Xxxxx xxxxxxxx Komise 95/32/XX
xx xxx 7. xxxxxxxx 1995
o xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx x xxxxxxxx xxx EHP)
KOMISE XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx směrnici Xxxx 76/768/XXX xx xxx 27. xxxxxxxx 1976 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx kosmetických xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 94/32/XX [2], x xxxxxxx xx xx. 8 odst. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, že xx xx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxx úřední xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx předpisy Xxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx složení kosmetických xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx analýzy xxxx xxx xxxxxxxxx xx nejdříve; xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] ve xxxxx xxxxxxxx 87/143/EHS [4], xxxxxxxx 82/434/XXX [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8] x 93/73/EHS [9];
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx x stanovení xxxxxxxx benzoové, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx, xxxxxxxx salicylové a xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx státy xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxx x stanovení xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx xxxxxxx, kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx hydrochinonu, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze.
Článek 2
1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx dosažení xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 30. xxxx 1996. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx směrnici xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx státy.
2. Xxxxxxx státy sdělí Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx směrnice.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských společenství.
Článek 4
Tato xxxxxxxx xx určena členským xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 7. xxxxxxxx 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Xx. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. věst. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Úř. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Xx. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Úř. věst. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Úř. věst. X 231, 14.9.1993, x. 34.
XXXXXXX
X. DŮKAZ X XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX, KYSELINY XXXXXXXXXX X KYSELINY PROPIONOVÉ X XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
1. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxxxxx prostředcích. Xxxxxxxxxx xxxx popsány xxxxxxx důkazu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kyseliny 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx stanovená touto xxxxxxx xx vyjádří x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
X. XXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX) a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ("xxxxxxxxxxxx xx desce"). V xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx potvrdí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX) xxxx, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (GC).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxx x.x. Xxxx být použita xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Aceton
2.3 Diethylether
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxx
2.6 nHexan
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx draselný, 4 X xxxxx roztok
2.10 Xxxxxxx xxxxxxxx, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx lithný, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4hydroxybenzoová
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Kyselina xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) xxxxxxx (100 xx/100 xx) xxxxx z pěti xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.13 xx 2.17) x xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
0,5 % roztok 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) x xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 xx/10 xx). Tento xxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
2.20 Roztok xxxxxxxxxxxx
0,3 % (m/V) xxxxxx xxxxxxxxxx lithného (2.11) xx xxxx (300 xx/100 xx). Xxxxx xxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/xxxxxx (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Xxxxxx xxxxxxx (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Přístroje a xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx
3.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X
3.2 Vyvíjecí komora
3.3 Xxxxx ultrafialového xxxxxx 254 x 366 xx
3.4 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, Xxxxxxxxx 60, xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 mm x xxxxxxxxxxxx xxxxx 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μl
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx na 25 μx
3.7 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx až 105 °C
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 x 200 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 mm, Schleicher &xxx; Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xX 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 ml
3.12 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.13 Topná xxxxx
4. Postup
4.1 Příprava xxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx 4 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (2.8) a 40 xx xxxxxxx (2.2). X silně xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, by xxxx xxx xxxxxxx 20 xxxxx 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, zda je xX přibližně 2. Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxxx a po xxxx jedné minuty xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx xxxxxxxxx fáze, směs xx opatrně zahřeje xx xxx 60 °X, aby se xxxxxx fáze xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx zchladí xx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 ml xxxxxxxx se převede xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 xx, xxxxx xx 20 xx xxxx x xxxxxxxx se. pH xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx na 10 xxxxxx 4 X xxxxxxxxx draselného (2.9) xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10).
Xxxxx se 1 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx se xxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx dělicí xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) x xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx. Vrstvy xx xxxxxxx xxxxxxx x vodná vrstva xx xxxxxxx do Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 250 xx. Xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xX vodného roztoku xxxxxx xx xxxxxxxxx 2 xxxxxxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxx xx 10 ml xxxxxxxxxxxxx (2.3), xxxxx xx xxxxxxxxx a silně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx odparky (3.12). Vodná xxxxxx xx zlikviduje.
Etherová vrstva xx xxxxxx téměř xx xxxxx a xxxxxx se znovu xxxxxxxx x 1 xx diethyletheru (2.3). Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.11).
4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx koncentrační xxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (3.4) se xx xxxx, xxxxxxx počet xxxxxxxx xxxxx referenčních xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx (3.5) ve xxxxxxxx xxxxxxxxx vždy xx 3 μx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.20) x xxxxxx se x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx topnou xxxxx (3.13) zahřátou xx 40 °C, xxx xx skvrny xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx nanese vždy 10 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku (2.18) x roztoku xxxxxx (4.1) xxxxxx xx xxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxx, xxx xxxx xxxxxxxx referenční xxxxxxx/xxxxxxx vzorku x xxxxxx xxxxxxxxxx lithného, xxxxxx přibližně 15 μx derivatizačního xxxxxxx (2.19) (xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx (3.7) 45 xxxxx při 80 °X. Xx xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx v xxxxxx (3.2), která xxxx (xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) 15 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx vyvíjení je xxxxxxxxx 80 xxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxx XX xxxxxxx (3.3). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx skvrn může xxx xxxxxxxxxxxxxxxx deska xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Xxxxx
Xxx xxxxxx skvrnu xx xxxxxxx xxxxxxx Rf.
Hodnoty Xx x xxxxxxx xxxxxx xxx UV xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx referenčních xxxxxx.
Xxxxx xx předběžné závěry x přítomnosti a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx popsaná x xxxxxx X, xxxx ukazuje-li se, xx je přítomna xxxxxxxx propionová, provede xx xxxxxxx chromatografie xxxxxxx v xxxxxx X. Získané xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x retenčními xxxx xxxxxxxxxxxx vzorků.
Výsledky TLC x HPLC xxxx XX se zkombinují x při xxxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxx z xxxxxxxxx výsledků.
B. STANOVENÍ XXXXXXXX BENZOOVÉ, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, KYSELINY XXXXXXX X XXXXXXXX SALICYLOVÉ
1. Xxxxxxxx metody
Vzorek se xx okyselení xxxxxxxxx xxxxx ethanolu x xxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. a xxxx xxx vhodná xxx XXXX. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nebo voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx
2.3 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Kyselina salicylová
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.7 Octan sodný, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Kyselina xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Kyselina xxxxxx, 2 M
2.11 Xxxxxxxx draselný, 0,2 X xxxxx xxxxxx
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Xxxx xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx ethanolu (2.2) xx smíchá x xxxxxx dílem xxxx (2:1)
2.14 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx obsahující 1 x xxxxxxxx 2methoxybenzoové (2.12) x 500 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13).
2.15 Xxxxxxx xxxx xxx XXXX
2.15.1 Acetátový xxxx: xx 1 xxxxx xxxx xx xxxxx 6,35 x xxxxxx xxxxxxx (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x xxxxxx se.
2.15.2 Xxxxxxx fáze xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pufru (2.15.1) x xxxxxxx xxxx acetonitrilu (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné baňky xx 50 xx xx přesně naváží xxx 0,05 x xxxxxxxx 4hydroxybenzoové (2.3), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxx (2.5) x 0,05 x kyseliny sorbové (2.6) x xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx uchovává x xxxxxxxx. Roztok xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx xxxxxx 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (2.16). Xx každé xxxxx xx přidá 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (2.14) x 0,5 ml 2 X kyseliny xxxxxx (2.10). Xxxxx se xxxxxx směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní vybavení x dále:
3.1 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx 60 °X
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s UV xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx délkou a 10μx nastřikovací smyčkou.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx ocel, xxxxx 12,5 až 25 cm, vnitřní xxxxxx 4,6 mm, xxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18 xxxx ekvivalentní náplní.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxx, průměr: 90 xx, Schleicher xxx Schüll, Weissband Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Erlenmeyerovy baňky xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 ml
3.7 Xxxxx kamínky, karborundum, xxxxxxxx 2–4 mm, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 xx (3.5) xx xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx 10 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 40 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx se Erlenmeyerova xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx minut xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx v proudu xxxxxxx xxxx a xxxxxxx xx xx xxxxxx uloží xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (3.4). Xxx 2 ml xxxxxxxx xx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx 5 °X x xxxxxxxxx pomocí XXXX xx xxxxxxx xx 24 hodin.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 50 xx (3.5) xx x xxxxxxxxx xx tři xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx (x gramů). Xxxxxxx xx přidá 1,00 ml 2 X xxxxxxxx sírové (2.10) x 30,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7) x 10 ml xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx protřepává, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad do xxxxxxxxxx xxxx se Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx ochladí v xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxx na xxxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx při 5 °X a stanovení xxxxxx HPLC xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx kapalinová xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxx (2.15).
Průtok mobilní xxxx xxxxxxx se xxxxxxx na 2,0 ± 0,5 ml/min. Xxxxxx xxxxx detektoru xx nastaví na 240 nm.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.17). Xxx xxxxx xxxxxx se xx xxxxxxxxx chromatogramů stanoví xxxxx výšky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přísady x xxxxx píku xxxxxxxxx standardu xxxxxxxxx x chromatogramů. Xxx xxxxxx konzervační xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx výšek xxxx xx koncentraci xxxxxxx standardního xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, xx xxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx extraktu xxxxxx (4.1.1) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Nastříkne xx 10 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx konzervační xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx. Xxxx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx časem xxxx xxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx xx chromatogram.
Je-li x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) rušivý xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, měl xx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx standard. (Xxxx-xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx konzervační xxxxxxx použít xxxx xxxxxxx standard.)
Je třeba xxxxxx, xxx chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- separace píků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx píků xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx dosaženo, xxxx xx xxx buď xxxxxxx účinnější xxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx upraveno tak, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx se xxx xxxxxxxxx od 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx faktoru asymetrie xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxx xx doporučená xxxxxxxx posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Faktor asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
5. Výpočet
Pro xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx výšek xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x výšky xxxx xxxxxxxx 2methoxybenzoové (xxxxxxx xxxxxxxx) a dále xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xi) xx xxxxxxx pomocí xxxxxx
xx % (m/m) = (100x 20 x x) / (106 x&xxxx; x) = x / (500 x a)
kde
a = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (x),
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x extraktu xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6. Xxxxxxxxxxxxxx [1]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % by xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,050 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,045 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,60 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx testování xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx množství xxxxxxxx xxxxxx přidané do xxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxx být x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xx-xx xx žádoucí, lze xxxxxx vhodnou xxxxxxxxx xxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Definice
Koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxx stanovená xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (% x/x) xxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx se stanovení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty p.a; xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx, 96 % (V/V)
4.2 Kyselina xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (x/X)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx odměrné xxxxx na 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 g (x gramů) kyseliny xxxxxxxxxx a doplní xx na xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx standardu
Do xxxxxxx xxxxx xx 50 xx se xxxxxx xxxxxx 1 x (x gramů) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx x doplní xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx:
5.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ionizačním xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx zkumavka (20 × 150 xx) se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na 60 °X
5.5 Skleněná injekční xxxxxxxxx na 10 xx x filtrační xxxxxxxxx (xxxxxx pórů 0,45 μx)
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Příprava xxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) se naváží xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Přidá xx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 ml xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx uzavře x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx nezbytné, xxxxxx xx zkumavka xx pět xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx zchladí xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.1.2 Příprava xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx skleněné xxxxxxxx (5.3) xx x xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,5 xx xxxxxxxx trihydrogenfosforečné (4.4), 0,50 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)x 9 xx ethanolu (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x silně xxxxxxxx. Xxxx to nezbytné, xxxxxx xx zkumavka xx xxx xxxxx xx vodní xxxxx xxxxxxx na 60 °X (5.4), xxx xx zcela xxxxxxxxxx xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx rychle xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.2 Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: korozivzdorná ocel
Délka: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Náplň: 10 % XX™ 1000 (xxxx ekvivalentní) + 1 % X3XX4 xx Chromosorbu XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °C
Kolona: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °X
Xxxxx xxxx: dusík
Průtoková rychlost: 25 xx/xxx
6.3 Chromatografie
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx se xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.5). Xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 1,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx na objem xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kyselinu 2xxxxxxxxxxxxxxxxx jako vnitřní xxxxxxxx v koncentraci x xx/xx (xx xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx x = 1,000) a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x/4, p/2, p, 2x, 4p mg/ml (xx znamená 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 xx/xx, xx-xx x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μl xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxx x x xxxxxx odpovídajících xxxxx píků xx xxx x.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx se xxxxxx xxxxxx ploch píku.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.1. Chromatogram xx xxxxxxx x chromatogramem xxxxxxx xx standardních xxxxxxx (6.3.1). Má-li xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx vnitřní xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxxx rušivý vliv, xxxxxxxxx se 1 μx xxxxxxxx xxxxxx 6.1.2 x xxxxx xx plochy xxxx xxxxxxxx propionové x xxxx vnitřního xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 dávky x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
7. Výpočty
7.1 X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.1 xx xxxxxx poměr xxxxxxxxx (X), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx získaného xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx kyseliny xxxxxxxxxx xx xxxxxx (x) x hmotnostních xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x x) =X(x / x)
xxx
X = xxxxx vypočtený x xxxx 7.1,
e = xxxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 4.6,
x = hmotnost xxxxxx x gramech xxxxx xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx místo.
8. Xxxxxxxxxxxxxx [2]
Xxx obsahu xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,12 %.
II. XXXXX A STANOVENÍ XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
X. XXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx hydrochinonu, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx a jeho xxxxxx xx provede xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx reakční činidla xxxx xxx čistoty x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (V/V)
3.2 Chloroform
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (X/X)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (d420 = 0,91 x/xx)
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
3.7 Xxxxxxxxxxx
3.8 Hydrochinonmonomethylether
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (monobenzon)
3.11 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x jsou xxxxxxxx xxxxx xxx.
3.11.1 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx naváží 0,05 x hydrochinonu (3.7). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx na objem 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 xx xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.3 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx xx objem 10 ml (3.1).
3.11.4 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 xx xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.10). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx na xxxxx 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Kyanoželezitan xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Xxxxxxx železitý xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (m/V) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx přidává xxxxxxx (3.5), xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx:
Xxx xxxxxx xxxxx se x xxxxxxx tvoří výbušné xxxxxxxxxx x měl xx xxx po xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (x/X) roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx se 1 % (x/X) xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.14) x 2 % (x/X) xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15). Těsně xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx díly xxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní vybavení, x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
4.2 Xxxxxx desky xxx xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx: xxxxxxxxx GHR/UV254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx vrstvy 0,25 xx.
4.3 Ultrazvuková xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 XX xxxxx, 254 xx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 3 x xxxxxx. Přidá xx 0,250 g xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) a 5 ml xxxxxxxx (3.1). xX xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.5) na 10. Xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Zkumavka xx xxxxxx zátkou x xxxxxxxxxxxx xx 10 minut x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo se xxxxxxxx xxx 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě (XXX)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.4).
5.2.2 Na desku xx xxxxxx po 2 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) x 2 μl xxxxxxx xxxxxx (5.1). Xxxxxx xx xx xxx xxx teplotě xxxxx, xxxxx xxxx rozpouštědla xxxxxxxxx vzdálenosti 15 xx xx xxxxxx.
5.2.3 Xxxxx se vyjme, xxxxx xx vyschnout xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxx xx xxxxxxxx xxx UV xxxxxx při 254 xx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxx.
5.3.2 Xxxxx xx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxx stříbrným (3.16.1), xxxx
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); zahřeje se xx xxx 120 °X, xxxx
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx chloridu železitého (3.16.3).
6. Důkaz
Spočítá xx xxxxxxx Xx každé xxxxxx.
Xxxxxx získané pro xxxxxx vzorku se xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxx x xxxxxx hodnoty Xx, xxxxx xxxxx x XX xxxxxx x barvu xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (X) x xxxxxxxxx xx retenční xxxx xxxxxxx xxx xxx (xxxx) vzorku s xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx z XXX x XXXX xx zkombinují s xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
7. Poznámky
Za xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx Rf:
hydrochinon: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,55
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,58
X. STANOVENÍ
1. Rozsah x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x hydrochinonmonobenzyletheru v xxxxxxxxxxxx prostředcích pro xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Stanovení xxxxxxx xx výsledném xxxxxxx xx provede kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x obrácenou xxxx x UV xxxxxxx.
3. Xxxxxxx xxxxxxx
3.1 Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx být xxxxxxx x.x. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Methanol
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Hydrochinonmonoethylether
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.7 Tetrahydrofuran, xxxxxxx xxx XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Xxxxxx xx xxxxx xxx xxxx x jeden xxx xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: xxxx tetrahydrofuran/voda 45:55 (X/X). Xxxxxx xx 45 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) a 55 xxxx xxxx.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx se xxxxxx 0,06 g xxxxxxxxxxxx (3.3), 0,08 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x hydrochinonmonoethyletheru (3.5) x 0,12 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Rozpustí xx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxx roztoku xx 50 xx směsí xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
4. Přístroje a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °C
4.2 Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vlnovou xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x korozivzdorné xxxxx, xxxxx 250 xx, vnitřní průměr 4,6 xx, plněná Xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxx XXX, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxx 6 μm, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nepoužívá xx ochranná xxxxxx, x výjimkou fenylové xxxxxx xxxx xxxxxx x ekvivalentní náplní.
4.4 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Schüll, Weissband Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Postup
5.1 Příprava xxxxxx
Xx xxxxxxx baňky xx 50 ml xx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x (x gramů) vzorku. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx 25 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx uzavře x xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx nevytvoří xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Baňka xx xxxxxx na xxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °C, xxx se usnadnila xxxxxxxx. Baňka se xxxxxxx a xxxxxx xx na xxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (4.4). Xxxxx HPLC xx xxxxxxx do 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx mobilní fáze (3.9) xx upraví xx 1,0 xx/xxx x vlnová délka xxxxxxxxx se xxxxxxx xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx se 10 μx roztoku xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1 a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx plochy píků. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.2.3. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro vzorek x referenční xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x roztoku xxxxxx se použijí xxxxxx xxxx x xxxxxxx odezvy (XX) xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.2.3.
5.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 10 μl referenčního xxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx, dokud xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx XXx (x xx xxxxxx xxxxxxx RF):
RFi = pi /xx
xxx
xx = xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = koncentrace xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx hydrochinonmonobenzyletheru v xxxxxxxxxxx roztoku (3.10) (x/50 xx).
Xx xxxxx xxxxxx, zda xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x roztok xxxxxx splňují následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx odděleného xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx uvedena xx xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx píků
Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, měla xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx kolona xxxx by mělo xxx xxxxxxx mobilní xxxx xxxxxxxx tak, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx xx uvedena na xxxxxxx 2.) Při xxxxxxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx stanovení faktoru xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 cm/min.
Obrázek 2:Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx
- Xxxxxxxx musí být xxxxxxxx.
6. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx) ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) se xxxxxxx xxxxxx vzorce
xi % (m/m) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,
xx = xxxxxx píku xxxxxxx x xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx obsahu hydrochinonu 2,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx hydrochinonmonomethyletheru 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Při xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (různé xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,37 %.
8.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xx stejným vzorkem xx různých podmínek (xxxxx laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, různé xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx obsahu hydrochinonmonoethyletheru 1 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených se xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx přístroje nebo xxxxx xxxx) překročit 0,19 %.
8.4 Při xxxxxx hydrochinonmonobenzyletheru 1 % xx neměla xxxxxxxxx hodnota rozdílu xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (různé laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Poznámky
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxx výrazně xxxxx xxx 2 % x xx požadován xxxxxx xxxxx obsahu, xxx by být xxxxxxx vzorku (5.1) xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxxx obsahující 2 % xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx přístrojů xxxx xxx vysokých koncentracích xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx detektoru.)
9.2 Rušivé xxxxx
Xxxx popsaná metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx x xxxxxx isokratickém xxxxxxx. Použití xxxxxxxx xxxxxx zajistí xxxxxxxxxxx xxxxxxx hydrochinonu, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx X18 x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
X xxxx metody xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx parabenů. X takovém xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx fáze. Xxxxxx xxxxxx lze xxxxx x literatuře v xxxxxxxx 2 x 3:
Xxxxxx: Zorbax XXX, 4,6 mm × 25 mm xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 5/95 (X/X)
xxx hydrochinonmonomethylether: methanol/voda 30/70 (X/X)
xxx hydrochinonmonobenzylether: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Xxxxxxxxxx X5XXX xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] ISO 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] XXX 5725.
[5] Herpol-Borremans, X., Xxxxx X.-X., Xxxxxxxxxxxxxx xx dosage de x’xxxxxxxxxxxx xx de xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dans xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx blanchir xx xxxx. Int. J. Xxxxxx. Xxx., 8-203-214 (1986).
[6] Firth, J., Xxx I., Xxxxxxxxxxxxx xx hydroquinone xx xxxx toning xxxxxx, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.