Rozhodnutí Komise
ze xxx 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx směrnici Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x tepelně xxxxxxxxx xxxxxx uvnitř Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx pozměněnou xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x zejména xx xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x testování, xxxxx xx mají xxxxxxxx xxx kontrolu dodržování xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že pro xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx antibiotik;
vzhledem x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxx mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx nepřítomnosti xxxxxxxx, xxxxx koliformních xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX mléko xx xxxxxxxx stanovit zejména xxxxxx pro stanovení xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxx stanovit xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx určitých xxxxx; xx xx xxxxxxx nezbytné xxxxxxxxxx x prošetřování xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx; xx v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx členské xxxxx xx xx, xxx xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx analýzy x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx jednotného xxxxxxx výsledků;
vzhledem k xxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jsou x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX TOTO XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx mléko xxxx tyto:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx somatických buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 2
Referenční postupy xxxxxxx x testování xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx peroxidázy,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx kolonií xxx 30 °X,
- xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Referenční postupy xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx XXX xxxxx x sterilizované mléko xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxxxxx referenčních xxxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxx pravidel xxxxxxxxxxx v xxxxxxx X.
Článek 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx 1, 2 x 3 jsou popsány x příloze XX.
Xxxxxx 6
Xxxx rozhodnutí xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx vědeckých x xxxxxxxxxxx znalostí.
Článek 7
Toto xxxxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 14. xxxxx 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Sharry
člen Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. věst. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx. Příslušné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx použitá k xxxxxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxx musí xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo demineralizovaná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být bez xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Rozpouštěním" xxxx "xxxxxxx" (bez dalšího xxxxxxxxx) xx rozumí "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "ředění xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, všechny používané xxxxxxxxxx xxxx mít xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
3.1 Seznam xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek xxx xxxxx referenční xxxxxx se týká xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Analytické xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" se xxxxxx xxxx x přesností xxxxxx na 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx zprávě x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxx, xxxxx splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx příslušnou metodu. Xxxx xxxx toto xxxxxxxxx opakovatelnosti xxxxxxx, xxxx se xxxx xxxxxxxx, jinak xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx vypočítá v xxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxx.
5. Xxxxxxxx spolehlivosti: xxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnost
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx uvedená xxx xxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Opakovatelnost (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx se xxxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx výrobkem xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Reprodukovatelnost (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx leží xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx totožným xxxxxxxx x xxxx testovacím xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx pracovníci, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx opakovatelnosti x reprodukovatelnosti, uváděné x xxxxxxxxxxx odstavcích xxxxxxx xxxxxxx, představují 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx používají xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx tyto pokusy, xxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx případě xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx naplánovány x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx x testování
Zpráva x testování musí xxxxxxxx xxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx jiné xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx x metodě xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a všechny xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx všechny informace xxxxxxxxxx xxxxxx identifikaci xxxxxx.
XX. ODBĚR XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Předmět x oblast použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx postup xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx dodané xxxxxxxxxx a xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx skladované xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x bodech 2, 4.4, 5 x 6 xx použijí xxx odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. provedou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, kteří xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, vyškolí xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx, že odebrané xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx musí xxx xxxxx zhotoveno x xxxxxxxx oceli xxxx x jiného xxxxxxxx, xxxxxxxxxx odolného materiálu, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx použití (xxxxxxxxxx, xxxxx vzorků, xxx.). Xxxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx žluklé xxxxx. Naběračky xxxx xxx opatřeny xxxxxx, xxxxxxxxxx dlouhou rukojetí x nabírání xxxxxx x jakékoli xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx být xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx nádob x xxxxx) nesmí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx výsledky testů. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx čistý, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) xxxx splňovat xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x musí být xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx po každém xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx orgán, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx výsledků po xxxx xxxxxxxx vzorků.
4. Xxxxxxxx xxxxxx vzorků
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx testy, které xxxx být xxxxxxxxx, xxxxx musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx ručně, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxx ihned xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx ještě x pohybu.
Pokud se x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx více xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxx být odebrán xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxx tyto xxxxxx téměř xxxxxxxx xxxxxxx x při xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx obsah xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Ruční xxxxx xxxxxx
4.2.1 Odběr xxxxxx x xxxxx x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxxxx dbát na xx, aby xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x aby se xx xxxxx konve xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celou zásilku, xx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx mechanicky xxxx xxxxx dokud xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x misky xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx bylo xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx. Za xxxxxx xxxxxxxxx rovnoměrného rozdělení xxxx může být xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx objem xxxxxxx, x níž se xx odebrat xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx misky xxx, odebrat xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx množství xxxxx, x něhož xx xx xxxxxxx xxxxx vzorků, xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, x každé xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx. Xxxxx vzorky z xxxxx nádoby xxxxxx xxx xxxxxxxx testovány, xxxxxxxx xx jednotlivé xxxxx těchto xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v poměru x xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxx, xx xxxxx xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx se odebere xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) z xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – skladovací xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx vzorků xx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, skladovacích xxxxxx, xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx doporučuje mechanické xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx promíchání xxxxxx xx xxxx, xx kterou xxxx xxxxx v xxxxx. Xxxx xxx prokázáno, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vhodný xxx xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx značně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx provedených na xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď x různých xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx intervalech xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx z xxxxx. Xxxxxx promíchání xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mléka) xx účinný, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx menší xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx části xxxx x xxxxx vypouštění xxxxxx malé množství xxxxx, které xxx xx promíchání xxxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Proto se xxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx vytéci xxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxx xxxx zajištěna xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx obsahu xxxxxxx nádob xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, cisternových xxxxxxx x cisternových xxxxxx xx možné xxxxxxx:
- mechanickou míchačkou xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx,
- vrtulí nebo xxxxxxxxx poháněnou elektrickým xxxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx otvoru; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- x xxxxxxx cisternových xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx je napojena xx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx se minimální xxxx a xxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx odběr xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jiným xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx musí xxx před x xxxxx používání podrobeno xxxxxxxxxxx kontrolám, které xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx postupů xxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mléka, x xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx),
- schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx používání xxxxxxxxxxxxx nebo poloautomatického xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx příslušný xxxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx může xxx provedeno, xxxx xxxxxxxxx preventivní opatření, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx vzorků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx obchodní xxxxxx nebo z xxxxxxxxxxxx místnosti zařízení xxx ošetření, a xx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx (v xxxxxxx pasterovaného mléka x den xxxxxxxxx).
X xxxxxxx druhu tepelně xxxxxxxxxx mléka (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x sterilizovaného) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, xxxxx xxxx xxx provedena, x xx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kódem, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokyny xxxxxxxx xx lhůty x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxx x době xxxx xxxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxx, x to xx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx je třeba xxxx xx xx, xxx vzorky nebyly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx skladován ve xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx přepravovány x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx musí xxx xx nejkratší a x xxxxxx xxxxxxx xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx souhlasit, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX xx 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx v popisu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupů.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx peroxidázy
IV. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X
X. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °C
VI. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx obsahu somatických xxxxx
XXXX. Detekce antibiotik x sulfonamidů
IX. Detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, syrového, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizovaného xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), v xxxx xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx ochlazována xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx nahrazuje xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx typy xxxxxxxxx. První xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx začátku xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx druhů xxxxx, xxx i xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx použitých xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx plató. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx rutinního xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxx využít xxx odhad xxxxxx xxxxxxx cizí vody x mléce xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx vyšší xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx (viz xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx x souladu x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx (°C).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podchladí xx xxxxxxx xxxxxxx x mechanickou xxxxxxx xx vyvolá xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx způsobí, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx až x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx postupem xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx přesné xxxxxx xxx dva xxxxxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx mléka xx stupních Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx skládá z xxxxxxxxxxx xxxxxx chladicí xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx snímače (xxxxxxxxxxxxxx odporového xxxxxxxxx) x příslušným xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx jiného xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxxxx xx vzorky x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx i xx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx jakýmikoli dvěma xxxx v kapalině xxxxx xxxxx než 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v rozmezí ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx v xxxxx xxxx udržována konstantní xxxxxxx kapaliny. Xxxx xxxxxx zkumavky xx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx zkumavky xx vzorky xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Vhodnou chladicí xxxxxxxxx je 33 % (X/X) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (ethylenglykolu).
4.1.2 Xxxxxxxxx x příslušný xxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx sondy x xxxxxxxxxx průměru 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 mm. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxxxx xxx 2 sekundy a xxxxxxx b (xxx xxxxxxxx) xxxx být xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, aby xxx − 0,512 °X xxxxxxx termistoru stoupla xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Xxxxxxxxx tolerance xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx na vzorky x x bodě, xxxxx je 44,6 ± 0,1 mm xxx horním okrajem xxxxxxxx (viz xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxx, aby se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / dT × 1 / X = β / X2
xxx:
X je xxxxxxx xx stupních Xxxxxxx
X xx xxxxx x xxxxxx při xxxxxxx T,
− xX / dT × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx vyhledávání xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x přesností xx ± 0,002 xX xx dobu xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx vyrovnává Wheatstoneovým xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporů, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ± 10 % x xxxxxxx teplotní xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°C.
Proměnný (xxxxxxxxxxx) xxxxx se nesmí xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x celém xxxxxxx x xxxx než x 0,3 % xxx xxxxxxxxx hodnoty.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx stupnice xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx provoz
Odečítací zařízení xxxx xxxxxxx rozlišení xx nejméně 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx následujících xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx 0,001 °C.
Linearita xxxxxx xxxx xxx taková, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °X do – 0,600 °X xxxxx xxxxx než ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx míchání testovacího xxxxxx se použije xxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 xx 1,5 mm, který xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx na rozkmit x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx úrovni hrotu xxxxx termistoru. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx asi 1,5 mm xxx xx pod touto xxxxxxx.
Xxxxxxxx vibruje bočně x xxxxxxxxxxx rozkmitem xxxxxxx výrobce (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxx teplota xxxxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx. Xxxxx míchání xx xxxxxxxx nesmí v xxxxxx okamžiku xxxxxxxx xxxxx termistoru xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Zařízení xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolá mrznutí xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. K xxxx xxxxx xxx použít xxxxxxxx; xxxxxx postupem xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xx xxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx dotýkala xxxxx xxxxxxxx xx vzorky.
4.1.6 Xxxxxxxx xx vzorky
Zkumavky xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx a 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx průměr xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx nesmí xxxxx o více xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx okraje 29,8 xx (21 xx xxx dnem xxxxxxxx), xxxxx uvádí objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx musí xxx stabilizován buď xxxxxx nebo vně xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx váhy
4.3 Xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 xx, xxxxx A.
4.4 Sušárna, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická pec, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Exsikátor
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx destilovaná x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x zchlazená xx 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx oxid xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., jemně xxxxx, xxxxxx 5 hodin xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x xxxxxxxxxx peci xxxx xxxxxxx 24 xxxxx při teplotě 130 ± 1 °X x xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz tabulka 1) suchého xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Rozpustit x xxxxxxxxxxx vodě (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx odměrné xxxxx x xxxxxx 1000 xx a doplnit xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx nejdéle xxx xxxxxx při xxx 5 °C x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx o maximálním xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxx xxx 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx použitím xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx protřepáním x několikerým otočením xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, aby xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx do suché x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z lahví, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx prázdné, x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxx dvou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx nastaven tak, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx o xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx světlu, průvanu xxxx pokojovým xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx výrobce x xx xxx zapnut xxxxxxx 12 hodin xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx chladicích xxxxxxx.
Xxxxxx xxx standardní xxxxxxx (xxx tabulka výše), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx x testování. Xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx – 0,100 °C.
(U xxxxxxxxx xxxx x současné xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx příslušný xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xx dané xxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx měřícího xxxxxxxx. X těchto xxxxxxxxx výběr jednoho xxxxxxxxxxxx roztoku, který xx tento xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx, xxxx měřit pomocí xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (xxxxxx druh xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou vodou). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx stejné xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx provádět xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x kryoskopu xxxxxx roven bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx takovým xxxxxxxx, dokud xx xxxx xxxxxxxxxxx odečty xxx xxxxx roztok xxxxxxxxxx správné xxxxxxx xxxx xxxxxxx každého x nich, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx nastavení. Kryoskop xx xxxx xxxxxxxxx x použití a xxxxx ukazuje xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx úprava.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx to je xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx 0 °X a 5 °X.
7.2 Pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx všechna xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx tuhý xxxxxx xxx xx xxxxxx xx čisté x xxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, nesmí reagovat x mlékem x xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx teploty.
7.3 Xxxxx může být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx xx xxxxx xx ohřát xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxxx testování. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx xx to, xxx standardní roztoky x vzorky xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx kyselost xxxxx, xxxxx možno současně xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x kyseliny xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx stát xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx hladina x xxxxxxx chladicí xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, případně zda xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx se, xxx xx chladicí xxxxxxxx xxxxxxx míchá nebo xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx alespoň 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx míchačky x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx sérií xxxxx měřit bod xxxxxxx standardního xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x více xxx 0,001 °C. Xxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx než 0,002 °X, kryoskop xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx popsáno x xxxx 6.
Pokud se xxxxxxxx xxxxxxx nepřetržitě, xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx xx provádí nejméně xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx opatrným xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml xxxxx xx xxxxx x čisté zkumavky xx vzorky. Ujistit xx, že xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x suché, xxxxx xx to xxxxxxxx opatrně xx xxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx kalibrovaného xxxxxxxxx podle pokynů xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx při xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °C.
(U některých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; u ručních xxxxxxxxx xx nezbytné xxxxxxxxx dosáhne tím, xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxxx začalo, xxxx se ručička xxxx nitka galvanometru xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x jakéhokoli xxxxxx xxxxxxx začne xxxxx nebo později, xxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx teplotního rozmezí, xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx se x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Pokud xxxxx xxxxx vzorek xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, alikvótní xxxxx vzorku se xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx xx xxxxxxx xx xxxx teplotě, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx zchladit xxxxxx xx testovací xxxxxxx a ihned xxxxxxx testování. Teplota xxxxx xx začátku xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx dobu xxxxxxxxxx, x poté klesne. Xxx xxxxxxx odpovídá xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx doby x tuto hodnotu xx xxxxx zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx, a xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx maximální teploty, xx liší xxxxxx xx xxxxxx a xxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou podstatně xxxxxx než pro xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx vodou x xxxxx xxxxx x míchačku xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx je rozdíl xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), xxxxxxx druhé xxxxxxxxx u jiného xxxxxx. Pokud jsou xxxxxxx xxxx stanovení xxxxxx xx 0,004 °X, xxxxxx xx x použijí xx xxx výpočet konečného xxxxxxxx.
8.4 Chlazení xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zkumavku na xxxxxx na xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxx provozní teplotu, xxx sonda xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx kryoskopu xx xxxx xxxxx; v xxxxxxxx případech je xxxxxxxx se ujistit, xxx je sonda xxxx xxxxxxxx měření xxxxx zchlazena, například xxxxxxxxxx xxxxxxxx slepých xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx údaje.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, za xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx získaných xxx bod xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx tři xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxx přijatelných xxxxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxxxx xx liché xxxxx, je xxxxx xxxxxx zaokrouhlit xx xxxxxxxxx sudou xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Spolehlivost
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Reprodukovatelnost (R): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivity xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx, pokud xx xxxxx než 4 xx xxxxxx xx 1 ml.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx fenol x xxxxxxxxx fenylfosfátu dvojsodného. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx dibromindofenolu (namodralé xxxxx), xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx měří při 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx porovnání xx vzorkem, jehož xxxxx xxxxxxxxx byl xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Tlumivý xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxx xx vodě 50,0 x xxxxxxxxx barnatého (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.3 Zahřát 500 xx xxxxxxx xxxxxxx na 50 °X, xxx roztoky xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxx xx 20 °C, v xxxxxxx nutnosti xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení
Rozpustit xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X a 20,0 g xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Tlumivý roztok xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx zabarvení (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx substrátu
Rozpustit 0,1 g fenylfosfát xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx tlumivého xxxxxxx (4.1.3) nebo 0,5 x fenylfosfátu xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx kapky xxxxxxx BQC (4.6) x xxxxxx stát 30 xxxxx při xxxxxxxx teplotě. Vzniklé xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx n-butanolu x xxxxxx stát, dokud xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx dní; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x provést xxxxx xxxxxxxx. Tlumivý xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, a xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx roztoku ve 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) a 0,6 x síranu měďnatého (XxXX4 · 5H2O) x xxxxxxx xx 100 ml.
4.6 Roztok 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xx starší xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 x síranu xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx fenolu x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 ml, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku, xxxxxxx xx 100 ml x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx xxxxxx.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx pomůcky xx skla, xxxxx x xxxxx a xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx destilovanou xxxxx xxxx čistění parou.
b) Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx váhy
5.2 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °C.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx odečty xx vlnové xxxxx 610 nm.
5.4 Zkumavky, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 ml x 10 xx.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx nejméně 9 xx xxx střední xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx pro přípravu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Postup
Poznámky:
a) Xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Stopy xxxx xxxx potu xxxxx xxxxxxxx falešně pozitivní xxxxxxxx a xx xxxxx xx jim xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx ihned xx xxxxxx vzorků. X xxxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xx déle xxx dva xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx kontrolní xxxx xxxxx pokus.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý vzorek xxxxxxxx dvě xxxxxx xx xxxxxx xxxx; xxxxxxxx a kádinku x xxxxxx vodou xxxxxx hliníkovou xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Rychle xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx ošetřovat xxxxx x testovací vzorek xxxxxxx způsobem. Xxxxxx 10 ml roztoku xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Vzorky ihned xxxxxxxxx 60 minut xx xxxxx xxxxx (5.2) x xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx obsah.
6.3.4 Stejně xxxx x bodě 6.3.1 zahřívat xxx xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx papír, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx čirý; shromáždit 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx vyvolání xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Přidat 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx a 30 xxxxx nechat xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx absorbanci xxxxxxxxxxxx roztoku obsahujícího 20 μg xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx vzorku. Připravit xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx opatrně xxxxx xx varu, xxx se inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx kalibrační xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) připravit xxxxxxxxxx xxxx zředěných xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujících 0 (xxxxxxxxx xxxx slepý xxxxx), 2, 5, 10 a 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xx každé x pěti zkumavek xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 ml vody x 1 ml xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); promíchat.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx slepým xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Na základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx přidaného fenolu (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nejmenších xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx a xxxxxx
7.1.1 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx fenolu xxxxxx xxxxxxxx přímky (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx mililitr xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
Aktivita xxxxxxxxx = 2,4 × X × D
kde
A xx množství xxxxxx x μg xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx xxxxxx xxxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x případě xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 z 1 ml testovacího xxxxxx) – xxx 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (předběžně) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 a 7.2.2 se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nepřítomnosti xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, který slouží xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx pasterováno, do 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx žádné xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vodíku. Xxxxxxxx xxxxxxxx kyslík xxxxxxx xxxxxxxx parafenylendiamin na xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx úměrná xxxxxxxxxxx enzymu.
4. Činidla
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °C) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx x xxxxx, x xxxxx hnědé xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx jednoho xx xxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx vytvoří xxxxxxxxx, kterou xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx zředit 9 ml 30 % xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 100 ml. Pro xxxxxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx peroxidu xxxxxx xx stálý xxx xxxxx xxxxx, pokud xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxx zátkou, xxxxx xxxxxxx jakémukoli xxxxx x organickými xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx xxxxx xx čisté xxxxxxxx x xxxxxxx víčkem.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx promíchání xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 sekund xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx popisuje referenční xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií při 30 °X. Postup xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléko, xxxxx xxxx 15 xxx preinkubováno xxx 30 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx vytvářejí počitatelné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx za popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx stanovený xxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxxxx médiem x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 72 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 ml syrového xxxx pasterovaného xxxxx xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx sterilizovaného xxxxx nebo XXX xxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx teplotu 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Zvětšovací xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x pracující xx xxxxxxxx excentrické xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x promíchání 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 ml xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), skleněné xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x nepoškozeným xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx otvorem x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx skla xxxx sterilního syntetického xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx misek xx xxxx xxx xxxxxxx 10 mm. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx ze xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), nejméně xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx to, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx by xxxxxx být napevno xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx by xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – agar xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxx srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx odstředěným xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a rozpustit xx vodě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x nakonec xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx přidat agar x za xxxxxxx xxxxxxx uvést xx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx to je xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx přes xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH pomocí xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx nezbytné, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx do xxxxx xxxx po 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 minut xxxxxxxxxxxx v autoklávu (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx kultivační médium xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx teplotě xxxx 1 a 5 °X, xxxxx xx xxxx než 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium
Kultivační xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce, xxx přidat sušené xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X metodou xxxxx xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok pepton/sůl
Složení:
|
Pepton |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit složky xx vodě, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (nejméně 0,1 mol/l) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) do xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxx.
Xxxxx xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v temnu xxx xxxxxxx mezi 1 a 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx připravovat z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx rychle xxxxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) na 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
Vzorek xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx tvorbě xxxx nebo pěnu xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx přijít xx kontaktu s xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) do 9 xx ředidla (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx postup xxxxxxx xxx xxxxxx, dokud xxxxx očekávat xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho misek
7.5.1 Xxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 denní xxxxxxxx xxx 30 °X – směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, dokud médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx misky do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx obrácené xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx v xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Petriho miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx tlumeném xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné xxxx xx xx, aby xxxxxxx x záměně xxxxxx sraženin x xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx kolonii. Pokud xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 až 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů na 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣC xx xxxxxxx počet xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx xxxxxx ředěním
n2 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx ředění
d xx faktor xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx získány první xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxxxxxxxxx číslice pět, xxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx mikroorganismů xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx jsou všechny xxxxx vyšší xxx 300 x xxxxxxxx xx možné, provést xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx zředění. Xxxxxxxx xxxxxxxx jako "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 21 °C
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 21 °X v xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx se x mléce při 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pět dní xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx inkubovat 25 xxxxx při 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx všech xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx pro kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx počítadlo
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Zkumavky s xxxxxxxx uzávěry a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx pro skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx hrotem, x xxxxxxxxxx objemu 1 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx zajištěno dostatečné xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, tyto xxxxxx by neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo víčka xx měly být xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xx se měly xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx sterilizovány x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Toto xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxxxxx extrakt, xxxxxxx, xxxxxxx x nakonec xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Xxxx přidat xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxxxxxxx xxxx papír.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po sterilizaci xxxx jeho hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, sterilizace x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx nebo xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx sterilizovat v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 a 5 °X, avšak xx xxxx než 1 měsíc xx xxxx přípravě.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx složkou xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx x skladovat kultivační xxxxxx podle bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx pH roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx každá xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 ml xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX ředidla.
Pokud xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx. Upravit xX xxxxxxxx podle xxxx 6.1, poté rozdělit, xxxxxxxxxxxx a skladovat xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultivačního média x zchladit ve xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, reprezentativní xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 100 xx po xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx inkubaci xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx co nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem testovacího xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx přibližně xxxxxx xxxx teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 sekund xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) podle xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X cílem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě ředění. Xxx xxxxx ředění (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx misku.
7.6 Nalévání xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx xxxxx nalít xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Petriho misek
Přenést xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat kolonie x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx xx, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx za xxxxx kolonii. Xxxxx xxxxxxx tvořící povlak xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx v nepostižené xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pokrývají xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Použít výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x je xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 je xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x je faktor xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx byly získány xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx sudá.
Příklad:
Ředění 10−2: 278 a 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx mililitr xx "xxxxx xxx 10 × x", xxxxxxx "d" je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx je xxxxx, provést odhad x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx vyjádřit xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx ml".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx testů ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX OBSAHU XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX PŘI 30 °X
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x pasterovaném xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx bakteriemi" xx rozumějí xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo necharakteristické xxxxxxx, jež jsou xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx charakteristické xxxxxxx x, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx laktózu. Poté xxxxxxxxx počet koliformních xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx teploty, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací jehla xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými uzávěry x xxxxxxx 20 xx, aby xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx trubičky xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o xxxxxx 150 xx 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx selektivního xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr asi 90 až 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx žádné nerovnosti, xxxxx xx bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje v xxxxxxxx, xxxx nádoby xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Agar x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx (VRBL xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 x xxxxx želírovacích vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx složky xx xxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx minut. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxx, upravit xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxx byla jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxx xxxxxx do xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x ihned xxxxxx po xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx do xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx zchladit xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx médium xx xxx hodin xx xxxx přípravě.
5.2 Xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx žluč |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx x xxxxx xx varu.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Durhamovy xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx se x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne déle xxx 1 měsíc xx jeho přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, rozdělit, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační médium
Použít xxxxxx (VRBL agar) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Příprava xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, aby byly xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, a to 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx pěny nebo xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx mezi mícháním x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx by neměla xxxxxxxxx tři xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx přenést (4.2.3) 1 xx vzorku xxxxx do xxxxx xx xxx xxxxx (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx po xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx inkubaci xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou xxxxx x 12 ml xxxxx VRBL xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
Xx úplném xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx VRBL xxxxx (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
Nechat xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem nahoru. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Počítat xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 kolonií. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x průměru xxxxxxx 0,5 mm, x xxxx bez xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Pokud xxxx všechny nebo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. jinou xxxxx, velikost xxxx xxxx xxxx sraženin xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx údajů x xxxx 6.6.2 provést xxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxx počtu (např. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxx, xx se pomocí xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx obsahující xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
Za kolonie xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx kolonie, xxxxx x Durhamově xxxxxxxx tvoří xxxx.
7. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx výsledky xxxxx obsahujících maximálně 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx provede xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx potvrzených xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií.
7.3 Vypočítat xxxxx koliformních xxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx (6.3).
n je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice, pokud xxxxxxxx xxxx xxx 100 kolonií. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, uvést xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx dva xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx somatických buněk.
A. Xxxxxxxxxxxxx metoda
B. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx počtu somatických xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx správnosti xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (viz X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, například xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxx xx xxxxx zřetelně xxxxxxx methylenovou xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 ml xxxxx na 1 xx2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx daném xxxxxxx se vynásobí xxxxxxxxx xxxxxxxx, s xxxxx xxxxxx počet xxxxx na 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
|
1,1,1-trichlorethan nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx kyselina xxxxxx |
6 ml |
Upozornění
Tetrachlorethan xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx uskutečnit v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx x 1,1,1-trichlorethan xxxx tetrachlorethan x xxxxxx ve xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx methylenovou xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 hodin xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pórů 10 xx 12 xxxxxxx x uchovat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx vytvoření xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky ze xxxx
5.1 Xxxxxxxxx umožňující xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 xx x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 mm × 5 xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx standardní xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 20 × 5 xx pro xxxxxx vrstvu.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Ventilátor (xxx) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Vodní xxxxx, nastavitelná na 30 xx 40 °X pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Příprava xxxxxx x laboratoři
Zahřát xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) na 30 xx 40 °X. Xxxx řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, při xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, vysušit xxxxxxx, xxxxx nezanechává xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxx prachem.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx připraveného, xxx xx uvedeno výše. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx stříkačky, xxxxx xxxxxx do styku x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx xx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx úplného xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx do barvícího xxxxxxx (4). Sušit x, xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxxxx xxxxxxxx ventilátorem (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx tekoucí vody, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx tak, xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Kalibrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Počítání x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx počítání xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, a xx xxxxxx jádra, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxx xx v xxxxxxxxxxxxxx poli xxxxxxxxx xxxxxxx polovina. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx třetině xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxx, xxxxx xxxx vybrány xxxxx x xxxxxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vrstev x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxx provádět xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx části xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rovnoměrně.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx být rovněž xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x mechanických xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx počítání x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Variační koeficient xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx překročit 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, musí xxx xxxxx Poissonova xxxxxx xxxxxxxxx nejméně 400, xxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti.
Podle Xxxxxxxxxx rozdělení:
M = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x xx xxxxxxxxxx odchylka.
Variační xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / s nebo XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 ml xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx vypočítá podle xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx, které se xxxx xxxxxxx, xx 5 xx. Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole, jak xx xxxxxxxx podložním xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / x × x
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx vrstvy xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx získat xxxxx xxxxx na ml xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, který xx může po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz X.1) používat xxx xxxxxxxxx xxxxx somatických xxxxx x xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx mají x xxxxxxxx barvení xxxxxxx XXX minimální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) se xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx se xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx slouží xxxx xxxxxxxx sklíčko.
Každá xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx zesiluje x zaznamenává. Obsah xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Činidla
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx se xxxxxx xxxxxxx čistoty x.x.. Xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xx to xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 až 5,9. Xxxxxxx vodou na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx překročit xxxx dní.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ethidiumbromid xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx vzduchotěsně xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1) tak, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxx.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý xxxxxx (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 ml |
|
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit xxxxx xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx překročit xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx zařízení xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení xxxx xxx xxxx použitím xxxxxxxxxxx. Tím xx xxxxxxx vztah xxxx xxxxxxx částic, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, x prahovou xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx použití xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Vodní xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Zkumavka, x xxxxxxx uzávěrem, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxx teplotě xx zkumavce (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx konzervován, xxxxxxxx xx může xxxxxxx xx xx uplynutí 24 xxxxx po xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx by byl xxxxxx nízký. Skladovací xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx 6 °C.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx musí xxx provedena xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx konzervace xxxxxx xx provede xxxxxxxx jednoho x xxxxxx konzervačních xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx orthoboritá:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx nesmí xxx xxxxx než 0,6 x na 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx teplotě 6 xx 12 °X;
- dvojchroman xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku xxxxx xxx vyšší xxx 0,2 g xx 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 72 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx azidem xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X xxxxx po xxxx odběru x xxxxxxxx xx 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx bronopolem x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X xxxxx po xxxx xxxxxx x xxxxxxxx do 72 xxxxx xx jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx až 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx být dodrženy xxxxxx podmínky xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vod.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, se xx nadojení xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx asi 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x den xxxxxxxx xx bez předběžného xxxxxxxx nedoporučuje, neboť xxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxx xxx starý xxxxxx xx vodní xxxxx (5.2) xx xxx 40 °C. Xxxx xxxxxxxxx vzorek xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx do xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx xx xxxxxxxx ohřívání (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx důkladně xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx co xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozdělení xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vzorku jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x) a reprodukovatelnosti (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou k xxxxxxxxx.
Xxxxx, které xxxx x dispozici na xxxxxxx xxxxxx, umožňují xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx mezi 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu koeficientu 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 buněk/ml
(odpovídá xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola xxxxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx počítáním xxxxx pod mikroskopem xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x tepelně xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
X. Kvalitativní postup
Tento xxxxxx je počáteční xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x sulfonamidy. Popisovaný xxxxxx je xxxxxx x několika xxxxxxx, xxxxx xxxx založeny xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx organismu. Xxxxx xxxxxx byl xxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx postupu, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx postup
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx detekci xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx x x tepelně ošetřeném xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyšší než xxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx extrakt |
1 g |
|
|
Chlorid xxxxx |
5 g |
|
|
Agar |
10–15 g |
|
|
Voda |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx uvést do xxxx. Xxxxxxx xX xxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx po 100 xx do xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx šikmý xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx sodný |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, s xxxxxxxx trimethoprimu nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, aby xx xxxxxxxxxxx byla jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 mg |
|
nebo Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx v ethanolu xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) a doplnit xxxxx.
5.1.4 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx x sterilizovat xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx o 60 μx/xx (100 IU/ml), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx destilované xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x doplnit xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Připravit 75 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) přidáním 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) do 71 xx mléka xxx inhibičních xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 xx 5.2.3 xx měly být xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) ve vodě, xxxxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Rovněž xxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx bylo xxxxxxxxxx x prohlášeno xx xxxxxx inhibičních xxxxx; xxxx xxxxx se xxxxxxx xx lahví x zahřívá xx xxxxx xxxxxx na 100 °X, xxxx xx uloženo xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °C xx 6 °C xx xxxx xxxxxxx jednoho xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x kmenem X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x proužcích xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 48 hodin xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zátkou. Takto xxxxxxx zásobní xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) a xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx kulturou (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °C x xxxxxxx xx xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Petriho xxxxx (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látku xx celém povrchu xxxxxx zahnuté xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Při xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) xxxx xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx dvakrát x časovém intervalu xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx spór xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Láhev xxxxxxx x důkladně xxxxxxxxx. Xxxxxxx, které xxxxxx ihned xxxxxxxxxxx, xx se xxxx xxxxxxxxx x chladničce xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Po 16xx až 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx při 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 xxxxxxx na xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x pokud xxxxxxxx sraženiny xxxx xxxxxxxxx, xxxx by xx nahradit novou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxxxx kultury (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx zkumavek/ampulí
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx média (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx se xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx ampule, zatavením xxxxx. Nechat agarové xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx zkumavky/ampule 12 xxxxx ve svislé xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců xxx 0–6 °C, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx přípravě xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky xx xx xxxxxxxx otestují, xxxxxxx xx 24 xxxxx po xxxxxx, x do xx xxxx xx xxxxxxxx xxx teplotě 0-5 °X. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °až - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zkumavku/ampuli (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxx x testy (5.2 a 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx vzorku xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx každého vzorku xxxxxx vždy novou xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx bodu 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx bodu 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx vzorku xxxxx.
6.7 Xxxxxxx zkumavky/ampule x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx nejméně 2½ xx 2¾ xxxxxx do vodní xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x xxxxx lázně.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx agarového xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx antibiotik nebo xxxxxxxxxxx xx vzorku x xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx xx straně 39. Pokud zabarvení xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx purpurové, xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Částečné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo nepravidelné xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek ve xxxxxx x koncentracích xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx zabarvení agarového xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek v xxxxxxxxxxx organismu.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx kontrol, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spóry x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx testovacím materiálem.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Potvrdit xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 podle xxxxxx "X".
Xxxxx xx nezbytné xxxxxx mléka před xxxxxxxxxx skladovat, xxxx xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx.
X. Postup xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx koncentrace
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx, jakož xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx reakcí (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx různá xxxxxxxxxxx
Xxx A.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx postupem xxxxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx disku.
2.2 Xxxxx vzorek, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx byla xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamáza), xxxxxxxxx čirou xxxx xxxx vytvoří čirou xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx xxx penicilinázy, xxxxxxxxx xxxxxx je xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx penicilinu a xxxxxx antibiotika xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx není xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, inhibiční xxxxxx ve xxxxxx xxxxx není xxxxxxxxx, xxx může to xxx jiné reziduum [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, X.1.x) a 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx cloxacillin sodný, xxxxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxxx inaktivovány xxxxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx papírový xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx umístí na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx mikroorganismus po xxxxxxxx narušuje xxxxxxx xxxxxx. Čirá xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx jsou v xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx. Velikost xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xx koncentraci x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx x vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 80 ± 1 °C.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, o xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx asi 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x exsikátoru).
5. Xxxxxxxxxx média, standardní xxxxxxx, xxxxxx penicilinázy, xxxxxxx xxxxxxxxx organismus xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx bakteriologické xxxxx. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx inhibiční xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Živný xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx detekci inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (A.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání x xxxxxxx zcela xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx trimethoprimu nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx médium 15 minut při 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxx inhibičních xxxxx (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 IU/ml)
c) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx penicilinázy (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx roztok, xxxxxxx rozdělený xx xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx až xxxxx xxxxx xxx 0 °X až 5 °C.
Poznámka
Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx jednotná mezinárodní xxxxx. Pro účely xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx deset xxxxxxxx penicilinázy stačí xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx, zda xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx nutnosti xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx penicilinázou, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx zjistí, že xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Testovací xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx rozpustit xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx na 55 oC.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx částí xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x cílem získat xxxxxxx hustotu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, x důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx vyhřáté xx 55 °X, xxxxxxxxxx agarové xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 xx 0,8 xx vrstva. Xxx Xxxxxxx misku o xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Umístit Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx vodorovnost xx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx médium xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx média, xxxxxx xxxxx xx xxxxx a xxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx misky se xxxxxxx nejlépe xxxxx xxx xxx, ale xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dva xxxxx, xxxxx xx xxxxx xx přípravě xxxxx xx xxxxxxxxxx polyethylenového xxxx x xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X vzorků x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, poté xxxxxxx xxx 10 xx xxxxxx zahřátého xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx penicilinázy (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.2.1 Xxxxxxx papírový xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) pomocí xxxxx a xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx disku x lahvičku se xxxxxxx. Xxxxxxxx položit xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx napuštěné xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 mm x xx xxxxxx xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; při xxxxxx testu xx xxxxxxx nejméně xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx agarové xxxxxx x po xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx je xxxxxxxxx 2,5 až 5 hodin při 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx světla, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx kolem xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxx xx xxxxx.
6.2.6 Standardní xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx nejméně 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx velkost je xxxxxx xxxx xxxxx xxx velikost xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx dvojmo se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (6.1.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx možné xx xxxxxx xxxxx ponořit xxxx napuštěný xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x uložit xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Postup 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) až d).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný xxxxxx xxxxxx inhibičních xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxxxxxx x pro standardní xxxxxxx penicilinu.
7. Interpretace xxxxxxxx (viz 2)
7.1 Xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx zóna, xxx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vzorkem xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než xxxx xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2x)), xxxxxxxxx látka xx vzorku xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx krystalického xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku nepuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx hodnotě průměru xxxx xxxx kolem xxxxx se xxxxxxx xxxxx, mléko obsahuje xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx xxxxx inaktivovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx použité x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem xxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v tomto xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je cloxacillin xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx penicilinázou xx xxxxxxxxx podmínek x xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx jiné než xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx to xx xxxxxxxx, inhibiční xxxxx xxxx xxx penicilin xxxxx xxx identifikovány xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx může xxx provedeno xxx xx sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx výpočty xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx získaných xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, standardní xxxxxx lze xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx zón na xxxxxx. Xxxxxxxxx zóny xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Průměry xxxxxxxxxxx xxx se graficky xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx x zakreslí xx xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx vypočítat xx základě průměru xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxx. Pro přesné xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx pětkrát xxxxx xxx poloměr disků.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx xxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než 0,004 μg/ml (xxxx xxxxxxxx stanovené xxxxxxxxxxx) xxxx jako obsah xxxxxxxxxxx látek jiných xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou k xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx použití
V xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx XXX xxxx 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx pokyny, xxxxx xxxx být dodržovány, xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx provést x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx příčinou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx mléko xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx splněny normy xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, pokud jde x xxxxxxxx kolonií xxx 30 °X x 21 °C, xxxxxxxxxx bakterie a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx detekci patogeny xx nezbytný xxxxx xxxxx, xxxxx existuje xxxxxxxxx, xx mléko xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx otravy xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx a xxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x zdravotní xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx, pokud xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Xxxxxx x výsledku
Pro xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx takto:
Počet xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "nepřítomnost" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx postup. Xxxxxx xxxx jasně xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.