Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx syrového xxxxx x tepelně ošetřeného xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x hygienických x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/EHS [2], x zejména xx xx. 10 odst. 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxx xx mají používat xxx kontrolu xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, bodu xxxxxxx x přítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx peroxidázy, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxx je vhodné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx dodržování xxxxxxxx xxxxx; xx xx xxxxxxx nezbytné xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx podmínek, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx; xx v xxxxxxxxx xxxxxxxx těchto xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx to, xxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx xxxxxx rutinní xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxxx referenčních xxxxx analýzy a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx spolehlivosti xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx výsledků;
vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx veterinárního xxxxxx,
XXXXXXX XXXX ROZHODNUTÍ:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx somatických buněk,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx pasterované xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – počítání kolonií xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů.
Xxxxxx 4
Xxxxxxx referenčních xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a odběr xxxxxx se xxxx xxxxxxx podle pravidel xxxxxxxxxxx x příloze X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 xxxx popsány x příloze XX.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx znalostí.
Xxxxxx 7
Toto xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu dne 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Sharry
člen Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx mléka
I. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná ustanovení xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx a pomůcek, xxxxxxxxx výsledků, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx států x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx tato ustanovení.
2. Xxxxxxx
2.1 Voda
2.1.1 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, ředění xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx voda xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxx mikrobiologické xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx, které mohou xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "ředění xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
3.1 Seznam přístrojů x pomůcek
Příslušný seznam xxxxxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x se zvláštní xxxxxxxxxxx.
3.2 Analytické xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není stanoveno xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx zprávě o xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxx, xxxxx splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx příslušnou metodu. Xxxx xxxx toto xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxx xxxxxxxx, jinak xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud xxxx xxxxxxxxx jinak, výsledek xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorku.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x reprodukovatelnost
5.1 Kritéria xxxxxxxxxxxxx uvedená xxx xxxxx postup xxxx xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxxxxxxx výsledky xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx výrobkem xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx xxxxxxxxx, krátké xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx samostatných xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx testovacím xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (různí pracovníci, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx a/nebo různé xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, hodnoty xxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnosti, uváděné x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx postupu, představují 95 % xxxxxxxxx xxxxxx spolehlivosti xxxxx xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx se používají xxx hodnocení postupu. Xxx některé postupy xxxx tyto pokusy, xxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxxx xxxxxxxxx. V xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx odhadnuty.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx a nezbytné xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx pokyny.
6. Xxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx použitý postup x xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx musí xxxxxx všechny podrobnosti xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x metodě xxxxx, xxxx volitelné xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx výsledky. Xxxxxx x testování xxxxxxxx xxxxxxx informace xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXX XXXXXXXXXX MLÉKA
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx syrového a xxxxxxx ošetřeného xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx skladované xx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx nádržích.
Postupy xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 xx xxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x konvích, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené odběrem xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx reprezentativní x x souladu x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx vzorků xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Vybavení pro xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx být xxxxxxxx s ohledem xx xxxxxxxxxxxxx použití (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx a xxxxxxxx xxx míchání xxxxxxx v xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx vzniku xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx vzorků x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx alespoň 50 xx.
Xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, kovová xxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx pro odběr xxxxxx (včetně nádob x víček) xxxxx xxxxxxxx takovou xxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxx mít xxxxx, xxxxx, xxxxxx povrch xxx trhlin x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x musí xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx sobě jdoucí xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx vybavení, musí xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx vyčištěno x sterilizováno x xxxxxxx x xxxxxx xxxx požadavky, které xxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxx xxxxxxxxx orgán, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx vzorků.
4. Xxxxxxxx odběru xxxxxx
4.1 Xxxxxx údaje
Bez ohledu xx testy, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxx mechanicky.
Vzorek xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, když xx mléko xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx xx x nádrže xxxxxxx xxxxxxx více vzorků xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxx být odebrán xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx použitých nádob xxxx být xxxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx naplněny xxxxxxx x xxx xxx bylo možné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx však hrozilo xxxxxxxxx stloukání xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Odběr xxxxxx x xxxxx x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx plunžrem xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x dolů, xxxxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxx řádně xxxxxxxxxx x aby xx xx xxxxx konve xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celou zásilku, xx odebere xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x zemědělském xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx dokud není xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx mléka neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx ručně.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z misky xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rozdělení xxxx může být xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx zásilky, x xxx xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx více nádob, x každé xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx každý vzor. Xxxxx vzorky x xxxxx nádoby nemusí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx těchto xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxx, které xx xxxxxxx x xxxxxx, ze xxxxx xxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx (xxxx) vzorek (xxxxxx) z xxxxxx xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx kamiony, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nádob, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx doporučuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx kterou bylo xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx promíchání xxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxxxxxx případů xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx shodu xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx mléka xxxx plnotučného xxxxx) xx xxxxxx, pokud xx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx odebraných xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Ve xxxxx nádobě x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx malé množství xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx pro celý xxxxx. Proto se xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx zajištěna reprezentativnost xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání obsahu xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx možné xxxxxxx:
- mechanickou míchačkou xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x průlezovém xxxxxx; xxxxxxxx xx ponořena x xxxxx,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mléka x xxxxxx xxxxxxxxx hadici, xxxxx xx xxxxxxxx xx pumpu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx minimální xxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx vniku žluklé xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx vybavení xxx odběr vzorků xxxxxxxx xxxxx dodaného xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jiným xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxxxx odpovědný xxxxx. Xxxxxxxx postupů xxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (který xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx používání xxxxxxxxxxxxx nebo poloautomatického xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxx, ze kterého xxxx být xxxxxxxx xxxxxx,
- minimální xxxxx xxxxxx,
- maximální xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxx spotřebě x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx ošetřené mléko xxxxxx x xxxxx xxxxxx spotřebě x xxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx skládají x xxxxxxxxxxxxx, zapečetěných nádob. Xxxxxx musí být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xx, xxxxx je xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx metodou UHT x sterilizovaného) se xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx, xxx odpovídal xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, x to podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx jiného příslušného xxxxxx.
5. Identifikace xxxxxx
Xxxxxx xx měl xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kódem, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx identifikaci xxxxx xxxxxx analytických laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, které xxxx xxx dodrženy x xxxx xxxx xxxxxxx vzorků jejich xxxxxxxxxx, x xx xx základě xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx přepravy x xxxxxxxxxx xx třeba xxxx na xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zápachu x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- vzorky xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx testování musí xxx přepravovány x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 oC xx 4 oC. Doba xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx musí být xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx orgán xxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX až 6 oC, xxxx-xx xxxx xxxx odběrem x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 hodin,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x skladovány xxx teplotách 0 xX až 4 xX. Xxxx mezi xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy musí xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx zařízení laboratoře x doba xxxx xxxxxxx vzorku x xxxxxxxx musí xxx xx nejkratší.
Speciální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x popisu xxxxxxx použitelných xxxxxxx.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Stanovení xxxx xxxxxxx
XX. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °C
VI. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – počítání kolonií xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxx mrznutí plnotučného, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx elektrickým xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X dispozici xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. První xxx xxxxxxxxx maximální xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, kdežto xxxxx xxx xx x xxxxxxxxxx důvodů xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx mrznutí xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x tomu, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx křivky xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxx i xxxxxx bodu xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx použitých xxx xxxxxxxxx, tento xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx plató. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx časem xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx rutinního xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x mléce za xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxx vyšší xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx (viz xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx mléka: xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx postupem x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxxx xx přístroji xxxxxxxxx xx vhodnou xxxxxxx x xxxxxxxxxxx vibrací xx xxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx až k xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx postupem xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx přesné xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx Celsia.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx řízené chladicí xxxxx, termistorového xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx odporového xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx obvodem, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, míchačky xx vzorky a xxxxxxxx xx vyvolání xxxxxxx, xxxxx i xx zkumavek xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx lázeň
Je xxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx izolovaná xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxx kapalinu, xxxxx xx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx dvěma xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx než 0,2 °C. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v rozmezí ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx x lázni xxxx udržována xxxxxxxxxx xxxxxxx kapaliny. Celá xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx vzorky xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °C xx nominální xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Vhodnou chladicí xxxxxxxxx xx 33 % (V/V) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx se skládá xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx a o xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx nižší xxx 2 sekundy a xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) musí být xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx při − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx teplotu xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx tolerance xxxxxx může xxx ± 5 %.
Když xx xxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx musí xxxxxxxx v xxx xxxxxxxx na xxxxxx x x xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx okrajem xxxxxxxx (xxx obrázek xx xxxxxx 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / T2
kde:
T je xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx odpor x xxxxxx xxx xxxxxxx X,
− xX / xX × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx mrznutí. Plató xx xxxx křivky, xxx xxxxxxx zůstane xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX po xxxx xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo podobným xxxxxxxxx xxxxxx nejlepších xxxxxxxxxxxx xxxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx se nesmí xxxxxxxx od xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x více xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace xxxx xxx xxxxx odpory xxxxxxx.
Xxxxxx stupnice je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx umožnit xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X v rozmezí xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx příslušného xxxxxx xxxx xxx taková, xxx xxxxxxxx dvou xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx téže teploty xxxxxx vyšší xxx 0,001 °X.
Xxxxxxxxx obvodu xxxx být taková, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx přístroje xxxxxxxxx x žádném xxxx xxxxxxx od – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x umístěna vertikálně xxx, aby její xxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx termistoru. Přípustná xxxxxxxxx xx xxx 1,5 mm xxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výrobce (nejméně ± 1,5 mm), xxx byla zajištěna xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx okamžiku xxxxxxxx xxxxx termistoru nebo xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, aby teplota xxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx k bodu xxxxxxx. X tomu xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; jedním xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx stěny xxxxxxxx na vzorky.
4.1.6 Xxxxxxxx na vzorky
Zkumavky xx xxxxxx (viz xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 mm xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 mm a xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx skla xxxxxxxx xx nesmí xxxxx o xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx okraje 29,8 xx (21 mm xxx xxxx zkumavky), xxxxx uvádí xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx napětí xxxx xxx stabilizován buď xxxxxx xxxx vně xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, když xxxxxx xxxxx kolísá x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 ml, xxxxx X.
4.4 Sušárna, xxxxx xxxxxxxxx, nastavitelná xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx pec, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx destilovaná x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx na 20 ± 2 °X, xx zkumavce xxxxxxxxxxx oxid xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, čistoty x.x., jemně xxxxx, xxxxxx 5 hodin xxx teplotě 300 ± 25 °X x elektrické xxxx xxxx xxxxxxx 24 xxxxx při xxxxxxx 130 ± 1 °X x sušárně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz xxxxxxx 1) suchého xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Rozpustit v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx odměrné baňky x xxxxxx 1000 xx x xxxxxxx xx značku xxxxx x teplotě 20 ± 2 °C.
Skladovat xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxx 5 °C v xxxxx uzavřených polyethylenových xxxxxxx o maximálním xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx roztoků xxxxxxxx xxxxxxx při 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx standardní roztok xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otočením xxxxx. Nikdy xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx roztoku přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xx x xxxxx xxxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx ze xxx čtvrtin xxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx neobsahují xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx thiomersalu 10 g/l).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx nastaven tak, xxx xx xxxxxx xxxxxxx nelišila x xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx než 26–27 °X.
Xxxxxxx se, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx a xx xxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, rozkmit xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx nad xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Rozdíl xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx neměl být xxxxx xxx – 0,100 °X.
(X xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx dostupných kryoskopů xx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxx xx dané xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. V těchto xxxxxxxxx výběr jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, jako xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx tuto xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx pipety xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxxx na xxxxxx, xxxx xxxxx pomocí xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx vyrobeny x xxxxxxxx jako zkumavky xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kalibrace, xxxxx xxxxxx x kryoskopu xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x druhým xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, dokud po xxxx xxxxxxxxxxx odečty xxx každý roztok xxxxxxxxxx správné xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x nich, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx připraven x xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx vzorku xxxxx, xxxx xx byla xxxxx jakákoli xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx skladovat vzorky xxx xxxxxxx xxxx 0 °X x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx tělíska xxxx tuhý mléčný xxx ve vzorku xx xxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se použije xxxxx, nesmí xxxxxxxx x mlékem a xxxx xxx xxxxxx xx laboratorní teploty.
7.3 Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °C) xxxx xx xxxxx xx ohřát na xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxx nezbytné xxxx xx xx, xxx standardní roztoky x vzorky mléka xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx kyselost xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx stanovením bodu xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x kyseliny xxxxxx xx 100 ml xxxxx, xxxxxxx být xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x sterilizované mléko xxxx xxxx xxxxxxx 20 minut před xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda xxxxxxx x xxxxxxx chladicí xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx zda xx sonda xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx na vzorky. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xx, xxx xx xxxxxxxx kapalina xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx. Pokud xxx xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx, zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxx kapaliny, xxxxxx míchačky a xxxxxxxx rozkmit jeho xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx sérií xxxxx měřit xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (například xxxxxx s bodem xxxxxxx – 0,512 °X), dokud xx xxxxxxx získané při xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x více xxx 0,001 °X. Xxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku o xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx popsáno x xxxx 6.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx provádí nejméně xxxxxx za xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx mléka
Promíchat xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x několikerým xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx standardní xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx přidat 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx xxxxx x čisté zkumavky xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx xxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx odspoda xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx při xxxxxxx xxxxxx výrobcem x xxxxxxxxx xx 0,1 °X.
(X některých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x digitálního xxxxxxxxx; u xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxx nitka xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx mrznutí začne xxxxx nebo xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx teplotního rozmezí, xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx tento xxxxx vzorek rovněž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, alikvótní xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx xx udržuje xx této xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx a ihned xxxxxxx xxxxxxxxx. Teplota xxxxx po xxxxxxx xxxxxxx rychle stoupne xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx odpovídá xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x tuto hodnotu xx xxxxx zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx kterou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, a xxxxxx interval xxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx maximální xxxxxxx, xx liší xxxxxx xx xxxxxx x xxx vodu a xxxxxxxxxx roztoky chloridu xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x otřít sondu x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx stanovení x jiného xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx body xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx u jiného xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,004 °X, zapíší xx x xxxxxxx xx xxx xxxxxxx konečného xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zkumavku na xxxxxx xx místo xxx vzorky x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx to xxxx možné; v xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx se ujistit, xxx je sonda xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, například xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx shodné xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx získaných xxx xxx mrznutí, xxxxxxxxxxxx xx tři xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx součet xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx stanovení provedených xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxx zaokrouhlit xx xxxxxxxxx xxxxx hodnotu, xxx xxxxxxx tento xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxx xx skleněné xxxxxxx termistoru x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení aktivity xxxxxxxxx v pasterovaném xxxxx.
2. Definice
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx míra xxxxxxx xxxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxx xx výrobku. Xx vyjádřena xxxxxxxxx xxxxxx v μg xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka je xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx fenol x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dibromchinonchlorimidem a xxxxxxx dibromindofenolu (xxxxxxxxx xxxxx), který se xxxxxxxxxxxxxx měří xxx 610 nm. Poté xx provádí xxxxxxxxx xx vzorkem, xxxxx xxxxx fosfatázy xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxx xx vodě 50,0 x hydroxidu barnatého (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] a xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.3 Zahřát 500 ml xxxxxxx xxxxxxx xx 50 °X, xxx roztoky xxxxxxx, promíchat, rychle xxxxxxxx asi na 20 °C, x xxxxxxx xxxxxxxx upravit xxxxxxx pH xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx stejným xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx vyvolání xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) nebo 12,6 x XxXX2.4X2X a 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx na 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Roztok substrátu
Rozpustit 0,1 g xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx roztoku (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx dvě xxxxx xxxxxxx XXX (4.6) x nechat xxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx teplotě. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, xxxxx xx butanol-1 neoddělí. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx-1. V případě xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx možné xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx dní; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx novou xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, a xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx ve 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx a hydroxidu xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx ve xxxx 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) a 0,6 x síranu měďnatého (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.6 Roztok 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx je xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu měďnatého (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) a xxxxxxx na 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx vodu, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Tento xxxxxx může být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 ml x xxxxxxxxx. 1 xx obsahuje 200 μx fenolu.
5. Přístroje x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx, jakož x xxxxx a xxxxxxxxx pro odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx vyčištěny. Doporučuje xx oplachování xxxxxxx xxxxxxxxxx destilovanou xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx typy xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx používání xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx vlnové xxxxx 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 nebo 18 × 150 xx, xxxxxxx odstupňované xx 5 ml a 10 ml.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx nálevky xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. o xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx filtrace.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx přípravu xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Postup
Poznámky:
a) Xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx potu xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x xx xxxxx se jim xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx zvláštní xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx ihned po xxxxxx vzorků. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v chladničce, xxxxx xx xxxx xxx dva xxx.
6.2 Xxxxxxxxx vzorek
Pomocí pipety xxxxxx 1 xx xxxxxx xx každé xx xxxx xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxxxx xxxx slepý xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx dvě xxxxxx xx xxxxxx xxxx; xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxx vodou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxx zkumavka. Rychle xxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Po xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x xxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxxxxx. Přidat 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Vzorky ihned xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx lázni (5.2) x občas (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx obsah.
6.3.4 Xxxxxx xxxx v xxxx 6.3.1 xxxxxxxx dvě xxxxxx xx vroucí xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 ml xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x x případě xxxxxxxx filtrovat xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx čirý; shromáždit 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Přidat 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvolání zabarvení (4.2).
6.3.8 Přidat 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx slepým pokusem xxxxxx absorbanci při xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxx x bodě 6.3.9 převyšuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx 20 μx fenolu xx xxxxxxxx podle xxxx 6.4.4, opakovat xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx vzorku. Xxxxxxxxx xxxxxxx smícháním xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx části xxxxx testovacího xxxxxx, xxxxx se xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx fenolu na xxxxxxxx. Do každé x xxxx zkumavek xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx vody x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx zředění vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); promíchat.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet zabarvení 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx slepým xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx xxxxxxx xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx xxx každé xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx metodou nejmenších xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
Aktivita xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx fenolu x μg xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
D xx xxxxxx zředění xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx D = 1).
2,4 xx faktor xxxxxxx (5/12 x 1 xx testovacího xxxxxx) – viz 6.2 ve xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μg xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud xx xxxxxxx provede xxxxx 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 a 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx, xxxxx xxxxxx xx kontrole xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, do 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx zabarvení.
Negativní xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza rozkládá xxxxxxx vodíku. Uvolněný xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx indofenol (Xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 fenylendiaminu
Rozpustit x teplé vodě (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x doplnit xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx a xxxxx, x xxxxx hnědé xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx dvou dní xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx zředit 9 xx 30 % peroxidu vodíku x xxxxxxx xx 100 ml. Pro xxxxxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx vodíku xx stálý xxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx skladován v xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxx jakémukoli xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx více xxx 30 xxxxxx xx xxxxxxx činidel, reakce xxxx specifická.
IV. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °C
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X. Postup xx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX mléko xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx bylo 15 xxx preinkubováno xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vzorku xxxxx x kultivačním xxxxxx x Xxxxxxx miskách x xxxxxx inkubovat 72 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx a vypočítat xxxxx mikroorganismů xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx sterilizovaného xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, schopný xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci teploty, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Zvětšovací xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Mechanické xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx schopná xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x dostatečným xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění.
4.2.2 Baňky x objemu 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), skleněné nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx z xxxxxx, bezbarvého skla xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx vnitřní xxxxxx xxx 90 xx 100 xx. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 mm. Xxx xxxxx xxx žádné xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx ze skla xx sterilizují xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1), nejméně xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx na to, xxx bylo zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v nádobách, xxxx xxxxxx by xxxxxx být napevno xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx volné.
Pomůcky ze xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx by xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx by nemělo xxxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které průkazně xxxxx inhibiční látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx kvasnicový xxxxxxx, trypton, glukózu x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx xx xxxx zcela xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 při 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx médium (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 ml xx xxxxx nebo xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky a xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ihned, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx po jeho xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může xxxxxxxxx z komerčního xxxxxxxxxxxxx kultivačního média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx sušené xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx pH xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X metodou xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok pepton/sůl
Složení:
|
Pepton |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx upravit xX roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) tak, xxx xx sterilizaci xxxxx xxxxxxxx obsahovala 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx ihned, skladuje xx x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx prášku. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxx podle xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx vodní xxxxx (4.1.5) na 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
Vzorek xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx mikroorganismy xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx tvorbě xxxx xxxx pěnu xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx kontaktu s xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx (syrové x xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx ředění 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx ředění se xxxxx postup xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx mléko: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx při 30 °X – směrnice 85/397/XXX, příloha X xxxxxxxx VII bod 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx naočkované misky xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, testovacího vzorku xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, dokud médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx stěnami a xxxxxx částí xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx to, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x cílem odlišit xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx považují za xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx méně než xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx více xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx misek xxxxxxxxxxxx 10 až 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) d
kde:
∑C ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx xxxxx bodu 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx objem xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx počet misek xxx xxxxxx xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se zaokrouhlí xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pět, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx sudá.
Příklad (pasterované xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx je "nižší xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx převrácená xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x vynásobit xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx jako "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX xxxxx x sterilizované mléko
Počty xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx považují xx nevyhovující xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ještě nejsou x dispozici.
V. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 21 °X
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx kolonií při 21 °C x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx pět dní xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x cílem xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xx x xxxxx při 6 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx za popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx stanovený objem xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx kolonie x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx xxxxx bodech xxxxxx.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx rozmíchat 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rotace xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx ředění xxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o objemu 150 až 250 xx xxxx xxxxxxxx x objemu 20 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x výpustním xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx asi 90 xx 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxx 10 xx. Dno nesmí xxx žádné nerovnosti, xxxxx xx bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx skla se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx nutné dbát xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx by xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx víčka xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx sterilizovány x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Kultivační médium – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 g |
|
D-glukóza(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx obsahovat žádné xxxxxxxxx xxxxx. Toto xx ověří xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx. Xxxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxxx. Poté přidat xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx zcela xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, upravit pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx jeho hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx od 100 xx 150 xx xx baněk xxxx xx 12 xx 15 ml do xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, avšak xx xxxx než 1 měsíc xx xxxx přípravě.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx kultivační médium
Kultivační xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržet pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx složkou xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, xxxxx to je xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx pH xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, aby xx xxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx zkumavek (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx každá xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 ml xxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx může xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx pH xxxxxxxx xxxxx bodu 6.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření nechat xxxxxx rozpustit xxxxxxxx xxxxxxxx kultivačního média x zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x inkubátoru [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx mléka nebo, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 hodin při 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, a xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se vzorkem. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších desetinných xxxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx tak xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx další desetinná xxxxxx xx tento xxxxxx opakuje tak xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 až 18 ml kultivačního xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Petriho misky, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx mléka, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit 15 xxxxx.
Xxxxxx stát xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
Přenést xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx na sebe xxxx xxx xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx být x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx to, aby xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx průzkum pomocí xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx odlišit xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 je xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxx
x2 je xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, na xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 a 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × x", xxxxxxx "x" je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx všechny počty xxxxx než 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx odhad x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v pasterovaném xxxxx xxxxxxxxx počítání xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx bakterie, xxxxx při 30 °X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jež jsou xx xxxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx plynu.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxxx charakteristické kolonie x, pokud xx xx xxxxx, potvrdit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxx jejich schopnosti xxxxxxxxx laktózu. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x vhodnými xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxx xxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr asi 90 až 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx by měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170 – 175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx autoklávu xx xxxxx xxxx xx xx, aby bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, tyto nádoby xx neměly být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx víčka xx xxxx být xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx červení, xxxxx x laktózou (VRBL xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 g |
|
Chlorid xxxxx (NaCl) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Suspendovat x xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); pokud xx xx xxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx do xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a ihned xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 až 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Kultivační xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X době xxxxxxx xxxxxxxxxxxx sterilitu xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Použít xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxx hodin po xxxx přípravě.
5.2 Xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx hovězí xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx x uvést xx varu.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) obsahujících Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx nesmějí xx xxxxxxxxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho přípravě.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, rozdělit, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx médium
Použít xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx x bodě 5.1.
6.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými otočeními xxxxxx xx vzorkem. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx do xxxxx xx xxx misek (4.2.4) a xxx xxxxxxxxx 3 ml xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx misky, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x smícháním x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx byl xxxxxx xxx naočkování xxxxx.
Xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx nejméně 4 xx XXXX xxxxx (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
Přenést xxxxx do inkubátoru (4.1.3). Misky inkubovat xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx než šest xxxxx. Sloupky misek xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 hodiny xxx 30 ± 1 °C.
6.6 Počítání xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 150 kolonií. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx kolonie x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx bez sraženiny xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx bakterie.
6.6.2 Pokud xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. jinou xxxxx, xxxxxxxx nebo xxxx xxxx sraženin xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx konfirmační xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 provést xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx (např. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií tím, xx xx xxxxxx xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx zkumavky xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx tvoří plyn.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX je celkový xxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 ml).
Počet xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx než 100 kolonií. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit tak, xxx sousední xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx ještě xxxxxx x dispozici.
VII. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx somatickými xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, například xxxxxxxxx a epitelové xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx možné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx modří
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 povrchu xxxxxxxxxx xxxxxxx. Tenká xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx pod mikroskopem. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx daném xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x 1,1,1-trichlorethan xxxx tetrachlorethan x xxxxxx xx xxxxx xxxxx na 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 hodin xxxxxxx x chladničce xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx octovou. Xxxxxxxxxxxx xxxx filtr x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 10 až 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx láhvi. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo usazenin, xxxx použitím roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Přístroje x pomůcky xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 ml x přesností xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko s xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx vrstvu.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx deska (30 °X xx 50 °X) pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Ventilátor (xxx) xxx sušení xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 až 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx testován xx xxxxx xxxxx po xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx nesmí xxxxxxx xxxxxx překročit 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx v laboratoři
Zahřát xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Poté xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx na xxxxxxx, xxx které xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxx prachem.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx připraveného, xxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx očistit xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx styku x xxxxxx. Přiložit xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 mm × 5 xx). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx tenkou xxxxxx xx horizontální xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx úplného vysušení.
U xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxx xxxxxx.
6.5 Barvení xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx xx barvícího xxxxxxx (4). Sušit x, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zcela xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Počítání xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxx jádra, x xx xxxxxx xxxxx, xxxxx jsou jasně xxxxxxxxxxxx x z xxxxx je v xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx polovina. Xxxxxxx xxxx xxxx pole xx střední xxxxxxx xxxxx vrstvy x xxxxxxxxx ty pásy xxxx xxxx, které xxxx vybrány xxxxx x okrajových xxxxx xxxxx vrstvy. Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx měsíc xxxxxxxxxx xxxxxxx částí xxxxx vrstvy. Xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rovnoměrně.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxx
Xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx než xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koeficient xxx xxxxxx xxxxx x obsahem 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx neměl překročit 5 %.
Xxxxx somatických xxxxx, xxxxx xx xxxxx v každém xxxxxx xxxxxxxx, musí xxx xxxxx Poissonova xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx rozdělení:
M = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx hodnota
V xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = s × 100 % / M xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx spočítány (například 400 xxx CV = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 xx xxxxx se pracovní xxxxxxx vypočítá xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx tenké vrstvě
Délka xxxx, xxxxx xx xxxx počítat, xx 5 xx. Šířka xxxx xxxxxxxx průměru xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Pracovní xxxxxx = 20 × 100 / x × x
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x mm, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
b xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx mikroskopických xxxx xx střední xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx obsahu xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx somatických buněk (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
X. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx bez xxxxxxxx konzervace.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x důsledku barvení xxxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxx fluorescence.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) se důkladně xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xx xxxx přenese xx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx disk, xxxxx slouží xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx impuls, xxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx čistoty p.a.. Xxxxxxx voda xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx je xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Hydrogenftalat xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx překročit xxxx xxx.
4.2 Fluorescenční xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx na 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ethidiumbromid xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx vzduchotěsně xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx by nemělo xxxxxxxxx xxx měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x tlumivým xxxxxxxx (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx objem 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx neměl xxx používán xxxx xxx sedm xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
|
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx vodou xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx složky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na principu xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx se xxxxxxx vztah xxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx xxxx xxxxxxx, x prahovou xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxx pokynů výrobce xx použití xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, x cirkulací xxxx, nastavitelná xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, objem xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx vzorek nebyl xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 hodin xx xxxxxxxx, xxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxxxxx xxxxx. Skladovací xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx do 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx konzervačních xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx orthoborité ve xxxxxx nesmí být xxxxx než 0,6 x xx 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx xxxxxx může být xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- dvojchroman xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx dvojchromanu xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx vyšší než 0,2 x na 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx vzorek může xxx xxxxxxxxx dalších 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 až 12 °X;
- azid xxxxx:
xxxxxx může xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx sodným x xxxxxxx koncentraci 0,024 g/100 xx, xxxxx je xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx 48 xxxxx po jeho xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx bronopolem x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 g/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx odběru x xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, který xxx byl konzervován xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx draselným.
Poznámka:
Pokud xxx x vzorky xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx dodrženy xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, se xx nadojení xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Počítání xxxxxx x den nadojení xx xxx předběžného xxxxxxxx nedoporučuje, neboť xxxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxx nutné xxxxxxxx xxxxxxx, vzorek xx xxx být xxxxxxxxx ošetřován nejméně xxx hodiny dvojchromanem xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx vzorek nejméně xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx vzorek xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx do xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx pomocí počítacího xxxxxxxx (5.1) do 15 minut po xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx důkladně xxxxxxxxx, aby se xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozdělení xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx ředění a xxxxxxxx vzorku jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) mezinárodních xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx správnosti xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o známém xxxxxx xxxxx, xxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxx xxx mikroskopem xx xxxxxxx referenční xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX ANTIBIOTIK X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx mléce a x tepelně ošetřeném xxxxx.
Xxxxx referenční postup xxxxxxxx:
X. Kvalitativní xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx antibiotika x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx založeny xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, co xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxx pro konfirmaci x identifikaci penicilinu
Tento xxxxxx xx musí xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní xxxxxx
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx detekci xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a x tepelně ošetřeném xxxxx, jejichž xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx uvedené v xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 g |
|
|
Pepton |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 g |
|
|
Agar |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx uvést do xxxx. Xxxxxxx xX xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx do xxxxxxxx xxxx xx 100 xx xx lahviček x xxxxxxxx s xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx občasného xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Přidat xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxx xX, xxx po xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) a doplnit xxxxx.
5.1.4 Živný xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 mg |
|
Glukóza |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová červeň |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx roztok xx dostupný x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x to xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu sodného xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx destilované vodě.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx destilované xxxx x xxxxxxx xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx penicilinu/ml (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 ml standardního xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx penicilinu xxxxxxx podle bodů 5.2.1 xx 5.2.3 xx měly být xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Mléko xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx preparát xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx čerstvého mléka, xxxxx xxxx otestováno x xxxxxxxxxx xx xxxxxx inhibičních látek; xxxx mléko se xxxxxxx do lahví x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx na 100 °C, xxxx xx uloženo xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxx 0 °C xx 6 °X xx xxxx xxxxxxx jednoho xxxxx.
5.4 Testovací xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx testovací xxxxxxxxxx xx použije Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x kmenem X 953.
5.4.2 Připravit xxxxxxx kulturu pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx kultury. Xxxxxxxxx kultura xx xxxxxxx na xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx agar se x xxxxxxxxx naočkuje xxxxxxx xxxxxxxxx kultura, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Po xxxxxxxx xxxxxxx zkumavka xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Asepticky přenést 20 xx xxxxxxx xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) x nechat xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx xxxxxxx agaru. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx při 0 xx 5 °X x xxxxxxx xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Petriho xxxxx (5.5.1) a xxxxxxxx xxxxxxxxx očkovací látku xx celém povrchu xxxxxx zahnuté skleněné xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Při xxxxxxx zásobní xxxxxxx (5.4.2) nebo kultury xxxxxx 36 hodin xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx vody xx Xxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vody. Láhev xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx. Kultury, které xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx x chladničce xxx 0 až 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X na xxxxxxxx xxxxx by xxxxxxxx xxxx měla vykazovat xxxxx životaschopných xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 10 miliony na xxxxxxxx. Xxxxxxxx spór xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x pokud xxxxxxxx sraženiny xxxx xxxxxxxxx, měla xx xx xxxxxxxx novou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), poté zchladit xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x pěti xxxxxx xxxxxxxxx média (5.6.1) xx zkumavce nebo x lahvičce. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx zátkou xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxx, zatavením xxxxx. Nechat agarové xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx svislé xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxx, xxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců při 0–6 °C, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxx, x do xx xxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxx 0-5 °X. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 hodin, xxxx xx xx xxxxxxx hluboko xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Čitelně x xxxxxxxxxxxx identifikovat xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx do xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx (5.2 a 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx mléka řádně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxxx vždy xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Postup xxxxx xxxx 6.4 xx opakuje xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Postupem xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx způsobem xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bez xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx xxxxxx mléka.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ až 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx s xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx se zkumavkami/ampulemi x vodní xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx agarového xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx xxxx testovacím vzorkem xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" uvedené x xxxxxxx na xxxxxx 39. Xxxxx zabarvení xx zkumavkách/ampulích se xxxxxxxxxxx roztokem penicilinu (6.5) xxxxxxx purpurové, xxxxxxx médium xx xxxxxxxxxx citlivé.
7.2 Částečné xxxxxxxxx zbarvení agarového xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx vzorkem mléka xxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx straně 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx organismu.
7.4 Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx zkumavkách/ampulích, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spóry x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx testovacím materiálem.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x reakcemi xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx metody "X".
Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx konfirmační xxxx penicilinu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, jakož xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxx mléka s xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx reakcí (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx různá xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Definice
2.1 Xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx, včetně sulfonamidů, xxxxx popsaným xxxxxxxx xxxxxxx čirou xxxxxxxxx xxxx nejméně 2 xx xxxxx disku.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx byla xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamáza), xxxxxxxxx xxxxx zónu xxxx vytvoří xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx xxx penicilinázy, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx antibiotika xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Pokud xxxx xxxx není penicilinázou (2.2) xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx může to xxx jiné xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A, kapitola XX, A.1.f) x 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx inaktivovány xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx stearothermophilus xxx. xxxxxxxxxxxx. Normální xxxx mikroorganismus xx xxxxxxxx narušuje xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx jsou x xxxxx přítomny xxxxx xxxxxxxxx látky xxx xxxx. Xxxxxxxx čiré xxxx mimo jiné xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x mléce.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx ze xxxx a xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz X.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °C.
4.2 Xxxxxxx xx skla
Viz X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx disky, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, o xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx asi 130 xx xxxxx (nejlépe xxxxxxxxx x exsikátoru).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, standardní xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Musí se xxxxxx xxxxxxxxxxx voda xx xxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Voda xxxxx obsahovat inhibiční xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Kultivační xxxxx
5.1.1 Xxxxx agar (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 g |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (A.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání a xxxxxxx xxxxx rozpustit xxxxx složky xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx po sterilizaci xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Sterilizovat xxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx standardní roztoky xxxxxxxxxx v mléce xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) x těchto xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 IU/ml)
b) 0,006 μx/xx (0,01 IU/ml)
c) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μg/ml (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Rozpustit xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx destilované xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx až xxxxx xxxxx při 0 °X xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx penicilinázu xxxxxxxxxx jednotná mezinárodní xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že deset xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. U xxxxxxxxxxxx x neznámou xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx napuštěné xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx spór)
Viz X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
5.6.1 Xxxxxx rozpustit xxxxxxx xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx na 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) x nezbytnému xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kolonií x naočkovaném xxxxxxx xxxxx, x důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx misky (X.4.2.2), předem vyhřáté xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx se vytvořila 0,6 až 0,8 xx xxxxxx. Pro Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx třeba xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx vytvořila 0,8 xx vrstva.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx, sejmout xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx ztuhnout. Xx ztuhnutí xxxxx, xxxxxx xxxxx na xxxxx a xxxxxxx xx dnem xxxxxx, xxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx agarového xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx misky se xxxxxxx nejlépe ještě xxx xxx, ale xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx týdny, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx zataveného polyethylenového xxxx x xxxxxxxxxx xx při 5 °X.
5.6.6 Označit xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 U xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx nové xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativního xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °X, xxx se vyloučil xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, poté xxxxxxx xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx širokým xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 ml xxxxxxx penicilinázy (5.3) x xxxxx promíchat.
6.2 Xxxxxxx inhibičních xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) do xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx disku x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Naplocho položit xxxx na xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x lehce xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx xxxx xxx vzdáleny xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 mm x xx xxxxxx xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx standardním roztokem xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx rozmístit xxxx xxxxx napuštěné xxxxxx xxxxx x poměru xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx disků.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx rozmístění xxxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, obrátit xxxxx xxxx xxxxxx x nechat je xxxxxxxxx 2,5 xx 5 hodin xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Po inkubaci xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx zdroji xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx čiré xxxxxxxxx xxxx kolem papírových xxxxx. Xxxx xxxx xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy (6.2.3) xxxx kolem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx zóny.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx vzorky mléka, xxxxxxx velkost xx xxxxxx nebo xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, ukazují xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx mléka (6.1.2) x xx xxxxxxx ošetřeným penicilinázou (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx mléka xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x xxxxxx xx na testovací xxxxx.
6.3.2 Postup 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx každý xx xxxxxxxxxxxx roztoků penicilinu xxxxxxxxx x 5.2 x) až d).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný průměr xxxxxx inhibičních xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx se kolem xxxxx napuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nevytvoří xxxxx xxxx xxxx, xxx xxxx zóna se xxxxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx nebo xxxxx než xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (5.2x)), xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx xxxxx nepuštěném xxxxxxxxx penicilinázu rovná xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx obsahuje xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx možné inaktivovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx použité x xxxxx postupu.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem disku xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, x xxxxxxxxx nebo polosyntetický xxxxxxxxx, který nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxx identifikovány xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Stanovení xxxxxx penicilinu může xxx xxxxxxxxx xxx xx sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx, nebo výpočty xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx získaných se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx xx xxxxxx. Inhibiční zóny xx počítají xx xxxxxxx průměru xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx graficky xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku xxxxx lze xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx pětkrát větší xxx poloměr disků.
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Výsledky xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx penicilinu rovný xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx stanovené xxxxxxxxxxx) xxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxx látek jiných xxx xxxxxxxxx.
9.2 Opakovatelnost (x) x reprodukovatelnost (X)
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx standardu při xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
X souladu x xxxxxxxxx směrnice 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx VII xxxx 2, tento postup xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodržovány, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
Vyšetření xx xxxx provést x xxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx ošetření, xxxxx xxxxxxxxx mléko xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx x příloze X, kapitole XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, pokud jde x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx detekci patogeny xx nezbytný xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx mléko xx xxxxxxx spojitost xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx osvědčení x xxxxxxxxx nezávadnosti xxx tepelně xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx existují, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Zpráva x xxxxxxxx
Xxx každý xxxxxxxxxxx patogenní xxxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx mléka xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" či "nepřítomnost" x objemu xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx požaduje xxxxxxx postup. Zpráva xxxx jasně xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.