Plné znění - 31981L0715

Devátá xxxxxxxx Komise

ze xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,

s xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx zavádí xxxxxx xxxxxx xxxxxx x analýzy Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx směrnice,

vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx kontroly xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, zda jsou xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx jakost x xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxx Společenství xxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 71/393/XXX [3], 72/199/XXX [4], 73/46/EHS [5], 74/203/XXX [6], 75/84/XXX [7], 76/372/EHS [8] a 78/633/EHS [9], xxxxxxxxx pozměněné xxxxxxxx xx xxx 30. xxxxxxxx 1981, xxx řadu xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství xxxxxxxxx; xx xxxx od xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx krmiva,

PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x monensinu xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx popsanými x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx a správní xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Komisi.

Xxxxxx 3

Xxxx směrnice xx xxxxxx členským xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 31. července 1981.

Xx Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Xx. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

PŘÍLOHA

1. STANOVENÍ XXXXXXXXXX XXXXXX V AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX POUŽITÍ

Tato xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x medikovaných xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 mg/kg (2 xxx). Přítomnost xxxxxxxxxxxxxxx antibiotik může xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx vzorek. Extrakt xx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx inhibičních xxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx xxxxxx logaritmu koncentrace xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Uchovávání xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) x xxxxxxx zkumavkách xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx xx xxx 30 °C inkubuje. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx při xxx 4 °X x xxxxx měsíc xx xxxxx naočkuje.

3.2. Xxxxxxxx suspenze spór [1]

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx médiu (3.1) xx xxxxx 2-3 xx sterilní vody. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Rouxova xxxxx, xxxxx obsahuje 300 xx kultivačního xxxxx (4.1), x po xxxx 3 až 5 xxx se xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx spór pod xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 xx ethanolu (4.2) x zhomogenizuje xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx při 4 °C.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 ml xxxxxxxx se xxxxx 800 xx xxxx.

4.3 Xxxxxxxx chlorovodíková, d: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx hydroxidu xxxxxxx, 2M.

4.5 Fosfátový xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, XX₂ PO₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX upravit xx 4,5.

4.6 Směs xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxx

5. XXXXXXXXXX ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.5) x xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx základní xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxx v 1 ml. Xxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx a při 4 °C, xxxxxxx xxxxx roztok použitelný 7 dní.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx postupným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pufrem xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Pro xxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx fosfátovým xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX EXTRAKTU A XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Medikované xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx vzorku, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx xxxxxxxxxx, xx x odměrné xxxxx x xxxxxx 100 xx xxxxxxxxxx protřepe x 60 xx xxxxx (4.6) xx xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx pH xx xxxxxxxxxxx a pokud xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) xx xxxxxxx 2. Xxxxx (4.6) xx doplní xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx. Xxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx přes xxxxxx xxxxxxxxx papír (xxxx. Whatman x. 1) x xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xx sleje. Xxxxxxx xx xxxxxxx část x xX se xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (4.4) upraví xx xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx avoparcinu 4 μx/xx ( = X₈).

X tohoto xxxxxxx xx postupným xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx) x X₁ (očekávaný obsah: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 50 x se xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx dobu 30 xxxxx xx mechanicky xxxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Poměrná xxxx čistého xxxxxxxx xx xxxxxxx (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (4.4) xxxxxx na 4,5. Tento xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), xxx xx xxxxxx roztok X8 (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X tohoto roztoku xx postupným xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 1,0 μx/xx), U₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) a X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx co xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx standardního xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (U8, X4, X2, U1).Na každou xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x extraktu. X xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředí xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx x rozestupem xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx xx xxx xxx prováděn xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx xxxx vyrobeny xx xxxxxxxx desky, xx xxxxxx xx xxxxxx hliníkové xxxx xxxxxxxx kroužky x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx se xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 7.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Poté, co xxxxxx ztuhne, xxxxxxxx xx otvory, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx otvor, podle xxxxxxx otvoru). Xxxxx xxxxxxxxxxx musí být xxxxxxx minimálně čtyřikrát, xxxxx xxx xxxxx xxxx xx vyhodnotí 32 xxxxxxxxxxx xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx dobu 16 xx 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx x přesností xx 0,1 xx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx pro extrakt xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxx standardního roztoku (XX) xx stanoví xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7S₈ + 4S₄ + X₂ – 2S₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx (UH) xxxxxxxx, přičemž se xx výše xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X₁, X₂, U₄ x X₈ namísto X₁, X₂, S₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx SL x XX se xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx obou xxxx vznikne nejvhodnější xxxxxx xxx standardní xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxx hodnoty XX x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro extrakt.

Pokud xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx přímky xxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) x (UH-UL) xxxxxxxxxxx xxxx než x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx, xx xxxxx vyloučit xxx U₁ x X₁ xxxx X₈ x X₈. Pak xx xxxxxxx XX, XX, UL x XX xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky:

Xxxxx xx xxxxxxx xxx hodnoty XX x XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímek xx xxxxxx zkontroluje xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxx úrovní, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx je možno xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (xxx X) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – S₁ – X₂ – X₄ – S₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ –

Xxx 3 úrovně

(d) xxx X = (U₁+ X₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) xxx X = (X₂+ X₄+ U₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx aktivita х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx hodnot 0,5–2,0, zkouška se xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací extraktu xxxx. standardních xxxxxxx. Xxxxx není možné xxxxxx xxxxxxxxx aktivitu x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, a xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx do protokolu x analýze.

Pokud není xxxxx xxxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, zkouška xx zopakuje. Pokud xx xxx pak xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

9. OPAKOVATELNOST

Rozdíly xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx jednoho xxxxxxxxx xxx jedné x xxxx xxxxxxx by xxxxxx překračovat:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 až 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx při obsahu 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu xxx 50 mg/kg.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL X XXXXXX POUŽITÍ

Metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x krmivech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. PRINCIP

Vzorek xx xxxxxxxxx 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx podrobí xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxx sodného ve xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx difúze xxxxxxxxx xxxxxxx x agarovém xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zónami xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx těchto xxxxxxxxxxx xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (NICB 8054)

3.1 Xxxxxxxx kmenové xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx při xxx 4 °C a xxxxx měsíc se xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Příprava xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx (3.1) x xxxxx xxxxxxxx se xxxxx 2-3 ml xxxxxxxx xxxx. Touto suspenzí xx naočkuje Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 dní xx inkubuje xxx 30 °X. Po xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx přidá xx 15 xx xxxxxxxx (4.3) x xxxxxxxxxxxxx xx. Tato xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX A XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 ml xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx xxxx.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (x/x): 900xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Methanol 50 %-xx (x/x): 500xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx hlinitý, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 mesh; xxxxxxxxx xxxxxxx UG1: X. Xxxxxxxxx xxx Xx., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Standardní xxxxxxxxx: monensin xxxxx x xxxxx aktivitě (xxxx jiné xxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Veterinary Laboratory, Xxxxxxxxx, Xxxxxx XX15 3XX, Xxxxx Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx rotační xxxxxxx x 250xx xxxxxxx baňkou.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, délka: 400 xx, s otvorem x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

5.3 Skleněná xxxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, s xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

6. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx asi 10 mg xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx v methanolu (4.4) x xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Xxx xxxxxxxx x uzavřené xxxxx x při 4 xX, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx výchozího xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx roztoky:

7. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX ROZTOKU

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx premixy

Vzorek x xxxxxxxxx 2,0 mg xx xxxxx x 100 ml 90 %-xxxx methanolu (4.5), xxxxxxx minut se xxxxxxxx a odstředí. Xxxxxx xx xxxxx 50 %-xxx methanolem (4.6), xxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, u xxxxx xxxxx monensinu xxxx nižší xxx 50 ppm

Vzorek x xxxxxxxxx 10 až 20 x xx xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x za xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx do xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxx hlinitého a xxxxxxx xx xxxxxxx. 30 ml filtrátu xx xxxxx 50 xx xxxx. Hned xxxx se xxxxx 50 %-xxx methanolem (4.6), aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Krmiva x xxxxx xxxxx monensinu xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx o xxxxxxxxx 10 xx 20 x xx přidá x 100 xx 90 %-ního xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx a odstřeďuje xxxxx se xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 20 xxx xx xxxxxxx 40 xx xxxxxx; pro 10 ppm se xxxxxxx 80 xx. Xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx nepřesahující 40 °X x rotačním xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí x 10 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx zavede xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x xx lehkého xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 75–80 mm oxidem xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx převede xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx. Kolona xx xxxxxxx 10 ml 90xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxx xx vakuu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx xxxx se xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Testovací roztok

Z xxxxxxx X8 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx roztoky X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 4 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μg/ml).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.2) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx 50 až 60 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxx xx xxxxx největší xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sodného.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx nasadí xxxx difúzní xxxx xx xxxxxxx po xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁) x xxxxxxxxxxx roztoku (X₈, U₄, X₂, X₁). Xx každou xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Z xxxx důvodu xxxx xxx xxxxx takové xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx vytvořit ve xxxxxx kultivačního xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx hliníkový xxxx xxxxxxxx xxxxxxx o xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 8.1, xxx xx vytvořila xxxxxx silná přibližně 2 xx (60 xx na xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Poté co xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, do xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a testovacího xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx otvor, xxxxx xxxxxxx otvoru). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxx se vyhodnotí 32 inhibičních xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 18 xxxxx xxx 35 xx 37 °C.

9. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx x přesností xx 0,1 mm. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, přičemž xx xxxxxx logaritmus xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. níže xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (SL) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₁ + 4X₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) se stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4X₄+ S₂ + 2S₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (XX) x nejvyšší úroveň (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx výše xxxxxxxxx vzorců dosadí X₁, X₂, X₄ x X₈ xxxxxxx X₁, S₂, S₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX xx zanesou xx xxxxxxxx diagramu. Xxxxxxxx xxxx bodů xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Totéž xx xxxxxxx pro xxxxxxx UL x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx (SH-SL) a (XX-XX) neodchylují více xxx x 10 % xx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx buď X1 x S1 xxxx X8 a S8. Xxx xx hodnoty XX, SH, UL x XX xxxx xxxxxx následujících xxxxxx, xxx xx obdržely xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky:

a) XX = 5S₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5X₂ + 2X₄ – S₈ / 6

b ) XX = 5S₄ + 2S₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Totéž se xxxxxxx pro xxxxxxx XX x XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx rovnoběžnost. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx tří xxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx protokolu x analýze.

Pokud je xxxxx přímky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (log A) xxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx vzorců:

Pro 4 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – S₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ U₂+ X₄ – X₁ – X₂ – S₄) × 0,401 / X₄+ S₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx A = (X₂+ X₄+ X₈ – S₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ S₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = předpokládaná xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx relativní aktivita xxxx xxxx rozsah xxxxxx 0,5–2,0, test xx zopakuje při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx příp. standardních xxxxxxx. Xxxxx není xxxxx xxxxxxxxx relativní xxxxxxxx x rozsahu xxxxxxxxxxxx hodnot, xxxxxxxx xx xxxxx považovat xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxx xx zopakuje. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx jedné x téže xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 20 % vyšší xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 až 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx být xxxxxxx xxxx metody, xxxxx xxxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxx.

[2] Může xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx výsledky.

[3] 1 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Xxxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx, xxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx spór.

[5] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxxxxxxx složení, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.