Rozhodnutí Xxxxxx
xx dne 14. xxxxx 1991,
kterým xx stanoví xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 85/397/XXX xx xxx 5. srpna 1985 x hygienických x xxxxxxxxxxxxx otázkách xxxxxxx x tepelně xxxxxxxxx xxxxxx uvnitř Společenství [1] naposledy pozměněnou xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x zejména xx xx. 10 odst. 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Komise xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx kontrolu xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx a tepelně xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx pro xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, obsahu xxxxx, bodu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx nezbytné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx nepřítomnosti xxxxxxxx, xxxxx koliformních xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx mléko x XXX mléko je xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx z xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx mají xxxxxxxx dodržování xxxxxxxx xxxxx; že je xxxxxxx nezbytné xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx; xx x očekávání xxxxxxxx těchto šetření xxxxx xxxxxxx státy xx xx, aby xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx stanovení referenčních xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx zahrnuje x xxxxxxxxx postupů xxxxxxx x kriterií xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx opatření xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a testování xxx xxxxxx mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů při 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 21 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – počítání xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx UHT mléko x xxxxxxxxxxxxx mléko xxxx xxxx:
- stanovení xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxx mikroorganizmů při 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Referenční postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx 1, 2 a 3 xxxx xxxxxxx x příloze II.
Xxxxxx 6
Toto rozhodnutí xxxx xxxxxxxxxxx do 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Článek 7
Toto xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 14. února 1991.
Za Xxxxxx
Xxx Xxx Sharry
člen Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X. OBECNÁ XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná xxxxxxxxxx xx týkají xxxxxxx, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx výsledků, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x zpráv x xxxxxxxxx. Příslušné xxxxxx členských xxxxx x xxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, ředění xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx destilovaná, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx účely xxxx xxx xxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx mikroorganismů xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" nebo "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx rozumí "xxxxxxxxxxx ve xxxx" xxxx "xxxxxx vodou".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx uznané xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx seznam xxxxxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxx referenční xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xx zvláštní xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" se xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx na 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xxxxxxx xx xxxxxx o xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx xxxxxxxxxx metodu. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti splněno, xxxx xx musí xxxxxxxx, jinak xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Výpočet xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xx vypočítá v xxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxx.
5. Xxxxxxxx spolehlivosti: opakovatelnost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx uvedená pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Opakovatelnost (x) je xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx mezi dvěma xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx postupem x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (stejný xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx xxxxxxxxx, krátké xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx kterou leží xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx totožným xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (různí pracovníci, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x příslušných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, představují 95 % intervaly xxxxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx uznaných pokusů, xxxxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx tyto pokusy, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. V xxx případě xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x nezbytné xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x získané xxxxxxxx. Xxxx jiné musí xxxxxx xxxxxxx podrobnosti xxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx x metodě xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. ODBĚR XXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx ošetřeného mléka. Xxxxx postup xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx mléko xxxxxx xxxxxxxxxx x pro xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx mléko skladované xx skladovacích x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x bodech 2, 4.4, 5 x 6 xx xxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. provedou pověření xxxxxxxxxxx, kteří xxxx xxxx odběrem xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx považují xx nezbytné, vyškolí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx reprezentativní x x souladu x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx zaměstnance xxxxxxxx xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx vzorků, aby xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx oceli xxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx musí xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, odběr xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx pro míchání xxxxxxx x nádobách xxxx xxx dostatečně xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx promíchání xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx opatřeny xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x nabírání xxxxxx x jakékoli xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx při výrobě xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x víček) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx na vzorky xxxx xxx xxxxx, xxxxx, xxxxxx povrch xxx xxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Vybavení pro xxxxx vzorků xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx vzorků (xxxxxx xxxxx) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx bodu 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx se xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x pokyny xxxx požadavky, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxx příslušný xxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx ohledu xx testy, xxxxx xxxx xxx provedeny, xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxxxx buď ručně, xxxx mechanicky.
Vzorek xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx promíchání, když xx mléko xxxxx x pohybu.
Pokud se x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx vzorků xxxxx xxx různé xxxxx, xxxx první xxxx xxx odebrán xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx potřebám testování. Xxxxx použitých nádob xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxx tyto xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxx xxxx možné xxxxx xxxxxxxxx obsah xxxx testováním, xxxx xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx promíchání xxxxxxxxx plunžrem xx xxxxx xxxx konvi xxxxxx x xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, aby xx xxxxx řádně promíchalo x xxx se xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Vzorek, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celou xxxxxxx, xx odebere xxxxxxxx xxxxx bodu 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x chlazených xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx dokud xxxx xxxxxxxx dostatečné homogenity.
Pokud xxxxx mléka xxxxxxxxxx xxxxxxx mechanické míchačky, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx bylo řádně xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rozdělení xxxx může být xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx míchání. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x níž se xx xxxxxxx vzorek, xxxxxxxx kapacitu misky xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx má xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, x každé xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx množství xxxxx xxx každý vzor. Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx jednotlivé xxxxx těchto xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x poměru x množství, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, ze xxxxx xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (více) vzorek (xxxxxx) z těchto xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Odběr xxxxxx x velkých xxxxx – skladovací xxxxxx, cisternové xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X promíchání xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových xxxxxxx xxxx cisternových xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx xxxxxx bylo xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx výsledků xxxxx provedených xx xxxxxxxx odebraných buď x xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx z xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (syrového mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx účinný, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx menší xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx otvorem xx xxxxxx části xxxx x xxxxx vypouštění xxxxxx xxxx množství xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celý xxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků x průlezového otvoru. X xxxxxxx odběru xxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxx vytéci xxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxx xxxx xxxxxxxxx reprezentativnost xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a cisternových xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx míchačkou xxxxxxxxxxx do xxxxxx x xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx x umístěnou x průlezovém xxxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx cisternových vagónů xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xx pumpu a xxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x xxxxxx vzduchem. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx vybavení xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx před x xxxxx xxxxxxxxx podrobeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpovědný orgán. Xxxxxxxx xxxxxxx odběru xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxx xxx xxxxxxx vzorek,
- xxxxx xxxxxxxxxx přenosu (xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx),
- schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x šarže xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx poloautomatického xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- maximální přenos,
- xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx provedeno, xxxx xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx je nutné xxxxxxxx.
4.4 Odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx obchodní xxxxxx xxxx z xxxxxxxxxxxx místnosti xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, a xx, xxxxx je xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx pasterovaného xxxxx x den pasterace).
Z xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x sterilizovaného) se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, aby odpovídal xxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxx xxxxxxxxx, x to xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx xxxxxx příslušného xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx měl xxx xxxxxxx identifikačním xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx souhlasem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx orgánu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx přepravy x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x době mezi xxxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx druhu xxxxx x testování, xxxxx xx být xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx toto:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx vzorky nebyly xxxxxxxxx nežádoucímu zápachu x přímému xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx použitá pro xxxxxx průsvitná, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx při xxxxxxxxx 0 oC xx 4 oC. Doba xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx musí xxx xx xxxxxxxxx x x žádném xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Příslušný orgán xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 oC xx 6 oC, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx musí být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx co xxxxxxxxx a v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 hodin,
- xxxx vzorky mléka xxx vzorky xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx laboratoře x xxxx mezi xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx, jsou xxxxxxx x popisu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupů.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy
III. Stanovení xxxxxxxx peroxidázy
IV. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 30 °C
V. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 21 °C
VI. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganismů
I. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, odstředěného, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizovaného mléka xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), x němž xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízením x xxxxxxxxxxxx xxxxxx nahrazuje xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx typy xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx maximální bod xxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxx xx x obchodních xxxxxx xxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxx mrznutí xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx odečet. Xxxxxxxx x xxxx, že xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx různých xxxxx xxxxx, ale i xxxxxx xxxx mrznutí xxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, tento referenční xxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxxx hledajících xxxxx. Xxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx není xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné na 100 xx (viz xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek mléka xx x závislosti xx přístroji podchladí xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vyvolá jeho xxxxxxxxxxxx, xxxxx způsobí, xx teplota xxxxxx xxxxxxx xx k xxxxx, které xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx mléka xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxx standardní xxxxxxx. Xx těchto xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx mléka xx xxxxxxxx Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx skla
Obvyklé laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx řízené chladicí xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx odporového xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx obvodem, xxxxxxxxxxxx nebo jiného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx na vyvolání xxxxxxx, xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx dva xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx izolovaná xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx dvěma xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx než 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °C xx nominální xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Je důležité, xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx kapaliny. Celá xxxxxx zkumavky na xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx proudí xxxxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx je 33 % (X/X) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx skleněné sondy x maximálním průměru 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí xxx nižší xxx 2 xxxxxxx a xxxxxxx b (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx napětí, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxx, aby při − 0,512 °C xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx teplotu xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Když xx sonda v xxxxxxxxx x pracovní xxxxxx, konec skleněné xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx je 44,6 ± 0,1 xx xxx horním xxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx straně 15). Xx třeba dodat xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx této xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce
− xX / xX × 1 / X = β / T2
kde:
T xx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx xxxxx x xxxxxx při xxxxxxx X,
− xX / xX × 1 / X xxxxxxxx koeficient
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx materiálu xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx doporučuje xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx x odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx na křivce xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx křivky, xxx xxxxxxx zůstane xxxxxxxxxx s přesností xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Wheatstoneovým xxxxxxx xxxx podobným xxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporů, jejichž xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx vyšší xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx od xxxxxxxxx x celém rozsahu x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx musí xxx možné xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx dílky xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx provoz
Odečítací xxxxxxxx xxxx umožnit rozlišení xx nejméně 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zařízení x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx odchylka xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx než 0,001 °C.
Linearita obvodu xxxx být taková, xxx xxx správné xxxxxxx xxxxxxxxx nevznikla x žádném xxxx xxxxxxx od – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx než ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx použije xxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 až 1,5 xx, který xxxxxxxxx s xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x umístěna xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx úrovni xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx je asi 1,5 xx nad xx pod touto xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 mm), xxx xxxx zajištěna xxxxxxxx teplota xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx stanovení. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx okamžiku xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Zařízení xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx do činnosti xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. X xxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx stěny xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (viz xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx xxxxxx je 13,5 ± 0,1 xx. Tloušťka xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx xxx značku xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx dnem xxxxxxxx), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx kolísání xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Analytické xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 xx, xxxxx A.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická xxx, xxxxxxxxx, nastavitelná na 300 ± 25 °X.
4.5 Exsikátor
5. Činidla
5.1 Xxxx destilovaná v xxxxxxxxxxxxxxx skle, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx na 20 ± 2 °X, xx zkumavce xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., jemně mletý, xxxxxx 5 hodin xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x elektrické xxxx xxxx xxxxxxx 24 xxxxx při xxxxxxx 130 ± 1 °X x xxxxxxx x zchlazený xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Rozpustit v xxxxxxxxxxx vodě (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx odměrné baňky x objemu 1000 xx x doplnit xx xxxxxx vodou x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dva xxxxxx xxx asi 5 °X v xxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx roztoků xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx xxxxxxxx xx standardní xxxxxx xxxxxxx promíchá xxxxxxxxxxx x několikerým xxxxxxxx xxxxx. Nikdy xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, aby xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx x láhve xxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx ze xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxx dvou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
Kryoskop xxxx xxx nastaven xxx, xxx xx okolní xxxxxxx nelišila x xxxx než 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, průvanu xxxx xxxxxxxxx teplotám xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx se, xx xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx a xx xxx zapnut xxxxxxx 12 hodin xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx standardní xxxxxxx (xxx xxxxxxx výše), xxxxxxx xxx mrznutí xx těsně xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu xxxxxxx xxxxxx xxxxx x testování. Rozdíl xxxx xxxx mrznutí xxxx roztoků by xxxxxxx neměl být xxxxx než – 0,100 °C.
(U xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx kryoskopů xx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxxx sestaven xxx, xx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx rozsahu xxxxxxxx xxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx výběr jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xx tento xxx xxxxxxx, jako xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx kalibrační xxxxxx; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx a čisté xxxxxxxx na xxxxxx, xxxx měřit xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx vyrobeny x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, umyté a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vodou). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxx stejné jako xxxxxxx vzorků xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx provádět xxxxxxxx xxxxxxxxx, dokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx roven bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx standardním xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx následující xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx každého x xxxx, aniž xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx vzorku mléka, xxxx by xxxx xxxxx xxxxxxxx úprava.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx teplotě mezi 0 °X x 5 °C.
7.2 Pokud xx je xxxxxxxx xxxxxxxx odstranit všechna xxxxxxxxx cizí tělíska xxxx xxxx mléčný xxx xx xxxxxx xx čisté a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx reagovat x mlékem a xxxx xxx účinný xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0 x 5 °X) xxxx je xxxxx xx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx zahájením testování. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx xx to, xxx standardní xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx stanovením bodu xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko xxxx xxxx xxxxxxx 20 minut před xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx hladina x teplota chladicí xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx kryoskop x xxxxxxx se, zda xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx alespoň 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kapaliny, xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx každou sérií xxxxx měřit xxx xxxxxxx standardního xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx x bodem xxxxxxx – 0,512 °X), dokud xx xxxxxxx získané xxx xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx měřeních xxxxxxx xxxxx o více xxx 0,001 °C. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx hodnot xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxx než 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx x xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx nepřetržitě, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx mléka
Promíchat xxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxxx protřepáním x několikerým xxxxxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx přimíchal vzduch.
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do suché x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx xxxx xxxxx x míchačka xxxxx a xxxxx, xxxxx je to xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Mléko se xxxxxxx x xxxxxxx xx vyvolá xxx xxxxxxx určené výrobcem x xxxxxxxxx xx 0,1 °C.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x ručních xxxxxxxxx xx nezbytné xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxx nitka xxxxxxxxxxxx xxxxx s příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx x jakéhokoli xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx nebo později, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx ukončí x zopakuje se x jiným vzorkem xxxxx. Xxxxx tento xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx se xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuk.
Poté xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxxxxx rychle stoupne xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx dobu xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx mrznutí xxxxxxxx xxxxxxxxx teplotě xxxxxxxx xxxxx této doby x xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx kterou teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx interval xxxx xxxxxxxx mrznutí a xxxxxxxxx maximální xxxxxxx, xx liší xxxxxx xx xxxxxx x xxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx než xxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, vyjmout xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx sondu x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx rozdíl xxxx xxxxxxxxxx body xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), provést xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, zapíší se x xxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Chlazení xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zkumavku xx xxxxxx xx xxxxx xxx vzorky x xxxxxx xxxxxxxx teplotu, xxx sonda zůstala x chladu.
(U některých xxxx kryoskopu xx xxxx možné; v xxxxxxxx případech je xxxxxxxx se xxxxxxx, xxx je sonda xxxx začátkem xxxxxx xxxxx zchlazena, například xxxxxxxxxx několika xxxxxxx xxxxxxxxx, dokud xx xxxxxxxxx xxxxxx údaje.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výpočet
Pokud xx po provedení xxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx hodnot získaných xxx bod xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx místa.
Pokud xxxxxx xxxx xxxx přijatelných xxxxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxxxx je liché xxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx mrznutí (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Reprodukovatelnost (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
4.1 (poloha xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxx xx skleněné xxxxxxx termistoru a xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx míra xxxxxxx xxxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxx ve výrobku. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx, pokud xx xxxxx xxx 4 xx fenolu xx 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx fenylfosfátu dvojsodného. Xxxxxxxx xxxxx reaguje x dibromchinonchlorimidem x xxxxxxx dibromindofenolu (xxxxxxxxx xxxxx), xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx měří xxx 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Xxxxxxxxx xx vodě 50,0 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] x xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx borité (H3BO3) x doplnit xx 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx každého xxxxxxx na 50 °X, oba roztoky xxxxxxx, promíchat, xxxxxx xxxxxxxx asi xx 20 °C, x xxxxxxx xxxxxxxx upravit xxxxxxx xX na 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx objemem xxxx.
4.2 Tlumivý roztok xxx vyvolání xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x NaBO2.4H2O x 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) a xxxxxxx na 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx roztok xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx na 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 g xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx dvojsodného xx 4,5 ml xxxxxxxxx roztoku pro xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx kapky xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx stát 30 minut při xxxxxxxx teplotě. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx možné xxxxxxxxx v chladničce xxxxxxx xxx; před xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, a to xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 g xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x síranu měďnatého (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx na 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 ml 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx x xxxxx láhvi x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx je starší xxx xxxxx měsíc.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 x síranu xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) a xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Standardní roztok xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx fenolu x xxxxxx do xxxxxxx baňky x xxxxxx 100 xx, xxxxxx vodu, promíchat x xxxxxxx na 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Zředit xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, doplnit xx 100 ml x xxxxxxxxx. 1 xx obsahuje 200 μx fenolu.
5. Přístroje x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx, jakož x zátky x xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx vyčištěny. Doporučuje xx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx destilovanou vodou xxxx čistění parou.
b) Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx používání je xxxxxxxx.
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx 610 xx.
5.4 Zkumavky, 16 nebo 18 × 150 xx, xxxxxxx odstupňované po 5 xx x 10 xx.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxxxx, xxxx. o xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx filtry o xxxxxxx nejméně 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx filtrace.
5.8 Odměrné xxxxx pro přípravu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Postup
Poznámky:
a) Xxxxx stanovení zabránit xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx potu xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xx xxxxx se xxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx ihned po xxxxxx xxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx skladovat xxxxxx v xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx dva dny.
6.2 Xxxxxxxxx vzorek
Pomocí xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx xx každé xx dvou xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx pokus.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx minuty xx vroucí xxxx; xxxxxxxx x xxxxxxx x vroucí xxxxx xxxxxx hliníkovou xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x xxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxxxxx. Přidat 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Vzorky xxxxx xxxxxxxxx 60 minut xx xxxxx xxxxx (5.2) a xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx obsah.
6.3.4 Stejně xxxx v xxxx 6.3.1 zahřívat xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 ml xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x řádně xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx mililitry x v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx není filtrát xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 X xxxxxxxxx x kontrolním xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx absorbance xxxxxxxx x bodě 6.3.9 převyšuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujícího 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx vzorku, xxxxx se xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx kalibrační xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx fenolu (4.8.2) připravit xxxxxxxxxx xxxx zředěných xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujících 0 (xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Do xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx pipety 1 xx vody x 1 ml xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 ml xxxxxxx XXX (4.6); promíchat.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx zabarvení 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Na základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx přidaného fenolu (6.4.1) vypočítat regresní xxxxxx metodou nejmenších xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxx a xxxxxx
7.1.1 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx xxxxxx x μx xxxxxxx xxxxx bodu 7.1.1;
D xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx provedené xxxxx bodu 6.3.10 (x xxxxxxx žádného xxxxxxx X = 1).
2,4 xx faktor xxxxxxx (5/12 x 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx fenolu/ml.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (předběžně) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx xx xxxxxxx provede xxxxx 6.3.10, limity xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 se xxxxxx xxxxxxxx získaných ze xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx peroxidázy x xxxxx, který slouží xx xxxxxxxx pasterace.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx mléko xxxxx pasterováno, xx 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx objeví xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx reakce xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx neobjeví xxxxx xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza rozkládá xxxxxxx xxxxxx. Uvolněný xxxxxxxx kyslík xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx enzymu.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xx připravení xxxxxx 1,4 fenylendiaminu vytvoří xxxxxxxxx, kterou xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx 9 ml 30 % xxxxxxxx xxxxxx x doplnit na 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx vodíku xx stálý asi xxxxx měsíc, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx a temnu, x láhvi se xxxxxxxxx zátkou, xxxxx xxxxxxx jakémukoli styku x xxxxxxxxxxx látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx vzorku xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x vhodným xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxxxx zabarvení. Xxxxx xx modré xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 sekund xx xxxxxxx xxxxxxx, reakce xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 30 °X
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °C. Postup xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléko, xxxxx xxxx 15 xxx preinkubováno xxx 30 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx vytvářejí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat stanovený xxxxx xxxxxx mléka x kultivačním médiem x Xxxxxxx xxxxxxx x nechat xxxxxxxxx 72 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx na 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Horkovzdušná xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx teplotu 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Mechanické xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx principu excentrické xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s vhodnými xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x promíchání 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Baňky x objemu 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nominálním xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 mm.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx sterilního syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 mm. Xxxxxxx xxxxxxx misek xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx ze xxxx xx sterilizují xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), nejméně xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx se materiál xxxxxxxxxxx x nádobách, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx by měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx sušeným mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx. Xxxx se xxxxx srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto pořadí xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx vodě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx přidat agar x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx xx xxxx zcela xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat přes xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx nezbytné, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci byla xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx médium (5.1) v množstvích xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 a 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx není xxxxxxx produktu.
Upravit pH xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat a xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Rozdělení, sterilizace x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx zkumavka obsahovala 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxx.
Xxxxx xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx prášku. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního média
Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxx rozpustit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a zchladit xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx pěnu xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 ml xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx nesmí xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 sekund xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) do 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
S xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx dlouho, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí být xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko (xxxxxxxxxxx xx 15 denní xxxxxxxx při 30 °X – směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx A xxxxxxxx VII bod 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx dvě xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx naočkované xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, podle xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx ředění x xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a čistém xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx obrácené xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx více než xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx dotýkat, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx částí xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Petriho miskách xxxxxxxxxxxxxx více než 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx tlumeném xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx nutné xxxx xx to, aby xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx za xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx misky, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx pokrývají xxxx xxx čtvrtinu plochy xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xxxxx tohoto vzorce:
∑C / (n1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣC xx celkový počet xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx objem xxxxxxxxxxxx vzorku, kde:
n1 xx xxxxx xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx zaokrouhlí xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx je "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx faktoru zředění.
8.1.4 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx vyšší xxx 300 x xxxxxxxx xx možné, xxxxxxx xxxxx x vynásobit xxx převrácenou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xx".
8.2 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx než 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 21 °X
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje referenční xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx mléce, xxxxx xxxx pět xxx xxxxxxxxxxxxx při 6 xX x cílem xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxxx se x xxxxx xxx 6 °C.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx za popsaných xxxxxxxx.
3. Princip
Inkubovat xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °C xx všech bodech xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx počítadlo
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx rozmíchat 1 xx vzorku xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx principu xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx objemem, x xxxxxxxxxxx prostorem x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx ředění xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx zkumavky x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx vatou), skleněné xxxx ze sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o xxxxxxxxxx objemu 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 až 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx jednu hodinu xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx xxxxx dbát xx xx, xxx xxxx zajištěno dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, tyto xxxxxx xx xxxxxx xxx napevno uzavřeny, xxxxxxx nebo víčka xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze skla xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 g |
|
D-glukóza(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx mléko |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx ověří srovnávacími xxxxx se sušeným xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x nakonec xxxxxx odstředěné xxxxx. Xxxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x uvést xx varu za xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx zcela xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx je xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, upravit xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx od 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 a 5 °C, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx dehydrovaného kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX na 6,9 ± 0,1 při 25 °C postupem xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx, xxxxx xx je xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx byla xxxx hodnota 7,0 ± 0,1 při 25 °C.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx ředidlo (6.1) xx zkumavek (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) při 121 ± 1 °C. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx může xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Upravit xX xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx podle bodu 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx potřebné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxxx xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 hodin při 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Po xxxxxxxx xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, a xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem testovacího xxxxxx by neměla xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx přijít xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx xxx přibližně xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat toto xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších desetinných xxxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) podle xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx tak xxxxxx 10−2.
X cílem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tento xxxxxx xxxxxxx tak xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě ředění. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.6 Nalévání xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx inkubaci xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx kolonií.
Doba mezi xxxxxx xxxxxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx povrchu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho misek
Přenést xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx nesmějí vzájemně xxxxxxx, xxx být x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx odlišit xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně než xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx misku. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx více xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Vypočítat počet xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxx
x2 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, na xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx sousední xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xx "xxxxx než 10 × x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx hodnota nejnižšího xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx odhad x xxxxxxxxx jej xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx vyjádřit xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně xxxxxxxx xxxxxxxxx testů ještě xxxxxx x dispozici.
VI. XXXXXXXXX XXXXXX KOLIFORMNÍCH XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX PŘI 30 °X
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx koliformních xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx při 30 °X xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jež jsou xx xxxxxxxxx podmínek xxxxxxx zkvašovat x xxxxxxx plynu.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx a 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx charakteristické xxxxxxx x, xxxxx to xx nutné, xxxxxxxx xxxxxxxx necharakteristických xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx laktózu. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx koliformních xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 pH-metr xx zařízením xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx platina-iridium xxxx nikl-chróm.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxx 20 xx, xxx mohly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o xxxxxx 150 až 250 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, x nepoškozeným xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, x výpustním xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx má xxxxxxx průměr xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx teplotě 170 – 175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx xxxxx xxxx xx xx, xxx bylo xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx neměly být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx by xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Agar x krystalovou violetí, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx (VRBL xxxx). Xxxxxx selektivní xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Suspendovat a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x nechat xxxx několik xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx rychle do xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 až 150 xx xx sterilních xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx a xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx po 10 xx do zkumavek (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Durhamovy xxxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx sterilizaci xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx jeho přípravě.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx xxxx připravit x xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx médium
Použít xxxxxx (XXXX agar) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka řádně xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 rychlými otočeními xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx vzorku xxxxx xx xxxxx xx xxx xxxxx (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního média
Do xxxxx naočkované xxxxx xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx xx nalití xxxxx promíchat rotací Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x smícháním x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Za xxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx byl xxxxxx xxx xxxxxxxxxx misky.
Nechat xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx VRBL xxxxx (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx ztuhnout.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
Přenést xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx červené xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx xxx sraženiny xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx kolonie xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (např. jinou xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx údajů v xxxx 6.6.2 provést xxxxxxxxxxx test u xxxxxxxx xxxxx (např. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií tím, xx se xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx plyn.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, vypočítat počet xxxxxxx koliformních xxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
n je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x mililitrech (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx 100 xxxxxxx. Když xx zaokrouhlovaná xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, uvést xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 ml".
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX BUNĚK
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk.
A. Xxxxxxxxxxxxx metoda
B. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx buněk xx xxxxxx mléka xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx somatickými buňkami xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x epitelové xxxxx, jejichž xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx methylenovou xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 ml xxxxx xx 1 xx2 povrchu xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx somatických buněk xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx chemikálie xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx modř |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
|
1,1,1-trichlorethan nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 ml |
Upozornění
Tetrachlorethan xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx uskutečnit v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx ve xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °C. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx promíchat, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx x chladničce xxx 4 °X x xxxxxx ledovou xxxxxxxx xxxxxxx. Přefiltrovat xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 10 až 12 xxxxxxx a uchovat xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující xxxxxxxxx xx 0,01 xx x přesností nejméně ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx 20 mm × 5 xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 × 5 mm xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) xxx sušení xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Podložní xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx kalibrována xxxxxxxxxxxxxx (5.2), například 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx podložní xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, vysušit papírem, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx plamenem a xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx mléka ze xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx uvedeno výše. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx stříkačky, xxxxx xxxxxx do styku x mlékem. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx podložní xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 mm). Xxxx xx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx horizontální vyhřívací xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx vysušení.
U xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx tenkých xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx je xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx ventilátorem (5.5). Xxxxxxx tenké xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx tak, aby xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Kalibrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x výpočet
7.1 Počítání xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx počítání xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx jádra, x xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx jasně xxxxxxxxxxxx x x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx viditelná xxxxxxx xxxxxxxx. Počítat xxxx nebo pole xx střední xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx ty xxxx xxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx kontrolovány xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx také xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx všechny části xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx buněk, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx počítání, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vzorků xxxxx xxx vyšší xxx xxxxxxxx koeficient elektronického xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx neměl xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx je xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, xxx bylo xxxxxxx kritérium opakovatelnosti.
Podle Xxxxxxxxxx rozdělení:
M = X = s2,
kde:
M xx střední xxxxxxx
X xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = s × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), které xxxx spočítány (xxxxxxxxx 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 7.3.1 nebo 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx pásů xx xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, je 5 mm. Šířka xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx faktor = 20 × 100 / x × b
kde:
d xx xxxxxx mikroskopického xxxx x mm, xxxxxxxxx xxxxxxxxx sklíčkem s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx spočítaných xxxx.
7.3.2 Počítání xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx střední xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx pomocí xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
s xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx získat xxxxx xxxxx xx ml xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk (7.1 a 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) používat xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x syrovém xxxxx x chemickou xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Definice
Pro xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx mají x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Xxxx xxxx xxxxx se xxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx sklíčko.
Každá buňka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx zesiluje x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x tisících xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxx xx použít xxxxxxx čistoty p.a.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx draselný |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx draselný |
13,75 g |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
|
pH 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx vodou na 10000 ml. |
Příprava:
Smíchat jednotlivé xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx xx nemělo překročit xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx vodou xx 1000 ml.
Příprava:
Rozpustit ethidiumbromid xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx před xxxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx roztoku (4.2) x tlumivým roztokem (4.1) xxx, xxx xx získal objem 1000 ml. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
|
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx vodou xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Přístroje x pomůcky ze xxxx
5.1 Počítací xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení xxxx xxx před použitím xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx vztah mezi xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxx, x xxxxxxxx hodnotou, xxx níž se xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx stanoven xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (A).
5.2 Xxxxx xxxxx, s xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, objem xxx 15 xx.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Vzorek xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx může xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 hodin xx xxxxxxxx, neboť xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx do 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx jednoho z xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,6 x na 100 xx. Xxxxx konzervovaný xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 až 12 °X;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx dvojchromanu draselného xx xxxxxx xxxxx xxx vyšší než 0,2 x na 100 ml. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 72 hodin xxx xxxxxxx 6 až 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x konečné koncentraci 0,024 x/100 ml, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X ihned xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- bronopol:
vzorek xxxx xxx konzervován xxxxxxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 ml, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X ihned xx xxxx odběru x xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx o vzorky xxxxxxxxxxxx dvojchromanem sodným, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx odpadních xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, které se xx vyšetřit, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx asi 2-6 °X. Počítání vzorků x xxx xxxxxxxx xx xxx předběžného xxxxxxxx nedoporučuje, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxx nutné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx být xxxxxxxxx ošetřován nejméně xxx hodiny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx vzorek nejméně xxxxx xxx xxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx skladovat xxxxxx xxx pokojové xxxxxxx xx xx počítání.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx xx xxxxxxxx ohřívání (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
Xxxxx ředění a xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx kruhových xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které jsou x xxxxxxxxx xx xxxxxxx úrovni, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx mezi 400 000 až 500 000 xxxx:
- směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 buněk/ml
(odpovídá xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí xxxxxx o známém xxxxxx buněk, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT X XXXXXX POUŽITÍ
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční postup xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx mléce x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky mléka, xxxxx xxxxxxxx antibiotika x sulfonamidy. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx jedním x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx organismu. Xxxxx postup byl xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx testy.
B. Xxxxxx xxx konfirmaci x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx se musí xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx penicilinu x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní xxxxxx
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx x x tepelně ošetřeném xxxxx, xxxxxxx koncentrace xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 g |
|
|
Pepton |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 g |
|
|
Chlorid xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Za občasného xxxxxxx uvést do xxxx. Upravit xX xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx byla jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx po 100 xx xx lahviček x xxxxxxxx s xxxxx získat xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Agarové xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx sodný |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx vodě, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx uvést xx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C. Upravit xX, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 mg |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprim (5 xxxx 30 xx) a xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 mg |
|
Glukóza |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx roztok x xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx x sterilizovat xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx dostupný x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx destilované vodě.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx destilované xxxx a xxxxxxx xx xx 1000 xx. Tento xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 IU/ml).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx pracovního xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) do 71 xx mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx inhibičních látek
Připravit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na přítomnost xxxxxxxxxxx látek. Xxxxxx xxx použít přiměřené xxxxxxxx čerstvého xxxxx, xxxxx bylo xxxxxxxxxx x prohlášeno xx xxxxxx xxxxxxxxxxx látek; xxxx xxxxx xx xxxxxxx do xxxxx x zahřívá se xxxxx hodinu na 100 °X, xxxx xx uloženo xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxx 0 °C až 6 °X xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Testovací xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. calidolactis XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 je xxxxxxxxx s kmenem X 953.
5.4.2 Připravit xxxxxxx kulturu pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx šikmém xxxxxx agaru (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x proužcích naočkuje xxxxxxx testovací kultura, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 48 hodin xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx zkumavka xxxxxxxx xxxxxxxx zátkou. Takto xxxxxxx xxxxxxx kultura xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx při 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 ml živného xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) x nechat xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx kulturou (5.4.2) a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx xxxxxxx agaru. Xxxxxxxx spór xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x xxxxxxx xx xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx skleněné xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °C (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx kultury (5.4.2) nebo xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx dvakrát x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx misku xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) a xxxxxxxxx tyčinkou xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) obsahující 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, které xxxxxx ihned přeočkovány, xx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Po 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx xx suspenze xxxx xxxx vykazovat xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 10 xxxxxxx na xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx xxxxxxx médium (5.1.2), poté xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx zkumavce nebo x lahvičce. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx naočkovaného média (5.6.2), xxx se xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, poté xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxx, zatavením xxxxx. Xxxxxx agarové xxxxxx ztuhnout, poté xxxxxx zkumavky/ampule 12 xxxxx ve xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx mohou xxx použity xxx xxx, xxx xxxxx xxx rovněž xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx po xxxxxx přípravě xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xx xx nejdříve xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx po odběru, x do xx xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 0-5 °X. Xxxxx xxxx xxxxx otestovat xxxxxx xx 24 hodin, xxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), aby xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx do xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx a xxxxx (5.2 a 5.3).
6.3 Xx každé xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) přenést 0,1 xx vzorku xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stříkačku.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μg/ml (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx stejným xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx vzorku xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx a xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx do xxxxx xxxxx s xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx se zkumavkami/ampulemi x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Purpurové xxxxxxxxx xxxxxxxxx média xx zkumavkách/ampulích se xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "zcela xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx na straně 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (6.5) xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx médium xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx agarového xxxxx xxxx nepravidelné xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx koncentracemi xxxxxxxxx xx straně 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx vzorek xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx životaschopné xxxxx x vzorky xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx x reakcemi xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx nezbytné xxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx zmraženy, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje konfirmační xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, jakož xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (X.7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx různá xxxxxxxxxxx
Xxx A.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx nejméně 2 xx kolem xxxxx.
2.2 Xxxxx vzorek, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx byla xxxxxxx penicilináza (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx čirou xxxx xxxx xxxxxxx čirou xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx bez penicilinázy, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx tato xxxx není xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, inhibiční xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx penicilin, xxx xxxx xx xxx jiné reziduum [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, A.1.f) x 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, xxxxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo jsou xxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx disk xxxxxxxxx mlékem, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx umístí na xxxxxx agarového xxxxx xxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xxxxx ukazuje, xx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xxx xxxx. Xxxxxxxx čiré xxxx xxxx jiné xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxx inhibiční xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx a vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 80 ± 1 °X.
4.2 Pomůcky xx xxxx
Xxx A.4.2.
4.3 Xxxxxxxx disky, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 xx 13 xx, schopné xxxxxxxxxx asi 130 xx mléka (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, roztok penicilinázy, xxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxx xxx bakteriologické xxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx voda xx xxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Živný xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx médium xxx xxxxxxx inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 g |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x podle xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxx, poté xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Sterilizovat médium 15 xxxxx při 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléku
Viz X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) v xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Tento xxxxxx, xxxxxxx rozdělený xx xxxxx xxxxx, je xxxxx skladovat až xxxxx xxxxx při 0 °X xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx penicilinázu xxxxxxxxxx jednotná mezinárodní xxxxx. Xxx účely xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx penicilinázy xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx x neznámou xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, zda xxxxx xxxxxxxxxx platí. V xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx napuštěné xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx zchladit na 55 oC.
5.6.2 Do xxxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést do xxxxxxxx Petriho xxxxx (X.4.2.2), předem xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx misku x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx třeba xxx 15 ml xxxxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Umístit Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vodováhou, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx média, xxxxxx xxxxx xx xxxxx a obrátit xx xxxx vzhůru, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vody xx povrchu agarového xxxxx.
5.6.5 Takto xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx ještě xxx den, xxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx se ihned xx přípravě xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx misek, aby xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx podle "xxxxxx X" (A.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx nové xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx vzorky 10 xxxxx na 80 ± 1 °X, xxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Důkladně xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx širokým xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx inhibičních xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx papírový disk (4.3) xx vzorku xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x suché xxxxxxx. Xxxxxxxxx přebytečné xxxxx otřením disku x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx mléka xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x xx okraje xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx citlivosti xx disky (4.3) xxxxxxxxx standardním roztokem xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x poměru xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; při xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nejméně xxx xxxxxxxxxxxx disků.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx rozmístění všech xxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, obrátit xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 hodin při 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Čiré xxxx xx xxxxx.
6.2.6 Standardní xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx zóny.
6.2.7 Čiré xxxx xxxxx disků xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx nebo xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx inhibičních xxxxx x testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx inhibičních xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx dvojmo se xxxxxxx zahřátého xxxxx (6.1.2) x se xxxxxxx ošetřeným penicilinázou (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx možné xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx penicilinázou (5.3.2) x xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx každý xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx vzorky xxxxx, xxxxxxxxx vzorky penicilinázy x xxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nevytvoří žádná xxxx xxxx, xxx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než xxxx xxxxx disku napuštěném xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx koncentraci krystalického xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μg/ml.
7.2 Pokud xx xxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx nepuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, mléko obsahuje xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy použité x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx kolem disku xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x tomto xx. Syntetické xxxxxxxxxx, xxxx je cloxacillin xxxxx, nemusejí být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podmínek x xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx jiné než xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx látky xxxx xxx penicilin xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx postupy.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Stanovení xxxxxx penicilinu xxxx xxx provedeno xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxx xx xxxxxxx velikostí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce (5.2 x) xx d)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx křivky
Vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx lineární xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx na xxxxxx. Inhibiční zóny xx xxxxxxxx xx xxxxxxx průměru zdvojeného xxxxx. Průměry inhibičních xxx se xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zakreslí xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Výpočet
Koncentrace xxxxxxxxxx xx vzorku xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx průměru xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx nejméně xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx disků.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx penicilinu xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx jiných xxx penicilin.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x reprodukovatelnost (X)
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx x jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX PATOGENNÍCH XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
V xxxxxxx x požadavky xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX bodu 2, tento postup xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx být dodržovány, xxx detekci patogenních xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
Vyšetření se xxxx provést x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x potravin.
Pasterace xx ošetření, xxxxx xxxxxxxxx mléko proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx patogenům. Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, pokud jde x xxxxxxxx kolonií xxx 30 °C x 21 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx detekci patogeny xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx mléko xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx propuknutím otravy xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx vydávání osvědčení x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Společenství. Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganismů xx, pokud xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Zpráva x xxxxxxxx
Xxx každý xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" či "nepřítomnost" x xxxxxx pasterovaného xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx postup. Zpráva xxxx jasně xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.