Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
VYHLÁŠKA
Ministerstva xxxxxxxxxxxxx
xx dne 16. xxxxx 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro zjišťování xxxxxxxx chemických látek x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx §4 xxxx. 1 xxxx. c) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x změně xxxxxxxxx dalších zákonů:
§1
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických, toxických, xxxxxx xxxxxxxxxx, žíravých, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a toxických xxx xxxxxxxxxx (xxxx xxx "toxicita chemických xxxxx a xxxxxxxxx").1)
§2
(1) Xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx prováděnými xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze xxxx vyhlášky.
(2) Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických látek x přípravků xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x reprodukovatelné xxxx xxxxxx uvedené x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx2) x xxxxxx xxxxxxxxxx Organizací xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx (XXXX).3)
§3
Tato xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. xxxxx 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. David, XXx. x. r.
Xxxxxxx x xxxxxxxx č. 251/1998 Xx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx toxicity chemických xxxxx x přípravků
X. XXXXXXXXX XXXX
1. ZÁKLADNÍ XXXXX
1.1 XXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx nepříznivé účinky, xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx podání xxxxx xxxxx xxxxxx látky.
1.2 XXXXXX TOXICITA
xx xxxxxxxxx xxxxxx popisující xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx by být xxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx očekáván xxxxx těžkých xxxxxxxxx xxxxxxxx x pravděpodobně x úmrtí.
1.3 XXXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx vyjádřena xxxx xxxxxxxx (gramy xxxx xxxxxxxxx) nebo xxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx na kilogram xxxxxxx hmotnosti), nebo xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX
xx nejvyšší xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx xxxxx, xxxx xx to xxxxxxxxx xxxxxxx (včetně xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
1.5 DÁVKOVÁNÍ
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx dávku, frekvenci x xxxxxxxx dobu xxxxxxxx.
1.6 LD50 (STŘEDNÍ XXXXXX DÁVKA)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivá xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 % zvířat, xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx hmotnosti pokusného xxxxxxx (xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxxx xxxxx, která pravděpodobně xxxxxxx xxxx xx xxxxxx doby xx xxxxxxxx u 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx definovanou xxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx standardním xxxxxx xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 XXXXX
xx zkratka xxx "xx xxxxxxxx adverse xxxxxx level" (hladinu xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x xx xx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx expoziční xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx nedochází x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se objeví x xxxxxxxxx xxxxxx x důsledku opakovaného xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chemické xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx očekávané xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX TOLEROVANÁ XXXXX (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX XXXX)
xx xxxxxxxx xxxxx, která x zvířat xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.
1.11 XXXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx změn xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
je xxxxxxxx xxxx xx xxx po aplikaci xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx oka.
1.13 XXXXXXXXXXXXX KŮŽE (XXXXXXXXX XXXXXXXXX DERMATITIDA)
xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
xx vyvolání xxxxxxxxxx tkáňového xxxxxxxxx xxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 TOXIKOKINETIKA
xx studium xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.16 ABSORPCE
xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx vstupuje do xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx proces(y), kterým(i) xxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx metabolity xxxx xxxxxxxxxxxx x těla.
1.18 XXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx xxxxx případně xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x těle.
1.19 XXXXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. AKUTNÍ - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX A XXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo systémová xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity (metody X.1 - B.5), xx xxxxxxx xxxx xxx xx jediné xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx postupy od xxxxxxxxx testu xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XX50. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx definovat xxxxxxx hodnotu jednorázové xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pozornost xx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx utrpení zvířete, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) x metoda xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx (metoda X.1 xxxx). Xxx xxxxxxxxx xx jednom xxxxx xxxx xxxxxx na xxxxxx druhu xxxxxxx xxxxxx vyvozené z xxxxx xxxxxx. X xxxxx případě může xxx použita xxxxxxxxxx xxxxxxxxx metoda xxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx aplikací (xxxxxx X.7, X.8 a X.9) xx posuzují xxxxxxx účinky xxxxxxxxxx x xxxxxxxx opakované xxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat xxx, aby xx xxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx měly pomoci xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx studií xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx hloubky (xxxxxx X.26 - X.30 x X.33).
3. XXXXXXXXXX - GENOTOXICITA
Mutagenita xx vztahuje x xxxxxxx trvalých xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx. Tyto xxxxx ("xxxxxx") xxxxx postihnout xxxxxx xxx nebo xxxxxxxx xxxx, blok xxxx xxxx celé xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx změnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx stanoví xxxxx xx vitro xx genové (bodové) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.10).
Xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx in xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.12) xxxx xxxxxxx metafáze xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Je xxxx xxxxx dávat xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxxx a kontrolu xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx získaných xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; zkoumání xxxxxx nezachycených xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; zahájení xxxx rozšíření xxxxxx xx xxxx.
Xxx xxxx xxxxx zahrnují xxxxxx X.15 xx X.25 xxx eukaryontní xxxxxxx xx xxxx x xx vitro, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Tyto xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x bodových xxxxxxxx x jiných xxxxxxxx x organismech xxxxxxxxxxxx xxx baktérie xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Obecně xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx naplánovat tak, xxx xxxxxxxx relevantní xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx daný případ, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, výsledků xxxxxxxxxx bakteriálních x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxxxx rizika xxxxxxxxx xxxxxx u savců xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx organizmu, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (bodovými) mutacemi, xxxx. xxxxxxxxxx locus xxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx zárodečné xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (nezahrnuto x xxxx xxxxxxx), nebo xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx u myší (xxxxxx X.25). Těchto xxxxx xxx použít xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x velmi xxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxxx locus xxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxxxx závažných důvodů.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro danou xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x Národní xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx toxikologie.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx charakterizovány xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx mutagenity/genotoxicity. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Test xxxxxxxx xxx opakované xxxxxxxx, xxxxxx X.7, a xxxxxxxxxxxxx studie s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologických xxxx, např. xxxxxxxxxxx x určitých tkáních, xxxxx by mohly xxx také xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, podrobnější zkoumání xxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxx xxxxxxxxxxxxx (metoda X.32) xxxx xxxxx x kombinované xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.33).
X xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx chování buněčných xxxxxx, u kterých xx xxxxxxxxxxx souvislost x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx - xx xxxx (xxxxxx B.21). Používá xx několika xxxxxxx xxxxxxxxx typů a xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx.
5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Reprodukční xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx reprodukčních xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx (metoda X.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx vývojové xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx použity xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx metodu pro xxxxxxxxxxxxx reprodukční xxxx (xxxxxx B.35) xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx se zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxxx změn xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx změn x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Předběžné xxxxxxxxxx xx neurotoxicitu xxxx vzejít z xxxxx akutní xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci (metoda X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s neurotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx aspektu. Navíc xx xxxxxxxx vzít x xxxxx specifické xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx jisté xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx B.37 a X.38 po xxxxxxxxxxxx xxxx opakovaném xxxxxx xxxxx.
7. IMUNOTOXICITA
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, například xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xx následek xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx B.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vyžadující xxxxx, xxxxxxxxx zkoumání tohoto xxxxxxx.
8. TOXIKOKINETIKA
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx x toxicitě, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aspekty xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx, xx bude x xxxxxx xxxxxxx zapotřebí xxxxxxxx všechny xxxxxxxxx. Xxxxx x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx posloupnost toxikokinetických xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). U xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx ukázat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x jednorázovým xxxxxxx (xxxxxx X.36).
Xxxxxxxxx x chemické struktuře x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastnostech xxxxx také poskytnout xxxxx, xxxxxxxxxx odhad xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx aplikace, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx. Přispět xxxxx také xxxxxxxxx x toxikokinetických xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx relevantní xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx je xxxxx xxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx toxikologické xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx výběr xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx.
Vypracování xxxxxxxxxx metody pro xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testované xxxxx (x také xxxxx xxxxx xxxxxxx nečistot) x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx měl předcházet xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx zprávě x xxxxx.
10. XXXX X ZVÍŘATA
Pro xxxxxxxxxxxxx testy je xxxxxx kontrola xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx kterém xxxx zvířata chována, x xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx přizpůsobit xxxxxxxxxxx druhům. Xxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx je vhodná xxxxxxx xxxxxxxxx 22 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX při xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx techniky xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uvedeny x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx je x xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx pokusu.
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx a xxx xx dvanácti xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx pokusu.
Pokud xxxxxx nevyžaduje jiný xxxxxx, xxxxx být xxxxxxx chována xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx jedinců jednoho xxxxxxx, xx více xxx 5 xxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x pokusech xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x klecích x xxxxx zvířat chovaných x xxxxx kleci xxx během xxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxx xxxxx následující xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx výživy xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx výživová xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx působením xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx výsledků. Používají xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx látka podávána x xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vliv xx xxxxxxxx, nesmějí xxx přítomny x xxxxxxxxxxxxx, ve xxxxxxx xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX XXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxx testovacích metod xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Snížení xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx zvířat xxx dosáhnout xxxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (X.1.xxx) xxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx smrti xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x vyžaduje menší xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx třídy akutní xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx o 70 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxx X.1.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (metody X.1, X.2 x X.3), ale xxxx x xx vivo xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx X.11 x B.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx zbytečně xxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx je možné xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, je-li to xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx založeno xx fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx validizovaných xxxxx in xxxxx. Xxxxxxxxx, byla-li x xxxxxx xxxxxxxxx studie xxxxxx kožní xxxxxxxx x dávkou xxxxxxxxxx x limitním xxxxx (xxxxxx B.3) x xxxxxx-xx pozorováno xxxxx xxxxxxxxxx xxxx, další xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4) může xxx xxxxxxxx; látky, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4), nesmějí xxx xxxx testovány xx xxxxxxxx oka.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupy, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx testy xx xxxxxxxxx a budou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat, budou xxxxxxx xxxx utrpení xxxx xx úplně xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, následnou xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxx xxx, xxx xx xx xxxxx.
12. HODNOCENÍ A XXXXXXXXXXXX
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx pokusů xx xxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xx nutno xxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxx x omezené xxxx; xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxx, pokud xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x kvantifikovaných xxxxxx xxxxxxxx.
Tyto xxxxxxxx xxxxx být xxxx xxxxxxx pro xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nových x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx vložen xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.1. AKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxx sondou, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx dávky xx xxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx pozorované xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxx, která uhynou xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx především xxx pokusech na xxxxxxxxxx.
Zvířata xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkách x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivých vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx testem se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pokud xx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx jako xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx další xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx vhodných vehikulích xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx známy xxxx xxxxxx před xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx relevantní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. U xxxxxxxx xx xxxxx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx úpravou xxxxxxxxxxx, xxx xx zajistil xxxxxxxxxx objem xx xxxxx hladinách xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx vehikulu xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou známy xxxxxx xxxxx tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xx xxxxxxx xxxxx xx x obou pohlaví xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 5 hlodavců xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx x obou xxxxxxx xx výrazně xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx se zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x je třeba xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xx vyvarovat xxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x mají xxx xxxxxx odstupňovány tak, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxx, a xxxxx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x přijatelnou xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
S xxxxxxxx hlodavců xxx xxxxxxx limitní xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx popsaných xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx způsobí uhynutí, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx úplné xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Nelze ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, rychlosti xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx se projevy xxxxxx objeví x xxxxxx, x xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, kde xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx večer xxxx xxxxxx. U zvířat x vyšší rychlostí xxxxxxx výměny xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxx x pitné xxxx xxxx omezen. X xxx pokusu se xxxxxxx zváží x xxxxxxxxx xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxx x jedné xxxxx. Xxxx-xx možno xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx menších xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ještě 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx během určitého xxxxxx, může xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx - xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx poskytnout.
Xx podání látky xx xxxxxxxxxx provádění x xxxxxxxxxxxxx systematicky, xxx xxxxx xxxxx xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Během prvního xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxx pozorování. Xx xxxxxxxx sledovat x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxx na xxxxxxxx.
Xxxxxxx jednou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx denně s xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx studii, např. xxxxx xxxx zmrazení xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x centrální nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx nejpřesněji.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xx-xx to xxxxxxxxxx, odeberou xx xxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x cílem xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx nejsou výrazně xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx pohlaví xx xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný počet xxxxxx xx počátku xxxxxx, doba uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx s jinými xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx účinků a xxxxxxxxx nálezů. Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pak v xxxxxxxxx intervalech x x xxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx stanovit x xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánním způsobem xxxxxxxx x ohledem xx stres x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx látkou. XX50 xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx expozicí xxxxxx testované látce x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx abnormalit xxxxxx xxxx chování, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, makroskopických xxxx, xxxx tělesné xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx toxických xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx obsahovat tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.
- experimentální xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx hladiny xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx exponovaných xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx LD50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx úplný pokus, x xx pro 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx metody výpočtu),
- 95% meze xxxxxxxxxxxxx xxx XX50, xxxxx xx xxx xxxxxxxxx,
- křivky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x její xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx věnovat xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx během xxxxx xx vypočtenou hodnotu XX50),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.1. xxx XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX XXXXX DÁVKY
1. METODA
1.1 Xxxxxxx testovací metody
Xxxx xxxxxx toxicity xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx jedné xxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxxx x xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
X předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx xx sekvenčním xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx aplikaci sondou x xxxxxx xxxxx xxxxxxx, vždy xxxxx xxxxx xx dávku. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x vztahu xxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx minimální xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx v xxxx xxxxx etapě xxxxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xx látka xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pěti xxxxx x xxxx xxxxx x jedné z xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx, x xx jako xxxxx, xxxxx pravděpodobně xxxxxx "xxxxxxx toxicitu" (viz xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), ale xx xxxxxxx.
Xx podání xx pozorují účinky. Xxxxxxxx xxxxxxx výchozí xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx toxicitu, xxx xxxxxx mortalitu, xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx pozorována xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxx toxická xxxxxx xxxxxxxx humánní xxxxxxxx, xxxxx se znova xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx úrovni dávky.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx xxxxx" (xxx xxxx X - Všeobecný xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x předem xxxxxxxxxxx xxxxxx dávky, xxxxxx je možno xxxxx, xxxx xx xxxxx x úhynu (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx a přetrvávajícími xxxxxxxx stresu a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx dávkách a xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx užívané xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx by x xxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx 5 dní xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx orientační xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx každého x xxxx pohlaví.
1.2.1.2 Příprava x xxxxxxxx dávky
Xxxxx xx třeba, xxxxxxxx xx roztok xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx první uvážit xxxxxxx vodného roztoku, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x rostlinném xxxxx, teprve xxxxx xxxx xxxxx možnost xxxxxx v jiných xxxxxxxx vehikulích xxxx xxxxxxxx. X nevodných xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx určeny xxxx xxxxxx nebo xxxxx xxxx jejich xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx normálně xxxxxxxxx 10 ml.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; výjimkou xxxx xxxxx roztoky, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx by xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek.
Před xxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx. Potkanům xx xxxxxxx odebere xxxxx xxxx testem; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx pokusu se xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látka xx xxxx xxxxxx orálně x jediné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, lze xxxxx aplikovanou dávku xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ještě 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx - xxxxxxx x xxxx zvířatům xxxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, pokud nejsou x xxxxxxxxx údaje, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pohlavím. Xxxxx xx podávají xxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx dalšímu xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x cílem xxxxxxx xxxxxxx otravy xxxxxxx xx xxxx dní; xxxxx přetrvávají projevy xxxxx otravy xxxxx xxx, xxxxx xx xxxx pozorovat ještě xx dalších sedm xxx. Posuzují xx xxxxxxxxxxx výchozí xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dávka xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nutné xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xx měl xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx otravy, x o nejmenší xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxx xx vybrat xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxx první dávky 500 xx.xx-1. Jestliže xx po xxxxxxx xxxxx nepozorují xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx 2000 mg.kg-1, xx xxxxxxxxxx studie xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx. Jestliže xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx humánní xxxxxxxx, je xxxxxx dalšímu zvířeti xxxxxxxxx xxxxx dávka (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx xxxx zvíře xxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx vhodné dávky xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, že xx xxx xxxxx postupu xxxxxxxxx xxxx xxx 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx, xxxxx bude užita x xxxxx, xx xxx zvolena z xxxxx xx 4 xxxxxxx xxxxxx dávek, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx dalšího xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx zvolené xxxxx xxxxxxxx zřejmou xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx znovu testovat xx xxxxx vyšší xxxxxx dávek. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx vyžaduje humánní xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx vlivem xxxxx, xxxx xx xxx xxxxx xxxxx testována xx další xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx pozorována po xxxx pozorovací období.
Xx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxx x zaznamenat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze xx xxxx stanovit rigorózně. Xxxx xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx je možno xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx doba, xxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x doba xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx patrná xxxxxxxx x xxxxxxxx vzniku xxxxxxxxx příznaků.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx látky x nejméně xxxxxxxxx xx den xxxxx xxx. Xxxxxxx vykazující xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxx xx třeba xxxxxxx utratit. Častější xxxxxxxxxx xxxx prováděna xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx ukončen x xxxxxxx, když je xxxxxx, xx byla xxxxxxx xxxxxx vysoká xxxxx.
Pozorování xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se provede xxxxxxxxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx 3 xxx x potom xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxxxx do xxxxx xxxxx, xx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx makroskopické patologické xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
X závislosti xx xxxxxxxx předcházející úrovně xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx druhé xxxx výjimečně xxxxx xxxxxxx dávky.
V xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5 mg.kg-1 (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mortalitu xxx této dávce), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx toxicitu xxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx z xxxxxxxxxx x xxxxxx studie xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx jednotlivě pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Z ní xxxx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx; počet xxxxxx s příznaky xxxxxxxx; počet xxxxxx xxxxxxxxx během xxxxx xxxx utracených z xxxxxxxxx důvodů; xxxxx xxxxxxxxx účinků; xxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx účinek, který xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; xxxxxx průběh xxxxx toxických účinků; xxxxxxxx pitvy. V xxxxxxx, že zvířata xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx hmotnosti.
Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou látkou, xxxx zaznamenána jako xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- experimentální xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovní dávek,
- ve xxxxx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx (počet xxxxxxxxx xxxxxx; změny tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx utracených během xxxxx; počet xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; xxxxxx, stupeň x xxxxxx účinků),
- xxxxxx xxxxxx nástupu xxxxxxxxx příznaků x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, doba úhynu xx podání látky, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx utracení xxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- všechny histopatologické xxxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx a interpretace
Xxxxx | Xxxxxxxx | Interpretace |
5 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá toxicita | Xxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxx Xxxxx, xxxxx xxxx jedovaté Xxx xxxxxxxx při 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % xxxxxxx | Látky, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxx velmi xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx 5 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx u 500 mg.kg-1 | |
500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxx zdraví xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx x 50 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxx považovat xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Viz xxxxxxxx x 2000 xx.xx-1 | |
2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx zřejmé xxxxxxxx | Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx-1 Xxxxx, xxxxx xxxxxx významnou xxxxxx xxxxxxxx |
B.1. xxxx AKUTNÍ XXXXXXXX (ORÁLNÍ) - XXXXXX XXXXXXXXX TŘÍDY XXXXXX TOXICITY
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, tak xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx používá xxx xxxxx stanovených xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx bylo xxxxx testovanou látku xx xxxxxxx výsledků xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx metodu xxxxxxxx výběr tří xxxxxxxxxxx xxxxx stanovených xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx dávky xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx testování. Použití xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx dávek xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx žádoucí xxxx xxxxxxxx další zpřesnění.
Metoda xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dávky x xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx XX50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx x x xxxx xxxxxx xxxxxxx kritériem xxxxxx. Xxxxxxxx testu xxxx xxxxxxx klasifikaci xxxxx. Xxxxxxxx x sekvenčnímu xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx mohlo být xxxxx než postup xxxxxxx x xxxxxx B.1. Xxxxxx xxxxxxx xxxx metody je xxxxx spotřeba zvířat xxx u xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx)(B.1) x než u xxxxxxxxxxxx metody xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Látka xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xx stanovených xxxxx. Testování xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Přítomnost xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, x.x.
- není zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx krok xxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx, ale xx xxxxxxx druhého xxxxxxx;
- xxxxx krok bude xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxx metody
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx jednotlivých zvířat, x xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx zvyknout xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx mohou být x klecích xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx jasné pozorování xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dávce xxxxxxxxx sondou xxxx xxxxxxx kanylou.
Pokud xx xx xxxxx, testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxx nosiči. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxxxxxxx) x xxx roztoku x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx vehikula xxxx xxx xxxxx xxxxxx toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx stanovena xxxxx před xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx bez xxxxxxx (xxxx. potkani přes xxx a xxxx 3 - 4 xxxxxx); přístup x xxxx se neomezuje.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx březí.
Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxx xxxx se xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx kroku xxxx xxx použito xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx úroveň je xxxxxxx ze tří xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx měla xxx taková, xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx uhynutí alespoň xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxx dávce xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx diagramu xxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 1.
Pro výběr xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx informací x vztahu xxxxxxxxx x účinku. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx úrovni xxxxx (2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx žádné xxxxxxxxx o xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx - x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti.
V xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx jak xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx pevnými xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx o xxxxxx testování xxx xxxxxxxxxxx pevných dávkách xx výši 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 tělesné hmotnosti.
Nemají xx aplikovat xxxxx, x kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx účinky xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx x závažnosti toxických xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx druhého pohlaví xxxx xxx xxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx, dokud není xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přežila.
1.3.2.4 Xxxxxxx test
Limitní xxxx x jedinou úrovní xxxxx ve xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx třech xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, lze další xxxxxxxxx provést při xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 xx.xx-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx pozorování x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx pozorování by xxxx nemělo xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zotavovacího xxxxxx. Je důležité xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx jde-li o xxxxxxxx toxické příznaky. Xxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx zaznamenávána: xxxxxxx xxxx vedeny xxx xxxxx xxxxxxxxxx zvíře.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx období xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx zvážena. Po xxxxxxxx látky xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Kde xx xxxxx podávána xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxx být - v xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx potravu x xxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx může xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx vodných xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx byl podáván xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxx celou xxxxxxxx, je xxxxx xx aplikovat xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx testování jsou xxxxxxx x Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx den (den xxxxxxxx) xxxx častěji, xxxxx xx vyžaduje xxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx nalezena v xxxxxxxxx stavu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx humánně xxxxxxx: tato xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx stejně xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxx mrtvá, xxxx xxxxx je třeba xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxx pozorování se xxxxxxx, doku xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx kůži x xxxxx, na očích x sliznicích, a xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx, vegetativním x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx aktivitě x xxxxxxx. Pozornost xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x kómatu.
Veškerá pozorování xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x zaznamenávají xxxxx xxxxxxxxx. Na konci xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, než budou xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx testu, xx xxxxxxx pitva. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxx zaznamenány pro xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx dalších xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx orgánů xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx 24 x xxxx xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx být xxxxx x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx shrnuty xx tabulkové formy, xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x průběhu xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků, x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x interpretaci výsledků xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x Dodatku 2.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx získány:
Pokusná xxxxxxx:
- živočišný xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx znám;
- počet, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;
- zdroj, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx začátku xxxxx, xxxx v týdenních xxxxxxxxxxx x xx xxxxx testu.
Podmínky testování:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- podrobné xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx objemů x xxxx aplikace;
- xxxxxxxx údaje o xxxxxxx x kvalitě xxxx (xxxxxx xxxxx x zdroje);
- xxxxxxxxxx xxxxxx počáteční xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx údajů o xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx tabulek xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx (xxx. xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx);
- xxxxxx x xxxxxx průběh xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx x histopatologické xxxxxx x každého xxxxxxx, xxxx-xx k dispozici.
Diskuse xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda je xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX TG 423.
DODATEK 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxx xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx by měla xxx ta ze xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx uhynutí xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx x jiných xxxxx toxicity a
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. Příslušné xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx dávku. X xxxxxxxxxx xx počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx zvířat postupuje xxxxxxxxx xxx, jak xxxxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 25 nebo 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, obvykle xx xxx xxxx netestuje. Xxxxx xxxx přitom xxxxxx x ostatních 5 zvířat xxxxx xxxxxxx příznaky, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx úmrtí xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx možnost xxxxxxx, xx xxxxx pokračovat x xxxxxxxxx xx xxxxx úrovni xxxxx.
4. Xxxxx xx xxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx jedno xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx předpokládat, xx xxxxxxx XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx reakce xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx pohlaví: zřetelné, xxxxxxx xxxxxxx příznaky x těchto xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx klasifikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX50 xx xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx, xxxx mohou xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
5. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx doplňkovými xxxxx xxxxxxxxxxx dávkami (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx k xxxxxx alternativní xxxxx x xxxxx bodu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx testování xx dokončení xxxxxxxxx xxxxx varianty 1.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích xx xxxxx dávka, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx uhynulých nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu uhynulých xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rámečku xxxx xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Dodatku 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx na základě xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti
V xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx rámečky xx počet xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx šipek xx do xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě konečných xxxxxx uvedených v xxxxxxxxxx xxxxx rámečku xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x výchozí xxxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx do xxxxxxxx šedého xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx variantě 1
X rámečcích xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako druhé).
Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Xxxx rámečky xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" v xxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx klasifikaci. Po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nedosáhne xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx znamená, xx XX50 je xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx rámečku xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx tělesné hmotnosti
(b) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx variantě 1
x) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
c) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx hmotnosti
X.2. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxx
Xx xxxxxxxx před xxxxxxx získat xxxxx x rozdělení velikosti xxxxxx, xxxxx xxx, xxxxxxx tání, teplotě xxxx, teplotě vzplanutí x xxxxxxxxxx (jsou-li xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Potom xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, se pitvají.
Xxxxxxx se závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx nemají xxxxxxx x takových xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx to xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx testované xxxxx je třeba xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace testované xxxxx; v xxx xxxxxxx se xxxxxx xxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx. Pokud xx užije pro xxxxxxxxx aplikace vehikulum xxxx jiná xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Používá se xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxxx hladinu xx xxxxx použít nejméně 10 xxxxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx se x akutních testech xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx látky.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, a xxxx xxx xxxxxx odstupňovány xxx, aby byl x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx x mortality. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x, xxxxx je xx xxxxx, xxxx umožnit xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 xxxxx x 5 samic xxxxx x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 xxxx parám xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx látky x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (xxxx - x xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx vlastností xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx rizika xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) během 14 xxx x žádné xxxxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx pokusy xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba xxxxxxxx
Xxxxxxxxx doba xxxxxxxx xx xxx 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Vybavení
Xxx xxxxxx se zvířaty xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx dynamické xxxxxxxx xxxxxxx x výměnou xxxxxxx nejméně 12krát xx xxxxxx, xxx xxx zaručen přiměřený xxxxx kyslíku a xxxxxxxxxx rozdělení látky x expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx x xxxxxx celkový xxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Je xxxx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové expozice; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují příjem xxxxx jinými xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx stanovit rigorózně. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx reakcích, xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx doba, xxx se xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx otravy, xxxxxx xxxx doba xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx je patrna xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx bezprostředně před xxxxxxxx xxxxx. Exponují xx xx xxxx 4 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx mělo xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx pokusu má xxx 22 xX ± 3 x X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být ideálně xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx to xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x aerosoly). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx tlaku xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx nepodává potrava xxx xxxx.
Používají xx vhodné systémy xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx zaručovat, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Konstrukce x provoz xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxxxxxx x komoře.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně),
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx v xxxxxxx xxxx alespoň xxxxxxx xxxxx expozice (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx častější xxxxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx o xxxx než ±15 %. X xxxxxxxxx aerosolů, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, xxx je to xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx týká xxxxxx x aerosolů, xxxx xx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx xxx xxxxx, xxx to pokus xxxxxxxx (xxx nejméně xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu),
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx i xx xxxxx skončení xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky. Xxxxx zvíře xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx dne xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pracovní xxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Xxxxx každodenní xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mají sloužit xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx nebo zmrazením xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx vnějšímu xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x kómatu. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx zachytit xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se stanovuje xx xxxxxxxx týdně x v xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx zřetelem xx xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x odeberou se xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenat, xxxxx zvířata xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx k bolestem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx. LC50 se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se hodnotí xxxxx - pokud xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, změn xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx umístění xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx je používán. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- údaje o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx odchylkou). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x inhalačním zařízení;
x) teplota a xxxxxxx xxxxxxx;
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Xxxx.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látek x xxxxxxx (např. xx xxxx) je xxxxx uvádět xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, xxxxx xx xx možné, xxxxxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxxxxx.
d) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx;
e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
f) xxxxxxxxxx xxxxxx aerodynamického průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);
x) doba xx xxxxxxxx rovnováhy;
x) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx byla humánně xxxxxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx exponovaných xxxxxx);
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx utracení xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- xxxxxxx XX50 xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x uvedením metody xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx je xxxxx xxx stanovit);
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) a její xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxx xxxxxx stanovení);
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx utracení zvířat x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50);
- interpretace xxxxxxxx.
X.3. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x takových xxxxxxx x takovým xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxxx značnou bolest x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx v pokusných xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních skupin. Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xx zádech xxxxxxx xxxx oholí. Xxx xxxxxxxx nebo holení xxxxx xx třeba xxxx xx to, xxx xx nepoškodila (xxxx. xxxxxx) kůže, xxx by mohlo xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Při xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx formě, xx třeba xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx brát x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxx, x xxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxx xxxx, a xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vybrat ten, xxxxx nejvíce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná zvířata
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx králíků. Xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx pro xx důvody. Xx xxxxx xxxxx známé xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx testu xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Používá-li xx samic, musí xxx nullipary a xxxxx být březí. Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx z obou xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx zvážit xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Má být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, nejméně tři, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických xxxxxx x xxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxx x úrovních xxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxx xxxx leptavé xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, a xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 s xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx úplnou studii.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx být xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Měla xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx otravy, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx doba, xxx xx xxxxxxx otravy xxxxxxx a xxxxxx x xxxx do xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx je patrná xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx, která xxxx xxx 10 % celkového xxxxxxx xxxx. Xxx vysoce xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx; mělo xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na co xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, aby xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X zamezení xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, úplnou xxxxxxxxxxxx xxxx nelze xxxxxxxxx.
Po uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxx xxxx nebo jiným xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx očištění xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx je třeba xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx vést xxxxxxxxxx záznamy. Xxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxx často. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx pracovní xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx sloužit xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xx kterou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx x xxxxxxx, x také dýchání x krevního oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xxxxx přežijí až xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx patologické změny xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Hodnocení toxicity x xxxxxxx pohlaví
Xx dokončení studie xx xxxxxx xxxxxxx xx podá xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrazně xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx odůvodněno xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx je x xxxxxxxxx spolehlivá xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx třeba stanovit x xxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xxxxxxx déle než xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx stres x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx touto látkou. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Xxxx xx hodnotí xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x stupněm všech xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lézí, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu pokusu xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxx xxx.,
- podmínky pokusu (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (včetně vehikula, xxxxx xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat,
- tabulky xxxxxxxxx xxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxx (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx humánně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx látky, důvody x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx,
- hodnota XX50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx xxx 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx xxx xxx xxxxxxxx),
- křivka xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx a xxxx xxxxxxxx (pokud je xxxxxxxxx danou metodou xxxxx),
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx testů xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx LD50 v xxxxxxxxxxx x utracením xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu),
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.4. XXXXXX XXXXXXXX (KOŽNÍ XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxx
Xx třeba xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx s xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat výrazné xxxxx xxxxxx. Následující xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pro posouzení, xxx je xxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zda není xxxxxxxxx xxxxx testování.
x) Fyzikálně-chemické xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx látky (xxxx. xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX rovné xx xxxxx 11,5) xxxx xxxxx testovat xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx leptavé účinky. Xx xxxxx xxxx x xxxxx také xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxx dostupné xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vitro xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx test.
c) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxxxx xxxx látka v xxxxx akutní xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxx dávky (2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti) x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kůže, xxxx xxxxx dále xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx testovat xxxxx xxxxxx toxické xxx dermální xxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx době xx odečte, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx podráždění, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx musí xxx dostatečně dlouhá, xxx xxxx možné xxxx zhodnotit také xxxxxxxxxxxxx pozorovaných xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Asi 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx holení srsti xx xxxxx xxxx xx to, xxx xx nepoškodila kůže (xxxx. xxxxxx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx, xxxxxxxxxxx kůží.
Xxxxxxx xxxxx králíka xxxx xxxxxxxx husté xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x některých obdobích xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx zóny xxxxx xxxxx xxxxx.
Xxx pokusech s xxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx byl xxxxx xxxxxxx x kůží. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nutné brát x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx podráždění xxxx testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx použít různé xxxxx savců, xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx x in xxxxx screeningových testů xxxx jiných xxxx xxxxxxxxx, že látka xxxx vyvolávat nekrózu (xxxx. je xxxxxxx), xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx zvířeti. Jestliže xxxxxxxx tohoto xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxx jsou xxxxx nejméně xxx xxxxxx dospělá xxxxxxx. Xxxx xxxxx zvláštních xxxxxx xxx neošetřenou xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nejednoznačných xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx zvláštní xxxxxx xxx xxxx postup, xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 g xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x testu xxxx vlastní xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx pozorování
Dobu xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxx vyhodnotit vratnost xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx třeba xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx xx aplikaci.
1.2.3 Xxxxx postupu
Zvířata xx chovají xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Testovaná xxxxx se nanese xx xxxxx plochu (xxx 6 cm2) xxxx x xxxxxxx xx plátkem mulu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx náplastí. X xxxxxxx x xxxxxxxxx past xxxx xxx vhodné xxxxxx xxxxxxx testovanou xxxxx xx mul, x xxx xxx připevnit xx xxxx. Xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx okluzivním xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxx x mulu x xxxxx přijmout xxxxxxxxxx xxxxx orálně xxxx xx vdechnout.
Na xxxxx doby xxxxxxxx xx xxxxx odstranit xxxxxx testovanou látku xxxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx případná xxxxxx xxxx nebo celistvost xxxxxxx.
Xxxx expozice xx xxxxxxx 4 xxxxxx.
Pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx, že látka xxxx xxxxxxx nekrózu (xxxx. xxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx. na 1 xxxxxx nebo 3 minuty). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 plátky xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx akutní xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx pozorována xxxxxxx xxxxx xxxxxx, odstraní xx xxxxx xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx a xx neodporuje principu xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx třetí xxxxxx xx 4 hodinách x klasifikují xx xxxxxx xxxxxxxx kůže. X případě, že xxxx možná 4xxxxxxxx xxxxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x humánních důvodů (xxxx. jestliže xx 4 xxxxxxxx expozice xx xxxxxxxxxx nekróza xxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxx. nekróza) xxxxxxxxxx xx 3 minutách xxxx xx 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx ukončen.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx navrhnout xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx pokud xx odpovídá očekávanému xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx u xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx kůže xx 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxx xxxxxxxxxx kůže xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx dále. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx závažné xxxx xxxx xxxxxxxxx (nevratná xxxxxxxxx xxxxx xxxxx) x jiné xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, maskovaných zabarvením xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx třeba použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx měření tloušťky xxxxx řasy.
2. XXXXX
Xxxxx se sestaví xx tabulky. Z xx xxxx být xxx xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x edému xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx rovněž xxxxx všechny xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, reverzibilitu xxxx xxxxxxxxx x všechny xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu obsahuje xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx přípravy x čištění kůže, xxx xxxxxx: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- ve xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx xxx každém xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 x 72 xxxxx atd. xx odstranění mulu),
- popis xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,
- diskuse výsledků,
- vyhodnocení výsledků.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx | |
1. Xxxxxxxxx erytému x xxxxxxxxx | |
1.1 Xxxxx xxxxxx | 0 |
1.2 Velmi xxxxx erytém (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx erytém | 2 |
1.4 Xxxxx xx výrazný xxxxxx | 3 |
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx poškození - xxxxxxx) znemožňující xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Xxxxxxxxx edému | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx lehký xxxx (xxxxx viditelný) | 1 |
2.3 Xxxxx edém (xxxxxx xxxx zřetelné, xxxxxx xx ohraničena xxxxxxxxx vyvýšením) | 2 |
2.4 Xxxxx edém (xxxxxx vyvýšeny xxx x 1 xx) | 3 |
2.5 Výrazný xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 xx x xxxx přesahujíce xxxxxxx exponované xxxxxx) | 4 |
4.2 Klasifikace xxxxx indexu kožní xxxxxxxxxxx (XXX)
XXX xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx a xxxx x jednotlivých xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a x takto xxxxxxxxx xxxxxx u xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | IKI |
nedráždí | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx dráždí | 0,5 &xx; XXX ≤ 3 |
středně xxxxxx | 3 &xx; XXX ≤ 5 |
silně xxxxxx | XXX > 5 |
X.5. XXXXXX XXXXXXXX (XXXX DRÁŽDIVOST)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
1.1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx podmínek, xxxxx xxxxx xxxxxxx těžké xxxxxx. X xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx reaktivita. Xxxx. xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx v xxx xX xxxxx xx xxxxx 2 nebo xX rovné xx xxxxx 11,5, xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Je xxxxx xxxx v úvahu xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rezervu.
x) Xxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studií; xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx silně xxxxxxxxxx vlastnostmi xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, xx tyto xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx metodou.
x) Xxxxxxxx xx studií xxxxx dráždivosti. Xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx zřejmé xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx dráždivost xxx xxx, xxxxxxx lze xxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx x xxxxxxxxxxx dávce xxxxxxxx xx xxxxxxx oka xxxxxxxx pokusným xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx intervalech xx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x reakce xx xxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx posouzení účinku. Xxxx pozorování musí xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx zhodnotit také xxxxxxxx nebo nevratnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
24 xxxxx xxxx testem xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetření xxxx očí. Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxxx defekt xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx druhy xxxxxxxxx zvířat, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet zvířat
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx výsledky tohoto xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxx xx výrazně xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxx leptavé (irreversibilní xxxxxx) účinky xxx xxx xxx použití xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivosti x xxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aspektů xxxxx xxx případně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří xxxxxx. Xxxxxxxxx nejednoznačných xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx
Při xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,1 ml. X xxxxxx látek, xxxx x xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxx 0,1 xx nebo xxxxxxxx xxx 0,1 x (xxxxxxxx xx vždy xxxxx xxxxx). Jedná-li xx x tuhou xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, je třeba xx xxxxxxxx na xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx po xxxxxxxx zhutnění, např. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxxxxx xx sprejích x xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nádobkách xx xxxxx vystříknout x xxxxxx 0,1 xx xxxxx x xxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx doby xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx stačí 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx oka tak, xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx. Xxxxx se pak xxx na 1 xxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxx látka xxxxxxxxxx. Druhé xxx, xx xxxxx xx xxxxx neaplikuje, slouží xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx předpokládá, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx bylo xxxxxxxxx, že následkem xxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxx zvolit xxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx způsobem se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx oko.
Xxx xxxxxxxxx zvířat je xxxxx xxxxxxx nejdříve 24 xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xx 24 xxxxxxxx xx možno xxx xxxxxxxxxxx, pokud xx xx považuje xx xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx podráždění, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx. X xxxxxx případech xx doporučuje xxxxxx 3 králíky. Xxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx průtoku, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pozorování x xxxxxxxxxxx
Oči xx xxxxxxxxx po 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Neprojevují-li xx xx 72 xxxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxx lézí, xx xxxxx zkoušku xxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx rohovky xxxx xxxx příznaky xxxxxxxxxx xxx tak, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x jejich xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx na rohovce, xxxxxxx x spojivce xx xxxxx zaznamenat x xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx.
Intenzitu xxxxxx oka xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx možnosti xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx možno xxxxxx ilustrovanou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx oka.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxxxx zařízení. Po xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 24 xxxxxxxx je xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxx pokusné zvíře xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x daném intervalu xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lézí x všechny xxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- experimentální xxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),
- x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx (např. po 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx,
- podrobný xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx zjištěného podráždění x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx body (1, 24, 48 x 72 hod.), např. xxxxxxxxxx xxxxx, oční xxxxxxxxx, fluorescein atd.,
- popis xxxxx xxxxxxxxxx mimoočních místních xxxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxx na xxx
Hodnota | |
A. Xxxxxxxx - xxxx | |
Edém xxxx xxxxxxxx | 0 |
Slabý xxxx xxxxxxxxxx mžurku | 1 |
Xxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx | 2 |
Edém způsobující xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxx | 3 |
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx na polovinu xxxx xxxxx | 4 |
X. Spojivka - xxxxxx | |
Slzení xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxxxx (xxxxx odlišit xx xxxxx sekrece xx xxxxxxxx xxxxxx) | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček a xxxxx x xxxxxxxxx xxx | 2 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x srsti v xxxxxxx xxxxx xxx | 3 |
X. Spojivka - xxxxxxx | |
Xxxxx xxxxxx normální | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx | 1 |
Splývající cévní xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, difusnější xxxxx xxxxxxx barva | 2 |
Difuzní tmavě xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Duhovka - xxxxxxxx | |
Anomálie nejsou xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxx více těchto xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx na xxxxxx je zachovaná, xxxxxxxx opožděná | 1 |
Xxxxxx xx světlo xxxx xxxxxxxx, rozsáhlé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx | 2 |
v xxxxxxx (xxxxx xxxx více xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx) | |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxx diseminovaného xxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxxxxxx xxxxx viditelné | 1 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxxxx, detaily xxxxxxx xxxxx zastřené | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxxxx stěží viditelný | 3 |
Xxxxx neprůhlednost xxxxxxx, xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xx ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx neprůhlednosti ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; plocha neprůhlednosti ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
plocha xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx indexu xxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx oční xxxxxxxxxxx (IOI) pro xxxxx zvíře x xxxxx interval xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx
XXX = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx interval xxxxxxxxx xx vypočte xxx xxxxx xxxxxxxx hodnocení xxxx xxxxxx z XXX.
Xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx XXX xx roven nejvyššímu XXX xxxxxxxxxx x xxxxxxx testu
4.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx dráždí | 30 - 59,9 |
xxxxx xxxxx xxxxxx | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
B.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx jsou považovány xx významné xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity x oblasti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx senzibilizačním xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx volbě xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx průniku xxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx lze xxxxxxxx xx testy s xxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rozpuštěním nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Freundově kompletním xxxxxxxx (XXX), a xx testy xxx xxxxxxxx.
Xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx pravděpodobného senizibilizačního xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx Xxxxxxxxx kompletního xxxxxxxx, x xxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxxx (Guinea-pig Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) je xxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxx. Ačkoliv k xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx senzibilizační reakci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xx GPMT xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s adjuvans.
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látek jsou xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xx xxxx Xxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
X určitých případech xxx xxxxxxxxx volbu Xxxxxxxxxx testu s xxxxxxxxxx xxxxxxxx spíše xxx xxxxxxxxxxxxx injekci xxxxxxxxxx v maximizačním xxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx Buehlerova xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou popsány xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxx (GPMT) x Xxxxxxxxx xxxx. Lze xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx odborné xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx.
Pokud xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dá pozitivní xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx testování xx xxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx provést xxxx na morčeti, xxx jak xx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx zprostředkovaná xxxxx xxxxxx xx látku. X xxxxxxx mohou xxx xxxxxx charakterizované xxxxxxxx, zarudnutím xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, puchýřky, xxxxxx (xxxxxxx puchýři) xxxx kombinací xxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx druhů xx xxxxx xxxxxx xxxxx x může xxx xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx přecitlivělosti.
Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxxxxxxx.
Provokační xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx reakcí xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Citlivost x xxxxxxxxxxxx použité xxxxxxxxxxxxxx metody xx xxxx xxx xxxxxxxxx každých xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx známo, že xxxx xxxxx až xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx.
X xxxxxxx provedeného xxxxx se očekává xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nejméně 30 % x xxxxxx x adjuvans a xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx XXX | Číslo EINECS | xxxxxxxx název | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | alfa-hexylcinnamaldehyd |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-merkaptobenzothiazol | xxxxxx |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx xxxxxxxx p-aminobenzoové | xxxxxxxxx |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxx odborném zdůvodnění xxxxx xxx použity xxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx výše uvedená xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx testované látce xxxxxxxxxxxxxxx injekcemi xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Po xxxxxx 10 až 14 xxx (xxxxxxxx xxxxxx), x průběhu kterého xx xxxx rozvinout xxxxxxxx reakce, jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx provokační xxxxx. Rozsah x xxxxxx kožní xxxxxx xx provokační expozici x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx podstoupí xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx a xx xxx aplikována xxxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Popis xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku, xxxxxxx xx to x použitím xxxx xxxx vhodného rozpouštědla xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx kožní xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.1 Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxxx (XXXX)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aklimatizují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx aspoň 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx stříháním, holením xxxx chemickou xxxxxxxx, x závislosti xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx xxxxx dbát xx xx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx se xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Počet x pohlaví
Xxx xxxxxx samce x xxxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx tvoří xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxx 5 xxxxxx xx xxxxx x kontrolní skupině. Xxxxxxx-xx se menšího xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx morčat x xxxx xxxxx dojít x xxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxxxxxxx, doporučuje xx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxx 20 testovaných x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, kterou xxxxxxx xxxxxxx dobře xxxxxxx x která xx xxxxxxxx xxxxxxxx mírné xx xxxxxxx podráždění xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, která x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolá xxxxxxxxxx kůže. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x předběžném xxxxxx xx xxxx xxxx třech xxxxxxxxx. Xxx xxxxx účel xxx uvážit xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx bylo xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.1.3.1 Indukce
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, se xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx roztokem x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
Injekce 3: xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxx připravená xx xxxxx FCA x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx roztokem x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxx xxxxxxx 3 xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x FCA xx vodné xxxx. Xxxxx rozpustné x xxxxxxxx xxxx látky xxxxxxxxxxx xx rozptýlí x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 3 má xxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxx 2.
Injekce 1 a 2 xx aplikují xxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx xxxxx, zatímco xxxxxxx 3 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx plochy.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx subkutánních xxxxxxx, xxxxx po 0,1 xx, xx podají xx stejných xxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (XXX) xxxxxxx s xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxx xxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx xxxxx XXX/xxxx xxxx fyziologického xxxxxxx x xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx
Přibližně dvacet xxxxx hodin před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxx pro kůži, xx na xxxxxxxxx xxxxxx po důkladném xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx se zbaví xxxxx. Xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 cm), xxxxx xx pak přiloží xx xxxxxxxxx xxxxxx x fixuje pomocí xxxxxxxxxxx obvazu xx xxxx 48 hodin. Xxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx látky xxxx xxxxx rozetřeny a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx; kapaliny xxx xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. den - Kontrolní skupina
Xxxxxxxxx plocha se xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx jako x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 48 xxxxx.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Boky xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx srsti. Xx jeden bok xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx v xxxxxxx x na xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vehikulum (xxxxx xx xx xxxxx). Xxxxxx se pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: testované a xxxxxxxxx skupiny
- xxxxxxxxx 21 hodin xx odstranění xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx ostříhá xxxxxxxx oholí a x případě potřeby xxxxxxxx;
- přibližně xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (přibližně 48 xxxxx xx začátku xxxxxxxx provokační dávky) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx 24 xxxxx po xxxxx xxxxxxxxxx se provede xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx (72 hodin).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" u xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx zvíře xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx je kontrolní.
Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxx nutná xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), provede xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx skupinou x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.
Všechny xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx důsledkem xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx postupů, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (viz xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. histopatologického xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx xxx.
1.5.2 Buehlerův xxxx
1.5.2.1 Příprava
Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx dobu aspoň 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx srsti xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Je třeba xxxx xx xx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx zváží xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx morčat.
1.5.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Lze xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 zvířat x xxxxxxxxx skupině.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx úrovně
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx použitá xxx xxxxxx indukční xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx mírné, ale xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže. Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace, xxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění xxxx. V xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx stanovit x xxxxxxxxxx xxxxxx xx dvou xxxx xxxxx zvířatech.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx rozpustné xx vodě xx xxxxxx použít xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx je preferován 80% xxxxxx etanol/voda xxx xxxxxxx a xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx bok xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Systém xxxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx (výběr xxxxxxxx xx řídí xxxxxxxxx xxxxxx; kapaliny xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx přímo).
Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
Xxxxxx plátkového testu xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx už xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx zajistila xxxxxx. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx další xxxxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx xx zbaven xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx, x to xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx možno xxxxxxxx, xx negativní xxxxxxxxx skupina xxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxx.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Testovaná x kontrolní xxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx x den 0 xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tomtéž boku (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxx xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx koncentraci xx xxxxxxxx xx xxxxx část xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxx. Překrývací xxxxxx xxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží vhodným xxxxxxx po dobu 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Pozorování x xxxxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxx (přibližně 30 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx plátku) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x dodatku;
- xxxxxxxxx po xxxxxxx 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 hodin xx aplikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, xxxxx xxxxx xxxx senzibilizováno x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx výsledků nutná xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx skupinou x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx na původní xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (xxx xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx použít dalších xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxx tloušťky kožních xxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX (GPMT X BUEHLERŮV TEST)
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx, ze xxxxx xxxx být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx patrná reakce xxxx xxx každém xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX (XXXX A XXXXXXXXX TEST)
Pokud xxx proveden xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx uvést xxxxx xxxxxx testu xxxx xxxx citaci (xxxx. XXXX - xxxx xxxxxxxxxxxx lymfatických xxxxx, MEST - xxxx ztluštění xxxx x xxxx) xxxxxx xxxxx podrobností xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx látky.
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (XXXX a Xxxxxxxxx xxxx)
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx mohly xxx získány:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx xxxxxx;
- xxxxx, stáří x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx, strava xxx.;
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x konci xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxx přípravy xxxxx pro plátkový xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx koncentracích xxx vlastní xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxx x odstranění xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x vehikula, použitá xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx citlivosti x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx referenční xxxxx, xxxx koncentracea xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx pozorovaných xxxxxx;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je analogická x xxxxxxx XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Magnussona/Kligmana xxx hodnocení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx reakcí
0 = žádná xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kůže;
2 = xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;
3 = xxxxxxxxxx zarudnutí x xxxxxxx kůže.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxx danou xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxx jako
xxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
mírný xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % xxxxxx
středně xxxxx alergen (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx alergen (XX. st.) - 65 - 80 % xxxxxx
extrémní xxxxxxx (X. st.) - 81 - 100 % xxxxxx
X.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá mladá xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx do kontrolní xxxxxxx x jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx se xx xxxxxxx vyloučil vliv xxxxxxxx xxxxx. Každé xxxxxxxxxx zvíře xx xxxxxxxxxxx označeno. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxxx látku lze xxxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xx třeba, rozpustí xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx se nejprve xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, pak xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxx oleji (xxxx. xxxxxxxxxx) a pak xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx. Pro nevodná xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxx stabilitu látky xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx možno xxxxxx x jiného xxxxx xxxxxxxx. Je třeba xxxxxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a nesmí xxx březí. Xxxxxxxx xxxxx by mělo xxxxx xx nejdříve xx xxxxxxx x x každém xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Na xxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx jako předběžný xxxxx před dlouhodobou xxxxxx, xx třeba x xxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířata stejného xxxxx x xx xxxxxxxx zdroje.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx hladinu xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xx možno xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 dnů xxxxxxxx dávku a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx třeba použít xxxxxxx xxx úrovně xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx pokusným xxxxxxxx, x to xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Pokud xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx očekávat účinek xxx denní dávce 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx možno xxxxxxx limitní test. Xxxxxx-xx taková data x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxx je xxxxx vzít v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x toxikologických x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx příbuzných.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx vyvolat toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx utrpení. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx závislost účinku xx dávce. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity (XXXXX). Xxxxxxx xx xxxxxx xxxx- až xxxxxxxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxxxx větší xxxxxx xxxxx, xx xxxxx přidat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, než xxxxxx příliš xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxx xxx 10).
Xxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxx vodě, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx množství xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx v potravě, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx koncentrace (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx dávkování ve xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxx. Aplikuje-li xx xxxxx xxxxxx, mělo xx se tak xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx sloužit xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dlouhodobou xxxxxx, xx třeba x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx potravy.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx-xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx při xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxx, která xxxx dávce xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx pravidlo xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx lidí xxxxxxxxxxx, xx je xxxxx xxxxxxxx při vyšších xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx x cílem xxxxxxxx xxxxxxxx zpožděné xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířatům xx xxxxxx testovaná xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 dnů, xx zdůvodněných případech 5 dní v xxxxx. Xxxxx xxxxx xx podává jednorázově xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx intubační kanylou. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx přesáhnout 1 xx na 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx lze xxxxx x 2 ml xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x xxxxxxxxx objemu xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx xxx podáván xxx xxxxx xx xxxxx úrovních dávky. Xxxxxxx xx u xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, u xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxx denní xxxx x x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx účinku xx xxxxxxxx. Zaznamenává xx xxxxxxxxx stav xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx denně xx provede xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx projevující silnou xxxxxx xxxx stres xxxx vyřazena, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx klinické xxxxxxxxx všech zvířat xx xxxxxxx před xxxxx xxxxxxxx (za xxxxxx intraindividuálního xxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx chovnou xxxx x xxxxxxxxxxx pozorovacím xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx skórovacího systému, xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx nejméně; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx a vegetativních xxxxxx (xxxxxx, zježení xxxxx, velikost zornic) x případně xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx pohybů, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (vytrvalé xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx pozadu).
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, proprioceptivní), xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, které xx xxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx xxxx, xxxx X).
Xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx aplikace lze xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud 28xxxxx studie slouží xxxx xxxxxxxxx studie xxx xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx x x xxxxx xxxxxxx xxxx údaje x xxxxxxxxx poruchách xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxxx xxx výběr xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx pozorování funkčních xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxxxxxxx funkčního xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxx hmotnost a xxxxxx potravy x xxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxx nejméně jednou xxxxx, také x xxxxxxx aplikace x xxxxx vodě.
1.2.3.3 Hematologie
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx a diferenciálního xxxxx leukocytů, xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx krve.
Xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx nebo x xxxxxxx utracení xxxxxxx, xxxxx, odkud se xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.4 Biochemická xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tkáně, zvláště xx xxxxx x xxxxxxx, se xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx1). Vyšetření xxxxxx a xxxx xxxxxxxx stanovení sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, močoviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx proteinů, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx dvou xxxxxx indikujících xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gama xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxxx enzymů (xxxxxxxxx xxxx jiného xxxxxx) x žlučových xxxxxxx xxxx v některých xxxxxxxxx poskytnout xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Další xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx posledního xxxxx xxxxxx: hodnotit xx xxxxx xxxxxx, xxxxx, osmolalitu xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xX, xxxxxxxxx, glukózu x xxxx příp. krvinky.
Xxxx xx třeba xxxxxx stanovení nespecifických xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx.
Další xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x působení xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx lačno, xxxxxx, specifických xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx určitých xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx případu.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x úvahu xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx očekávané xxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx hodnotách některých xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1) Vyšetření xx xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxx, xxxxxxx xxx glukózu. Hlavní xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxx xx xx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx maskovat xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx straně, hladovění xxxx xxx by xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxx metabolismus x x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxx se xxxxxxx xxxx xx lačno, xx xxxxx biochemické xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx pozorování xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx testu.
1.2.3.5 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx provede xxxxx, xxxxxxxxxx pečlivé xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech xxxxxx, xxxxxx lební, xxxxxx x xxxxxx, a xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx, slezina, xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx očistí od xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxx se zváží xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx pozdější histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx hemisfér, mozečku x xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxx x xxxxxx střevo (včetně Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, štítnou xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxxxx naplněním xxxxxxxx xxxxxxxx x xxx ponořením), xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (např. xxxxxx, xxxxxxxx), xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx xxx oblast xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxx pokrytí xxxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xxxx (n. xxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxx), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx (xxxx čerstvý xxxxx x nasáté xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Každý xxxxx, xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Histopatologické xxxxxxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxx, které xxxx xxxxxx nejvyšší dávka, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x tkání. Xxxxx xx x xxxxxxxx x tkáních xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx objeví xxxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření těchto xxxxx i x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx vyšetřit.
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xx xxxxxx zařazeny, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx se zvláštním xxxxxxx xx orgány x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXX X ZÁZNAM XXXXX
X dispozici xxxx xxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx xxxxx sumarizovány xx tabulkové xxxxx, xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx toxických xxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx každého xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, typ xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistickou xxxxxx xx xxxxx zvolit xxx při xxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, podmínky chovu, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx testu.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, xxxxx xx jiné xxx xxxx;
- zdůvodnění xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx látky xxx xxxxxxxx, případně x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- přepočet z xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx dávku v xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx x xxxxxxxx x dietě xxxx xxxx);
- podrobné xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx druhu a xxxxxx);
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx;
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pohlaví a xxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxx, závažnost x trvání xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. zda xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx síly x motorické xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx hmotnost xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx získány;
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx:
4. LITERATURA
Tato xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx XXXX TG 407.
X.8. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX (28DENNÍ XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxx pokusem xx xxxxx získat údaje x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx velikosti částic, xxxxx par, xxx xxxx, xxx xxxx, xxx vzplanutí x xxxxxxxxx (jsou-li xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx studované xxxxx denně po xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx jedné xxxxxxxxxxx, x xx po 28 dní. Použije-li xx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx x atmosféře xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx x zjišťují se xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx xx konce pokusu, xx xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx xxxxx, přidá xx k xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx příslušná xxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx být x nich xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li vhodná xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Pracuje xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xx začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx musí být xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, xx nutno xxxxxx celkový počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxxxx vysoké xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxxxxxxx xxxx zpožděný výskyt xxxxxxxxx xxxxxx. Používá xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx tři skupiny x různou xxxxxx xxxxxxxxxxx x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x skupiny x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx s pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx toxicity. Pokud xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx koncentrací, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxxxx x xxxxxx x střední koncentrací x v xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx expozice
Xxxxxx xxxxxxxx má být 6 xxxxx denně; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxx xx zvířaty xx xxxxxxx xxxxxxxxx expoziční xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx xxx zaručen přiměřený xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx konstruovat xxx, xxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx shlukování xxxxxx a aby xxxxxxxxx expozice testované xxxxx byla co xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx neměl xx x xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx příjem xxxxx jinými xxxxxxx.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx během xxxxxx období xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a xxxx odezní toxické xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx dobu 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx aplikace, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x otravy xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx není xxxxx (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Udržování mírně xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx vodního sloupce) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxx. Xxxxx expozice xx xxxxxxxx potrava xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx provést xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx xxxxx nastavit xxx, xxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx boxu xxxx stejné. Systém xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx měří x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné expozice xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx střední xxxxxxx x xxxx xxx ± 15 %. U xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx celou xxxx xxxxxx experimentu xxxx xxx koncentrace tak xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx kontinuálně.
Xxxxx expozice a xx xxxxx xxxxxxxx xx pozorování xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky; xxxxx zvíře xx xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx týdně. Doporučuje xx zaznamenávat xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata a xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
Xx konci xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx leukocytů a xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx analýza xxxx: x posouzení xxxxxx xxxxx a ledvin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x těchto xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Mezi xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxxx, xxxxxxx, chloridů, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx lačno, lipidů, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx být v xxxxxxx xxxxxxx použity xxx studium xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3.1 Pitva
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva. Xxxxx játra, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Orgány x xxxxx (dýchací xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, x xxxxxxx orgány s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, zvážit x xxxxxxx vhodným xxxxxx, tak aby xx zachovala xxxxxxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx koncentrace, x x xxxxxx kontrolní xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx provést histologické xxxxxxxxx těchto xxxxx x u xxxxx xxxxxx s nižšími xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx x xxxxx, ve xxxxxxx xx objevily xxxxxx otravy x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx výsledky xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, popis xxxxxxxxx odpadního xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx v xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx; x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx; x) xxxxxxxx koncentrace x dýchací zóně; x) hmotnostní xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x geometrická směrodatná xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle koncentrací,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxx, kdy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.9. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx na xxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx zdravá mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých experimentálních xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx pokusných zvířat. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx však xxxxxxx xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo xxxxxxx xx xxxxxxx opakovat xxxxx týden. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx na xx, xxx se nepoškodila xxxx (např. xxxxxx). Xxx nanášení xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x x velikosti xxxxxxx xxxxxx. Při xxxxxxxx x tuhými látkami, xxxxx mohou být xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx použít i xxxx xxxxxxx druhy, xxxxxx použití však xxxx xxx odůvodněné. Xx xxxxxxx studie xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx) xx xxxxxxx kůží. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Pokud se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx možno xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx následujících 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx skupiny 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - pokud xx použilo xxxxxxxx - xxxxxxxxx skupinu x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx nejméně 6 xxxxx denně. Xxxxxxxx testované látky xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx dobu. X intervalech xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx zachází stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se vehikulum xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx množství, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx má xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x malém xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx být vmezeřené xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx testované xxxxx x těžkému xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx snížit xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx vyloučení xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x těžkému xxxxxxxxx xxxx, xx dokonce xx určitých xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x nižšími xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx dávky, která xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx na příznaky xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx dobu uhynutí x dobu, xxx xx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx otravy.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx studované xxxxx xxxxxxx 7 xxx x týdnu xx xxxx 28 dnů. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx chovat xx xxxxxxx 14 xxx xxx expozice, xxx xx mohla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx denně.
Testovanou xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, která xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx xxxx; x vysoce toxických xxxxx může xxx xxxx plocha menší. Xxxxxx je třeba xxxxxx xx největší xxxx pokusné xxxxxx xxxxxxxxxx v xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx je xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx a testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx doporučit. Jako xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxx".
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxx očištění xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx x také dýchání x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx xxxxx i xxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. v xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx xxxxx nebo chybného xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx všechna xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x výjimkou satelitních xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x zvířata x těžkém xxxxxx xx xxxxxx bolestí xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.
Na xxxxx xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Biochemická xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx funkce xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx z xxxxxx parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamátpyruvát-transamináza), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamát-oxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx.
Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: vápníku, xxxxxxx, chloridů, sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx, xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x případě xxxxxxx použity xxx xxxxxxx xxxxxxx spektra xxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx. Aspoň xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxxx, xxxxx a varlata xx xx nejdříve xx xxxxx xxxxx xx vlhkém stavu, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Orgány x xxxxx, xxxx. normální x exponovaná kůže, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x všechny xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, a x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx, je třeba xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx ve skupině x xxxxxxxx dávkou xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. U zvířat xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx otravy u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- údaje x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, podmínkách xxxxx, xxxxxx xxx.),
- experimentální podmínky (xxxxxx xxxxx obvazu; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx ji xxx xxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x jejich další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
B.10. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX U XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 473, Xx Xxxxx Mammalian Chromosome Xxxxxxxxxx Test (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxxx je xxxxxx xxxxx, jež v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Strukturální xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx x aberacím xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Vznik xxxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx však xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x běžně se x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy, xxx xxxxxxxxx xxxxx x onkogenech x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx vzniku rakoviny x člověka a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx se používá x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx. Xxxx chemických xxxxx, xxxxx jsou x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, je xxxx xxx xxxxx karcinogenní, xxxx xxxx dostatečná xxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx o xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx látky, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nezjistí, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx poškozením XXX.
X xxxxxxx chromozómových xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx stabilizovaných buněčných xxxxx, xxxxxxxxx kmenů xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Použité xxxxx xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu x xxxxxxx, stability xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx.
Xxxxx in xxxxx vyžadují xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x savců in xxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by mohly xxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, nýbrž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx cytotoxicitou (4) (5).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx projevuje xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx chromatidami.
Xxxxxxx chromozómového typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx).
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx za předpokladu, xx vzniklá mezera xx struktuře chromatidy xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment v xxxxx zlomu xx xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx replikace XXX xxxxxxxxxx jádro xx mitózy, nýbrž xxxxxx xxxxx S-fáze. Xxxxxxxxx jsou chromozómy x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx léze xxxxx než xxxxx xxxxx chromatidy x x minimálním vybočením xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx index: xxxxx xxxxx v xxxxxxxx dělený xxxxxxxx xxxxxx buněk v xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) jiný xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3n, 4n xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení xx xxxxxx metafáze, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Buněčné xxxxxxx xx vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, x to s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx ní. Xx xxxxxxxxxxx intervalech po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, buňky se xxxxxx, xxxxxx xx x v metafázických xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxx xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxxxxxx křečka xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
X udržování xxxxxx je třeba xxxxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxx způsobem kontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky nepoužívají. Xx třeba xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx: buňky xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx před xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 xX.
Xxxxxxxxx: xx kultivačnímu xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxx xxx xxxx xxxx x vhodným xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. heparinem), xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx teplotě 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Na xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx i v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx xx kofaktory suplementovaná xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy xxxx xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bude xxxxxxx na tom, xxxxxx typu xx xxxxxxxxx látka. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x několika xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx aktivace mohou xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx linií by xxx xxx vědecky xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx cytochromu X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx stavu, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, xx delší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX XXXXX
1.6 XXXXXXXXXXXX
X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx existovat xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x testovanou látkou xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x aktivitu X9. Používá-li se xxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx, xxx všem tam, xxx je to xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx zvažováno xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.
1.6.1 Koncentrace
Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Cytotoxicita xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x hlavním xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx integrity a xxxxx, například stupně xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Je xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x předběžných xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x xxxxxxxxxxxx, musí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx lišit více xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx hodnotami 2 a √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxx nejvyšší koncentraci xxxxxxxxx signifikantní xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx o xxxx než 50%). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nepřímou xxxxx xxxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xx expozici xxxxxxxxxx látkou. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx detekce xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx informace xx xxxxx použít xxxx xxxxx x kinetice xxxxxxxxx dělení, xxxx xx průměrný generační xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx celkový průměr, xxxxx xx vždy xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X tak x malé prodloužení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látek činí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejnižší x xxxxxx 5 µx/xx, 5 mg/ml xxxx 0,01 X.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx koncentrace, xxx xxxxx xx xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx dochází-li x xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx nerozpustná xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx testovat při xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx počátku x xx konci xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vlivem xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 apod. Nerozpustnost xx xx xxxxxxx x prostým xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxx.
1.6.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx každého xxxxxxxxxxx, xx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací xxxx xxx xx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx). Xxxxx se xxxxxxxx metabolická xxxxxxxx, xxxx být pozitivní xxxxxxxxx látka vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mutagenního xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx používá známý xxxxxxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxx úrovních, xxx xx xxxxxxx, xx poskytne xxxxxxxxxxxxxxxx x detekovatelný xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx zvolit tak, xxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx identitu xxxxxxxxxxxx preparátů. Mezi xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Metabolická aktivace | Xxxxx | CAS | XXXXXX |
Xx | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx methansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx mitomycin C 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Ano | xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx látky. Xxx, xxx xx xx xxxxx, je xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx.
Xxx každý xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu, xx které se xxxxxxx rozpouštědlo nebo xxxxxxxxx x kultivačním xxxxx, zpracované xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx jakéhokoliv xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxxxxxx i nepřítomnosti xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxx xxxxxx koncentraci používají xxx xxxxxxx; x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx negativní kontroly x xxxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx. Pokud xxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx minimální (13) (14), xx xxxxxxxxxx, aby se xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx těkavých xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (15).
1.6.3.2 Xxxx sklízení xxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx ní xx xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx odebírají x čase xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx začátku expozice (12). Xxxxx jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx výsledky negativní, xxxxxxx xx další xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx expozicí xx do xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Některé xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx 1,5xxxxxxx délky xxxxxxxxx cyklu. Negativní xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se posuzují xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx třeba xxxx xxxxxxxxxx zdůvodnit.
1.6.3.3 Příprava xxxxxxxxxx
Xx buněčné kultury xx xxxxxx Xxxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx dobu 1 - 2 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zpracovává zvlášť. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx sestává x ovlivnění buněk xxxxxxxxxxxx roztokem, fixace x xxxxxxxxx.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Jelikož xxxxxxx postupy často xxxxx x rozbití xxxxxxxx xxxxxx metafázických xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx, musí xxx x xxxxx xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx číslu ± 2. Xxx xxxxxx koncentraci x xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází, xxxxxxxxxxx x obou xxxxxx, xxxxx byly xxxxxxx. X případě, xx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx počet analyzovaných xxxxxxxx xxxxxx.
I xxxx účelem testu xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxx důležité xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Jelikož experimentální xxxxxxxxx xx buňka, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými aberacemi. Xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kultur. Xxxx xx zaznamenávají zvlášť, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx četnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Současně xx xxxxx x testu xxxxxxxxxxxx xxxx zjištěnou xxxxxxxxxxxx v experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx se data xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Verifikace xxxxxx pozitivních xxxxxxxx xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx testováním, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výsledky xxxx xxxxxxxxx x xxxx. 1.4.3.3. X následných xxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx modifikaci použitých xxxxxxxxx tak, aby xx rozšířil xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. K xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx. Xxxxxxx je xxxxx uvážit biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (3) (13). Xxxxxxxxxxx významnost xx však xxxxxx xxx jediným určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx schopnost inhibovat xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (17) (18).
Xxxxxxxxx xxxxx, při jejímž xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená kritéria, xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, nebo negativní xxxxxxxx, xx výjimečných xxxxxxxxx získaná data xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx posouzení xxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx experimentů. Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
XXXXXX X XXXXXXX POKUSU
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx uvést xxxx xxxxxxxxx:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx a zdroj xxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx buněk,
- xxxxxxx mykoplasmat, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx x délce xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx dárce krve, xxx byla xxxxxxx xxxx krev xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, použitý xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxx, xx-xx xx xxxxx - xxxxxx udržování xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx to xxxxx
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx působení na xxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx např. údajů x xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx média, xxxxxxxxxxx XX2, je-li to xxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx vehikula x xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx buněk xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti,
- pozitivní a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx podložních xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení aberací,
- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, negativní nebo xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx toxicity, tj. xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx x buněčném xxxxx, x xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx index,
- xxxxxx srážení,
- xxxxx o pH x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx aberací, xxxxxx gapů,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx chromozómových xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kulturu xxxxxx,
- případné xxxxx xxxxxxx,
vztah xxxxx-xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.11. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXX XXXXX SAVCŮ IN XXXX
1. XXXXXX
Metoda je xxxxxxxxx XXXX XX 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx chromozómových xxxxxxx x xxxxx xx vivo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyvolané testovanou xxxxxx x buňkách xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Aberace vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chromatidové, xxxxx x xxxxxxxx chromozómového xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx u člověka x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx u xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxx testu xx xxxxx xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxxxx tkání x xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx buněk, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx živočišné druhy x xxxxxx xxxxx xx x xxxxx xxxxx nepoužívají.
Xxxxx xxxx xx chromozómové xxxxxxx xx zvláště xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxxxx xxxx x xxxxx faktory xxxxxxxxxxx xx vivo, farmakokinetiky x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x když xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx také xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx předtím xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.
Existují-li doklady x tom, xx xx testovaná xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxx použití tohoto xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, nebo xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx jako zlom x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx chromatidy: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx nebo obou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, než xx xxxxx poškozené xxxxxxxxxx. Dále xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x xxxxx zlomu xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), případně xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x důsledku delece.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx než šířka xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx dělený celkovým xxxxxx buněk v xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx hapoidního xxxxx xxxxxxxxxx (x) mimo xxxxxxxxx xxxxx (tedy 3x, 4x atd.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx jako xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Zvířata se xxxxxxx způsobem xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx působení xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Z xxxxx xxxxxx dřeně xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a v xxxxxxxxxxxxx buňkách xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Běžně xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxx křečci, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx by při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx X, vlhkost xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx mladí dospělí xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly případné xxxxx toho, xxx x kde jsou xxxxx umístěny. Zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx aklimatizují x laboratorních xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx stavu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x případně xx xxxxx. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx se mohou xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx je to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx testu xx xxxxx pro každé xxxxxxx zařadit souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx stejně.
Pozitivní xxxxxxxx by měly xxxxxxxxx strukturální xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole se xxxx tak, aby xxxx účinky xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx intervalu. Xxx je xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Příklady xxxxx vhodných xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
ethyl xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo vehikulem x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx zařazeny do xxxxx časových xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje o xxxxxxxxx chromozómových aberací x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx interval odběru xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxxxxxx kontrol, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx
V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx každého xxxxxxx. Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, existují xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx na jednom xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx závislá xx xxxxxxx, xxx xx xxxx například x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxxx podávat xxxxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, například na xxx dávky xx xxx podané x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxx režimy xxxxxxxxx musejí být xxxxxxx odůvodněné.
Vzorky xx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx. U xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx délky xxxxxxxxx cyklu (která xxxx xxxxxxx 12 - 18 xxxxx) xx xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxx potřebná xxx absorpci x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x její xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xx 24 xxxxxxxx od xxxxxxx odběru. Xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx den, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vzorků 1,5xxxxxxxx délky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu po xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx intraperitoneálně xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Colcemidu® xxxx kolchicinu x xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky. X xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3 - 5 xxxxx, u čínských xxxxxx zhruba 4 - 5 xxxxx. X xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x zjišťují se x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx údaje, xx xxxxx ji provádět x xxxx laboratoři xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (5). Při xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx tři xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx maximální xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx xx xxx třeba xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx takové xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx xxxxxxx, jež se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx známkám xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx indexu o xxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx v xxxxx dávce nebo xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx dávkových úrovní. Xxx dlouhodobé xxxxxx xxxx limitní xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xxx xxxx xxxxxx xxxxx než 14 xxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxx xxx xxxxxxxxx použití x xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávkové úrovně.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxx buď žaludeční xxxxxx, nebo intraperitoneální xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx sondou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx překročit 2 xx/100x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo žíravých xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava xxxxxxxxxx
Okamžitě xx xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx podložní xxxx x xxxxxx xx.
1.5.7 Analýza
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx x všech zvířat xxxxxx pozitivních i xxxxxxxxxxx xxxxxxx stanoví xxxxxxxxx index xxx xxxxxxxxx 1000 xxxxx x každého xxxxxxx.
X xxxxxxx jedince xx analyzuje xxxxxxxxx 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx aberací. Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx pozitivních x negativních kontrol) xx před mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x porušení xxxxxxxx xxxxxx metafází xxxxxxxxx xx ztrátou chromozómů, xxxx být xxxxx xxxxxxxxx v hodnocených xxxxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Xxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počet xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x procento xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. U experimentálních x kontrolních xxxxxx xx zaznamenají xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx frekvence xxxxxxx nezahrnují. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx o xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, xx xxxxx xxxxx xx obě xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xx používá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk x chromozómovými xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx buněk může xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx buněk s xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx fáze xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx v xxxxx systému považuje xx xxxxxxxxxxx.
Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech však xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment několikrát xxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx daných experimentálních xxxxxxxx testovaná látka x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx specifickou cílovou xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud je xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,
- původ, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx ze xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, že se xxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- případně převod xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti/den),
- xxxxxxxxxxx o kvalitě xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, její xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx analyzovaných buněk xx xxxxx zvíře,
- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx index,
- xxx x xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx jedince zvlášť,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx změny xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, byly-li provedeny,
- údaje ze xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,
- historické údaje x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
- údaje ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
Xxxxxxx výsledků.
Závěry.
X.12. XXXXXXXXXX - XX VIVO XXXXXXXXXXXX XXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx x xxxxx xxxxxx xx zjištění poškození, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx v xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxx xxxxx xxxx. x xxxxxxxxx krve xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx je x xxxxx vyloučeno; xxxxxxxx zbude x xxxxxxxxxx vzniklé xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx. Nárůst xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx důkazem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x této xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (polychromních) erytrocytů x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx krvi xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xxxx prokázáno, xx jeho xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx je tento xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx rozlišovat xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (centromery), xxxx xxxxxxxxxxxxx DNA x mikrojádru. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxx počet zralých (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx obsahujících xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxxxx testují xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx u savců xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, protože xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vivo, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, i xxxx xxx mohou xxx xxxx živočišnými xxxxx, xxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx se xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx tkáně nedostane, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): oblasti xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx dělícího xxxxxxxx xxxxxxxxxx organizovaný xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Mikrojádro (xxxxxxxxxxxx): xxxx jádra xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx celými chromozómy.
Xxxxxxxxxxxx erytrocyt: zralý xxxxxxxxx, jemuž chybějí xxxxxxxx x xxxx xx xx xx xxxxxxxxx, polychromních erytrocytů xxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx stadium, xxx xxxx dosud xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx lze xxxxxxx xx xxxxxxx, normochromních xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Zvířata xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxxx xx ve xxxxxxx xxxx xx působení xxxxx usmrtí, xxxxxx xxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, jež se xxxxxx (1-7). Xxxxx xx xxxxxxx periferní xxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx se xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx periferní xxxx, musí xxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx zpracování xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, doporučují xx xxxx pokusná xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx; xxxx xxxx xxx použit jiný xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Lze xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx druh xx xxxxxxxxxxx, xx xx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nebo xx x xxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, jež xxxxxxxxx strukturální xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx uvedeny xx Všeobecném xxxxx x xxxxx B.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí xx kontrolní a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx dobu xxxxxxxxx pěti xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x kde xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx a xx-xx xx možné, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx o xxxxxxxx (xxxxxxxxx) prokazují, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx reagovat. Používá-li xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x testovanou látkou. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx je xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je xxxxx zacházet se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx stejně.
U xxxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx nalezena xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení nad xxxxxxxxx xxxxxx. Dávky xxx pozitivní kontrole xx volí xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx preparátu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x jednom xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx skupiny, xxxx xx testovaná látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu:
Xxxxx | XXX | EINECS |
xxxxx methansulfonát | 62-50-0 | 200-536-7 |
X-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 | |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx xxx xxxxxxxx xx všech xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx variabilitě xxxx xxxxxxx. Aplikuje-li xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx pouze xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx první xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je třeba xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx nevyvolává žádné xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x vzorek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx pouze v xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 xxxxx), kde xxxxxxxx xxxxx leží x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kontroly.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Pokud x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, existují xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxxxxxx pouze na xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx farmaceutických přípravků, xxxxxxx se xxxx xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. jedna, dvě xxxx xxxx xxxxx x 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxx; x případě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx tak xxxxxx, xx xx xxxxxxx toxicita, xxxx xxxx použita xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx do xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x objemnou dávku xxxxxxxxx látky, xxxx xx k usnadnění xxxxxxxx rozdělit, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx den xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx hodin.
Test xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
(x) Xx zvířata xx xxxxxxxxxx látkou xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx kostní xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dvakrát, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 24 hodinách x xxxxxxx xx xxxxxxx xxx po 48 xxxxxxxx xx xxxxxx látky, s xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxx vzorků. Xxxxx xx vzorky xxxxxxxx xxxxx než po 24 xxxxxxxx, xxxx xxx odůvodněné. Xxxxxx xxxxxxxxx krve se xxxxxxxx minimálně xxxxxxx, xxxxxx xx dříve xxx po 36 xxxxxxxx od xxxxxx xxxxx, xx vhodnými xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxx déle xxx 72 xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx pozitivní xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx se xxxxx xxxxxx dvakrát xxxx xxxxxxxx xx den (xxxx. dvě xxxx xxxx xxxxx ve 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxx kostní dřeně xxxxxx mezi 18 x 24 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx (12).
Je-li xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Provádí-li xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (13). Xxx zjištění xxxxxxxx se xxxxxxx xxx první časový xxxxxxxx xxxxxx vzorků xxx dávky xxx, xxx xxxxxxxxx rozmezí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x toxicitě xxxxx, xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xx xxx třeba xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ve stejném xxxxxx podávání xx xxxxxx byly letální. Xxxxx, jež x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo mitogeny, xxxxx představovat xxxxxxx x xxxxxx kritérií xxx stanovení dávek x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx k xxxxxxx xxxxxxx toxicity x xxxxxx dřeni (xxxx. xxxxxx xxxxxx nezralých xxxxxxxxxx x celkového xxxxx erytrocytů x xxxxxx dřeni xxxx. xxxxxxxxx xxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx hmotnosti x xxxxx dávce xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a jestliže xx xx základě xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být provedena xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx dávkových xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx limitní xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx xx den xxx době xxxxxx xx 14 dnů, x 1000 mg/kg xxxxxxxxx při době xxxxxx xxxxx xxx 14 dnů. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx případech xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem kapaliny, xxxxx xx dá xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx normálně xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx byl xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný a xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Příprava xxxxxx xxxxx / xxxx
Xxxxx kostní xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx tibie okamžitě xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx dřeň vyjme x xxxxxx nebo xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Periferní xxxx xx získává x xxxxxx žíly xxxx xxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx stavu xxxxxx (8) (9) (10), xxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Použitím xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx vznikajících xxx použití barviva, xxxxx není XXX xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx by xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx - například kolony xx xxxxxxxx celulózy x odstranění buněk x xxxxxx (16) - pokud xxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
U každého xxxxxxx xx stanoví xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (nezralé + xxxxx). X tomuto xxxxx se počítá x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. X každého xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx minimálně 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Doplňující informace xxx xxxxxx xxx, xx xx mikrojádra xxxxxxxxx xx zralých xxxxxxxxxxxx. Při analýze xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového počtu xxxxxxxxxx xxxxx než 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů xxxx xxxxx, lze xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx erytrocytů xx xxxxxxx jedince. Možnou xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx analýza - xxxx xxxxxxxxx), pokud xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Údaje x xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů xx všech erytrocytů. Xxxxx xxx test xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxx, je xxxxx uvést také xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx byly xxxxxxxxxx). Podíl xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx procento xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx o xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx několik kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx počtu buněk x mikrojádry xxxx xxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxx statistické xxxxxx (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx kritéria, xx x tomto xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx tvorbu mikrojader, xxxx xxxxxxxx chromozómového xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aparátu v xxxxxxxxxxxxxx testovaného xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx experimentálních podmínek xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Je xxxxx uvažovat, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx specifickou xxxxxxx xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx zprávě x průběhu pokusu xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, věk x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, chovné xxxxxxxx, xxxxxx apod.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx hmotnostního xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx pro určení xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dávky,
- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx koncentrace xxxxx x xxxxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,
- metody xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- kritéria, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- počet xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx pro každého xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry xxx každou xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - účinek, je-li xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy x xxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx x historických negativních xxxxxxx,
- xxxxx xx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.13/14. MUTAGENITA - TEST XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Mutatiton Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxx bakteriálním xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx histidin) a xxxxx Xxxxxxxxxxx coli (xxxxxxxxxx xx vztahu x aminokyselině tryptofan). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx genové xxxxxx xxxxxxx mechanismem xxxxxxxxxx xxxx delece xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x tom, xx xx zjišťují mutace, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx přítomné v xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx základní xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx bakteriální xxxxx xx detekována xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx růst xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, kterou xxxxxxxx xxxxxxxx zkušební xxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxx x člověka xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx a existují xxxxxxxxxxx doklady xxxx, xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x člověka x xxxxxxxxx zvířat roli xxx xxxxxx nádorů. Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx mutace xx xxxxxx, levný x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx charakteristikami, díky xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx mutací, xxxxxx citlivých sekvencí XXX v xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xxx jsou xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx umožňuje xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx bakteriální xxxxx xxxxxxxxxx mutací xx x xxxxxxxxx velmi xxxxxxxx xxxxxxxx výsledků xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metody xxx testování xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx kmenů Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxxx xxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx), xxx xxxxx ke xxxxxx xxxxx, který xx xx dodávce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nezávislý.
Mutageny xxxxxxxxxxxx substituci xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x XXX. Při xxxxxxxxx xxxxx může x xxxxxx xxxxx xxxxx xx místě xxxxxxx xxxxxx nebo xx jiném místě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx) jsou xxxxx, jež způsobují xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxx bází x XXX, xxxx xx xxxx čtecí rámec x RNA.
1.3 VÝCHOZÍ XXXXX
V bakteriálním xxxxx xx využívají xxxxxxxxxxxxx buňky, které xx xx savčích xxxxx xxxx v xxxxxx xxxxx metabolismu, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx opravy XXX. Xxxxx in xxxxx xxxxxx xxxxxxxx exogenní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx metabolické aktivace xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx, takže xxxx xxxxxxxxxxx přímé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dané xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx mutací xx xxxxx používá jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx rozsáhlé xxxxxxxx se xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx jsou x xxxxx testu pozitivní, xxxxxxxx xxxx v xxxxxx testech xxxxxxxxx xxxxxxxx. Existují ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, jež xx xxxxx testem neodhalí; xxxxxxx tohoto xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxx vyhodnocovaných veličin, xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx dostupnosti. Xx xxxxx straně xxxxxxx, jež citlivost xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx k xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx test xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx některé silně xxxxxxxxxxxx sloučeniny (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx (například xxxxxxx inhibitory topoizomerázy xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx u xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx při tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; závisí xx xxxxxxxx xxxxx, x existují xxxxxxxxxxx, xxxxx tímto xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x bakteriálních xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 PRINCIP XXXXXX
Xxxxxxxx bakteriálních xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx "xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx agarem x xxxxxx xx xxxxx x minimální xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx směs inkubuje x smísí x xxxxxxx xxxxxx a xx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxx xxxx metodách xx xxx až xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx x počtem xxxxxxxxx revertujících xxxxxxx xx kontrolních miskách x xxxxxxxxxxxxx.
Je xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx. X nich nejběžnější xxxx klasická xxxxxxx xxxxxx ["xxxxx xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), preinkubační xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx metoda (9) (10) a suspenzní xxxxxx (11). Xxxx xxxx popsány xxxxxx xxxxxxxxxx pro testování xxxxx nebo xxx (12).
Postupy popsané x xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x metody xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx metody xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx jak x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Některé xxxxx xx detekují xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou; xxxxx se o xxxxxxxx třídy, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nitrosaminy x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, aldehydy, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx a nitrosloučeniny (3). Také xxxx xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xx je třeba xxxxxxxx xxxx xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxxx" (xxxxx x příklady xxxxxxx, které xx xxxx xxx jejich xxxxxxx použít): azobarviva x diazosloučeniny (3) (5) (6) (13), xxxxx x těkavé xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx od standardního xxxxxxx xx třeba xxxxxxx zdůvodnit.
1.5. POPIS METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vypěstují xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stadiu xx nepoužívají. Xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vysoký titr xxxxxxxxxxxxxxx bakterií. Xxxx xx dá xxxxxxxx xxx z historických xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x jednotlivých xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk očkováním xx miskách.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx teplota xxxx 37xX.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx čtyři kmeny X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; TA 1537 xxxx XX97x nebo 1X97; XX98; a XX100); u xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx XX x xx xxxxx, xx nemusejí xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx detekovat pomocí xxxxx X. xxxx XX2 xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx bází XX. Xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx:
- X. typhimurium XX1535 a
- X. xxxxxxxxxxx XX1537 xxxx XX97 xxxx XX97x x
- X. xxxxxxxxxxx XX98 x
- X. xxxxxxxxxxx TA100 x
- E. xxxx XX2 xxxX nebo X. coli XX2 xxxX (xXX101) xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102.
X detekci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vazby xxxx xxx nejvhodnější xxxxxx XX102 xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kmen X. xxxx (xxxx. X. xxxx XX2 xxxx X. xxxx WP2 (xXX101)).
Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx kultury, xxxxxxx markeru x xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx, tryptofan v xxxxxxx kmenů X. xxxx). Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: xxxxxxxxxx xx nepřítomnost R-faktor xxxxxxxx xxx, kde xx xxxxxxxx x xxxxx (např. rezistence xxxx xxxxxxxxxx u xxxxx XX98, XX100 x TA97a nebo XX97, XX2 xxxX (xXX101) a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx x xxxxx XX 102); přítomnost xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (tj. xxx xxxxxx u X. typhimurium pomocí xxxxxxxxxx xxxx krystalové xxxxxxx x xxxX xxxxxx u X. xxxx nebo xxxX xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx citlivosti xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx xxxx mít xxxxx spontánně revertujících xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx očekávaném xxxxx xxxxxxxxxxxx kontrolních xxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx i x xxxxxxx uvedeném x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Médium
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx agar (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X x xxxxxxxx) x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx enzymů xxxxxxx, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx kombinace fenobarbitalu x ß-naftoflavonu (18) (20) (21). Xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx obvykle xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 30 % v/v xx xxxxx S9. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxxx záviset na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx post-mitochondriální frakci x několika xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx použít redukční xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).
1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / příprava
Xxxxx látky se xxxx působením xx xxxxxxxx rozpustí xxxx xx připraví xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx mohou xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx jejich xxxxx xxxxxxxxxx xx přijatelné.
1.5.2 Podmínky xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (viz 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx
Ke xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx vzít v xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, patří xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x konečné směsi, xxxxx xx x xxxxxxxx použije.
Xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x nerozpustnost x předběžném xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx zmenšením růstu xx pozadí nebo xxxxxx stupně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx změnit. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látek 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, jež x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx rozpustné, xx xxxxx nebo několik xxxxxxxxxxx mělo být x xxxxxxx pokusné xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µl/misku, xx xxxxxxx až xx xxxxxxxxxxx koncentrace. Sraženina xxxxx xxxxx při xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx různých xxxxxxxxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxx půllogaritmickým intervalem (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx body x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Zkoumá-li xx koncentrační závislost, xxxx být vhodný xxxxxxxx xxxxx. Testování xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µl/misku xxxxxxxx x úvahu, xxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx test xxxx zahrnovat x xxxxxxxxx xxxxxxx specifickou xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum) xxxxxxxx, jak s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Pro xxxxxxxxx kontrolu se xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
X xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx volí xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 |
Následující xxxxx xx vhodnou xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
Kongo xxxxxx | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-xxxxxxxxxxxxx xx nepoužívá xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx X9. Pokud xx 2-xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxx S9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, např. xxxx[x]xxxxxxx, dimethylbenzantracenenm.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx, uvádí xxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX | |
Xxxx xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 x XX 100 |
2-xxxxxxxxxxxx | 607-57-8 | 210-138-5 | XX 98 |
9-xxxxxxxxxxxx | 90-45-9 | 201-995-6 | XX 1537, XX 97 x XX 97x |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, TA 97 x XX 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | XX 102 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 | XX uvrA x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, WP2uvrA x XX2xxxX (xXX101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | WP2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (XX2) | 3688-53-7 | kmeny xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx referenční xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx použití xxxxxxxxxx se xxxxxxx x chemické xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx x negativní kontroly xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, bez testované xxxxx, se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx jako xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxx xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxx xx mutagenní xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx obvykle xxxxx 0,05 nebo 0,1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 ml xxxxxxx bakteriální kultury (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 xx sterilního xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx agaru. X xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx aktivací xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx metabolické xxxxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x v metabolické xxxxxxxxx xxxxx) x 2,0 xx vrchního xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx /testovaným roztokem. Xxxxx xxxxx zkumavky xx xxxxxxx a xxxxxx na xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 životaschopných xxxxx) a xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) obvykle po xxxx 20 xxx xxxx xxxx xxx 30 - 37 xX; xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x nalije xx misku x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx xxxxxxxx x 0,5 xx směsi X9 nebo xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx třepáním.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx přijatelné, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx xx xxxxxx misky, nemusí xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxx látky xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, například x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 XXXXXXXX
Všechny xxxxx x rámci xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx při xxxxxxx 37 xX xxx xxxx 48 - 72 xxxxx, načež xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx. Rovněž xx xxxxx počet xxxxxxxxxxxxx kolonií jak x negativní xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, byla-li xxxxxxx), tak z xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx látku x xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (resp. xxx působení rozpouštědlo) xx uvedou počty xxx xxxxxxxxxx xxxxx x průměrný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx misku včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xx musejí xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, je xxxxx to zdůvodnit. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx zvážit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx působení ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xxxx xxxxxxxxxxx x tekutém xxxxxxxxx) x podmínky metabolické xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ve sledovaném xxxxxxx x/xxxx reprodukovatelný xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx při xxxxx xxxx více xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx jednoho xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxx (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx biologická relevance xxxxxxxx. Xxxx pomůcku xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (24), statistická xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují, xx v tomto xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x když xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx bakteriálního xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx x genomu Xxxxxxxxxx typhimurium xxxx. Xxxxxxxxxxx coli. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, že xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx není testovaná xxxxx xx zkušebním xxxxx mutagenní.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx rozpouštědle, pokud xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxx x kultuře,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxx misku (v xx xxxx μx) xx zdůvodněním xxxxx xxxxx x počtu xxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-xxx x xxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx (včetně kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- postupy xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- počty na xxxxxxxxxxxx miskách,
- xxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.15. GENOVÉ XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kmeny xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx indukovaných chemickými xxxxxxx xxx a x xxxxxxxxxxxx aktivací.
Xxxx xxxxxxxxx forward xxxxxxx systémy u xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx míra vzniku xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx-1, xxx-2) xx xxxxxxx, xxxxxx vyžadující xxxx mutanty x xxxxxxxxxx systémy, xxxx xx indukce rezistence xx canavaninu x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx využití xxxxxxxxxxx xxxxx XX 185-14 X s okrovými (xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 2-1, xxx 4-17, xxx 1-1 x trp 5-48. Xxxxxx jsou vratné xxxxxxxxx mutagenů xxxx xxxxxx xxxx, které xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X nese rovněž xxx 1-7 marker, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mutacemi x xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx revertován xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxx je jediným xxxxxx xxxxxxxxxx kmenem X7, xxxxx xx xxxxxxxxxxx pro xxx 1-92.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Roztoky xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X organických xxxxx xx vodě xxxxxxxxxxxxx xx nemá xxxx roztok vyšší xxx 2 objemová % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx aktivace
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x přítomnosti, tak x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx užívaným xxxxxxxx xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx indukujících enzymy x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx jiných xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx rovněž vhodné xxx metabolickou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx kmen XX 158-14C a xxxxxxxxx xxxx D7 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx mutací. Xxxx xxxxx xxxxx xxx rovněž vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x mutovaných xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mají být xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx po xxx xxxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx případ xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Kultivační xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xx sedm xxx při 28 xx 30 xX xx xxx.
1.2.2.6 Frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx
Frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx být x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx nutno xxxxxx nejméně tří xxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx u testu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x u xxxxxxxxxx xxxxx. X experimentů xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 3-10 x xxxxxx xxxxxxx rychlostí xxxx být xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx získány xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx x tekutém xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 107 buněk/ml je xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX xx třepání. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x vyočkovány xx xxxxxx xxxxxxxxxx médium. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x buňky x xxxxxxx genových xxxxxx.
Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx proveden xxxxx xxxxx s buňkami xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx xx první xxxxx pozitivní, je xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx výsledky xxxx xxx potvrzeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx ve stacionární xxxx xxxx rostoucí, xxxxxxx xxxxx, teplota x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx aktivační systém,
- xxxxxxxxx vlastního xxxxxxxxxxx: xxxxxxx expozice, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx kolonií, počtu xxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx mutací, xxxxxx xxxxx a xxxxxx, pokud xx xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx rekombinace x Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx mezi xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. První xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxx je xxxxxxxx nereciproční a xx nazýván xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx testováno xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xx základě xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzniklých x auxotrofního heteroalelického xxxxx, který xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx mitotické xxxxxx konverse xxxx X4 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 x xxx 5), D7 (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 5), BZ34 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4) x JD1 (xxxxxxxxxxxxxx x his 4 x xxx 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x růžové xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx u X5 xxxx X7 (který xxxxxx měří xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx mutace v xxx 1-92). Oba xxxxx xxxx heteroalelické xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxx nerozpustných se xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % v xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, xxxx xx xxxxxx, aceton xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx a charakteristiky xxxxx.
Metabolická aktivace
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testovaných xxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, tak x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakce xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x doplněná kofaktory. Xxxxx jiných xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx rovněž vhodné xxx metabolickou aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Nejužívanější jsou xxxxxxxxx xxxxx X4, X5, D7 x XX1. Užití xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní, xxxxxxxxxxx x rozpouštědlem xxxxxxxxx kontroly jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx specifickou xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx koncentrací. Xxxx xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x rozpustnost. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nesmí xxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X toxických xxxxx nemá nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pod 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx až xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, je xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx být xxxxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx buď xxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. Xxxxxxx dlouhodobě xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx
Misky xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xx čtyři xx xxxx xxx xxx 28 - 30 xX. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx sektorů xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x chladničce (xxx 4 xX) xx xxxxx 1 - 2 dny xxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxx utvořit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kolonie.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx rekombinace
Xxxx xxx užity xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx normálních xxxxxx.
1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx
Xx nutno xxxxxx xxxxxxx tří misek xx xxxxx xxxxxxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxxx xxxxx tvořených xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx mitotickým překřížením xx být počet xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx dostatečného xxxxx kolonií.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx S. xxxxxxxxxx xxxxxxx obvykle xxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxx prostředí x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx pokusy mají xxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx xxxxxxxxx testované xxxxx xx dobu xx 18 x. xxx 28 xx 30 oC xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx ovlivnění xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx počítány xxxxxxxxxxx xxxxx x buňky x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx pokus negativní, xx xxx proveden xxxxx xxxxx x xxxxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozitivní, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje mají xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx počet kolonií, xxxxx rekombinací, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Údaje xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- použité xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: buňky xx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxx, složení xxxxx, xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, postup x xxxxxx xxxxxxxxx, teplota xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx,
- počet xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, přežívajících xxxxx x frekvence xxxxxxxxxxx, vztah dávky x účinku, xxxxx xx to možné, xxxxxxxxxxx hodnocení xxx,
- diskusi výsledků,
- vyhodnocení xxxxxxxx.
B.17. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX XXXXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Gene Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx genových xxxxxx in xxxxx xx xx používat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx lymfomové xxxxx X5178X, xxxxx CHO, XXX-XX52 x X79 xxxxx čínského xxxxxx x xxxxxx lymfoblastoidní xxxxx XX6 (1). X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx konečný xxxxxxxxx xxxxx zjišťují xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX) x x xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX). Testy xxxxxx x XX, HPRT x XXXX se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx změn. Autosomální xxxxxxxxxx TK x XXXX xxxx xxxxxxx xxxxxxx i xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx xx lokusu XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
X xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx buněčných xxxxx. Xxx xxxxx xxxxx se xxxxx x úvahu xxxxxxx xxxxxxxxxx dané kultury x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx podmínky xx xxxx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxx xxxxxxxx podmínek, xx xxxxxxx by výsledky xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx nejsou důsledkem xxxxxxx mutagenity xxxx xxxxx x důsledku xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx screeningu xxxxxxx xxxxxxx mutagenů x karcinogenů. Řada xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx, neexistuje xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxx v xxxxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx formy, xxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx substituci páru xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx jednoho xxxx xxxxxxxx páru xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxx x DNA.
Doba xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx jsou x xxxx zmutovaných xxxxx xxxxxxxxxxxx nezměněné genové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx počtu xxxxx x xxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxxx xx jako xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti xxxxxxx efficiency (x xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx efficiency) xxxxxxxxxxx xxxxx x době xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx podmínkách xx xxxxxx exprese.
Přežití: xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) ovlivněných xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Buňky, xxxxxxxxxxx xx thymidinkinázu (TK) x xxxxxxxx xxxxxx XX+/- → XX-/-, xxxx rezistentní xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pyrimidinového xxxxxxx trifluorthymidinu (TFT). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx XXX xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx XXX proto xxxxx xxxxxxxxxxxx mutovan xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx thymidinkinázu, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx buňky x xxxxxxxxxxx XXXX nebo XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 6-xxxxxxxxxxx (XX) xxxx 8-azaguaninu (AG). Xxxxx je xxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx vlastnosti testované xxxxx bedlivě xxxxxx. Xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxx xxxx. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx třeba potvrdit, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx vhodnou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s metabolickou xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxxxx xx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a k xxxxxxx fenotypické exprese xxxx xxxxxxx xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx relativního xxxxxxxxx xxxxxxx kultur xx xxxxxxxx látky. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx dostatečnou dobu, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx daný xxxxx a xxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx expresi xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxx v médiu xxxxxxxxxxx selekční xxxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxx tohoto xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx kolonie spočítají. Xxxxxxx frekvence se xxxxxx z xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x selekčním xxxxx x z xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx, včetně xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x XX6. U xxxxxxxxx typů xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx klonovací xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx kontroluje, xxx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, aby měl xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (power). Počet xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxx xxxxxxx expozici x xxxxxxx se x xxxxxxxxxxxx stadiích xxxxx, xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnoty xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx však použít xxxxxxx 106 buněk. Xxxx xx xxx x xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testu.
1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx podmínky (xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentraci CO2, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx xx pro xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx expresní xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxx teplotě 37 xX. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx látkou xxxxxx x přítomnosti x x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx xx kofaktory xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx hlodavců, ovlivněná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx a β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx x médiu činí xxxxxxx 1 - 10% x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, jakého xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxx frakci x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xx systému xxxxxxxx přímo xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx neovlivňuje xxxxxx vlastnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
X zvoleného xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat, x xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx x aktivitu X9. Používá-li se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx prokazujícími xxxx xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx, xxx všude xxx, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Je-li testovaná xxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlo xxxxx xxxxxxx. Voda xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, xxx se uvažují xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx v systému x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx buněk, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (přežití) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx růst. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx čtyři xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx maximální xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx lišit xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. Xxxxxxx-xx maximální xxxxxxxxxxx x cytotoxicity, měla xx xxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x 10-20 %, xx xxxx méně xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx měla xxx nejnižší z xxxxxx 5 mg/ml, 5 μx/xx x 1,01 M.
U relativně xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, má xxx xxxxxxxx použitá xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mez rozpustnosti xx xxxxxxxx kultivačním xxxxx xx konci xxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx konci působení, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx během expozice x xxxxxxxx přítomnosti xxxxx, S9, xxxx xxx. xxxxx. Nerozpustnost xx xx zjistit x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx být xx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx provést x xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (rozpouštědlo, vehikulum) xxxxxxxx, x xx xxx x metabolickou xxxxxxxx, xxx bez xx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx látkami xxx xxxxxxxxx kontrolu patří xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx methansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
XX (xxxx a xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx methansulfonát | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XPRT | ethyl metansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (malé x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cyklofosfamidu benzo[a]pyren 3-methylcholantren | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XPRT | N-nitrosodimethylamin (pro xxxxxx koncentrace X-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
xxxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx xxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx historickou xxxxx x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (XXX 59-14-3, xxxxx XXXXXX 200-415-9), xxx použít x xxxx referenční xxxxx. Xxx, xxx xx xx xxxxx, xx vhodné xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx interval xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx, zpracované xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx účinky.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Expozice xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx buňky xx xxxxxx testovanou xxxxxx jak x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Expozice xxxxxxx po xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Doba expozice xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx více xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx koncentraci xx xxxxxxxxx kultury xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxx xxxxx kultura, xx třeba zvýšit xxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx zajistil xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx osm xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx látek xx xxxxx uplatnit x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx je použití xxxxxxxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx přežívání, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a fenotypické xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx začíná x analýzou cytotoxicity xxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti - xxxxxxx efficiency xxxx relativního xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx expresi xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XPRT vyžaduje xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 dny). Xxxxx xx pěstují x xxxxx x x xxx selekčního xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx účinnosti. Xx xxxxxxxx doby xxxxxxx xx začne x xxxxxxxx životnosti (xxxxxxxxx x xxxxxxx četnosti xxxxxxx) inokulací buněk xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx x xxxxx X5178X XX+/- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x experimentálních xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x na xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách xxxxxxxx velikost kolonií. Xxxxx je xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxx i xx studiích x XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Xxxx xxxx slouží xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x mutační xxxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx kultur. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x testu X5178XX+/- se kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx přinejmenším v xxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx x cytogenetické xxxxxxxxxx xxxxxxx i xxxxxx kolonií byly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx testu TK+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (velké) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, mají xxxxx dobu xxxxxxxx, x proto xxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx obvykle xxxx od ztráty xxxxxx genu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx látkám xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx postižené mutanty xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx cloning xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx celkový xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx vyjadřuje xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; nakonec xx xxxxxxx xxxx shrnou x xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx se objasňují xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X případech, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxx nejednoznačných nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx v následných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx studie xxx, xxx xx rozšířilo xxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, patří rozdíly xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx reprodukovatelný nárůst xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody. Xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx xxxxxx být xxxxxxx určujícím faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx systému xxxxxxxx xx nemutagenní. Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx negativní výsledky, x ojedinělých případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx dat xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx genové xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx dávka - xxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxxxxxx genové mutace.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx informace:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- typ x xxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx kultur,
- xxxxxxxx xxxxx pasáží,
- xxxxxxxx xxxxxx kultivace xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx kultur, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x dispozici,
- xxxxxxx média, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxxxx testované xxxxx,
- objem xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx inkubace,
-doba xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (případně xxxxxx xxxxx inokulovaných xxxxx, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- metody xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, x nichž xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx (xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "velkými" xxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- údaje x xX a osmolalitě xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxx zjistit malé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X5178X XX+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, je-li to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- souběžné xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.18. POŠKOZENÍ XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - XXXXX XXXXX XX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (XXX) xxxxxxxx xxxxx reparační xxxxxxx XXX po xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3H-TdR) xx DNA xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x X xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vzestup 3X-XxX xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxxx buňkách. Xxxxxxxxx se primární xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx v xxxxxxxxxxx, xxx x v xxxxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxx xxx také xxxxxxxxx v xxxxxxx xx xxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Testované xxxxx x sloučeniny xxxxxxx jako kontrolní xxxx referenční xx xxxxxxxx xxxx suspendují x kultivačním médiu xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxx xx provádí jenom xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx životnost xxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx kultur
Xxx xxxxx experimentální xxx xx potřeba xxxxxxx xxxx buněčných xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxx xxxx, xx-xx to xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX UDS.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx současně xxxxxxxx negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx i v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx x xxx XXX bez metabolické xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-NQO). Xxxx xxxxxxxxx kontrolu při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lze xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Xxxx být použito xxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx toxický xxxxx.
Látky ve xxxx špatně rozpustné xxxx být testovány x xxxxxxxxxxxxx xx xx hranici rozpustnosti xx použití vhodných xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx určuje případ xx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx růstové xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx x xxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx kontrolovány xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx hepatocytů se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx experiment
1.2.3.1 Příprava xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx se připravuje xx xxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx nebo setřepáním xxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), inokuluje xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 oC.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx připravují xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx izolovaným xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Kultury lidských xxxxxxxxx jsou založeny xxxxxx vhodné xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur xxxxxxxxx xxxxx
Primární hepatocyty xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x médiu xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie x xxxxxxxxx
Autoradiografické xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxx xxxx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 3H-TdR. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx na druhu xxxxxxxxx xxxxx, aktivitě xxxxxxxxxxxxx systému x xx xxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxx 3H-TdR přidat xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx několik xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx ovlivněn xxxxxx interakcí mezi xxxxxxxxxx xxxxxx a 3X-XxX. X odlišení xxxx UDS x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx xxxxx arginin xxxxxxxxxxx médium, xxxxx xxxxx xxxx nebo xxxxxxxx hydroxyurey xx xxxxxxxxxxxx xxxxx, což xxxxxxx inhibici semikonzervativní xxxxxxxxx XXX.
Xxxxxxxxx XXX pomocí XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vstup xxxxx xx X-xxxx, xxx xxxx shora xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxx xxxx xxxxxxx xxx autoradiografii. Xx xxxxx xxxxxxxxx je XXX extrahována x xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx XXX x xxxxx rozsah xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Xxxxxxxx xxxx použity ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx replikace XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Analýza
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Při xxxxxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx kultuře xx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx. Hodnotí xx xxxxxxx 50 xxxxx x každém xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Preparáty xx xxxxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vybraných xxxx. Xxxxxxxx inkorporovaného 3X-XxX x xxxxxxxxxx xx xxxx x xxxx o xxxxxxxxx xxx jader v xxxxxxxxxx každé hodnocené xxxxx.
1.2.4.2 Vyhodnocení XXX
Xxx xxxxxxxxx XXX XXX se použije xxxxxxxxx počet xxxxxx xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx cytoplazmy a xxxxx zrn nalezených xxxx xxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxx.
Xxxxxx inkorporace 3H-TdR xx cytoplazmy x xxxxx zrn x xxxxx je xxxxxxxx xxxxxx průměru, xxxxxxx x xxxx.
2.2 Vyhodnocení XXX
Inkorporace 3X-XxX xx zaznamenává xxxx xxx/μx XXX. Průměrná xxxxxxx xxx/μx XXX xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Údaje xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx kultur,
- xxxxxxxx použitých k xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2,
- testované látce, xxxxxxxxxxxx, koncentracích x xxxxxxxxxx jejich výběru x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx schématu,
- pozitivních a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx autoradiografických xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,
- postup xxxxxxxxx k extrakci XXX x k xxxxxxxxxxx celkového obsahu XXX xxx xxxxxx XXX,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- statistickým xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.19. XXX - XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
XXX xx krátkodobý xxxx xxx xxxxxxx recipročních xxxxx XXX xxxx xxxxx sesterskými xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. SCE reprezentují xxxxxx xxxxxxxxxxx sekvencí XXX mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx zlom x xxxxxxxx spojení, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx základě tohoto xxxxxxx. Xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatid. Xxxx xx xxxxxxxx inkorporací xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) xx xxxxxxxxxxxxx XXX na xxxx dvou xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx vitro xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x přítomnosti x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xx-xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx po xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx XxxX. Ke xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx ovlivní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vřeténka (xxxx. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx x x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx ukončení xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxx a připraveny xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Používají xx xxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxxxx x hlediska xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.
Používají xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx, kultivační xxxxxx, koncentrace XX2 x xxxxxxx).
Testovaná xxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, rychlost xxxxx xxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxx se xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx použití buněčných xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx aktivity xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx použijí xxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx experimentu xxxx xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx musí xxx použita negativní xxxxxxxx x použitým xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx:
- xxxxx působící xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx xxxxx, xx možné zařadit xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx dávky. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xx xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Stabilizovaná xxxxxxx linie xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx nádob xx xxxxxx hustotě x xxxxxxxx xxx 37 oC. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx takový xxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxx než x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxx běžnými xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Buňky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v exponenciální xxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu. Xx xxxxxxx xxxxxxx stačí xxxxx xx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xx na dva xxxxxxx xxxxx, je-li xx xxxxx. Xxxxx, xxxxx nemají xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx x média xxxxxxxxxx, buňky xxxxxx x dále xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx médiu x XxxX dva xxxxxxxxxx cykly. Alternativně xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkou x XxxX po dobu xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx analyzovány x xxxxxx mitotickém xxxxxx xx expozici xxxxxxxxx látce, která xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx buněčného xxxxx. Xxxxxxx kultury x XxxX xx xxxxx xxxxxxxx v temnu xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, aby xx zabránilo xxxxxxxx XXX, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Jednu xx čtyři xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (např. kolchicín). Xxxxx kultura xx xxxxxxxxxx samostatně.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx a barvení
Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx preparátů xx xxxxxxxxxx XXX xxxx xxx provedeno xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. fluorescenční xxxx Giemsa).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx závislý xx xxxxxxxxx frekvenci XXX x xxxxxxxx. Xxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx 25 dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx před xxxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx analyzují xxxxx xxxxxxxx s 46 xxxxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx pouze xxxxxxxx, které xx xxxx o ± 2 xxxxxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx třeba stanovit, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx SCE x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x každé xxxxxxxx x xxxxx XXX/xxxxxxxxx zvlášť pro xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx.
Údaje xx xxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu obsahuje, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, metodách xxxxxxxxx x udržování xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, koncentraci XX2, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice, inhibitoru xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- počtu kultur xxx každý experimentální xxx,
- způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxx XXX/xxxxx x XXX/xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxx každou xxxxxxx),
- kritériích xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx koncentrací,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX XXXXXX XX XXXXXXX U XXXXXXXXXX MELANOGASTER
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Test xx xxxxxxxxx letální xxxxxx xxxxxx na pohlaví (XXXX) xx Drosophila xxxxxxxxxxxx umožňuje detekci xxxxxx, jak genových, xxx x xxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxx hmyzu. Je xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx screening mutací x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxx 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přibližně 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx x X-chromozómu xx fenotypicky projeví x xxxxx nesoucích xxxxxxxx xxx. Když xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx její xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx jednoho ze xxxx typů xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. XXXX test xx xxxxxxx xxxxxxxx x zvláštnímu xxxxxxx x xxxxxxxxxx chromozómů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxx dobře xxxxxxxxxx xxxxxx linie x xxxxxx linie Xxxxxx-5. Xxxxx být xxxxxxx x xxxx vhodné xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x vícenásobnou xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Testované xxxxx
Testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx xx xxxx nerozpustné xx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle (xxxx. xxxx xxxxxxx x Tweenu-60 xxxx 80), xxxx xxxxxxxx xx dále xxxx xxxxx nebo fyziologickým xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx frekvence xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nutný xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx per xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx plynům nebo xxxxx. Zkrmování xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x cukerném roztoku. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx XxXx a xxxxxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jestliže má xxxxxxxxx x dispozici xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, není xxxxx xxxxxxxxx do experimentu xxxxxxxx kontroly.
1.2.1.6 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx maximální xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxxxx. Netoxické xxxxx se xxxxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Popis xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx typu (xx stáří 3-5 xxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Samice xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx dva xx xxx xxx, xxx xxx xxxxxx celý xxxxxxx cyklus xxxxxxxxxxx xxxxx. X potomků xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx s účinkem xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ve středním xxxx pozdním stadiu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x spermatogonie.
Heterozygotní X1 xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx dále xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx. V F2 xxxxxxxx je x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx v xxxxxxx vznikají X1 xxxxxx nesoucí xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx chromozómem), dcery xxxxxx samic se xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx, zda xxxxxxxx xx opakuje x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx údaje xx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x počet xxxxxxxxxx s letální xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, pro každé xxxxxx xxxxxxx a xxx xxxxxxx testovaného xxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxx clusterů xxxxxxx xxxxxxxxx xxx každého xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx potvrdit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx zhodnotí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x jednom xxxxx má být xxxxx x úvahu x zhodnoceno xxxxxxx xxxxxxxxxxxx způsobem.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:
- xxxxxxxxx liniích xxxx xxxxxxx Drosophily, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxxx xxxxx, počtu vzniklých X2 xxxxxx, xxxxx X2 xxxxxx xxx potomků, xxxxx xxxxxxxxxx nesoucích xxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx xxxxx ovlivňování x xxxxxx odběru xxxxxx, výše dávek, xxxxx o toxicitě, xxxxxxxxx (x rozpouštědlem) x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx počítání xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx možné,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.21. XXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX - XX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
Savčí xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx chemickými látkami xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx in vivo. Xxxxxxxxxx se používají xxxxx X3X10X1/2, 3X3, XXX, Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x test xx xxxxx x změny xxxxxxx morfologie, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx fyziologické xx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx výsledek xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Některé xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Cytotoxicita xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxx kolonie (cloning xxxxxxxxxx) nebo ovlivněním xxxxxxxxx růstu kultury. Xxx hodnocení cytotoxicity xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx k xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx test xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x xx je xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x spolehlivost.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx test xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Testované xxxxx xx rozpouštějí xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx x kultuře nesmí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx rychlost nebo xxxxxx transformace.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Buňky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx látky.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Negativní a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx experimentu musí xxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx působících x vyžadujících xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx látek pro xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-propiolakton,
- xxxxx xxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Je-li xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Koncentrace
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx závislý xx xxxxxxxxxxx, nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dobu závislou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Ta může xxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxxxxxxx testované látce xxxxxxxx x výměnou xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxx), xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxx vlastní metabolické xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx testované látce x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxx expozice je x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látka x kultivace xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx. Xxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx kontrolní xxxxxx x frekvenci xxxxxxxxxxxx xxxx počet xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx použitých k xxxxxxxxx kultury, xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx testované xxxxx, době xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, hustotě xxxxx během xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx selektivního systému (xx-xx xx xxxxxx), xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x transformovaných xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX XXXX X XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Indukce xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxxxx, xx tato xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Obecně se xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx mutace jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Samci xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx x neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx mrtvých xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x exponované skupině xxx xxxxx mrtvých xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx vyjadřuje xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx porovnáním xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx součet pre- x postimplantačních ztrát. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx živých xxxxxxxxxx xx xxxxxx x exponované xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx zánikem xxxxx (t.j. xxxxxxxxxxxx x/xxxx spermatogonií).
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxxx xxxxx rozpustit nebo xxxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx xxxx xx xxxx xxxx suspendují xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx rozpouštědlo xxxxx xxxxxxxx x testovanou xxxxxx ani vyvolávat xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podává xxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx podávat xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx orální xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxx i xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx. Xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jsou náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxxxxx počet exponovaných xxxxx x ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx se řídí xxxxxx zjištěnou detekční xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx případě xx xxxxxxxxx volí xxxxxx xxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxx 30 - 50 xxxxxxx xxxxx xx připouštěcí xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) kontroly musí xxx zařazeny xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx laboratoř x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx ve xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx citlivost xxxxx (např. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je postačující xxxxx xxxxxx dávka.
1.2.2.6 Xxxxxxx test
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x xxxxx dávce 5 g.kg-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx opakované xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Existuje xxxxxxx postupů. Nejčastěji xx používá xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx však xxx xxxxxxx jiné xxxxxx.
Xxxxx samec xx opakovaně křížen x jednou xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx neprokáží xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
Počet xxxxxx xx expozici xx dán xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx všechna stadia xxxxxxxxxxx xxxxx sledovaných xx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx druhé xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx dělohy je xxxxxxxx k xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx vyšetřeny x xxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx x xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx v xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx páření xxxxxx identifikace každého xxxxx a samice xxxx uváděny xxxxxxxxxx. Xxxxx samice xxxx xxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxx, x počtu xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx živých xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx mrtvých xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině ke xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupině xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrátách.
X xxxxxxx musí xxx xxxxx odlišeny xxxxx x xxxxxx letalita. Xxxx být xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx ztráty. Xx mohou být xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxx průměrného xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxxxxxxx vhodnými statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx možno, informace x:
- druhu, xxxxx, věku x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, dávkových hladinách x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, negativních x xxxxxxxxxxx kontrolách, xxxxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx páření,
- xxxxxxxx x průkazu xxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX V XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 483, Mammalian Xxxxxxxxxxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xx xx vivo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx a chromatidové. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx většinou xxxxxxxxxxxx, ovšem k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu xxxxxxx xxxxxx. Tato xxxxxx xxxx určena x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x příbuzné xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Tímto xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx předpokládá, že xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
K xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Tímto xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx se zjišťují xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx buňky.
Aby xx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx chromatidového xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mitózu xx působení xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx než xx poškození ztratí x xxxxxxxxxxxx buněčném xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x ovlivněných xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxx buňky xxxx xx spermatocyty.
Xxxxx xxxx in xxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx mutageny xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx aktivní v xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Mimoto xx xxxx význam xxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxxx posuzovat xxxxxxx xxxxxxxxxxx in xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx procesů DNA.
X xxxxxx xx xxxxxxxx řada generací xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxx. Zjištěné xxxxxxx xxxx představují xxxxxx reakcí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx kvůli anatomické x fyziologické xxxxxxx Xxxxxxxxx buněk x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx, že xx xxxxxxxxx látka xxxx její reaktivní xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx pro xxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx zlom x xxxxxxxx spojení mezi xxxxxxxxxxxx.
Aberace chromozómového xxxx: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx obou xxxxxxxxx xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx chromatid xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx větší, xxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále xxx v xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx zlomu xx dislokovaný (nebo xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx chromatid.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Polyploidie: xxxxxxx haploidního xxxxx xxxxxxxxxx (n) jiný xxx xxxxxxxxx počet xxxx (3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx, x výměny.
1.3 XXXXXXX METODY
Zvířata xx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx xxxx po působení xx usmrtí. Před xxxxxxxxx xx na xx působí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx pak xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Běžně se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxx xxxxx použít xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx studie xxxx xxx minimální x u xxxxxxx xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x části X.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx minimálně xxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx uspořádat xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky se xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Rozpouštědlo/vehikulum x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx a nesmí x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx třeba xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx xx zvířaty xx xxxxx skupinách xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxx xxxxxxx, kdy lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole xx xxxx tak, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost zakódovaného xxxxxxxxx. Pozitivní kontrolu xx možné xxxxxxx xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx látku a xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx intervalu. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Příklady xxxxx vhodných pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Látka | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
akrylamid xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx vehikulem x xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx skupiny xxxx xx být xxxxxxxx xx všech xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx o frekvenci xxxxx x xxxxxxxxx x x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i neovlivněných xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx prokazující, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx nebo mutagenní xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx minimálně xxx analyzovatelných xxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxxxxxxx xxxxx se podává xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx jedná x objemnou xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx aplikace rozdělit, xx. na xxx xxxxx za xxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx hodin. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dvakrát. Jelikož xxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx pozdější xxxxx xxxxxx 24 x 48 hodin po xxxxxxxx. U ostatních xxxxx (tj. xxxx xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx vzorků xxxxxxx xx 24 hodinách xxxx po 1,5násobku xxxxx buněčného xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (6).
Xxxxx toho mohou xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx o látku xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómů xxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx S-fázi xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx odběru xxxxxx (1).
Zda xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx provádí xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, usmrcují xx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx (1,5násobku xxxxxxxxx cyklu) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxxxx x x xxxxxxx intervalech, xxxxxxxx-xx se xx xx xxxxxx.
Před xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje vhodná xxxxx Colcemidu® xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx xx tento xxxxxxxx zhruba 3-5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4-5 xxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx rozpětí toxicity, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxx, xx třeba xx xxxxxxxx v xxxx laboratoři xx xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xxx xxxxx tak, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx toxicity k xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx pozdější xxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx při xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx byly xxxxxxx.
Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx také xxxxxxxxxx jako xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxxxx (např. xxxxxx poměru xxxxx xxxxxxxxxxxxx x první x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xxxxxx xxxx xxx vyšší xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx podaných x xxxxx xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xx může použít x xxxxxxxx testu xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Testovaná látka xx obvykle xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx sondou, xxxx intraperitoneální xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx přijatelné x jiné xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, která xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 g hmotnosti; xxxxx xxxxx musí xxx zdůvodněné. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx vykazují xxx xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xxx, aby xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx se xxx objemová variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx chromozómů
Xxxxxxxx xx usmrcení zvířete xx z jednoho xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxx buněčná xxxxxxxx, na xxxxxx xx působí hypotonickým xxxxxxxx a xxxxxx xx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx.
1.5.7 Analýza
X xxxxxxx jedince xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx xx snížit, xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx preparáty (včetně xxxxxxxxxxx a negativních xxxxxxx) xx před xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx fixační xxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxx xxxx buněk xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxxxx. U xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxxx xx jednu xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxxxx mitóza x xxxxxx, xxxxxxx xx x všech xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx míra xxxxxxxxxxxx poměr xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx, a to xxx, že xx x xxxxxxx jedince xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxx mitóza, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx kritérií, například xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx xxxxxx počtu buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x s xxxxxx časovým intervalem xxxxxx xxxxxx. Nejprve xx třeba uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx statistické metody (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx považuje xx nemutagenní.
Ačkoliv xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx ohledu xx xxxxx opakovaných xxxxxxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx ukazují, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx dosáhne xxxxxxxx xxxxxxx nebo je xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x xxx xxxxxx,
-původ, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost jednotlivých xxxxxx xx počátku xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xx studie xxx xxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx aplikace xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx / xxx),
- podrobnosti x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx koncentrace a xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx jedno xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx metafázi,
- xxx x počet xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx aberací x xxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li provedeny,
- údaje xx xxxxxxxxxx negativních kontrol,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx pozorované xxxxx xxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.24. XXXX XXXX X MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xx xx xx xxxx xxxx xx xxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx chemickým xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx geny xx, které kontrolují xxxxxxxxxx srsti. Embrya xxxx heterozygoti pro xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Mutace xxxx ztráty xxxxxxxxxxxx xxxxx v genech xxxxxxxxxxxx xxxx vyjádřeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx vytvářejících xxxxxx (spots) xxxxxxxxx xxxxx srsti xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x těmito xxxxxxxx, xxxxxxxx, je xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx u xxxxxxx x kontrol. Myší xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx buňkách.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxx. Používají xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxx T (nonagouti, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, xxx x/xxx x; brown, x/x; xxxxxx, xxxxx xxx, x xx/x se; xxxxxxx xxxxxxxx, x/x) xxxx xxxxxxx buď x xxxxxx XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xx a xx/xx x bp; xxxxxx xxxxx, xx xx/ /xx xx; pearl xx/xx) xxxx x xxxxxx C57 XX (xxxxxxxxx, x/x).
Xxxxx xxx použita i xxxx křížení, xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx XXXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxx, c/c) x XXX (nonagouti, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx zvířat
Xxxxxxx xx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxx samic, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx dávku. Xxxxxx xxxxxxxx vzorku xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx a x kontrolních myší. Xxxxxxxxx výsledky jsou xxxxxxxxxxx pouze x xxxxxxx, xx bylo xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xxxx být použity xxxxxxxx xxxxxxxxx pouze xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxxx citlivosti xxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx laboratoře xx předpokladu, xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x pozitivních xxxxxxx získané v xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx mutagenním xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x testované xxxxx nebyla mutagenita xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx. Xx-xx xx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiný xxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxx dvě xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx jsou xxxxxxxx ovlivněna testovanou xxxxxx xxxxx jednou 8., 9. xxxx 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 a 9.25 xxx po xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxx xxxxxxx během xxxxxx dnů.
Xxxxxxx
X mláďat xx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx mezi xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx po porodu. Xxxxxxxxx xx tři xxxxx xxxxx:
(a) xxxx skvrny x xxxxxxx 5 mm xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx xx předpokládá, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);
(x) xxxxx xxxxxx typu xxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx, hrdla, axil, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (MDS);
(x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx výsledek xxxxxxxxxxx xxxxxx (RS).
Xxxxxxx xxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx, RS, je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx mezi XXX a XX xx xxxxx vyřešit xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx potomků.
2. XXXXX
Získaná xxxx xxxx xxxxxxx jako xxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxx majících jednu xxxx více skvrn xxxxxxxxxx somatickými xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Údaje xxxx také xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx vrh.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- kmeni xxxxxxxx xxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxx odstavení,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx aplikována,
- x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx x XXXX, XXX a XX x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x XX, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Test xx přenosné xxxxxxxxxxx x myší xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x první xxxxxxxx potomků. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx reciproké xxxxxxxxxxx x u xxxxxxxx potomků ještě xxxxxx X-chromozómu. Nositelé xxxxxxxxxxx x XX-xxxxxx xxxxxxxx sníženou fertilitu, xxxxx xx xxxxxxx xxx výběr X1 xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx způsobena xxxxxxxxx xxxx translokací (X-xxxxxxx x x-x xxx). Xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx ve stadiu xxxxxxxxx-xxxxxxxx I, xxxx X1 xxxxx xx xxxxxxx potomků F1 xxxxx. Xxxxxx XO xxxx xxxxxxxxxxxxx identifikovány xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx v mitózách x xxxxxx xxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx látky jsou xxxxxxxxxx x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx nerozpustné, xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx reagovat s xxxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.1.1 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxx xx xxxxxxx orálně xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx verifikaci xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xx xxxx xxx xxxxx xxx osm x xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se zdravá, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Počet xxxxxx nutně xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxx indukovaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Test xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx samců X1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x F1 xxxxxxxx je testováno x každé xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx také xxxxxx X1 xxxxxxxx potomků, xxx xx xxxxxxxx 300 xxxxx a 300 samic.
1.2.1.4 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx výsledky kontrol xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx laboratoře, mohou xxx použity.
1.2.1.5 Dávkování
Xxxxxxx se jedna xxxxx, obyčejně xxxxxxxx xxxxx vyvolávající minimální xxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx chování xxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx dvou dalších, xxxxxxx dávek. U xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Popis xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxx x oplodnění
Xxxxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx používá jedna xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxx xx možná xxxxxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx sedm xxx x xxxxx po 35 xxx.
Xxxxx xxxxxxxxx po expozici xx xxxxx schématem xxxxxxxxxxx a musí xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx stadia xxxxxxxxxxx xxxxx budou xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxx rozděleny xx xxxxx. Xx xxxxxx xx xxxxx zaznamenat xxxxx, velikost xxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xx vrhu xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx až xx xxxx xxxxxxxx xx experimentu.
1.2.2.2 Zjišťování xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx ze xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx fertility X1 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx možných xxxxxxxx xxxxxxxxxxx cytogenetickou xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx X1 xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxx xxxxxxxxx
Snížená fertilita xxxxxx x F1 xxxxxxxx se může xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx určení xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx stanovena xxx každý xxxx xxxxxxxxx myší.
Xxxxxxxx xxxx: F1 xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx ze stejného xxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx vrhu x xxxxxxx F2 xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxx porodu, xxxx xxxx xxxx odděleni. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx X1 samice, X2 xxxxxxx xxxxxx vrhů xxxx uchováváni xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxxxx x jakéhokoliv jejich xxxxxxxx potomka. XX-xxxxxx xxxx xxxxxx změnou xxx ratio xxxx xxxxxx xxxxxxx x 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx vs. xxxxxx. V následném xxxxx xxxx normální X1 xxxxxxx xxxxxxxx x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx X2 xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jinak xxxx zaznamenány druhé x třetí xxxx. X1 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx tří X2 xxxx, xxxx dále xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx dělohy, xxxx xxxx xxxxx podrobena xxxxxxxxxxxxx analýze.
Analýzy xxxxxx dělohy: Redukce xxxxxxxxx xxxx x xxxxxx translokací xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx implantací indikuje xxxxxxxxxx translokací u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Testovaní X1 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ke 2 - 3 xxxxxxx. Oplodnění se xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zátky. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx 14. - 16. xxx x jsou xxxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxx xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxx X x primárních xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx dvou xxxxx x multivalentními xxxxxxxxxx xxxxxxx požadovaný xxxxx, xx testované xxxxx xx nositelem xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx X1 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Na xxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 buněk x xxxxxxxxx - metafáze X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx s xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx x X1 xxxxx xxxxxxxxxxx XX. Přítomnost xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx translokační xxxxxxxxx (x-x xxx). Xxxxxxx X-autosomální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx xx xxxxx 10 xxxxxxxx je xxxxxxx xxx XX xxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx jsou prezentovány xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx zaznamenána xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx (sex xxxxx).
Pro odhad xxxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxx průměrná xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x individuální xxxxxxxxx xxxx X1 nosičů xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx průměrný xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x kontrole x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x mrtvých xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx F1 nosičů xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X xx xxxxx počet xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx počet xxxxx xxx každého xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx X1 xxxxxxxx jedince xx zaznamenává počet x xxxx připuštění. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx o cytogenetické xxxxxxx.
X XX xxxxx se uvádí xxxxxxxx velikost xxxx, xxx xxxxx X2 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx analýzy.
X xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx byly xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx uvést informaci x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx translokačních heterozygotů.
Xxxx být xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x pozitivních kontrolách.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxx xxxx, xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- počtu rodičovských xxxxxx pro každé xxxxxxx x exponovaných x kontrolních skupinách,
- xxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách, xxxxxxxx popis xxxxxxxxxxx xxxxxx, dávkové hladiny, xxxxxxxxxxxx x schéma xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x pohlaví xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro analýzu xxxxxxxxxxx,
- xxxx x kritériích xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxx cytogenetické xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx x obrázky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90denní xxxxxxxxx podávání xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx po 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xx každé xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx v podmínkách xxxxxxxx a krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Před xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, v xxxxxxxx xxxx v pitné xxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, xxxx xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx dřívější data, xx možno xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx případě xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx měli xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 6 týdnů, v xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 xxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný živočišný xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx použít nejméně 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx musí xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx každého xxxxxxx) po xxxx 90 dnů nejvyšší xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx úrovně dávek x xxxxx kontrolní xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, a xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx obdrží xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx u xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx hodnotu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx vyvolat xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx.
Xx skupině x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx být xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx xxxxxxxxxx koncentrace (x ppm xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx dávkování ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Aplikuje-li xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxx xxx xxxxx den xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (týdenních xxxx čtrnáctidenních) přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx xx 90xxxxx xxxx xxxx popsanou xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx den (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx tato xxxxx) žádné toxické xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, xxx xxx aplikované množství xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx a xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis postupu
X xxxxxxxx případě xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx aplikace, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (a xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x pitné vodě) x xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx.
Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xx ztrátám xxxxxx xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx studie se xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X všech xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření oftalmoskopem xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx studie nejlépe x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx v xxxx. Xxxx další charakteristiky, xxxxx mohou být xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: lipidů, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(x) Analýza xxxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx přiměřené historická xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxxxx pozdější histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx brzlíku, xxxxxxxxxx x plíce, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), játra, slezina, xxxxxxx, nadledviny, slinivka xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx kost x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx), páteřní xxxxx xx třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx posuzují x xxxxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxx postižení xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx třeba xxxxxxx u všech xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx všechna xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(c) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxx x střední dávkou xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx histopatologická xxxxxxxxx xx u zvířat xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx rutinně, xxxx xx však provést xxxx na xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx satelitní xxxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx a procentuálně xxxxx zvířat s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx informace:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- experimentální xxxxxxxx - úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx dávek,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, případně xxxx x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx příznaky x xxxxxx další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- hematologická xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx (včetně výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx moči),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, studie na xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx po 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx), x to každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují, xxx xx zjistily příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx testem se xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Testovanou xxxxx xxx podávat v xxxxxxx nebo může xxx vhodnější podávání x kapslích. Xxxxx xxx použity také xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xx celou xxxx pokusu stejnou xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx používá pes: xxxx xx přednost xxxxxxxxxxxx plemeni. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba pracovat xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx; v případě xxx se má x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 xx 6 xxxxxx x xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Provádí-li xx subchronický orální xxxx jako xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx nejméně 8 xxxxxx (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxx xxxx být takový, xxx umožnil vyhodnocení xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Dávkování
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x jednu kontrolní xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx nejnižší xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx by střední xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Ve xxxxxxx s nízkou x střední úrovní xxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx by x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Podává-li xx málo xxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx aplikované xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx normální xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx se xxxxxx buď konstantní xxxxxxxxxxx (x ppm xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx alternativu xx xxxxx xxxxx. Podává-li xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x kapslích, xxxx xx se xxx xxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx intervalech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou studiích xx má xxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx 90denní xxxx xxxx popsanou xxxxxxx a xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx den (nebo xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, je xxxxx xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, xx xxxxx zajistit, aby xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx je třeba xxxxx pozorovat a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx třeba zaznamenat xxxx xxxxxxx a xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
X ideálním případě xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látka 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Podává-li xx xxxxx xxxxx způsobem xxx v xxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx látku 5 xxx x xxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje (xxx není na xx omezeno) změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
Příjem xxxxxxx (x příjem vody xxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx x vhodnými xxxxxxxxxx x minimalizaci xxxxx zvířat pro xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx látky x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx, xxx alespoň x nejvyšší xxxxx x u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Najdou-li xx xxxx změny, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Na xxxxxxx xxxxx, a xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo uprostřed x xxxx xx xxxxx xxxxxx se xx xxxxxxx hematologické xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x testy srážlivosti xxxx xxxx například xxxx xxxxxxxxxxx, protrombinový xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Na xxxxxxx testu, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx a xxxx xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx stanovovat vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx trvání xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a kmene), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx transamináza xxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx glutamát-oxalacetát xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx potřebné xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků. Před xxxxxxx xxxxxx krve xx xxxxxxxxxx měli xxxxxxxx (ne xxxx xxx 24 xxxxx).
(x) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx postup, xxx xxx na podkladě xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X všech xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx se provede xxxxx zahrnující zevní xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx dutiny xxxxxx xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, štítná xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x řezech xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx žláza, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx místě xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx žlázy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx pohlavní xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, jícen, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, reprezentativní lymfatické xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx) x (páteřní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx nejvyšší dávka, x u xxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat z xxxxxxx xxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx, nebo xxxx xx xx indikováno xx xxxxxxx klinických xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, plemeno nebo xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, případně xxxx o přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx byly pozorovány xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x jejich další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření a xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- interpretace výsledků.
X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. METODA
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx aplikuje xxxxx na kůži xx 90 dní x odstupňovaných dávkách xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x to xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx se zjistily xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx chována x podmínkách ustájení x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Před testem xx zdravá xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Krátce před xxxxxxxx pokusu se xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx před experimentem. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx holení xxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % povrchu xxxx. Xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxx x velikosti připravované xxxxxx kůže x x xxxxxxxxx krycího xxxxxx.
Při xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx formy, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, jejich použití xxxx xxxx být xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx hodnoty. Xxxxxxx-xx xx subchronický dermální xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx se má xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx a 10 xxxxx) xx zdravou xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx studie, xx xxxxx xxxxxx celkový xxxxx zvířat o xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého xxxxxxx) po dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx.
1.2.2.3 Dávkování
Xx xxxxx použít nejméně xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xx xxx nejméně 6 xxxxx denně. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx mělo xxxxxxxx xxxxx den xx stejnou dobu. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, aby xx udržovala xxxxx xxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx pokusným skupinám, x to xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx jen x xxxxx počtu. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Pokud xxxxxxxx odhady expozice x xxxxxxx, má xxxxxxxx dávka tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx střední xxxxxxx xxxxx xxxx vyvolat xxx xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s xxxxxx x střední xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Vede-li xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx podráždění xxxx, je třeba xxxxxx koncentraci, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x omezení xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx znova x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx toxické xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a zaznamenávat xxxxxxx účinky. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx kterém xx xxxxxx a opět xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx xx studované xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx po dalších 28 dnů xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxx xxxxxx přetrvávání. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx tato xxxxxx xxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx rovnoměrně x xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x kontaktu x kůží xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxx xxxxxx je xxxx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxx xx zabránilo orálnímu xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx však nelze xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx nebo jiným xxxxxxxx vhodným x xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx počátku, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, očí x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, změny funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat jako xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x zvířata x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx utratit a xxxxxx.
X všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx konci xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, koncentrace hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx trombocytů.
(c) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx živočišného xxxxx), xxxxxxxxxxx transferáza (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx transamináza xxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být potřebné xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx být x případě potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků.
(x) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxx, xx se xxxxxx xxxxxxxxx hematologických x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní dutiny xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx ve vlhkém xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, kůra xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, štítná xxxxx, xxxxxxxxx tělíska, xxxx na xxxxx xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, aorta, (slinné xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické uzliny, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (hrudní xxxx x kostní xxxxx), (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx úrovních - xxxxx, xxxxx xxxxxx x bederní) x (xxxxx žlázy). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření normální x exponované xxxx, xxxxxx x xxxxx xx xxxxx provést x všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u zvířat xxxxxxxxx skupiny.
(x) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx orgány x xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.
(x) Používá-li xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx to xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Další xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, u xxxxxxx byly zjištěny xxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky. Z xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx lézí. Xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení,
- podmínky pokusu,
- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- údaje x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx ji xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické xxxxxx,
- hematologická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- biochemická vyšetření x jejich výsledky (xxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.29. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX - INHALAČNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx - xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Několik xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, v xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xx 90 dnů. Použije-li xx xxx dosažení xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx uhynou, i xx, která xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, přidá xx k testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx se užije xxx usnadnění aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x xxxx známo, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Existují-li vhodná xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx zvířatech z xxxxx užívaných pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx studiích xx xx použít xxxxxx xxxx a kmen.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x nesmí xxx březí. Xxxxx xx zvířata budou xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto je xxxxx exponovat xxxxx xxxxxxx (satelitní skupinu) 20 zvířat (10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x během následujících 28 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt toxických xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx - xxxxx se xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x skupiny x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx). S výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Nejvyšší xxxxxxxxxxx má vyvolat xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx žádné uhynutí xxxx xxx x xxxxx počtu. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, mají xxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s nízkou x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x v kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
1.2.2.4 Xxxxxx expozice
Xxxxxxx xx exponují xx xxxx 6 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X případě specifických xxxxxxxxx xx možné xxxxxx x xxxxxx xxx expozice.
1.2.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Pro xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a rovnoměrné xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Použije-li xx xxxxxxxxx box, xx xxxxx ho xxxxxxxxxxx tak, xxx xx nejvíce xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce byla xx nejvyšší. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx boxu xxxxx by x xxxxxx celkový objem xxxxxxxxx xxxxxx přesáhnout 5 % xxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, samotné xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx pozorování
Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x čas, xx xxxxxx xx objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.3. Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx dobu 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx aplikace, x xxxxxxxxx zotavení x otravy nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx během xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx být xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, kde xx xxxx xxxxx (xxxx. experimenty s xxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxx xx nepodává potrava xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx inhalační xxxxxx x vhodnou xxxxxxxxxxx kontrolou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx pokus xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx xxxxx nastavit xxx, aby xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx vzduchu (xxxxxxxxxxx).
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxx x xxxxxxx xxxx. Během xxxxx xxxxxxxx se nemá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx než ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx není možné xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx rozsah xxxxxxxx. Xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx
x) Během xxxxxxxx x xx xx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx; xxxxx zvíře má xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x zaznamenávat xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx třeba xxxxxxxx pravidelnou xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx chybného xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx vyřadit x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx přístrojem xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx a x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx se oční xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx se xxxx xxxxx živočišného druhu x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x celkové xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.
(x) Xxxxxxx moče xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pozorované xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx se xxxxxx stanovení hematologických x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx začátkem xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx prohlídku xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní xxxxxx x jejich xxxxxx. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po sekci xxxxx ve vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx vysychání.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx (mají xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xx zachovala xxxxxxxxx xxxx - perfusní xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, hypofýza, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx žlázy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxxxx (xx-xx přítomen), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), periferní xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx stehenní xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx hrudní a xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx příznaků xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx respiračního systému x ostatních xxxxxx x tkání je xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla exponována xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx zvířat xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx se mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx rutinně, musí xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx s vysokou xxxxxxxxxxx.
(x) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx se histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x orgánech, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a počet xxxxxx s xxxxxx, xxx xxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x jednotlivými typy xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x tomu možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Zpráva x průběhu pokusu xx xxxxx možno xxxxxxxxx tyto informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení,
- xxxxxxxx xxxxxx: Popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, klimatizačního xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx vzduchu, xxxxxxxxx stability xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx x průměrnými xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxxxx xxxx údaje:
x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením,
b) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx,
x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx objemem xxxxxxx),
x) povaha vehikula, xxxxx xxxx užito,
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxxx),
- xxxxx o xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx účinku, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX TOXICITY
1. METODIKA
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx pozorována xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx podmínkách xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx testu. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx. Xx základě předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx nebo xxxx). Xx xxxxx xxxxxx zdravé x xxxxx xxxxxxx běžně xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx mláďat. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx ve xxxx xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx použít stejný xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx nejméně 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 samců), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx xxxx xxx xxxxxxxxx a neměly xx být březí. Xxxxx je záměrem xxxxxxx xxxxxxx zvířata xxxx dokončením testu, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx vyšší počet xxxxxx.
X případě xxxxxx druhů xxxxxx (xxxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, ale ne xxxx než 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Dávky x frekvence xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx projevy xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx dávka by xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx toxicity. Xxxxxxx xxxxx xx měly xxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx a nízkými xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxx xxxx x xxxxx výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx exponována xxxxx. X případě, xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx x xxxxx xxxx nebo x xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx, xxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx ohledu x exponované xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx není xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx aplikace xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx xxxxxx závisí na xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx člověka.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicita x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx odvozena x xxxxxxxx xxxxxxxx testu x znalosti xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, odvozené x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx toxicity.
Xxxxxx xxxxxx
Tam, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, jimiž může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx se přednost xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx proti xxxx xxxxxx důvody. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx nebo podanou x xxxxxxx.
Ideálně xx xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx, xxxxxxx dávkování xxx xxx v xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx toxicity nebo xxxxxx vyvolat "abstinenční" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx je považováno xx přijatelné.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx technicky xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx uvedeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, takže xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxx dnů x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo x návaznosti xx xxxxxx expozici x xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin denně xx xxxx dní x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx x xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. X obou xxxxxxxxx jsou zvířata xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx v xxx, že x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx studia x xx lidské xxxxxxxx, která xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx obtíže. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx prostředí xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) generace aerosolu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x technik xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx proud xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx komory xx xxxx mít xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx byly expoziční xxxxxxxx srovnatelné ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxx xx xxxxx úniku xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx by x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx průtoku xxxxxxx komorou xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(x) xxxxxxxxxxx: během xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 15 % střední hodnoty;
(x) xxxxxxx a xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx xx xxxx xxx udržována v xxxxxxx 22 ± 2 xX x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx by xxxx xxx kontrolovány průběžně;
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx částice xx xxxx být x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx odebírají x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro distribuci xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, x když xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté během xxxxxxx tak často, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým jsou xxxxxxx exponována.
1.2.2.6 Trvání xxxxxx
Expozice látky xx měla xxxxx xxxxxxx 12 xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Pozorování
Xxxxxxx klinické sledování xx mělo xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxxxxxxxx zákroky x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, např. xxxxx xxxx uložení xx xxxxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx utracení xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxx moribundní. Xxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx spolehlivě xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xx xxxxxx minimalizace xxxxx x důsledku xxxxxx, xxxxxxxx xxxx kanibalismu.
Xxxxxxxxxx xx klinické xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Zaznamenává xx xxxx objevení x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx podezření xx xxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx jednou xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx tomto xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, ledaže xx xxxxxxxxx stav xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Hematologická xxxxxxxxx (např. obsah xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, xxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx, xxxxxxxx destiček xxxx xxxx ukazatele xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx a xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a xx xxxxx na xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx od xxxxx nehlodavců xxxx. xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx z xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx to xxxxx, vzorky ve xxxxx intervalech xx xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx měl xxx xxxxxxx vzorek xxxx xxxxxx od nehlodavců.
Xxxxx klinické vyšetření xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, měl xx být stanoven xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx xx vzorcích xx zvířat xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x u xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx nebo xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxx se x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx nižší.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx analýzu xxxxx xxxxx od xxxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx jednotlivých zvířat, xxxx xx směsném xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx dávek a xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx a xxxxxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
V přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx všech xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx v xxxxx skupině, xxxxx xxxxx pro tytéž xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Od nehlodavců xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx před xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx je připravena xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:
- xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- testy xx funkci jater (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamát xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx transpeptidázy, ornithin xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx v xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.2.3.5 Pitva
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x všech zvířat xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx během pokusu xxxx xxxx utracena x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx utracením se xxxxxxxx xxxxxx krve xxxxx zvířat pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx viditelné xxxxxx nebo léze, xxxx léze, xxxxx xx mohly být xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, kory mozkové), xxxxxxxx xxxxxxxxx, štítné xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, trachey x xxxx, srdce, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, ledvin3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, močového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, xxxxx3), akcesorních pohlavních xxxxxx, xxxxxx mléčné xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx dření a xxxxxxxx xxxxx včetně xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx cestou xx konzervaci xxxxxx xxxxx; naplnění plic x inhalačních studiích, xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické zkoumání. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xx měly xxx x dispozici xxxx xxxxxxxxxxxxxx vyšetřením, xxxxxxx xxxxx dát xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) tyto orgány x 10 xxxxxx xx pohlaví a xx skupinu x xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) ze xxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx tumory a xxxx xxxx vyskytující xx x xxxxxxxxxx xxxxxx, mají xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx doporučeny xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(x) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všech uchovaných xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx:
1. x xxxxx xxxxxx, xxxxx uhynula xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx studie,
2. x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxx či xxxxx xxxxxxxxx abnormity xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx s nižšími xxxxxxx,
(c) xxx, xxx xxxxxxxx svědčí xxx xxxxxxxx zkrácení xxxxxxxx xxxxx života xxxxxx xxxx vyvolání xxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx nižší xxxxxx xx xxxxxxx popsaným xxxxxxxx,
(x) informace x incidenci xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx v použitém xxxxx zvířat, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx. historické xxxxxxxxx xxxxx, jsou nezbytné xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx pozorovaných x xxxxxx x xxxxxxxxxxx látkou.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx počet zvířat xx začátku testu, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx lézí. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx testu: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx a aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Údaje x expozici: ve xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx inhalační aparatury xxxxxx xxxxxxx vzduchu)
(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx použito
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně
(x) xxxxxxx velikosti částic (xx-xx to xxxxxxxxxx)
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x koncentrace
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx
- xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxx
- doba xxxxx během studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx
- doba, xxx byl pozorován xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxx hematologické xxxxx x výsledky
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x všechny xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx moči)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxxxxx zpracování výsledků x popisem xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X XXXXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx dávka xx každou skupinu, xxxxxxx v xxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Krátce xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx i x xxxxxxx je použita x dalšímu xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryo- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, stejného xxxx x velikosti xxxx xxxxxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxx xxx zajištěno přirozenou xxxxxx nebo umělou xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx podávána xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx po implantaci x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Den xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx hysterektomií x podrobeny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx skeletu x xxxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxx možnosti zpomaleného xxxxx, xxxxxxxx osifikace x xxxxxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxxx. Preferovanými xxxxx jsou xxxxxx x xxxxxx. Je xxxxx používat xxxxxxxxx xxxxxxxx kmeny. Používaný xxxx xx neměl xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xxx x xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxx 20 xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx podána xx vehikulu, je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx xxx teratogenní xxx xxx xxxx xx reprodukční schopnosti. Xx xxxxxxx v xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx mírné snížení xxxx, xxx xx xx xxxx xxx 10 % xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxxxxxx xxxxxx. Střední xxxxx xx xxxx xxx voleny tak, xxx byly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx, xx látka x xxxxxx xxxxxxxxx xxx dávce xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx úrovních dávek.
1.2.2.5 Xxxx expozice
Xxxxxx xxxx xxxxx xx xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxx xx možno xxxxxxxxx 6. xx 15. xxx u xxxxxxx x xxxx, 6. xx 14. xxx x xxxxxx a 6. až 18. xxx x xxxxxxx. X xxxxxxx, že xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx bylo pozorováno xxxxxx nebo byla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x předchozím údajům xxxxx xxx. Podle xxxx alternativy xxxxx xxxxxxxx xxxxx den xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Každý xxx xx xxxxx xxxxxxx pečlivé klinické xxxxxxxxx. Xxxxx sledování x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx za účelem xxxxxxxxxxxx ztrát během xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx orálně xxxxxx, xxxxx xx stejnou xxxx.
Xxxxxxxxxx samicím xx testovaná xxxxx xxxxxx denně xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo, xxxxxxxx x rychlému xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, zvířata xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vážení. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Samice xxxxxxxxxx xxxxxx potratu nebo xxxxxxxxxxx porodu xx xxxxx utratit x xxxxx makroskopicky xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx x xx ukončení xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, ale vyhnout xx komplikacím při xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx porodu. Xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx kůže x xxxxx, očí x sliznic, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířata.
1.2.3.1 Xxxxx
Xxxxx xxxxx x xxxxxxx během xxxx na konci xxxxxx, xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx morfologické xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohly xxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxx. Ihned xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx x ohledem xx xxxxx embryí x zárodků x xxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. X xxxxxxx x králíků xx xxxxx xxxxxxxx počet xxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx určit xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xx xxxxx jednotlivě zevně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, myší x xxxxxx je xxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxxxxxx u zhruba xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx vrhu x x xxxxxx vhodnými xxxxxxxx xxxxxxxx abnormity xxxxxxx xxxxx. U xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx je xxxxx xxxxxxx xx formě xxxxxxx, udávající pro xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx zárodků x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx abnormit x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. ZPRÁVA
3.1. Zpráva x testu
Xxxxxx x testu xx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxx, kmen, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- podmínky xxxxx,
- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxx použito) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx každou xxxxx,
- dávka xxx xxxxxx (xxxxx xx bylo xxxxx xxxxxxxx),
- dobu xxxxx xxxxx studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx hmotnosti x xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x údaje o xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx (živé/mrtvé, xxxxxxx, xxxxxxx skeletu x xxxxxxx xxxxx),
- údaje x xxxxxxxxxxxx vrzích (xxxx/xxxxx xxxxx, pohlaví, xxxxxxx xxxxxxx x měkkých xxxxx),
- statistické xxxxxxxxxxx výsledků,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.32. TEST XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx látka je xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na xxxxxxx, xx větší xxxx života xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx za účelem xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx podmínkách ustájení x xxxxxx nejméně xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx zvířata náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx mladá zvířata x xxxxx chovaných xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx by xxxx xxx započata xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxx xxx xxxxxx ve xxxx xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. V případě, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx stejný xxxx x kmen x obou studiích.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx se xxxxx nejméně 100 xxxxxx (50 samic x 50 xxxxx) xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina. Samice xx xxxx xxx xxxxxxxxx x negravidní. Xx-xx plánováno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, počty xx třeba xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx budou takto xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Dávkové xxxxxx x frekvence xxxxxxx
Xxxxx se při xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň by xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx růstem, xxxxxxx x xxxxxx života xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx by neměla xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx dávku/dávky xx třeba stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx úrovní xx xxxx xxxx x xxxxx předchozí xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx denně. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx nebo xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx být xxxxx x dispozici.
1.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná kontrolní xxxxxxx je identická x xxxxxx xxxxxx x exponovanou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxx použije-li xx xxx orální xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx orální, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx se xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x cest, xxxxx může xxx xxxxxxxxx člověk, dává xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, rozpuštěnu x xxxxx vodě xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Ideálně by xx xxxx látka xxxxxxx xxxx dní x xxxxx, protože xxxxxxxxx xxx dnů x xxxxx xxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx naopak xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Nicméně, xxxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxx aspekty, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Dermální xxxxxx
Xxxxxxxx přímo xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x člověka x xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx poškození.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx xxxxxxx alternativou xx specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx lidské xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx obvykle xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx denně xx pět xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx dní x xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), x přibližně xxxxxx xxxxxxx pro krmení xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx expozičního xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx koncentracím xxxxxxxxx xxxxx. Hlavní xxxxxx xxxx přerušovanou x stálou xxxxxxxx xx x tom, xx v první xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx účinků xxxxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx studia a xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Nicméně, xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice pro xxxxxxxx podmínek zevního xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace par x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx exponují x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx xxx nejméně 12 výměn xxxxxxx xx hodinu, aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx identickou xxxxxxxxxx, xxx aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve všech xxxxxxxxx xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx úniku testované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx shlukování xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecně xx x zájmu xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) Xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx komorou xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Koncentrace: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °C x xxxxxxx x komorách 30 - 70 % vyjma případů, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průběžně.
(x) Měření velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx komor u xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx testovací xxxxx. Xxxxxx atmosféry xxxxx xx odebírají x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro distribuci xxxxxx, kterým xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému suspendovanému xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Analýza xxxxxxxxx částic xx xxxx xxx prováděna xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx často, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx použitého xxx xxxx. Xxxx xx měl xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Nicméně, xxx xxxxxxx xxxxx zvířat x delší xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx ukončení xx xxxx být 24 xxxxxx pro xxxx a křečky x 30 xxxxxx xxx potkany. Alternativně, xxxxxxxx xxxxxx prodloužené xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx na 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx zřetelný xxxxxxxx rozdíl odpovědi, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Tam, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxxx dávkou xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx nutné xxxx k ukončení xxxxxx testu, pokud xxxxxxx xxxxxxx nevykazují xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx činily problémy. Xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx než 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx než 50 % x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x srsti, xxx a xxxxxxx, xxxxx x dýchacího, xxxxxxxxx, autonomního x xxxxxxxxxxx nervového systému, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Pravidelná kontrola xxxxxx xx xxxxx, xxx se zabránilo xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx chyb v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx příznaky x xxxxxxxxx by xxxx xxx zaznamenány x všech zvířat. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: doba xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, vzhled x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx či hmatného xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx spotřeby potravy (x xxxx xxx, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, ledaže xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx sledování.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxx pozorování xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx diferenciální xxxxx bílých xxxxxxx.
Xx 12 xxxxxx, xx 18 xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx vzorcích xx zvířat xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx, xxxxxxx údaje xxxxxxx xxxx utracením, xxxx údaje z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x x xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx je vysoká xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, která xxxxxxx xxxxx pokusu nebo xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, nebo xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, je xxxxx uchovat.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx měly xxx xxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření: xxxxx (včetně řezů xxxxxxxxxxx míchy/mostu, mozečkové xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx mozkový, štítná xxxxx x příštítná xxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxxxx a xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx orgány, xxxx, xxxxx, žaludek, dvanácterník, xxxxxxx, xxxxx, slepé xxxxxx, xxxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí xxxxxx žláza, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx x kostní xxxxx, xxxxxxxx kost xxxxxx xxxxxx, mícha xx třech úrovních (xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx) x xxx.
Xxxxxxxx plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Naplnění plic x inhalačních xxxxxxxx xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Xxxxx histopatologie xx provede x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx nebo byla xxxxxxxx xxxxx testu, x u xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x s xxxxxxx xxxxxx.
(x) Všechny xxxxxx viditelné xxxx x xxxx, které xxxx podezřelé xxxx xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx skupinou x xxxxxxx dávkou a xxxxxxxxx skupinou, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx provede x daném xxxxxx xx xxxxx x x dalších skupinách.
(x) Xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx u xxxxxxx, xxxx by xxx kompletně zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší xxxxxx.
(x) Xx-xx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků, xxxxx xx mohly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx xxxxxxxx během xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx x tumory xxx xxxxxxxx. Výsledky xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, zdroj, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,
- podmínky testu: Xxxxx expozičního xxxxxxxx xxxxxx konstrukce, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx je xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatná xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx průtoku vzduchu x inhalačním xxxxxxxx,
(x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx,
(c) xxxxxxxxx koncentrace (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx do inhalační xxxxxxxxx xxxxxx objemem xxxxxxx),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(x) skutečné xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx kde xx relevantní),
- xxxxxxx úrovně (včetně xxxxxxxx, xx-xx užito) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxx tumoru,
- xxxx úmrtí xxxxx xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxx toxických účinků xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- data x xxxxxxxx xxxxxxx x tělesné hmotnosti,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxx patologicko-anatomické,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Cílem xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx druhu savců xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx tento účel xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx alespoň xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx tuto satelitní xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx nejvyšší xxxxx použitá xxx xxxxx karcinogenity. Zvířata x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxx toxicitu, xxx xx karcinogenní xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx toxicitu.
Testovaná xxxxx xx podává xxxxxxx sedm dní x týdnu, vhodnou xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx v pokusných xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nejméně xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx zdravá xxxxxxx náhodně rozdělí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Experimentální xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx xx potkan. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx druhy (xxxxxxxx x nehlodavce). Xxxxxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx co nejdříve xx odstavení xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx rozdíl xx xxxx xxxxxx xxxxx více než ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx x xxxx v xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 zvířat (50 xxxxx a 50 xxxxx) xx každou xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxx nullipary x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxx xxxxxxxx před xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx) xxx xxxxxxxxx patologie xxxx, xxx jsou tumory, xx každá měla xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx skupina xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví.
1.2.3 Dávkové xxxxxx x frekvence xxxxxxx
Pro xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx kromě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxx vyvolat příznaky xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx tumory. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx interferovat x xxxxxxxxx růstem, xxxxxxx x délkou života xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx nižší xxx 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx dávku/dávky xx třeba stanovit xx středním pásmu xxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xx měly xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.
Pro xxxxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxx zahrnuty xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxx xxxxxxx. Vysoká xxxxx xxx xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx aplikaci xxxxxxxxxx, xxxxx biologická aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx jedna z xxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx v potravě, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx podanou x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx podávat xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x týdnu xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x xxxxx ovlivnit výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, především x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx přijatelné.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Aplikace xxxxx xx kůži může xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx hlavní xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x jako modelový xxxxxx xxxxxxxx kožního xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx technicky komplikovanější xxx jiné xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x této xxxxx xxxxxx. Intratracheální instilace xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx expozice, takže xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx po xxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin xxxxx xx sedm dní x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx x xxx čištění expozičního xxxx. X obou xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx je v xxx, že x xxxxx má xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx denní expozice x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx přerušované xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx kontinuální xxxxxxxx xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxx nutností xxxx x krmení xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x technik xxxxxxxxxxxx.
Expoziční komory
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce zaručuje xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x rovnoměrná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x expoziční komory xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx srovnatelné xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:
(x) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) teplota x vlhkost: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx být udržována x rozmezí 22 ± 2 °C x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx je xxxx používána x xxxxxxxxxx testované xxxxx x atmosféře xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx částic: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx x atmosféře xxxxx x tekutých xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx komor se xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx by xxx xxx reprezentativní xxx xxxxxxxxxx částic, kterým xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by xxxxxxxxxxxxx odpovídat xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aerosolu, i xxxx značná xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx velikosti xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx generujícího xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, a poté xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, xxx xxxx xxxxx posoudit xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx zvířata xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxx. Xxxx xx měl xxx ukončen x 18 xxxxxxxx x xxxx x křečků x 24 xxxxxxxx x potkanů. Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxx xxxxx xxxxxx resp. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx tumorů, xxxx xxxxxxxx by xxxx xxx 24 xxxxxx xxx myši x xxxxxx x 30 xxxxxx pro xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx takové xxxxxxxxxxx studie xx xxxxxxxxxx, když xxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx skupině klesne xx 25 %. Xxx ukončení testu, xx kterém xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx pohlaví xx posuzuje xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x vysokou xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx vést x xxxxxxxx celého xxxxx, xxxxx ostatní xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, nesmí xxx ztráty použitelných xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx skupině xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx ve xxxxx skupinách xxxxx xxx nižší xxx 50 % v 18 xxxxxxxx u xxxx x křečků x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxx skupiny 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx a 10 připojených kontrolních xxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxxxxxxx pro testování xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx x xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. X těchto xxxxxx by mělo xxx plánováno xxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, která xx vztah x xxxxxxxxx xxxxx, od xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx a xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního x centrálního nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (skupin) se xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xx xxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chyb x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx zaznamenávají x xxxxx xxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx objevení, lokalizace, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx každého xxxxxxxxxxx xx hmatného xxxxxx xx zaznamenává.
Xx xxxxx provádět xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx tam, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x pitné xxxx) xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx x xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx intervalech, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx frekvence xxxxxxxxx.
Tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx týdně xxxxx xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx testu x xxxxx jednou xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx destiček xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx být xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x na xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx z xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx xx xxxxx, vzorky xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx od xxxxx potkanů.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx má xxxxx bílých xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx skupině s xxxxxxxx xxxxxx a x kontrol. Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x u xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, než xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx od 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Následující xxxxxxxxx xxxx provedena xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx vzorku xxx xxxxxxx podle dávek x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x hustota x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, ketolátky, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx měření xx xxxxx nehlodavců x 10 potkanů xxxxxxx pohlaví, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx. Xx nehlodavců xx xxxxx xxxx xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxxx. Z těchto xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- testy xx funkci xxxxx (xxxx. aktivita bázické xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy1), xxxxxxxx xxxxxx transaminázy2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- metabolismus xxxxx, např. xxxxxx xxxxxxx xx lačno,
- testy xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) nyní xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx aminotransferáza
2) xxxx známá xxxx xxxxxx aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Kompletní xxxxx xx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, která zemřela xxxxx pokusu nebo xxxx utracena x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se odeberou xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx viditelné xxxx, xxxxxx xxxx léze, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxx x xxxxx xx měly být xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx týká následujících xxxxxx x xxxxx: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, thymu, xxxxxxx a xxxx, xxxxx, aorty, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), nadledvinek3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx střeva, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, močového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, gonád3), akcesorních xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx žlázy, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nervu, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x bederní), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x stehenní xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Naplnění xxxx x močového xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx v inhalačních xxxxxxxx xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx klinická xxxxxxxxx, xxxxxxxxx získané x xxxxxx procedur xx xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx patologovi významné xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x xx skupinu xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx orgánech xxxxx xxxxxx satelitní xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxxx skupině xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx patologické xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, vyšetří xx histologicky xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx skupin xxxxx xxxxxx věnované xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
(x) xxxxx histopatologie xx xxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx nebo byla xxxxxxxx během xxxxx x x xxxxx xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx;
(b) všechny xxxxxx viditelné okem x xxxx, xxxxx xxxx podezřelé xxxx xxxxxx, se vyšetří xxxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx;
(x) je-li xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx x daném xxxxxx xx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx;
(x) xx-xx přežití xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, měla by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
(x) xx-xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nižší dávkovou xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sumarizují xx xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxx utracení. Xxxxxxxx xx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,
- podmínky testu: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx konstrukce, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro vytváření xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, xxx je xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x expozici: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx zařízení,
(b) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx inhalační aparatury xxxxxx objemem xxxxxxx),
(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx použito,
(x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx částic (xxx xxx xxxxxxxxxx),
- dávkové xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx xxxxx studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx do xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx ,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx xxxxx xxxxx,
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx popis všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx zpracování výsledků x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - JEDNOGENERAČNÍ XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx několika xxxxxxxx xxxxx x xxxxx v odstupňovaných xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx růstu x xxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx u xxxx x 70 xxx x xxxxxxx), xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx xxxxx na spermatogenezu.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) dostávají xxxxx xx dobu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx. Zvířata xxxx xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx obou xxxxxxx, x době gravidity x kojení xxxxx xxxxxxx.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx modifikovat.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xxxx chována xxxxxxx 5 dnů xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látku xxxxxxx v xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Jiné xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx testu. Pokud xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiné aditivum, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Xxxxx xx aplikuje 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx zvířata
1.2.2.1 Xxxxx druhu
Xxxx xx přednost potkanům xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx zdravá xxxxxxx, xx té xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Nepoužívá xx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x váhy x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx u xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x kontrolní, xxxx být odstavena xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, aby bylo xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx stejným termínem xxxxxx. Xxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x tím zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx gravidity x xxxxxxxx chování v X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx početí xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx testu
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Před xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx mateřských xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx materiál xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Použijí xx xxxxxxx xxx exponované xxxxxxx x jedna xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx testovaná xxxxx snižuje příjem x využití xxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx co xx výživy.
Xxxxxxxxx xxxxx v nejvyšší xxxxxxxxxxx má x xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx xx není xxxxxxx jejími xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx toxicitu, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Střední xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xx daly xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx dávka by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxx u xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete a xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx podle změny xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx hmotnosti x 0. xxxx 6. xxx xx začátku xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx test
X případě látek x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx ani xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ukáže, xx xxxxxx dávka, xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx nepříznivé xxxxxx xx plodnost, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Denní xxxxxxxx samcům xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx xx věku pěti xx xxxxxx xxxxx, xx nejméně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx deset týdnů xxxx xxxxxxx připouštění (8 xxxxx pro xxxx). Xxxxx se xxx xxxxxx a xxxxxxx xx konci xxxxxx připouštění, nebo xx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxx xxxxxxxx x vyšetřeni xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx aplikace xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) začne xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx aplikace xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx připouštění, x xxxx xxxxxxxxx xx xx odstavení X1 xxxxxxxx. Je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx bioakumulaci.
1.3.2 Xxxxxx xxx připouštění
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx dvěma samicím).
X xxxxxxx 1 : 1 párování, xxxxxx se xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxx, x kterých xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx neplodnosti xxxx. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx k oplodnění x osvědčenými jedinci xxxx pohlaví xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx možnost xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx odstavení xxx standardizace xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx vrhů xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. a 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx vyřazením xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx xx dosáhlo xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; pokud xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx jiné xxxxx, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 nelze standardizovat.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou xx xxx. Významné změny xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mortality xx zaznamenávají. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx jak před, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx porodu x x průběhu laktace xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (x xxxx, xxxxx se látka xxxxxx x pitné xxxx) ve stejný xxx, xxx xx xxxxxxxxx váženo. Rodičovská X xxxxxxx xx xxxx xxxxx den xxxxxxxx x xxx xxxxx. Všechna xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Doba gestace xx xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xx počty x xxxxxxx mláďat, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx hrubých anomálií.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx utracená xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx mláďata xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. xxx a xxxxx každý týden xx ukončení xxxxxx, xxx jsou zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx x zaznamenávají xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx
1.3.5.1 Pitva
Xx xxxxxxxx nebo xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx generace P xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx abnormality anebo xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pozorností k xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, děloha, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, prostata, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx P xx xxxxxxxx xxx mikroskopické xxxxxxxxx. X případě, xx tyto xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx mnohadávkových xxxxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x skupiny xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxx x dále x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx.
Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x těchto xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx x u X xxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Data xx sumarizují v xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxxx, počet plodných xxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, xxx změn x procento zvířat xxxxxxxxx xxxx změny.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metoda.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx xxxxx možno obsahovat xxxxxxxxxxx údaje:
- xxxx/xxxx použitých zvířat,
- údaje x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gestace x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx pokusu,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx každého vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x konečnou xxxxxxxxxxxx hmotnost xxxxxxx,
- xxxxxxx a xxxxx účinky xx xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx hmotnost zvířat X generace,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx, xxxxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.35. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - DVOUGENERAČNÍ XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Samci xxxxxxxxxx (X) generace dostávají xxxxxxxxxx látku x xxxx xxxxx x xxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 dnů x xxxx x 70 xxx u xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (P) xxxxxxxxx xxxxx po xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx cyklů, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx.
Xxxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx zvířatům xxxx xxxxxxx x xxxxx, x době xxxxxxxxx x xxxxxx, xxxxx samicím. Po xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 v xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, x době xxxxxx x xx xx xxxx xxxxxxxxx X2 xxxxxxxx.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx zahájením xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx náhodně rozdělena xx dvou xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (P) jsou xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx během experimentu. Xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx podávat x xxxxxxx nebo v xxxxx vodě. Xxxx xxxxxxx podání xxxx xxxx xxxxx. Všechna xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem v xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx se používá x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Látka se xxxxxxxx 7 xxx x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx. Používají se xxxxxx X zvířata, xx xx doby xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Nepoužívá xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx charakterizována co xx druhu, kmene, xxxxxxx a xxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxx pohlaví. Xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx, exponované x xxxxxxxxx, musí být xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Počet a xxxxxxx
Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx zaručeno cca 20 xxxxxxx samic x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx dostatečný xxxxx těhotenství a xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnocení xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx generace X1 od xxxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx F2 xx xx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx libitum. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xx xxx poskytnut xxxxxxxx xxx vytvoření xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx používá xxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx objemu. Xxxxx xxxxxxxxx látka xxxxxxx xxxxxx x utilizaci xxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupiny, xxxxxxxxx xx xx výživy.
Xxxxxxxxx látka x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x nikoli xxxxxxxxx x rodičovské xxxxxxxx. Xxxxxxx dávka(y) xx xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx se xxxx xxxxxxx testované látce, x xxxxxxxx dávka xx neměla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x xxxxxx ani x xxxxxxxxx.
Xxx podání xxxxxx nebo x xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx samic, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx hmotnosti x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx xxxxx s nízkou xxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx žádným xxxxxxxx účinkem na xxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx dávkových xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx studie xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, vyvolávající jasnou xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Plán xxxxxx
Xxxxx aplikace xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X začne ve xxxx xxxx až xxxxxx týdnů, aspoň xx pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx pokračuje xxxxx týdnů xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx pro myši). Xxxxx xx xxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxx x aplikaci x xxxx použiti xxx případnou xxxxxxxx xxxxxxx vrhů x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx pokusu.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx P xxxxx xx xxxxxxxxx aklimatizaci x pokračuje xxxxx xxx xxxxx před xxxxxxx připouštění. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx gravidity xx xx xxxxxxxxx X1 potomstva. Xx xxxxxxxxx změna xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, např. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx resp. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xx odstavu x xxxxx jejich xxxxxxxxx.
1.3.2 Postup při xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx párování 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) anebo 1 : 2 (xxxxx xxxxx ke xxxxx xxxxxxx).
X případě 1 : 1 xxxxxxxx, samice xx xxxxxxx s týmž xxxxxx ve společné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx po xxxx 3 týdnů. Xxxxx xxxx jsou samice xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx vaginální xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx nálezu xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxxx k xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, zvířata xxxxxxxx X1 xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx x myší x 13 xxxxx x xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx z xxxxxxx vrhů xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se utratí xx xxxxxxx.
Dvojice, x kterých xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx vyšetřit s xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx další xxxxxxxxxxxx x oplodnění x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx reprodukčních orgánů xxxx xxxxxxxxxx estrálního xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Zvířatům xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ponechána xxxxxxx porodit xxxxxxxx x xxxxxxx x xxx potomstvo xx xxxxxxxx odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti vrhů. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: mezi 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxx počtu 4 xxxxx a 4 xxxxx na xxx; xxxxx xx xxxx proveditelné, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx počty, xxxx. 5 xxxxx a 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx než 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx X2 xx xxxxxxx obdobně.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxx pozorováno xxxxxxx xxxxxx za xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx prodlouženého xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx mortality, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx jak před, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx vhodné kontrolovat xxxxxx xxxxxxx denně. Xx xxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx xxx, kdy je xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X x X1 xxxxxxx se xxxx xxxxx den aplikace x xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx dne 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx co xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx a mláďata xxxxxxxx ve xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx vyšetření xx xxxxx defekty. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx zváží xxxx xx porodu, xx 4. x 7. xxx a xxxxx xxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxx, kdy xxxx xxxxxxx zvážena xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x chování x xxxxxxxx stavu xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Pitva
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X x F1 xx xxxxxxxx, jakmile xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxxxx xxx připouštění x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X2 se utratí xx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx P a X1 makroskopicky vyšetří xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mláďata xxxxxxx xxxx umírající xx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx hrdlo, xxxxxx, varlata, epididymis, xxxxxxx kanálky, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, hypofýza x další xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx P a X1 xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx X x F1 xxxxxx xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku, xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx, a xxxx x zvířat, která xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx již bylo xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx podezřelých x xxxxxxxxxxx se xxxx xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, xxx změn x procento xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zpracovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Může xx použít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x experimentu
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx pokud možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx použitých xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx plodnosti, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,
- tabulka xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx před xxxxxxxxx,
- toxické x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx byly xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X1 xxxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx mikroskopických xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxx všech xxxxx, xxxxx xx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.36. XXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx opakovaně x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx jsou xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx, tkáních xxxxx v exkretech.
Xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx s "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx xxxxx. Jestliže xx xxxxxxx značení, xxxxxx xx xxx, xxx poskytlo xx xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx na laboratorní xxxxxxxx xxxxxxx po xxxx xxxx xxx xxxx testováním. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx mladých, pregnantních xx xxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx či xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx by xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvažovaných xxx užití x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx testovanou xxxxxx. Jestliže xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx hmotnosti xxxxx než ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 4 xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx dávku. Xxx xxxxxxxxx není xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx za xxxxxxxx podmínek xxxx xxxxxxxxx potřeba provádět xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx odpovědi x různých xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 zvířata xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (jiných xxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
Je-li xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxx x úvahu xxx xxxxx zvířat, která xxxxx xxxxxxxx v xxxxxx časovém xxxx, xxx počet časových xxxx, v xxxxx xxxx xxxxxxxxx prováděno.
Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx skupiny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx studie.
Zahrnuje-li xxxxxx větší xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, pak xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxx xx skupině xxxxx xxx xxxx xxx 2 xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx xxxx xxx dostatečná xx to, xxx xxx xxxxx resp. xxxx xxxxxxxxxx poskytla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
X případě xxxxxxxxxxxxx podání xx xxxx být použity xxxxxxx 2 různé xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xx xxx xxxxx dávka xxxxx, xx které xxxxxx pozorovány xxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxx, xx xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
V případě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xx určitých xxxxxxxx xxxx xxx nezbytné x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx prováděny xxxxxxx způsobem xxxxxxxx x xx-xx xx xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx používány x xxxxxxxxx toxikologických xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx kůži, xxxx xxxxxxxx inhalačně xx xxxxxxx xxxx skupině xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Navíc xxxxxx po intravenózní xxxxxxxx látky mohou xxx xxxxxxx důležité xxxxxxxxx x distribuci xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx by xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx vstřebávání x xxxxxxx, je-li testovaná xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx testovaná xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxxxx xxxxx x údaji x jejich počátku, xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx způsobem xxxxxxxxxx xxxxx. Xx zdůvodněných xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Absorpce
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx absorpce xxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny1), x xx xxxx.:
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx metabolitů x xxxxxxxxx např. x xxxx, žluči, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxx x karkasu,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpovědi (xxxx. studie xxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,
- porovnání xxxxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx vylučovaných xxxxxxxxx xxxx testovanou x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx plochy xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky a xx. jejích metabolitů x xxxxxx na xxxx x xxxxxxxxx x daty xxxxxxxxx x referenční skupině.
1) V xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx ta, xx které xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávky.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 přístupy, z xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx schématu xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx oba:
- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovení koncentrací x xxxxxxxx testované xxxxx x ev. xxxxxx metabolitů v xxxxxxx x orgánech xxxxxxxxx xx zvířat x různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx, stolice, xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxxxxxx případech žluč. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. jejích xxxxxxxxxx xx v xxxxxx exkretech stanovuje xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, x to xxx xx xxxxxxxxx 95 % z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 7 xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx speciálních xxxxxxxxx xxxx xxx potřebné xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx technikami. Měla xx být objasněna xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx tam, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x metabolismu xxxx xxx prospěšné xxxxxxxxx xx xxxxx studií.
Xxxxx informace x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx látky xxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxx studií xxxx. xxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - SH xxxxxxx x nebo xxxxx látky na xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Získané xxxxx xx xxxxx xxxx prováděné studie xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx doplněných xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxxx (pokud xx to xxxxxxxxxx). Xxxxxx vstřebávání x xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx metodami. V xxxxxxx metabolických xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metabolitů x navrženy metabolické xxxxx xxxxxxxxx látky.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx typu xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x testu měla xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx údaje:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx podmínky, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxx použit,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx podání,
- xxxxxx(x) xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. jejích xxxxxxxxxx v biologickém xxxxxxxxx xxxxxx vydechovaného xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxx, tkání x xxxxxx,
- uvedení xxxxxxx vstřebávání x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx čase,
- xxxxxx užité xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx biochemická xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxx metabolismus,
- diskusi xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Při xxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx důležité vzít x úvahu xxxxxxxxx xxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxx specifický xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx studiích xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx vitro xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx vyvolat pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x in vitro xxxxxx xxxx xxxx xxxxx považovat xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx jako "xxxxxxxxx sloučeniny fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx estery, thioestery xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx amidothiofosforečných, xxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx této xxxxxxx.
Pozdní neurotoxicita xx syndrom xxxxxxxxxxx xx ataxií, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx a xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x dále xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx esterase) x nervové xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, že x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx druhů xxxxxxxxx nezměnila.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, EINECS 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx kyseliny fosforečné, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (XXXX).
1.4 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx cholinergními xxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx 21 xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx, ataxie x xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx XXX, se provádí x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z každé xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 hodin xx podání xxxxx. 21 dnů po xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání.
1.5 Popis xxxxxx testování
1.5.1 Příprava
Xxxxx xxxxxx dospělé xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx chůzí xx xxxxxxx přiřadí xx experimentální a xxxxxxxxx skupiny. Nejméně 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx se dostatečně xxxxx xxxxx nebo xxxxxx umožňující volný xxxxx xxxxxx x xxxxxx pozorování chůze.
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxx sondou, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rozpuštěné xx xxxxxxx vehikulu, xxxx xx např. xxxxxxxxx xxxx, pevné xx doporučuje rozpustit, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx látek v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx nemusely xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx určeny xxxx testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.6 Experimentální xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx kura xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx věku 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x chovají xx xx podmínek, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx testovací xxxxxxx xx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx pozitivní kontrolní xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx zvířaty x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.
V xxxxx xxxxxxx má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx vyšetření (xx třech xxxx x druhý xxx xx xxxxxx) x xxxx přežilo 21denní xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx souběžně xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Má xxx aspoň šest xxxxxx, xxxxxx se xxxxxx látka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxx slepice xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx některý ze xxxxxxxxxx xxxxx testu (xxxx. plemeno, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx).
1.6.1.3 Xxxxx xxxxx
Xx být xxxxxxxxx předběžná xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx slepic a xxxxxx x různých xxxxxxxx xxxxx, aby xx dala stanovit xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Určitá úmrtnost xx x této xxxxxxxxx xxxxxx nezbytná xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx úmrtí pro xxxxxx cholinergní účinky, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx jiný ochranný xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x pozdními xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx typů xxxxxxxxxxx xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Historické xxxxx xxx slepice xxxx xxxx toxikologické xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx.
Úroveň dávky xxxxxxxxx látky x xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx co xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx dávky x hornímu limitu xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx (šest) x xx 21 dnech xxx histologii (xxxx). Xxxxxxx nebo jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinky, xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, za xxxxxxx postupů xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx podle údajů x xxxxx x xxxxxxxxx strukturou není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x studii x xxxxxxx vyšší xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx neprovádí, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx postupu
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx následky akutního xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx podána x xxxxxx dávce.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Pozorování xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pozorují několikrát x xxxxxxx xxxxxxx xxxx dnů a xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 21 xxx xxxx xxxxx nebudou utraceny xxxxx xxxxx. Veškeré xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, včetně nástupu, xxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx čtyřstupňové xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx nucené xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx usnadnilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx se xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx stresu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x pitvat.
1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Biochemie
Šest xxxxxx náhodně xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx NTE xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jeho xxxx xx inhibici XXX. Xxxxx xx xxxxxxxx tři xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx testované xxxxxxx xx 24 hodinách x další xxx xx 48 xxxxxxxx, xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx usmrcují xxxxx xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxxx xxxxxxxx naznačuje, xx xxxxxxx xxxxx xx x organismu xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx dvakrát ze xxx xxxxxx, x xx mezi 24 xx 72 hodinami xx xxxxxx látky.
X xxxxxx vzorků xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx jako inhibitoru XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx u xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) zahrnuje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mozku x míchy.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně se xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx perfúzních xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx podélný xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxx, střední xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx nervů xx xxxxxxx distální xxxx x x. tibialis (x xxxx xxxxx x x. xxxxxxxxxxxxx) x z x. xxxxxxxxxxx. Řezy xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx a xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Negativní xxxxxxxx x účincích xxxxxxxxxxx touto metodou (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxx) běžně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx nebo neurčité xxxxxxxx mohou xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx jevících xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx účinky, xxxx x stupeň těchto xxxxxxxxx nebo xxxxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx účinku.
Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x hlediska xxxxxxx, xxxxxxxxxx a korelace xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x histopatologickými xxxxxx a dalšími xxxxxxxxxxxx jevy x xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
Xxxxxxx výsledky xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx a obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx metody xx xxxxx xxx x xxxx plánované studie.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x průběhu pokusu
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Testovaná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx a xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, podmínky xxxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- podrobné xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x homogenitě xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx a xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxxx úrovně dávek;
- specifikace xxxxxxxxxx xxxxx, včetně podrobných xxxxx x vehikulu, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx xxxxx x podání xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx klinických xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx);
- podrobný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx;
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Hodnocení x Interpretace
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda je xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX XX 418.
B.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX 28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx a vyhodnocení xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx toxicity. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx vitro xxxxx xxx použity xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Negativní xxxxx x xx vitro xxxxxx xxxx xxxx xxxxx považovat za xxxxx, xx xxxxx xxxx neurotoxická.
Tento 28xxxxx xxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx informace x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vznikajícím z xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx odpovědi xx dávce x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávkových xxxxxx, xx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Tato úroveň xx používá xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Definice
Do xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x názvu této xxxxxx xxxx "organické xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx amidofosforečné xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx u některých xxxxx xxxx skupiny.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx specifické esterázy - XXX (neuropathy xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx denně xxxxxx xxxxxxxx po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, zaznamenává xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Xxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx slepice xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nervových xxxxx.
1.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx zdravé xxxxxxx slepice xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x s normální xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách chovu x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx velké xxxxx xxxx ohrady xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx slepic x xxxxxx pozorování xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxx, xxxxx 7 xxx x týdnu, buď xxxxxx, želatinovými xxxxxxxxx xxxx jinou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tekutiny xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx,
jako je xxxx. xxxxxxxxx olej. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, neboť velké xxxxx pevných xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx známy xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Gallus xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx velikosti x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx dovolují xxxxx pohyb.
1.4.2.2 Xxxxx x pohlaví
Je xxxxx použít nejméně xxx xxxxxx dávek x jednu kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.
V xxxxx xxxxxxx má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx šest x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx v každém xx xxxx časových xxxx) a xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pozorování xx xxxxxxxx expozice.
1.4.2.3 Xxxxx dávek
Dávkové xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx ani xxxxxx xxxxxxx. Dále xx zvolí xxxx xxxxxxxxxxx dávek xxxxxxxx, xxxxx umožní xxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx test
Jestliže xxxx x dávkou xxxxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, za xxxxxxx xxxxxxx popsaných xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx pozorované toxické xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx údajů u xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx důvod xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxxx. Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxxxx se u xxxx naznačuje potřebu xxxxxxx xxxxx vyšší xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx pozorují xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx expozice x 14 xxx xx xx, xxxx do xxxxxxxx a xx xxxxx podle xxxxx.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxx dní x xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx po začátku xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxx po 28 xxx a dalších 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx podle plánu. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx včetně xxxxxxx, xxxx, stupně x xxxxxx. Pozorování xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx nemá xx xx ně xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx paréza. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vyjmou x klecí x xxxxxxx nucené xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako např. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Umírající xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx xx xxxxx vyloučit, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx slepice xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx jednou xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx vybraných x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxx analýzu xxxxxxxx NTE xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx mícha. Xx xxxxxx vypreparovat xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx xxxx tkáň xx inhibici NTE. Xxxxxxx se usmrcují xxx slepice x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studie xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx usmrcení xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxx uvést v xxxxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx spontánní xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx vést k xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx AChE.
1.4.3.4 Xxxxx
Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x míchy.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (nepoužitých pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx krční xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x lumbosakrální), x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x n. xxxxxxxx (x xxxx větve x x. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx a xxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x nejvyšší dávkou. Xxxxx xx xxxxxx x zvířat xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx účinku, provede xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x na xxxxxxxxx xx xxxxxx, které xxxxxxx xxxxx střední x xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx touto xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Neprůkazné xxxx neurčité xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx počátku pokusu x počet xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx biochemické xxxxxx, xxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x korelaci mezi xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx pozorovanými xxxx x testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x pokusu obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx plemeno,
- xxxxx x xxxxx xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.,
- hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Podmínky xxxxxxxxx:
- podrobné údaje x přípravě, stabilitě x xxxxxxxxxx testované xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x kvalitě xxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, xxxxxx podrobných údajů x vehikulu, xxxxxx x xxxxxxxxx formě xxxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx doby pro xxxxx na biochemické xxxxxxxxx, xx-xx jiná xxx 24 x 48 xxxxx.
Výsledky:
- údaje o xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx bez xxxxxx (NOAEL),
- xxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx klinických xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické vyhodnocení xxxxxxxx, u xxxxxxx xx to xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 419.
B.39. Test xxxxxxxxxxx syntézy XXX x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx
1. METODA
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx XXX Xxxxxxxxx (XXX) Test Xxxx Xxxxxxxxx Liver Cells Xx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) v xxxxxxx xxxxxxxxx buňkách xx xxxx je xxxxx xxxxx, vyvolávající xxxxxxxx XXX v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4).
Tento xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx chemických xxxxx x játrech. Xxxxxxxx xxxxx indikuje xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx následnou reparaci. Xxxxx jsou obvykle xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sloučenin; jsou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx poškození XXX xx vivo.
Xxxxxxxx-xx doklady o xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (XXX) xx hodnotí xxx, xx se stanoví xxxxxxxx značených xxxxxxxxxx x buňkách, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X-xxxx) xxxxxxxx DNA. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, při xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx thymidin xxxxxxx xxxxxxx (3H-TdR). Xxx xxxxx XXX xx xxxx xx nejčastěji xxxxxxxxx potkaní játra. Xxxx tkáně než xxxxx se xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx však xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxx xxxx XXX, xxx jsou x xxxxx poškození odstraněny x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx vhodná x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx repair" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Xxxx může xxxxxxxx x mutacím x důsledku xxxxxxxxxx, xxxxxxxx opravení nebo xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Rozsah odpovědi XXX neříká xxx x přesnosti procesu xxxxxxxx. Mimoto xx xxxxx, že xxxxxxx xxxx sice x XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx DNA xxxx xxxxxxxx excizním xxxxxxxxxx xxxxxxxx. To, xx XXX xxxx xxxxxxxxxxx x mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxx x reparaci: xxx xxxxxxx xxxxx (NNG) xxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxx (NNG): xxxxxxxxxxxxx míra XXX xxxxxxxx buněk xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx testech XXX, xxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx xxxxxx zrn x xxxxx (XX) x xxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxx (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx apod.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx DNA xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx syntéza XXX po xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 PRINCIP XXXXXX
Xxxx XXX x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxx oblast xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx působením. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx DNA xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx nízkým xxxxxx xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx tato technika xxxx xxx xxxxxxxx x interferenci s xxxxxxx v X-xxxx, xxxx je xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx druhu
Xxxxx xx xxxxxxxxx potkani, xxx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx xx xxxx být 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Zdraví xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx je třeba xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.2 Testovaná xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x je-li xx xxxxx, látka xx před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou podávat xxxxx xxxx xx xxxx podáváním ředí. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.3 Podmínky xxxxx
1.4.3.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx nesmí vyvolávat xxxxxxx účinky a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx známé rozpouštědlo, xxxx xxx xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Doporučuje xx, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / vehikulum.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx každého xxxxx xx třeba xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozitivní kontroly xx xxxx indukovat XXX xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx středně xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly hodnotiteli xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxx xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | CAS | XXXXXX |
xxxxx v xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 xxxxx) | N-2-fluorenylacetamid (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx xxxxxx x jiné xxxxxx xxxxx. Xx možná xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, než xx xxxxxxxx testovaná xxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Počet x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx jeden, xxxx xxx xxxxxxx.
Xxxxx x době, xxx xx xxxxxx provádí, xxxxxxxx údaje xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx testování xxxxx xx jednom xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxxxx. Xxx, kde humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx pohlavně xxxxxxxxxx, xxx je xxxx například x xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xx xxxxxxxxx odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx podává xxxxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx. Nejvyšší xxxxx je definována xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx při xxxxx xxxxx ve stejném xxxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % dávky xxxxx.
Látky, jež x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxx ke zjištění xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici, je xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxx laboratoři x za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxx x xxxxxx studii.
Xxxx nejvyšší dávku xxx také definovat xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx toxicity v xxxxxxx (xxxx. pyknotická xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx test xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx ve xxxx dávkách x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx o strukturně xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx očekávané humánní xxxxxxxx může xxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, protože xx xx tím xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxx krevním xxxxxx. Xxxxxxxxx objem kapaliny, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, závisí xx velikosti pokusného xxxxxxx x nemá xxxxxxxxx 2 ml/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx dráždivých xxxx xxxxxxxx látek, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx ve xxxxx xxxxxxxxx úrovních stejný x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx jaterních xxxxx
Xxxxxxx buňky xx x pokusných xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 hodiny xx xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx po 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx možno xxxxxx x jiné xxxx xxxxxx xxxxxx, xx-xx to odůvodněné xx xxxxxxx toxokinetických xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jater xx xxxx kolagenázou. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx čerstvě disociované xxxxxxx buňky xxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx. Jaterní xxxxx xx zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx UDS
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx dobu (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx inkubují x médiu xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Xx xxxxxxxx xx médium odstraní( xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx nadbytek xxxxxxxxxxx thymidinu, aby xx xxxxxxx neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (xxx. "cold xxxxx"). Buňky xx xxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx "xxxx xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx xx autoradiografické xxxxxx, exponují xx xxx (xxxx. xx xxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx zrna. X každého xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Mikroskopické preparáty xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zjevné známky xxxxxxxxxxxx (např. xxxxxxx, xxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx zrn xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx hodnotí 100 xxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxx xxx 100 na xxxxxxx jedince, musí xx xxx zdůvodněné. Xxx xxxxxxxx xxx xx nevyhodnocují jádra x X-xxxx, xxx xxxxx xxxxx v X-xxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx stupeň xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx jader x cytoplazmy v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Výsledky xxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxxx preparátů x xxxxxx. Mimoto se xxxxxxx data xxxxxx x tabelární formě. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx a xxx xx stanoví xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (NNG) odečtením xxxxx XX xx xxxxx XX. Xxxxxxxx-xx xx "xxxxx x xxxxxx", xxxx být xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x podložena xxxx x historických xxxx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxxxx testy xxxxxxx, xx xxxxx xx vybrat x xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE VÝSLEDKŮ
Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxx | (I) hodnoty XXX xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx | |
nebo | (II) xxxxxxx NNG významně xxxxx xxx u xxxxxxxx kontroly | |
negativní | (X) xxxxxxx XXX na xxxxxx/xxx xxxxxx historického prahu x xxxxxxx | |
xxxx | (II) xxxxxxx XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxx. |
Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat, což xxxxxxx, že xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx jedinci, xxxxx xxxxx - odpověď x cytotoxicita. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek xxxxx XXX xx savčími xxxxxxxxx buňkami xx xxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx XXX, xxxxx xxx xxxxxxx neplánovanou xxxxxxxx XXX xx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nevyvolává xxxxxx poškození XXX, xxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx v xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx dosáhne xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx tyto informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Pokusná zvířata:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx podmínky, strava xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx i xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody k xxxxxxx, xx xx xxxxx dostala xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx cílové tkáně,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x vody,
- podrobné xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x odběru vzorků,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxx autoradiografická xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxxxx hodnoty počtů xxxxxxxxxx zrn x xxxxxxx, cytoplazmě x "xxx xxxxxxx grains" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- známky toxicity,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních kontrol,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- počet "xxxxx x opravě", xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x X-xxxx, xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx buněk.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Metoda X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem č. 208/2001 Sb. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.40. XXXXXXX XXXXXX XX KŮŽI
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Centre for xxx Xxxxxxxxxx of Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, XXXXX, Xxxxx Xxxxxxxx Centre, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) schválilo xxxxxxx xxxxxxx validní xxx testy xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na xxxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx electrical xxxxxxxxxx, XXX) a xxxx xxxxxxxxxxx modelu xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx vycházející x xxxxxx lidské xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (známé xxxxx způsobující xxxxx xxxxxxxxx xxxx X35, x xxxxxxx látky xxxxxxxxxxx poleptání kůže, X34). Xx xxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx testů; xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxxxxxxxxx uživatele.
1.2 DEFINICE
Poleptání xxxx: způsobení xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kůže xx xxxxxxxx testované xxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX LÁTKY
Žádná xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX XXXXXX - TEST XXX XX XXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanese xx xxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx povrch xxxxxxx xxxx odebrané x xxxxxxx potkanů utracených xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxx leptavé xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx své schopnosti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.Xxxx schopnost xx xxxx jakožto xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Dráždivé x xxxxxxxxxx xxxxx TER xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxx x xxx. (6)) xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxxx typů xxxxxxxxxx xxxxx vyskytují (2) (7).
1.5 POPIS XXXXXX - XXXX XXX XX XXXX POTKANA
1.5.1 Xxxxxxx zvířata
Pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23xxxxx) potkani, Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx nůžkami xx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx a xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxx omyjí xxxxxxxx otíráním x xxxxxx xx ponoří xx xxxxxxx antibiotika, xxxxxxxxx streptomycinu, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x koncentracích inhibujících xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx omytí xx xxxxxxx omyjí xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx 3 xxx xx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx kožních xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx terčíků xxxx
Xxxxxxx se humánním xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx kůže z xxxxxxxx xxxxxx a x té xx xxxxxxx xxxxxxx přebytečný xxx. Xxxx xx xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxx, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxxx trubice xx xxxxxxxx xxxxxx X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx trubice x X-xxxxxxx ukazuje xxx. 1. Gumový X-xxxxxxx xx pak xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx XXXX trubice xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx obsahující xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx x tekutém xxxxx, xxxxxx xx na xxxxxxxxxxx povrch uvnitř xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx stavu xxxxxx, xxxxxx se xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxx celý xxxxxx epidermis, xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx s xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx látek toho xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 30 xX, xxx se xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx tři xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Látka xx xxxxxx na dobu 24 hodin (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx promýváním xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx 30 xX xxx dlouho, xxxxx se xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx ztuhla, se xx xxxxxxxx vymýváním xxxxxxx proudem xxxx xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Měření TER
Transkutánní xxxxxxxxxx odpor (XXX) xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx proud (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 či xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xx ethanol xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx xxxxx, x xxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxx a xxxxx xx xxxxx x xΩ/xxxxxx (xxx. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx krokosvorkou xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx uloží xxxxxx XXXX xxxxxxx xxx, xxx byla do xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vždy xxxxxx xxxxx elektrody. Vnější (xxxxx) elektroda xx xxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xx dně. Xx třeba dodržovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx XXXX trubice (obr. 1), tato vzdálenost xx vliv xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 20 xΩ, xxxx xx xxx důsledek xxxx, že xxxxxxxxx xxxxx překrývá xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kůže. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx tak, xx xx XXXX xxxxxxx utěsní palcem x xxxxxxxx a xxxxxx 10 xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx x čerstvým roztokem.
Průměrná xxxxxxxx hodnota XXX xx xxxxxxxxxxx, pokud xxxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx přijatelných xxx xxxx metodu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx akceptovatelná xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x aparaturu xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
10 – 25
|
1.5.3.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivní xxxxx x neutrální xxxxxxxxx látky
Pokud je xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látek (detergentů) xxxx neutrálních organických xxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx průniku (xxxxxxxxx) barviva. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx nejedná x výsledky falešně xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B
Po prvotním xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx na epidermální xxxxxx xxxxx terčíků xxxxxx xx 2 xxxxxx po 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x destilované vodě. Xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxx xx xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx pokojovou xxxxxxx. Xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) barvivo. Xxxxx xxxxxx kůže xx xxx xxxxxxx xxxxx x XXXX xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx (xxxx. xx 20 ml xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 ml xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx po xxxx 5 xxxxx jemně xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) barviva. Xxxxx oplach xx xxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx do xxxxxxx x 5 ml 30 % (x/x) xxxxxxx dodecylsulfátu sodného (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx, xxx se xxxx noc xxxxxxxx xxx xxxxxxx 60 xX. Xx xxxxxxxx xx terčíky xxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx roztok se xxxxxxxxxx po xxxx 8 minut xxx xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 xx supernatantu xx xxx xxxxx 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx roztoku XXX). Xxxxxxx xxxxxxx (XX) xxxxxxx xx měří xxx cca 565 xx.
1.5.3.3.2 Výpočet xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x terčíku xx xxxxxxxx x xxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; molekulová xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B se xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx kůže xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx navázaného xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx metody. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx se x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx metodě x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx barviva (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx kůže (xxxx. 2 hodiny) za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxx XXX přeceňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx 2 xxxxxx (2), jakkoliv xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 24hodinovém xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx TER mohou xxx ovlivněny xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx leptavé xxxxxx 5 xΩ xxxx xxxxxxxxx xx základě xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx. Pokud xx xx zkušební xxxxxxxx xxxxxxx změnily, xxxxx by být xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx okalibrovat xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx referenčních xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx při validační xxxxxx (3).
1.6 PRINCIP XXXXXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX
Xxxxxxxxx materiál xx nanáší topicky xx dobu xx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx model lidské xxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx podle schopnosti xxxxxxx xxxxxx životnosti xxxxx stanovené například xxxxxx "MTT reduction xxxxx" (MTT = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 difenyl xxxxxxxxxxx xxxxxx) pod xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxx vychází x předpokladu, xx xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx xxxx xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx erozí) x jsou dostatečně xxxxxxxxxxx, xxx přivodily xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 XXXXX METODY - XXXX X XXXXXXX XXXXXX KŮŽE
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x různých zdrojů, xxxx xxxx splňovat xxxxxx kritéria. Model xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx corneum s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx funkce xxxxxxx xxxxxxx musí xxx přiměřeně xxxxxxxxx. Xx xxx prokázat xxx, xx xxxxx xxxx rezistentní xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, o xxxxx xx známo, xx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek vykazovat xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v modelu xxxx xxx dostačující x tomu, aby xx xxxx dobře xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xx. XX xxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx model. Xxxxxxx x xxxxxxx látky xxx pozitivní kontrolu (xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx spadat do xxxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx validačnímu xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Popis xxxxxxx
1.7.2.1 Nanesení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx testovaná látka xxxxxx, nanese xx xxx, aby pokrývala xxxxxx xxxx (minimální xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, xxxxxx xx tak, aby xxxxxxxxx kůži, x xxxxxxxx se xxxxxx, xxx xx s xxxx xxxxxxxx dobrý xxxx. Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xxxxx se před xxxxxxxx roztírají xx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, že xx xxxxxx pro široký xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx doby xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx kůže xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X měření životnosti xxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx validizovaná xxxxxxxxxxxxx metoda. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XXX, o xxxxx xxxx xxxxxxxxx že x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx přesné a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx xx xx dobu 3 xxxxx xxxxxx do xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx teplotě 20 - 28 xX. Xxxxxxxxx modrý xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx (extrakce xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx formazanu xx stanoví měřením XX při xxxxxx xxxxx 545 a 595 xx.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x přesné xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. xxxx xx životnost xxxxx xxxxxxxx vliv. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx model xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx nutné, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx x xxxxx xxxx laboratoře, tak xxxx různými xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx definované dříve (2) x xxxxxxxx xxxxxx validizační studie xxxx xxx xxxxxxxxxx x takovém xxxxxxxx xxxxxxxx, xx kterém xxxxxx xxxx zveřejněním xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
1.8.1 Xxxx TER xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (x kΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, průměrné xxxxxxx a z xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.8.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx kůže
Hodnoty OD x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx hodnoty x z nich xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.9.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxx hodnota XXX xxx xxxxxxxxx materiál xxxxx xxx 5 xΩ, xx látka xxxxxxxxxxx. Je-li xxxxxxx XXX xxxxx nebo xxxxx 5 xΩ x nejedná xx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx testovaná xxxxx xxxxxxx účinky xx.
X povrchově aktivních xxxxx (xxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX nepřesahující 5 xΩ, lze xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xxxxx barviva x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx průměrnému xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxx souběžně xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x 36 % XXx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pozitivní x xxxx xx xxxxxxx xxxxxx, kdežto xx-xx xxxxx xxxxxxx x terčíku xxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx leptavé xxxxxx xxxx.
1.9.2 Test x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX pro xxxxxxxxx xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxx XX xxx xxxxxxxxxx zkušební xxxxxx xx xxxxxxx procentuální xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx nezpůsobují poleptání xxxx, xx těch, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx metoda xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx údaje, xxxxxxxxx xxxx, popřípadě xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx x xxx ně.
Podmínky xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx použitého xxxxxxx,
- xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx hodnot xxxxxx (xxxx TER) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk (test x xxxxxxx xxxxxx xxxx) pro testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, a xx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. opakované xxxxxxxxxxx a průměrné xxxxxxx;
- popis všech xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Obrázek 2
Metoda X.40. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.41. FOTOTOXICITA - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), x xxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx chemickým xxxxxx x xxxxxxxx pak xxxxxx, xxxx xx-xx xxxxxxx kůže ozářena xx celkovém xxxxxx xxxxxx látky.
Informace xxxxxxx x rámci xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxxxx xx stanovení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testované xxxxx, xxxx xx xxxxxxxx, zda daná xxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x viditelnému xxxxxx xxxxxxxxxxx možné nebezpečí xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx in vitro xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx působením xxxxx a světla, xxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xx vivo xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v kůži, x sloučeniny, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx nanesení xx pokožku.
Test xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU in xxxxx xxx vypracován x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX z let 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx validní xxxxxxxxxxx xx vitro xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. V xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Výsledky xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxxx porovnávány s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx u xxxxxx a xxxx x xxxx zjištěno, xx xxxxx xxxx xx xxx uvedené xxxxxx vynikající predikční xxxxxxxxxx. Xxxx není xxxxxxx x tomu, xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, jež xxxxx x kombinovaného xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxx řada xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx není xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx fotoxicity.
Sekvenční xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxx látek xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx viditelného xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; měřená ve X/x2 xxxx v XX/xx2.
Xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx (= intenzita x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (= W x x) xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 xxxx X/xx2.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxx ultrafialového xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx International xx L'Eclairage) xx xxxxxxx označení XXX (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx i xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx xxxx xxxxx XXX x XXX xx xxxxx xxxxxxxx 320 nm x XXX se xxxxx xxxx xx UV-A1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxxx x 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: parametr, xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. příjem xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx červeně, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xxxxx parametrů xxxxxxxx xxxxx testem a xxxx uspořádání koreluje x celkovým xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (vitalitou) xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), které xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxx + XX xxxx - UV), xxxxx xxx působení xxxxxxxxx látky.
Predikční model: xxxxxxxxxx, kterým se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx predikce xxxxxxxxx potenciálu. X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx test xx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx vitro x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx PIF x XXX.
XXX (xxxxx xxxxxxxxxx factor, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx představující xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.
MPE (xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): xxxx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx průběhu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.
Fototoxicita: xxxxxx xxxxxxx reakce (xxxxxx), xxxxx vzniká po xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx expozici xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxxx je obdobně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx systémovém podání xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx pojmu "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx dochází x xxxx poté, xx xx xx xxxxxx (topicky nebo xxxxxx přijatá) xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vedou vždy x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (reakce podobné xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx působení xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x tomu, xxx se reaktivita xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) s xxxxxxxxxxx xxxxxxx, ke xxxxx xxxxxxx poté, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx negenotoxické xxxxx XX/XXX záření x xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: karcinogenita xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x látky. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX zářením xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x fotokokarcinogenitě.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxx pro pozitivní xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx testována xxx xxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX doporučuje xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x látek, xxxxx xxxx použity xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu (1) (3) (13).
1.4 XXXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxxxx účinky byly xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx světelnou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx se xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx návodu, xxxx xx se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x UV/VIS xxxxxxx (xxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxx XXXX x. 101). Pokud xx xxxxxxx extinkční/absorpční koeficient xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x cm-1, nemá xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x není třeba xx na škodlivé xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx testem na xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx biologickým xxxxxx (viz xxxxxxx).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx absorpce světla (xxxxxxxxx) chromoforem vyústit xx fototoxickou xxxxxx (7), xxxxxxx všechny xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx je xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx necytotoxické dávky XXX/XXX xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx při tomto xxxxx vyjadřuje jako xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vitálního xxxxxxx, xxxxxxxxx červeně (neutral xxx, XX) (9), 24 xxxxx po xxxxxxxx testované látky x xxxxxxxxx.
Xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx v jedné xxxxxx (monolayer). Pro xxxxxx xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx po 96 xxxxxxx s xxxxxx x osmi xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Xxxxx x obou destiček xx pak vystaví xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxxxx 5 X/xx2 XXX (+XX xxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx xx uchovává x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx médiem kultivačním x po dalších 24 hodinách xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (neutral xxx uptake, NRU) xx dobu 3 xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx každou x osmi koncentrací xx stanoví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol. X posouzení fototoxického xxxxxxxxxx se porovnají xxxxxxxxxxxx závislé reakce xxxxxxx v přítomnosti (+XX) x x xxxxxxxxxxxxx (-UV) záření, xxxxxxx xx xxxxxx XX50, xx. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x 50 % x porovnání x kontrolami xxx xxxxxxxxx.
1.6 XXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx vůči záření XXX, historické xxxxx: x xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx nasadí v xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro, xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxx UVA x xxxxx 1 - 9 X/xx2 a xxxxx den xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx kritéria jakosti, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX záření 5 X/xx2 xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxx 9 X/xx2 nemá být xxxxxxxxxxxxxxx nižší než 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx provádí xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx buněk.
Citlivost buněk xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x Xxxxxxx vyváženém xxxxxx roztoku [Earl´s xxxxxxxx salt solution, XXXX] x 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx ethanolu (XxXX) xxxx bez xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxx (-UVA).
Životaschopnost xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (OD540 XXX) xxxxxx x NR xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 104 xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx dvou xxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti, xx-xx xxxxxxxx xxxxxxx XX540 NRU x xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx 0,2.
Xxxxxxxxx kontrola: při xxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx známou xxxxxxxxxxxx látkou. Při xxxxxxxxx studii EU/COLIPA xxx xxxx xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxxx chlorpromazin (XXX); xxxxx xx xxxx xxxxx doporučuje. Pro XXX xxxxxxxxx dle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+XXX): XX50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-XXX): EC50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), tzn. xxxxx xxxxxxx XX50, xx xxx xxxxxxxxx 6.
Xxxxx CPZ xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx použít x jiné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx chemické xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx testované (xxxxxxxxx) látky. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx dat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x XXX xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XXXXX METODY
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Buňky
Při xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněčná xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx Balb/c 3X3 xxxx 31, x xx buď x XXXX xxxx x ECACC; xx xx proto doporučuje. Xxxxx xxxxxxxx protokolu xx dají x xxxxxxxx použít i xxxx xxxxx nebo xxxxxxx xxxxx, pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx podle jejich xxxxxxxxxxxx xxxxxx; je xxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.
X buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, x xxx xx použít jen x xxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx citlivost buněk xxxx UVA xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 x xxxxxx s nejnižším xxxxxx, pokud xxxxx xxxxxx než 100. Xxxxxxxxx buněk Balb/c 3X3 vůči UVA xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, x xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx rutinní pasážování xxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. X případě xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxx x XXXX xxxxxxxxx 10 % xxxx novorozených xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 oC / 7,5 % XX2. Xx nezbytné, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx cyklus x xxxxxxxxx historickém xxxxxxx xxx xxxx buňky xxxx. buněčnou linii.
1.7.1.3 Xxxxxxxx kultur
Buňky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nasadí x xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx v kultivačním xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, aby na xxxxx xxxxx (tj. xxx xx stanovuje xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx xx nasazení) xxxxxxx xx xxxxxxxxxx (xx splynutí x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). V xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx doporučuje xxxxxxx 1 x 104 xxxxx x jedné xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx identicky xx xxx xxxxxxxx x 96 jamkami, xxxxx xxx xxxxxxxxxx celým xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, s xxxxxxxx xxxx, kdy xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XXX/XXX) x druhá xx xxxxxxxxxx v xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx genotoxického xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx požadavkem použití xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx in xxxx nebo xx xxxxx, bylo metabolické xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx proto xxx xx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx prováděl x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.1.5 Testovaná látka / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xx xxxxxxxxx. Pokud je xxxxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx x fotodegradaci, xxxx se příprava xxxxxxxx xxx červeným xxxxxxx.
Xxxxx xx rozpustí x pufrovaném xxxxxx xxxxxxx, například x Xxxxxxx vyváženém solném xxxxxxx (XXXX) xxxx xx fyziologickém roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, PBS), xxxxx - xxx xxxxxxx dojít x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx - xxxxx obsahovat xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx barevné xxxxxxxxxx xX, pohlcující světlo.
Pokud xx xxxxxxxxx látka xx xxxx omezeně xxxxxxxxx, xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stonásobně xxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx konečná xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx se xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx solným roztokem. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxxxxxx x konstantním xxxxxx 1 % (x/x) xx všech xxxxxxxxx, tj. ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxx (XxXX). Xxxxxx xxxxx xxx i xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx aceton, xx však třeba xxxx pečlivě xxxxxx xxxxxx specifické xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, potlačení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, dá se xxxxxx xxxxxxx resp. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx ohřev xx 37 oC.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx UV xxxxxxx / příprava
Světelný zdroj: xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x XXX x xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx spojováno x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx záření UVB xx v tomto xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xx 313 xx x 280 xx zvyšuje xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx světelného zdroje xxxxx xxxxxxx požadavek, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxx testovaná xxxxx xxxxxxxxx, x xxx byla světelná xxxxx (dosažitelná za xxxxxxxxxx xxxx) xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém - xxxxx xxx i xxxxxxxxxx xxxxx (infračervená xxxxxx).
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se pokládají xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx se používají xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx (vysokotlaké) rtuťové xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx mají xx xxxxxx, xx vyzařují xxxx xxxxx a xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx všechny xxxxxxx xxxxxxxxxx emitují xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX, xx xxxxx xxxxxx filtrovat xxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx xx fototoxicitu 3T3 XXX xx vitro xx xxxxx použít xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxxxx nevyskytuje (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Xxxxxxx spektrálního xxxxxxxxx filtrovaného xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx v xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxx pravidelně xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, který xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx daný zdroj. Xxxxxxxxx UV-metru xx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Ideální xx, xxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx iradiance xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru xxxxxx spektroradiometru; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx vyžaduje xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx validační xxxxxx xxxx xxxxxxxx, že xxxxx XXX záření 5 J/cm2 xx xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx excitovala x xxxxx fototoxické látky. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 minut, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 mW/cm2. Xxxxxxx-xx xx jiná xxxxxxx linie xxxx xxxx zdroj xxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx XXX upravit xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce:
|
dávka xxxxxx (X/xx2) x 100
|
&xxxx; | |
| &xxxx;
x (xxx) =
|
&xxxx;
________________________
|
&xxxx;
(1 X = 1 X x)
|
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxxx (xX/xx2) x 60
|
&xxxx; |
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx převýšit xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx byly detekovány xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx vyšších koncentracích xx xxxxxxx četnost xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Xxxxxxx xX xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxxx (+XXX) x xxx xxx (-UVA) xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx předběžných xxxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxx koncentrační řady xx xxxxx xxx, xxx křivky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Používá xx koncentrační geometrická xxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx suspenze 1 x 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx periferních xxxxx 96xxxxxxx mikrotitrační destičky xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx 100 μl samotného xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx 100 μl xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 1 x 105 buněk/ml (= 1 x 104 xxxxx xx xxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx - xxxxx pro stanovení xxxxxxxxxxxx (-XXX), xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX), xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Tato xxxxxxxxx doba xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx objemem 150 μx XXXX/XXX xx xxxxxx xxxxx. Xxxxx se 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx koncentraci xxxx xxxxx rozpouštědlo (negativní xxxxxxxx). Testovaná xxxxx xx přidává v xxxx koncentracích. Buňky x xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxxx x xxxxx xx dobu 60 xxxxx (7,5 % CO2, 37 xX).
Xxxx xxxxx x XXX (+UVA) xx xxxxxxx tak, že xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 50 xxxxx xxxx víčko xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx UVA x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / cm2). Xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vody pod xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx ventilátoru. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-XXX) se xx xxxx 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) uchovávají xx xxxxxxxx teploty x temném xxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx médiem x přes xxx (18 - 22 xxxxx) xx xxxxxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x fázovým kontrastem. xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx kontrola xx xxxxxxxxxx, xxx xx eliminovaly experimentální xxxxx, ale při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (NR)
Buňky xx xxxxxxx objemem 150 μx xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Promývací xxxxxx xx odstraní jemným xxxxxxxx. Xxxxx se 100 μx xxxxx x XX a xxxxxxxx xx xxx 37 oC ve xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % XX2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx se xxxxxx x NR xxxxxxxx x buňky xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx pak xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx (xx také xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xx xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xx dobu 10 xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx XX x xxxxx nevyextrahuje a xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 xx za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx srovnávacího xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx formátu (xxxx. ASCII) xxx xxxxx analýzu.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXX X KVANTITA XXXXX
Xxxxx musí umožňovat xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx aplikaci XXX/XXX xxxxxx a xxx xx. Je-li xxxxxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx údaje xxxx vyjádřit xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxx až xx xxxxxxxxxx limitní xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x xxxxxxxxxxx xx xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx dojít k xxxx, xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxx dat. Xxxxx xxxx cytotoxicita xxxxxxxx x xxxxx z xxxx částí xxxxxxxxxxx (xxx xxx -UVA, xxx xxx +XXX), xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx čáry xxxxxxxxxxx modelu - xx třeba test xxx ověření xxxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx potřebné, xxxx xxx důležité xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx jasného xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxxxx, nejvhodnější xxx xxxx xxxxxxxxx xx variace xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, triturace, xxxxxxxxxx). Lze také xxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxx. U xxxxx, xxx jsou xx xxxx xxxxxxx, může xxx významný vliv xxxxxxxx xxxx.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx x 50 % inhibici xxxxxxxxx xxxxxx XX (XX50). Xx lze učinit xxx, xx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxxxxxx xxxxxxxxx vhodná xxxxxx xxxxxxxxxx regrese (xxxxxxx Xxxxxxx funkce nebo xxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxx xx xxxxxxx EC50 použije xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx proložení. K xxxxxxx hodnoty EC50 xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx metody. X xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx papír (xxx x: log, xxx x: probit), xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx mnohdy xxxxx lineární.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX XXXXXX)
1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, verze 1: fotoiritační xxxxxx (XXX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx (+XXX), xxx xx xxxxxxxxxxxxx (-XXX) světla, se xxxxxxxxxxxx faktor (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) PIF =
|
&xxxx;
____________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx žádný fototoxický xxxxxxxxx, kdežto XXX ≥ 5 fototoxický xxxxxxxxx předpovídá.
Je-li xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx při +XXX, xxxxxx xxx -XXX je xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx PIF xxxxxxxxx, x když xx jedná x xxxxxxxx, xxxxx indikuje, xx xxxxx má xxxxxxxxxxx potenciál. X xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxx. "&xx; PIF", když xx test cytotoxicity (-XX) xxxxxxx až xx xxxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx (Xxxx) a xxxx hodnota xx xxxxxx xx vzorce:
|
Cmax (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) > XXX =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", xxx xxxxx xxxxxxx > 1 xxxxxxxxxx fototoxický xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxx EC50 (-XX), xxx XX50 (+XX), xxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, je xx xxxxxxxx toho, že xxxxx xxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx formální "PIF = *1", xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX = *1 =
|
___________
|
|
Cmax (+XX)
|
Xxxxx xx dá xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, že není xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (x) x (x) xx xxxxx xxx predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x úvahu xxxxxxxxxxx, xxxxx se xxx testu xxxxxxx.
1.10.2 Xxxxxxxxx model, xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxxx (XXX)
Xx xxxxx xxxx xxxxxx novější verze xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu, vypracovaného xx xxxxxxx xxx x validační studie XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx xx podmínek xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx XX xxxxxx (13). X xxxxx modelu jsou xxxxxxxxx omezení modelu XXX v těch xxxxxxxxx, kde nelze xxxxxx xxxxxxx EC50. X xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx xxxxxxxx modelu XXX byl na Xxxxxxxxxxx univerzitě x Xxxxxxx xxxxxxx speciální xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx obdržet xxxxxx.
1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx výsledek xxxxx (XXX ≥ 5 nebo XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx daná xxxxx xx fototoxický xxxxxxxxx. Xxxxx se k xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx nižších xxx 10 μg/ml, xx xxxxxxxxxxxxx, že xxxxx bude xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx také xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx xx pozitivní xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (100 (x/xx), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx látky xxxxxxxx xxxxxxxxx dalších informací. Xxx mohou xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx, nebo údaje x xxxxxxxxx xxxx xxxxx x jiném xxxxxxxxxxxx alternativním xxxxx, xxxxxxxxx za použití xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX < 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka není xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xx xx látka xxxx xxxxxxxx i xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx se xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxx koncentracích získány xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx reakce (EC50 + UV x XX50 - XX), xx xxxxxxxxxxxx dat xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx nebyla xxxxxxxxx xxxxx toxicita (+XX xxx -UV) x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx koncentrace 100 μx/xx, xx xxxxx xxxxxxxxx tento xxxx xxx danou látku xx ne xxxxx xxxxxx x mělo xx se uvažovat x xxxxx, potvrzujícím xxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx vitro xxxx xxxxxx kůže xx xxxx xxxx in xxxx).
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:
Testovaná xxxxx:
- identifikační údaje x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,
- fyzikální xxxxxx x čistota,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x fotostabilita, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- rozpustnost xxxxxxxxx látky x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x zdroj buněk,
- xxxxxxxxxxxx mykoplazmat,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx UVA xxxxxxxxx pomocí ozařovacího xxxxxxxx, xxx se x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T XXX xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (a) - xxxxxxxx před xxxxxxxxxx x xx xxx:
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx média,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xx x xx xx).
Xxxxxxxx pokusu (b) - ovlivnění xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx použijí v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx x xxx xxx,
- x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx x absence xxxxxxxxxxxx zdůvodnění nejvyšší xxxxxxxxx koncentrace,
- xxx x xxxxxxx působícího xxxxx (xxxxxxxxx solný xxxxxx),
- xxxx ovlivňování xxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (c) - xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx daného xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx charakteristika xxxxxx světelného xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje xx testovaného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx XXX (v x W/cm2) xxx xxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx UV/VIS záření,
- xxxxx xxxxxx UVA (xxxxxxxxx x čas) x J/cm2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx kultur xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx uchovávaných v xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxx XXX:
- xxxxxxx média s XX,
- xxxx xxxxxxxx x NR,
- inkubační xxxxxxxx (koncentrace CO2, xxxxxxx, vlhkost),
- xxxxxxxx xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xx spektrofotometricky xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XX,
- druhová xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), byla-li xxxxxxx,
- složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), xxxxx xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx buněk xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x procentech vůči xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (koncentrace testované xxxxx νx relativní xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +UVA x -UVA,
- xxxxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx - výpočtem xxx xxxxxxxxxxxxxx faktoru (XXX) nebo středního xxxxxxxxxx (MPE),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx testu (a) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx denzita extraktu XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- historické xxxxx negativních xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx akceptovatelnosti xxxxx (b) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-UVA) x XXX xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: hodnoty XX50 (+XXX), XX50 (-UVA) x PIF, průměry x směrodatné xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. xxxx xxxxxxx právním xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Informace
Právní xxxxxxx č. 251/98 Xx. nabyl xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx podchyceny xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x.:
208/2001 Sb., xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., kterou xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx - novela xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Sb. xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. s xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Xxxxx jednotlivých xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxx aktualizováno, xxxxx se jich xxxxxx derogační xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx n) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxx x x xxxxx některých xxxxxxx xxxxxx.
2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx zákonů x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Sb. x x. 30/1998 Xx.
3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx pro hospodářskou xxxxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx chemikálií. Xxxxx 4 - xxxx xx zdraví (XXXX Xxxxxxxxxx for Xxxxxxx xx Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Effects).