Xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/32/XX
xx xxx 7. xxxxxxxx 1995
x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx x významem xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX ze xxx 27. xxxxxxxx 1976 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx států xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 94/32/XX [2], x xxxxxxx xx čl. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx se xx směrnici 76/768/XXX xxxxxxx úřední xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx analýzy xxxx xxx stanoveny xx xxxxxxxx; že xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx přijaty xx xxxxxxxx Komise 80/1335/XXX [3] ve znění xxxxxxxx 87/143/EHS [4], xxxxxxxx 82/434/XXX [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] a xx směrnicích 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8] x 93/73/XXX [9];
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx salicylové a xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx směrnice 76/768/EHS xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx a kyseliny xxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx hydrochinonu, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x hydrochinonmonobenzyletheru xxxxxxxxx xxxxxxxx popsanými x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
1. Členské xxxxx uvedou x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 30. xxxx 1996. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx státy musí xxxxxxxxx xxxxx na xxxx směrnici xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx učiněn při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx členské xxxxx.
2. Xxxxxxx státy sdělí Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx předpisů, xxxxx xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx xxxx směrnice.
Článek 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx x platnost xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 7. července 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Bonino
členka Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Úř. věst. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Úř. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Úř. věst. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. věst. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Úř. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Úř. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. věst. X 231, 14.9.1993, x. 34.
XXXXXXX
X. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX, XXXXXXXX SALICYLOVÉ X KYSELINY XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xx použitelná xxx xxxxx a xxxxxxxxx kyseliny benzoové, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx jsou popsány xxxxxxx důkazu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x kyseliny xxxxxxxx.
2. Definice
Množství xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx stanovená xxxxx xxxxxxx se vyjádří x xxxxxxxxxxxx procentech xxxxxxx xxxxxxx.
X. DŮKAZ
1. Xxxxxxxx metody
Po xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxx analyzuje xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx (XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ("xxxxxxxxxxxx xx xxxxx"). V xxxxxxxxxx xx výsledcích xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou chromatografií (XXXX) nebo, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx chromatografií (XX).
2. Xxxxxxx činidla
2.1 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla musí xxx xxxxxxx x.x. Xxxx být použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň ekvivalentní xxxxxxx.
2.2 Aceton
2.3 Xxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Toluen
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx draselný, 4 X xxxxx xxxxxx
2.10 Xxxxxxx xxxxxxxx, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4hydroxybenzoová
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx se 0,1 % (x/X) roztoky (100 xx/100 xx) xxxxx z pěti xxxxxxxxxxxxx přísad (2.13 xx 2.17) x xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Derivatizační xxxxxxx
0,5 % xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) v xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 xx/10 xx). Tento xxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxx každý xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
0,3 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.11) xx xxxx (300 xx/100 xx). Xxxxx xxxxxx by měl xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/xxxxxx (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Xxxxxx xxxxxxx (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
3.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx teplotu 60 °X
3.2 Vyvíjecí xxxxxx
3.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx 254 x 366 xx
3.4 Hotové desky xxx chromatografii xx xxxxx xxxxxx, Silikagel 60, bez fluorescenčního xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, tloušťka xxxxxx 0,25 mm x xxxxxxxxxxxx zónou 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx ekvivalentní)
3.5 Mikrostříkačka xx 10 μx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx xx 25 μx
3.7 Xxxxxxx nastavitelná xx teplotu xx 105 °C
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 x 200 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx 90 xx, Schleicher &xxx; Xxxüxx, Weissband Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Univerzální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xX 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 ml
3.12 Rotační xxxxxxx xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.13 Xxxxx xxxxx
4. Postup
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.8) se odváží xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx 4 X kyseliny chlorovodíkové (2.8) x 40 xx xxxxxxx (2.2). X silně xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx mýdlo, by xxxx být přidáno 20 xxxxx 4 X xxxxxxxx chlorovodíkové (2.8). Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, zda je xX přibližně 2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xx xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx extrakci xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx fáze, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx 60 °X, aby xx xxxxxx fáze xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 200 xx, xxxxx se 20 xx xxxx a xxxxxxxx se. xX xxxxx se upraví xxxxxxxxx na 10 xxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.9) xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10).
Xxxxx xx 1 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx se xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx papír (3.9) xx xxxxxx nálevky xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) x xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x vodná xxxxxx xx odpustí do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 250 xx. Xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xX xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx 2 xxxxxxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2.8). Přidá xx 10 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3), xxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx jednu xxxxxx; xxxxxx xx nechají xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx převede xx xxxxxxx xxxxxxx (3.12). Vodná xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx sucha x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx v 1 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3). Xxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.11).
4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx koncentrační zóny xxxxx xxx chromatografii xx xxxxx xxxxxx (3.4) xx xx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxx analyzovány, nanese xxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxxxxx odstupech xxxx xx 3 μx xxxxxxxxxx lithného (2.20) x xxxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx na xxxxxx xxxxx (3.13) zahřátou xx 40 °C, xxx xx skvrny xxxxxxx co xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx startovní xxxxx xxxxx xxxxxx vždy 10 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x xxxxxxx xxxxxx (4.1) xxxxxx do xxxx, xxx xxx xxxxxxx uhličitan xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx přesně xx xxxx, xxx xxxx naneseny xxxxxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxx vzorku x xxxxxx xxxxxxxxxx lithného, xxxxxx přibližně 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.19) (xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx zahřívá x xxxxxxx (3.7) 45 xxxxx xxx 80 °C. Xx xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x komoře (3.2), xxxxx byla (xxx vyložení filtračním xxxxxxx) 15 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), dokud xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 80 minut).
Deska xx xxxxxx x xxxxxx studeného xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxx XX světlem (3.3). Xxx zesílení xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx do tekutého xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Xxxxx
Xxx xxxxxx skvrnu se xxxxxxx xxxxxxx Rf.
Hodnoty Xx x xxxxxxx xxxxxx xxx XX xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x přítomnosti x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx vysokoúčinná xxxxxxxxxx chromatografie xxxxxxx x xxxxxx X, xxxx xxxxxxx-xx xx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx propionová, provede xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x oddílu X. Xxxxxxx retenční xxxx xx xxxxxxxxx x retenčními xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx XXX x XXXX nebo XX se xxxxxxxxxx x xxx konečném xxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, KYSELINY SORBOVÉ X XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxxx metody
Vzorek xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vysokoúčinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (HPLC).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x. x xxxx xxx xxxxxx xxx XXXX. Xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx
2.3 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxx salicylová
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.7 Xxxxx xxxxx, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Xxxxxxxx octová, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Acetonitril
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 X
2.11 Xxxxxxxx draselný, 0,2 X xxxxx xxxxxx
2.12 Xxxxxxxx 2methoxybenzoová
2.13 Směs xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxx (2.2) xx xxxxxx x xxxxxx dílem xxxx (2:1)
2.14 Xxxxxx xxxxxxxxx standardu
Připraví xx xxxxxx xxxxxxxxxx 1 x xxxxxxxx 2methoxybenzoové (2.12) x 500 xx xxxxx ethanol/voda (2.13).
2.15 Xxxxxxx fáze xxx HPLC
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: xx 1 xxxxx xxxx xx xxxxx 6,35 g xxxxxx xxxxxxx (2.7) x 20,0 ml xxxxxxxx octové (2.8) x smíchá xx.
2.15.2 Xxxxxxx fáze se xxxxxxxx smícháním devíti xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (2.15.1) x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 ml xx xxxxxx naváží xxx 0,05 x xxxxxxxx 4hydroxybenzoové (2.3), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxx (2.5) x 0,05 x kyseliny sorbové (2.6) x objem xx doplní xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrných xxxxx xx 20 ml xx xxxxxx 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (2.16). Xx xxxxx xxxxx xx xxxxx 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (2.14) a 0,5 xx 2 X kyseliny xxxxxx (2.10). Objem xx xxxxxx směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x dále:
3.1 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx na 60 °X
3.2 Chromatograf xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx délkou a 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 12,5 xx 25 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Nucleosilem 5C18 xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx: 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx
3.7 Xxxxx kamínky, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx ekvivalentní
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx přidání xxxxxxxxx standardu
Do Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 xx (3.5) xx xxxxxx 1 g xxxxxx. Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 10 ml 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) a 40 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx se xxxxxx x xxxxx se xxxxxxx jednu minutu xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx extrakce konzervačních xxxxxx do xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx zahřívá přesně xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °C.
Erlenmeyerova xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x proudu xxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xx xxxxxx uloží při 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Asi 2 ml xxxxxxxx xx převedou xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx 5 °C x xxxxxxxxx pomocí XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 50 ml (3.5) xx x xxxxxxxxx xx tři desetinná xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 g xxxxxx (a xxxxx). Xxxxxxx se přidá 1,00 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) a 30,0 xx xxxxx ethanol/voda (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7) x 10 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx protřepává, dokud xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx usnadnění extrakce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx (3.1) při 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx zfiltruje přes xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx převedou xx vzorkovací lahvičky (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxx (2.15).
Průtok xxxxxxx xxxx kolonou se xxxxxxx na 2,0 ± 0,5 xx/xxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na 240 nm.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx po 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad (2.17). Pro xxxxx xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx píku xxxxxxxxxxx konzervační xxxxxxx x výšce xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x chromatogramů. Pro xxxxxx konzervační přísadu xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx poměru xxxxx xxxx xx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, že při xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx extraktu vzorku (4.1.1) x xxxxxxxxx xx chromatogram. Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx xx chromatogram. Xxxxxxxx chromatogramy xx xxxxxxxxx. Xxxx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx časem xxxx xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx vnitřní standard), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x chromatogramu xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx 2methoxybenzoová, xxx xx být xxxxxx xxxx vnitřní standard. (Xxxx-xx jedna z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad x chromatogramu xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx použít jako xxxxxxx xxxxxxxx.)
Xx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páru xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx separace xxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx požadované xxxxxxxx dosaženo, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx by xxxx xxx xxxxxxx mobilní xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Faktor xxxxxxxxx Xx všech xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx od 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx uvedena na xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx papíru xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Faktor xxxxxxxxx xxxx
- Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx použijí xxxxxx xxxxx píků xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx benzoové, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (m/m) = (100x 20 x x) / (106 x&xxxx; x) = b / (500 x x)
xxx
x = hmotnost xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (x),
x = koncentrace konzervační xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μg/ml) xxxxxxxx z kalibračního xxxxx.
6. Opakovatelnost [1]
Při xxxxxx kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,050 %.
Při xxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx 0,50 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,045 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx sorbové 0,60 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Výsledky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx tedy xxxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Je-li xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové x kosmetických prostředcích xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx stanovená touto xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (% m/m) výrobku.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx p.a; xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx, 96 % (V/V)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (x/X)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx se přesně xxxxxx 1 x (x xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx přesně xxxxxx 1 x (x xxxxx) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
5.1 Běžné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
5.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx zkumavka (20 × 150 xx) xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Vodní xxxxx xxxxxxxxx xx 60 °X
5.5 Skleněná xxxxxxxx xxxxxxxxx na 10 xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (průměr xxxx 0,45 μm)
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx skleněné xxxxxxxx (5.3) xx naváží xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxx se 0,5 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) a 9,5 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx nezbytné, xxxxxx xx xxxxxxxx xx pět minut xx xxxxx lázně xxxxxxx na 60 °X (5.4), xxx xx zcela xxxxxxxxxx xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx rychle xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes membránový xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx den.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s vnitřním xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) se x xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx. Přidá xx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4), 0,50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)a 9 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx to nezbytné, xxxxxx xx zkumavka xx xxx xxxxx xx xxxxx lázně xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx rozpustila xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx rychle xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxxx xxx.
6.2 Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx: 2 m
Průměr: ⅛"
Náplň: 10 % XX™ 1000 (xxxx xxxxxxxxxxxx) + 1 % X3XX4 na Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °X
Xxxxxx: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °X
Xxxxx xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 25 xx/xxx
6.3 Xxxxxxxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.5). Xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx odpipetuje 1,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kyselinu 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xx/xx (to xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx e = 1,000) a kyselinu xxxxxxxxxxx x koncentraci x/4, x/2, x, 2x, 4x mg/ml (xx xxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 mg/ml, je-li x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx vynesením xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxx x x poměru xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxx x.
Xxxxxxxxxx xx 3 dávky x xxxxxxx roztoku x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxxxx vzorku 6.1.1. Chromatogram xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Má-li xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx čas xxxx xxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx se vnitřní xxxxxxxx. Není-li pozorován xxxxx xxxxxx vliv, xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu vzorku 6.1.2 x změří xx plochy xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxx vnitřního standardu.
Nastříknou xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
7. Výpočty
7.1 X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.1 xx xxxxxx poměr xxxxxxxxx (X), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx ploch xxxx vypočtenému x xxxx 6.3.2.
7.2 Z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku (x) x hmotnostních procentech xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x x) =X(x / x)
xxx
X = poměr xxxxxxxxx x bodu 7.1,
x = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx bodu 4.6,
a = xxxxxxxx vzorku x gramech podle xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx místo.
8. Xxxxxxxxxxxxxx [2]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx neměl xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,12 %.
XX. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX, HYDROCHINONMONOMETHYLETHERU, HYDROCHINONMONOETHYLETHERU X HYDROCHINONMONOBENZYLETHERU V XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
X. XXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x.
3.1 Ethanol, 96 % (X/X)
3.2 Xxxxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Vyvíjecí xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (X/X)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (x420 = 0,91 x/xx)
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
3.7 Hydrochinon
3.8 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx roztoky
Následující xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx jeden xxx.
3.11.1 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx objem 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny askorbové (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx na xxxxx 10 ml (3.1).
3.11.3 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 ml xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) a 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x doplní se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 ml (3.1).
3.11.4 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx naváží 0,05 x hydrochinonmonobenzyletheru (3.10). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Kyselina xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Kyanoželezitan draselný xxxxxxxxxx
3.15 Chlorid xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Detekční xxxxxxx
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx roztoku (x/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxxxx xxxxxxx (3.5), dokud xx xxxxxxx xx sraženina xxxx nerozpustí.
Upozornění:
Při xxxxxx xxxxx se x xxxxxxx xxxxx výbušné xxxxxxxxxx a měl xx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxx dodekamolybdofosforečné (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx xx 1 % (m/V) xxxxx xxxxxx kyanoželezitanu draselného (3.14) a 2 % (x/X) vodný xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15). Těsně xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xx tenké vrstvě
4.2 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx XXX/XX254 (254 xx dolním xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 cm (Xxxxxxx, Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx). Tloušťka xxxxxx 0,25 xx.
4.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 XX xxxxx, 254 xx
5. Xxxxxx
5.1 Příprava xxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 3 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). xX xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.1) na 10 xx. Zkumavka xx xxxxxx zátkou x homogenizuje xx 10 xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxx 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx vrstvě (XXX)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx vyvíjecím rozpouštědlem (3.4).
5.2.2 Xx desku xx xxxxxx xx 2 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) x 2 μl roztoku xxxxxx (5.1). Vyvíjí xx ve xxx xxx xxxxxxx okolí, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzdálenosti 15 xx od xxxxxx.
5.2.3 Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx vyschnout xxx pokojové teplotě.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxx xx xxxxxxxx pod XX xxxxxx při 254 xx x xxxxxx xxxxx se označí.
5.3.2 Xxxxx xx postříká
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- kyselinou xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); xxxxxxx xx xx asi 120 °X, nebo
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx chloridu xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx Xx každé xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx vzorku se xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx pro referenční xxxxxxx, pokud xxx x xxxxxx xxxxxxx Xx, xxxxx xxxxx x XX xxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (X) x porovnají xx retenční časy xxxxxxx pro xxx (xxxx) vzorku x xxxxxxxxxx xxxx píků xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx x XXX a XXXX xx xxxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxx přítomnost xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx Rf:
hydrochinon: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,55
hydrochinonmonobenzylether: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Rozsah x oblast xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx prostředcích xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx je extrahován xxxxx xxxx/xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Stanovení xxxxxxx xx xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x obrácenou xxxx s UV xxxxxxx.
3. Xxxxxxx činidla
3.1 Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx xxx čistoty x.x. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Methanol
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Hydrochinonmonomethylether
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (monobenzon)
3.7 Tetrahydrofuran, xxxxxxx xxx XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Smíchá xx xxxxx xxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: xxxx tetrahydrofuran/voda 45:55 (X/X). Xxxxxx xx 45 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 55 dílů xxxx.
3.10 Xxxxxxxxxx roztok
Do odměrné xxxxx xx 50 xx xx naváží 0,06 g xxxxxxxxxxxx (3.3), 0,08 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx xx x doplní xx na objem xxxxxxxxxx (3.2). Referenční xxxxxx se připraví xxxxxxxx 10 ml xxxxxx roztoku xx 50 xx směsí xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx xx připravují xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
4.1 Vodní xxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx délkou x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Analytická kolona:
Chromatografická xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx, délka 250 xx, xxxxxxx průměr 4,6 xx, plněná Xxxxxx xxxxxxx (chemicky xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxx SIL, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), velikost částic 6 μx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, x výjimkou xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx x ekvivalentní náplní.
4.4 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Postup
5.1 Příprava xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx x přesností xx tři desetinná xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x (x gramů) xxxxxx. Xxxxxx xx rozptýlí xx 25 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx xxxxxx x silně xxxxxxxx, xxxxx se nevytvoří xxxxxxxxx suspenze. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx na xxxxx xxxxx (4.1) nastavenou xx 60 °C, xxx xx usnadnila xxxxxxxx. Baňka xx xxxxxxx x xxxxxx xx xx objem xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx xx zfiltruje xxxx xxxxxxxxx xxxxx (4.4). Xxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx od xxxxxxxx extraktu.
5.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Průtoková xxxxxxxx xxxxxxx fáze (3.9) xx upraví xx 1,0 xx/xxx x vlnová xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xx 10 μx roztoku xxxxxx xxxxxxxxx podle xxxx 5.1 a xxxxxxxxx xx chromatogram. Xxxxx xx plochy píků. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3. Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx x referenční xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx použijí xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxxx podle xxxx 5.2.3.
5.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se 10 μx referenčního xxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx se provede xxxxxxxxxx, dokud xxxx xxxxxx xxxx konstantní.
Stanoví xx faktor xxxxxx XXx (x xx xxxxxx xxxxxxx RF):
RFi = pi /xx
xxx
xx = plocha píku xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 xx).
Xx xxxxx xxxxxx, zda chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- separace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx uvedena xx xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx dosaženo, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx kolona xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx mobilní xxxx xxxxxxxx tak, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Faktor xxxxxxxxx Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx pohybovat xx 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2:Xxxxxx asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx.
6. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx vzorku xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vzorku xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) se xxxxxxx pomocí xxxxxx
xx % (x/x) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx,
xx = xxxxxx xxxx xxxxxxx i xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx hydrochinonmonomethyletheru 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx obsahu hydrochinonmonobenzyletheru 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Při xxxxxx hydrochinonu 2 % xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) překročit 0,37 %.
8.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx stanovení provedených xx xxxxxxx vzorkem xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx přístroje xxxx různá xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx obsahu hydrochinonmonoethyletheru 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, různí xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx přístroje xxxx xxxxx xxxx) překročit 0,19 %.
8.4 Při xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xx různých xxxxxxxx (různé laboratoře, xxxxx experimentátoři, xxxxx xxxxxxxxx nebo různá xxxx) překročit 0,11 %.
9. Poznámky
9.1 Jestliže xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyšší xxx 2 % x xx xxxxxxxxx xxxxxx odhad obsahu, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx (5.1) xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 % hydrochinonu, x stanovení xx xxxx být xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx přístrojů může xxx vysokých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx hodnota xxxxxxxxxx mimo xxxxxxxx xxxxxx detektoru.)
9.2 Xxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx hydrochinonu x xxxx xxxxxx x jednom xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zajistí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, kterou xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx X18 x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
X xxxx metody xxxx snadno xxxxxxx x xxxxxxxx vlivu xxxx xxxx parabenů. X takovém případě xx stanovení xxxx xxx xxxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx fáze. Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx x literatuře x xxxxxxxx 2 x 3:
Xxxxxx: Zorbax XXX, 4,6 mm × 25 xx xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx fáze:
pro xxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 5/95 (X/X)
xxx hydrochinonmonomethylether: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (V/V)
pro xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Xxxxxxxxxx X5XXX xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (V/V)
průtok: 1,5 ml/min
Tyto xxxxxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] ISO 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] XXX 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, X., Xxxxx M.-O., Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx de x’xxxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx cosmétiques xxxx xxxxxxxx xx xxxx. Xxx. J. Xxxxxx. Xxx., 8-203-214 (1986).
[6] Firth, X., Xxx I., Xxxxxxxxxxxxx xx hydroquinone in xxxx xxxxxx creams, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.