Rozhodnutí Xxxxxx
xx dne 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx syrového mléka x tepelně ošetřeného xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx dne 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx otázkách xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx pozměněnou xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x zejména na xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x testování, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxx x tepelně xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, xxxxxx xxxxx, bodu xxxxxxx x přítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxx pasterované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, přítomnosti xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx mrznutí;
vzhledem x xxxx, xx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx a XXX xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxx mikroorganismů, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx x technických xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy a xxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xx xx xxxxxxx xxxxxxxx pokračovat x xxxxxxxxxxxx podmínek, xx kterých se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x testování; xx v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx členské státy xx xx, xxx xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxx analýzy a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx výsledků;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jsou x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx pasterované xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx fosfatázy,
- stanovení xxxxxxxx peroxidázy,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů při 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních bakterií – xxxxxxxx kolonií xxx 30 °X,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx UHT xxxxx x sterilizované xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, stanovení kritérií xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx podle pravidel xxxxxxxxxxx x příloze X.
Článek 5
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x testování xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 jsou xxxxxxx x příloze XX.
Článek 6
Xxxx rozhodnutí xxxx přezkoumáno xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx se zohlednil xxxxx vědeckých a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 14. xxxxx 1991.
Za Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka
I. OBECNÁ XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx výsledků, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx členských xxxxx x laboratoře xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx tato ustanovení.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, ředění nebo xxxx musí xxx xxxxxxx xxxx destilovaná, xxxxxxxxxxxx xxxx demineralizovaná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být bez xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "xxxxxx vodou".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není stanoveno xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Seznam přístrojů x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek xxx různé xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx použití x se zvláštní xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx xxxxxx na 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx o xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx průměrem dvou xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxxx, jinak xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorku.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Kritéria xxxxxxxxxxxxx uvedená pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Opakovatelnost (x) xx xxxxxxx, xxx kterou xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxxxxxx postupem s xxxxxxxxxx výrobkem xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, stejný přístroj, xxxxxx laboratoř, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) je xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx samostatných xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (různí xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x příslušných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx spolehlivosti xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx vypočteny x xxxxxxxx uznaných xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx používají xxx hodnocení postupu. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx opakovatelnosti a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx odhadnuty.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x testování xxxx xxxxxxxx použitý postup x xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx, xxxx volitelné xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx. Xxxxxx x testování xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX MLÉKA
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného mléka xxxxxxxx x přímé xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxx x xxxxxxx, nádržích xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx byli xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vyškoleni.
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx budou reprezentativní x v xxxxxxx x celou šarží.
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x jiného vhodného, xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx použití (xxxxxxxxxx, odběr xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx a xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx povrchu, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx žluklé xxxxx. Naběračky xxxx xxx xxxxxxxx pevnou, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x nabírání xxxxxx x xxxxxxxx hloubky xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx alespoň 50 ml.
Vzorkovnice x xxxxx musí být xxxxxxxx, xxxxxx nebo x vhodného plastu.
Materiály xxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx trhlin x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx vzorků (xxxxxx xxxxx) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx bodu 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx použije xxxxx vybavení, musí xxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx vyčištěno x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx příslušný orgán, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx odběru xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx ohledu xx xxxxx, xxxxx xxxx být provedeny, xxxxx musí být xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď xxxxx, xxxx mechanicky.
Vzorek xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx xx x nádrže odebírá xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx potřebám xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx byly tyto xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x při xxx bylo možné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx másla xxxxx přepravy.
4.2 Ruční xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x xxxxx x konví xx xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx plunžrem xx xxxxx nebo xxxxx xxxxxx x dolů, xxxxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x aby xx xx xxxxx konve xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx reprezentativní xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx bodu 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x chlazených xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxx podniku
Míchat xxxxx mechanicky xxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxx
Xx nezbytné, xxx xxxxx xxxx řádně xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rozdělení xxxx xxxx být xxxxxxxx další xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx zásilky, x xxx se xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x celé xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx má provést xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, x každé nádoby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx každý vzor. Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx se jednotlivé xxxxx těchto xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x poměru x xxxxxxxx, xxxxx xx nachází x xxxxxx, ze které xxx xxxxx ze xxxxxx odebrán. Xx xxxxxxxxxx xx odebere xxxxx (xxxx) vzorek (xxxxxx) x těchto xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Odběr xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Před xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X promíchání obsahu xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka xxxxxxxxxx xxxxxx na době, xx xxxxxx bylo xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx postup xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx x jednotlivých xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx shodu xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď x xxxxxxx xxxxx xxxxx, nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx z xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (syrového mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, pokud xx xxxxxx xxxxxx xxxx u obou xxxxxx odebraných xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx nádobě s xxxxxxxxxxx otvorem ve xxxxxx xxxxx xxxx x místě vypouštění xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx ani xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Proto se xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx otvoru. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nádob xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x cisternových xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx otvoru; xxxxxxxx je ponořena x mléce,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx cisternových xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xx pumpu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, stlačeným x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx x objem xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoří xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx musí xxx xxxxxxx vzorek,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprezentativní vzorek x šarže xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx používání xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxx, ze xxxxxxx xxxx xxx odebrány xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- maximální přenos,
- xxxxxxxxx, které může xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je nutné xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jde x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx skládají x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx xxxxxxxx, x xx, xxxxx je xx možné, xxxxx xx xxxxxxxxxx (v xxxxxxx pasterovaného mléka x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx tepelně xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x sterilizovaného) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, která xxxx být xxxxxxxxx, x to podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx vzorku
Vzorek xx xxx být xxxxxxx identifikačním xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx příslušného xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x době xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx x testování, xxxxx má být xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx slunečnímu xxxxxx. Je-li xx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx testování xxxx xxx přepravovány x xxxxxxxxxx při xxxxxxxxx 0 xX až 4 oC. Doba xxxx odběrem a xxxxxxxxxx musí xxx xx xxxxxxxxx x x žádném xxxxxxx xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx souhlasit, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX xx 6 oC, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x testováním delší xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Xxxx mezi xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx a v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx syrového xxxxx x pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x doba mezi xxxxxxx vzorku a xxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx, jsou xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx použitelných postupů.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx mrznutí
II. Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy
III. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C
V. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X
XX. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – počítání kolonií xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx obsahu somatických xxxxx
XXXX. Xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganismů
I. STANOVENÍ XXXX MRZNUTÍ
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, syrového, xxxxxxxxxxxxx, UHT xxxxx xxxx sterilizovaného mléka xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx ochlazována elektrickým xxxxxxxxx zařízením x xxxxxxxxxxxx snímač xxxxxxxxx xxxxxxx teploměr.
K xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx bod xxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx začátku xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx mohou lišit xxxxx křivky xxxx xxxxxxx různých druhů xxxxx, ale x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx referenční xxxxxx vyžaduje použití xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx rutinního xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxx využít xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x mléce xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx vyšší xxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek xxxxx xx v xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podchladí xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx vibrací xx xxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx k xxxxx, které odpovídá xxxx xxxxxxx vzorku.
Přístroj xx kalibruje takovým xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx postupem jako xxx vzorky xxxxx xxxxxxx přesné xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Za těchto xxxxxxxx plató xxxxx xxx mrznutí mléka xx xxxxxxxx Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxxxx řízené xxxxxxxx xxxxx, termistorového xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x příslušným xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, míchačky xx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx i xx zkumavek xx xxxxxx.
4.1.1 Chladicí xxxxx
Xx xxxxx použít dva xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx typ
Dobře izolovaná xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kapalinu, xxxxx xx xxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 0,2 °C. Teplota xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Je důležité, xxx x xxxxx xxxx udržována xxxxxxxxxx xxxxxxx kapaliny. Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx zkumavky xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Teplota xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (ethylenglykolu).
4.1.2 Xxxxxxxxx a příslušný xxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx průměru 1,80 ± 0,2 xx x o xxxxxxx xxxxxx maximálně 0,31 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí xxx nižší xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx napětí, xxxxx x konstanta xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx při − 0,512 °C xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Maximální xxxxxxxxx xxxxxx může být ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx v pracovní xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx musí xxxxxxxx x ose xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx je 44,6 ± 0,1 mm xxx horním xxxxxxx xxxxxxxx (viz xxxxxxx xx straně 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx této polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx odpor x xxxxxx xxx xxxxxxx X,
− xX / xX × 1 / R xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx závisí xx materiálu použitém xxx xxxxxx termistoru. X xxxxx praxi xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx měření
Použitý xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx vyhledávání prvního xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx vyrovnává Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporů, jejichž xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (vyrovnávací) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx linearity x xxxxx xxxxxxx x více xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace musí xxx možné xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx stupnice je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx zařízení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x rozmezí xx 0 °C xx –1 °C.
Stabilita xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx odchylka xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx teploty xxxxxx xxxxx než 0,001 °X.
Xxxxxxxxx obvodu xxxx být taková, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx přístroje nevznikla x žádném xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °C xx – 0,600 °C xxxxx chyba než ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx míchání xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx o xxxxxxx 1 až 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx měla být xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx asi 1,5 xx nad xx pod xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x dostatečným xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 mm), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx teplota testovacího xxxxxx xxxxx stanovení. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx zkumavky.
4.1.5 Xxxxxxxx xx vyvolání mrznutí
Může xx být xxxxxxxx xxxxxxxx, které xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx x bodu xxxxxxx. X xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx; jedním xxxxxxxx xx xxxxxxxx rozkmitu xxxxxxx xx jednu xx dvě sekundy xxx, aby xx xxxxxxxx dotýkala xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx na xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx a xxxxxxx xxxxxx je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx nesmí xxxxx x xxxx xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx xxx značku xxxxxx xxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 mm xxx xxxx zkumavky), xxxxx uvádí xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx buď xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx kolísání nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx hodnoty, xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 xx, xxxxx A.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Činidla
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, převařená x xxxxxxxxx na 20 ± 2 °X, ve zkumavce xxxxxxxxxxx xxxx uhličitý.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., jemně mletý, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x elektrické xxxx xxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx teplotě 130 ± 1 °X x xxxxxxx x zchlazený na xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx (viz xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Rozpustit v xxxxxxxxxxx vodě (5.1), xxxxxxxxxxxxx přelít xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx x xxxxxxx xx značku xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °C.
Skladovat xxxxxxx nejdéle xxx xxxxxx při xxx 5 °C v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx použitím xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x několikerým xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx xx xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xx suché x čisté xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxxxx byly xx xxx čtvrtin prázdné, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx nastaven tak, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx než 1 °X xx xxxxxxx, xxx níž se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, průvanu xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx a xx byl xxxxxx xxxxxxx 12 hodin xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx sondy, rozkmit xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx standardní roztoky (xxx tabulka xxxx), xxxxxxx xxx mrznutí xx těsně nad xxxx těsně pod xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx by xxxxxxx neměl být xxxxx xxx – 0,100 °X.
(X xxxxxxxxx xxxx v současné xxxx xxxxxxxxxx kryoskopů xx příslušný xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx se ustálí xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X těchto xxxxxxxxx výběr jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx tento xxx xxxxxxx, jako xxxxxxx x kalibračních xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx a čisté xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx při kalibraci xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx zkumavky xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxx stejné xxxx xxxxxxx vzorků mléka.
Podle xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kalibrace, xxxxx xxxxxx z kryoskopu xxxxxx roven xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x druhým xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x střídavě xx xxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxxxx po xxxx xxxxxxxxxxx odečty xxx xxxxx roztok xxxxxxxxxx správné xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, aniž xx xxxx nutná xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kryoskop xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx mléka, xxxx xx byla xxxxx jakákoli xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx mezi 0 °X x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx odstranit všechna xxxxxxxxx cizí xxxxxxx xxxx tuhý xxxxxx xxx xx vzorku xx xxxxx x xxxxx xxxxxx a xxxxxx opatrně xxxxxxxxx. Xxxxx xx použije xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx a xxxx xxx xxxxxx xx laboratorní xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx je xxxxx xx ohřát xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx na xx, xxx standardní roztoky x xxxxxx xxxxx xxxx xxx použití xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Stanovit xxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxxxx možno xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Vzorky, xxxxxxx xxxxxxxx přesahuje 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX mléko x sterilizované xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x otevřené xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, případně xxx xx sonda xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx kryoskop a xxxxxxx se, xxx xx chladicí kapalina xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Pokud xxx xxxxxxxx xxxxxx alespoň 12 xxxxx, zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx míchačky x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx sérií xxxxx xxxxx bod xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx x bodem xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx při xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebudou xxxxx x xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx xx průměr xxxxxx hodnot liší xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxx než 0,002 °X, kryoskop se xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx x xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx kontrola kalibrace xx provádí xxxxxxx xxxxxx xx hodinu, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx výrobce.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx protřepáním x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx přimíchal vzduch.
Pomocí xxxxxx přidat 2,5 ± 0,1 ml xxxxx xx suché x xxxxx zkumavky xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxx opatrně xx xxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x chlupy nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx zkumavku xx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x přesností xx 0,1 °C.
(U některých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosáhne xxx, xx se xxxxxxx, xxx xxxxxxx začalo, xxxx xx ručička xxxx nitka xxxxxxxxxxxx xxxxx x příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx se xxxxxx x zopakuje xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxx vzorek xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx vzorku se xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx se xxxxxxx xx této xxxxxxx, xxx se rozpustil xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx zchladit xxxxxx na testovací xxxxxxx x ihned xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx rychle xxxxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxx zůstane po xxxxxxx dobu konstantní, x poté xxxxxx. Xxx mrznutí xxxxxxxx xxxxxxxxx teplotě xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxx hodnotu xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx konstantní, a xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx vzorek xx vzorku a xxx vodu x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx než pro xxxxx. Je nezbytné xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx uspokojivě xxxxxxxxx, vyjmout xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx vodou x otřít xxxxx x míchačku xxxxxx xxxxxxx nahoru xxxxxx, xxxxxx x chlupy xxxxxxxxxxxx látkou a xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx než xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,004 °X, xxxxxx xx x použijí se xxx výpočet konečného xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx sondy
Po xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx na místo xxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx sonda zůstala x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx možné; v xxxxxxxx případech xx xxxxxxxx se ujistit, xxx xx sonda xxxx začátkem měření xxxxx zchlazena, například xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx považuje xxxxxx obou dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx bod xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx místa.
Pokud xxxxxx xxxx xxxx přijatelných xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx zaokrouhlit xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stanovení |
Průměr |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Spolehlivost
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r): 0,004 °X
9.2.2 Reprodukovatelnost (R): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Schéma xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx aktivity xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Aktivita xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx 4 xx fenolu na 1 ml.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx xx vzorku xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx fenol reaguje x dibromchinonchlorimidem x xxxxxxx dibromindofenolu (xxxxxxxxx xxxxx), který xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx fosfatázy xxx xxxxxx.
4. Činidla
4.1 Tlumivý xxxxxx boritanu x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] a xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (H3BO3) x doplnit na 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx každého xxxxxxx na 50 °X, xxx roztoky xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxx xx 20 °X, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx vyvolání xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X a 20,0 g xxxxxxxx xxxxxxx (NaCl) a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx roztoku (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx dvojsodného xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx kapky xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx xxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx a xxxxxx xxxx, dokud xx xxxxxxx-1 neoddělí. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx je možné xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx bezprostředně před xxxxxxxx, x to xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx vodě 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (ZnSO4 · 7X2X) x 0,6 x síranu xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x doplnit xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx láhvi x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok, xxxxx xxxxx barvu xxxx xx xxxxxx xxx xxxxx měsíc.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx vodě 0,05 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Standardní roztok xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx fenolu x přelít do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 ml, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x doplnit xx 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré xxxxxxx xx xxxx, xxxxx x xxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx destilovanou xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx způsobit xxxxxxxxxxx fenolů x xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx.
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Spektrofotometr xxxxxx xxx xxxxxx xx vlnové xxxxx 610 nm.
5.4 Zkumavky, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 xx x 10 xx.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx o xxxxxxx nejméně 9 xx pro střední xxxxxxxx filtrace.
5.8 Odměrné xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx slin xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xx xxxxx se xxx xxxxxxx. Xx proto xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx ihned xx xxxxxx vzorků. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v chladničce, xxxxx ne déle xxx xxx xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 ml xxxxxx xx každé xx dvou xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx jako kontrolní xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý xxxxxx xxxxxxxx dvě minuty xx vroucí xxxx; xxxxxxxx a kádinku x vroucí xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx folií, xxx xx prohřála xxxx zkumavka. Rychle xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx zbytek xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx způsobem. Xxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx.
6.3.3 Vzorky xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx vodní xxxxx (5.2) a xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx v xxxx 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou teplotu.
6.3.5 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, vylít xxxxx dva mililitry x x případě xxxxxxxx xxxxxxxxx znovu, xxxxx xxxx filtrát xxxxxxxx čirý; xxxxxxxxxx 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Přidat 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), promíchat x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx zabarvení při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 převyšuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx 20 μg xxxxxx xx zkumavku podle xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Připravit xxxxxxx smícháním xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx do xxxx, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) připravit xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx fenolu xx xxxxxxxx. Xx každé x pěti xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx pipety 1 xx xxxx x 1 ml xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Do každé xxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx s kontrolním xxxx slepým pokusem xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.4.5 Na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx hodnot xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx fenolu xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx mililitr xxxxxxxxxxxxx mléka podle xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx xxxxxx x μx xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx xxxxxx zředění xxx zředění xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x případě xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 ve spojitosti x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Spolehlivost
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (předběžně) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, xxxxxx uvedené x 7.2.1 x 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nepřítomnosti xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx, který xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx je mléko xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zabarvení.
Negativní xxxxxx xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx xx promíchání xx neobjeví žádné xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza rozkládá xxxxxxx vodíku. Xxxxxxxx xxxxxxxx kyslík xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °X) 2 x 1,4 fenylendiaminu (X6X8X2) a doplnit xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x temnu, x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx dvou dní xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, kterou xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx 9 xx 30 % peroxidu xxxxxx x xxxxxxx xx 100 ml. Pro xxxxxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx vodíku xx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx skladován v xxxxxx x xxxxx, x xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx mléka xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx víčkem.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx xxxxxxx peroxidu xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po promíchání xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx než 30 sekund xx xxxxxxx xxxxxxx, reakce xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °C
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií při 30 °C. Xxxxxx xx použije xxx xxxxxx mléko, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX mléko xxxx sterilizované xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx preinkubováno xxx 30 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx za popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Petriho xxxxxxx x nechat xxxxxxxxx 72 hodin při 30 °X. Spočítat xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 xx xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xxxx na 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Horkovzdušná xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx teploty, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Mechanické xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka schopná xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx s 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx x pracující xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k promíchání 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx zkumavky o xxxxxx 20 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 ml, x xxxxxxxxx otvorem x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého skla xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 xx. Vnitřní xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx mít xxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx sterilizují jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxxx 170–175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx by xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx odstředěné xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Toto se xxxxx srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx inhibiční látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto pořadí xxxxxxxxxxx x rozpustit xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Xxxx xxxxxx agar x xx xxxxxxx xxxxxxx uvést do xxxx, dokud se xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného nebo xxxxxxxx chlorovodíkové, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 při 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx médium (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx zkumavek (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx kultivační médium xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx teplotě xxxx 1 a 5 °X, xxxxx xx xxxx než 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx médium
Kultivační xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud není xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační médium xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx pepton/sůl
Složení:
|
Pepton |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pH-metrem (4.1.4); xxxxx to xx nezbytné upravit xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 mol/l) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) tak, xxx po sterilizaci xxxxx zkumavka obsahovala 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 a 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx prášku. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Upravit xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního média
Před xxxxxxxxx mikrobiologického xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx množství kultivačního xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) na 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku mléka
Vzorek xxxxx řádně promíchat, xxx xxxx mikroorganismy xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx nádoby xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx a pasterované xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 sekund xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) do 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx pokynů x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx ředění 10−2.
X xxxxx xxxxxx další xxxxxxxxx ředění xx xxxxx postup opakuje xxx dlouho, xxxxx xxxxx očekávat přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho misek
7.5.1 Xxxxxx mléko: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx vhodnou misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx při 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx misky.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx asi 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx média (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx rozložení kolonií.
Doba xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, podle xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a čistém xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx misky xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx více xxx xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx se nesmějí xxxxxxxx dotýkat, ani xxx v xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Syrové a xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx misek xxxxxxxxxxxx 10 až 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) d
kde:
∑C ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je objem xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx počet misek xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx vlevo xxxx xxxx.
Xxxxxxx (pasterované xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx nižší než 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx převrácenou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx jako "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx mléko
Počty xxxxx než 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 21 °C
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X v xxxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxx xxx dní xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x xxxxx xxxxxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxxx xx x mléce xxx 6 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx vytvářejí počitatelné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx médiem x Xxxxxxx miskách a xxxxxx inkubovat 25 xxxxx při 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný udržovat xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx se xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx sklo, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx vzorku xxxxx xxxx desetinného xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxxxxxx objemem, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx desetinných xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx nebo xxxxxxxx x objemu 20 xx pro skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), skleněné xxxx ze sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 xx, x výpustním xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x čirého, bezbarvého xxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx asi 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx měla xxx nejméně 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx nebo víčka xx měly být xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx se měly xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx být sterilizovány x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx se xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Toto xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx mlékem, které xxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx míchání, dokud xx xxxx zcela xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x páře xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx od 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 až 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx při teplotě xxxx 1 a 5 °C, xxxxx xx xxxx než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx kultivační médium
Kultivační xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx složkou xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx po xxxxxxxxx každá xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná ředidla
Ředidlo (6.1) se může xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx bodu 6.1, poté rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bodu 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx rozpustit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x inkubátoru [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx, xxxxx to xxxx xxxxx, reprezentativní xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Po inkubaci xxxxxx mléka řádně xxxxxxxxx, aby byly xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx nechat rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx ředidla xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat toto xxxxxxxx ředění míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) podle xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X cílem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tento xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného ředění. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit jednu xxxxxxx misku.
7.6 Nalévání xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx xxxxx nalít xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx promíchat xxxxxx Petriho xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx k rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx přípravy vzorku xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit 15 minut.
Nechat stát xx vodorovném, xxxxxxxx x čistém povrchu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin v xxxxxxx s drobnými xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx pochybností provést xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx považují xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx více xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 kolonií (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x je xxxxx naočkovaného vzorku, xxx:
x1 je počet xxxxx při xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx druhém xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, na xxxxxxx xxxxxxx xxxx získány xxxxx počty.
Počet se xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx číslice. Když xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx byla sudá.
Příklad:
Ředění 10−2: 278 a 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx všechny počty xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × d", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, provést odhad x vynásobit jej xxxxxxxxxxx xxxxxxxx faktoru xxxxxxx. Xxxxxxxx vyjádřit xxxx "Odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testů ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX PŘI 30 °X
1. Xxxxxxx a xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení koliformních xxxxxxxx x pasterovaném xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx s kultivačním xxxxxx x Petriho xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxxx charakteristické xxxxxxx x, pokud to xx nutné, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxx jejich schopnosti xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx koliformních xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací jehla xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx nikl-chróm.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx, aby xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 až 250 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx selektivního xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, x xxxxxxxxxxxx hrotem, x nominálním xxxxxx 1 – 10 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x čirého, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx xx měla xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dbát xx xx, aby xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, tyto xxxxxx xx neměly být xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx měly vysušit xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Agar x xxxxxxxxxxx violetí, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx (VRBL xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Suspendovat a xxxxxxxxx složky ve xxxx a nechat xxxx několik xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxx byla jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x ihned xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx zchladit ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X době xxxxxxx zkontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxx hodin xx xxxx přípravě.
5.2 Xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 g |
|
Laktóza (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx hovězí žluč |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxx xx varu.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx do xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Durhamovy xxxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx v bodě 5.1.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx nutné zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx mezi mícháním x odběrem testovacího xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx tři xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx přenést (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx do xxxxx xx xxx xxxxx (4.2.4) x tím xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 12 xx VRBL xxxxx (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, aby xx inkubaci xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx vzorku mléka x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiem nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou xxxxx x 12 ml xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
Xx úplném ztuhnutí xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX xxxxx (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx ztuhnout.
6.5 Xxxxxxxx Petriho misek
Přenést xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx dnem nahoru. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx nesmějí vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Počítání xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx červené xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx bez xxxxxxxxx xxxxx, charakteristické xxx xxxxxxxxxx bakterie.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx kolonie xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (např. jinou xxxxx, velikost xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx konfirmační xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx údajů x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx pomocí xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
Za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Durhamově xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících maximálně 150 kolonií.
7.2 Xxxxx xx provede konfirmační xxxx, xxxxxxxxx počet xxxxxxx koliformních bakterií xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx bakterií.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx mléka podle xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX je celkový xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx vyšetřením xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) v xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx 100 xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, xxxxx výsledek xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
VII. STANOVENÍ XXXXXX SOMATICKÝCH XXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx postupy xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x syrovém xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx správnosti xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (viz X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 ml xxxxx na 1 xx2 povrchu xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx mikroskopem. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxx xx daném xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx počet xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx roztok
Složení
|
Methylenová xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
|
1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxx. Příprava a xxxxxxxxx se proto xxxx uskutečnit x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx tetrachlorethan x xxxxxx ve xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °C. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Přefiltrovat xxxx xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 10 xx 12 xxxxxxx x uchovat xxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx láhvi. X xxxxxxx vytvoření xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx použitím roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Mikroskop umožňující xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 xx x přesností nejméně ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx 20 mm × 5 xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx vrstvu.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (30 °X až 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx sklíček.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) xxx xxxxxx xxxxx vrstvy.
5.6 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx mléka.
5.7 Podložní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx testován xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Během xxxxxxxxxx nesmí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx zmražen.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx x laboratoři
Zahřát xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) na 30 xx 40 °X. Xxxx řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx které xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx podložní xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx papírem, xxxxx nezanechává xxxxx, xxxxxxxx plamenem x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx stříkačky, která xxxxxx xx styku x mlékem. Přiložit xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 mm). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx vyplnit. Xxxxxx xxxxxxx tenkou vrstvu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx vysušení.
U xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx dvě tenké xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Sušit x, pokud je xx nezbytné, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx vody, xxxxx xx přebytečné xxxxxxx zcela nesmyje. Xxxxx xxxxx a xxxxxxx tak, aby xxx xxxxxxx před xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, a xx xxxxxx jádra, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx a x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xx střední třetině xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxx pole, xxxxx xxxx vybrány pouze x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vrstev x tudíž x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za měsíc xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Počítání xxx také provádět xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx polí xxxxxxxxxxxx takovým způsobem, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy byly xxxxxxxxxx rovnoměrně.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx mikroskopem xxxx xxx rovněž xxxxxxx pro standardizaci xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx počítání, variační xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx vyšší xxx xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx mléka x obsahem 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Počet xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx x každém xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx rozdělení:
M = X = x2,
xxx:
X xx střední xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x je xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / M xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) představuje počet xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx spočítány (xxxxxxxxx 400 pro XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx pracovní xxxxxxx vypočítá xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx vrstvě
Délka xxxx, xxxxx se xxxx počítat, je 5 mm. Xxxxx xxxx xxxxxxxx průměru xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx stanoven xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx faktor = 20 × 100 / d × x
xxx:
x xx xxxxxx mikroskopického xxxx x xx, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx xxxxx spočítaných xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx vrstvy xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
s xxxxxxx xxxxx spočítaných polí.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na ml xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem (7.3).
7.5 Přesnost
Variační xxxxxxxxxx (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx mají x xxxxxxxx barvení xxxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Princip
Část xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx x s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx vrstvy xx rotační xxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx sklíčko.
Každá buňka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx impuls, xxxxx se zesiluje x zaznamenává. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x tisících xx mililitr.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx je xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 g |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx jednotlivé xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (zásobní roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx vodou na 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx chráněné xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx roztoku (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1) tak, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx více xxx sedm xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 ml |
|
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx složky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx překročit xxxxxx dní.
5. Přístroje x pomůcky xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx zařízení xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx se xxxxxxx vztah xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx počítat, x prahovou hodnotou, xxx xxx xx xxxxxxxx provádí. Kalibrace xxxxxxxx xx provede xxxxx pokynů xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, nastavitelná xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, objem xxx 15 ml.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx po uplynutí 24 hodin xx xxxxxxxx, neboť obsah xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxxxxx nízký. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx musí xxxxxxx do 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx provedena xx xxxxxxxx po odběru xxxxxx.
6.2.1 Chemická konzervace xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx orthoborité xx xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 0,6 x na 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx draselný:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného xx xxxxxx nesmí xxx vyšší xxx 0,2 x na 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °C;
- azid xxxxx:
xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx azidem xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 g/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx teplotu 6 až 12 °X ihned xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx konzervován xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 g/100 ml, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx teplotu 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx odběru a xxxxxxxx do 72 xxxxx po xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx konzervován xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx dodrženy xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vod.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, které se xx xxxxxxxx, se xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x xxx nadojení xx xxx předběžného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, neboť xxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxx nutné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx nejméně xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx vodní xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx skladovat vzorek xxx xxxxxxxx teplotě xx xx počítání.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Bezprostředně před xxxxxxxxx vzorky důkladně xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx co xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
Xxxxx ředění x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) mezinárodních xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které jsou x xxxxxxxxx xx xxxxxxx úrovni, umožňují xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 až 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x známém xxxxxx xxxxx, který xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. DETEKCE XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX A XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx detekce antibiotik x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx postup
Tento xxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx antibiotika x xxxxxxxxxxx. Popisovaný xxxxxx je jedním x xxxxxxxx postupů, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx použití Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx testovacího xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx testy.
B. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx x identifikaci penicilinu
Tento xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx identifikaci xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů v xxxxxxx xxxxx x x tepelně xxxxxxxxx xxxxx, jejichž koncentrace xxxx xxxxx xxx xxxxxx uvedené x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx [1]
|
Citlivost xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 g |
|
|
Pepton |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 g |
|
|
Chlorid xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 g |
|
|
Voda |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx uvést xx xxxx. Xxxxxxx xX xxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx xxxx xx 100 xx do xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx získat šikmý xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Agarové xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit složky xx xxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Za občasného xxxxxxx uvést xx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprim x xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 mg |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 ml |
|
Vodado |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx v ethanolu xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx x indikátor, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx o 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx destilované xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní roztok xxxxxxxxxx vložením 1,25 xx xxxxxxx penicilinu (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx do 1000 xx. Tento xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Připravit 75 ml standardního xxxxxxx xxxxxxxxxx obsahujícího 0,004 μg xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx inhibičních látek
Připravit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxx čerstvého mléka, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx xxxxx se xxxxxxx do xxxxx x zahřívá xx xxxxx xxxxxx xx 100 °X, xxxx xx uloženo xx xxxxxxxxxx x teplotou 0 °X xx 6 °X xx xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 je xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx testovací kultury. Xxxxxxxxx kultura se xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultura, xxxx xx aerobně xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Po xxxxxxxx xxxxxxx zkumavka xxxxxxxx xxxxxxxx zátkou. Takto xxxxxxx zásobní xxxxxxx xxxx xxx skladována xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx při 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Asepticky xxxxxxx 20 ml živného xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx destilované xxxx xx zkumavky xx xxxxxxx kulturou (5.4.2) a vymýt xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx se xxxxx xxx 0 xx 5 °C x xxxxxxx xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látku xx xxxxx povrchu xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) nebo xxxxxxx xxxxxx 36 hodin xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx dvakrát x časovém xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx vody xx Xxxxxxx misku obsahující xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx z povrchu.
Přenést xxxxxxxx xxxx do xxxxx (4.2.3) obsahující 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vody. Láhev xxxxxxx x důkladně xxxxxxxxx. Xxxxxxx, které xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx se xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X na agarovém xxxxx by xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mikroorganismů xxxx 5 a 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Suspenze xxxx xxxx vykazovat rovnoměrné xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx zkumavek/ampulí
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x pěti xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx nebo x xxxxxxxx. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést do xxxxxxxx zkumavky xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx naočkovaného média (5.6.2), aby se xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, poté xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx nebo, x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx týž xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx se xx nejdříve xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxx, x do xx xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 0-5 °X. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 hodin, xxxx by xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °až - 15°X), xxx se xxxxxxx na minimum xxxxxxxxxx penicilinu.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zkumavku/ampuli (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x testy (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx a mikrostříkačkou (4.1.4) přenést 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx vždy novou xxxxxxxx stříkačku.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 IU/ml) xxxxxxxxxx namísto xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx bodu 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx způsobem xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx vzorku xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx s xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testovacím xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x koncentraci nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "zcela xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích se xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx purpurové, xxxxxxx médium xx xxxxxxxxxx citlivé.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx koncentracemi uvedenými xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx agarového xxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx novému xxxxxxxxx x čerstvě xxxxxxxxxxx testovacím materiálem.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx popsanými x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx zmraženy, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Postup xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx koncentrace
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx antibiotik, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (A.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, xxxxx xxxxxxxx postupem xxxxxxx čirou inhibiční xxxx nejméně 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), a xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx xxxxx zónu xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx menšího xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx bez xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Pokud xxxx xxxx není xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx není xxxxxxxxx, xxx xxxx xx xxx jiné xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/EHS, xxxxxxx A, xxxxxxxx XX, A.1.f) a 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx částečně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo jsou xxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx papírový xxxx xxxxxxxxx mlékem, xxxxx xx xx vyšetřit, xx xxxxxx xx xxxxxx agarového xxxxx xxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx disku ukazuje, xx xxxx v xxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Velikost čiré xxxx xxxx xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxx inhibiční xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, pomůcky ze xxxx a xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Pomůcky xx xxxx
Xxx A.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx média, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx organismus xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Musí xx xxxxxx destilovaná xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx inhibiční xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Kultivační xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 g |
|
Trypton |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 g |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxx, poté xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Po xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx xx sterilizaci xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx v xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx kvantitativní stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce xxx inhibičních látek (X.5.3) v xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Roztok xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Tento xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx při 0 °X xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx jednotná xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx je možné xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx penicilinázou, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx spór)
Viz X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 xX.
5.6.2 Do xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx čerstvých xxxx (5.5) x nezbytnému xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x cílem xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x naočkovaném agarové xxxxx, a důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx misky (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxxx 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx misku o xxxxxxxx průměru 140 xx je xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, aby xx vytvořila 0,8 xx vrstva.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx povrch, xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxx vodováhou, sejmout xxxxx a nechat xxxxxxx médium xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx na xxxxx x obrátit xx xxxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx agarového xxxxx.
5.6.5 Xxxxx připravené Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nejlépe xxxxx xxx den, ale xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dva xxxxx, xxxxx xx ihned xx přípravě vloží xx zataveného polyethylenového xxxx x xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Postup
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x pozitivním nebo xxxxxxxxx výsledkem podle "xxxxxx A" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx x kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °C, xxx xx vyloučil xxxx nespecifických xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Důkladně xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 ml xxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx lahvičky xx širokým hrdlem. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 ml xxxxxxx penicilinázy (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx disk (4.3) do vzorku xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx disku x xxxxxxxx se xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx misky (5.6) x xxxxx přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x xx xxxxxx xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx kontrolu xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx standardním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx rozmístit xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxx v xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx disků xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx testu xx xxxxxxx xxxxxxx pět xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Po xxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x po xxxxxx xxxxxxxxxxxx, obrátit xxxxx xxxx xxxxxx x nechat xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx kolem xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxx xx změří.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx kolem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx mléka, xxxxxxx velkost je xxxxxx xxxx větší xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx inhibičních xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 se xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx mléka (6.1.2) x xx xxxxxxx ošetřeným xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx vzorku xxxxx xx možné do xxxxxx xxxxx ponořit xxxx xxxxxxxxx penicilinázou (5.3.2) a xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx provede xxxxxx xxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx průměr xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxx xxxxxx mléka, xxxxxxxxx vzorky penicilinázy x pro standardní xxxxxxx penicilinu.
7. Interpretace xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nevytvoří žádná xxxx xxxx, xxx xxxx xxxx se xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx velká nebo xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2x)), xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx koncentraci krystalického xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx vyšší než 0,004 μg/ml.
7.2 Pokud xx průměrná xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx kolem xxxxx xx vzorkem xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx možné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx použité x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx průměru čiré xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx nebo polosyntetický xxxxxxxxx, který nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, nemusejí být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx jiné než xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx penicilin xxxxx být identifikovány xxxxxxxx postupy.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Stanovení xxxxxx penicilinu xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxx standardní xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx velikostí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x mléce (5.2 x) až x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx lineární xxxxxxxx xxxx xxx10 koncentrace xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx lze xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx zón xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx inhibičních xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací penicilinu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx lze vypočítat xx základě průměru xxx vzorků xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx ze standardní xxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxx xx poloměr xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx pětkrát xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx xxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxx rovný xxxx xxxxx než 0,004 μx/xx (nebo xxxxxxxx stanovené koncentrace) xxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx penicilin.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) a reprodukovatelnost (X)
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx a jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE PATOGENNÍCH XXXXXXXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx použití
V xxxxxxx x xxxxxxxxx směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxx 2, xxxxx postup xxxxxxxxxxx pokyny, které xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx u xxxxxxxx, které jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx splněny xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx VII xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, xxxxx jde x počítání xxxxxxx xxx 30 °C x 21 °X, xxxxxxxxxx bakterie x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx test xx xxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytný xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx mléko xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx propuknutím xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxx vyšetření musí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nezávadnosti xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx obchod xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx patogenních mikroorganismů xx, pokud xxxxxxxx, xxxxxxx kritéria a xxxxxxx přijaté xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Zpráva x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx patogenní xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx výsledek xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x objemu pasterovaného xxxxx, xxxxx požaduje xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx jasně popsat xxxxxxx xxxxxx.