Desátá Xxxxxxxx Komise
ze xxx 25. července 1984,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX ze dne 20. července 1970, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Aktem x xxxxxxxxxxx Xxxxx, a xxxxxxx xx článek 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxx směrnice požaduje, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxxx požadavků xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx týkajících xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx byla xxxxxxxxx xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 73/46/XXX [3], 74/203/EHS [4], 75/84/XXX [5], 76/372/XXX [6] xxxxxxxxx pozměněné xxxxxxxx 81/680/EHS [7], xxxxxxxx 71/393/XXX [8], 72/199/XXX [9], 78/633/EHS [10] xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 84/4/XXX [11] x xxxxxxxx 81/715/EHS [12] xxx stanovily xxxxxx xxxxx analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xx xxxxxx x xxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxx přijmout xxxxx metodu;
vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx krmiva,
PŘIJALA TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, pokud jde x jejich xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxxxx 1985 a xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Článek 3
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 25. července 1984.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Komise
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Úř. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Úř. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Xx. xxxx. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Xx. věst. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Úř. věst. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Úř. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Xx. věst. X 257, 10.9.1981, x. 38.
XXXXXXX
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXX XX XXXXXXXX MÉDIU
1. Xxxx a rozsah
Metoda xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx spiramycinu x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx/xx (1 xxx) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx-xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xX 8. Xxxxxxx xx dekantován xxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Xxxx antibiotická xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxxxxx x agarovém médiu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx tvorbou xxxxxxxxxxx xxx mikroorganizmu. Xxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx úměrný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx použitých xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Mikroorganizmus: Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXX 9341 (XXXX 8340, XXXX 8553)
3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxx xxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx v chladničce xxx xxxxxxx xxxxx 4 °X. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx dva xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx bakteriální xxxxxxxx [2]
Xx xxxxx xxxxxxxxxxxx šikmého xxxxx xxxxxx bakterie 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x naočkování 250 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx x Xxxxxxx baňce x inkubujte 18 xx 20 hodin xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxx do 25 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3) x promíchejte. Xxxxxx xxxxxxxx na 1/10 xxxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3). Světelná xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx 75 %, xxxxxx xxx 650 xx v 1 xx kyvetě xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3.). Tato xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxx týden při xxx 4 °C.
4. Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [3]
|
Xxxxxx pepton |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 g |
|
Voda |
1000 xx |
|
XX 6,5 až 6,6 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
|
4.2 Zkušební xxxxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x masa |
3,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 g |
|
Voda |
1000 xx |
|
XX 8,0 (po xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Roztok chloridu xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx objemový)
Rozpusťte 8 x xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x xxxxxx do 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4 Xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx, pH 8,0
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dvou xxxxxxxx X2XXX4 |
16,7 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX2XX4 |
0,5 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx XxXXX3 |
20,0 x |
|
Xxxx xx |
1000 ml |
4.5 Xxxx xxxxxxx xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx (4.4)
50/50 (xxxxxxxx).
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxx (x XX).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxx látky (4.6.) xx xxxxx (4.5.) x zřeďte xxxxxxx xxxxx, abyste obdrželi xxxxxxx xxxxxx obsahující 1000 XX xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx.
X xxxxxx zásobního xxxxxxx xxxxxxxxx postupným xxxxxxx xxxxx (4.5.) xxxxxxxxxxx roztoky:
|
S8 |
1 |
IU/ml |
|
S4 |
0,5 |
IU/ml |
|
S2 |
0,25 |
IU/ml |
|
S1 |
0,125 |
IU/ml |
6. Příprava xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx
6.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx v xxxxxxx xxxxx, 1,0 xx 20,0 x x xxxxxxx. Xxxxxxxx 100 ml xxxxx (4.5) a xxxxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx dekantujte x xxxxxx roztok xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.5), abyste xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= U8).
Pro xxxxxxxxx xxxxxx spiramycinu xxxxx xxx 2,5 mg/kg xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx 20,0 g xxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx směsi (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx 50 xx xxxxxxx supernatantu x xxxxxxx na xxx 4 xx xx sníženého tlaku xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X. Xxxxxx xxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx obdrželi xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= X8).
6.2 Xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx X8 xxxxxxxxx xxxxxxX4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 XX/xx), U2 (očekávaný xxxxx: 0,25 IU/ml) x U1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,125 IU/ml) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Zkušební xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx zkušební médium (4.2) xxxxxxxxxxx suspenzí (3.2) xxx asi 50 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx miskách xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxx požadované xxxxxxxx xxxxxxxxxxx suspenze, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx inhibiční xxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spiramycinu.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xx čtyřmi xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, X1) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (U8, X4, X2, X1). Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a standardu xxxx xxx nutně xxxxxxxx xx každé xxxxx. Pro tento xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx médiu xxxxxxx xxx otvorů s xxxxxxxx 10 xx 13 xx a xxxxxxx 30 mm xxxx středy. Xxxxx xxxx xxx proveden xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxx s kroužkem x xxxxxxx nebo xxxxxx umístěným xx xxxxx, 200 xx x xxxxxxx x 20 mm vysokým.
Rozlijte xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2.), inokulovaného xxxx v 7.1., xxx xxxxxxxxx vrstvu xxx 2 xx xxxxxx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx, vytvořte xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zkušebních x standardních roztoků (xxxx 0,10 a 0,15 xx na xxxxx, podle xxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.
7.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 30 ± 2 °X.
8. Xxxxxxxxxxx
Xxxxxx průměr xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx papír, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve vztahu x xxxxxxxx inhibičních xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xx níže xxxxxxx.
Xxxxxxxx "nejvhodnější" bod xxx standardní nejnižší xxxxxx (SL) x xxxxxxxx rovnice:
a) SL = 7x1 + 4x2+ s4 – 2x8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" bod xxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxx (XX) s použitím xxxxxxx:
x) XX = 7x8 + 4x4+ x2 – 2x1 / 10
Podobně xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxx pro xxxxxxxx úroveň xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) xxxxxxxxxx u1, x2, x4 x u8 xx x1, x2, x4, x x8 x dříve xxxxxxxxx xxxxxxxxx [5]
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx SL x XX xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx tak, xxxxxx dostali "xxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx XX x XX x xxxxxx xx xxx, abyste xxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X nepřítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxxxx by křivky xxxx xxx paralelní. Xxx xxxxxxxxx účely xxxxx být křivky xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxx hodnoty (XX — XX) a (XX — XX) xxxxxxxxxx xxxx než x 10 % xx jejich xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x1 x x1 xxxx x8 x x8, xxxxx xxx xxxxxxxx x SL, SH, XX a XX xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx rovnic, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x) SL = 5x1 + 2x2 – x4 / 6 nebo 5s2 + 2x4 – x8 / 6
b′) XX = 5x4 + 2x2 – x1 / 6 xxxx 5s8 + 2x4 – x2 / 6
x xxxxxxx xxx UL x XX. Měla by xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx byl výsledek xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x analýze.
Pokud xxxx xxxxxx považovány xx paralelní, vypočtěte xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) x xxxxxx jedné x xxxxxxxxxxxxx rovnic, x xxxxxxxxxx xx xxx, xxxxx xxxx použity xxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx ohodnocení xxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx úrovně
c) Xxx A = (x1+ x2+ x4+ x8 – x1 – s2 – x4 – s8) × 0,602 / x4+ u8+ x4+ x8 – u1 – x2 – x1 – s2
Pro xxx xxxxxx
x) Xxx X = (u1+ x2+ u4 – x1 – s2 – s4) × 0,401 / u4+ x4 – u1 – x1
xxxx
x´) Xxx X = (u2+ x4+ x8 – x2 – x4 – s8) × 0,401 / x8+ x8 – x2 – x2
Xxxxxxxx extraktu xxxxxx = aktivita xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx × X
(X8 = X8 × X)
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx 0,5 xx 2,0, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxx toto xxxx možné, xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx relativní aktivita xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx musí xxx uvedeno x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx stanovení. Xxxxx xxxx xxxxx docíleno xxxxxxxxxxxx, stanovení xxxx xxx považováno xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx spiramycinu xx kilogram xxxxxx.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx do 10 xx/xx,
- 20 % xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 10 až 25 xx/xx,
- 5 xx/xx v xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx k nejvyšší xxxxxxx pro xxxxxx xxx 50 xx/xx.
[1] 1 xx xxxx xxxxxxxxxxx xx ekvivalentem 3200 xxxxxxxxxxxxx jednotek (XX).
[2] Xxxxx metody xxxxx xxx použity xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[3] Může xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxxxx x dávající xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Xxxx xxx použito xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx složení a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[5] Xxxx xxxxxxx "x" x "x" xxxxxxxxxx xxxxxxxx inhibičních zón.