Rozhodnutí Komise
ze xxx 14. února 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx některé xxxxxx analýzy a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. srpna 1985 x xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx xx xx. 10 odst. 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, které xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx dodržování xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko;
vzhledem k xxxx, xx xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, obsahu xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patogenů, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx antibiotik a xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx mléko x XXX xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx z technických xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx stanovit xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx dodržování xxxxxxxx xxxxx; že je xxxxxxx xxxxxxxx pokračovat x prošetřování xxxxxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx x testování; xx x očekávání xxxxxxxx těchto xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx, xxx xxx dodržení xxxxx xxxxxxxx 85/397/ES byly xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxx analýzy x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx jednotného xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx opatření xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx pasterované xxxxx xxxx tyto:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X,
- stanovení xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x testování xxx XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx mléko xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxxxxx referenčních xxxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx v článcích 1, 2 x 3 jsou xxxxxxx x xxxxxxx II.
Článek 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx přezkoumáno xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx vědeckých x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Toto xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Mac Sharry
člen Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
X. OBECNÁ XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná xxxxxxxxxx xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx výsledků, kritérií xxxxxxxxxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx. Příslušné xxxxxx členských xxxxx x laboratoře xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx mléka musí xxxxxxxxx tato ustanovení.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx použitá x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx voda xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxx mikrobiologické xxxxx xxxx být xxx xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx vodě" xxxx "xxxxxx vodou".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek xxx xxxxx referenční xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x pomůcek xx zvláštnímu xxxxxxx x se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx váhy
"Analytickými xxxxxx" xx rozumí xxxx s xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Vyjádření výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, výsledek uvedený xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx splněno, xxxx xx musí xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx neplatný.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx spolehlivosti: opakovatelnost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxxxxxxx výsledky xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, krátké xxxxxx období).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx leží xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx testovacím xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (různí xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx x/xxxx různé xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx kritéria opakovatelnosti x reprodukovatelnosti, uváděné x příslušných xxxxxxxxxx xxxxxxx postupu, xxxxxxxxxxx 95 % intervaly xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx tyto xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx provedeny. X xxx případě xxxx xxxxxxx opakovatelnosti a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx naplánovány a xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x mezinárodními xxxxxx.
6. Xxxxxx x testování
Zpráva x testování xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx x metodě xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx. Xxxxxx x testování xxxxxxxx všechny informace xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX MLÉKA
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx syrového x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, přeprava x skladování xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx mléko xxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx skladovacích x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx uvedené x bodech 2, 4.4, 5 a 6 se xxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxx ošetřeného mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Obecně
Odběr xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. provedou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx byli xxxx odběrem vzorků xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx, xx odebrané xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx příslušné xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků v xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx předpokládané xxxxxxx (xxxxxxxxxx, odběr xxxxxx, xxx.). Plunžry a xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výrobku xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx opatřeny xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx rukojetí x xxxxxxxx xxxxxx x jakékoli xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx naběračky xxxx xxx xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x vhodného xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx změnu xxxxxx, xxxxx by xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx na vzorky xxxx xxx xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx trhlin x xxxx xxx zakulacené xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků (xxxxxx xxxxx) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx být xxxxxxxx.
Xxxxx xx pro xx sobě xxxxxx xxxxxx xxxxxx použije xxxxx vybavení, xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx výsledků po xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx vzorků
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxx, xxxxx xxxx xxx provedeny, xxxxx musí xxx xxxx odběrem důkladně xxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxx mechanicky.
Vzorek xxxx xxx odebrán xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx více vzorků xxxxx pro xxxxx xxxxx, jako xxxxx xxxx xxx odebrán xxxxxx pro mikrobiologické xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx potřebám xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxx tyto xxxxxx xxxxx naplněny xxxxxxx x při xxx xxxx xxxxx xxxxx promíchat xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx stloukání xxxxx xxxxx přepravy.
4.2 Xxxxx xxxxx vzorků
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxx na xxxxx
X xxxxxxxx promíchání xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x dolů, xxxxxxx xxxx xx xx, aby xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxx xx xx hrdle xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Vzorek, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx odebere xxxxxxxx xxxxx bodu 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxxxx podniku
Míchat xxxxx mechanicky xxxx xxxxx dokud xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Odběr xxxxxx x misky xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx řádně xxxxxxxxxx, když xx xxxxxx xx xxxxx xxx. Za xxxxxx xxxxxxxxx rovnoměrného xxxxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx míchání. Xxxxx xxxxx zásilky, x xxx xx xx odebrat vzorek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxxxx reprezentativní xxxxxx z celé xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x něhož xx má xxxxxxx xxxxx xxxxxx, rozděleno xx více xxxxx, x každé nádoby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx množství mléka xxx xxxxx xxxx. Xxxxx vzorky x xxxxx xxxxxx nemusí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, xx které xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (více) vzorek (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Odběr xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, cisternové xxxxxxx, xxxxxxxxxx vagóny
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx vzorků xx xxxxx vhodným způsobem xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nádob, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx kterou xxxx xxxxx x xxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx, xx postup xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x jednotlivých xxxxxxx xx vhodný xxx xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx promíchání xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx odebraných buď x xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxx z xxxxx. Xxxxxx promíchání xxxxx (xxxxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, pokud xx xxxxxx xxxxxx xxxx x obou xxxxxx odebraných xx xxxxxx xxxxxxxx menší xxx 0,1 %.
Xx xxxxx nádobě x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx malé množství xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxx pro celý xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx odběr vzorků x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx vytéci xxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxx xxxx xxxxxxxxx reprezentativnost xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx možné xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nádoby x poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx poháněnou elektrickým xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx otvoru; xxxxxxxx je ponořena x xxxxx,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xxxxxxxxx mléka x xxxxxx xxxxxxxxx hadici, xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xx průlezového xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, stlačeným x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx se minimální xxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx odběr xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se může xxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx příslušným xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx podrobeno xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx odpovědný xxxxx. Xxxxxxxx postupů odběru xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (který xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x šarže po xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo poloautomatického xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx příslušný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxx, ze xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- maximální přenos,
- xxxxxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx spotřebě a xxxxxxxxxx v maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx, zapečetěných xxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx xxxxxxxx, x xx, xxxxx je xx xxxxx, xxxxx xx zpracování (v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x den xxxxxxxxx).
X xxxxxxx druhu tepelně xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, která xxxx xxx xxxxxxxxx, x to podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx nebo podle xxxxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Identifikace xxxxxx
Xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx umožňuje xxxx xxxxxxx identifikaci xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří xxxx příslušného orgánu (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokyny xxxxxxxx se xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x skladování, xxxxx xxxx xxx dodrženy x době xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxxx, a xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx x testování, xxxxx má xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx vzorky xxxxxx xxxxxxxxx nežádoucímu xxxxxxx x přímému xxxxxxxxxx xxxxxx. Je-li xx xxxxxx použitá xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx skladován ve xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx přepravovány x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx souhlasit, xxx xxxx teplota skladování 0 xX xx 6 xX, není-li xxxx xxxx odběrem x testováním xxxxx xxx 24 hodin,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx vzorky mléka xxx vzorky syrového xxxxx a pasterovaného xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx laboratoře x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx, jsou xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx použitelných postupů.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx peroxidázy
IV. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů
IX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX mléka xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (termistorového xxxxxxxxx), x xxxx xx termostatem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx snímač nahrazuje xxxxxxx xxxxxxxx.
X dispozici xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx bod xxxxxxx xx plató xxxxxx mrznutí, xxxxxx xxxxx xxx xx x obchodních xxxxxx xxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ve stanovenou xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx mohou xxxxx xxxxx xxxxxx bodu xxxxxxx xxxxxxx druhů xxxxx, xxx x xxxxxx xxxx mrznutí xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx použitých xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxxx hledajících xxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx lze xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x mléce za xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 ml (xxx xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx mléka: hodnota xxxxxxxx x xxxxxxx x popsaným postupem x vyjádřená xx xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek mléka xx x xxxxxxxxxx xx přístroji podchladí xx vhodnou teplotu x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx až x xxxxx, které odpovídá xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx postupem xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx odečty xxx xxx standardní xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx mrznutí xxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x příslušným xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxxxx xx vzorky x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, jakož i xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx typ
Dobře xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxx kapalinu, xxxxx xx míchá xxx, xxx teplotní rozdíl xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x kapalině xxxxx xxxxx xxx 0,2 °C. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx v rozmezí ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Celá xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx typ
Kolem xxxxxxxx xx vzorky xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxx. Teplota xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v rozmezí ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx a příslušný xxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx sondy x maximálním průměru 1,80 ± 0,2 xx x o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx b (viz xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx může xxx ± 5 %.
Xxxx xx sonda x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx se musí xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx je 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx okrajem xxxxxxxx (viz xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx třeba dodat xxxxxxxxxxx, aby se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické vlastnosti xxxxxxxxxx xxxxx vzorce
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X je xxxxxxx xx stupních Xxxxxxx
X xx odpor x xxxxxx xxx xxxxxxx X,
− dR / dT × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx použitém xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X běžné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx pracuje xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx mrznutí. Xxxxx xx xxxx křivky, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx dobu xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx vyrovnává Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx podobným xxxxxxxxx pomocí nejlepších xxxxxxxxxxxx odporů, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°C.
Proměnný (vyrovnávací) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx od xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x více xxx x 0,3 % xxx maximální xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx provoz
Odečítací xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx příslušného xxxxxx xxxx xxx taková, xxx odchylka dvou xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx než 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx taková, xxx xxx správné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx bodě xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °C.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx míchání xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx o xxxxxxx 1 až 1,5 mm, xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x umístěna vertikálně xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx úrovni hrotu xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx 1,5 mm nad xx xxx touto xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx bočně x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 mm), xxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxx teplota xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxx dotknout xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx zkumavky.
4.1.5 Zařízení xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx být jakékoli xxxxxxxx, xxxxx po xxxxxxx xx činnosti xxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx testovacího vzorku xxxxxxx k bodu xxxxxxx. K xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xx dvě sekundy xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx stěny xxxxxxxx na vzorky.
4.1.6 Xxxxxxxx xx vzorky
Zkumavky xx vzorky (xxx xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx průměr xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx o xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx mít značku xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx okraje 29,8 xx (21 mm xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx kolísání xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx hodnoty, když xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx váhy
4.3 Xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 xx, xxxxx X.
4.4 Sušárna, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Činidla
5.1 Xxxx destilovaná x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, převařená x xxxxxxxxx xx 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx oxid uhličitý.
5.2 Xxxxxxx sodný, xxxxxxx x.x., xxxxx mletý, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °C x xxxxxxxxxx xxxx xxxx nejméně 24 xxxxx xxx xxxxxxx 130 ± 1 °X x sušárně x zchlazený xx xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx exsikátoru.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx chloridu xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx vodě (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x objemu 1000 xx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °C.
Skladovat xxxxxxx xxxxxxx dva xxxxxx xxx xxx 5 °C x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxx při 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx použitím xx standardní roztok xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otočením xxxxx. Nikdy xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx xx xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat pipety.
Nepoužívat xxxxxxx z xxxxx, xxxxx byly ze xxx čtvrtin xxxxxxx, x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxx dvou xxxxxx, xxxxx neobsahují fungicid (xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx nastaven xxx, xxx xx okolní xxxxxxx nelišila o xxxx xxx 1 °X xx teploty, xxx xxx xx xxxxxxx kalibrace. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx teplotám xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, že xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx byl xxxxxx xxxxxxx 12 hodin xxxx xxxxxxxxx. Zkontrolovat xxxxxx xxxxx, rozkmit xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx kapalin.
Vybrat xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx tabulka xxxx), xxxxxxx xxx mrznutí xx těsně xxx xxxx xxxxx pod xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxx mrznutí xxxx roztoků xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx než – 0,100 °X.
(X některých xxxx x xxxxxxxx xxxx dostupných xxxxxxxxx xx příslušný xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xx dané xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx rozsahu xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx výběr xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, jako jednoho x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kalibrační postup; xxxxxxx musí tuto xxxxxxx uvést).
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xx xxxxx a xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxxx xxx kalibraci xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (stejný druh xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou xxxxx). Xxxxxxx standardních xxxxxxx xxxx stejné jako xxxxxxx xxxxxx mléka.
Podle xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, dokud xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx roven bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx tento xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx každý xxxxxx xxxxxxxxxx správné xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, aniž xx xxxx nutná xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx bod xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx úprava.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx mezi 0 °X x 5 °X.
7.2 Pokud xx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx všechna xxxxxxxxx xxxx tělíska xxxx tuhý xxxxxx xxx ve vzorku xx xxxxx a xxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx použije xxxxx, xxxxx reagovat x xxxxxx a xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx teploty.
7.3 Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx je xxxxx xx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxx nezbytné xxxx xx to, xxx standardní xxxxxxx x xxxxxx mléka xxxx při xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx kyselost xxxxx, xxxxx možno současně xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx přesahuje 0,18 x kyseliny mléčné xx 100 ml xxxxx, nemohou být xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 minut před xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Postup
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx hladina x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx x pokyny xxxxxxx, případně zda xx sonda termistoru xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx kryoskop x xxxxxxx se, xxx xx chladicí kapalina xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx byl xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kapaliny, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx měřit bod xxxxxxx standardního xxxxxxx xxxxxxxx sodného (například xxxxxx x bodem xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx při xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx se xxxxxx xxxxxx hodnot xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxx xxx 0,002 °X, kryoskop xx xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx x xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Stanovení xxxx mrznutí mléka
Promíchat xxxxx se vzorkem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x několikerým otáčením. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx xx do xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx vzorky. Xxxxxxx xx, že xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx opatrně je xxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, čistou x xxxxxx nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx zkumavku se xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °C.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přístrojů xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x ručních xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosáhne tím, xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx teplotního xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxx vzorek xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, xxxxxxxxx xxxxx vzorku xx xxxxxxx na 45 °X x 5 xxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx x ihned xxxxxxx testování. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx na xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx odpovídá xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx doby x xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx konstantní, a xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx liší vzorek xx xxxxxx a xxx xxxx x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx uspokojivě xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nahoru xxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x xxxxxx vzorku xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx naměřenými xxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), provést xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx xx x xxxxxxx se xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xx xxxxx xxx vzorky x xxxxxx xxxxxxxx teplotu, xxx xxxxx xxxxxxx x chladu.
(U některých xxxx kryoskopu to xxxx xxxxx; v xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx se xxxxxxx, xxx je sonda xxxx začátkem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několika slepých xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxxxxx kontroly kalibrace xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx získaných xxx bod xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx místa.
Pokud xxxxxx xxxx xxxx přijatelných xxxxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxxxx xx liché xxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx sudou hodnotu, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivity xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx je míra xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx vyjádřena xxxxxxxxx xxxxxx v μg xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Aktivita xxxxxxxxx mléka je xxxxxxxxx, pokud xx xxxxx xxx 4 xx fenolu xx 1 xx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx fenol x xxxxxxxxx fenylfosfátu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dibromchinonchlorimidem x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxx při 610 xx. Poté xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx byl xxxxxx.
4. Činidla
4.1 Tlumivý xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] a xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 g xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x doplnit xx 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx každého xxxxxxx xx 50 °X, oba xxxxxxx xxxxxxx, promíchat, rychle xxxxxxxx asi xx 20 °C, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Tlumivý xxxxxx xxx vyvolání zabarvení
Rozpustit xx vodě 6,0 x methaboritanu sodného (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 g xxxxxxxx xxxxxxx (NaCl) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx roztok xxx zředění vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Roztok substrátu
Rozpustit 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, ve 100 xx xxxxxxxxx roztoku (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx XXX (4.6) x nechat stát 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx. Vzniklé xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, dokud xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx-1. V případě xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx xxx; před xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x provést xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx substrát xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x to xxxxxxxx 1 ml xxxxxx xxxxxxx ve 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx a hydroxidu xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 x síranu xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx na 100 xx.
4.6 Roztok 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx je starší xxx jeden měsíc.
4.7 Xxxxxx síranu xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 x síranu xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) a xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 ml, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 ml. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 ml xxxxxxxxx roztoku, doplnit xx 100 xx x promíchat. 1 xx obsahuje 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré xxxxxxx xx skla, xxxxx x zátky a xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx vyčištěny. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx xxxx plastových xxxxx mohou způsobit xxxxxxxxxxx fenolů x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx váhy
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °C.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx 610 xx.
5.4 Zkumavky, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx odstupňované xx 5 ml x 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx filtry x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx pro střední xxxxxxxx filtrace.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx přímého xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx pozitivní xxxxxxxx a xx xxxxx xx xxx xxxxxxx. Xx proto xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Testování xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxx dny.
6.2 Xxxxxxxxx vzorek
Pomocí pipety xxxxxx 1 xx xxxxxx xx xxxxx xx xxxx zkumavek (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx kontrolní xxxx xxxxx pokus.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx dvě minuty xx vroucí xxxx; xxxxxxxx x xxxxxxx x vroucí vodou xxxxxx hliníkovou xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Rychle xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Po xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 ml xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx vodní lázni (5.2) a xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Stejně xxxx x bodě 6.3.1 zahřívat xxx xxxxxx xx vroucí xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu.
6.3.5 Xx xxxxx zkumavky xxxxxx 1 ml xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, vylít xxxxx dva mililitry x x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx filtrát xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Přidat 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx roztoku XXX (4,6), promíchat a 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx zabarvení xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxx 6.3.9 převyšuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 20 μg xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx vzorku. Připravit xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx opatrně xxxxx do xxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx zředěných xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx slepý xxxxx), 2, 5, 10 a 20 μx fenolu xx xxxxxxxx. Do xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx vody x 1 xx xxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 xx roztoku XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx zabarvení 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Na základě xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nejmenších xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxxxx přímky (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μx xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx množství xxxxxx x μg získané xxxxx bodu 7.1.1;
D xx xxxxxx xxxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxx) – viz 6.2 xx spojitosti x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Spolehlivost
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μg xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (předběžně) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud xx xxxxxxx provede podle 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 a 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxxxxxxx xxxx nepřítomnosti xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, který slouží xx kontrole xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, do 30 sekund xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zabarvení.
Negativní xxxxxx xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx po promíchání xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vodíku. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx parafenylendiamin na xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita zabarvení xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °C) 2 x 1,4 fenylendiaminu (X6X8X2) x doplnit xx 100 xx. Xxxxxx skladovat v xxxxxx a xxxxx, x xxxxx hnědé xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx jednoho xx xxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx odstranit.
4.2 Roztok xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx zředit 9 ml 30 % xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx přidat 1 xx koncentrované xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx stálý xxx xxxxx měsíc, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x temnu, x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Dát 5 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx zkumavky x vhodným xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxxxx zabarvení. Pokud xx xxxxx zabavení xxxxxx xxxx než 30 xxxxxx po xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx preinkubováno xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx vytvářejí počitatelné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx miskách x xxxxxx xxxxxxxxx 72 xxxxx při 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 ml syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx sterilizovaného xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Mechanické xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x pracující xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 ml xxxx zkumavky x xxxxxx 20 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, s nepoškozeným xxxxxx, o nominálním xxxxxx 1 ml, x xxxxxxxxx xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx z xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, dno xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek xx xxxx:
Xxxxxxx ze xxxx xx sterilizují xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), nejméně xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxx xx xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx sušeným xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx odstředěné xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Toto xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx odstředěným xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx vodě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, glukózu x nakonec sušené xxxxxxxxxx xxxxx. Ohřev xxxxxxxx usnadňuje postup. Xxxx xxxxxx agar x za xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx je xxxxxxxx, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 až 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx teplotě mezi 1 a 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx médium
Kultivační xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx pH xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok pepton/sůl
Složení:
|
Pepton |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx vodě, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) tak, xxx po sterilizaci xxxxx zkumavka obsahovala 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx v temnu xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, avšak ne xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx připravovat x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx prášku. Dodržet xxxxxx výrobce. Upravit xX xxxxxxx podle xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ředidla podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx xxxxx a zchladit xx vodní xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
Vzorek xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx rozptýlit. Doba xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xx neměla xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 sekund xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx (syrové a xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx primárního xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Získá xx xxx ředění 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx ředění xx xxxxx postup xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx očekávat xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
7.5.1 Xxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx misky (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx misky (4.2.4) 1 ml vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (vyšetřované xx 15 denní xxxxxxxx xxx 30 °X – směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx A xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx misky.
7.6 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx naočkované misky xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx média (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, aby po xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, testovacího xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx více xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx dotýkat, ani xxx v kontaktu xx stěnami x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx k záměně xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, misku vyřadit.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx a xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 až 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx mikroorganismů xx 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx druhém ředění
d xx faktor xxxxxxx, xx základě xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxxxxxxxxx číslice pět, xxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx nižší xxx 10, uvést, xx xxxxx mikroorganismů xx xxxxxxxx je "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.1.4 Xxxxx jsou všechny xxxxx xxxxx než 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx převrácenou hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx považují xx xxxxxxxxxxxx požadavkům xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
V. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °X
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X v xxxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx při 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xx x mléce xxx 6 °C.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pět xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx pasterovaného mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °X xx xxxxx bodech xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Zkumavky s xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxxxxxx objemem, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx desetinných ředění.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 až 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x čirého, bezbarvého xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 xx 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx měla xxx nejméně 10 xx. Xxx nesmí xxx žádné nerovnosti, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dbát xx to, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, tyto xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx nebo xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx být xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační médium – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx dextróza |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x podle želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx mlékem, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx přidat xxxx a xxxxx xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx agar xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to je xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx jeho hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx baněk nebo xx 12 až 15 ml do xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc po xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxxx xxxxx bodu 5.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx to xx xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx nezbytné xxxxxxx pH roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, aby xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °C.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx a skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx v autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 měsíc xx xxxx přípravě.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředidla
Ředidlo (6.1) xx může xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Rozpuštění xxxxxxxxxxxx média
Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nechat xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit ve xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] uzavřené xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx není xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 100 xx po xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx inkubaci xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx se vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx pěny xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx kontaktu s xxxxxxxx. Teplota ředidla xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 sekund xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v bodě 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
S xxxxx xxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxx xx tento xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx ředění (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx misku.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 xx 18 xx kultivačního xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Petriho misky, xxx po inkubaci xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a smícháním, xxxxx druhu mléka, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxx x kultivačním xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém povrchu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx xx sebe xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x kontaktu se xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx průzkum pomocí xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx považují xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx v nepostižené xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx více xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX je celkový xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 x2)x je xxxxx naočkovaného vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 je počet xxxxx xxx druhém xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, zaokrouhlit xxx, xxx sousední xxxxxxx xxxxx byla sudá.
Příklad:
Ředění 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx než 10 × x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx než 300 x počítání xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx jej xxxxxxxxxxx hodnotou faktoru xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx ml".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testů ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – POČÍTÁNÍ XXXXXXX XXX 30 °X
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x pasterovaném xxxxx technikou počítání xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx bakteriemi" xx xxxxxxxx bakterie, xxxxx při 30 °X xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx nebo necharakteristické xxxxxxx, xxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zkvašovat s xxxxxxx plynu.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx xxxxxxxxx laktózu. Poté xxxxxxxxx počet koliformních xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °C.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx platina-iridium xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x vhodnými xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Baňky x xxxxxx 150 až 250 xx pro xxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 xx 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by bránily xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx teplotě 170 – 175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx víčka xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, žlučí x xxxxxxxx (XXXX xxxx). Xxxxxx selektivní xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x nechat xxxx několik xxxxx. Xxxx xxxxxxxx promíchat.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx do xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx množstvích 100 xx 150 xx do xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx zchladit ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V xxxx xxxxxxx zkontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Použít xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx. Konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx a xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to je xxxxxxxx, upravit pH xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °C.
Rozdělit xxxxxx xx 10 xx do xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky nesmějí xx xxxxxxxxxxx obsahovat xxxxxxxxx bubliny.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržte xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodů 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, a to 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Petriho misek
Sterilní xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx xx každé xx xxx xxxxx (4.2.4) a xxx xxxxxxxxx 3 ml xxxxxx mléka (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx VRBL xxxxx (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, aby xx inkubaci xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx mezi koncem xxxxxxxx xxxxxx mléka x smícháním x xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx misku x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx byl použit xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a čistém xxxxxxx, dokud médium xxxxxxxx.
Xx úplném ztuhnutí xxxxx nejméně 4 xx XXXX agaru (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
Přenést xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky inkubovat xxxxxxxx dnem nahoru. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx být x xxxxxxxx se xxxxxxx a xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Počítat xxxxxxx x Petriho miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx červené xxxxxxx x průměru xxxxxxx 0,5 mm, x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Pokud xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx nebo xxxx xxxx sraženin xxxxxxxx k charakteristickým xxxxxxxx), provést xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx v xxxx 6.6.2 provést xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx počtu (např. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx pomocí xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx kolonie, xxxxx v Durhamově xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx provede konfirmační xxxx, vypočítat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx potvrzených xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx 100 kolonií. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx byla xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 150 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX BUNĚK
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk.
A. Xxxxxxxxxxxxx metoda
B. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxx xxx stanovení xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx kalibrace a xxxxxxxx správnosti xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento xxxxxx xx somatickými xxxxxxx xxxxxxxx buňky, xxxxxxxxx xxxxxxxxx a epitelové xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx možné zřetelně xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 povrchu xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx vysuší x xxxxxxx. Počítání xx xxxxxxx pod mikroskopem. Xxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx vynásobí xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx získat počet xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
|
1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxx. Příprava x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx ve xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx methylenovou xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °C x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx velikosti pórů 10 xx 12 xxxxxxx x uchovat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené láhvi. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx použitím roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující xxxxxxxxx xx 0,01 xx x xxxxxxxxx nejméně ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko s xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx xxx tenkou xxxxxx nebo standardní xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 × 5 xx pro xxxxxx xxxxxx.
5.4 Horizontální xxxxx deska (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) xxx xxxxxx xxxxx vrstvy.
5.6 Vodní xxxxx, nastavitelná na 30 až 40 °X xxx ohřívání xxxxxx xxxxx.
5.7 Podložní xxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx testován do xxxxx xxxxx xx xxxxxx vzorku. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx nesmí xxx xxxxxxx.
6.2 Příprava xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Poté řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), například 20 °X.
6.3 Předběžné ošetření xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx před xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx vrstvy
Mikrostříkačkou (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx připraveného, xxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx očistit xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) a xxxxxxx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxx (20 xx × 5 mm). Xxxx xx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx vyhřívací xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx vysušení.
U xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxx xxxxxx.
6.5 Barvení xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx vody, xxxxx xx přebytečné xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxx, aby xxx xxxxxxx před xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x výpočet
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx jádra, x xx xxxxxx jádra, xxxxx xxxx jasně xxxxxxxxxxxx a z xxxxx je v xxxxxxxxxxxxxx xxxx viditelná xxxxxxx polovina. Počítat xxxx nebo pole xx střední xxxxxxx xxxxx vrstvy x xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxx, xxxxx xxxx vybrány xxxxx x okrajových xxxxx xxxxx xxxxxx. Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x tudíž x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx také xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx polí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx všechny části xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx buněk, xxxxx se xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x tomu, xx počítání xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx být rovněž xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx počítání z xxxxxxxxxxx vzorků xxxxx xxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx vzorek xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 buněk/ml xx xxxxx překročit 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx spočítat, xxxx xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx rozdělení xxxxxxx 400, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx střední xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x je xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (buněk), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx pracovního faktoru
Při xxxxxxx 0,01 ml xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 nebo 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx tenké vrstvě
Délka xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, je 5 xx. Xxxxx xxxx odpovídá průměru xxxxxxxxxxxxxxx pole, xxx xx xxxxxxxx podložním xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Pracovní xxxxxx = 20 × 100 / x × b
kde:
d xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx spočítaných xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx vrstvy xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole v xx, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx spočítaných polí.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx xxxxxx počet xxxxx xx xx xxxxx, se počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup, xxxxx xx xxxx po xxxxxxxxxxxx kalibraci (xxx X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx somatických xxxxx v syrovém xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx konzervace.
2. Definice
Pro xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx buňkami rozumějí xxxxxxx, xxxxx xxxx x důsledku barvení xxxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Princip
Část xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) se xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Část xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx buňka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx impuls, xxxxx xx zesiluje x xxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx v xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx je to xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 g |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx vodou na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxxx dní.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx vodou xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx chráněné před xxxxxxx by nemělo xxxxxxxxx dva xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx roztoku (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 ml. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit vodou xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx složky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Přístroje x pomůcky xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx zařízení xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx se xxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxx xxxxxx, které xx mají xxxxxxx, x prahovou hodnotou, xxx níž se xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx xx xxxxxxx vzorků, xxxxxxx obsah xxxxx xxx xxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, s xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 ml.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Xxxxxx xxxx xxx skladován xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx po xxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Konzervace xxxx xxx xxxxxxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická konzervace xxxxxx se provede xxxxxxxx jednoho z xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx konzervovaný xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- dvojchroman xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx dvojchromanu xxxxxxxxxx xx xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 0,2 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 hodin při xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx může být xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx teplotu 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx odběru x xxxxxxxx xx 48 xxxxx po xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 ml, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx teplotu 6 až 12 °X xxxxx xx xxxx odběru x xxxxxxxx do 72 xxxxx xx jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, který xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, může xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx až 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx o xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx být dodrženy xxxxxx podmínky xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vod.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx asi 2-6 °X. Xxxxxxxx vzorků x xxx xxxxxxxx xx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, vzorek xx xxx xxx xxxxxxxxx ošetřován xxxxxxx xxx hodiny dvojchromanem xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený xxxxxx (xxx 7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx nejméně xxxxx den xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) na xxx 40 °C. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx do xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx xx xxxxxxxx ohřívání (xxx 7.2). Bezprostředně xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx nejlepšího xxxxxxxxxxx rozdělení somatických xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) mezinárodních xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 až 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- směrodatná xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX A XXXXXX POUŽITÍ
Tato kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx detekce antibiotik x sulfonamidů x xxxxxxx mléce a x xxxxxxx ošetřeném xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx postup
Tento xxxxxx je počáteční xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxxxx, xxxxx obsahují antibiotika x sulfonamidy. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx použití Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. calidolactis, XXXX 10149, co xx testovacího xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx byl xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx penicilinu
Tento xxxxxx xx musí xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx penicilinu x xxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyšší xxx xxxxxx uvedené x xxxx tabulce:
Detektovatelné xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 g |
|
|
Voda |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx. Xx občasného xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Upravit xX xxx, xxx po xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx zkumavek xxxx po 100 xx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx sodný |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx občasného xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxx xX, xxx po xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Roztok trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 mg |
|
nebo Xxxxxxxxxxx |
30 mg |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 ml |
|
Vodado |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx roztok
Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 ml |
Příprava:
Rozpustit xx xxxx živný roztok x xxxxxxxxx, xxxxx xx je nutné, xxxxxxxx a sterilizovat xxxxxxxx. Živný xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Ve sterilní xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 IU/ml), x to xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu xxxxxxx xxxx draselného xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx roztoku penicilinu (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x doplnit xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx penicilinu/ml (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Připravit 75 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) přidáním 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx měly xxx xxxxxxxxxx x den xxxxxxxxx testu.
5.3 Mléko xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx preparát mléka xxx inhibičních xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx předtím xxxxxxxxxx na přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx. Rovněž xxx použít přiměřené xxxxxxxx čerstvého xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x prohlášeno xx xxxxxx inhibičních xxxxx; xxxx mléko xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx se xxxxx hodinu na 100 °X, xxxx xx uloženo do xxxxxxxxxx s teplotou 0 °X xx 6 °X xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx organismus xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx testovací kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx šikmém xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx testovací kultura, xxxx xx aerobně xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx zásobní xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Asepticky xxxxxxx 20 xx živného xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) a xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx kulturou (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx smyčkou xxxxx xx xxxxxxx agaru. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °C x xxxxxxx xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) a důkladně xxxxxxxxx očkovací xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx zahnuté xxxxxxxx xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx zásobní xxxxxxx (5.4.2) xxxx xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x časovém xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx vody na Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx spór do xxxxx (4.2.3) obsahující 250 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Láhev xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx přeočkovány, xx se xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Po 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx při 63 ± 1 °X na xxxxxxxx xxxxx xx suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 miliony na xxxxxxxx. Xxxxxxxx spór xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx sraženiny nebo xxxxxxxxx, xxxx by xx nahradit xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx agarové médium (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx část suspenze xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x pěti xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx zkumavce nebo x lahvičce. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx naočkovaného xxxxx (5.6.2), aby xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx uzavřít xxxxxxxx zátkou xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxx, zatavením xxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx ztuhnout, poté xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx svislé xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °C, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxx, x do xx xxxx xx skladují xxx xxxxxxx 0-5 °X. Xxxxx není xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxx zmrazené (−30 °xx - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx penicilinu.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxx x xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx zkumavky/ampule xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx vzorku do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vždy novou xxxxxxxx stříkačku.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg/ml (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Postupem xxxxx bodu 6.4 xxxxxxxx stejným xxxxxxxx xx xxxxxxx kontrolního xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx nejméně 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x xxxxx lázně.
6.9 Xxxxxxxxx barvu xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx média xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxxxxxx roztokem penicilinu xxxx xxxxxxxxxx vzorkem xxxxx ukazuje na xxxxxxxxxx antibiotik xxxx xxxxxxxxxxx xx vzorku x koncentraci nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "zcela xxxxxxxxx" uvedené x xxxxxxx na straně 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (6.5) xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx agarového xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx vzorek mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx vzorek xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx organismu.
7.4 Xxxxx xx purpurové zabarvení xxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx životaschopné xxxxx x xxxxxx xxxx xxx podrobeny xxxxxx xxxxxxxxx s čerstvě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Potvrdit xxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx metody "X".
Xxxxx je nezbytné xxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, musí xxx zmraženy, aby xx zabránilo poškození xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx penicilinů x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje konfirmační xxxx penicilinu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, jakož xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx (X.7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx různá xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx vzorek, xxxxx xxxxxxxx antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), a xx kterému xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx čirou zónu xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx menšího xxxxxxx xxx je xxxxxx xxxx xxx penicilinázy, xxxxxxxxx xxxxxx je xxx penicilin xxxx xxxx penicilinu a xxxxxx antibiotika xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Pokud tato xxxx xxxx penicilinázou (2.2) xxxxxxxxxxxx, inhibiční xxxxxx xx vzorku xxxxx není xxxxxxxxx, xxx xxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, X.1.x) a 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx peniciliny, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, xxxxxx nebo xxxx xxxxx částečně inaktivovány xxxxxxxxxxxxx nebo jsou xxxxxx x nemohou xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx disk xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx umístí xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx přítomny xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Velikost xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xx koncentraci x druhu xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx ze xxxx x xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx skla
Viz X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx disky, neobsahující xxxxxxxxx látky, x xxxxxxx 9 xx 13 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx mléka (nejlépe xxxxxxxxx x exsikátoru).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Musí se xxxxxx destilovaná xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (A.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx rozpustit xxxxx složky xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx přidání xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Sterilizovat xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v mléku
Viz X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx standardní roztoky xxxxxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) x těchto xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamázy) xx sterilní destilované xxxx s xxxxx xxxxxx koncentraci 1000 X/xx. Tento xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx dávky, xx xxxxx skladovat až xxxxx týdny při 0 °C xx 5 °C.
Poznámka
Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx účely xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx kontrolním xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx odpovídající množství xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Testovací xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
5.6.1 Xxxxxx rozpustit xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx xxxxxxxx na 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx čerstvých xxxx (5.5) k nezbytnému xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kolonií x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, x důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (X.4.2.2), předem vyhřáté xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx se vytvořila 0,6 až 0,8 xx xxxxxx. Pro Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx třeba xxx 15 xx xxxxxxxxx média, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx povrch, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx média, xxxxxx xxxxx na xxxxx a obrátit xx xxxx xxxxxx, xxx se na xxxxxxxxx kondenzaci vody xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx misky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx při 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x pozitivním xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (X.7.1 x X.7.2) musí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativního xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx vzorky 10 xxxxx xx 80 ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx termolabilních xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 ml xxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx lahvičky xx xxxxxxx hrdlem. X mléku xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx promíchat.
6.2 Xxxxxxx inhibičních látek
6.2.1 Xxxxxxx papírový xxxx (4.3) xx vzorku xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x suché xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Naplocho položit xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x lehce xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx napuštěné xxxxxxx vzorky xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 mm x xx okraje xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx disky (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v poměru xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx testu xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx disků.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x po xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 až 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Po inkubaci xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx světla, xxx xxxx možné xxxxxxxxx xxxx inhibiční xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxx xx změří.
6.2.6 Standardní xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx disku xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Čiré xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx velkost xx xxxxxx nebo xxxxx xxx velikost xxxxxxx x 6.2.6, ukazují xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx mléka (6.1.2) a xx xxxxxxx ošetřeným xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx přidání xxxxxxxxxxxx do 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx ponořit xxxx xxxxxxxxx penicilinázou (5.3.2) x xxxxxx xx xx testovací xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx provede xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx kolem xxxxx napuštěném kontrolní xxxxxxxxxxxxx nevytvoří žádná xxxx zóna, xxx xxxx zóna xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), inhibiční látka xx xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rovná xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx se vzorkem xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, které xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxx průměrná xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx vzorkem mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx mléka obsahuje xxxxxxxxx x antibiotika, xxxxxx sulfonamidů, x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací penicilinázy xxxxxxx x tomto xx. Syntetické xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx penicilinázou xx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxx tudíž xxxxxxxxxxxxx jako inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxxxx látky xxxx xxx penicilin xxxxx být identifikovány xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx buď xx sestrojení standardní xxxxxx, nebo výpočty xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx lineární korelace xxxx xxx10 koncentrace xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx sestrojit xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx pořadnici a xxxxxx zón na xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx počítají xx xxxxxxx průměru xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx na základě xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx vypočítat xx základě průměru xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx je poloměr xxxxxxxxxxx xxx nejméně xxxxxxx větší, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μg/ml (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
9.2 Opakovatelnost (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou k xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x požadavky směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx A, xxxxxxxx XXX xxxx 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx pokyny, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Definice
Vyšetření xx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx x příloze X, xxxxxxxx VII xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx x počítání xxxxxxx xxx 30 °C x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx detekci patogeny xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx mléko xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx propuknutím xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx a xxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx osvědčení x zdravotní xxxxxxxxxxxx xxx tepelně ošetřené xxxxx pro xxxxxx xxxxxx Společenství. Xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x výsledku
Pro každý xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mikroorganismus xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx pasterovaného xxxxx, který požaduje xxxxxxx postup. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx postup.