Xxxxxxxxxx Komise
ze xxx 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Evropského xxxxxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx xxxxxxxx Rady 85/397/XXX ze dne 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvnitř Xxxxxxxxxxxx [1] naposledy pozměněnou xxxxxxxx 89/662/EHS [2], x zejména xx xx. 10 xxxx. 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x testování, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxx x tepelně xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, že xxx xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, bodu mrznutí x xxxxxxxxxxx antibiotik;
vzhledem x tomu, xx xxx xxxxxxxxxxx mléko xx nezbytné xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patogenů, xxxxx koliformních xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, přítomnosti peroxidázy, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxx mrznutí;
vzhledem k xxxx, že xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx stanovit referenční xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxx mají xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x prošetřování xxxxxxxx, xx kterých se xxxxxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx a xxxxxxxxx; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx státy xx xx, aby xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/XX byly xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxxx referenčních xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx i xxxxxxxxx postupů xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx zajištění jednotného xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx syrové xxxxx xxxx tyto:
- stanovení xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx pasterované mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Použití referenčních xxxxxxx analýzy a xxxxxxxxx, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x článcích 1, 2 a 3 jsou popsány x příloze II.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx přezkoumáno xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Toto xxxxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. věst. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx mléka
I. OBECNÁ XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná xxxxxxxxxx xx týkají činidel, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx x testování. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x laboratoře xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx tato xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxx použitá k xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx musí xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx demineralizovaná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být bez xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx nebo jinak xxxxxxxx růst xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx dalšího xxxxxxxxx) se rozumí "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "ředění xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxx referenční xxxxxx se týká xxxxxxxxx x pomůcek xx xxxxxxxxxx použití x se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx váhy
"Analytickými xxxxxx" xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, výsledek uvedený xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx splňují xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorku.
5. Xxxxxxxx spolehlivosti: xxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnost
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) je xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xxxxx xxxx získány xxxxxxx postupem x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx podmínek (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx laboratoř, xxxxxx xxxxxx období).
5.1.2 Reprodukovatelnost (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx odlišných xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx přístroje, xxxxx xxxxxxxxxx a/nebo různé xxxx).
5.1.3 Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, hodnoty xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, uváděné x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % intervaly xxxxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx postupu. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx tyto xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx provedeny. X xxx případě xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Kruhové xxxxx a nezbytné xxxxxx xx xxxx xxx naplánovány x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x mezinárodními xxxxxx.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x testování xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx jiné xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, které nejsou xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, které by xxxxx xxxxxxxx výsledky. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx informace xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX A TEPELNĚ XXXXXXXXXX XXXXX
1. Předmět x xxxxxx použití
Tento xxxxxx popisuje referenční xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxx, přeprava x skladování xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx mléko xxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 se použijí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a tepelně xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxx x xxxxxxx, nádržích xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, kteří xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx považují xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x metodách xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x x souladu x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx testovací xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pro odběr xxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu, xxx xxxx xxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx předpokládané xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx vzorků, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxx plochu xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx dlouhou xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx hloubky xxxxxx. Objem xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 50 ml.
Vzorkovnice x xxxxx musí xxx xxxxxxxx, kovová xxxx x xxxxxxxx plastu.
Materiály xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x víček) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx materiál x xxxxxx xx xxxxxx xxxx mít xxxxx, xxxxx, hladký xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx mít zakulacené xxxxx.
3.2 Vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Vybavení pro xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) musí splňovat xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx sobě xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx po každém xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x pokyny xxxx požadavky, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx výsledků xx xxxx jdoucích vzorků.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx testy, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx odebrán xxxxx xx promíchání, xxxx xx mléko xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx vzorků xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxx odebrán xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxxx testování. Xxxxx xxxxxxxxx nádob xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx obsah xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx přepravy.
4.2 Ruční xxxxx vzorků
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x věder x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx nebo xxxxx xxxxxx a xxxx, xxxxxxx xxxx na xx, xxx se xxxxx xxxxx promíchalo x aby xx xx hrdle xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celou xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx xx mléko x zemědělském podniku
Míchat xxxxx mechanicky nebo xxxxx xxxxx není xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx ručně.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxx
Xx nezbytné, xxx xxxxx xxxx řádně xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx do xxxxx xxx. Za xxxxxx xxxxxxxxx rovnoměrného xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x níž se xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx množství xxxxx, u něhož xx má provést xxxxx vzorků, xxxxxxxxx xx více xxxxx, x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx. Xxxxx vzorky x xxxxx nádoby nemusí xxx xxxxxxxx testovány, xxxxxxxx xx jednotlivé xxxxx těchto xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x množství, xxxxx xx nachází v xxxxxx, ze xxxxx xxx každý xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx (více) xxxxxx (xxxxxx) z těchto xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Odběr xxxxxx x velkých xxxxx – skladovací xxxxxx, cisternové kamiony, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Před xxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx obsahu xxxxxxx xxxxx, skladovacích xxxxxx, cisternových kamionů xxxx cisternových vagónů xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka xxxxxxxxxx xxxxxx xx době, xx kterou xxxx xxxxx v xxxxx. Xxxx xxx prokázáno, xx xxxxxx promíchání xxxxxxx x xxxxxx x jednotlivých xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx promíchání xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx provedených xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxx z xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx obsahu xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx otvorem xx xxxxxx části xxxx x místě xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx promíchání xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celý xxxxx. Proto xx xxxxxxxxxxxxx odběr xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nádob xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x cisternových xxxxxx xx možné xxxxxxx:
- mechanickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x poháněnou elektrickým xxxxxxx,
- vrtulí xxxx xxxxxxxxx poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx a umístěnou x xxxxxxxxxx otvoru; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx cisternových xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxxx do průlezového xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x čistým xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx vniku xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x poloautomatické xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx xxxxx dodaného xxxxxxxxxx se může xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxx testovací laboratoří xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxx x xxxxx používání xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx postupů odběru xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, z xxxxx musí xxx xxxxxxx vzorek,
- xxxxx xxxxxxxxxx přenosu (xxxxx xxxxxxx s minimálním xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx poloautomatického xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- minimální objem xxxxx, xx kterého xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx preventivní opatření, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx k přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxx k přímé xxxxxx spotřebě a xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vzorky se xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, zapečetěných xxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx ošetření, a xx, xxxxx xx xx xxxxx, ihned xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka x den pasterace).
Z xxxxxxx druhu tepelně xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x sterilizovaného) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, x xx podle xxxxxx poskytnutých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx jiného příslušného xxxxxx.
5. Identifikace xxxxxx
Xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx orgánu xxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř pokyny xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x skladování, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxx mezi xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx druhu xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx na to, xxx vzorky xxxxxx xxxxxxxxx nežádoucímu xxxxxxx x xxxxxxx slunečnímu xxxxxx. Je-li xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx průsvitná, xxxx xxx xxxxxxxxx ve xxx,
- xxxxxx syrového xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx přepravovány a xxxxxxxxxx při teplotách 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX až 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx delší xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x testováním xxxx xxx co xxxxxxxxx x x xxxxxx případě nesmí xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy musí xxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx zařízení xxxxxxxxxx x xxxx mezi xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx musí xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx testy, jsou xxxxxxx v popisu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupů.
PŘÍLOHA X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C
V. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů
IX. Detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx přístroje (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), v němž xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx ochlazována elektrickým xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx snímač xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx dva typy xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx bod xxxxxxx xx plató xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxx je x obchodních xxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx mrznutí xxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxx odečet. Vzhledem x xxxx, že xx xxxxx xxxxx xxxxx křivky xxxx xxxxxxx xxxxxxx druhů xxxxx, xxx i xxxxxx xxxx mrznutí xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx hledajících xxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx časem se xxxxx používat v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx lze xxxxxx xxx odhad xxxxxx xxxxxxx cizí xxxx x mléce za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx x souladu x popsaným postupem x xxxxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx (°C).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek mléka xx v závislosti xx přístroji xxxxxxxxx xx vhodnou teplotu x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, která xxxxxxx, xx teplota xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx, xxxxx odpovídá xxxx mrznutí vzorku.
Přístroj xx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx vzorky mléka xxxxxxx xxxxxx odečty xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx udává xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx chladicí xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx teploměru) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, míchačky xx vzorky x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx zkumavek xx xxxxxx.
4.1.1 Chladicí xxxxx
Xx xxxxx použít dva xxxx xxxxxxxx lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx míchá xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxxx vyšší xxx 0,2 °C. Xxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx v rozmezí ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx zkumavky xx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx chladicí kapalinou.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx zkumavky xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (V/V) vodný xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x příslušný xxxxx
Xxxxxxxxx xx skládá xx skleněné sondy x maximálním xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 mm. Časová xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx než 2 xxxxxxx x xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °C xxxxxxx termistoru stoupla xxx teplotu okolí xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx tolerance xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx x pracovní xxxxxx, xxxxx skleněné xxxxxxx se musí xxxxxxxx v xxx xxxxxxxx na xxxxxx x x bodě, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (viz xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce
− xX / xX × 1 / X = β / T2
kde:
T xx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X je xxxxx x xxxxxx při xxxxxxx T,
− xX / dT × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx závisí xx xxxxxxxxx použitém xxx výrobě xxxxxxxxxx. X xxxxx praxi xx doporučuje hodnota xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx x odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx měření
Použitý xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx prvního xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Plató xx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx dobu xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor xxxxxxxxxx xx vyrovnává Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo podobným xxxxxxxxx pomocí nejlepších xxxxxxxxxxxx xxxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x xxxxxxx teplotní xxxxxxxxxx není xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx nesmí xxxxxxxx xx linearity x xxxxx rozsahu x více xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx hodnoty.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx možné xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx stupnice xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °C xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx dvou xx xxxx následujících xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx vyšší než 0,001 °C.
Linearita xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx správné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx bodě xxxxxxx od – 0,400 °C xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx než ± 0,001 °C.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx testovacího xxxxxx xx použije xxxxxx xxxx o xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, který xxxxxxxxx x mlékem,.
Míchačka xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx konec xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx termistoru. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx 1,5 xx nad xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx vibruje xxxxx x dostatečným rozkmitem xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 mm), xxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx testovacího xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx míchání xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx termistoru xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx mrznutí
Může xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxxx, xxx teplota xxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx k bodu xxxxxxx. X tomu xxxxx xxx použít xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx rozkmitu xxxxxxx xx jednu xx xxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx vzorky
Zkumavky xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; vnější xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx průměr je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx skla xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx mít značku xxxxxx xxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx dnem zkumavky), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx buď xxxxxx xxxx vně xxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx kolísání xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, když xxxxxx zdroj kolísá x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx váhy
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 ml, xxxxx X.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx odvětraná, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, nastavitelná xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Činidla
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x zchlazená xx 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, čistoty x.x., jemně xxxxx, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °C x elektrické xxxx xxxx nejméně 24 xxxxx xxx xxxxxxx 130 ± 1 °X x xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx exsikátoru.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx tabulka 1) xxxxxxx chloridu xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx přelít xxxxxx xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 xx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxx 5 °X v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx o maximálním xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otočením xxxxx. Nikdy neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x lahví, xxxxx xxxx ze xxx xxxxxxx xxxxxxx, x nepoužívat roztoky xxxxxx dvou xxxxxx, xxxxx neobsahují xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
Kryoskop xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 1 °X od teploty, xxx níž se xxxxxxx kalibrace. Xxxxxxxx xxxxx xxx vystaven xxxxxxxxxx světlu, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx než 26–27 °X.
Xxxxxxx se, že xxxxxxxx funguje xxxxx xxxxxx výrobce x xx xxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxx kalibrací. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx míchačky x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxx těsně xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu xxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx body xxxxxxx xxxx roztoků xx xxxxxxx xxxxx být xxxxx xxx – 0,100 °X.
(X některých xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xx dané hodnotě xxxx xxxxxxx v xxxxx rozsahu xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx postup; xxxxxxx xxxx tuto xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx pipety xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx a čisté xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx provádět xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx postup x xxxxxx standardním xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx takovým xxxxxxxx, dokud po xxxx xxxxxxxxxxx odečty xxx každý xxxxxx xxxxxxxxxx správné xxxxxxx xxxx xxxxxxx každého x nich, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx nastavení. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x použití x xxxxx ukazuje xxx xxxxxxx vzorku xxxxx, xxxx by xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx to je xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx 0 °X x 5 °C.
7.2 Xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxxx xxxxxxxxx všechna xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxx xx vzorku xx xxxxx x xxxxx nádoby x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se použije xxxxx, xxxxx reagovat x mlékem a xxxx být xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °C) xxxx xx xxxxx xx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx na xx, xxx standardní xxxxxxx x vzorky xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx stanovením xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx přesahuje 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, nemohou být xxxxxxxxxxx.
7.5 UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx nejméně 20 xxxxx před xxxxxxxxxx x otevřené xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxx, případně xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v prázdné xxxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx kryoskop x xxxxxxx xx, zda xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx zapnut alespoň 12 hodin, zkontrolovat xxxxxxx chladicí xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx jeho xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx měřit xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx měřeních nebudou xxxxx x xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx xx průměr xxxxxx hodnot liší xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxx než 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx v xxxx 6.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xx provádí nejméně xxxxxx za xxxxxx, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Stanovení xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx protřepáním x několikerým xxxxxxxx. Xxxxx neprotřepávat standardní xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx xxxxx x čisté zkumavky xx xxxxxx. Ujistit xx, že jsou xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx zkumavku xx xxxxxxx do kalibrovaného xxxxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx při xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °C.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x ručních xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosáhne xxx, xx xx xxxxxxx, xxx mrznutí xxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx mrznutí začne xxxxx nebo xxxxxxx, xxx xx dosaženo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Pokud xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx před dosažením xxxxxxxxx teploty, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na 45 °X a 5 xxxxx se udržuje xx xxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx rychle xxxxxxx xx na xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx dobu xxxxxxxxxx, x xxxx klesne. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dosažené xxxxx této xxxx x xxxx hodnotu xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx konstantní, x xxxxxx interval xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx maximální teploty, xx liší xxxxxx xx vzorku x xxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx xxx pro xxxxx. Je nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx uspokojivě xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx sondu x míchačku xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x chlupy xxxxxxxxxxxx látkou x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx naměřenými xxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), xxxxxxx druhé xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,004 °X, zapíší se x xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx sondy
Po xxxxxxx xxxxxxxxx uložit xxxxxxxx zkumavku xx xxxxxx xx místo xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx sonda zůstala x chladu.
(U xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx to xxxx xxxxx; v xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx se ujistit, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx slepých xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Výpočet
Pokud xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xxxxxxxxx potvrzena, xx xxxxxxxx xx považuje xxxxxx obou xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx mrznutí, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx součet xxxx xxxx přijatelných xxxxxx stanovení provedených xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, je třeba xxxxxx zaokrouhlit na xxxxxxxxx xxxxx hodnotu, xxx ukazuje xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx termistoru x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Aktivita xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx alkalické xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxx podmínek.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx, pokud xx xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 ml.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxx xxxxx z xxxxxxxxx fenylfosfátu dvojsodného. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dibromchinonchlorimidem a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (namodralé xxxxx), který xx xxxxxxxxxxxxxx měří xxx 610 nm. Xxxx xx provádí xxxxxxxxx xx vzorkem, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx byl xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx boritanu a xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x hydroxidu barnatého (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] a xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (H3BO3) x xxxxxxx xx 1000 ml.
4.1.3 Zahřát 500 ml každého xxxxxxx na 50 °X, xxx roztoky xxxxxxx, xxxxxxxxx, rychle xxxxxxxx xxx na 20 °X, x xxxxxxx nutnosti xxxxxxx xxxxxxx pH xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx vyvolání xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx sodného (XxXX2) nebo 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 g chloridu xxxxxxx (XxXx) a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Tlumivý roztok xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku pro xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x fenylfosfát xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) nebo 0,5 x fenylfosfátu xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx zabarvení (4.2), xxxxxx dvě xxxxx xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx xxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx a xxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx dní; xxxx xxxxxxxx vyvolat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx roztoku xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 g xxxxxx xxxxxxxxxxx (ZnSO4 · 7X2X) x 0,6 x síranu xxxxxxxxx (XxXX4 · 5H2O) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 ml 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Vyhodit xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx je xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) a xxxxxxx na 100 xx.
4.8 Standardní xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx na 100 ml. Tento xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx fenolu.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx xxxxxxx xx skla, xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx musí být xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx destilovanou xxxxx xxxx čistění xxxxx.
x) Xxxxxxx typy xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx způsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx váhy
5.2 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx délce 610 nm.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 xx x 10 ml.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx nálevky xxxxxx xxxxxxxxx, např. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx o xxxxxxx nejméně 9 xx xxx střední xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx přímého xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Stopy slin xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx falešně xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xx xxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx ihned xx xxxxxx xxxxxx. V xxxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxx v chladničce, xxxxx ne xxxx xxx xxx xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx xx xxxxx xx dvou xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx; xxxxxxxx a kádinku x xxxxxx xxxxx xxxxxx hliníkovou xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Po xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x testovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx lázni (5.2) x xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) promíchat xxxxxx obsah.
6.3.4 Xxxxxx xxxx x bodě 6.3.1 zahřívat xxx xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Rychle xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x řádně xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx filtrovat xxxxx, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvolání xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx a 30 minut xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx v bodě 6.3.9 převyšuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx při vhodném xxxxxxx vzorku. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx části xxxxx testovacího vzorku, xxxxx xx opatrně xxxxx do xxxx, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx (4.8.2) připravit vyhovující xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 a 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx vody x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx roztoku síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody a 0,1 ml roztoku XXX (4.6); promíchat.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx xxxxxxx xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx metodou nejmenších xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx fenolu xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu fosfatázy xxxxxxxxxx v μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × X
xxx
X xx množství xxxxxx x μx xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
D xx xxxxxx xxxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx žádného xxxxxxx X = 1).
2,4 xx faktor xxxxxxx (5/12 z 1 ml testovacího xxxxxx) – xxx 6.2 xx spojitosti x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Spolehlivost
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx fenolu/ml.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (xxxxxxxxx) μg xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud se xxxxxxx xxxxxxx podle 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 xx týkají xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXXXX PEROXIDÁZY
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxx nepřítomnosti xxxxxx peroxidázy x xxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 sekund xx xxxxxxxxxx xx objeví xxxxx zabarvení.
Negativní reakce xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx neobjeví xxxxx xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza xxxxxxxx xxxxxxx vodíku. Uvolněný xxxxxxxx xxxxxx oxiduje xxxxxxxx parafenylendiamin xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 fenylendiaminu
Rozpustit x teplé xxxx (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxx, x tmavě xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Během jednoho xx xxxx dní xx připravení xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx 9 xx 30 % xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx na 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx stálý asi xxxxx měsíc, pokud xx xxxxxxxxx x xxxxxx x temnu, x láhvi xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx styku x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx mléka xx čisté xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx peroxidu xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx zabavení xxxxxx xxxx než 30 xxxxxx po xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx specifická.
IV. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií xxx 30 °C. Xxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx, pasterované xxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx při 30 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Petriho xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 72 xxxxx při 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx 0,1 xx preinkubovaného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Přístroje a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, schopný xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx x pracující xx xxxxxxxx excentrické xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x dostatečným xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 ml xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx skladování kultivačního xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), skleněné xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky z xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx sterilního syntetického xxxxxxxxx, dno misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 xx. Vnitřní xxxxxxx misek xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx mít žádné xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx počítání xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek xx xxxx:
Xxxxxxx ze xxxx xx sterilizují xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx na to, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx se materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry nebo xxxxx by xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx by xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx sušeným xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx odstředěné xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by nemělo xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxx srovnávacími xxxxx xx sušeným odstředěným xxxxxx, xxxxx průkazně xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Xxxx xxxxxx agar x xx stálého xxxxxxx xxxxx do xxxx, xxxxx xx xxxx zcela nerozpustí, xxxx xxxxxxxx v xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx to xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx médium (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx po 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium
Kultivační xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx mléko před xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit pH xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx, pokud xx je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH pH-metrem (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (nejméně 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) do xxxxxxxx (4.2.1) tak, xxx po xxxxxxxxxxx xxxxx zkumavka obsahovala 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx se ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, avšak ne xxxx než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
Vzorek xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Doba xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx ředidla xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 sekund xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx ředidla (6.1) xxxxx pokynů x xxxx 7.3.
Získá xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho xxxxx
7.5.1 Xxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx při 30 °X – směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx A xxxxxxxx XXX bod 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx dvě xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx kultivačního média
Do xxxxx naočkované misky xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx došlo k xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx mléka a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx obrácené dnem xxxxxx. Neskládat xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx v kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx tlumeném xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx to, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx považují xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle bodu 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx misek xxx druhém xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx získány xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx nižší xxx 10, uvést, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx než 300 x počítání xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx převrácenou hodnotou xxxxxxx zředění. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 UHT mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx na 0,1 xx xx považují xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx mléce, xxxxx xxxx pět xxx xxxxxxxxxxxxx při 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, které xx xxx xxxxxx xx x xxxxx xxx 6 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Inkubovat xxxxxxxxxxx xxxxx pět dní xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx miskách x xxxxxx inkubovat 25 xxxxx xxx 21 °X. Spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °X xx všech bodech xxxxxx.
4.1.4 pH-metr se xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, přesný na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx sklo, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx desetinných ředění.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx nebo xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), skleněné xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx hrotem, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx ze xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo víčka xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx se měly xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko |
1,0 g |
|
Agar |
10-15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx srovnávacími xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx mlékem, xxxxx xxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx suspendovat a xxxxxxxxx ve vodě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx odstředěné mléko. Xxxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx a xxxxx xx varu xx xxxxxxx míchání, dokud xx agar xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, upravit pH, xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci xxxx jeho xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx nebo xx 12 až 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx než 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační médium
Kultivační xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx, ale přidat xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx složkou produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, xxxxx xx xx xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx je xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, aby xx sterilaci byla xxxx hodnota 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx ředidlo (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxxxxxxx pH ředidla.
Pokud xx xxxxxxx nepoužije xxxxx, skladuje xx x xxxxx při xxxxxxx mezi 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx bodu 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a skladovat xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média x xxxxxxxx ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Příprava xxxxxx mléka
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo, xxxxx to xxxx xxxxx, reprezentativní vzorek x xxxxxx nejméně 100 ml xx xxxx 120 ± 2 hodin xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Po inkubaci xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, a to 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx primárního ředění (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx přijít xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 ml xxxxxxx (6.1) podle xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx desetinná xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tak xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést do xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného ředění. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 až 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx mléka, xxxxxxxxxxx vzorku nebo xxxxxx s kultivačním xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho misek
Přenést xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x kontaktu xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 300 kolonií.
Misky vyšetřit xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x cílem odlišit xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně než xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x nepostižené xxxxx misky x xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka podle xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx druhém xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, na základě xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx byla xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "nižší než 10 × x", xxxxxxx "x" je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 300 x xxxxxxxx je xxxxx, provést odhad x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Odhadovaný počet xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testů xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX OBSAHU XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční postup xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Definice
"Koliformními xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx při 30 °X vytvářejí xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx necharakteristické xxxxxxx, jež xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx plynu.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vzorku xxxxx x kultivačním xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx nechat xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx charakteristické xxxxxxx x, xxxxx to xx xxxxx, potvrdit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxx xxxxxx schopnosti xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 pH-metr xx zařízením xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací jehla xx slitiny platina-iridium xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxx 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx trubičky xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Baňky x xxxxxx 150 xx 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx selektivního xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x čirého, xxxxxxxxxx xxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx asi 90 až 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °C;
b) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu je xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečné proniknutí xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, tyto xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx by xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Agar x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx (VRBL xxxx). Sušené selektivní xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxx byla jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxx xxxxxx do xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx xx sterilních xxxxx (4.2.2). Kultivační xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx zkontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx x brilantovou xxxxxx. Konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx žluč |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx x xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx pH xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) obsahujících Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx médium nepoužije xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne déle xxx 1 xxxxx xx jeho přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Upravit xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat kultivační xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx médium
Použít xxxxxx (VRBL xxxx) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Příprava xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx přenést (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxx xxxxx (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému rozložení xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx xxxxxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Za xxxxxx xxxxxxxx sterility xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x 12 xx xxxxx VRBL xxxxx, xxxxx byl xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx na vodorovném, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX xxxxx (6.1) xx povrch xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx ztuhnout.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Sloupky misek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °C.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Počítat xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 kolonií. Xxxxxxx xxxxx červené xxxxxxx x xxxxxxx nejméně 0,5 mm, s xxxx bez xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx kolonie xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. jinou xxxxx, velikost xxxx xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx k charakteristickým xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx údajů v xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 až 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx pomocí xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx obsahující xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Durhamově xxxxxxxx tvoří xxxx.
7. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx maximálně 150 kolonií.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx procentuálního xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 v xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx vyšetřovaného xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx na dvě xxxxxx číslice, xxxxx xxxxxxxx xxxx než 100 kolonií. Xxxx xx zaokrouhlovaná xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Pokud xxxx všechny xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, uvést xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx".
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx ještě xxxxxx x dispozici.
VII. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx popisuje dva xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk.
A. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Mikroskopická metoda
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx buněk xx xxxxxx xxxxx za xxxxxx kalibrace x xxxxxxxx správnosti xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx somatickými xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, například xxxxxxxxx a epitelové xxxxx, xxxxxxx jádra xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 povrchu podložního xxxxxxx. Tenká vrstva xx vysuší a xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx pod mikroskopem. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx daném xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, s xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Činidla
Musí xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx roztok
Složení
|
Methylenová xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová xxxxxxxx xxxxxx |
6 ml |
Upozornění
Tetrachlorethan je xxxxxxxx. Příprava x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx tetrachlorethan x xxxxxx xx xxxxx xxxxx na 60 xx 70 °C. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx modř, xxxxx promíchat, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx ledovou xxxxxxxx xxxxxxx. Přefiltrovat xxxx xxxxx x xxxxxxxxx velikosti xxxx 10 až 12 xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx láhvi. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx usazenin, xxxx použitím xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující dávkování xx 0,01 xx x přesností xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 xx × 5 mm xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx vrstvu.
5.4 Horizontální xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx sklíček.
5.5 Ventilátor (xxx) pro xxxxxx xxxxx vrstvy.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx mléka.
5.7 Podložní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Příprava xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 až 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx které xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, vysušit xxxxxxx, xxxxx nezanechává prach, xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, kde jsou xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx tenké vrstvy
Mikrostříkačkou (5.2) odebrat 0,01 xx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx výše. Xxxxxxx xxxxxxx vnější xxxxxx xxxxxxxxx, která xxxxxx do styku x xxxxxx. Přiložit xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx obkreslit obvod xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx vyplnit. Xxxxxx xxxxxxx tenkou vrstvu xx horizontální vyhřívací xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx mléka xxxxxxxxx a vyšetřit xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Barvení xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx do barvícího xxxxxxx (4). Xxxxx x, pokud xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx tenké vrstvy xx tekoucí xxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx zcela nesmyje. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx tak, aby xxx chráněn před xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx průměr mikroskopického xxxx (5.7).
7. Počítání x xxxxxxx
7.1 Počítání xxxxx
Xxxxxx mikroskop (5.1). Xxxxx xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx jádra, x xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Počítat xxxx xxxx xxxx xx střední xxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xx pásy xxxx xxxx, xxxxx xxxx vybrány xxxxx x okrajových částí xxxxx vrstvy. Xxxxxxx xxxxxxxx tenkých vrstev x xxxxx i xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx nejméně xxxxxx za xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mikroskopických xxxx xxxxxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xxxxxxx části xxxxx vrstvy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu buněk, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx somatických xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx standardizaci xxxxxxxxxxxxx x mechanických xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx počítání x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxxxx elektronického xxxxxxxxx. Variační koeficient xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx překročit 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx je xxxxx v xxxxxx xxxxxx spočítat, musí xxx xxxxx Poissonova xxxxxx xxxxxxxxx nejméně 400, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx rozdělení:
M = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx hodnota
V xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx odchylka.
Variační xxxxxxxxxx xx:
XX = s × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx spočítány (xxxxxxxxx 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Počítání xxxx xx tenké xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx 5 xx. Šířka xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, jak xx stanoven podložním xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / x × x
xxx:
x xx xxxxxx mikroskopického xxxx x mm, xxxxxxxxx xxxxxxxxx sklíčkem x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
b xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Počítání mikroskopických xxxx xx střední xxxxxxx tenké vrstvy xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x je průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
s xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na ml xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx koeficient (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup, xxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx somatických xxxxx x syrovém xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo bez xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup se xxxxxxxxxxx xxxxxxx rozumějí xxxxxxx, které xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxx fluorescence.
3. Princip
Část xxxxxx (například 0,2 xx) se důkladně xxxxxxxx s tlumivým xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Xxxx xxxx směsi se xxxx xxxxxxx xx xxxxx tenké xxxxxx xx xxxxxxx disk, xxxxx xxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x zaznamenává. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxx xx použít xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx voda xx xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Hydrogenftalat xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 až 5,9. Xxxxxxx vodou na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx jednotlivé xxxxxx. Skladování ve xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Fluorescenční xxxxxx (zásobní xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 ml.
Příprava:
Rozpustit ethidiumbromid xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx vzduchotěsně xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx před xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1) xxx, xxx xx získal xxxxx 1000 ml. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx více xxx xxxx xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx roztok (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx vodou xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx složky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na principu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Tím se xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx počítat, x prahovou hodnotou, xxx níž xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx xx použití vzorků, xxxxxxx obsah xxxxx xxx stanoven mikroskopickou xxxxxxx (A).
5.2 Xxxxx xxxxx, x cirkulací xxxx, nastavitelná xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, objem xxx 15 ml.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Vzorek xxxx být skladován xxx xxxxx xxxxxxx xx zkumavce (5.3). Xxxxx vzorek xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 xxxxx po xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx nízký. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx provedena co xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx konzervačních xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx být xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx teplotě 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx draselný:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx než 0,2 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- azid xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 xx, xxxxx je vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx odběru x xxxxxxxx xx 48 xxxxx xx jeho xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx může xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 g/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx teplotu 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx odběru x xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Vzorek, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx ještě xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx o xxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojchromanem xxxxxx, xxxx být dodrženy xxxxxx podmínky pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxx
Xxxxx, které xx xx vyšetřit, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx asi 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx mohou být xxxxxx nízké. Pokud xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, vzorek xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx ve vodní xxxxx (5.2) na xxx 40 °X. Xxxx skladovat vzorek xxx pokojové xxxxxxx xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxxx pomocí počítacího xxxxxxxx (5.1) do 15 xxxxx po xxxxxxxx ohřívání (viz 7.2). Bezprostředně před xxxxxxxxx vzorky důkladně xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozdělení somatických xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx provedeny v xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) x reprodukovatelnosti (X) xxxxxxxxxxxxx kruhových xxxxx nejsou k xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx odhady:
(1) počet xxxxx xxxx 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola xxxxxxxxxx xx provádí xxxxxx xxxxxx o známém xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pod mikroskopem xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX A XXXXXX POUŽITÍ
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční postup xxx detekce antibiotik x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx mléce x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou založeny xx použití Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx testy.
B. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx x identifikaci xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx se musí xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x stanovení xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxxxxxxxx xxxx vyšší než xxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx extrakt |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx uvést do xxxx. Upravit xX xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx zkumavek xxxx xx 100 xx do xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx vodě, x xxxxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxx xX, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu
Složení:
|
Trimethoprim |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 ml |
|
Vodado |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) a doplnit xxxxx.
5.1.4 Živný xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 ml |
Příprava:
Rozpustit xx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx x sterilizovat xxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx sterilní xxxxx x vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx o 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx destilované xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vložením 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxx xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) přidáním 4 xx pracovního roztoku xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 ml xxxxx xxx inhibičních látek (5.3).
5.2.4 Roztoky xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx xxxx být xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek
Připravit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx inhibičních xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx bylo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx inhibičních xxxxx; xxxx mléko se xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 100 °C, xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °X xx 6 °X na xxxx nejvýše jednoho xxxxx.
5.4 Testovací xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx testovací organismus xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx testovací kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx aerobně xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Po inkubaci xxxxxxx zkumavka sterilní xxxxxxxx xxxxxx. Takto xxxxxxx zásobní xxxxxxx xxxx xxx skladována xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx přenést 20 ml xxxxxxx xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Xxxxxxx misky (4.2.2) x nechat xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °C x xxxxxxx xx xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) a důkladně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Při xxxxxxx zásobní kultury (5.4.2) nebo kultury xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx misku xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x povrchu.
Přenést xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) obsahující 250 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Kultury, xxxxx xxxxxx xxxxx přeočkovány, xx se měly xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 až 6 °C.
5.5.5 Xx 16xx xx 18ti xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx xx suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mikroorganismů xxxx 5 x 10 xxxxxxx na xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx rovnoměrné xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, měla xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kultury (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx zkumavek/ampulí
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x pěti xxxxxx xxxxxxxxx média (5.6.1) xx xxxxxxxx nebo x lahvičce. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx média (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, poté xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx nebo, x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Nechat agarové xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxx xxx, ale xxxxx xxx rovněž xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °X, pokud xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx se xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx do 24 xxxxx xx xxxxxx, x do xx xxxx se xxxxxxxx xxx teplotě 0-5 °X. Xxxxx není xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx xx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °až - 15°X), aby se xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Umístit xx xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx požadovaný pro xxxxxx a testy (5.2 x 5.3).
6.3 Xx každé xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx xxxxxx do xxxxxxxx zkumavky/ampule. Xxx xxxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx xxxx novou xxxxxxxx stříkačku.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx opakuje xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx do xxxxx xxxxx s teplotou 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vzorkem xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx na straně 39. Pokud xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) zůstane purpurové, xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo nepravidelné xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x koncentracích xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx organismu.
7.4 Xxxxx xx purpurové zabarvení xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx životaschopné spóry x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx testovacím xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 a 7.2 podle xxxxxx "X".
Xxxxx xx nezbytné xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, jakož xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx mléka x xxxxxxxxx (A.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx, xxxxx popsaným xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx disku.
2.2 Xxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), a xx kterému xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamáza), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx menšího průměru xxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx je xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx penicilinu a xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx xxxx penicilinázou (2.2) xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx penicilin, xxx může xx xxx xxxx xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx peniciliny, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx jsou xxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mlékem, které xx má xxxxxxxx, xx umístí xx xxxxxx xxxxxxxxx média xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx stearothermophilus xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Čirá xxxx xxxxx disku ukazuje, xx xxxx v xxxxx přítomny látky xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Velikost xxxx xxxx xxxx jiné xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x mléce.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °C.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx A.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, neobsahující xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 až 13 xx, schopné xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x exsikátoru).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, roztok xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx kultivačních xxxxx musí xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Musí xx xxxxxx destilovaná voda xx skle xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxxx xxxxx obsahovat inhibiční xxxxx xxx růst xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx médium xxx detekci inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 g |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx rozpustit xxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx v xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx sterilní destilované xxxx s cílem xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx až xxxxx týdny při 0 °X xx 5 °C.
Poznámka
Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Pro xxxxx xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. X xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx nutnosti proto xxxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto roztoku xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx běžně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx A.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx pro detekci xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx xxxxxxxx na 55 xX.
5.6.2 Do xxxxx xxxxxx část xxxxxxxx čerstvých spór (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx získat xxxxxxx hustotu kolonií x naočkovaném xxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx vyhřáté xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx vytvořila 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx misku x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx na xxxxxxx, vodorovný xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxx ztuhnout. Xx ztuhnutí xxxxx, xxxxxx xxxxx na xxxxx x obrátit xx xxxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx povrchu xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx misek, xxx xxxx možná identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X vzorků x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx A" (A.7.1 x X.7.2) musí xxx xxxxxxxxx nové xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °C, xxx se vyloučil xxxx xxxxxxxxxxxxxx termolabilních xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, poté xxxxxxx xxx 10 ml xxxxxx zahřátého xxxxx xx sterilní xxxxxxxx xx širokým xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 ml xxxxxxx penicilinázy (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx otřením disku x lahvičku se xxxxxxx. Naplocho položit xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Disky xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx vzdáleny xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x od okraje xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx standardním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx testu se xxxxxxx nejméně xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Po xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x nechat xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx misky xxx xxxxxxx xxxxxx světla, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxx čiré inhibiční xxxx xxxxx papírových xxxxx. Xxxx zóny xx změří.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx nejméně 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx velkost xx xxxxxx nebo xxxxx xxx xxxxxxxx popsaná x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx inhibičních xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace x xxxxxxxxxxxx inhibičních xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 se xxxxxxx dvojmo xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (6.1.2) x se xxxxxxx ošetřeným xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Namísto přidání xxxxxxxxxxxx do 10 xx vzorku xxxxx xx možné do xxxxxx xxxxx ponořit xxxx napuštěný xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x xxxxxx xx na xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx provede dvojmo xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) až x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx inhibičních xxx xxx xxxxxx mléka, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx kolem xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx žádná xxxx xxxx, ale xxxx zóna se xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vzorkem xxxxx, xxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), xxxxxxxxx látka xx vzorku xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx rovné xxxx vyšší xxx 0,004 μg/ml.
7.2 Pokud xx xxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx použité x tomto xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx kolem xxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx podle 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xx. Syntetické xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx tudíž xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx to je xxxxxxxx, xxxxxxxxx látky xxxx xxx penicilin xxxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxx získaných se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce (5.2 x) až x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx počítají xx xxxxxxx xxxxxxx zdvojeného xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se graficky xxxxxxx na základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Výpočet
Koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx lze xxxxxxxxx xx xxxxxxx průměru xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxx. Pro přesné xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx nejméně xxxxxxx xxxxx, avšak xxxxxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx disků.
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Výsledky xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx penicilinu xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) xxxx xxxx obsah xxxxxxxxxxx látek jiných xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx standardu při xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX bodu 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx u xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx příčinou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx ošetření, xxxxx xxxxxxxxx mléko xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xxxx splněny xxxxx xxxxxxxxx v příloze X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, pokud jde x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, specifický xxxx xx detekci xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx, že mléko xx nějakou spojitost xx propuknutím xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx a xxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x zdravotní xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pro obchod xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, pokud existují, xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx patogenní xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "nepřítomnost" x xxxxxx pasterovaného xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx jasně xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.