Animace načítání

Stránka se připravuje...


Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Dvanáctá směrnice Xxxxxx 93/117/XX

xx xxx 17. xxxxxxxx 1993,

xxxxxx xx xxxxxxx analytické xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,

s xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x analýzy Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XXX) x. 3768/85 [2], x zejména na xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, že xx xxxxxx kontroly krmiv, xxxxx mají xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx předepsaných xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Společenství pro xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, že xx xxxxx stanovit xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx dodržování xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx robenidinu x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx;

xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou v xxxxxxx xx stanoviskem Xxxxxxx výboru xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx kontrol xxxxxxxxxx xx obsahu xxxxxxxxxx a methylbenzochátu x krmivech xx xxxxxxxxx metody popsané x příloze této xxxxxxxx.

Článek 2

Xxxxxxx státy xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a správní xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. xxxxxxxxx 1994. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Komisi.

Tato xxxxxxxx přijatá členskými xxxxx xxxx obsahovat xxxxx xx xxxx xxxxxxxx nebo xxxx xxx xx xxxxxx xxxxx učiněn při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx xxxxxxx členské xxxxx.

Článek 3

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

X Bruselu xxx 17. prosince 1993.

Za Xxxxxx

Xxxx Xxxxxxxx

xxxx Xxxxxx


[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. xxxx. X 362, 31.12.1985, x. 8.


XXXXXXX

1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX

1,3-xxx [(4-xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxx]xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxx v xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 mg/kg.

2. Xxxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx část se xxxxxxxx xx koloně x oxidem hlinitým. Xxxxxxxxx xx eluuje x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx se a xx vhodný xxxxx xx upraví xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx účinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx xxxxxxxx fázi pomocí XX xxxxxxxxx.

3. Xxxxxxx

3.1 Xxxxxxxx

3.2 Okyselený xxxxxxxx

Xx 500 ml xxxxxxx xxxxx xx xxxxx 4,0 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (X20x, 1,18 x/xx), doplní xx xx xxxxxx methanolem (3.1.) a xxxxxxxx. Xxxxx roztok musí xxx xxxxxxxxx těsně xxxx xxxxxxxx.

3.3 Acetonitril, xxx XXXX

3.4 Molekulární xxxx

Xxx 3X, 8 xx 12 xxxx (1,6–2,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx 0,3 xx).

3.5 Xxxx hlinitý: xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx X xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

100 x xxxxx hlinitého xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx 2 xx xxxx. Xxxxxxxxx xx x protřepává xx přibližně 20 xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxx zazátkované xxxxxxx.

3.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x = 0,025 xxx/x

3,4 x dihydrogen xxxxxxxxxxxx xx rozpustí xx xxxx (xxx XXXX) x 1000 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx po xxxxxx x xxxxxxxx.

3.7 Hydrogen xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x = 0, 025 xxx/x

3,55 x xxxxxxxxx (nebo 4,45 x xxxxxxxxx, nebo 8,95 x dodekahydrátu) xxxxxxxx fosforečnanu sodného xx xxxxxxxx xx xxxx (xxx XXXX) x 1000 xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xx značku x xxxxxxxx.

3.8 Mobilní xxxx XXXX

Xxxxxx se:

650 xx xxxxxxxxxxxx (3.3.),

250 xx xxxx (xxx XXXX),

50 xx roztoku xxxxxxxxxx fosforečnanu xxxxxxxxxx (3.6.),

50 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.).

Xxxxxxxxx xx filtrem 0,22 μm (4.6.) x xxxxxx xx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xx dobu 10 xxxxx).

3.9 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xxxxxxxxx: 1.3-xxx [(4-xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxx] guanidin xxxxxxxxxxxx, X 758.

3.9.1 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx standardní roztok: 300 μx/xx:

Xxxxxx se 30 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx robenidinu (3.9.) x xxxxxxxxx 0,1 xx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxx methanolu (3.2.) xx 100 xx xxxxxxx baňce, xxxxxx se xx xxxxxx xxxxxxx rozpouštědlem x xxxxxxxx xx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxx.

3.9.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx standardní xxxxxx: 12 μg/ml

Odměří xxx 10,0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.1) xx 250 xx odměrné baňky, xxxxxx po xxxxxx xxxxxxx fází (3.8) x xxxxxxxx. Xxxxx xx obalí xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x temnu.

3.9.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx buněk xx xxxxxx 5.0, 10.0, 15.0, 20.0 x 25.0 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.2.). Xxxxxx se xx značku xxxxxxx xxxx (3.8.) a xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 1.2, 2.4, 3.6, 4.8 a 6.0 μx/xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx roztoky xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx použitím.

4. Přístroje x xxxxxxx

4.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxxxxxxx uzavíracím xxxxxxxx x nádržkou xx xxxxxxxxx 150 xx. Xxxxxxx xxxxxx 10 – 15 xx, délka 250 xx.

4.2 Xxxxx třepačka

4.3 Xxxxxxx xxxxxxx

4.4 Xxxxxxxx xx vysoce účinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxxx ultrafialovým detektorem x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx polem, xxxxxxxxxx x pásmu 250 - 400 xx

4.4.1 Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: 300 xx x 4 xx, X18, 10 μx xxxxxx xxxx xxxxxxx.

4.5 Xxxxx xx xxxxxxxxxx vláken (Xxxxxxx XX/X xxxx xxxxxxx)

4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,22 μx

4.7 Membránové xxxxxx 0,45 μx

5. Postup

Pozn.: Xxxxxxxxx xx citlivý xx xxxxxx. Xxxxx xxxx být xxx xxxxx úkonech použito xxxx xxxxxx z xxxxxxx skla.

5.1 Xxxxxx

5.1.1 Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx krmivo xxx xxxxxxxxxxx robenidinu x xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx.

5.1.2 Je xxxxxx provést test xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1.1.), xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx ve xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx 60 mg/kg xx xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xxxxxxx 3 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.1.). Xxxxxx xx xxxxxx xxx xx xxxxx 0,5 xx x proudu dusíku. Xxxxx xx 15 x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx se x xx xxxxxx minutách xx může xxxxx x xxxxxxxx (5.2.).

Xxxx.: Xxx xxxx této xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx vzorek x nemělo by xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx

Xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx xxxxxx xxxxxxxxx 15 x xxxxxxxxxx xxxxxx x přesností 0,01 x, xxxxx xx 100 ml xxxxxxxxxxx methanolu (3.2), xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx na xxxxxxxx (4.2). Roztok se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) x xxxx xxxxx filtrátu se xxxx do 150 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se 7,5 x xxxxxxxxxxxxx síta (3.4), zazátkuje x xxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx přes xxxxx xx skleněných xxxxxx. Xxxxx roztok xx použije x xxxxxxx (5.3).

5.3 Xxxxxxx

5.3.1 Xxxxxxxx kolony x xxxxxx xxxxxxxx

Xx spodního xxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx vloží xxxx xxxxx ze xxxxxx vaty x xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se 11,0 g připraveného xxxxxxxxxx hlinitého (3.5) x xxxxxx xx xx xxxxxx, pokud xxxxx x minimální xxxxxxx prodlevou x xxxxxxx xxxxxxxxx. Oxid xxxxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxx setřese xxxxxx poklepem xx xxxxx xxxxx kolony.

5.3.2 Xxxxxxx xxxxxx

Xx připravenou xxxxxx se xxxxxxxxxx 5,0 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2). Xxxxxx xxxxxx se xxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx nechá xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx pomocí 100 ml xxxxxxxxx (3.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 2 – 3 xx xx xxxxxx x eluát xx jímá xx 250 xx xxxxx x kulatým xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x při teplotě 40xX xxxxxx xx xxxxx v xxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxx xx znovu xxxxxxxx xx 3 – 4 xx mobilní xxxx (3.8.) x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 10 ml xxxxxxx xxxxx. Baňka xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1 – 2 xx mobilní xxxx x tyto xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx doplní xx xxxxxx mobilní fází x xxxxxxxx se. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx xxxxx (4.7). Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx HPLC xxxxxxxxx (5.4).

5.4 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)

5.4.1 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx výsledkům:

Kolona xxx xxxxxxxxxxx chromatografii (4.4.1),

xxxxxxx xxxx (3.8),

xxxxxxxxx rychlost: 1,5–2 xx/xxxxxx,

xxxxxx délka xxxxxxxxx: 317 xx,

xxxxx xxxxxxxx: 20–50 μx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.3), xxxxx obsahuje 3,6 μx/xx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x retenčních xxxx.

5.4.2 Xxxxxxxxxx graf

Pro xxxxx kalibrační roztok (3.9.3) xx provede xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx se výšky (xxxxxx) píků xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx ploch xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kalibračních xxxxxxx x μx/xx.

5.4.3 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx objem xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxx xx průměrná xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx.

6. Výpočet x xxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) xxxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxx vzorku se xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx x μx/xx odečtením x kalibračního grafu (5.4.2).

x = (c × 200)/x,

xx xxxxxx xx

x = koncentrace xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx,

x = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx.

7. Xxxxxxx xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx s přídavkem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x diodovým xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.9.3) obsahujícím 6 μx/xx xxxxxxxxxx.

7.1.1 Opakované xxxxxxxxx x přídavkem

K xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.3). Xxxxxxxx přidaného xxxxxxxxxx xx xxx obdobné xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxx by xx xxxxxx pouze xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx extraktu. Xxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx.

7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

x) xxx vlnové xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx píku na xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému. Xxx detektor x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx/xxxxx 2 xx;

x) xxx vlnové xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx zkoušeného xxxxxx x standardu xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx lišit xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vykázána xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nikde xxxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx standardního analytu.

c) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx xx ostatních x této xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx 10 xx 100 % relativní absorbance. Xxxxxx kritéria xx xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx stejná xxxxxx x jestliže xx xxxxx sledovaných bodech xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx nikde 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx vrcholu xxxx.

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx kritérií, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

7.2. Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu xxxxxxxxxx xxx 15 xx/xx.

7.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx pro fortifikovaný xxxxxx musí xxx xxxxxxx 85 %

8. Xxxxxxxx kruhového testu

Společenství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx dvanáct xxxxxxxxxx analyzovalo xxxxx xxxxxx xxxxx pro xxxxxx a xxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx:

Xxxxxx

xxxxxxx

Xxxxx xxxxxx

Xxxxxx

Xxxxx xxxxxx

Xxxxxx

Xxxxxx (xx/xx)

27,00

27,99

43,6

40,1

Xx (mg/kg)

1,46

1,26

1,44

1,66

CVr (%)

5,4

4,5

3,3

4,1

XX (xx/xx)

4,36

3,36

4,61

3,91

XXX (%)

16,1

12,0

10,6

9,7

Výtěžnost (%)

90,0

93,3

87,2

80,2

Xx = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx opakovatelnosti

SR = xxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

XXX = variační xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

2. XXXXXXXXX METHYLBENZOCHÁTU

(2-methyl-7-benzyl-oxy-6-butyl-1,4-dihydro-4-oxychinolin-3-karboxylát)

1. Účel x xxxxxx použití

Tato xxxxxx xxxxxx k xxxxxxxx methylbenzochátu x xxxxxxxx. Xxxxx mez xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx/xx.

2. Princip

Methylbenzochát xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx methanolového roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx chromatografií, a xxxxxxxx xxx znovu xxxxxxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx fází vysoce xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxx UV xxxxxxxxx.

3. Xxxxxxx

3.1 Dichlormethan

3.2 Xxxxxxxx, xxx XXXX

3.3 Xxxxxxx xxxx XXXX

Xxxx xxxxxxxxx (3.2.) a xxxx (pro XXXX) 75 + 25 (xxx.).

Xxxxxxxxxxx xx xxxx 0,22 μx filtr (4.5.) x odplyní (xxxx. ultrazvukem xx xxxx 10 xxxxx).

3.4 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σ = 2 %

20 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx rozředí x 1000 xx xxxxxxxxx (3.2.).

3.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx σ = 10 %

100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (X20 x. 1,18x/xx) xx rozředí x 1000 xx xxxx.

3.6 Xxxxx XX-120 (Xx), 100 – 200 xxxx

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx katex takto: 100 x xxxxxxxxxxx xx rozmíchá x 500 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3,5) x za stálého xxxxxxx se xxxxxxx x xxxx xx xxxxx desce. Xx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx filtr xx sníženého tlaku. Xxxxx se propláchne xxxxxxx xxxx 500 xx xxxx a xxxxx 250 ml xxxxxxxxx (3.2). Xxxxx xx propláchne dalšími 250 xx methanolu x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vysušený xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

3.7 Xxxxxxxxxx xxxxx: čistý methylbenzochát (2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)

3.7.1 Základní xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, 500 μx/xx

Xxxxxx se 50 xx standardní xxxxx (3.7) x přesností 0,1 xx, xxxxxxxx xx ve 100 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.4), doplní xx značku x xxxxxxxx.

3.7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 50μx/xx

Xx 50 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 5 ml základního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.1), xxxxxx xx xxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxx x xxxxxxxx.

3.7.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxx 25 ml xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx 1, 2, 3, 4 x 5 xx xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.2). Xxxxxx se xx xxxxxx mobilní xxxx (3.3) x xxxxxxx. Xxxx roztoky xxxx xxxxxxxxxxx 2, 4, 6, 8 x 10 μg/ml methylbenzochátu. Xxxxxxxxxx roztoky xx xxxx připravovat xxxxx xxxx jejich xxxxxxxx.

4. Xxxxxxxxx a pomůcky

4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.2 Xxxxxxx xxxxxxx

4.3 Skleněná xxxxxx (250 x 15 xx) xxxxxxxx uzavíracím xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kapacitou 200 xx

4.4 HPLC zařízení xxxxxxxx XX detektorem x měnitelnou xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx

4.4.1 Xxxxxx xxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx: 300 mm x 4 mm, C – 18, 10μx xxxx xxxxxx xxxxxxx

4.5 Xxxxxxxxxx filtry 0,22 μx

4.5 Membránové xxxxxx 0,45μx

5. Postup

5.1 Obecně

5.1.1 Xxxxxxxx krmivo bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx analyzovat a xxxxxxxxxx zda v xxx xxxx xxxxxxxx xxx methylbenzochát xxx xxxx rušivé látky.

5.1.2 Xxxx se provést xxxx výtěžnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx. X fortifikaci na xxxxxx 1,5 xx/xx xx xxxxx xx 20 x xxxxxxxxxx xxxxxx 600 μl xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.1), xxxxxxxx se x xx 10 xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx (5.2).

Xxxx.: Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxx xx xxxx být podobného xxxx, xxxx je xxxxxx, a při xxxx xxxxxxx xx xxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx

Xx 250 xx Erlenmeyerovy baňky xx xxxxxx xxxxxxxxx 20 x xxxxxxxxxxxx xxxxxx s přesností 0,01 g. Xxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx methansulfonové (3.4) x mechanicky xx xxxxx (4.1) xx xxxx 30 xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx papírový xxxxx x filtrát xxxxxxx xx extrakci xxxxxxxx-xxxxxxxx (5.3).

5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx

Xx 500 ml xxxxxx nálevky, xxxxxxxxxx 100 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx přidá 25 xx filtrátu, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx (5.2). Xxxx se xx xxxxxxx přidá 100 xx xxxxxxxxxxxxxx (3.1) a xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxxxx xx 500 xx xxxxx s kulatým xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x tyto xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx odpaří xx xxxxx xx rotační xxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx tlaku a xxxxxxx 40 xX. Xxxxxxx xx rozpustí x 20–25 ml xxxxxxxxx (3.2), baňka xx xxxxxxxxx x xxxx extrakt se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx (5.4).

5.4 Xxxxxxxxxxxxxx výměnou xxxxx

5.4.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx kolony (4.3) xx xxxxx xxxxxx xx skelné xxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx x 5 x xxxxxxxxxx xxxxxx x x 50 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.5). Xxxx směs xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx kyselina xx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xx promývá xxxxx xxxxx xxxxxxxx eluát xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xx kolony xx xxxxxx 50 xx methanolu (3.2) x nechá xx xxxxx až x xxxxxxx xxxxxx.

5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xx kolonu xx xxxxxxx napipetuje xxxxxxx xxxxxxx (5.3). Xxxxx x kulatým xxxx xx vypláchne xxxxx xxxxxxx 5 xx 10 xx xxxxxxxxx (3.2) a výplach xx také převede xx kolonu. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx x povrchu xxxxxx. Kolona xx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 5 xx za xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx. Methylbenzochát xx xxxxxx x kolony 150xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxx se xxxx xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

5.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx

Xxxxxxx eluát (5.4.2) xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx 5 xx 10 xx methanolu (3.2) a xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx dělící xxxxxxx xxxxx 300 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 130 xx xxxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxx se xx xxxx jedné xxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxx xx odpustí xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 70 ml dávkami xxxxxxxxxxxxxx x tyto xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx dnem.

Extrakt xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x rotační xxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx 40 °X. Xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx 5 ml xxxxxxxxx (3.2) a xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 10 xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx x xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx dvěma dalšími xxxxxxx 1 xx 2 ml methanolu x xxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx množství xx xxxxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx (4.6). Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx XXXX (5.6).

5.6 Xxxxxxx xxxxxx XXXX

5.6.1 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx být použity xxxx parametry xxxxx xxxxxxx xx stejným xxxxxxxxx:

- xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx chromatografii (4.4.1),

- xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxx x vody,

- xxxxxxxxx rychlost: 1–1,5 xx/xxxxxx,

- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx: 265 xx,

- xxxxx xxxxxxxx: 20 xx 50μl.

Stabilita chromatografického xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kalibračního xxxxxxx (3.7.3) obsahujícího 4μx/xx, xx do xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx.

5.6.2 Xxxxxxxxxx xxxx

Xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.7.3) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx křivka xx xxxxx xxxxxxxxx průměrných xxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxx proti xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x μx/xx.

5.6.3 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.5.) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x určí xxxxxxxx xxxxxxx výšky (xxxxxx) z xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.

6. Výpočet xxxxxxxx

X xxxxxxxx hodnoty výšky (xxxxxx) xxxx methylbenzochátu x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx vzorku x μg/ml podle xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2.).

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx w (xx/xx) xx vzorku xx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxx

x =(x x 40)/x,

xx xxxxxx xx

x = xxxxxxxxxxx methylbenzochátu x xxxxxxx xxxxxx x μg/ml,

m = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x gramech.

7. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx detektoru x xxxxxxxx xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzorku s xxxxxxxxxxx roztokem (3.7.3.), xxxxxxxxxxx 10 μx/xx xxxxxxxxxxxxxxxx.

7.1.1 Opakované stanovením x xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx přidáním xxxxxxxx xxxxxxxx pracovního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.2.). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx být xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx jak xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ve zředěném xxxxxxxx. Xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx 10 % původní šíře.

7.1.2 Xxxxxxxx diodového xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

x) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx chromatogramu stejný x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx detektor x diodovým xxxxx xx udává xxxx/xxxxx 2 xx;

x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx se xxxxx xxxxxx spektra xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v rozsahu 10 xx 100 % relativní xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria je xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x jestliže nikde xxxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxx nepřesahuje 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;

x) xxx xxxxxx xxxxx mezi 220 x 350 xx xx nesmí xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx píku zkoušeného xxxxxx lišit od xxxxxxxxx v této xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx 10 xx 100 % relativní xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx xxxx dosaženo xxxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx, přítomnost analytu xxxx xxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx 4 x 20 xx/xx.

7.3 Výtěžnost

Výtěžnost xxx xxxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx nejméně 90 %.

8. Xxxxxxxx kruhového xxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx. U každého xxxxxx xxxx provedeny xxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxx

Xxxxxx

Xxxxx krmivo

Pelety

Průměr (xx/xx)

Xxxxxxxxxx

4,50

4,50

8,90

8,70

Xx (xx/xx)

0,30

0,20

0,60

0,50

XXx (%)

6,70

4,40

6,70

5,70

XX (xx/xx)

0,40

0,50

0,90

1,00

XXX

8,90

11,10

10,10

11,50

Xxxxxxxxx (%)

92,00

93,00

92,00

89,00

Xx = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

XX = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

XXX = variační xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx