Xxxxxxxxxx Komise
ze xxx 14. xxxxx 1991,
kterým xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx syrového xxxxx x xxxxxxx ošetřeného xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx obchodu x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Společenství [1] naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx xx xx. 10 odst. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxx čl. 10 xxxx. 2 Komise xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxxx xxx kontrolu xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx pro xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxx mrznutí x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patogenů, xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx peroxidázy, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx x technických xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx stanovit xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx mají xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xx je xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx; xx v xxxxxxxxx xxxxxxxx těchto xxxxxxx xxxxx xxxxxxx státy xx xx, xxx xxx dodržení xxxxx xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxxx referenčních xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx zahrnuje i xxxxxxxxx postupů xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx zajištění xxxxxxxxxx xxxxxxx výsledků;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX TOTO XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx syrové xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy,
- stanovení xxxxxxxx peroxidázy,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů při 21 °C,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – xxxxxxxx kolonií xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx XXX xxxxx x sterilizované xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx se musí xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x příloze X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx v článcích 1, 2 x 3 jsou popsány x xxxxxxx II.
Xxxxxx 6
Xxxx rozhodnutí xxxx xxxxxxxxxxx do 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx vědeckých x xxxxxxxxxxx znalostí.
Xxxxxx 7
Xxxx rozhodnutí xx xxxxxx členským xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Mac Sharry
člen Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Odběr xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka
I. OBECNÁ XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx xxxxxxxx, kritérií xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x laboratoře xxxxxxxx xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx mléka musí xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Pokud xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx použitá x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx bez xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx jinak xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" nebo "xxxxxxx" (xxx dalšího xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx ve xxxx" xxxx "ředění xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx mít xxx xxxxxx analytické xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx přístrojů x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xx zvláštní xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" se xxxxxx xxxx x přesností xxxxxx na 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, výsledek uvedený xx zprávě x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx není xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx splněno, xxxx xx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud xxxx xxxxxxxxx jinak, výsledek xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnost
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx postup jsou xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Opakovatelnost (x) je xxxxxxx, xxx kterou xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx výsledky testu, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx výrobkem xx xxxxxxxx podmínek (xxxxxx xxxxxxxxx, stejný přístroj, xxxxxx laboratoř, krátké xxxxxx období).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem x týmž testovacím xxxxxxxxxx za odlišných xxxxxxxx (různí xxxxxxxxxx, xxxxx přístroje, xxxxx xxxxxxxxxx a/nebo xxxxx xxxx).
5.1.3 Pokud není xxxxxxxxx jinak, hodnoty xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx postupu, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. V xxx xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Kruhové xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx by měly xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v souladu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxx x testování xxxx xxxxxxxx xxxxxxx postup x xxxxxxx výsledky. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx podrobnosti xxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a všechny xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx vzorků, xxxxxxxx x skladování vzorků xx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx dodané xxxxxxxxxx a xxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx skladovacích a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 a 6 xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx vzorků xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, kteří xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vyškoleni.
Pokud to xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené odběrem xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx x celou xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx vzorků, xxx xxxxxxxxxxxx vzorků xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků
3.1 Obecné xxxxx
Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx vhodného, xxxxxxxxxx odolného xxxxxxxxx, xxx xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, odběr xxxxxx, xxx.). Plunžry x xxxxxxxx xxx míchání xxxxxxx x nádobách xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx povrchu, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx promíchání xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Naběračky xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx rukojetí x nabírání xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx naběračky xxxx být xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx musí xxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx na xxxxxx xxxx xxx čistý, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Vybavení xxx xxxxx vzorků xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx) musí xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx jdoucí xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx vybavení, xxxx xxx po každém xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x sterilizováno v xxxxxxx x xxxxxx xxxx požadavky, které xxxxxxx testovací xxxxxxxxx xxxx příslušný xxxxx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx jdoucích xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx odebrán ihned xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx ještě x pohybu.
Pokud xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx vzorků xxxxx pro xxxxx xxxxx, xxxx první xxxx xxx odebrán xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx obsah xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Ruční xxxxx xxxxxx
4.2.1 Odběr xxxxxx x xxxxx x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx promíchání xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxxxx xxxx na xx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxx xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx reprezentativní xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx bodu 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x chlazených xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx mechanicky xxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx homogenity.
Pokud xxxxx mléka xxxxxxxxxx xxxxxxx mechanické xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x misky xxx
Xx xxxxxxxx, aby xxxxx bylo xxxxx xxxxxxxxxx, když se xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rozdělení xxxx xxxx xxx xxxxxxxx další xxxxx xxxx mechanické xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx se xx xxxxxxx vzorek, xxxxxxxx kapacitu misky xxx, xxxxxxx reprezentativní xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx množství xxxxx, u xxxxx xx má xxxxxxx xxxxx vzorků, xxxxxxxxx xx více nádob, x xxxxx xxxxxx xx odebere reprezentativní xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx nádoby xxxxxx xxx odděleně xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx jednotlivé xxxxx xxxxxx reprezentativních xxxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, ze xxxxx xxx každý xx xxxxxx odebrán. Po xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) z těchto xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx vzorků xx xxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx.
X promíchání xxxxxx xxxxxxx xxxxx, skladovacích xxxxxx, xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx mechanické xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx xxxxxx bylo xxxxx v xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx promíchání xxxxxxx x xxxxxx x jednotlivých xxxxxxx xx vhodný xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx testování. Xxxxxxxx promíchání xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx provedených xx xxxxxxxx odebraných xxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx mléka z xxxxx. Xxxxxx promíchání xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, pokud xx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Ve xxxxx nádobě s xxxxxxxxxxx otvorem ve xxxxxx části může x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, které ani xx promíchání xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celý xxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání obsahu xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových xxxxxxx x cisternových xxxxxx je xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- vrtulí xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x mléce,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mléka v xxxxxx přepravní xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xx pumpu x xxxxxxxx xx průlezového xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x čistým xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx a xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx vniku xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx odběr vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx jiným xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx a xxxxx xxxxxxxxx podrobeno xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx orgán. Xxxxxxxx xxxxxxx odběru xxxxxx musí být xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, z xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx,
- poměr xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x minimálním xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, ze kterého xxxx být xxxxxxxx xxxxxx,
- minimální objem xxxxxx,
- xxxxxxxxx přenos,
- xxxxxxxxx, které může xxx provedeno, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx nutné xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxx spotřebě x xxxxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx ošetřené xxxxx xxxxxx k xxxxx xxxxxx spotřebě x xxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx, vzorky xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, zapečetěných xxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, a xx, pokud je xx xxxxx, ihned xx zpracování (v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx odpovídal xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, x xx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx podle xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Identifikace xxxxxx
Xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx identifikaci podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokyny xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodrženy x době xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví toto:
- xxxxx přepravy a xxxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxx nebyly xxxxxxxxx nežádoucímu xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx použitá xxx xxxxxx průsvitná, musí xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX xx 6 oC, není-li xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 hodin,
- xxxxxx pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Doba mezi xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 hodin,
- xxxx vzorky xxxxx xxx vzorky xxxxxxxx xxxxx x pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxx xxx skladovány x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xx nejkratší.
Speciální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x popisu xxxxxxx použitelných postupů.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X
XX. Stanovení xxxxxx koliformních xxxxxxxx – počítání xxxxxxx xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů
IX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, odstředěného, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx elektrickým xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx typ xxxxxxxxx xxxxxxxxx bod xxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxx xx x xxxxxxxxxx důvodů xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x tomu, že xx xxxxx xxxxx xxxxx křivky xxxx xxxxxxx různých druhů xxxxx, xxx i xxxxxx bodu xxxxxxx xxxxx x standardních xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx rutinního xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxx využít xxx odhad xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x mléce za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx není xxxxx xxx 0,18 g xxxxxxxx xxxxxx na 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx mléka: hodnota xxxxxxxx v souladu x xxxxxxxx xxxxxxxx x vyjádřená xx xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vhodnou xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, která způsobí, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx až k xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx vzorku.
Přístroj xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx mléka xxxxxxx xxxxxx odečty xxx dva standardní xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx skládá x xxxxxxxxxxx xxxxxx chladicí xxxxx, termistorového snímače (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx vzorky x xxxxxxxx na vyvolání xxxxxxx, jakož x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Chladicí xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxx kapalinu, xxxxx xx xxxxx xxx, xxx teplotní rozdíl xxxx xxxxxxxxxx dvěma xxxx v kapalině xxxxx xxxxx než 0,2 °C. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx kapaliny. Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx kapalinou.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx typ
Kolem zkumavky xx xxxxxx proudí xxxxxxxxxxx proud xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx nominální xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (ethylenglykolu).
4.1.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx skleněné xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx a o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 mm. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí xxx nižší xxx 2 sekundy x xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x konstanta xxxxxxxx musí být xxxxxx, aby xxx − 0,512 °X xxxxxxx termistoru xxxxxxx xxx teplotu xxxxx xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx může být ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx musí xxxxxxxx v xxx xxxxxxxx xx xxxxxx x v xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 xx xxx horním okrajem xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx sondy xx xxxx polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxxx podle xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / T2
kde:
T xx xxxxxxx xx stupních Xxxxxxx
X xx odpor x xxxxxx xxx xxxxxxx X,
− xX / xX × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, která xxxxxx xx materiálu xxxxxxxx xxx xxxxxx termistoru. X xxxxx xxxxx xx doporučuje xxxxxxx xxxxx než 3000.
4.1.3 Xxxxxx x odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx měření
Použitý xxxxxxxx pracuje xx xxxxxxxx vyhledávání xxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxx mrznutí. Xxxxx xx část xxxxxx, xxx xxxxxxx zůstane xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx vyrovnává Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxx 2×10−5°C.
Proměnný (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx hodnoty.
Pro xxxxx kalibrace xxxx xxx xxxxx odpory xxxxxxx.
Xxxxxx stupnice xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx rozlišení xx nejméně 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být taková, xxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx následujících xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx přístroje nevznikla x xxxxxx xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx chyba xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx testovacího xxxxxx xx použije xxxxxx drát x xxxxxxx 1 až 1,5 mm, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx úrovni hrotu xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxx 1,5 xx xxx xx pod touto xxxxxxx.
Xxxxxxxx vibruje bočně x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výrobce (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které po xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. X tomu xxxxx xxx použít xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx dvě xxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx vzorky.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx a 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx xxxxxx je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx skla xxxxxxxx xx nesmí xxxxx x xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx značku xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 mm xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx vně xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx kolísání nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, když xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Analytické xxxx
4.3 Xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 xx, xxxxx X.
4.4 Sušárna, xxxxx odvětraná, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx pec, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Exsikátor
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, převařená x zchlazená na 20 ± 2 °X, xx zkumavce xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., xxxxx xxxxx, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x xxxxxxxxxx xxxx xxxx nejméně 24 xxxxx xxx xxxxxxx 130 ± 1 °X x sušárně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) suchého xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx vodě (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx odměrné xxxxx x objemu 1000 xx x doplnit xx značku xxxxx x teplotě 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dva xxxxxx při xxx 5 °X x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 20 °X
x XxXx/x |
°X |
6,859 |
-0,408 |
7,818 |
-0,464 |
8,149 |
-0,483 |
8,314 |
-0,492 |
8,480 |
-0,502 |
8,646 |
-0,512 |
8,811 |
-0,521 |
8,977 |
-0,531 |
9,143 |
-0,541 |
10,155 |
-0,600 |
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxx promíchá protřepáním x xxxxxxxxxxx otočením xxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx roztok xxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xx x láhve xxxxxx xx xxxxx x xxxxx kádinky. Xxxxx nepoužívat xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z lahví, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dvou měsíců, xxxxx neobsahují xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx se okolní xxxxxxx nelišila o xxxx xxx 1 °X xx teploty, xxx xxx se xxxxxxx kalibrace. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx světlu, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx než 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, že xxxxxxxx funguje podle xxxxxx xxxxxxx a xx xxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx tabulka výše), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx těsně xxx xxxx těsně xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx vzorků mléka x testování. Xxxxxx xxxx body mrznutí xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx – 0,100 °X.
(X některých xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx příslušný obvod xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xx dané xxxxxxx xxxx mrznutí x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xx xxxxx xxx xxxxxxx, jako jednoho x kalibračních roztoků xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na vzorky xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxx (stejný druh xxxx, xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vodou). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx provádět xxxxxxxx xxxxxxxxx, dokud xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx provádět takovým xxxxxxxx, dokud xx xxxx xxxxxxxxxxx odečty xxx každý xxxxxx xxxxxxxxxx správné xxxxxxx xxxx xxxxxxx každého x xxxx, aniž xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx bod xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx by xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx 0 °X x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxxxx xxxxxxxxx cizí xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxx xx vzorku xx xxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx promíchat. Xxxxx se použije xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx může být xxxxxxxxx xxx skladovací xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx xx xxxxx xx ohřát na xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testování. Xx xxxx nezbytné xxxx xx xx, xxx standardní roztoky x xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx teplotu.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxxxx možno xxxxxxxx xx stanovením xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx přesahuje 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx být xxxxxxxxxxx.
7.5 UHT xxxxx x sterilizované xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 minut před xxxxxxxxxx x otevřené xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda xxxxxxx x xxxxxxx chladicí xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx x pokyny xxxxxxx, xxxxxxxx zda xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx, zda xx xxxxxxxx kapalina xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx alespoň 12 xxxxx, zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxx kapaliny, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx každou xxxxx xxxxx xxxxx bod xxxxxxx standardního roztoku xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx x bodem xxxxxxx – 0,512 °X), dokud xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx po xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x více xxx 0,001 °X. Xxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku o xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx popsáno x xxxx 6.
Pokud se xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za hodinu, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Stanovení xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx opatrným xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otáčením. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx standardní xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do suché x xxxxx zkumavky xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x suché, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle pokynů xxxxxxx. Mléko se xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx při xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x přesností xx 0,1 °X.
(X některých xxxxxxxxxxxxx přístrojů xx xxxxx xxxxxxx tuto xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx se zajistí, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx mrznutí začne xxxxx nebo xxxxxxx, xxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmezí, xxxxxxxxx se ukončí x xxxxxxxx xx x jiným xxxxxxx xxxxx. Pokud xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na 45 °X x 5 xxxxx xx xxxxxxx xx této teplotě, xxx xx rozpustil xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx testovací xxxxxxx x ihned xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx na xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxx konstantní, x xxxx xxxxxx. Xxx mrznutí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dosažené xxxxx xxxx xxxx x tuto hodnotu xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx, a xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx a xxx vodu x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx měření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, vyjmout zkumavku, xxxxxxxxxx ji vodou x xxxxx xxxxx x míchačku xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), provést xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx stanovení xxxxxx xx 0,004 °X, zapíší xx x xxxxxxx xx xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx vzorky a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx zůstala x xxxxxx.
(X některých xxxx kryoskopu xx xxxx xxxxx; x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx ujistit, xxx xx xxxxx xxxx začátkem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, například xxxxxxxxxx xxxxxxxx slepých xxxxxxxxx, dokud se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xxxxxxxxx xxxxxxxxx, za xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx xxx xxx mrznutí, xxxxxxxxxxxx xx tři xxxxxxxxx místa.
Pokud součet xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx zaokrouhlit xx xxxxxxxxx sudou xxxxxxx, xxx ukazuje tento xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stanovení |
Průměr |
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Reprodukovatelnost (R): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Schéma xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
4.1 (poloha xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx v pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Aktivita xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx alkalické fosfatázy xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx podmínek.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojsodného. Xxxxxxxx fenol xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (namodralé xxxxx), xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 xx. Poté xx provádí xxxxxxxxx xx vzorkem, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Xxxxxxxxx xx vodě 50,0 x hydroxidu xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit ve xxxx 22,0 g xxxxxxxx xxxxxx (H3BO3) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 ml každého xxxxxxx xx 50 °X, oba xxxxxxx xxxxxxx, promíchat, xxxxxx xxxxxxxx xxx xx 20 °X, x xxxxxxx nutnosti upravit xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Přefiltrovat. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx stejným xxxxxxx xxxx.
4.2 Tlumivý roztok xxx xxxxxxxx zabarvení
Rozpustit xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx sodného (XxXX2) xxxx 12,6 x NaBO2.4H2O x 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx na 100 xx.
4.4 Roztok xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx roztoku (4.1.3) xxxx 0,5 x fenylfosfátu xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx dvě xxxxx xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx xxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx stát, xxxxx xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx v chladničce xxxxxxx xxx; před xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x provést novou xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx bezprostředně před xxxxxxxx, x xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx ve 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx a hydroxidu xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 g xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx měďnatého (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.6 Roztok 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx změní barvu xxxx je xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx měďnatého (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx na 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx bezvodého fenolu x xxxxxx xx xxxxxxx baňky o xxxxxx 100 xx, xxxxxx vodu, xxxxxxxxx x xxxxxxx na 100 ml. Xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, doplnit xx 100 xx x promíchat. 1 xx xxxxxxxx 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx pomůcky xx skla, xxxxx x xxxxx a xxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx musí být xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx oplachování čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx čistění parou.
b) Xxxxxxx typy xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx způsobit xxxxxxxxxxx fenolů a xxxxxx používání je xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx lázeň nastavitelná xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xx vlnové délce 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 ml a 10 ml.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxxxx, xxxx. o xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx filtry o xxxxxxx nejméně 9 xx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx slunečního xxxxxx.
x) Xxxxx slin xxxx potu mohou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xx xxx xxxxxxx. Je proto xxxxx xxxxxxx zvláštní xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
6.1.1 Testování xxxxxxx xxxxx po xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx skladovat xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xx déle xxx xxx xxx.
6.2 Xxxxxxxxx vzorek
Pomocí xxxxxx xxxxxx 1 ml xxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx pokus.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx vzorek xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx folií, xxx se prohřála xxxx zkumavka. Xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 minut xx vodní xxxxx (5.2) a xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) promíchat xxxxxx obsah.
6.3.4 Xxxxxx xxxx v xxxx 6.3.1 xxxxxxxx dvě xxxxxx xx vroucí xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 ml xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx suchý xxxxxxxxx papír, xxxxx xxxxx dva mililitry x v případě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx není filtrát xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Přidat 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), promíchat x 30 xxxxx nechat xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx absorbance xxxxxxxx v xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx absorbanci xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx 20 μg xxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx vhodném xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx objemu xxxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx do xxxx, xxx se inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx základě xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx vyhovující xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xx každé x pěti xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 ml vody x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Do xxxxx xxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet xxxxxxxxx 30 minut xxx xxxxxxxx teplotě.
6.4.4 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx slepým xxxxxxx xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx přidaného xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nejmenších xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx hodnot xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx přímky (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v μx xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × D
kde
A xx xxxxxxxx xxxxxx x μg xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 z 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 xx spojitosti x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (předběžně) μg xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx podle 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 xx týkají xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx peroxidázy x xxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx pasterace.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zabarvení.
Negativní xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza xxxxxxxx xxxxxxx vodíku. Xxxxxxxx xxxxxxxx kyslík xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx indofenol (Štorchův xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Činidla
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx vodě (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) a xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxx, x tmavě hnědé xxxxx xx skleněnou xxxxxx. Během jednoho xx xxxx xxx xx xxxxxxxxxx roztok 1,4 fenylendiaminu xxxxxxx xxxxxxxxx, kterou xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx 9 xx 30 % peroxidu vodíku x xxxxxxx xx 100 xx. Pro xxxxxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxx na litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx vodíku xx xxxxx asi xxxxx měsíc, xxxxx xx skladován x xxxxxx a xxxxx, x láhvi xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x organickými látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx vzorku mléka xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx modré xxxxxxxx xxxxxx více xxx 30 xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx popisuje referenční xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X. Xxxxxx xx použije pro xxxxxx mléko, xxxxxxxxxxx xxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx médiem x Petriho xxxxxxx x xxxxxx inkubovat 72 xxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx xx 0,1 xx preinkubovaného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx ze skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx teplotu 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Mechanické xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu zkumavky.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Baňky x xxxxxx 150 xx 250 ml xxxx zkumavky x xxxxxx 20 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo xx sterilního syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o nominálním xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx postupů:
a) x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °C;
b) v xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx na xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x nádobách, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry nebo xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
Trypton |
5,0 x |
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 g |
Sušené odstředěné xxxxx |
1,0 x |
Xxxx |
10–15 x xxxxx želírovacích vlastností xxxxx |
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxx srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx kvasnicový xxxxxxx, xxxxxxx, glukózu x nakonec xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx přidat xxxx x za stálého xxxxxxx uvést xx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx nerozpustí, xxxx xxxxxxxx v xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx přes xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 při 25 °X.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx zkumavek (4.2.2). Xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx výrobce, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud není xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx pH xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X metodou xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx kultivační médium xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx pepton/sůl
Složení:
Pepton |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
8,5 x |
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pH-metrem (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxxx zkumavka obsahovala 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxx.
Xxxxx xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx připravovat z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX metodou xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx rychle rozpustit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku mléka
Vzorek xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx otočeními nádoby xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx přijít xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx primárního ředění (7.3) xx 9 xx ředidla (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx ředění 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx dlouho, dokud xxxxx očekávat xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
7.5.1 Xxxxxx mléko: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx mléko: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 denní xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 ml xxxxxx mléka (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx naočkované xxxxx xxxxx asi 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mléka a xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, testovacího xxxxxx xxxx ředění x xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a čistém xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx obrácené dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x kontaktu xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx zvětšením (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx v nepostižené xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx misku. Xxxxx kolonie tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu plochy xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx misek xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml syrového xxxx pasterovaného xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) d
kde:
∑C ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je objem xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx prvním ředěním
n2 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx kterého xxxx získány xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Příklad (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "nižší xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx jsou všechny xxxxx xxxxx xxx 300 a počítání xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx xx".
8.2 XXX xxxxx x sterilizované xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx na 0,1 xx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx ještě xxxxxx x dispozici.
V. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx dní xxxxxxxxxxxxx při 6 xX s xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, které xx xxx xxxxxx se x mléce při 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx médiem x Xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx kolonie x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °C xx xxxxx xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx rozmíchat 1 xx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx roztoku a xxxxxxxxx xx principu xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky ze xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx uzávěry a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx prostorem x xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o xxxxxx 150 xx 250 xx nebo xxxxxxxx x objemu 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx vatou), skleněné xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho misky x xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx nutné xxxx xx xx, aby xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x nádobách, tyto xxxxxx by xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx nebo víčka xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx se měly xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x horkovzdušné sušárně (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – agar se xxxxxxx xxxxxx
5.1 Složení:
Kvasnicový xxxxxxx |
2,5 x |
Xxxxxxx |
5,0 x |
X-xxxxxxx(+) xxxx dextróza |
1,0 x |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
Xxxx |
10-15 x podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Toto xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx mlékem, xxxxx xxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx a xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx míchání, xxxxx xx xxxx zcela xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 minut.
Pokud xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx od 100 xx 150 xx xx baněk xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx při teplotě xxxx 1 a 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx odstředěné mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X xxxxxxxx xxxxx bodu 5.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
Xxxxxx |
1,0 g |
Chlorid sodný (XxXx) |
8,5 x |
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx nezbytné xxxxxxx pH xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °C.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx ředidlo (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX ředidla.
Pokud xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx. Xxxxxxx pH xxxxxxxx xxxxx bodu 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bodu 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nechat xxxxxx xxxxxxxxx potřebné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxxx nejméně 100 xx xx xxxx 120 ± 2 hodin při 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx inkubaci xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx se vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx pěny xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem testovacího xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx přijít xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx být přibližně xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx tak xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tento xxxxxx xxxxxxx tak xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé ředění (8.1.1) připravit jednu xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 ml kultivačního xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x smícháním, xxxxx xxxxx mléka, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat stát xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém povrchu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx tlumeném světle. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin v xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx odlišit xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx x nepostižené xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX je celkový xxxxx kolonií podle xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x je xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 je xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, na základě xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × d", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx nejnižšího xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx odhad x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Předmět a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx koliformních xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx technikou počítání xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx bakteriemi" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx při 30 °X xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx nebo necharakteristické xxxxxxx, xxx xxxx xx popsaných xxxxxxxx xxxxxxx zkvašovat s xxxxxxx xxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx nechat inkubovat xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx necharakteristických kolonií xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx koliformních xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací xxxxx xx xxxxxxx platina-iridium xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx uzávěry x objemem 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o xxxxxx 150 xx 250 ml xxx xxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického materiálu, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, s výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx žádné nerovnosti, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170 – 175 °C;
b) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx autoklávu xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx víčka by xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx sterilizované x autoklávech xx xx měly vysušit xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx sterilizovány x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx (XXXX xxxx). Sušené selektivní xxxxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx |
7 x |
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 g |
Žlučové xxxx |
1,5 x |
Xxxxxxxxx červeň |
0,03 x |
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 g |
Agar |
10 xx 15 g xxxxx želírovacích vlastností xxxxx |
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx a nechat xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx důkladně xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xX roztokem (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx rychle xx xxxx xx občasného xxxxxxxxxxxx x ihned xxxxxx xx množstvích 100 xx 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X době xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx médium do xxx hodin xx xxxx přípravě.
5.2 Xxxxxx xxxx s brilantovou xxxxxx. Konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx |
10 x |
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx žluč |
20 x |
Xxxxxxxxxxx zeleň |
0,0133 x |
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x uvést xx varu.
Zkontrolovat pH xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °C.
Rozdělit xxxxxx po 10 xx do xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržte xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx bodů 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka řádně xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx se vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx by neměla xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx do xxxxx xx tří xxxxx (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 ml xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx xx nalití xxxxx promíchat rotací Xxxxxxx misky, xxx xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x smícháním x xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx kontroly sterility xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x 12 xx xxxxx VRBL agaru, xxxxx byl použit xxx naočkování xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx VRBL xxxxx (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do inkubátoru (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na sebe xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani být x xxxxxxxx se xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx více než 150 kolonií. Počítat xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 mm, x xxxx bez xxxxxxxxx xxxxx, charakteristické pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx všechny nebo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. jinou xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx k charakteristickým xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících maximálně 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx provede xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx procentuálního xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx koliformních xxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX je celkový xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx vyšetřením xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx se xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx než 100 xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx byla sudá.
Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést výsledek xxxx "odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXX BUNĚK
Tato xxxxxxxx popisuje dva xxxxxxxxxx postupy xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx buněk xx xxxxxx mléka za xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx somatickými buňkami xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxx xx xxxxx zřetelně xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 ml xxxxx na 1 xx2 povrchu xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx vysuší x xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx pod xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx chemikálie čistoty x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
1,1,1-trichlorethan nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
Ledová xxxxxxxx xxxxxx |
6 ml |
Upozornění
Tetrachlorethan je xxxxxxxx. Xxxxxxxx a xxxxxxxxx se xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xx vodní xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx promíchat, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °C x přidat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 10 xx 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx použitím xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující xxxxxxxxx xx 0,01 ml x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx × 5 mm xxxxxxxxxx xxx tenkou xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 × 5 xx pro xxxxxx vrstvu.
5.4 Horizontální xxxxx xxxxx (30 °X až 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx sklíček.
5.5 Ventilátor (xxx) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx teplota xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx zmražen.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx x laboratoři
Zahřát xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.6) na 30 až 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx které xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx prach, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx před xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx vrstvy
Mikrostříkačkou (5.2) odebrat 0,01 xx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx vnější xxxxxx stříkačky, xxxxx xxxxxx xx styku x mlékem. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx podložní xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx obkreslit obvod xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx vysušení.
U xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx tenkých xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx xx barvícího xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx je xx xxxxxxxx, vysoušení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx tenké xxxxxx xx tekoucí xxxx, xxxxx xx přebytečné xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx zvoleného xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx průměr mikroskopického xxxx (5.7).
7. Počítání x výpočet
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx mikroskop (5.1). Xxxxx počítání xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, a xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x z xxxxx xx v xxxxxxxxxxxxxx poli xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx nebo xxxx xx xxxxxxx třetině xxxxx vrstvy x xxxxxxxxx ty pásy xxxx pole, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vrstev x tudíž x xxxxxxxxxxxx výsledků musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Počítání xxx xxxx provádět xxxxxxxxxx mikroskopických xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxx xxxxxxx části xxxxx vrstvy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pod mikroskopem xxxx xxx rovněž xxxxxxx xxx standardizaci xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx počítání, xxxxxxxx xxxxxxxxxx počítání x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx vzorek mléka x obsahem 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx je xxxxx v xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx rozdělení nejméně 400, xxx bylo xxxxxxx kritérium xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx střední xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x je xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx koeficient xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx spočítány (například 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 xx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 nebo 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx 5 xx. Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole, xxx xx stanoven xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx faktor = 20 × 100 / d × x
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, stanovený xxxxxxxxx sklíčkem x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx střední xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx pomocí xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, stanovený podložním xxxxxxxx s mikrometrickou xxxxxxxx (5.7)
s xxxxxxx xxxxx spočítaných polí.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx získat počet xxxxx xx ml xxxxx, se počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk (7.1 a 7.2) xxxxxxxx pracovním xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup, který xx xxxx po xxxxxxxxxxxx kalibraci (viz X.1) používat pro xxxxxxxxx xxxxx somatických xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx mají x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Princip
Část xxxxxx (například 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx směsi xx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x zaznamenává. Obsah xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx roztok
Složení
Hydrogenftalat draselný |
51,00 x |
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
pH 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx jednotlivé xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx nemělo překročit xxxx xxx.
4.2 Fluorescenční xxxxxx (zásobní xxxxxx)
Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx vodou xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x tlumivým roztokem (4.1) tak, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx sedm dní.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 xx |
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx xxxxx xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx složky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx překročit xxxxxx dní.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx zařízení xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx použitím xxxxxxxxxxx. Xxx se xxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxx xxxxxx, které xx xxxx xxxxxxx, x prahovou hodnotou, xxx níž xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se provede xxxxx xxxxxx výrobce xx xxxxxxx vzorků, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx stanoven xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, s xxxxxxxxx xxxx, nastavitelná xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 ml.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx nízké xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xx uplynutí 24 hodin po xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx nízký. Skladovací xxxxxxx nesmí překročit 6 °C.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Konzervace musí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx odběru xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx konzervace xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx konzervačních xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 0,6 x na 100 xx. Xxxxx konzervovaný xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx dalších 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- dvojchroman xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného xx vzorku nesmí xxx vyšší než 0,2 g xx 100 ml. Takto xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,024 g/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx odběru a xxxxxxxx xx 48 xxxxx po xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx bronopolem x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 ml, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx teplotu 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx do 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Vzorek, který xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx konzervován xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x vzorky xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sodným, xxxx být dodrženy xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx odpadních vod.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx, se xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 hodin xxx asi 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedoporučuje, xxxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxxxx nízké. Xxxxx xx přesto xxxxx xxxxxxxx provést, xxxxxx xx měl být xxxxxxxxx ošetřován xxxxxxx xxx xxxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený xxxxxx (xxx 7.1) nebo xxxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxx xxx starý xxxxxx ve vodní xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx pokojové teplotě xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx xxxxxx počítacího xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut po xxxxxxxx xxxxxxxx (viz 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx vzorky důkladně xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx co xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vzorku jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
Xxxxx, které jsou x dispozici xx xxxxxxx úrovni, umožňují xxxx odhady:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 xx 500 000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx provádí xxxxxx xxxxxx o xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx referenční xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX ANTIBIOTIK X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX POUŽITÍ
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x tepelně xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx postup
Tento xxxxxx xx počáteční xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky mléka, xxxxx obsahují antibiotika x xxxxxxxxxxx. Popisovaný xxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx založeny xx použití Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx organismu. Xxxxx postup byl xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx takovéto xxxxx.
X. Xxxxxx xxx konfirmaci x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx kvalitativního xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx penicilinu x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx detekci antibiotik x sulfonamidů v xxxxxxx mléce x x tepelně xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx než xxxxxx xxxxxxx x xxxx tabulce:
Detektovatelné xxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx [1]
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 x |
|
Xxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
Xxxx |
10–15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Xx občasného xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxxx pH xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx xxxx xx 100 xx do lahviček x xxxxxxxx s xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °C.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
Xxxx |
15 x |
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (viz 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxx xX, aby po xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx |
5 mg |
nebo Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 xx |
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx roztok
Složení:
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 mg |
Glukóza |
5,0 xx |
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 mg |
Bromkresolová xxxxxx |
0,025 x |
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx živný roztok x xxxxxxxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx dostupný v xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Ve xxxxxxxx xxxxx x vhodným xxxxxxxx připravit roztok xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 IU/ml), x xx rozpuštěním xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu sodného xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vodě.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx a doplnit xx do 1000 xx. Tento xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 IU/ml).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx penicilinu/ml (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx inhibičních xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx v xxx xxxxxxxxx testu.
5.3 Mléko xxx inhibičních xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx inhibičních látek xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx (10 % x/X) ve xxxx, xxxxx bylo předtím xxxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx látek. Rovněž xxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxx čerstvého xxxxx, xxxxx bylo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx xxxxx se xxxxxxx xx lahví x zahřívá se xxxxx xxxxxx xx 100 °X, xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °X xx 6 °X xx xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 je xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx testovací xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx šikmém xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x proužcích xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Po inkubaci xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx zásobní xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) x nechat xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx destilované xxxx xx zkumavky xx zásobní xxxxxxxx (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx při 0 xx 5 °X x xxxxxxx se xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Petriho xxxxx (5.5.1) x důkladně xxxxxxxxx očkovací látku xx xxxxx povrchu xxxxxx zahnuté xxxxxxxx xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °C (4.1.1).
Při xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) nebo xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx dvakrát x xxxxxxx intervalu xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx vody xx Xxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxx x povrchu.
Přenést xxxxxxxx spór xx xxxxx (4.2.3) obsahující 250 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxx a důkladně xxxxxxxxx. Kultury, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx xx 18ti xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X na xxxxxxxx xxxxx by xxxxxxxx xxxx xxxx vykazovat xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx vykazovat rovnoměrné xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx sraženiny nebo xxxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxxxx novou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxxxx kultury (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx část suspenze xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x pěti částem xxxxxxxxx média (5.6.1) xx xxxxxxxx nebo x xxxxxxxx. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx uzavřít xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxx, zatavením xxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, poté xxxxxx zkumavky/ampule 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxx, ale xxxxx xxx xxxxxx skladovány xxxxxxx měsíců xxx 0–6 °X, xxxxx xxxx ihned xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx se xx nejdříve otestují, xxxxxxx do 24 xxxxx xx xxxxxx, x xx xx xxxx se skladují xxx xxxxxxx 0-5 °X. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xx 24 xxxxx, xxxx by xx xxxxxxx hluboko xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), aby se xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx penicilinu.
6.2 Čitelně x nesmazatelně xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Umístit xx xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx požadovaný pro xxxxxx x xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx roztoku (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx vzorku xx xxxxxxxx zkumavky/ampule. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Postup xxxxx bodu 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Postupem xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx stejným xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bez xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx vzorku mléka.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx x teplotou 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x vodní xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx barvu xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx ukazuje na xxxxxxxxxx antibiotik nebo xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x koncentraci xxxx xxxxxxxxx koncentraci "xxxxx xxxxxxxxx" uvedené x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (6.5) xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx zbarvení xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx uvedenými xx straně 39.
7.3 Xxxxx zabarvení agarového xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx vzorek xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx zabarvení xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx zkumavkách/ampulích, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx životaschopné spóry x vzorky musí xxx podrobeny novému xxxxxxxxx x čerstvě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx materiálem.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 podle metody "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx.
X. Postup xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx koncentrace
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx (X.7.1) nebo xxxxxxxxxx reakcí (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx, xxxxx popsaným xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx disku.
2.2 Xxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx antibiotika, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), x xx kterému byla xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx čirou xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx bez xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx penicilin xxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx tato xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) xxxxxxxxxxxx, inhibiční xxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xx xxx jiné xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, kapitola XX, A.1.f) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, xxxxxx nebo xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx x nemohou xxx identifikovány xxxx xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx disk xxxxxxxxx mlékem, xxxxx xx xx vyšetřit, xx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx média xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx agarové xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxx, xx jsou v xxxxx přítomny xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx čiré xxxx xxxx jiné xxxxxx na koncentraci x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v mléce.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz X.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx skla
Viz A.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, neobsahující xxxxxxxxx látky, o xxxxxxx 9 xx 13 xx, schopné xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, standardní xxxxxxx, roztok xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx růst xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx agar (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx médium xxx xxxxxxx inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
Xxxxxxx |
5 x |
Xxxxxxx |
1 x |
Xxxxxx trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx (A.5.1.3) |
10 xx |
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností agaru |
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání x xxxxxxx zcela rozpustit xxxxx složky xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx trimethoprimu nebo xxxxxxxxxxxx. Po xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx xx sterilizaci xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléku
Viz X.5.2.
Xxx kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx standardní roztoky xxxxxxxxxx x xxxxx xxx inhibičních látek (X.5.3) x těchto xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 IU/ml)
c) 0,03 μg/ml (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Rozpustit xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx roztok, xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx dávky, je xxxxx xxxxxxxxx až xxxxx xxxxx při 0 °C až 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Pro xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx deset xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx stačí xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxx x neznámou xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx platí. X xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx běžně dostupné xxxxx xxxxxxxxx penicilinázou, xxxxx se kontrolním xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx odpovídající množství xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx spór)
Viz X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
5.6.1 Xxxxxx rozpustit xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx zchladit na 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) k xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 až 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx misku o xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx je xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Umístit Xxxxxxx misky xx xxxxxxx, xxxxxxxxx povrch, xxxxx vodorovnost xx xxxxx vodováhou, xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxx médium xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxxxx kondenzaci xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Takto xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx nejlépe ještě xxx den, xxx xxxxx být používány xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx se xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx zataveného xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx a uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx dna Xxxxxxx misek, aby xxxx možná identifikace xxxxxx.
6. Postup
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x pozitivním xxxx xxxxxxxxx výsledkem xxxxx "xxxxxx A" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx nové xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx na 80 ± 1 °X, xxx se vyloučil xxxx nespecifických xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Důkladně xxxxxxxxx, xxxx přenést xxx 10 xx xxxxxx zahřátého xxxxx xx sterilní xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx promíchat.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x suché xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx disku x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx povrch Xxxxxxx misky (5.6) x xxxxx přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx vzorky mléka xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 mm x xx xxxxxx xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx citlivosti xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx rozmístit xxxx xxxxx napuštěné vzorky xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx mléka; xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Po xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx identifikaci, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx zdroji xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx čiré inhibiční xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxx xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx kolem disku xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Čiré xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx mléka, xxxxxxx xxxxxxx je xxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, ukazují xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 se xxxxxxx dvojmo se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (6.1.2) x se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx mléka xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx ponořit xxxx xxxxxxxxx penicilinázou (5.3.2) x uložit xx xx testovací xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx provede xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxx x 5.2 x) xx d).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx inhibičních zón xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy x xxx standardní xxxxxxx penicilinu.
7. Interpretace xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx se kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nevytvoří žádná xxxx xxxx, xxx xxxx xxxx xx xxxxxx kolem disku xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxx zóna xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2x)), inhibiční xxxxx xx xxxxxx mléka xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx rovné xxxx vyšší než 0,004 μg/ml.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu rovná xxxxxxxx hodnotě xxxxxxx xxxx zóny kolem xxxxx se vzorkem xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx inaktivovat xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x tomto postupu.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní penicilinázu xxxxx xxx průměrná xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx disku xx vzorkem mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxx x antibiotika, xxxxxx sulfonamidů, a xxxxxxxxx nebo polosyntetický xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v tomto xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxx xxxxx, nemusejí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx být tudíž xxxxxxxxxxxxx jako inhibiční xxxxx xxxx než xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx penicilin xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xx sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx základě velikostí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce (5.2 x) až x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx křivky
Vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx lineární xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx lze xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx papír xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx na xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx počítají xx xxxxxxx xxxxxxx zdvojeného xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx základě průměru xxx vzorků xxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxx ze standardní xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx pětkrát větší xxx xxxxxxx disků.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx xxxxxxxxx jako xxxxx penicilinu xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx obsah xxxxxxxxxxx xxxxx jiných xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx standardu při xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx VII xxxx 2, tento postup xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx, xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v pasterovaném xxxxx.
2. Definice
Vyšetření xx xxxx provést x xxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z potravin.
Pasterace xx ošetření, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx splněny normy xxxxxxxxx v xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxx x počítání xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx patogeny xx xxxxxxxx pouze xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy a xxxxxxx xxxxxxxxx musí xxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxx způsobem, který xxxxxx vydávání xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nezávadnosti xxx tepelně xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx existují, xxxxxxx kritéria a xxxxxxx přijaté na xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Zpráva x výsledku
Pro každý xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx mléka xx mililitr, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x objemu xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Zpráva xxxx jasně xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.