Plné znění - 31999L0076

Xxxxxxxx Komise 1999/76/XX

xx xxx 23. xxxxxxxx 1999,

xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx

(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/EHS xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx metod xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx, [1] xxxxxxxxx pozměněnou aktem x přistoupení Rakouska, Xxxxxx x Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx:

(1) Xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx úřední xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx právními x xxxxxxxxx xxxxxxxx týkajícími xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx x xxxxxx.

(2) Xxxxxxxx Xxxx 70/524/XXX ze dne 23. listopadu 1970 x xxxxxxxxxxx látkách x xxxxxxxx [2], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxxx Xxxxxx (XX) x. 866/1999 [3], stanoví, xxx xxxxx lasalocidu xxxxxxx musí xxx xxxxxx na xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx.

(3) Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx kontrolu xxxxxx xxxxx.

(4) Opatření xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Článek 1

Členské xxxxx xxxxxxx, že analýzy xxx úřední kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x krmivech x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx metod xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx směrnice.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v účinnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx nejpozději xx 31. ledna 2000. Xxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxx Komisi.

Budou xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx 1. xxxxx 2000.

Xxxx opatření xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx učiněn xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx státy.

Xxxxxx 3

Xxxx směrnice xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských společenství.

Xxxxxx 4

Tato xxxxxxxx xx určena členským xxxxxx.

X Bruselu dne 23. xxxxxxxx 1999.

Xx Xxxxxx

Xxxxx Xxxxxxxx

xxxx Xxxxxx

[1] Úř. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.

[3] Úř. věst. X 108, 27.4.1999, x. 20.

XXXXXXX

XXXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxx xxx xxxxxxxxxx monokarboxylové xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Streptomyces xxxxxxxxxxx

1. Účel x xxxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx 5 xx/xx, xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xx/xx.

2. Xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx vzorku xx xxxxxxxxxxx methanolu x stanoven xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (Xxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx, XXXX) na xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx detektoru.

3. Xxxxxxx

3.1 Xxxxxxxxxxx dihydrogendraselný (XX₂XX₄)

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x = 85 %

3.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, ρ= 20 %

Xxxxxxxxx 23,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2.) xx 100 xx xxxx

3.4 6-methyl-2-heptylamin (1,5-dimethylhexylamin), x = 99 %

3.5 Methanol, HPLC xxxxxxx

3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ρ₂₀ = 1,19 x/xx

3.7 Xxxxxx fosfátového xxxxx, c = 0,01 xxx/x

Xxxxxxxxx 1.36 x XX₂XX₄ (3.1) x 500 ml xxxx (3.11), přidat 3,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) a 10,0 xx 6-xxxxxx-2-xxxxxxxxxxx (3.4). Xxxxxx roztoku xxxxxxxx ortofosforečné (3.3) xxxxxxxx xX xx 4,0 x xxxxxxxx xx 1000 xx xxxxx (3.11).

3.8 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 ml přenést 5,0 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.6), doplnit xx xxxxxx xxxxxxxxxx (3.5) x promíchat. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

3.9 XXXX xxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 5 + 95 (xxx. + xxx.)

Xxxxxxxxx 5 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pufru (3.7) x 95 ml xxxxxxxxx (3.5).

3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx čistotou, C₃₄H₅₃O₈ (xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx lasaliensis), X763

3.10.1 Xxxxxxx roztok lasalocidu xxxxxxx, 500 x/xx

X xxxxxxxxx 0,1 xx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.) xx 100 xxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx baňky, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8.), xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx připravován xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx.

3.10.2 Xxxxxxx roztok xxxxxxxxxx xxxxxxx, 50 x/xx

Xxxxxx xxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxx roztoku (3.10.1.) xx xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx methanolem (3.8.) x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx měl xxx připravován xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

3.10.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx Elenmayerových xxxxx x xxxxxx 50 xx xxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 x 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.2). Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8) a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 x 10,0 mikrogramům xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx. Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

3.11 Xxxx, HPLC čistota

4. Xxxxxxxxx a pomůcky

4.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx lázeň) x xxxxxxxx regulace xxxxxxx

4.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx, 0,45 μx

4.3 XXXX xxxxxxxxx x injekčním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 20 μl

4.3.1 Xxxxxx pro kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx 125 xx x 4 mm, xxxxxxxx xxxx X18, 5 μx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx

4.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx i xxxxxx xxxxxx délky

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxx

5.1.1 Slepý xxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2) je xxxxxxx xxxxxxx analyzovat čisté xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxx xxx xxxxxxxxx lasalocid xxxxx ani xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.1.2 Xxxxxxxxx xxxx

Xxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, obohaceného xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx přibližně xxxxxxx x xxxx xxxxxxx xx vzorku. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 100 xx/xx, xxxxx 10,0 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) xx 250 xx xxxxxxx kádinky x xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx 0,5 ml. Xxxxxx 50 x xxxxxxx krmiva, důkladně xxxxxxxxx x xxxxxxxx x klidu 10 xxxxx. Xxxx pokračováním x extrakcí (5.2) xxxx několikrát promíchat.

Jinou xxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx čisté xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxx 5.1.1.), xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx adice. X xxxxx případě xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, jehož xxxxxxxx xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx lasalocidu, xxxxx xx xx xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxx vzorek xx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx x kontrola xx provedena xxxxxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx

5.2.1 Xxxxxx

Xxxxxxx 5 xx 10 x xxxxxx s xxxxxxxxx 0,01 g do 250 xx Xxxxxxxxxxxx xxxxx se zátkou. Xxxxxxx přidat 100,0 xx xxxxxxxxxxx methanolu (3.8). Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x obsahem xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxx 40 °C xx 20 minut. Xxxx xxxxxxx x ochladit xx pokojovou xxxxxxx. Xxxxxx xxxx po xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, dokud xxxxxxx x usazení xxxxxxxxxx xxxxx. Poté odfiltrovat xxxxxxxx xxxx přes 0,45 x membránový xxxxx (4.2) xx xxxxxx xxxxxx. Přejít x xxxxxxxx xxxxxx XXXX (5.3.).

5.2.2 Xxxxxxx

Xxxxxxx x xxxxxxxxx 0,001 x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx 2 x xxxxxxx xx 250 xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxx 100,0 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8) a xxxxxxxxx pohybem rozmíchat. Xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx do ultrasonické xxxxx (4.1) x xxxxxxx přibližně 40 °X na 20 xxxxx. Poté xxxxxxx x ochladit xx xxxxxxxxx teplotu. Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8) a xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xx xxxx xxxxx hodiny, xxxxx xx rozpuštěná xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx 0,45 x xxxxxxxxxx xxxxx (4.2) do xxxxxx nádoby. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8), xxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 4 x/xx lasalocidu xxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx XXXX (5.3).

5.3 Stanovení xxxxxx XXXX

5.3.1 Parametry

Následující xxxxxxxx xxxx uvedeny xxx xxxxxxxxx; je možno xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx rovnocenné xxxxxxxx:

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1): 125 mm x 4 xx, obrácená xxxx C18, xxxxxx 5 m nebo xxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx fáze (3.9): Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (3.7) a xxxxxxxxx (3.5), 5 + 95 (obj. + xxx.)

Xxxxxxxx xxxxxxx: 1,2 xx/xxx

Xxxxxxxx vlnové xxxxx:

– Xxxxxxxxx: 310 xx

– Xxxxxx: 419 nm

Injektovaný xxxxx: 20 μl

Prověřit xxxxxxxxx chromatografického systému xxxxxxxxxx xxxxxxx kalibračního xxxxxxx (3.10.3), xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx výšek (xxxx xxxxx) x retenčních xxxx.

5.3.2 Xxxxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.10.3) x xxxxx xxxxxxx hodnotu xxxxx (plochy) pro xxxxxx koncentraci. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) xx xxxxxxxxx xxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x μx/xx xx xxx svislé.

5.3.3 Xxxxxx xx xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx získaný v 5.2.1 xxxx 5.2.2 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx kalibračních roztoků x určit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (plochy) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sodnému.

6. Xxxxxxx výsledků

Ze středních xxxxxx xxxxx (ploch) xxxxxxxxxxx xxxxxxx roztoku xx xxxxxxx (5.3.3) xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (x/xx) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

6.1 Xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx vzorku, x (xx/xx) je xxx xxxxxxxxxxxx vztahem

w = (β · X₁)/x [xx/xx]

xxx:

β = koncentrace xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (5.2.1) x μx/xx,

X₁ = X2 = xxxxx xxxxxxxx xxxxxx podle 5.2.1. x xx (xx. 100),

x = xxxxxxxx testovaného podílu x x.

6.2 Xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx, x (mg/kg) xx dán xxxxxxxxxxxx xxxxxxx

x = (β · V2 · x)/x [xx/xx]

xxx:

β = xxxxxxxxxxx lasalocidu sodného x xxxxxxx vzorku (5.2.2.) x g/ml,

V₂ = xxxxx extraktu xxxxxx xxxxx 5.2.2. x xx (t. x. 250),

f = xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 5.2.2., x = xxxxxxxx testovaného podílu x x.

7. Xxxxxxx xxxxxxxx

7.1 Shodnost

Metody založené xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx x postupy xxxxxxxxxx xx xxxxxxx XX xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze potvrdit xxxxxxxxxxxxxxxx.

7.1.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxx (5.2.1 nebo 5.2.2) xx xxxxxxxx přidáním xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx extraktu. X xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx zvýšena xxxxx výška odpovídající xxxxxxxxxx xxxxxxx. Jeho xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxx xxxxxxxxx:

- 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx sodného x xxxxxxx xx 30 xx/xx do 100 xx/xx,

- 15 xx/xx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx/xx xx 200 xx/xx,

- 7,5 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx hodnotě xxx xxxxx xxxxxxxxxx sodného xxxxx xxx 200 xx/xx.

7.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 80 % xxx xxxxxxxxx (čistý) xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx výtěžek xxx dosahovat xxxxxxx 90 %.

8. Výsledky xxxxxxxx xxxxxx

Xx společné xxxxxx [1] xxxx xx 12 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 xxxxxxx (xxxxxx 1 a 2) x 5 xxxxx (xxxxxx 3-7). Xx každém xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx. Výsledky xxxx xxxxxxx v následující xxxxxxx:

L = xxxxx xxxxxxxxxx

X = xxxxx xxxxxxxxxxxx výsledků

Sr = standardní xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx

XX = xxxxxxxxxx xxxxxxxx reprodukovatelnosti

CVr = variační koeficient xxx xxxxxxxxx, %

CVR = variační xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %

[1] Xxxxxxx, 1995, 120, 2175-2180.