Čtvrtá Xxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 5. xxxxxxxx 1972,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxx kontrolu xxxxx
(73/46/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx metod xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], ve xxxxx xxxxxxxx 72/275/EHS xx xxx 20. července 1972 [2], x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxx xxxxxxxx požaduje, xxx xxxx oficiální xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx x analýzy xx xxxxxx xxxxxxxx souladu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx správním xxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 71/250/XXX xx dne 15. xxxxxxxx 1971 [3], 71/393/XXX xx dne 18. xxxxxxxxx 1971 [4] x 72/199/XXX xx dne 27. xxxxx 1972 [5] xxx xxxxxxxxx řadu xxxxxxxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx metod;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx uvedená x xxxx směrnici jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx krmiva;
PŘIJALA TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxx oficiální xxxxxxxx krmiv, xx xx týče jejich xxxxxx vlhkosti x xxxxxxxxxxx a rostlinných xxxx x olejů x obsahů xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x krmivech, xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx I xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx ustanovení xxxxxxxxx x části 1 (xxxx) přílohy xxxxx směrnice Xxxxxx 71/250/XXX ze dne 15. xxxxxx 1971 xx vztahují x xx metody xxxxxxx x xxxxxxx I xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx byly xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx X), xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxx X1), xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx X), prováděny xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx II xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx 1 (úvod) přílohy xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx x. 71/250/EHS ze xxx 15. xxxxxx 1971 xx, s xxxxxxxx části xxxxxxxx xx xxxxxxxx vzorku, xxx má xxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx II xxxx směrnice.
Xxxxxx 3
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v účinnost xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné pro xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 1. xxxxx 1974. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Komisi.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 5. xxxxxxxx 1972.
Xx Xxxxxx
X. L. Xxxxxxxx
xxxxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 171, 29.7.1972, x. 39.
[3] Úř. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[4] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[5] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.
PŘÍLOHA X
1. STANOVENÍ XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX
1. Xxxx x rozsah
Tato metoda xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx při 103 °C. Xxxxxx xxxxxxxxx se stanoví xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx
3.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx materiálu, 8 xx 9 xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx.
3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xx zesílenou xxxxxx x expanzní xxxxxxx xx horním xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 80 °X xx xxxxxxx 110 °X, x xxxxxxxxx 10 xx xxxxxx.
3.3 Xxxxxxx lázeň xxxx xxxxxxxxxx varná plotýnka.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx činidlo.
3.5 Analytické xxxx.
4. Postup
Odvažte x xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx 20 g xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxx, xxxxxxxx xxxxx (3.1) s xxxxxxxxxx (3.2). Zahřejte xxxxxxxx xxxxx nebo plotýnku (3.3) za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx dosáhla 90 °X xxxxx xxx 7 minut.
Snižte xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx misky. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 105 °X. Xxxxxxxxxx v xxxxxxx xxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxx zajištěno xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 103 °X ± 2 °X, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx ochlaďte na 93 °C. Xxxxx xxxxxxxx vychladnout xx xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxx. Opakujte xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxx nepřekračuje 2 mg.
Poznámka:
Vzestup xxxxxxxxx xxxxxx xx opakovaném xxxxxx naznačuje oxidaci xxxx, v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x vážení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxx zvětšovat.
5. Výpočet xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx, je xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(X1 – X2) · 100 / Mo
kde:
Mo = xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx;
X1 = hmota xxxxx x obsahem x xxxxxxx xxxx ohřevem;
M2 = xxxxx xxxxx x obsahem v xxxxxxx po xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx než 0,05 % xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx "xxxxx xxx 0,05 %".
Opakovatelnost
Rozdíl xx xxxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených u xxxxxxxx vzorku nesmí xxxxxxxxx 0,05 % x xxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXXXXXX XXXXXXX
— xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx —
1. Xxxx x xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx hořčíku x krmivech. Xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx 5 %.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, je xxxxxxxxx přímo xx xxxxxxx kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx stanoví atomovou xxxxxxxxx spektrofotometrií xxx xxxxxx xxxxx 285,2 xx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx x.x. x: 1,16.
3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. x: 1,19.
3.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxx drát, xxxx XxXX4 7X2X, xxxxxx xx pokojové xxxxxxx.
3.4 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxxxx nebo xxxxxxxx) 2,5 % (76,08 x SrCl2 6X2X x.x., xxxx 60,38 x Xx(Xx3)2 p.a.).
3.5 Xxxxxxxxxx roztok xxxxxxx: xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 1 x xxxxxxx (3.3), x kterého byla xxxxxx xxxxxxx odstraněna xxxxxxxx vrstva, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (10,143 x) MgSO47H2O (3.3). Xxxxxx do 1000 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx 80 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 1000 xx vodou. 1 xx xxxxxx roztoku xxxxxxxx 1,000 xx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx elektrická muflová xxx.
4.3 Atomový absorpční xxxxxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxx vzorku
5.1.1 Krmiva xxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx s xxxxxxxxx xx xx 5 x xxxxxx xx 500 xx xxxxxxx xxxxx x 250 až 300 xx xxxx. Xxxxxxxx 40 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx varu po xxxx 30 minut. Xxxxxxxx vychladnout, xxxxxxx xxxxx na xxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx kádinky xxxx suchý xxxxxxxx xxxxx. Vyřaďte prvních 30 ml xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 5 x xxxxxx v dostatečném xxxxxxxx (15-30 xx) xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2), xxxxxxx do sucha xx xxxxx lázni x vložte na xxxxx hodinu xx xxxxxxx o 105 °X. Xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxx věty x 5.1.2.
5.1.2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x přesností xx mg 5 x xxxxxx xx xxxxxxx a zpopelněte xxx 550 °X x muflové xxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx, který xx xxx uhlíkatých xxxxxx, x xxxxxxxx vychladnout. Xxx xxx odstraněn xxxxxx, přidejte do xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (15-30 ml) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx lázni x xxxxxx na xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x 105 °X. Xxxxxx rozpusťte 10 xx kyseliny chlorovodíkové (3.1) a xxxxxxxx xx 500 ml xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx vody. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx do suché xxxxxxx přes suchý xxxxxxxx filtr. Vyřaďte xxxxxxx 30 ml xxxxxxxx.
5.1.3 Krmiva složená xxxxxxxx z organických xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 5 x xxxxxx xx xxxxxxx a zpopelněte xxx 550 °C x xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx je xxx xxxxxxxxxx částic. Xxxxx ošetřete 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx xxxxx na xxxxx xxxxx x převeďte xx jednu xxxxxx xx xxxxxxx o 105 °X, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nerozpustnými. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.1), xxxxxxxx xx 250 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx horké xxxx, xxxxxx xx xxxx, nechejte xxxxxxxxxxx x doplňte na xxxxx xxxxx. Promíchejte x xxxxxxxxxxxx do xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx filtr. Xxxxxxx prvních 30 xx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5) vodou xxxxxxxxx nejméně 5 xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxx 10 xx roztoku xxxx xxxxxxxx (3.4) a xxxxx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxx alikvotní část xxxxxxxx získaného podle 5.1.1, 5.1.2 xxxx 5.1.3 xxx, že xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx referenčních xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx kyseliny chlorovodíkové xxxxxx roztoku xxxxx xxxxxxxxx 0,4 N. Xxxxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (3.4) a potom xxxxxxx objem xx 100 xx xxxxx. Xxxxxx absorpci xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx, a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx při vlnové xxxxx 285,2 xx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx vzorku xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 5 % xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXX VLÁKNINY
1. Xxxx x rozsah
Tato metoda xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx nerozpustné v xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx vláknina.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xx třeba, xx xxxxxxxxx postupně xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sírové x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx azbestu, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxx 900 °X. Ztráta xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vlákniny x xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxx sírová 0,26 X.
3.2 Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx užívanému s Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 násobek xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (1 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x: 1,19 + 3 xxxx vody). Xxxxx xxxx přibližně 45 xxxxx, xxxxxxxx vychladnout, xxxxxxxxxxxx přes Buchnerovu xxxxxxx. Promývejte xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx chlorovodíková xxxxxxx x promývací xxxx, x potom xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx 2 xxxxxx xxx 900 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx ošetřený xxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx. Musí xxxxxxxx xxxxxxxxx dané v xxxx 5, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxxx emulse (xx. xxxxxxx).
3.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,23 X.
3.5 Xxxxxxxx chlorovodíková 0,5 X.
3.6 Aceton.
3.7 Xxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Kádinky x xxxxxx xxxxxxx 600 ml x xxxxxxxxx úrovně 200 xx.
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 80 xx x průměru a xxxxxxxxx 4 xx xxxxx, perforované xxxxxxxxx 32 xxxxxx, každý xxxxxxxxx x xxxxxxx 4 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 2 litry x xxxxxxxxx úrovně 800 ml x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx 120 xx x xxxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx přibližně 40 xx x xxxxxxx x přibližně 4 xx xxxxx xx xxxxxxxxx okraji xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx (4.3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 16 xxxxxx, každá x xxxxxxx přibližně 4 xx x xxxxxxx drátěnou xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 1 xx. Xxxxx x síťovina xxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
4.5 Xxxxxxxxx xxxx křemíkové xxxxxxxxx xxxxxxx.
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxxxx.
4.8 Asbestový xxxxx: Xxxxxxxxxxx 2,0 x xxxxxxx (3.2) xx 100 xx xxxx.
Xxxxxxxxx xx vakua xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx x xxxxxxx vakuové xxxxx (4.3). Zachyťte xxxxxxx x filtrujte xxxxx xxxxxx přes xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
Xxxxxxx s xxxxxxxxx xx xx 3 g xxxxxx x 2 g xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2) xx xxxxxxx (4.1), xxxxxxxx 200 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.1) x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.3). Xxxxxx rychle xx xxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 30 xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx je 500 xx xxxxx s xxxxxxx dnem, xx xxxxx xxxxxxxxx studená xxxx. Zastavte var xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx vody x xxxxxxxxx okamžitě xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx ve 4.8.
Xxxxxxxxx xxxxxx pěti dávkami xxxxxxxxx 100 ml xxxxx horké xxxx, xxx xx získal xxxxxxx xxxxx filtrátu 800 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1), xxxxx xxxx xxxxxxxx vybavena xxxxxxxxxxxx kotoučem (4.2) xxx xxxxxxxx varu. Xxxxxxxx 200 xx xxxxxxx xxxxxxxxx draselného (3.4). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx a xxxxxxxx vařit přesně 30 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 ml xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxx přes xxxxxxx xxxxxx připravený xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx ve 4.8. Xxxxxxxxx zbytek velmi xxxxxx vodou, xxxxx xxxx vymývací xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx), potom 3krát xxxxxxxx (3.6) (xxxxxxxxx 100 xx xxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx kelímku (4.5), xxxxxxxx, xxxxx xx to xxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx 130 °X.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx (4.7) a xxxxxx zvažte.
Vložte xxxxxxx xx muflové xxxx (4.6) a nechejte xxxxxxxxx xx dobu 30 minut při 900 °C. Nechejte xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx pokusza xxxxxxx stejného xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2), xxx xxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx ze xxxxxxxxxx 6 x xxxxxxx, xxxxx překročit 10 xx.
6. Výpočet xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xxxxxxxx, jako xxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxx:
(x-x) · 100 / 3
kde:
a = ztráta váhy xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
x = xxxxxx xxxx po xxxxxxxxxx xxxxx slepého pokusu.
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x stejného vzorku xxxxx překročit:
0,3 v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 %;
3 % xxx. x xxxxxx hrubé xxxxxxxx rovných nebo xxxxxxx xxx 10 %.
7. Poznámky
7.1 Krmiva xxxxxxxxxx xxxx xxx 10 % xxxxx x xxxx xxxx xxx xxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx testovaný xxxxxx (3 x x xxxxxxxxx na xx) xx azbestový xxxxx (4.8). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 50 ml xxxxxxxxxxxxx (3.7) x xxxxxxx xxxxxxx filtrujte xx vakua. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorek x xxxxxx kvantitativně xx xxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx je xxxxxxx v xxxx 5.
7.2 Xxxxxx obsahující xxxxx a xxxx, xxx nemohou být xxxxxxxxxxx xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x 7.1 x následně potom, xx bylo provedeno xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
Xxx provedení xxxxxxxxx xxxxxxxx zbytek třikrát xxxxxxxx (3.6) (100 xx celkem), xxxxx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx kádinky (4.1) x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx bodu 5 (xxxxxxxx roztokem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx).
7.3 Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx (xxxx xxx 2 % xxxxxxx), xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (3 x x xxxxxxxxx xx xx) xx kádinky (4.1) xx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 0,5 X (3.5) a xxxxxxxx stát x xxxxxxx xx xxxx 5 xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx vodou. Xxxx xxxxx xxxxxxxx 2,0 x xxxxxxx určeného xxx xxx s xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx filtrace xxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx acetonem (3.6). Xxxxx postupujte tak, xxx uvedeno x xxxx 5.
PŘÍLOHA II
1. STANOVENÍ XXXXXXXX (XXXXXXX X)
1. Xxxx x rozsah
Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (vitamín X) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx detekce xx 10000 XX/xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx krmiva x 4000 XX/xx xxx ostatní [1]. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxx, xxxxx jejich xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxx A: xxxxxx xxxxx xxx 200000 IU/kg;
Skupina X: xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx než 200000 XX/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx hydrolyzován za xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx je xxxxxxxxxxx 1,2-xxxxxxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx chromatografován xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (u xxxxxxxx xxxxxxx X xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pouze x xxxxxxxx xxxxxxxxx). X xxxxxxxx xxxxxxx X je xxxxxxx xxxxxxxx spektrofotometricky xxx 610 nm po xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx Xxxx-Xxxxxxxx reakce; x produktů xxxxxxx X spektrofotometricky v XX xxxxxxx xxx 325 nm.
3. Xxxxxxxxxx
x) xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X
3.1 96 % (V/V) ethanol.
3.2 10 % (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx sodného x.x. xxxx
3.3 čištěný xxxxx.
3.4 50 % (xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxx) roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.5 1 X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx p.a.
3.6 0,5 X xxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx x.x.
3.7 1,2-xxxxxxxxxxxx x.x.
3.8 Xxxxxxxxxxx, rozsah xxxx: 30–50 °C. Xxxxx je xx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxx 1000 xx petroletheru se 20 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zůstává xxxxxxxx xxxxxxxx. Odstraňte kyselinu x promývejte xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 ml xxxx, xxxxxxx 250 xx 10 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x třikrát 500 xx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx vrstvu, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, přefiltrujte a xxxxxxxxxx.
3.9 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx podle Brockmanna: xxxxxxx xx xxxx 8 xxxxx při 750 °X, xxxxxxxxx x exsikátoru x xxxxxxxxxx v xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx zábrusovou skleněnou xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx chromatografii zvlhčete xxxxxxxxxx: do xxxxx x hnědého skla xxxxxx 10 x xxxxx xxxxxxxxx x 0,7 ml xxxx, xxxxxxxx zátkou, xxxxxxxxxx xx xxxx 5 xxxxx v lázni x xxxxxx vodou xx současného protřepávání. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ověřte xxxxxxxx xxxxx připraveného xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx retinolu (3.17) (xxx 500 XX) xxxxx postupu xxxxxxxxx x 5.3 x 5.4 a xxxxxxxxxx xxxxxx.
3.10 Xxxxxxx oxid xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx 1 (Xxxxx, Merck xxxx ekvivalentní).
3.11 Xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx oxidu xxxxxxxxx (3.10). (25 x xxxxx xxxxxxxxx na 250 ml xxxxxxxxxxxxx.)
3.12 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.8) xx 4, 8, 12, 16 x 20 % (V/V) xxxxxxxxxxxxx (3.11).
3.13 0,5 xxx/x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx x 70 % (V/V) glycerinu xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx p.a.
b) xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X
3.14 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx benzen x.x.
3.15 Xxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (3.10) (50 x oxidu xxxxxxxxx xx 200 xx xxxxxxxxxxx; doporučuje xx xxxxxxxxxxxxxxxx prvních 50 xx xxxxxx xxxxxxx).
3.16 Xxxx-Xxxxxxxx činidlo: xxxxxxxx xxxxxxxxx 25 x chloridu xxxxxxxxxxxx x.x. (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx) se 100 xx xxxxxxxxxxx (3.15), xxxxx není xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Přidejte 2 xx xxxxxxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxx x chladničce x láhvi z xxxxxxx skla xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx týdnů.
3.17 Xxxxxxx – xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
x) xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X
3.18 Xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Vodní xxxxx.
4.2 Vakuová odparka x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxx chromatografické xxxxxxx (xxxxx: 300 mm; xxxxxxx xxxxxx: xxxxx 13 xx).
4.4 Spektrofotometr x 10ml xxxxxxxx. Xxxxxx v xxxxxxx XX xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.5 XX xxxxx xxxxxx pro 365 xx.
5. Postup
Poznámka:
Všechny xxxxxxx xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxx světlo, xxxxx je xx xxxxxxx, x zařízení x xxxxxxx skla.
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxx
X jemně xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx retinolu, xxxxx:
0,1–1,0 x xxx koncentráty (xxxxxx větší xxx 20000 IU/g);
3,0–5,0 g xxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx 400 x 20000 IU/g);
10–20 x xxx minerální směsi;
30 x pro xxxxxxxx xxxxxxx X.
Xxxxx umístněte xxxxxxxxx xxxxxx xx 500 ml xxxxx xx xxxxxxxxx zábrusovou xxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxx [2]
Přidejte postupně x xxxxxxxxxxx xxxxxx 40 xx xxxxxxxx (3.1), 2 ml xxxxxxx askorbanu sodného (3.2) [3], 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) x 2 xx roztoku xxxxxx xxxxxxx (3.13).
Xxxxxxxxxx xx dobu 30 xxxxx xxx 70-80 °X xxx zpětným xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pod xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 50 ml ethanolu (3.1) x 100 xx 1,2-dichlorethanu (3.7) (xxxxxxxxxxx pipetou). Xxxxx xxxxxxxxxxx a potom xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx nádoby. Xxxxxxxx xx nádoby 150 xx roztoku xxxxxxxxx draselného (3.5), xxxxxxxxxxx po dobu 30 vteřin x xxxxxxxx stát, xxxxx xxxxxx vrstvy odděleny. Xxxxxxxx vrstvu xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxx xxxxxx, přidejte 40 ml roztoku xxxxxxxxx draselného (3.6), xxxxxxxxxxx xx dobu 10 xxxxxx a xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx vrstvu xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x propláchněte 6–8 xxxx 40 xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxx xxxxxx dichlorethanu a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx za použití xxxxxxx filtračního xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx alikvotní xxxx xxxxxxx xx xxxxx a ve xxxxx xxxxx xxx 40 °X. Rychle xxxxxxxx xxxxxx 5 xx petroletheru (3.8).
Xxx xxxxxxxx skupiny X xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3.1.
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxx xxxxxx do 50 xx odměrné xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.8), xxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx x 5.4.2.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxx chromatografickou xxxxxxx (4.3) do xxxx 200 mm 10 x xxxxx xxxxxxxxx (3.9) předem xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (3.8). Xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx získaný x 5.2 a xxxxx xxxxxxxx 20 xx xxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx dávkami xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx 4, 8, 12, 16 x 20 % diethyletheru (3.12) xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx vakua, xxxxxx xxxxxxx je 2 xx 3 kapky xx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx [4]. Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12). Xxxxxxxxxx xxxxxxx za XX xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx výbojkou). Xxxxxxxxxxxxx zóna xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx žlutých xxx xxxxxxxxx, jež xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx frakci xxxxxxxxxx xxxxxxx shromážděte xx Xxxxxxxxxxxxx baňky.
5.3.2 Produkty xxxxxxx X
Xxxxxxxxxxxxxx musí xxx prováděna xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx získaná x 5.4.2 xxxxxxxxx požadavky xxxx v 5.4.2.
Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx chromatografické xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x petroletheru, získaného x 5.2, obsahujícího xxxxxxxxx 500 IU xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx uvedeného x 5.3.1.
5.4 Měření xxxxxxx xxxxxxx
5.4.1 Produkty xxxxxxx X
Xxxxxxx xx xxxxx za vakua xxxxx obsahující retinol xxxxxxx v 5.3.1. Xxxxxxxx xxxxxx 2 xx xxxxxxx (3.14). Xxxxxxxx 0,3 ml xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16). Xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx optickou xxxxxxx spektrofotometrem při 610 nm xxxxxx 30 vteřin poté, xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx standardní xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx standardních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Carr-Priceovým xxxxxxxx (2 xx 16 IU xxxxxxxx-xxxxxxxx (3.17) xx 0,3 xx xxxxxxx (3.14) + 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16)). Xxxxxxxxxx křivka xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x často xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx připraveného roztoku Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx.
5.4.2 Produkty xxxxxxx B
Odeberte xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, získaného v 5.2, xxxxxxxxxxxx přibližně 200 IU retinolu. Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx (3.18) Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxx 325, 310 a 334 xx. Maximální xxxxxxxx se nachází xx 325 nm. Xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx vypočítá xxxxxxxxxx:
X325 · 18,30 = IU xxxxxxxx/xx
Xxxxxxx, xxxxx optických xxxxxx
X310 : X325 x X334 : X325
xxxx xxx 6 : 7 = 0,857.
Pokud xx jeden x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx této xxxxxxx (< 0,830 xxxx >0,880), musí xxxxxx xxxxxxx hustoty xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx s metodou xxxxx v 5.3.2. Xxxxx měření xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx ukáže, že xx xxxxxxx poměr xxxxx xxxxxxxx xxxx xx hodnoty 0,857 (&xx; 0,830 nebo &xx; 0,880), xxxx xxx xxxxxxxxx provedeno x souladu s xxxxxxx danou xxx xxxxxxxx skupiny A.
6. Xxxxxxx výsledků
Vypočítejte obsah xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxx x úvahu xxxx testovaného vzorku x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x XX xxxxxxxx na kg xxxxxx xxxx xx xx koncentrátu xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx paralelních stanovení xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- 20 % xxx. x obsahů xxxxxxxx xxxxxxx xxx 75000 XX/xx,
- 15000 IU x xxxxxx xxxx 75000 x 150000 XX/xx,
- 10 % xxx. x xxxxxx xxxx 150000 x 250000 XX/xx,
- 25000 XX x xxxxxx xxxx 250000 x 500000 XX/xx,
- 5 % xxx. u xxxxxx větších xxx 500000 XX/xx.
2. STANOVENÍ XXXXXXXX (XXXXXXX X1, XXXXXXX)
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx, xxxxxxxx B1) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x premixech. Xxxxx xxxxxxx xx 5 xxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx je xx xxxxx ošetřen xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx enzymaticky xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx alkalické xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x stanoven xxxxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 100 μx/xx: xxxxxxxxx 112,3 xx xxxxxxxx-XXX, předem xxxxxxxxx xx xxxxx na xxxxxx xxxx, x 1000 xx 0,2 X kyseliny sírové (3.2). Pokud xx xxxxxx uchováván na xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
3.2 0,2 X xxxxxxxx xxxxxx.
3.3 Čistý xxxxxxxx xxxxx.
3.4 20 % (váhově xxxxxxxx x objemu) xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.5 25 % (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.6 Oxidační směs: xxxxxxxxx 2 ml xxxxxxx hexakyanoželezitanu xxxxxxxxxx (3.4) xx 48 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5). Tato xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxx 4 hodiny.
3.7 Xxxxxxxxxx p.a.
3.8 2,5 X xxxxxx octanu xxxxxxx.
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, fosfatázu x amylázu (xxxx. xxxxxxx).
3.10 96 % (X/X) xxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) xx 3 až 50 xx trubicemi xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zátkami.
4.3 Xxxxxxxxxx.
5. Postup
5.1 Enzymatická xxxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxx 250 xx xxxxxxxxx baněk X x B xxxxxx xxxxxxx množství xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx obsahujícího xxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx x 125 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.2). Přidejte xxxxxx, xxxxx xx xxxxx X, 1,0 xx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.1) (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxx protřepte xxxxx, umístněte xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx tam po xxxx 15 minut x xxxxxxxxxxxxx protřepávejte. Xxxxxxxx vychladnout na xxxxxxxxx 45 xX. Xxxxxxxx do xxxxx xxxxx 20 xx xxxxxxx octanu xxxxxxx (3.8) x 0,5 x multienzymatického xxxxxxxxx (3.9), xxxxx nechejte xxxx xx xxxx 20 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.8), xxxxxxx na objem xxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx. Odeberte xxxxxxxx X x B xxxx, xx xxxx xxxxxxxxx prvních 15 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
5.1.1 Referenční xxxxxx X
Xx xxxxxxx odstředivky (4.2) dejte 5 xx xxxxxxxx A x xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.3). Xxxxxxx xxxxxxx xx vroucí xxxxx xxxxx xx 15 xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
5.1.2 Xxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx) x X (xxxxxx)
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2) xxxxx 5 xx xxxxxxxx X a 5 xx xxxxxxxx X xx jiné xxxxxxx odstředivky (4.2).
5.2 Xxxxxxx
Xxxxxxxx k roztokům X, X a X 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.6) x x minutu xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx (3.7). Zazátkujte xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 5 xxxxxx. Xxxxxxxx stát xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx vrstvy. Z xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 5 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx 25 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx ethanolem (3.10) x homogenizujte (= xxxxxxxx X, X x B).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx optimální odezvu xx xxxxxxxxxxxx trichrómu. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 365 nm.
Nastavte xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx X. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X x X.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx x xx/xx xxxxxx xx xxx xxxxxxx:
x · b / (x-x) x
xxx:
x = intenzita fluorescence xxxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx);
x = xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx B (xxxxxx);
x = xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx v x;
x = množství xxxxxxxx x μg xxxxxxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx standard).
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit:
10 % xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx nižších xxx 500 xx/xx x
5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx než 500 mg/kg.
3. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXX X)
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx askorbové x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx X) v krmivech, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx je 5 xxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx skupin podle xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx obsahu xxxxxxxx X:
Xxxxxxx A: xxxxxx xxxxx xxx 10 x/xx;
Xxxxxxx B: xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx než 10 g/kg.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Vodní xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx, xxx byla xxxxxxxx askorbová převedena xx xxxxxxxx dehydroaskorbovou, x xxxxx xxxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx směsí xxxxx acetátu, ledové xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx rozpuštěn xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 xx.
X xxxxxxxx skupiny X je xxxxxxx xxxxxx x kolonové xxxxxxxxxxxxxx xxxx podroben xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,05 % xxxxxxxx X-xxxxxxxxx: xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxx L-askorbové x.x. x přibližně 20 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x doplňte xx xxxxxx 100 ml xxxxx. Připravujte bezprostředně xxxx xxxxxxxx.
3.2 10 % (váhově vzhledem x objemu) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxx 200 x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx p.a. x xxxxxxx xx 2000 ml xxxxx. Xxxxxxxxx při 4oC. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx x.x.
3.4 0,5 % (xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxx) xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx p.a. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
3.5 Filtrační xxxxxxx (X. x X. x. 121 xxxx xxxxxxxxxx)
3.6 2 % xxxxxx roztok (xxxxxx xxxxxxxx x objemu) 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 2 x 2,4-dinitrophenylhydrazinu xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx sírové (25 xx xxxxxxxx sírové x.x., x: 1,84, xxxxxx xxxxxxxxx xx 100 ml xxxxx). Xxxxx roztok, xx-xx xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx xxxxx týden.
3.7 Xxxxx xxxx
3.8 Kysličník xxxxxxxx.
3.9 Xxxx xxxxx xxxxxxx p.a./ledové xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx x.x.: 96/2/2 xxxxxxxx.
3.10 Xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x.x./xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx: 97/3 objemově.
3.11 Silika xxx, xxxxxxxx částic: 0,05 až 0,2 xx.
3.12 Xxxxx silika xxx xxxxxx X xxx xxxxxxxxxxxx chromatografii.
3.13 Xxxxxx kyselinu xxxxxxx: xxxxx 105 xx xxxx xx 200 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx objem xxxxxxxxx xxxxxxx p.a., x: 1,84.
3.14 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx tenkovrstvou xxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx x.x., 25 ml xxxxx xxxxxxx x.x. x 4,0 ml 96 % (xxxxxx xxxxxxxx x objemu) xxxxxxxx xxxxxx x.x. Xxxxxxx xx 2 až 3 xxxxxxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 20 °X.
4.2 Odstředivka (3500 xx./xxx.) xx 40 až 50 xx trubicemi xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zábrusovými xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxx vakuová xxxxxxx x 250 ml xxxxxxx.
4.4 Xxxxxxxx chromatografické xxxxxxx (délka: 100 xx, xxxxxxx průměr: 20 mm), se xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. Xxxxxxxxx trubice).
4.5 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx s xxxxxx s 10ml xxxxxxxx.
4.6 Xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.12) xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,5 až 0,6 mm. (Xxxxxx xxxx xxx vyrobené xxxxx.) Xxxxx desky xx 2 x xxx xx 3 xxxxxx x xxxxxxx xxx 120 až 130 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a potom xxxxxxxx x exsikátoru xx xxxxxxx 24 xxxxx před xxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxx xxxxxxxxx xx 120 xx 130 °X.
5. Postup
5.1 Xxxxxxxx
Xx xxxxx xx dvou 250 xx xxxxxxxxx xxxxx (se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx) X x X xxxxxx xxxxxxx množství xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 200 μg xxxxxxxx X. Přidejte, xxxxx do baňky X, 0,4 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx 30 xx xxxxxxxxxxx (3.3) a 25 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) při 4 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx 10 xx 15 minut. Xxxxxxxx 25 xx xxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, silně xxxxxxxxxxx xx 10 xxxxxx x xxxxxxxx xxxx 10 xx 15 xxxxx xx xxxxx lázni (4.1). Xxxxxxxxx, aby se xxxxxxxx vodní fáze xx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxx, u xxxxxxx xxxxxxxx A (xxxxxxx xxxxxxxx) a X.
5.2 Xxxxxxx
Xx xxxxxxx pipety xxxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxx x 5.1 xx xxxxxxx xxxxxxx vybavené xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx 0,5 xx 1 xx xxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxxxxxx. Vytvoří xx xxxxxxx zbarvení, které xx xxxx přetrvat xxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx přibližně 300 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5), protřepejte x xxxxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx nemusí xxx xxxxx xxxxx.
5.3 Reakce x 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx hydrazonu
Za použití xxxxxx xxxxxxxx 10 xx filtrátu xxxxxxxxx x 5.2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2), xxxxxxxx 2 xx xxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx (3.7) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3.8) xx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xx přibližně 15 xxxxx (xxxx xxx) xx xxxxx xxxxx (4.1).
Xxxxx xxxxxxxx 3 xx xxxx, 20 xx směsi ethyl xxxxxxx/xxxxxx kyseliny octové/acetonu (3.9) x přibližně 800 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5). Xxxxxxxxxx xxxxxxx, silně xxxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx a xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 15 xx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (4.3), xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zbytek. Rozpusťte xxxxxx xx 2 xx xxxxx ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) za ohřevu xx 50 °X, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 10 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx kyseliny octové (3.10) x promíchejte.
5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) do xxxxxx 30 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx kyseliny xxxxxx (3.10). Suspendujte (xxxxx protřepávaje) 5 x silika xxxx (3.11) ve 30 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10); xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Nechejte xxxx x potom stlačte xxx dusíkem (3.7) xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx do trubice xxxxxx xxxxxxx x 5.3, vypláchněte xxxxx xxxxx množstvím směsi xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx kyseliny octové (3.10) x xxxxxxxx xx trubice, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (3.10) x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (3 xx 4 xxxxx xxxxxxxxx 5 xx), xxxxx není získán xxxxxxxx xxxxx. Vyřaďte xxxx eluátu, xxxxx xx zbarven xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx trubice xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9), xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.
5.4.1 U xxxxxxxx xxxxxxx X (xxxxx vitamínu C xxxxx xxx 10 x/xx), xxxxxxxxx xxxxxx xx 2,0 ml xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové/acetonu (3.9) x ihned xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxx je xxxxxxx x 5.5.
5.4.2 U xxxxxxxx skupiny X (xxxxx xxxxxxxx C xx xxxxx nebo xx xxxxx xxx 10 x/xx), xxxxxxxx xxxxxxxx zbytek 4,0 xx zředěné kyseliny xxxxxx (3.13), xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx optickou xxxxxxx, jak xx xxxxxxx x 5.6.
5.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx postupy provádějte xxxxxxxxxx. Umístněte 0,5 xx roztoku xxxxxxxxx x 5.4.4 x xxxxx čáře xx xxxxxxxx (4.6). Za xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla (3.14) vyvíjejte xx xxxxxxx 20 minut x xxxxx vyplněném xxxxxx xxxxxxxxxxxx, dokud xxxx xxxxxx zbarvená xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Označte xxxxxxx xxxxxx xxxx, seškrabejte xxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4).
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 2 ml x xxxxxxx 1,5 xx xxxxx ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9). Xxxxxxx eluát xx xxxx xxxxx (poslední xxx xxxx xxx xxxxxxxx). Odpařte do xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 4,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.13), silně xxxxxxxxxxx, xxx xx zbytek xxxxx rozpustil x xxxxxx optickou hustotu.
5.6 Xxxxxx optické xxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 xx 20 až 30 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx sírovou (3.13).
5.7 Xxxxx pokus
Proveďte xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ale xxx xxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxx x x na xx xx xxx xxxxxxx:
(x – x) · 2 / (x – x) · 10x
xxx:
x = optická xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
x = optická xxxxxxx xxxxxxx interního standardu;
c = xxxxxxx hustota xxxxxxx xxxxxx;
x = xxxx xxxxxxxxxxx vzorku x gramech.
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
10 % rel. x obsahů xxxxxxxx X xxxxxxx xxx 10 x/xx x
5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx než 10 x/xx.
[1] 1 XX = 0,3 μx xxxxxxxx.
[2] X xxxxxxxx krmiv x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx x druhém xxxxxxxx xxxx 5.2.
[3] Xxxxxxxx sodný nemusí xxx přidán, když xxxxxxx hydrolýza x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
[4] Xxxxx xxxxxxxx může být xxxxxxxx měřením optické xxxxxxx xxx 450 xx; X 1% / 1xx = 2600.