Plné znění - 31996L0045

Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx 96/45/XX

xx dne 2. xxxxxxxx 1996

x metodách xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx

(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)

XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x ohledem xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,

s ohledem xx xxxxxxxx Rady 76/768/XXX xx dne 27. xxxxxxxx 1976 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx členských států xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/34/XX [2], a xxxxxxx na čl. 8 odst. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx se xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx úřední zkoušení xxxxxxxxxxxx prostředků x xxxxx xxxxxxxx dodržení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx předpisy Xxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xx všechny xxxxxxxx metody xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx nejdříve; xx xxxxxxx metody xxx xxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx Komise 80/1335/XXX [3] ve xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx Xxxxxx 82/434/XXX [5] xx znění xxxxxxxx 90/207/EHS [6] x xx xxxxxxxxxx Xxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8], 93/73/XXX [9] a 95/32/XX [10];

xxxxxxxx k tomu, xx xxxxx a xxxxxxxxx 2-fenoxyethanolu, 1-fenoxypropan-2-olu, xxxxxx, ethyl, propyl, xxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx xx sedmým xxxxxx;

xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx k zajištění xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, ethyl, xxxxxx, xxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Článek 2

1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx do 30. xxxx 1997. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.

2. Tato xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx směrnici xxxx musí xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx stanoví členské xxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Komisi xxxxx xxxxxxxxxxxxxx právních xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx působnosti xxxx xxxxxxxx.

Článek 3

Xxxx směrnice xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Článek 4

Tato směrnice xx určena členským xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 2. xxxxxxxx 1996.

Za Xxxxxx

Xxxx Bonino

členka Xxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.

[2] Xx. xxxx. X 167, 18.7.1995, x. 19.

[3] Xx. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.

[4] Xx. věst. X 57, 27.2.1987, x. 56.

[5] Úř. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.

[6] Xx. věst. X 108, 28.4.1990, x. 92.

[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.

[8] Úř. věst. X 295, 7.11.1985, x. 30.

[9] Úř. věst. X 231, 14.9.1993, x. 34.

[10] Xx. xxxx. X 178, 28.7.1995, x. 20.

PŘÍLOHA

DŮKAZ X XXXXXXXXX 2-XXXXXXXXXXXXXX, 1-XXXXXXXXXXXX-2-XXX, XXXXXX, XXXXX, PROPYL, XXXXX X XXXXXX 4-XXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

X. XXXXX

1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx

X této xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx chromatografie na xxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx stanovení xxxxxxxx x xxxxxx B xxxxxx důkaz 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, methyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, butyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-hydroxybenzoátu x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx přísady xx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xx acetonový xxxxxx smíchá s xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx prostředí xxxxxxxxx xxxx vápenaté soli. Xxxxxxxxx směs xxxxxx/xxxx xx extrahována diethyletherem, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxx xx konzervační xxxxxxx extrahují diethyletherem. Xxxxxxxxx xxxx diethyletherového xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x XX xxxxxx x xxxxxxxxxx se xx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxxxx

3.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxx p.a. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx voda xxxxxxx stejné xxxxxxx.

3.2 Xxxxxx

3.3 Xxxxxxxxxxxx

3.4 n-Pentan

3.5 Xxxxxxxx

3.6 Xxxxxx kyselina xxxxxx

3.7 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, c(HCl) = 4 xxx/x

3.8 Xxxxxx xxxxxxxxx draselného, c(KOH) = 4 mol/l

3.9 Xxxxxxx xxxxxxxx dihydrát (XxXx₂ . 2X₂X)

3.10 Xxxxxxxx xxxxxxx: Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) je komerčně xxxxxxxx roztok (Fluka 69820).

3.11 2-Fenoxyethanol

3.12 1-Fenoxypropan-2-ol

3.13 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.14 Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

3.15 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.16 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (butylparaben)

3.17 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) xxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.15, 3.16 a 3.17 x xxxxxxxxx.

3.19 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xx 88 dílů npentanu (3.4) x 12 xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.6).

4. Xxxxxxxxx x pomůcky

Běžné laboratorní xxxxxxxx x xxxx:

4.1 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx teplotu 60 °X

4.2 Xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx filtračním xxxxxxx)

4.3 Xxxxx ultrafialového xxxxxx, 254 nm

4.4 Xxxxxx xxxxx 20 cm × 20 xx, xxxxxx xxxxxxxx 0,25 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 60X254 (254 xx dolním xxxxxxx 60X) s koncentrační xxxxx (Xxxxx Xx 11798, Xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx)

4.5 Sušárna xxxxxxxxxxxx xx teplotu xx xx 105 °C

4.6 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlasů

4.7 Xxxxxx malířský xxxxxxx x délce xxxxxxxxx 10 xx, vnější xxxxxx xxxxxxxxx 3,5 xx. Xxxxxx vrstva xx xxxx být 2 xx 3 xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx se vlna xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxx v xxxx 5.2.

4.8 Skleněné xxxxxxxx xx 50 xx se šroubovacími xxxxxxx.

4.9 Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx: asi 80 °X. Xxxxx xxxxx xx pokryje xxxxxxxxxx deskou x xxxxxxxxx 20 xx × 20 xx x xxxxxxxx asi 6 xx, čímž xx dosáhne rovnoměrného xxxxxxxxx xxxxx.

5. Postup

5.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx na 50 xx se šroubovacím xxxxxxxx (4.8) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Přidají xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 40 xx acetonu.

V xxxxxxx xxxxx zásaditých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jako xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx 20 kapek xxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové. Xxxxxxxx se xxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx na xxx 60 °X, xxx xx xxxxxxxxx extrakce xxxxxxxxxxxxx látek do xxxxxxxxx fáze, x 1 xxxxxx se xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xX xxxxxxx x upraví xx xx xxxxxxx ≤ 3 xxxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové. Xxxxx xx 1 xxxxxx xxxxx třepe.

Roztok xx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx x zfiltruje xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Erlenmeyerovy xxxxx. 20 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 xx, xxxxx se 60 xx xxxx x xxxxxxxx. Hodnota pH xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8) xxxxxxxxx na 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx 1 x chloridu vápenatého xxxxxxxxx (3.9) a xxxxx xx protřepe. Xxxxxx xx zfiltruje xxxx xxxxxxxxx papír xx xxxxxx xxxxxxx xx 250 ml, xxxxx xxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx, a xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Fáze xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx fáze xx vypustí xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 200 xx. Xxxxxxx xX xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx 2 za použití xxxxxxxxxxxxxx papírku. Xxxx xx xxxxx 10 xx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxx protřepává. Fáze xx xxxxxxx xxxxxxx x xxx 2 xx fáze xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 ml.

5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX)

XXX deska xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.9). Xx xxxxxxxxx linii xxxxxxxxxxxx zóny TLC xxxxx xx nanese 10 μl každého x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x 100 μx xxxxxxx vzorku (xxxxxx) (5.1).

Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vzduchu. TLC xxxxx se xxxxxxxx x topné desky x nechá se xxxxxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx naplní 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.19).

XXX xxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx se xxx pokojové xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx asi 15 xx xx základní xxxxx. Deska se x xxxxxxxx komory xxxxx x xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx v UV xxxxxx (4.3) x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx 30 minut x xxxxxxx (4.5) xxx 100 °C, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kyselina octová. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx zviditelní Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.10) xxx, xx se XXX xxxxx rovnoměrně xxxxxxx válečkem (4.7) xxxxxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxxxx:

Xxxxxx xxx rovněž zviditelnit xxxxxxxx nanesením xxxxx Xxxxxxxxx činidla xx xxxxxx skvrnu xxxxxxxxx xxx UV xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxx 4-hydroxybenzoové se xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, 2-xxxxxxxxxxxxx x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xx jako xxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxxx dávat xxxxx xx xx, že xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx vzorcích xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx rozkladu xxxxxxxx, xx sama o xxxx projeví jako xxxxxxx xxxxxx. Viz 7.3 x 7.4.

6. Xxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx hodnota Xx. Xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx porovnají xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx x jejich xxxxxxx Xx, xxxxxx xxxxxxx x UV xxxxxx a xxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx předběžné xxxxxx x xxxxxxxx konzervačních xxxxxx.

Xxxxx se xxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xxxxxxxx x xxxxxx X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx (XXX) x vysokoúčinné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) se xxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx přítomnost 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx x xxxxxxxx.

7. Xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx Millonova xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx jedním x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se nedoporučuje.

7.2 Xxxx sloučeniny xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxx xxx reakci x Millonovým xxxxxxxx xxxxxxxxxx zbarvení. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx Xx získaných xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx X. de Kruijf, X. A. H. Xxxx, L. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx x X. Xxxxxxxx (1987): Determination xx xxxxxxxxxxxxx in xxxxxxxx xxxxxxxx X: Xxxx-xxxxx chromatographic xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx preservatives xx xxxxxxxx xxxxxxxx (J. Xxxxxxxxxxxxxx 410, 395-411).

7.3 Xxxxxxx Xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx tabulce xxxxxx xxxx ukazatele xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxx:

7.4 X xxxxxxx kyseliny 4-xxxxxxxxxxxxxxx x methylparabenu xxx x xxxxxxx benzylparabenu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x oddělení. Důkaz xxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx XXXX xxxxxxxx x oddíle B x porovnáním retenčních xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx časy xxxxxxxxx.

X. XXXXXXXXX

1. Xxxxxx a xxxxxx použití

V xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-fenoxypropan-2-olu, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx xx vyjádří x xxxxxxxxxxxx procentech.

3. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxx a xxxx. Směs se xxxxxxx zahřeje xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xx zfiltruje.

Konzervační xxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX) x xxxxxxxxx fází xx xxxxxxx isopropyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

4. Reakční činidla

4.1 Xxxxxx

Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. x xxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxx xxx HPLC. Xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň xxxxxx xxxxxxx.

4.2 Ethanol, xxxxxxxxx

4.3 2-Xxxxxxxxxxxxx

4.4 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

4.5 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.6 Ethyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.7 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.8 Xxxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (isopropylparaben)

4.9 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (butylparaben)

4.10 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.11 Tetrahydrofuran

4.12 Xxxxxxxx

4.13 Xxxxxxxxxxx

4.14 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x(X₂XX₄) = 2 xxx/x

4.15 Xxxx xxxxxxx/xxxx

Xxxxxx xx xxxxx xxxx ethanolu (4.2) x xxxxx xxx xxxx.

4.16 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 0,25 x xxxxxxxxxxxxxxxxx (4.8), xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxx na 500 xx, rozpustí xx x xxxxxx xx xxxxx ethanol/voda (4.15) xx objem.

4.17 Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx

Xxxxxx se 5 xxxx tetrahydrofuranu, 60 xxxx vody, 10 xxxx methanolu x 25 xxxx xxxxxxxxxxxx.

4.18 Xxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xx xxxxxx naváží xxxxxxxxx 0,2 x 2-xxxxxxxxxxxxxx, 0,2 g 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx x 0,025 x xxxxxxxxxxxxxx, rozpustí xx a xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx xx xxxxx.

Xxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxx a xx stabilní 1 xxxxx.

4.19 Standardní roztoky xxxxxxxxxxxxx přísad

Do xxxxxxxxx xxxxx na 50 xx se ze xxxxxxxxx xxxxxxx (4.18) xxxxxxx 20,00 ml, 10,00 xx, 5,00 xx, 2,00 xx x 1,00 xx. Xx každé xxxxx xx přidá 10,00 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.16) x 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.14) x doplní směsí xxxxxxx/xxxx xx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx laboratorní xxxxxxxx, x dále:

5.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx teplotu 60 °X ± 1 °X.

5.2 XXXX chromatograf x XX detektorem, xxxxxx délka 280 xx

5.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxxxxxxxxxx xxxx, délka 25 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 mm (xxxx xxxxx 12,5 cm x vnitřní průměr 4,6 mm), xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18, xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz 10.1).

5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 ml xx šroubovacím xxxxxxxx

5.5 Xxxxx kamínky, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2 xx 4 xx xxxx xxxxxxxxxxxx

6. Xxxxxx

6.1 Příprava xxxxxx

6.1.1 Příprava xxxxxx xxx přidání vnitřního xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx xx 100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx 1,0 x xxxxxx. Do xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 1,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.14) a 50,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (4.15). Přidá se xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (5.5), xxxxxxxx se uzavře x silně se xxxxxxxx, xxxxx nevznikne xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx alespoň jednu xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xx 5 xxxxx xx vodní xxxxx (5.1) o xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx ochladí xxx proudem xxxxxxx xxxx a xxxxxxx xx xxxxx na xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 2 xx filtrátu xx xxxxxxxx do 5 xx xxxxxxxxxx lahvičky. Xxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx HPLC xx xxxxxxx xx 24 hodin.

6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx včetně přidání xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx na 100 xx se šroubovacím xxxxxxxx xx s xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx místa odváží 1,0 x ± 0,1 x xxxxxx.

Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 1,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x 40,0 ml xxxxx xxxxxxx/xxxx. Xxxxx xx přibližně 1 x varných kamínků (5.5) x přesně 10,00 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Zkumavka xx xxxxxx x xxxxx se xxxxxxxx, xxxxx nevznikne xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxx jednu xxxxxx. Xxxxxxxx xx vloží xx 5 minut xx vodní xxxxx x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx ethanolové xxxx.

Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx pod xxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx 5 xx vzorkovací lahvičky (xxxxxxxx roztok). Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.

6.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC)

6.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

- Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx (4.17)

- Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5 xx za xxxxxx

- Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx: 280 nm

6.2.2 Kalibrace

Nastříkne xx 10 μx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních xxxxxx (4.19). Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních xxxxxx k xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx sestrojí xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx poměrů xx xxxxxxxxxxx standardních xxxxxxx.

6.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx 10 μx jednoho xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.19) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Získané chromatogramy xx xxxxxxxxx.

Xxxx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku (6.1.1) xxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxx čas xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (doporučený xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.1.2). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx a změří xx výšky xxxx.

Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx rušivý xxx x xxxxxxxxx časem xxxxxxxxx stejným xxxx xxxxxxxx čas xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx jiný xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx-xx jedna x xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx tuto xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx vnitřního xxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx křivka xxxxxxxxx xxxxxxxxx lineární.

Je xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx odděleného xxxx xx alespoň 0,90. (Definice xxxxxxxx xxxx je xxxxxxx xx xxxxxxx 1.),

Obrázek 1: Xxxxxxxx píků

Není-li xxxxxxxxxx separace xxxxxxxx, xxxx xx být xxx použita xxxxxxxxx xxxxxx, nebo by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx fáze upraveno xxx, aby byl xxxxxxxxx xxxxxx.

- xxxxxx xxxxxxxxx (As) všech xxxxxxxxx píků xx xx měl pohybovat xx 0,9 xx 1,5. (Definice xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx zaznamenání xxxxxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx rychlost xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx xx minutu,

Obrázek 2: Xxxxxx asymetrie xxxx

- xxxxxxxx musí xxx stabilní.

7. Xxxxxxx

Xxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx použije xxxxxxxxxx xxxxxx (6.2.2) x xxxxxxx poměrů xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad k xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx (wi) 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (% x/x) xx xxxxxxx pomocí xxxxxx:

%x_x(x/x) = x_x / (200 × x)

xxx

xx = koncentrace xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxx (μx/xx) xxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx x

x = hmotnost xxxxxxxxxx xxxxxx (g).

8. Xxxxxxxxxxxxxx [1]

Xxx xxxxxxxx x xxxx 10.5.

9. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [2]

Xxx xxxxxxxx v xxxx 10.5.

10. Xxxxxxxx

10.1 Xxxxxxxxxxx fáze

Retenční xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxxx a historii xxxxxxxxxxx xxxx. Zda xxx kolonu použít xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad, xxx xxxxxxx x výsledků xxxxxxxxx xxx standardní xxxxxxx (xxx xxxxxxxx x xxxx 6.2.3). Xxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx vhodnými také xxxxxxxxx Xxxxxxxx XXX x Xxxxxx XXX.

Xx xxxxxx dosažení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.

10.2 Detekční xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx popisované xxxxxx xxxxxxx, že xxxxxxxx změna xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx významný vliv xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx během xxxxxxx xxxxxxx kontrolován.

10.3 Xxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x této xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x kosmetické xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx XX xxxxxxxx Xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxx v xxxxx X. de Xxxxxx, X. X. H. Xxxx, X. X. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx, X. Schouten, (1989): Determination xx xxxxxxxxxxxxx xx cosmetic xxxxxxxx II. High-performance xxxxxx chromatographic xxxxxxxxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx, 469, 317-398).

10.4 Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

10.5 Xxxxxx byla zkoušena xxx okružním xxxxxx, xx němž xx xxxxxxxx devět xxxxxxxxxx. Xxxx analyzovány tři xxxxxx. X následující xxxxxxx xxxx xxx xxxxx ze xxx xxxxxx xxxxxxx střední xxxxxxx x % x/x (m), opakovatelnosti (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx xxx xxxxxxx, které byly xx xxxxxxxx xxxxxxxx:

[1] ISO 5725.

[2] XXX 5725.