Plné znění - 31996L0045

Xxxxx Směrnice Komise 96/45/XX

xx xxx 2. xxxxxxxx 1996

o metodách xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx složení kosmetických xxxxxxxxxx

(Xxxx x xxxxxxxx xxx EHP)

KOMISE EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX ze xxx 27. xxxxxxxx 1976 x xxxxxxxxxx právních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx kosmetických xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/34/XX [2], x xxxxxxx xx čl. 8 odst. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx k xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx předepsaných xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x tomu, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx metody xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/EHS [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/EHS [4], xxxxxxxx Komise 82/434/XXX [5] xx znění xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x ve xxxxxxxxxx Xxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8], 93/73/EHS [9] x 95/32/XX [10];

xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxx a xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx;

xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:

Článek 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx úředním zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx důkaz x xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxx a xxxxxx 4-hydroxybenzoátu prováděly xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx dosažení xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1997. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.

2. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx členskými státy xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx směrnici xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx jejich xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx stanoví členské xxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Článek 3

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Článek 4

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

V Xxxxxxx xxx 2. xxxxxxxx 1996.

Za Xxxxxx

Xxxx Bonino

členka Xxxxxx

[1] Xx. věst. X 262, 27.9.1976, x. 169.

[2] Xx. věst. X 167, 18.7.1995, x. 19.

[3] Úř. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.

[4] Úř. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.

[5] Úř. věst. X 185, 30.6.1982, x. 1.

[6] Xx. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.

[7] Úř. věst. X 291, 24.10.1983, x. 9.

[8] Xx. věst. X 295, 7.11.1985, x. 30.

[9] Úř. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.

[10] Xx. věst. X 178, 28.7.1995, x. 20.

PŘÍLOHA

DŮKAZ A STANOVENÍ 2-XXXXXXXXXXXXXX, 1-XXXXXXXXXXXX-2-XXX, METHYL, XXXXX, XXXXXX, XXXXX X XXXXXX 4-XXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

X. XXXXX

1. Xxxxxx a xxxxxx použití

V xxxx xxxxxx je specifikován xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, který x xxxxxxxxx x xxxxxxx stanovení xxxxxxxx x xxxxxx B xxxxxx xxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, propyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-hydroxybenzoátu x xxxxxx 4-hydroxybenzoátu x kosmetických xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx přísady xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx se x xxxxxxxxxx prostředí vysrážejí xxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx/xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Po xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vrstvou xxxxxxxxxx. Xx vyvíjení xx xxxxxxx chromatogram pozoruje x UV xxxxxx x zviditelní se xx xxxxxxx Millonova xxxxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxxxx

3.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx být xxxxxxx p.a. Musí xxx xxxxxxx destilovaná xxxx nebo voda xxxxxxx stejné xxxxxxx.

3.2 Xxxxxx

3.3 Xxxxxxxxxxxx

3.4 x-Xxxxxx

3.5 Xxxxxxxx

3.6 Ledová xxxxxxxx xxxxxx

3.7 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x(XXx) = 4 xxx/x

3.8 Roztok xxxxxxxxx draselného, x(XXX) = 4 mol/l

3.9 Xxxxxxx vápenatý xxxxxxxx (XxXx₂ . 2X₂X)

3.10 Xxxxxxxx xxxxxxx: Millonovo xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (Xxxxx 69820).

3.11 2-Xxxxxxxxxxxxx

3.12 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

3.13 Xxxxxx 4-hydroxybenzoát (methylparaben)

3.14 Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (ethylparaben)

3.15 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.16 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

3.17 Xxxxxx 4-hydroxybenzoát (benzylparaben)

3.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) xxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.15, 3.16 a 3.17 x xxxxxxxxx.

3.19 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xx 88 dílů npentanu (3.4) x 12 xxxx xxxxxx kyseliny xxxxxx (3.6).

4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx:

4.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X

4.2 Xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx)

4.3 Xxxxx ultrafialového xxxxxx, 254 nm

4.4 Hotové xxxxx 20 cm × 20 xx, xxxxxx xxxxxxxx 0,25 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 60F254 (254 xx xxxxxx indexem 60X) x koncentrační xxxxx (Xxxxx No 11798, Darmstadt, nebo xxxxxxxxxxxx)

4.5 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx až xx 105 °X

4.6 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlasů

4.7 Xxxxxx xxxxxxxx váleček x délce přibližně 10 cm, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 3,5 xx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx 2 xx 3 xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx se vlna xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxx x xxxx 5.2.

4.8 Xxxxxxxx xxxxxxxx na 50 xx xx šroubovacími xxxxxxx.

4.9 Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x termostatem. Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxx 80 °X. Xxxxx xxxxx xx pokryje xxxxxxxxxx deskou x xxxxxxxxx 20 xx × 20 xx x xxxxxxxx xxx 6 xx, xxxx xx xxxxxxx rovnoměrného xxxxxxxxx xxxxx.

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xx skleněné xxxxxxxx xx 50 xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8) xx xxxxxx přibližně 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx čtyři kapky xxxxxxx kyseliny chlorovodíkové (3.7) a 40 xx acetonu.

V xxxxxxx xxxxx zásaditých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx 20 xxxxx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx se xxxxxx xxxxxxx xx xxx 60 °X, xxx xx usnadnila extrakce xxxxxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxx, x 1 minutu xx xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx papírkem xx xxxxx pH xxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxxxx ≤ 3 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx 1 minutu xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx a zfiltruje xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. 20 xx xxxxxxxx se převede xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 xx, xxxxx xx 60 xx vody x xxxxxxxx. Hodnota pH xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx draselným (3.8) xxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx.

Xxxxx xx 1 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.9) a xxxxx xx protřepe. Xxxxxx se zfiltruje xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx 250 xx, xxxxx xxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxx xxxxxx protřepává. Xxxx xx nechají xxxxxxx x xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 200 xx. Hodnota xX roztoku xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx přibližně 2 za xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx papírku. Xxxx xx přidá 10 xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxx protřepává. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxx 2 xx fáze xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 ml.

5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX)

XXX xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx desku (4.9). Xx xxxxxxxxx linii xxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxx xx xxxxxx 10 μx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x 100 μl xxxxxxx vzorku (vzorků) (5.1).

Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx odpaření xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxxx se xxxxxxxx x topné xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx naplní 100 xx vyvíjecího xxxxxxxxxxxx (3.19).

TLC xxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x vyvíjí se xxx xxxxxxxx teplotě, xxxxx čelo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 15 xx od xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vlasů.

Deska se xxxxxxxxx v XX xxxxxx (4.3) a xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx 30 xxxxx x sušárně (4.5) xxx 100 °C, xxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx octová. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xx zviditelní Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.10) xxx, xx xx XXX deska xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (4.7) xxxxxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxxxx:

Xxxxxx xxx xxxxxx zviditelnit xxxxxxxx xxxxxxxxx kapky Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx skvrnu označenou xxx XX světlem.

Estery xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx červené xxxxxx, 2-xxxxxxxxxxxxx x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxxx dávat pozor xx xx, xx xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx přítomná xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxx x xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Viz 7.3 x 7.4.

6. Xxxxx

Xxx každou xxxxxx xx vypočte hodnota Xx. Xxxxxx xxxxxxx x roztoku xxxxxx xx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx o xxxxxx xxxxxxx Xx, jejich xxxxxxx x XX xxxxxx x barvu xx zviditelnění. Xxxxx xx předběžné xxxxxx x identitě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx xxx, xx jsou přítomny xxxxxxxx, provede xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxxx x oddíle X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) se xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx přítomnost 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx x xxxxxxxx.

7. Xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx xx nejvhodnější aplikovat xxxx xxxxxxx xxxxxx x popsaných xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

7.2 Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x Xxxxxxxxxx činidlem xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x hodnot Xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx je xxxxxxx x xxxxx X. de Xxxxxx, X. X. X. Xxxx, L. X. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx x X. Xxxxxxxx (1987): Determination xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx X: Xxxx-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx preservatives xx xxxxxxxx xxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx 410, 395-411).

7.3 Xxxxxxx Xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx tabulce xxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxx:

7.4 V xxxxxxx kyseliny 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx HPLC xxxxxxxx x xxxxxx B x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx časy xxxxxxxxx.

X. XXXXXXXXX

1. Xxxxxx a xxxxxx použití

V xxxx xxxxxx je specifikován xxxxxx xxx stanovení 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, ethyl 4-hydroxybenzoátu, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx a benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx.

3. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxxx přidáním kyseliny xxxxxx a xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx ethanolu a xxxx. Xxxx se xxxxxxx zahřeje xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx isopropyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

4. Xxxxxxx xxxxxxx

4.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. x xxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxx xxx XXXX. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx alespoň xxxxxx xxxxxxx.

4.2 Ethanol, absolutní

4.3 2-Xxxxxxxxxxxxx

4.4 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

4.5 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (methylparaben)

4.6 Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.7 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.8 Xxxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxx)

4.9 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (butylparaben)

4.10 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (benzylparaben)

4.11 Tetrahydrofuran

4.12 Xxxxxxxx

4.13 Xxxxxxxxxxx

4.14 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx c(H₂SO₄) = 2 xxx/x

4.15 Xxxx xxxxxxx/xxxx

Xxxxxx se xxxxx dílů ethanolu (4.2) a xxxxx xxx xxxx.

4.16 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxx přibližně 0,25 x isopropylparabenu (4.8), xxxxxxx se do xxxxxxx baňky xx 500 xx, rozpustí xx x doplní xx xxxxx ethanol/voda (4.15) xx xxxxx.

4.17 Xxxxxxx xxxx: směs xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx

Xxxxxx xx 5 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, 60 xxxx vody, 10 xxxx xxxxxxxxx x 25 xxxx acetonitrilu.

4.18 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxx baňky xx 100 xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,2 g 2-xxxxxxxxxxxxxx, 0,2 g 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx x 0,025 x benzylparabenu, xxxxxxxx xx a xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx na xxxxx.

Xxxxxx se xxxxxxxx x ledničce x xx xxxxxxxx 1 xxxxx.

4.19 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.18) xxxxxxx 20,00 xx, 10,00 xx, 5,00 xx, 2,00 xx x 1,00 xx. Xx každé baňky xx xxxxx 10,00 xx roztoku vnitřního xxxxxxxxx (4.16) x 1,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx sírové (4.14) x xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx xx xxxxx. Xxxx roztoky xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx:

5.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X ± 1 °X.

5.2 XXXX xxxxxxxxxxxx x UV xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx 280 xx

5.3 Analytická xxxxxx:

Xxxxxxxxxxxxx xxxx, délka 25 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 mm (xxxx xxxxx 12,5 cm x xxxxxxx xxxxxx 4,6 mm), naplněná Xxxxxxxxxxx 5X18, xxxx xxxxxxxxxxxxx sorbentem (viz 10.1).

5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 xx xx šroubovacím uzávěrem

5.5 Xxxxx kamínky, karborundum, xxxxxxxx 2 xx 4 xx nebo xxxxxxxxxxxx

6. Postup

6.1 Příprava xxxxxx

6.1.1 Xxxxxxxx vzorku xxx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx

Xx zkumavky xx 100 xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx 1,0 x xxxxxx. Do xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx sírové (4.14) a 50,0 xx směsi xxxxxxx/xxxx (4.15). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx kamínků (5.5), xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx se xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx alespoň xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xx 5 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.1) x xxxxxxx 60 °X ± 1 °C, xxx se podpořila xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx ethanolové xxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Asi 2 xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xx 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx provede xx 24 hodin.

6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx skleněné xxxxxxxx na 100 xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1,0 x ± 0,1 x xxxxxx.

Xx xxxxxxxx se pipetou xxxxx 1,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx sírové x 40,0 ml xxxxx xxxxxxx/xxxx. Xxxxx xx přibližně 1 x xxxxxxx xxxxxxx (5.5) a xxxxxx 10,00 xx roztoku xxxxxxxxx standardu. Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx homogenní xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jednu xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xx 5 xxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx ethanolové xxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx pod xxxxxxx xxxxxxx vody x xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx hodinu xx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx zfiltruje xxxx xxxxxxxxx papír.

Asi 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.

6.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)

6.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

- Mobilní fáze: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx (4.17)

- Xxxxxxxxx rychlost: 1,5 xx xx xxxxxx

- Xxxxxxxx xxxxxx délka: 280 xx

6.2.2 Kalibrace

Nastříkne xx 10 μl xxxxxxx ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních přísad (4.19). Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x píku xxxxxxxxx standardu. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx sestrojí křivka xxxxxxxxxx těchto xxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

6.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xx nastříkne 10 μx roztoku xxxxxx xxx vnitřního standardu (6.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx se 10 μl jednoho xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.19) x zaznamená xx xxxxxxxxxxxx. Získané xxxxxxxxxxxxx xx porovnají.

Není-li x xxxxxxxxxxxxx extraktu vzorku (6.1.1) xxxxxxxx pík x přibližně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx retenční xxx xxxx isopropylparabenu (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), pokračuje xx nastříknutím 10 μx xxxxxxx xxxxxx x vnitřním xxxxxxxxxx (6.1.2). Chromatogram se xxxxxxxxx x změří xx xxxxx píků.

Je-li x chromatogramu roztoku xxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxx čas isopropylparabenu, xxx xx xxx xxxxxx jiný xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxx výšek xxxx vyšetřovaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x výšce xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx, že xx xxxxxxxxxx křivka xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxx ověřit, zda xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx vzorku splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- separace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx je xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx uvedena xx obrázku 1.),

Obrázek 1: Xxxxxxxx píků

Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx by xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxx xxx složení xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxxx splněn.

- xxxxxx xxxxxxxxx (Xx) xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx je xxxxxxx xx obrázku 2.) Xxx zaznamenání xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx rychlost xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx za minutu,

Obrázek 2: Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx

- xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.

7. Xxxxxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (6.2.2) x hodnoty poměrů xxxxx píků xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad k xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx (xx) 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-fenoxypropan-2-olu, methyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, ethyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx (% m/m) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx:

%x_x(x/x) = x_x / (200 × x)

xxx

xx = koncentrace xxxxxxxxxxx přísady i xx zkušebním xxxxxxx (μx/xx) odečtená z xxxxxxxxxx xxxxxx x

x = xxxxxxxx zkušebního xxxxxx (g).

8. Xxxxxxxxxxxxxx [1]

Xxx xxxxxxxx x xxxx 10.5.

9. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [2]

Xxx poznámka x xxxx 10.5.

10. Poznámky

10.1 Xxxxxxxxxxx fáze

Retenční xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx HPLC xxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxx xxx kolonu xxxxxx xxx oddělení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, lze xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxxx x bodu 6.2.3). Xxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu xxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxxxx také xxxxxxxxx Hypersil XXX x Xxxxxx XXX.

Xx xxxxxx xxxxxxxx požadovaného xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx složení mobilní xxxx.

10.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx změna detekční xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxx vliv xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

10.3 Xxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx metodě xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x kosmetické xxxxxxx. Xxxxxxxx časy xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxx XX xxxxxxxx Xxxx týkající xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx X. xx Xxxxxx, X. X. X. Xxxx, X. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx, A. Schouten, (1989): Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx II. High-performance xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx identification (X. Xxxxxxxxxxxxxx, 469, 317-398).

10.4 Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx lze xxxxxx xxxxxxx předkolonu.

10.5 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx okružním pokusu, xx němž xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx analyzovány tři xxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx pro xxxxx ze tří xxxxxx xxxxxxx střední xxxxxxx v % x/x (m), xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) zjištěné xxx xxxxxxx, které xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx:

[1] XXX 5725.

[2] XXX 5725.