg |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx roztok
Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 mg |
|
Glukóza |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ve xxxx xxxxx roztok x xxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Standardní roztoky xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx sterilní xxxxx x vhodným xxxxxxxx připravit xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx rozpuštěním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 IU/ml).
5.2.3 Připravit 75 ml standardního xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg penicilinu/ml (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) do 71 xx xxxxx xxx inhibičních látek (5.3).
5.2.4 Roztoky penicilinu xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx xxxx být xxxxxxxxxx x den xxxxxxxxx testu.
5.3 Mléko xxx xxxxxxxxxxx látek
Připravit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx vodě, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek. Xxxxxx xxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx čerstvého mléka, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx inhibičních xxxxx; xxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx se xxxxx xxxxxx xx 100 °X, xxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °X xx 6 °C xx xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Připravit xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx na šikmém xxxxxx agaru (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x proužcích xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx inkubaci xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx kultura xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 ml živného xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) přenést 5 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx do zkumavky xx xxxxxxx xxxxxxxx (5.4.2) x vymýt xxxxxxxx smyčkou xxxxx xx xxxxxxx agaru. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °C x xxxxxxx se xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx očkovací xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx skleněné xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Při xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) nebo xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx mělo xxxxxxx nejméně xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 hodin.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx xxxx na Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxx x povrchu.
Přenést xxxxxxxx xxxx do xxxxx (4.2.3) obsahující 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Kultury, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx xx 18ti xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx by xxxxxxxx xxxx měla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx spór xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xx nahradit xxxxx xxxxxxxx připravenou ze xxxxxxx kultury (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x pěti částem xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx zkumavce xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx zátkou xxxx xxxxxx xxxx, v xxxxxxx ampule, xxxxxxxxx xxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx ztuhnout, poté xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule xxxxx xxx použity xxx xxx, ale xxxxx xxx rovněž xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °C, xxxxx xxxx xxxxx po xxxxxx přípravě ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xx xx nejdříve xxxxxxxx, xxxxxxx do 24 xxxxx po xxxxxx, x do xx xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 0-5 °X. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xx 24 hodin, xxxx by se xxxxxxx hluboko zmrazené (−30 °až - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx identifikovat xxxxxx zkumavku/ampuli (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx požadovaný pro xxxxxx x xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx každé xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx x mikrostříkačkou (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx vzorku xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx novou xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Postup xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg/ml (= 0,0067 IU/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx zkumavky/ampule a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx na nejméně 2½ až 2¾ xxxxxx do xxxxx xxxxx s xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (viz 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx média xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx ukazuje xx xxxxxxxxxx antibiotik xxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x koncentraci xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx zabarvení xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx médium je xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx nepravidelné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx koncentracemi uvedenými xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx mléka xxx inhibičních látek xxxx xxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx zkumavkách/ampulích, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx životaschopné xxxxx x vzorky xxxx xxx podrobeny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx metody "X".
Xxxxx xx nezbytné xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx skladovat, xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx penicilinu nebo xxxxxx xxxxxxxxxx, jakož xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx (A.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx popsaným xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx kolem xxxxx.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), a xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamáza), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx bez xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx látkou xx xxx penicilin xxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx antibiotika xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Pokud xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx není penicilin, xxx xxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx [xxx směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx A, kapitola XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, xxxxxx nebo xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo jsou xxxxxx x xxxxxxx xxx identifikovány jako xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mlékem, xxxxx xx má xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Čirá xxxx xxxxx disku xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Velikost xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx na koncentraci x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, pomůcky xx xxxx a vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 80 ± 1 °X.
4.2 Pomůcky xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx 9 xx 13 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxx asi 130 xx xxxxx (nejlépe xxxxxxxxx v exsikátoru).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, standardní xxxxxxx, roztok penicilinázy, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx kultivačních xxxxx musí xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx voda xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Živný agar (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g podle xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx složky xx xxxx, xxxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Po xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pH, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx médium 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx standardní roztoky xxxxxxxxxx x mléce xxx xxxxxxxxxxx látek (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μg/ml (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μg/ml (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Rozpustit xxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinázy (beta-laktamázy) xx xxxxxxxx destilované xxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx rozdělený xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx skladovat xx xxxxx xxxxx při 0 °C až 5 °C.
Poznámka
Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx jednotná mezinárodní xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx postupu se xxxxxxxxxxx, že deset xxxxxxxx penicilinázy stačí xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. X xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxxxx, xxx tento xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se kontrolním xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx A.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 oC.
5.6.2 Do xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx čerstvých spór (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx částí xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx získat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x naočkovaném agarové xxxxx, x důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx do xxxxxxxx Xxxxxxx misky (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx médium, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 až 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 ml xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx na xxxxxxx, xxxxxxxxx povrch, xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx, sejmout xxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxx ztuhnout. Xx xxxxxxxx média, xxxxxx víčka na xxxxx x xxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx se na xxxxxxxxx kondenzaci xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx připravené Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nejlépe ještě xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xx ihned xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Postup
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x pozitivním xxxx xxxxxxxxx výsledkem podle "xxxxxx A" (X.7.1 x A.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx za účelem xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx vzorky 10 xxxxx na 80 ± 1 °C, xxx se xxxxxxxx xxxx nespecifických xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx přenést xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx sterilní xxxxxxxx xx širokým xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx vzorku xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x suché xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x lahvičku se xxxxxxx. Xxxxxxxx položit xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx misky (5.6) x lehce xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx vzorky mléka xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 mm x od xxxxxx xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx rozmístit xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx testu se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx disků.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxx x po xxxxxx identifikaci, obrátit xxxxx dnem vzhůru x nechat xx xxxxxxxxx 2,5 až 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx inkubaci xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx kolem xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx zóny xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx disku xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx mléka, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx větší xxx velikost xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx inhibičních xxxxx v testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx inhibičních látek
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx zahřátého mléka (6.1.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx mléka xx možné xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx napuštěný xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x xxxxxx xx na xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx průměr xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxx xxxxxx mléka, xxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy x pro standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Interpretace xxxxxxxx (viz 2)
7.1 Xxxxx xx kolem xxxxx napuštěném kontrolní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx, ale xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx velká xxxx xxxxx než xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2x)), inhibiční xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx vyšší než 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxxxxxxx hodnotě xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, mléko xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx možné inaktivovat xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x xxxxx postupu.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxx polosyntetický xxxxxxxxx, který xxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xx. Syntetické xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx být xxxxxxxxxxxx penicilinázou za xxxxxxxxx podmínek a xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxx xxxx než xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxx identifikovány xxxxxxxx postupy.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu může xxx provedeno buď xx xxxxxxxxxx standardní xxxxxx, xxxx výpočty xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx získaných xx xxxxxxxxxxxx roztoky penicilinu x xxxxx (5.2 x) xx d)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx korelace xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxx zón xx xxxxxx. Xxxxxxxxx zóny xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx graficky xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zakreslí se xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx vypočítat xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx vyjadřují xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μg/ml (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx penicilin.
9.2 Opakovatelnost (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX PATOGENNÍCH XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X souladu x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx XXX bodu 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx být dodržovány, xxx detekci patogenních xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
Vyšetření xx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, které jsou xxxxxxxxxxx příčinou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx splněny xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, pokud xxx x počítání xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx nějakou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx a xxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx ošetřené xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganismů xx, pokud xxxxxxxx, xxxxxxx kritéria x xxxxxxx přijaté na xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx mléka xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" či "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx popsat xxxxxxx postup.