Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx dne 14. února 1991,
kterým xx stanoví některé xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx směrnici Rady 85/397/XXX xx dne 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx obchodu x tepelně xxxxxxxxx xxxxxx uvnitř Společenství [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/EHS [2], x xxxxxxx xx xx. 10 xxxx. 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, že xxxxx čl. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx používat xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx syrové xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxx mléko je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, bodu mrznutí x přítomnosti antibiotik;
vzhledem x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx nepřítomnosti patogenů, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx mikroorganismů, nepřítomnosti xxxxxxxxx, přítomnosti peroxidázy, xxxxxxxxxxxxx antibiotik x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX xxxxx xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx z xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx mají xxxxxxxx dodržování xxxxxxxx xxxxx; že xx xxxxxxx nezbytné xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx; xx v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx členské xxxxx xx xx, aby xxx dodržení xxxxx xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx vhodné rutinní xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x kriterií spolehlivosti xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, že opatření xxxxxx xxxxxxxxxx jsou x souladu xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx peroxidázy,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – počítání xxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx,
- detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a testování xxx XXX xxxxx x sterilizované mléko xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů.
Xxxxxx 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x odběr xxxxxx xx musí xxxxxxx podle pravidel xxxxxxxxxxx v xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Referenční postupy xxxxxxx a testování xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 a 3 jsou xxxxxxx x xxxxxxx II.
Článek 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx se xxxxxxxxx xxxxx vědeckých x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Toto xxxxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Bruselu dne 14. xxxxx 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx vzorků xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx. Příslušné xxxxxx členských xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx mléka musí xxxxxxxxx tato ustanovení.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxx, ředění xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo demineralizovaná xxxxxxx odpovídající xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být bez xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx jinak xxxxxxxx xxxx mikroorganismů xx xxxxxxxxx testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Rozpouštěním" xxxx "xxxxxxx" (bez xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx uznané xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje x xxxxxxx
3.1 Seznam xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a pomůcek xxx různé referenční xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Analytické váhy
"Analytickými xxxxxx" se rozumí xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xxxxxxx xx zprávě o xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxx, které splňují xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx příslušnou metodu. Xxxx není toto xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx neplatný.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, výsledek xx vypočítá x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx spolehlivosti: xxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnost
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx uvedená xxx xxxxx postup xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx výsledky testu, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx období).
5.1.2 Reprodukovatelnost (X) je hodnota, xxx kterou xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx totožným postupem x týmž xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (různí pracovníci, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx x/xxxx různé xxxx).
5.1.3 Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx opakovatelnosti x reprodukovatelnosti, uváděné x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % intervaly xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx vypočteny z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx postupy xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx provedeny. X xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Kruhové xxxxx x nezbytné xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x mezinárodními xxxxxx.
6. Xxxxxx x testování
Zpráva x xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, které nejsou xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a všechny xxxxxxxxx, které by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx úplnou identifikaci xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx vzorků, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx vzorků xx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x bodech 2, 4.4, 5 x 6 xx použijí xxx odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx vzorků xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka obsaženého x konvích, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx pověření xxxxxxxxxxx, kteří xxxx xxxx odběrem xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx považují xx nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx budou reprezentativní x x souladu x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx příslušné xxxxxx xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx za nezbytné, xxxxxxx zaměstnance xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx
3.1 Obecné xxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x jiného xxxxxxxx, xxxxxxxxxx odolného xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx promíchání výrobku xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x jakékoli xxxxxxx xxxxxx. Objem xxxxxxxxx xxxx být alespoň 50 xx.
Xxxxxxxxxxx a xxxxx musí xxx xxxxxxxx, kovová nebo x vhodného plastu.
Materiály xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxx) nesmí xxxxxxxx xxxxxxx změnu xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx testů. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx na xxxxxx xxxx xxx čistý, xxxxx, hladký povrch xxx xxxxxx a xxxx mít zakulacené xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx sobě jdoucí xxxxxx vzorků použije xxxxx vybavení, musí xxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx vyčištěno x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxx požadavky, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx příslušný xxxxx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx výsledků po xxxx jdoucích xxxxxx.
4. Xxxxxxxx odběru xxxxxx
4.1 Xxxxxx údaje
Bez xxxxxx xx xxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxxxx buď ručně, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx ihned xx xxxxxxxxxx, když xx xxxxx xxxxx x pohybu.
Pokud xx x nádrže odebírá xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx různé xxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxx odebrán xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx nádob xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxxx téměř naplněny xxxxxxx a xxx xxx bylo možné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx stloukání xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Ruční xxxxx xxxxxx
4.2.1 Odběr xxxxxx x xxxxx x xxxxx xx xxxxx
X rychlému xxxxxxxxxx xxxxxxxxx plunžrem xx xxxxx xxxx konvi xxxxxx x dolů, xxxxxxx xxxx xx xx, aby se xxxxx řádně xxxxxxxxxx x xxx se xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx smetana. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celou xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx x zemědělském podniku
Míchat xxxxx mechanicky xxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx dostatečné homogenity.
Pokud xxxxx mléka neumožňuje xxxxxxx mechanické xxxxxxxx, xxxxxx ručně.
4.2.3 Odběr xxxxxx z xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx řádně xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rozdělení xxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx se xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxx xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x rozdělené xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx xx provést xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx více xxxxx, x každé nádoby xx odebere xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx vzor. Xxxxx xxxxxx x xxxxx nádoby xxxxxx xxx odděleně testovány, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx reprezentativních xxxxxxxx x poměru x množství, xxxxx xx nachází x xxxxxx, ze které xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx (více) xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Odběr xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – skladovací xxxxxx, cisternové kamiony, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx vzorků se xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nádob, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx cisternových vagónů xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx době, xx kterou xxxx xxxxx x xxxxx. Xxxx být prokázáno, xx postup promíchání xxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxxxxxx případů xx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx značně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx x různých xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx intervalech při xxxxxxxxxxxxx mléka x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (syrového mléka xxxx xxxxxxxxxxx mléka) xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx u xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx části xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx ani xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celý xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx otvoru. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x vypouštěcího xxxxxx xx xxxxx xxxxxx vytéci dostatečné xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx reprezentativnost xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání xxxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx nebo xxxxxxxxx poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx hadici, xxxxx xx napojena xx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- filtrovaným, stlačeným x čistým xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx žluklé xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx vybavení xxx odběr vzorků xxxxxxxx mléka dodaného xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx příslušným xxxxxxx.
Xxxxxx vybavení xxxx xxx před x xxxxx používání xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxxxxxx orgán. Xxxxxxxx postupů odběru xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxxxxxx mléka, x xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (který xxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx příslušný xxxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxx, xx kterého xxxx být xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, které xxxx xxx provedeno, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx ošetřené xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx spotřebě x xxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxx během obchodní xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx ošetření, x xx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx pasterovaného xxxxx x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka (pasterovaného, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx takový počet xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, která xxxx být provedena, x xx podle xxxxxx poskytnutých testovací xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx jiného příslušného xxxxxx.
5. Identifikace xxxxxx
Xxxxxx xx měl být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx identifikaci podle xxxxxx analytických laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx orgánu (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxx xxxxxxxx se xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x skladování, xxxxx xxxx xxx dodrženy x xxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx druhu xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx je xxxxx xxxx na to, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x přímému xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx je xxxxxx použitá pro xxxxxx průsvitná, musí xxx xxxxxxxxx ve xxx,
- xxxxxx syrového xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx přepravovány a xxxxxxxxxx při xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx musí být xx xxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Xxxxxxxxx orgán xxxx souhlasit, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX až 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx odběrem x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 xX. Doba mezi xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx být co xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx 24 hodin,
- xxxx vzorky xxxxx xxx xxxxxx syrového xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx skladovány v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x doba mezi xxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxx být xx nejkratší.
Speciální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx testy, xxxx xxxxxxx v popisu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
PŘÍLOHA X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy
III. Xxxxxxxxx xxxxxxxx peroxidázy
IV. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganismů
I. XXXXXXXXX XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx typy xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxx je x obchodních důvodů xxxxxxxx tak, xx xx začátku xxxxxxx xxxxxxx ve stanovenou xxxx xxxxxx. Vzhledem x tomu, že xx xxxxx xxxxx xxxxx křivky xxxx xxxxxxx různých druhů xxxxx, xxx x xxxxxx xxxx mrznutí xxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx hledajících xxxxx. Xxxxxxxxx x pevně xxxxxxxxxx časem xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxx využít xxx odhad podílu xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 ml (viz xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx ve xxxxxxxx Celsia (°C).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek mléka xx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx vibrací xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, která xxxxxxx, xx xxxxxxx rychle xxxxxxx až x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxx xxxxxx mléka xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx těchto xxxxxxxx plató xxxxx xxx xxxxxxx mléka xx xxxxxxxx Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx chladicí xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx snímače (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxxxx xx vzorky x xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx lázeň
Je xxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx míchá xxx, xxx xxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx vyšší xxx 0,2 °C. Teplota xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx výrobcem.
Je xxxxxxxx, xxx x lázni xxxx udržována xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx kapalinou.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx vzorky proudí xxxxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx může kolísat xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx je 33 % (V/V) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx skládá xx xxxxxxxx sondy x maximálním xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx a x xxxxxxx xxxxxx maximálně 0,31 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx termistoru xxxx xxx xxxxx xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx teplotu okolí xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Maximální xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx musí xxxxxxxx x ose xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx straně 15). Xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce
− xX / dT × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X je xxxxx x ohmech xxx xxxxxxx X,
− xX / dT × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β je xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx materiálu xxxxxxxx xxx xxxxxx termistoru. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx vyhledávání xxxxxxx xxxxx xx křivce xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx křivky, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX po xxxx xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx vyrovnává Wheatstoneovým xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ± 10 % x jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°C.
Proměnný (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx nesmí xxxxxxxx xx linearity x xxxxx xxxxxxx x více xxx x 0,3 % xxx maximální xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx možné xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx dílky xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx umožnit rozlišení xx nejméně 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °C.
Stabilita xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx příslušného obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx dvou xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx teploty xxxxxx vyšší xxx 0,001 °X.
Xxxxxxxxx obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx nevznikla x xxxxxx bodě xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °C xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx použije xxxxxx drát x xxxxxxx 1 xx 1,5 mm, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx vertikálně xxx, aby xxxx xxxxxx konec byl xx xxxxxx xxxxx xxxxx termistoru. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxx 1,5 mm xxx xx pod xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx vibruje bočně x xxxxxxxxxxx rozkmitem xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 mm), xxx xxxx zajištěna xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx během stanovení. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx okamžiku xxxxxxxx xxxxx termistoru xxxx xxxxx zkumavky.
4.1.5 Zařízení xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx teplota xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x bodu xxxxxxx. X tomu xxxxx xxx použít xxxxxxxx; jedním postupem xx xxxxxxxx rozkmitu xxxxxxx xx jednu xx dvě xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx stěny xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx vzorky (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 mm xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 mm x xxxxxxx xxxxxx je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx skla xxxxxxxx se xxxxx xxxxx o xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx značku xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx nebo xxx xxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, když xxxxxx zdroj xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 ml, xxxxx X.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx odvětraná, nastavitelná xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx pec, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Exsikátor
5. Činidla
5.1 Xxxx destilovaná v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, převařená x xxxxxxxxx xx 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx sodný, čistoty x.x., xxxxx xxxxx, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x xxxxxxxxxx peci xxxx nejméně 24 xxxxx při xxxxxxx 130 ± 1 °X x xxxxxxx x xxxxxxxxx na xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Příprava xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit odpovídající xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Rozpustit x xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx přelít roztok xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx x xxxxxxx xx značku xxxxx x teplotě 20 ± 2 °C.
Skladovat xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx při xxx 5 °C x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx standardní roztok xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, aby xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx x láhve xxxxxx xx suché x xxxxx kádinky. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x lahví, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx měsíců, xxxxx neobsahují fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 g/l).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxx xxxxxxx nelišila x xxxx xxx 1 °X xx teploty, xxx xxx se xxxxxxx kalibrace. Kryoskop xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx světlu, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx než 26–27 °X.
Xxxxxxx se, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx byl zapnut xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Zkontrolovat xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx kapalin.
Vybrat xxx xxxxxxxxxx roztoky (xxx tabulka xxxx), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx těsně xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x testování. Xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx roztoků by xxxxxxx neměl xxx xxxxx xxx – 0,100 °X.
(X xxxxxxxxx xxxx x současné xxxx dostupných xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx ustálí xx dané xxxxxxx xxxx mrznutí x xxxxx rozsahu xxxxxxxx xxxxxxxx. X těchto xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xx tento bod xxxxxxx, xxxx jednoho x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx musí xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx pipety xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx a xxxxx xxxxxxxx na vzorky, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx vyrobeny x xxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxx (xxxxxx druh xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx provádět xxxxxxxx kalibrace, xxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx standardního xxxxxxx. Xxxxxxxx tento xxxxxx x xxxxxx standardním xxxxxxxx x xxxxxxxx xx provádět xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx mrznutí xxxxxxx x xxxx, xxxx xx xxxx nutná xxxxxxxxx nastavení. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x použití x xxxxx ukazuje bod xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx by byla xxxxx jakákoli xxxxxx.
7. Xxxxxxxx testovacího xxxxxx
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx skladovat xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx 0 °X x 5 °C.
7.2 Xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxxx odstranit všechna xxxxxxxxx xxxx tělíska xxxx xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx xx čisté x xxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxx účinný xx laboratorní xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx je xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx zahájením testování. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx při použití xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx kyselost xxxxx, xxxxx možno xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx bodu xxxxxxx. Vzorky, jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 ml xxxxx, nemohou být xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko xxxx stát nejméně 20 minut xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxx chladicí xxxxxxxx jsou x xxxxxxx s pokyny xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx sonda xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx byl xxxxxxxx zapnut alespoň 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx sérií xxxxx měřit bod xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (xxxxxxxxx xxxxxx x bodem xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx při xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x více xxx 0,001 °C. Xxxxx xx průměr xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxx xxx 0,002 °X, kryoskop se xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx x xxxx 6.
Pokud se xxxxxxxx xxxxxxx nepřetržitě, xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx hodinu, xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se vzorkem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx jsou xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx kalibrovaného xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxx xx vyvolá xxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem x xxxxxxxxx na 0,1 °X.
(X některých xxxxxxxxxxxxx přístrojů xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; u xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx ručička xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx začne xxxxx xxxx později, xxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxx x zopakuje se x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx tento xxxxx vzorek xxxxxx xxxxxx xxxx dosažením xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx vzorku xx xxxxxxx na 45 °X x 5 xxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx testovací xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx testování. Xxxxxxx xxxxx xx začátku xxxxxxx rychle stoupne xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx teplotě xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx mrznutí a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xx vzorku x xxx vodu x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx než pro xxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx.
Xxxx xx měření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx sondu x míchačku xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), provést xxxxx xxxxxxxxx u jiného xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx obou xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx se x xxxxxxx xx xxx xxxxxxx konečného xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zkumavku xx xxxxxx xx xxxxx xxx vzorky x xxxxxx provozní xxxxxxx, xxx sonda zůstala x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx; v xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx sonda xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx slepých xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx údaje.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx provedení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrzena, za xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx xxx bod xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na tři xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx ukazuje xxxxx xxxxxxx:
Xxx mrznutí (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Schéma xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (poloha xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx skleněné xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Aktivita xxxxxxxxx je xxxx xxxxxxx alkalické fosfatázy xxxxxxxx ve xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx než 4 xx xxxxxx xx 1 xx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorku xxxxxx fenol x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojsodného. Xxxxxxxx xxxxx reaguje x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), který xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx při 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx porovnání xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Rozpustit xx vodě 50,0 x hydroxidu xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 g xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x doplnit na 1000 ml.
4.1.3 Zahřát 500 ml xxxxxxx xxxxxxx na 50 °X, xxx roztoky xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx asi xx 20 °X, v xxxxxxx nutnosti xxxxxxx xxxxxxx xX na 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx vodě 6,0 x xxxxxxxxxxxxx sodného (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X a 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (NaCl) x xxxxxxx na 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bezvodý, xxxxxx xxxxxx, ve 100 xx tlumivého xxxxxxx (4.1.3) nebo 0,5 x fenylfosfátu xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx dvě xxxxx xxxxxxx BQC (4.6) x nechat xxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Vzniklé xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx stát, dokud xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx a odstranit xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx možné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx zabarvení x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx substrát xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, a xx xxxxxxxx 1 ml xxxxxx roztoku xx 100 ml roztoku xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx ve vodě 3,0 g xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) a 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 ml.
4.6 Roztok 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx BQC)
Rozpustit x 10 xx 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx měďnatého (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 x síranu xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx na 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 xx xxxxxxx bezvodého xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 ml, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 ml. Xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, doplnit xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx fenolu.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré xxxxxxx xx skla, xxxxx x zátky x xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx vyčištěny. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx typy plastových xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx používání xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx lázeň nastavitelná xx 37 ± 1 °C.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro odečty xx xxxxxx délce 610 nm.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx odstupňované xx 5 xx x 10 xx.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx nálevky vhodné xxxxxxxxx, xxxx. o xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Odměrné xxxxx xxx přípravu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx zabránit xxxxx přímého xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Stopy slin xxxx potu xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xx jim xxxxxxx. Xx proto xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx ihned po xxxxxx xxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx skladovat xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx dva xxx.
6.2 Xxxxxxxxx vzorek
Pomocí pipety xxxxxx 1 xx xxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx kontrolní xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý vzorek xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx vodě; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx folií, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Rychle xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Po zbytek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x testovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx.
6.3.3 Vzorky xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) x občas (xxxxxxx xxxxxxxxx) promíchat xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx x xxxx 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx xx vroucí xxxx. Xxxxxx zchladit xx xxxxxxxxx teplotu.
6.3.5 Xx xxxxx zkumavky xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x řádně promíchat.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx přes suchý xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx filtrovat znovu, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 ml xx xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx a 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx zabarvení xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx slepým xxxxxxx xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, opakovat xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx vzorku. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx objemu xxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx testovacího vzorku, xxxxx xx opatrně xxxxx xx xxxx, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx (4.8.2) připravit xxxxxxxxxx xxxx zředěných xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx fenolu xx xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxx x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Do xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx roztoku síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet xxxxxxxxx 30 minut při xxxxxxxx teplotě.
6.4.4 X xxxxxxxxx s kontrolním xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.4.5 Na základě xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x vzorec
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx fenolu pomocí xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx fenolu x μx xxxxxxx xxxxx bodu 7.1.1;
X xx faktor xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.10 (x případě žádného xxxxxxx D = 1).
2,4 je xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 ml testovacího xxxxxx) – xxx 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Spolehlivost
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud se xxxxxxx provede podle 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx vzorku.
III. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxxxxxxx nebo nepřítomnosti xxxxxx peroxidázy x xxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx:
Xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 sekund po xxxxxxxxxx se objeví xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza rozkládá xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx parafenylendiamin xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx enzymu.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °X) 2 x 1,4 fenylendiaminu (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 ml. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x temnu, x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xx připravení roztok 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx vodíku
Vodou zředit 9 xx 30 % xxxxxxxx vodíku x xxxxxxx na 100 ml. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx peroxidu xxxxxx xx stálý xxx xxxxx měsíc, pokud xx skladován x xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx jakémukoli styku x xxxxxxxxxxx látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx mléka xx xxxxx zkumavky x vhodným xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx roztoku peroxidu xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 sekund xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 30 °C
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií xxx 30 °C. Xxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx inkubovat 72 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo XXX xxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx teplotu 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx se zařízením xxx xxxxxxxxxx teploty, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx mléka nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx a pracující xx principu xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 ml xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), skleněné nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x výpustním otvorem x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx z xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 mm. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx mít žádné xxxxxxxxxx, které by xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx ze skla xx sterilizují xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x nádobách, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx by xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx v horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené odstředěné xxxxx xx nemělo xxxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx. Toto xx xxxxx srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx odstředěným xxxxxx, xxxxx průkazně xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx vodě kvasnicový xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x nakonec xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx se xxxx xxxxx nerozpustí, xxxx zahřívat x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 při 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 ml xx xxxxx nebo xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx ihned, skladuje xx x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium
Kultivační xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx výrobce, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx není xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx vodě, xxxxx xx je nutné, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud to xx nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx dehydrovaných xxxxxx xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX metodou xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx mikrobiologického vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx množství kultivačního xxxxx a zchladit xx vodní xxxxx (4.1.5) na 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku mléka
Vzorek xxxxx xxxxx promíchat, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx kontaktu s xxxxxxxx. Xxxxxxx ředidla xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx x xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) do 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx ředění 10−2.
S xxxxx xxxxxx další xxxxxxxxx ředění xx xxxxx postup xxxxxxx xxx xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A xxxxxxxx VII bod 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx misky.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx mléka a xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, testovacího xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx obrácené dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx se nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx v kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx částí inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky vyšetřit xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx usnadnění počítání xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x záměně xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx považují za xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx odpovídající počet xxx celou xxxxx. Xxxxx kolonie tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx misek xxxxxxxxxxxx 10 až 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (n1 + 0,1x2) d
kde:
∑C ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx misek xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx misek xxx druhém ředění
d xx faktor zředění, xx základě xxxxxxx xxxx xxxxxxx první xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx číslice pět, xxxxxxxxxxx tak, aby xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Příklad (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx je "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.1.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx vyšší xxx 300 a xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x vynásobit xxx převrácenou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx xx".
8.2 UHT xxxxx x sterilizované mléko
Počty xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx požadavkům xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
V. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx pět xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxxx xx x xxxxx při 6 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Inkubovat xxxxxxxxxxx xxxxx pět xxx xxx 6 °C. Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx miskách x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Spočítat xxxxxxx x vypočítat počet xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky xx skla
Obvyklé laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °X xx xxxxx bodech xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx mléka xxxx desetinného xxxxxx x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx na principu xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx prostorem x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx ředění nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o objemu 150 xx 250 xx xxxx zkumavky x xxxxxx 20 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, bezbarvého xxxx nebo ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 až 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x nádobách, xxxx xxxxxx xx neměly xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx nebo xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze skla xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx se měly xxxxxxx odvětráním páry.
Pipety xxxx být xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – agar xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx extrakt, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Poté xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 minut.
Pokud je xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, sterilizace x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °C, avšak xx déle xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační médium
Kultivační xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X postupem xxxxx bodu 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx, xxxxx to xx xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilaci xxxx xxxx hodnota 7,0 ± 0,1 při 25 °C.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx a skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 ml xxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 minut xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx se x temnu xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx může xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx bodu 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bodu 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Rozpuštění xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultivačního média x xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] uzavřené xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx inkubaci xxxxxx mléka řádně xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx co nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, a xx 25 rychlými otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx nutné zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři minuty.
7.3 Xxxxxxxx primárního xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx přijít xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx xxx přibližně xxxxxx xxxx teplota xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X cílem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx vyšetřena xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé ředění (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx xxxxxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx mléka, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxx s kultivačním xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx na sebe xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, xxx být x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx průzkum pomocí xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx odlišit xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx xxxxxxxx za xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx pokrývají xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, misku vyřadit.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 kolonií (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx naočkovaného vzorku, xxx:
x1 xx počet xxxxx při prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "nižší než 10 × x", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Pokud xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 300 x počítání xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX OBSAHU KOLIFORMNÍCH XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato kapitola xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v pasterovaném xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx při 30 °X vytvářejí xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx jsou xx popsaných xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kolonie x, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx necharakteristických xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx schopnosti xxxxxxxxx xxxxxxx. Poté xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 pH-metr xx zařízením pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací xxxxx xx xxxxxxx platina-iridium xxxx nikl-chróm.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými xxxxxxx x objemem 20 xx, xxx mohly xxxxxxxxx konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx trubičky xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Baňky x xxxxxx 150 xx 250 xx xxx xxxxxxxxxx sušeného selektivního xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx nebo ze xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, s výpustním xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx asi 90 až 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx teplotě 170 – 175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, aby bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, tyto xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx víčka xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx skla sterilizované x autoklávech xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx sterilizovány v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx violetí, xxxxxxxxx červení, žlučí x laktózou (VRBL xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx složky xx xxxx a nechat xxxx několik xxxxx. Xxxx důkladně promíchat.
Zkontrolovat xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx nutné, upravit xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx do xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx po xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx do xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Kultivační xxxxxx zchladit ve xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx zkontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Použít xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx hodin po xxxx xxxxxxxx.
5.2 Tekutý xxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 g |
|
Laktóza (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx zeleň |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx a uvést xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx jeho hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx po 10 xx do zkumavek (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Durhamovy xxxxxxxx. Zkumavky uzavřít.
15 xxxxx sterilizovat v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje se x xxxxx při xxxxxxx mezi 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržte xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, sterilizovat x skladovat kultivační xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx médium
Použít xxxxxx (VRBL xxxx) xxxxxxx v xxxx 5.1.
6.2 Příprava xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx pěny nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx tři minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx přenést (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxx misek (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx mléka (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx po xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, aby xx inkubaci xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiem nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Za xxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx misku x 12 xx xxxxx XXXX agaru, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx VRBL xxxxx (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
Nechat xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než šest xxxxx. Sloupky misek xx nesmějí vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Počítání xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx kolonie x Petriho miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 kolonií. Xxxxxxx xxxxx červené xxxxxxx x průměru nejméně 0,5 xx, x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxx xxxxx, velikost nebo xxxx xxxx sraženin xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx údajů v xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx obsahující xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
Za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Durhamově xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx a vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx maximálně 150 kolonií.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx konfirmační xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka podle xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx vyšetřením xxxxxx xxxxx (6.3).
n xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku (6.3) x mililitrech (3 xx).
Xxxxx se xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx více než 100 xxxxxxx. Xxxx xx zaokrouhlovaná xxxxxxx xxx, zaokrouhlit tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx sudá.
Pokud xxxx všechny xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXX SOMATICKÝCH BUNĚK
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx dva xxxxxxxxxx postupy xxx xxxxxxxxx somatických buněk.
A. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup pro xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx x syrovém xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx mléka xx xxxxxx kalibrace a xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (xxx B.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx buňky, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx methylenovou xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 xxxxxxx podložního xxxxxxx. Tenká vrstva xx xxxxxx x xxxxxxx. Počítání xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx somatických buněk xxxxxxxxxxx na daném xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx počet xxxxx na 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx modř |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx kyselina xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °C. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 hodin xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °X x přidat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxx pórů 10 xx 12 xxxxxxx x uchovat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx vytvoření xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx přefiltrovat.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
5.1 Mikroskop umožňující xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující dávkování xx 0,01 ml x xxxxxxxxx nejméně ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko s xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx standardní xxxxxxxx sklíčko a xxxxxxx 20 × 5 mm xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) xxx sušení xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Ventilátor (xxx) pro sušení xxxxx vrstvy.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 30 až 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx po 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka musí xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Během xxxxxxxxxx xxxxx teplota xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx nesmí xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx x laboratoři
Zahřát xxxxxx xx vodní xxxxx (5.6) na 30 až 40 °X. Poté xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx které xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx podložní xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx papírem, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx před xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) odebrat 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx do xxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx vrstvu xx xxxxxxxxxxxx vyhřívací xxxxx (5.4) až xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x vyšetřit xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx xx barvícího xxxxxxx (4). Xxxxx x, pokud xx xx nezbytné, xxxxxxxxx xxxxxxxx ventilátorem (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nesmyje. Xxxxx sušit x xxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Kalibrace mikroskopického xxxx
Xx xxxxxxx zvoleného xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Počítání x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxx jádra, x xx xxxxxx jádra, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x z xxxxx je x xxxxxxxxxxxxxx poli xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxx, které xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx měsíc xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Počítání xxx také xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx polí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx části xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx somatických xxxxx pod mikroskopem xxxx xxx rovněž xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, variační xxxxxxxxxx počítání z xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx mléka x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx je xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, musí xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx rozdělení xxxxxxx 400, aby xxxx xxxxxxx kritérium opakovatelnosti.
Podle Xxxxxxxxxx rozdělení:
M = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) představuje počet xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (například 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 ml xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx pásů xx xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx se xxxx počítat, xx 5 xx. Xxxxx xxxx xxxxxxxx průměru xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx stanoven podložním xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / d × b
kde:
d xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx mikroskopických xxxx ve xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx mřížky
Pracovní xxxxxx
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x celkový xxxxx xxxxxxxxxxx polí.
7.4 Xxxxxxx obsahu xxxxx
X xxxxx získat počet xxxxx na xx xxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx pracovním xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup, který xx může po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Definice
Pro xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, které mají x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Princip
Část xxxxxx (například 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Část xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxx vrstvy xx rotační disk, xxxxx slouží jako xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx impuls, xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx mililitr.
4. Činidla
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx se použít xxxxxxx xxxxxxx p.a.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx je to xxxx odpovídající čistoty.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 ml |
|
pH 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 ml. |
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx vodou na 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ethidiumbromid xx xxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx roztok (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx roztoku (4.2) x xxxxxxxx roztokem (4.1) tak, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 ml. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx dní.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý roztok (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx vodou xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx dní.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx se xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxx pokynů xxxxxxx xx xxxxxxx vzorků, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (A).
5.2 Vodní xxxxx, s cirkulací xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx uzávěrem, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxxx konzervován, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx po xxxxxxxx 24 xxxxx po xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx překročit 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx musí xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx dalších 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 až 12 °X;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,2 g xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx skladován dalších 72 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °C;
- azid xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x konečné koncentraci 0,024 x/100 xx, xxxxx je xxxxxx xxxxxxxx xx teplotu 6 xx 12 °X ihned xx xxxx odběru a xxxxxxxx do 48 xxxxx po jeho xxxxxx;
- bronopol:
vzorek xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, který xxx xxx konzervován xxxxxxxxx boritou, může xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx draselným.
Poznámka:
Pokud xxx o xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vod.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 hodin xxx xxx 2-6 °X. Počítání vzorků x xxx xxxxxxxx xx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, neboť xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx nízké. Pokud xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený xxxxxx (xxx 7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx nejméně xxxxx den starý xxxxxx xx vodní xxxxx (5.2) na xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx vzorek xxx pokojové xxxxxxx xx do xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx počítacího xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx po xxxxxxxx ohřívání (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxx důkladně xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx nejlepšího xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx ředění a xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 až 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 buněk/ml
(odpovídá xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx správnosti xx provádí xxxxxx xxxxxx x známém xxxxxx xxxxx, xxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxx xxx mikroskopem xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekce antibiotik x sulfonamidů v xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx postup xxxxxxxx:
X. Kvalitativní xxxxxx
Xxxxx xxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx, který umožňuje xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx obsahují antibiotika x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx založeny xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx testy.
B. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx identifikaci penicilinu x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx postup
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxxxxxxxx xxxx vyšší xxx xxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Citlivost xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 g |
|
|
Chlorid xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx uvést xx xxxx. Xxxxxxx pH xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx xxxx xx 100 xx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx získat xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 g |
|
Agar |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu (viz 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xx občasného xxxxxxx uvést do xxxx. Přidat xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu
Složení:
|
Trimethoprim |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 mg |
|
Glukóza |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 ml |
Příprava:
Rozpustit ve xxxx xxxxx xxxxxx x indikátor, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx roztok xx dostupný x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx sterilní xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx připravit xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx destilované xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx destilované xxxx x doplnit xx xx 1000 xx. Tento pracovní xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx penicilinu/ml (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx standardního xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx penicilinu/ml (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) přidáním 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx testu.
5.3 Mléko xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx inhibičních xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx předtím xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx bylo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx xxxxx xx xxxxxxx do xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx na 100 °X, xxxx xx uloženo do xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °X až 6 °X xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Testovací organismus
5.4.1 Xxxx testovací organismus xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x kmenem X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx kulturu xxx xxxxxxxxx testovací kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx šikmém xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 hodin xxx 63 ± 1xX. Xx inkubaci xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zátkou. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx přenést 20 ml xxxxxxx xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) a xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx do xxxxxxxx xx zásobní xxxxxxxx (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx smyčkou xxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x použije xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Petriho xxxxx (5.5.1) a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx skleněné xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °C (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx kultury (5.4.2) xxxx kultury xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx mělo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x časovém xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 hodin.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx misku obsahující xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx z povrchu.
Přenést xxxxxxxx spór xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, které xxxxxx ihned přeočkovány, xx se měly xxxxxxxxx x chladničce xxx 0 xx 6 °C.
5.5.5 Xx 16xx až 18xx xxxxxxxx inkubaci při 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx by xxxxxxxx xxxx měla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x pokud xxxxxxxx sraženiny nebo xxxxxxxxx, měla xx xx nahradit novou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx agarové médium (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx média (5.6.1) xx zkumavce xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést do xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx média (5.6.2), aby se xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx ztuhnout, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx ve xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxx, ale xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců xxx 0–6 °X, xxxxx xxxx ihned xx xxxxxx xxxxxxxx ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky se xx xxxxxxxx otestují, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx odběru, x xx té xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 0-5 °X. Xxxxx není xxxxx otestovat vzorky xx 24 xxxxx, xxxx by xx xxxxxxx hluboko xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx identifikovat xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx a xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx zkumavky/ampule xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) přenést 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx zkumavky/ampule. Pro xxxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx vždy xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 IU/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx bodu 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx způsobem xx použití kontrolního xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx vzorku mléka.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ až 2¾ xxxxxx do xxxxx xxxxx s teplotou 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx se zkumavkami/ampulemi x vodní xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx agarového xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx roztokem penicilinu xxxx xxxxxxxxxx vzorkem xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx antibiotik xxxx xxxxxxxxxxx xx vzorku x xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx koncentraci "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx purpurové, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx zbarvení xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve zkumavkách/ampulích xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx straně 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx purpurové xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx podrobeny novému xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Potvrdit xxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 a 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx.
X. Postup xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tento xxxxxx popisuje konfirmační xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx antibiotik, xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx různá xxxxxxxxxxx
Xxx A.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx, včetně sulfonamidů, xxxxx popsaným postupem xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx vzorek, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx byla xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx čirou xxxx xxxx xxxxxxx čirou xxxx xxxxxxx průměru xxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx je xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx antibiotika xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx tato xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) xxxxxxxxxxxx, inhibiční xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx to xxx xxxx xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/EHS, xxxxxxx A, xxxxxxxx XX, A.1.f) x 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx cloxacillin xxxxx, xxxxxx nebo xxxx xxxxx částečně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx jsou xxxxxx x xxxxxxx xxx identifikovány jako xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx disk xxxxxxxxx xxxxxx, které xx xx xxxxxxxx, xx umístí xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx stearothermophilus xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx narušuje agarové xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Velikost čiré xxxx xxxx jiné xxxxxx xx koncentraci x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x mléce.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz A.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 80 ± 1 °X.
4.2 Pomůcky xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx disky, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx asi 130 xx mléka (xxxxxxx xxxxxxxxx x exsikátoru).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, standardní xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxx xxx bakteriologické xxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx voda xx xxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx obsahovat inhibiční xxxxx xxx růst xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx zcela xxxxxxxxx xxxxx složky ve xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx trimethoprimu nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu xxxxxxx hodnotu xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléku
Viz X.5.2.
Xxx kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) x těchto xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μg/ml (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinázy (xxxx-xxxxxxxxx) xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx koncentraci 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx rozdělený xx xxxxx dávky, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx při 0 °X xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx penicilinázu xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezinárodní xxxxx. Pro účely xxxxxx postupu xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx stačí xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. X xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxxxx, zda xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx dostupné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx zjistí, xx xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Testovací xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx spór)
Viz A.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx xxxxxxxx na 55 oC.
5.6.2 Xx xxxxx přidat xxxx xxxxxxxx čerstvých xxxx (5.5) k nezbytnému xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x naočkovaném xxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx vyhřáté xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx médium, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 xx 0,8 xx vrstva. Xxx Xxxxxxx misku x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 ml xxxxxxxxx média, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx vrstva.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx médium xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx na xxxxx a xxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx se na xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vody xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx používány xxxxxxxxx xxx týdny, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 X vzorků x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx podle "xxxxxx X" (X.7.1 x A.7.2) xxxx xxx provedeno xxxx xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx vzorky 10 xxxxx na 80 ± 1 °C, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx termolabilních xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, poté xxxxxxx xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx lahvičky xx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 ml xxxxxxx penicilinázy (5.3) x řádně promíchat.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx disk (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x suché xxxxxxx. Xxxxxxxxx přebytečné xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxx Xxxxxxx misky (5.6) x lehce přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Disky napuštěné xxxxxxx vzorky xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx druhého xxxxxxx 20 mm x xx xxxxxx xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx kontrolu citlivosti xx disky (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x poměru xxxxxxx 2 % xxxxx disků xx xxxxxx mléka; při xxxxxx testu xx xxxxxxx nejméně xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx rozmístění xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, obrátit xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx je xxxxxxxxx 2,5 až 5 hodin xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx zdroji světla, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx čiré inhibiční xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxx xx změří.
6.2.6 Standardní xxxxxx penicilinázy (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx nejméně 2 xx xxxx.
6.2.7 Čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx v testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace x xxxxxxxxxxxx inhibičních látek
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx dvojmo se xxxxxxx xxxxxxxxx mléka (6.1.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx do 10 xx xxxxxx mléka xx možné do xxxxxx mléka xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx provede dvojmo xxx každý ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Interpretace xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx kolem xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxxx nevytvoří žádná xxxx xxxx, ale xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxxxx roztokem penicilinu (5.2x)), xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μg/ml.
7.2 Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxxxxxxx hodnotě průměru xxxx zóny kolem xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx obsahuje xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxx polosyntetický xxxxxxxxx, který xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xx. Xxxxxxxxxx peniciliny, xxxx xx cloxacillin xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx penicilinázou za xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx je xxxxxxxx, inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx být identifikovány xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu
8.1 Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx provedeno buď xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx výpočty xx základě xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx křivky
Vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx korelace xxxx log10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx sestrojit xx logaritmický papír xxxxxxxxxx koncentrací penicilinu xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx na xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx zdvojeného xxxxx. Průměry xxxxxxxxxxx xxx xx graficky xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx základě xxxxxxx xxx vzorků pomocí xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx standardní xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, avšak xxxxxxx pětkrát xxxxx xxx poloměr disků.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx vyjadřují jako xxxxx penicilinu xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μg/ml (nebo xxxxxxxx stanovené xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx obsah xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
9.2 Opakovatelnost (x) x reprodukovatelnost (X)
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx standardu xxx xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
X souladu x požadavky xxxxxxxx 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx XXX xxxx 2, xxxxx postup xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx detekci patogenních xxxxxxxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx provést x xxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx ošetření, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx x příloze X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, pokud xxx x počítání kolonií xxx 30 °C x 21 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx, specifický xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxx, xxxxx existuje xxxxxxxxx, xx mléko xx xxxxxxx spojitost xx propuknutím otravy xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx vydávání xxxxxxxxx x zdravotní xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx obchod xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganismů xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Zpráva x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx takto:
Počet mléka xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx postup. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.