Rozhodnutí Komise
ze xxx 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx dne 5. srpna 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvnitř Xxxxxxxxxxxx [1] naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/EHS [2], x xxxxxxx na xx. 10 xxxx. 2 uvedené směrnice,
vzhledem x xxxx, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pro syrové xxxxx a tepelně xxxxxxxx mléko;
vzhledem x xxxx, že pro xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxx mrznutí x xxxxxxxxxxx antibiotik;
vzhledem x xxxx, že xxx pasterované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx nepřítomnosti xxxxxxxx, xxxxx koliformních bakterií, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx antibiotik x xxxx mrznutí;
vzhledem x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxxxx mléko x XXX xxxxx xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx z xxxxxxxxxxx xxxxxx je vhodné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xx xx xxxxxxx nezbytné xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx x testování; xx x očekávání xxxxxxxx xxxxxx šetření xxxxx členské xxxxx xx xx, xxx xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx postupů xxxxxxx x kriterií spolehlivosti xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx rozhodnutí xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Stálého veterinárního xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Článek 1
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 21 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx kolonií xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a testování xxx XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- detekce xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx pravidel xxxxxxxxxxx x příloze X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x testování xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 xxxx popsány x příloze II.
Článek 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. prosince 1992, xxx xx zohlednil xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx znalostí.
Xxxxxx 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 14. xxxxx 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Sharry
člen Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X. OBECNÁ XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx členských xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx mléka musí xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx použitá x xxxxxxxxxxx, ředění xxxx xxxx musí xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" nebo "xxxxxxx" (bez xxxxxxx xxxxxxxxx) se xxxxxx "xxxxxxxxxxx ve xxxx" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxx uznané xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx přístrojů x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx váhy
"Analytickými xxxxxx" xx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx xxxxxx na 0,1 xx.
4. Vyjádření xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx zprávě x xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx příslušnou metodu. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx hmotnosti vzorku.
5. Xxxxxxxx spolehlivosti: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx uvedená pro xxxxx postup jsou xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) je xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx mezi dvěma xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xxxxx xxxx získány xxxxxxx postupem x xxxxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx (stejný xxxxxxxxx, stejný xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Reprodukovatelnost (X) xx xxxxxxx, xxx kterou leží xxxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxx samostatných testů, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x týmž testovacím xxxxxxxxxx za odlišných xxxxxxxx (xxxxx pracovníci, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx a/nebo xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx není xxxxxxxxx jinak, xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnosti, uváděné x příslušných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, představují 95 % intervaly xxxxxx spolehlivosti podle xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxx xx používají xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx postupy xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx provedeny. X xxx xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx odhadnuty.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx pokyny.
6. Xxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx použitý xxxxxx x získané výsledky. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a všechny xxxxxxxxx, které xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx. Xxxxxx x testování xxxxxxxx xxxxxxx informace xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X TEPELNĚ XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x skladování xxxxxx xx použijí pro xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx vzorků xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. provedou pověření xxxxxxxxxxx, kteří byli xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx x metodách xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx budou reprezentativní x x xxxxxxx x xxxxx šarží.
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx testovací laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxx zhotoveno x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx vhodného, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx být xxxxxxxx s xxxxxxx xx předpokládané xxxxxxx (xxxxxxxxxx, odběr xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx opatřeny xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx vzorků x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 50 ml.
Vzorkovnice a xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, kovová nebo x xxxxxxxx plastu.
Materiály xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která xx xxxxxxxxx xxxxxxxx testů. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx na xxxxxx xxxx xxx xxxxx, xxxxx, hladký xxxxxx xxx trhlin a xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Vybavení xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) xxxx splňovat xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx se pro xx xxxx jdoucí xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, musí xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx vyčištěno x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx s pokyny xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx příslušný xxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx výsledků xx xxxx xxxxxxxx vzorků.
4. Xxxxxxxx odběru xxxxxx
4.1 Xxxxxx údaje
Bez ohledu xx testy, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď xxxxx, xxxx mechanicky.
Vzorek musí xxx xxxxxxx ihned xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx ještě x xxxxxx.
Xxxxx se x nádrže xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx nádob xxxx být takový, xxx xxxx tyto xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxx xxx xxxx možné xxxxx promíchat xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, aniž xx však xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Ruční xxxxx xxxxxx
4.2.1 Odběr xxxxxx x xxxxx x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx nebo xxxxx xxxxxx a xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxx řádně xxxxxxxxxx x xxx xx xx hrdle xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx zásilku, xx odebere xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx na mléko x zemědělském podniku
Míchat xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx dokud xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx míchačky, xxxxxx ručně.
4.2.3 Odběr xxxxxx z misky xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx bylo xxxxx xxxxxxxxxx, když xx xxxxxx xx misky xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx mechanické xxxxxxx. Xxxxx objem xxxxxxx, x xxx xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx kapacitu xxxxx xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx z celé xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx x rozdělené xxxxx
Xxxx xx množství xxxxx, u xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, rozděleno xx xxxx xxxxx, x xxxxx nádoby xx odebere xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, přičemž se xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx xxxxx vzor. Xxxxx xxxxxx z xxxxx nádoby xxxxxx xxx xxxxxxxx testovány, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx těchto xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, ze xxxxx xxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x těchto xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx z velkých xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx obsahu xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xx xxxxxxxxxx mechanické xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx promíchání xxxxxx xx xxxx, xx kterou bylo xxxxx v klidu. Xxxx xxx prokázáno, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v každém x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vhodný pro xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx shodu xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, nebo x xxxxxxxxxxxx intervalech při xxxxxxxxxxxxx mléka x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx x obou xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx menší xxx 0,1 %.
Xx xxxxx nádobě x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, které xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nádoby x xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx je xxxxxxxx x mléce,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xxxxxxxxx mléka x xxxxxx xxxxxxxxx hadici, xxxxx xx napojena xx pumpu a xxxxxxxx xx průlezového xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx a objem xxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x poloautomatické xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxxx xxxxx dodaného xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx podle pokynů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jiným xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx podrobeno xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx odběru xxxxxx xxxx být xxxxxxx x cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxxxxxx mléka, z xxxxx musí xxx xxxxxxx vzorek,
- poměr xxxxxxxxxx přenosu (který xxxxxxx x minimálním xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x šarže po xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx příslušný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxx, xx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx opatření, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx jde x xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx skládají x xxxxxxxxxxxxx, zapečetěných xxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxx během obchodní xxxxxx nebo z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx ošetření, x xx, pokud xx xx možné, xxxxx xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx pasterovaného xxxxx x den pasterace).
Z xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, x to xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx xxxxxx příslušného xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kódem, xxxxx umožňuje xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podle xxxxxx analytických xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx orgánu připraví xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x podmínek přepravy x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodrženy x xxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx být xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx je xxxxx xxxx na to, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nežádoucímu xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Je-li je xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx ve xxx,
- vzorky xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx při teplotách 0 xX xx 4 oC. Xxxx xxxx odběrem x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx a x žádném případě xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Příslušný xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx teplota xxxxxxxxxx 0 xX až 6 xX, není-li xxxx mezi odběrem x xxxxxxxxxx delší xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x skladovány xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx zařízení laboratoře x xxxx mezi xxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx testy, xxxx xxxxxxx v popisu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Stanovení xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C
V. Stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °C
VI. Xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx přístroje (termistorového xxxxxxxxx), v němž xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx ochlazována xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx snímač nahrazuje xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx dva xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxx mrznutí, kdežto xxxxx xxx xx x xxxxxxxxxx důvodů xxxxxxxx xxx, xx xx začátku xxxxxxx xxxxxxx xx stanovenou xxxx odečet. Vzhledem x tomu, že xx xxxxx lišit xxxxx křivky xxxx xxxxxxx různých xxxxx xxxxx, ale x xxxxxx xxxx mrznutí xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx referenční xxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx testování.
Bod xxxxxxx xxx využít xxx odhad xxxxxx xxxxxxx cizí xxxx x xxxxx za xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx není vyšší xxx 0,18 g xxxxxxxx xxxxxx xx 100 ml (xxx xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x vyjádřená xx xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx x závislosti xx přístroji xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx způsobí, xx xxxxxxx rychle xxxxxxx xx k xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx vzorku.
Přístroj xx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx postupem jako xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx odečty xxx dva xxxxxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxx xxxxxxxx plató xxxxx xxx xxxxxxx mléka xx xxxxxxxx Celsia.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx teploměru) x příslušným obvodem, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx na vyvolání xxxxxxx, xxxxx i xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Chladicí xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx dva xxxx xxxxxxxx lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx typ
Dobře xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx, xxx teplotní rozdíl xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx vyšší xxx 0,2 °X. Teplota xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx v rozmezí ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Je důležité, xxx v lázni xxxx udržována konstantní xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx zkumavky xx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx typ
Kolem xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx kapaliny. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx je 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx skládá xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx průměru 1,80 ± 0,2 xx x o xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx nižší xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Pracovní napětí, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx při − 0,512 °X xxxxxxx termistoru stoupla xxx teplotu xxxxx xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Když xx sonda x xxxxxxxxx x pracovní xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx se musí xxxxxxxx x ose xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxx obrázek xx xxxxxx 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, aby se xxxxxxxxx nastavení xxxxx xx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / T2
kde:
T je xxxxxxx ve stupních Xxxxxxx
X xx xxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxx X,
− dR / dT × 1 / X xxxxxxxx koeficient
β je xxxxxxxxx, která závisí xx materiálu xxxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx x odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx měření
Použitý xxxxxxxx pracuje na xxxxxxxx vyhledávání xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx mrznutí. Xxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x jejichž teplotní xxxxxxxxxx není xxxxx xxx 2×10−5°C.
Proměnný (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx nesmí xxxxxxxx xx linearity x xxxxx rozsahu x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx hodnoty.
Pro xxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx umožnit rozlišení xx nejméně 0,01 °X x rozmezí xx 0 °X xx –1 °C.
Stabilita xxxxxxxxxxx zařízení a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx než 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx přístroje xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx chyba xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx použije xxxxxx drát o xxxxxxx 1 až 1,5 mm, který xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xx rozkmit x umístěna xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx byl xx úrovni xxxxx xxxxx termistoru. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx 1,5 xx xxx xx pod xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx bočně x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx teplota xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx stanovení. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx nesmí x xxxxxx okamžiku xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Zařízení xx vyvolání xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x bodu xxxxxxx. X xxxx xxxxx lze použít xxxxxxxx; jedním xxxxxxxx xx xxxxxxxx rozkmitu xxxxxxx na jednu xx dvě xxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 mm xxxxxx; xxxxxx průměr xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx průměr xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx skla xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx o xxxx xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx xxx xxxxxx xxxxxx vzdálenou xx xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx dnem xxxxxxxx), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx tak, aby xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Analytické xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 ml, xxxxx A.
4.4 Sušárna, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 20 ± 2 °X, xx zkumavce xxxxxxxxxxx xxxx uhličitý.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, čistoty x.x., jemně mletý, xxxxxx 5 xxxxx xxx teplotě 300 ± 25 °X x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx teplotě 130 ± 1 °X v xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu v xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vodě (5.1), xxxxxxxxxxxxx přelít xxxxxx xx odměrné xxxxx x xxxxxx 1000 xx x xxxxxxx xx značku xxxxx x teplotě 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx nejdéle xxx xxxxxx při xxx 5 °C x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před použitím xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx protřepáním x několikerým otočením xxxxx. Nikdy neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxx, xxxxx byly xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx neobsahují xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 g/l).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Kryoskop xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, průvanu xxxx xxxxxxxxx teplotám xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx a xx xxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx sondy, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx chladicích xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx tabulka xxxx), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx nad xxxx těsně xxx xxxxxxxxxx hodnotou xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx roztoků xx xxxxxxx xxxxx být xxxxx než – 0,100 °C.
(U některých xxxx x současné xxxx dostupných kryoskopů xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx sestaven xxx, xx xx ustálí xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx rozsahu xxxxxxxx xxxxxxxx. V těchto xxxxxxxxx výběr jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx tento xxx xxxxxxx, jako jednoho x kalibračních xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx musí xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx vzorky, xxxx xxxxx pomocí xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (xxxxxx druh xxxx, umyté x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx provádět xxxxxxxx xxxxxxxxx, dokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx roven bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x druhým standardním xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx takovým xxxxxxxx, dokud po xxxx následující xxxxxx xxx xxxxx roztok xxxxxxxxxx správné xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxxx xx xxxx nutná xxxxxxxxx nastavení. Xxxxxxxx xx xxxx připraven x xxxxxxx x xxxxx ukazuje xxx xxxxxxx xxxxxx mléka, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxx úprava.
7. Xxxxxxxx testovacího xxxxxx
7.1 Xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx xxxxxxx xxxx 0 °X x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxxxx xxxxxxxxx cizí xxxxxxx xxxx tuhý mléčný xxx ve xxxxxx xx čisté x xxxxx xxxxxx x xxxxxx opatrně xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx a xxxx xxx účinný xx laboratorní xxxxxxx.
7.3 Xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx xx xxxxx xx ohřát xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxxx testování. Xx xxxx nezbytné xxxx xx to, xxx xxxxxxxxxx roztoky x xxxxxx xxxxx xxxx xxx použití xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxxxx xxxxx současně xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx přesahuje 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, nemohou být xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX mléko x sterilizované xxxxx xxxx stát xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v otevřené xxxxxx.
8. Postup
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda xxxxxxx x xxxxxxx chladicí xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx se, xxx xx chladicí kapalina xxxxxxx míchá xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx míchačky x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Rutinní kontrola xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx sérií xxxxx měřit xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx x bodem xxxxxxx – 0,512 °X), dokud xx xxxxxxx xxxxxxx při xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx xx průměr xxxxxx hodnot xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxx než 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx kalibrujte, xxx xx xxxxxxx x xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx nepřetržitě, xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx xx xxxxxxx nejméně xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx výrobce.
8.3 Stanovení xxxx mrznutí xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx protřepáním x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx neprotřepávat standardní xxxxxx xxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx přidat 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do xxxxx x xxxxx zkumavky xx vzorky. Xxxxxxx xx, xx jsou xxxxx x míchačka xxxxx x xxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxx opatrně xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx a xxxxxxx xx vyvolá xxx xxxxxxx určené xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °X.
(X některých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx odečíst tuto xxxxxxx x digitálního xxxxxxxxx; x ručních xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosáhne xxx, xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxxx začalo, xxxx xx ručička xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx z jakéhokoli xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxxxx, xxx xx dosaženo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx se x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxx vzorek xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, alikvótní xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na 45 °X x 5 xxxxx xx xxxxxxx xx této xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuk.
Poté xxxxxxxx xxxxxx na testovací xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx testování. Xxxxxxx xxxxx xx začátku xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx dobu xxxxxxxxxx, x poté xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx vzorek xx xxxxxx x xxx vodu x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx maximální teplotu.
Když xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, vyjmout xxxxxxxx, xxxxxxxxxx ji vodou x xxxxx sondu x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nahoru xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx naměřenými body xxxxxxx větší než xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), provést xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,004 °X, xxxxxx se x xxxxxxx se xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx na xxxxx xxx vzorky x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx; x xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx sonda xxxx xxxxxxxx měření xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx slepých xxxxxxxxx, dokud xx xxxxxxxxx shodné údaje.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výpočet
Pokud xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xxxxxxxxx potvrzena, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx součet xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx liché xxxxx, xx xxxxx xxxxxx zaokrouhlit xx xxxxxxxxx sudou xxxxxxx, xxx ukazuje xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stanovení |
Průměr |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Spolehlivost
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Schéma xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivity xxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxx xx výrobku. Xx vyjádřena množstvím xxxxxx x μx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Aktivita xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx, pokud xx xxxxx xxx 4 xx fenolu xx 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx xx vzorku xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dibromchinonchlorimidem x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx porovnání xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx fosfatázy xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Tlumivý xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Rozpustit xx xxxx 50,0 x hydroxidu barnatého (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] x xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x doplnit xx 1000 ml.
4.1.3 Xxxxxx 500 ml každého xxxxxxx xx 50 °X, xxx roztoky xxxxxxx, xxxxxxxxx, rychle xxxxxxxx xxx na 20 °C, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Přefiltrovat. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx stejným xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx vodě 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x NaBO2.4H2O a 20,0 x chloridu xxxxxxx (XxXx) a xxxxxxx na 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x fenylfosfát xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, ve 100 xx xxxxxxxxx roztoku (4.1.3) nebo 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 ml xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx kapky xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx xxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx teplotě. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx-1 neoddělí. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; před xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x provést xxxxx xxxxxxxx. Tlumivý xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx, x xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx ve 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx x hydroxidu xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5H2O) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 ml 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Vyhodit xxxxxx, xxxxx xxxxx barvu xxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 mg xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x přelít do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 ml, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 ml. Tento xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku, xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx xxxxxx.
5. Přístroje x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx pomůcky xx xxxx, jakož x xxxxx x xxxxxxxxx pro odběr xxxxxx xxxx být xxxxxxx vyčištěny. Doporučuje xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou xxxx čistění parou.
b) Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx používání xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Analytické váhy
5.2 Xxxxx lázeň nastavitelná xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx vlnové délce 610 nm.
5.4 Xxxxxxxx, 16 nebo 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 xx x 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx nálevky vhodné xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx filtry x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Postup
Poznámky:
a) Xxxxx xxxxxxxxx zabránit xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Stopy slin xxxx xxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xx xxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Testování xxxxxxx ihned po xxxxxx xxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxx dny.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx xx každé xx xxxx zkumavek (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx kontrolní xxxx slepý xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý xxxxxx xxxxxxxx dvě xxxxxx xx xxxxxx vodě; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx vodou xxxxxx xxxxxxxxxx folií, xxx xx xxxxxxxx xxxx zkumavka. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x xxxxxxxxx vzorek xxxxxxx způsobem. Xxxxxx 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx ihned xxxxxxxxx 60 xxxxx xx vodní xxxxx (5.2) a občas (xxxxxxx čtyřikrát) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx v bodě 6.3.1 xxxxxxxx dvě xxxxxx xx vroucí xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx zkumavky xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, vylít xxxxx xxx xxxxxxxxx x x případě xxxxxxxx filtrovat znovu, xxxxx xxxx filtrát xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Pokud absorbance xxxxxxxx v xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx absorbanci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 20 μx fenolu xx zkumavku xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se opatrně xxxxx do xxxx, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx kalibrační xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) připravit vyhovující xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx fenolu xx xxxxxxxx. Do každé x pěti xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx pipety 1 ml xxxx x 1 ml xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Do každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx roztoku xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet xxxxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx slepým pokusem xxxxxx absorbanci při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx každé xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx základě hodnot xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × D
kde
A xx množství xxxxxx x μg získané xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 je faktor xxxxxxx (5/12 x 1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxx) – viz 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (xxxxxxxxx) μg xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 a 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nepřítomnosti xxxxxx peroxidázy x xxxxx, xxxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx pasterováno, do 30 sekund xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx žádné xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza rozkládá xxxxxxx vodíku. Xxxxxxxx xxxxxxxx kyslík oxiduje xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 fenylendiaminu
Rozpustit x xxxxx xxxx (50 °X) 2 x 1,4 fenylendiaminu (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx a temnu, x tmavě hnědé xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx odstranit.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx vodíku
Vodou zředit 9 xx 30 % peroxidu xxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx stálý xxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxx, x láhvi xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Dát 5 xx xxxxxx mléka xx xxxxx zkumavky x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx zabavení xxxxxx více xxx 30 xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, reakce xxxx xxxxxxxxxx.
XX. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °X
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxx xx použije pro xxxxxx mléko, xxxxxxxxxxx xxxxx, UHT xxxxx xxxx sterilizované mléko, xxxxx bylo 15 xxx preinkubováno při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx vytvářejí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x kultivačním médiem x Xxxxxxx xxxxxxx x nechat xxxxxxxxx 72 xxxxx při 30 °X. Spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx 0,1 xx preinkubovaného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx teplotu 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx principu xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x dostatečným xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 ml xxxx xxxxxxxx o xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), skleněné xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s nepoškozeným xxxxxx, o nominálním xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx otvorem x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx sterilního syntetického xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 xx. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx mít xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek xx xxxx:
Xxxxxxx ze skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), nejméně jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx je nutné xxxx na xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx vysušit xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx odstředěné xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto pořadí xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x nakonec sušené xxxxxxxxxx mléko. Ohřev xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx přidat xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx uvést xx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx nerozpustí, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx do xxxxx xxxx po 12 až 15 xx xx zkumavek (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx médium
Kultivační médium (5.1) xx může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit pH xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx sterilizaci xxxxx zkumavka obsahovala 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx než 1 xxxxx po jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx prášku. Dodržet xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx vodní lázni (4.1.5) na 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx a pasterované xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx primárního xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx další xxxxxxxxx ředění xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, dokud xxxxx očekávat xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 denní xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, podle xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx v xxxxxxxx xx stěnami a xxxxxx částí xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx to, aby xxxxxxx k záměně xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx pochybností provést xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx od cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx považují xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx xxxxx misku. Xxxxx kolonie tvořící xxxxxx pokrývají více xxx čtvrtinu plochy xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Použít xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů na 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx počet misek xxx prvním xxxxxxx
x2 xx počet misek xxx xxxxxx ředění
d xx xxxxxx xxxxxxx, xx základě xxxxxxx xxxx získány první xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pět, xxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (pasterované xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx mikroorganismů xx xxxxxxxx xx "nižší xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx jsou všechny xxxxx vyšší xxx 300 a xxxxxxxx xx možné, provést xxxxx a xxxxxxxxx xxx převrácenou hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xx".
8.2 UHT xxxxx x sterilizované xxxxx
Xxxxx xxxxx než 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ještě nejsou x dispozici.
V. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °X
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 21 °X v xxxxxxxxxxxx mléce, které xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx při 6 xX x cílem xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xx x xxxxx při 6 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí organismy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Princip
Inkubovat xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °C. Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx médiem x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx kolonie x xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx xxxxx bodech xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx se xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx desetinného ředění x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx principu xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky ze xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 xx nebo xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx skladování xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx hrotem, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x výpustním xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr asi 90 xx 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx žádné nerovnosti, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx postupů:
a) v xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx použití autoklávu xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx zajištěno dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx by xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo víčka xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 g |
|
D-glukóza(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx suspendovat a xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx extrakt, trypton, xxxxxxx a nakonec xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx suspenze usnadňuje xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx kultivačního média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx nebo xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH kultivačního xxxxx.
Xxxxx se kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržet pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X postupem xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, xxxxx xx xx xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx je nezbytné xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx sterilaci xxxx xxxx hodnota 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx zkumavek (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředidla
Ředidlo (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx. Dodržet pokyny xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bodu 6.2.
7. Postup
7.1 Rozpuštění xxxxxxxxxxxx média
Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření nechat xxxxxx rozpustit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
7.2.1 Inkubovat x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 100 ml xx xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx pěny nebo xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx primárního xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx přijít xx kontaktu s xxxxxxxx. Teplota ředidla xxxx xxx přibližně xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx tak xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní pipetou (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být vyšetřena xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé ředění (8.1.1) xxxxxxxxx jednu xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba mezi xxxxxx přípravy vzorku xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu mléka, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx stát xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx sebe xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, ani být x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx tlumeném xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx to, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx více xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka podle xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 n2)d xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxx
x2 je počet xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, na xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx byla sudá.
Příklad:
Ředění 10−2: 278 a 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × x", xxxxxxx "x" je xxxxxxxxxx xxxxxxx nejnižšího xxxxxxx zředění.
8.4 Xxxxx xxxx všechny počty xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx je xxxxx, xxxxxxx xxxxx x vynásobit jej xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX OBSAHU KOLIFORMNÍCH XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx počítání xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jež jsou xx popsaných xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Petriho xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx inkubovat xxx 30 °X. Xxxxxxxx charakteristické xxxxxxx x, xxxxx xx xx nutné, potvrdit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Poté xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 pH-metr xx zařízením xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx jehla xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx nikl-chróm.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými uzávěry x xxxxxxx 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, s výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Dno nesmí xxx žádné nerovnosti, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx postupů:
a) v xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dbát xx xx, aby bylo xxxxxxxxx dostatečné proniknutí xxxx: xxxxx se xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx být volné.
Pomůcky xx xxxx sterilizované x autoklávech by xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx sterilizovány v xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx červení, xxxxx x laktózou (XXXX xxxx). Xxxxxx selektivní xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Suspendovat x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx minut. Xxxx důkladně promíchat.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud to xx xxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx rychle xx xxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx do sterilních xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X době xxxxxxx zkontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Použít xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxx přípravě.
5.2 Xxxxxx xxxx x brilantovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 g |
|
Laktóza (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x uvést xx varu.
Zkontrolovat pH xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °C.
Rozdělit xxxxxx xx 10 xx do xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx déle xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Upravit xX, xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX agar) xxxxxxx v bodě 5.1.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, aby byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx pěny xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx tři xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx přenést (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx tří xxxxx (4.2.4) a tím xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, aby xx inkubaci xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mléka x smícháním x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou xxxxx x 12 ml xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx byl xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx VRBL xxxxx (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
Přenést xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, ani být x xxxxxxxx xx xxxxxxx a vrchní xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Počítat kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 150 xxxxxxx. Počítat xxxxx xxxxxxx kolonie x průměru nejméně 0,5 xx, x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx všechny nebo xxxxxxx kolonie xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Konfirmační xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx test x xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx pomocí xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx obsahující xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx kolonie, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx tvoří plyn.
7. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Použít xxxxxxxx xxxxx obsahujících xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, vypočítat xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX je celkový xxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx vyšetřovaného xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 ml).
Počet xx xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx než 100 kolonií. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx všechny počty xxxxx než 150 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXX SOMATICKÝCH XXXXX
Xxxx xxxxxxxx popisuje dva xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
B. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Mikroskopická xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx postup popisuje xxxxxx xxx stanovení xxxxx buněk xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (viz B.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento postup xx somatickými xxxxxxx xxxxxxxx buňky, například xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx možné zřetelně xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 ml xxxxx xx 1 xx2 povrchu xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx. Počítání xx xxxxxxx pod xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Činidla
Musí xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová kyselina xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx a xxxxxxxxx se xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx a 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx modř, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 hodin xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °X x přidat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Přefiltrovat xxxx xxxxx o xxxxxxxxx velikosti xxxx 10 až 12 xxxxxxx x uchovat xxxxxxx roztok ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx láhvi. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx usazenin, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 ml x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 xx × 5 mm xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx nebo standardní xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 mm xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Horizontální xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) pro sušení xxxxx vrstvy.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx mléka.
5.7 Podložní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka musí xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxx po xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx překročit 6 °X. Vzorek xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Příprava xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.2), například 20 °X.
6.3 Předběžné ošetření xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, vysušit xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) odebrat 0,01 xx xxxxx ze xxxxxx připraveného, jak xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx vnější xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx styku x xxxxxx. Přiložit xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx tenkou xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a vyšetřit xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx xx barvícího xxxxxxx (4). Xxxxx x, pokud xx xx xxxxxxxx, vysoušení xxxxxxxx ventilátorem (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx se přebytečné xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx sušit a xxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx zvoleného xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx průměr mikroskopického xxxx (5.7).
7. Počítání x xxxxxxx
7.1 Počítání xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx počítají xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx jasně xxxxxxxxxxxx x x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Počítat xxxx xxxx pole xx střední třetině xxxxx vrstvy x xxxxxxxxx ty pásy xxxx xxxx, které xxxx xxxxxxx xxxxx x okrajových xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vrstev x tudíž x xxxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx různých částí xxxxx vrstvy. Počítání xxx xxxx provádět xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx polí xxxxxxxxxxxx takovým způsobem, xxx všechny části xxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx počtu xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx počítání xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx počítání, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vzorků xxxxx xxx vyšší xxx xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx mléka x obsahem 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx somatických xxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx spočítat, xxxx xxx xxxxx Poissonova xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, aby xxxx xxxxxxx kritérium xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx rozdělení:
M = X = s2,
kde:
M xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx odchylka.
Variační xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx počet xxxxxx (buněk), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 pro XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 7.3.1 nebo 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx, které xx xxxx počítat, je 5 xx. Šířka xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx faktor = 20 × 100 / x × b
kde:
d xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x mm, xxxxxxxxx xxxxxxxxx sklíčkem x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Počítání mikroskopických xxxx xx střední xxxxxxx xxxxx vrstvy xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v xx, xxxxxxxxx podložním xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7)
s xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xx xxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxxx somatických xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx, který xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) používat xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxx s chemickou xxxxxxxxxx nebo bez xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Definice
Pro xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) se xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx x s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Část xxxx xxxxx se xxxx přenese xx xxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx disk, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx sklíčko.
Každá xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx zesiluje x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx v xxxxxxxx xx mililitr.
4. Činidla
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx čistoty x.x.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
4.1 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Hydrogenftalat draselný |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 až 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (zásobní roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx na 1000 ml.
Příprava:
Rozpustit ethidiumbromid xx vodě. Skladování xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx chráněné xxxx xxxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx roztoku (4.2) x xxxxxxxx roztokem (4.1) xxx, aby xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Pracovní xxxxxx by neměl xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
|
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx nemělo xxxxxxxxx xxxxxx dní.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na principu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mají počítat, x prahovou xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Kalibrace xxxxxxxx se provede xxxxx xxxxxx výrobce xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx obsah xxxxx xxx stanoven xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Vodní xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx uzávěrem, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Vzorek xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx zkumavce (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počítání xx může xxxxxxx xx po uplynutí 24 hodin xx xxxxxxxx, neboť xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx nízký. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Konzervace xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx konzervace xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx konzervačních xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx orthoborité ve xxxxxx xxxxx být xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx konzervovaný xxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 0,2 x xx 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 72 hodin xxx xxxxxxx 6 až 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx azidem xxxxxx x xxxxxxx koncentraci 0,024 x/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx do 48 xxxxx po xxxx xxxxxx;
- bronopol:
vzorek může xxx xxxxxxxxxxx bronopolem x konečné xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 xx, xxxxx je vzorek xxxxxxxx na teplotu 6 až 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx xxx konzervován xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx ještě konzervován xxxxxxx až 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx, se xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 hodin xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, neboť xxxxxxxx xxxxx být xxxxxx nízké. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, vzorek xx xxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx vzorek nejméně xxxxx xxx starý xxxxxx xx vodní xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx skladovat xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání se xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut xx xxxxxxxx ohřívání (xxx 7.2). Bezprostředně před xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx co nejlepšího xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx ředění a xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx provedeny x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) a reprodukovatelnosti (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx jsou x dispozici na xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 buněk/ml
(odpovídá xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xx národní xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční postup xxx detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx počáteční xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxx xxxxxx mléka, xxxxx xxxxxxxx antibiotika x xxxxxxxxxxx. Popisovaný xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou založeny xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx organismu. Xxxxx postup xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx x identifikaci penicilinu
Tento xxxxxx se xxxx xxxxxx xxx konfirmaci xxxxxxxx kvalitativního xxxxxxx, xxx identifikaci xxxxxxxxxx x stanovení jeho xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x tepelně xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx v xxxx tabulce:
Detektovatelné xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx testu |
||
|
Negativní |
Pozitivní |
|
|
Benzylpenicilin |
0,002 |
0,006 |
|
Ampicilin |
0,002 |
0,005 |
|
Cloxacillin |
0,015 |
0,035 |
|
Nafcilin |
0,006 |
0,011 |
|
Tetracyklin |
0,10 |
0,40 |
|
Oxytetracyklin |
0,20 |
0,45 |
|
Chlortetracyklin |
0,15 |
0,50 |
|
Chloramfenikol |
7 |
15 |
|
Dihydrostreptomycin |
4 |
13 |
|
Neomycin |
1 |
22 |
|
Kanamycin |
9 |
28 |
|
Bacitracin |
0,06 |
0,14 |
|
Erythromycin |
1 |
2,25 |
|
Rifamycin |
0,01 |
0,14 |
|
Diafenylsulfon |
0,01 |
0,1 |
|
Sulfametazin (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx extrakt |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 g |
|
|
Agar |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx uvést do xxxx. Xxxxxxx xX xxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx po 10 xx xx zkumavek xxxx xx 100 xx xx xxxxxxxx x naklonit x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx sodný |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Za občasného xxxxxxx xxxxx do xxxx. Xxxxxx trimethoprim xxxx tetroxoprim x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Upravit xX, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Roztok xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu
Složení:
|
Trimethoprim |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprim (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 ml |
Příprava:
Rozpustit xx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, pokud xx xx nutné, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx dostupný x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx sterilní xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 IU/ml), x to xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx destilované vodě.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx penicilinu (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x doplnit xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 IU/ml).
5.2.3 Připravit 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μg penicilinu/ml (= 0,0067 IU xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx pracovního xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 ml mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx x den xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx preparát mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) ve vodě, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Rovněž xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx látek; xxxx xxxxx se xxxxxxx xx lahví x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx na 100 °X, xxxx xx uloženo xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °X xx 6 °X xx xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx organismus xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 xx xxxxxxxxx s xxxxxx X 953.
5.4.2 Připravit xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx testovací kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultura, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx kultura xxxx xxx skladována xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx do xxxxxxxx xx zásobní kulturou (5.4.2) x vymýt xxxxxxxx smyčkou xxxxx xx xxxxxxx agaru. Xxxxxxxx xxxx se xxxxx xxx 0 xx 5 °C x použije se xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Petriho misku (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx skleněné xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx kultury (5.4.2) xxxx kultury xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx mělo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 hodin.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx vody xx Xxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x povrchu.
Přenést xxxxxxxx xxxx do xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx a důkladně xxxxxxxxx. Kultury, xxxxx xxxxxx ihned xxxxxxxxxxx, xx se měly xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °C.
5.5.5 Po 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx by xxxxxxxx xxxx xxxx vykazovat xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx, xxxx xx xx nahradit novou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx zkumavek/ampulí
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx xxxxxxx médium (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx média (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx zkumavky nebo xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx média (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, v xxxxxxx ampule, zatavením xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, poté xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx ve xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx týž xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx při 0–6 °X, pokud xxxx xxxxx po xxxxxx přípravě xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx do 24 xxxxx xx odběru, x xx té xxxx xx skladují xxx teplotě 0-5 °X. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xx 24 hodin, xxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx penicilinu.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x testy (5.2 x 5.3).
6.3 Xx každé xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) přenést 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Pro xxxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx namísto xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Postupem xxxxx bodu 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx použití kontrolního xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx zkumavky/ampule a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (viz 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx antibiotik nebo xxxxxxxxxxx ve vzorku x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (6.5) xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Částečné xxxxxxxxx xxxxxxxx agarového xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích xx vzorkem xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x koncentracích xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx straně 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx ve zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx zabarvení xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx zkumavkách/ampulích, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx životaschopné xxxxx x xxxxxx musí xxx podrobeny xxxxxx xxxxxxxxx x čerstvě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Potvrdit xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 a 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx nezbytné xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxx skladovat, xxxx xxx zmraženy, xxx xx zabránilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Postup xxx xxxxxxxxxx penicilinů x xxxxxxxxx koncentrace
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje konfirmační xxxx penicilinu xxxx xxxxxx antibiotik, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu ve xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx (A.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx A.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, xxxxx xxxxxxxx postupem xxxxxxx čirou xxxxxxxxx xxxx nejméně 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx antibiotika, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamáza), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx bez xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx látkou je xxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx antibiotika včetně xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) xxxxxxxxxxxx, inhibiční xxxxxx ve vzorku xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xx xxx xxxx reziduum [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, kapitola XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické peniciliny, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx x nemohou xxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx papírový disk xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx vyšetřit, xx xxxxxx xx xxxxxx agarového xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx stearothermophilus xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx narušuje xxxxxxx xxxxxx. Čirá xxxx xxxxx disku xxxxxxx, xx jsou x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky pro xxxx. Xxxxxxxx čiré xxxx mimo xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x druhu inhibiční xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx a xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx A.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx A.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, o xxxxxxx 9 až 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx média, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Musí xx xxxxxx destilovaná voda xx skle xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxx, poté xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xx přidání xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce xxx xxxxxxxxxxx látek (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 IU/ml).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Rozpustit xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Tento xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx až xxxxx týdny při 0 °X až 5 °C.
Poznámka
Pro penicilinázu xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx účely xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx stačí xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx, zda tento xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx nutnosti xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx možné xxxxxx xxxxx dostupné xxxxx napuštěné xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zjistí, xx xxxxxxxx odpovídající množství xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx na 55 xX.
5.6.2 Do xxxxx přidat xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5) k xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, a důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx misky (X.4.2.2), předem xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 xx 0,8 xx vrstva. Xxx Xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 ml xxxxxxxxx xxxxx, aby xx vytvořila 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx misky xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx média, xxxxxx xxxxx xx xxxxx x obrátit xx xxxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vody xx xxxxxxx agarového xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx používány xxxxxxxxx dva týdny, xxxxx xx xxxxx xx přípravě vloží xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx a uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Postup
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 U xxxxxx x pozitivním nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx na 80 ± 1 °X, xxx xx vyloučil xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, poté xxxxxxx xxx 10 ml xxxxxx zahřátého xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxx přidat xxx 0,4 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx disk (4.3) xx vzorku xxxxx (6.1.2) pomocí xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Odstranit xxxxxxxxxx xxxxx otřením disku x xxxxxxxx se xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxx Xxxxxxx misky (5.6) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Disky napuštěné xxxxxxx xxxxxx mléka xxxx být xxxxxxxx xxxxx xx druhého xxxxxxx 20 xx x xx okraje xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx disky (4.3) xxxxxxxxx standardním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx napuštěné xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx disků.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx rozmístění všech xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx identifikaci, obrátit xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 hodin xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx světla, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxx xxxx inhibiční xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx zóny xx změří.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx disků xxxxxxxxxxx vzorky mléka, xxxxxxx xxxxxxx je xxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx x testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 se xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zahřátého mléka (6.1.2) x se xxxxxxx ošetřeným xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx možné xx xxxxxx xxxxx ponořit xxxx napuštěný penicilinázou (5.3.2) a xxxxxx xx xx testovací xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx průměr xxxxxx inhibičních zón xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz 2)
7.1 Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx, xxx xxxx zóna xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vzorkem xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než xxxx xxxxx disku napuštěném xxxxxxxxxxx roztokem penicilinu (5.2x)), inhibiční xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μg/ml.
7.2 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny xxxxx disku nepuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny kolem xxxxx xx vzorkem xxxxx, mléko xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx kolem xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, x xxxxxxxxx xxxx polosyntetický xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx být xxxxxxxxxxxx penicilinázou xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx penicilin xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu xxxx xxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx výpočty xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce (5.2 x) xx d)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 koncentrace xxxxxxxxxx x průměrem xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx lze sestrojit xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx pořadnici x xxxxxx zón xx xxxxxx. Inhibiční xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se graficky xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxx vypočítat xx základě xxxxxxx xxx vzorků xxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx přesné xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx nejméně xxxxxxx větší, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) xxxx xxxx obsah xxxxxxxxxxx látek jiných xxx penicilin.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx x jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx VII bodu 2, xxxxx postup xxxxxxxxxxx pokyny, které xxxx být xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
Vyšetření xx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx mléko proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, xxxxx xxx x počítání xxxxxxx xxx 30 °C x 21 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx test xx xxxxxxx patogeny xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že mléko xx nějakou spojitost xx propuknutím otravy xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy x xxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxx způsobem, který xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x zdravotní xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx ošetřené xxxxx xxx obchod xxxxxx Společenství. Xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx patogenní xxxxxxxxxxxxxxx xxxx být výsledek xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "nepřítomnost" x objemu pasterovaného xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx postup. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.