Plné znění - 31981L0715

Devátá xxxxxxxx Komise

ze xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,

s xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx společenství,

s xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 70/373/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx zavádí xxxxxx xxxxxx vzorků x xxxxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx článek 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX stanoví, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx za xxxxxx xxxxxxxx, xxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x správních předpisů xx xxxxxx x xxxxxxx krmiv, xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx vzorků a xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 71/393/EHS [3], 72/199/XXX [4], 73/46/XXX [5], 74/203/EHS [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] a 78/633/XXX [9], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx 30. xxxxxxxx 1981, xxx řadu xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xx xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx soubor xxxxxxxxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx k xxxx, že xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx krmiva,

PŘIJALA TUTO XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx státy xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx.

Článek 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx směrnicí xx 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Článek 3

Tato xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.

V Xxxxxxx xxx 31. xxxxxxxx 1981.

Xx Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Úř. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Úř. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Úř. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

XXXXXXX

1. XXXXXXXXX AVOPARCINU XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX MÉDIU

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 xx/xx (2 xxx). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx antibiotik xxxx xx xxxxxxxxx působit xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx směsi xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx chlorovodíková xx xxxxxxxxxxx vzorek. Xxxxxxx xx odstředí. Jeho xxxxxxxxxxxx aktivita xx xxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxxx v agarovém xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zónami xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxx xxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx přímo xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. MIKROORGANISMUS: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) v xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx se při 30 °X xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx suspenze xxxx [1]

Xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx médiu (3.1) xx xxxxx 2-3 xx sterilní vody. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx láhev, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 xxx se xxxxxxxx xxx 30 °X. Po xxxxxxxx xxxxxx xxxx pod xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 xx xxxxxxxx (4.2) x zhomogenizuje xx. Xxxx xxxxxxxx může xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx při 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X ČINIDLA

4.1 Xxxxxxxxxx médium [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 ml xxxxxxxx xx zředí 800 xx xxxx.

4.3 Xxxxxxxx chlorovodíková, x: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx hydroxidu xxxxxxx, 2X.

4.5 Fosfátový xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, KH₂ PO₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX upravit xx 4,5.

4.6 Xxxx acetonu/vody/kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx

5. STANDARDNÍ XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx množství xxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx ve fosfátovém xxxxx (4.5) x xxxxx pufrem xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxx v 1 ml. Při xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x při 4 °C, zůstane xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxxx postupným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Xxx xxxxxx

X výchozího xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pufrem xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 mg xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx xxxxxxxxxx, se x xxxxxxx baňce x xxxxxx 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x 60 xx xxxxx (4.6) xx xxxx 15 minut. Xxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx, upraví xx xxxxxxxxx chlorovodíkovou (4.3) xx xxxxxxx 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx přes xxxxxx filtrační xxxxx (xxxx. Xxxxxxx x. 1) x prvních 5 ml xxxxxxxx xx xxxxx. Odebere xx poměrná xxxx x xX se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx xx dosáhlo xxxxxxxxxxx xxxxxx avoparcinu 4 μg/ml ( = X₈).

X tohoto xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx) x X₁ (očekávaný xxxxx: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x hmotnosti 50 x se přidá xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx xxxx 30 xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxx odstředěním (v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Xxxxxxx xxxx čistého extraktu xx odebere (viz. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx na 4,5. Xxxxx roztok xx xxxxxx fosfátovým xxxxxx (4,5), xxx xx získal roztok X8 (xxx. následující xxxxxxx).

X xxxxxx xxxxxxx xx postupným rozřeďováním (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) připraví roztoky X4 (očekávaný xxxxx: 1,0 μx/xx), X₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. POSTUP XXXXX

7.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx xxxxxxx 50–60 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx ostré xxxxxxxxx xxxx xxx různých xxxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxxx xx xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁) a testovacího xxxxxxx (U8, U4, X2, U1).Na xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx bezpodmínečně xxxxxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x průměru 10-13 xx s xxxxxxxxxx xxxxxx minimálně 30 xx. Xxxx xx xxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxx jsou vyrobeny xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx hliníkové xxxx xxxxxxxx kroužky x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx xx vytvořila xxxxxx silná xxxxxxxxx 2 xx (60 xx na xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Poté, co xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxx se pipetou xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx otvoru). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx minimálně xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxx 16 xx 18 xxxxx při 30 °X.

8. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 mm. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx zakreslí xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, vypočítané např. xxxx xxxxxxxx způsobem.

Nejvhodnější xxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

SH = 7X₈ + 4X₄ + S₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (XX) a xxxxxxxx úroveň (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx se xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx U₁, X₂, X₄ a X₈ xxxxxxx S₁, X₂, X₄ a X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x SH xx xxxxxxx xx stejného xxxxxxxx. Spojením obou xxxx xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx xxx standardní xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX x získání xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx nevyskytují rušivé xxxxxxx, měly by xxx přímky rovnoběžné. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxxx xx hodnoty (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx střední hodnoty.

Pokud xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx X₁ x X₁ xxxx U₈ x S₈. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, UL a XX určí pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx obdržely alternativní xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx zkontroluje xxxxxxxxxxxx. Výsledky, xxxxx xxxx xxxxxxxxx ze xxx xxxxxx, by xxxx xxx zaznamenány xx xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, vypočítá xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx X) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx X = (X₁+ U₂+ U₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ S₄+ X₈ – U₁ – X₂ –

Xxx 3 xxxxxx

(x) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – S₄) × 0,401 / U₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – S₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx aktivita = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx hodnot 0,5–2,0, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx není xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx aktivitu x xxxxxxx požadovaných xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, x xx xx mělo xxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxxxxx xx zopakuje. Xxxxx xx ani pak xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx jednoho analytika xxx xxxxx x xxxx zkoušce xx xxxxxx překračovat:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx avoparcinu 2 až 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx hodnoty výsledku xxx obsahu 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahu 25 až 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx hodnoty výsledku xxx obsahu xxx 50 xx/xx.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX SODNÉHO XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL X XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx monensinu sodného x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. PRINCIP

Vzorek xx xxxxxxxxx 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxxx vhodnému xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx naočkovaném xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se prokáže xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx x xxxxxxx použitých xxxxxxxxxxx považován xx xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx antibiotika. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx médium (4.1) v xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx x xxxx xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Kultura xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Čerstvá xxxxxxx xx agaru (3.1) x xxxxx xxxxxxxx se omyje 2-3 xx sterilní xxxx. Touto suspenzí xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx 300 ml kultivačního xxxxx (4.1), x xx dobu 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx spór xxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx přidá xx 15 xx xxxxxxxx (4.3) x xxxxxxxxxxxxx xx. Tato xxxxxxxx xxxx být uchována xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °C.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX A XXXXXXX

4.3 Ethanol 20 %-xx (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx xxxx.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Methanol 90 %-xx (x/x): 900xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (x/x): 500xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 ml xxxx.

4.7 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (alcoa X, 20 xxxx; xxxxxxxxx xxxxxxx XX1: X. Xxxxxxxxx and Xx., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: monensin sodný x xxxxx aktivitě (xxxx jiné xxxxxxxxxx x International Xxxxxxxxxx xxx Boilogical Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Xxxxxx XX15 3XX, Velká Británie).

5. XXXXXXXXX

5.1 Vakuová xxxxxxx xxxxxxx x 250xx xxxxxxx baňkou.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, xxxxx: 400 xx, s xxxxxxx x průměru 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

5.3 Skleněná xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, vnitřní xxxxxx: 11 xx, xxxxx: přibližně 300 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

6. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx standardní xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx, xxx xxxxxx výchozí xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx sodného 800 μx/xx. Při uchování x xxxxxxxx xxxxx x při 4 xX, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx výchozího xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx rozřeďováním 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX ROZTOKU

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 2,0 mg xx xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx methanolu (4.5), xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx nižší xxx 50 xxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 xx 20 x se xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxx trubičky (5.2) x xx lehkého xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx hlinitého x xxxxxxx xx xxxxxxx. 30 xx filtrátu xx xxxxx 50 xx vody. Hned xxxx xx xxxxx 50 %-ním xxxxxxxxxx (4.6), xxx bylo xxxxxxxx očekávané koncentrace xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx x xxxxx podíl xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 xx 20 x se xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 20 xxx xx xxxxxxx 40 xx zbytku; xxx 10 ppm se xxxxxxx 80 ml. Xxxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx nepřesahující 40 °X x xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx xxxxxxxx x 10 xx 90 %-xxxx methanolu.

Vatová xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx trubičky (5.3) x za xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx výše 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx zbytku xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx hlinitého x filtrát se xxxxxxx. Kolona xx xxxxxxx 10 ml 90xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v rotační xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí x 10 xx bezvodého xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx na 20 xx. Xxxxxx se xxxxxxxxxx minimálně 5 xxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx poté xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxx X8 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 4 μx/xx), U2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X1 (očekávaný podíl: 1 μg/ml).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.2) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) při 50 až 60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx médiem (4.2) xx stanoví množství xxxxxxx, xxxxx vykáže xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx použitými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx miskách xx xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, S₁) x xxxxxxxxxxx roztoku (X₈, U₄, X₂, X₁). Xx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x extraktu. X xxxx důvodu musí xxx miska xxxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx kultivačního média xxxxxxx osm xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx skleněné xxxxx, xx xxxxx je xxxxxxx hliníkový nebo xxxxxxxx kroužek x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 mm (60 xx xx xxxxx x průměru 200 xx). Poté xx xxxxxx xxxxxx, vyhloubí xx otvory, xx xxxxxxx xx pipetou xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx čtyřikrát, xxxxx xxx každý xxxx se xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 18 hodin xxx 35 až 37 °C.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se xxxxx x přesností xx 0,1 mm. Xxx každou xxxxxxxxxxx xx střední hodnoty xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx logaritmus xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jako xxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímky, xxxxxxxxxx xxxx. níže uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx bod xxx xxxxxxxx úroveň standardního xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₁ + 4X₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx xxxxxxx xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4X₄+ S₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx tak xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (XX) x nejvyšší úroveň (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx vzorců xxxxxx X₁, X₂, X₄ x U₈ namísto X₁, X₂, S₄ x S₈.

Vypočítané xxxxxxx XX x XX xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx. Totéž xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) neodchylují xxxx xxx x 10 % xx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx přímky nejsou xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx buď U1 x X1 xxxx X8 x X8. Xxx xx hodnoty XX, SH, XX x XX xxxx xxxxxx následujících xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nejvhodnější xxxxxx:

x) XX = 5X₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5X₂ + 2X₄ – X₈ / 6

b ) XX = 5X₄ + 2S₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Totéž xx xxxxxxx pro xxxxxxx XX x UH. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xx měly xxx xxxxxxxxxxx do protokolu x analýze.

Pokud je xxxxx xxxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx X) xxxxxx jednoho x xxxxxxxxxxxxx vzorců:

Pro 4 xxxxxx

x) xxx A = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – S₄ – X₈) × 0,602 / U₄+ U₈+ X₄+ S₈ – X₁ – U₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 úrovně

d) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄ – S₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx X = (X₂+ X₄+ U₈ – X₂ – X₄ – S₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = předpokládaná xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx relativní xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx přizpůsobení koncentrací xxxxxxxx xxxx. standardních xxxxxxx. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx přibližný, a xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx rovnoběžnosti, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx jedné x xxxx xxxxxxx xx neměly xxxxxxxxxxx:

- 20 % vyšší xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx monensinu xxxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx xxx použity xxxx metody, které xxxxxxxxx odpovídající sporovou xxxxxxxx.

[2] Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1000 jednotkám XX.

[4] Mohou xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx vytvoří xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Xxxx xxx xxxxxxx jakékoli xxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx stejné xxxxxxxx.