Xxxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 25. xxxxxxxx 1984,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx úřední xxxxxxxx xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Aktem o xxxxxxxxxxx Řecka, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, že xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx úřední xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx kvality x xxxxxxx xxxxx byla xxxxxxxxx xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx a xxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 73/46/EHS [3], 74/203/XXX [4], 75/84/XXX [5], 76/372/XXX [6] xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 81/680/XXX [7], xxxxxxxx 71/393/XXX [8], 72/199/XXX [9], 78/633/XXX [10] xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 84/4/XXX [11] x směrnice 81/715/XXX [12] xxx stanovily xxxxxx xxxxx analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx; že xxxxxx x práci xx té xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx krmiva,
PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, že xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx jde x jejich obsah xxxxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxxxx popsanou x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x správní xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. xxxxxx 1985 x xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx směrnice xx určena členským xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 25. července 1984.
Za Xxxxxx
Xxxx Dalsager
člen Komise
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Úř. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Xx. xxxx. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Xx. věst. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Xx. věst. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Xx. xxxx. X 257, 10.9.1981, x. 38.
PŘÍLOHA
STANOVENÍ XXXXXXXXXXX XXXXXX XX AGAROVÉM XXXXX
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxxxx xx určena pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx x premixech. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 mg/kg (1 xxx) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx se extrahuje xxxxx metanol/fosfát-bikarbonátovým xxxxxx x xX 8. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stanovena xxxxxxx xxxxxx spiramyscinu x agarovém xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx zón je xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx antibiotických xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxxxxxxx: Micrococcus xxxxxx XXX 9341 (XXXX 8340, XXXX 8553)
3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx x inkubujte 24 xxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx okolo 4 °X. Znovu xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx.
3.2 Příprava bakteriální xxxxxxxx [2]
Ze xxxxx xxxxxxxxxxxx šikmého xxxxx xxxxxx bakterie 2 xx 3 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x naočkování 250 xx kultivačního xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx x Rouxově baňce x xxxxxxxxx 18 xx 20 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxx xx 25 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx 1/10 xxxxxxxx chloridu xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx transmise xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx 75 %, xxxxxx xxx 650 xx v 1 xx xxxxxx proti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3.). Xxxx suspenze xxxx xxx skladována xxxxx xxxxx při xxx 4 °X.
4. Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxx médium [3]
|
Xxxxxx xxxxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x kvasnic |
3,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 g |
|
Voda |
1000 xx |
|
XX 6,5 xx 6,6 (xx sterilizaci). |
|
|
4.2 Zkušební xxxxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
4,0 g |
|
Extrakt x masa |
3,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 8,0 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Roztok xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx xxxxxxxx)
Xxxxxxxxx 8 x xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx a xxxxxx do 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4 Xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx, xX 8,0
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx draselný X2XXX4 |
16,7 g |
|
Hydrogen xxxxxxxxxxx xxxxxxxx KH2PO4 |
0,5 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx XxXXX3 |
20,0 x |
|
Xxxx xx |
1000 xx |
4.5 Xxxx xxxxxxx fosfát-bikarbonátový xxxx (4.4)
50/50 (objemově).
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx o xxxxx aktivitě (x XX).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.6.) xx směsi (4.5.) x xxxxxx stejnou xxxxx, abyste xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 1000 IU spiramycinu xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x zazátkované xxxxx xxx 4 °X xx tento xxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx.
X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (4.5.) xxxxxxxxxxx roztoky:
|
S8 |
1 |
IU/ml |
|
S4 |
0,5 |
IU/ml |
|
S2 |
0,25 |
IU/ml |
|
S1 |
0,125 |
IU/ml |
6. Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
6.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 20,0 x vzorku x xxxxxxx xxxxx, 1,0 xx 20,0 x x premixů. Přidejte 100 ml xxxxx (4.5) a třepejte 30 xxxxx. Odstřeďte xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx očekávaný xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= U8).
Pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2,5 xx/xx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx následovně. Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x třepejte 30 xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x odpařte xx xxx 4 xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx rotační xxxxxxx xxx xxxxxxx nepřesahující 40 °X. Xxxxxx xxxxxx směsí (4.5), xxxxxx obdrželi očekávaný xxxxx spiramycinu 1 XX/xx (= X8).
6.2 Xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx X8 xxxxxxxxx roztokU4 (xxxxxxxxx obsah: 0,5 XX/xx), X2 (očekávaný xxxxx: 0,25 IU/ml) x X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,125 IU/ml) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Zkušební xxxxxx
7.1 Naočkování xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) při asi 50 °X. Předběžnými xxxxxx xx xxxxxxx xx zkušebním médiem (4.2) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bakteriální xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x nejjasnější xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na miskách xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, S2, S1) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, U1). Xxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx na xxxxx xxxxx. Pro xxxxx xxxxxx vyberte xxxxx xxxxxxxxxx velké, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx otvorů x xxxxxxxx 10 až 13 mm x xxxxxxx 30 xx xxxx středy. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx x tabule xxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, 200 xx x xxxxxxx a 20 mm vysokým.
Rozlijte xx xxxxx množství xxxxx (4.2.), inokulovaného xxxx v 7.1., xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 2 mm xxxxxx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 ml). Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx objemy xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, podle xxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx čtyřikrát tak, xx každé xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.
7.3 Inkubace
Inkubujte xxxxx 16 xx 18 xxxxx při 30 ± 2 °X.
8. Vyhodnocení
Změřte xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Zaznamenejte střední xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xx semilogaritmický xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx logaritmus xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x průměrům xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx standardního roztoku x xxxxxxxx, například xxx xx níže xxxxxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" bod xxx standardní xxxxxxxx xxxxxx (SL) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7s1 + 4x2+ x4 – 2x8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx úroveň (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x8 + 4s4+ x2 – 2x1 / 10
Podobně xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxx (XX) a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) xxxxxxxxxx x1, u2, x4 a x8 xx x1, s2, x4, x s8 x xxxxx uvedených xxxxxxxxx [5]
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx SL a XX xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx je xxx, xxxxxx dostali "xxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx standardní xxxxxx. Podobně xxxxxxxxxxxx XX x XX x xxxxxx xx xxx, xxxxxx dostali "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx pro xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx jakéhokoli xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx. Xxx praktické účely xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx (XX — XX) x (XX — XX) xxxxxxxxxx více než x 10 % xx jejich xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x1 x x1 nebo x8 x x8, xxxxx xxx xxxxxxxx x SL, XX, XX x UH xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "nejvhodnější" xxxxxx:
x) XX = 5x1 + 2x2 – s4 / 6 xxxx 5s2 + 2x4 – x8 / 6
b′) XX = 5x4 + 2s2 – x1 / 6 xxxx 5x8 + 2x4 – s2 / 6
x xxxxxxx xxx XX x XX. Měla by xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, musí xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x analýze.
Pokud xxxx křivky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) x xxxxxx jedné x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx na xxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx ohodnocení xxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx
x) Xxx A = (x1+ x2+ u4+ x8 – s1 – x2 – x4 – x8) × 0,602 / x4+ u8+ x4+ x8 – x1 – u2 – x1 – s2
Pro xxx xxxxxx
x) Xxx X = (x1+ x2+ x4 – x1 – s2 – s4) × 0,401 / x4+ x4 – x1 – x1
xxxx
x´) Log X = (x2+ x4+ x8 – x2 – s4 – x8) × 0,401 / u8+ x8 – u2 – s2
Aktivita extraktu xxxxxx = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx standardu × X
(X8 = X8 × X)
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx aktivita xxxxxxxx xxxx rozsah 0,5 xx 2,0, potom xxxxxxxx zkoušku, při xxxx proveďte vhodné xxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud nemůže xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx požadovaného xxxxxxx, musí být xxxxx získaný xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx protokolu x xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx stanovení. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx báze xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx krmiva.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx překročit:
- 2 xx/xx x absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx xxxx spiramycinu xx 10 xx/xx,
- 20 % xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,
- 5 xx/xx x absolutní xxxxxxx pro xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.
[1] 1 mg xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3200 xxxxxxxxxxxxx jednotek (XX).
[2] Další metody xxxxx xxx použity xx předpokladu, xx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx podobné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[3] Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx výsledky.
[4] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx stejné xxxxxxxx.
[5] Xxxx xxxxxxx "x" x "x" xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón.