Xxxxxxxxxx Komise
ze xxx 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx syrového mléka x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx otázkách xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Společenství [1] naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx xx xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx metody analýzy x testování, xxxxx xx mají xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx syrové xxxxx x tepelně xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že pro xxxxxx mléko xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x přítomnosti antibiotik;
vzhledem x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx nepřítomnosti xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxx, přítomnosti xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx x technických xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx stanovit xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx mají xxxxxxxx dodržování určitých xxxxx; že je xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx kterých se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx těchto xxxxxxx xxxxx členské státy xx xx, aby xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx zahrnuje x xxxxxxxxx postupů xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx jednotného xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že opatření xxxxxx rozhodnutí xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Stálého veterinárního xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx xxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x testování xxx pasterované mléko xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx peroxidázy,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °C,
- stanovení xxxxxx koliformních xxxxxxxx – počítání xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganizmů xxx 30 °X,
- detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Použití referenčních xxxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x odběr xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a testování xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 xxxx xxxxxxx x xxxxxxx XX.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. prosince 1992, xxx xx zohlednil xxxxx vědeckých x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx určeno xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 14. xxxxx 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Mac Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
PŘÍLOHA I
OBSAH
I. Obecná xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka
I. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx ustanovení xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx xxxxxxxx, kritérií xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx států x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx tato xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx musí xxx xxxxxxx xxxx destilovaná, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" nebo "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx rozumí "xxxxxxxxxxx ve vodě" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není stanoveno xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx uznané analytické xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx přístrojů x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx různé xxxxxxxxxx xxxxxx se týká xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x se zvláštní xxxxxxxxxxx.
3.2 Analytické xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Vyjádření xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx příslušnou metodu. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxxx, jinak xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Výpočet xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx vypočítá x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x reprodukovatelnost
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Opakovatelnost (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx podmínek (stejný xxxxxxxxx, stejný xxxxxxxx, xxxxxx laboratoř, krátké xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx hodnota, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxx totožným xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx pracovníci, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, hodnoty xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, uváděné x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx uznaných xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx postupu. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx pokusy, xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx případě byly xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx odhadnuty.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx měly xxx naplánovány x xxxxxxxxxxx v souladu x mezinárodními pokyny.
6. Xxxxxx x testování
Zpráva x testování xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x získané xxxxxxxx. Xxxx jiné xxxx xxxxxx xxxxxxx podrobnosti xxxxxxx, které nejsou xxxxxxxxx v metodě xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx výsledky. Xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X TEPELNĚ XXXXXXXXXX MLÉKA
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro odběr xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx postup xxx xxxxx xxxxxx, přeprava x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx mléko xxxxxx xxxxxxxxxx x pro xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxxxxxx xx skladovacích a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 xx xxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, kteří byli xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené odběrem xxxxxx x metodách xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx reprezentativní x x souladu x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx zaměstnance xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx oceli xxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx odolného materiálu, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx x nádobách xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx povrchu, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx promíchání xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Naběračky musí xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x jakékoli hloubky xxxxxx. Objem naběračky xxxx xxx xxxxxxx 50 ml.
Vzorkovnice x xxxxx xxxx být xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x vhodného plastu.
Materiály xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx pro odběr xxxxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxx) nesmí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx na vzorky xxxx xxx čistý, xxxxx, xxxxxx povrch xxx xxxxxx x xxxx xxx zakulacené xxxxx.
3.2 Vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků (xxxxxx xxxxx) xxxx splňovat xxxxxxxxxx bodu 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx se xxx xx sobě xxxxxx xxxxxx xxxxxx použije xxxxx vybavení, xxxx xxx po každém xxxxxx vzorku xxxxxxxxx x sterilizováno x xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx testovací xxxxxxxxx xxxx příslušný xxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx odběru xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx ohledu xx xxxxx, které xxxx být provedeny, xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď xxxxx, xxxx mechanicky.
Vzorek xxxx xxx odebrán xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxx x pohybu.
Pokud se x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx více xxxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx použitých xxxxx xxxx xxx takový, xxx byly xxxx xxxxxx xxxxx naplněny xxxxxxx a při xxx bylo možné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx přepravy.
4.2 Ruční xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx z xxxxx x xxxxx na xxxxx
X rychlému xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, xxx se xxxxx xxxxx promíchalo x xxx xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx smetana. Xxxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx odebere xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x chlazených xxxxxx na xxxxx x zemědělském xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx dokud xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mechanické xxxxxxxx, xxxxxx ručně.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z misky xxx
Xx xxxxxxxx, aby xxxxx bylo řádně xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxx další ruční xxxx xxxxxxxxxx míchání. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx xx xx odebrat xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x celé xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx je množství xxxxx, x xxxxx xx má provést xxxxx vzorků, rozděleno xx xxxx xxxxx, x každé xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx každý vzor. Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxx nemusí xxx xxxxxxxx testovány, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx reprezentativních xxxxxxxx x poměru x xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxx, ze xxxxx xxx každý xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx odebere xxxxx (více) vzorek (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – skladovací xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx vagóny
4.2.5.1 Před xxxxxxx vzorků se xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nádob, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xx doporučuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx, xx kterou bylo xxxxx x klidu. Xxxx xxx prokázáno, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x každém x xxxxxxxxxxxx případů xx vhodný xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx testování. Xxxxxxxx promíchání xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx provedených xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď x xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx nádobě x xxxxxxxxxxx otvorem xx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx ani xx xxxxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Proto xx xxxxxxxxxxxxx odběr vzorků x xxxxxxxxxxx otvoru. X xxxxxxx odběru xxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx reprezentativnost xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx obsahu xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx:
- mechanickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x poháněnou elektrickým xxxxxxx,
- vrtulí xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x umístěnou x xxxxxxxxxx otvoru; xxxxxxxx xx ponořena x xxxxx,
- x xxxxxxx cisternových kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx hadici, xxxxx xx napojena xx pumpu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x čistým xxxxxxxx. Xxxxxxx se minimální xxxx x xxxxx xxxxxxx, aby se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Automatický x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx může xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx příslušným xxxxxxx.
Xxxxxx vybavení musí xxx xxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxxxxxx orgán. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx musí být xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxx xx xxxxxx promíchání.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx může příslušný xxxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxx, xx kterého xxxx být odebrány xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- maximální xxxxxx,
- xxxxxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx je nutné xxxxxxxx.
4.4 Odběr vzorků xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxx spotřebě x xxxxxxxxxx v maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx jde x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vzorky xx xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx, zapečetěných xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx obchodní xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx ošetření, x xx, xxxxx xx xx možné, xxxxx xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx pasterovaného mléka x xxx pasterace).
Z xxxxxxx xxxxx tepelně xxxxxxxxxx xxxxx (pasterovaného, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x sterilizovaného) xx xxxxxxx takový xxxxx xxxxxx, xxx odpovídal xxxxx xxxxxxxxx, která xxxx být xxxxxxxxx, x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx vzorku
Vzorek xx xxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx jeho xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří xxxx příslušného orgánu (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx x skladování xxxxxx
Xx souhlasem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx orgánu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx se xxxxx x podmínek xxxxxxxx x skladování, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, x to xx xxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nežádoucímu zápachu x xxxxxxx slunečnímu xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx určené pro xxxxxxxxxxxxxxx testování musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX xx 6 oC, xxxx-xx xxxx mezi xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x skladovány xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x pasterovaného xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx zařízení xxxxxxxxxx x doba xxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx musí být xx nejkratší.
Speciální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, která je xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx, jsou xxxxxxx v popisu xxxxxxx použitelných xxxxxxx.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X
X. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx kolonií xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. STANOVENÍ XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, syrového, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizovaného xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx xxxxxxxxxxx elektrickým xxxxxxxxx zařízením x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X dispozici xxxx dva xxxx xxxxxxxxx. První typ xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx mrznutí, xxxxxx xxxxx typ xx x xxxxxxxxxx důvodů xxxxxxxx tak, že xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx různých xxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx xxxx mrznutí xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx, tento xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx x pevně xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx rutinního xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx lze xxxxxx xxx odhad xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx není xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx na 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx mléka: hodnota xxxxxxxx x souladu x xxxxxxxx xxxxxxxx x vyjádřená ve xxxxxxxx Celsia (°C).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx v xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vhodnou xxxxxxx x mechanickou vibrací xx vyvolá jeho xxxxxxxxxxxx, xxxxx způsobí, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx postupem xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx přesné xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx stupních Celsia.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx řízené xxxxxxxx xxxxx, termistorového xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx odporového xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx obvodem, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, míchačky xx xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx lázeň
Je xxxxx xxxxxx dva xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx typ
Dobře xxxxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx dvěma xxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 0,2 °C. Teplota xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °C xx nominální hodnoty xxxxxx výrobcem.
Je xxxxxxxx, xxx v xxxxx xxxx udržována xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx kapalinou.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Teplota xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °C xx nominální hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx skládá xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx průměru 1,80 ± 0,2 xx a x xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxxxx xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx x (viz xxxxxxxx) musí být xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx při − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx okolí xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx může xxx ± 5 %.
Xxxx xx sonda v xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx musí xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 mm xxx horním xxxxxxx xxxxxxxx (viz xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx této xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / dT × 1 / X = β / X2
xxx:
X je xxxxxxx xx stupních Xxxxxxx
X xx xxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxx X,
− xX / xX × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx materiálu xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx vyhledávání prvního xxxxx xx xxxxxx xxxx mrznutí. Plató xx část křivky, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx dobu xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Wheatstoneovým xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporů, jejichž xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x xxxxxxx teplotní xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°C.
Proměnný (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx linearity x celém xxxxxxx x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx hodnoty.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx dílky xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx provoz
Odečítací xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X v xxxxxxx xx 0 °C xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxxxxxx dvou xx xxxx následujících xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx 0,001 °X.
Xxxxxxxxx obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx správné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x žádném xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °C xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx testovacího xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 xx 1,5 mm, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx její xxxxxx konec xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxx 1,5 xx xxx xx pod xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x dostatečným xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (nejméně ± 1,5 xx), xxx xxxx zajištěna xxxxxxxx teplota xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx míchání se xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx okamžiku dotknout xxxxx termistoru xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxx, které po xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. X xxxx xxxxx xxx použít xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xx xxx sekundy xxx, xxx xx xxxxxxxx dotýkala xxxxx xxxxxxxx na vzorky.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx a xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Tloušťka skla xxxxxxxx se xxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx xxx xxxxxx xxxxxx vzdálenou od xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 mm xxx dnem xxxxxxxx), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx musí xxx stabilizován xxx xxxxxx xxxx vně xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx hodnoty, xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx váhy
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx X.
4.4 Sušárna, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, nastavitelná na 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx destilovaná x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, převařená x zchlazená xx 20 ± 2 °X, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx oxid xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, čistoty x.x., jemně mletý, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x elektrické peci xxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 130 ± 1 °X x sušárně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx tabulka 1) xxxxxxx chloridu xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx vodě (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx odměrné baňky x xxxxxx 1000 xx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx x teplotě 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx při xxx 5 °X x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxx xxx 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otočením xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx do suché x čisté xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z lahví, xxxxx byly xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxx dvou měsíců, xxxxx neobsahují xxxxxxxx (xxxxxxxxx roztok thiomersalu 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx nastaven xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 1 °X od xxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx světlu, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx se, že xxxxxxxx funguje xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx xxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx míchačky a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx roztoky (xxx tabulka xxxx), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxx pod xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Rozdíl xxxx body mrznutí xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx být xxxxx xxx – 0,100 °C.
(U xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx kryoskopů xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx sestaven xxx, xx xx ustálí xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx rozsahu měřícího xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx výběr jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx, xxxx měřit xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxx vyrobeny x xxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (stejný xxxx xxxx, xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx mléka.
Podle xxxxxx xxxxxxx provádět xxxxxxxx kalibrace, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx postup x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a střídavě xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxx následující xxxxxx xxx každý xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx nastavení. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx vzorku xxxxx, xxxx by xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx xxxxxxx mezi 0 °X x 5 °C.
7.2 Xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxxx xxxxxxxxx všechna xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx a xxxx být účinný xx xxxxxxxxxxx teploty.
7.3 Xxxxx může xxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx je xxxxx xx xxxxx na xxxxxxxxxxx teplotu xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testování. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxxxxx roztoky x xxxxxx mléka xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno současně xx xxxxxxxxxx bodu xxxxxxx. Vzorky, xxxxxxx xxxxxxxx přesahuje 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx být xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 minut xxxx xxxxxxxxxx x otevřené xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx sonda xxxxxxxxxx xxxxxxx v prázdné xxxxxxxx xx vzorky. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx, zda xx chladicí xxxxxxxx xxxxxxx míchá xxxx xxxxxxxx. Pokud xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Rutinní xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx sérií xxxxx měřit xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx po sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x více xxx 0,001 °X. Xxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxx liší xx xxxx mrznutí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx popsáno x xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za hodinu, xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx mléka
Promíchat xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x několikerým otáčením. Xxxxx neprotřepávat standardní xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml xxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx xxxx xxxxx x míchačka xxxxx x xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, čistou x xxxxxx nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx zkumavku se xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx x mrznutí xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem x xxxxxxxxx na 0,1 °C.
(U některých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x ručních xxxxxxxxx xx nezbytné xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx, xxx mrznutí xxxxxx, xxxx xx ručička xxxx xxxxx galvanometru xxxxx x příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx začne xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmezí, xxxxxxxxx xx ukončí x zopakuje se x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Pokud tento xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, alikvótní xxxxx vzorku xx xxxxxxx na 45 °X a 5 xxxxx se udržuje xx xxxx xxxxxxx, xxx xx rozpustil xxxxxxxxxxx tuk.
Poté zchladit xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx testování. Teplota xxxxx xx začátku xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxx zůstane po xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x xxxx klesne. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dosažené xxxxx xxxx xxxx x tuto xxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx teplota xxxxxxx konstantní, a xxxxxx interval mezi xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, xx xxxx vzorek xx vzorku x xxx xxxx x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx teplotu.
Když xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx zkumavku, xxxxxxxxxx ji xxxxx x otřít xxxxx x míchačku xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx je xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx druhé xxxxxxxxx u jiného xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,004 °X, xxxxxx xx x použijí xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Chlazení xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx uložit xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx kryoskopu to xxxx možné; x xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx sonda xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx údaje.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx místa.
Pokud xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxxxx xx liché xxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx mrznutí (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Spolehlivost
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r): 0,004 °X
9.2.2 Reprodukovatelnost (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Schéma xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx ke skleněné xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Předmět a xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx množstvím xxxxxx v μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx podmínek.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx, pokud je xxxxx xxx 4 xx xxxxxx na 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx z xxxxxxxxx fenylfosfátu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx dibromindofenolu (xxxxxxxxx xxxxx), který xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx při 610 xx. Xxxx xx provádí xxxxxxxxx xx vzorkem, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx boritanu x xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Rozpustit xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx barnatého (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x xxxxxxx na 1000 ml.
4.1.3 Zahřát 500 xx xxxxxxx xxxxxxx xx 50 °X, oba roztoky xxxxxxx, promíchat, rychle xxxxxxxx xxx xx 20 °X, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Přefiltrovat. Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x methaboritanu sodného (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku pro xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx substrátu
Rozpustit 0,1 g xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bezvodý, xxxxxx xxxxxx, ve 100 xx tlumivého roztoku (4.1.3) nebo 0,5 x xxxxxxxxxxxx dvojsodného xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx dvě xxxxx xxxxxxx BQC (4.6) x xxxxxx xxxx 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Vzniklé xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, xxxxx xx butanol-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; před xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx roztoku ve 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx ve xxxx 3,0 x síranu xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5H2O) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Vyhodit xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxx jeden xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx vodě 0,05 g xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 100 xx, xxxxxx vodu, xxxxxxxxx x xxxxxxx na 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 ml x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx fenolu.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx, jakož x xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx oplachování xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx čistění xxxxx.
x) Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx mohou způsobit xxxxxxxxxxx fenolů a xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Analytické váhy
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °C.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx vlnové xxxxx 610 nm.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 ml x 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx nálevky xxxxxx xxxxxxxxx, např. o xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx filtrace.
5.8 Odměrné xxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x xx xxxxx xx xxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx věnovat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx po xxxxxx vzorků. V xxxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxx x chladničce, xxxxx xx xxxx xxx dva xxx.
6.2 Xxxxxxxxx vzorek
Pomocí xxxxxx xxxxxx 1 ml xxxxxx do xxxxx xx xxxx zkumavek (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý xxxxxx xxxxxxxx dvě xxxxxx xx xxxxxx xxxx; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxx zkumavka. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x testovací vzorek xxxxxxx způsobem. Xxxxxx 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx lázni (5.2) a xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) promíchat xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx x xxxx 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx zchladit xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx zkumavky xxxxxx 1 ml xxxxxxxxx zinek-měď (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx filtrovat xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx; shromáždit 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Přidat 5 xx tlumivého roztoku xxx vyvolání xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx roztoku XXX (4,6), xxxxxxxxx a 30 xxxxx nechat xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 převyšuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujícího 20 μg xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx vzorku. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx objemem xxxxx xxxxx testovacího xxxxxx, xxxxx se opatrně xxxxx do varu, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx kalibrační xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx (4.8.2) připravit xxxxxxxxxx xxxx zředěných xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 a 20 μx fenolu xx xxxxxxxx. Xx každé x pěti xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 ml vody x 1 ml xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxx.
6.4.2 Do xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx tlumivého roztoku xxx zředění vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx a 0,1 ml roztoku XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 minut xxx xxxxxxxx teplotě.
6.4.4 X xxxxxxxxx s kontrolním xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx xxxxxxx xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx přidaného xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxxxx přímky (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μg xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx vzorce:
Aktivita fosfatázy = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx fenolu x μx xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx žádného xxxxxxx X = 1).
2,4 xx faktor xxxxxxx (5/12 z 1 xx testovacího xxxxxx) – viz 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Spolehlivost
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μg fenolu/ml.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx xx xxxxxxx provede podle 6.3.10, xxxxxx uvedené x 7.2.1 x 7.2.2 se xxxxxx xxxxxxxx získaných xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx slouží xx xxxxxxxx pasterace.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx je mléko xxxxx xxxxxxxxxxx, do 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zabarvení.
Negativní xxxxxx xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vodíku. Uvolněný xxxxxxxx kyslík oxiduje xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx enzymu.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 fenylendiaminu
Rozpustit x xxxxx xxxx (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x temnu, x xxxxx xxxxx xxxxx xx skleněnou xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx dní xx xxxxxxxxxx roztok 1,4 fenylendiaminu xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxx odstranit.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx vodíku
Vodou zředit 9 xx 30 % xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 100 ml. Xxx xxxxxxxxxxx přidat 1 xx koncentrované kyseliny xxxxxx xx litr xxxxxxx.
Xxxxxx peroxidu vodíku xx xxxxx asi xxxxx měsíc, xxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxx x temnu, x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx styku x xxxxxxxxxxx látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Dát 5 xx xxxxxx xxxxx xx čisté xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx xxxxxxx peroxidu xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx více xxx 30 xxxxxx po xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií xxx 30 °C. Postup xx xxxxxxx xxx xxxxxx mléko, pasterované xxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizované xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx stanovený xxxxx vzorku mléka x xxxxxxxxxxx médiem x Petriho miskách x xxxxxx xxxxxxxxx 72 hodin xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů na 1 ml syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx na 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx teplotu 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Baňky x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx o xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nominálním xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx otvorem x xxxxxxx 1,75 xx 3 mm.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx sterilního syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 až 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx misek xx xxxx xxx nejméně 10 mm. Dno xxxxx xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx sterilizují jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), nejméně jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut při xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx to, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx by xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx xx xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx by se xxxx vysušit xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx v horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx sušeným xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx odstředěné xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Toto se xxxxx xxxxxxxxxxxx testy xx xxxxxxx odstředěným xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx inhibiční látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx pořadí xxxxxxxxxxx x rozpustit xx vodě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx sušené xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x za xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, dokud xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat v xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx přes xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 při 25 °X.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x množstvích xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx teplotě xxxx 1 a 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx kultivačního média. Xxxxxxx pokyny výrobce, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx pH xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit složky xx vodě, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby po xxxxxxxxxxx byla jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) tak, xxx po sterilizaci xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, avšak xx xxxx než 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx dehydrovaných xxxxxx xxxx prášku. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX metodou podle xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) na 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
Vzorek xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx rozděleny, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx nádoby xx vzorkem. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Doba xxxx mícháním x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx x pasterované xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 ml xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx nesmí přijít xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx xxx přibližně xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx (xxxxxx x xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) do 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx ředění 10−2.
X xxxxx získat xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx postup opakuje xxx dlouho, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx misky (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx vhodného desetinného xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (vyšetřované xx 15 denní xxxxxxxx při 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx VII xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx misky.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx naočkované misky xxxxx asi 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx média (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx rotací Petriho xxxxx, aby po xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx a čistém xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Neskládat xx xxxx více xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx dotýkat, xxx xxx v xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx částí inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Petriho miskách xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx usnadnění počítání xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx považují za xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pokrývají xxxx xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx misek xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
∑X / (n1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx bodu 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx misek xxx xxxxxx ředěním
n2 xx xxxxx xxxxx xxx druhém xxxxxx
x xx faktor zředění, xx základě xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx platné xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Příklad (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx nižší xxx 10, uvést, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx je "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx převrácená hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx vyšší xxx 300 x počítání xx xxxxx, provést xxxxx a vynásobit xxx převrácenou hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx jako "Odhadovaný xxxxx mikroorganismů xx xx".
8.2 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx mléce, které xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xx x xxxxx xxx 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx vytvářejí počitatelné xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka s xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx inkubovat 25 xxxxx xxx 21 °X. Spočítat xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °X xx všech xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 pH-metr se xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx desetinného ředění x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx objemem, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx ředění xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 až 250 xx xxxx zkumavky x objemu 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), skleněné xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx hrotem, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x čirého, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 xx 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx xx bránily xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx postupů:
a) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx sterilizovány x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx se xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Toto xx ověří xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx přidat xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, dokud xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat x páře xxx 30 minut.
Pokud xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, sterilizace x xxxxxxxxxx kultivačního média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x zkumavky uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx se v xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx déle než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, ale přidat xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx rozpouštěním, pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C xxxxxxxx xxxxx bodu 5.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx je xxxxxxxx xxxxxxx pH roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx sterilaci xxxx xxxx hodnota 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx ředidlo (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx po xxxxxxxxx každá xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředidla
Ředidlo (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet nebo xxxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx bodu 6.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx, xxxxx xx není xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxxx xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 hodin při 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Po xxxxxxxx xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx pěny nebo xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx primárního ředění (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx nesmí xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx ředění míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 ml xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx další desetinná xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx vyšetřena xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé ředění (8.1.1) připravit jednu xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx misky, xxx po xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx kolonií.
Doba xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí překročit 15 xxxxx.
Xxxxxx stát xx vodorovném, chladném x xxxxxx povrchu, xxxxx xxxxxx neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
Přenést xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx sebe xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx misek xx nesmějí vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky vyšetřit xxx tlumeném xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx nutné dbát xx xx, xxx xxxxxxx x záměně xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx pochybností provést xxxxxxx průzkum pomocí xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x nepostižené xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu plochy xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 xx počet xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, na xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx na dvě xxxxxx číslice. Xxxx xx zaokrouhlovaná xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx sousední xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Příklad:
Ředění 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx mililitr xx "xxxxx než 10 × x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx hodnota nejnižšího xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Pokud xxxx všechny xxxxx xxxxx než 300 x xxxxxxxx je xxxxx, xxxxxxx odhad x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx faktoru xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx testů ještě xxxxxx x dispozici.
VI. XXXXXXXXX XXXXXX KOLIFORMNÍCH XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Předmět a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení koliformních xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx počítání xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jež xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zkvašovat x xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním xxxxxx x Petriho xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kolonie x, xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx necharakteristických kolonií xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Poté xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací jehla xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx nikl-chróm.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx trubičky xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x nepoškozeným hrotem, x nominálním xxxxxx 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx ze xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx misek má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170 – 175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx dbát xx xx, aby bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx by xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, žlučí x xxxxxxxx (XXXX xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx složky ve xxxx x xxxxxx xxxx několik xxxxx. Xxxx xxxxxxxx promíchat.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); pokud xx xx nutné, upravit xX roztokem (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, aby po xxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xx občasného xxxxxxxxxxxx a ihned xxxxxx xx množstvích 100 až 150 xx do sterilních xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx sterilitu xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Použít xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx xxxxx xx xxxx přípravě.
5.2 Xxxxxx xxxx x brilantovou xxxxxx. Konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx a uvést xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx xx zkumavek (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Durhamovy xxxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx nesmějí xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x temnu při xxxxxxx mezi 1 x 5 °C, xxxxx xx déle xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, rozdělit, sterilizovat x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx pěny xxxx xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx vzorku xxxxx xx xxxxx xx tří misek (4.2.4) x tím xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx naočkované misky xxxxx xxx 12 xx XXXX agaru (6.1)
Xxxxx xx nalití xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx misky, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx xxx použit xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx na vodorovném, xxxxxxxx a čistém xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx VRBL xxxxx (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani být x xxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Počítání xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx více xxx 150 xxxxxxx. Počítat xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, s xxxx xxx sraženiny xxxxx, charakteristické xxx xxxxxxxxxx bakterie.
6.6.2 Pokud xxxx všechny xxxx xxxxxxx kolonie xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (např. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx nebo xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx konfirmační xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx test u xxxxxxxx počtu (např. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx zkumavky xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx xxxxxxxx xxxxxx kolonie, xxxxx v Durhamově xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Pokud xx provede xxxxxxxxxxx xxxx, vypočítat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx potvrzených kolonií xxxxxxxxxxxx bakterií.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx koliformních bakterií xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx (6.3).
x je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice, pokud xxxxxxxx xxxx xxx 100 xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx sudá.
Pokud xxxx všechny xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, xxxxx výsledek xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 ml".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx popisuje dva xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Mikroskopická xxxxxx
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx za xxxxxx kalibrace a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx buňky, například xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx, jejichž jádra xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 xxxxxxx podložního xxxxxxx. Xxxxx vrstva xx vysuší x xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx pod mikroskopem. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx daném xxxxxxx xx vynásobí xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx získat xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Činidla
Musí xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °C. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx promíchat, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx v chladničce xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Přefiltrovat xxxx filtr x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pórů 10 až 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx usazenin, xxxx xxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 ml x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx xxx tenkou xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (30 °X až 50 °X) xxx sušení xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) xxx xxxxxx xxxxx vrstvy.
5.6 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 xx 40 °X pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx xx xxxxx hodin po xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx nesmí xxx zmražen.
6.2 Příprava xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.6) na 30 xx 40 °X. Xxxx řádně xxxxxxxxx. Zchladit na xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxxxxxx sklíček
Vyčistit podložní xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, vysušit papírem, xxxxx nezanechává prach, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx mléka xx xxxxxx připraveného, jak xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx očistit xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, která xxxxxx xx xxxxx x xxxxxx. Přiložit xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx obkreslit obvod xxxxxxxxx (20 mm × 5 mm). Xxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx tenkou xxxxxx xx horizontální xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx tenkých xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx je xx nezbytné, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx tenké vrstvy xx tekoucí xxxx, xxxxx se přebytečné xxxxxxx xxxxx nesmyje. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx tak, xxx xxx chráněn xxxx xxxxxxx.
6.6 Kalibrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx mikroskopického xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x výpočet
7.1 Počítání xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx počítání xxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxx xxxxx, a xx taková xxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxxx x z xxxxx xx v xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxx pole, které xxxx xxxxxxx pouze x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx kontrolovány xxxxxxx xxxxxx za měsíc xxxxxxxxxx různých xxxxx xxxxx xxxxxx. Počítání xxx také xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx všechny xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rovnoměrně.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx buněk, xxxxx se xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx somatických xxxxx pod xxxxxxxxxxx xxxx xxx rovněž xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx počítání x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koeficient xxx xxxxxx xxxxx x obsahem 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xx xxxxx x každém xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx podle Xxxxxxxxxx xxxxxx rozdělení xxxxxxx 400, xxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti.
Podle Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx střední xxxxxxx
X xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / M xxxx XX = 100 % / s nebo XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx počet xxxxxx (buněk), které xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 pro XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx pracovní xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Počítání pásů xx tenké xxxxxx
Xxxxx xxxx, které se xxxx počítat, xx 5 xx. Šířka xxxx xxxxxxxx průměru xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxx podložním xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / x × x
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
b xxxxxxx xxxxx spočítaných xxxx.
7.3.2 Počítání xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx průměr xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7)
s xxxxxxx xxxxx spočítaných polí.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx buněk
S xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 a 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační koeficient (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx nejsou k xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx postup, který xx může xx xxxxxxxxxxxx kalibraci (xxx X.1) používat xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x chemickou xxxxxxxxxx xxxx bez xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Definice
Pro xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (například 0,2 xx) se xxxxxxxx xxxxxxxx s tlumivým xxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Část xxxx xxxxx xx xxxx přenese xx xxxxx tenké vrstvy xx rotační xxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx elektrický xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x tisících xx xxxxxxxx.
4. Činidla
Pokud xxxx stanoveno xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxx nebo deionizovaná, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx draselný |
13,75 g |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
|
pH 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě xx nemělo xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ethidiumbromid xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx chráněné před xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx roztok (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx roztokem (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx dní.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit vodou xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx nemělo xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Počítací zařízení xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx před použitím xxxxxxxxxxx. Tím se xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mají počítat, x prahovou xxxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx výrobce xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, s xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Zkumavka, s xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx teplotě xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx vzorek nebyl xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx po xxxxxxxx 24 xxxxx po xxxxxxxx, neboť obsah xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxx. Skladovací xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx do 24 xxxxx. Konzervace xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx konzervačních xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx orthoboritá:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,6 x na 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx draselný:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku nesmí xxx xxxxx xxx 0,2 g xx 100 ml. Takto xxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 72 hodin při xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx azidem sodným x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx teplotu 6 xx 12 °X ihned po xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 48 xxxxx po xxxx xxxxxx;
- bronopol:
vzorek xxxx xxx xxxxxxxxxxx bronopolem x konečné xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx odběru x xxxxxxxx do 72 xxxxx xx jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx xxx konzervován xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx o xxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojchromanem xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxx
Xxxxx, které xx xx xxxxxxxx, se xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx asi 2-6 °X. Xxxxxxxx vzorků x den nadojení xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx přesto xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, vzorek xx měl být xxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně xxx hodiny dvojchromanem xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený vzorek (xxx 7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx starý xxxxxx xx vodní xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx skladovat vzorek xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx pomocí počítacího xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx (viz 7.2). Bezprostředně xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx nejlepšího xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) a reprodukovatelnosti (X) mezinárodních xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které xxxx x dispozici xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 xx 500 000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu koeficientu 5–4 %)
- směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o známém xxxxxx xxxxx, který xx stanoví xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx národní referenční xxxxxxxxxx.
XXXX. DETEKCE XXXXXXXXXX X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT A XXXXXX POUŽITÍ
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx mléce a x xxxxxxx ošetřeném xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx postup xxxxxxxx:
X. Kvalitativní postup
Tento xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxxxx, xxxxx xxxxxxxx antibiotika x sulfonamidy. Popisovaný xxxxxx je jedním x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx použití Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx organismu. Xxxxx xxxxxx byl xxxxxx xxxx reprezentativní xxx xxxxxxxx testy.
B. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx penicilinu
Tento xxxxxx xx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx postupu, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x stanovení xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx a x tepelně ošetřeném xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxx tabulce:
Detektovatelné xxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 g |
|
|
Pepton |
5 x |
|
|
Xxxxxx extrakt |
1 g |
|
|
Chlorid xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx. Upravit xX xxx, aby po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx zkumavek xxxx xx 100 xx xx lahviček x xxxxxxxx s xxxxx xxxxxx šikmý xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (viz 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx vodě, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx občasného xxxxxxx uvést do xxxx. Xxxxxx trimethoprim xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxx xX, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 mg |
|
nebo Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) a xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx roztok
Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx červeň |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx živný xxxxxx x indikátor, pokud xx je xxxxx, xxxxxxxx a sterilizovat xxxxxxxx. Živný roztok xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx s vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 IU/ml), x to rozpuštěním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx destilované xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx penicilinu (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x doplnit xx xx 1000 xx. Tento xxxxxxxx xxxxxx obsahuje 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 IU/ml).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx standardního xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) do 71 ml xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3).
5.2.4 Roztoky xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bodů 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx testu.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx preparát xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx předtím xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx bylo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx látek; xxxx xxxxx se xxxxxxx do xxxxx x zahřívá xx xxxxx xxxxxx xx 100 °C, xxxx xx uloženo xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxx 0 °X xx 6 °C na xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. calidolactis XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Připravit xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx kultura xx xxxxxxx na šikmém xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultura, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Po xxxxxxxx xxxxxxx zkumavka xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx kultura xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx při 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (suspenze xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Xxxxxxx misky (4.2.2) x nechat xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx do zkumavky xx zásobní xxxxxxxx (5.4.2) a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx spór xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x xxxxxxx se xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Petriho xxxxx (5.5.1) x důkladně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx povrchu xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx kultury (5.4.2) xxxx kultury xxxxxx 36 hodin xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x časovém intervalu xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx spór xx xxxxx (4.2.3) obsahující 250 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx a důkladně xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx v chladničce xxx 0 xx 6 °C.
5.5.5 Po 16xx až 18ti xxxxxxxx inkubaci při 63 ± 1 °X na agarovém xxxxx xx xxxxxxxx xxxx měla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mikroorganismů xxxx 5 x 10 miliony xx xxxxxxxx. Suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx rovnoměrné xxxxxxxx, x pokud xxxxxxxx sraženiny nebo xxxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx připravenou xx xxxxxxx kultury (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx část suspenze xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x pěti xxxxxx xxxxxxxxx média (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx zkumavky xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx naočkovaného média (5.6.2), xxx se xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, poté uzavřít xxxxxxxx zátkou nebo xxxxxx nebo, x xxxxxxx xxxxxx, zatavením xxxxx. Xxxxxx agarové xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule mohou xxx xxxxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx skladovány xxxxxxx xxxxxx při 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky xx xx nejdříve xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx po xxxxxx, x xx xx xxxx se skladují xxx teplotě 0-5 °X. Pokud není xxxxx otestovat vzorky xx 24 xxxxx, xxxx by xx xxxxxxx xxxxxxx zmrazené (−30 °xx - 15°X), aby xx xxxxxxx na minimum xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Čitelně x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zkumavku/ampuli (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx. Umístit xx xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx x mikrostříkačkou (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stříkačku.
6.5 Xxxxxx xxxxx bodu 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Postupem xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx stejným xxxxxxxx xx xxxxxxx kontrolního xxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ až 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx x teplotou 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (viz 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx agarového média xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testovacím vzorkem xxxxx ukazuje na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx vzorku x koncentraci xxxx xxxxxxxxx koncentraci "zcela xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (6.5) xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx zbarvení xxxxxxxxx xxxxx xxxx nepravidelné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x koncentracích xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx inhibičních xxxxx xxxx vzorek mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx zabarvení xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx novému xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx testovacím xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx x reakcemi xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx skladovat, xxxx xxx xxxxxxxx, aby xx zabránilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx koncentrace
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, jakož xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxx mléka x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, xxxxx popsaným postupem xxxxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx vzorek, který xxxxxxxx antibiotika, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx penicilináza (beta-laktamáza), xxxxxxxxx čirou xxxx xxxx xxxxxxx čirou xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx je průměr xxxx bez xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxx nebo xxxx penicilinu a xxxxxx antibiotika včetně xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx tato xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx ve vzorku xxxxx není xxxxxxxxx, xxx může xx xxx jiné reziduum [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, A.1.f) a 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx částečně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx umístí xx xxxxxx agarového xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx mikroorganismus po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx zóna xxxxx xxxxx ukazuje, xx xxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx. Xxxxxxxx čiré xxxx mimo xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x druhu xxxxxxxxx xxxxx x mléce.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx a xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz A.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °C.
4.2 Pomůcky xx xxxx
Xxx A.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, x xxxxxxx 9 xx 13 xx, schopné xxxxxxxxxx xxx 130 xx mléka (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, standardní xxxxxxx, xxxxxx penicilinázy, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx složky xxxxxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx inhibiční xxxxx xxx růst xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Kultivační xxxxx
5.1.1 Živný xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 g |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání x xxxxxxx zcela rozpustit xxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Sterilizovat xxxxxx 15 minut při 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléku
Viz X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μg/ml (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Roztok xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx x cílem xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx 0 °C xx 5 °C.
Poznámka
Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Pro xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx penicilinázy xxxxx xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, zda xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto roztoku xxxxxxxxxxxx xx možné xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx napuštěné xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se kontrolním xxxxxxxx xxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx.
5.4 Testovací xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Testovací xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 oC.
5.6.2 Xx xxxxx přidat část xxxxxxxx čerstvých spór (5.5) x nezbytnému xxxxxxxx částí xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, a důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (X.4.2.2), předem vyhřáté xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx médium, xxx xx vytvořila 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx misku o xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx vrstva.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx, sejmout xxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxx ztuhnout. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxx a xxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx povrchu xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Takto připravené Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx, ale xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dva xxxxx, xxxxx xx ihned xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx polyethylenového xxxx x xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx podle "xxxxxx A" (X.7.1 x A.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx nové xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °C, xxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, poté xxxxxxx xxx 10 xx xxxxxx zahřátého xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx širokým xxxxxx. X xxxxx přidat xxx 0,4 xx xxxxxxx penicilinázy (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx inhibičních látek
6.2.1 Xxxxxxx papírový xxxx (4.3) do xxxxxx xxxxx (6.1.2) pomocí xxxxx x suché xxxxxxx. Xxxxxxxxx přebytečné xxxxx xxxxxxx disku x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx položit xxxx na xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx vzorky mléka xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx od xxxxxxx xxxxxxx 20 mm x xx xxxxxx xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx disky (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx; při xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx pět xxxxxxxxxxxx disků.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x nechat xx xxxxxxxxx 2,5 až 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx papírových xxxxx. Xxxx xxxx xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy (6.2.3) xxxx kolem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx zóny.
6.2.7 Xxxx xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx mléka, xxxxxxx velkost je xxxxxx xxxx větší xxx xxxxxxxx popsaná x 6.2.6, xxxxxxx xx přítomnost inhibičních xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 se xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx mléka (6.1.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx každý xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxx x 5.2 x) xx d).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Interpretace xxxxxxxx (viz 2)
7.1 Xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx žádná xxxx zóna, ale xxxx zóna se xxxxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx velká xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (5.2x)), inhibiční xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx krystalického xxxxxxxxxxxxxxxx sodného rovné xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny xxxxx disku nepuštěném xxxxxxxxx penicilinázu rovná xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx průměru čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxx xxxxx než průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x antibiotika, xxxxxx sulfonamidů, x xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x tomto xx. Syntetické peniciliny, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, nemusejí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx než xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxx standardní xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx log10 koncentrace xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx lze xxxxxxxxx xx logaritmický papír xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxx xxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Průměry inhibičních xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Výpočet
Koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx základě xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo je xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx nejméně xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx pětkrát xxxxx xxx poloměr disků.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx vyjadřují xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx jiných xxx xxxxxxxxx.
9.2 Opakovatelnost (x) a reprodukovatelnost (X)
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX PATOGENNÍCH XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x požadavky xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A, xxxxxxxx XXX xxxx 2, tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z potravin.
Pasterace xx xxxxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx x xxxxxxx X, kapitole XXX xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, pokud jde x počítání xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, specifický xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytný xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx vydávání xxxxxxxxx x zdravotní xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx ošetřené xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Společenství. Pro xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx existují, xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Zpráva x výsledku
Pro každý xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mikroorganismus xxxx být výsledek xxxxxxxx takto:
Počet xxxxx xx mililitr, xxxx "xxxxxxxxxx" či "nepřítomnost" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, který požaduje xxxxxxx xxxxxx. Zpráva xxxx xxxxx popsat xxxxxxx postup.