Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx směrnice Komise

ze xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx úřední xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx na Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,

s ohledem xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx se xxxxxx xxxxxx odběru vzorků x xxxxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Aktem x xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX stanoví, xx xxxxxx kontroly xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, zda jsou xxxxxxx požadavky xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 71/393/XXX [3], 72/199/XXX [4], 73/46/XXX [5], 74/203/EHS [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] x 78/633/XXX [9], xxxxxxxxx pozměněné xxxxxxxx xx dne 30. xxxxxxxx 1981, xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xx stav od xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nyní xxxxxxxx xxxxxxxx devátý xxxxxx xxxxxxxxxxxx metod;

vzhledem k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx na obsah xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx popsanými v xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x správní xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí xx 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Článek 3

Xxxx xxxxxxxx xx určena členským xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 31. xxxxxxxx 1981.

Za Xxxxxx

Xxxxxx Thorn

předseda

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Úř. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Úř. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

XXXXXXX

1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL X XXXXXX POUŽITÍ

Tato xxxxxx umožňuje stanovení xxxxxxxxxx x krmivech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx hranice xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 xx/xx (2 xxx). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx antibiotik xxxx xx stanovení xxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx směsi xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Extrakt xx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx aktivita xx xxxxxxx měřením xxxxxx xxxxxxxxxx x agarovém xxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx inhibičními xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxxxxxxx xxx je xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxx xx xxx 30 °X inkubuje. Xxxxxxx xx uchovává x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °C x každý xxxxx xx znovu xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx spór [1]

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx při 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx spór xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx do 15 xx xxxxxxxx (4.2) x zhomogenizuje xx. Xxxx suspenze může xxx uchována xxxxxxxxx 5 měsíců xxx 4 °C.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX A ČINIDLA

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 ml xxxxxxxx xx zředí 800 xx xxxx.

4.3 Xxxxxxxx chlorovodíková, x: 1,18–1,19.

4.4 Roztok hydroxidu xxxxxxx, 2M.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, XX₂ PO₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX xxxxxxx xx 4,5.

4.6 Xxxx acetonu/vody/kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxx

5. STANDARDNÍ ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx množství asi 10 mg standardní xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxx (4.5) a xxxxx xxxxxx naředí, xxx vznikl xxxxxxxx xxxxxx obsahující 100 μx avoparcinu v 1 xx. Při xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxx 4 °X, zůstane xxxxx roztok použitelný 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx premixy

Z xxxxxx xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx následující xxxxxxx:

5.2 Xxx xxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX ROZTOKU

6.1 Medikované xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx množství 10 xx vzorku, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx avoparcinu, xx x odměrné xxxxx x xxxxxx 100 xx mechanicky protřepe x 60 xx xxxxx (4.6) po xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) na xxxxxxx 2. Směsí (4.6) xx xxxxxx xxxxx x homogenizuje xx. Xxx se xxxxx xxxxxxxx přefiltruje xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. Whatman x. 1) x xxxxxxx 5 ml filtrátu xx sleje. Odebere xx xxxxxxx část x xX xx xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (4.4) upraví xx xxxxxxx 4,5. Tento xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx pufrem (4.5), xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 4 μx/xx ( = X₈).

X xxxxxx xxxxxxx se postupným xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) připraví xxxxxxx U4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X2 (očekávaný xxxxx: 1 μg/ml) x X₁ (xxxxxxxxx obsah: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 50 x xx xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx dobu 30 xxxxx xx mechanicky xxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxx odstředěním (x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Poměrná xxxx xxxxxxx extraktu xx xxxxxxx (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xX se xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx 4,5. Tento roztok xx naředí xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), xxx xx xxxxxx roztok X8 (viz. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx rozřeďováním (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) připraví roztoky X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 1,0 μg/ml), U₂ (xxxxxxxxx obsah: 0,5 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx obsah: 0,25 μx/xx).

7. POSTUP XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx xxxxxxx 50–60 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx vykáže co xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx misek

Test se xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁) x testovacího xxxxxxx (X8, X4, X2, U1).Na xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx koncentrace standardu x extraktu. X xxxx xxxxxx musí xxx xxxxx takové xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx kultivačního prostředí xxxxxxx xxx otvorů x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx by xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 mm x průměru 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx misku x průměru 200 xx). Xxxx, co xxxxxx ztuhne, xxxxxxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx musí být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx pro xxxxx xxxx se vyhodnotí 32 xxxxxxxxxxx xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxx 16 xx 18 xxxxx při 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx inhibičních xxx xx xxxxx x xxxxxxxxx na 0,1 mm. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx k průměru xxxxxxxxxxx zón. Pro xxxxxxxxxx xxxxxx stejně xxxx pro xxxxxxx xx zakreslí nejpříhodnější xxxxxx, vypočítané xxxx. xxxx uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxx standardního roztoku (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7S₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Nejvhodnější xxx xxx nejvyšší xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx xxxxxxx podle xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Stejně xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxx (UL) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, přičemž xx xx výše xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈ namísto X₁, X₂, X₄ a X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx SL x SH xx xxxxxxx xx stejného xxxxxxxx. Spojením obou xxxx xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx xxx standardní xxxxxx. Totéž se xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x UH x xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx pro xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly by xxx xxxxxx rovnoběžné. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx (XX-XX) a (XX-XX) xxxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx rovnoběžné, xx xxxxx xxxxxxxx xxx U₁ a X₁ nebo X₈ x X₈. Pak xx xxxxxxx SL, XX, XX x XX xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorců, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX. X xxxxxx alternativních xxxxxx xx xxxxxx zkontroluje xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx stanoveny xx xxx úrovní, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx je xxxxx xxxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, vypočítá se xxxxxxxxxx relativní aktivity (xxx X) xxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx A = (X₁+ X₂+ U₄+ X₈ – X₁ – S₂ – X₄ – S₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ –

Xxx 3 úrovně

(d) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – U₁ – X₁

xxxx

x´) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – U₂ – S₂

Skutečná xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx rozsah xxxxxx 0,5–2,0, zkouška se xxxxxxxx při odpovídajícím xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. standardních roztoků. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx požadovaných xxxxxx, xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx není xxxxx xxxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx. Pokud xx ani xxx xxxxxxxxx rovnoběžnosti, je xxxxx výsledek xxxxxxxxx xx neuspokojivý.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx výsledky dvou xxxxxxxxx jednoho xxxxxxxxx xxx jedné x xxxx zkoušce by xxxxxx překračovat:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx hodnoty xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 až 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu 10 xx 25 mg/kg,

- 5 xx/xx absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 mg/kg.

2. STANOVENÍ XXXXXXXXX XXXXXXX DIFÚZÍ X XXXXXXXX KULTIVAČNÍM XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx sodného x krmivech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Spodní xxxxxxx stanovitelnosti je 10 mg/kg (10 xxx) [3].

2. PRINCIP

Vzorek xx xxxxxxxxx 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx difúze monensinu xxxxxxx v agarovém xxxxxxxxxxx xxxxx naočkovaném xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx inhibičními zónami xxxxxxxxxxxxxx. Průměr těchto xxxxxxxxxxx xxx je x rozsahu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx považován za xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je snížena xxxxxxxxxxx sodných iontů.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (NICB 8054)

3.1 Uchování kmenové xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x šikmých xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis x xxxx xxx xx xxxxxxxx při 30 °X. Xxxxxxx xx uchovává x xxxxxxxxxx xxx asi 4 °X x xxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Čerstvá xxxxxxx xx xxxxx (3.1) x xxxxx xxxxxxxx se omyje 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Rouxova xxxxx, která obsahuje 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 dní xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Po xxxxxxxx tvorby xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 xx ethanolu (4.3) x xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx suspenze xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 měsíců xxx 4 °C.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 xx ethanolu xx zředí 800 xx vody.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Methanol 90 %-xx (x/x): 900ml xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (x/x): 500xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 xxxx; xxxxxxxxx xxxxxxx UG1: X. Xxxxxxxxx xxx Co., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxx xxxxx x známé xxxxxxxx (xxxx xxxx získatelný x Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Standards, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Xxxxxx XX15 3XX, Xxxxx Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx s 250xx xxxxxxx baňkou.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, xxxxx: 400 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

5.3 Skleněná xxxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 11 mm, xxxxx: přibližně 300 xx, s xxxxxxx x průměru 2 xx na xxxxxx xxxxx.

6. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx asi 10 mg xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx x methanolu (4.4) x xxxxxx, xxx vznikl xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Xxx xxxxxxxx x uzavřené xxxxx x xxx 4 xX, xxxxxxx tento xxxxxx použitelný 2 xxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Extrakce

7.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 2,0 mg xx xxxxx x 100 ml 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x odstředí. Xxxxxx se xxxxx 50 %-xxx methanolem (4.6), aby xxxx xxxxxxxx očekávané koncentrace xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, u xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx nižší xxx 50 xxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 xx 20 x xx xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxx ustát.

Vatová xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx trubičkou xx xxxxxx xx výše 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx xx sloupec xxxxx hlinitého x xxxxxxx xx filtrát. 30 xx filtrátu xx xxxxx 50 xx vody. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-ním xxxxxxxxxx (4.6), xxx bylo xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx u xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 50 ppm (xxxxxx hranice 10 xxx)

Xxxxxx x hmotnosti 10 xx 20 x xx přidá x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx nevyčistí.

Pro xxxxxx x podílem xxxxxxxxx 20 ppm xx xxxxxxx 40 xx zbytku; xxx 10 xxx xx xxxxxxx 80 ml. Xxxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 10 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx výše 75–80 xx oxidem xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx převede xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx methanolu x xxxxxxx filtrát xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx se xxxxxx xx xxxxx při xxxxxxx nepřesahující 40 °X x rotační xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 10 ml bezvodého xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxx xx xxxxxx xxxxx na 20 xx. Roztok xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx xxx minimálních xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx poté se xxxxx 50 %-ním xxxxxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxx X8 xx xxxxxxxxx rozřeďováním (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 4 μx/xx), U2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Naočkování kultivačního xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx 50 až 60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx miskách se xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx ostré xxxxxxxxx zóny s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, S₁) x xxxxxxxxxxx roztoku (X₈, X₄, X₂, X₁). Na xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx bezpodmínečně xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx standardu x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx takové xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx kultivačního xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x průměru 10-13 xx s rozestupem xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Test xx xxx xxx prováděn xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx vyrobeny xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 8.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx přibližně 2 mm (60 xx na xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx xx xxxxxx xxxxxx, vyhloubí xx xxxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, podle xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx minimálně xxxxxxxxx, xxxxx pro každý xxxx xx vyhodnotí 32 inhibičních xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx přibližně po xxxx 18 xxxxx xxx 35 xx 37 °C.

9. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx zón se xxxxx s přesností xx 0,1 xx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímky, vypočítané xxxx. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (SL) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) SL = 7X₁ + 4S₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx nejvyšší xxxxxx standardního xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4S₄+ X₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx body xxx nejnižší (UL) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dosadí X₁, X₂, U₄ x X₈ namísto X₁, S₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX a SH xx zanesou do xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxx UL x XX k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx faktory, měly xx xxx přímky xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, pokud se xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) neodchylují xxxx xxx x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx přímky nejsou xxxxxxxxxx, xx možné xxxxxxxx xxx X1 x X1 xxxx X8 x X8. Xxx xx hodnoty XX, XX, XX x UH xxxx xxxxxx následujících xxxxxx, xxx se obdržely xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 5S₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5X₂ + 2X₄ – X₈ / 6

x ) XX = 5X₄ + 2X₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Totéž xx xxxxxxx xxx hodnoty XX x XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx rovnoběžnost. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx tří úrovní, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx logaritmus relativní xxxxxxxx (xxx A) xxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx vzorců:

Pro 4 xxxxxx

x) log X = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – S₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ X₄+ S₈ – X₁ – X₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 úrovně

d) xxx X = (X₁+ U₂+ U₄ – S₁ – X₂ – S₄) × 0,401 / X₄+ S₄ – X₁ – S₁

nebo

d) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – S₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – S₂

Skutečná xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, test xx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx přizpůsobení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx není xxxxx xxxxxxxxx relativní xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, x xx by xxxx xxx zaznamenáno xx xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxx xx zopakuje. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx za neuspokojivý.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx sodného 10 xx 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % vyšší xxxxxxx xxxxxxxx při obsahu xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpovídající sporovou xxxxxxxx.

[2] Může být xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx odpovídajícího xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx výsledky.

[3] 1 xx xxxxxxxxx sodného xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx vytvoří xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx složení, xxxxx xxxxxxxxx stejné xxxxxxxx.