Xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/32/XX
xx dne 7. xxxxxxxx 1995
x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx
(Xxxx x významem xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX xx dne 27. xxxxxxxx 1976 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 94/32/XX [2], x xxxxxxx na čl. 8 xxxx. 1 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx se xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx úřední xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx dodržení xxxxxxxx předepsaných předpisy Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xx všechny xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx nejdříve; xx xxxxxxx metody xxx xxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/EHS [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx 82/434/EHS [5] xx znění směrnice 90/207/XXX [6] a xx xxxxxxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8] x 93/73/XXX [9];
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích x xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonoethyletheru x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx prostředcích xxxx xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxxxxxx pokroku,
PŘIJALA TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx úředním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- důkaz x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metodami popsanými x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx právní a xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx dosažení souladu x touto směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx opatření xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx odkaz xx xxxx směrnici nebo xxxx takový xxxxx xxx xxxxxx při xxxxxx úředním vyhlášení. Xxxxxx odkazu xx xxxxxxx členské státy.
2. Xxxxxxx xxxxx sdělí Xxxxxx xxxxx vnitrostátních xxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx xxxx směrnice.
Xxxxxx 3
Tato směrnice xxxxxxxx x platnost xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 7. xxxxxxxx 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Komise
[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Xx. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Úř. věst. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Úř. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Xx. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Úř. věst. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
PŘÍLOHA
I. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX BENZOOVÉ, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXXXXX X KYSELINY XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx důkaz x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx propionové x kosmetických xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx popsány xxxxxxx důkazu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx salicylové, xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Definice
Množství xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx salicylové, kyseliny xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx stanovená touto xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx procentech xxxxxxx xxxxxxx.
X. DŮKAZ
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (TLC) x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ("derivatizace xx xxxxx"). V xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx důkaz xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx, x xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Obecně
Všechna xxxxxxx činidla xxxx xxx xxxxxxx p.a. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxx
2.3 Xxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Toluen
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, tekutý
2.8 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx draselný, 4 X vodný xxxxxx
2.10 Xxxxxxx xxxxxxxx, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4hydroxybenzoová
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx sorbová
2.17 Xxxxxxxx propionová
2.18 Referenční xxxxxxx
Xxxxxxxx se 0,1 % (x/X) xxxxxxx (100 mg/100 ml) xxxxx x pěti xxxxxxxxxxxxx přísad (2.13 xx 2.17) x xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
0,5 % roztok 2brom2‘acetonaftonu (2.12) x acetonitrilu (2.4) (50 mg/10 xx). Tento roztok xx xxx xxx xxxxxxxxxxx každý týden x xxxxxxxxx v xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx katalyzátoru
0,3 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.11) xx xxxx (300 xx/100 xx). Xxxxx xxxxxx xx měl xxx připravován čerstvý.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/aceton (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Xxxxxx parafin (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx
3.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx teplotu 60 °X
3.2 Xxxxxxxx komora
3.3 Xxxxx ultrafialového světla 254 a 366 xx
3.4 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, Xxxxxxxxx 60, bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx 2,5 × 20 xx (Merk 11845 xxxx ekvivalentní)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μl
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx xx 25 μx
3.7 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx až 105 °X
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 x 200 xx xx xxxxxxxxxxx zátkou
3.9 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx &xxx; Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx. 5892, nebo xxxxxxxxxxxx
3.10 Univerzální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pH 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx na 5 xx
3.12 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (Rotavapor xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.13 Xxxxx xxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 ml xx xxxxxxxxxxx zátkou (3.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8) x 40 xx acetonu (2.2). X silně xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx xxxxx, by xxxx xxx xxxxxxx 20 kapek 4 X xxxxxxxx chlorovodíkové (2.8). Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, zda xx xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx baňka se xxxxxx a po xxxx xxxxx minuty xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx extrakci xxxxxxxxxxxxx přísad xx xxxxxxxxx fáze, směs xx opatrně xxxxxxx xx xxx 60 °X, xxx xx xxxxxx xxxx rozpustila.
Roztok xx xxxxxxx na xxxxxxxxx teplotu a xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx Xxxxxxxxxxxxx baňky.
20 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Erlenmeyerovy baňky xx 200 xx, xxxxx xx 20 xx xxxx x xxxxxxxx xx. xX xxxxx xx upraví xxxxxxxxx na 10 xxxxxx 4 M xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.9) xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10).
Xxxxx se 1 x chloridu xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx přes xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx xxxxxx nálevky xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) a xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x vodná xxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 250 ml. Etherová xxxxxx se zlikviduje. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xX vodného xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx 2 xxxxxxxxxx 4 X xxxxxxxxx chlorovodíkovou (2.8). Xxxxx se 10 ml xxxxxxxxxxxxx (2.3), xxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx minutu; xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x etherová xxxxxx xx převede xx xxxxxxx xxxxxxx (3.12). Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x 1 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3). Xxxxxx se převede xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.11).
4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě
Na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx zóny xxxxx xxx chromatografii xx tenké xxxxxx (3.4) se xx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx referenčních xxxxxxx x roztoků xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx (3.5) ve xxxxxxxx xxxxxxxxx vždy xx 3 μx xxxxxxxxxx lithného (2.20) x vysuší xx x proudu xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx topnou xxxxx (3.13) xxxxxxxx xx 40 °X, xxx se xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) se xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx nanese xxxx 10 μl xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x roztoku xxxxxx (4.1) přesně do xxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxx, xxx xxxx naneseny xxxxxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.19) (xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x sušárně (3.7) 45 minut xxx 80 °X. Po xxxxxxxxxxx se deska xxxxxx x komoře (3.2), xxxxx xxxx (xxx xxxxxxxx filtračním xxxxxxx) 15 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), dokud xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 80 xxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí xxx XX světlem (3.3). Xxx zesílení xxxxxxxxxxxx xxxxxxx skvrn může xxx chromatografická xxxxx xxxxxxxx xx tekutého xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Xxxxx
Xxx xxxxxx skvrnu xx xxxxxxx hodnota Xx.
Xxxxxxx Xx x chování xxxxxx xxx XX xxxxxxx se xxxxxxxxx x hodnotami x xxxxxxxx referenčních vzorků.
Učiní xx xxxxxxxxx závěry x přítomnosti x xxxxxx konzervačních přísad. Xxxxxxx xx vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx B, xxxx xxxxxxx-xx xx, xx je xxxxxxxx xxxxxxxx propionová, provede xx plynová xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x oddílu X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x retenčními xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx TLC x HPLC xxxx XX se xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX BENZOOVÉ, KYSELINY 4XXXXXXXXXXXXXXX, KYSELINY XXXXXXX X KYSELINY XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xx okyselení xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Reakční xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx musí být xxxxxxx p.a. a xxxx xxx xxxxxx xxx HPLC. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx voda xxxxxxx ekvivalentní xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx
2.3 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxx salicylová
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.7 Xxxxx xxxxx, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Kyselina xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 X
2.11 Xxxxxxxx draselný, 0,2 X xxxxx xxxxxx
2.12 Xxxxxxxx 2methoxybenzoová
2.13 Xxxx xxxxxxx/xxxx
Xxxxx dílů xxxxxxxx (2.2) se xxxxxx x jedním xxxxx xxxx (2:1)
2.14 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx 1 x xxxxxxxx 2methoxybenzoové (2.12) v 500 xx směsi xxxxxxx/xxxx (2.13).
2.15 Xxxxxxx xxxx xxx XXXX
2.15.1 Acetátový xxxx: xx 1 xxxxx xxxx xx xxxxx 6,35 x xxxxxx xxxxxxx (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx octové (2.8) x xxxxxx xx.
2.15.2 Xxxxxxx fáze xx xxxxxxxx smícháním devíti xxxx xxxxxxxxxxx pufru (2.15.1) x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (2.9).
2.16 Xxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx přesně xxxxxx xxx 0,05 x xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx (2.3), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x xxxxxxxx benzoové (2.5) x 0,05 x xxxxxxxx xxxxxxx (2.6) x objem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx uchovává x xxxxxxxx. Roztok je xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrných baněk xx 20 ml xx xxxxxx 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (2.16). Xx každé baňky xx přidá 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (2.14) x 0,5 xx 2 X kyseliny xxxxxx (2.10). Objem se xxxxxx směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Tyto roztoky xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
3.1 Vodní xxxxx, xxxxxxxxx na 60 °X
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x UV xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx ocel, xxxxx 12,5 xx 25 cm, xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Nucleosilem 5X18 xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx papír, průměr: 90 xx, Schleicher xxx Schüll, Weissband Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Erlenmeyerovy baňky xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx
3.7 Xxxxx kamínky, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx vzorku
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu
Do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx (3.5) se xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx 10 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 40 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx jednu minutu xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx přesně xxx minut na xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x proudu xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (3.4). Asi 2 xx extraktu xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.6). Xxxxxxx se uchovává xxx 5 °X x xxxxxxxxx pomocí XXXX se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx vnitřního standardu
Do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx (3.5) xx x xxxxxxxxx xx xxx desetinná xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx (x gramů). Xxxxxxx se přidá 1,00 ml 2 X kyseliny xxxxxx (2.10) x 30,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (3.7) x 10 xx xxxxxxx vnitřního standardu(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx alespoň xxxxx xxxxxx protřepává, dokud xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx se Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx pět xxxxx xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxx ochladí x xxxxxx xxxxxxx vody x xxxxxxx xx xxxxx na hodinu xxx 5 °C.
Extrakt xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx papír (3.4). Xxx 2 ml xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Extrakt se xxxxxxxx xxx 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx HPLC xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxx (2.15).
Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx 2,0 ± 0,5 xx/xxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na 240 xx.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx nastříkne xx 10 μl standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad (2.17). Xxx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx výšky xxxx xxxxxxxxxxx konzervační xxxxxxx x xxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx poměru xxxxx xxxx xx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, xx xxx xxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Stanovení
Do xxxxxxxxxxxx chromatografu (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx vzorku (4.1.1) x zaznamená xx chromatogram. Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx chromatogramy se xxxxxxxxx. Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx extraktu xxxxxx (4.1.1) xxxxx xxx x přibližně stejným xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx vnitřní standard), xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx extraktu xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.1.2) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxx-xx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx tuto xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx standard.)
Je xxxxx xxxxxx, zda xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx standardní xxxxxx x xxxxxx xxxxxx splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- separace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx uvedena xx xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx píků
Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx by xxxx xxx složení mobilní xxxx xxxxxxxx xxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Faktor xxxxxxxxx Xx všech získaných xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Faktor asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx.
5. Výpočet
Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxx píků xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad x xxxxx píku xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx) a dále xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (x/x) = (100x 20 x x) / (106 x x) = b / (500 x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (x),
x = koncentrace xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6. Xxxxxxxxxxxxxx [1]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,050 %.
Při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,045 %.
Při xxxxxx xxxxxxxx sorbové 0,60 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx testování xxxxxxxxxxx xxxxxx ukazují, xx xxxxxxxx kyseliny xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx kyselin ze xxxxxx je xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx zpracovávaného xxxxxx by xxxx xxxx xxx x xxxxxxxxxxx rozmezí.
7.2 Xx-xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx pro xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Definice
Koncentrace kyseliny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx xx xxxxxxx x procentech hmotnosti (% x/x) xxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx stanovení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty p.a; xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx xxxxxxx ekvivalentní xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2methylpropionová
4.4 Xxxxxxxx trihydrogenfosforečná, 10 % (x/X)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx odměrné xxxxx na 50 xx xx přesně xxxxxx 1 g (x xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 g (x gramů) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení a xxxx:
5.2 Xxxxxxx chromatograf x xxxxxxxxxx ionizačním xxxxxxxxxx
5.3 Skleněná xxxxxxxx (20 × 150 xx) xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Vodní lázeň xxxxxxxxx na 60 °X
5.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 10 xx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxx 0,45 μx)
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Příprava xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx zkumavky (5.3) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxx se 0,5 ml kyseliny xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 xx ethanolu (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x silně xxxxxxxx. Xxxx xx nezbytné, xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxx lázně xxxxxxx xx 60 °X (5.4), aby xx xxxxx rozpustila xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx xxxxxx zchladí xxx xxxxxxx vodou. Xxxx roztoku se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se provede xxxxxx xxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) xx x xxxxxxxxx na 3 xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,5 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4), 0,50 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)a 9 xx ethanolu (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx protřepe. Xxxx to xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx xxxxx xx vodní xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), aby xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx tekoucí xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.2 Podmínky xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx: 2 m
Průměr: ⅛"
Xxxxx: 10 % XX™ 1000 (xxxx ekvivalentní) + 1 % X3XX4 xx Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °X
Xxxxxx: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °C
Nosný xxxx: dusík
Průtoková rychlost: 25 ml/min
6.3 Xxxxxxxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx roztoku kyseliny xxxxxxxxxx (4.5). Xx xxxxx xxxxxxx baňky xx xxxxxxxxxx 1,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxx. Takto xxxxxxxxxx xxxxxxx obsahují xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxxx jako vnitřní xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x mg/ml (xx xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx x = 1,000) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x/4, x/2, p, 2x, 4x xx/xx (xx xxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 xx/xx, je-li x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx osu x x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx píků na xxx x.
Xxxxxxxxxx xx 3 dávky x xxxxxxx roztoku x xxxxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxx píku.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Má-li xxx přibližně stejný xxxxxxxx xxx jako xxx kyseliny 2methylpropionové, xxxxx xx vnitřní xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxxxx vzorku 6.1.2 a změří xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx propionové a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 dávky x každého xxxxxxx x vypočte xx xxxxxx poměrů ploch xxxx.
7. Výpočty
7.1 X xxxxxxxxxx křivky sestrojené xxxxx xxxx 6.3.1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (K), který xxxxxxxx xxxxxx ploch xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx získaného xxxxxx xxxxxxxxx se vypočte xxxxx xxxxxxxx propionové xx xxxxxx (x) x hmotnostních procentech xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x a) =X(x / a)
kde
K = xxxxx xxxxxxxxx x xxxx 7.1,
x = xxxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxx 4.6,
x = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx podle xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
8. Opakovatelnost [2]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) by neměl xxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,12 %.
II. XXXXX A XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X HYDROCHINONMONOBENZYLETHERU V XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
X. XXXXX
1. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxx.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx (TLC).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx xxx xxxxxxx x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
3.2 Chloroform
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (X/X)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (d420 = 0,91 x/xx)
3.6 Kyselina xxxxxxxxx
3.7 Xxxxxxxxxxx
3.8 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (monobenzon)
3.11 Xxxxxxxxxx roztoky
Následující xxxxxxxxxx xxxxxxx xx připravují xxxxxxx x jsou xxxxxxxx jeden xxx.
3.11.1 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonmonomethyletheru (3.8). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x doplní xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.3 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.4 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.10). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) a 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 ml (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Detekční xxxxxxx
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx roztoku (x/X) xxxxxxxxx stříbrného (3.12) xx přidává xxxxxxx (3.5), xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx nerozpustí.
Upozornění:
Při xxxxxx xxxxx xx v xxxxxxx tvoří xxxxxxx xxxxxxxxxx x měl xx xxx po xxxxxxx zlikvidován.
3.16.2 10 % (m/V) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx xx 1 % (x/X) xxxxx xxxxxx kyanoželezitanu draselného (3.14) x 2 % (m/V) vodný xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15). Těsně xxxx xxxxxxxx se smíchají xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx, x dále:
4.1 Běžné xxxxxxxx xxx chromatografii xx xxxxx xxxxxx
4.2 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx XXX/XX254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx.
4.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 XX xxxxx, 254 nm
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx se xxxxxx 3 x xxxxxx. Přidá xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). pH xxxxxxx xx upraví amoniakem (3.5) na 10. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.1) na 10 ml. Zkumavka xx xxxxxx zátkou x xxxxxxxxxxxx se 10 minut v xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxxx xxx 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx komora se xxxxxx vyvíjecím xxxxxxxxxxxxx (3.4).
5.2.2 Na xxxxx xx xxxxxx xx 2 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) a 2 μl roztoku xxxxxx (5.1). Vyvíjí xx xx xxx xxx teplotě okolí, xxxxx xxxx rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx od xxxxxx.
5.2.3 Xxxxx xx vyjme, xxxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxx xx xxxxxxxx pod XX xxxxxx xxx 254 xx a poloha xxxxx xx xxxxxx.
5.3.2 Xxxxx xx postříká
- xxxxxxxxxx stříbrným (3.16.1), xxxx
- kyselinou xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); xxxxxxx xx xx xxx 120 °X, xxxx
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx draselného x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx Xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx vzorku xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx pro referenční xxxxxxx, pokud jde x xxxxxx xxxxxxx Xx, xxxxx skvrn x UV xxxxxx x barvu xxxxx xx xxxxxxxxxxxx detekčním xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie popsaná x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (X) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx pík (xxxx) xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
Výsledky x XXX x HPLC xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx Xx:
xxxxxxxxxxx: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
hydrochinonmonoethylether: 0,55
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,58
X. STANOVENÍ
1. Rozsah x xxxxxx použití
V xxxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonoethyletheru x hydrochinonmonobenzyletheru x xxxxxxxxxxxx prostředcích pro xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx voda/methanol za xxxxxxx zahřátí, xxxxxx xx xxxxxxxx tukový xxxxxxxx. Stanovení analytů xx xxxxxxxxx roztoku xx provede xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x UV xxxxxxx.
3. Reakční činidla
3.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Musí být xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx voda alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Methanol
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxx XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Xxxxxx xx xxxxx xxx vody x xxxxx díl xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: směs xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx 45:55 (X/X). Smíchá xx 45 dílů xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 55 xxxx xxxx.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx 0,06 g hydrochinonu (3.3), 0,08 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x hydrochinonmonoethyletheru (3.5) x 0,12 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx xx x doplní xx xx objem xxxxxxxxxx (3.2). Referenční xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 ml xxxxxx xxxxxxx xx 50 xx směsí xxxx/xxxxxxxx (3.8). Tyto xxxxxxx se připravují xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x dále:
4.1 Vodní xxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografii x XX xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx vlnovou xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 250 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxx fenylem (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx na Xxxxxxx XXX, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), velikost xxxxxx 6 μx, nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx fenylové xxxxxx xxxx kolony x ekvivalentní xxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 mm, Xxxxxxxxxx xxx Schüll, Weissband Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx s xxxxxxxxx xx tři xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 g (x xxxxx) vzorku. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx 25 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx se xxxxxx x xxxxx protřepe, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xx na xxxxx xxxxx voda/methanol (3.8). Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (4.4). Důkaz XXXX xx provede xx 24 xxxxx od xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Průtoková xxxxxxxx mobilní fáze (3.9) xx xxxxxx xx 1,0 xx/xxx x xxxxxx délka xxxxxxxxx xx nastaví xx 295 nm.
5.2.2 Xxxxxxxxx se 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Změří xx plochy xxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.2.3. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx roztoky. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3.
5.2.3 Kalibrace
Nastříkne se 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx provede xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx faktor xxxxxx XXx (i xx xxxxxx xxxxxxx RF):
RFi = xx /ci
kde
pi = xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethylether, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = koncentrace xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 xx).
Xx xxxxx xxxxxx, xxx chromatogramy xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx odděleného páru xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx požadované xxxxxxxx xxxxxxxx, měla xx xxx buď xxxxxxx účinnější xxxxxx xxxx by xxxx xxx složení xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxx požadavek xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx získaných xxxx xx se xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 cm/min.
Obrázek 2:Xxxxxx xxxxxxxxx píku
- Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
6. Výpočet
Pro výpočet xxxxxxxxxxx analytu (xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxxx xx použijí xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vzorku xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (x/x) = (xx x 100) / (RFi x x)
xxx
x = hmotnost xxxxxx x gramech,
bi = plocha píku xxxxxxx x ve xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2,0 % by xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx obsahu hydrochinonmonomethyletheru 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx hydrochinonmonoethyletheru 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, různé xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,37 %.
8.2 Při xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx přístroje xxxx různá xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (různé xxxxxxxxxx, různí xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx přístroje xxxx xxxxx doba) xxxxxxxxx 0,19 %.
8.4 Xxx xxxxxx hydrochinonmonobenzyletheru 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou stanovení xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, xxxxx xxxxxxxxx xxxx různá xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxx výrazně vyšší xxx 2 % x je xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx být xxxxxxx vzorku (5.1) xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxxx obsahující 2 % xxxxxxxxxxxx, x stanovení by xxxx xxx opakováno.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx vysokých koncentracích xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx lineární xxxxxx xxxxxxxxx.)
9.2 Xxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x jeho xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zajistí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx kolony C18 x uvedenou mobilní xxxx.
X xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx dochází x xxxxxxxx vlivu xxxx xxxx parabenů. X takovém xxxxxxx xx xxxxxxxxx mělo xxx xxxxxxxxxx x xxxxx systémem xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx fáze. Vhodné xxxxxx lze najít x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2 x 3:
Xxxxxx: Xxxxxx ODS, 4,6 xx × 25 xx xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 ml/min
mobilní xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: methanol/voda 5/95 (X/X)
xxx hydrochinonmonomethylether: methanol/voda 30/70 (V/V)
pro xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Xxxxxxxxxx S5ODS xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 ml/min
Tyto xxxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx [6].
[1] ISO 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] XXX 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, X., Xxxxx M.-O., Identification xx xxxxxx xx x’xxxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxx méthylique xx xxxxxxxxxx dans xxx produits xxxxxxxxxxx xxxx blanchir la xxxx. Xxx. J. Xxxxxx. Sci., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, X., Xxx X., Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx in xxxx xxxxxx xxxxxx, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.