Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx dne 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 85/397/XXX ze dne 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx na xx. 10 odst. 2 uvedené směrnice,
vzhledem x xxxx, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x testování, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx dodržování xxxxx pro syrové xxxxx a tepelně xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx stanovit zejména xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, obsahu xxxxx, xxxx xxxxxxx x přítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx pasterované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxxxx mléko x XXX mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx x technických xxxxxx je xxxxxx xxxxxxx stanovit referenční xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; že xx xxxxxxx nezbytné pokračovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx; xx x očekávání xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx členské xxxxx xx xx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx spolehlivosti xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX TOTO ROZHODNUTÍ:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx xxxxxx mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx peroxidázy,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx XXX xxxxx x sterilizované mléko xxxx xxxx:
- stanovení xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- detekce xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a testování xxxxxxx v článcích 1, 2 x 3 xxxx xxxxxxx x xxxxxxx II.
Xxxxxx 6
Xxxx rozhodnutí xxxx přezkoumáno do 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Článek 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
PŘÍLOHA I
OBSAH
I. Obecná xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná xxxxxxxxxx xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxxx výsledků, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a zpráv x xxxxxxxxx. Příslušné xxxxxx členských států x laboratoře xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, ředění xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx růst xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" nebo "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx ve xxxx" xxxx "ředění xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx používané xxxxxxxxxx xxxx mít xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
3.1 Seznam xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx seznam xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx váhy
"Analytickými xxxxxx" xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx na 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx zprávě x xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx průměrem xxxx xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx není xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxxx, jinak xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx vypočítá x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorku.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Kritéria xxxxxxxxxxxxx uvedená xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx kterou se xxxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxxxxx výsledky xxxxx, xxxxx xxxx získány xxxxxxx postupem s xxxxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx laboratoř, krátké xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) je xxxxxxx, xxx kterou xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx testovacím xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx (různí xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, uváděné x příslušných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % intervaly xxxxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx vypočteny x xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxx xx používají xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx některé xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx provedeny. X xxx případě xxxx xxxxxxx opakovatelnosti a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx odhadnuty.
5.1.4 Kruhové xxxxx x nezbytné xxxxxx xx xxxx xxx naplánovány a xxxxxxxxxxx x souladu x xxxxxxxxxxxxx pokyny.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x testování xxxx xxxxxxxx xxxxxxx postup x získané xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx x metodě xxxxx, nebo volitelné xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxx ovlivnit výsledky. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. ODBĚR XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, přeprava x xxxxxxxxxx xxxxxx xx použijí xxx xxxxxx mléko xxxxxx xxxxxxxxxx a pro xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, kteří xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vyškoleni.
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odběrem xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, xx odebrané xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x x souladu x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx příslušné xxxxxx xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx za xxxxxxxx, xxxxxxx zaměstnance pověřené xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxxxxxx vzorků xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Vybavení xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pro odběr xxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx musí xxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx předpokládané xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxx mít dostatečně xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx opatřeny xxxxxx, xxxxxxxxxx dlouhou xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x jakékoli xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx a xxxxx musí xxx xxxxxxxx, kovová xxxx x xxxxxxxx plastu.
Materiály xxxxxxx při výrobě xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx nádob x xxxxx) nesmí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxxxxxx výsledky xxxxx. Xxxxxxx materiál a xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx čistý, xxxxx, xxxxxx povrch xxx xxxxxx a xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx pro xxxxx vzorků xxx xxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Vybavení pro xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx bodu 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx pro xx sobě jdoucí xxxxxx vzorků použije xxxxx xxxxxxxx, musí xxx xx každém xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxx s xxxxxx xxxx požadavky, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx orgán, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx výsledků xx xxxx xxxxxxxx vzorků.
4. Xxxxxxxx odběru xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx testy, které xxxx xxx provedeny, xxxxx musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď ručně, xxxx mechanicky.
Vzorek xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx promíchání, když xx xxxxx ještě x xxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxx odebírá xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxx, jako xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx použitých nádob xxxx xxx xxxxxx, xxx byly tyto xxxxxx xxxxx naplněny xxxxxxx a při xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx obsah xxxx testováním, aniž xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx stloukání xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx vzorků
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxx na xxxxx
X xxxxxxxx promíchání xxxxxxxxx plunžrem xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx a xxxx, xxxxxxx dbát xx xx, aby xx xxxxx řádně xxxxxxxxxx x xxx xx xx hrdle xxxxx xxxxxxxxxxx smetana. Xxxxxx, xxxxx je reprezentativní xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx z chlazených xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx mechanicky nebo xxxxx dokud není xxxxxxxx xxxxxxxxxx homogenity.
Pokud xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx míchačky, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxx
Xx nezbytné, xxx xxxxx bylo xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx mechanické xxxxxxx. Xxxxx objem xxxxxxx, x níž xx xx odebrat vzorek, xxxxxxxx kapacitu xxxxx xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxx xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx množství xxxxx, x něhož xx xx provést xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, x xxxxx xxxxxx xx odebere xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxxxx množství mléka xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx z xxxxx nádoby nemusí xxx odděleně testovány, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx reprezentativních xxxxxxxx v xxxxxx x množství, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, xx xxxxx xxx každý xx xxxxxx odebrán. Po xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x těchto xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx z xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, skladovacích xxxxxx, cisternových xxxxxxx xxxx cisternových xxxxxx xx doporučuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx, xx kterou xxxx xxxxx x klidu. Xxxx být xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x jednotlivých xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx promíchání xxxxxx xxxxxxxxx shodu xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx odebraných xxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, nebo x xxxxxxxxxxxx intervalech xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, xxxxx xx rozdíl xxxxxx xxxx u xxxx xxxxxx odebraných xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx nádobě s xxxxxxxxxxx otvorem ve xxxxxx xxxxx xxxx x místě xxxxxxxxxx xxxxxx malé množství xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celý xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x průlezového xxxxxx. X xxxxxxx odběru xxxxxx x vypouštěcího xxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání obsahu xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx míchačkou xxxxxxxxxxx do xxxxxx x xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx cisternových xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx přepravní hadici, xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, stlačeným x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx minimální xxxx a xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx dodaného xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx podle pokynů xxxxxxxxxxx testovací laboratoří xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx vybavení xxxx xxx před x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx x cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxx, z xxxxx xxxx xxx xxxxxxx vzorek,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (který xxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprezentativní xxxxxx x xxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo poloautomatického xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- minimální xxxxx xxxxxx,
- maximální xxxxxx,
- xxxxxxxxx, které xxxx xxx provedeno, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx opatření, xxxxx xx nutné xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jde x xxxxxxx ošetřené xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx skládají z xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx místnosti xxxxxxxx xxx ošetření, x xx, xxxxx je xx xxxxx, xxxxx xx zpracování (v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx pasterace).
Z xxxxxxx xxxxx tepelně xxxxxxxxxx mléka (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx metodou XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, aby odpovídal xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, x xx podle xxxxxx poskytnutých testovací xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx xxxxxx příslušného xxxxxx.
5. Identifikace vzorku
Vzorek xx měl xxx xxxxxxx identifikačním xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří xxxx příslušného xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x skladování xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx se xxxxx x xxxxxxxx přepravy x skladování, které xxxx xxx xxxxxxxx x xxxx mezi xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, a xx xx xxxxxxx druhu xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx toto:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx je xxxxx xxxx na xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zápachu x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx je xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx skladován xx xxx,
- xxxxxx syrového xxxxx určené pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx při xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx musí být xx xxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx orgán xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX xx 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx odběrem x testováním delší xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Xxxx mezi xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx 24 hodin,
- xxxx vzorky xxxxx xxx vzorky syrového xxxxx x pasterovaného xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx skladovány v xxxxxxxxx zařízení laboratoře x doba mezi xxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxx být xx nejkratší.
Speciální preventivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx, jsou xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx použitelných xxxxxxx.
PŘÍLOHA I
OBSAH
I. Xxxxxxxxx xxxx mrznutí
II. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X
XX. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů
IX. Detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX MRZNUTÍ
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx plnotučného, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, syrového, xxxxxxxxxxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx přístroje (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), v němž xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx dva typy xxxxxxxxx. Xxxxx typ xxxxxxxxx maximální bod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx mrznutí, xxxxxx xxxxx typ je x obchodních xxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ve stanovenou xxxx xxxxxx. Vzhledem x xxxx, xx xx mohou xxxxx xxxxx křivky bodu xxxxxxx xxxxxxx druhů xxxxx, xxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x standardních xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx testování.
Bod xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx cizí vody x mléce xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx není vyšší xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx na 100 xx (viz xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x popsaným xxxxxxxx x xxxxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx v závislosti xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx vibrací xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, která způsobí, xx teplota rychle xxxxxxx xx k xxxxx, které xxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx přesné odečty xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx mrznutí xxxxx xx xxxxxxxx Celsia.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx skládá x xxxxxxxxxxx řízené chladicí xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx teploměru) x příslušným xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx zkumavek xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx použít xxx xxxx chladicí xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx izolovaná xxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx míchá xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx vyšší než 0,2 °C. Teplota xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Je xxxxxxxx, xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx konstantní xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx zkumavky xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx typ
Kolem xxxxxxxx xx vzorky proudí xxxxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) xxxxx xxxxxx 1,2-ethandiolu (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx skládá xx skleněné xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 mm. Xxxxxx xxxxxxxxx termistoru musí xxx nižší xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °X xxxxxxx termistoru xxxxxxx xxx teplotu xxxxx xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Xxxxxxxxx tolerance xxxxxx může být ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx v pracovní xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xx vzorky x v bodě, xxxxx je 44,6 ± 0,1 mm xxx horním xxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx třeba dodat xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx nastavení sondy xx této xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce
− xX / xX × 1 / X = β / T2
kde:
T xx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx odpor x ohmech xxx xxxxxxx T,
− xX / dT × 1 / R xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β je xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx použitém xxx xxxxxx termistoru. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx pracuje xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Plató xx část křivky, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx dobu xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Wheatstoneovým xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nejlepších xxxxxxxxxxxx odporů, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ± 10 % x jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (vyrovnávací) xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx zařízení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx obvodu xxxx xxx taková, xxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx následujících xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx přístroje nevznikla x žádném xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx použije xxxxxx drát x xxxxxxx 1 xx 1,5 mm, xxxxx xxxxxxxxx x mlékem,.
Míchačka xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x umístěna vertikálně xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx byl xx xxxxxx hrotu xxxxx xxxxxxxxxx. Přípustná xxxxxxxxx xx xxx 1,5 mm xxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx zajištěna xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx testovacího vzorku xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. K tomu xxxxx lze použít xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx rozkmitu xxxxxxx xx jednu xx dvě xxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx stěny xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx vzorky
Zkumavky xx vzorky (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx a 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 mm x xxxxxxx průměr je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x více xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx mít xxxxxx xxxxxx vzdálenou xx xxxxxxx okraje 29,8 xx (21 mm xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx zdroj xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 xx, xxxxx X.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx odvětraná, nastavitelná xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Exsikátor
5. Činidla
5.1 Xxxx destilovaná x xxxxxxxxxxxxxxx skle, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx na 20 ± 2 °X, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx sodný, čistoty x.x., jemně xxxxx, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx teplotě 130 ± 1 °X x sušárně x xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx (viz tabulka 1) xxxxxxx chloridu xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Rozpustit v xxxxxxxxxxx vodě (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx roztok xx xxxxxxx xxxxx x objemu 1000 xx x doplnit xx značku xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx nejdéle xxx xxxxxx při xxx 5 °X x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx standardní xxxxxx xxxxxxx promíchá xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx z láhve xxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxxxx byly ze xxx xxxxxxx prázdné, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx thiomersalu 10 g/l).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
Kryoskop xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx okolní xxxxxxx nelišila o xxxx než 1 °X xx teploty, xxx níž se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx světlu, xxxxxxx xxxx pokojovým xxxxxxxx xxxxxx než 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, že xxxxxxxx funguje podle xxxxxx výrobce x xx xxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Zkontrolovat xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx chladicích xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx roztoky (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx xxx mrznutí xx xxxxx nad xxxx těsně pod xxxxxxxxxx hodnotou xxxx xxxxxxx vzorků mléka x testování. Xxxxxx xxxx xxxx mrznutí xxxx xxxxxxx by xxxxxxx neměl xxx xxxxx xxx – 0,100 °X.
(X xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx dostupných xxxxxxxxx xx příslušný xxxxx xxxxxxxxxx sestaven tak, xx se ustálí xx xxxx xxxxxxx xxxx mrznutí x xxxxx rozsahu xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx jednoho x xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx pipety xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx měřit xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na vzorky xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, umyté x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vodou). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx postup x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x střídavě xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx následující xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx nastavení. Kryoskop xx xxxx připraven x xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx vzorku mléka, xxxx by xxxx xxxxx jakákoli úprava.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
7.1 Xxxxx to xx xxxxxxxx skladovat xxxxxx xxx teplotě xxxx 0 °X x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx tuhý mléčný xxx xx vzorku xx xxxxx a xxxxx nádoby a xxxxxx opatrně xxxxxxxxx. Xxxxx xx použije xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x mlékem a xxxx být účinný xx laboratorní teploty.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx skladovací xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °C) xxxx je xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx zahájením testování. Xx však xxxxxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx roztoky x xxxxxx xxxxx xxxx xxx použití xxxxxxx teplotu.
7.4 Stanovit xxxxxxxx kyselost mléka, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx stanovením bodu xxxxxxx. Vzorky, jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x kyseliny xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x sterilizované xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx x pokyny xxxxxxx, případně zda xx sonda xxxxxxxxxx xxxxxxx x prázdné xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx kryoskop x xxxxxxx xx, xxx xx xxxxxxxx kapalina xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kapaliny, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Rutinní xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx každou xxxxx xxxxx měřit xxx xxxxxxx standardního xxxxxxx xxxxxxxx sodného (například xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,001 °C. Xxxxx se průměr xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxx mrznutí xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx v xxxx 6.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx nepřetržitě, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx opatrným protřepáním x xxxxxxxxxxx otáčením. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml xxxxx xx xxxxx x xxxxx zkumavky xx vzorky. Xxxxxxx xx, xx jsou xxxxx x míchačka xxxxx x xxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxx opatrně xx xxxxx xxxxxx odspoda xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx kalibrovaného xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx. Mléko xx xxxxxxx x xxxxxxx xx vyvolá xxx xxxxxxx určené xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °C.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx odečíst xxxx xxxxxxx x digitálního xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx, xxx mrznutí xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxx nitka xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx začne xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx teplotního rozmezí, xxxxxxxxx se ukončí x zopakuje se x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx tento xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx dosažením xxxxxxxxx teploty, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na 45 °X a 5 xxxxx xx udržuje xx xxxx teplotě, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x ihned xxxxxxx xxxxxxxxx. Teplota xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx stoupne xx xx hodnotu, xxxxx zůstane xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x xxxx klesne. Xxx mrznutí xxxxxxxx xxxxxxxxx teplotě xxxxxxxx xxxxx xxxx doby x xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx interval xxxx xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, xx xxxx vzorek xx xxxxxx x xxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx podstatně xxxxxx než xxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx vodou x xxxxx xxxxx x xxxxxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx rozdíl xxxx xxxxxxxxxx body xxxxxxx větší xxx xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxx stanovení xxxxxx na 0,004 °X, zapíší se x xxxxxxx xx xxx xxxxxxx konečného xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zkumavku na xxxxxx na xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx teplotu, xxx xxxxx zůstala x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx to xxxx xxxxx; x xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx se ujistit, xxx xx sonda xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx údaje.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx považuje xxxxxx obou xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx získaných xxx xxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na tři xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx součet xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx zaokrouhlit xx xxxxxxxxx sudou hodnotu, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r): 0,004 °X
9.2.2 Reprodukovatelnost (R): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Předmět a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Aktivita xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx množstvím xxxxxx x μx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 xx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx z xxxxxxxxx fenylfosfátu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx fenol reaguje x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (namodralé xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx měří při 610 xx. Poté xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Xxxxxxxxx xx vodě 50,0 x xxxxxxxxx barnatého (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] a xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx ve xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x doplnit xx 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx xxxxxxx xxxxxxx na 50 °X, xxx roztoky xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxx na 20 °X, x xxxxxxx nutnosti xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx roztok ve xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx.
4.1.4 Xxxx použitím xxxxxx xxxxxx stejným objemem xxxx.
4.2 Tlumivý xxxxxx xxx vyvolání zabarvení
Rozpustit xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx na 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx substrátu
Rozpustit 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bezvodý, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx tlumivého xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x fenylfosfátu xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx dvě xxxxx xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx xxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx-1 neoddělí. Xxxxxxx x odstranit xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx se extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx dní; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx novou xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx, a to xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx x hydroxidu xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx ve vodě 3,0 g xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5H2O) x doplnit xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 ml 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx láhvi x xxxxxxxxxx. Vyhodit xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx je xxxxxx xxx jeden měsíc.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx vodě 0,05 g xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Standardní roztok xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx bezvodého fenolu x xxxxxx xx xxxxxxx baňky o xxxxxx 100 ml, xxxxxx vodu, promíchat x xxxxxxx xx 100 ml. Xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, doplnit xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx obsahuje 200 μx fenolu.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré xxxxxxx xx xxxx, jakož x xxxxx x xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou xxxx čistění xxxxx.
x) Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx způsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx používání je xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
5.1 Analytické xxxx
5.2 Xxxxx lázeň nastavitelná xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx odečty xx xxxxxx xxxxx 610 xx.
5.4 Zkumavky, 16 nebo 18 × 150 xx, xxxxxxx odstupňované xx 5 xx x 10 xx.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, např. o xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx xxx střední xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx mohou xxxxxxxx falešně xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xx xxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx věnovat zvláštní xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vzorků. X xxxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx, xxxxx xx déle xxx xxx dny.
6.2 Xxxxxxxxx vzorek
Pomocí xxxxxx xxxxxx 1 ml xxxxxx xx xxxxx xx dvou xxxxxxxx (5.4), jednu zkumavku xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx slepý xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx vodě; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx způsobem. Xxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx ihned xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx lázni (5.2) x občas (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Stejně xxxx x xxxx 6.3.1 xxxxxxxx dvě xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Rychle zchladit xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 ml xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x řádně xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx suchý xxxxxxxxx xxxxx, vylít xxxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx; shromáždit 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Přidat 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxx x bodě 6.3.9 xxxxxxxxx absorbanci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 20 μx xxxxxx xx zkumavku xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx vhodném xxxxxxx xxxxxx. Připravit xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx části xxxxx testovacího xxxxxx, xxxxx xx opatrně xxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku fenolu (4.8.2) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx nebo slepý xxxxx), 2, 5, 10 a 20 μx fenolu xx xxxxxxxx. Xx xxxxx x pěti xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 ml vody x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Do xxxxx xxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx zředění vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); promíchat.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.4.5 Xx xxxxxxx xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx pro každé xxxxxxxx xxxxxxxxx fenolu (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
Aktivita xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx množství fenolu x μx xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
D xx faktor zředění xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.10 (x případě xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 je faktor xxxxxxx (5/12 z 1 ml testovacího xxxxxx) – xxx 6.2 ve xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μg xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (předběžně) μg xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, limity uvedené x 7.2.1 a 7.2.2 se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXXXX PEROXIDÁZY
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo nepřítomnosti xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx, který slouží xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx mléko xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx zabarvení.
Negativní xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx neobjeví xxxxx xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx kyslík xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Štorchův xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx enzymu.
4. Činidla
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °C) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) a doplnit xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx x xxxxx, x tmavě hnědé xxxxx xx skleněnou xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx dní xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 fenylendiaminu xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Roztok xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx 9 xx 30 % xxxxxxxx vodíku x xxxxxxx na 100 ml. Xxx xxxxxxxxxxx přidat 1 xx koncentrované xxxxxxxx xxxxxx xx litr xxxxxxx.
Xxxxxx peroxidu xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx a temnu, x xxxxx se xxxxxxxxx zátkou, xxxxx xxxxxxx jakémukoli xxxxx x organickými xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx vzorku xxxxx xx xxxxx zkumavky x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 sekund po xxxxxxx xxxxxxx, reakce xxxx specifická.
IV. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 30 °X
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X. Postup xx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx, pasterované xxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléko, xxxxx xxxx 15 xxx preinkubováno xxx 30 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx vytvářejí počitatelné xxxxxxx po aerobní xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat stanovený xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 72 hodin při 30 °C. Spočítat xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx na 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ředění s 9 ml ředicího xxxxxxx x xxxxxxxxx xx principu excentrické xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými xxxxxxx a dostatečným xxxxxxx, s dostatečným xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 ml xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 ml xxx skladování kultivačního xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého skla xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, které by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek xx xxxx:
Xxxxxxx ze skla xx sterilizují xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v nádobách, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – agar xx sušeným xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx odstředěné xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx nemělo xxxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx. Toto se xxxxx srovnávacími testy xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx kvasnicový xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx. Ohřev xxxxxxxx usnadňuje postup. Xxxx přidat xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx uvést do xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx nerozpustí, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx je xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxx pH, roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx sterilizaci byla xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx médium (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 a 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium
Kultivační médium (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx sušené xxxxxxxxxx mléko před xxxxxxxxxxxx, pokud není xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X metodou xxxxx xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx vodě, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, sterilizace x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) tak, xxx po xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx připravovat x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx prášku. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Upravit xX metodou xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx ředidla podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit xx xxxxx lázni (4.1.5) na 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
Vzorek xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx byly mikroorganismy xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx ředidla xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 sekund xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Získá se xxx ředění 10−2.
X xxxxx xxxxxx další xxxxxxxxx ředění se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx dlouho, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 ml vzorku x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí být xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx vhodnou misku.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx při 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, příloha X xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx asi 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx média (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba xxxx koncem xxxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, testovacího xxxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx misky xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Neskládat xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx dotýkat, xxx xxx v xxxxxxxx xx stěnami a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné dbát xx xx, xxx xxxxxxx x záměně xxxxxx sraženin v xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx od cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx xxxxxxxx za xxxxx kolonii. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx méně než xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx kolonie tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx a xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx mikroorganismů na 1 xx xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
∑X / (n1 + 0,1x2) d
kde:
∑C ΣX xx xxxxxxx počet xxxxxxx podle bodu 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx objem xxxxxxxxxxxx vzorku, kde:
n1 xx xxxxx misek xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx získány xxxxx xxxxx.
Xxxxx se zaokrouhlí xx xxx platné xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx číslice pět, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Příklad (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx faktoru xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, provést xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zředění. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 UHT mléko x sterilizované xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx považují xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXX MIKROORGANISMŮ PŘI 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °C v xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX s cílem xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx množit xx x xxxxx xxx 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx dní xxx 6 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx kolonie x xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx počítadlo
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx desetinného xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Zkumavky s xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o xxxxxx 150 až 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, s výpustním xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx průměr xxx 90 až 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx nesmí xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx teplotě 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dbát xx xx, xxx xxxx zajištěno dostatečné xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx xxxxx xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx odvětráním páry.
Pipety xxxx xxx sterilizovány x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx se xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 g |
|
D-glukóza(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xx xxxxxx obsahovat xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx xxxxx srovnávacími xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx mlékem, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat x páře asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, upravit xX, xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx kultivačního média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx od 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se v xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx než 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium
Kultivační xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx odstředěné mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx složkou xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C xxxxxxxx xxxxx bodu 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx vodě, xxxxx xx xx xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat pH xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilaci xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °C.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx zkumavek (4.2.1) xxx, xxx po xxxxxxxxx každá xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) při 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x temnu xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne déle xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředidla
Ředidlo (6.1) xx může xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Dodržet pokyny xxxxxxx. Xxxxxxx pH xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Příprava xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x objemu xxxxxxx 100 xx po xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx inkubaci xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx nechat rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího xxxxxx by neměla xxxxxxxxx tři xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx primárního ředění (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx pasterovaného mléka xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí přijít xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx desetinná xxxxxx xx tento xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, dokud nelze xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx xxx vyšetřena xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 až 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx s kultivačním xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat stát xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx povrchu, xxxxx xxxxxx neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx tlumeném xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx považují za xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x nepostižené xxxxx misky a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou xxxxx. Xxxxx kolonie tvořící xxxxxx pokrývají xxxx xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX je celkový xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 n2)d xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx základě xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx byla sudá.
Příklad:
Ředění 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "nižší než 10 × x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx nejnižšího xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx je xxxxx, provést odhad x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testů xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX KOLIFORMNÍCH XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Definice
"Koliformními bakteriemi" xx rozumějí xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X vytvářejí xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx popsaných podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Petriho xxxxxxx a 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxxx charakteristické xxxxxxx x, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx xxxxxxxx necharakteristických xxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich schopnosti xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx jehla xx slitiny xxxxxxx-xxxxxxx xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx uzávěry x objemem 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx selektivního xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nominálním objemu 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx by xxxx xxx nejméně 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx teplotě 170 – 175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx sterilizované x autoklávech xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x laktózou (XXXX xxxx). Sušené xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 g |
|
Neutrální červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx minut. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nutné, upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a ihned xxxxxx po množstvích 100 až 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx zchladit xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx zkontrolovat sterilitu xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Použít xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxx přípravě.
5.2 Xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 g |
|
Laktóza (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx x xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, upravit pH xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx do xxxxxxxx (4.2.1) obsahujících Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx sterilizaci xxxxxxxxx xxxxxxxxx bubliny.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x komerčního dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Upravit xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodů 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační médium
Použít xxxxxx (VRBL xxxx) xxxxxxx x bodě 5.1.
6.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx přenést (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx do xxxxx xx xxx misek (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 ml xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx asi 12 xx XXXX agaru (6.1)
Xxxxx po xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx misky, aby xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem xxxxxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx misku x 12 xx xxxxx VRBL xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx misky.
Nechat xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx ztuhnutí xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX xxxxx (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
Nechat xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Počítat xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více než 150 kolonií. Počítat xxxxx xxxxxxx kolonie x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx xxx sraženiny xxxxx, charakteristické xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx necharakteristický xxxx (xxxx. jinou xxxxx, xxxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx konfirmační xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 provést xxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx zkumavky xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx v Xxxxxxxxx xxxxxxxx tvoří xxxx.
7. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx konfirmační xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx potvrzených kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 v xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx vyšetřením xxxxxx xxxxx (6.3).
x je xxxxxxxx vyšetřovaného vzorku (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 ml).
Počet se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice, xxxxx xxxxxxxx xxxx než 100 kolonií. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 150 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx".
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX SOMATICKÝCH BUNĚK
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx xxxxx somatických xxxxx v syrovém xxxxx.
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx buněk xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (viz X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx buňky, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x epitelové xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx získat xxxxx xxxxx na 1 xxxxxxxx.
4. Činidla
Musí xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
|
1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx uskutečnit v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx vodní xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx modř, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx v chladničce xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx octovou. Xxxxxxxxxxxx xxxx filtr x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pórů 10 až 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxx. X xxxxxxx vytvoření xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx umožňující xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 xx x xxxxxxxxx nejméně ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx xxx tenkou xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 xx pro xxxxxx vrstvu.
5.4 Horizontální xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) xxx sušení xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 30 až 40 °X xxx ohřívání xxxxxx xxxxx.
5.7 Podložní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx testován xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Během xxxxxxxxxx xxxxx teplota xxxxxx překročit 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Příprava xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) na 30 až 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx na xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), například 20 °X.
6.3 Předběžné xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, xxxxxxx papírem, xxxxx nezanechává prach, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, kde jsou xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx tenké xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx mléka xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx uvedeno xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx styku x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx xx co xxxxxxxxxxxxxxx vyplnit. Xxxxxx xxxxxxx tenkou vrstvu xx horizontální vyhřívací xxxxx (5.4) až xx xxxxxxx vysušení.
U xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx tenkých xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Sušit x, pokud je xx xxxxxxxx, vysoušení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nesmyje. Xxxxx sušit a xxxxxxx xxx, xxx xxx chráněn xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Počítání x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx mikroskop (5.1). Xxxxx počítání xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxx je x xxxxxxxxxxxxxx xxxx viditelná xxxxxxx polovina. Xxxxxxx xxxx nebo pole xx střední třetině xxxxx vrstvy x xxxxxxxxx xx pásy xxxx xxxx, xxxxx xxxx vybrány xxxxx x okrajových xxxxx xxxxx vrstvy. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx různých xxxxx xxxxx vrstvy. Xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx mikroskopem xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x mechanických xxxxxxx počítání, xxxxxxxx xxxxxxxxxx počítání x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx xxxxxxxx koeficient elektronického xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx mléka x xxxxxxx 400000 xx 600000 buněk/ml xx neměl xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx je xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, aby bylo xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti.
Podle Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x je xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / M xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (buněk), xxxxx xxxx spočítány (například 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Počítání xxxx xx tenké vrstvě
Délka xxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx, je 5 xx. Xxxxx xxxx odpovídá xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, jak xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / d × b
kde:
d xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx počet spočítaných xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx mikroskopických xxxx ve xxxxxxx xxxxxxx tenké xxxxxx xxxx xxxxxx mřížky
Pracovní xxxxxx
xxx:
x xx průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx polí.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx buněk
S xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na xx xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační koeficient (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup, xxxxx xx xxxx po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxx x chemickou xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxx XXX minimální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Princip
Část xxxxxx (například 0,2 xx) xx důkladně xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx ve xxxxx tenké vrstvy xx xxxxxxx disk, xxxxx xxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx buňka xxxxxxxxx elektrický impuls, xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx v tisících xx xxxxxxxx.
4. Činidla
Pokud xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx voda je xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, xxxx je to xxxx odpovídající xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx draselný |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 až 5,9. Xxxxxxx xxxxx na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx jednotlivé xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Fluorescenční xxxxxx (zásobní roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ethidiumbromid xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx roztok (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1) tak, xxx xx xxxxxx objem 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx by xxxxx xxx xxxxxxxx více xxx xxxx dní.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx roztok (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 ml |
|
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
5.1 Počítací xxxxxxxx xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx musí xxx před xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx se xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx xxxx xxxxxxx, x prahovou xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pokynů výrobce xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx buněk xxx stanoven mikroskopickou xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, s xxxxxxxxx xxxx, nastavitelná xx 40 ± 1 °X.
5.3 Zkumavka, x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx být skladován xxx nízké xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx konzervován, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxx by byl xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx jednoho x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx než 0,6 x na 100 xx. Takto konzervovaný xxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- dvojchroman xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx než 0,2 g xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 až 12 °X;
- azid xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx sodným x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 ml, xxxxx je vzorek xxxxxxxx xx teplotu 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx do 48 xxxxx xx jeho xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx konzervován xxxxxxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,05 g/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx teplotu 6 až 12 °X ihned po xxxx odběru x xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Vzorek, který xxx xxx konzervován xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojchromanem sodným, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vod.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx skladuje xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, neboť xxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx provést, vzorek xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx hodiny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx vzorek xxx xxxxxxxx teplotě xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut po xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxx xxxxxxxxx, aby se xxxxxxx co nejlepšího xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) a reprodukovatelnosti (X) mezinárodních xxxxxxxxx xxxxx nejsou k xxxxxxxxx.
Xxxxx, které jsou x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, umožňují xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 buněk/ml
(odpovídá xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola xxxxxxxxxx xx provádí xxxxxx xxxxxx x známém xxxxxx xxxxx, který xx stanoví xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx národní referenční xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX ANTIBIOTIK X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx kapitola xxxxxxxx referenční postup xxx detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx ošetřeném xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx postup xxxxxxxx:
X. Kvalitativní xxxxxx
Xxxxx xxxxxx je počáteční xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Popisovaný xxxxxx xx xxxxxx x několika xxxxxxx, xxxxx xxxx založeny xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx testovacího xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxx xxx konfirmaci x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx identifikaci penicilinu x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní postup
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyšší xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxx tabulce:
Detektovatelné xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Citlivost xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 g |
|
|
Agar |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx. Xxxxxxx pH xxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx xx 100 xx xx xxxxxxxx x naklonit s xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx občasného xxxxxxx xxxxx do xxxx. Xxxxxx trimethoprim xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu
Složení:
|
Trimethoprim |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 ml |
|
Vodado |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Živný xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 mg |
|
Glukóza |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx živný roztok x xxxxxxxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx x sterilizovat xxxxxxxx. Živný roztok xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx sterilní xxxxx x vhodným xxxxxxxx připravit xxxxxx xxxxxxxxxx o 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní roztok xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) sterilní xxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxx xx xx 1000 xx. Xxxxx pracovní xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx obsahujícího 0,004 μx penicilinu/ml (= 0,0067 IU xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.2) do 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx penicilinu xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx testu.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx otestováno x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx xxxxx se xxxxxxx do xxxxx x zahřívá xx xxxxx xxxxxx xx 100 °C, xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxx 0 °X až 6 °C na xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx kulturu xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx kultura se xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x proužcích xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx aerobně xxxxxxxx 48 hodin xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx přenést 20 xx živného xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) x nechat xxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx zásobní kulturou (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx xxxxxxx agaru. Xxxxxxxx xxxx se xxxxx xxx 0 xx 5 °C x xxxxxxx se xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Petriho misku (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx očkovací látku xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx zásobní xxxxxxx (5.4.2) xxxx xxxxxxx xxxxxx 36 hodin xx očkování xxxx xxxxxxx nejméně dvakrát x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx xxxx na Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) a xxxxxxxxx tyčinkou xxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vody. Láhev xxxxxxx a důkladně xxxxxxxxx. Xxxxxxx, které xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx až 18ti xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx vykazovat xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 10 xxxxxxx na xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, měla by xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx připravenou ze xxxxxxx kultury (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x xxxx částem xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x lahvičce. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx zkumavky nebo xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), aby xx xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, poté xxxxxxx xxxxxxxx zátkou xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx ztuhnout, xxxx xxxxxx zkumavky/ampule 12 xxxxx ve xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx xxxxx xxx použity týž xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců při 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx přípravě ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx se xx nejdříve xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx po xxxxxx, x do té xxxx xx xxxxxxxx xxx teplotě 0-5 °X. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xx 24 hodin, xxxx by xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °až - 15°X), aby se xxxxxxx xx minimum xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx identifikovat xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx (5.2 a 5.3).
6.3 Xx každé xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx roztoku (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a mikrostříkačkou (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx zkumavky/ampule. Pro xxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxxx xxxx novou xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Postup xxxxx bodu 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx stejným xxxxxxxx xx xxxxxxx kontrolního xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx vzorku xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx a xxxxxxxx se xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx do xxxxx xxxxx s xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx se zkumavkami/ampulemi x xxxxx lázně.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx agarového média xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu xxxx testovacím xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx koncentraci "zcela xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx zabarvení xx zkumavkách/ampulích se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx zbarvení agarového xxxxx xxxx nepravidelné xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx koncentracemi xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vzorků x reakcemi xxxxxxxxx x 7.1 a 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx je nezbytné xxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx zabránilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Postup xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx antibiotik, jakož xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (A.7.1) nebo xxxxxxxxxx reakcí (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx různá xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Definice
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně sulfonamidů, xxxxx popsaným xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx nejméně 2 xx kolem disku.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx kterému byla xxxxxxx penicilináza (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx vytvoří xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx je xxxxxx xxxx xxx penicilinázy, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxx nebo xxxx penicilinu a xxxxxx antibiotika včetně xxxxxxxxxxx.
2.3 Pokud tato xxxx není xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx není xxxxxxxxx, xxx xxxx xx xxx jiné reziduum [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx peniciliny, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx nebo xxxx xxxxx xxxxxxxx inaktivovány xxxxxxxxxxxxx xxxx jsou xxxxxx a nemohou xxx identifikovány jako xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx papírový xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx agarového xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx zóna xxxxx disku xxxxxxx, xx jsou x xxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx mimo jiné xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx a xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz X.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 80 ± 1 °C.
4.2 Pomůcky xx xxxx
Xxx A.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, neobsahující xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx asi 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, standardní xxxxxxx, xxxxxx penicilinázy, xxxxxxx xxxxxxxxx organismus xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Voda xxxxx xxxxxxxxx inhibiční xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (A.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx ve xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Po přidání xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx po sterilizaci xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx médium 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní roztoky xxxxxxxxxx x mléku
Viz X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x xxxxx xxx inhibičních látek (X.5.3) v xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Rozpustit xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamázy) xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Tento xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx týdny při 0 °C až 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezinárodní xxxxx. Xxx účely xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx penicilinázy xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx běžně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx odpovídající množství xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx spór)
Viz X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro detekci xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 oC.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5) x nezbytnému xxxxxxxx částí agarového xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), x cílem xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kolonií x naočkovaném xxxxxxx xxxxx, x důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (X.4.2.2), předem xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 až 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx média, aby xx vytvořila 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx vodorovnost se xxxxx vodováhou, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx ztuhnutí xxxxx, xxxxxx víčka xx xxxxx x obrátit xx xxxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vody xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nejlépe xxxxx xxx den, xxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X vzorků x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (A.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx za účelem xxxxxxxxxxxx a kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx na 80 ± 1 °X, xxx se vyloučil xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Důkladně xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 ml xxxxxx xxxxxxxxx mléka xx sterilní xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. X mléku xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx disk (4.3) do xxxxxx xxxxx (6.1.2) pomocí xxxxx a suché xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx disku x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx položit xxxx na xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Disky xxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx od druhého xxxxxxx 20 xx x od okraje xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx kontrolu xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx standardním roztokem xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxx v xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx testu xx xxxxxxx nejméně xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx rozmístění všech xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx vzhůru x nechat je xxxxxxxxx 2,5 až 5 xxxxx při 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx zdroji xxxxxx, xxx xxxx možné xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Čiré xxxx xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx kolem xxxxx xxxxxxxx nejméně 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx vzorky xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx je xxxxxx xxxx větší xxx xxxxxxxx popsaná x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx inhibičních xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx dvojmo se xxxxxxx zahřátého xxxxx (6.1.2) x se xxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázou (6.1.3). Xxxxxxx přidání xxxxxxxxxxxx do 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x uložit xx xx testovací xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx každý xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) až d).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz 2)
7.1 Xxxxx se xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx, xxx xxxx zóna xx xxxxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx vzorkem mléka, xxxxxx xxxxx nebo xxxxx než xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2x)), xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, mléko xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x tomto postupu.
7.3 Xxxxx je průměrná xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxx x antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, který nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx penicilinázou za xxxxxxxxx podmínek x xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx jiné xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx látky xxxx než xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Stanovení xxxxxx penicilinu
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx buď xx sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx velikostí xxx získaných xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx křivky
Vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x průměrem xxxxxxxxxxx xxx, standardní xxxxxx xxx sestrojit xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx zón na xxxxxx. Inhibiční xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx průměru zdvojeného xxxxx. Xxxxxxx inhibičních xxx xx graficky xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve vzorku xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx průměru xxx vzorků pomocí xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx standardní xxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx nejméně xxxxxxx větší, avšak xxxxxxx xxxxxxx větší xxx poloměr xxxxx.
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Výsledky xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx stanovené koncentrace) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x reprodukovatelnost (X)
Xxxxx nejsou k xxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X souladu x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx VII xxxx 2, tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx u xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx mléko xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx patogenům. Xxxxx xxxx splněny xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X, kapitole XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytný xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx otravy xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nezávadnosti xxx tepelně xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx kritéria x xxxxxxx přijaté na xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Zpráva x výsledku
Pro každý xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx takto:
Počet xxxxx xx mililitr, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx pasterovaného xxxxx, xxxxx požaduje xxxxxxx xxxxxx. Zpráva xxxx xxxxx popsat xxxxxxx postup.