EPIS® Právní systém | Plné znění

Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.

Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Vyhláška

§1 §2 §3

Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod

B.1. Akutní toxicita orální (per os)

B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky

B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity

B.2. Akutní toxicita (inhalační)

B.3. Akutní toxicita (dermální)

B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)

B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)

B.6. Senzibilizace kůže

B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)

B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)

B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)

B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro

B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo

B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech

B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií

B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae

B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae

B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro

B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro

B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro

B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster

B.21. Test transformace savčích buněk in vitro

B.22. Dominantní letální test u hlodavců

B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích

B.24. Spot test u myší

B.25. Přenosné translokace u myší

B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)

B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)

B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)

B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)

B.30. Testování chronické toxicity

B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci

B.32. Test karcinogenity

B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity

B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test

B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test

B.36. Toxikokinetika

B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice

B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice

B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo

B.40. Leptavé účinky na kůži

B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro

INFORMACE

VYHLÁŠKA

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx

xx xxx 16. xxxxx 1998,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx

Ministerstvo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 xxxx. 1 xxxx. x) zákona x. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:

§1

Xxxx xxxxxxxx stanoví xxxxxx xxx xxxxxxxxxx nebezpečných xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x chemických xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, toxických, xxxxxx škodlivých, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, karcinogenních, xxxxxxxxxxx x toxických xxx xxxxxxxxxx (xxxx xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx").¹⁾

§2

(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze xxxx xxxxxxxx.

(2) Ke zjišťování xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx, pokud jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx xxxx metody xxx xxxxxxx pokusných xxxxxx²⁾ x xxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx (OECD).³⁾

§3

Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. ledna 1999.

Xxxxxxx:

XXXx. Xxxxx, XXx. x. x.

Příloha k xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.

Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx

X. XXXXXXXXX XXXX

1. ZÁKLADNÍ POJMY

1.1 AKUTNÍ XXXXXXXX

xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx se objeví xxxxx xxxxxx doby (xxxxxxxx 14 xxx) xx podání jedné xxxxx xxxxxx látky.

1.2 XXXXXX TOXICITA

xx xxxxxxxxx xxxxxx popisující xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx podávané dávky xxxx xxx očekáván xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x pravděpodobně x úmrtí.

1.3 XXXXX

xx xxxxxxxx podávané xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx (gramy xxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti), nebo xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (díly na xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx kilogram xxxxxxx).

1.4 XXXXXXXXXXXXXX DÁVKA

xx xxxxxxxx xx xxxx pevných xxxxxxxxx xxxxxx, kterou xx xxxxx podat, aniž xx to způsobilo xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

1.5 XXXXXXXXX

xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx dávku, xxxxxxxxx x celkovou xxxx xxxxxxxx.

1.6 XX₅₀ (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)

xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx způsobí xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 % zvířat, xxxxxx xxxx podána. Xxxxxxx LD₅₀ xx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).

1.7 XX₅₀ (STŘEDNÍ XXXXXX XXXXXXXXXXX)

xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx doby xx xxxxxxxx x 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx definovanou xxxx. Hodnota LC₅₀ xx udává xxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (mg.l^-1).

1.8 XXXXX

xx zkratka pro "xx observed xxxxxxx xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x xx xx nejvyšší x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentrace, xxx které nedochází x zjistitelným xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.9 TOXICITA XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxxx x pokusných xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx úsek xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.10 XXXXXXXX TOLEROVANÁ XXXXX (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX XXXX)

xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx projevy toxicity, xxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxx na přežití x xxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.

1.11 XXXXXXXXXX XXXX

xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx na xxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.12 XXXXXXXXXX OČÍ

je xxxxxxxx změn xx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxx xxx.

1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (ALERGICKÁ XXXXXXXXX DERMATITIDA)

je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxx.

1.14 XXXXXXXXX XXXX

je vyvolání xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poškození xxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx látky po xxxx xx 3 xxxxx do 4 xxxxx.

1.15 XXXXXXXXXXXXXX

xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.16 ABSORPCE

xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) aplikovaná xxxxx xxxxxxxx xx xxxx.

1.17 XXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) xxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx z těla.

1.18 XXXXXXXXXX

označuje xxxxxx(x), kterým(i) je xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rozdělovány x těle.

1.19 XXXXXXXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx v těle xxxxxxxxxxxxx xxxx neenzymatickými xxxxxxxx.

2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX A XXXXXXXXX XXXXXXXX

Akutní xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx různých xxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 - B.5), xx xxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxx získán xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

V xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx zvolit xxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx testu xx xx xxxxxxxxx stanovení XX₅₀. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx není xxxxxxx xxxx navržen, xxxxxxx xxxxxx xxxxx definovat xxxxxxx hodnotu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx pevné xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) x metoda xxxxxxxxx xxxxx akutní xxxxxxxx (xxxxxx X.1 xxxx). Xxx xxxxxxxxx xx jednom xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx druhu doplnit xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx studie. V xxxxx případě může xxx xxxxxxx standardní xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx.

Xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxx aplikací (xxxxxx X.7, X.8 a X.9) xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx opakované xxxxxxxx. Důležité xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, aby xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx testy xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx orgány xxxxxxxx a xxxxxxx x netoxické dávky. Xx dlouhodobých xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - X.30 x X.33).

3. XXXXXXXXXX - GENOTOXICITA

Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx v množství xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxx, blok xxxx xxxx celé xxxxxxxxxx. Účinky xx xxxx chromozómy xx xxxxx projevovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx.

Xxxxxxxxx aktivita xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx vitro xx xxxxxx (xxxxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx (metoda X.10).

Xxxxxxxxxx jsou také xxxxxxx in xxxx, xxxx. micronucleus xxxx (xxxxxx X.12) xxxx xxxxxxx metafáze chromozomů xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Je xxxx xxxxx dávat jednoznačně xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.

Pro xxxxx xxxxxxxx ve velkém xxxxxxxx nebo pro xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxx xxxxxx k xxxxxxxx účelům: potvrzení xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx metod; xxxxxxxx xxxx rozšíření xxxxxx xx vivo.

Pro xxxx xxxxx zahrnují xxxxxx X.15 xx X.25 jak xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo x xx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Tyto xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx používané x základním souboru xxxxx.

Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx uvažované xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx relevantní xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxxx karcinogenním xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, metabolického xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx dědičných xxxxxx u xxxxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx savčím xxxxxxxxx, xx už xxxxxxxxxx xxxxxxxx (bodovými) xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx xxxx u xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxx (nezahrnuto v xxxx příloze), nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx X.25). Těchto xxxxx xxx použít xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x velmi xxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxxx locus test, xx třeba xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx na xxxxxxx závažných xxxxxx.

Xxx stanovení xxxxxxxxxxxx xx postupuje xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xx projednání x Národní xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

4. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx genotoxické xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx poskytují testy xxxxxxxx xxx opakované xxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci, xxxxxx X.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologických xxxx, xxxx. hyperplazie x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxx xxxx významné. Xxxx studie x xxxxxxxxxxxxxxx informace xxxxx xxxxxx identifikovat chemické xxxxx x karcinogenním xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx karcinogenity (xxxxxx X.32) xxxx xxxxx x kombinované xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (metoda X.33).

X dispozici xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx buněk savců, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx chování xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx předpokládá xxxxxxxxxx x maligní transformací - in xxxx (xxxxxx X.21). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx.

5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx schopností xxxxx a samic (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxx x účinky v xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx X.31) xxx studie zaměřené xx xxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx s xxxxxxx podáváním. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být použity xxxx způsoby xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx xxxxxxx. V takových xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Pokud je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx test (xxxxxx X.35) xxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

6. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx funkčních xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na neurotoxicitu xxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx toxicity při xxxxxxxxx xxxxxxxx (metoda X.7) xxxxxxxx také xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, hloubkové zkoumání xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky, které xxxxxxx být odhaleny x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx například xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx sloučeniny xxxxxxx xxxxxxxxx pozdní toxicitu, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx B.37 a X.38 xx xxxxxxxxxxxx xxxx opakovaném podání xxxxx.

7. XXXXXXXXXXXXX

Imunotoxicita xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx má xx xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxxxxxxx nebo navozenou xxxxxxxxxxx. Test xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx X.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxx xxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx tohoto xxxxxxx.

8. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pomáhají xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx o toxicitě, xxxxxxxxx specifické xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Nepředpokládá se, xx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bude nezbytná xxxx xxxxxxxxxxx toxikokinetických xxxxxx (studie xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx změny x xxxx sekvenci nebo xx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.36).

Xxxxxxxxx x chemické xxxxxxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx odhad xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x toxikokinetických parametrech x předcházejících toxikologických x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

9. XXXXXXXXXXXXXXX TESTOVANÉ XXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x její relevantní xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxx manipulaci x xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxxxx a kvantitativní xxxxxxxxx testované xxxxx (x xxxx pokud xxxxx xxxxxxx nečistot) x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx materiálu xx měl předcházet xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx týkající se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.

10. XXXX X XXXXXXX

Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxx kontrola xxxxxxxx xxxxxxxxx, ve xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxx x xxxxxxx podstatnou xxxxxxxxx.

10.1 XXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx zvířata xx třeba přizpůsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xx vhodná xxxxxxx xxxxxxxxx 22 ^xX ± 3 ^xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx má xxx xxxxxxx 20 ^xX ± 3 ^xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %.

Xxxxxxx experimentální techniky xxxxxxx xxxx zvláště xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx o xxxxxxxxxxx podmínkách uvedeny x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, zaznamenávat xx x uvést je x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx má být xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx a xxx xx dvanácti xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx týkající xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx zprávě x xxxxxxx pokusu.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx chována xxxxxxxxxx xxxx x malých xxxxxxxxx jedinců xxxxxxx xxxxxxx, ne xxxx xxx 5 xxxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x pokusech xx xxxxxxxxx jsou xxxxx x způsobu xxxxx x xxxxxxx x xxxxx xxxxxx chovaných x xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx doby xxxxxxxxxx.

10.2 XXXXXXXX XXXXXX

Krmení xxxx vyhovovat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Podávají-li xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x potravě, může xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx vzájemným xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx složky potravy. Xxxxxxx xxxxxx reakce xx xxxxx vzít x xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx laboratorní xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxx xxxx. Pokud xx xxxxxxxxx xxxxx podávána x xxxxxxx, je xxxxx tomu přizpůsobit xxxxx diety.

Xxxxxxx x potravě, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx přítomny x xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx.

11. XXXXXXX ZVÍŘAT

Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Snížení xxxxx x omezení xxxxxxx x stresu xxxxxx xxx dosáhnout např. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (X.1.xxx) xxxx xxxxxx stanovení třídy xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx nevyužívá xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx kritéria x xxxxxxxx menší xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx o 70 % xxxxxx méně xxx metoda B.1.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x přetrvávajícími příznaky xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx je známo, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1, B.2 x X.3), xxx xxxx x in vivo xxxxxxx mutagenity (xxxxxx X.11 a X.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx je možné xxxx neprovést nebo xxx omezit na xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx to xxxxxxxxxx vědecky zdůvodnitelné. Xxxxxx xxxxxxx zdůvodnění xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, na xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, byla-li s xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx toxicity x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx B.4) xxxx xxx xxxxxxxx; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx B.4), xxxxxxx xxx xxxx testovány xx dráždění xxx.

Xx nutno xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxx xxxxxxxxxx stejnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx využívat xxxxxxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx budou xxxxxx metody x xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxx použití xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, následnou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx tam, xxx xx xx xxxxx.

12. HODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX

Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx in vitro xx xxxxx xxx xx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx možná xxx x xxxxxxx xxxx; xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx, xxxxx xxxx x dispozici, mohou xxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Výsledky xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx látek xxxxx účinků xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

Tyto xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxx pro studie, xxxxxxxx xx posuzování xxxxxx nových i xxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx byl vložen xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx od 22.6.2001

X.1. XXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (XXX XX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná látka xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx x uhynutí. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxx metoda xx xxxxxxx především xxx pokusech xx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je třeba xxxxxxxx způsobem utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx svých leptavých xxxx dráždivých xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx během experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Pokud je xxxxx, xxxxxxxx se xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx látky ve xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx, další volbou xx xxxxxx x xxxxxxxxxx oleji, xxxxxx xxxxx xxxx další xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx vehikulích xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx známy xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx něho xxxxxx relevantní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx objem xxxxx xxxxxxxx překročit 10 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, jichž xx xxxxx podávat xx 20 xx.xx^-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxx minimalizovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxx xx vehikulu xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx lokální xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx přednost potkanům, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx variační rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Počet xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 5 hlodavců xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx je k xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Používají-li xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, mělo xx xx zvážit xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Volba xxxxx

Xx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx tři, x mají xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx byl u xxxxxxxxxxx xxxxxx viditelný xxxxxx toxických xxxxxx x xxxxxxxxx. Získané xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx vztahu xxxx xxxxxx x xxxxxxx, a xxxxx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀ x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

X xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx limitní test xxxxxx dávkou xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx x xxxxxxxx výše xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx podaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx by xxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx doba, xxx xx xxxxxxx xxxxxx objeví x xxxxxx, x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, kde xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. X zvířat x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výměny xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; přístup x xxxxx vodě xxxx omezen. X xxx xxxxxx se xxxxxxx zváží x xxxxxxxxx látka xx xxxx xxxxxx orálně x jedné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx menších množstvích xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx přístup x xxxxxxx ještě 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se látka xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxx - xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx - xxxxxxx x xxxx zvířatům xxxxxxxxxx.

Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky, xxx xxxxx zvíře xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxx x zaznamenat xxxxxx xxxxxx aplikované látky x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx.

Xxxxxxx jednou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx ztrát zvířat xxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx zmrazení xxxxxxxxx zvířat, a xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x krevního oběhu, xxxxx funkce autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, spánku x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx až xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx nálezy xx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx u druhého xxxxxxx

Po xxxxxxxxx xxxxxx xx jednom xxxxxxx, xxxx se xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx x pěti xxxxxxxxx druhého xxxxxxx x cílem zjistit, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx nejsou výrazně xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx. X jednotlivých xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx nálezů. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x době uhynutí. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx, přežívají-li xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxxx x ohledem xx stres x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolané xxxxx xxxxxx. XX₅₀ xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zahrnovat xxxx vztah, xxxxx xxxxxxxx, mezi expozicí xxxxxx testované látce x výskytem a xxxxxxx xxxxx abnormalit xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, makroskopických xxxx, změn tělesné xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.

- experimentální xxxxxxxx,

- úrovně xxxxx (včetně vehikula, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx hladiny xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx exponovaných zvířat),

- xxxx xxxxxxx xx podání testované xxxxx, důvody x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxx XX₅₀ xxx to pohlaví, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx pokus, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (s xxxxxxxx metody výpočtu),

- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX₅₀, xxxxx xx lze xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví,

- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxx xxx xxxxxxx utracení xxxxxx během testu xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀),

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.1. xxx XXXXXX TOXICITA XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX XXXXX XXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx informace x xxxxxxxxxxxx účincích, které xxxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx jedné xxxxx testované xxxxx.

Xxxxxx x fixní xxxxxx se provádí xx xxxx etapách.

X předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx účinky xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx téhož xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx xxxxx x toxicity, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Normálně xx x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx než xxxx xxxxxx.

X hlavní xxxxxx se xxxxx xxxxxx orálně xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x pěti xxxxx x jedné x xxxxxx fixních dávek: 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx studie, x xx xxxx xxxxx, xxxxx pravděpodobně xxxxxx "xxxxxxx toxicitu" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx bod 1.2), xxx xx xxxxxxx.

Xx podání xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx žádné xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx úrovni dávky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, látka se xxxxx otestuje xx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Pokud zvířata xxxxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx humánní xxxxxxxx, xxxxx xx znova xxxxxxxx xx nejbližší xxxxx úrovni xxxxx.

Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx xxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx úvod xxx 1.2), tj. xxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxx úrovní dávky, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, aniž by xxxxx x xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).

Zvířata xx xxxxxxxxx a přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkách x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých leptavých xxxx dráždivých vlastností.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.

Xx třeba používat xxxxx užívané kmeny xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx by x xxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx orientační xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxx jedna xxxxxxx xxxxxxx z xxxx xxxxxxx.

1.2.1.2 Příprava x xxxxxxxx xxxxx

Xxxxx je xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx první xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx, xxxxx xxxxxx je xxxxxx x rostlinném xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx v jiných xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx určeny xxxx testem xxxx xxxxx něho xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx normálně xxxxxxxxx 10 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; výjimkou xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx možno xxxxxxx xx 20 xx.xx^-1. Xxxxxxxxxxx objemů xxxxx podávané x xxxxxxx xx xx xxxx minimalizovat takovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek.

Před xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Potkanům xx xxxxxxx odebere xxxxx xxxx xxxxxx; přístup x xxxxx vodě xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látka se xxxx xxxxxx xxxxxx x jediné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx x xxxx zvířatům poskytnout.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávek xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx; xxxxx přetrvávají xxxxxxx xxxxx xxxxxx sedmý xxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx ještě xx xxxxxxx xxxx xxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx výchozí xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 a 2000 xx.xx^-1. Xxxxxxxx zvolená xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, potom xx xxxxx podat xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Tento xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx informace x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) příznaky xxxxxx, x o nejmenší xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Je třeba xxxxxxx xx vybrat xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkách. Xxxxx xxxxxx x dispozici, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxx 500 xx.xx^-1. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx nepozorují xxxxxxxx xxxxxx, vyšetřuje xx xxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x uhynutí při 2000 mg.kg^-1, xx xxxxxxxxxx xxxxxx skončena x hlavní xxxxxx xx třeba xxxxxxx xx této úrovni xxxxx. Xxxxxxxx jsou xxx použití xxxxxxx xxxxx (např. 500 xx.xx^-1) zjištěny xxxxx xxxxxx, vyžadující humánní xxxxxxxx, je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx nižší xxxxx (xxxx. 50 xx.xx^-1). Xxxxxxxx xxxx zvíře xxxxxxx, mohou být xxxxxxx xxx další xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx je xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx 5 zvířat.

1.2.2.2 Hlavní xxxxxx

Pro každou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx se mělo xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx by měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxx by xxx xxxxx.

Xxxxxxxxx metody xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx dávek xxx xxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx, xxxxx xxxx užita x xxxxx, má xxx zvolena x xxxxx xx 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx výchozí úroveň xxxxx xx xxxx xxx ta, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, avšak xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx mají xxx zaznamenána. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxx zvolené xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx testovat xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx měla xxx xxxx pozorována xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx těžká toxická xxxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx být xxxxx znovu xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Opět xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, by měla xxx xxxxxxxxxx xx xxxx pozorovací xxxxxx.

Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x xxxxxxxxxxxxx systematicky. Xxx každé zvíře xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.

Doba xxxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze ji xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx a xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x pozdnímu vzniku xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx vyšetření je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx první xxx xx xxxxxx látky x xxxxxxx jedenkrát xx xxx další xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx bolesti xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxx utratit. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx prováděna xxxxx několika xxxxxxx xxx po podání xxxxx, xxxxxxxx zvířata xxxx vykazují příznaky xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xx byla xxxxxxx příliš xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xx změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní a xxxxxxxxx nervové soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxxxx hmotnosti jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx další 3 xxx a potom xxxxxx týdně. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxxxx do xxxxx xxxxx, xx xxxxx a pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se tkáně xxx histopatologické vyšetření.

X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxx vyšetření xxxxx xxxx výjimečně třetí xxxxxxx dávky.

V xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5 xx.xx^-1 (xxxx jestliže xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx x xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx xx sestavují xx xxxxxxx jednotlivě pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. X ní xxxx xxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxx testu xxxx utracených z xxxxxxxxx důvodů; popis xxxxxxxxx účinků; pro xxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx účinek, xxxxx xxx xxxxxxx testované xxxxx; časový xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx déle než xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenat xxxxx hmotnosti.

Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánně xxxxxxxx vzhledem ke xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxx zaznamenána xxxx xxxxxxx vyvolaná testovanou xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno obsahovat xxxx informace xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení, xxx.,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx,

- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; změny xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx počet xxxxxxxxx zvířat nebo xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx toxicity; xxxxxx, stupeň x xxxxxx xxxxxx),

- xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxx reversibilní,

- xxxxx zvířata xxxxxxx nebo byla xxxxxxxx, xxxx xxxxx xx podání xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx indikaci xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- pitevní nálezy,

- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx příznaků xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxxxxx x xxxxx.

3.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx

Xxxxx	Xxxxxxxx	Xxxxxxxxxxxx
5 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % přežití 100 % přežití, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá toxicita	Xxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxx Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx xxx 50 xx.xx^-1
50 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti	Xxxx xxx 100 % xxxxxxx	Xxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx nebo velmi xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx xxx 5 xx.xx^-1
	100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Látky, xxxxx xxxx zdraví škodlivé Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx^-1
500 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % xxxxxxx	Látky, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxx zdraví xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x 50 xx.xx^-1
	100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx	Xxxxx, které xxx považovat xx xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 2000 xx.xx^-1
2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x nebo xxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxx xxxxxxxx u 500 xx.xx^-1 Xxxxx, xxxxx nemají xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx

X.1. xxxx AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX TŘÍDY XXXXXX TOXICITY

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx toxicity xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx rizika, xxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx používá tří xxxxx stanovených xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx aby xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx základě výsledků xxxxxxx. Xxxxx toho xxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx výběr xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které lze xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx body xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx. Použití xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx další xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxx xxxxx stanovené xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx XX₅₀. Xxxxxxxx stanovení rozsahu xxxxxxx, ve xxxxxx xx xxxxxxx úmrtnost, xxxxxxx xxxx části xxxxxx xx x x xxxx metody xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x sekvenčnímu xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x metodě B.1. Xxxxxx výhodou xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx)(B.1) x xxx u xxxxxxxxxxxx metody xxxxx xxxxx (B.1 bis).

1.2 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx se xxxxxx orálně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx ze stanovených xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Není xxxxx provádět xxxxxxxxxx xxxxxx. Přítomnost xxxx xxxxxxxxxxxx úhynu xxxxxx xx vztahu x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx kroku, x.x.

- xxxx xxxxxxxxx xxxxx další xxxxxxxxx;

- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx se stejnou xxxxxx, ale se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx s xxxxx xxxx nižší úrovní xxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxx náhodně xxxxxxx, xxxxxxxx tak, xxx byla možná xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x chována xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx pohlaví x dávky, xxx xxxxx zvířat v xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx jasné xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx sondou nebo xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxx xxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxx roztoku/suspenze, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x jedlém rostlinném xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx roztoku x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx není známa, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx testem.

Zvířata xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxx xx určitou xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxx přes xxx a xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx přednost xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx být xxxxx.

Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (pro xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.

1.3.2.2 Xxxxx a pohlaví

Pro xxxxx xxxx se xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx kroku může xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx ze xxx xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 x 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, aby x největší xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx uhynutí alespoň xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx příslušného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 1.

Xxx výběr xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x účinku. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx úmrtnost xx xxxxxxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxx úrovni xxxxx (2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx se xxxxxxx xxxxxxx test. Xxx nejsou žádné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx - x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxx 200 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx jak xx dovoluje xxxx x třemi xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx pevných dávkách xx xxxx 5, 50 xxxx 500 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti.

Nemají xx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx způsobují xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx x závažnosti xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx při xxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx, xxxxx není xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx dávku přežila.

1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx test x jedinou xxxxxx xxxxx xx výši 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx k uhynutí xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 xx.xx^-1 (xxxx 500 xx.xx^-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx pozorovat obvykle xx xxxx 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx musí být xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxx pozorování x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx nemělo být xxxxxxxxx xxxxxx pevně; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxx jejich xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Je důležité xxxxxxxxxxxx xxxx, kdy xx xxxxxx x xxxx příznaky toxicity, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx toxické xxxxxxxx. Xxxxxxx pozorování xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: záznamy xxxx vedeny xxx xxxxx xxxxxxxxxx zvíře.

1.3.3 Xxxxx postupu

Po období xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxx xxxxxxx zkušební xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx potravy xx dobu xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Kde je xxxxx podávána po xxxxxxx během určité xxxx, může být - x závislosti xx xxxxx xxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx potravu x vodu.

Maximální xxxxx xxxxxxxx, který xxxx xxx xxxxx najednou, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxxxx xx objem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti, x xxxxxxx vodných xxxxxxx xxx podat x 2 xx xx 100 g xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxx objem xx xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxxx není xxxxx xxxxx dávku xxxxx xxxxxxxx, je možné xx xxxxxxxxx po xxxxxxx po xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx x Xxxxxxx 1.

1.3.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) xxxx častěji, xxxxx to xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxx látky, x xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx silného stresu, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxx zvířata xxxx xxxxxxxxx stejně xxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xx xx xxxx zvířata xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxx xxxxx, dobu xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx zvířata xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje změny xx xxxx x xxxxx, na xxxxx x sliznicích, x xxxx na dýchacím, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx nervovém systému, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx věnovat xxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x kómatu.

Veškerá xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zaznamenávána: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx každé jednotlivé xxxxx.

1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxx zvážena xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Na konci xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx před xxx, než xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.3.3.3 Pitva

U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx testu, xx xxxxxxx pitva. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx zvíře zvlášť. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx uvážit mikroskopické xxxxxxxxx orgánů xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologie x zvířat přežívajících 24 x xxxx xxxxx.

2. SBĚR X XXXXXX XXXXX

X dispozici xxxx být údaje x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx údaje shrnuty xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x humánních xxxxxx, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx x vratnost xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx je xxxxxxx v Xxxxxxx 2.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Zpráva x průběhu pokusu

Zpráva x xxxxxx obsahuje xxxx informace, xxxxx xxxxx xxx získány:

Pokusná xxxxxxx:

- xxxxxxxxx druh/kmen;

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;

- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;

- zdroj, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx testu.

Podmínky xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, xxxxx je xxxx xxx xxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx podávaných xxxxxx x xxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx x kvalitě xxxx (včetně druhu x xxxxxx);

- xxxxxxxxxx xxxxxx počáteční xxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx údajů x xxxxxxxx každého xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx (xxx. zvířata xxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, charakter, xxxxxxxxx x trvání xxxxxx);

- xxxxxx x xxxxxx xxxxxx příznaků xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx:

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 423.

XXXXXXX 1

XXXXXX XXXXXXXXX

1. Xxx xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx způsobí xxxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- vztah xxxxxxxxx x xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a

- xxxxxxxxxxxxx použití testované xxxxx.

2. Příslušné vývojové xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx stanovují xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxxx xx počtu xxxxxxx utracených xxxx xxxxxxxxx xxxxxx postupuje xxxxxxxxx xxx, jak xxxxxxxxx šipky.

3. Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 25 nebo 200 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx uhyne xxxxx xxxxx zvíře xxxxxxx xxxxxxx, obvykle se xxx xxxx netestuje. Xxxxx však xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx příznaky, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx úmrtí xxxxxxxxxxx s podanou xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx úrovni xxxxx.

4. Xxxxx xx xxxxx 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx každého pohlaví, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx hodnota LD₅₀ xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx jen xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxx: zřetelné, xxxxxxx xxxxxxx příznaky x xxxxxx zvířat xxxxx být xxxxxxx xxx klasifikaci odpovídající xxxxxxx XX₅₀ xx xxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxx podnětem pro xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx úrovni xxxxx.

5. Xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx stanovenými xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx k xxxxxx alternativní xxxxx x xxxxx bodu xxxxxxxxxxxxx procesu, xxxx xxx další xxxxxxxxx xx dokončení xxxxxxxxx xxxxx varianty 1.

Postup xxxxxxxxx s výchozí xxxxxx 25 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X rámečcích xx xxxxx dávka, xxxxx zvířat a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).

Xxx xxxxxxx xx xxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx šipek xx xx xxxxxxxx šedého xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x příslušném šedém xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx dávkou 200 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti

V xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx druhé).

Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx do xxxxxxxx xxxxxx rámečku.

Varianta 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Pokračování xxxxx x příslušnou xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace xx provede xx xxxxxxx konečných hodnot xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako druhé).

Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x testování xxxxxxxxx xx směru xxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx vyhodnocení uvedeného x Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x příslušnou xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rámečku.

DODATEK 2

Xxxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1

X rámečcích je xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx).

Xxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).

Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX TESTOVÁNÍ" x xxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx klasifikaci. Xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, dokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Hodnoty x xxxxxxxxx xxxxxxxxx horní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx XX50 xx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)

(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 200 xx/xx xxxxxxx hmotnosti

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1

x) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

&xxxx;

x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

x) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx hmotnosti

X.2. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xx xxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxx xxxxx x rozdělení xxxxxxxxx xxxxxx, tenzi xxx, xxxxxxx xxxx, teplotě xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x výbušnosti (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) testované látky

1.2 Xxxxxxx metody

Několik xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x to xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x přetrvávajícími příznaky xxxxxx x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Testované xxxxx xx nemají xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx xxxxx, že xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx to xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Pevné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx částice xxxxxxxxx velikosti. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, aby x ovzduší vznikla xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx kontrolní skupina x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx možno xx xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Pokusná zvířata

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Používá se xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti zvířat xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).

1.3.2.2 Počet a xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 10 xxxxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu zvířat. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxxx, xxx nebyly překročeny xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx testované xxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx dávek, xxxxxxx xxx, a xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, aby byl x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxx xxxxxx x mortality. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x, xxxxx je xx xxxxx, musí umožnit xxxxxxxxx XX₅₀ s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.3.2.4 Limitní xxxx

Xxxxxxx-xx xx 4 xxxxxxxx expozici 5 xxxxx x 5 xxxxx plynu x xxxxxxxxxxx 20 xx.x^-1 xxxx xxxxx xx aerosolu xxxxxx xxxx xxxxx látky x koncentraci 5 xx.x^-1 (nebo - x případech, xxx xxxx xxxxxxxxxxx není xxxxx použít v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - při xxxxxxxx xxxxxxxxx dosažitelné xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx x žádné xxxxxxxxx xxxxxxxx sledovanou xxxxxx, považují xx xxxxx xxxxxx za xxxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx doba xxxxxxxx xx xxx 4 xxxxxx.

1.3.2.6 Xxxxxxxx

Pro xxxxxx se zvířaty xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xx xxxxxxx omezovalo xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx maximální. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx by neměl x xxxxxx celkový xxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Je xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jinými cestami.

1.3.2.7 Xxxx pozorování

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx jejich xxxxxx x xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxx x opět xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx do xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx je patrna xxxxxxxx xx zpožděné xxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xx xxxx 4 xxxxx xx xxxxxxxx rovnováhy koncentrace xxxxxxxxx xxxxx. Nastavení xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxx. Teplota xxxxx xxxxxx xx xxx 22 ^oC ± 3 ^x X. Xxxxxxxxx vlhkost xx být xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x výjimkou případů, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. experimenty x aerosoly). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 mm xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx unikání xxxxxxxxx xxxxx do xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx nepodává potrava xxx xxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx vytvoření x xxxxxxxxxxxx testovací atmosféry. Xxxxxx musí xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx nejrychleji. Konstrukce x provoz xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry x komoře.

Xx xxxxx xxxxxxxx měření xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:

(x) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx),

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxx x dýchací xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx expozice (xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx vyžadovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Během xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx než ±15 %. U některých aerosolů, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx větší xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx trvání xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxx částic x xxxxxxxx, xxxx xx distribuce velikosti xxxxxx xxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu),

(x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx x xx jejím xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky. Xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxx xxxxxxx dne xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Minimálně xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx každodenní xxxxxxxxxx x odpovídající xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx snížení ztrát xxx studii, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xx utracením xxxxxxx nebo umírajících xxxxxx.

Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x krevního oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxxx dýchání, xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx týdně x v xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx xx zvláštním xxxxxxxx xx xxxx změnám xxxxx x xxxxx xxxxx dýchacího xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x odeberou xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx sestaví xx tabulky. Z xx musí xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx patrný počet xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx nálezy. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx přežijí xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, která xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx. XX₅₀ xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - mezi xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x všech xxxxxxx xxxxxxxxx účinků.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx informace:

- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, podmínky ustájení, xxxxxx, xxx.,

- xxxxxxxx pokusu: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, rozměrů, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxxxxxxx aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx umístění zvířat x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx je xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti vzduchu, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,

- údaje x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx údaje:

x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x inhalačním zařízení;

x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;

x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, dělené objemem xxxxxxx);

Xxxx.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x roztoku (např. xx vodě) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx koncentraci xxxxx xx vzduchu, nýbrž xxxx, pokud je xx možné, koncentraci xxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx.

d) povaha xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxx;

x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;

f) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD);

x) xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx;

h) xxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví a xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx, která x pokuse xxxxxxx xxxx xxxx humánně xxxxxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx);

- xxxx uhynutí xxxxx expozice nebo xx xxxxx skončení, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxx;

- hodnota XX₅₀ xxx xxxxx xxxxxxx stanovená po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx metody xxxxxxx);

- 95% xxxxxxxx spolehlivosti xxx XX₅₀ (xxxxx je xxxxx xxx xxxxxxxx);

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx (xxxxxxxxxxx) a její xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxx metoda xxxxxxxxx);

- xxxxxxx xxxxxx;

- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxx (xx zvláštním xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx utracení zvířat x humánních xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnotu XX₅₀);

- interpretace xxxxxxxx.

B.3. AKUTNÍ XXXXXXXX (DERMÁLNÍ)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxx na xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx zvířat, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i zvířata, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x takových xxxxxxx x takovým xxxxxxxx, o kterých xx známo, že xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zvířat xx zádech xxxxxxx xxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx se xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Při xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, případně připravenými x xxxxxxxx formě, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx vliv xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kůží. Xxxxx vehikula by xx xxx xxxxx xxx, x xxxx xxxxx se může xxxx látka xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxx xxxx, x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vybrat ten, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx kůží. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx neředěné.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx králíků. Xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xx důvody. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx testu xx xxxxxx variační xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx každou xxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx samic, musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx druhů, xxx xxxx xxxxxxxx, mělo xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx zvolit x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx se nepřekročily xxxxx xxxxxxx dávky. X xxxxxx testech xx xxxxx vyhnout xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testované xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx vznikly xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x mortality. Xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx nebo leptavé xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx možno xxxxxxx xxxxxxxxx LD₅₀ x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Lze xxxxxxx xxxxxxx xxxx jednou xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx způsobí xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx úplnou xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx být xxxxxxx 14 dní. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu otravy, xxxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxxxxx xx doba, kdy xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxx x xxxx do xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx je patrná xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx uhynutí.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx plochu, která xxxx asi 10 % celkového povrchu xxxx. Xxx vysoce xxxxxxx xxxxx xxxx xxx tato plocha xxxxx; mělo xx xx xxxx aplikovat xxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxx této xxxxxx.

Testovaná látka xx xx expoziční xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx mulového xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx xxxxxx je xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx xxxxxx xxxxx x testovaná látka xxxxxxxx x xxx xx zabránilo orálnímu xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx omezení xxxxxxxx xxxxxx, úplnou xxxxxxxxxxxx xxxx nelze xxxxxxxxx.

Po xxxxxxxx xxxx expozice xx xxxxxxxx zbytky testované xxxxx, xxxxx xxxxx xxxx nebo xxxxx xxxxxxx způsobem se xxxxxxx očištění xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx systematicky xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx třeba vést xxxxxxxxxx záznamy. První xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Nejméně xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a odpovídající xxxxxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx snížení xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. pitvou nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx izolací x xxxxxxxxx slabých xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx a sliznic, x xxxx xxxxxxx x krevního oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Okamžik xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx co nejpřesněji. Xxxxxxx, která během xxxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají a xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Hodnocení xxxxxxxx x druhého xxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x pěti xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví, xxx xx xxxxxxxx, zda xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxx citlivější xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx případech xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx xx x dispozici spolehlivá xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pohlaví jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Údaje xx sestaví do xxxxxxx. Z xx xxxx být pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x xxxxxx projevy xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx v týdenních xxxxxxxxxxx x před xxxxxxxxx. Xxxxx hmotnosti xx xxxxx stanovit x xxxxxxxxxx, přežijí-li xxxxxxx xxxx než xxxxx den. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx x bolesti xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx touto xxxxxx. XX₅₀ xx vypočte xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx vztah, xxxxx existuje, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x všech ostatních xxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx tyto informace:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx atd.,

- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx způsobu xxxxxxxx xxxx x typu xxxxxx: okluzivní xxxx xxxxxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx je užito) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle xxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; počet exponovaných xxxxxx),

- xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx látky, důvody x xxxxxxxx pro xxxxxxx utracení zvířat,

- všechna xxxxxxxxxx,

- xxxxxxx LD₅₀ xxx to xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx úplný pokus, x xx pro 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),

- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX₅₀ (xxxxx xxx xxx xxxxxxxx),

- křivka xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx x její xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx danou xxxxxxx xxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx xxxxxxxxx věnovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀ v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x humánních xxxxxx xxxxx xxxxx),

- interpretace výsledků.

X.4. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXX DRÁŽDIVOST)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxx

Xx xxxxx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může být xxxxxxxx xxx posouzení, xxx xx vhodný xxxxx test, studie xx jediném xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx (např. xX xxxxx či xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5) xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx kožní dráždivost, xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx leptavé xxxxxx. Xx xxxxx xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.

x) Xxxxxxxx xxxx dostupné xxxxxxxxxxx xxxxxxx závažných účinků xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vitro xxxxx, není xxxxxxxxx xxxxx xxxx.

x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxxxx xxxx látka v xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxx při limitní xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti) x xxxxxx pozorováno xxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx dále testovat xxxxx xxxxxxxxxx. Rovněž xxxx xxxxx testovat xxxxx vysoce xxxxxxx xxx dermální cestě xxxxxx.

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx slouží xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx stanovené době xx xxxxxx, vyhodnotí x xxxxxxxx popíše xxxxxx podráždění, aby xxxx xxxxx provést xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx pozorování xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx bylo možné xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx pozorovaných účinků.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba humánním xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba dbát xx xx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. abrazí). Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx zdravou, xxxxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. Testované xxxxx xx xxxxx nanášet xx xxxx zóny xxxxx husté xxxxx.

Xxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dostatečně xxxxxxxx xxxxx, případně xxxxx vhodným vehikulem, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x kůží. Xxx xxxxxxx vehikula xx xxxxx xxxx x úvahu vliv xxxxxxxx na podráždění xxxx testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx albínu králíka.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx xx x xx xxxxx screeningových xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx vyvolávat nekrózu (xxxx. xx xxxxxxx), xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx testu na xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx tohoto xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xx xxxxx doplnit xxxxxxxxx na dvou xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx neošetřenou xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx případů xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxx další xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Pokud xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx kůže 0,5 ml xxxxxxxx xxxx 0,5 x xxxx nebo xxxxxxxx xxxxx. Přilehlé xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx zvířete xxxxxx x testu xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxx pozorování

Dobu xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx bylo možno xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx xxxx nevratnost xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx po xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x klecích. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx malou xxxxxx (xxx 6 xx²) xxxx a pokryje xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxx past může xxx vhodné nanést xxxxxxx testovanou látku xx xxx, x xxx xxx xxxxxxxxx xx kůži. Xx xxxx trvání xxxxxxxx xx xxxxx přidržovat xxxxxx volně na xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxx, aby xx xxxxx xxxxxxx x xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx orálně xxxx xx xxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx odstranit xxxxxx xxxxxxxxxx látku xxxxx, pokud je xx možné, xxxx xxxxxxx rozpouštědlem, ale xxx, aby xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 4 xxxxxx.

Xxxxx existuje xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. tím, že xxxxxx poleptání, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx. na 1 xxxxxx nebo 3 xxxxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx nejprve xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 plátky xxxx současně, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx. První xxxxxx xx xxxxxxxx po 3 minutách. Pokud xxxx pozorována xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx druhý xxxxxx xx 1 hodině. Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zacházení, odstraní xx třetí plátek xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx nejméně dvou xxxxxxx zvířat; pokud xx není xxxxxxxxxxxxxxxx x humánních důvodů (xxxx. xxxxxxxx xx 4 hodinách expozice xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).

Xxxxxxxx je xxxxxxx xxxxx reakce (xxxx. nekróza) xxxxxxxxxx xx 3 minutách xxxx xx 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx ukončen.

Xx xxxxxxxx podmínek je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx je třeba xxxxxxxxx na příznaky xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xx 60 xxxxxxxx a xxxx 24, 48 x 72 hodin xx odstranění xxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx klasifikuje x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 1. Jestliže nebylo xxxxx 72 hodin xxxxxxxx xxxxxxx odeznění xxxxxx, provádí xx xxxxxxxxxx dále. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx kožní xxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx reakcí nebo xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx zabarvením xxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx histopatologického vyšetření xxxx xxxxxx tloušťky xxxxx xxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx erytému x edému xx xxxxx xxxx pozorování. Xx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx pozorované toxické xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx možno xxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxx xxxxxx: okluzivní, xxxxxxxxxxxxx,

- ve xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxx každé xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (za 1, 24, 48 a 72 hodin xxx. xx odstranění xxxx),

- xxxxx zjištěných xxxxxxx poškození xxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx x povahy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx xxxxx xxxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx výsledků.

4. XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx

	Hodnota
1. Xxxxxxxxx erytému x příškvaru
1.1 Žádný erytém	0
1.2 Xxxxx xxxxx erytém (stěží xxxxxxxxx)	1
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx	2
1.4 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx	3
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxx příškvaru (xxxxxxxxx poškození - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx	4
2. Hodnocení edému
2.1 Žádný xxxx	0
2.2 Xxxxx lehký edém (xxxxx xxxxxxxxx)	1
2.3 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx)	2
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx vyvýšeny asi x 1 xx)	3
2.5 Xxxxxxx xxxx (zduření xxxx xxx 1 xx x xxxx přesahujíce xxxxxxx exponované plochy)	4

4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kožní xxxxxxxxxxx (IKI)

XXX xx vypočte xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx reakce xxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx jedince a x xxxxx získaných xxxxxx u xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx aritmetický průměr.

Xxxxxxxxxxx	I_KI
xxxxxxxx	X_XX ≤ 0,5
xxxxx dráždí	0,5 &xx; X_XX ≤ 3
xxxxxxx xxxxxx	3 &xx; I_KI ≤ 5
xxxxx xxxxxx	X_XX > 5

B.5. XXXXXX XXXXXXXX (OČNÍ DRÁŽDIVOST)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

1.1.1 Xxxxxxx xxxxx

Xx třeba xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx informace x xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testování látky xx podmínek, které xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. X xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

a) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx reaktivita. Např. xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxx xx xxxxx očekávat - xxxxxxxx x xxx xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX rovné či xxxxx 11,5, xxxx xxxxx xxxxxxxx, pokud xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.

b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x xxxxxxxxxxx potenciálně xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx vlastnostmi xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx dráždivost pro xxx, xxxxxxx lze xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx zřejmé xxxxxxx xxxx výrazně xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx testovat xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx lze xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxx na xxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx jednoho xxx xxxxxxxx pokusným zvířatům, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx jako xxxxxxxx. Xx stanovených xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx posouzení xxxxxx. Xxxx pozorování musí xxx dostatečně dlouhá, xxx bylo možné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx nevratnost xxxxxxxxxxxx účinků.

Zvířata xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x bolesti je xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

24 xxxxx xxxx xxxxxx xx x xxxxxxx z xxxxxxxxx vybraných pokusných xxxxxx xxxxxxx vyšetření xxxx očí. Xxxxxxx, x xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx očí, xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, se x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Ačkoliv xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, doporučuje xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx dospělému albinotickému xxxxxxx.

1.2.2.2 Počet xxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky, je xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) účinky pro xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx specifických xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířata.

X ostatních xxxxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyžadovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx

Při xxxxxxxxx xxxxxxx xx používá xxxxx 0,1 xx. X tuhých látek, xxxx a xxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxx objem 0,1 xx xxxx hmotnost xxx 0,1 g (xxxxxxxx je vždy xxxxx uvést). Xxxxx-xx xx x tuhou xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, je třeba xx xxxxxxxx na xxxxx prášek. Objem xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.

U xxxxx xxxxxxxxxx xx sprejích x pumpou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nádobkách xx třeba xxxxxxxxxxx x sebrat 0,1 xx xxxxx x xxxxxxxxxx xx xx xxx podle xxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx

Délku xxxx xxxxxxxxxx není možno xxxxxxxx rigorózně. Musí xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx stačí 21 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx tak, xx xx xxxxxx xxxxx lehce odchlípne xx xxxx bulvy. Xxxxx xx xxx xxx xx 1 xxxxxxx xxxxx x xxxx přidrží, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx oko, xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, slouží xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx předpokládá, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx instilací testované xxxxx použít lokální xxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxxx, xx následkem xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx testovanou xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx typ, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxx anestezovat x xxxxxxxxx oko.

Oči xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx vymývat xxxxxxxx 24 xxxxxx po xxxxxxxx testované látky. Xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx oči xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx při xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx s použitím xxxxxxx, xxxxxx se xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx oči. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 3 xxxxxxx. Půl xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kapaliny x xxxxxxxxx průtoku, xxx nedošlo k xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx

Oči xx xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 x 72 hodinách. Xxxxxxxxxxx-xx xx po 72 xxxxxxxx žádné příznaky xxxxxx lézí, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx postižení xxxxxxx xxxx jiné xxxxxxxx xxxxxxxxxx oka tak, xxx bylo možno xxxxxxxx xxxxx xxxx x jejich xxxxxxxx xx nevratnost. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx ve xxxxxx x jiné xxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx oka připouští xxxxx xxxxxxxx interpretace. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xx, kdo xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx oka.)

Xxxxxxxxxxx reakcí je xxxxx usnadnit použitím xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx zařízení. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 24 xxxxxxxx je xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx mimoto xxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx být xxx xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx intervalu xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxx popis stupně x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx závažných lézí x všechny xxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx x zvířatech (xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),

- v xxxxxxxxx formě výčet xxxxxxxxxx nebo leptavých xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)

- popis xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx,

- podrobný popis xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx zjištěného xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx rohovky,

- xxxxx metody xxxxxxxxx pro jednotlivé xxxxxx xxxx (1, 24, 48 x 72 xxx.), xxxx. xxxxxxxxxx lampa, xxxx xxxxxxxxx, fluorescein xxx.,

- popis xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx místních xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx.

4. DODATEK

4.1 Stupnice xxxx na xxx

	Xxxxxxx
A. Xxxxxxxx - otok
Edém xxxx xxxxxxxx	0
Slabý xxxx zahrnující mžurku	1
Xxxxxxx xxxx x everzí xxxxx	2
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx víček xx xxxxxxxx	3
Xxxx xxxxxxxxxx víčka xxxx xxx na polovinu xxxx xxxxx	4
X. Xxxxxxxx - xxxxxx
Slzení xxxx xxxxxxxx	0
Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx)	1
Xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx xxx	2
Slzení xx xxxxxxxxx víček x xxxxx v xxxxxxx okolí xxx	3
X. Xxxxxxxx - enantém
Cévní xxxxxx xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxx cév xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx normě	1
Xxxxxxxxxx cévní xxxxxx, xxxxxxxxx jednotlivých xxx nesnadné, difusnější xxxxx červená barva	2
Xxxxxxx tmavě xxxxxxx xxxxx	3
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx
Xxxxxxxx nejsou xxxxxxxx	0
Nepravidelná xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxx cév xxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx xx xxxxxx xx zachovaná, xxxxxxxx xxxxxxxx	1
Xxxxxx na xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx a hemoragie	2
v xxxxxxx (xxxxx nebo xxxx xxxxxx charakteristik)
X. Xxxxxxx - xxxxxx neprůhlednosti
Xxxxxxxxxxxxx xxxx přítomná	0
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx diseminovaného xxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxxxxxx xxxxx viditelné	1
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, detaily duhovky xxxxx xxxxxxxx	2
Xxxxxxxxxx zóny opalescence, xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxxxx stěží xxxxxxxxx	3
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, duhovka xx xxxxx xxxxxxxxxxx	4
X. Rohovka - xxxxxx neprůhlednosti
Neprůhlednost xx xxxxxxxxxxxxx, ale xxxx xxxxxx xx ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx	1
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx	2
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx	3
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx > 3/4 xxxxxx xxxxxxx	4

4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx indexu xxxx dráždivosti (X_XX)

Xxxxxxxxxxxx index oční xxxxxxxxxxx (I_OI) xxx xxxxx zvíře x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx

X_XX = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.E.F

Xxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (I_OP) xxx xxxxx interval xxxxxxxxx xx vypočte pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x X_XX.

Akutní xxxxx xxxx dráždivosti XXX xx xxxxx nejvyššímu X_XX xxxxxxxxxx x xxxxxxx testu

4.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx	X_XX
nedráždí	0 - 4,9
xxxxx xxxxxx	5 - 14,9
xxxxxx	15 - 29,9
xxxxx xxxxxx	30 - 59,9
velmi xxxxx dráždí	60 - 79,9
extrémně xxxxxx	80 – 110

X.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX

1. METODA

1.1. Xxxx

Xxxxxxxx:

Citlivost x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx jsou považovány xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx dostatečně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx všechny xxxxx x potenciálním senzibilizačním xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xx se xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.

Xxx volbě testu xx třeba uvažovat xxxxxxx jako xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx průniku xxxx.

Xxxxx na xxxxxxxxx lze xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rozpuštěním xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx Freundově kompletním xxxxxxxx (FCA), x xx xxxxx bez xxxxxxxx.

Testy s xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx senizibilizačního xxxxxx pro xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx Freundova kompletního xxxxxxxx, x proto xx jim dává xxxxxxxx.

Maximizační test xx morčatech (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) je velmi xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx senzibilizační xxxxxx xxxxxxxx několik xxxxxxx xxxxx, je GPMT xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx.

X mnoha xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xx dává Xxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxxx xx xxxx citlivé.

X určitých případech xxx xxxxxxxxx volbu Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx injekci xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx. Xxx použití Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.

X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx test na xxxxxxx (XXXX) a Xxxxxxxxx test. Lze xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx validizované x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx.

Pokud screeningový xxxx xxxxxxxxx uznávanou xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx potenciální xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxx výsledku xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx, xxx xxx je xxxxxx x této xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Definice

Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx látku. X člověka xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx druhů xx xxxxx reakce xxxxx x xxxx být xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx xxxx otok.

Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx testované látce xx záměrem xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx: období xxxxxxx xxxxxxx týdne xx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Citlivost x spolehlivost xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx každých xxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxx, x kterých xx xxxxx, xx xxxx mírný xx xxxxxxx silný xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx.

X xxxxxxx provedeného xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx mírné/střední xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % x xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx 15% u xxxxxx xxx adjuvans.

Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx látkám:

Číslo XXX	Číslo XXXXXX	xxxxxxxx název	xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx
101-86-0	202-983-3	2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx	xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx
149-30-4	205-736-8	2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx	kaptax
94-07-7	202-303-5	Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx	xxxxxxxxx

Xxxxx nastat xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx.

1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Po období 10 xx 14 xxx (xxxxxxxx xxxxxx), x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx reakce, jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxx reakce xx provokační xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx porovnán x xxxxxxxx x stupněm xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxx x xx jim xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávka.

1.5 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Jestliže je xxxxxxxxxx za nezbytné xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx x použitím xxxx xxxx vhodného rozpouštědla xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.1 Xxxxxxxxxxx xxxx xx morčatech (XXXX)

1.5.1.1 Xxxxxxxx

Zdravá mladá xxxxxxx xxxxxxxxxxx morčata xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před testem xx xxxxxxx náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx stříháním, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx depilací, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxx. Zvířata xx xxxxx xxxx zahájením xxxxx a xx xxxxx xxxxx.

1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.5.1.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.1.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx xxxxxx samce x xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx x nejméně 5 xxxxxx xx třeba x kontrolní skupině. Xxxxxxx-xx xx menšího xxxxx než 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx možné xxxxx x xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx, doporučuje xx xxxxxxxxx xx dalších xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx celkového počtu xxxxxxx 20 testovaných x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.1.2.3 Dávkové úrovně

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dobře xxxxxxx x která xx xxxxxxxx xxxxxxxx mírné xx střední xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, která u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx na dvou xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxx tento účel xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXX.

1.5.1.3 Popis xxxxxxx

1.5.1.3.1 Xxxxxxx

Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Následující 3 xxxxxxx subkutánních xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, se xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx srsti xxxxxxxxxx xxxxx střední xxxxx:

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx s xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;

Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx FCA x vodou xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;

Xxx xxxxxxx 3 xx xxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx před xxxxxxxx x FCA xx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx rozptýlí x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxx xxxxxxx 3 má být xxxxxx xxxx pro xxxxxxx 2.

Xxxxxxx 1 a 2 xx aplikují blízko xxxx a xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx 3 xxxxxx xx xxxxxxxx části xxxxxxxxx xxxxxx.

Den 0 - Kontrolní xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, xx podají xx stejných xxxx xxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx:

Injekce 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x objemovém xxxxxx 1:1;

Xxxxxxx 2: xxxxxxxx vehikulum;

Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) se xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).

5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

Přibližně dvacet xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx aplikací, xxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxx xxx xxxx, xx na xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx případně oholení xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx sodného xx vazelíně, za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

6. - 8. den - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Testovanou xxxxxx xx xxxxxxx vehikulu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), xxxxx xx xxx přiloží xx testovací xxxxxx x fixuje xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx zbaví xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxx 48 hodin.

1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx

20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx

Xxxx exponovaných x kontrolních zvířat xxxx xxxxxxx srsti. Xx xxxxx xxx xxxxxxx je aplikována xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xx xxxxx bok se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (pokud xx xx třeba). Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx obvazu udržují x xxxxxxxx s xxxx xx 24 xxxxxx.

1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx oholí a x xxxxxxx potřeby xxxxxxxx;

- xxxxxxxxx xx xxxxxxx třech xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx od xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx kožní xxxxxx x zaznamenává xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx v dodatku;

- xxxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx reakce xxxx (72 hodin).

Doporučuje xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" u testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxxx je k xxxxxxxxx výsledků xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx přibližně o xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx původní xxxxxxxxx skupině.

Všechny xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx postupů, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx nálezů xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx

1.5.2.1 Xxxxxxxx

Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 dnů před xxxxxxxxx testu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx. Odstranění xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x závislosti xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxx xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Zvířata xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx testu.

1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.5.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.2.2.2 Počet x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxx xx minimálně 20 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx

Koncentrace xxxxxxxxx xxxxx použitá xxx každou indukční xxxxxxxx se xxxxxx xx takovou xxxxxx, xxxxx xx nejvyšší xxxxxxxx xxxxx, ale xx xxxxx silné xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace se xxxxxxx maximální koncentrace, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx vodě je xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Pro xxxx xxxxx je preferován 80% roztok xxxxxx/xxxx xxx indukci a xxxxxx xxx provokaci.

1.5.2.3 Xxxxxx

1.5.2.3.1 Xxxxxxx

Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxx bok xx xxxxxx srsti (xxxxxxxx ostříhán). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx řídí xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).

Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx xx testovací xxxxxx x přidržován x kontaktu s xxxx překrývacím plátkem xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem xx xxxx 6 xxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx už xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx². Je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx zajistila okluze. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx být xxxxx další xxxxxxxx.

Xxx 0 - Xxxxxxxxx skupina

Jeden xxx je xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x to xxxxxxxx způsobem jako x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x kontaktu s xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx komůrkou a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx možno xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, lze použít xxxxx kontrolní xxxxxxx xxx aplikace.

6. - 8. a 13. - 15. xxx - Testovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx jako x den 0 xx xxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx xx tomtéž boku (xxxxxxxx xxxxxxxx srsti) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.

1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx

27. - 29. xxx - Testovaná a xxxxxxxxx xxxxxxx

Neošetřený xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx aplikuje xx xxxxx xxxx neošetřeného xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxx xxxx neošetřeného xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx aplikovat xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plátky xxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx x kontaktu x kůží vhodným xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.

1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx

- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx odstranění xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx srsti;

- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxx (přibližně 30 xxxxx xx xxxxxxxx provokačního plátku) xx pozorují xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx;

- xxxxxxxxx po dalších 24 hodinách (xx. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxx xxxxxx znovu pozorují x xxxxxxxxxxxxx.

Doporučuje xx systém "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, které xxxxx xxxx senzibilizováno x xxxxx xx kontrolní.

Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx provokace), provede xx přibližně x xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx znovu x kontrolní xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.

Xxxxxxx xxxxx reakce x xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx důsledkem indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx zaznamenávají podle xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření nebo xxxxxx tloušťky kožních xxx.

2. XXXX A XXXXXX XXXXX (GPMT X XXXXXXXXX XXXX)

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx musí xxx xxx xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX (GPMT A XXXXXXXXX XXXX)

Xxxxx xxx xxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx tohoto testu xxxx xxxx citaci (xxxx. LLNA - xxxx regionálních xxxxxxxxxxxx xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx ucha x xxxx) xxxxxx xxxxx podrobností postupu x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx testované a xxxxxxxxxx xxxxx.

3.1 Zpráva x průběhu pokusu (XXXX x Buehlerův xxxx)

Zpráva x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxx morčat;

- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.;

- hmotnost xxxxxxxxxxxx zvířat na xxxxxxx x konci xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxx přípravy xxxxx pro xxxxxxxx xxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxx o materiálech x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx koncentracích xxx xxxxxxx test;

- xxxxxxxx xxxxxxxxx x přípravě, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;

- xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.

Výsledky:

- xxxxxx výsledků xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx referenční xxxxx, její xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

- xxxxxx xxxxx charakteru x xxxxxx pozorovaných xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Diskuse výsledků

Xxxxxx

4. LITERATURA

Tato xxxxxx xx analogická x metodou XXXX XX 406.

Xxxxxxx

5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx reakcí

0 = žádná xxxxxxxxx xxxxx;

1 = xxxxx xxxx skvrnité xxxxxxxxx xxxx;

2 = xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;

3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.

5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxx pozitivity xxx xxxxxxxxxx expozici, tj. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx senzibilizováno, xx xxxxx xxxxxxxxxxx jako

xxxxx alergen (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx

xxxxx alergen (XX. st.) - 9 - 28 % zvířat

xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (III. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx

xxxxx alergen (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx

xxxxxxxx xxxxxxx (V. xx.) - 81 - 100 % xxxxxx

B.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx se zvířata xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx se zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Pitva xx provede u xxxxx zvířat, která xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxx zvířata, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx utratí x xxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx co xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx klece. Xxxxx xxxxxxxxxx zvíře je xxxxxxxxxxx označeno. Nejméně 5 xxx před xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx lze xxxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx studie x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xx xx třeba, rozpustí xxxx suspenduje xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (vehikulu). Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Dává xx xxxxxxxx potkanům, xxx xx xxxxx použít x jiného xxxxx xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných kmenů. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a nesmí xxx březí. Podávání xxxxx by xxxx xxxxx co nejdříve xx xxxxxxx a x každém případě xxxxx, než xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.

Na xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx zvlášť) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

Pokud xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx před dlouhodobou xxxxxx, xx třeba x xxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířata stejného xxxxx x ze xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Počet x pohlaví

Xxx xxxxxx hladinu dávek xx použije xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Používá xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxx dávek

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tři xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx se kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.

Pokud xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx denní xxxxx 1000 mg.kg^-1 tělesné xxxxxxxxx, je možno xxxxxxx xxxxxxx test. Xxxxxx-xx xxxxxx xxxx x dispozici, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vyhledávací xxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxx.

Při xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx všechny xxxxxxxxxx xxxxx x toxikologických x toxikokinetických xxxxxx x xxxxxxxxx látce xxxxxxxx látkách xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx. Dále xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx dávce. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (NOAEL). Xxxxxxx je xxxxxx xxxx- xx čtyřnásobný xxxxxx xxxx sousedními xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx dávek, xx xxxxx přidat čtvrtou xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxx xxx 10).

Xxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxx pitné vodě, xx xxxxxxxx zajistit, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx neovlivňovalo xxxxxx x vodní xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx se testovaná xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; použitou xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxx sondou, xxxx xx xx xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx dobu x dávkování přizpůsobovat xxxxxx tělesné hmotnosti xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx předběžný xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx použít xxxxxx potravy.

1.2.2.4 Limitní xxxx

Xxxxxxxxx-xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx 1000 mg.kg^-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx vodě, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky nevyplývá x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxx úrovních xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx údaje o xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xx xx třeba xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx pozorování

Xxxx pozorování je 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny jsou xxxxxxxxxx nejméně xxxxxxx 14 xxx bez xxxxxxxx x cílem xxxxxxxx případné xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx přetrvávání nebo xxxxxxxxx účinku.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířatům xx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 dnů, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxx v xxxxx. Denní xxxxx xx podává xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kanylou. Xxxxxxxxx xxxxx tekutiny, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx velikosti zvířete. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx podat x 2 xx xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx objemu xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx byl podáván xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx to x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, u xxxxxxx xx třeba obvykle xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně, xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx a x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Zaznamenává se xxxxxxxxx xxxx zvířat. Xxxxxxx dvakrát denně xx provede xxxxxx xxxxxxxxx všech xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx stres xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx provede před xxxxx aplikací (xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x dále xxxxxxx xxxxxx týdně. Toto xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx chovnou klec x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx dobu. Výsledky xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, nejlépe s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx; osoba, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx neměla znát xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx skupin.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny kůže, xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x exkretů, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx, zježení xxxxx, velikost xxxxxx) x xxxxxxxx další. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxx xxxxxx xx manipulaci, xxxxxxxxxx klonických a xxxxxxxxx pohybů, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (vytrvalé xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx pozadu).

Xx xxxxxxx týdnu xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxx podněty (xxxx. xxxxxxxx, zrakové, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Další xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, které xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, jsou uvedeny x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx úvod, xxxx X).

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx vynechat, xxxxx 28xxxxx studie slouží xxxx xxxxxxxxx studie xxx xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxxxxxx (90denní); x xxx případě je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poruch xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx studie. Ovšem x v tomto xxxxxxx xxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx týdnu 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxx hmotnost x xxxxxx potravy a xxxx

Xxxxxxx se xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Spotřeba potravy x vody xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, také v xxxxxxx aplikace x xxxxx xxxx.

1.2.3.3 Hematologie

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů, počtu xxxxxxxxxx x změření xxxxxxxxxxx xxxx.

Krev xx xxxxxxx xxxxx xxxx nebo v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, odkud xx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve xx účelem posouzení xxxxxxxxx toxických xxxxxx xx xxxxx, zvláště xx xxxxx x xxxxxxx, xx provede x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxx zvířata xxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx¹⁾. Xxxxxxxxx xxxxxx x séra xxxxxxxx stanovení xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx alespoň xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky xx jaterní xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, aspartátaminotransferáza, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, sorbitoldehydrogenáza). Xxxxxxxx xxxxxxx enzymů (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx původu) x xxxxxxxxx kyselin xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx užitečné xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx posledního xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xX, xxxxxxxxx, glukózu x xxxx příp. krvinky.

Xxxx je xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxx podezřelých x xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxx funkce: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, specifických xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx vyšetření xx posuzuje podle xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx látek xxxx xxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxx je třeba xxxxxxxxxx pružně, xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx látky.

Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxx stanovení xxxxx před xxxxxxxx xxxxxx.

1) Xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx v séru x xxxxxx, xxxxxxx xxx glukózu. Xxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx je to, xx x nehladovějících xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, která xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx změny a xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, hladovění xxxx noc by xxxxx mít xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx x potravě xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxx xx lačno, xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provést až xx xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xx 4. xxxxx testu.

1.2.3.5 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, zahrnující pečlivé xxxxxxxxx vnějšího xxxxxxx xxxx, xxxxx otvorů, xxxxxx lební, xxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, varlata, xxxxxxxxxx, brzlík, slezina, xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx tkání x xx xxxxxxxx po xxxxx xx xxxxx xx vlhkém stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Následující xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx oblasti xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x mostu), míchu, xxxxxxx, tenké x xxxxxx střevo (xxxxxx Xxxxxxxxxx plátů), játra, xxxxxxx, nadledvinky, slezinu, xxxxx, brzlík, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x xxxxxxxx pohlavní xxxxxx (xxxx. xxxxxx, xxxxxxxx), močový xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x jedna xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), periferní xxxx (n. xxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxx), xxxxxxx v blízkosti xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx i další xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx, je xxxxx xxxxxxx.

1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx objeví poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx nutno xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx i x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze xx xxxxx xxxxxxxx.

U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xx xxxxxx zařazeny, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXX X XXXXXX XXXXX

X dispozici xxxx být xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx údaje sumarizovány xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx vykazujících příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx x průběhu xxxxx xxxx utracených x xxxxxxxxx důvodů, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx příznaku, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx typy xxxx.

Výsledky x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistickou metodu xx xxxxx xxxxxx xxx při xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx získány:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;

- xxxxx, stáří x xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx začátku xxxxx, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a na xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxx než xxxx;

- zdůvodnění xxxxxx dávek;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx testované xxxxx xxx aplikaci, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx látky;

- přepočet x xxxxxxxxxxx látky x xxxxx xxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx v xx xx xx xxxxxxx hmotnosti (pokud xxx o xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx);

- podrobné xxxxx o xxxxxxx x kvalitě xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);

Výsledky:

- xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx;

- údaje x toxických reakcích xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxx xxxxxxxx toxicity;

- xxxxxx, závažnost x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. zda xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;

- posouzení xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, úchopové síly x motorické xxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx;

- výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx normami;

- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x hmotnosti xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxx;

- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxx x xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxx:

4. XXXXXXXXXX

Tato xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx OECD XX 407.

X.8. XXXXXX XXXXXXXX INHALAČNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Xxxx

Xxxx pokusem je xxxxx získat údaje x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx par, bod xxxx, bod varu, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).

1.2 Xxxxxxx metody

Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx koncentraci, x xx xx 28 xxx. Použije-li xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vehikulum. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xx, která přežijí xx konce pokusu, xx xxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx třeba, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné vehikulum xxx, xxx x xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxx xx užije xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo jiná xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx data, je xxxxx xx xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xx xxxxxxx studie xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx pohlaví zvlášť).

1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx vysoké xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx každého pohlaví) xx xxxx 28 xxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání xxxx zpožděný výskyt xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx satelitní xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx pohlaví).

1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Použijí se xxxxxxx tři xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupina, případně xxxxxxxxx skupina x xxxxxxxxx - xxxxx xx užije - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x skupiny x xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxxx koncentrace má xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x malém xxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, mají xxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.

1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Trvání xxxxxxxx xx xxx 6 hodin xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je možné xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Pro pokusy xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx expoziční xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx konstruovat xxx, xxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx byla xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx objem pokusných xxxxxx přesáhnout 5 % objemu boxu. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expozice; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx cestami.

1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx pozorovat xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x zotavení a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx a xxx, ve kterém xx xxxxxx a xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx v týdnu, xx xxxx 28 xxx. Zvířata v xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx určena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 ^xX ± 3 ^xX. Relativní xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx uvnitř xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx okolí. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx předběžný xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx podmínky v xxxxx expozičním xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxxx expozice xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx.

Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:

x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).

b) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx se xxxx x dýchací zóně. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ± 15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx koncentrace xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxx xxxxxx x aerosolů, xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx týdně x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

x) Teplota x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx expozice x xx xxxxx skončení xx xxxxxxxxxx provádějí x zaznamenávají systematicky; xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx pozorovat xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx výskyt, xxxxxx x trvání. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a krevního xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx, jako xxxx. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx tkání nebo xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx v těžkém xxxxxx xx trpící xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, koncentrace xxxxxxxxxxx, počtu erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů a xxxxxxxxxxx krve.

2. Xxxxxxxxxxx analýza xxxx: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jeden x těchto xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxx (xxxxx známá jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), aspartátaminotransferáza (xxxxx xxxxx jako glutamátoxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x séru.

Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy xx lačno, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.3.3.1 Pitva

X xxxxx zvířat xxxxxxxxx ve xxxxxx xx provede xxxxx. Xxxxx játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx se xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx x xxxxx, x xxxxxxx orgány x xxxxxxxxxxxxxxx změnami xxxx xxxxxxx velikosti) xx xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x fixovat vhodným xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

U xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x zvířat kontrolní xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tkání x u xxxxx xxxxxx x nižšími xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx na xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu x xxxxx zvířat s xxxxxxxxxxxx formami xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má pokud xxxxx obsahovat tyto xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx xxx.,

- podmínky xxxxxx: popis expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx vzduchu x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x boxu, xxxxx xx používán. Xxxxxx přístroje pro xxxxxx teploty, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx údaje: x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx; x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx objemem xxxxxxx); x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx užito; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx; x) hmotnostní xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (MMAD) x geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD),

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx koncentrací,

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, případně xxxx x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxx účinku,

- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx potravy a xxxxx tělesné xxxxxxxxx,

- hematologická vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx možné,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - DERMÁLNÍ (28XXXXX OPAKOVANÁ APLIKACE)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx zvířat, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata chována x xxxxxxxxxx ustájení x krmení, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx možné, mělo xx xx však xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx experimentem. Xxxxxxxxx nebo xxxxxxx xx potřeba opakovat xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je třeba xxxx xx to, xxx xx nepoškodila xxxx (např. abrazí). Xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx nejméně 10 % povrchu těla. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx rozhodování x xxxxxxxxx připravované xxxxxx kůže x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx danou látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xx možno používat xxxxxxx potkany, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx použít x xxxx zvířecí druhy, xxxxxx použití xxxx xxxx xxx odůvodněné. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx každou xxxxxxx dávek použít xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx) se xxxxxxx kůží. Samice xxxx být nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Pokud se xxxxxxx budou xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 dnů xxxxxxxx xxxxx a xxxxx následujících 14 xxx xx ukončení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx nejméně tři xxxxxx dávek x xxxxx kontrolní xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x aplikací xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být nejméně 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx den xx xxxxxxx dobu. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx udržovala xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx skupině x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx jen x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx dávka by xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady expozice x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx dávka xxxx vyvolat xxx xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx než 3 xxxxxx dávek, xxxx xxx vmezeřené xxxxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxx x xxxxxx x střední dávkou x x xxxxxxxxx xxxxxxx by počet xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx testované xxxxx x těžkému xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx u xxxxxx xxxxxxx úrovně xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx účinků. Došlo-li x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx okolností xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxx xxxxx xxxxx, která xxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx toxické xxxxxx, není xxxxx xxxxxxx nutná.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx dobu uhynutí x xxxx, xxx xx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx studované xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx satelitní skupiny, xxxxx jsou xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 14 xxx bez xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xxxx nejméně 6 xxxxx xxxxx.

Testovanou xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxxxx xxx 10 % povrchu xxxx; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pokusné xxxxxx xxxxxxxxxx v xx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx s kůží xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx volnosti xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx. Jako xxxxxxxxxxxx metody xx xxxxx xxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxx".

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.

Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx x xxxx dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce autonomní x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Hmotnosti xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx pravidelné xxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx ztrátám zvířat, xxxx xxxx. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx xxxxx nebo chybného xxxxxxxx. Po skončení xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx a zvířata x xxxxxx stresu xx xxxxxx bolestí xx třeba okamžitě xxxxxxx, humánně xxxxxxx x pitvat.

Xx xxxxx xxxxxx xx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxx xxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.

2. Biochemická xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx xxxxxx jater x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx z xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx.

Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy xx xxxxx, xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího spektra xxxxxx.

1.2.3.1 Pitva

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxx x varlata xx xx nejdříve xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Orgány x xxxxx, např. normální x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, srdce x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx lézemi xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

U xxxxx xxxxxx skupiny, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší dávkou xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tkání x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxx provést histologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx se objevily xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x tomu xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, podmínkách xxxxx, xxxxxx xxx.),

- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxx (včetně vehikula, xxxxx se xxxxxxx) x koncentrace,

- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx ji lze xxxxxxxx,

- xxxxx x toxických odpovědích xxxxx xxxxxxx x xxxxx,

- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx nebo jiné xxxxxx,

- doba, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální příznaky x jejich xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx a vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je to xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx.

X.10. XXXXXXXXXX - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X SAVCŮ XX VITRO

1. XXXXXX

Metoda xx xxxxxxxxx OECD XX 473, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Účelem analýzy xxxxxxxxxxxxxx aberací xx xxxxx xx nalézt xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx a chromatidové. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx x aberacím xxxxxxxxxxxxxx typu. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx daná chemická xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx metoda xxxx xxxx navržena x xxxxxxx numerických xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx a existují xxxxxxxxxxx doklady xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka a xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat.

Xxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx možných xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxx xxxxx, které jsou x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx stále xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx než xxxxxx xxxxxxxxxx DNA.

X analýze xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vitro xx mohou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, buněčných xxxxx xxxx xxxxxxxx buněčné xxxxxxx. Použité xxxxx xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx chromozómů, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx.

Testy in xxxxx vyžadují obecně xxxxxxxx zdroj xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx podmínky x xxxxx xx xxxx. Xx xxxxx xx vyvarovat podmínek, xxxxx by xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, jež neodrážejí xxxxxxx xxxxxxxxxx, nýbrž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).

1.2 DEFINICE

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, případně xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx jako xxxx x opětovné spojení xxxx chromatid xx xxxxxxx místě (zahrnuty xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).

Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx mezera xx xxxxxxxxx chromatidy xx větší, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx pak x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx v xxxxx zlomu je xxxxxxxxxxx (xxxx mimo xxx xxxxxxxxxx), případně xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, kde xx X-xxxx replikace XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.

Xxx: achromatická léze xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Mitotický xxxxx: xxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (n) jiný xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3n, 4n xxx.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx dělení xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Xxxxxxx xxxxxxx xx vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xx x xxxxxxxxxxxx aktivací x xxx xx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, se xxxxxxxx xxxxxxx například Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, buňky xx xxxxxx, xxxxxx se x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 XXXXX METODY

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx

Je xxxxx xxxxxx celou řadu xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxx xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxxxxxx křečka xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx krve xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx).

1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx

X udržování xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kultivační xxxxx a inkubační xxxxxxxx (kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx x xxxxxxx). U xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx je xxxxx xxxxxx způsobem kontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx. X případě xxxxxxxxxxx xx xxxxx nepoužívají. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx: xxxxx se xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx hustotě, xxx xxxxxxx nedosáhly konfluentní xxxxxx před dobou xxxxxxxx x xxxxxxxx xx při xxxxxxx 37 ^xX.

Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxx xxx plná xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx zdravých xxxxxxx x kultivují xx xxx xxxxxxx 37 ^xX.

1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx suplementovaná xxxxxxxxxxxxxxx frakce (S9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Aroclor 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx a ß-xxxxxxxxxxxx (10) (11) (12).

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému bude xxxxxxx xx xxx, xxxxxx typu xx xxxxxxxxx látka. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx použít mitochondriální xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxx účely xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx linií xx xxx xxx vědecky xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx

Xx-xx testovaná látka x xxxxxx xxxxx, xxxxx xx před xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx nebo se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x případně xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, xx delší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

1.5 XXXXXXXX TESTU

1.6 XXXXXXXXXXXX

X zvoleného xxxxxxxxxxxx xxxxx existovat xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx narušovat přežívání xxxxx a aktivitu X9. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxx rozpouštědlo, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxx tam, xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxxxx, musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlo xxxxx bezvodé. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.

1.6.1 Koncentrace

Xxxx xxxxxxxx, xxx xx uvažují xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x xxxxxxx x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.

Cytotoxicita se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx stupně xxxxxxxxxx, počet živých xxxxx, xxxx mitotický xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx cytotoxicitu a xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xx třeba xxxxxx minimálně tři xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, musí xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx xx maximální xx xxxxx nebo xxxxxx toxicity. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lišit xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx mezi xxxxxxxxx 2 a √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx růstu, xxxxx xxxxx, xxxx mitotického xxxxxx (xxxx o xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx index je xxxxx nepřímou mírou xxxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxx xx době xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Je xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx byla xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx informace xx xxxxx xxxxxx také xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx průměrný xxxxxxxxx xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx celkový xxxxxx, xxxxx ne vždy xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx subpopulací xxxxx. X xxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx znamenat značný xxxxxx xx vhodné xxxx sklízení x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výtěžku xxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 µx/xx, 5 xx/xx xxxx 0,01 X.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx se xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšší, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu xx xxxxx kultivace s xxxxxxxxxx látkou. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx dochází-li x xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vyšších, xxx xx nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Může xxx užitečné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx x na xxxxx xxxxxxxx, protože xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx systému xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk, xxxx, X9 apod. Nerozpustnost xx xx zjistit x xxxxxxx okem. Xxxxxxxxx xxxxx být xx překážku xxx xxxxxxxxx buněk.

1.6.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx každého experimentu, xx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací xxxx xxx xx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx). Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx být pozitivní xxxxxxxxx látka vyžadující xxxxxxxxxxxx aktivaci k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx účinku.

Xxx pozitivní kontrolu xx xxxxxxx známý xxxxxxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x detekovatelný xxxxxx xxxxxxx nad pozadí, xxxxxxxxxxx citlivost testovacího xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx zvolit xxx, xxx xxxxxx byl xxxxxx, ale xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátů. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxx aktivace	Xxxxx	XXX	XXXXXX
Xx	methyl xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx ethyl xxxxxxxxxxxxxxx mitomycin X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx	66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5	200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1
Ano	xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx monohydrát xxxxxxxxxxxxxx	50-32-8 50-18-0 6055-19-2	200-028-5 200-015-4

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxx. Tam, xxx xx xx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx třeba zařadit xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.6.3 Xxxxxx

1.6.3.1 Expozice xxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx látkou za xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx 48 xxxxx xx xxxxxxxxx mitogenem.

Xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx; x xxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxx prokázat, xx xxxxxxx xxxx duplicitními xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx jedna xxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nádob (15).

1.6.3.2 Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx

X prvním experimentu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx xx xxxx 3 - 6 hodin x xxxxxx xx xxxxxxxxx x čase odpovídajícím xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Pokud jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx negativní, xxxxxxx se další xxxxxxxxxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx doby xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, než xx 1,5xxxxxxx délky xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx xx posuzují xxxxxx od případu. X případech, xxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepokládá xx xxxxx, je třeba xxxx rozhodnutí zdůvodnit.

1.6.3.3 Příprava xxxxxxxxxx

Xx buněčné xxxxxxx xx působí Colcemidem® xxxx xxxxxxxxxxx obvykle xx xxxx 1 - 2 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx pro přípravu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx.

1.6.3.4 Xxxxxxx

Všechny preparáty, xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, se xxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx zakódují. Jelikož xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metafázických xxxxx a ztrátě xxxxxxxxxx, xxxx xxx x všech xxxx xxxxx počet centromer x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx minimálně 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází, xxxxxxxxxxx z xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xx počet xxxxxxx vysoký, xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X xxxx xxxxxx testu xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx důležité xxxxxxxxxx xxxxxxxxx polyploidii x xxxxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxxxx experimentální xxxxxxxxx xx buňka, xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx buněk se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xx zaznamenávají zvlášť, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxx xxx jednotlivé xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx testováním, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxx. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx použitých xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. K xxxxxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx. Nejprve je xxxxx uvážit biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků testu xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx může indikovat, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx procesy a xxxxxxxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx s endoreduplikovanými xxxxxxxxxx může naznačovat, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (17) (18).

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx většina xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx získaná xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx posouzení xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxx ohledu xx xxxxx xxxxxxxxxxx experimentů. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx chromozómové xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx testovaná látka xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

XXXXXX X XXXXXXX XXXXXX

Xx zprávě x xxxxxxx pokusu je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Buňky:

- xxx a xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, je-li xx nutné,

- xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx dárce krve, xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxx xxxxx, je-li xx nutné - xxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxx, je-li to xxxxx

- modální xxxxx chromozomů.

Podmínky xxxxxx:

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx koncentrace x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx koncentrací x xxxxx kultur, xxxxxx xxxx. údajů x cytotoxicitě x xxxxxx rozpustnosti, jsou-li x dispozici,

- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, je-li xx xxxxx

- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx vehikula x xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxxxx teplota,

- xxxx xxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx buněk na xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx nutné

- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx přípravy podložních xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- metoda xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxxx konfluence, údaje x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx index,

- xxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx x xX x osmolalitě xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx aberací, xxxxxx xxxx,

- xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx aberacemi a xxx chromozómových xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní kulturu xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,

vztah xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Diskuse výsledků.

Xxxxxx.

X.11. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXX XXXXX SAVCŮ XX XXXX

1. XXXXXX

Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Aberration Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx vivo je xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx dřeně zvířat, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx polyploidie xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Aberace xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rovněž. Xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx přesvědčivé xxxxxxx toho, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx jevy, xxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx u xxxxxxx a v xxxxxxxxxxxxxxxx systémech.

K xxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxxxx xxxxx x xxx xx kostní xxxx, protože xx xxxxx o xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx dají xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx druhy x xxxxxx xxxxx xx v xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx na chromozómové xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx při hodnocení xxxxxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vivo, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx reparace XXX, x xxxx xxx mohou být xxxx xxxxxxxxxxx druhy x mezi xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx také xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx efektu, xxxxx byl předtím xxxxxxx testem in xxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxxx látka xxxx její reaktivní xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx zlom x xxxxxxxx spojení xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx aberace typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx)

Xxxx chromatidy: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx předpokladu, xx xxxxxxx xxxxxx xx struktuře xxxxxxxxxx xx větší, než xx šířka poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx pak x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx xx kratší x důsledku xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx replikace XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx mitózy, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.

Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx než xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx dělený xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx buňky.

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx hapoidního počtu xxxxxxxxxx (x) mimo xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x atd.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x výměny.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx vhodnou dobu xx působení se xxxxxx. Xxxx usmrcením xx xx xx xxxxxx xxxxxx zastavující xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). X xxxxx kostní xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx buňkách xx xxxxxxxxxxxxx zjišťují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx

Běžně xx xxxxxxxxx potkani, xxxx x čínští xxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx jiný xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x každého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx X, xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Příprava zvířat

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx dobu xxxxxxxxx xxxx dní xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxx stavu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx připraví její xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx nebo vehikulu x případně xx xxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx údaje o xxxxxxxx prokazují, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.

1.4.2 Xxxxxxxx testu

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Rozpouštědlo / vehikulum x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx je xx xxxxx, bylo na xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx pro každé xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Je xxxxx zacházet se xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole xx xxxx tak, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx než xxxxxxxxxx látkou x xxxxxx odebírat v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako je xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	759-73-9	212-072-2
xxxxxxxxx C	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxxx nebo vehikulem x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx by xxx zařazeny do xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx x x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se u xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx nejvhodnější xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx použít x xxxxxxxxxxxxx kontrol, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx vehikulum xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx účinky.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx v xxxx, xxx xx studie xxxxxxx, xxxxxxxx údaje x xxxxxxx živočišném xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx pohlavími xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx humánní expozice xxxxxxxxx látkám xxxx xxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxx je xxxx například x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxxx podávat jednorázově. Xxxxx xx xxxxx x objemnou dávku, xxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx dávka xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx za xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx odůvodněné.

Xxxxxx xx odebírají xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po podání xxxxx dne. X xxxxxxxx je první xxxxxxxx odběru xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu (xxxxx xxxx xxxxxxx 12 - 18 hodin) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x její vliv xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx chromozómových aberací, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx po 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Pokud xx x daném xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx za xxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx odběr vzorků 1,5xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx dávka Colcemidu® xxxx kolchicinu x xxxxxxxx xx z xxxx xx vhodném xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky. X xxxx xx xxxxx interval zhruba 3 - 5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4 - 5 hodin. X kostní xxxxx xx xxxxxxxx buňky x xxxxxxxx xx x nich chromozómové xxxxxxx.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx-xx se studie xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx ji xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x pokusného xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (5). Při xxxxxxxx toxicity se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx tři xxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxx od maximální xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx pozdější xxxxxx xxxxxxxx odběru vzorků xx pak třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx individuálně případ xx případu. Nejvyšší xxxxx může být xxxx xxxxxxxxxx jako xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx známkám xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx o xxxx xxx 50 %).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx minimálně 2 000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx x jeden xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx údajů x xxxxxxx x xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx provedena xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx úrovní. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx při xxxx xxxxxx xx 14 xxx, a 1&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xxx xxxx trvání xxxxx xxx 14 xxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx může xxx zapotřebí xxxxxxx x limitním xxxxx xxxxx xxxxxxx úrovně.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx sondou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx byl xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný a xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx fixuje. Xxxxxxxx buněk se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x obarví xx.

1.5.7 Analýza

Xxxxxxx xxxx cytotoxicity xx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx 1000 xxxxx x každého jedince.

X xxxxxxx xxxxxxx xx analyzuje xxxxxxxxx 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx při xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx určitého xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx chromozómů, xxxx být xxxxx xxxxxxxxx v hodnocených xxxxxxx 2n ± 2.

2. XXXXX

2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx jedinec. X xxxxxxx zvířete xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počet aberací xx xxxxx buňku x xxxxxxxx buněk xx strukturálními chromozómovými xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenají jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx x xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, xx xxxxx údaje xx obě xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxx.

2.2 Vyhodnocení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xx xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxxxxx buněk x chromozómovými xxxxxxxxx, xxxx zřetelný xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx ve skupině x jednorázovou xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné výsledky xx xxxxx vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vyvolávat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx fáze buněčného xxxxx (7) (8).

Xxxxxxxxx xxxxx, při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Většina xxxxxxxxxxx sice poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx výsledky, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxx nejednoznačné nebo xxxxxxxxxxxxx, x když xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, že testovaná xxxxx vyvolává x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx xxxxx vzít x xxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx specifickou xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Ve xxxxxx o průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx pokusu:

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,

- xxxxx xx studie xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx tkáně,

- případně xxxxxx xxxxxxxxxxx látky v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,

- xxxxxxxx popis xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx hodnocení xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, její xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx,

- metody xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,

- kritéria xxx xxxxxxxxx aberací,

- xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxx zvíře,

- xxxxxxxx, xxxxx xx studie hodnotí xxxx pozitivní, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Výsledky:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxx x xxxxx aberací xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,

- celkový počet xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xxxxxx průměr x xxxxxxxxxx odchylka,

- xxxxxxxx změny xxxxxxx,

- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx to xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx údaje x negativních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

Xxxxxxx výsledků.

Xxxxxx.

X.12. MUTAGENITA - IN XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX V XXXXXXX XXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

Metoda xx replikací XXXX XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Test (1997).

1.1 XXXX

Mikronukleus xxxx in xxxx x savců xxxxxx xx xxxxxxxx poškození, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx x mitotickém xxxxxxx erytroblastů; test xxxxxxx v xxx, xx se analyzují xxxxxxxxxx x kostní xxxxx xxxx. z xxxxxxxxx krve xxxxxx, xxxxxxx hlodavců.

Účelem xxxxxxxxxxxx testu xx xxxxxxx látky, jež xxxxxxxxx cytogenetické poškození, xxxxx výsledkem xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx zbude v xxxxxxxxxx xxxxxxx mikrojádro. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx četnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxxxx chromozómů.

V xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx proto, xx xx polychromní xxxxxxxxxx v xxxx xxxxx tvoří. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x mikrojádry v xxxxxxxxx krvi je xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxx slezina xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xx tento xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx strukturální xxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Mikrojádra xx xxxx rozlišovat podle xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx či xxxxxxxxxxxx kinetochoru (xxxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxx DNA x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx nezralých (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxx počet xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx krvi obsahujících xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx zralých xxxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxx x xxxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Tento xx vivo mikronukleus xxxx x savců xx zvláště xxxxxx x xxxxxxxxx rizika xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x procesů xxxxxxxx XXX, x když xxx mohou xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxx konečným xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx také xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx byl xxxxxxx xxxxxxx x systému xx xxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o tom, xx se xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx použití tohoto xxxxx xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): oblasti xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx během xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Mikrojádro (mikronukleus): xxxx xxxxx oddělená xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) vytvářená během xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: zralý xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x jenž xx dá xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx erytrocytů xxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx pro ribozómy.

Xxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxxxx xxxxxxxxx, vývojové xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx ribozómy, xxxxx xxx lze xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pomocí barviva xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx dřeň, zvířata xx ve xxxxxxx xxxx xx působení xxxxx usmrtí, kostní xxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, jež xx xxxxxx (1-7). Xxxxx xx xxxxxxx periferní xxxx, xxxxxxx se xx vhodné době xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx se xxxxxx (4) (8) (9) (10). V xxxxxxxxxxxxx, ve kterých xx xxxxxxx periferní xxxx, xxxx xxx xxxx od xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx xx nejkratší. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx se používá xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx myši nebo xxxxxxx; může však xxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx druh. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx druh xx xxxxxxxxxxx, xx se x něj xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nebo xx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx podmínky xxxxx jsou xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx úvodu x části B.

Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Zdraví xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně rozdělí xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xx jednoznačně xxxxxx x po xxxx xxxxxxxxx pěti xxx xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx a xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx testované látky xx xxxxx podávat xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, ledaže xxxxx o xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

1.4.2 Podmínky xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum

Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx a nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx nepříliš známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx je xx xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Kontroly

Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zařadit souběžné xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Je xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

X xxxxxxxxxxx kontrol xx xxxx xxx nalezena xxxxxxxxxx xx vivo xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx tak, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, ale přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx odlišným způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx odebírat x xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Xxx je xx možné, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu:

Xxxxx	CAS	EINECS
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
X-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	759-73-9	212-072-2
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu	6055-19-2
triethylenmelamin	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx skupiny xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci buněk x xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxxxxx variabilitě xxxx xxxxxxx. Aplikuje-li xx x negativních xxxxxxx pouze xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx xxxxxxxx odběru vzorků. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx prokazující, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx krev, xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola xxxxxxxxxx x xxxxxx odebraný xxxx působením xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxx krátkodobých xxxxxx x periferní krvi (xxxx. 1 - 3 xxxxx), kde xxxxxxxx údaje xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Pokud x xxxx, kdy se xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx závislá na xxxxxxx, jak xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx se test xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx schéma

Xxxx xx doporučit xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxx, xxx xxxx xxxx dávek x 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx schémata, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x případě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx toxicita, xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx do xxxx odběru xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, může xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, například xx dvě xxxxx xx den podané x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx způsoby:

(x) Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Vzorky xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx než xx 24 xxxxxxxx x celkově xx xxxxxxx xxx xx 48 hodinách od xxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Pokud xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx 24 hodinách, musí xxx odůvodněné. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx minimálně xxxxxxx, xxxxxx ne xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx prvním xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx nikoli déle xxx 72 hodiny. Xxxxx se v xxxxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx pozitivní xxxxxxx, xxxx xxx další xxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xxxxx xx látka xxxxxx dvakrát xxxx xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xxx xxxx xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx intervalech), xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx mezi 18 x 24 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxx periferní xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx (12).

Xx-xx xx relevantní, xxxxx xx mimoto xxxxxx x další xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.5.3 Dávkování

Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxx, xx třeba xx provádět x xxxx laboratoři xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx použijí x hlavní xxxxxx (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx pokrývaly rozmezí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx dávku. Xx xx definována xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky toxicity, xx při xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, jež x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx od případu. Xxxxxxxx xxxxx může xxx také definována xxxx xxxxx, xxxxx xxxx k určitým xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx podílu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů x xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxx).

1.5.4 Limitní xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx ve dvou xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x podobnou chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx genotoxicita, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx xxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx za xxx xxx xxxx trvání xx 14 dnů, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx při xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 dnů. Podle xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx xxxx být zapotřebí xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx buď xxxxxxxxx sondou, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx i xxxx způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx injekcí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx třeba upravit xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx tak xxxxxxxx variabilita.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx / xxxx

Buňky xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx x femuru xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zvířete. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx dřeň xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x obarví xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxx obarví (8) (9) (10), xxxx xx zhotoví xxxxxx, které xx xxxxxxx obarví. Použitím xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (např. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) nebo Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx některé x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx DNA xxxxxxxxxx. Tato výhoda xxxxxxxxx, xx xx xx nedala použít xxxxx xxxxxxx (např. Xxxxxx). Lze xxxxxx x xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx celulózy x xxxxxxxxxx buněk x xxxxxx (16) - xxxxx tyto xxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.5.7 Xxxxxxx

X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x celkového xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). K tomuto xxxxx xx počítá x xxxxxxx kostní xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx x v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X každého jedince xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 2000 nezralých erytrocytů x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx získat xxx, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Při analýze xxxxxxxxx xxxx být xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % hodnoty x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů xxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x minimálně 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jedince. Možnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx systémy xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx xxxxxxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx zvíře. U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx zaznamená xxxxx xxxxxxxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů. Xxxxx byl xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx čtyř týdnů xxxx xxxx, xx xxxxx xxxxx také xxxxx o zralých xxxxxxxxxxxx (pokud xxxx xxxxxxxxxx). Podíl nezralých xxxxxxxxxx x celkového xxxxx erytrocytů a xxxxxxxx xxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx x xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx za xxx pohlaví xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX A INTERPRETACE XXXXXXXX

Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx x mikrojádry xx skupině s xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (18) (19). Statistická xxxxxxxxxx xx však xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Testovaná látka, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, xx x xxxxx systému xxxxxxxx za nemutagenní.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých případech xxxx nelze ze xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Pozitivní xxxxxxxx mikronukleus testu xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx důsledek xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířecího xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx dřeni příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Je xxxxx uvažovat, xxxx xx pravděpodobnost, xx xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xx zprávě x xxxxxxx pokusu xx třeba xxxxx xxxx informace:

Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx volby vehikula

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx známa.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx x xxxxxxx jedinců,

- xxxxx, chovné podmínky, xxxxxx xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx počátku testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,

- údaje ze xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedena,

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxxxx cesty xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx x ověření, xx xx látka xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,

- případný xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx),

- podrobnosti x xxxxxxx potravy x xxxx,

- xxxxxxxx xxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx x odběru xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,

- xxxxxx měření xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx s mikrojádry,

- xxxxx analyzovaných xxxxx x každého xxxxxxx,

- kritéria, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x celkovému xxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx každého xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx počet ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx každou xxxxxxx,

- vztah dávka - účinek, xx-xx xx možné,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy x metody,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX REVERZNÍCH XXXXXX X BAKTERIÍ

1. METODA

Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Mutatiton Xxxx (1997).

1.1 ÚVOD

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx typhimurium (xxxxxxxxxx xx vztahu k xxxxxxxxxxxxx histidin) x xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxxxx uvedených systémů xxx xxxxxxxxx genové xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bakteriálních xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxx mutace, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx detekována xx základě xxx xxxxxxxxxx xxxx za xxxxxxxxxxxxx aminokyseliny, kterou xxxxxxxx xxxxxxxx zkušební xxxx.

Genové xxxxxx xxxx u xxxxxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx x existují xxxxxxxxxxx doklady xxxx, xx xxxxxx mutace x onkogenech x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx zvířat xxxx xxx vzniku xxxxxx. Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxx mutace xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxx citlivější xxx detekci xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x místech xxxxxxx, zvýšené xxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxxx x eliminace xxxxxxx reparace XXX xx xxxxxxxx takových xxxxxxx reparace XXX, xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx umožňuje xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o typech xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx genotoxickými xxxxxxx. Xxx bakteriální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx výsledků xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a byly xxxxxxxxxxx osvědčené xxxxxx xxx testování chemikálií x různých fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx, xxxxxx chemikálií xxxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxx xxxxxxxxxx mutací s xxxxxxxx kmenů Salmonella xxxxxxxxxxx xxxx Escherichia xxxx slouží ke xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx závislém xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (histidinu xxxx. xxxxxxxxxx), xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxx je xx xxxxxxx aminokyseliny xxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páru xxxx xxxx látky xxxxxxxxxxx změnu xxxx x DNA. Xxx xxxxxxxxx testu xxxx x xxxxxx změně xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Frameshift xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx) jsou xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx bází v XXX, xxxx se xxxx xxxxx xxxxx x XXX.

1.3 VÝCHOZÍ XXXXX

X xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, které xx xx xxxxxxx xxxxx liší v xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx struktuře x xxxxxxxxx opravy XXX. Xxxxx xx vitro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xx vitro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx in xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx jako xxxxxxx screenin xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx genové xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx prokázalo, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx jsou x xxxxx xxxxx pozitivní, xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx se xxxxx testem xxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxx nedostatku xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx veličin, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx dostupnosti. Xx druhé xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx reverzní xxxxxx zvyšují, xxxxx xxxx x tomu, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx test xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxx třídy xxxxxxxxxx xxxxx, jakými jsou xxxxxxxxx xxxxxxx silně xxxxxxxxxxxx sloučeniny (kupříkladu xxxxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxx, x nichž xx předpokládá nebo xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx (například xxxxxxx inhibitory xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx); v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxxx třídě, x existují karcinogeny, xxxxx tímto xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx, negenotoxickým xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx, xxxxx v bakteriálních xxxxxxx neprobíhá.

1.4 XXXXXXX XXXXXX

Suspenze xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx miskové xxxxxx "xxxxx incorporation" xx xxxxxxxx smísí x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx půdou. Xxx xxxxxxxxxxxx metodě se xxxxxxx xxxx inkubuje x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx půdu. Při xxxx metodách xx xxx xx xxx xxx po inkubaci xxxxxxxxxxx xxxxxxx spočítají x xxxxxxxx xx xxxxxxx x počtem xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx kontrolních miskách x xxxxxxxxxxxxx.

Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx provedení xxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ["plate incorporation"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Jsou xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx testování xxxxx xxxx xxx (12).

Postupy popsané x xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x metody xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou; xxxxx se x xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx alifatické xxxxxxxxxxx x xxxxxxx řetězcem, xxxxxxxxx kovy, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx x diazosloučeniny, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, alylové xxxxxxxxxx a nitrosloučeniny (3). Také xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx standardních xxxxxxxx xxxx neodhalí. Na xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx na "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx detekci je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx identifikovány xxxxxxxxxxx "speciální xxxxxxx" (xxxxx x příklady xxxxxxx, které xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx): azobarviva x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) a xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx zdůvodnit.

1.5. POPIS XXXXXX

1.5.1 Xxxxxxxx

1.5.1.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx bakteriální xxxxxxx xx vypěstují xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stacionárního xxxxxx xxxxx (zhruba 10⁹ xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stadiu xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vysoký titr xxxxxxxxxxxxxxx bakterií. Titr xx dá xxxxxxxx xxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x jednotlivých xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xx xxxxxxx.

Doporučená xxxxxxxxx teplota činí 37^xX.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. typhimurium (TA 1535; XX 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; XX98; x XX100); x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnost výsledků xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx XX x je xxxxx, xx nemusejí detekovat xxxxxx xxxxxxxx mutageny, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx látky xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx X. coli XX2 xxxx X. xxxxxxxxxxx TA102 (19), xxxxx mají xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx bází XX. Xxxxx xx doporučená xxxxxxxxx kmenů xxxx:

- X. xxxxxxxxxxx XX1535 x

- X. xxxxxxxxxxx TA1537 xxxx XX97 xxxx XX97x x

- X. xxxxxxxxxxx XX98 x

- X. xxxxxxxxxxx XX100 x

- X. xxxx XX2 uvrA nebo X. xxxx XX2 xxxX (xXX101) xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102.

X detekci mutagenů xxxxxxxxxxxxx křížové vazby xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx TA102 xxxx xxxxxx XXX reparačně xxxxxxxxxxxx xxxx E. xxxx (xxxx. E. xxxx XX2 xxxx X. xxxx XX2 (xXX101)).

Xx xxxxx xxxxxx zavedených xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx markeru x xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx, tryptofan x xxxxxxx xxxxx X. xxxx). Podobně xx xxxxx xxxxxxxxxxxx i xxxxx fenotypické xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx R-faktor xxxxxxxx xxx, xxx xx přichází v xxxxx (např. rezistence xxxx xxxxxxxxxx u xxxxx TA98, XX100 x TA97a xxxx XX97, XX2 xxxX (xXX101) x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx x kmene XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (tj. xxx xxxxxx u X. typhimurium xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxX xxxxxx u E. xxxx xxxx xxxX xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx citlivosti xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx xxxx mít xxxxx spontánně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx frekvenčním xxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx kontrolních xxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxx možno i x xxxxxxx xxxxxxxx x literatuře.

1.5.1.2 Xxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X x xxxxxxxx) x vrchní xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x biotin xxxx xxxxxxxxx umožňující několik xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).

1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx

Bakterie xx xxxxxxxx testované látky xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx, tak xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Nejčastěji xx používá xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx je Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 30 % x/x xx xxxxx X9. Xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxxx záviset xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X některých případech xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakci x několika xxxxxxxxxxxxx. X azobarviv x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metabolické xxxxxxxx (6) (13).

1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx

Xxxxx látky se xxxx působením xx xxxxxxxx rozpustí xxxx xx připraví jejich xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx mohou xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx jejich delší xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

1.5.2 Podmínky xxxxx

1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (viz 1.5.1.1.)

1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx

Ke xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxxx x rozpustnost x xxxxxxx xxxxx, xxxxx se x xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xxx účelné stanovit xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx růstu xx xxxxxx xxxx xxxxxx stupně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx změnit. Nerozpustnost xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx skutečných xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látek 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µl/misku. U xxxxxxxxxxxxxxx látek, xxx x těchto xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx nerozpustných. Xxxxxxxxx xxxxx, jež jsou xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 mg/misku resp. 5 µx/xxxxx, xx xxxxxxx až xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx intervalem (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxx xxxxxxxx menší. Testování xx xxxxxxxxxxx vyšších xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx podstatné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nečistot.

1.5.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx takové xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx efektivnost xxxxxx xxxxx.

X xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem se xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx volí xxxxx použitého xxxx xxxxxxxxxxxxx kmene.

Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:

Xxxxx	XXX	EINECS
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx	781-43-1	212-308-4
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx	57-97-6	200-359-5
xxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5
2-xxxxxxxxxxxxx	613-13-8	210-330-9
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2

Následující xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxxxxx:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
Kongo xxxxxx	573-58-0	209-358-4

2-xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx X9. Pokud xx 2-xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxx X9 charakterizovat xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní kontrolu x xxxxxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
Xxxx xxxxx	26628-22-8	247-852-1	XX 1535 a XX 100
2-nitrofluoren	607-57-8	210-138-5	TA 98
9-aminoakridin	90-45-9	201-995-6	TA 1537, XX 97 a XX 97a
XXX 191	17070-45-0	241-129-4	XX 1537, XX 97 x XX 97x
xxxxx-xxxxxxxxxxxx	80-15-9	201-254-7	TA 102
xxxxxxxxx C	50-07-7	200-008-6	XX uvrA x XX 102
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx	70-25-7	200-730-1	XX2, WP2uvrA x XX2xxxX (pKM101)
4-nitrochinolin-1-oxid	56-57-5	200-281-1	XX2, XX2xxxX x WP2uvrA (xXX101)
Furylfuramid (XX2)	3688-53-7		kmeny xxxxxxxxxx xxxxxxxx

K xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx i jiné xxxxxx referenční xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx.

Xx xxxxx použít x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xx xxxx vehikula xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx zachází xxxxxx xxxx při xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní údaje xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx či mutagenní xxxxxx.

1.5.3 XXXXXX

Xxx xxxxxxxx miskové metodě (1) (2) (3) (4) bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,05 xxxx 0,1 ml testovaného xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx zhruba 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 ml sterilního xxxxx a 2,0 xx xxxxxxxx agaru. X xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx metabolické xxxxxxxxx xxxxx obsahující přiměřené xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x rozmezí 5 - 30 % x/x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx směsi) x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx /xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx každé xxxxxxxx xx promísí a xxxxxx xx povrch xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xx nechá xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Při xxxxxxxxxxxx metodě (2) (3) (5) (6) xx testovaná xxxxx / xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) a xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 min xxxx déle xxx 30 - 37 ^xX; xxxxx xx xxxxx x vrchním xxxxxx a xxxxxx xx misku x xxxxxxxxxx xxxxxx. Obvykle xx mísí 0,05 xxxx 0,1 ml xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx roztoku 0,1 xx xxxxxxxx x 0,5 xx xxxxx X9 nebo xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx vrchního xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx provzdušňují třepáním.

Xxx xxxxxxxxx odhad xxxxxxx se xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxx. Duplicitní xxxxxxxx je xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx náhodně xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x zatavených nádobách (12) (14) (15) (16).

1.5.4 XXXXXXXX

Všechny xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^xX pod xxxx 48 - 72 hodin, xxxxx xx spočítají xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx.

2. XXXXX

2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx misku. Xxxxxx xx uvede xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií jak x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, popřípadě kontrola xxx působení, byla-li xxxxxxx), tak x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxx pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx (resp. xxx působení rozpouštědlo) xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Verifikace xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků nepovažuje xx nutné, xx xxxxx to xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx experimentech xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx studijních parametrů xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx posuzovaných xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx mezi koncentracemi, xxxxxx xxxxxxxx ("plate xxxxxxxxxxxxx" xxxx xxxxxxxxxxx x tekutém prostředí) x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx dávkově xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxx (23). Xxxx první xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (24), xxxxxxxxxxx významnost xx však xxxxxx xxx jediným určujícím xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx látka, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují, xx v xxxxx xxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.

Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x když xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.

Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx reverzní xxxxxx ukazují, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx pokusu

Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla,

- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx rozpouštědle, xxxxx xx xxxxx.

Kmeny:

- použité xxxxx,

- xxxxx buněk x kultuře,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxx (v xx xxxx μx) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a počtu xxxxx xxx jednu xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx,

-xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx),

- postupy xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).

Výsledky:

- známky xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxx,

- počty xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- vztah xxxxx-xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- údaje xx xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, průměrů x směrodatných xxxxxxxx,

- údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.15. GENOVÉ XXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mohou xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x x metabolickou xxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx systémy x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx míra vzniku xxxxxx x červených, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx-1, ade-2) xx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx mutanty a xxxxxxxxxx systémy, xxxx xx indukce xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx.

Nejlépe xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx systém xxxxxxxx využití haploidního xxxxx XX 185-14 X x okrovými (xxxxx) xxxxxxxx mutacemi xxx 2-1, arg 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx místě, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutace. XX185-14X xxxx rovněž xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx mutaci, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx a xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny.

U xxxxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx xx jediným xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X₇, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx ilv 1-92.

1.2 Popis metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Roztoky testovaných xxxxx a xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X organických xxxxx xx vodě xxxxxxxxxxxxx se nemá xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 objemová % v organických xxxxxxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx životnost x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx aktivace

Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkám xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx užívaným systémem xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx z jater xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakcí xx xxxxxxx xxxx xxx rovněž xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14X x xxxxxxxxx xxxx X7 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx genových xxxxxx. Xxxx kmeny mohou xxx rovněž vhodné.

1.2.2.2 Xxxxx

Odpovídající xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx určení počtu xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx specifickou mutační xxxxx mají být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Má xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Látky xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx po xxx rozpustnosti xxxxx xx xxxxxxx vhodných xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx vodě xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.2.5 Kultivační xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx po sedm xxx při 28 xx 30 ^xX xx tmě.

1.2.2.6 Frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx

Frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx být x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx nejméně tří xxxxx xx jednu xxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x životnosti xxxxx. X experimentů xxxxxxxxxxx markery xxxx xxx 3-10 s xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx počet xxxxx zvýšen, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx rostoucích xxxxxxx: 1-5 x 10⁷ buněk/ml je xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx až 18 h. při 28 xx 30 ^xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, promyty x vyočkovány na xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxx xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx dalším xxxxxxx xxxxxxxxxx experimentem.

2. XXXXX

Xxxxx mají být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, počet xxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx výsledky xxxx xxx xxxxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx. Xxxxx mají xxx vyhodnoceny vhodnými xxxxxxxxxxxxx metodami.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx kmenech,

- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xx stacionární xxxx nebo rostoucí, xxxxxxx médií, xxxxxxx x trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, pozitivní a xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx xx možné,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx výsledků.

X.16. MITOTICKÁ XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx detekována xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx xx nazýván xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx nereciproční x xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Překřížení je xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx tvorby recesivních xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx vzniklých u xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xx testována xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzniklých x auxotrofního xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxx xxx xxxxx defektní xxxxx téhož xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx kmeny xxx detekci xxxxxxxxx xxxxxx konverse jsou X₄ (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 2 x xxx 5), X₇ (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 5), XX₃₄ (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4) x JD1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x trp 5). Xxxxxxxxx překřížení xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxxxxxx x X₅ xxxx D₇ (xxxxx xxxxxx xxxx mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx mutace v xxx 1-92). Xxx xxxxx xxxx heteroalelické xxx komplementární xxxxx xxx 2.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx těsně xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx roztok xxxxx než 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, jako xx xxxxxx, xxxxxx xxxx dimetylsulfoxid (DMSO). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula xxxx významně xxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristiky xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testovaných xxxxx jak x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx aplikaci xxxxx indikujících xxxxxx x doplněná xxxxxxxxx. Xxxxx jiných druhů, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx postupů xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Testovací xxxxx

Xxxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx kmeny D₄, X₅, D₇ x XX1. Užití xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Média

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

Pozitivní, xxxxxxxxxxx x rozpouštědlem xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Xx být xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx brán xxxxx xx cytotoxicitu x rozpustnost. Nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X toxických xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx ve vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx testovány až xx mez xxxxxxxxxxxx xxxxx za použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, je xxxxxx xxxxxx xx případu.

Xxxxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx buď xxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxxx po xxxx xx 18 x. Xxxxxxx dlouhodobě xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx znehodnocuje.

1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx

Misky xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xx čtyři xx xxxx xxx při 28 - 30 ^xX. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx červených x růžových sektorů xxxxxxxxx xxxxxxxxxx překřížením xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx 4 ^xX) xx xxxxx 1 - 2 xxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx s frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx akceptovaných normálních xxxxxx.

1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx prototrofních xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxx určení životnosti xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx recesivní xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx překřížením xx být xxxxx xxxxx zvýšen, aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

1.2.2.8 Xxxxxx

Xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx test x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx provedeny xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 10⁷ buněk/ml xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 ^xX xx xxxxxxx. Odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému xx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx, pokud xx xx potřebné.

Xx skončení xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx kultivační xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx počítány xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx negativní, xx být xxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx pokus xxxxxxxxx, xx potvrzen xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx experimentem.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx formě x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx rekombinací, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Výsledky xxxx xxx potvrzeny x xxxxxxxxxx experimentu.

Xxxxx xxxx být vyhodnoceny xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, složení xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx aktivační xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx, teplota xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- počet xxxxxxx, xxxxx rekombinant, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvence xxxxxxxxxxx, xxxxx dávky x účinku, pokud xx to xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx,

- diskusi xxxxxxxx,

- vyhodnocení výsledků.

X.17. MUTAGENITA - XXXX GENOVÝCH XXXXXX X XXXXXXX BUŇKÁCH XX VITRO

1. XXXXXX

Xxxxxx je replikací XXXX XX 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xx dá xxxxxxxx xx zjišťování xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx linie xxxxx xxxx xxxxxxxxx buňky X5178X, xxxxx XXX, XXX-XX52 x X79 xxxxx xxxxxxxx křečka x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx XX6 (1). X xxxxxx buněčných xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zjišťují xxxxxx x thymidinkináze (TK) x hypoxanthin-guanin xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x x xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxx mutací x TK, XXXX x XPRT se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx změn. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX x XXXX může umožnit xxxxxxx x takové xxxxxxxxx změny (např. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx na xxxxxx XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).

K xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Při xxxxx xxxxx xx xxxxx x úvahu růstové xxxxxxxxxx xxxx kultury x stabilita xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx in xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Takový xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx dokonale. Xx xxxxx vzniku xxxxxxxx podmínek, xx xxxxxxx by výsledky xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx v důsledku xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).

Xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx screeningu xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, jsou savčími xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx korelace xxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx více xxxxxxx toho, xx xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xx xxxxx testem xxxxxxxx, xxxxxxx zřejmě xxxxxx nějakým jiným, xxxxxxxxxxxxxx mechanismem xx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nepůsobí (6).

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx formy, xxx xxxx xx změně xxxx ztrátě enzymatické xxxxxxxx kódovaného xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páru xxxx: látky xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx x XXX.

Xxxxxxxxxx mutageny (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxx jednoho xxxx xxxx párů xxxx x DNA.

Doba fenotypické xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx nezměněné genové xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx: počet xxxxxxxxxxxx mutovaných buněk xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx počtu buněk x xxxx v xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxx buněk; xxxxxxxxxx xx xxxx součin xxxxxxxxx suspenzního růstu (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxx klonovací xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (v xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx).

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx růst: xxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x selekčních xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Buňky, xxxxxxxxxxx xx thymidinkinázu (XX) x xxxxxxxx mutace XX^+/- → TK^-/-, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx působení pyrimidinového xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx vůči XXX xxxxxxx, což xxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxxxxxxx x zastavuje xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx XXX proto xxxxx proliferovat xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nemohou. Xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx HPRT nebo XXXX selekčně rezistentní xxxx 6-xxxxxxxxxxx (XX) xxxx 8-xxxxxxxxxx (AG). Xxxxx je xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mutace x xxxxxxx buňkách, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx selekční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxx x bez xxxx. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příbuzné xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xx je xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).

Buňky x xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx vhodnou xxxx xxxxxxx působení testované xxxxx x metabolickou xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxxxx xx ke stanovení xxxxxxxxxxxx x k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx mutantů (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (cloning xxxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx se ponechají x xxxxxxxx xxxxx xx dostatečnou dobu, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx a typ xxxxx, xxx xxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Po xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx spočítají. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx z xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx buněk x selekčním xxxxx x x počtu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx

Xx xx xxxxxx xxxx řada xxxxxxxxx xxxx, včetně xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x XX6. X xxxxxxxxx typů používaných x tomto xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx kontroluje, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; infikované xxxxx xx xxxxxx nesmějí.

Test xx xxxxx naplánovat xxx, aby měl xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxx). Počet xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx těmto xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (14). Minimální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx expozici a xxxxxxx se x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xx xxx frekvencí xxxxxxxxxxx mutací. Obecným xxxxxxxx xx, xx xxxxx xxxxx má xxx xxxxxxxxx desetinásobkem xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxxxxxx 10⁶ xxxxx. Xxxx by být x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje, xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvládnutí testu.

1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx podmínky

Je xxxxx xxxxxx vhodná xxxxxxxxxx média x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx a xxxxxxx). Xxxxx se xxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx. Zvláště xxxxxxxx je, aby xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x schopnost xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.4.1.3 Příprava xxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxx xx zásobních kultur, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x inkubují xxx teplotě 37 ^xX. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx buněk.

1.4.1.4 Metabolická xxxxxxxx

Xx buňky se xxxxxxxxxx látkou působí x xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx je Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x médiu xxxx xxxxxxx 1 - 10% x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx chemikálie. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx použity x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xx před xxxxxxxxx xx xxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenze xx xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxx naředí. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx přímo xxxx xx předtím xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, xx xxxxx skladování xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

X zvoleného rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx mohlo x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx rozpouštědlo xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxxxx xxx, xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx zvažováno xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx organické rozpouštědlo xxxxx bezvodé. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxx kritéria, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x systému x xxxxx pH xxxx. osmolality.

Cytotoxicita se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx integrity x xxxxx buněk, xxxx xx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) nebo xxxxxxxxx celkový xxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x předběžných experimentech.

Použijí xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Dochází-li x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx toxicity. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxx více xxx xxxxxxxx, který xxxx xxxx hodnotami 2 a √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x cytotoxicity, xxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx celkovému xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dávka xxxx xxx xxxxxxxx z xxxxxx 5 xx/xx, 5 μx/xx a 1,01 X.

X relativně xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx netoxické v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx koncentrace, xxx xxxxx xx již xxxxx xxxxxxxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšší, xxx xx mez rozpustnosti xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, S9, séra xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx nesmí být xx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxx.

1.4.2.3 Kontroly

V rámci xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, x xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxx xx xxxxxxxx metabolická xxxxxxxx, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx mutagenního účinku. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxx	Xxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxxxxx
Xx	XXXX	xxxxx methansulfonát ethyl nitrosomočovina	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
	TK (xxxx x velké xxxxxxx)	xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	66-27-3	200-625-0
	XXXX	xxxxx metansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
Xxx	XXXX	3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx	56-49-5 62-75-9 57-97-6	200-276-4 200-549-8 200-359-5
	XX (malé x xxxxx xxxxxxx)	xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cyklofosfamidu benzo[a]pyren 3-methylcholantren	50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5	200-015-4

				200-028-5 200-276-5
	XPRT	N-nitrosodimethylamin (pro xxxxxx xxxxxxxxxxx X-9)	62-75-9	200-549-8
		xxxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5

Xxx xxxxxxxxx kontrolu se xxxxx xxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx historickou xxxxx x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (XXX 59-14-3, xxxxx XXXXXX 200-415-9), xxx xxxxxx x xxxx referenční xxxxx. Xxx, xxx xx xx možné, xx xxxxxx použít xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxx každý xxxxxx xxxxxxxx sklízení xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x negativní xxxxxxxx, ve které xx používá xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiu, xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxxxxxxxx kultury. Mimoto xx xxxxxx třeba xxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky nepříznivé xx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.4.3 Xxxxxx

1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx testovanou xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxxxxx xxxxxxx xx vhodnou xxxx (obvykle xx xxxxxx doba 3-6 xxxxx). Xxxx expozice xxxx přesáhnout xxxxx xxxx xxxx buněčných xxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxx jedna kultura, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x analýze (xx. xxxxxxxxx osm xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou (rozpouštědlem/vehikulem) xx používají xxxxxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx postupy, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).

1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, viability x xxxxxxx frekvence

Po xxxxxxxx expozice se xxxxx promyjí x xxxxxxxxx xx stanovení xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx efficiency xxxx relativního xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xxxxx má xxxxxxx minimální xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XPRT xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 dny). Xxxxx xx pěstují x xxxxx x x xxx selekčního xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxx exprese xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxx četnosti xxxxxxx) inokulací xxxxx xx selekční médium.

Pokud xx xxxxx x xxxxx L5178Y XX⁺/^- xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx kultur (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách xxxxxxxx xxxxxxxx kolonií. Xxxxx je xxxxx x tomto testu xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxx provést x xx xxxxxxxx s XX6XX⁺/^-.

2. XXXXX

2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxx xxxx slouží xxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x mutační xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kultur. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx X5178XX⁺/^- xx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrole. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx testu XX⁺/^- xx kolonie hodnotí xxxxx kritéria kolonií xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) x xxxxxxxx růstu (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx nejrozsáhlejší xxxxxxxxx poškození, xxxx xxxxx dobu zdvojení, x xxxxx tvoří xxxx xxxxxxx. Rozmezí xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx po xxxxxxxxxxxx viditelné chromozómové xxxxxxx. Tvorba xxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx x expozicí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mutanty xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xxxx přežití (relativní xxxxxxxxx účinnost - xxxxxxxx cloning xxxxxxxxxx) xxxx relativní xxxxxxx xxxx. Mutační frekvence xx xxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxx buněk xxxxxx xxxxxx přežívajících xxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx formě.

Verifikace xxxxxx pozitivní reakce xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xx musí xxxxxxxx xxxxxx xx případu. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxx nejednoznačných nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x následných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx studie tak, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx podmínek. K xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, patří rozdíly xxxx jednotlivými koncentracemi x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody. Xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.

Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují výše xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech xxxx nelze ze xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o aktivitě xxxxxxxxx látky definitivní xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.

Pozitivní výsledky xxxxx xx genové xxxxxx v savčích xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xx reprodukovatelný pozitivní xxxxx xxxxx - xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních podmínek xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx mutace.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Ve zprávě x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx uvést xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxx:

- typ x xxxxx xxxxx,

- xxxxx buněčných xxxxxx,

- xxxxxxxx počet xxxxxx,

- xxxxxxxx metody xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx pokusu:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx v rozpustnosti, xxxx-xx k xxxxxxxxx,

- xxxxxxx média, xxxxxxxxxxx XX₂,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- objem xxxxxxxx x přidané xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

-xxxx xxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx,

- xxx x složení xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx,

- xxxxx expresní xxxxxxx (případně xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx)

- selekční xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxx zjišťování xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx buněk,

- definice xxxxxxx, x nichž xx hodnotí velikost x xxx (xxxxxx xxxxxxxxxx kritérií pro xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "xxxxxxx" koloniemi).

Výsledky:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx o xX a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, minimálně xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx malé xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxx X5178X XX⁺/^-,

- xxxxx dávka - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a pozitivních xxxxxxx,

- historické údaje x xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX SYNTÉZA XXX - SAVČÍ XXXXX XX XXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Test neplánované xxxxxxx DNA (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA po xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx indukovaného xxxxxxxxxx xxxx fyzikálními xxxxxxx. Test je xxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx tymidínu (³X-XxX) xx DNA xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x X xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx ³X-XxX je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (LSC) x xxxxxxxxxxxx buňkách. Xxxxxxxxx se primární xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxx v přítomnosti, xxx i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxx xxx také xxxxxxxxx v xxxxxxx xx xxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx referenční se xxxxxxxx xxxx suspendují x kultivačním xxxxx xxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx fibroblasty).

Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce v xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx kultur

Pro xxxxx experimentální xxx xx xxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxxxx kultur xxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx kultur (nebo xxxx, xx-xx xx xxxxxxx zdůvodnitelné) pro XXX XXX.

1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx kontroly

X xxxxxx experimentu xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx pozitivní xxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx hepatocyty xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) nebo 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxx xxx autoradiografii, xxx x pro XXX xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx lze xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávat toxický xxxxx.

Xxxxx xx xxxx špatně xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xx hranici xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vhodných xxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxx ve vodě xxxxx rozpustné xx xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx určuje xxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxx

Xxx udržování xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx růstové xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO₂, teplota x vlhkost. Stabilizované xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx aktivace

Pro xxxxxxxxxxxx hepatocytů se xxxxxxxxxxx aktivační systém xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxx exponovány testované xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx

1.2.3.1 Příprava xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx připravuje xx xxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx nádoby), xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 ^xX.

Xxxxxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx izolovaným xxxxxxxxxxx přichytit se xx vhodném médiu x povrchu kultivační xxxxxx.

Kultury xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur xxxxxxxxx xxxxx

Primární xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované látce x médiu xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx xxxxxxx xxxx. Xx ukončené xxxxxxxx xx médium xxxxxxxxxx, xxxxx promyty, xxxxxxxx a sušeny. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx stripping xxxx), xxxxxxxxxx, vyvolána, obarvena x xxxxxxxxxxx.

Stabilizované xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu x xxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx ³X-XxX. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxx buněk. X xxxxxxxxx nejvyššího xxxxxxx UDS je xxxxx ³H-TdR xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx těmito xxxxxxx xx ovlivněn xxxxxx interakcí mezi xxxxxxxxxx xxxxxx x ³X-XxX. X xxxxxxxx xxxx XXX a xxxxxxxxxxxxxxxxx replikací XXX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX.

Xxxxxxxxx XXX xxxxxx XXX: Xxxx expozicí xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vstup xxxxx xx X-xxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx bylo xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx XXX extrahována x xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx obsah DNA x určen xxxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX.

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x nestimulovaných xxxxxxxxx xxxxxxx semikonzervativní replikace XXX zbytečná.

1.2.4 Xxxxxxx

1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx autoradiografie

Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx kultuře se xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx 50 buněk x xxxxxx experimentálním xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx se hodnotí xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Množství xxxxxxxxxxxxxxx ³X-XxX v cytoplazmě xx určí v xxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx XXX

Xxx stanovení XXX XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx počet xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxx.

Výsledky xxxx být xxxxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.

2.1 Vyhodnocení xxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx inkorporace ³X-XxX xx xxxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx buněčné xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxx ³H-TdR xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx v xxxxx xx hodnocen xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxx.

2.2 Xxxxxxxxxxx XXX

Inkorporace ³X-XxX xx zaznamenává xxxx xxx/μx XXX. Průměrná xxxxxxx dpm/μg DNA xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx používají x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Údaje xx xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx x době xxxxxxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultury, médiu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂,

- testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx výběru x experimentu,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,

- pokusném schématu,

- pozitivních a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx autoradiografických metodách,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxx XXX a x xxxxxxxxxxx celkového xxxxxx XXX xxx xxxxxx XXX,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.19. XXX - VÝMĚNA XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XX VITRO

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

XXX xx xxxxxxxxxx test xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx DNA xxxx xxxxx sesterskými chromatidami xxxxxxxxxx. XXX reprezentují xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x identických (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxxx vyžaduje zlom x xxxxxxxx spojení, xxx xx zatím xxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx základě xxxxxx xxxxxxx. Detekce SCE xxxxxxxx diferenční xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatid. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XxxX) xx xxxxxxxxxxxxx DNA xx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Savčí buňky xx vitro xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx přítomnosti exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xx-xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx BrdU. Xx xxxxx kultivace xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx) x akumulaci xxxxx x x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx ukončení xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro analýzu xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Používají xx xxxxxxxxxxxx (lidské xxxxxxxxx) xxxx stabilizované xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx křečka). Xxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x hlediska xxxxxxxxxxx Mycoplasmaty.

Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx, kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO₂ x vlhkost).

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx xxxxx významně xxxxxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxxxxx xxxxx xxxx frekvenci XXX.

Buňky xx xxxxxxxx testované látce x přítomnosti x xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx (xxxxxxx) metabolickou xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxx skupinu chemických xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx

Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx použijí nejméně xxx kultury.

1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx kontroly

X xxxxxx experimentu xxxx být zařazeny xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx lze použít:

- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx

- xxxxxxx xxxxxxxx mutageny: xxxxxxxxxxxxx

Xx-xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx pozitivní kontrolu xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx mít xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx musí xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk. Xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx testovat až xx hranici jejich xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx rozpustné netoxické xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Stabilizovaná xxxxxxx linie se xxxxxxxxxx ze zásobní xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx buněk z xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx při 37 ^oC. Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx takový xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xx xxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx také xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xx připraví x xxxxxxxxxxxxxx krve xxxxxxx xxxxxxx x inkubují xxx 37 ^xX.

1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur

Xxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx x exponenciální xxxx růstu xx xxxxxxx dobu. Xx xxxxxxx případů xxxxx xxxxx xx dvě xxxxxx, ale xxxxxxxx xxxx xxx prodloužena xx xx xxx xxxxxxx xxxxx, xx-xx xx třeba. Buňky, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx metabolickou aktivitu, xxxx být exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na konci xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx vymyty x xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x BrdU xxx xxxxxxxxxx cykly. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx a XxxX po dobu xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xxxx exponovány testovanou xxxxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxx jsou xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx po expozici xxxxxxxxx látce, která xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx buněčného xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx s XxxX xx třeba xxxxxxxx x temnu xxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx žárovky, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxx xx inkorporovaný XxxX.

1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Jednu xx čtyři xxxxxx xxxx ukončením xxxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx inhibitor xxxxxxxx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.3.4 Příprava xxxxxxxxx a xxxxxxx

Xxxxxxxxx xx připraví xxxxxxxxxx cytogenetickou technikou. Xxxxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxxxxx SCE xxxx xxx provedeno xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. fluorescenční xxxx Xxxxxx).

1.2.3.5 Xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx frekvenci XXX x xxxxxxxx. Xxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx 25 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na každou xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx zakódovány xxxx xxxxxxxx. V lidských xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x 46 xxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx o ± 2 centromery xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxxxxx. Výsledky xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x každé xxxxxxxx x xxxxx XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x udržování xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx média, xxxxxxx, koncentraci CO₂, xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx i xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách,

- xxxxx xxxxxx xxx každý xxxxxxxxxxxxxx xxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx kulturu),

- xxxxxxxxx xxxxx SCE/buňku x SCE/chromozóm (odděleně xxx každou xxxxxxx),

- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx možné,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX VÁZANÉ XX POHLAVÍ X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Test xx xxxxxxxxx letální mutace xxxxxx na xxxxxxx (XXXX) na Drosophila xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx, xxx i xxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxx xx xxxxxxx mutace xxxxxx xxx xxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx chromozómu X. Xxxx reprezentují ani 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přibližně 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx genomu.

Xxxxxx v X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx gen. Když xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx ze xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. XXXX test xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx definované xxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxx Xxxxxx-5. Xxxxx xxx použity x xxxx vhodné xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.

1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx ve xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxx etanolu x Tweenu-60 nebo 80), xxxx aplikací xx xxxx xxxx xxxxx nebo fyziologickým xxxxxxxx. Doporučuje se xxxxxxxxxx dimetylsulfoxid (XXXX) xxxx vehikulu.

1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx

Test xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx frekvence xxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nutný xxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxx aplikace

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx uskutečňuje per xx, xxxxxxxx nebo xxxxxxxx plynům xxxx xxxxx. Zkrmování testované xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx XxXx x xxxxxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

V xxxxxx pokusu se xxxxxxxx xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx má xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.6 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx používá xxxxx xxxxx rovnající xx xxxxxxxxx tolerované xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Popis postupu

Xxxxx xxxxxxxx xxxx (xx stáří 3-5 xxx) jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxx Muller-5 xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx linie (vícenásobná xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx až xxx dny, xxx xxx xxxxxx celý xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx spermie, xx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxx pozdním stadiu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx X₁ samice xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kříženy xxxxxxxxxxxx (xx. jedna xxxxxx/xxxxxxxx) se svými xxxxxx. X F₂ xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx samců xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx v xxxxxxx vznikají F₁ xxxxxx nesoucí xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxx samci s xxxxxxxxxx chromozómem), dcery xxxxxx xxxxx se xxxxxxx genotypem xxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xx zjistilo, xxx xxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx generacích.

2. XXXXX

Získané údaje xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx s letální xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx, pro každé xxxxxx křížení x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Zaznamenává xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx každého xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx potvrdit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Údaje xx xxxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x jednom xxxxx xx být xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kmenech Drosophily, xxxx, počtu xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxx F₂ xxxxxx, xxxxx X₂ kultur xxx potomků, počtu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx letální xxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin,

- podmínkách testu: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x schéma xxxxxx xxxxxx, xxxx dávek, xxxxx x toxicitě, xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx kontroly,

- kritériích počítání xxxxxxxxx mutací,

- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, je-li xx možné,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.21. TEST XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX - IN XXXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxx xxx použít xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx vitro xxxxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx C3H10T1/2, 3X3, XXX, Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x test se xxxxx x změny xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx nebo změny x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx agaru. Méně xx xxxxxxxxx systémy xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx výsledek xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx schopné xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxx zjištěna xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) nebo ovlivněním xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx hodnocení xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx ze xxxxxxxxxxx, xx expozice xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx ji nelze xxxxxx k určení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx experimentech, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxx

Xxxxxxxx xxxx buněčných xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx musí xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx x testu transformace xxxxxxxx příslušné xxxxxxxxxxx xxxxx xx expozici xxxxxx karcinogenem x xx test xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x že je xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.2 Médium

Xxxxxxx média x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxx xxx xxxxxxx test xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx

Testované xxxxx xx rozpouštějí xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla x kultuře xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx transformace.

1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx x přítomnosti a xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

Do xxxxxxx experimentu xxxx xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x použitím xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x vyžadujících metabolickou xxxxxxxx. Musí být xxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx (s rozpouštědlem).

Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxx působící látky: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx: 2-acetylaminofluoren, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx nejméně xxx dávky. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx efekt závislý xx xxxxxxxxxxx, nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nízkou xxxxxx přežívání buněk, x xxxxxxxx koncentraci xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx stejné jako x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx testovat xx xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Buňky xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dobu závislou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx (ev. výměnou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí být xxxxxxxxxx testované látce x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxx expozice xx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx. Xxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx formě. Xx xxxxxx vyjadřovat xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx kultury, počtu xxxxxx,

- kultivačních xxxxxxxxxx: koncentraci xxxxxxxxx xxxxx, době xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx aktivačním xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx systému (xx-xx xx xxxxxx), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- metodách vyčíslení xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,

- statistickém xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretaci xxxxxxxx.

X.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX XXXX X XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip metody

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx dominantních xxxxxxxxx mutací xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx exponovaného xxxxxxxxx xxxxx. Obecně xx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxx). Smrt xxxxxx xxxxxxxxxx samice může xxx také výsledkem xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pářeni x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Vzestup mrtvých xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx počet xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Preimplantační xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx porovnáním xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxx v exponované x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx dominantní xxxxxxxx xx xxxxxx xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrát. Xxxxxxx celkové dominantní xxxxxxxx je xxxxxxx xx srovnání xxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x živým implantacím xx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx implantací v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx způsobeno xxxxxxx xxxxx (t.j. spermatocytů x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Testovanou xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ve fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxx xxxx suspendují xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxx rozpouštědlo nesmí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Způsob xxxxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxx pouze xxxxxx. Na základě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxx test xx doporučují xxxxxx xxxxxxx xxxx myši. Xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx x pohlaví

Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxxxxxxxx variabilitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky. Xxxxx se xxxx xxxxxx zjištěnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu. V xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx volí takový xxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx 30 - 50 xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Negativní a xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x negativní (s xxxxxxxxxxxxx) kontroly musí xxx zařazeny xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxxx xx laboratoř x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivních xxxxxxx x nedávných xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx musí být xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. MMS, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 mg.kg^-1).

1.2.2.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx x exponovaných xxxxxx. X některých xxxxxxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx dávka.

1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx

Netoxické xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx dávce 5 x.xx^-1 nebo x dávce 1 x.xx^-1.xxx^-1 xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Existuje xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx.

Jeden xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Samičky musí xxx u xxxxx xxxxxxx xx dobu xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx, xxxx pokud xx neprokáží xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxx utraceny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx dělohy xx xxxxxxxx x určení xxxxx mrtvých x xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x určení xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx x xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx x xxxxx páření, x xxxxx xxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx celkového xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx živých xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx ku xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx skupině xx xxxxxxx vypovídá x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrátách.

X xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx ztráty. Xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx xxxxxx corpora xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx na dělohu xx srovnání x xxxxxxxxx.

Údaje jsou xxxxxxxxxxx vhodnými statistickými xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx možno, informace x:

- xxxxx, xxxxx, věku x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x exponovaných x kontrolních skupinách,

- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx jejich xxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx kontrolách, údajích x xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx expozice,

- xxxxxx páření,

- xxxxxxxx k průkazu xxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

- kritéria xxx počítání xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx hodnocení,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX V XXXXXXX SPERMATOGONIÍCH

1. METODA

Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD XX 483, Mammalian Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx testu je xx xxxx identifikovat xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rovněž. Xxxx xxxxxx není určena x analýze xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx a příbuzné xxxx xxxx u xxxxxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxx se analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx, a proto xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx predikovat indukci xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx buňkách.

X xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx testem xx xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx spermatogonií. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx jiné xxxxxx buňky.

Xxx xx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx třeba xxxxxxxxxx první xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x následujícím xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, xxx xx zjišťují xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx, x xxxx xx ovlivněné xxxxx xxxx xx spermatocyty.

Xxxxx xxxx xx xxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx mutageny aktivní x somatických xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx zárodečných. Mimoto xx xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity xxx, xx xxxxxxxx posuzovat xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, farmakokinetiky a xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX.

X xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx generací xxxxxxxxxxxxx se širokým xxxxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx látkám. Zjištěné xxxxxxx xxxx představují xxxxxx xxxxxx ovlivněných xxxxxxxx spermatogonií, xxx xxxxxxxxxx diferencované xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx polohy xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx spermatogonií xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x fyziologické xxxxxxx Xxxxxxxxx buněk x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx, xx xx testovaná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx cílové xxxxx nedostane, xxxx xxxx xxxxx xxx xxxx vhodná.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx chromatidového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx se projevuje xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx respektive xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx stejném xxxxx (xxxxxxxx jako xxxxxxx xxxx dicentrický chromozóm, xxxxxxxxxx chromozóm-ring)

Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx hodnotit xxxxxxxx xxxxxxxxxx jedné nebo xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že vzniklá xxxxxx ve xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x xxxxx zlomu xx dislokovaný (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx jedna xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxx.

Gap: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx než xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Numerická xxxxxxx: změna počtu xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx (3x, 4x xxx.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, x xxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Zvířata xx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xx xxxxxxx xxxx xx působení xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metafázi (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx pak xxxxxxxx xxxxxxxxx a xx xxxxxxxx se v xxxxxxxxxx analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Běžně xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxx ovšem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx druhu. Xxxxxxxxx se běžné xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx rozdíly xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x x každého xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Všeobecné xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Všeobecném úvodu x xxxxx B.

Xxxxxxx by měla xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Klece xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx a xxx xxxx klece xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném stavu x je-li xx xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx přímo xxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx. xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (stabilitě) xxxxxxxxx, xx skladování xx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x používaných dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí x testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kompatibilitě x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx to xxxxx, xxxx na xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx každého xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx pohlaví zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxx skupinách xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, aby xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní kontrolu xx možné xxxxxxx xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx odebírat x xxxxxx xxxxxxx intervalu. Xxx xx to xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx vhodných xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx	XXX	XXXXXX
cyklofosfamid	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxx	108-91-8	203-629-0
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxx xxxxxxx	79-06-1	201-173-7
triethylenmelamin	51-18-3	200-083-5

Negativní xxxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx stejným způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx x neovlivněných xxxxxxx, ledaže existují xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx prokazující, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.

1.5 POSTUP

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx zvířat

X xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jednorázově xxxx xx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x objemnou dávku, xxxx se k xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxx, xx. xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx se vzorky xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dvakrát. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, provádí xx xxxxx dřívější a xxxxx xxxxxxxx odběr xxxxxx 24 x 48 hodin xx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx (xx. mimo xxxxx nejvyšší) se xxxxx vzorků provádí xx 24 xxxxxxxx xxxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, ledaže xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx interval xxx xxxxxxx xxxxxx (6).

Xxxxx toho xxxxx xxx použity xxxx xxxxxx intervaly xxxxxx xxxxxx. Např. xxxxx-xx xx o látku xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómů xxxxx xxxxxx, nebo xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx S-fázi xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx odběru xxxxxx (1).

Xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx působit opakovaně, xx posuzuje případ xx xxxxxxx. Xxxxx xx provádí aplikace xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx cyklu) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx se to xx xxxxxx.

Před xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vhodná xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx intervalu xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx je tento xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, u čínských xxxxxx zhruba 4-5 xxxxx.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx laboratoři xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx jenom nejvyšší xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx při xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.

Xxxxx, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx pro stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx dávka, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx (např. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx( tento xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Jestliže xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx v jedné xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx podaných x jeden den xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky a xxxxxxxx se na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx studie xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xx xxxx xxxxxx x limitním xxxxx xxxxx dávky.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx intraperitoneální xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x xxxx způsoby xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx sondou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx zvířete x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 g xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx zdůvodněné. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx vykazují při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, aby xxxxx xxx ve xxxxx xxxxxxxxx úrovních stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx objemová variabilita.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xx usmrcení zvířete xx z xxxxxxx xxxx z xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx hypotonickým xxxxxxxx x xxxxxx xx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx nakape xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.

1.5.7 Xxxxxxx

X xxxxxxx jedince xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x jedné xxxxxxx). Tento xxxxx xx dá xxxxxx, xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vysoký. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx před xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx podílu xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx chromozómů, xxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx 2x ± 2.

2. XXXXX

2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx se prezentují x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou je xxxxxxx. U xxxxxxx xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx. X experimentálních x xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet x xxxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxxxxx míra xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x první x xxxxx meiotické xxxxxxxx, x to xxx, xx xx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx buněk. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx se mitotický xxxxx u xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx jednorázovou xxxxxx a s xxxxxx časovým xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); statistická xxxxxxxxxx xx však neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx látka, při xxxxxx xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx považuje xx nemutagenní.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pozitivní, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx nejisté, nebo xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Je třeba xxxxxxxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx širokého xxxxxxx nebo je xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx rozpouštědla/vehikulu, xxxxx xx známa.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx a věk xxxxxx,

-původ, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx apod.,

- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny.

Podmínky xxxxxx:

- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxx-xx provedena,

- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx aplikace xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- zdůvodnění xxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx x potravě/pitné xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx / xxx),

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x odběru xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx toxicity,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- kritéria xxx hodnocení aberací,

- xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxx xxxxx,

- kritéria, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- mitotický xxxxx,

- poměr xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxx a xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,

- xxxxxxx xxxxx aberací x xxxx skupině,

- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx,

- xxxxx dávka - xxxxxxx, je-li xx xxxxx,

- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- údaje xx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx údaje x negativních xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,

- xxxxxxxx pozorované xxxxx xxxxxxx.

Diskuse xxxxxxxx.

Závěry.

X.24. XXXX XXXX X XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xx xx xx vivo xxxx na myších, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx chemickým látkám. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx srsti. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxx ovlivňujících xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (spots) xxxxxxxxx xxxxx srsti xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx potomků x xxxxxx skvrnami, xxxxxxxx, je xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxx test xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo suspendovány x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx jsou xxxxxxxxxx nebo suspendovány xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx s testovanou xxxxxx nebo vyvolávat xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxx X (nonagouti, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, c^ch x/x^xx x; xxxxx, b/b; xxxxxx, xxxxx ear, x xx/x xx; xxxxxxx xxxxxxxx, x/x) xxxx kříženy xxx x xxxxxx XX (xxxxxx, nonagouti, brachypody, xx x xx/xx x xx; xxxxxx xxxxx, xx xx/ /xx xx; xxxxx xx/xx) xxxx x xxxxxx C57 BL (xxxxxxxxx, a/a).

Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx že xxxxx xxxxxxx nonagouti potomci. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx XXXX (nonagouti, x/x; albino, x/x) x DBA (nonagouti, x/x; xxxxx, b/b; xxxxxx x/x).

1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx samic, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx dávku. Xxxxxx xxxxxxxx vzorku xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovaných x xxxxxxxxxxx xxxx x x kontrolních xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx ovlivněných xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pouze xxxxxxxxxxxxx (negativní xxxxxxxx). Xx zvýšení xxxxxxxxxx xxxxx mohou být xxxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx. Nedávné xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx získané v xxxx laboratoři při xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx mutagenním xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx sondou xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx. Xx-xx xx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx, x xxxxx xxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx pouze jednou 8., 9. xxxx 10. xxx březosti, xxxxxxx za 1. xxx březosti se xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 x 9.25 xxx po xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx provést xxxxx xxxxxx dnů.

Xxxxxxx

X xxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx a čtvrtým xxxxxx po xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx skvrn:

(x) xxxx xxxxxx x xxxxxxx 5 xx xx střední xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);

(x) žluté xxxxxx xxxx xxxxxx xx vyskytují x xxxxx mléčných xxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx slabin a xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx se, že xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx diferenciace (XXX);

(x) zbarvené a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x srsti xxxx xxxxxxxx somatických xxxxxx (XX).

Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxxx, XX, je xxxxxxxxx relevantní. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx XXX x RS xx možné xxxxxxx xxxxxxxxxxx chlupů xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xx nápadné, velké xxxxxxxxxxxx malformace xxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxxxx data xxxx uváděna xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxx majících xxxxx xxxx více xxxxx xxxxxxxxxx somatickými xxxxxxxx. Xxxxx získané x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx metodami. Xxxxx xxxx xxxx uváděny xxxx získané xxxxxxx xx vrh.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, informace x:

- xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx,

- xxxxx zabřezlých xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x experimentální x v xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx x xxx xxxxxxxxx,

- dávkových xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx byla xxxxxxxxx xxxxx aplikována,

- x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx sledovaných xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx x XXXX, XXX x XX x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x RS, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx detekuje xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx potomků. Indukované xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxxx X-chromozómu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x XO-samice xxxxxxxx sníženou fertilitu, xxxxx xx využívá xxx výběr X₁ xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx některými xxxx xxxxxxxxxxx (X-xxxxxxx x c-t xxx). Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x meiotických xxxxxxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, nebo X₁ xxxxx či xxxxxxx xxxxxxx X₁ xxxxx. Xxxxxx XX xxxx cytogeneticky xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pouze 39 xxxxxxxxxx v mitózách x kostní xxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx reagovat x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx toxické účinky.

1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx orálně xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx x jiné xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Pro xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx kmen. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx měla být xxxxx xxx xxx x xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx zdravá, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxx zvířat

Xxxxx xxxxxx nutně xxxxxx xx frekvenci spontánních xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxx indukovaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx samců X₁ xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x F₁ xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx také xxxxxx X₁ xxxxxxxx potomků, xxx xx xxxxxxxx 300 xxxxx x 300 xxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x předchozích xxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx dávka/odpověď je xxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Popis postupu

1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxxx xx 35 xxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xx expozici xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a musí xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx stadia zárodečných xxxxx budou xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxx. Xx porodu xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx vrhu x xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xx doby xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

1.2.2.2 Zjišťování xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx jedna xx xxxx možných xxxxx. Xxxx fertility X₁ xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxx cytogenetická xxxxxxx xxxxx xxxxx X₁ xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xxxx xxxxxxxxx

Snížená xxxxxxxxx xxxxxx x F₁ xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx a/nebo analýzou xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx fertility xxxx být stanovena xxx xxxxx kmen xxxxxxxxx xxxx.

Velikost xxxx: X₁ xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx samostatně xx xxxxx se xxxxxxxx ze stejného xxxxxxxxxxx nebo stejné xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Velikost xxxx x pohlaví X₂ xxxxxxx xxxx zaznamenány xxx xxxxxx, xxxx xxxx jsou odděleni. Xxxxxxxx xxxx testovány X₁ xxxxxx, X₂ xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx uchováváni pro xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx verifikovány xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx určeny xxxxxx xxx xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx z 1 : 1 xx 1 : 2 samci vs. xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxx jsou normální X₁ zvířata vyřazena x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx první X₂ xxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x třetí vrhy. X₁ xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxx X₂ xxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx přímo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Redukce xxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx translokací u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx X₁ xxxxx jsou xxxxxxxxxxx každý xx 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx jsou xxxxxxxx 14. - 16. xxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxx xxxxxxx.

(b) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Metodou xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx z testes. Xxxxxx translokací xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx multivalentních xxxxx xx stadiu xxxxxxxxx - xxxxxxxx X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx dvou xxxxx s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx testované xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx byl xxxxxxxx výběr no xxxxxxxx, všichni F₁ xxxxx jsou vyšetřeni xxxxxxxxxxxxx. Na každého xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx x xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx spermatogoniích xxxx x kostní xxxxx xx vyžaduje x samců x xxxxxx testes x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx u X₁ samic xxxxxxxxxxx XX. Přítomnost xxxxxxxxx xxxxxxxx a/nebo krátkého xxxxxxxxxx x každé x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx samčí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (c-t xxx). Xxxxxxx X-autosomální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx samčí sterilitu xxxxx xxx identifikovány xxxxx xxxxxxxxxx mitotických xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx xx xxxxx 10 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx XO xxxxxx.

2. XXXXX

Získané xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Pro xxxxx interval xxxxxxxxxxx xx zaznamenána průměrná xxxxxxxx vrhu x xxxxx pohlaví (sex xxxxx).

Xxx xxxxx xxxxxxxxx F₁ xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu kontroly x individuální xxxxxxxxx xxxx X₁ nosičů xxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x individuální xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx pro každé xxxxxxxxxxx X₁ nosičů xxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx diakinéze-metafáze I xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx počet xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx translokací.

Pro X₁ xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx počet x doba xxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

X XO xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxx X₂ xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

V xxxxxxx, že pomocí xxxxx xxxxxxxxx byly xxxxxxxxx vybráni xxxxx xxxxxxxx X₁ translokací, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x skutečném xxxxx xxxxxxxxxxx translokačních xxxxxxxxxxxx.

Xxxx být uvedeny xxxxx x negativních x xxxxxxxxxxx kontrolách.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, informace x:

- xxxxx xxxx, stáří a xxxx exponovaných zvířat,

- počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro každé xxxxxxx v exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx popis ovlivňování xxxxxx, dávkové hladiny, xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, počet x pohlaví xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx x xxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxxx,

- počet x detailní xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x březosti x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxx cytogenetické xxxxxx x mikroskopické xxxxxxx, pokud xxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ

(90xxxxx xxxxxxxxx podávání per xx, xxxxxx na xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx po 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Nejméně 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se zdravá xxxxx dospělá zvířata xxxxxxx přiřadí do xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x potravě, xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Všem xxxxxxxx xx testovaná látka xxxxxx xx xxxxx xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum nebo xxxx xxxxxxx, musí xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx případě xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 6 xxxxx, x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 xxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx a 10 xxxxx). Samice musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která xxxxx zabita xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého xxxxxxx) po dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které obdrží xxxxxxx, které se xxxxxxxx xxxxxxxx dávka. Xxxxxxxx úroveň dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx existují xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx nejnižší xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx by xxxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx být xxxxxx tak, aby xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx.

Ve xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx úrovní dávky x x kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx měl být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.

Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx nebo xx.xx^-1 potravy) nebo xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je třeba xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx sondou, xxxx xx se xxx xxx každý xxx xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních) přizpůsobovat xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx test

Xxxxxxx-xx xx 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti xx den (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné expozici xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) žádné xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx toxická xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx množství xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí a xxx, xx kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Popis postupu

X ideálním případě xx xxxxxxxx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx aplikace, x xxxxxxxxx zotavení x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx x kleci xxxxxxxx změny kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (a xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx testované látky x xxxxx vodě) x hmotnost xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx ztrátám xxxxxx xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, která xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx utratit x xxxxxx.

U xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(a) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx a na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávky a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx konci xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx a testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx trombocytů.

(c) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza krve. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (trvání doby xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), alaninaminotransferáza (xxxxx pyruvát-transamináza) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx séra (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx pro úplné xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx běžný xxxxxx, xxx xxx na xxxxxxxx očekávané xxxx xxxxxxxxxx toxicity.

Xxxxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxxxx xxxxxxxxx data, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx přechovávat xx vhodném médiu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, tlusté a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), xxxxxx kost x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), páteřní mícha xx třech úrovních - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, x (xxxxx žlázy). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxx xx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx s cílovým xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.

(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v jiných xxxxxxxxx skupinách.

(x) Xxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx poskytuje xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x těchto skupin. Xxxxx histopatologická xxxxxxxxx xx x zvířat xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x kterých byly xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx exponovaných skupin.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx do tabulky. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx typy poškození. Xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Je x xxxx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,

- experimentální xxxxxxxx - úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxx bez xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,

- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx,

- doba, kdy xxxx pozorovány jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxxxxx analýz moči),

- xxxxxxx xxxxxx,

- detailní popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx možné,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

B.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx po 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx), x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x zvířata, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v jakých xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Testovanou látku xxx podávat x xxxxxxx xxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x kapslích. Xxxxx xxx xxxxxxx také xxxx způsoby orální xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx po xxxxx xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx možno xx xxxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx druh - xxxxxxxxxx používá xxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx; v xxxxxxx xxx xx xx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 xx 6 xxxxxx a xx xxxxxxx než 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx úroveň xxxxx použít xxxxxxx 8 xxxxxx (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Počet xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Dávkování

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xx se zvířaty x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx nezpůsobit žádné xxxxxxx. Nejnižší xxxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx u člověka, xx xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxx jen xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xx xxxxxxx x nízkou x střední xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

Podává-li xx málo xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx normální xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx, xxxx se xxxxxx buď xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x ppm xxxx xx.xx^-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx; xxxxxxxx alternativu je xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x kapslích, xxxx xx xx xxx dít xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx, x dávkování x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx předběžný xxxx xxxx xxxxxxxxxxx testem, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx dieta.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx-xx 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti xx den (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx látka x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx množství xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, xx kterém xx xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

X xxxxxxxx xxxxxxx xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx x potravě, xxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx látku 5 dní x xxxxx.

Pozorování zahrnuje (xxx xxxx xx xx xxxxxxx) změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní a xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.

Příjem xxxxxxx (x xxxxxx vody xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx s vhodnými xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

U xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx x nejvyšší xxxxx x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, vyšetří xx všechna zvířata.

(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx na xxxxx xxxxxx se xx provést hematologické xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx například xxxx srážlivosti, protrombinový xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.

(x) Na xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a dále xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x xxxxxxxx aminotransferáza xxxx (dříve glutamát-oxalacetát xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx studium xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx krve xx xxxxxxxxxx měli xxxxxxxx (xx xxxx xxx 24 xxxxx).

(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx použitých ve xxxxxx xx provede xxxxx xxxxxxxxxx zevní xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, hrudní a xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx.

Následující orgány x tkáně je xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xx možná xxxxxxxx histopatologická vyšetření: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, mozek - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx žláza, xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx pohlavní xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, tenké, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx) x (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní a xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Histopatologická vyšetření

Xxxxx histopatologické vyšetření xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxx když xx to xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx, typy poškození x procentuálně počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu

Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, plemeno nebo xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, potrava,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) a koncentrace,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx a xxxxx xxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, případně xxxx o přežití xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),

- doba, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx abnormální příznaky x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření a xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, kde xx to xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx.

B.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx kůži xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x to xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx se zjistily xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx přežijí xx xxxxx pokusu, se xxxxxxx.

1.2 Popis metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.

Krátce xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx xxxxx, mělo xx xx však xxxxxxx xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx potřeba xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx se nepoškodila xxxx (např. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže a x xxxxxxxxx krycího xxxxxx.

Xxx xxxxxxxx x xxxxxx látkami, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x týdnu.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, králíky xxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, jejich xxxxxxx xxxx musí být xxxxxxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a kmen.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx a 10 xxxxx) se zdravou xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před xxxxxx pokusu. Mimoto xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx podávání sledovat xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx výskyt toxických xxxxxx.

1.2.2.3 Dávkování

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx se použilo xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xx být nejméně 6 xxxxx denně. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou dobu. X intervalech xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních je xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, xxx xx udržovala xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx zachází stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx pokusným skupinám, x to ve xxxxxxx množství, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Nejnižší xxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx toxický účinek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, aby vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx s xxxxxx x střední xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxx skupině xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x těžkému xxxxxxxxxx xxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx může xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx k xxxxxxx poškození kůže, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ukončit x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxx vyšší xxxxx, která xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx toxické xxxxxx, není další xxxxxxx xxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x čas, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata xx xxxxxxx x xxxxxxx po xxxxxx. Xxxxxxxx se studované xxxxx xxxxxxx 7 xxx v xxxxx xx dobu 90 xxx. Zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx pro následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Doba xxxxxxxx činí nejméně 6 xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx látku xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % povrchu xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx tato xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx pokrýt xx xxxxxxxx část pokusné xxxxxx rovnoměrně v xx nejtenčí xxxxxx.

Xxxxxxxxx látka xx xx expoziční xxxx xxxxxxxxx v kontaktu x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mulového xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový obvaz x testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít i xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, úplnou xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxx.

Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xxx a xxxxxxx, x také xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx zaznamenávat xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chybného zařazení. Xx skončení xxxxxx xx všechna zvířata, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx či xxxxxx bolestí je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

X všech xxxxxx xxxxxx kontrolních xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávky a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, vyšetří se xxxxxxx zvířata.

(b) Xx konci xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.

(c) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxx), alaninamino transferáza (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx ve vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Následující xxxxxx a tkáně xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu x ohledem na xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, kůra xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, děloha, přídatné xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx (xx-xx přítomen), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, tenké, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (xxxxxx mléčná žláza), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), (xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx) a (xxxxx žlázy). Tkáně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity nebo xxxxx souvisejí s xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx.

(b) Xx třeba vyšetřit xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx orgány x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(d) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx skupinách x xxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxx histopatologicky xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx zdravotního xxxxx zvířat. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxx provést vždy xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx skupině x vysokou xxxxxx.

(x) Používá-li xx xxxxxxxxx skupiny, musí xx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx každou experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Výsledky xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- podmínky xxxxxx,

- xxxxxx dávek (xxxxxx vehikula, pokud xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x toxických odpovědích xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx bez xxxxxx, xxxxx xx lze xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx během experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat do xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx tělesné xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- hematologická vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich výsledky (xxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXX

(90xxxxx opakovaná xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xx hlodavcích)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx studované xxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx jedné xxxxxxxxxxx, x xx xx 90 dnů. Použije-li xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zjišťují se xxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xx, xxxxx xxxxxxx xx konce pokusu, xx pitvají.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se zdravá xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Pokud xx xxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, xxxx být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx je xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx zvířatech x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Na začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx test před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx studiích xx xx xxxxxx stejný xxxx x xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 dnů po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx koncentrace

Xxxxxxx xx nejméně xxx skupiny s xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx s xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx). X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx má vyvolat xxxxxxx účinky, ale xxxxxxxxxx žádné uhynutí xxxx jen v xxxxx počtu. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x člověka, má xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx výsledků obtížné.

1.2.2.4 Xxxxxx expozice

Xxxxxxx xx exponují xx xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx možné xxxxxx x xxxxxx xxx expozice.

1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Pro expozici xxxxxx se používá xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zaručuje xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx za xxxxxx, aby xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x rovnoměrné xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx byla xx nejvyšší. Xxx xxxxxxxxx stability atmosféry x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx x xxxxxx celkový xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Je možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, samotné xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; první xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Doba xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xxxxx celého xxxxxx xxxxxxxx x zotavení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Je třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, ve xxxxxx xx objeví x opět odezní xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3. Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce denně, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, která xxxx určena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx aplikace, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx být 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % x 70 %, s xxxxxxxx případů, kde xx není možné (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.

Používá xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x vhodnou xxxxxxxxxxx kontrolou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx pokus pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx expozičním xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx musí zaručovat, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx.

Měření xxxx monitorování xxxxxxxx xxxxxxxx:

a) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).

x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky se xxxx v dýchací xxxx. Během jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ±15 %. U některých xxxxxx x aerosolů, xxx této xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx rozsah xxxxxxxx. Xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, jak xx xx prakticky xxxxx. Xxx xxxxxx generátoru xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxx, xxx byla xxxxxxx představa x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx tak xxxxx, xxx xx xx potřeba pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

x) Xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx

x) Xxxxx xxxxxxxx x xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx; xxxxx zvíře xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a zaznamenávat xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxx zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx x spotřeba xxxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx pravidelnou kontrolu xxxxxx, aby xxxxx xxxxx nedocházelo xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx chybného xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření oftalmoskopem xxxx rovnocenným přístrojem xx xx xxxxxxx xxxx podáváním testované xxxxx x na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx a x kontrolních skupin. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.

(b) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx trombocytů.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), alaninamino xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx séra (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx pozorovaných xxxxxx.

(x) Xxxxxxx moče xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má se xxxxxx xxxxxxxxx hematologických x xxxxxxxxxxxxx parametrů xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.1 Pitva

X xxxxx zvířat použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxx obsahu. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx tělísky) a xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx ve vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx x fixovat vhodným xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx xx považuje xx vhodnou), xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, hypofýza, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx brzlíku, xxxxxxxxxx, srdce, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x vaječníky, xxxxxx, (přídatné xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x xxxxx střevo, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, reprezentativní xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x kostní xxxxx, (xxxx stehenní xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx je to xxxxxxxxxx xxxxx příznaků xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Histopatologická vyšetření

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx provést x xxxxx xxxxxx skupiny, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a x xxxxxx kontrolní xxxxxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinách.

(x) Xxxxx xxxxxx xx skupinách x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx poskytuje obraz xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx histopatologická vyšetření xx u zvířat xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx rutinně, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx postižení xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

(x) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx tkáních x xxxxxxxx, u xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx počátku xxxxxx x xxxxx xxxxxx s lézemi, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx typy xxxx. Výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x průběhu pokusu xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx druh, xxxx, původ, podmínky xxxxxxxx, krmení,

- xxxxxxxx pokusu: Popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx stability koncentrací x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxx xx sestaví xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatnou xxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:

x) xxxxxxxx průtoku vzduchu xxxxxxxxxx zařízením,

x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,

c) nominální xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),

x) povaha xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx,

x) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,

x) xxxxxx velikostí xxxxxx (x xxxxxxxx),

- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a podle xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx, pokud xx xxxxx ji xxxxxxxx,

- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx tělesné hmotnosti,

- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- hematologická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- pitevní xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.30. TESTOVÁNÍ XXXXXXXXX TOXICITY

1. XXXXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, vhodnou xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na xxxxxxx, xx xxxxx část xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x po expozici xxxxxxxxx látce jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx jsou chována xxx standardních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx započetím testu. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Preferovaným xxxxxx je xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx x další xxxxx (hlodavce nebo xxxx). Je xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx by xxxxx rozdíl ve xxxx zvířat xxxxx xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx stejný xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx nejméně 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 xxxxx), xxxxxx x pro xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx měly být xxxxxxxxx a xxxxxx xx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vyšší xxxxx xxxxxx.

V xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx počet xxxxxx, xxx ne xxxx xxx 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxx tři dávky x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší dávka xx xxxx vyvolat xxxxx xxxxxxx toxicity xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx dávka by xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx voleny xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx. Výběr dávek xx xxx vzít x xxxxx výsledky xxxxxxxxxxx studií.

Obvykle xxxx xxxxxxx exponována xxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxxx vodě nebo x xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx, aby x xx xxxx xxxxxxx stálý xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x exponované xxxxxxx, xxxxx expozice testované xxxxx.

Xx zvláštních xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx použije-li xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx

Dva xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx závisí na xxxxxxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx člověka.

Použití xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx problémy. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx kožního xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx odvozena z xxxxxxxx orálního xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx toxicity.

Xxxxxx xxxxxx

Tam, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx dostat testovanou xxxxx v xxxxxxx, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx podávat xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx dávkování xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx k xxxxxxxx toxicity nebo xxxxxx vyvolat "abstinenční" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx je považováno xx xxxxxxxxxx.

Inhalační xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx technicky xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x této xxxxx podání. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace může xxx platnou xxxxxxxxxxxx x specifických xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže zvíře xx obvykle xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx denně xx xxx xxx x xxxxx (přerušovaná expozice), nebo x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně xx sedm xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, použitou x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx v xxxxx má zvíře 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx expozice x ještě delším xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx expozice závisí xx xxxxxx xxxxxx x xx lidské xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Nicméně, xx třeba vzít x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx simulaci podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nutnosti xxxx x xxxxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace xxx x technik xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx komory

Xxxxxxx xx exponují x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx byl zajištěn xxxxxxxxxx přísun xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Kontrolní x xxxxxxxxx komory xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx srovnatelné xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx komory se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a tím xx brání xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxxxx.

Xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx:

(a) xxxxxx xxxxxxx: rychlost průtoku xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;

(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx více xxx 15 % xxxxxxx xxxxxxx;

(x) xxxxxxx x xxxxxxx: pro hlodavce, xxxxxxx by měla xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 ^oC a xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx xx voda xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány průběžně;

(x) xxxxxx velikosti xxxxxx: měla xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx částice xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i když xxxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Analýza xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx stabilitu aerosolu, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2.6 Trvání xxxxxx

Xxxxxxxx látky xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 měsíců.

1.2.3 Xxxxx postupu

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx

Xxxxxxx klinické sledování xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxx. Xxxxxxxxx pozorování xx xxxx xxx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, např. xxxxx nebo uložení xx xxxxxxx u xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, která xxxx xxxxx xxxx moribundní. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx sledovat, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx včetně neurologických x xxxxxx změn x xxxxx zvířat, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx objevení x xxxxxx xxxxxxxxx příznaků xxxxxx podezření na xxxxx.

Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx jednou xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx xxxxx a aspoň xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (a xxxx xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx podávána x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx tělesné xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx frekvence xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx bílých krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx měsíce, xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx vzorcích xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx resp. xx 10 potkanů xx pohlaví x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xx xxxxxxxx potkanů. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx před xxxxxx od nehlodavců.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx naznačí zhoršený xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx vzorcích xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx tato xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí xxxxxxx, xxxxxxx xx i x skupiny s xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.3.3 Xxxxxxx moči

Xxxxxx xxxx 10 potkanů xxxxxxx pohlaví xx xxxxxxx xxx analýzu xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hematologické zkoušky. Xxxxxxxxxxx stanovení xxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx směsném xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:

- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření sedimentu (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).

1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx závěr jsou xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx nehlodavců x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Od xxxxxxxxxx xx vedle toho xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X těchto xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- koncentrace xxxxxxxx,

- xxxxx xx funkci xxxxx (xxxx. xxxxxxxx bázické xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx¹⁾, xxxxxxxx xxxxxx transaminázy²⁾, xxxxx xxxxxxxx transpeptidázy, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,

- testy na xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx v xxxx.

1) xxxx xxxxx jako sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx

1.2.3.5 Xxxxx

Kompletní xxxxx se xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx během xxxxxx xxxx byla utracena x xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx x tkáně xx měly být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx:xxxxx³⁾ (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, mozečkové xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x plic, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, xxxxx³⁾, sleziny, xxxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx měchýře, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, xxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx pohlavních xxxxxx, samičí xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx a xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x očí. Xxxxxxxx plic a xxxxxxxx xxxxxxx fixativem xx optimální xxxxxx xx konzervaci těchto xxxxx; naplnění xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické zkoumání. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx a xxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx vyšetřením, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx významné xxxxxxx.

3) xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví a xx xxxxxxx u xxxxxxxx x ze xxxxx xxxxxxxxxx a dále xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx tělísky) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx

1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx změny, xxxxxxx xxxxxx x xxxx léze xxxxxxxxxxx xx x kterémkoli xxxxxx, mají xxx xxxxxxxx mikroskopicky. Navíc xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

(a) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx x tkání x xxxxxxxxxx popisem xxxxx xxxx xxxxxxxxxx:

1. x xxxxx xxxxxx, xxxxx uhynula xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,

2. x xxxxx zvířat xx skupiny s xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx skupiny,

(x) xxxxxx či xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx způsobené xxxx pravděpodobně způsobené xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx také xx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx,

(c) tam, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx významné zkrácení xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxx ovlivnit xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx popsaným xxxxxxxx,

(x) xxxxxxxxx x incidenci xxxx, xxxxx xx normálně xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podmínkách, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jsou xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx pozorovaných x xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx zvířat vykazujících xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x testu

Xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx pro vytváření xxxxxx x aerosolů, xxxxxx klimatizace, zneškodňování xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) a xxxx xx zahrnovat:

(a) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vstupující xx xxxxxxxxx aparatury xxxxxx objemem xxxxxxx)

(x) xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxxxx

(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx

(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx xx xxxxxxxxxx)

- dávkové úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx

- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a dávky

- xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxx

- xxxx xxxxx xxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx až do xxxxx

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx

- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx abnormální příznak x xxxx další xxxxx

- xxxx x xxxxxxxx potravy x tělesné hmotnosti

- oftalmologické nálezy

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a výsledky

- testy klinické xxxxxxxxx x všechny xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxx moči)

- xxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxx popis všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů

- xxxxxxxxxxx zpracování výsledků x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

- xxxxxxx xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - HLODAVCI X NEHLODAVCI

1. METODIKA

1.1 Princip xxxxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxx koncentracích xxxxxxxx xxxxxxxx březích xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx dávka xx xxxxxx skupinu, xxxxxxx v tom xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx před xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx i x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx studium xxxxxx- x xxxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx věku x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxxxxx samci x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Oplozené xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxx xxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx samicím xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Den xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx vyjmuty xxxxxxxxxxxxx x podrobeny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx orgánů xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, opožděné osifikace x xxxxxxxx do xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx, xxx, xxxxxx x králík. Preferovanými xxxxx xxxx potkan x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Používaný xxxx xx xxxxx xxx nízkou xxxxxxxx x měly xx xxx x xxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx. Zvířat jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxx je xxxxx použít xxxxx 20 xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Xx sledování xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx

Xx xxxxx xxxxxx aspoň tři xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx do xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx vehikulum. Je xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx: xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx x výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx fyzikálně xxxxxxxx xxxx biologické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, pak xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx u xxxxx vyvolat takové xxxxxxx toxicity, jako xx xxxxx snížení xxxx, xxx už xx xxxx jak 10 % xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx voleny xxx, xxx xxxx geometricky xxxxxxxxx mezi xxxxxx x xxxxxxx dávkou.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

V xxxxxxx, že xxxxx x xxxxxx toxicitou xxx dávce nejméně 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx dávek.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx

Nultým xxxx xxxxx je xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxxx (pokud xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx organogeneze. Xx xxxx období xx možno xxxxxxxxx 6. až 15. xxx x xxxxxxx x xxxx, 6. xx 14. xxx x křečka x 6. xx 18. xxx u králíka. X xxxxxxx, xx xx xx xxxxx xxx považován den, xxx xxxx pozorováno xxxxxx nebo byla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx. Podle xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx

Každý xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxx x xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx ztrát během xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx stejnou xxxx.

Testovaným samicím xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx na váhu xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx během xxxxxxxx, zvířata mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx upravována xxxxx xxxxxxxxxx vážení. Xxxxxxx xxxxxx toxicity xx třeba xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx potratu xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx makroskopicky vyšetřit. X xxxxxxxxxx je xxxxx pokračovat x xx ukončení xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx porodem. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, ale vyhnout xx komplikacím xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxx porodu. Pozorování xxxxxx x xxxxx xx xxxx zahrnovat xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x srsti, xxx x xxxxxxx, dále xxxxxxxxx, oběhového, autonomního x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx spotřebu xxxxxxx x vážit xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

Xxxxx xxxxx x xxxxxxx během xxxx xx konci xxxxxx, xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx dobu xxxxx xxxxxxx v xxxxxx. U xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx stanovit xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx určit xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxxx. Xx vyjmutí xx xxxxx jednotlivě xxxxx xxxxxxxx každý xxxxxxx. X xxxxxxx, xxxx x xxxxxx xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx třetiny až xxxxxxxx xxxx a x zbytku vhodnými xxxxxxxx xxxxxxxx abnormity xxxxxxx tkání. X xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, udávající xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx, která xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x abnormalitami xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x určitým xxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1. Xxxxxx x testu

Xxxxxx x xxxxx by xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx pro každou xxxxx,

- xxxxx xxx xxxxxx (pokud xx xxxx xxxxx xxxxxxxx),

- xxxx xxxxx xxxxx studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx,

- xxxxx x tělesné xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx,

- délka březosti x xxxxx x xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x měkkých tkání),

- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, defekty xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx cestou, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx dávka na xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x po xxxxxxxx testované látce xxxx zvířata denně xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx vývinu xxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx dní xxxx xxxxxxxxx testu. Xxxx xxxxxx se mladá xxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx skupin.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i další xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx mladá xxxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx by měla xxx xxxxxxxx co xxxxxxxx xx odstavení xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxx xxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X případě, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 samic x 50 xxxxx) xxx každou úroveň xxxxx x souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx a negravidní. Xx-xx xxxxxxxxx průběžné xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx zvýšit x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx před xxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Dávkové xxxxxx x frekvence xxxxxxx

Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx tři dávkové xxxxxx kromě souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity, xxxx xx xxxxx pokles xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx účinky xxx xxxxxx.

Nejnižší xxxxxxx úroveň by xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx růstem, vývojem x délkou života xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx by xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Střední xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx středním xxxxx xxxx vysokou x xxxxxx xxxxxx.

Volba xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Je-li xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx xxxxxxxxx do potravy, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx ohledu x xxxxxxxxxxx skupinou, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xx zvláštních xxxxxxxxx, jako jsou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxx aplikace xxxx orální, xxxxxxxx x inhalační. Xxxxx xxxxxxx podání xxxxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx testované xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.5.1 Xxxxxx studie

Xxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx může být xxxxxxxxx xxxxxx, dává xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, rozpuštěnu x xxxxx vodě xxxx podanou x xxxxxxx.

Xxxxxxx xx xx xxxx látka xxxxxxx xxxx dní x týdnu, protože xxxxxxxxx pět xxx x xxxxx xxxx xxxx x vymizení xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx. Nicméně, xxxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx týdně xx považováno za xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Dermální xxxxxx

Xxxxxxxx přímo na xxxx může xxx xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx aplikace, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx informace o xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou alternativou xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx ustálení koncentrace xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx x týdnu (přerušovaná xxxxxxxx), xxxx v xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx x prostředí, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro krmení xxxxxx denně xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx případech xxxx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x stálou xxxxxxxx xx x xxx, xx x první xx zvíře 17 - 18 hodin xx xxxxx účinků xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx obdobím xxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx xxxxxx x xx lidské xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, je xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx technické xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx nutnosti pití x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx par x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx komory

Zvířata xx exponují x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x xxxxxxxxx komory xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak aby xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx x tím xx xxxxx úniku xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx shlukování xxxxxxxxxxx zvířat. Obecně xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Měření nebo xxxxxxxxxxxx zahrnuje:

(x) Xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxx kontrolována kontinuálně.

(x) Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx by xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx hodnoty.

(x) Xxxxxxx a xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

(x) Měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx komor u xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx částice xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x dýchací xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx distribuci xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x když xxxxxx xxxx aerosolu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx prováděna xxxxx xxxxx vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx tak často, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Trvání xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx zvířete použitého xxx xxxx. Test xx xxx xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx u myší x xxxxxx x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Nicméně, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x delší dobou xxxxxx xxxx. s xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx doba xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 měsíců xxx xxxx a křečky x 30 měsíců xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx prodloužené xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x nejnižší dávky xxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxx na 25 %. Při xxxxxxxx testu, xx xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Tam, xxx xxxxx předčasně xxx skupina s xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, nesmí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx údajů (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo x důsledku xxxx xxxxxxx) x žádné xxxxxxx větší xxx 10 % a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx než 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx x xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxx i dýchacího, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je nutná, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxxx příznaky x xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx věnovat xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.

Xx xxxxx provádět xxxxxx spotřeby xxxxxxx (x vody tam, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x pak xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx jiné xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx jednou týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x aspoň xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx tomto xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx

Pokud pozorování xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stavu xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xx 12 xxxxxx, xx 18 xxxxxx x xxxx utracením xxxxxx xx provede xxxxxx xxxxx ze xxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx vzorcích xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxxx. Pokud tato xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x x xxxxxxx s xxxxxx nejblíže xxxxx, xxx je vysoká xxxxx.

1.3.2.2 Xxxxx

Kompletní xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx utracena, xxxxxxx xx nemocná. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx tumory, xx xxxxx uchovat.

Následující xxxxxx x tkáně xx měly xxx xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxx xxx možné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření: xxxxx (včetně xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň thymu, xxxxxxx x plíce, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, pankreas, xxxxxx, xxxxxx, akcesorní xxxxxxxx xxxxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxxxx, ileum, xxxxx xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzlina, xxxxxx xxxxxx xxxxx, svalovina xxxxxx, periferní nerv, xxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx kost xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx třech xxxxxxxx (xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x bederní) x xxx.

Naplnění plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je optimální xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Naplnění xxxx x xxxxxxxxxxx studiích xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxx respirační xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

1.3.2.3 Histopatologické xxxxxxxxx

(x) Úplná xxxxxxxxxxxxxx xx provede x xxxxxxxx x tkáních xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx testu, x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx kontrolní x x xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxxxx viditelné xxxx x xxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, se vyšetří xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.

(c) Je-li xxxxxxxx rozdíl v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx skupinou s xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx x daném xxxxxx xx xxxxx x x dalších skupinách.

(x) Xx-xx přežití xx skupině s xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxx, xxxx by xxx kompletně xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.

(x) Xx-xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mohly ovlivnit xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nižší xxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, doba jejich xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx x tumory xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Zpráva o xxxxx

Xxxxxx o xxxxx bude, xxxxx xxxxx, obsahovat následující xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, dieta,

- xxxxxxxx xxxxx: Xxxxx expozičního zařízení xxxxxx konstrukce, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro vytváření xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro měření xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx zahrnovat:

(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x inhalačním zařízení,

(x) teplotu x xxxxxxx vzduchu,

(x) xxxxxxxxx koncentrace (celkové xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx do inhalační xxxxxxxxx xxxxxx objemem xxxxxxx),

(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx použito,

(x) skutečné koncentrace x dýchací xxxx,

(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xx relevantní),

- xxxxxxx úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx užito) x koncentrace,

- xxxxxxxxx tumorů podle xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,

- xxxx úmrtí během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx,

- xxxxxx toxických xxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx a jiných xxxxxx,

- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx další xxxxx,

- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- použité xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,

- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- statistické xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX TOXICITY/KARCINOGENITY

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxx

Cílem xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky x xxxxxxxxx druhu xxxxx xx dlouhodobé xxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxx xx test karcinogenity xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x kontrolní xxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávka xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx karcinogenity. Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jak xx obecnou xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx toxicitu.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, vhodnou xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity a xxxxxx xxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nejméně xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před testem xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Preferovaným druhem xx xxxxxx. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další druhy (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx z xxxxx chovaných xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx xx nejdříve xx odstavení mláďat. Xx začátku xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx váze zvířat xxxxx více xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, že vlastní xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx v obou xxxxxxxx.

1.2.2 Počet x xxxxxxx

Pro hlodavce xx použije nejnémě 100 xxxxxx (50 xxxxx a 50 xxxxx) xx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx nullipary x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxx x počet xxxxxx, xxxxx budou takto xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx (skupiny) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx xxxxxx, xx xxxxx měla xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx satelitní skupina xxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx 10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x frekvence xxxxxxx

Xxx test xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx doby dožití xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx růstem, xxxxxxx x délkou života xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx xx neměla xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx třeba stanovit xx středním xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx dávkou.

Při xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx se xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.

Pro xxxxx testování chronické xxxxxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx satelitní xxxxxxx. Vysoká xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx denně. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx přimíšena xx xxxxxxx, měla xx xxx xxxxx k xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxx látce.

Ve xxxxxxxxxx případech, jako xxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx další xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx exponována xxx xxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxx aplikace

Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx a inhalační. Xxxxx xxxxxxx podání xxxxxx na xxxxxxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx x člověka.

1.2.5.1 Orální xxxxxx

Tam, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x gastrointestinálního xxxxxx a je-li xxxxxx jedna z xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.

Xxxxxxx xx se xxxx xxxxx podávat sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx dávkování xxx xxx v xxxxx xxxx vést k xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx na praktické xxxxxxx, dávkování xxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx přímo xx kůži xxxx xxx xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx vyvolání kožního xxxxxxxxx.

1.2.5.3 Inhalační studie

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Intratracheální xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x specifických xxxxxxxxx.

Dlouhodobé expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), nebo x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin xxxxx xx sedm xxx x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx zvířat xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx čištění expozičního xxxx. X obou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx je x xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším xxxxxxx xxxxx víkendu.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx expozice závisí xx xxxxxx studie x na lidské xxxxxxxx, která má xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx obtíže. Například xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx narušeny xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx komory

Xxxxxxx xx xxxxxxxx x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx proud pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx byl zajištěn xxxxxxxxxx přísun xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx komory xx měly xxx xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx testované látce. Xxxxxx komory se xxxxxxx udržuje xxxxx xxxxxxx x tím xx brání xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaných xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Měření xxxx monitorování zahrnuje:

(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx průtoku vzduchu xxxxxxx by měla xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx neměla xxxxxxx xxxx než ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,

(x) teplota x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °C x xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx testované xxxxx x atmosféře xxxxxx. Xxx parametry by xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) xxxxxx xxxxxxxxx částic: xxxx xx být stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx aerosolů. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měly xxx x respirabilní xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx komor xx xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x měl xx xxxxxxxxxxxxx odpovídat celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxx respirabilní. Xxxxxxx velikosti částic xx xxxx xxx xxxxxxxxx často xxxxx xxxxxx generujícího xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx částic, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx část normální xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx by xxx xxx xxxxxxx v 18 xxxxxxxx u xxxx x křečků x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx xxx xxxxxxx kmeny xxxxxx x delší xxxxx xxxxxx resp. x nízkým xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxxx xxx xxxx a xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, když xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx ukončení xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, kde xxxxx xxxxxxxxx xxx skupina x vysokou xxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx skupiny xxxxxxxxxx toxické xxxxxxx, xxxxx xx činily xxxxxxxx. Aby bylo xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx testu, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (autolýzou, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) v xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx nesmí xxx xxxxx než 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx x křečků x v 24 xxxxxxxx u xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx být v xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx mělo xxx plánováno utracení xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx patologie, xxxxx xx xxxxx k xxxxxxxxx látce, od xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stárnutí.

1.3 Xxxxx postupu

1.3.1 Xxxxxxxxxx

Xxxxx pozorování xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, očí a xxxxxxx, jakož i xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (skupin) xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx klinické xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx nutná, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx chyb x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xx xxxx xxx xxxxxxxx a xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x mortalita xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx vývoji xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, lokalizace, xxxxxxx, vzhled x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx tumoru xx xxxxxxxxxxx.

Je xxxxx provádět xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx v pitné xxxx) týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x pak xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx intervalech, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx váhy xxxxxxx xxxxxxx xxxx frekvence xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx během xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx testu a xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx období.

1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx

Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx bílých xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx srážlivosti) xx měla xxx xxxxxxxxx xx tři xxxxxx, xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx xxxxxxxx krve xx 10 xxxxxxx xx pohlaví x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx od xxxxx potkanů.

Pokud xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx zdravotním stavu xxxxxx během studia, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxxxxx ze xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x kontrol. Xxxxx xxxx data nebo xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změn naznačí xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x x xxxxxxx x dávkou xxxxxxxx nižší, xxx xx vysoká dávka.

1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx

Vzorky xxxx xx 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx sbírají pro xxxxxxx pokud xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx provedena xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:

- xxxxxx xxxx, objem x hustota u xxxxxxxxxxxx zvířat,

- xxxxxxxx, glukóza, ketolátky, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (semi-kvantitativně).

1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx všech xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx vedle toho xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx jater (xxxx. xxxxxxxx bázické xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx¹⁾, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx²⁾, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,

- metabolismus xxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx lačno,

- testy xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx v xxxx.

1) xxxx xxxxx xxxx sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx aminotransferáza

1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu nebo xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek. Xxxxxxx viditelné léze, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx mohly být xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.

Všechny xxxxxx x tkáně xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx: xxxxx³⁾ (prodloužené xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx žlázy x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, aorty, xxxxxxxx xxxx, xxxxx³⁾, sleziny, xxxxxx³⁾, nadledvinek³⁾, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterníku, jejuna, xxxx, xxxxxxx střeva, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx žlázy, xxxx, xxxxxxxxx, periferního xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x stehenní xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; naplnění xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx studován xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně xxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxx-xx provedena xxxx klinická vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx patologovi xxxxxxxx xxxxxxx.

3) Tyto xxxxxx x 10 xxxxxx xx xxxxxxx x na xxxxxxx xxxxxxxx mají být xxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx vyšetření se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se x satelitní xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látkou, xxxxxxx xx histologicky cílové xxxxxx xxxxx ostatních xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx všech xxxxxxxxxxxx skupin xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx.

Xxx testování xxxxxxxxxxxxx:

(x) úplná xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x s nevyšší xxxxxx;

(x) xxxxxxx xxxxxx viditelné xxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx;

(x) xx-xx xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx dávkou a xxxxxxxxx xxxxxxxx, histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx tkáni i x dalších xxxxxxxxx;

(x) xx-xx xxxxxxx xx skupině s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;

(x) xx-xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx kompletně vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx sumarizují ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku testu, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx během xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxx

Zpráva x xxxxx bude xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,

- podmínky xxxxx: xxxxx expozičního zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x xxxxxxxx: xx xxxxx tabulky včetně xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxx:

(x) rychlost xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx zařízení,

(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,

(x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx vstupující xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx objemem xxxxxxx),

(x) xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxxxx,

(e) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx,

(x) xxxxxx xxxxxxxxx částic (xxx xxx relevantní),

- dávkové xxxxxx (xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- data xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví, xxxxx x typu xxxxxx,

- doba xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx ,

- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx,

- data x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- oftalmologické xxxxxx,

- použité hematologické xxxxx x výsledky,

- testy klinické xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (včetně výsledků xxxxxxx xxxx),

- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxxx xxxxxxxx samic x xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx dostávají xxxxxxxxxx látku x xxxx růstu x xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx spermatogenního xxxxx (přibližně 56 xxx x xxxx x 70 xxx x xxxxxxx), xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx xxxxx xx spermatogenezu.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) dostávají xxxxx xx dobu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx. Zvířata xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx připouštění se xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, x době xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxx inhalační xxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxx zahájením xxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do dvou xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx pokusu x xxxx podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Doporučuje xx xxxxxxxxxx látku xxxxxxx x potravě xxxx x xxxxx xxxx. Jiné způsoby xxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. Všechna zvířata xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x průběhu xxxxxx testu. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx o xxxx známo, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx xxxxx

Xxxx xx přednost potkanům xxxx myším. Používají xx xxxxxx xxxxxxx, xx té doby xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx být xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx co xx xxxxx, kmene, xxxxxxx a váhy x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx skupinách, xxxxxxxxxx x kontrolní, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx stejným termínem xxxxxx. Xxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnocení xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx chování x X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx x vývoj xxxxxxxxx generace X₁ xx xxxxxx do xxxxxxx.

1.2.3 Podmínky xxxxx

Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxx. Xxxx porodem xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx do zvláštních xxxxxxxxx nebo mateřských xxxxx a xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx hnízda.

1.2.4 Xxxxxxxxx

Použijí xx xxxxxxx xxx exponované xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxx snižuje xxxxxx x využití xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.

Testovaná xxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx to xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx toxicitu, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) xx měla(y) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, které xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolávat xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx u xxxxxx xxx u potomstva.

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx x tobolkách xx xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx podle xxxxx xxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxx případně xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v 0. xxxx 6. xxx od xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2.5 Limitní test

X xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx toxickým xxxxxxx na reprodukci, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Xxxxx xxxxxxxxx studie ukáže, xx vysoká xxxxx, xxxxxxxxxxxx u matek xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx postupu

1.3.1 Xxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxx pěti xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx pětidenní xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx obdobím připouštění (8 týdnů xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx pokračuje v xxxxxxxx a mohou xxx použiti xxx xxxxxxxx dalších xxxx x xxxx xxx xxxxxxxx x vyšetřeni xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxx aplikace xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) začne po xxxxxxxxx aklimatizaci x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx před obdobím xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx xxxx tři xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx až xx odstavení F₁ xxxxxxxx. Xx přípustná xxxxx dávkovacího xxxxx xxxxx znalostí o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxx. o indukci xxxxxxxxxxx a/nebo bioakumulaci.

1.3.2 Xxxxxx při xxxxxxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).

X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx otěhotnění anebo xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx přítomnost spermatu xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx, u xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx třeba vyšetřit x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx páru. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx jedinci xxxx pohlaví xxxx xxxxxxxxxxxxxx vyšetřením xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxx vrhů

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx plodnosti je xxxxxxxxx možnost xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx vrhů standardizuje, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. a 4. xxxx xx porodu xx velikost xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; pokud xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx možno standardizovat xx xxxx počty, xxxx. 5 samců x 3 xxxxxx. Xxxx menší xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za xxx. Významné xxxxx xxxxxxx, příznaky xxxxxxxxx xxxx prodlouženého porodu x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx před, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (x xxxx, xxxxx se látka xxxxxx x xxxxx xxxx) xx xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx váženo. Xxxxxxxxxx X xxxxxxx xx xxxx první den xxxxxxxx x xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx každé dospělé xxxxx.

Doba xxxxxxx xx počítá od xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx vrh xx xx nejdříve xx xxxxxx vyšetří x xxxxxxx se počty x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx porodů x xxxxxxxxxx xxxxxxx anomálií.

Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx pro vyšetření xx možné defekty. Xxxx mláďata se xxxxxxxxx a xxxx xxxx se xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. dnu x xxxxx xxxxx xxxxx xx ukončení xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx individuálně. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx abnormality x xxxxxxx x fyzickém xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.3.5 Xxxxxxxxx

1.3.5.1 Xxxxx

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx všechna xxxxxxx generace X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx anebo xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx vyšetří xx defekty.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

Xxxxxxxxx, děloha, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, semenné váčky, xxxxxxxxxx xxxxx, prostata, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx všech zvířat xxxxxxxx P xx xxxxxxxx xxx mikroskopické xxxxxxxxx. X případě, xx tyto xxxxxx xxxxxx doposud xxxxxxxxx x jiných mnohadávkových xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxx x dále u xxxxxx, která xxxxxxx x průběhu pokusu.

Xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, se xxxxxxx i x X xxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx makroskopicky postižené. Xxx xxx bylo xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx podezřelých z xxxxxxxxxxx se xxxx xxx podrobit mikroskopické xxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxx xx sumarizují x xxxxxxxxx, kde je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxx xxxxxxxxxxx zpracovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metoda.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje:

- xxxx/xxxx použitých xxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie nebo xxx zvířata přežila xx xxxxxxxx xxxxxx,

- tabulka uvádějící xxxxxxxx každého xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx a xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx,

- xxx, kdy byly xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X xxxxxxxx,

- xxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xx možné,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.35. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip testovací xxxxxx.

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Samci xxxxxxxxxx (X) generace xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx a xxxxxxx v průběhu xxxxxxx spermatogenního cyklu (xxxxxxxxx 56 dnů x myší x 70 dnů u xxxxxxx), aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx testované látky xx spermatogenezu.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (P) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, aby xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X době xxxxxxxxxxx xx testovaná xxxxx podává zvířatům xxxx xxxxxxx x xxxxx, x době xxxxxxxxx a xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxxxxxx F₁ x xxxxxxx růstu xx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx a až xx xxxx xxxxxxxxx X₂ xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx xxxx skupin - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (X) xxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx před zahájením xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx podávat x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx celého xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x nich známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Látka se xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx

Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx. Používají xx xxxxxx X xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx s nízkou xxxxxxxxx. Musí být xxxx charakterizována co xx xxxxx, kmene, xxxxxxx x xxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x obou pohlaví. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3 Počet x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx cca 20 březích xxxxx x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx získat xxxxxxxxxx xxxxx těhotenství a xxxxxxxxx, a xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x mateřské xxxxxxx, xxxxxx, xxxx x xxxxx potomstva generace X₁ xx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx X₂ xx xx odstavení.

1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx

Vodu a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se těhotné xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx porodních xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dostávají xxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxx použití xxxxx xxxxxxxxx skupiny, spárované xx xx xxxxxx.

Xxxxxxxxx látka v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx případě, xxxxx to xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky x její xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx toxicitu x xxxxxx xxxxxxxxx x rodičovské xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky, které xx xx daly xxxxxxx xxxxxxxxx látce, x nejnižší xxxxx xx xxxxxx vyvolávat xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, ani u xxxxxx ani x xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx hmotnosti. V xxxxxxx těhotných xxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx určeny xx xxxxxxx xxxxxxx hmotnosti x 0. xxxx 6. dni od xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxxx xxxx

V případě xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, pokud xx xxx dávka 1000 xx.xx-1 neprojevuje xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx vysoká xxxxx, vyvolávající jasnou xxxxxxxxx xxxxxxxx, nemá xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx studie na xxxxxx dávkových úrovních.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Plán xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx pro xxxx). Xxxxx se xxx xxxxxx x vyšetří xx xxxxx období xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx utraceni x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx pokusu.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx P začne xx pětidenní xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx xxxx tři xxxxx xxxxxx připouštění, x xxxx gravidity xx xx odstavení X₁ xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx znalostí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, např. o xxxxxxx xxxxxxxxxxx resp. x xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx generace X₁ xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.2 Postup při xxxxxxxxxxx

Xx možno xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx ke xxxxx xxxxxxx).

X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, samice xx xxxxxxx s týmž xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 týdnů. Každé xxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx vaginální xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx den nálezu xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.

Vzhledem x xxxxxx spermatogeneze, xxxxxxx xxxxxxxx X₁ xx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xx věku 11 xxxxx u xxxx x 13 xxxxx x xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X₁ xx xxxxxxx xxxxxxx páry x xxxxxxx xxxx téže xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx odstavu.

Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx vyšetřit x xxxxx xxxxxxx důvod xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx příležitosti x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx obou xxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx estrálního xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšetření xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx normálně x xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx standardizuje, je xxxxx dodržet xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx porodu xx xxxxxxxx všech xxxx xxxxxx vyřazením xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx na xxx; xxxxx to xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx standardizovat na xxxx xxxxx, např. 5 xxxxx a 3 samice. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx standardizovat. Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx F₂ xx xxxxxxx obdobně.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za xxx. Xxxxxxxx změny xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx prodlouženého porodu x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx jak xxxx, xxx během xxxx xxxxxxxxxxx. Během xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx denně. Xx xxxxxx a x průběhu xxxxxxx xx měří příjem xxxxxxx xx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X x F₁ xxxxxxx xx váží xxxxx xxx aplikace x pak xxxxx. Xxxxxxx pozorování xx xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxx mláďat, počet xxxxxxx a živých xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx čtvrtém xxx xx uchovají xxx vyšetření xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se spočítají x xxxx xxxx xx zváží xxxx xx porodu, xx 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx studie, kdy xxxx xxxxxxx zvážena xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxx x chování x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.3.5 Xxxxxxxxx.

1.3.5.1 Pitva

Všechna xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X x F₁ xx utrácejí, xxxxxxx xxxx xxxxx je xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx. Zvířata xxxxxxxx X₁ nevybraná xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X₂ xx xxxxxx xx odstavení.

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X a X₁ xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx patologické xxxxx, xx xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x další xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X x X₁ se uchovají xxx mikroskopické xxxxxxxxx. X případě, že xxxx xxxxxx nebyly xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studiích, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx X x X₁ xxxxxx xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku, xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx, x xxxx x zvířat, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx skupin xxxxxx, xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxx makroskopicky postižené. Xxx již xxxx xxxxxxx, reprodukční xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xx mají xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx sumarizují x xxxxxxxxx, kde xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx začátku xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx změn x procento xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxx xx xxxxxx kterákoliv xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje:

- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- údaje x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx a životaschopnosti,

- xxxx uhynutí x xxxxxxx xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx do ukončení xxxxxx,

- tabulka xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx utracením,

- toxické x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, potomstvo a xxxxxxxxxxx xxxx,

- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx hmotnost xxxxxx X x X₁ xxxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx mikroskopických xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx, xxxxx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx.

X.36. XXXXXXXXXXXXXX

1. METODIKA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx studie látka xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Látka resp. xxxx metabolity xxxx xxx podle účelu xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x exkretech.

Xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx s "neznačenou" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx se xxx, xxx xxxxxxxx co xxxxxxx informací x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx na laboratorní xxxxxxxx nejméně po xxxx xxxx dnů xxxx testováním. Xxxx xxxxxxxxx testování jsou xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx xxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, pregnantních xx xxxxxxxxxxxxxxx zvířat.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Toxikokinetické studie xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx více xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx by xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxx toxikologických studiích xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx by xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než ± 20 % průměrné xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx užije xxxxxxx 4 xxxxxx xxx xxxxxx jednotlivou dávku. Xxx xxxxxxxxx není xxxxxx přednost xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na obou xxxxxxxxx. Jestliže jsou xxxxxxxx xxxxxxxx odpovědi x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxx xxxxxxxx) je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.

Je-li studována xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx utracena v xxxxxx xxxxxxx bodu, xxx xxxxx časových xxxx, x nichž xxxx xxxxxxxxx prováděno.

Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx studie.

Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx x sledovaných xxxxxxxx intervalů, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxxx časových xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, ale xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxx 2 zvířata. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx to, aby xxx xxxxx xxxx. xxxx metabolity poskytla xxxxxxxxxx charakteristiky xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx

V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx 2 různé xxxxx testované xxxxx. Xxxx xx xx xxx nízká dávka xxxxx, po xxxxx xxxxxx pozorovány žádné xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx dávka, po xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx změny x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dávek xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Způsob xxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxxx studie by xxxx být prováděny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xx-xx xx xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxx používány x ostatních xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx, aplikována xx kůži, xxxx xxxxxxxx inhalačně xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx užitečné xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Navíc xxxxxx xx intravenózní xxxxxxxx látky xxxxx xxx získány xxxxxxxx xxxxxxxxx x distribuci xxxxx x organismu.

Xxxxxx by se xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxx xx měla xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx x příznaky toxicity x další xxxxxxxxxx xxxxxxxx údaje zaznamenávány xxxxx s údaji x jejich počátku, xxxxxxxxx x trvání.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx způsobem xxxxxxxxxx xxxxx. Ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.

1.3.1 Absorpce

Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx absorpce xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx¹⁾, a xx xxxx.:

- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, xxxxx, stolici, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx jejích xxxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxx biologické xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- porovnání xxxxxxxx xxxxx xxxx. jejích xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx látky x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx a xxxxxxxxx x xxxx získanými x referenční xxxxxxx.

1) V xxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx rozumí ta, xx které xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx způsobem, který xxxxxxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx dávky.

1.3.2 Xxxxxxxxxx

X současné xxxx xxxx dostupné 2 přístupy, x xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx schématu xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxx:

- xxx xxxxxxx celkotělové xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx kvalitativní xxxxxxxxx;

- kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovení koncentrací x xxxxxxxx testované xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx x orgánech xxxxxxxxx xx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po zahájení xxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxxxxxx případech xxxx. Xxxxxxxx testované látky x xx. jejích xxxxxxxxxx se x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx po xxxxxx xxxxx, x to xxx do xxxxxxxxx 95 % z xxxxxxxx množství nebo xxxxxxx 7 dnů xx počátku vylučování.

Xx xxxxxxxxxxx případech xxxx xxx potřebné xxxxxxxx xxxx vylučování xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x době xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxxxx

X určení xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx vzorky analyzují xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx třeba odpovědět xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxx prospěšné xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx získat z xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, sledováním poklesu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxxx se podle xxxx prováděné studie xxxxxxxxxx x tabulkách, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xx uvedou xxxxxxx x charakteristiky xxxxxxxxxxx xx vztahu k xxxx, xxxxx, xxxxx x orgánům (xxxxx xx xx relevantní). Xxxxxx vstřebávání x xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx metodami. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x navrženy metabolické xxxxx studované xxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- charakteristika xxxxxxxxx xxxxxxxxx, jestliže xxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx podání,

- xxxxxx(x) podání x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx x x xxxxxxx pozorované xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx testované látky x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx rozdělené xxxxx xxxxxxx, dávky, režimu, xxxx, xxxxx a xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxx vstřebávání x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx,

- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.37. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH XXXXXXXXX XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Při xxxxxxxxx a vyhodnocení xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx schopnost xxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx typ xxxxxxxxxxxxx, který xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx však xxxx xxxxx považovat xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Xx skupiny látek xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx metody xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx elektricky xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx anhydridy kyseliny xxxxxxxxxx, fosfonové xxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx thiofosforečných, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx způsobit xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, pozorovanou x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.

Xxxxxx neurotoxicita xx syndrom projevující xx ataxií, distální xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx a xxxxxxxxxx xxxxx s pozdním xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x nervové xxxxx.

1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx může být xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx používané xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, chemický název: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (TOCP).

1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx cholinergními účinky. Xxxxxxx se xx xxxx 21 dnů xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x paréza. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx inhibice XXX, se xxxxxxx x xxxxxx náhodně xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 hodin xx podání xxxxx. 21 dnů po xxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxx utraceny x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření vybraných xxxxxxxxx tkání.

1.5 Popis xxxxxx testování

1.5.1 Příprava

Xxxxx zdravé dospělé xxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx dostatečně xxxxx xxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx orálně xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx např. xxxxxxxxx olej, xxxxx xx doporučuje rozpustit, xxxxx velké xxxxx xxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx nemusely dostatečně xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx nebo určeny xxxx testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.6 Experimentální xxxxxxxx

1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx kura xxxxxxxx (Xxxxxx gallus xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx xx plemena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x chovají xx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.

1.6.1.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se zvířaty x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x pokusnými.

X xxxxx skupině má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx prvý x xxxxx den xx xxxxxx) a xxxx přežilo 21xxxxx xxxxxxxxxx.

Pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx xx může xxxxxxxx souběžně xxxx xx může xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx historie. Xx xxx aspoň šest xxxxxx, kterým xx xxxxxx látka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxx slepice xxx xxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx některý xx xxxxxxxxxx prvků xxxxx (xxxx. xxxxxxx, potrava, xxxxxxxx xxxxx).

1.6.1.3 Xxxxx xxxxx

Xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx slepic x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx dala xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx bude xxxxxxx x hlavní xxxxxx. Xxxxxx úmrtnost xx x této xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx cholinergní xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx ochranný xxxxxxxxx, o xxxxxx xx známo, že xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx použito xxxxxxx typů xxxxxxxxxxx xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx toxikologické informace xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx studii xx xxxx xxx co xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxx x výsledkům xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x hornímu xxxxxx xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxxx xxxxx xx neměly xxxxxxxx xxxxxxx dostatečného xxxxx zvířat pro xxxxxxxxx (xxxx) a xx 21 dnech xxx histologii (xxxx). Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xx použít xxxx xxxxxxx před xxxxxxxx cholinergními účinky.

1.6.1.4 Xxxxxxx test

Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx tuto studii, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx podle xxxxx x látek x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx očekávat, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x studii x xxxxxxx vyšší xxxxx. Xxxxxxx test xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx dávky.

1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx 21 xxx.

1.6.2 Xxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxxx prostředku, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx látka podána x xxxxxx xxxxx.

1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx látky. Xxxxxxx slepice xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x průběhu prvních xxxx xxx x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx po dobu 21 xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx plánu. Veškeré xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, včetně nástupu, xxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx chování. Xxxxxx se hodnotí xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny vyjmou x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx po xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, humánním xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx aspoň xxxxxx xxxxx.

1.6.2.3 Xxxxxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem x xxx slepice z xxxxxxxxx kontrolní skupiny (xx-xx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxxx v xxxxxxx dnech xx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx vyjmou xxxxx x lumbální mícha. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx n. xxxxxxxxxxx x analyzovat xxxx xxxx na xxxxxxxx XXX. Xxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxx x kontrolní x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxx xxx xx 48 hodinách, xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xx usmrcují xxxxx xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx klinických xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx pohybuje xxxxx xxxxxx (xxxxxxx xx nástup xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), pak xx xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx, a xx mezi 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx látky.

X xxxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx spontánní xxxxxxxxxx XXxX, což xxxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxx XXxX.

1.6.2.4 Xxxxx

Pitva x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxx špatný xxxxxxx xxxx) zahrnuje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mozku x xxxxx.

1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) se histologicky xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xx situ xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx podélný xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x lumbosakrální, x xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x n. tibialis (x xxxx xxxxx x m. xxxxxxxxxxxxx) x z n. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx a xxxxx.

2. XXXX A XXXXXX ÚDAJŮ

Xxxxxxxxx xxxxxxxx x účincích xxxxxxxxxxx touto metodou (xxxxxxxxx, histopatologie x xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx nebo neurčité xxxxxxxx mohou vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxx xx xxxx sestaví xx tabulky. Z xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx účinky, typy x xxxxxx těchto xxxxxxxxx xxxx účinků x procento zvířat xxxxxxxxxxxx každý xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx účinku.

Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx jevy u xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx již x xxxx xxxxxxxxx studie.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:

Xxxxxxxxx zvířata:

- xxxxxxx xxxxxxx;

- počet a xxxxx xxxxxx;

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.;

- hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.

Podmínky xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxxx výběru vehikula;

- podrobné údaje x xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx a kvalitě xxxx;

- zdůvodnění xxxxxxx úrovně dávek;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx látky;

- podrobné xxxxx x xxxxxx ochranného xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxx o tělesné xxxxxxxxx;

- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx klinických xxxxxxxx (xx vratných xxxx xxxxxxxxxx);

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky;

- xxxxxxx nálezy;

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx xx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x metodou XXXX TG 418.

B.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH XXXXXXXXX XXXXXXX 28XXXXX OPAKOVANÁ XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Při xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx důležité vzít x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx toxicity. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu byly xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x in xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, že látka xxxx xxxxxxxxxxxx.

Tento 28xxxxx test xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx zdravotním xxxxxx vznikajícím x xxxxxxx xxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Poskytne informace x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx dávce a xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx kritérií bezpečné xxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx této xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery nebo xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx amidofosforečné xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, thiofosfonových xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx jiné xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x některých xxxxx xxxx xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, distální xxxxxxxxxx, xxxxxxx v míše x xxxxxxxxxx nervu x pozdním xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x xxxx inhibicí a xxxxxxxxx specifické xxxxxxxx - XXX (neuropathy xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 28 dnů. Zvířata xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně, zaznamenává xx abnormální chování, xxxxxx x xxxxxx xxxxx 14 xxx xx poslední dávce. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxxxx x slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx skupiny 24 x 48 hodin xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Dva týdny xx xxxxxxxx dávce xxxx xxxxxxxxx slepice xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxx nervových tkání.

1.4 Xxxxx metody testování

1.4.1 Xxxxxxxx

Xxxxx zdravé xxxxxxx slepice xxx xxxxxxxxxxxxxxx virových xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx léčby x x normální xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx experimentální x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x podmínkách chovu x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx ohrady umožňující xxxxx pohyb slepic x xxxxxx pozorování xxxxx.

Testovaná xxxxx xx xxxxxx orálně, xxxxx 7 dní x týdnu, xxx xxxxxx, želatinovými xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxx,

jako xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx látek x želatinových tobolkách xx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx vstřebat. X xxxxxxxxx nosičů musí xxx známy xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Gallus xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx velikosti a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx dovolují xxxxx xxxxx.

1.4.2.2 Počet x xxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx.

X xxxxx xxxxxxx xx být xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx utraceno pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx ukončení expozice.

1.4.2.3 Xxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx výsledkům x xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x dalším xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx testované látky. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicity, nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx zvolí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Nejnižší xxxxx xx neměla vyvolat xxxxx xxxxxxxx toxicity.

1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti x xxx, za použití xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx pozorované toxické xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx x příbuznou xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx třeba xxxxxxxx x xxxxxx s xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx naznačuje potřebu xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.4.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Všechna xxxxxxx xx pozorují nejméně xxxxxx xxxxx po xxxx expozice x 14 dnů xx xx, xxxx xx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx plánu.

1.4.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se podává xxxx xxx v xxxxx xx 28 xxx.

1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx po začátku xxxxxx xxxxx. Všechny xxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx po 28 xxx a dalších 14 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx podle xxxxx. Xxxxxxx příznaky xxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxx xxxxxxx, typu, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, ale nemá xx na ně xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stupnice, xxxxxxxxxxx xx paréza. Xxxxxxx dvakrát týdně xx slepice xxxxxx x klecí a xxxxxxx nucené xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx vyloučit, xxxxxxxx xxxxxxxx utratit x xxxxxx.

1.4.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pak xxxxxxx jednou týdně.

1.4.3.3 Xxxxxxxxx

Šest xxxxxx xxxxxxx vybraných z xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx usmrtí x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx NTE xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx tkáň xx inhibici XXX. Xxxxxxx xx usmrcují xxx slepice x xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx skupiny xx 24 xxxxxxxx x xxxxx tři xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx údaje x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx jiná xxxx usmrcení po xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dobu a xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx.

X xxxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx provede xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). Xx vivo xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, což xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.

1.4.3.4 Pitva

Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx stav) zahrnuje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x míchy.

1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Nervová xxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxxxxxxxxx vyšetří. Xxxxx xx fixují xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Odebírá xx: xxxxxxx (střední xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxx xxxxx xx provádí x xxxxx xxxxx xxxxx, střední hrudní x xxxxxxxxxxxxx), z xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx distální xxxx x x. tibialis (x xxxx větve x m. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.

Nejprve xx xxxxxxx fixované xxxxx xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, provede xx histologické xxxxxxxxx x na slepicích xx xxxxxx, které xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ

Xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxx touto xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx neurotoxicitu. Neprůkazné xxxx neurčité xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxxx xxx jednotlivá xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx a xxxxxx poškození xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:

Xxxxxxxxx zvířata:

- xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx x xxxxx xxxxxx,

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx atd.,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.

Podmínky testování:

- podrobné xxxxx x xxxxxxxx, stabilitě x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx o potravě x xxxxxxx xxxx,

- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx podrobných xxxxx x vehikulu, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xxxx xxx 24 a 48 xxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxx,

- úroveň xxx xxxxxx (XXXXX),

- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx klinických xxxxxxxx (xx vratných nebo xxxxxxxxxx),

- xxxxxxxx xxxxx biochemických xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxx xxxxxx,

- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx xxxxx.

Xxxxxxx výsledků

Xxxxxxxxx x Interpretace

4. LITERATURA

Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 419.

B.39. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx

1. METODA

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx DNA Xxxxxxxxx (XXX) Test With Xxxxxxxxx Xxxxx Xxxxx Xx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx testu xxxxxxxxxxx syntézy XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx reparaci XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4).

Xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxxxxxxx xxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxxxxx DNA x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx jsou obvykle xxxxxxx místem metabolismu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx detekci poškození XXX in xxxx.

Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxxx test xxxxxx.

Výsledek xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (UDS) xx hodnotí xxx, xx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (S-fáze) xxxxxxxx XXX. Nejběžnější xx xxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (³X-XxX). Pro xxxxx XXX in xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx játra. Xxxx xxxxx xxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx však xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxx bází XXX, xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) je xxxx xxxxxxx. Dále xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Rozsah odpovědi XXX xxxxxx xxx x přesnosti xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxx xxxx xxxx s XXX reagovat, xxx xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, xx XXX xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Buňky x xxxxxxxx: xxx xxxxxxx xxxxx (NNG) xxxxx xxx určitá, xxxxxx xxxxxxxxx hodnota, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.

Xxx xxxxxxx grains (XXX): xxxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx UDS, xxxxxxxxx jako rozdíl xxxx xxxxxx xxx x jádře (XX) x průměrným xxxxxx xxx x cytoplasmě (XX): XXX = XX - CG. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx pro jednotlivé xxxxx a následně xxxxxxxxxxx na buňky x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx apod.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx DNA xxxxxxxxx, XXX): opravná xxxxxxx XXX xx xxxxxx x odstranění xxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Xxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo indikuje xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx excizi x xxxxxxxxxx segmentu XXX xxxxxxxxxxxx oblast xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx xxxx fyzikálním xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx obvykle x xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx XXX xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxxxxxx ³X-XxX se xxxxxxx stanoví xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx v S-fázi, xxxx xx např. xxxxxxxxxxx metoda.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Používají xx xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xx Všeobecném xxxxx v části X.

Xxxxxxx xx xxxx být 50 - 60 %.

1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Zdraví xxxxx dospělí xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí x xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx zvířata aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x kde xxxx xxxxx xxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx a xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx chemicky reagovat. Xxxxxxx-xx se xx xxxxxx známé rozpouštědlo, xxxx být jeho xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx kde xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.3.2 Xxxxxxxx

Do každého xxxxx je xxxxx xxx xxxxx pohlaví xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx zvířaty xx všech skupinách xxxxxx.

Xxxxxxxxx kontroly xx xxxx indukovat XXX xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx spontánní úroveň. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x dávkách xxxxxxxxx ke středně xxxxxx odezvě (4). Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnotiteli xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

Xxxx xxxxxx xxxxxx	Látka	XXX	XXXXXX
odběr x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx)	X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx	62-75-9	200-249-8
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 hodin)	X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX)	53-96-3	200-188-6

Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Xx možná xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx cestou, xxx xx xxxxxxxx testovaná xxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx skupiny negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, nebo xxx xxxxxxx.

Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx provádí, xxxxxxxx údaje xx xxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx expoziční xxxx, xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx podstatné xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pouze xx xxxxxx pohlaví, xxxxxxx xx samcích. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx látkám xxxx být pohlavně xxxxxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx xxxxxxxxx odpovídajícího xxxxxxx.

1.5.2 Dávkovací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx jednorázově.

1.5.3 Dávkování

Xxxxxxx xx používají xxx xxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx dávka vyvolávající xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx vyšší xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxx letální xxxxxx. Xxxxx dávka xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % dávky xxxxx.

Látky, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nejsou x dispozici, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx x téže xxxxxxxxxx x xx použití xxxxxxxx živočišného druhu, xxxxx, pohlaví a xxxxxxxxx xxxxxx, jaké xx pak použijí x xxxxxx xxxxxx.

Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxx (např. pyknotická xxxxx).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxx x jedné xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx v xxxxx xxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx očekávané xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávka.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx vpravuje xxxxxxxxx xxxxxx. V odůvodněných xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx i xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx, protože xx xx tím mohla xxxxx vystavit xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx objem kapaliny, xxxxx se dá xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx velikosti pokusného xxxxxxx x nemá xxxxxxxxx 2 xx/100 x hmotnosti xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx zdůvodněné. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx vykazují xxx xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, aby objem xxx ve xxxxx xxxxxxxxx úrovních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx se xxx objemová xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Příprava xxxxxxxxx xxxxx

Jaterní xxxxx xx z xxxxxxxxx xxxxxx zpracovávají xxxxxxx 12 - 16 xxxxx xx podání xxxxx testované látky. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx xx xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx xx 12 - 16 hodinách xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xx ovšem xxxxx xxxxxx i xxxx xxxx odběru vzorků, xx-xx to xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Krátkodobé xxxxxxx xxxxxxx jaterních xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx čerstvě disociované xxxxxxx buňky mohly xxxxxxxxx ke vhodnému xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).

1.5.7 Xxxxxxxxx XXX

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx xxxx (např. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX. Po xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xx potom xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx thymidinu, aby xx snížila xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Buňky se xxx promyjí, fixují x xxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx "xxxx xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx xx autoradiografické xxxxxx, exponují ve xxx (např. xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx stříbrná zrna. X každého jedince xx připraví xxx xxxx xxx xxxxxxxxx.

1.5.8 Xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx dostatečný xxxxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (např. pyknóza, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).

Preparáty xx xxxx xxxxxxxxx zrn xxxxxxxx. Vždy xx xxxxxxxxx dvou preparátech x každého xxxxxxx xx xxxxxxx hodnotí 100 xxxxx; pokud xx buněk xxxx xxx 100 xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x X-xxxx, ale xxxxx xxxxx v X-xxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx metodou se xxxxxxx stupeň xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx xxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx depozice xxxxxxxxxx zrnek.

2. ÚDAJE

2.1 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Xxxxxxxx xxxxxxxx údaje z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (NNG) xxxxxxxxx xxxxx XX od xxxxx NG. Počítají-li xx "buňky v xxxxxx", xxxx být xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xx mohou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx vybrat a xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Xxxxxxxx pro pozitivní/negativní xxxxxx xxxxxxxx:

xxxxxxxxx		(X) xxxxxxx XXX nad xxxxxx xxxxxxxxxx prahem, zdůvodněným xx základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx
	nebo	(XX) xxxxxxx NNG významně xxxxx než x xxxxxxxx kontroly
xxxxxxxxx		(I) hodnoty XXX xx xxxxxx/xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
	xxxx	(II) hodnoty XXX nejsou signifikantně xxxxx xxx souběžná xxxxxxxx.

Je xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, což xxxxxxx, xx je xxxxx vzít x xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx variabilita xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx - odpověď x xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx statistické metody; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit o xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Výsledky xxxxx být stále xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX xx savčími xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx vivo xxxxxxxxx XXX, xxxxx xxx xxxxxxx neplánovanou xxxxxxxx XXX xx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx XXX, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Je xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx dosáhne širokého xxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx tkáň (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud je xxxxx.

Pokusná xxxxxxx:

- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek xxx jednotlivé xxxxxxx.

Xxxxxxxx pokusu:

- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, xx se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx oběhu xxxx xx xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx vodě (ppm) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,

- podrobné xxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx vzorků,

- xxxxxx zjišťování xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk,

- xxxxxxx autoradiografická xxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Výsledky:

- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx, cytoplazmě a "xxx nuclear xxxxxx" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx,

- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx,

- statistické xxxxxxxxx, bylo-li provedeno,

- xxxxxx toxicity,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x pozitivních xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních kontrol xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- počet "xxxxx x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,

- počet xxxxx x X-xxxx, xxx-xx stanoven,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxx X.39. xxxx vložena xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001

X.40. XXXXXXX ÚČINKY XX KŮŽI

1. METODA

1.1 XXXX

Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Centre for xxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, ECVAM, Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxxxxx Commission) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx in xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na kůži: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx electrical resistance, XXX) x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx. Validizační studie XXXXX xxxxxxxxx, xx xxx testy dokáží xxxxxxxxxx rozlišovat xxxx xxxxxxx xxxxxxx leptajícími x xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x modelu xxxxxx xxxx xxxxxxxx správně xxxxxxxxxx jednotlivé stupně xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx způsobující těžké xxxxxxxxx xxxx X35, x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, X34). Je xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx; xxxxx xxxx oběma testy xxxxxx xx konkrétních xxxxxxxxxxx x na xxxxxxxxxxxx uživatele.

1.2 DEFINICE

Poleptání xxxx: způsobení xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kůže xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.

1.3 REFERENČNÍ XXXXX

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxxxx, viz xxxx xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.

1.4 PRINCIP XXXXXX - XXXX XXX XX KŮŽI XXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxxxxxx se nanese xx xxxx xx 24 hodin xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx odebrané x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx identifikovány xxxxx své schopnosti xxxxxxx xxxxxxxx integritu x bariérové xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.Xxxx xxxxxxxxx xx měří xxxxxxx xxxxxx inherentního transkutánního xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5kΩ) (4) (5). Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx látky TER xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X případě xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (jejichž xxxxxxxx viz x xxx. (6)) xx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxx zařadit xxxx xxxxxx barviva, xxx xx snížil xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx se x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).

1.5 XXXXX METODY - XXXX TER XX KŮŽI POTKANA

1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxx. Malými xxxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx srst x dorzální x xxxxx xxxxxx. Zvířata xx pak omyjí xxxxxxxx otíráním x xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx streptomycinu, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, x koncentracích inhibujících xxxx bakterií. Xxxxx xxxx xxxxxx den xx prvním xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx 3 dní xx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx být zvířata xxxxxx než 31 xxx.

1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx usmrtí, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xx xx xxxxxxx xxxxxxx přebytečný xxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) trubice, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx. Xxxx konec xxxxxxx xx přetáhne xxxxxx X-xxxxxxx, kterým se xxxx xxxxxx, a xxxxxxxxxx tkáň xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x O-kroužku xxxxxxx xxx. 1. Gumový X-xxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx TPFE xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Trubice xx xxxxxx do xxxxxx obsahující xxxxxx xxxxxx hořečnatého (154 xX), xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).

1.5.3 Xxxxx xxxxxxx

1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx stavu, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx povrch uvnitř xxxxxxx (obr. 2). Xx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx se xx xxxxxx v xxxxxxx množství, xxx xx xxxxxx celý xxxxxx epidermis, na xxxxxx látky xx xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx s xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx látek xxxx xxx dosáhnout xxxxxxxx xxxxx na 30 ^xX, aby xx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx prášek. Xxxxxxx xx vždy tři xxxxxxx xxx každou xxxxx. Xxxxx se xxxxxx xx dobu 24 xxxxx (viz xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx 30 ^xX tak xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, která x xxxxxxx xxxxxx, se xx napomoci vymýváním xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx zhruba 30 ^xX.

1.5.3.2 Měření TER

Transkutánní xxxxxxxxxx xxxxx (TER) xx xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx můstku xxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu xx xxxxx povrchové xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx několika xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx trubice xxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxxx x xΩ/xxxxxx (xxx. 2). Xxxxxxx elektrod x délku xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (silné) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx tak, xxx byla do xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xx receptorové xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xx dně. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx hranou xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx XXXX trubice (obr. 1), xxxx xxxxxxxxxx xx vliv xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx naměřený xxxxx xxxxx xxx 20 xΩ, xxxx xx být důsledek xxxx, že xxxxxxxxx xxxxx překrývá xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx tak, xx se PTFE xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx 10 xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx roztokem.

Průměrná xxxxxxxx hodnota TER xx akceptována, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx:

&xxxx; Xxxxxxxx	&xxxx; Xxxxx	&xxxx; Xxxxxxx odporu (xX)
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; 10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)	&xxxx; 0,5 - 1,0
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; xxxxxxxxxxx voda	10 – 25

1.5.3.3 Modifikovaný postup xxx povrchově aktivní xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx je xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxxx látek (xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx xxxxxxx XXX xxxxx nebo xxxxx 5 xΩ, xxx xx této xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx průniku (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxxxx, xxx se xxxxxxx x xxxxxxxx falešně xxxxxxxxx (2).

1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B

Po prvotním xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xx xx epidermální xxxxxx všech xxxxxxx xxxxxx xx 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxxxxxx vodě. Xxxxxxx xxxx se xxx zhruba xx xxxx 10 sekund xxxxxxxxx prudkým xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Tím se xx odstranit přebytečné (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Každý xxxxxx xxxx se xxx opatrně xxxxx x XXXX xxxxxxx x uloží xx xxxxxxx (xxxx. xx 20 xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx xxxx. Nádobky xx xx xxxx 5 minut jemně xxxxxx, aby se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (nenavázaného) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx do xxxxxxx x 5 xx 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) v xxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxx xxx inkubují xxx teplotě 60 ^xX. Po inkubaci xx terčíky xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxx po xxxx 8 xxxxx xxx xxxxxxx 21 ^xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxx xx pak xxxxx 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX v xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx xxxxxxx (XX) xxxxxxx se xxxx xxx cca 565 xx.

1.5.3.3.2 Xxxxxxx obsahu xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x xxxxxxx xx xxxxxxxx z xxxxxxx XX (molární extinkční xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xxx 565 xx xxxx 8,7 . 10⁴; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B se xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx hodnota. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx akceptována za xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx akceptovatelného rozsahu xxxx metody. Za xxxxxxxxxxxxxx rozmezí obsahu xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx látek xxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx:

&xxxx; Xxxxxxxx	&xxxx; Xxxxx	&xxxx; Xxxxxxx xxxxxx barviva (mg/terčík)
Pozitivní	10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	&xxxx; 40 - 100
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; xxxxxxxxxxx xxxx	&xxxx; 15 – 35

1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxx zvolit xxxxxx xxxx působení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx (xxxx. 2 hodiny) xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx schopnosti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx identifikaci xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxx působení.

Získané xxxxxxx XXX xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Prahová hodnota xxx leptavé xxxxxx 5 xΩ xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxx xxxxxx jiných xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxx okalibrovat xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnotu xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx při validační xxxxxx (3).

1.6 PRINCIP XXXXXXXX METODY - XXXX S XXXXXXX XXXXXX XXXX

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx 4 hodin na xxxxxxxxxxxx model xxxxxx xxxx, sestávající z xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx životnosti xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx "XXX reduction xxxxx" (MTT = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 difenyl xxxxxxxxxxx xxxxxx) pod xxxxxxxx xxxxxxx definovanou pro xxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxx vychází x předpokladu, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jsou xx, xxxxx dokáží xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx erozí) x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx buněčných xxxxxxxx.

1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX KŮŽE

1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx

Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx pocházet x xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx kritéria. Model xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Bariérová funkce xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx přiměřeně zachována. Xx xxx xxxxxxxx xxx, xx model xxxx xxxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxxxx xx nanesení xxxxx, x xxxxx xx xxxxx, xx xxxx xxx buňky xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx skrze xxxxxxx xxxxxxx neprocházejí. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x modelu xxxx být xxxxxxxxxxx x tomu, xxx xx dalo xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx. Xxxxxxxxx buněk (xxxxxx xxxxxxxxx velikostí xxxxxxx XXX, tj. XX hodnotou) xx xxxxxxxx látce xxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx xxxx ležet x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx x případě xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xx srovnání x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx hodnoty xxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx predikční xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).

1.7.2 Xxxxx xxxxxxx

1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (minimální xxxxxxxx 25 (μ/cm²). Xx-xx pevná, xxxxxx xx xxx, aby xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx zvlhčí, xxx se s xxxx zajistil xxxxx xxxx. Pokud xx xx xxxxx, pevné xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, že xx xxxxxx xxx široký xxxxxx látek (2). Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx fyziologickým xxxxxxxx.

1.7.2.2 Měření xxxxxxxxxx xxxxx

X xxxxxx životnosti xxxxx se xx xxxxxx xxxxxxxxx validizovaná xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá redukce XXX, o které xxxx prokázáno xx x xxxxxxx laboratořích xxxxxxxxx přesné x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx xx xx xxxx 3 xxxxx ponoří xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx xxxxxxx 20 - 28 ^xX. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx (extrakce rozpouštědlem) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx XX xxx xxxxxx xxxxx 545 x 595 nm.

1.7.2.3 Doplňující xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. mají xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxx okalibrovat xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx standardů xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xx validizační xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx nutné, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx použitá metoda xx xxxxxxx široké xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx standardů xxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx různými laboratořemi. Xxxxxxxxx musí xxxxxx xxxxxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxx definované xxxxx (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx studie xxxx být xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

1.8 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

1.8.1 Xxxx XXX xx xxxx xxxxxxx

Xxxxxxx odporu (x xΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx experimenty, xxxxxxxx xxxxxxx x z xxxx xxxxxxxx klasifikace.

1.8.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx

Xxxxxxx XX x xxxxxxxxx procento xxxxxxxxxxxxxxx buněk xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx a případné xxxxxxxxxx referenční látky xxxxxxx x tabelární xxxxx, x xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x opakované xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.9 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE XXXXXXXX

1.9.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx TER xxx testovaný materiál xxxxx než 5 xΩ, je xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxx XXX nižší xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (detergent) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, pak xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx účinky xx.

X povrchově aktivních xxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek, xxx poskytují xxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrole x 36 % XXx, je testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx má xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx menší, xx testovaná látka xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxx xxxxxxx účinky xxxx.

1.9.2 Test x xxxxxxx xxxxxx kůže

Hodnota XX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxx XX pro xxxxxxxxxx zkušební xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxxxx. Hraniční procentický xxxxx životaschopných buněk, xxxxx odděluje látky, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, od xxxx, xxxxx xxxxxxxxx způsobují, xxxxxxxxxx odlišuje jednotlivé xxxxx leptavých vlastností, xxxx xxx v xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx předtím, xxx xx metoda xxxxxxxxxx, x následnou validační xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, že je xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Zpráva x xxxxxxx pokusu

Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx údaje x xxx xx.

Xxxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxx xxxxx použitého xxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx TER) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk (test x modelem xxxxxx xxxx) pro testovaný xxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx standardní referenční xxxxx, a to xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;

- popis xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx 1

Obrázek 2

Metoda X.40. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001

X.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX IN XXXXX

1. XXXXXX

1.1 XXXX

Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (reakce), x xxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxxx vystavena xxxxxxx chemickým xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xx-xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx celkovém xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx získané x rámci xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dané testované xxxxx, xxxx xx xxxxxxxx, xxx daná xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x viditelnému xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx in xxxxx xx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a světla, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v kůži, x xxxxxxxxxx, jež xxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx nanesení xx xxxxxxx.

Xxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxx vypracován x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx alternativa xx vitro xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx testům xx xxxx. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx OECD xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx trestů pro xxxxxxxxx fototoxicity (4).

Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx účinky xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx vivo u xxxxxx a lidí x bylo xxxxxxxx, xx tento xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx x tomu, xxx xxxxxxxxxxx jiné xxxxxxxxxx účinky, jež xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx fotogenotoxicita, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxx xxxx látek xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, reaguje při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx umožňoval xxxxxxxxx xxxxxx fotoxicity.

Sekvenční xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx viz xxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxx: intenzita ultrafialového (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; xxxxxx xx X/x² xxxx x XX/xx².

Xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxx dopadajícího xx xxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx (= X x x) na xxxxxxxx xxxxxxx, např. X/x² xxxx X/xx².

Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx doporučení XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 nm) x UVC (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxx: za xxxxxxx mezi pásmy XXX x XXX xx často považuje 320 xx x XXX xx někdy xxxx xx UV-A1 x XX-X2 x xxxxxxx zhruba x 340 xx.

Xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: xxxxxxxx, xxxxxx xx měří celková xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. příjem xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx červeně, do xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx uspořádání xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx. životností (xxxxxxxxx) xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v porovnání x negativními xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxx + XX xxxx - UV), xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.

Predikční xxxxx: xxxxxxxxxx, kterým xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xx xxxxx x transformaci xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX x XXX.

XXX (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx stejně xxxxxxxx cytotoxických koncentrací (XX₅₀) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx (-XX) a v xxxxxxxxxxx (+UV) necytotoxického XXX/XXX xxxxxxx.

XXX (xxxx xxxxx effect, xxxxxxx xxxxxxxxx): nová míra xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.

Fototoxicita: akutní xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), xxxxx vzniká xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx kůže xxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kůže xx xxxxxxxxxx podání xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx xxxxx "fototoxicita", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxx x kůži xxxx, xx na ni xxxxxx (xxxxxxx nebo xxxxxx přijatá) xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vedou xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (reakce xxxxxxx xxxx xxx nadměrném xxxxxxx).

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx prvním působení xxxxx a světla xxxxxxxxxxx, a kdy xx zapotřebí xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx k xxxx, xxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxxx: genotoxická xxxxxx (xxxxxx) s xxxxxxxxxxx xxxxxxx, ke xxxxx xxxxxxx poté, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX záření x xxxxxxxxxxxxx látky.

Fotokarcinogenita: karcinogenita xxxxxxxx opakovanou aplikací xxxxxx x xxxxx. Xxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX zářením xxxxxxxx látkou, xxxxxxx x fotokokarcinogenitě.

1.3 XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxx chlorpromazinu jako xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, se xxx xxxxxxxx testu xx fototoxicitu 3T3 XXX xxxxxxxxxx použít xxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx porovnávání xxxxxx testu (1) (3) (13).

1.4 XXXXXXX XXXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx rysem xx xx, že xxxxxx xxxxxxxxxx světelnou xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Podle xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxx fotoreakce xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx by xx xxxxxxx, než xx xxxxx uvažovat x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx by se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x XX/XXX xxxxxxx (xxxxxxxxx podle zkušební xxxxxx OECD č. 101). Xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx koeficient xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx^-1 x xx^-1, xxxx xxxxx fotoreaktivní potenciál x není xxxxx xx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky xxxxxxxx xxx xxxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx dodatek).

1.5 XXXXXXX XXXXXX

Xxxx xxxxxxxx xxxxx mechanismy, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx světla (xxxxxxxxx) chromoforem xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7), přičemž xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx testované x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx necytotoxické xxxxx XXX/XXX xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx, XX) (9), 24 hodin xx xxxxxxxx testované xxxxx x ozařování.

Buňky Xxxx/x 3X3 xx xxxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx (monolayer). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx preinkubují xxx xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Jedna x obou destiček xx pak xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UVA/VIS záření x xxxxx 5 X/xx² XXX (+UV xxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxxxx xx xxx médium xxxxxxx médiem kultivačním x xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx uptake, XXX) xx dobu 3 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Pro xxxxxx x osmi xxxxxxxxxxx xx stanoví relativní xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxx procento hodnot x negativních kontrol. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx porovnají xxxxxxxxxxxx xxxxxxx reakce xxxxxxx x přítomnosti (+XX) x v xxxxxxxxxxxxx (-UV) xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx XX₅₀, xx. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x 50 % v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx bez xxxxxxxxx.

1.6 XXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx záření XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx provádět xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxx UVA. Xxxxx xx nasadí x xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, příští xxx se xxxxxxx xxxxxx UVA x xxxxx 1 - 9 X/xx² x xxxxx xxx xx xxxxxx NRU xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Buňky xxxxxxx kritéria xxxxxxx, xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxxxx xx ozáření dávkou XXX záření 5 X/xx² není xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxx XXX záření 9 X/xx² nemá xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx. Tato kontrola xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vůči xxxxxx XXX, běžný xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] x 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx (XxXX) xxxx xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx v témž xxxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxx (-UVA).

Životaschopnost xxxxxxxxxxx xxxxxxx: absolutní xxxxxxx xxxxxxx (XX_{540 XXX}) xxxxxx v XX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 10⁴ xxxxx nasazených x xxxxx xxxxx rostlo xxxxx dvou xxx xxxxx s normální xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxx hodnota XX_{540 XXX} x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx rovna 0,2.

Xxxxxxxxx kontrola: xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx vitro je xxxxx xxxxxxx souběžný xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx xxxx látka xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXX); xxxxx se xxxx xxxxx doporučuje. Xxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx protokolu x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxx definována xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: CPZ xxxxxxx (+UVA): XX₅₀ = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-UVA): XX₅₀ = 7,0 - 90,0 μx/xx. Fotoiritační xxxxxx (XXX), tzn. xxxxx hodnoty XX₅₀, xx xxx xxxxxxxxx 6.

Xxxxx XXX xx xxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xxxx xxxxxx x jiné známé xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx chemické xxxxxxx xxxx rozpustnosti xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) látky. X xxxxxxx případě je xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX₅₀ x XXX xxxx MPE (střední xxxxxxxxx).

1.7 XXXXX METODY

1.7.1 Xxxxxxxx

1.7.1.1 Buňky

Při validační xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněčná xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x to xxx x XXXX xxxx x ECACC; xx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx protokolu xx xxxx s xxxxxxxx xxxxxx x xxxx buňky xxxx xxxxxxx xxxxx, pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx; xx xxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.

X xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx kontaminovány xxxxxxxxxxxx, a smí xx xxxxxx jen x xxxxxxx, xx xx výsledek xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx UVA xxxxxx xxxx x počtem xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3X3 z xxxxxx x nejnižším xxxxxx, xxxxx možno xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx UVA xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx postupem xxxxxxxx xxxxxxx popsaným x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.7.1.2 Xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxxx pasážování xxxxx x xxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x inkubační xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 xx xxxxx x XXXX xxxxxxxxx 10 % séra novorozených xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, penicilinem a xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^xX / 7,5 % XX₂. Xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx dané xxxxx xxxx. buněčnou xxxxx.

1.7.1.3 Xxxxxxxx kultur

Buňky xx xxxxxxxxxx zásobních xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxx.

Xxx test xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx v takové xxxxxxx, aby na xxxxx xxxxx (xx. xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk 48 xxxxx xx nasazení) xxxxxxx xx xxxxxxxxxx (xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx vrstvu xxxxx). X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 xxxxxxxxxxxxx x destičkách x 96 jamkami xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 x 10⁴ xxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxx testovanou xxxxx se buňky xxxxxxxx identicky xx xxx destičky x 96 xxxxxxx, xxxxx xxx procházejí xxxxx xxxxxxxx xx identických xxxxxxxxxxxx podmínek, x xxxxxxxx xxxx, kdy xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx xx xxxxxxxxxx x temnu (-XXX/XXX).

1.7.1.4 Metabolická xxxxxxxx

Xxxxxxx xxx všech xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx genotoxického nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxx požadavkem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx k xxxx, aby působila xxxx fotoxin xx xxxx nebo xx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zapotřebí. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxx xx xxxxx, xxx xx vědecky odůvodněné, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx metabolickým aktivačním xxxxxxxx.

1.7.1.5 Xxxxxxxxx látka / xxxxxxxx

Xxxxxxxxx látka xxxx být xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxx stabilitě xxxxxxxxx, xx xx xx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx k fotodegradaci, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx pod xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx v Xxxxxxx vyváženém solném xxxxxxx (XXXX) xxxx xx fyziologickém roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, XXX), xxxxx - xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx během xxxxxxxxx - nesmí xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx složky xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx látka xx vodě xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx xx xxxxx v poměru 1 : 100 xxxxxxxxxx solným xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) xx všech xxxxxxxxx, xx. ve xxxxx koncentracích xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxx rozpouštědlo xx doporučuje dimethylsulfoxid (XXXX) xxxx ethanol (XxXX). Vhodná xxxxx xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxx třeba xxxx xxxxxxx zvážit xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, potlačení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx se napomohlo xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 ^xX.

1.7.1.6 Xxxxxxxxx UV světlem / xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx při xxxxxxxxx fototoxicity klíčovým xxxxxxxx. Xxxxxx x XXX a ve xxxxxxxxx oblasti je xxxxxxx spojováno s xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx XXX xx x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx od 313 xx k 280 xx xxxxxxx tisícinásobně. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx světelného xxxxxx xxxxx xxxxxxx požadavek, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, a xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx) postačující xx zjištění známých xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx délky x xxxxx xxxxxxxxxx poškozující xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx sem x xxxxxxxxxx xxxxx (infračervená xxxxxx).

Xx optimální xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx simulátory, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx tyto xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx výbojky a xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx výbojky - xx mají xx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxx a xxxx levnější, xxxxxxxx xxxxxx však imitují xxxx. Jelikož xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxx test xx fototoxicitu 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx záření, xxx xx složka XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Příklad spektrálního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xx x xxxxx (3).

Xxxxxxxxxx: intenzita xxxxxx (iradiance) xx xxxx pravidelně před xxxxxx xxxxxx fototoxicity xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru, který xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxx xx doporučuje xxxxxx xxxxx, referenční XX-xxxx xxxxx xxxx x kalibrace. Xxxxxxx xx, xxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx spektrální iradiance xxxxxxxxxxxx světelného zdroje x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx širokopásmového XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; taková xxxxxxxxxxxxx xxxxx vyžaduje xxxxxxxxxxxxxx obsluhu vyškoleného xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx studii xxxx zjištěno, xx xxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx² xx xxx buňky Xxxx/x 3X3 necytotoxická x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx fototoxické xxxxx. Xxx xx této xxxxx dosáhlo xxxxx 50 minut, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 xX/xx². Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx XXX xxxxxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx k průkazu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx expozice xx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce:

	dávka xxxxxx (X/xx²) x 100	&xxxx;
&xxxx; x (xxx) =	________________________	(1 X = 1 X x)
&xxxx;	&xxxx; xxxxxx (mW/mc²) x 60	&xxxx;

1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μg/ml, xxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xx zvyšuje četnost xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků (13). Xxxxxxx xX xxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx při použití xxxxxx (+UVA) x xxx něj (-XXX) xx xxxxx stanovit x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rozsah a xxxxxx koncentrační řady xx xxxxx xxx, xxx xxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ředění).

1.7.3 Popis xxxxxxx

1.7.3.1 Xxxxx xxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx 1 x 10⁵ buněk/ml x kultivačním xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx jamek 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx ostatních xxxxx se dávkuje xx 100 μl xxxxxxx suspenze x xxxxxxx 1 x 10⁵ buněk/ml (= 1 x 10⁴ xxxxx xx xxxxx). Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxx - xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX), druhá xxx xxxxxxxxx fotocytotoxicity (+XXX).

Xxxxx xx inkubují xx dobu 24 xxxxx (7,5 % XX₂, 37 ^xX), xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.

1.7.3.2 Druhý xxx

Xx inkubaci xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx odstraní a xxxxxxx dvakrát objemem 150 μx XXXX/XXX xx xxxxxx jamku. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx koncentraci xxxx xxxxx rozpouštědlo (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx přidává x xxxx xxxxxxxxxxxxx. Buňky x testovanou látkou xx inkubují x xxxxx xx dobu 60 minut (7,5 % XX₂, 37 ^xX).

Xxxx xxxxx s XXX (+XXX) xx xxxxxxx tak, že xx buňky za xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 50 xxxxx skrz xxxxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx zářením UVA x intenzitě 1,7 xX/xx² (= xxxxx 5 / xx²). Xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vody xxx xxxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx. Duplicitní xxxxxxxx (-UVA) xx xx dobu 50 xxxxx (= expoziční xxxx UVA) xxxxxxxxxx xx pokojové xxxxxxx x temném boxu.

Roztok xx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx médiem x přes xxx (18 - 22 xxxxx) xx xxxxxxxx (7,5 % CO₂, 37 ^oC).

1.7.3.3 Třetí xxx

Xxxxxxxxxxxxx hodnocení

Buňky se xxxxxxxxxx xxx mikroskopem x xxxxxxx xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx xx změny xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Tato kontrola xx doporučuje, xxx xx xxxxxxxxxxx experimentální xxxxx, xxx při xxxxxxxxxxxxx cytotoxicity nebo xxxxxxxxxxxx se tyto xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx červeně (XX)

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Promývací xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μl média x NR a xxxxxxxx xx xxx 37 ^oC ve xxxxxxxx atmosféře se 7,5 % XX₂ xx dobu 3 xxxxx.

Xx xxxxxxxx xx xxxxxx x XX xxxxxxxx a buňky xx promyjí xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx se xxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxxxx destičky xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx).

Xxxxx xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx na xxxxxxxx XX (čerstvě xxxxxxxxxx směs xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, dokud xx XX x xxxxx nevyextrahuje a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx optická xxxxxxx xxxxxxxx XX při 540 xx xx xxxxxxx slepého pokusu xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx uchovají xx vhodném xxxxxxx (xxxx. XXXXX) pro xxxxx xxxxxxx.

2. ÚDAJE

1.8 XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXX

Xxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx xxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx xx. Je-li xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx až xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl/ml x xxxxxxxxxxx xx xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx při ozařování (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx dojít x xxxx, xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxx muset xxxxxx xxxxx, xxx byl xxxxxx xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxx xxx -UVA, xxx xxx +XXX), xxxxxxxxx testování s xxxxxx rozestupem mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx modelu - xx xxxxx test xxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xx opakování xxxxx xx potřebné, xxxx xxx xxxxxxxx pozměnit xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx proměnnou x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxx xxxx opakování xx xxxxxxx těchto xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, triturace, xxxxxxxxxx). Lze xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx doby xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx jsou ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx významný vliv xxxxxxxx xxxx.

1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XX (XX₅₀). Xx xxx učinit xxx, xx xx xx xxxx koncentrace - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx metoda xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxx funkce nebo xxxxxxxxxx regrese) nebo xx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Než xx xxxxxxx EC₅₀ xxxxxxx xxx xxxxx výpočty, xx třeba xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. K xxxxxxx xxxxxxx XX₅₀ xx xxxx možno xxxxxx xxxxxxxx metody. X xxxxx případě xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx papír (xxx x: log, osa x: xxxxxx), xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

1.10 VYHODNOCENÍ XXXXXXXX (XXXXXXXXX XXXXXX)

1.10.1 Xxxxxxxxx model, xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx křivky xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx (+UVA), xxx za xxxxxxxxxxxxx (-XXX) xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx podle vzorce

	EC₅₀ (-XX)
&xxxx; (x) XXX =	&xxxx; ____________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+XX)

XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx PIF ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, xxxxxx xxx -XXX je xxxxxxxxxxxxx, xxxx se XXX xxxxxxxxx, i xxxx xx jedná x xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx má xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx xx vypočítat xxx. "&xx; XXX", xxxx xx test cytotoxicity (-XX) provede xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (C_max) x xxxx xxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxx:

&xxxx;	&xxxx; X_xxx (-XX)
&xxxx; (x) > PIF =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+UV)

Pokud xx xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", xxx xxxxx xxxxxxx &xx; 1 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxx XX₅₀ (-XX), xxx EC₅₀ (+XX), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, je xx xxxxxxxx xxxx, že xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx potenciál. X xxxxxxx případě xx xxxxxxx xxxxxxxx "XXX = *1", xxxx xx charakterizuje xxxxxxxx

&xxxx;	&xxxx; X_xxx (-XX)
&xxxx; (x) PIF = *1 =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; X_xxx (+UV)

Pokud xx dá xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, xx není xxxxxxxx xxxxx fototoxický xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxx (x) x (x) xx xxxxx xxx predikci xxxxxxxxxxxxx potenciálu vzít xxxxxxx x úvahu xxxxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxx dosáhlo.

1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, verze 2: xxxxxxx fotoefekt (XXX)

Xx xxxxx xxxx xxxxxx novější xxxxx xxxxxx xxx predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) a xxxxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxx studie xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx in xxxxx x xxxxx XX xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XXX x xxxx xxxxxxxxx, xxx nelze xxxxxx xxxxxxx XX₅₀. X tomto xxxxxx xx xxxxxxx veličina "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx průběhu xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx aplikaci xxxxxx XXX xxx na Xxxxxxxxxxx univerzitě x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx.

1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx výsledek xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx potenciál. Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxxx dojde xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx xxxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxx působit xxxx xxxxxxxxx také xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in xxxx. Xxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (100 (x/xx), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx schopnosti xxxx xxxxx nejspíše xxxxxxxxx xxxxxxx informací. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx alternativním xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx by xx látka xxxx xxxxxxxx i při xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, xx látka xxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx vivo se xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx byly xxx xxxxxxx koncentracích xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (EC₅₀ + UV a XX₅₀ - UV), xx interpretace dat xxxxxx. Naproti xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+UV xxx -UV) a xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx nedalo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xx možno xxxxxxxxx xxxxx test xxx xxxxx látku xx ne xxxxx xxxxxx x mělo xx xx uvažovat x xxxxx, potvrzujícím xxxxx (například x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xx xxxx nebo xx xxxx).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:

Testovaná xxxxx:

- identifikační xxxxx x xxxxx CAS, xx-xx xxxxx,

- fyzikální xxxxxx a xxxxxxx,

- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- stabilita x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxx rozpouštědla,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla v xxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx XXX).

Xxxxx:

- typ x xxxxx buněk,

- xxxxxxxxxxxx mykoplazmat,

- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xx něm:

- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx média,

- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx CO₂, xxxxxxx, xxxxxxx),

- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xx a po xx).

Xxxxxxxx pokusu (x) - xxxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx x xxx xxx,

- x případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x absence xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxx koncentrace,

- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx),

- doba xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (c) - xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx světelného xxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx světelného xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx),

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx systému,

- xxxxxxxxx XXX (x x X/xx²) xxx xxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,

- xxxxx xxxxxx XXX (xxxxxxxxx x xxx) x X/xx²,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxx XXX:

- xxxxxxx xxxxx x XX,

- xxxx inkubace x XX,

- inkubační xxxxxxxx (koncentrace CO², xxxxxxx, xxxxxxx),

- xxxxxxxx xxxxxxxx XX (extrakční xxxxxxx, doba xxxxxxxx),

- xxxxxx délka, při xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XX,

- druhová vlnová xxxxx (referenční), xxxx-xx xxxxxxx,

- xxxxxxx srovnávacího xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), xxxxx xxx xxxxxx.

Xxxxxxxx:

- životaschopnost xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x procentech xxxx xxxxxxxx životaschopnosti xxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx νx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk) získané xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +XXX x -XXX,

- xxxxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX₅₀ (+XXX) x XX₅₀ (-XXX),

- porovnání xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx - výpočtem xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (MPE),

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - souběžná xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxx xxxxxxx extraktu XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- kritéria akceptovatelnosti xxxxx (b) - xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx:

- xxxxxxx XX₅₀ (+UVA), XX₅₀ (-XXX) x XXX xxxxx použité xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx látky xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxx EC₅₀ (+XXX), XX₅₀ (-XXX) x XXX, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxx X.41. byla xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x účinností od 22.6.2001

Xxxxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxx č. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.

Xx xxxxx xxxxxx právního xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx právním xxxxxxxxx x.:

208/2001 Xx., xxxxxx xx mění vyhláška XX x. 251/98 Xx., kterou se xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx

x účinností xx 22.6.2001

Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Xx. xxx xxxxxx xxxxxxx předpisem č. 443/2004 Sb. s účinností xx 1.8.2004.

Xxxxx jednotlivých xxxxxxxx norem xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx aktualizováno, xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx právního xxxxxxxx.

1) §2 xxxx. 8 písm. x) xx x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a o xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., na ochranu xxxxxx xxxxx týrání, xx znění xxxxxx x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Sb., x. 243/1997 Sb. x x. 30/1998 Xx.

3) Směrnice Xxxxxxxxxx pro hospodářskou xxxxxxxxxx x xxxxxx xxx zkoušení xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx na xxxxxx (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx of Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu. Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.