Rozhodnutí Xxxxxx
xx xxx 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx syrového mléka x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Smlouvu x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x hygienických x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/EHS [2], x zejména xx xx. 10 xxxx. 2 uvedené směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxxxx čl. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx pro xxxxxx mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, bodu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, přítomnosti xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx mrznutí;
vzhledem x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; že je xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x testování; xx x očekávání xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx členské xxxxx xx to, aby xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx stanovení referenčních xxxxx analýzy x xxxxxxxxx zahrnuje x xxxxxxxxx postupů analýzy x kriterií spolehlivosti xxx xxxxxxxxx jednotného xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že opatření xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX ROZHODNUTÍ:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx pasterované mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních bakterií – xxxxxxxx kolonií xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- detekce xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx 1, 2 a 3 xxxx xxxxxxx x xxxxxxx II.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx do 31. prosince 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx vědeckých a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Článek 7
Toto xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 14. února 1991.
Za Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
PŘÍLOHA I
OBSAH
I. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Odběr vzorků xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná ustanovení xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx výsledků, kritérií xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x testování. Xxxxxxxxx xxxxxx členských xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx tato xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Pokud xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx destilovaná, xxxxxxxxxxxx nebo demineralizovaná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx účely xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx dalšího xxxxxxxxx) xx rozumí "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "ředění xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx používané xxxxxxxxxx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek
Příslušný seznam xxxxxxxxx a pomůcek xxx různé xxxxxxxxxx xxxxxx xx týká xxxxxxxxx x pomůcek xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Analytické xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx xxxxxx xxxx x přesností xxxxxx na 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek uvedený xx xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx příslušnou metodu. Xxxx není xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx splněno, xxxx se xxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xx vypočítá x xxxxxxxxxx hmotnosti vzorku.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx uvedená pro xxxxx postup xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxxxxxxx výsledky testu, xxxxx byly získány xxxxxxx postupem x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (stejný xxxxxxxxx, stejný xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, krátké xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Reprodukovatelnost (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxx samostatných xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx (různí xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx a/nebo různé xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, uváděné x příslušných odstavcích xxxxxxx postupu, xxxxxxxxxxx 95 % intervaly xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx uznaných xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx používají xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. V xxx xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx odhadnuty.
5.1.4 Kruhové xxxxx a nezbytné xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x mezinárodními xxxxxx.
6. Xxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x získané xxxxxxxx. Xxxx jiné musí xxxxxx všechny podrobnosti xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x všechny xxxxxxxxx, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. ODBĚR XXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx syrového x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx vzorků xx použijí pro xxxxxx mléko xxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx skladovacích x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx vzorků xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. provedou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, kteří xxxx xxxx odběrem xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx to xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx laboratoř považují xx nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxxx reprezentativní x x souladu x celou xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx za nezbytné, xxxxxxx zaměstnance pověřené xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx oceli xxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu, xxx xxxx být xxxxxxxx s ohledem xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, odběr vzorků, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx pro míchání xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx mít dostatečně xxxxxx plochu xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výrobku xxx vzniku žluklé xxxxx. Naběračky xxxx xxx xxxxxxxx pevnou, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x nabírání xxxxxx x jakékoli xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo x vhodného xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxx) nesmí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx materiál a xxxxxx xx vzorky xxxx xxx čistý, xxxxx, xxxxxx povrch xxx xxxxxx x xxxx mít zakulacené xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x musí xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx pro xx xxxx xxxxxx xxxxxx vzorků xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, musí xxx xx každém xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x sterilizováno x xxxxxxx x xxxxxx xxxx požadavky, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx příslušný xxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx vzorků
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx odebrán ihned xx promíchání, když xx mléko ještě x xxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx pro různé xxxxx, xxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx potřebám xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx takový, xxx byly xxxx xxxxxx xxxxx naplněny xxxxxxx a při xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx obsah xxxx xxxxxxxxxx, aniž xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx přepravy.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx z xxxxx x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, aby se xxxxx řádně xxxxxxxxxx x xxx xx xx xxxxx konve xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx odebere postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x chlazených xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx dokud není xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx míchačky, xxxxxx ručně.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x misky xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx bylo xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx účelem xxxxxxxxx rovnoměrného xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxxxx xxxxx ruční xxxx xxxxxxxxxx míchání. Xxxxx objem zásilky, x xxx xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx misky xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x celé xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx z rozdělené xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx vzorků, xxxxxxxxx xx více nádob, x xxxxx xxxxxx xx odebere xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx množství mléka xxx každý xxxx. Xxxxx vzorky z xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx odděleně testovány, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x poměru x xxxxxxxx, xxxxx xx nachází v xxxxxx, ze které xxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx odebere xxxxx (xxxx) vzorek (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Odběr xxxxxx z xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, cisternové kamiony, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Před xxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka xxxxxxxxxx xxxxxx xx době, xx xxxxxx xxxx xxxxx x klidu. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx postup xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx plánovaného testování. Xxxxxxxx promíchání xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx promíchání xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx účinný, pokud xx rozdíl xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx vypouštění xxxxxx malé množství xxxxx, xxxxx ani xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxxxxx odběr xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě xxxxxx xxxxxx z vypouštěcího xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx zajištěna xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání xxxxxx xxxxxxx nádob xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a cisternových xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- vrtulí xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x průlezovém otvoru; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- x xxxxxxx cisternových xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx a objem xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx odběr vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx mléka dodaného xxxxxxxxxx se může xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx před a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxxxx odpovědný xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx musí xxx xxxxxxx vzorek,
- poměr xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x minimálním xxxxxxx xxxxxx),
- schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x šarže xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxx, xx kterého xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- maximální xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx je nutné xxxxxxxx.
4.4 Odběr xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx spotřebě a xxxxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx jde x xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx obchodní xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx xxxxxxxx, a xx, xxxxx xx xx možné, xxxxx xx xxxxxxxxxx (v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x den xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx UHT x sterilizovaného) xx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, x to xxxxx xxxxxx poskytnutých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx podle xxxxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx vzorku
Vzorek xx xxx být xxxxxxx identifikačním kódem, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx příslušného orgánu (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodrženy x xxxx mezi xxxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxx, a xx xx xxxxxxx druhu xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx vzorky nebyly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zápachu x xxxxxxx slunečnímu xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx syrového xxxxx určené pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx při xxxxxxxxx 0 oC xx 4 oC. Xxxx xxxx odběrem x xxxxxxxxxx xxxx být xx nejkratší x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Příslušný xxxxx xxxx souhlasit, xxx xxxx xxxxxxx skladování 0 xX xx 6 xX, xxxx-xx xxxx mezi xxxxxxx x testováním xxxxx xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx pasterovaného mléka xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx x testováním xxxx xxx xx xxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx 24 hodin,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxx xx nejkratší.
Speciální preventivní xxxxxxxx, která xx xxxxx přijmout xxx xxxxxxx testy, xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx peroxidázy
IV. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X
X. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – počítání xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganismů
I. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, odstředěného, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), v xxxx xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx snímač xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx typ xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx plató xxxxxx xxxxxxx, kdežto xxxxx xxx xx x obchodních xxxxxx xxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxx mrznutí xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx odečet. Vzhledem x xxxx, že xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx bodu xxxxxxx různých druhů xxxxx, xxx x xxxxxx xxxx mrznutí xxxxx a standardních xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx plató. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx časem se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx rutinního testování.
Bod xxxxxxx lze xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x mléce xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx vyšší xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx na 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx mléka: hodnota xxxxxxxx v souladu x xxxxxxxx xxxxxxxx x vyjádřená xx xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek xxxxx xx v xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podchladí xx xxxxxxx teplotu x mechanickou xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, která xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx až x xxxxx, které odpovídá xxxx xxxxxxx vzorku.
Přístroj xx kalibruje xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxx vzorky mléka xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Za těchto xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx mrznutí xxxxx xx xxxxxxxx Celsia.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx řízené chladicí xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx teploměru) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, míchačky xx xxxxxx x xxxxxxxx xx vyvolání xxxxxxx, xxxxx x xx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.1 Chladicí xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx dva xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxx kapalinu, xxxxx xx xxxxx tak, xxx xxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx než 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xx důležité, xxx x lázni xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxxx je 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx skládá xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 mm. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 2 xxxxxxx a xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx napětí, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, aby při − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx stoupla xxx xxxxxxx okolí xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Maximální tolerance xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Když xx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, konec xxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx v xxx xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 mm xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (viz xxxxxxx xx straně 15). Xx třeba dodat xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx nastavení xxxxx xx této polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx xxxxx x ohmech při xxxxxxx X,
− xX / xX × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxxxx. X xxxxx praxi xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip měření
Použitý xxxxxxxx pracuje xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxx xxxxxxx. Plató xx část křivky, xxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX po xxxx xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x jejichž teplotní xxxxxxxxxx není vyšší xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx nesmí xxxxxxxx od xxxxxxxxx x xxxxx rozsahu x více xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace xxxx xxx možné odpory xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx dílky xx xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx rozlišení xx xxxxxxx 0,01 °X x rozmezí xx 0 °X xx –1 °C.
Stabilita xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx obvodu xxxx xxx taková, xxx xxxxxxxx dvou xx xxxx následujících xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx 0,001 °X.
Xxxxxxxxx obvodu xxxx být xxxxxx, xxx xxx správné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx bodě xxxxxxx od – 0,400 °X do – 0,600 °X xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx o xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx měla být xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, aby její xxxxxx konec xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxx 1,5 xx nad xx xxx touto xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx bočně x xxxxxxxxxxx rozkmitem xxxxxxx xxxxxxx (nejméně ± 1,5 mm), xxx byla zajištěna xxxxxxxx xxxxxxx testovacího xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx vyvolání mrznutí
Může xx xxx jakékoli xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolá mrznutí xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx k xxxx xxxxxxx. K xxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx postupem xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na jednu xx xxx xxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx stěny xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx a 50,8 ± 0,1 mm xxxxxx; xxxxxx průměr xx 16,0 ± 0,1 xx a xxxxxxx xxxxxx je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx skla xxxxxxxx xx nesmí xxxxx x více xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx xxx xxxxxx xxxxxx vzdálenou od xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 mm xxx dnem xxxxxxxx), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx kolísání xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, když xxxxxx zdroj xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 xx, xxxxx X.
4.4 Sušárna, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx pec, xxxxxxxxx, nastavitelná na 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx skle, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx na 20 ± 2 °X, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx sodný, xxxxxxx x.x., xxxxx mletý, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x xxxxxxxxxx xxxx xxxx nejméně 24 xxxxx při xxxxxxx 130 ± 1 °X x xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx chloridu xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx přelít roztok xx odměrné xxxxx x objemu 1000 xx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dva xxxxxx xxx asi 5 °C x xxxxx xxxxxxxxxx polyethylenových xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx roztoků chloridu xxxxxxx xxx 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx použitím xx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx x láhve xxxxxx do suché x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat pipety.
Nepoužívat xxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx prázdné, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx neobsahují xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx thiomersalu 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
Kryoskop musí xxx xxxxxxxx xxx, xxx se okolní xxxxxxx nelišila x xxxx xxx 1 °X od teploty, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být vystaven xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx pokojovým xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx x xx xxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx xxxx kalibrací. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx chladicích xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx bod mrznutí xx těsně nad xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu xxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx. Rozdíl xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx – 0,100 °C.
(U xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx příslušný xxxxx xxxxxxxxxx sestaven xxx, xx se ustálí xx xxxx hodnotě xxxx mrznutí x xxxxx xxxxxxx měřícího xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx kalibrační postup; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx pipety xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx do xxxxx a xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx vyrobeny x xxxxxxxx xxxx zkumavky xxxxxxxxx na vzorky xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x kryoskopu xxxxxx xxxxx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x druhým xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx roztok xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, aniž xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx tedy připraven x použití x xxxxx ukazuje xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxx jakákoli úprava.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx skladovat xxxxxx xxx teplotě mezi 0 °X a 5 °X.
7.2 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx tělíska xxxx xxxx xxxxxx xxx xx vzorku xx xxxxx a xxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx promíchat. Xxxxx xx použije xxxxx, nesmí xxxxxxxx x xxxxxx x xxxx být účinný xx laboratorní xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °C) xxxx je xxxxx xx ohřát na xxxxxxxxxxx teplotu xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx roztoky x vzorky mléka xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx teplotu.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx současně xx xxxxxxxxxx bodu xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x kyseliny xxxxxx xx 100 xx xxxxx, nemohou xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Postup
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x teplota xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, případně zda xx sonda xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx vzorky. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xx, zda xx xxxxxxxx kapalina xxxxxxx míchá xxxx xxxxxxxx. Xxxxx byl xxxxxxxx xxxxxx alespoň 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx chladicí xxxxxxxx, xxxxxx míchačky x xxxxxxxx rozkmit xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx měřit xxx xxxxxxx standardního xxxxxxx xxxxxxxx sodného (xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx při xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx měřeních xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,001 °C. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx hodnot xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx než 0,002 °X, xxxxxxxx se xxxxx kalibrujte, xxx xx popsáno v xxxx 6.
Pokud se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx xx provádí nejméně xxxxxx xx hodinu, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx protřepáním x xxxxxxxxxxx otáčením. Xxxxx neprotřepávat standardní xxxxxx xxx prudce, xxx xx xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do xxxxx x čisté xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, že xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxx opatrně xx xxxxx směrem odspoda xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx určené výrobcem x xxxxxxxxx na 0,1 °X.
(X některých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx odečíst xxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x ručních xxxxxxxxx se nezbytné xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se xxxxxxx, xxx mrznutí xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxx nitka xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx začne xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxx se x jiným xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx xx udržuje xx xxxx xxxxxxx, xxx se rozpustil xxxxxxxxxxx tuk.
Poté xxxxxxxx xxxxxx xx testovací xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx rychle stoupne xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx dobu xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dosažené xxxxx xxxx doby x tuto xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx kterou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx maximální xxxxxxx, xx liší vzorek xx xxxxxx a xxx xxxx x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx než xxx xxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx uspokojivě xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx x xxxxxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx naměřenými body xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), provést xxxxx xxxxxxxxx x jiného xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx obou stanovení xxxxxx xx 0,004 °X, zapíší se x xxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx přístroje uložit xxxxxxxx zkumavku na xxxxxx na xxxxx xxx vzorky x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x chladu.
(U některých xxxx xxxxxxxxx xx xxxx možné; v xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx se xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několika xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx shodné xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Výpočet
Pokud xx po xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xxxxxxxxx xxxxxxxxx, za xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx obou xxxx xxxxxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx tento xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °C
Obrázek 1
Schéma xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xx skleněné xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivity xxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Definice
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Aktivita xxxxxxxxx mléka je xxxxxxxxx, pokud je xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 ml.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojsodného. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 nm. Poté xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx fosfatázy byl xxxxxx.
4. Činidla
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxx xx vodě 50,0 x xxxxxxxxx barnatého (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx borité (X3XX3) x doplnit xx 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx xxxxxxx xxxxxxx na 50 °X, oba xxxxxxx xxxxxxx, promíchat, xxxxxx xxxxxxxx xxx xx 20 °X, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pH na 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx objemem xxxx.
4.2 Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x methaboritanu xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x NaBO2.4H2O x 20,0 g xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx na 100 xx.
4.4 Roztok xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, prostý xxxxxx, xx 100 xx tlumivého roztoku (4.1.3) nebo 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 ml xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx BQC (4.6) x xxxxxx stát 30 xxxxx xxx xxxxxxxx teplotě. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, dokud xx xxxxxxx-1 neoddělí. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X případě xxxxxxxx xx extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx zabarvení x provést xxxxx xxxxxxxx. Tlumivý xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x to xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx x hydroxidu xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (ZnSO4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5H2O) x xxxxxxx xx 100 ml.
4.6 Roztok 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 ml 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 x síranu xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 mg xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx do xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 xx, xxxxxx vodu, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 ml. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx měsíců.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré pomůcky xx skla, xxxxx x xxxxx a xxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx oplachování čerstvě xxxxxxxxxx destilovanou vodou xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx typy xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx způsobit xxxxxxxxxxx fenolů a xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx laboratorní vybavení, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx váhy
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx 610 nm.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx po 5 xx x 10 ml.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx o xxxxxxx nejméně 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Postup
Poznámky:
a) Xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx slunečního xxxxxx.
x) Stopy xxxx xxxx potu xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xx xxxxx xx jim xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v chladničce, xxxxx xx déle xxx xxx xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx xx xxxxx xx dvou xxxxxxxx (5.4), xxxxx zkumavku xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý xxxxxx xxxxxxxx dvě minuty xx xxxxxx vodě; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx vodou xxxxxx xxxxxxxxxx folií, xxx xx prohřála xxxx xxxxxxxx. Rychle xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x xxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx ihned xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx lázni (5.2) x xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx v bodě 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx ve vroucí xxxx. Xxxxxx zchladit xx xxxxxxxxx teplotu.
6.3.5 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 ml xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx znovu, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx roztoku XXX (4,6), xxxxxxxxx x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Xxxxx absorbance xxxxxxxx x bodě 6.3.9 převyšuje absorbanci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujícího 20 μx fenolu xx zkumavku podle xxxx 6.4.4, opakovat xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx testovacího xxxxxx, xxxxx se opatrně xxxxx xx varu, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) připravit xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Do xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 ml xxxx x 1 ml xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx zředění vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 xx roztoku XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx zabarvení 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.4.5 Na xxxxxxx xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx xxx každé xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxx x vzorec
7.1.1 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxxxx x μx xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × D
kde
A xx xxxxxxxx xxxxxx x μx získané xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx xxxxxx zředění xxx zředění provedené xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx D = 1).
2,4 je xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Spolehlivost
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud xx xxxxxxx provede xxxxx 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx vzorku.
III. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx pasterováno, do 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx žádné xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx rozkládá xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx oxiduje xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx přímo úměrná xxxxxxxxxxx enzymu.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 fenylendiaminu
Rozpustit x xxxxx vodě (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x temnu, x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx jednoho xx xxxx xxx xx připravení roztok 1,4 xxxxxxxxxxxxxx vytvoří xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx zředit 9 xx 30 % peroxidu xxxxxx x xxxxxxx xx 100 ml. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx peroxidu xxxxxx xx stálý asi xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxx x temnu, x láhvi se xxxxxxxxx zátkou, xxxxx xxxxxxx jakémukoli styku x organickými xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx zkumavky x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po promíchání xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx modré xxxxxxxx xxxxxx xxxx než 30 xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, reakce xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxx xx použije xxx xxxxxx mléko, pasterované xxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizované xxxxx, xxxxx bylo 15 xxx preinkubováno xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat stanovený xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním xxxxxx x Petriho miskách x nechat inkubovat 72 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 ml syrového xxxx pasterovaného xxxxx xxxx na 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx sterilizovaného xxxxx xxxx UHT xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx se zařízením xxx kompenzaci teploty, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Mechanické xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx schopná xxxxxxx 1 ml xxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx ředicího xxxxxxx a pracující xx xxxxxxxx excentrické xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze skla
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx x dostatečným xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x promíchání 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění.
4.2.2 Baňky x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx zkumavky x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx skla xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 mm. Vnitřní xxxxxxx xxxxx by xxxx být nejméně 10 mm. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x těchto xxxxxxx:
x) x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx teplotě 170–175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při použití xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx by xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené odstředěné xxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, glukózu x nakonec xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Xxxx přidat agar x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, dokud se xxxx zcela xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat v xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x množstvích xx 100 do 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky a xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx kultivační médium xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx médium
Kultivační médium (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx pokyny výrobce, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx pH xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X metodou xxxxx xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, sterilizace x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) tak, xxx xx sterilizaci xxxxx xxxxxxxx obsahovala 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat pH xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx než 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx mikrobiologického vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx mikroorganismy xx nejrovnoměrněji rozděleny, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx pěnu xxxxxx xxxxxxxxx. Doba xxxx mícháním a xxxxxxx testovacího vzorku xx xxxxxx překročit xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx kontaktu s xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ředění míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších desetinných xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) do 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx ředění 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx postup xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho xxxxx
7.5.1 Xxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx vhodného desetinného xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 denní xxxxxxxx při 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, příloha A xxxxxxxx XXX bod 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx do misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx mléka (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx naočkované misky xxxxx asi 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem přípravy xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx ředění x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx misky xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx obrácené xxxx xxxxxx. Neskládat xx xxxx více xxx xxxx misek. Sloupky xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné dbát xx xx, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx koloniemi. X xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící povlak xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx misky, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx misku. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx více xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Použít xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 až 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 ml xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) d
kde:
∑C ΣC xx celkový xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx misek xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx misek xxx druhém ředění
d xx xxxxxx zředění, xx xxxxxxx kterého xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Když je xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx převrácená hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.1.4 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x počítání xx možné, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx se považují xx nevyhovující xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
V. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °X
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxx pět xxx xxxxxxxxxxxxx při 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xx x xxxxx xxx 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx pasterované xxxxx pět xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx skla
Obvyklé laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °C xx xxxxx xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní lázeň, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx počítadlo
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx vzorku xxxxx xxxx desetinného xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx principu xxxxxxxxxxx rotace obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x objemu 20 xx pro skladování xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, bezbarvého xxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Dno nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze skla:
Pomůcky xx skla se xxxxxxxxxxx jedním z xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx sterilizuje x nádobách, xxxx xxxxxx xx neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxx xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx se xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx dextróza |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx ověří xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx mlékem, xxxxx xxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V xxxxx xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx extrakt, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx odstředěné mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx zcela xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 minut.
Pokud je xx nezbytné, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx od 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije ihned, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 a 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 měsíc po xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx rozpouštěním, pokud xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx x skladovat kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx ředidlo (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, aby po xxxxxxxxx xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 ml xxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxxxxxxx pH ředidla.
Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx pH xxxxxxxx podle xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultivačního média x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Příprava xxxxxx xxxxx
7.2.1 Inkubovat x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx to xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x objemu xxxxxxx 100 ml po xxxx 120 ± 2 xxxxx při 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx co nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx mezi xxxxxxxx x odběrem testovacího xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 sekund xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx xx tak xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tento xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx přiměřené množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx a/nebo xxxxxxxx desetinného ředění. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx ředění. Xxx xxxxx ředění (8.1.1) xxxxxxxxx jednu xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 ml kultivačního xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx misky, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba mezi xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x kultivačním xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky inkubovat xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx sebe xxxx než xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx xx nesmějí vzájemně xxxxxxx, xxx být x kontaktu se xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat kolonie x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin v xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx pochybností provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx považují za xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x nepostižené xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pokrývají xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, misku vyřadit.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 xx 300 kolonií (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 n2)d xx xxxxx naočkovaného vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx byla sudá.
Příklad:
Ředění 10−2: 278 a 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, že počet xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × d", xxxxxxx "d" je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx je xxxxx, xxxxxxx odhad x vynásobit xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX OBSAHU KOLIFORMNÍCH XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX PŘI 30 °X
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční postup xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v pasterovaném xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx při 30 °X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx jsou xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zkvašovat x xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx nechat xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kolonie x, xxxxx to xx nutné, potvrdit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx koliformních xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx platina-iridium xxxx nikl-chróm.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx, aby xxxxx xxxxxxxxx konfirmační kultivační xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxx xxxxxxxxxx sušeného selektivního xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, x xxxxxxxxxxxx hrotem, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, s výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx se xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu hodinu xxx xxxxxxx 170 – 175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx xxxxx dbát xx xx, xxx bylo xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: pokud se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, tyto nádoby xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx víčka xx xxxx být xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx violetí, xxxxxxxxx červení, xxxxx x xxxxxxxx (XXXX xxxx). Xxxxxx selektivní xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 g |
|
Kvasnicový xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxx xxxx několik minut. Xxxx důkladně promíchat.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 až 150 xx do sterilních xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx zkontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Použít xxxxxxxxxx médium xx xxx xxxxx xx xxxx přípravě.
5.2 Tekutý xxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx. Konfirmační kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx a xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, upravit pH xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po sterilizaci xxxx xxxx hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx bubliny.
Zkontrolovat pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x temnu při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržte xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx podle xxxx 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (VRBL xxxx) xxxxxxx v xxxx 5.1.
6.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx mléka řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx přenést (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx do každé xx tří xxxxx (4.2.4) x tím xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx mléka (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx asi 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx po nalití xxxxx promíchat rotací Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx misku x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx xxx použit xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
Xx xxxxxx ztuhnutí xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX xxxxx (6.1) xx povrch xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx ztuhnout.
6.5 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx být x xxxxxxxx se xxxxxxx x vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 hodiny xxx 30 ± 1 °C.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x průměru nejméně 0,5 xx, s xxxx bez xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx kolonie necharakteristický xxxx (xxxx. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx nebo xxxx tvar sraženin xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), provést xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 provést xxxxxxxxxxx test x xxxxxxxx xxxxx (např. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx obsahující xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °C.
Za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx xxxxxxxx takové xxxxxxx, xxxxx x Durhamově xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx výsledky xxxxx obsahujících xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx základě procentuálního xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
n xx xxxxxxxx vyšetřovaného xxxxxx (6.3) x mililitrech (3 ml).
Počet xx xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx číslice, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx 100 xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx sousední xxxxxxx xxxxx byla sudá.
Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, uvést výsledek xxxx "xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 ml".
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx ještě nejsou x dispozici.
VII. XXXXXXXXX XXXXXX SOMATICKÝCH XXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx dva xxxxxxxxxx postupy xxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
B. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxx pro stanovení xxxxx buněk xx xxxxxx mléka xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (viz X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx možné zřetelně xxxxxxx methylenovou modří
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Tenká vrstva xx xxxxxx a xxxxxxx. Počítání xx xxxxxxx xxx mikroskopem. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx získat počet xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
|
1,1,1-trichlorethan nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx a xxxxxxxxx xx proto xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx a 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxx na 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx modř, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 hodin xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °X x přidat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx filtr x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 10 xx 12 xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx roztok xxxxx přefiltrovat.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 xx x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko s xxxxxxx 20 mm × 5 mm xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx standardní xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx vrstvu.
5.4 Horizontální xxxxx deska (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx sklíček.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) pro sušení xxxxx xxxxxx.
5.6 Vodní xxxxx, nastavitelná xx 30 xx 40 °X xxx ohřívání xxxxxx xxxxx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxx po xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx teplota xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Vzorek xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) na 30 až 40 °X. Xxxx řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxxxxxx sklíček
Vyčistit xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, vysušit papírem, xxxxx xxxxxxxxxxx prach, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx tenké xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, která xxxxxx xx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) a xxxxxxx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx xx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx tenkou vrstvu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x vyšetřit xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx tenkých xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, pokud xx xx xxxxxxxx, vysoušení xxxxxxxx ventilátorem (5.5). Xxxxxxx tenké vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx se přebytečné xxxxxxx zcela xxxxxxx. Xxxxx sušit a xxxxxxx tak, xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Počítání xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx jádra, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxx je x xxxxxxxxxxxxxx xxxx viditelná xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxx, které xxxx xxxxxxx pouze x okrajových xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx nejméně xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Počítání xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pod mikroskopem xxxx být rovněž xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx počítání, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx elektronického xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x obsahem 400000 xx 600000 buněk/ml xx neměl xxxxxxxxx 5 %.
Počet xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx podle Xxxxxxxxxx xxxxxx rozdělení nejméně 400, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = s2,
kde:
M xx xxxxxxx hodnota
V xx xxxxxxx
x xx xxxxxxxxxx odchylka.
Variační xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / M xxxx XX = 100 % / s nebo XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (například 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx tenké xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx se xxxx počítat, xx 5 mm. Šířka xxxx odpovídá průměru xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / x × x
xxx:
x je xxxxxx mikroskopického xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
b xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx ve střední xxxxxxx xxxxx vrstvy xxxx xxxxxx mřížky
Pracovní xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx buněk
S xxxxx xxxxxx počet xxxxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 a 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační xxxxxxxxxx (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup, který xx xxxx po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x syrovém xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo bez xxxxxxxx konzervace.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxx x důsledku barvení xxxxxxx XXX minimální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (například 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx s tlumivým xxxxxxxx x s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xx xxxx přenese ve xxxxx xxxxx xxxxxx xx rotační disk, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x zaznamenává. Obsah xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx xx to xxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
4.1 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Hydrogenftalat draselný |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
|
pH 5,7 až 5,9. Xxxxxxx vodou na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx jednotlivé xxxxxx. Skladování ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx dní.
4.2 Fluorescenční xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ethidiumbromid xx xxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x tlumivým xxxxxxxx (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx objem 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx více xxx xxxx xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx roztok (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx složky. Skladování xx nemělo xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Počítací zařízení xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxx částic, které xx xxxx počítat, x xxxxxxxx hodnotou, xxx níž xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx výrobce xx použití xxxxxx, xxxxxxx obsah xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Vodní xxxxx, s xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Zkumavka, s xxxxxxx xxxxxxxx, objem xxx 15 xx.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Vzorek xxxx být skladován xxx nízké xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx vzorek xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xx uplynutí 24 xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx byl xxxxxx xxxxx. Skladovací xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °C.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx po odběru xxxxxx.
6.2.1 Chemická xxxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx konzervačních xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx orthoborité xx xxxxxx xxxxx být xxxxx než 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx draselný:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,2 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx může xxx xxxxxxxxxxx azidem xxxxxx x xxxxxxx koncentraci 0,024 x/100 xx, xxxxx je vzorek xxxxxxxx xx teplotu 6 až 12 °X ihned po xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 48 xxxxx po jeho xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx může xxx konzervován xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx teplotu 6 xx 12 °X ihned po xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx byl konzervován xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx ještě xxxxxxxxxxx xxxxxxx až 48 xxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojchromanem xxxxxx, xxxx xxx dodrženy xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx vyšetřit, se xx nadojení xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Počítání xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx bez předběžného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx mohou být xxxxxx nízké. Xxxxx xx přesto nutné xxxxxxxx xxxxxxx, vzorek xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně xxx hodiny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený vzorek (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nejméně xxxxx xxx starý xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx pokojové xxxxxxx xx xx počítání.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxxx pomocí počítacího xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx po xxxxxxxx ohřívání (viz 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx vzorky důkladně xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx ředění x xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxxx provedeny x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx na xxxxxxx úrovni, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 xx 500 000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 buněk/ml
(odpovídá variačnímu xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola xxxxxxxxxx xx provádí xxxxxx xxxxxx o xxxxxx xxxxxx xxxxx, který xx stanoví počítáním xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů v xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxxxx, xxxxx obsahují antibiotika x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx jedním x několika xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx organismu. Xxxxx postup byl xxxxxx xxxx reprezentativní xxx takovéto testy.
B. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx x identifikaci xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx konfirmaci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x stanovení xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x tepelně xxxxxxxxx xxxxx, jejichž koncentrace xxxx vyšší než xxxxxx xxxxxxx v xxxx tabulce:
Detektovatelné xxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx [1]
|
Citlivost xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 g |
|
|
Pepton |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 g |
|
|
Voda |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky ve xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Upravit xX xxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxxxxx po 10 xx do xxxxxxxx xxxx xx 100 xx xx lahviček x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °C.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, s xxxxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Roztok trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 mg |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 ml |
|
Vodado |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprim (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Živný xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx živný xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx x sterilizovat xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx o 60 μx/xx (100 XX/xx), x to xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu sodného xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx destilované xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx roztoku penicilinu (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxx xx xx 1000 xx. Tento xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx penicilinu/ml (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx obsahujícího 0,004 μg xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx pracovního xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx v xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Mléko xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx inhibičních látek xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) ve xxxx, xxxxx xxxx předtím xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx čerstvého xxxxx, xxxxx bylo xxxxxxxxxx x prohlášeno xx xxxxxx xxxxxxxxxxx látek; xxxx mléko xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx se xxxxx xxxxxx xx 100 °C, xxxx xx uloženo do xxxxxxxxxx x teplotou 0 °X xx 6 °X xx xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 xx xxxxxxxxx s xxxxxx X 953.
5.4.2 Připravit xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x xxxxxxxxx naočkuje xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 hodin xxx 63 ± 1xX. Po xxxxxxxx xxxxxxx zkumavka sterilní xxxxxxxx zátkou. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx při 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Xxxxxxx misky (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx xx zkumavky xx xxxxxxx kulturou (5.4.2) a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x xxxxxxx xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Xxxxxxx misku (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx povrchu xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Při xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) nebo xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx mělo xxxxxxx xxxxxxx dvakrát x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx do xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx měly xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx až 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx měla xxxxxxxxx xxxxx životaschopných xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 10 xxxxxxx na xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx vykazovat xxxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx zkumavce xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx naočkovaného média (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx zátkou nebo xxxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxx, zatavením xxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx ztuhnout, poté xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx svislé xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxx xxx, ale xxxxx xxx rovněž xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °C, pokud xxxx ihned po xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx se xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx po odběru, x xx té xxxx xx skladují xxx teplotě 0-5 °X. Xxxxx není xxxxx otestovat xxxxxx xx 24 hodin, xxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxx zmrazené (−30 °xx - 15°X), aby xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Čitelně x nesmazatelně identifikovat xxxxxx zkumavku/ampuli (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Umístit do xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx požadovaný xxx xxxxxx a xxxxx (5.2 a 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x mikrostříkačkou (4.1.4) přenést 0,1 xx vzorku do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg/ml (= 0,0067 IU/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxx xxxxxx mléka bez xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx do xxxxx xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x xxxxx lázně.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx agarového média xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testovacím xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx antibiotik xxxx xxxxxxxxxxx xx vzorku x xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" uvedené x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Pokud xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx purpurové, xxxxxxx médium xx xxxxxxxxxx citlivé.
7.2 Částečné xxxxxxxxx zbarvení xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x koncentracích xxxx koncentracemi xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx inhibičních xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx životaschopné xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxx popsanými x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxx skladovat, xxxx xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx koncentrace
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (X.7.1) nebo xxxxxxxxxx reakcí (A.7.2).
Citlivost xxxxxxx xxx různá xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx kolem xxxxx.
2.2 Xxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx byla xxxxxxx penicilináza (beta-laktamáza), xxxxxxxxx čirou xxxx xxxx vytvoří čirou xxxx menšího xxxxxxx xxx xx průměr xxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx je xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx penicilinu a xxxxxx antibiotika xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) xxxxxxxxxxxx, inhibiční xxxxxx xx vzorku xxxxx není xxxxxxxxx, xxx může xx xxx xxxx reziduum [xxx směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, A.1.f) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx cloxacillin sodný, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx částečně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxx xxx identifikovány xxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx papírový disk xxxxxxxxx mlékem, které xx má xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Čirá xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx jsou x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx čiré xxxx mimo jiné xxxxxx xx koncentraci x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx x vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx A.4.2.
4.3 Xxxxxxxx disky, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 xx 13 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxx asi 130 xx mléka (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx složky xxxxxxxxxxxx xxxxx musí být xxxxxx pro bakteriologické xxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxx xxx růst xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Živný xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekci inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 g |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x podle xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx složky xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx přidání xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu xxxxxxx xxxxxxx pH, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx inhibičních látek (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 IU/ml)
b) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamázy) xx xxxxxxxx destilované xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx rozdělený xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx až xxxxx týdny xxx 0 °X xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx penicilinázu xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx účely xxxxxx postupu xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx penicilinázy stačí xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx x neznámou xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx tento xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx běžně dostupné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Testovací kultura (xxxxxxxx spór)
Viz X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 oC.
5.6.2 Do xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5) x nezbytnému xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x cílem xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kolonií x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (X.4.2.2), předem xxxxxxx xx 55 °C, xxxxxxxxxx agarové xxxxxx, xxx xx vytvořila 0,6 až 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx misku x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx vytvořila 0,8 xx vrstva.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx vodorovnost se xxxxx vodováhou, sejmout xxxxx x xxxxxx xxxxxxx médium xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx na xxxxx x obrátit xx dnem vzhůru, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx povrchu xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Takto xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nejlépe xxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx používány xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx se ihned xx xxxxxxxx vloží xx xxxxxxxxxx polyethylenového xxxx a uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x pozitivním xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx A" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx vzorky 10 xxxxx xx 80 ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxx nespecifických xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, poté přenést xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx mléka xx sterilní xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. X mléku přidat xxx 0,4 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx inhibičních xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) pomocí xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Odstranit přebytečné xxxxx xxxxxxx disku x lahvičku xx xxxxxxx. Naplocho xxxxxxx xxxx na xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx mléka xxxx být vzdáleny xxxxx od druhého xxxxxxx 20 mm x xx okraje xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx kontrolu xxxxxxxxxx xx disky (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx rozmístit xxxx xxxxx napuštěné xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx pět xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Po xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx identifikaci, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x nechat xx xxxxxxxxx 2,5 až 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx inkubaci xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx světla, xxx xxxx možné xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx kolem xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx zóny xx xxxxx.
6.2.6 Standardní xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx kolem disku xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxxx vzorky mléka, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx větší xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, ukazují xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx inhibičních xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zahřátého xxxxx (6.1.2) a se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx přidání xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx mléka xxxxxxx xxxx napuštěný xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x uložit xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx každý ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx vzorky xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy x pro standardní xxxxxxx penicilinu.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nevytvoří žádná xxxx zóna, xxx xxxx xxxx se xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mléka, xxxxxx xxxxx nebo xxxxx než xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztokem penicilinu (5.2x)), inhibiční xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μg/ml.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxxxxxxx hodnotě průměru xxxx xxxx kolem xxxxx xx vzorkem xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx použité x xxxxx postupu.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxx xxxxx než průměrná xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx nebo polosyntetický xxxxxxxxx, který xxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xx. Xxxxxxxxxx peniciliny, xxxx je cloxacillin xxxxx, xxxxxxxx být xxxxxxxxxxxx penicilinázou za xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx být tudíž xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx provedeno xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx papír xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx pořadnici a xxxxxx zón na xxxxxx. Inhibiční xxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx zdvojeného xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací penicilinu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx lze vypočítat xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Pro přesné xxxxxxxxx xx poloměr xxxxxxxxxxx xxx nejméně xxxxxxx větší, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx disků.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx vyjadřují jako xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx stanovené xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx x jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x požadavky směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxx 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodržovány, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx příčinou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x potravin.
Pasterace xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx patogenům. Pokud xxxx splněny normy xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx x počítání xxxxxxx xxx 30 °C x 21 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, specifický xxxx xx detekci patogeny xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx, že mléko xx xxxxxxx spojitost xx xxxxxxxxxxx otravy xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx vydávání xxxxxxxxx x zdravotní xxxxxxxxxxxx xxx tepelně xxxxxxxx xxxxx xxx obchod xxxxxx Společenství. Pro xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx kritéria a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x výsledku
Pro xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mikroorganismus xxxx být výsledek xxxxxxxx takto:
Počet mléka xx xxxxxxxx, nebo "xxxxxxxxxx" či "nepřítomnost" x xxxxxx pasterovaného xxxxx, xxxxx požaduje xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx jasně xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.