Xxxxxxxxxx Komise
ze xxx 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx některé xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx ošetřeného xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx dne 5. srpna 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx otázkách xxxxxxx x xxxxxxx ošetřeným xxxxxx xxxxxx Společenství [1] xxxxxxxxx pozměněnou xxxxxxxx 89/662/EHS [2], x xxxxxxx xx xx. 10 odst. 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Komise xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxxx xxx kontrolu xxxxxxxxxx xxxxx xxx syrové xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko;
vzhledem x xxxx, xx pro xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, bodu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx pasterované mléko xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patogenů, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx peroxidázy, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX xxxxx xx xxxxxxxx stanovit zejména xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx x technických xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, které mají xxxxxxxx dodržování xxxxxxxx xxxxx; xx je xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx; xx x očekávání xxxxxxxx těchto šetření xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx, xxx xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx jednotného xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx veterinárního xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx syrové mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 21 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – počítání xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx UHT xxxxx x sterilizované xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- detekce xxxxxxxxxx x sulfonamidů.
Článek 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, stanovení kritérií xxxxxxxxxxxxx a odběr xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 xxxx popsány x xxxxxxx XX.
Článek 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx do 31. prosince 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx znalostí.
Článek 7
Xxxx rozhodnutí xx xxxxxx členským xxxxxx.
V Bruselu xxx 14. xxxxx 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a zpráv x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x laboratoře xxxxxxxx xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx ustanovení.
2. Xxxxxxx
2.1 Voda
2.1.1 Xxxxx xxxx stanoveno jinak, xxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxx musí být xxxxxxx voda xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx účely xxxx xxx bez xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx mikroorganismů xx popsaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" nebo "xxxxxxx" (bez xxxxxxx xxxxxxxxx) xx rozumí "xxxxxxxxxxx xx vodě" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není stanoveno xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí mít xxx uznané xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek xxx různé xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx použití x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx uvedený xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx není toto xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se musí xxxxxxxx, jinak xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx vypočítá x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorku.
5. Xxxxxxxx spolehlivosti: xxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnost
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx uvedená xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Opakovatelnost (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx mezi dvěma xxxxxxxxxxxx výsledky xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx výrobkem za xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, stejný přístroj, xxxxxx xxxxxxxxx, krátké xxxxxx období).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) je xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx samostatných xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem x xxxx testovacím xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx a/nebo xxxxx xxxx).
5.1.3 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x příslušných odstavcích xxxxxxx postupu, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx provedeny. X xxx xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x souladu x xxxxxxxxxxxxx pokyny.
6. Xxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x získané výsledky. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x všechny xxxxxxxxx, které xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx. Xxxxxx o testování xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx identifikaci xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje referenční xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx ošetřeného xxxxx. Xxxxx postup xxx xxxxx vzorků, přeprava x skladování xxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx skladovacích x xxxxxxxxxxx nádržích.
Postupy uvedené x bodech 2, 4.4, 5 a 6 xx použijí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Obecně
Odběr vzorků xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx pověření xxxxxxxxxxx, kteří byli xxxx odběrem xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx považují xx xxxxxxxx, vyškolí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, že odebrané xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x v xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx testovací xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx vzorků, xxx xxxxxxxxxxxx vzorků byla xxxxxxxxxxx.
3. Vybavení xxx xxxxx vzorků
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo x jiného xxxxxxxx, xxxxxxxxxx odolného xxxxxxxxx, xxx musí být xxxxxxxx x ohledem xx předpokládané použití (xxxxxxxxxx, odběr xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx pro míchání xxxxxxx v xxxxxxxx xxxx xxx dostatečně xxxxxx xxxxxx povrchu, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx dlouhou xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x jakékoli xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx být alespoň 50 xx.
Xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxx být xxxxxxxx, kovová xxxx x vhodného xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x víček) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx materiál x xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) musí xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx pro xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, musí xxx po xxxxxx xxxxxx vzorku vyčištěno x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxx testovací laboratoř xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx vzorků
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx ohledu xx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxx odběrem xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx ručně, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx odebrán ihned xx xxxxxxxxxx, xxxx xx mléko ještě x xxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx vzorků xxxxx pro xxxxx xxxxx, xxxx první xxxx být odebrán xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku musí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx použitých xxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx naplněny xxxxxxx x při xxx bylo možné xxxxx promíchat obsah xxxx xxxxxxxxxx, aniž xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx stloukání xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Ruční xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx z xxxxx x konví na xxxxx
X rychlému xxxxxxxxxx xxxxxxxxx plunžrem xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx a xxxx, xxxxxxx dbát xx xx, xxx xx xxxxx xxxxx promíchalo x aby xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx smetana. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx zásilku, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x chlazených xxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx dokud xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx mléka xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx do xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx mechanické xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx kapacitu misky xxx, xxxxxxx reprezentativní xxxxxx x xxxx xxxxxxx postupem podle xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, u něhož xx má xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx více xxxxx, x každé xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx vzor. Xxxxx vzorky z xxxxx xxxxxx nemusí xxx xxxxxxxx testovány, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx reprezentativních xxxxxxxx x poměru x xxxxxxxx, které xx xxxxxxx x xxxxxx, xx xxxxx xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx se odebere xxxxx (více) xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Odběr xxxxxx z velkých xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, cisternové kamiony, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Před xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vhodným způsobem xxxxxxxx.
X promíchání xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx promíchání xxxxxx xx době, xx kterou xxxx xxxxx x klidu. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx postup xxxxxxxxxx xxxxxxx x každém x jednotlivých xxxxxxx xx vhodný pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx promíchání xxxxxx xxxxxxxxx shodu výsledků xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď x různých xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx promíchání xxxxx (syrového xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, pokud xx xxxxxx xxxxxx xxxx u xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx menší xxx 0,1 %.
Ve xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx otvorem xx xxxxxx části xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx malé množství xxxxx, které ani xx xxxxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Proto xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x průlezového otvoru. X případě odběru xxxxxx z vypouštěcího xxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nádob xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a cisternových xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx x xxxxxxxxx x průlezovém xxxxxx; xxxxxxxx je xxxxxxxx x xxxxx,
- x xxxxxxx cisternových xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx hadici, xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- filtrovaným, stlačeným x xxxxxx vzduchem. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx žluklé xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx odběr xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x poloautomatické xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx příslušným xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx x xxxxx používání xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolám, které xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx x cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxx xxx xxxxxxx vzorek,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x šarže xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx používání xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro odběr xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxx odebrány xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- maximální přenos,
- xxxxxxxxx, které může xxx provedeno, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx nutné xxxxxxxx.
4.4 Odběr xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jde x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx musí být xxxxxxxx během obchodní xxxxxx nebo z xxxxxxxxxxxx místnosti xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, a xx, xxxxx je xx možné, xxxxx xx xxxxxxxxxx (v xxxxxxx pasterovaného xxxxx x xxx pasterace).
Z xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx metodou UHT x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx takový xxxxx xxxxxx, xxx odpovídal xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, x to xxxxx xxxxxx poskytnutých testovací xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx měl xxx xxxxxxx identifikačním kódem, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx identifikaci podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří xxxx příslušného orgánu (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x skladování xxxxxx
Xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxxxxx orgánu xxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxx xxxxxxxx xx lhůty x podmínek xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodrženy x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx základě druhu xxxxx a testování, xxxxx má xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx třeba xxxx na xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x přímému slunečnímu xxxxxx. Xx-xx je xxxxxx použitá xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- vzorky xxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx testování musí xxx přepravovány x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 oC xx 4 oC. Doba xxxx odběrem x xxxxxxxxxx xxxx být xx nejkratší x x xxxxxx případě xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx skladování 0 xX až 6 oC, xxxx-xx xxxx mezi xxxxxxx x xxxxxxxxxx delší xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx co xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxx syrového xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx skladovány v xxxxxxxxx xxxxxxxx laboratoře x doba xxxx xxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, která je xxxxx přijmout pro xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Stanovení xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °C
V. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – počítání xxxxxxx xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. STANOVENÍ XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxx xxxxxxx plnotučného, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, syrového, xxxxxxxxxxxxx, XXX mléka xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (termistorového xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx xxxxxxxxxxx elektrickým xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx typ xxxxxxxxx maximální xxx xxxxxxx xx plató xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx tak, že xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx stanovenou xxxx xxxxxx. Vzhledem x tomu, xx xx xxxxx lišit xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, ale i xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx a standardních xxxxxxx použitých xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxxx hledajících xxxxx. Xxxxxxxxx x pevně xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx rutinního xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx lze xxxxxx xxx odhad xxxxxx xxxxxxx cizí xxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx není xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx (viz xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx ve xxxxxxxx Celsia (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx mléka xx x xxxxxxxxxx xx přístroji podchladí xx vhodnou xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx, xxxxx způsobí, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, aby se xxxxxxx xxxxxxxx jako xxx vzorky mléka xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Za těchto xxxxxxxx xxxxx udává xxx xxxxxxx xxxxx xx stupních Celsia.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx řízené xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx snímače (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x příslušným xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xx vyvolání xxxxxxx, xxxxx i xx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx použít xxx xxxx chladicí lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxx kapalinu, xxxxx xx xxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx jakýmikoli xxxxx xxxx v kapalině xxxxx vyšší xxx 0,2 °X. Teplota xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Je důležité, xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Celá xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx pod značkou xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx vzorky proudí xxxxxxxxxxx proud xxxxxx xxxxxxxx kapaliny. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx a příslušný xxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xx skleněné xxxxx x maximálním xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx nižší xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx x (viz xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxx, aby xxx − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx tolerance xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Když xx sonda x xxxxxxxxx x pracovní xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xx vzorky x x xxxx, xxxxx je 44,6 ± 0,1 xx xxx horním okrajem xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, aby se xxxxxxxxx nastavení xxxxx xx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / T2
kde:
T je xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx odpor x xxxxxx při xxxxxxx X,
− xX / dT × 1 / X xxxxxxxx koeficient
β xx xxxxxxxxx, která závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxxxx. X běžné praxi xx doporučuje xxxxxxx xxxxx než 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxx xxxxxxx. Plató xx část křivky, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pomocí nejlepších xxxxxxxxxxxx xxxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ± 10 % x xxxxxxx teplotní xxxxxxxxxx xxxx vyšší xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx linearity x celém xxxxxxx x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx odpory xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx dílky po xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x rozmezí xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx příslušného obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx následujících xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx než 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx správné xxxxxxx xxxxxxxxx nevznikla x xxxxxx xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °C xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx míchání testovacího xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx x mlékem,.
Míchačka xx xxxx xxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx vertikálně xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx byl xx xxxxxx xxxxx xxxxx termistoru. Přípustná xxxxxxxxx je xxx 1,5 mm xxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx vibruje xxxxx x dostatečným xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (nejméně ± 1,5 mm), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx teplota xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx míchání xx xxxxxxxx xxxxx v xxxxxx okamžiku dotknout xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Zařízení xx vyvolání xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxxxxx xx činnosti xxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxx, xxx teplota xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx k bodu xxxxxxx. X xxxx xxxxx xxx použít xxxxxxxx; jedním xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xx xxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx dotýkala xxxxx xxxxxxxx xx vzorky.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (viz xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; vnější průměr xx 16,0 ± 0,1 mm x xxxxxxx xxxxxx je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx skla xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx xxx xxxxxx xxxxxx vzdálenou xx xxxxxxx okraje 29,8 xx (21 xx xxx xxxx zkumavky), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxx xxx stabilizován buď xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx kolísání nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx hodnoty, xxxx xxxxxx xxxxx kolísá x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx baňky o xxxxxx 1000 xx, xxxxx A.
4.4 Sušárna, xxxxx xxxxxxxxx, nastavitelná xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická pec, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx skle, xxxxxxxxx x zchlazená xx 20 ± 2 °X, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx oxid uhličitý.
5.2 Xxxxxxx sodný, xxxxxxx x.x., jemně mletý, xxxxxx 5 xxxxx xxx teplotě 300 ± 25 °C x xxxxxxxxxx peci xxxx nejméně 24 xxxxx při xxxxxxx 130 ± 1 °X v sušárně x zchlazený na xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Příprava xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit odpovídající xxxxxxxx (viz xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Rozpustit v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx přelít xxxxxx xx odměrné xxxxx x xxxxxx 1000 xx x xxxxxxx xx značku xxxxx x teplotě 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx při xxx 5 °X x xxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x několikerým xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx z xxxxx xxxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxxxx byly xx xxx čtvrtin prázdné, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx měsíců, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx thiomersalu 10 g/l).
6. Kalibrace xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxx kalibrace. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, průvanu xxxx xxxxxxxxx teplotám xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx výrobce x xx xxx xxxxxx xxxxxxx 12 hodin xxxx kalibrací. Zkontrolovat xxxxxx xxxxx, rozkmit xxxxxxx míchačky x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx standardní roztoky (xxx tabulka výše), xxxxxxx bod xxxxxxx xx xxxxx nad xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx vzorků mléka x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx body xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx než – 0,100 °X.
(X xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx příslušný xxxxx xxxxxxxxxx sestaven xxx, xx se ustálí xx dané xxxxxxx xxxx mrznutí x xxxxx xxxxxxx měřícího xxxxxxxx. X těchto xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx bod xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx uvést).
Pomocí pipety xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx na vzorky, xxxx měřit xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxx kalibraci xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxx zkumavky xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (stejný xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou vodou). Xxxxxxx standardních xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx výrobce xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx standardním xxxxxxxx x střídavě xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, dokud xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx vzorku xxxxx, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx 0 °C a 5 °X.
7.2 Pokud xx je xxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxxxx xxxxxxxxx cizí xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx xx xxxxx x xxxxx nádoby a xxxxxx opatrně xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxx účinný xx laboratorní teploty.
7.3 Xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx xx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx teplotu xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxx nezbytné xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx mléka xxxx při xxxxxxx xxxxxxx teplotu.
7.4 Stanovit xxxxxxxx kyselost xxxxx, xxxxx možno současně xx stanovením bodu xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x kyseliny xxxxxx xx 100 ml xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx nejméně 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda hladina x xxxxxxx chladicí xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, případně zda xx sonda xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx na vzorky. Xxxxxxx kryoskop a xxxxxxx xx, zda xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx míchačky a xxxxxxxx rozkmit jeho xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx získané xxx xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx o xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxx liší xx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx v xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx mléka
Promíchat xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx protřepáním x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak prudce, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx xxxxx x xxxxx zkumavky xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx jsou xxxxx a xxxxxxxx xxxxx a xxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxx opatrně xx xxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x chlupy nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx. Mléko se xxxxxxx x mrznutí xx xxxxxx při xxxxxxx určené xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °X.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx tuto xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx zajistí, xxx xxxxxxx začalo, xxxx xx ručička xxxx nitka xxxxxxxxxxxx xxxxx x příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx mrznutí začne xxxxx xxxx později, xxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmezí, xxxxxxxxx se ukončí x zopakuje xx x xxxxx vzorkem xxxxx. Xxxxx tento xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx vzorku se xxxxxxx na 45 °X x 5 xxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx testovací xxxxxxx x ihned xxxxxxx testování. Teplota xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx rychle xxxxxxx xx na xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx dobu xxxxxxxxxx, x poté klesne. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx teplotě xxxxxxxx xxxxx této xxxx x tuto xxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx, a xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx maximální xxxxxxx, xx xxxx vzorek xx xxxxxx a xxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx teplotu.
Když xx xxxxxx uspokojivě xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nahoru xxxxxx, xxxxxx x chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxx stanovení x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx rozdíl xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx xx x xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Chlazení xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx uložit xxxxxxxx zkumavku xx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x chladu.
(U xxxxxxxxx xxxx kryoskopu xx xxxx xxxxx; v xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx údaje.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xxxxxxxxx xxxxxxxxx, za xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx obou xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx mrznutí, xxxxxxxxxxxx na xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx součet xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx stanovení provedených xxxxxxxxxx xx liché xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
4.1 (poloha xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Aktivita xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx vyjádřena množstvím xxxxxx v μg xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 ml.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx fenylfosfátu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx fenol xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (namodralé xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx při 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx porovnání xx vzorkem, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx boritanu x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Rozpustit xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (H3BO3) x doplnit xx 1000 xx.
4.1.3 Zahřát 500 ml xxxxxxx xxxxxxx na 50 °X, oba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, rychle xxxxxxxx xxx na 20 °C, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pH xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Tlumivý roztok xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx vodě 6,0 x methaboritanu xxxxxxx (XxXX2) nebo 12,6 x NaBO2.4H2O a 20,0 g xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Tlumivý roztok xxx zředění vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2) xxxxx na 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 g xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, prostý xxxxxx, ve 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx kapky xxxxxxx BQC (4.6) x xxxxxx xxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx. Vzniklé xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, dokud xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x odstranit xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx v chladničce xxxxxxx dní; xxxx xxxxxxxx vyvolat zabarvení x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx, x xx xxxxxxxx 1 ml xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx vodě 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx měďnatého (XxXX4 · 5X2X) x doplnit xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok, xxxxx změní barvu xxxx xx starší xxx jeden xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx ve xxxx 0,05 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) a xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx roztok xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 mg xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx na 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 ml x promíchat. 1 xx obsahuje 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx, xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx oplachování čerstvě xxxxxxxxxx destilovanou vodou xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenolů a xxxxxx používání xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Analytické váhy
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Spektrofotometr xxxxxx xxx odečty xx xxxxxx xxxxx 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx po 5 xx x 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, např. o xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx zabránit xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Stopy xxxx xxxx xxxx mohou xxxxxxxx falešně xxxxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxx xx xxx xxxxxxx. Je proto xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx dva xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx pipety xxxxxx 1 xx xxxxxx xx xxxxx xx xxxx zkumavek (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx kontrolní xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx vroucí xxxx; xxxxxxxx a xxxxxxx x vroucí vodou xxxxxx hliníkovou xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Rychle xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Vzorky ihned xxxxxxxxx 60 xxxxx xx vodní xxxxx (5.2) x občas (xxxxxxx xxxxxxxxx) promíchat xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx x xxxx 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx zinek-měď (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxx papír, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx čirý; shromáždit 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx roztoku XXX (4,6), xxxxxxxxx x 30 minut xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Pokud absorbance xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx absorbanci xxxxxxxxxxxx roztoku obsahujícího 20 μg fenolu xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx smícháním xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx objemem části xxxxx xxxxxxxxxxx vzorku, xxxxx se opatrně xxxxx xx varu, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx kalibrační xxxxxx
6.4.1 Na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) připravit xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 a 20 μx fenolu na xxxxxxxx. Do každé x xxxx zkumavek xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxx x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxx.
6.4.2 Do každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 xx roztoku XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx slepým xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx délce 610 xx.
6.4.5 Na xxxxxxx xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx xxx každé xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nejmenších xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x vzorec
7.1.1 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × D
kde
A xx xxxxxxxx fenolu x μg xxxxxxx xxxxx bodu 7.1.1;
X xx faktor xxxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x případě žádného xxxxxxx X = 1).
2,4 xx faktor xxxxxxx (5/12 x 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 xx spojitosti x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μg xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx podle 6.3.10, limity uvedené x 7.2.1 x 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx získaných ze xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX PEROXIDÁZY
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx, který slouží xx xxxxxxxx pasterace.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx:
Xxxxx je mléko xxxxx xxxxxxxxxxx, do 30 sekund xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx promíchání xx neobjeví žádné xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx rozkládá xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx parafenylendiamin xx xxxxxxxxx indofenol (Xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 fenylendiaminu
Rozpustit x xxxxx xxxx (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) a xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxx xx skleněnou xxxxxx. Xxxxx jednoho xx dvou xxx xx xxxxxxxxxx roztok 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, kterou xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Roztok xxxxxxxx vodíku
Vodou xxxxxx 9 xx 30 % xxxxxxxx xxxxxx x doplnit xx 100 xx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx koncentrované kyseliny xxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx měsíc, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x temnu, x xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x organickými xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx mléka xx čisté xxxxxxxx x vhodným xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X. Postup xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléko, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním médiem x Xxxxxxx xxxxxxx x nechat inkubovat 72 xxxxx při 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx schopná xxxxxxx 1 ml xxxxxx mléka nebo xxxxxxxxxxx ředění s 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx principu excentrické xxxxxx xxxxxx zkumavky.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k promíchání 10 xx primárního xxxxxx nebo dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 ml xxxx xxxxxxxx o xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx skla xxxx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, dno xxxxx xx vnitřní průměr xxx 90 xx 100 xx. Vnitřní xxxxxxx misek by xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx sterilizují jedním x xxxxxx postupů:
a) x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx bylo zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx v nádobách, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx by se xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx sušeným mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx odstředěné xxxxx xx nemělo xxxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx odstředěným xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx pořadí xxxxxxxxxxx x rozpustit xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx x nakonec xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje postup. Xxxx xxxxxx xxxx x za xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx se xxxx zcela xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat přes xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx médium (5.1) v množstvích xx 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 až 15 xx do zkumavek (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx kultivačního média. Xxxxxxx xxxxxx výrobce, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit pH xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, sterilizovat a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, pokud xx xx nutné, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pH-metrem (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx upravit xX roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) do xxxxxxxx (4.2.1) tak, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx prášku. Dodržet xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX xxxxxxx podle xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ředidla podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx mikrobiologického vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku mléka
Vzorek xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího vzorku xx xxxxxx překročit xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 sekund xxxxxxx promíchávat toto xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx (syrové a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) do 9 xx ředidla (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx postup opakuje xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx misky (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 denní xxxxxxxx při 30 °X – směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx misky.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx naočkované xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx média (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx mléka x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx ředění s xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx obrácené dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx více xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx se nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více než 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx xx, xxx xxxxxxx k záměně xxxxxx sraženin v xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxx skla s xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pokrývají xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 až 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣC xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, kde:
n1 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx misek xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx zředění, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx získány první xxxxx.
Xxxxx xx zaokrouhlí xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, uvést, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx je "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx převrácená xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.1.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx vyšší xxx 300 x počítání xx možné, xxxxxxx xxxxx x vynásobit xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zředění. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX xxxxx x sterilizované mléko
Počty xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °C
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 21 °C x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx pět dní xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX s xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xx x xxxxx xxx 6 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Princip
Inkubovat pasterované xxxxx pět dní xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °X xx xxxxx bodech xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx desetinného xxxxxx x 9 ml xxxxxxxx roztoku x xxxxxxxxx xx principu xxxxxxxxxxx rotace xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxxxxxx objemem, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx ředění xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 až 250 xx nebo zkumavky x objemu 20 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, x xxxxxxxxxxxx hrotem, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním z xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx teplotě 170–175 °X;
x) v autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx xx, aby xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x nádobách, tyto xxxxxx by xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, xxxxxxx nebo víčka xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx odvětráním páry.
Pipety xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx se xxxxxxx mlékem
5.1 Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 g |
|
D-glukóza(+) xxxx dextróza |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx ověří xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx mlékem, xxxxx xxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxxxxx extrakt, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Poté přidat xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx míchání, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx x páře xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx papír.
Zkontrolovat pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to je xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 ml xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 a 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc po xxxx xxxxxxxx.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx ve xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, aby xx xxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °C.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 minut xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx může xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet nebo xxxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx podle bodu 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nechat xxxxxx xxxxxxxxx potřebné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média x xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Příprava xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] uzavřené balení xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx to xxxx xxxxx, reprezentativní xxxxxx x objemu xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 xxxxx při 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx nesmí xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 sekund xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v bodě 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx další desetinná xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, dokud nelze xxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní pipetou (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být vyšetřena xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx misku.
7.6 Nalévání xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 xx 18 xx kultivačního xxxxx (7.1).
Xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx misky, xxx xx inkubaci xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx s kultivačním xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, chladném x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx a vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x cílem odlišit xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx xxxxxxxx za xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx naočkovaného xxxxxx, xxx:
x1 xx počet xxxxx při prvním xxxxxxx
x2 je xxxxx xxxxx xxx druhém xxxxxx
x je xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx byly získány xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx na dvě xxxxxx číslice. Xxxx xx zaokrouhlovaná číslice xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 a 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, že počet xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "nižší xxx 10 × x", xxxxxxx "d" je xxxxxxxxxx xxxxxxx nejnižšího xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x počítání xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na ml".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – POČÍTÁNÍ XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx referenční postup xxx xxxxxxxxx koliformních xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx bakterie, xxxxx xxx 30 °X vytvářejí xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jež xxxx xx popsaných podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx plynu.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx objem vzorku xxxxx x kultivačním xxxxxx v Petriho xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, pokud to xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx necharakteristických kolonií xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Pomůcky xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx, xxx mohly xxxxxxxxx konfirmační kultivační xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx trubičky vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Baňky x xxxxxx 150 až 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x nepoškozeným hrotem, x xxxxxxxxxx objemu 1 – 10 xx, x výpustním xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx ze xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr asi 90 až 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) v xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx teplotě 170 – 175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx sterilizovány x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Xxxx x krystalovou violetí, xxxxxxxxx xxxxxxx, žlučí x xxxxxxxx (VRBL xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx minut. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx rychle xx xxxx za občasného xxxxxxxxxxxx x ihned xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 až 150 xx do xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx zchladit ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V xxxx xxxxxxx zkontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx xxxxx xx xxxx přípravě.
5.2 Xxxxxx xxxx x brilantovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx žluč |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx zeleň |
0,0133 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx a uvést xx varu.
Zkontrolovat pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx do zkumavek (4.2.1) obsahujících Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx může xxxxxxxxx x komerčního dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, rozdělit, sterilizovat x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX agar) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx mezi mícháním x odběrem testovacího xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx přenést (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx do xxxxx xx xxx xxxxx (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx mléka (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx asi 12 xx VRBL agaru (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem xxxxxxxx vzorku mléka x smícháním x xxxxxxxxxxx médiem nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Za xxxxxx xxxxxxxx sterility xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x 12 ml xxxxx VRBL agaru, xxxxx xxx xxxxxx xxx naočkování xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
Xx úplném xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx VRBL xxxxx (6.1) xx povrch xxxxxxxxxxxx média.
Nechat ztuhnout.
6.5 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem nahoru. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °C.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x průměru xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx xxx sraženiny xxxxx, charakteristické xxx xxxxxxxxxx bakterie.
6.6.2 Xxxxx xxxx všechny xxxx xxxxxxx kolonie necharakteristický xxxx (např. jinou xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx sraženin xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx (např. 3 až 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx zkumavky obsahující xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °X.
Xx kolonie xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Durhamově xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx maximálně 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx provede xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx bakterií.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka podle xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx se 7.2), xxxxxxxxxxx vyšetřením xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx vyšetřovaného xxxxxx (6.3) v xxxxxxxxxxx (3 ml).
Počet xx xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxxxxx více xxx 100 kolonií. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx sudá.
Pokud xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 150 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx "odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 ml".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk.
A. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx x syrovém xxxxx.
Xxxxx postup popisuje xxxxxx xxx stanovení xxxxx buněk xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (xxx B.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxx xx možné zřetelně xxxxxxx methylenovou modří
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx na 1 xx2 povrchu podložního xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Počítání xx xxxxxxx pod xxxxxxxxxxx. Xxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxx xx daném xxxxxxx xx vynásobí xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx získat xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Činidla
Musí xx xxxxxx chemikálie xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová xxxxxxxx xxxxxx |
6 ml |
Upozornění
Tetrachlorethan xx xxxxxxxx. Příprava x xxxxxxxxx se xxxxx xxxx uskutečnit v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx methylenovou xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 hodin xxxxxxx x chladničce xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx octovou. Přefiltrovat xxxx xxxxx x xxxxxxxxx velikosti xxxx 10 xx 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx roztok ve xxxxxxxxxxxx uzavřené láhvi. X xxxxxxx vytvoření xxxxxx xxxx usazenin, xxxx použitím xxxxxx xxxxx přefiltrovat.
5. Přístroje x pomůcky xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 xx x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx xxx tenkou xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Horizontální xxxxx xxxxx (30 °X až 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Ventilátor (xxx) pro xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, nastavitelná na 30 xx 40 °X xxx ohřívání xxxxxx xxxxx.
5.7 Podložní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx hodin xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx nesmí xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx vodní xxxxx (5.6) na 30 až 40 °X. Xxxx řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx kalibrována mikrostříkačka (5.2), například 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx podložní xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, vysušit xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx plamenem a xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) odebrat 0,01 xx xxxxx ze xxxxxx připraveného, jak xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx očistit vnější xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx x mlékem. Přiložit xxxxxxxxx xx podložní xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 mm). Xxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx vyplnit. Nechat xxxxxxx xxxxxx vrstvu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx úplného xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx ventilátorem (5.5). Xxxxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxx, xxx xxx chráněn před xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Počítání x výpočet
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx buněk xx počítají pouze xxxxxxx xxxxx, x xx taková jádra, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxx je x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx třetině xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx ty pásy xxxx pole, které xxxx xxxxxxx pouze x okrajových částí xxxxx xxxxxx. Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx nejméně xxxxxx za xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx také xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxx
Xxxxxxxx k tomu, xx počítání xxxxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x mechanických xxxxxxx xxxxxxxx, variační xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vzorků xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx elektronického xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx vzorek xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 buněk/ml xx neměl xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, musí xxx podle Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = s2,
kde:
M xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = s × 100 % / X nebo XX = 100 % / s nebo XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (buněk), které xxxx spočítány (například 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx tenké xxxxxx
Xxxxx xxxx, které xx xxxx xxxxxxx, xx 5 xx. Šířka xxxx odpovídá průměru xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / x × b
kde:
d xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, stanovený xxxxxxxxx sklíčkem s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx střední xxxxxxx xxxxx vrstvy xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v xx, stanovený podložním xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x celkový xxxxx spočítaných xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx buněk
S xxxxx xxxxxx počet xxxxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 a 7.2) xxxxxxxx pracovním xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx koeficient (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx může po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo bez xxxxxxxx konzervace.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx směsi xx xxxx přenese ve xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx disk, xxxxx slouží xxxx xxxxxxxx sklíčko.
Každá xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx impuls, xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx mililitr.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx voda xx xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx je xx xxxx odpovídající čistoty.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 g |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě xx xxxxxx překročit xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx na 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ethidiumbromid xx vodě. Xxxxxxxxxx xx vzduchotěsně uzavřené xxxxxx chráněné xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx dva měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x tlumivým xxxxxxxx (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx objem 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx by xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx dní.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý xxxxxx (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
|
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit xxxxx xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx složky. Skladování xx nemělo překročit xxxxxx xxx.
5. Přístroje x pomůcky ze xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx se xxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxx částic, xxxxx xx mají xxxxxxx, x xxxxxxxx hodnotou, xxx níž xx xxxxxxxx provádí. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se provede xxxxx pokynů xxxxxxx xx použití xxxxxx, xxxxxxx obsah buněk xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, s xxxxxxx uzávěrem, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Xxxxxx xxxx xxx skladován xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx vzorek nebyl xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xx uplynutí 24 xxxxx po xxxxxxxx, neboť xxxxx xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx do 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx jednoho x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx orthoborité ve xxxxxx xxxxx být xxxxx než 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 až 12 °X;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného xx xxxxxx xxxxx xxx vyšší než 0,2 g na 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- azid xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx azidem sodným x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 g/100 xx, xxxxx je xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X ihned po xxxx odběru x xxxxxxxx xx 48 xxxxx xx jeho xxxxxx;
- bronopol:
vzorek xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 g/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx ještě konzervován xxxxxxx až 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx draselným.
Poznámka:
Pokud xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vod.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xx nadojení xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x den nadojení xx xxx předběžného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, neboť xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx nutné xxxxxxxx provést, vzorek xx xxx xxx xxxxxxxxx ošetřován nejméně xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený vzorek (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) na xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě xx do xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx důkladně xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xx nejlepšího xxxxxxxxxxx rozdělení somatických xxxxx.
Xxxxx ředění x xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxxx provedeny v xxxxxxxx.
8. Spolehlivost
Výsledky opakovatelnosti (x) x reprodukovatelnosti (X) mezinárodních xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které xxxx x dispozici na xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx odhady:
(1) xxxxx xxxxx mezi 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola správnosti xx provádí pomocí xxxxxx o xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx stanoví počítáním xxxxx xxx mikroskopem xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX ANTIBIOTIK X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT A XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční postup xxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a x xxxxxxx ošetřeném xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x sulfonamidy. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx jedním x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou založeny xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx testovacího xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx takovéto testy.
B. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x identifikaci xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx konfirmaci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx postupu, xxx identifikaci penicilinu x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx postup
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx detekci xxxxxxxxxx x sulfonamidů x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxxx xX xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx po 10 xx xx zkumavek xxxx xx 100 xx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx získat xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 g |
|
Agar |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, x xxxxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx. Přidat trimethoprim xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
5.1.3 Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx v ethanolu xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Živný xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 mg |
|
Glukóza |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová červeň |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ve xxxx živný xxxxxx x xxxxxxxxx, pokud xx je xxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx připravit xxxxxx xxxxxxxxxx o 60 μx/xx (100 IU/ml), x xx rozpuštěním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx roztoku penicilinu (5.2.1) sterilní xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx 1000 xx. Tento xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 IU xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx pracovního xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx mléka xxx inhibičních xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx měly xxx xxxxxxxxxx v xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Mléko xxx xxxxxxxxxxx látek
Připravit xxxxxxxxx preparát mléka xxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxx sušeného odstředěného xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek. Xxxxxx xxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx otestováno x prohlášeno xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx mléko xx xxxxxxx xx lahví x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx na 100 °X, poté xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx s teplotou 0 °C xx 6 °C xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx organismus xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x kmenem X 953.
5.4.2 Připravit xxxxxxx kulturu xxx xxxxxxxxx testovací xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxx xxxxxx agaru (5.1.1). Xxxxx agar xx x proužcích xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultura, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx inkubaci xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx kultura xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Asepticky xxxxxxx 20 xx živného xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx destilované xxxx xx zkumavky xx zásobní kulturou (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx smyčkou xxxxx xx xxxxxxx agaru. Xxxxxxxx xxxx se xxxxx při 0 xx 5 °X x použije xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) a důkladně xxxxxxxxx očkovací látku xx xxxxx povrchu xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Při xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) xxxx xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx intervalu xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx ihned xxxxxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °C.
5.5.5 Po 16xx xx 18xx xxxxxxxx inkubaci při 63 ± 1 °X xx agarovém xxxxx by suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx životaschopných xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx sraženiny xxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx připravenou ze xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx zkumavek/ampulí
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx médium (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx část suspenze xxxxxxxxx spór (5.5.4) x pěti částem xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx nebo x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx xxxxx xxx použity xxx xxx, xxx xxxxx xxx rovněž xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx při 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky se xx nejdříve xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx po xxxxxx, x xx xx xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 0-5 °X. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx by xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), xxx se xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x nesmazatelně identifikovat xxxxxx zkumavku/ampuli (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Umístit xx xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx a xxxxx (5.2 a 5.3).
6.3 Xx xxxxx zkumavky/ampule xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx roztoku (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx xxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Pro xxxxxxxxx každého vzorku xxxxxx vždy novou xxxxxxxx stříkačku.
6.5 Xxxxxx xxxxx bodu 6.4 xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx namísto xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bez xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx zkumavky/ampule x xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi xxxxxxx na nejméně 2½ xx 2¾ xxxxxx do vodní xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x vodní lázně.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx agarového xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testovacím xxxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx vzorku x koncentraci xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx zabarvení xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx purpurové, xxxxxxx médium je xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo nepravidelné xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx na přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v koncentracích xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx organismu.
7.4 Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spóry x vzorky xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxx popsanými x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx zabránilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx koncentrace
1. Předmět x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx postupem xxxxxxx čirou inhibiční xxxx xxxxxxx 2 xx kolem disku.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), a xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx čirou xxxx xxxx vytvoří xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx je xxx penicilin nebo xxxx penicilinu a xxxxxx antibiotika xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx může xx xxx xxxx reziduum [xxx xxxxxxxx 85/397/EHS, xxxxxxx A, xxxxxxxx XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx peniciliny, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxx identifikovány xxxx xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx papírový xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx má xxxxxxxx, xx xxxxxx na xxxxxx agarového xxxxx xxxxxxxxxxxx Bacillus stearothermophilus xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx mikroorganismus xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Čirá xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx jsou v xxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx na koncentraci x druhu inhibiční xxxxx x mléce.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx ze xxxx x xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 80 ± 1 °C.
4.2 Pomůcky xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 xx 13 xx, schopné xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, roztok xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx testovací organismus xxx.
Xxxxxxxx složky kultivačních xxxxx xxxx xxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx skle xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx voda alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxx xxx růst xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Kultivační xxxxx
5.1.1 Xxxxx agar (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx detekci inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 g |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (A.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx ve xxxx, xxxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnotu pH, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Sterilizovat médium 15 xxxxx při 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x xxxxx xxx inhibičních xxxxx (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx penicilinázy (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dávky, je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx týdny při 0 °C xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx penicilinázu xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx účely xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx deset xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je nutné xxxxxxxxxxxx, xxx tento xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx koncentraci roztoku xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx možné xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se kontrolním xxxxxxxx xxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx spór)
Viz A.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx rozpustit agarové xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 xX.
5.6.2 Do xxxxx přidat xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) x nezbytnému xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), x cílem xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, x důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx misky (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxxx 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Pro Xxxxxxx misku x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 ml xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxx vodováhou, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx víčka xx xxxxx a xxxxxxx xx dnem xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx kondenzaci vody xx xxxxxxx agarového xxxxx.
5.6.5 Xxxxx připravené Xxxxxxx misky xx xxxxxxx nejlépe xxxxx xxx den, ale xxxxx být používány xxxxxxxxx xxx týdny, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx vloží xx xxxxxxxxxx polyethylenového xxxx x xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Označit xxx Xxxxxxx misek, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 U vzorků x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (A.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °C, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Důkladně xxxxxxxxx, xxxx přenést xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx lahvičky xx širokým xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx penicilinázy (5.3) x řádně xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) do vzorku xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x suché xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx disku x lahvičku xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x lehce xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Disky napuštěné xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx od xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x od xxxxxx xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx kontrolu citlivosti xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx standardním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx rozmístění xxxxx xxxxx na agarové xxxxxx x xx xxxxxx identifikaci, obrátit xxxxx dnem xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 až 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Po inkubaci xxxxxxxx misky xxx xxxxxxx zdroji xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx kolem xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx zóny xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx nejméně 2 xx zóny.
6.2.7 Xxxx xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx nebo xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx inhibičních xxxxx x testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace a xxxxxxxxxxxx inhibičních xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (6.1.2) x xx xxxxxxx ošetřeným xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) a xxxxxx xx na xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Postup 6.2.1 xx provede dvojmo xxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz 2)
7.1 Xxxxx xx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx žádná xxxx xxxx, xxx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než zóna xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztokem penicilinu (5.2x)), inhibiční xxxxx xx xxxxxx mléka xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než 0,004 μx/xx.
7.2 Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx hodnotě xxxxxxx xxxx xxxx kolem xxxxx se vzorkem xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx použité x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx průměru čiré xxxx xxxxx disku xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, který nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx být tudíž xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx to je xxxxxxxx, xxxxxxxxx látky xxxx než xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx postupy.
8. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Stanovení xxxxxx penicilinu xxxx xxx provedeno buď xx xxxxxxxxxx standardní xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx základě velikostí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) xx d)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx lineární xxxxxxxx xxxx log10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, standardní xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx na xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx počítají na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Průměry xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx koncentrací penicilinu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx průměru xxx vzorků xxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx pětkrát xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx vyjadřují xxxx xxxxx xxxxxxxxxx rovný xxxx xxxxx než 0,004 μx/xx (nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx obsah xxxxxxxxxxx látek xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX PATOGENNÍCH XXXXXXXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
X souladu x požadavky směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX bodu 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxx dodržovány, xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx u xxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx mléko proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx x xxxxxxx X, kapitole VII xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, xxxxx jde x počítání xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx patogeny xx nezbytný pouze xxxxx, pokud existuje xxxxxxxxx, že xxxxx xx nějakou spojitost xx xxxxxxxxxxx otravy xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxx vydávání xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx tepelně ošetřené xxxxx xxx obchod xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx každý xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "nepřítomnost" x objemu pasterovaného xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Zpráva xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx postup.