Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx

xx xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,

s xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX ze dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx článek 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx účelem xxxxxxxx, xxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx předpisů xx jakost a xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx vzorků a xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/EHS [2], 71/393/EHS [3], 72/199/XXX [4], 73/46/XXX [5], 74/203/XXX [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] a 78/633/EHS [9], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ze dne 30. července 1981, xxx xxxx analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xx xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nyní xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx krmiva,

PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:

Článek 1

Členské xxxxx xxxxxxx, že analýzy xxx úřední xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx a monensinu xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx státy xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx souladu s xxxxx xxxxxxxx xx 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.

X Xxxxxxx dne 31. xxxxxxxx 1981.

Za Xxxxxx

Xxxxxx Thorn

předseda

[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Úř. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Úř. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Úř. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Úř. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

PŘÍLOHA

1. STANOVENÍ XXXXXXXXXX XXXXXX X AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx premixech. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti xx 2 mg/kg (2 xxx). Přítomnost xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx působit xxxxxx.

2. PRINCIP

Ze směsi xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx chlorovodíková se xxxxxxxxxxx xxxxxx. Extrakt xx xxxxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx měřením xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis. Xxxxxx xx dokáže xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zónami xxxxxxxxxxxxxx. Průměr inhibičních xxx je xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) v xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx a přes xxx xx xxx 30 °C xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxx x chladničce xxx xxx 4 °X x xxxxx měsíc xx znovu naočkuje.

3.2. Xxxxxxxx suspenze xxxx [1]

Xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx vody. Xxxxx suspenzí se xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx kultivačního xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 až 5 dní xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx spór pod xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx suspenze xxxx xxx uchována xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx xxxxx 800 ml xxxx.

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, d: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, 2X.

4.5 Fosfátový xxxx 0,1 M:

dihydrogenfosforečnan xxxxxxxx, KH₂ PO₄: 13,6 g

voda: 1000 xx

xX xxxxxxx xx 4,5.

4.6 Směs xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Standardní xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x známé xxxxxxxx

5. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx xx fosfátovém xxxxx (4.5) x xxxxx xxxxxx naředí, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx obsahující 100 μx avoparcinu x 1 ml. Při xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx x xxx 4 °C, xxxxxxx xxxxx roztok xxxxxxxxxx 7 dní.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozřeďováním xxxxxxxxxx pufrem následující xxxxxxx:

5.2 Xxx xxxxxx

X xxxxxxxxx roztoku xx připraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Medikované xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx množství 10 xx vzorku, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx xxxxxxxxxx, xx x xxxxxxx baňce x xxxxxx 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x 60 xx xxxxx (4.6) xx xxxx 15 minut. Xxxxxxx xX se xxxxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) na xxxxxxx 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx xxxxx x homogenizuje xx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx papír (xxxx. Xxxxxxx x. 1) a xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx x xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (4.4) upraví xx xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx obsahu avoparcinu 4 μx/xx ( = U₈).

Z xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) připraví xxxxxxx U4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx) a X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 50 x se přidá xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx xxxx 30 xxxxx xx mechanicky xxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxx odstředěním (x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx odebere (xxx. xxxxxxxxxxx tabulka) x xxxxxxx pH se xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), xxx xx xxxxxx xxxxxx X8 (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx rozřeďováním (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) připraví xxxxxxx X4 (očekávaný obsah: 1,0 μg/ml), X₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx obsah: 0,25 μx/xx).

7. POSTUP XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.1) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx největší xxx xxxxx xxxxx inhibiční xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxx koncentracích avoparcinu.

7.2 Xxxxxxxx misek

Test se xxxxxx xxxx difúzní xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X₈, X₄, X₂, X₁) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (U8, X4, X2, X1).Xx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx všechny xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x extraktu. X xxxx důvodu musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx kultivačního xxxxxxxxx xxxxxxx osm xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx x rozestupem xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Test xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na miskách, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx hliníkové xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx přibližně 2 xx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxx se pipetou xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a testovacího xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx otvor, podle xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx musí být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxx se xxxxxxxxx 32 inhibičních xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx změří x přesností na 0,1 xx. Pro xxxxxx koncentraci xx xxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx semilogaritmického papíru, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx stejně xxxx pro xxxxxxx xx zakreslí nejpříhodnější xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7S₈ + 4S₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (UL) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx se xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx U₁, X₂, X₄ x X₈ namísto X₁, X₂, S₄ a X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Spojením xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx standardní xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x UH x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro extrakt.

Pokud xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly by xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx je možno xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) x (UH-UL) xxxxxxxxxxx xxxx než x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx rovnoběžné, xx xxxxx xxxxxxxx xxx X₁ a X₁ xxxx X₈ x S₈. Pak xx xxxxxxx XX, XX, XX x XX xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxx alternativní xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x UH. U xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, by xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (xxx X) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 úrovně

(c) xxx X = (X₁+ U₂+ U₄+ X₈ – X₁ – S₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ S₄+ X₈ – X₁ – U₂ –

Xxx 3 úrovně

(d) xxx X = (U₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – S₄) × 0,401 / U₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – S₂

Skutečná xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х relativní xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx hodnot 0,5–2,0, zkouška xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx roztoků. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx relativní xxxxxxxx x rozsahu požadovaných xxxxxx, xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx, a to xx mělo xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x analýze.

Pokud není xxxxx přímky xxxxxxxxx xx rovnoběžné, zkouška xx xxxxxxxx. Xxxxx xx ani xxx xxxxxxxxx rovnoběžnosti, xx xxxxx výsledek považovat xx xxxxxxxxxxxx.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx analytika xxx xxxxx a xxxx zkoušce xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 až 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 mg/kg,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahu 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx nad 50 mg/kg.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX SODNÉHO XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL X XXXXXX POUŽITÍ

Metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx premixech. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. XXXXXXX

Xxxxxx xx extrahuje 90 %-xxx methanolem. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx obsahu xxxxxxxxx sodného xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx monensinu xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx inhibičními xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx považován za xxxxx úměrný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS XXXXXXXX XXXX 6633 (NICB 8054)

3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x šikmých xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx noc xx xxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxx xx uchovává x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x xxxxx měsíc xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx spór [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx agaru (3.1) x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx 2-3 ml sterilní xxxx. Xxxxx suspenzí xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, která obsahuje 300 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 xxx xx inkubuje xxx 30 °C. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx přidá do 15 ml ethanolu (4.3) x zhomogenizuje xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx uchována xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °C.

4. XXXXXXXXXX MÉDIUM A XXXXXXX

4.3 Ethanol 20 %-xx (v/v): 200 xx xxxxxxxx xx zředí 800 xx xxxx.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Methanol 90 %-xx (x/x): 900ml xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 100 ml xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (x/x): 500xx xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Oxid xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 xxxx; xxxxxxxxx xxxxxxx XX1: X. Xxxxxxxxx xxx Xx., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx Laboratory xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Laboratory, Xxxxxxxxx, Xxxxxx KT15 3XX, Xxxxx Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Vakuová rotační xxxxxxx x 250xx xxxxxxx xxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, xxxxx: 400 xx, x otvorem x xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

5.3 Skleněná trubička xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 11 mm, xxxxx: přibližně 300 xx, s otvorem x xxxxxxx 2 xx na xxxxxx xxxxx.

6. XXXXXXXXXX ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx množství xxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxx, xxx vznikl xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Xxx xxxxxxxx x uzavřené xxxxx x xxx 4 xX, xxxxxxx tento xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX ROZTOKU

7.1 Extrakce

7.1.1 Xxxxxxxxxx premixy

Vzorek x xxxxxxxxx 2,0 xx xx přidá k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx se zředí 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx očekávané koncentrace xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Krmiva, x xxxxx xxxxx monensinu xxxx xxxxx xxx 50 xxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 xx 20 g xx xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx protřese x xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx trubičkou se xxxxxx xx xxxx 75–80 xx oxidem xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx na sloupec xxxxx hlinitého x xxxxxxx xx xxxxxxx. 30 xx filtrátu xx zředí 50 xx xxxx. Hned xxxx xx zředí 50 %-ním methanolem (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Krmiva x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx x hmotnosti 10 xx 20 x xx xxxxx x 100 xx 90 %-ního xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 20 xxx xx odebere 40 xx zbytku; xxx 10 xxx xx xxxxxxx 80 xx. Xxxxxx se xxxxxx xx vakuu při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx rozpustí x 10 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx trubička xxxxxx do xxxx 75–80 xx oxidem xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx zbytku xx xxxxxxx xx xxxxxxx oxidu xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx. Kolona se xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx methanolu x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 10 xx bezvodého xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx xx doplní xxxxx na 20 xx. Roztok se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-ním xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxx U8 se xxxxxxxxx rozřeďováním (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 4 μx/xx), U2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X1 (očekávaný podíl: 1 μx/xx).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx 50 xx 60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxx množství xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx možná xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx použitými koncentracemi xxxxxxxxx sodného.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx difúzní xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (S₈, X₄, S₂, X₁) x testovacího xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁). Xx xxxxxx xxxxx musí být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx standardu x xxxxxxxx. Z xxxx xxxxxx musí xxx xxxxx takové xxxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx osm otvorů x průměru 10-13 xx s rozestupem xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Test xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx jsou vyrobeny xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx je xxxxxxx hliníkový nebo xxxxxxxx xxxxxxx o xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx takové množství xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 8.1, xxx xx vytvořila xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx xx xxxxxx ztuhne, xxxxxxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, podle xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx pro každý xxxx xx vyhodnotí 32 inhibičních xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxx 18 hodin xxx 35 až 37 °X.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xx xxxxx s xxxxxxxxx xx 0,1 mm. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx střední hodnoty xxxxxxx xx semilogaritmického xxxxxx, přičemž se xxxxxx logaritmus koncentrace xx vztahu x xxxxxxx inhibičních xxx. Xxx standardní roztok xxxxxx jako pro xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímky, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (SL) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) SL = 7X₁ + 4X₂ + S₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx nejvyšší xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

b) XX = 7S₈ + 4S₄+ X₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx nejvhodnější xxxx xxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx úroveň (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx do xxxx xxxxxxxxx vzorců xxxxxx X₁, X₂, X₄ x U₈ namísto X₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX xx xxxxxxx do xxxxxxxx diagramu. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Totéž xx provede xxx xxxxxxx UL x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky pro xxxxxxx.

Xxxxx xx nevyskytují xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx přímky xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, pokud se xxxxxxx (XX-XX) a (XX-XX) xxxxxxxxxxx více xxx o 10 % od střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx U1 x X1 xxxx X8 a S8. Xxx xx hodnoty XX, XX, XX x XX xxxx xxxxxx následujících xxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nejvhodnější přímky:

a) XX = 5X₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5X₂ + 2X₄ – S₈ / 6

x ) XX = 5X₄ + 2S₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Totéž xx xxxxxxx pro xxxxxxx XX a XX. X xxxxxx alternativních xxxxxx xx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx stanoveny xx tří xxxxxx, xx xxxx být xxxxxxxxxxx do protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx přímky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) xxx X = (U₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – S₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ U₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx X = (X₂+ X₄+ U₈ – S₂ – X₄ – S₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х relativní xxxxxxxx.

Xxxxx relativní aktivita xxxx xxxx rozsah xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v rozsahu xxxxxxxxxxxx hodnot, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx přímky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx zopakuje. Xxxxx xx xxx xxx nedosáhne xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx výsledek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při jedné x téže zkoušce xx xxxxxx překračovat:

- 20 % vyšší xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 až 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % vyšší hodnoty xxxxxxxx při xxxxxx xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpovídající sporovou xxxxxxxx.

[2] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium odpovídajícího xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx monensinu xxxxxxx xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Xxxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Může xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx složení, které xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.