Směrnice Xxxxxx 98/64/XX
xx xxx 3. září 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxx x krmivech a xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx 71/393/EHS
(Text s xxxxxxxx pro EHP)
KOMISE XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x ohledem xx Smlouvu x xxxxxxxx Evropského společenství,
s xxxxxxx na xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX za xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x přistoupení Xxxxxxxx, Xxxxxx x Švédska, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k tomu, xx směrnice 70/373/EHS xxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxx xxxxx za xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx xxx 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxx [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 97/47/XX [3], x xxxxxxxx Xxxx 93/74/XXX ze xxx 13. xxxx 1993 x krmivech xxxxxxxx xx zvláštním účelům xxxxxx [4], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/ES [5], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxx xxxxxxx xx označení xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Rady 70/524/XXX xx dne 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x krmivech [6], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 98/19/XX [7], xxxxxxx, xx obsah xxxxxxxxxxx musí být xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx je xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx směsí;
vzhledem k xxxx, xx druhá xxxxxxxx Komise 71/393/XXX xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971, kterou xx xxxxxxx analytické xxxxxx Společenství pro xxxxxx kontrolu xxxxx [8], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 84/4/XXX [9], stanoví metody xxxxxxx xxxx xxxx x xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx; že xx xxxxxx uvedené xxxxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxx analytické xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxx xxxxxx látek;
vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx pro krmiva,
PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské státy xxxxxxx, že xxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxx olachindoxu x krmivech se xxxxxxxxx xx použití xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 2
X xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/EHS xx xxx "4. Xxxxxxxxx xxxxxx tuku" xxxxxxxxx xxxxx B xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1998. Xxxxxxx x nich xxxxxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxx tyto xxxxxxxx xxxxxxxx xx 1. xxxxx 1999.
Tato opatření xxxxxxx členskými xxxxx xxxx xxxxxxxxx odkaz xx tuto směrnici xxxx xxxx xxx xxxxxx odkaz učiněn xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx ustanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx této xxxxxxxx.
Článek 4
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 5
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx dne 3. září 1998.
Xx Xxxxxx
Xxxxx Xxxxxxxx
xxxx Komise
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Xx. věst. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Xx. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Xx. xxxx. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Xx. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Xx. xxxx. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Úř. xxxx. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
PŘÍLOHA
ČÁST X
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx) x vázaných (xxxxxxx xxxxxx x xxxxx) xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx za použití xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxx, prolin, xxxxx, xxxxxxx x xxxxx.
Xxxx metoda xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx formami X x X. Xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx hydroxy xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxx aminokyseliny
Volné xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx dusíkaté makromolekuly xx srážejí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Zfiltrovaný xxxxxx xx xxxxxx xx pH 2,20. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xx xx xxxxxx x ninhydrinem xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx.
2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx proces xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxx(x)xx x xxxxxxxxx xxxx xxx před xxxxxxxxxx oxidovány na xxxxxxxx cysteovou x xx xxxxxxxxxxxxxxx. Tyrosin xx xxxx xxxxxxxxxx x hydrolyzátech neoxidovaných xxxxxx. Ostatní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x bodě 1 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxx v xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx při 0 xX směsí xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x fenolu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Oxidovaný nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chlorovodíkovou (x = 6 xxx/x) xx 23 xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxx na pH 2,20. Aminokyseliny xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx chromatografií x stanovují se xx xxxxxx s xxxxxxxxxxx fotometrickou xxxxxxx xxx 570 xx (440 xx xxx xxxxxx).
3. Xxxxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx dvakrát xxxxxxxxxxx xxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx &xx; 10 μS).
3.1 xxxxxxx xxxxxx, w = 30 %
3.2 xxxxxxxx xxxxxxxx, w = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 xxxxxxxxx xxxxx
3.5 xxxxxxxx xxxxx
3.6 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx
3.7 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx 1,18 x/xx
3.8 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (thiodiglykol)
3.10 xxxxxxx xxxxx
3.11 ninhydrin
3.12 xxxxxxxxxxx, xxx xxxx 40–60 °X
3.13 norleucin xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx standard
3.14 xxxxx – xxxx (&xx; 10 ppm xxxxxxx)
3.15 1-xxxxxxx
3.16 aminokyseliny
3.16.1 xxxxxxxxxx látky xxxxxxx x xxxx 1; xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xx xx xxxxx xxx X2X5 xxxx X2XX4 xxxxx xxxx xxxxxxxx
3.16.2 kyselina xxxxxxxx
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx c = 7,5 xxx/x:
300 x XxXX (3.5) se xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx do 1 xxxxx.
3.18 xxxxxxxx xxxxx, roztok x = 1 mol/l:
40 x NaOH (3.5) xx rozpustí xx xxxx a xxxxxx xx 1 xxxxx.
3.19 xxxxxx kyseliny xxxxxxxx x fenolu:
Smíchá xx 889 g xxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) se 111 g xxxx x xxxxx xx 4,73 x xxxxxx (3.3).
3.20 xxxxxxxxxxxx xxxx, x = 6 xxx XXx/x x xxxxxxxxx 1 x xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) xx xxxxx 1 g xxxxxx (3.3) x xxxxxx xx xxxxx xx 1 xxxxx.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, c = 6 mol XXx/x x xxxxxxxxx 2% xxxxxxxxxxxxx:
8,2 xx XXx (3.7) se xxxxxxx přibližně 900 xx xxxx, přidá xx 20 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9) x xxxxxx vodou xx 1 xxxx (3.7 x 3.9 se xxxxx xxxxxxx přímo).
3.22 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, β = 6 %:
60 x xxxxxxxx 5-sulfosalicylové (3.6) se xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xxxxx xx 1 litr.
3.23 xxxxxxxx xxxx (kyselina xxxxxxxxxxx – xxxxx):
X xxxx xxxxxxx xx smíchá 0,5 ml xxxxxxxx xxxxxx (3.1) s 4,5 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx (3.19); xxxxxxx xx x klidu 1 xxxxxx při 20–30 °C, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx vzorku xx xxxx xxxxxxx v xxxxx x xxxxxxx xxxxx (15 xxxxx).
Xxxxx:
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx a xxxxxxxx ochranný xxxx.
3.24 xxxxxxxxxxx xxxxxxx roztok, x = 0,2 xxx Xx+/x, pH 2,20:
X xxxxxxxxx 800 xx xxxx xx xxxxxxxx 19,61 x xxxxxxxxx xxxxxxx (3,8), 5 ml xxxxxxxxxxxxx (3.9), 1 g xxxxxx (3.3) x 16,50 xx XXx (3.7). xX se xxxxxx na 2,20. Xxxxxx xx vodou xx xxxxx 1 xxxxx.
3.25 xxxxxx tlumivé xxxxxxx připravované xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 xxxxxxxxxxxx xxxxxxx připravované xxxxx xxxxxxxx xxx použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx 5 °C.
3.27.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx pro každou xxxxxxxxxxxxx v kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3.27.2 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx, c = 1,25 μxxx/xx
0,2115 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.16.2) x 0,2265 x xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx (3.16.3) x citronanovém xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxx xxxxxxx pod 5 °X xxxxxxx 12 xxxxxx. Tento xxxxxx xx nepoužívá, pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.27.1) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
3.27.3 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx, x = 20 μxxx/xx
0,6560 x norleucinu (3.13) xx rozpustí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x odměrné xxxxx xx 250 xx x doplní xx po značku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 6 xxxxxx.
3.27.4 xxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxx aminokyselin pro xxxxxxx s hydrolyzáty, x = 5 xxxx/50 μx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx x c = 10 nmol/50 μx x ostatních xxxxxxxxxxxx
Xx 100 ml kádince xx xxxxxxxx 2,2 x xxxxxxxx xxxxxxx (3.10) x 30 xx citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Přidají xx 4,00 xx xxxxxxxxx standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.27.1), 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního roztoku xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) x 0,50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu (3.27.3), xxxxx xx xxxxxxx. xX xx xxxxxx xx 2,20 hydroxidem xxxxxx (3.18).
Roztok xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 50 ml odměrné xxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx se.
Skladuje xx xxx teplotě xxx 5 °C xxxxxxx 3 měsíce.
Viz xxxx xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, připravenými xxxxx xxxx 5.3.3.1 a xxx xxxxxxxx (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx podle 3.27.4 x vynecháním chloridu xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx 5 °C xxxxxxx 3 xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky
4.1 xxxxx x xxxxxxx xxxx x obsahu 100 nebo 250 xx opatřená zpětným xxxxxxxxx
4.2 nádoba x xxxxxxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx 100 xx xx šroubovým xxxxxxxx x xxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxx, Xxxxxx) pro xxxxxxx v sušárně
4.3 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx ±2 °X
4.4 xX xxxx (xxx desetinná xxxxx)
4.5 xxxxxxxxxx xxxxx (0,2 μx)
4.6 odstředivka
4.7 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
4.8 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx aminokyselin xxxx zařízení HPLC x iontoměničovou kolonou, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx pryskyřicí, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx oddělení xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek. Průtok xxxxxxxxx roztoku a xxxxxxxxxx zajišťují xxxxxxxx xx stálostí xxxxxxx ± 0,5 % xx xxxx zahrnující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx i xxxxxxx vzorku.
Některé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx v případě, xx hydrolyzát xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x = 0,8 xxx/x x obsahuje xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x oxidačního kroku. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx hydrolyzát xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx vysoké xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx objem xxxxxxxx xxxx úpravou xX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx 5 xx. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxxx ve xxxxx xxx teplotě nejvýše 40 °X.
5. Postup
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx mletím tak, xxx xxxxxx xxxxx x xxx 0,5 xx. Xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx před xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °C xxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx xx před xxxxxx extrahují xxxxxxxxxxxxx (3.12).
5.2 Stanovení xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v krmivech x v premixech
Do xxxxxxx baňky xx xxxxxx příslušné množství (1–5 x) upraveného xxxxxx (5.1) s xxxxxxxxx na 0,2 xx x xxxxx xx 100,0 xx xxxxxxxxx xxxxx (3.21). Xxxxx xx xxxxx 60 minut xx xxxxxxxxxx třepačce nebo xxxxx xx magnetické xxxxxxxx (4.8). Po xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x obsahu 100 xx.
Xx xxxxxxx xxxxxxx xx přidá 50 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx x xxxxxxx xx magnetické míchačce xxxxxxx 5 xxxxx. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxx do xxxxxxx o obsahu 100 xx, xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18), xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx odměrné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Použije-li xx xxxxxxx standard, xxxxx xx 1,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) na xxxxxxx 100 ml odstředěného xxxxxxx x potom xx xxxxxx po xxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24).
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.4 – chromatografie.
Nejsou-li extrakty xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
5.3 Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 xxxxxxx
0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxxxx s xxxxxxxxx 0,2 xx:
- do xxxxx x xxxxxxx xxxx x obsahu 100 ml (4.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.3.2.3) xxxx
- xx xxxxx s xxxxxxx xxxx x xxxxxx 250 xx (4.1), xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx sodíku nebo
- xx nádoby o xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) (xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Xxxxxxxx část xxxxxx xx xxxx xxx obsah dusíku xxx 10 xx x obsah xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 100 xx.
Xxxxx/xxxxxx xx umístí do xxxxx s xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xx 0 °X, xxxxx xx xxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.23) x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx/xxxxxx xx uzavře x xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xx x s xxxxx x ledovou xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx 0 °X x xxxxxxx se xxx 16 xxxxx. Xx 16 xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xx xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 x dvojsíranu xxxxxxx (3.4).
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 xxxxxxxxx
5.3.2.1 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
X xxxxxxxxxxx xxxxxx připravenému xxxxx 5.3.1 xx xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) xxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xx lžíci. Xxxxx xxxxxxxxx postupu xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorků
Do xxxxx x xxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 xx nebo 250 xx (4.1) xxxx xx xxxxxx x obsahu100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) xx xxxxxx 0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) x přesností xx 0,2 xx. Xxxxxxxx část vzorku xx měla xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 xx. Xxxxxxx xx xxxxx 25 xx hydrolyzační směsi (3.20) x smíchá xx se xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx xxxxx 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2) se přidají 3 xxxxxxxx xxxxxxx x směs xx xxxxx do mírného xxxx pod xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxx 23 xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx promyje 5 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxx se xxxxxx x xxxxxxx xx x xxxxxx lázni. Xxxx se postupuje xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 uzavřená xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx podle 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 xx xxxxxx xx xxxxxxx (4.3) při 110 °X. Aby xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látek) x xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx volně xx xxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (4.3) 23 xxxxx. Xx skončení xxxxxxxxx xx baňka vyjme xx sušárny, opatrně xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx postupu xxx xxxxxx pH (5.3.3) xx obsah xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx x xxxxxx 250 xx nebo do xxxxx x kulatým xxxx o xxxxxx 250 ml.
Dále xx xxxxxxxxx podle 5.3.3
5.3.3 xxxxxx xX
Xxxxx toho, xxxxx xxxxxxxxx k xxxxxx má xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxx xxxxxx pH xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 xxx chromatografické xxxxxxx (4.9), vyžadující xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx xxxxxxxxxx aminokyselin xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sodíku (xx-xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx), xxxxxxxxxx xx xxxxxx vnitřní xxxxxxx xxxxxxxxxx roztok (3.27.3).
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx hydrolyzátu 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. xx xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).
Na xxxxxxx xxxxxxx (4.7) se xxxxx objem xx 5-10 xx xx xxxxx xxx 40 °X. Xxxxx by xx objem náhodou xxxxxx pod 5 xx, xxxxxxxxxx xx xxxxx odstranit x xxxxx xxxxxxx xxxxx.
xX xx xxxxxx xx 2,20 roztokem xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) x xxxxxxxxx xx podle xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 xxx xxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9)
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 17 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.17), xx xxxxxxx míchání x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx pod 40 °X.
xX se xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx pokračuje xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx vzorků xxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) s upraveným xX xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx odměrné xxxxx x xxxxxx 200 xx a tlumivým xxxxxxxx (3.24) xx xxxxxx po xxxxxx.
Xxxxx-xx xxxxx použit xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 2,00 xx vnitřního xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx se xxxxxx xx značku citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xx přejde x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Xxxxxx-xx xxxxxxx xxxxxx analyzovány týž xxx, xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °C.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxx (5.2) a xxxxxxxxxx (5.3.4) pokojovou xxxxxxx. Směs xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xx zfiltruje xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,2 μ (4.5). Výsledný xxxx roztok xx xxxxxxx xxxxxxxx chromatografii xx analyzátoru aminokyselin (4.9).
Xxxxxxx xxx provést xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx důležité, xxx xx xx xxxxxxx nastřikovalo xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx vzorků x xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx vnitřního standardu. Xxxxxx xxxxx sodíku x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a x roztocích xxxxxx xx možná xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx závisí hlavně xx stabilitě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a analytického xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx se ředí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 – 200 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx typu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx ionexu. Xxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx separovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx i od xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx by xxx xxxxxxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx sloupec.
Při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, by xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxx. Xxxx equimolární xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselin (4.9).
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx poměr xxxxx sedla x xxxxxxx píku xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx aminokyselin na xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 2:10 (xxxxx xx xxxxxxx pouze xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nedostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxx 1:10.
Xxxxxx xxxx xxxxxxx, xx xxxxx bude xxxxxxxxx od "xxxxxxxxxx xxxxxxxx" x xxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx píků vzorků x xxxxxxxxx se xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v x xx xx xxxxxx.
x xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxx = X × X × XX × F / B × X × 1 000
Xx-xx použit xxxxxxx xxxxxxxx, násobí xx xxxxxxxx: X / X
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx standardního xxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x hydrolyzátu xxxx x xxxxxxxx
X = xxxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxxxx v kalibračním xxxxxxxxxxx roztoku
MV = xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
X = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v μxxx/xx
X = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (x) (xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xx vzorek xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
X = xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.3.4) x xx xxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxxxx vypočteného xxxxx 6.1
Xxxxxx x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx stanoví xxxx kyselina xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx (X6X12X2X4X2, XX 240,30) x xxxxxxxx XX 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx methioninsulfon, xxx xxxxxxxxxx se xxxx methionin x xxxxxxxx MV methioninu: 149,21.
Xxxxxxx volný xxxxxxxxx xx zjišťuje xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx XX.
6.1 Xxxxxxx xxxxx zředěného xxxxxxxx (X) xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
X = 100 ml × (10 ml + 5 ml) / 10 xx × X&xxxx;xx / 10xx
X = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7. Vyhodnocení xxxxxx
Xxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx úrovni v xxxx 1990 při xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx směs xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxx broilery, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx). Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx středních xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx hodnoty x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx brojlery |
9,31 n = 16 |
3,92 x = 18 |
5,08 x = 18 |
13,93 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Xxxxxx |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
x = počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx vnitrolaboratorní xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xx) xxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
0,13 x = 15 |
0,10 n = 17 |
0,11 x = 17 |
0,26 x = 13 |
|
Xxxxx směs pro xxxxxxxx |
0,20 x = 16 |
0,11 x = 18 |
0,16 x = 18 |
0,28 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,48 n = 16 |
0,13 x = 17 |
0,27 n = 17 |
0,99 x = 15 |
|
Xxxxxx |
1.30 x = 16 |
_ |
2,19 x = 16 |
2,06 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
Variační xxxxxxxxxx (%) vnitrlaboratorních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Sr)
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
1,9 x = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 n =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro brojlery |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
2,7 x = 16 |
2,6 n = 17 |
2,2 x = 17 |
2,4 n = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 x = 16 |
- |
2,4 n = 16 |
2,1 n = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.2 Reprodukovatelnost
Výsledky xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze shora xxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx standardní xxxxxxxx (XX) v x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
0,28 n = 15 |
0,30 x = 17 |
0,23 x = 17 |
0,30 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,48 n = 16 |
0,34 x = 18 |
0,55 x = 18 |
0,75 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,85 n = 16 |
0,62 x = 17 |
1,57 n = 17 |
1,24 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,49 x = 16 |
- |
6,20 n = 16 |
6,62 x = 16 |
x = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
4,1 x = 15 |
9,9 x = 17 |
7,0 x = 17 |
3,2 n = 13 |
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxxx |
5,2 x = 16 |
8,8 n = 18 |
10,9 n = 18 |
5,4 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
3,8 n = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 x = 17 |
3,0 n = 15 |
|
Xxxxxx |
4,3 n = 16 |
- |
6,9 x = 16 |
6,7 x = 16 |
x = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
8. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx uvedené xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx referenčních xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx certifikovanými kalibračními xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 3.27.4 a 3.27.5) x xxxxxxx xxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx se musí xxxxxxxxxxxx xxx všechny xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx xxx, aby xx dosáhlo xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
9.2 Xxxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx zařízení xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx zkoušek optimalizovány x souladu x xxxxxxxxxxx výrobce.
9.3 Při xxxxxxx xxxx metody x krmiv xxxxxxxxxxxx xxxx než 1 % xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx x podhodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xx proto xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXXX B XXXXXXXXX XXXX
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx se stanoví xxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx Rady 136/66/XXX xx dne 22. xxxx 1996.
Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx následujících postupů:
1.1 Xxxxxx X – xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, které jsou xxxxxxxx do xxxxxx xxxxxxx X.
1.2 Postup X – xxxxxxx xxx
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx se xxx všechny materiály, x xxxxx není xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. xxxxx, xxxxxxxx, bramborové xxxxxxxx x výrobky, které xxxx podrobeny xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x zahřívání).
1.3 Interpretace xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxx výsledku xxxxxxxx X, xxx xxxxxxxx X, xx třeba xxxxxxxxx xx platnou xxxxxxx xxxxx postupu X.
2. Xxxxxxx
2.1 Postup X
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Rozpouštědlo xx xxxxxxxxxxx x zbytek xx xxxxxx x xxxxx.
2.2 Postup X
Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xx ochladí a xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxx zpracuje xxxxx xxxxxxx A.
3. Činidla
3.1 xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx mezi 40 x 50 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx menší xxx 1 a xxxxxx po odpařování xxxxx než 2 xx/100 ml
3.2 xxxxx xxxxx, xxxxxxx
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 3 mol HCl/l
3.4 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxxxxxx), refluxní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxx 10 xxxxx xx xxxxxx. X xxxx bez xxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xx minutu.
4.2 Extrakční xxxxxxx, bez xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, x porositou x xxxxxxx s požadavky xxxxx xxxx 4.1.
4.3 Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 75 °X ± 3 °X, nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 100 °X ± 3 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxx X (viz xxx 8.1)
Xx extrakční xxxxxxx xx naváží 5 x xxxxxx x xxxxxxxxx na 1 xx (4.2) x xxxxxxxxx smotkem xxxx xxx tuku.
Patrona xx xxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xx xxxxx, předem xxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx xxxxxx pemzy [1].
Xxxxxxxxxxxx xx oddestiluje, xxxxxx x xxxxx xx suší 1,5 xxxxxx x sušárně (4.3). Nechá xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xx xxxxxxx 30 xxxxx, xxx se xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx tuku konstantní (xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx následujícími xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1 mg).
5.2 Xxxxxx B
Do xxxxxxx x obsahu 400 xx xxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 300 xx xx odváží 2,5 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx (viz xxx (8,2) x přidá xx 100 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) x úlomky xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx refluxním chladičem. Xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx malém xxxxxxx xxxx na xxxxx xxxxx x vaří xx xx dobu xxxxx hodiny. Během xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx částeček xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.
Xxxx se xxxxxxx x xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), xxx xxx xxxxxxxx nedošlo xx ztrátám xxxx. Xxxxxxxx xx přes xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zbavený tuku. Xxxxxx se promývá xxxxxxxx vodou, až xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx, zda filtrát xxxxxxxxxx xxxxx xxx. Xxxx přítomnost xxxxxxx, xx se xxxxxx xxxx před xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx petroletherem xxxxx xxxxxxx A.
Dvojitý filtrační xxxxx xx zbytkem xx xxxxxx na xxxxxxxx xxxx x xxxx se xxxxxxxx xxxxxx v horkovzdušné xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °X ± 3 °X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx papír s xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx. Xxxxxxx xx vloží xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x třetího xxxxxxxx xxxx 5.1.
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx zbytku xx xxxxxxx jako procento xx vzorku.
7. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx stejném vzorku xxxxxxx pracovníkem xx xxxxx přesáhnout:
- 0,2 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, při obsahu xxxx xxxxxx xxx 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx 5 xx 10 %,
- 0,4 % x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx nad 10 %.
8. Xxxxxxxx
8.1 U xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx olejů x xxxx, které xx xxxxxxx xxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx postupuje následujícím xxxxxxxx:
Xxxxxx xx 20 x vzorku s xxxxxxxxx na 1 xx x xxxxxx xx x 10 xxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx xxxx 5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx xx. 50 xx xxxxxxx xx odpipetuje xx xxxx suché, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx [2].
Rozpouštědlo xx xxxxxxxxxxxx, baňka xx xxxxxx x xxxxxxxxx xx podle xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx procento xx vzorku xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
(10 x + x) × 5
xxx:
x = hmotnost xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxx xxxx extraktu)
b = xxxxxxxx zbytku xx druhé xxxxxxxx x xxxxxxx
8.2 U xxxxxxx, xxxxx mají xxxxx xxxxx tuku xx může xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxxx xx 5 g.
8.3 Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxx obsah xxxx, xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X xxxxxxx x bezvodým xxxxxxx sodným.
8.4 X xxxx 5.2 xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx filtraci xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
8.5 U některých xxxxx xx musí xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx 1,5 xxx. Xx xxxx třeba xxxxxxx přílišnému xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx x nízkým xxxxxxxxx. Xx xxxxx použít x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
8.6 Xxx obsahu xxxx xxx 15 % xx doporučuje xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx extrakci xxxxx xxxxxxx X x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X. Xxxxxx to xx xxxxx xxxx xx xxxxx krmiva x xxxxx xxxx x xxxxxx.
XXXX C
STANOVENÍ XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx metodou se xxxxxxx xxxxx olachindoxu x krmivech. Xxxxx xxx stanovitelnosti xx 5 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx směsí xxxx a methanolu. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx vysoce xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX) xx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxx
3.2 xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 xxxx, xxx XXXX
3.4 xxxxxxx xxxx xxx XXXX:
Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
3.5 xxxxxxxxxx látka: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx, E 851
3.5.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 250 μg/ml
Do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 200 xx xx xxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.5) s xxxxxxxxx na 0,1 xx x xxxxx xxx 190 ml xxxx. Baňka xx xxxxxxx na 20 xxxxx do ultrazvukové xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx. Baňka xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx měsíc.
3.5.2 xxxxxxxx standardní roztok xxxxxxxxxxx, 25 μx/xx
10,0 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx přenese xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 xx, xxxxxx xx xx xxxxxx mobilní xxxx (3.4) x promíchá. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxx xxxxxxxxxxx denně xxxxxxx.
3.5.3 xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx baněk x xxxxxx 50 xx xx xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 x 20,0 ml pracovního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.2). Xxxxxx se xxxxxxx xxxx (3.4) po xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Tyto xxxxxxx xxxxxxxxxx 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 x 10,0 μx olachindoxu xx xx.
Xxxx roztoky xx xxxx připravovat xxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
4.1 xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.2 xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.3 xxxxxxxx XXXX x proměnnou xxxxxxx xxxxxx ultrafialového xxxxxxxxx nebo s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
4.3.1 xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 mm x 4 mm, xxxxxxx C18, 10 μx, nebo srovnatelná xxxxxx
4.4 xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx světlo. Xxxxxxx postupy xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx nebo x nádobách x xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx se xxxx předem xxxxxxxxxx xxx kontrolu, xxx xxxxxxxxxx olachindox xxxx xxxx interferující látky.
5.1.2 Xxxxxxx na xxxxxxxxx xx xxxxxxx analýzou xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx takového množství xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx K xxxxxxxxxxx xx xxxxxx 50 xx/xx xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (3.5.1) do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 250 ml x xxxxxx xx odpaří xx cca 0,5 xx. Xxxxx xx 50 g xxxxxxxxxx xxxxxx, řádně se xxxxxxxx x xxxxx xx 10 minut xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx přejde x xxxxxxxx (5.2).
Poznámka:
Pro xxxxx této metody xx být modelové xxxxxx xxxxxxxxx typu xxxx xxxxxxxx xxxxxx x nesmí xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx 50 x xxxxxx x přesností xx 0,01 x. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 ml, xxxxx xx 100 xx methanolu (3.1) x xxxxx xx xxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xxxxx xx 410 xx xxxx x ponechá xx v xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Baňka xx xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxx xx přenese xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 20 xx, xxxxxx xx xxxxx xx značku x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (viz xxx 9. Poznámky). Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXXX (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx HPLC
5.3.1 Parametry:
Následující xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx, xxxxx xxx použity xxxx xxxxxxxx, za xxxxxxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1)
xxxxxxx fáze (3,4): Xxxx vody (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxx
xxxxxxxx xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx nástřiku: 20 μx–100 μx
Xxxxxxxxx chromatografického xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxx, že se xxxxxxxxxx nastříkne kalibrační xxxxxx (3.5.3) obsahující 2,5 μx/xx, až xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx.
5.3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx nástřiků x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (plochy) xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxx (xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxx x příslušných xxxxxxxxxxx x μx/xx xxxx xxxxxxxxx.
5.3.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2) xxx xxxxxxx stejného xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) píků xxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx výsledků
Ze xxxxxxx xxxxxxx výšky (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx xx zjistí koncentrace x xxxxxxx vzorku x μx/xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx (5.3.2).
Xxxxx olachindoxu ve xxxxxx x x xx/xx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = x × 1&xxxx;000 / m
kde:
c = xxxxxxxxxxx olachindoxu x xxxxxxxx vzorku (5.2) x μg/ml
m = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x x (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Identita
Identita xxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx polem, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3), xxxxxxxxxxxx 5,0 μx/xx olachindoxu.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (co-chromatography)
Extrakt vzorku (5.2) se obohatí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx mělo odpovídat xxxxxxxx olachindoxu xxxxxxxxxx x extraktu vzorku.
S xxxxxxx xx přidané xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx jen xx xxxxxxx výšky xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx píku x polovině xxxx xxxxx xxxx být x xxxxxxx ±10 % xxxxxxx šířky xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) při xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxx spektra zaznamenaný xx vrcholu xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx danou xxxxxxxxxxx schopností xxxxxxxxxx xxxxxxx. Pro detektor x diodovým xxxxx xx xxxxx ±2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx mezi 220 x 400 xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx zaznamenaný xx vrcholu píku xxxxxxxxxxxxx lišit xx xxxxxxxxx částí xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vykázána xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx analytu;
b) xxx vlnové xxxxx xxxx 220 a 350 xx xx xxxxx spektrum xxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxx zkoušeného xxxxxx xxxxx od xxxxxxxxx x této xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 až 100 % relativní absorbance. Xxxxxx kritéria xx xxxxxxxx, jestliže jsou xxxxxxxx xxxxxx maxima x xxxxxxxx xx xxxxx sledovaných xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx nikde 15 % absorbance xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxx-xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx splněno, přítomnost xxxxxxx není potvrzena.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi výsledky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx na stejném xxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 10 x 20 mg/kg, xxxxx přesáhnout15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
X xxxxx ES xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxx xx 13 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx tabulce:
|
| xxxxxx 1 |
xxxxxx 2 |
xxxxxx 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
X |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
X |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
xxxxxxx (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (xx/xx) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
XXx (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
XXX (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx obsah (xx/xx) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
xxxxxxxxx (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: xxxxx xxxxxxxxxx
x: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx tato metoda xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx obsahující více xxx 100 xx/xx xxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxx vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Xxxxx xx xx xxx xxxxxxxx zkoušet na xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx za xxxxxxxx kuličky.
[2] Xxxxx xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx kuličky.