Xxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 93/117/XX
xx xxx 17. xxxxxxxx 1993,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x ohledem na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x analýzy Společenství xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XXX) x. 3768/85 [2], x xxxxxxx na xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx předepsaných xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx krmiv, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, že xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxx x methylbenzoátu x xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx této xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxxxx, xx xxx xxxxxxxxx provedených v xxxxx xxxxxxxx kontrol xxxxxxxxxx se obsahu xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx popsané x příloze této xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx x správní xxxxxxxx nezbytné pro xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. listopadu 1994. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Komisi.
Tato xxxxxxxx xxxxxxx členskými xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx tuto xxxxxxxx nebo musí xxx xx takový xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx státy.
Článek 3
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x platnost xxxxxx dnem xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
V Bruselu dne 17. xxxxxxxx 1993.
Za Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 362, 31.12.1985, x. 8.
PŘÍLOHA
1. STANOVENÍ XXXXXXXXXX
1,3-xxx [(4-xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxx]xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx slouží xx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx v krmivech. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx je 5 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx okyseleným xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx x oxidem xxxxxxxx. Xxxxxxxxx se eluuje x kolony xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx se x xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx fáze. Obsah xxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxx účinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx xxxxxxxx fázi xxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 Xxxxxxxx
3.2 Okyselený xxxxxxxx
Xx 500 xx xxxxxxx xxxxx se xxxxx 4,0 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (X20x, 1,18 x/xx), xxxxxx xx xx xxxxxx methanolem (3.1.) x xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx těsně xxxx xxxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxxx, xxx HPLC
3.4 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxx 3X, 8 xx 12 mesh (1,6–2,5 mm xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx 0,3 xx).
3.5 Xxxx xxxxxxx: xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx X xxx kolonovou xxxxxxxxxxxxxx
100 x oxidu xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 2 xx xxxx. Zazátkuje xx a xxxxxxxxxx xx přibližně 20 xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, roztok x = 0,025 mol/l
3,4 x dihydrogen xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx (pro XXXX) x 1000 ml xxxxxxx xxxxx, doplní xx xx značku x promíchá.
3.7 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, xxxxxx x = 0, 025 xxx/x
3,55 x xxxxxxxxx (xxxx 4,45 x xxxxxxxxx, nebo 8,95 g dodekahydrátu) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx (xxx XXXX) x 1000 ml xxxxxxx xxxxx. Doplní xx xx xxxxxx x xxxxxxxx.
3.8 Xxxxxxx xxxx XXXX
Xxxxxx se:
650 xx xxxxxxxxxxxx (3.3.),
250 xx vody (xxx XXXX),
50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného (3.6.),
50 ml roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sodného (3.7.).
Xxxxxxxxx se xxxxxxx 0,22 μm (4.6.) x roztok xx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xx dobu 10 xxxxx).
3.9 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx: 1.3-xxx [(4-xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxx] guanidin xxxxxxxxxxxx, X 758.
3.9.1 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: 300 μg/ml:
Naváží xx 30 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx robenidinu (3.9.) x přesností 0,1 xx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxx (3.2.) ve 100 xx odměrné baňce, xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxx.
3.9.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: 12 μg/ml
Odměří xxx 10,0 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.1) xx 250 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx po značku xxxxxxx fází (3.8) x xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx aluminiovou xxxxx x xxxxx x xxxxx.
3.9.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx buněk xx odměří 5.0, 10.0, 15.0, 20.0 x 25.0 ml xxxxxxxxxx standardního roztoku (3.9.2.). Xxxxxx se xx xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.8.) x xxxxxxxx. Xxxx roztoky xxxxxxxxxx 1.2, 2.4, 3.6, 4.8 x 6.0 μx/xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx těsně xxxx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky
4.1 Skleněná xxxxxx
Xxxxxxxx z xxxxxxx xxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a nádržkou xx přibližně 150 xx. Xxxxxxx xxxxxx 10 – 15 xx, délka 250 xx.
4.2 Xxxxx xxxxxxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxxxx
4.4 Zařízení xx xxxxxx účinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxxx ultrafialovým detektorem x měnitelnou vlnovou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx polem, xxxxxxxxxx v xxxxx 250 - 400 xx
4.4.1 Kolona xx xxxxxxxxxxx chromatografii: 300 xx x 4 xx, X18, 10 μx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
4.5 Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx (Whatman XX/X xxxx xxxxxxx)
4.6 Xxxxxxxxxx filtry 0,22 μx
4.7 Membránové filtry 0,45 μm
5. Postup
Pozn.: Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx světlo. Xxxxx xxxx být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx nádobí x xxxxxxx skla.
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxxxx se analyzovat xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1.1.), xx xxxxxxx bylo xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xx xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx 60 xx/xx xx do 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 3 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.1.). Xxxxxx xx xxxxxx asi na xxxxx 0,5 xx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx 15 x xxxxxxxxxx krmiva, xxxxxxxx se a xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx začít x xxxxxxxx (5.2.).
Xxxx.: Xxx xxxx této xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxx krmivo xxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x nemělo xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Extrakce
Do 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 15 g xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 x, xxxxx xx 100 ml xxxxxxxxxxx methanolu (3.2), xxxxxxxxx x hodinu xxxxx na xxxxxxxx (4.2). Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx přes xxxxx xx xxxxxxxxxx vláken (4.5) x xxxx xxxxx filtrátu se xxxx xx 150 xx Erlenmeyerovy xxxxx. Xxxxx xx 7,5 x xxxxxxxxxxxxx xxxx (3.4), xxxxxxxxx x xxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx přefiltruje xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxxxxx x xxxxxxx (5.3).
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxx kolony s xxxxxx xxxxxxxx
Xx spodního xxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxx xxxx zátka xx xxxxxx xxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Naváží se 11,0 g xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.5) x xxxxxx se xx kolony, xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxx setřese xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xx připravenou xxxxxx xx xxxxxxxxxx 5,0 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx x stěnu xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx řádně xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx 100 xx methanolu (3.1) při xxxxxxxxx xxxxxxx 2 – 3 xx za xxxxxx a eluát xx xxxx xx 250 xx baňky x xxxxxxx dnem. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx 40xX odpaří xx xxxxx x rotační xxxxxxx (4.3). Odparek xx xxxxx xxxxxxxx xx 3 – 4 xx xxxxxxx xxxx (3.8.) x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 10 ml xxxxxxx xxxxx. Baňka xx několikrát vypláchne 1 – 2 xx xxxxxxx xxxx x xxxx roztoky xx přidají xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx x promíchá xx. Xxxxxxxxx xxxx zfiltruje xxxx 0,45 μm xxxxx (4.7). Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx HPLC xxxxxxxxx (5.4).
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)
5.4.1 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.4.1),
xxxxxxx xxxx (3.8),
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxxxxx,
xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx: 317 xx,
xxxxx xxxxxxxx: 20–50 μx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.3), xxxxx xxxxxxxx 3,6 μx/xx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx a retenčních xxxx.
5.4.2 Kalibrační graf
Pro xxxxx xxxxxxxxxx roztok (3.9.3) xx xxxxxxx xxxxxxx nástřiků x xxxxx xx výšky (xxxxxx) xxxx xxx xxxxxx koncentraci. Kalibrační xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx průměrných hodnot xxxxx xxxx ploch xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x μg/ml.
5.4.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx.
6. Výpočet x xxxxxxxxx výsledků
Z průměrných xxxxxx xxxxx (ploch) xxxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxx xxxxxx se xxxx koncentrace xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx xxxxxxxxx x kalibračního grafu (5.4.2).
x = (x × 200)/x,
xx kterém xx
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx x μx/xx,
x = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx.
7. Xxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Identita
Identita xxxxxxx analýzy může xxx potvrzena opakovaným xxxxxxxxxx x přídavkem xxxxx xxxxxxxx detektoru x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx extraktu vzorku x kalibračním xxxxxxxx (3.9.3) xxxxxxxxxxx 6 μx/xx xxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x přídavkem
K xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vhodného množství xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx robenidinu xx xxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xx xx xxxxxx xxxxx výška xxxx robenidinu xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx robenidinu x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx extraktu. Xxxx xxxx x xxxxxxxx jeho xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) při vlnové xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx/xxxxx 2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 nm xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxxxx zaznamenaný xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx lišit xx xxxxxxxxx částí xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Tohoto xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx odchylka xxxx dvěma xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
x) xxx vlnové délce xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx spektrum vzestupu, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx od xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 až 100 % relativní xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
7.2. Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených na xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxx. nejvyššího xxxxxxxx xxx obsahu xxxxxxxxxx xxx 15 mg/kg.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx 85 %
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx analyzovalo čtyři xxxxxx xxxxx pro xxxxxx a xxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx vzorků xxx xxxxxxxx dvěma xxxxxxxxxx. Výsledky jsou xxxxxxx x xxxx xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
xxxxxxx |
|||
|
Xxxxx krmivo |
Pelety |
Sypké xxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
Xxxxxx (xx/xx) |
27,00 |
27,99 |
43,6 |
40,1 |
|
Xx (xx/xx) |
1,46 |
1,26 |
1,44 |
1,66 |
|
XXx (%) |
5,4 |
4,5 |
3,3 |
4,1 |
|
XX (xx/xx) |
4,36 |
3,36 |
4,61 |
3,91 |
|
XXX (%) |
16,1 |
12,0 |
10,6 |
9,7 |
|
Výtěžnost (%) |
90,0 |
93,3 |
87,2 |
80,2 |
Xx = standardní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx opakovatelnosti
SR = xxxxxxxxxx odchylka v xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = variační xxxxxxxxxx x reprodukovatelnosti
2. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX
(2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)
1. Účel x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxx k xxxxxxxx methylbenzochátu v xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx ze xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx methansulfonové. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx chromatografií, x xxxxxxxx pak znovu xxxxxxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxx UV xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxxxxx
3.2 Xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 Xxxxxxx fáze XXXX
Xxxx xxxxxxxxx (3.2.) x xxxx (xxx XXXX) 75 + 25 (xxx.).
Xxxxxxxxxxx xx přes 0,22 μx filtr (4.5.) x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxx 10 xxxxx).
3.4 Xxxxxx xxxxxxxx methansulfonové σ = 2 %
20 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x 1000 ml xxxxxxxxx (3.2.).
3.5 Roztok xxxxxxxx chlorovodíkové σ = 10 %
100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (X20 x. 1,18x/xx) xx xxxxxxx x 1000 xx vody.
3.6 Xxxxx XX-120 (Xx), 100 – 200 xxxx
Xxxx použitím se xxxxxxxx katex takto: 100 x xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx v 500 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3,5) x za xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx x xxxx xx xxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xx kyselina xxxxxxxxx. Filtruje se xxxx xxxxxxxx filtr xx sníženého tlaku. Xxxxx xx propláchne xxxxxxx xxxx 500 xx xxxx x xxxxx 250 ml xxxxxxxxx (3.2). Potom xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 250 ml xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vysušený xxxxx xx uskladňuje v xxxxxxxxxxx xxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxx xxxxx: čistý xxxxxxxxxxxxxxx (2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)
3.7.1 Xxxxxxxx standardní xxxxxx xxxxxxxxxx, 500 μx/xx
Xxxxxx se 50 xx xxxxxxxxxx látky (3.7) s přesností 0,1 mg, xxxxxxxx xx ve 100 xx odměrné baňce x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.4), xxxxxx xx značku a xxxxxxxx.
3.7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 50μx/xx
Xx 50 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.1), xxxxxx se xxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxx x promíchá.
3.7.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx série 25 xx xxxxxxxxx xxxxx xx odpipetuje 1, 2, 3, 4 x 5 xx xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.2). Xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxx fází (3.3) x xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx 2, 4, 6, 8 a 10 μg/ml xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx roztoky xx xxxx xxxxxxxxxxx těsně xxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky
4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.2 Xxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx xxxxxx (250 x 15 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x nádržkou x xxxxxxxxx 200 xx
4.4 XXXX xxxxxxxx xxxxxxxx XX xxxxxxxxxx x měnitelnou xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx
4.4.1 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: 300 xx x 4 xx, C – 18, 10μx xxxx xxxxxx xxxxxxx
4.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,22 μx
4.5 Xxxxxxxxxx filtry 0,45μx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx krmivo xxx xxxxxxxxxxx methylbenzochátu se xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx x xxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx rušivé xxxxx.
5.1.2 Xxxx xx provést xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx krmiva, fortifkovaného xxxxxxxxxxxxxxxxx x obdobném xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xx vzorku. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxx 1,5 xx/xx xx xxxxx xx 20 x xxxxxxxxxx xxxxxx 600 μl xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.1), promíchá xx x po 10 xxxxx xx započne x extrakcí (5.2).
Xxxx.: Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx účel by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx xxxxxx, a při xxxx analýze by xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
5.2 Extrakce
Do 250 xx Erlenmeyerovy xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 20 x xxxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxx 0,01 x. Přidá xx 100 xx xxxxxxx kyseliny methansulfonové (3.4) x mechanicky xx třepe (4.1) xx xxxx 30 xxxxx. Roztok se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx (5.3).
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xx 500 xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx 100 ml roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxx 25 xx xxxxxxxx, který xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx (5.2). Xxxx se xx xxxxxxx xxxxx 100 ml xxxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx. Potom xx xxxxxxx vrstvy separovat x spodní vrstva (xxxxxxxxxxxxxx) se odpustí xx 500 ml xxxxx x xxxxxxx xxxx. Extrakce vodné xxxx xx xxxxxxx xx dvěma dalšími 40 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a tyto xx spojí s xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx s xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (4.2) při xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx 40 oC. Xxxxxxx xx rozpustí x 20–25 xx xxxxxxxxx (3.2), baňka xx xxxxxxxxx a xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx výměnou (5.4).
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx
5.4.1 Příprava xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx konce xxxxxxxx xxxxxx (4.3) xx vloží xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx suspense x 5 g xxxxxxxxxx xxxxxx a x 50 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5). Xxxx xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx a nechat xxxxxx. Xxxxxxxxxx kyselina xx xxxxxxx xx xxxxx nad xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx neutrální na xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xx xxxxxx xx xxxxxx 50 xx methanolu (3.2) x xxxxx xx xxxxx až k xxxxxxx ionexu.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xx kolonu xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.3). Xxxxx x kulatým dnem xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 5 až 10 xx methanolu (3.2) x xxxxxxx xx také xxxxxxx xx kolonu. Xxxxxxx xx xxxxx stéci xx k xxxxxxx xxxxxx. Kolona se xxxxxxx 50 ml xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxx nepřesahoval 5 xx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxx 150xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxx xx xxxx xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx (5.4.2) xx převede xx xxxxxxxxxxxx dělící xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx baňka se xxxxxxxxxx 5 xx 10 ml methanolu (3.2) x xxxxxxx xx přidá xx xxxxxx nálevky. Xxxx xx xx dělící xxxxxxx xxxxx 300 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 130 xx xxxxxxxxxxxxxx (3.1). Třepe xx xx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xx nechají xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx (dichlormethanová) xxxxxx se xxxxxxx xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 70 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x tyto xxxxxxxx xx xxxxx x prvním extraktem x xxxxx s xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx dichlormethanu xx xxxxxx xx xxxxx v xxxxxxx xxxxxxx (4.2) při xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx 40 °C. Xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx 5 ml xxxxxxxxx (3.2) x xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx do 10 ml odměrné xxxxx. Baňka s xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx 2 ml xxxxxxxxx x opět xx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx množství xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.6). Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XXXX (5.6).
5.6 Analýza xxxxxx XXXX
5.6.1 Parametry
Následující podmínky xxxx uvedeny xxxxxxxxxxx. Xxxxx být použity xxxx parametry pokud xxxxxxx xx stejným xxxxxxxxx:
- xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.4.1),
- xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxx x vody,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1–1,5 xx/xxxxxx,
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx: 265 xx,
- xxxxx xxxxxxxx: 20 xx 50μl.
Stabilita xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx kontroluje xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kalibračního xxxxxxx (3.7.3) xxxxxxxxxxxx 4μx/xx, xx do xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx.
5.6.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxx roztok (3.7.3) xx xxxxxxx několik xxxxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vynesením xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x μx/xx.
5.6.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xx nastříkne xxxxxxx xxxxxx (5.5.) x použitím xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx kalibrační xxxxxxx x určí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) z xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxx výšky (xxxxxx) píků xxxxxxxxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2.).
Obsah xxxxxxxxxxxxxxxx x (xx/xx) xx xxxxxx se xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxx
x =(x x 40)/x,
xx kterém xx
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx,
x = xxxxxxxx xxxxxxx vzorku x xxxxxxx.
7. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x přídavkem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spektra xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.7.3.), xxxxxxxxxxx 10 μg/ml xxxxxxxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xx fortifikuje přidáním xxxxxxxx množství pracovního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.2.). Xxxxxxxx přidaného xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxx je předpokládaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku.
Mělo by xxxxx xxxxx xx xxxxxxx píku xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx jak xx přidané množství, xxx na množství xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Šíře xxxx x polovině maximální xxxxx musí xxx xx xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx šíře.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx pole
Výsledky xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) při xxxxxx xxxxx maximální xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx zaznamenaný xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx danou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx detekčního xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx plus/minus 2 xx;
x) xxx xxxxxx délce xxxx 220 x 350 xx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x standardu xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx chromatogramu lišit xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx 10 až 100 % xxxxxxxxx absorbance. Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x jestliže xxxxx xxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxx nepřesahuje 15 % absorbance standardního xxxxxxx;
x) při xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx v této xxxxx spektra v xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vykázána stejná xxxxxx x xxxxxxxx xx všech sledovaných xxxxxx odchylka xxxx xxxxxxx nepřesahuje xxxxx 15 % absorbance xxxxxxx ve xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx dosaženo xxxxxxxxx x těchto xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx prokázána.
7.2 Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx methylbenzochátu mezi 4 x 20 xx/xx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx xxxxxxx 90 %.
8. Výsledky kruhového xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx. U xxxxxxx xxxxxx xxxx provedeny xxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx
|
Xxxxxxxx xxxxxx |
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
Xxxxxx (mg/kg) |
Nezjištěno |
4,50 |
4,50 |
8,90 |
8,70 |
|
Sr (xx/xx) |
— |
0,30 |
0,20 |
0,60 |
0,50 |
|
XXx (%) |
— |
6,70 |
4,40 |
6,70 |
5,70 |
|
SR (xx/xx) |
— |
0,40 |
0,50 |
0,90 |
1,00 |
|
XXX |
— |
8,90 |
11,10 |
10,10 |
11,50 |
|
Xxxxxxxxx (%) |
— |
92,00 |
93,00 |
92,00 |
89,00 |
Xx = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx opakovatelnost
SR = xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = xxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukovatelnosti