Dvanáctá xxxxxxxx Xxxxxx 93/117/XX
xx xxx 17. xxxxxxxx 1993,
kterou xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx krmiv
KOMISE EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x ohledem xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx směrnici Xxxx 70/373/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x analýzy Společenství xxx úřední kontrolu xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (EHS) x. 3768/85 [2], x zejména xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx potvrdit xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x správními xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx krmiv, xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství;
vzhledem x xxxx, že xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx kontrolu dodržování xxxxxxxx xxx používání xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, že xxx xxxxxxxxx provedených x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Členské xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu s xxxxx xxxxxxxx nejpozději xx 30. xxxxxxxxx 1994. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx členskými xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
X Bruselu xxx 17. prosince 1993.
Za Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 362, 31.12.1985, x. 8.
PŘÍLOHA
1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1,3-xxx [(4-xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxx]xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx x oblast xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx slouží xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx je 5 mg/kg.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxx okyseleným xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx část xx xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx hlinitým. Xxxxxxxxx xx eluuje x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx x xx vhodný xxxxx xx upraví pomocí xxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) na xxxxxxxx xxxx xxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 Xxxxxxxx
3.2 Xxxxxxxxx methanol
Do 500 xx odměrné xxxxx xx oměří 4,0 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (P20c, 1,18 x/xx), xxxxxx xx xx značku methanolem (3.1.) x xxxxxxxx. Xxxxx roztok musí xxx připraven xxxxx xxxx použitím.
3.3 Xxxxxxxxxxx, xxx HPLC
3.4 Molekulární xxxx
Xxx 3X, 8 xx 12 xxxx (1,6–2,5 mm xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx, průměr xxxx 0,3 xx).
3.5 Xxxx xxxxxxx: kyselý, xxxxxx xxxxxxxx X xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
100 x oxidu xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx nádoby a xxxxxxx xx 2 xx vody. Xxxxxxxxx xx a xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x = 0,025 mol/l
3,4 x xxxxxxxxxx fosforečnanu xx xxxxxxxx ve xxxx (xxx HPLC) x 1000 xx xxxxxxx xxxxx, doplní xx po značku x xxxxxxxx.
3.7 Hydrogen xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x = 0, 025 xxx/x
3,55 g xxxxxxxxx (xxxx 4,45 x xxxxxxxxx, nebo 8,95 x dodekahydrátu) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx (xxx XXXX) x 1000 ml xxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xx xxxxxx x promíchá.
3.8 Xxxxxxx xxxx XXXX
Xxxxxx xx:
650 xx acetonitrilu (3.3.),
250 xx vody (xxx XXXX),
50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx fosforečnanu xxxxxxxxxx (3.6.),
50 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.).
Xxxxxxxxx se xxxxxxx 0,22 μx (4.6.) x xxxxxx xx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxx 10 xxxxx).
3.9 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx: 1.3-xxx [(4-xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxx] guanidin hydrochlorid, X 758.
3.9.1 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: 300 μx/xx:
Xxxxxx xx 30 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (3.9.) x přesností 0,1 xx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxx (3.2.) xx 100 xx xxxxxxx baňce, xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxx.
3.9.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: 12 μg/ml
Odměří xxx 10,0 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.1) do 250 xx odměrné baňky, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx fází (3.8) x xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxx.
3.9.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx buněk xx xxxxxx 5.0, 10.0, 15.0, 20.0 x 25.0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.2.). Xxxxxx xx xx xxxxxx mobilní xxxx (3.8.) a xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 1.2, 2.4, 3.6, 4.8 x 6.0 μg/ml xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx připravují xxxxx xxxx xxxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxxxxxxx uzavíracím xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 150 xx. Xxxxxxx xxxxxx 10 – 15 xx, délka 250 xx.
4.2 Xxxxx xxxxxxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xx xxxxxx účinnou xxxxxxxxxxx chromatografii (XXXX) xxxxxxxx ultrafialovým xxxxxxxxxx x měnitelnou vlnovou xxxxxx, anebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx x pásmu 250 - 400 xx
4.4.1 Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx chromatografii: 300 xx x 4 xx, X18, 10 μx náplní xxxx xxxxxxx.
4.5 Filtr xx xxxxxxxxxx xxxxxx (Xxxxxxx XX/X nebo xxxxxxx)
4.6 Xxxxxxxxxx filtry 0,22 μx
4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,45 μm
5. Xxxxxx
Xxxx.: Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxx xxxx být xxx xxxxx úkonech xxxxxxx xxxx xxxxxx z xxxxxxx skla.
5.1 Obecně
5.1.1 Xxxxxxxxxx xx analyzovat xxxxxxxx krmivo xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx, zda xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ani jiné xxxxxx xxxxx.
5.1.2 Je xxxxxx provést test xxxxxxxxxx xxxxxxxx modelového xxxxxx (5.1.1.), xx xxxxxxx bylo přidáno xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je ve xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx 60 xx/xx xx xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 3 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.1.). Xxxxxx xx xxxxxx asi xx xxxxx 0,5 ml x proudu xxxxxx. Xxxxx se 15 x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx x xx xxxxxx minutách xx xxxx xxxxx x xxxxxxxx (5.2.).
Xxxx.: Xxx účel xxxx xxxxxx xx mělo xxx modelové xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 15 g upraveného xxxxxx s xxxxxxxxx 0,01 x, xxxxx xx 100 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxxx x hodinu xxxxx na xxxxxxxx (4.2). Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx přes xxxxx xx skleněných xxxxxx (4.5) a celý xxxxx xxxxxxxx se xxxx xx 150 xx Xxxxxxxxxxxxx baňky. Xxxxx se 7,5 x molekulárního síta (3.4), xxxxxxxxx a xxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx přes xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (5.3).
5.3 Čištění
5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx kolony (4.1) se xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Naváží xx 11,0 g xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.5) x xxxxxx xx xx xxxxxx, xxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx prostředí. Xxxx xxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxx xxxxx kolony.
5.3.2 Xxxxxxx vzorku
Na připravenou xxxxxx xx xxxxxxxxxx 5,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx o stěnu xxxxxx a extrakt xx nechá xxxxx xxxxxxxxxx oxidem xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx 100 xx xxxxxxxxx (3.1) při xxxxxxxxx xxxxxxx 2 – 3 xx za xxxxxx x xxxxx xx jímá xx 250 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx roztok xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx teplotě 40xX odpaří xx xxxxx x rotační xxxxxxx (4.3). Xxxxxxx xx xxxxx rozpustí xx 3 – 4 xx xxxxxxx xxxx (3.8.) x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 10 xx xxxxxxx xxxxx. Baňka xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1 – 2 xx mobilní xxxx x xxxx roztoky xx xxxxxxx do xxxxxxx baňky. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx x promíchá xx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx xxxxx (4.7). Tento xxxxxx xx použije xxx xxxxxxx HPLC xxxxxxxxx (5.4).
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)
5.4.1 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx i xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx výsledkům:
Kolona pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.4.1),
xxxxxxx xxxx (3.8),
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxxxxx,
xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx: 317 nm,
objem xxxxxxxx: 20–50 μx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.3), xxxxx xxxxxxxx 3,6 μx/xx, xx xx xxxxxxxx konstantních xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx.
5.4.2 Kalibrační graf
Pro xxxxx kalibrační xxxxxx (3.9.3) xx xxxxxxx xxxxxxx nástřiků x xxxxx xx xxxxx (xxxxxx) xxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx. Kalibrační xxxxxx se získá xxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnot xxxxx nebo xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x μx/xx.
5.4.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx a určí xx průměrná xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx.
6. Výpočet x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X průměrných xxxxxx výšek (xxxxx) xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx robenidinu x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx odečtením x xxxxxxxxxxxx grafu (5.4.2).
x = (x × 200)/m,
ve kterém xx
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx,
x = xxxxxxxx navážky xxxxxx v xxxxxxx.
7. Xxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Identita
Identita xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx detektoru x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx porovnání xxxxxxx xxxxxxxx vzorku x kalibračním xxxxxxxx (3.9.3) obsahujícím 6 μx/xx xxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx
X xxxxxxxx vzorku xx xxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.3). Xxxxxxxx přidaného robenidinu xx xxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx by xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx přidaného xxxxxxxxxx x xxxxxx robenidinu x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx píku x xxxxxxxx xxxx maximální xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx.
7.1.2 Detektor xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) při xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být záznam xxxxxxx zaznamenaný ve xxxxxxx píku xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx detekčního xxxxxxx. Xxx detektor x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx/xxxxx 2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 nm xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vrcholu xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vykázána xxxxxx maxima x xxxxxxxx nikde odchylka xxxx dvěma spektry xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx analytu.
c) xxx vlnové délce xxxx 220 a 350 xx se xxxxx spektrum xxxxxxxx, xxxxxxx x sestupu xxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx xx ostatních x této xxxxx xxxxxxx v rozsahu 10 xx 100 % relativní absorbance. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx bodech xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % xxxxxxxxxx spektra xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxxxxxx.
7.2. Opakovatelnost
Rozdíl mezi xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx 15 xx/xx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx 85 %
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx testu
Společenství xxxxxxxxxxxxx kruhový xxxx, xx kterém xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krmiv pro xxxxxx x králíky, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx vzorků xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x této xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
xxxxxxx |
|||
|
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
Xxxxxx (xx/xx) |
27,00 |
27,99 |
43,6 |
40,1 |
|
Xx (xx/xx) |
1,46 |
1,26 |
1,44 |
1,66 |
|
XXx (%) |
5,4 |
4,5 |
3,3 |
4,1 |
|
XX (xx/xx) |
4,36 |
3,36 |
4,61 |
3,91 |
|
XXX (%) |
16,1 |
12,0 |
10,6 |
9,7 |
|
Xxxxxxxxx (%) |
90,0 |
93,3 |
87,2 |
80,2 |
Xx = standardní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XX = xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = variační xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
2. XXXXXXXXX METHYLBENZOCHÁTU
(2-methyl-7-benzyl-oxy-6-butyl-1,4-dihydro-4-oxychinolin-3-karboxylát)
1. Xxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx methylbenzochátu v xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx je 1 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx methanolového xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx přečištěn xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx chromatografií, a xxxxxxxx xxx znovu xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxxx xxxx vysoce xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 Dichlormethan
3.2 Xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 Xxxxxxx fáze XXXX
Xxxx xxxxxxxxx (3.2.) x xxxx (xxx XXXX) 75 + 25 (xxx.).
Xxxxxxxxxxx xx přes 0,22 μx filtr (4.5.) x odplyní (xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxx 10 xxxxx).
3.4 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σ = 2 %
20 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x 1000 xx xxxxxxxxx (3.2.).
3.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx σ = 10 %
100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (X20 x. 1,18g/ml) xx rozředí x 1000 ml xxxx.
3.6 Xxxxx XX-120 (Xx), 100 – 200 xxxx
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx: 100 x xxxxxxxxxxx xx rozmíchá x 500 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3,5) x xx stálého xxxxxxx xx zahřívá x xxxx xx xxxxx desce. Xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx tlaku. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 500 xx xxxx x xxxxx 250 xx xxxxxxxxx (3.2). Xxxxx xx xxxxxxxxxx dalšími 250 ml methanolu x vysuší xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx lahvi.
3.7 Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)
3.7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, 500 μx/xx
Xxxxxx xx 50 xx xxxxxxxxxx xxxxx (3.7) s přesností 0,1 mg, rozpustí xx xx 100 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.4), doplní xx značku x xxxxxxxx.
3.7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx methylbenzochátu 50μx/xx
Xx 50 xx odměrné xxxxx se odpipetuje 5 xx základního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx methylbenzochátu (3.7.1), xxxxxx xx xxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxx a promíchá.
3.7.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx 25 xx odměrných xxxxx se odpipetuje 1, 2, 3, 4 x 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx methylbenzochátu (3.7.2). Xxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.3) a xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx 2, 4, 6, 8 a 10 μx/xx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx těsně xxxx jejich xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky
4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.2 Xxxxxxx xxxxxxx
4.3 Skleněná xxxxxx (250 x 15 xx) vybavená xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a nádržkou x kapacitou 200 xx
4.4 XXXX zařízení xxxxxxxx XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx
4.4.1 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: 300 xx x 4 xx, X – 18, 10μx xxxx xxxxxx xxxxxxx
4.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,22 μx
4.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,45μx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx v xxx xxxx xxxxxxxx xxx methylbenzochát xxx xxxx rušivé látky.
5.1.2 Xxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx ve xxxxxx. X fortifikaci xx xxxxxx 1,5 mg/kg xx přidá xx 20 x xxxxxxxxxx xxxxxx 600 μx xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.7.1), xxxxxxxx xx x xx 10 xxxxx se xxxxxxx x extrakcí (5.2).
Pozn.: Xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, jako xx xxxxxx, x při xxxx analýze xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 20 g připraveného xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 g. Xxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.1) xx dobu 30 xxxxx. Roztok xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx (5.3).
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xx 500 ml xxxxxx nálevky, obsahující 100 ml roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx přidá 25 xx filtrátu, který xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxx (5.2). Xxxx xx xx xxxxxxx xxxxx 100 xx xxxxxxxxxxxxxx (3.1) a xxxxx xx xxxx jedné xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx vrstvy separovat x xxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) se odpustí xx 500 ml xxxxx s xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx se opakuje xx dvěma xxxxxxx 40 xx dávkami xxxxxxxxxxxxxx x tyto xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx s kulatým xxxx. Xxxxxxx dichlormethanu xx odpaří xx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx tlaku x xxxxxxx 40 oC. Xxxxxxx se rozpustí x 20–25 ml xxxxxxxxx (3.2), xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx (5.4).
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx
5.4.1 Xxxxxxxx ionexové xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx kolony (4.3) xx xxxxx xxxxxx xx skelné vaty. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 5 x xxxxxxxxxx xxxxxx x x 50 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5). Xxxx xxxx xx xxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx kyselina xx xxxxxxx až xxxxx nad hladinu xxxxxxxxxxx x kolona xx promývá xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xx xxxxxx xx xxxxxx 50 xx xxxxxxxxx (3.2) x nechá xx xxxxx xx x xxxxxxx ionexu.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.3). Xxxxx x kulatým dnem xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 5 až 10 xx xxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xx také xxxxxxx xx kolonu. Xxxxxxx xx nechá xxxxx xx x povrchu xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 5 xx xx minutu. Xxxxxxxx kapalina xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx se xxxxxx x kolony 150xx roztoku kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxx se xxxx xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.5 Extrakce xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx (5.4.2) xx převede xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx nálevky. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 5 až 10 xx xxxxxxxxx (3.2) a xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Dále xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx 300 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 130 xx dichlormethanu (3.1). Xxxxx se xx xxxx xxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx (dichlormethanová) xxxxxx xx xxxxxxx xx 500 xx xxxxx s xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 70 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xx smísí x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx v xxxxxxx xxxxxxx (4.2) při xxxxxxxx tlaku x xxxxxxx 40 °X. Xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx 5 xx xxxxxxxxx (3.2) a xxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 10 ml xxxxxxx xxxxx. Baňka s xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 až 2 xx xxxxxxxxx x xxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Baňka se xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx a promíchá. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx (4.6). Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxx analýzu HPLC (5.6).
5.6 Xxxxxxx xxxxxx XXXX
5.6.1 Parametry
Následující podmínky xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx použity xxxx xxxxxxxxx pokud xxxxxxx ke stejným xxxxxxxxx:
- kolona xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.4.1),
- xxxxxxx fáze: směs xxxxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxxx rychlost: 1–1,5 xx/xxxxxx,
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx: 265 xx,
- xxxxx xxxxxxxx: 20 xx 50μl.
Stabilita chromatografického xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.3) xxxxxxxxxxxx 4μx/xx, xx xx xxxxxxxx konstantních xxxxx xxxx ploch xxxx x xxxxxxxxxx časů.
5.6.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxx roztok (3.7.3) xx xxxxxxx několik xxxxxxxx a xxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vynesením xxxxxxxxxx xxxxxx výšek xxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx kalibračních roztoků x μg/ml.
5.6.3 Roztok xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.5.) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, jaký xxx xxxxxx xxx kalibrační xxxxxxx a určí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) x píků xxxxxxxxxxxxxxxx.
6. Výpočet výsledků
Z xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) píků xxxxxxxxxxxxxxxx x roztoku vzorku xx xxxx koncentrace x roztoku vzorku x μx/xx podle xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2.).
Obsah xxxxxxxxxxxxxxxx x (xx/xx) xx vzorku xx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxx
x =(c x 40)/x,
xx xxxxxx xx
x = xxxxxxxxxxx methylbenzochátu x xxxxxxx xxxxxx x μg/ml,
m = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx.
7. Ověření xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Identita
Identita xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx porovnání xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.7.3.), xxxxxxxxxxx 10 μx/xx xxxxxxxxxxxxxxxx.
7.1.1 Opakované xxxxxxxxxx x přídavkem
Extrakt vzorku xx xxxxxxxxxxx přidáním xxxxxxxx množství pracovního xxxxxxxxxxxx roztoku (3.7.2.). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxx je předpokládaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxx ke xxxxxxx xxxx methylbenzochátu x xxxxxxx jak xx přidané množství, xxx xx množství xxxxxxxxxxxxxxx ve zředěném xxxxxxxx. Xxxx xxxx x polovině xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx šíře.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx pole
Výsledky xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kritérií:
a) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vrcholu xxxx xx xxxxxxxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx detektor x diodovým polem xx xxxxx plus/minus 2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x standardu xxxxxxxxxxx xx vrcholu xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Xxxxxx kritéria je xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxx maxima x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % absorbance standardního xxxxxxx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx nesmí xxxxxxxx xxxxxxxx, vrcholu x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx od xxxxxxxxx v xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 až 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Tohoto kritéria xx dosaženo, jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx odchylka mezi xxxxxxx nepřesahuje xxxxx 15 % absorbance xxxxxxx ve xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx prokázána.
7.2 Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx 4 x 20 xx/xx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx nejméně 90 %.
8. Výsledky xxxxxxxxx xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pět xxxxxx. X každého xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx
|
Xxxxxxxx xxxxxx |
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx krmivo |
Pelety |
|
|
Průměr (xx/xx) |
Xxxxxxxxxx |
4,50 |
4,50 |
8,90 |
8,70 |
|
Xx (xx/xx) |
— |
0,30 |
0,20 |
0,60 |
0,50 |
|
XXx (%) |
— |
6,70 |
4,40 |
6,70 |
5,70 |
|
SR (xx/xx) |
— |
0,40 |
0,50 |
0,90 |
1,00 |
|
XXX |
— |
8,90 |
11,10 |
10,10 |
11,50 |
|
Xxxxxxxxx (%) |
— |
92,00 |
93,00 |
92,00 |
89,00 |
Xx = standardní xxxxxxxx opakovatelnosti
CVr = xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxx
XX = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx