Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
XXXXXXXX
Ministerstva xxxxxxxxxxxxx
xx dne 16. xxxxx 1998,
xxxxxx xx stanoví xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x přípravků
Ministerstvo xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx §4 odst. 1 xxxx. c) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx látkách x chemických xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx zákonů:
§1
Tato xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a toxických xxx xxxxxxxxxx (dále xxx "toxicita xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx").1)
§2
(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxxxx zkouškami xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v příloze xxxx vyhlášky.
(2) Xx zjišťování xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx i jiné xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx stejně xxxxxxx, xxxxxx x reprodukovatelné xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx2) x metody xxxxxxxxxx Organizací xxx xxxxxxxxxxxx spolupráci a xxxxxx (XXXX).3)
§3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. xxxxx 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. Xxxxx, XXx. x. x.
Xxxxxxx x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx
B. XXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXXXX XXXXX
1.1 AKUTNÍ XXXXXXXX
xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx podání xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXX TOXICITA
xx xxxxxxxxx xxxxxx popisující xxxxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx rizika x xxxx xx xxx xxxxxx, že xx xxxxxxx podávané xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx těžkých xxxxxxxxx xxxxxxxx a pravděpodobně x xxxxx.
1.3 XXXXX
xx xxxxxxxx podávané xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx (gramy nebo xxxxxxxxx) nebo jako xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti), nebo xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx xx xxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxx xx kilogram xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX
xx xxxxxxxx xx xxxx pevných dávkových xxxxxx, kterou xx xxxxx xxxxx, aniž xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx humánního xxxxxxxx) související x xxxxxxx látkou.
1.5 DÁVKOVÁNÍ
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x celkovou dobu xxxxxxxx.
1.6 LD50 (STŘEDNÍ XXXXXX XXXXX)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 % xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx LD50 se xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx).
1.7 LC50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx smrt xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx x 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx LC50 xx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx objemu xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 XXXXX
xx xxxxxxx xxx "xx observed xxxxxxx xxxxxx level" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x je xx nejvyšší x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.9 TOXICITA XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxxxx xx objeví x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx podávání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx dobu xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx života xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX DOSE)
je xxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxx vyvolává xxxxxxxx projevy toxicity, xxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxx, který xx xxxxxxxx.
1.11 PODRÁŽDĚNÍ XXXX
xx vyvolání xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
xx xxxxxxxx změn na xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)
je xxxxxxxxxxxx vyvolaná xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
xx vyvolání xxxxxxxxxx tkáňového poškození xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxx xx 3 xxxxx do 4 xxxxx.
1.15 TOXIKOKINETIKA
xx xxxxxxx absorpce, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx testovaných xxxxx.
1.16 ABSORPCE
označuje xxxxxx(x), kterým(i) aplikovaná xxxxx xxxxxxxx do xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx případně xxxx metabolity xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx.
1.18 XXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx.
1.19 XXXXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) je xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. AKUTNÍ - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX
Akutní xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxx za použití xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxx toxicity (xxxxxx X.1 - X.5), xx xxxxxxx xxxx xxx xx jediné xxxxxxxx získán xxxxxxxxx xxxxx toxicity.
V xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx testu xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XX50. Xxx inhalační xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx expozice.
Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx zvířat a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx pevné xxxxx (xxxxxx B.1 xxx) x metoda xxxxxxxxx xxxxx akutní xxxxxxxx (metoda B.1 xxxx). Při xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx studie na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx může xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7, X.8 x X.9) se posuzují xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x důsledku xxxxxxxxx xxxxxxxx. Důležité xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx měly pomoci xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx vyžaduje zkoumání xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx hloubky (xxxxxx X.26 - X.30 x X.33).
3. MUTAGENITA - GENOTOXICITA
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx struktuře xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx na xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx struktury nebo xxxxx.
Mutagenní aktivita xxxxx se stanoví xxxxx xx xxxxx xx genové (xxxxxx) xxxxxx v baktériích (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.10).
Xxxxxxxxxx xxxx také xxxxxxx xx vivo, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx B.12) nebo xxxxxxx xxxxxxxx chromozomů xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Je však xxxxx dávat jednoznačně xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx mohou být xxxxxxxxxx xxxxx další xxxxxx ke zjištění xxxxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx účelům: potvrzení xxxxxxxx xxxxxxxxx základním xxxxxxxx xxxxx; zkoumání xxxxxx xxxxxxxxxxxxx základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx studií xx xxxx.
Xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx X.15 xx X.25 xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx x xx xxxxx, xxx rozšiřují xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků. Tyto xxxxx poskytují xxxxxxxxx x xxxxxxxx mutacích x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx složitějších xxx baktérie xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Obecně platí, xx další xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx relevantní xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxxxxxx studie, xxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxx záviset xx xxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxxxxx bakteriálních x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx dědičných xxxxxx x xxxxx xxxx x dispozici xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků v xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx už xxxxxxxxxx xxxxxxxx (bodovými) xxxxxxxx, xxxx. specifický locus xxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x první xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx lze xxxxxx xxx odhadování xxxxxxx xxxxxxxxxxx rizika látky xxx xxxxxxx. Vzhledem xx složitosti xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx jen na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx stanovení xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xx projednání x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx být charakterizovány xxxx genotoxické xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xx čerpají xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx poskytují testy xxxxxxxx xxx opakované xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx. Test xxxxxxxx xxx opakované aplikaci, xxxxxx X.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologických xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx tkáních, xxxxx xx mohly xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx identifikovat xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které vyžadují xxxxx, xxxxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.32) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxx toxicity/karcinogenity (xxxxxx X.33).
K xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx buněčných xxxxxx, u xxxxxxx xx předpokládá xxxxxxxxxx x maligní xxxxxxxxxxxx - xx xxxx (xxxxxx X.21). Používá xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx typů x xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx.
5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Reprodukční xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo schopností xxxxx x xxxxx (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinků xx xxxxxxxxx (vývojová xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx teratogenitu x xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx B.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx teratogenitu jako xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx. Alternativně xxxxx xxx použity xxxx xxxxxxx aplikace x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. X takových xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx reprodukční xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.35) xxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx se zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx nebo periferním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxx vzejít x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) xxxxxxxx také xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx měla xxxxxx odhalit chemické xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které vyžadují xxxxx, xxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx. Navíc xx důležité xxxx x úvahu specifické xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx x jiných studiích xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, že jisté xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx X.37 x X.38 po jednorázovém xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
7. IMUNOTOXICITA
Imunotoxicita xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx anebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx nebo navozenou xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx X.7), zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinků. Xxxxxx xx měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x imunotoxickým xxxxxxxxxxx, vyžadující xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx tohoto xxxxxxx.
8. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx a vyhodnocení xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aspekty xxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx studií xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx, xx bude x xxxxxx xxxxxxx zapotřebí xxxxxxxx xxxxxxx parametry. Xxxxx x ojedinělých xxxxxxxxx bude nezbytná xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu x xxxxxxx). U xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx nebo xx může xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.36).
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx struktuře x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastnostech xxxxx také xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxx aplikace, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx také xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických x toxikokinetických studií.
9. XXXXXXXXXXXXXXX TESTOVANÉ LÁTKY
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x její xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxikologické xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx poskytují xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx podávání, pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxx skladování.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky (x také pokud xxxxx větších xxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxx x biologickém xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, fyzikálně-chemických xxxxxxxxxx, xxxxxxx x chování xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx zprávě o xxxxx.
10. XXXX X ZVÍŘATA
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx kontrola xxxxxxxx xxxxxxxxx, ve kterém xxxx xxxxxxx chována, x xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX XXXXX
Životní xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxx místnosti 22 xX ± 3 xX při relativní xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx králíky xx xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX při xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx na teplotu. Xxx xxxx xxxxxxx xxxx podrobnosti x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x popisu testované xxxxxx. Při všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx je x xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx x průběhu xxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx střídáním xxxxxx a xxx xx dvanácti xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, mohou být xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx jedinců xxxxxxx xxxxxxx, ne xxxx xxx 5 xxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx součástí xxxxxx x pokusech na xxxxxxxxx jsou údaje x způsobu chovu x xxxxxxx a xxxxx xxxxxx chovaných x xxxxx kleci xxx během expozice xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx doby xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx, xxxx xx výživová xxxxxxx xxxxxx vzájemným působením xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx složky xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx reakce xx xxxxx xxxx x úvahu xxx xxxxxxxxxxxx výsledků. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxx xxxx. Pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx tomu xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX ZVÍŘAT
Xxx xxxxxxxxxxx testovacích xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx počtu x xxxxxxx bolesti x stresu xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxx fixní xxxxx (X.1.xxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (B.1.tris). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x vyžaduje xxxxx xxxxx xxxxxx. Metoda xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx vyžaduje x xxxxxxx o 70 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxx X.1.
Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx dávkách a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1, X.2 a X.3), xxx xxxx x in vivo xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx X.11 x X.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx možné xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx x jednoho xxxxxxx, je-li xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zdůvodnitelné. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastnostech xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx provedených xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx vitro. Xxxxxxxxx, byla-li x xxxxxx xxxxxxxxx studie xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx testu (xxxxxx B.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže, další xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx B.4) může xxx xxxxxxxx; látky, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže při xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx B.4), xxxxxxx xxx dále testovány xx xxxxxxxx oka.
Xx nutno xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx stejnou xxxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx se úplně xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx metody k xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxx použití xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x označování xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxx, xxx xx xx xxxxx.
12. XXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX
Xxx xxxxxxxxx x interpretaci pokusů xx xxxxxxxxx x xxxxx in xxxxx xx nutno xxx xx zřeteli, že xxxxx extrapolace na xxxxxxx xx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxx; xxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Výsledky xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx x označování xxxxxx x stávajících látek xxxxx účinků na xxxxxx člověka xx xxxxxxx xxxxxxxxxx zjištěných x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx být také xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxx xx posuzování xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx předpisem č. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.1. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (PER XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx podává x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx x uhynutí. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkách a xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx je xxxxx, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, v jakých xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx náhodně přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx se xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx jako xxxxx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx, další xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx oleji, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx roztok x xxxxxx vhodných vehikulích xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. U xxxxxxxx xx xxxxx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxx, jichž je xxxxx xxxxxxx xx 20 ml.kg-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx hladinách dávek. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx vhodnou koncentraci xxxxx xx vehikulu xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx testu xx x xxxx pohlaví xxxxxx variační rozpětí xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Pro každou xxxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí. Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx je výrazně xxxxxxxxxx, je třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx hlodavci, xxxx xx xx zvážit xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx je xxxxx pečlivě xxxxxx x xx třeba xxxxxxxx, xxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxx středně xxxxxxx dávky. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Má být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x mají xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických účinků x mortality. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxx, musí xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x přijatelnou xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 samců x 5 samic x xxxxxxxx xxxx popsaných xxxxxxx. Pokud xxxxxx xxxxx způsobí xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx stanovit rigorózně. Xxxx xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx potřeby prodloužit. Xxxxxxxx xx doba, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx, x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, kde xx xxxxxx tendence x xxxxxxxx mortalitě.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx zvířata xxxxxxx. Xxxxxxxx se potrava xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. X zvířat x xxxxx rychlostí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxx x pitné xxxx xxxx omezen. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx zváží a xxxxxxxxx xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx menších xxxxxxxxxx xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ještě 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx se látka xxxxxxxxxxxxx xxxxx určitého xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx x xxxx zvířatům xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky, xxx každé zvíře xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Během xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx častá xxxxxxxxxx. Xx nezbytné sledovat x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x bezprostřední reakci xxxxxx na xxxxxxxx.
Xxxxxxx jednou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vyšetření. Xxxx pozorování se xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx opatřeními x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, např. xxxxx nebo zmrazení xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx nejpřesněji.
Zvířata, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i ta, xxxxx přežijí až xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, odeberou se xxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Hodnocení xxxxxxxx x druhého xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx o xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví x cílem zjistit, xxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrazně xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X jednotlivých xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx použití xxxxxxx xxxxx zvířat. Pokud xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx testovaného xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx vynechat.
2. XXXXX
Xxxxx se sestavují xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx nálezů. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx provede xxxxxxxxxxxxx xxxx podáním testované xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxx uhynutí. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx zvířat xxxx než xxxxx xxx. Zvířata, která xxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxxx s xxxxxxx xx stres a xxxxxx xxxxxxxx podanou xxxxxx, se xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx xxxxx látkou. LD50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, mezi xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látce x výskytem x xxxxxxx všech abnormalit xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx tělesné xxxxxxxxx, mortality x xxxxxxxxx toxických účinků.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.
- experimentální xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx (počet uhynulých xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx exponovaných xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat - xxxxxxx xxxx pozorování,
- xxxxxxx LD50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx metody xxxxxxx),
- 95% meze xxxxxxxxxxxxx xxx XX50, xxxxx xx lze xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx a její xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx během testu xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.1. xxx XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX OS) - XXXXXX XXXXX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací metody
Xxxx akutní xxxxxxxx xxxxxxxxx informace x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx testované xxxxx.
Xxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx orientační xxxxxx se sekvenčním xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxx aplikaci xxxxxx x xxxxxx téhož xxxxxxx, vždy jedno xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx studie xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx odhadu xxxxxxxxx xxxxxxx dávky. Normálně xx x xxxx xxxxx xxxxx nepoužije xxx xxx xxxx xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x pěti samic x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxx dávka, xxxxx pravděpodobně vyvolá "xxxxxxx toxicitu" (viz xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xxx xx xxxxxxx.
Po xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx vybraná xxxxxxx xxxxxx dávky vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx další xxxxxxxxx. Xxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx pozorována zřejmá xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx otestuje na xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxx toxická xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx znova xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx xxxxx" (xxx xxxx B - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), tj. xxxxxxxx z předem xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, aniž xx xxxxx x xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je třeba xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx vyvolávají značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx proti tomu.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx užívané xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxxx testu xx x obou pohlaví xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx náhodně přiřadí xx jednotlivých experimentálních xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx stačí xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx každého x xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxx x xxxxxxxx dávky
Xxxxx xx třeba, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxx první uvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx volbou xx xxxxxx x rostlinném xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx možnost xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx vehikulích nebo xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx by xxxxx xxxxx normálně xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné roztoky, xxxxx je xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx objemů xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek.
Xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx. Potkanům xx xxxxxxx odebere xxxxx xxxx testem; přístup x xxxxx vodě xxxx omezen. V xxx pokusu se xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx se xxxx xxxxxx orálně x jediné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx podat xxxxx xxxxxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx množstvích xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx podání xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx období - potravu x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Orientační xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx různých xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x dispozici xxxxx, xx jsou xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx podávají sekvenčně, xxxx xx xxxxxxx 24 hodin xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pozorují x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx nejméně xx xxxx xxx; xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx otravy sedmý xxx, xxxxx xx xxxx pozorovat xxxxx xx dalších sedm xxx. Posuzují xx xxxxxxxxxxx výchozí hladiny xxxxx: 5, 50, 500 a 2000 xx.xx-1. Jestliže zvolená xxxxxxx dávka xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx jednu xxxx xxxx vmezeřených xxxxxx dávek. Tento xxxxxx by xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx(xxx) dávek, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx xxxxxx, x o xxxxxxxx xxxxx, která vyvolává xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxx xx vybrat xxxxxxx xxxxx podle xxxxx o příbuzných xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se použít xxxx xxxxx xxxxx 500 xx.xx-1. Jestliže xx xx výchozí xxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x uhynutí při 2000 xx.xx-1, xx xxxxxxxxxx studie xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxx úrovni xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (např. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx těžké xxxxxx, vyžadující xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx dalšímu xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx dávka (xxxx. 50 mg.kg-1). Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx vhodné xxxxx xxxx určenými fixními xxxxxxx. Za xxxxxxxxxx podmínek xx xxxxxxxxx, xx xx xxx tomto postupu xxxxxxxxx více xxx 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx hladinu xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx). Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx dávek xxx xxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxx, xxxxx bude xxxxx x xxxxx, má xxx zvolena z xxxxx xx 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 nebo 2000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti. Xxxxxxx výchozí xxxxxx xxxxx xx měla xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, avšak xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů); xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx toxicitu, ale xxxxxxxx mortalitu, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx testování.
Xxxx xxxxxx zvolené xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx xxxxx testovat xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx měla xxx xxxx pozorována xxx, aby xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx kompletní. Xxxxxxxx xxxxx toxická xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx vlivem látky, xxxx xx xxx xxxxx znovu testována xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Opět xx zvířata, xxxxx xxxx xxxxx humánně xxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxx látky xx pozorování xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx samostatné xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx účinek xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zvířat xx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxx by měla xxx nejméně 14 xxx. Xxxxx xx xxxx stanovit rigorózně. Xxxx by xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx x trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxx x xxxx xx uhynutí, zvláště xxx, xxx xx xxxxxx tendence x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx provádět xxxxxxx xxxxxxx xxxxx den xx podání látky x xxxxxxx jedenkrát xx xxx další xxx. Zvířata vykazující xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx utratit. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx několika xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx, jestliže zvířata xxxx vykazují xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxx, xxxx je xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx na xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní a xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xx xxxxx 3 xxx a xxxxx xxxxxx xxxxx. Zvířata, xxxxx uhynou během xxxxx, i xx, xxxxx přežívají do xxxxx xxxxx, xx xxxxx x pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx to indikováno, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx třetí xxxxxxx dávky.
V xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5 xx.xx-1 (xxxx xxxxxxxx orientační xxxxxx xxxxxxxxx mortalitu xxx xxxx xxxxx), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
2. XXXXX
Xxxxx x orientační x xxxxxx studie xx xxxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. X xx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx; počet xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx utracených z xxxxxxxxx xxxxxx; popis xxxxxxxxx účinků; pro xxxxxx xxxxxx, zda xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx účinek, který xxx připsat xxxxxxxxx xxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků; xxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx než xxx, xx třeba xxxxxxxxx x zaznamenat xxxxx hmotnosti.
Zvířata, xxxxx xxxx humánně xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx i xxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- ve formě xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx podle pohlaví x podle xxxxxx xxxxx (počet xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx zvířat x příznaky xxxxxxxx; xxxxxx, stupeň x xxxxxx xxxxxx),
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, doba xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx utracení xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx
Xxxxx | Xxxxxxxx | Interpretace |
5 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx | Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx Látky, xxxxx xxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx xxx 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx nebo velmi xxxxxxxx. Viz výsledky xxx 5 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Látky, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx výsledky x 500 mg.kg-1 | |
500 xx.xx-1 tělesné hmotnosti | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx | Látky, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x 50 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není zřejmá xxxxxxxx | Látky, xxxxx xxx xxxxxxxxx za xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 2000 xx.xx-1 | |
2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x nebo xxx zřejmé toxicity | Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx-1 Xxxxx, xxxxx xxxxxx významnou xxxxxx xxxxxxxx |
X.1. xxxx XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX STANOVENÍ XXXXX XXXXXX XXXXXXXX
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, tak xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx používá xxx xxxxx stanovených dávek x přiměřených xxxxxxxxx, xxx xxx bylo xxxxx testovanou xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx toho xxxxxx xxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx pevně xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx dávky xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx pro xxxxx xxxxxxxxx. Použití xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, pokud xx žádoucí xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dávky x xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx LD50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx rozsahu xxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx je x x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxxx xxxxx mohlo být xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx B.1. Hlavní výhodou xxxx metody xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx x metody xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx)(B.1) x než x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx se xxxxxx xxxxxx skupině xxxxxxxxx zvířat v xxxxx xx stanovených xxxxx. Testování xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx úhynu xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x dalším xxxxx, x.x.
- není zapotřebí xxxxx další xxxxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx se stejnou xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxx náhodně xxxxxxx, xxxxxxxx tak, xxx byla xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, x chována xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx testu, aby xx xxxxx xxxxxxxx xx laboratorní xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxx x klecích ve xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávky, xxx xxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx se rozpustí xxxx suspenduje xx xxxxxxx nosiči. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx roztoku/suspenze, xxx použití roztoku/emulze x xxxxxx rostlinném xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x xxxxxx nosičích. Xxx xxxxxxx vehikula xxxx být xxxxx xxxxxx toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx být stanovena xxxxx před testem.
Zvířata xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxx xx určitou xxxx xxx potravy (xxxx. potkani přes xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); přístup k xxxx xx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx být březí.
Na xxxxxxx studie by xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx zvířat (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví
Pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxxx xxx použito xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Úrovně xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx xx xxx xxxxxxx úrovní, xxx. 25, 200 a 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, aby x největší xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx podána. X závislosti xx xxxxxxx dávce xx xxxxxxx příslušného diagramu xxxxxxx popsaného x Xxxxxxx 1.
Xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x účinku. Xxxxx xxxx informace xxxxxxxxx, xx úmrtnost je xxxxxxxxxxxxxxx i při xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx), xxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx žádné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx - s xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx - xxxxxx výchozí xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxx xxxxxxxx získanou xxxxxxxxx, xxx xxx xx dovoluje xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx pevných dávkách xx výši 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na rychlosti xxxxxxx, na trvání x závažnosti xxxxxxxxx xxxxxxxx. Testování xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx xxxx při další xxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx, že zvířata xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx test
Limitní xxxx x jedinou xxxxxx xxxxx xx výši 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx provádí xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx 200 mg.kg-1 (xxxx 500 xx.xx-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx obvykle xx xxxx 14 xxx, kromě případů xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx utracena z xxxxxx xxxxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx xxx prodlouženo xxxxx toxických reakcí, xxxx xxxxxx xxxxxxx x délky zotavovacího xxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx-xx o xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: záznamy xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx zvíře.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxx zvážena. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx potravy xx xxxx dalších 3 - 4 xxxxx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx určité xxxx, xxxx xxx - x xxxxxxxxxx xx xxxxx této xxxx - nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vodu.
Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx podán xxxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx na 100 x tělesné xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx minimalizovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx byl xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxx možné xxxxx xxxxx celou xxxxxxxx, xx možné xx xxxxxxxxx po xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx v Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx dvakrát za xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx, xxxxx xx vyžaduje xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx látky, a xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx vykazující xxxxxxxx xxxxx bolesti x xxxxxxxxxxxxxxx silného stresu, xx třeba xxxxxxx xxxxxxx: xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx stejně xxxx zvířata xxxxxxx.
Xx xx byla xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, dobu xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky toxicity. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xx kůži x xxxxx, na xxxxx x xxxxxxxxxx, a xxxx xx dýchacím, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nervovém xxxxxxx, xxxxxxxxx aktivitě x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, křečí, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x xxxxxx.
Xxxxxxx pozorování xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx jsou vedeny xxx xxxxx jednotlivé xxxxx.
1.3.3.2 Tělesná hmotnost
Všechna xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx před podáním xxxxxxxxx látky x xxx xxxxxxx jednou xxxxx. Počítají xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Pitva
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx testu, se xxxxxxx pitva. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx zvíře zvlášť. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx uvážit mikroskopické xxxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx makroskopické patologie x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx 24 x xxxx xxxxx.
2. XXXX A XXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx xxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx formy, xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx skupiny počet xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx nebo utracených x xxxxxxxxx důvodů, xxxx xxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x interpretaci xxxxxxxx xxx klasifikaci xx xxxxxxx v Xxxxxxx 2.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Zpráva x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh/kmen;
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- zdroj, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx, xxxxx je xxxx xxx xxxx;
- podrobné xxxxx o způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x doby xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx x zdroje);
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx každého xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx (xxx. zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx a trvání xxxxxx);
- xxxxxx x xxxxxx průběh příznaků xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx x histopatologické xxxxxx x xxxxxxx zvířete, xxxx-xx x dispozici.
Diskuse xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx s metodou XXXX XX 423.
XXXXXXX 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxx xxxx xxxxxxx v xxxx 1.4.2.3, výchozí xxxxx xx měla xxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx u některých xxxxxx. Xxx výběr xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxx o xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx x jiných xxxxx toxicity x
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.
2. Xxxxxxxxx vývojové xxxxxxxx uvedené x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx dávku. X xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxxx šipky.
3. Xxxxx xx xxxxxxxx výchozí xxxxx 25 nebo 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx uhyne pouze xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx však xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx ověřit xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx x podanou xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxx potvrdí, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx dávky.
4. Xxxxx xx dávce 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx pohlaví, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xx xx xxxx xxx hraniční xxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx posoudit xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x těchto zvířat xxxxx být důvodem xxx klasifikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX50 xx xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti nebo xxxxx, xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx úrovni xxxxx.
5. Xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx x třemi xxxxxxxxxxx xxxxx stanovenými xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx je možno xxxxxx buď x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx bodu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx testování xxxxx xxxxxxxx 1.
Postup xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích xx udána xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx rámečky je xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx šipek xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rámečku nebo xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx je udána xxxxx, xxxxx zvířat x pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených zvířat (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx směru xxxxx xx do xxxxxxxx xxxxxx rámečku.
Varianta 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x příslušnou doplňkovou xxxxxx.
Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx testování x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích xx xxxxx dávka, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako první, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx xxxxxxxxx zvířat xx x testování xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxx rámečku.
Varianta 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx xxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Pokračování xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
X rámečcích xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako druhé).
Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Šedé xxxxxxx xxx rámečkem "XXXXX XXXXX TESTOVÁNÍ" x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx klasifikaci. Po xxxxxxxxx xxxxx varianty 1 xx příslušná xxxxx sleduje, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Hodnoty x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx příslušný xxxxxx klasifikace. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, že XX50 xx xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx rámečku xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
(b) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx postup s xxxxxxx dávkou 2000 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
a) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
b) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
c) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx hmotnosti
X.2. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x rozdělení xxxxxxxxx xxxxxx, tenzi xxx, xxxxxxx tání, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (jsou-li xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Několik xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx exponováno studované xxxxx xx určenou xxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x to xxxxx koncentraci x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxx x případy xxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx a bolesti xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx x takových xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres následkem xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 dní xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx expozičního xxxxxxxx, xxxx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx velikosti. Pokud xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx kontrolní xxxxxxx x vehikulem. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický účinek. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Používá se xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx ± 20 % střední hodnoty (xxx každé xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Počet x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Samice musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxxx: Používají-li se x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx testované látky.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx vhodně xxxxxxxxxxxx xxx, aby xxx x testovacích xxxxxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx xx znázornění xxxxxx mezi xxxxxx x xxxxxxxxxx a, xxxxx xx xx xxxxx, musí xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 s xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.3.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 samců a 5 xxxxx xxxxx x koncentraci 20 xx.x-1 xxxx xxxxx xx xxxxxxxx tekuté xxxx xxxxx látky x koncentraci 5 xx.x-1 (xxxx - x xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx použít x xxxxxxxx fyzikálních nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosažitelné xxxxxxxxxxx) během 14 xxx k xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx pokusy za xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx expozice xx být 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Pro xxxxxx xx xxxxxxx xx třeba použít xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx dynamické proudění xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx rozdělení xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx tak, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx shlukování xxxxxx a aby xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx zajištění xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx by xxxxx x zásadě xxxxxxx xxxxx pokusných zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Je xxxx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx dva způsoby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jinými xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx by měla xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze ji xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx otravy, stejně xxxx xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx po xxxx 4 hodin od xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx by mělo xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx má xxx 22 oC ± 3 o X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Udržování xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky do xxxxx. Xxxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Používají xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx musí xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx nejrychleji. Xxxxxxxxxx x xxxxxx boxu xx zajišťovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) měření xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně),
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx xxxxxxx třikrát xxxxx xxxxxxxx (některá xxxxxxx, např. xxxxxxxx xx xxxxxx koncentraci, xxxxx vyžadovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx dosáhnout, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx stabilní, xxx xx to xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx týká xxxxxx x aerosolů, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx),
(c) xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx se xxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx jejím skončení xx xxxxxxxxxx provádějí x xxxxxxxxxxxxx systematicky. Xxxxx xxxxx xx xxxx individuální protokol. Xxxxx prvního dne xx xxxxx provádět xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx studii, např. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx či utracením xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx a kómatu. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx stanovuje xx xxxxxxxx xxxxx x x okamžiku xxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx x dolní xxxxx dýchacího xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx tkáně pro xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
2. ÚDAJE
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx další xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx x bolestem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x všech xxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxx pokusu: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx umístění xxxxxx x expozičním xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- údaje o xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx spolu s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx odchylkou). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx údaje:
a) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx;
x) teplota x xxxxxxx xxxxxxx;
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Xxxx.: při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x roztoku (xxxx. xx xxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, pokud xx xx xxxxx, koncentraci xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx.
x) povaha xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;
e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx;
f) xxxxxxxxxx xxxxxx aerodynamického xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD);
x) xxxx xx xxxxxxxx rovnováhy;
x) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx toxických reakcí xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx, která x xxxxxx uhynula xxxx xxxx humánně xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx x příznaky toxicity; xxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat);
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- hodnota XX50 xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx doby pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx xx xxxxx xxx stanovit);
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) x její xxxxxxxx (pokud to xxxxxxxx metoda stanovení);
- pitevní xxxxxx;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (se zvláštním xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50);
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.3. AKUTNÍ XXXXXXXX (DERMÁLNÍ)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx nanáší xx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, a xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx účinky x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x přetrvávajícími příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a takovým xxxxxxxx, x kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx 24 xxxxx xxxx zahájením testu xx srst xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Při xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx je třeba xxxx xx xx, xxx xx nepoškodila (xxxx. abrazí) xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx připraví xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx brát x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kůží. Xxxxx vehikula xx xx xxx xxxxx xxx, v jaké xxxxx se může xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxx xxxx, x xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vybrat xxx, xxxxx xxxxxxx usnadňuje xxxxxx xxxx. Testované xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx neředěné.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxx se dospělých xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxx i xxxx živočišné xxxxx, xxxxx xxxx xxx xx důvody. Xx xxxxx volit xxxxx xxxxx pokusných xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 5 zvířat xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx je x xxxxxxxxx informace, že xxxxx x obou xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Používají-li xx v xxxxxxxx xxxxxxx toxicity xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pečlivě xxxxxx x je třeba xxxxxxxx, xxx se nepřekročily xxxxx xxxxxxx dávky. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx podávání letálních xxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxxxxx počet dávkových xxxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx být xxxxxx odstupňovány tak, xxx vznikly testovací xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků x xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx testované látky. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, a xxxxx možno xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxx provést xxxxxxx test jednou xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx x použitím xxxx popsaných xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx úplnou xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx má xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx však xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx určena xxxxx obrazu otravy, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxxxxx xx doba, xxx xx příznak xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx do xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx je xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Testovaná xxxxx xx xxxxxx rovnoměrně xx xxxxxx, která xxxx asi 10 % xxxxxxxxx povrchu xxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxx látky může xxx xxxx xxxxxx xxxxx; xxxx by xx však aplikovat xxxxxxxxxxx xx co xxxxxxxx část této xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xx expoziční xxxx 24 hodin xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mulového obvazu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx je xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X zamezení xxxxxx látky je xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx nelze xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, xxxxx možno xxxx xxxx jiným xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx systematicky xxxxxxxxxxxx. Xxx každé xxxxx xx xxxxx vést xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx se zvířata xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx pracovní xxx xx třeba xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx slabých xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx aplikace, xxx a xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx co nejpřesněji. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xxxxx přežijí až xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají a xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxx pohlaví
Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx podá xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx druhého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx citlivější xx testovanou xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx zvířata xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, testování xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zvířat x jinými xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánním xxxxxxxx utracena s xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx látkou, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX50 se vypočte xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx hodnotí xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, mezi xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, klinických xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.,
- podmínky xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxx xxxxxx: okluzivní xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx užito) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx pokusných zvířat,
- xxxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx; počet exponovaných xxxxxx),
- doba xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx pozorování,
- xxxxxxx LD50 xxx to xxxxxxx, x kterého xxx xxxxxxxx úplný xxxxx, x to xxx 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% interval xxxxxxxxxxxxx xxx LD50 (xxxxx xxx xxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- pitevní xxxxxx,
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx druhém xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx pozornost xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vypočtené xxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxx),
- interpretace výsledků.
X.4. XXXXXX XXXXXXXX (KOŽNÍ XXXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Výchozí xxxxx
Je třeba xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx s xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx reakce. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx test, xxxxxx xx xxxxxxx zvířeti xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx další xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX rovné xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5) xxxx xxxxx testovat xx xxxxxxxx kožní xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx leptavé xxxxxx. Xx xxxxx vzít x úvahu xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxx dostupné xxxxxxxxxxx xxxxxxx závažných xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx.
x) Xxxxxxxx ze studií xxxxxx toxicity. Jestliže xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx toxicity xxx xxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti) x xxxxxx pozorováno xxxxxxxxxx kůže, xxxx xxxxx dále testovat xxxxx xxxxxxxxxx. Rovněž xxxx třeba xxxxxxxx xxxxx vysoce xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx dávce xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx jako xxxxx vlastní xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx popíše xxxxxx podráždění, xxx xxxx možno provést xxxxx posouzení xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx možné xxxx zhodnotit xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx střihání xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Je xxxxx použít xxxxx xxxxxxx xx zdravou, xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx husté srsti, xxxxx xxxx výraznější x některých xxxxxxxx xxxx. Testované xxxxx xx nesmí xxxxxxx xx xxxx zóny xxxxx husté srsti.
Xxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, případně xxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x kůží. Xxx xxxxxxx vehikula xx nutné xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx xxxxx xxxxxx různé xxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx dát xxxxxxxx albínu xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx z xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx látka xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xx leptavá), xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Pro xxxxx test xxxx xxxxx xxxxxxx tři xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro neošetřenou xxxxxxxxx xxxxxxx, pro xxxxxxxxx případů xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx mohou být xxxxxxx xxxxx zvířata.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx důvody xxx jiný postup, xxxxxx xx na xxxxxxxxx místo xxxx 0,5 ml kapaliny xxxx 0,5 x xxxx nebo polotuhé xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx vlastní kontrola.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx účinků. Xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx xx aplikaci.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx chovají xxxxxxxxxx x klecích. Xxxxxxxxx xxxxx xx nanese xx xxxxx xxxxxx (xxx 6 cm2) xxxx x pokryje xx plátkem xxxx xxxxxxxxxxxx nedráždivou xxxxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx nanést xxxxxxx xxxxxxxxxx látku xx xxx, x xxx xxx xxxxxxxxx xx kůži. Po xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx přidržovat xxxxxx xxxxx na xxxx vhodným okluzivním xxxx částečně xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxx, xxx xx zvíře xxxxxxx x xxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx orálně nebo xx xxxxxxxxx.
Na xxxxx xxxx xxxxxxxx xx třeba odstranit xxxxxx testovanou látku xxxxx, pokud xx xx možné, nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xx obvykle 4 xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. tím, xx xxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx zkrátit xxxxx xxxxxxxx (xxxx. xx 1 hodinu nebo 3 minuty). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nejprve xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx xxxxxxxx, pokud xx xxxxxx dermální xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx. První xxxxxx xx xxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx plátek xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx v xxxx xxxx naznačují, xx xx xxxxxxxx 4xxxxxxxx expozice x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, odstraní xx xxxxx xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx kůže. X případě, že xxxx xxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx test x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx zvířat; pokud xx není xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů (xxxx. jestliže xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx pozorována xxxxxxx xxxx).
Jestliže je xxxxxxx kožní reakce (xxxx. xxxxxxx) pozorována xx 3 xxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxxx, xx test xxxxxxxx ukončen.
Xx xxxxxxxx podmínek xx xxxxx xxxxxxxxx delší xxxxxxxx, například pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx u xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x kožního xxxxx x stupeň xxxxxx xxxx po 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx kůže xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxx x tabulce 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 hodin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, provádí xx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx kůže xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx závažné léze xxxx poleptání (nevratná xxxxxxxxx xxxxx xxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx zabarvením xxxx testovanou látkou, xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx měření xxxxxxxx xxxxx xxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky. Z xx xxxx xxx xxx každé pokusné xxxxx patrný xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxx dobu xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx, popis xxxxxx x xxxxxx podráždění xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx možno xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxx xxxxxx: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- ve xxxxx xxxxxxx údaje x kožní xxxxxx xxx každé xxxxxxxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 x 72 xxxxx xxx. xx xxxxxxxxxx mulu),
- xxxxx zjištěných xxxxxxx poškození xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění x xxxxxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxx všech xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,
- diskuse výsledků,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx reakce xxxx
Hodnota | |
1. Hodnocení xxxxxxx x xxxxxxxxx | |
1.1 Xxxxx xxxxxx | 0 |
1.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx (stěží xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx | 2 |
1.4 Mírný xx xxxxxxx xxxxxx | 3 |
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxx příškvaru (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx erytému | 4 |
2. Xxxxxxxxx xxxxx | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx lehký edém (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
2.3 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxx zřetelné, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) | 2 |
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxx x 1 xx) | 3 |
2.5 Výrazný xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 xx x otok xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx) | 4 |
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx indexu xxxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
XXX xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx a xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx jedince x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx u xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
nedráždí | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; XXX ≤ 3 |
středně dráždí | 3 < IKI ≤ 5 |
xxxxx xxxxxx | IKI &xx; 5 |
X.5. XXXXXX XXXXXXXX (OČNÍ DRÁŽDIVOST)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
1.1.1 Výchozí xxxxx
Xx třeba xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx x xxxxx snížit xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx podmínek, xxxxx xxxxx xxxxxxx těžké xxxxxx. X xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Např. xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx látky, které - jak je xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx v xxx xX xxxxx či xxxxx 2 nebo xX rovné xx xxxxx 11,5, není xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxx závažná xxxxxxxxx. Xx třeba xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rezervu.
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; látky x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx vlastnostmi xxxxxx xxx xxxx testovány xx xxxxxxxxxx pro xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx budou xxx xxxxxxx xxxxxx na xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxx dráždivosti. Látky, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx účinky xx xxxx xx studii xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx dále testovat xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx v xxxxxxxxxxx xxxxx aplikuje xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx neexponované xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx stanovených xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxxx se xxxx xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx pozorování xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
24 hodin xxxx xxxxxx xx x xxxxxxx z xxxxxxxxx vybraných xxxxxxxxx xxxxxx provede xxxxxxxxx xxxx xxx. Zvířata, x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx očí, xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx rohovky, xx x experimentu xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Ačkoliv se xxxxxxxxx xxxxx druhy xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xx dávat xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxx xx jediném xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxx xxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx postupu, xxxx xxxxx xxxxx testování xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyžadovat xxxxxxx xxxxxxx zvířat.
1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx
Při testování xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,1 xx. X xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxx xxxxx 0,1 xx xxxx hmotnost xxx 0,1 g (xxxxxxxx je xxxx xxxxx xxxxx). Xxxxx-xx xx o xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx rozemlít na xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
U látek xxxxxxxxxx xx sprejích x pumpou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx x xxxxxx 0,1 xx látky x xxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxx popisu xxx kapaliny.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx 21 dnů po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx spojivkového vaku xxxxxxx xxx tak, xx xx xxxxxx xxxxx lehce odchlípne xx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xx 1 xxxxxxx xxxxx k xxxx xxxxxxx, aby xx žádná xxxxx xxxxxxxxxx. Druhé xxx, xx xxxxx se xxxxx neaplikuje, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx předpokládá, že xxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxxx, xx následkem xxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx změnám v xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx zvolit xxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx oko.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx vymývat xxxxxxxx 24 xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx oči xxxxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxx za xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxx, které při xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx podráždění, je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxx xxxxxx 3 králíky. Půl xxxxxx po instilaci xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Oči xx xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Neprojevují-li xx po 72 xxxxxxxx žádné příznaky xxxxxx lézí, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx jiné xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x jejich vratnost xx xxxxxxxxxx. Vedle xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx a spojivce xx třeba zaznamenat x xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx.
Intenzitu xxxxxx xxx xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx oka xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx interpretace. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx laboratoře x xx, xxx provádějí xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx podráždění xxx.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx použitím xxxxxxxxxxx xxxx, ruční xxxxxxxxxx lampy, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx pozorování po 24 xxxxxxxx xx xxxxx oči některých xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx stupeň podráždění x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x zvířatech (xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),
- v xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)
- popis xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, charakteru x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx body (1, 24, 48 x 72 xxx.), xxxx. xxxxxxxxxx lampa, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx.,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mimoočních místních xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Stupnice xxxx xx xxx
Hodnota | |
A. Xxxxxxxx - xxxx | |
Xxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Slabý xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx | 1 |
Výrazný xxxx x everzí víčka | 2 |
Edém způsobující xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx | 3 |
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx více xxx xx polovinu xxxx xxxxx | 4 |
X. Spojivka - xxxxxx | |
Slzení xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxxxx (xxxxx odlišit xx xxxxx sekrece xx vnitřním koutku) | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxx v blízkosti xxx | 2 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x srsti x xxxxxxx okolí oka | 3 |
X. Xxxxxxxx - enantém | |
Cévní xxxxxx normální | 0 |
Xxxxxxxxxxx cév zřetelně xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxx cévní xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx červená xxxxx | 2 |
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx barva | 3 |
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx | |
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxx rohovky (xxxxx xxxx xxxx těchto xxxxxxxxxxxxxx), reakce na xxxxxx xx zachovaná, xxxxxxxx opožděná | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, rozsáhlé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx | 2 |
x xxxxxxx (xxxxx nebo více xxxxxx charakteristik) | |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Neprůhlednost xxxx přítomná | 0 |
Xxxxxxxxxxx oblast je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx viditelné | 1 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxx xxxxxxxx | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx opalescence, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx viditelné; xxxxx xxxxxxx stěží viditelný | 3 |
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, duhovka xx xxxxx neviditelná | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Neprůhlednost xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xx ≤ 1/4 plochy xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; plocha neprůhlednosti ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; plocha xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 plochy xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx > 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOI) pro xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vypočte xxxxx xxxxxx
IOI = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.E.F
Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOP) xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vypočte xxx xxxxx xxxxxxxx hodnocení xxxx průměr z XXX.
Xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx IOA xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx v xxxxxxx testu
4.3 Klasifikace
Xxxxxxxxxxx | IOA |
xxxxxxxx | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx xxxxxx | 30 - 59,9 |
velmi xxxxx dráždí | 60 - 79,9 |
extrémně xxxxxx | 80 – 110 |
X.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. METODA
1.1. Úvod
Xxxxxxxx:
Citlivost x xxxxxxxx schopnost xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx metoda, která xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx senzibilizačním xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
Xxxxx na xxxxxxxxx xxx rozdělit xx xxxxx s xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX), x xx testy xxx xxxxxxxx.
Xxxxx s xxxxxxxx xx zdají xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx Xxxxxxxxx kompletního xxxxxxxx, x xxxxx xx jim dává xxxxxxxx.
Maximizační xxxx xx xxxxxxxxx (Guinea-pig Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) xx velmi xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Ačkoliv x xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dalších xxxxx, xx XXXX xxxxxxxxx za preferovanou xxxxxxxx x xxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx bez adjuvans (xxxxxxxx xx xxxx Xxxxxxxxxx testu) považovány xx méně xxxxxxx.
X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx volbu Xxxxxxxxxx testu s xxxxxxxxxx xxxxxxxx spíše xxx intradermální injekci xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx na morčatech. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxx odborné xxxxxx.
X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx (GPMT) x Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx validizované x xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx provedený xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, je možno xxxxxxxxxx látku xxxxxxx xxxx potenciální xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx výsledku je xxxx nutné xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxx x této xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxx reakce xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx (xxxxxxx puchýři) xxxx kombinací těchto xxxxxxxx. U jiných xxxxxxxxxxx druhů xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované látce xx xxxxxxx navodit xxxx přecitlivělosti.
Indukční xxxxxx: období xxxxxxx xxxxxxx týdne xx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx kterého se xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx, zda subjekt xxxxxx reakcí xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Citlivost x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx metody xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x kterých xx xxxxx, že xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nejméně 30 % x metody x xxxxxxxx x xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx dává xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Číslo XXX | Xxxxx XXXXXX | xxxxxxxx xxxxx | generický/obchodní xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | alfa-hexylcinnamaldehyd |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-merkaptobenzothiazol | kaptax |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxx odborném xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Pokusná xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (indukční xxxxxxxx). Po xxxxxx 10 xx 14 xxx (indukční xxxxxx), x xxxxxxx kterého xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx reakce, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxx reakce xx xxxxxxxxxx expozici x testovaných zvířat xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x stupněm xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxx xxxxxxx expozici x xxxx indukce x xx xxx aplikována xxxxxxxxxx dávka.
1.5 Popis xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx je xxxxxxxxxx xx nezbytné xxxxxxxxx testovanou látku, xxxxxxx se xx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.1 Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxxx (XXXX)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Zdravá mladá xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 xxx před zahájením xxxxx. Xxxx testem xx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx stříháním, holením xxxx chemickou xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx se xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Experimentální xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx samce x xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx být březí. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxx 5 xxxxxx xx třeba x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx xxxxx než 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx morčat a xxxx xxxxx dojít x závěru, že xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxxxxxxx, doporučuje xx xxxxxxxxx na dalších xxxxxxxxx, aby se xxxxxxx celkového xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 kontrolních xxxxxx.
1.5.1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx expozici se xxxxxx na takovou xxxxxx, kterou xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x která xx xxxxxxxx působící xxxxx xx střední podráždění xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx maximální xxxxxxxxxxx, xxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolá xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx vhodné koncentrace xxxxxxxx x předběžném xxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxx tento účel xxx uvážit použití xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.1.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Následující 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx podají xx lopatkové oblasti xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (FCA) xxxxxxx s xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x objemovém xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx zvolené xxxxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx látka ve xxxxxxx xxxxxxxxxxx připravená xx směsi XXX x xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx roztokem x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Pro xxxxxxx 3 xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx rozpustí před xxxxxxxx x XXX xx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx x nezředěném FCA. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 3 xx xxx xxxxxx jako xxx xxxxxxx 2.
Xxxxxxx 1 x 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx 3 směrem xx kaudální xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx x testovaných xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx kompletní xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: neředěné xxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v poměru 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx
Přibližně xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx indukční aplikací, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxx, xx na testovací xxxxxx po důkladném xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 xx 10% laurylsulfátu sodného xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Testovanou xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), xxxxx xx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 hodin. Xxxxx vehikula se xxxx odbornými xxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx; kapaliny xxx xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. xxx - Kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxx plocha se xxxxx zbaví xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x zafixuje xxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 48 xxxxx.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. den - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx
Boky exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx srsti. Xx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx nebo x xxxxxxx x xx xxxxx xxx xx xxxxxxx způsobem aplikuje xxxxx xxxxxxxxx (pokud xx xx třeba). Xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx obvazu xxxxxxx x kontaktu s xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Pozorování a xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx odstranění náplasti xx provokační xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx potřeby xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx provokační xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x zaznamenává xx podle xxxxxxxx xxxxxxx v dodatku;
- xxxxxxxxx 24 xxxxx po xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx reakce xxxx (72 xxxxx).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, které zvíře xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx je k xxxxxxxxx výsledků nutná xxxxx xxxxxxxxx (tj. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx také xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x provokačních xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít dalších xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx xxx.
1.5.2 Buehlerův xxxx
1.5.2.1 Příprava
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx 5 dnů xxxx xxxxxxxxx testu. Xxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Odstranění xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.5.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Lze xxxxxx samce x/xxxx xxxxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx skupině.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx xxxxxx indukční xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx je nejvyšší xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx silné xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění xxxx. V xxxxxxx xxxxxxx je možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx pokusu xx dvou nebo xxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxx xxxxxx vodu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 80% roztok xxxxxx/xxxx xxx indukci x xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Xxxxxxx
Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Jeden xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Systém xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx překrývacím plátkem xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem xx xxxx 6 hodin.
Xxxxxx xxxxxxxxxx testu xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx je bavlněný xxxxxxxxx, ať xx xxxxxxx xxxx čtverhranný, x xxxxxxx přibližně 4 - 6 xx2. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx, mohou xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx je zbaven xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Xx testovací xxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx, a to xxxxxxxx xxxxxxxx jako x xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx po xxxx 6 hodin. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupina není xxxxx, lze xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx aplikace.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx
Xxxxxx aplikace jako x xxx 0 xx xxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx případně srsti) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. xxx - Testovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxx testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Okluzivní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx část neošetřeného xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxx část neošetřeného xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxx plátek x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plátky xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx vhodným xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x hodnocení
- xxxxxxxxx 21 hodin xx odstranění plátku xx xxxxxxxxxx plocha xxxxx srsti;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx 30 hodin xx xxxxxxxx provokačního xxxxxx) xx pozorují kožní xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x dodatku;
- xxxxxxxxx xx dalších 24 xxxxxxxx (tj. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zaznamenávají.
Xxxxxxxxxx xx systém "slepého xxxxxx" u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx výsledků xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx přibližně x xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx znovu x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.
Xxxxxxx xxxxx reakce x xxxxxxxxx nálezy, včetně xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx xxx.
2. SBĚR X XXXXXX ÚDAJŮ (XXXX X XXXXXXXXX TEST)
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx musí xxx xxx každé pokusné xxxxx patrná xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xxx xxxxxxxx před xxxxxxxxx testu xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx jeho xxxxxx (xxxx. LLNA - xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, MEST - xxxx ztluštění ucha x xxxx) xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (XXXX x Xxxxxxxxx xxxx)
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.;
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxx přípravy xxxxx pro plátkový xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx plátkového xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx studie se xxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx test;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxx x odstranění xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx x celková xxxxxxxx testované xxxxx x vehikula, použitá xxx xxxxxxx a xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx výsledků xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx použité referenční xxxxx, její xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- slovní xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxx
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx OECD XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Magnussona/Kligmana xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx reakcí
0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kůže;
2 = xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;
3 = xxxxxxxxxx zarudnutí a xxxxxxx xxxx.
5.2 Klasifikace xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Podle xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x rámci xxxxxx xxxx danou xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx
xxxxx xxxxxxx (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. st.) - 9 - 28 % xxxxxx
xxxxxxx xxxxx alergen (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx
xxxxxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 81 - 100 % zvířat
X.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx se podává xxxxx po 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, x to xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx pozorují, xxx se zjistily xxxxxxxx toxicity. Pitva xx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx, která xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx během xxxxxx; xxxx zvířata, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Klece xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Každé xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx lze xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx nebo x xxxxx xxxx, xxxxx účelu xxxxxx x fyzikálně-chemických vlastností xxxxx.
Pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) a xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx musí být xxxxx jejich xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; pokud xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx. Je nezbytné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Dává se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx možno použít x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx mladých zdravých xxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx a x xxxxxx případě xxxxx, xxx zvířata xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x obou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx stejného xxxxx a xx xxxxxxxx zdroje.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx použije nejméně 10 zvířat (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx nutno xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx po podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx zpožděný výskyt xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Volba xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace testované xxxxx se xx xxxxxxx v kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x to xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxx dostupných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx účinek xxx denní dávce 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx-xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx dávek.
Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx vzít x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx z toxikologických x toxikokinetických xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx příbuzných.
Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx vyberou xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx dávce. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx by xxxxxx vyvolat žádné xxxxxxxx xxxxxxxx (NOAEL). Xxxxxxx xx xxxxxx xxxx- xx xxxxxxxxxxx xxxxxx mezi sousedními xxxxxxx; pokud xx xxxxx pokrýt větší xxxxxx dávek, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx mezi xxxxxxx (xxxx. xxxxxx větší xxx 10).
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xx xxxxxxxx zajistit, xxx podávané množství xxxxx neovlivňovalo xxxxxx x vodní rovnováhu. Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx x potravě, xxxx xx použít xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x ppm) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx tak xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx x dávkování xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Pokud xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx pokus xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxx studiích xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxxx-xx test xxxxxxxxx zde popisovaným xxxxxxxx xxxxx toxické xxxxxx při xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxx, která xxxx dávce xxxxxxxx, x pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx od provedení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxxx. Toto pravidlo xxxxxxxxx xxxxx platí, xxxxx xxxxx o xxxxxxxx lidí nenaznačují, xx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx pozorování xx 28 dní. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx dalších 14 xxx xxx xxxxxxxx x cílem xxxxxxxx případné xxxxxxxx xxxxxx x pro xxxxxxxxx přetrvávání xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířatům xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 dní x xxxxx po xxxx 28 xxx, xx xxxxxxxxxxxx případech 5 xxx x xxxxx. Denní xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx tekutiny, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx zvířete. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx lze xxxxx x 2 xx xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx byl xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx úrovních dávky. Xxxxxxx xx u xxxxx dráždivých x xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx obvykle xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx klinické xxxxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx x x xxxxxxxx xxxx očekávaného xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Zaznamenává xx xxxxxxxxx xxxx zvířat. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx zjištění xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx způsobem x xxxxxxx.
Xxxxxxxx klinické xxxxxxxxx všech xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx aplikací (za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx týdně. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx klec x xxxxxxxxxxx pozorovacím xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se pečlivě xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx pozorování měnily xx xxxxxxx; osoba, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování xxxxxxxx změny kůže, xxxxx, xxx a xxxxxxx, přítomnost xxxxxxx x xxxxxxx, změny xxxxxxx x vegetativních xxxxxx (slzení, zježení xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxx další. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxx xxxxxx na manipulaci, xxxxxxxxxx klonických x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x chování (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) xxxx bizarních xxxxxx chování (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxx týdnu xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx úvod, část X).
Pozorování xxxxxxxxx xxxxxx ve čtvrtém xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx vynechat, xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx následující xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90denní); x xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx studie. Xxxxx x x xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx čtvrtém týdnu 28xxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx xx xxx posuzování funkčního xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx a xxxx
Zvířata xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx se xxxx nejméně xxxxxx xxxxx, také v xxxxxxx aplikace v xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, koncentrace xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů, xxxxx xxxxxxxxxx x změření xxxxxxxxxxx krve.
Xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx utracení zvířete, xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxických xxxxxx xx xxxxx, zvláště xx xxxxx a xxxxxxx, xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Doporučuje xx xxxxxx zvířata xxx xxxxxxx přes noc xxxxxxx xxxx1). Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, močoviny, kreatininu, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx indikujících xxxxxx xx jaterní xxxxx (xxxx alaninaminotransferáza, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx fosfatáza, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx) x žlučových xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx poskytnout xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x vyšetření xxxx xxxxx posledního xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xX, xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx xxxx. xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nespecifických xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx.
Další xxxxxxxxxxxxxxx je třeba xxxxxxxx u látek xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx funkce: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx lačno, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx hormonů, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx určitých xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx od xxxxxxx.
Xxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxx, brát x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx druh x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dané látky.
Xxxxx nejsou k xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před začátkem xxxxxx.
1) Xxxxxxxxx xx xxxxx je xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxx x plazmě, zvláště xxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxx xx xx, xx u xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx vyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx mohla maskovat xxxxx změny x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx noc xx xxxxx xxx xxxx xx celkový xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx x potravě xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provést xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx xxxxx.
1.2.3.5 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx pečlivé xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech otvorů, xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, varlata, xxxxxxxxxx, brzlík, slezina, xxxxx x xxxxx xxxxx zvířat xx xxxxx očistí xx xxxxxxxx tkání a xx xxxxxxxx po xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx tkáně xx třeba přechovávat xx vhodném médiu x xxxxxxx na xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickými xxxxxxx, xxxxx (reprezentativní xxxxxxx xxxxxx hemisfér, xxxxxxx x mostu), míchu, xxxxxxx, tenké i xxxxxx střevo (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (konzervované xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxx ponořením), gonády x xxxxxxxx pohlavní xxxxxx (např. dělohu, xxxxxxxx), močový xxxxxx, xxxxxxxxxx uzliny (přednostně xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), periferní xxxx (n. xxxxxxxxxxx xxxx n. xxxxxxxx), xxxxxxx x blízkosti xxxxx, xxx kostní xxxxx (nebo xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i další xxxxx. Každý xxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx orgánem xxx působení xxxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X všech xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x tkání. Xxxxx xx v xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xx nutno xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxx i u xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx vyšetřit.
U xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx xx orgány x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx otravy u xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXX X ZÁZNAM XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x každém xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxx údaje sumarizovány xx xxxxxxxxx formy, xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx úmrtí jednotlivých xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx každého xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx x procento xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx v xxxxxxx formě xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou x uznávanou statistickou xxxxxxx. Statistickou metodu xx xxxxx zvolit xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, stáří a xxxxxxx zvířat;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxx v týdenních xxxxxxxxxxx a xx xxxxx testu.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, xxxxx xx jiné xxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx dávek;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxx látky xxx xxxxxxxx, případně x xxxxxxxx diety, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx nebo xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx xxxxx v xx xx xx xxxxxxx hmotnosti (xxxxx xxx x aplikaci x xxxxx xxxx xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx x potravě x xxxxxxx xxxx (xxxxxx druhu a xxxxxx);
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx;
- údaje x toxických xxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx příznaků xxxxxxxx;
- povaha, závažnost x trvání xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxx xxxx vratné xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx;
- výsledky xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření s xxxxxxxxxxx normami;
- xxxxxxx hmotnost xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx;
- pitevní xxxxxx;
- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx:
4. LITERATURA
Tato xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx OECD TG 407.
X.8. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX (28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látce: xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx par, bod xxxx, bod xxxx, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx, v xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, každá xxxxxxx jedné koncentraci, x xx xx 28 dní. Použije-li xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x atmosféře xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zjišťují xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx v xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.3.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xxxxxxx xx xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx exponovat xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx x během xxxxxxxxxxxxx 14 dnů xxxxxxxx vratnost, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx x různou xxxxxx xxxxxxxxxxx a jedna xxxxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxx skupina x xxxxxxxxx - xxxxx xx užije - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx počtu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx toxický xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx by počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx expozice
Xxxxxx xxxxxxxx xx být 6 xxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxx xxx expozice.
1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xx zvířaty xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zaručuje xxxxxxxx vzduchu x xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx hodinu, aby xxx zaručen xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x expoziční atmosféře. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx konstruovat xxx, xxx xx zamezilo xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx x zásadě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Xx možné xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx způsoby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Pokusná xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx období expozice x zotavení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, ve kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx látce denně, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx bez aplikace, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx během experimentu xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx není xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx uvnitř xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx sloupce) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx okolí. Xxxxx expozice se xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rychlost xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx stejné. Xxxxxx xxxx zaručovat, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Měření xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx studované xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxx expozice xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx xx střední xxxxxxx o xxxx xxx ± 15 %. U xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx rozsah xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx koncentrace tak xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx možné. Xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx.
c) Xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx xx pozorování provádějí x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx individuální protokol. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx ztrátám xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx zařazení.
Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, s výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx či trpící xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xx u xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zahrnovat alespoň xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx analýza xxxx: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jeden x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx jako glutamátoxalacetát-transamináza), xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x séru.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, fosforu, xxxxxxxx, xxxxxx, draslíku, xxxxxxx xx lačno, lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, játra, ledviny, xxxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx x xxxxx, x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx změnami xxxx xxxxxxx velikosti) je xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx na pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx poškození, xxxxxx x fixovat vhodným xxxxxx, tak xxx xx xxxxxxxxx struktura.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx skupiny, xxxxx byla podána xxxxxxxx koncentrace, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x orgánech a xxxxxxx xx skupině x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx x x všech xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X zvířat xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx do xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx formami xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxx.,
- podmínky xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx v xxxx, xxxxx xx používán. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxx: a) xxxxxxxx průtoku vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx; x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx vzduchu); x) povaha vehikula, xxxxx xxxx xxxxx; x) skutečná xxxxxxxxxxx x dýchací zóně; x) hmotnostní xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx směrodatná xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx koncentrací,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o přežití xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo jiných xxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx na kůži xxxxx xx 28 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx skupině xxxxx úroveň dávky. Xxxxx xxxxxx podávání xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx budou během xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx mladá xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx srst xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx xxxxx, xxxx xx se xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx holení xxxxx je xxxxx xxxx xx to, xxx se nepoškodila xxxx (xxxx. abrazí). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx vzít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx rozhodování x xxxxxxxxx připravované xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Při xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit vodou, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx možno používat xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx i xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx použití však xxxx xxx odůvodněné. Xx začátku studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 samic a 5 xxxxx) se xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx studie, xx nutno xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx možno xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx následujících 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx skupiny 10 xxxxxxxxxxx zvířat (5 xxxxxx každého xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je třeba xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx a xxxxx kontrolní xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx skupinu x aplikací xxxxxxxx. Xxxx expozice xx xxx xxxxxxx 6 hodin xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx mělo xxxxxxxx každý xxx xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx týdenních xxxx čtrnáctidenních xx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx má xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx jen x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx tuto xxxxxxx překračovat. Ideálně xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx být vmezeřené xxxxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxx s nízkou x střední xxxxxx x v kontrolní xxxxxxx by počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx testované xxxxx x těžkému xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxx koncentraci, xxx u xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Došlo-li x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx dokonce xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx jej xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx toxické xxxxxx, xxxx další xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x dobu, xxx xx objeví x xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx otravy.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx x xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 dnů. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx xxxx určena xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx chovat xx xxxxxxx 14 xxx bez xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx reparace xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xxxx nejméně 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % povrchu xxxx; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx co největší xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx vrstvě.
Xxxxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxxxx dobu 24 xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx xxxxxx porézního xxxxxxxx xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu xx dále třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx příjmu. K xxxxxxxx xxxxxx látky xx možno xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx immobilizaci xxxx xxxxx doporučit. Xxxx xxxxxxxxxxxx metody xx xxxxx xxxxxx "ochranného xxxxx".
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx nebo x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx denně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx, stupně a xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx x xxxx dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx i xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, aby xxxxx možno nedocházelo xx ztrátám zvířat, xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx satelitních xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
Xx xxxxx pokusu se x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx má xxxxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx xxxxxx jater x ledvin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx xxxxx xxxx glutamátpyruvát-transamináza), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (dříve známá xxxx glutamát-oxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx.
Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva. Aspoň xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x varlata xx co xxxxxxxx xx xxxxx zváží xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxx, xxxx. normální x exponovaná xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x všechny xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx lézemi xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, je xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx těchto tkání x x xxxxx xxxxxx x nižšími xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx orgány x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu a xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, podmínkách xxxxx, krmení atd.),
- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxx bez xxxxxx, xxxxx ji xxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx do xxxxx sledovaní,
- xxxxxxx nebo jiné xxxxxx,
- xxxx, xxx byly pozorovány xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx další xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.10. XXXXXXXXXX - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD XX 473, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Účelem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, jež x xxxxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxxxxx strukturální chromozómové xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Vznik xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx metoda xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x tomuto účelu xxxxxxxxx. Chromozómové mutace x příbuzné xxxx xxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx x onkogenech a xxxxxxxxxxxxxxxxxx genech somatických xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
Xxxxx xxxx se používá x xxxxxxxx možných xxxxxxx mutagenů x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxx xxxxx, které xxxx x xxxxx testu xxxxxxxxx, je xxxx xxx xxxxx karcinogenní, xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace xxxxxx xx xxxxx xxxxx x existuje xxxxx xxxx xxxxxxx o xxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nezjistí, xxxxxxx zřejmě působí xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx XXX.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, buněčných xxxxx xxxx primární buněčné xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x kultuře, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx chromozómů, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx.
Testy xx xxxxx xxxxxxxx obecně xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxx systém xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxx. Je třeba xx xxxxxxxxx podmínek, xxxxx xx mohly xxxx x pozitivním xxxxxxxx, xxx neodrážejí xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, které xx xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx vzniklá mezera xx xxxxxxxxx chromatidy xx xxxxx, xxx xx xxxxx poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx kratší x xxxxxxxx delece.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx jádro xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx další S-fáze. Xxxxxxxxx xxxx chromozómy x 4, 8, 16, .. chromatidami.
Xxx: xxxxxxxxxxxx léze xxxxx než xxxxx xxxxx chromatidy x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx index: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (n) jiný xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3n, 4n xxx.).
Strukturální xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Buněčné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx testované látky, x xx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, se xxxxxxxx zastaví například Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx x v metafázických xxxxxxx se mikroskopicky xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx celou řadu xxxxxxxxx linií, xxxxx xxxx primárních xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx buněk xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx křečka xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx a kultivační xxxxxxxx
K udržování xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x inkubační xxxxxxxx (kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxx a xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x buňkách. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxxxxx. Xx třeba xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxx: xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx vysetím do xxxxxxxxxxxx média v xxxxxx hustotě, aby xxxxxxx xxxxxxxxx konfluentní xxxxxx před xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 oC.
Lymfocyty: xx xxxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxxx mitogen (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxx xxx xxxx krev x xxxxxxx antikoagulantem (xxxx. xxxxxxxxx), nebo xxxxxxxxxx lymfocyty získané xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx i v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx kofaktory xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (S9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx činidly xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx na tom, xxxxxx typu xx xxxxxxxxx látka. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx použity i xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx stavu, xxxxx se xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx naředí. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx stabilitě prokazují, xx xxxxx skladování xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX XXXXX
1.6 ROZPOUŠTĚDLO
X zvoleného xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat, x xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx x aktivitu X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxxx xxx, xxx xx to xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxxxx, musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Xxxx xx dá odstranit xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.6.1 Koncentrace
Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x xxxxxxx a xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx indikace xxxxxxx integrity x xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxx, xxxx mitotický xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx toxicity. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lišit xxxx xxx násobkem, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. X době sklízení xxxxx musí xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (vždy x xxxx než 50%). Xxxxxxxxx index xx xxxxx nepřímou mírou xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx a je xxxxxxx na době xxxxxxxx xx expozici xxxxxxxxxx látkou. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx obtížná x xxxxxxxxxxx. Jako xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít také xxxxx x kinetice xxxxxxxxx dělení, jako xx průměrný generační xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx zpožděných xxxxxxxxxxx xxxxx. X tak x malé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx od vhodné xxxx sklízení x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx z xxxxxx 5 µl/ml, 5 xx/xx xxxx 0,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxxx x koncentracích xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx které se xxx xxxxx nerozpouští, xx být xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx kultivace x xxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx x xxxxxxxxx účinku při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx srážením. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx x na konci xxxxxxxx, protože se xxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxxxx změnit v xxxxxxxxxx xxxxxxx vlivem xxxxxxxxxxx buněk, xxxx, X9 xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx zjistit x xxxxxxx okem. Xxxxxxxxx xxxxx být xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.6.2 Xxxxxxxxx x pozitivní kontroly
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx již x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx ní, xx xxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx). Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx pozitivní xxxxxxxx xx používá xxxxx xxxxxxxxx, x to xxx xxxxxxxxxxx úrovních, xxx se očekává, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx nárůst xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testovacího xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx tak, xxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx neodhaloval xxxxxxxxxxx přímo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx například:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx | XXX | EINECS |
Xx | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Xxx | xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Pro pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx i jiné xxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx to xxxxx, je xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látku ze xxxxxx xxxxxxxx skupiny.
Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxx kontrolu, xx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, zpracované xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx zařadit xxxxxxxx xxx jakéhokoliv xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Expozice testovanou xxxxxx
Na xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx 48 hodin xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx kultury; x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx lze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx mezi duplicitními xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx (13) (14), je xxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx jenom jedna xxxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kultivačních xxxxx (15).
1.6.3.2 Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx ní po xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx odebírají x čase xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxx expozice (12). Xxxxx xxxx xxx použití aktivačního xxxxxxx x bez xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se další xxxxxxxxxx xxx aktivace, x kontinuální expozicí xx do xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normálního xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx xxxxx xx hodnotí xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx s metabolickou xxxxxxxx se posuzují xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx negativních xxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Příprava xxxxxxxxxx
Xx buněčné xxxxxxx xx působí Xxxxxxxxxx® xxxx kolchicinem obvykle xx dobu 1 - 2 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvlášť. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx roztokem, xxxxxx x odbarvení.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Xxxxxxx preparáty, xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxxxxxx postupy xxxxx xxxxx k rozbití xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x ztrátě xxxxxxxxxx, xxxx být x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx koncentraci a xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx minimálně 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx je počet xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxx analyzovaných xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace, je xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxx experimentální xxxxxxxxx xx buňka, xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými aberacemi. Xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy strukturálních xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx a četnosti x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kultur. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx četnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Současně xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kulturách.
Xxxxxxx se data xxx jednotlivé kultury. Xxxxxxx xx všechna xxxx uvedou x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx pozitivních xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx testováním, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v odst. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx použitých xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. K xxxxxxxxxx, xxxxx lze xxxxxxxxxxx, patří koncentrační xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx. Nejprve je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx metody (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx polyploidních xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx procesy x xxxxxxxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx x endoreduplikovanými xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx (17) (18).
Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, xx x tomto xxxxxxx považuje za xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx data xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx posouzení xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx opakovaných xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
ZPRÁVA X XXXXXXX XXXXXX
Xx zprávě x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx x vhodnost xxxxxx xxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx lymfocyty, použitý xxxxxxx,
- počet xxxxxx xxxxx, xx-xx xx xxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxx, je-li xx xxxxx
- modální xxxxx chromozomů.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx koncentrace x xxxx působení xx xxxxx
- zdůvodnění xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x cytotoxicitě a xxxxxx rozpustnosti, jsou-li x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xx-xx xx xxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx vehikula x xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx buněk xx xxxxxxx kultivace, xx-xx xx xxxxx
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx podložních xxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxxx aberací,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- metoda xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxxx xxxxxxxxxx, údaje x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx index,
- xxxxxx srážení,
- xxxxx x xX x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx stanoveny,
- xxxxxxxx aberací, xxxxxx xxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxxxxx aberací xxx každou experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ploidie,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, včetně rozpětí, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.11. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX V XXXXXX XXXXX XXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD TG 475, Mammalian Xxxx Xxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx analýzy chromozómových xxxxxxx x xxxxx xx vivo xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v buňkách xxxxxx dřeně zvířat, xxxxxxx hlodavců (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx dvojího druhu: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy jsou xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx přesvědčivé xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy, xxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, hrají úlohu xxx xxxxxxxx u xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxx testu xx xxxxx využívají hlodavci. Xxxxxxx tkání x xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xxxxx x tkáň xxxxxx vaskularizovanou, obsahující xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, jež xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx živočišné xxxxx x xxxxxx xxxxx xx x xxxxx xxxxx nepoužívají.
Xxxxx xxxx na chromozómové xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx při hodnocení xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxx faktory xxxxxxxxxxx xx vivo, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x když xxx xxxxx xxx xxxx živočišnými xxxxx x mezi tkáněmi xxxxxxx. Xxxx in xxxx je také xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx efektu, xxxxx byl xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxx reaktivní xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxx použití tohoto xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatidami.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx spojení xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx aberace typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx)
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx zlom lze xxxxxxxx porušení kontinuity xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx vzniklá xxxxxx xx struktuře chromatidy xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx zlomu je xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx delece.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx replikace XXX nepřechází xxxxx xx mitózy, xxxxx xxxxxx další X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx chromozómy x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx léze xxxxx než xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Mitotický xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx hapoidního počtu xxxxxxxxxx (n) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4n atd.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxx xxxx xx působení xx xxxxxx. Před xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx xxxxxx zastavující xxxxxxxx (xxxxxxxxx kolchicinem xxxx Xxxxxxxxxx®). X xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x čínští křečci, xxx xxxxx xxxxxx x jakýkoliv xxxx xxxxxx xxxxx druh. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx B, xxxxxxx xx měla být 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx mladí xxxxxxx xxxxxxx se náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx. Zvířata xx xxxxx jednoznačně xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx zvířata aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx, xxxx podáním xxxxxxxx xx rozpustí nebo xx připraví xxxx xxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx x případně se xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xx příliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx použití podpořeno xxxxx o kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx je to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx každé xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx stejně.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx strukturální xxxxxxx xx xxxx při xxxxxxx, kdy lze xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx. Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx patrné, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní kontrolu xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx než xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx intervalu. Xxx je xx xxxxx, xx třeba xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx kontrolu:
Xxxxx | XXX | EINECS |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxxx intervalů xxxxxxxxxx, xxxxx nejsou x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací x o xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxxxxxx kontrol, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx každého xxxxxxx. Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx údaje x xxxxxxx živočišném xxxxx x použití xxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxxxx, xx mezi xxxxx pohlavími xxxxxx x xxxxxxxx podstatné xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx závislá na xxxxxxx, xxx je xxxx například x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx zvířatech odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jednorázově. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx dávku, xxxx se k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx dávky xx xxx xxxxxx x xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx musejí být xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Vzorky xx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx časových xxxxxxxxxxx xx podání xxxxx xxx. X xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normální délky xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxx 12 - 18 xxxxx) xx podání xxxxx. Xxxxxxx doba xxxxxxxx xxx absorpci x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxx xx kinetiku buněčného xxxxx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx po 24 xxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx za xxx, xx třeba provést xxxxx odběr vzorků 1,5xxxxxxxx xxxxx normálního xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Colcemidu® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx se z xxxx ve vhodném xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky. X xxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3 - 5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4 - 5 xxxxx. X xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x zjišťují xx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx provádět x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx druhu, xxxxx, xxxxxxx x pokusného xxxxxx, jaké xx xxxxxxx v hlavní xxxxxx (5). Při xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru vzorků xx xxx třeba xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx takové xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx představovat x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, jež xx xxxxxxxxxxx individuálně xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx známkám xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (např. pokles xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx dávce xxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x jestliže xx xx základě údajů x xxxxxxx x xxxxxxxx chemickou strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx dávkových xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xx xxx při xxxx trvání xx 14 xxx, x 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx době xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx očekávané xxxxxxx expozice může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxx žaludeční xxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxx přijatelné x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x hmotnosti; xxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež normálně xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky tak, xxx objem byl xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný a xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx buněk se xxxxxx xx podložní xxxx a obarví xx.
1.5.7 Analýza
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx x všech zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx 1000 xxxxx x každého xxxxxxx.
X každého jedince xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx nezávisle zakódují. Xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být počet xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.
2. ÚDAJE
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Údaje od xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx buňku x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx strukturálních chromozómových xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx, xxx obvykle se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx x xxx, že xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Vyhodnocení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx xxxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx x jednorázovou dávkou xxx jednom xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxx vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vyvolávat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx fáze buněčného xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití výsledky xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx chromozómové xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx daných experimentálních xxxxxxxx testovaná látka x kostní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx nevyvolává.
Xx třeba xxxx x úvahu, xxxx xx pravděpodobnost, že xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxx používána, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Pokusná zvířata:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,
- původ, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx a negativní (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx xxxxxx xxx určení xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, xx xx xxxxx dostala xx xxxxxxxxx oběhu nebo xx xxxxxx tkáně,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti/den),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a vody,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx hodnocení xxxxxxxx,
- látka xxxxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x doba xxxxxxxx,
- metody xxxxxxxx mikroskopických preparátů,
- kritéria pro xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk xx jedno xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx index,
- xxx x xxxxx aberací xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, jejich xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- případné změny xxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxx, je-li to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek.
- údaje ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
B.12. XXXXXXXXXX - XX XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX V XXXXXXX ERYTROCYTECH
1. METODA
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Mammalian Xxxxxxxxxxx Micronucleus Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Mikronukleus xxxx in xxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx poškození, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x chromozómech xxxx x mitotickém xxxxxxx erytroblastů; test xxxxxxx v tom, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. x xxxxxxxxx krve xxxxxx, xxxxxxx hlodavců.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx látky, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx představujících xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx chromozómů.
Xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jádro xx x xxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx zbude x xxxxxxxxxx xxxxxxx mikrojádro. Xxxxxxxxxxx mikrojádra je xxxxxxxxx tím, že xxxxx buňkám xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx je u xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxx xx xxxxxx dřeň xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v této xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x mikrojádry x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx x každého xxxxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx bylo prokázáno, xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx odstraňovat nebo xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx způsobujících xxxxxxxxxxxx xxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx rozlišovat podle xxxx kritérií, xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (centromery), xxxx xxxxxxxxxxxxx XXX x mikrojádru. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x xxxxxxxxx krvi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxxx xxxxxxx použít x případě, xx xx zvířata xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx týdnů.
Tento xx vivo xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xx zvláště xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx faktory xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x procesů xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx byl xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xx vitro.
Existují-li xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx nebo její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx během dělení xxxx vlákna xxxxxxxx xxxxxxxx umožňující xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x pólům xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx xxxxx oddělená xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxx reprezentovaná opožďujícími xx fragmenty xxxxxxxxxx xxxx celými xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: zralý xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x jenž xx xx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx erytrocyt: nezralý xxxxxxxxx, vývojové stadium, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx ribozómy, xxxxx xxx lze xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pomocí barviva xxxxxxxxxxxx xxx ribozómy.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx ve xxxxxxx xxxx xx působení xxxxx usmrtí, xxxxxx xxxx xx xxxxxxx x připraví xx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxx (1-7). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx vhodné době xx xxxxxxxx látky x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, musí xxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx zpracování xxxxx xx xxxxxxxxx. X preparátech se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, doporučují xx jako xxxxxxx xxxxxxx myši xxxx xxxxxxx; xxxx xxxx xxx použit xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Xxx xxxxx xxxxxx jakýkoliv xxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xx x něj xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx xxxx xx x něj byla xxxxxxxxx xxxxxxxxxx citlivost xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx studie xxxx xxx minimální a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Všeobecné xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Všeobecném xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jedinci xx xxxxxxx rozdělí xx kontrolní a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx zvířata aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toho, xxx x xxx jsou xxxxx umístěny.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Je-li xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx x je-li xx xxxxx, xxxxx xx před podáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx připraví její xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxxxx ředí. Xx xxxxx používat xxxxxxx preparáty, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Podmínky xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxxxx kontrol xx xxxx xxx nalezena xxxxxxxxxx in vivo xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad xxxxxxxxx úroveň. Dávky xxx pozitivní kontrole xx volí tak, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx odlišným xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x vzorek odebírat x jednom xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx vhodných xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
X-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx skupiny xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxx x xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Aplikuje-li xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx jeden xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx existují xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxx, může xxx xxxx souběžná xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x vzorek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx pouze x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 xxxxx), kde xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx každého pohlaví (11). Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx prokazující, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, kde humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxx je xxxx například u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx rozvrh (xxxx. xxxxx, dvě xxxx více dávek x 24xxxxxxxxxx intervalech). Xxx xxxxxx delší xxxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xx v xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx tak xxxxxx, xx se xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx až xx xxxx odběru xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, může xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, například xx dvě dávky xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xx může provádět xxxxx xxxxxxx:
(x) Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx působí xxxxxxxxxxx. Xxxxxx kostní xxxxx se odeberou xxxxxxxxx xxxxxxx, poprvé xx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx 48 hodinách xx xxxxxx látky, x xxxxxxxx intervaly xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx vzorky xxxxxxxx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx, musí xxx odůvodněné. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dvakrát, xxxxxx xx dříve xxx po 36 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx po prvním xxxxxx vzorku, xxxxxxx xxxx nikoli xxxx xxx 72 xxxxxx. Xxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pozitivní xxxxxxx, xxxx xxx další xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xx látka xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx za xxx (xxxx. xxx nebo xxxx dávek xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xx vzorky x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 hodinami xx xxxxxxxxx podání xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (12).
Je-li xx xxxxxxxxxx, mohou xx mimoto xxxxxx x další xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx studie ke xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx žádné vhodné xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, pohlaví x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x hlavní studii (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx časový xxxxxxxx odběru xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxxx xxxxx, xxxx nulové. Pro xxxxxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx dávku. Xx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx při xxxxxxx xxxxxxx xx stejném xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx byly xxxxxxx. Xxxxx, xxx v xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx nebo mitogeny, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, která xxxx x určitým xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dřeni (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx resp. xxxxxxxxx krvi).
1.5.4 Limitní xxxx
Jestliže test xxx dávce minimálně 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné toxické xxxxxx x xxxxxxxx xx xx základě xxxxx x látkách x xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx studie za xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx době trvání xx 14 dnů, x 1000 mg/kg xxxxxxxxx xxx době xxxxxx delší xxx 14 dnů. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx vpravuje xxx xxxxxxxxx sondou, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxxxxxx případech xxxxx xxx xxxxxxxxxx i xxxx způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem kapaliny, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a nemá xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při vyšších xxxxxxxxxxxxx xxxxx účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx / xxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx tibie xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx dřeň xxxxx x xxxxxx nebo xxxxx, buňky xx xxxxxxx x obarví xxxxxxxxxx metodami. Xxxxxxxxx xxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (8) (9) (10), xxxx xx xxxxxxx xxxxxx, které se xxxxxxx xxxxxx. Použitím xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro XXX (např. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 s xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx eliminovat xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx barviva, xxxxx xxxx DNA xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, že by xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Lze použít x xxxxx systémy - xxxxxxxxx xxxxxx xx sloupcem xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x jádrem (16) - pokud tyto xxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx mikrojader.
1.5.7 Xxxxxxx
U každého xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). X tomuto xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx minimálně 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol) xx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X každého xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 2000 nezralých erytrocytů x zaznamená se xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů xxxx xxxxx, lze xxxx xxxxx xxxxxxxxxx vyhodnotit x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jedince. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jsou systémy xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx cytometry), xxxxx xxxx zdůvodněny x xxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Údaje z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxx. X xxxxxxx jedince xx xxxxxx zaznamená xxxxx xxxxxxxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxx nezralých xxxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů. Xxxxx xxx test xxxxxxxx kontinuálně xx xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxx, xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx o tom, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx údaje za xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxx sloučit.
2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku se xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx počtu xxxxx x mikrojádry xxxx xxxxxxxx nárůst počtu xxxxx x xxxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxx statistické metody (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxx vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx experimentů sice xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx negativní xxxxxxxx, x ojedinělých případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx mikrojader, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aparátu x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu nevyvolává xxxxx mikrojader x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx specifickou cílovou xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx známa.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, byla-li xxxxxxxxx,
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx dávky,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody x ověření, xx xx xxxxx xxxxxxx xx celkového oběhu xxxx xx cílové xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) na faktickou xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- podrobný xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,
- metody měření xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s mikrojádry,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- podíl xxxxx nezralých erytrocytů x celkovému počtu xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů s xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx počet ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s mikrojádry xxx xxxxxx xxxxxxx,
- vztah xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxx statistické xxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX REVERZNÍCH XXXXXX X XXXXXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Reverse Mutatiton Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx k detekci xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx histidin) a xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx xx vztahu x aminokyselině tryptofan). Xxxxxx xxxxxxxxx systémů xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx vzniklé mechanismem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zpětně xxxxxxx xxxxxx přítomné x xxxxxxxxxx kmenu do xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx aminokyselinu. Xxxxx změněná xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx růst za xxxxxxxxxxxxx aminokyseliny, kterou xxxxxxxx xxxxxxxx zkušební xxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x existují xxxxxxxxxxx doklady xxxx, xx xxxxxx mutace x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x člověka x xxxxxxxxx xxxxxx roli xxx xxxxxx nádorů. Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxx mutace je xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, díky xxxx xxxx citlivější xxx xxxxxxx mutací, xxxxxx xxxxxxxxx sekvencí XXX x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx DNA, xxx jsou xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x typech xxxxxx, jež xxxx xxxxxxxx genotoxickými látkami. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx x dispozici xxxxx xxxxxxxx databáze xxxxxxxx xxx širokou xxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx osvědčené xxxxxx xxx xxxxxxxxx chemikálií x xxxxxxx fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx mutací x xxxxx závislém xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx), xxx xxxxx ke xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx aminokyseliny xxxxxx nezávislý.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx substituci xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x XXX. Xxx xxxxxxxxx testu xxxx x takové změně xxxxx na místě xxxxxxx mutace xxxx xx xxxxx místě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Frameshift xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx odebrání xxxxxxx xxxx více xxxx xxxx x XXX, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxx x XXX.
1.3 XXXXXXX XXXXX
X bakteriálním xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx od savčích xxxxx xxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx opravy XXX. Xxxxx xx vitro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx metabolické aktivace xx xxxxx ovšem xxxxxxxx xxxxxxxx imitovat xxxxx xxxxxxxx in xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x organismech xxxxx.
Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx jako xxxxxxx screenin xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Pomocí rozsáhlé xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx mnohé xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx v xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx mutagenní xxxxxxxx. Existují ovšem x příklady xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx testem xxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxx nedostatku xxxx xxx specifická xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x metabolické xxxxxxxx xxxx rozdíly x biologické xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx citlivost xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx k xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Bakteriální test xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxx třídy xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxxxx některé xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (kupříkladu xxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxx, o nichž xx předpokládá nebo xx, xx specificky xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx některá xxxxxxx xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx u xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx při xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxx, ovšem korelace xxxx xxxxxxxxx; závisí xx xxxxxxxx třídě, x existují karcinogeny, xxxxx tímto testem xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Suspenze bakteriálních xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx přítomnosti x xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx "xxxxx incorporation" xx xxxxxxxx smísí x xxxxxxx agarem x vylije na xxxxx s minimální xxxxxx půdou. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x smísí x xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx xx xxx xx xxx xxx po inkubaci xxxxxxxxxxx kolonie xxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx x počtem xxxxxxxxx revertujících xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x rozpouštědlem.
Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ["plate xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), preinkubační metoda (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx testování xxxxx xxxx xxx (12).
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx týkají hlavně xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx preinkubační. Xxx xxxx xxxxxx xxxx přijatelné xxx xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx preinkubační xxxxxxx; xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxx, kam xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x krátkým řetězcem, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx a nitrosloučeniny (3). Také bylo xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxxx mutagenů, xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xx xx třeba xxxxxxxx jako na "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx jiných xxxxx. Xxxx identifikovány xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx případy" (xxxxx x příklady xxxxxxx, které se xxxx xxx jejich xxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) a xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. XXXXX METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vypěstují xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Kultury v xxxxxxx stacionárním xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Důležité xx, aby xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xxx x historických xxxxx růstových xxxxxx, xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx teplota činí 37xX.
Použije xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx čtyři xxxxx X. typhimurium (TA 1535; XX 1537 xxxx XX97x nebo 1X97; XX98; x XX100); x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx různými xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx X. typhimurium xxxx xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxxx bází GC x xx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx mutageny, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx látky xx xxxx detekovat pomocí xxxxx E. xxxx XX2 nebo X. xxxxxxxxxxx TA102 (19), xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx místě xxx xxxx XX. Xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxx:
- S. xxxxxxxxxxx XX1535 x
- X. typhimurium TA1537 xxxx XX97 nebo XX97x x
- X. xxxxxxxxxxx TA98 x
- X. xxxxxxxxxxx XX100 x
- E. xxxx XX2 xxxX nebo X. xxxx WP2 xxxX (pKM101) xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102.
X detekci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx být nejvhodnější xxxxxx TA102 xxxx xxxxxx XXX reparačně xxxxxxxxxxxx xxxx E. xxxx (xxxx. X. xxxx XX2 xxxx X. coli WP2 (xXX101)).
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zásobní xxxxxxx, xxxxxxx markeru x xxxxxxxxxx. Xxx každý xxxxxxxx preparát xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx nutné xxx xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxxx, tryptofan x xxxxxxx xxxxx E. xxxx). Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: xxxxxxxxxx xx nepřítomnost R-faktor xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx v xxxxx (např. rezistence xxxx xxxxxxxxxx u xxxxx XX98, XX100 x TA97a xxxx XX97, XX2 xxxX (xXX101) x rezistence xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx x xxxxx XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (tj. xxx xxxxxx x X. typhimurium xxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxX xxxxxx x E. xxxx xxxx xxxX xxxxxx u X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx záření) (2) (3). Použité xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx ve frekvenčním xxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx x x xxxxxxx uvedeném x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xx vhodný xxxxxxxxx agar (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx E a xxxxxxxx) x vrchní xxxx obsahující xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx umožňující několik xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxx, xxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx je Aroclor 1254 (1) (2) xxxx kombinace xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x koncentracích xxxx 5 x 30 % x/x xx směsi X9. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxxx záviset xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X některých případech xxxx být xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x několika koncentracích. X azobarviv a xxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx použít redukční xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).
1.5.1.4 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx připraví jejich xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx mohou xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo se xxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stabilitě prokazují, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.5.2 Podmínky xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (viz 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Koncentrace
Xx xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxx xxxxxx stanovit xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx experimentu. Xxxxxxxxxxxx se dá xxxxxxx snížením počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx změnit. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxxxxx x konečné xxxxx za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx maximální pokusná xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx necytotoxických látek 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx koncentracích xxxxxx xxxxxxxxx, by xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx, jež jsou xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx nižších než 5 xx/xxxxx resp. 5 µx/xxxxx, xx xxxxxxx až xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx rušit xxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx pěti různých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. √10) mezi xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx experimentu. Zkoumá-li xx koncentrační xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx vyšších xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx v xxxxx, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx podstatné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutagenních xxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxx, jak s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx ní. Xxx xxxxxxxxx kontrolu se xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx prokazují efektivnost xxxxxx xxxxx.
X xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem xx xxxxxxxxxx látka xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx volí xxxxx použitého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x metabolickou aktivací, xxxxx tabulka:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx kontrolou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Látka | XXX | XXXXXX |
Xxxxx červeň | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-aminoantracen xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx X9. Pokud xx 2-xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba každou xxxxx X9 charakterizovat xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, např. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Příklady xxxxx, xxx jsou xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x testech bez xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx tato xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX | |
Xxxx xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 x XX 100 |
2-xxxxxxxxxxxx | 607-57-8 | 210-138-5 | XX 98 |
9-xxxxxxxxxxxx | 90-45-9 | 201-995-6 | TA 1537, XX 97 a XX 97a |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, TA 97 a XX 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | XX 102 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 | XX xxxX x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, WP2uvrA x XX2xxxX (pKM101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (AF2) | 3688-53-7 | xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx i jiné xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx dostupné, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x chemické xxxxx.
Xx třeba xxxxxx x negativní kontroly xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx při xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xx použijí x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx ovlivnění xxxxxxxxxx xxxxxx ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxx xx mutagenní xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Při xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4) xxx metabolické xxxxxxxx xx obvykle xxxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx buněk) x 0,5 xx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx agaru. X testech x xxxxxxxxxxxx aktivací se xxxxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x rozmezí 5 - 30 % x/x x metabolické xxxxxxxxx směsi) x 2,0 xx vrchního xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx /testovaným xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx zkumavky xx promísí x xxxxxx na xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx agar xx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxx.
Při xxxxxxxxxxxx metodě (2) (3) (5) (6) xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx metabolickým xxxxxxxxxx systémem (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 xxx xxxx déle při 30 - 37 xX; xxxxx se xxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xx misku s xxxxxxxxxx xxxxxx. Obvykle xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx roztoku 0,1 xx xxxxxxxx x 0,5 xx směsi X9 nebo xxxxxxxxxx xxxxx s 2,0 xx vrchního xxxxx. Xxxxxxxx se během xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx adekvátní xxxxx xxxxxxx se pro xxxxxx xxxxx očkují xxx xxxxx. Duplicitní xxxxxxxx xx přijatelné, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx náhodně xx xxxxxx misky, xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Plynné nebo xxxxxx xxxxx se xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx postupů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nádobách (12) (14) (15) (16).
1.5.4 XXXXXXXX
Všechny xxxxx x xxxxx xxxxxx testu se xxxxxxxx xxx teplotě 37 xX pod xxxx 48 - 72 xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx revertantní xxxxxxx na xxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx misku. Xxxxxx xx xxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx kontroly (xxxxxxxxxxxx, popřípadě xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxx), xxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontrolu (resp. xxx působení xxxxxxxxxxxx) xx xxxxxx počty xxx jednotlivé xxxxx x průměrný počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx se objasňují xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od případu. Xxxxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx nutné, xx xxxxx to xxxxxxxxx. X následných experimentech xx xxxxx zvážit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx modifikovat, xxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx ("plate xxxxxxxxxxxxx" xxxx preinkubace x tekutém xxxxxxxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx revertantních xxxxxxx na jednu xxxxx xxx jedné xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem nebo xxx něj (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx biologická relevance xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx statistické xxxxxx (24), xxxxxxxxxxx významnost xx však neměla xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxx pozitivní xxxxxx.
Testovaná látka, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx bakteriálního xxxxx xx reverzní xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx genové xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx nebo posuzovaných xxxxxx v xxxxxx Xxxxxxxxxx typhimurium xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx mutagenní.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx rozpouštědle, pokud xx xxxxx.
Kmeny:
- xxxxxxx xxxxx,
- počet buněk x kultuře,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxx (v xx nebo μx) xx xxxxxxxxxxx volby xxxxx a xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-typ a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Výsledky:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxx srážení,
- počty na xxxxxxxxxxxx miskách,
- xxxxxxxx xxxxx revertantních xxxxxxx xx jednu xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- údaje ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.15. XXXXXX XXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kmeny kvasinek Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx produkce xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx xxx x x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx využívány forward xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx kmenů, jako xx xxxx vzniku xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx vyžadující xxxxxx (xxx-1, xxx-2) xx xxxxxxx, adenin vyžadující xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx canavaninu x xxxxxxxxxxxxx.
Nejlépe xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx haploidního xxxxx XX 185-14 X x okrovými (xxxxx) xxxxxxxx mutacemi xxx 2-1, xxx 4-17, xxx 1-1 x trp 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mutagenů xxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx mutace xx xxxxxxxxxxx místě, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx mutace. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 marker, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxx hom 3-10, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X7, xxxxx xx xxxxxxxxxxx pro ilv 1-92.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Roztoky testovaných xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx vhodného xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % v organických xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Finální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx aktivace
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkám xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx indukujících xxxxxx x doplněná xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx může xxx rovněž xxxxxx xxx metabolickou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14X a xxxxxxxxx kmen D7 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx mutací. Xxxx xxxxx mohou xxx rovněž vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx užívána xxx určení xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x rozpouštědlem xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx zvolených koncentrací. X xxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají být xxxxxxxxx xx xx xxx rozpustnosti látky xx xxxxxxx vhodných xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Misky xxxx xxxxxxxxxx po xxxx xxx při 28 xx 30 oC xx xxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx má xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx nutno xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x testu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx markery jako xxx 3-10 s xxxxxx xxxxxxx rychlostí xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx X. cerevisiae xx xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx stacionární xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 107 xxxxx/xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. při 28 až 30 xX za xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému je xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx potřebné. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx centrifugovány, promyty x xxxxxxxxxx na xxxxxx kultivační médium. Xx inkubaci jsou xxxxxxxx přežívající buňky x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx první xxxxx negativní, xx xxx proveden druhý xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx fázi. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozitivní, xx xxxxxxxx dalším xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x tabulkové xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Údaje xxxx xxx vyhodnoceny vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx kmenech,
- podmínkách xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx aktivační systém,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: hladina expozice, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxxxxxx, pozitivní a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxx, přežívajících buněk x xxxxxxxxx mutací, xxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.16. MITOTICKÁ XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip metody
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. Xxxxx případ xx xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx případ xx xxxxxxxx nereciproční a xx xxxxxxx genová xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx tvorby recesivních xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx vzniklých x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx revertant xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx různé xxxxxxxx xxxxx téhož genu. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx detekci mitotické xxxxxx xxxxxxxx xxxx X4 (heteroalelický v xxx 2 x xxx 5), X7 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 5), XX34 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4) x XX1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x trp 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx produkující xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx může být xxxxxxxxx x X5 xxxx X7 (xxxxx xxxxxx měří xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mutace x xxx 1-92). Xxx xxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx alely xxx 2.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Roztoky xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx mají být xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, jako xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxx významně xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx jak x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx z jater xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x doplněná xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx může xxx xxxxxx xxxxxx xxx metabolickou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx D4, X5, D7 x XX1. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Média
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx média xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Pozitivní, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx specifickou xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx odpovídající pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xx životnost xxxxx. U toxických xxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx testovány xx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx vodě xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxx mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxx stacionární xxxx, nebo xxxxx xxxxx po xxxx xx 18 h. Xxxxxxx dlouhodobě ovlivňované xxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx
Misky jsou xxxxxxxxxx xx xxx xx čtyři xx xxxx xxx při 28 - 30 xX. Xxxxx použité xxx xxxxxx červených x růžových xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx 4 xX) xx xxxxx 1 - 2 dny xxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxx utvořit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kolonie.
1.2.2.6 Spontánní xxxxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx
Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxxx xxxxx tvořených xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V případě xxxxxxxxx recesivní xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx počet xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx S. xxxxxxxxxx xxxxxxx obvykle jako xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxx prostředí x xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx pokusy xxxx xxx provedeny xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 107 buněk/ml xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 h. xxx 28 až 30 xX za xxxxxxx. Odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx potřebné.
Xx skončení xxxxxxxxx xxxx xxxxx centrifugovány, xxxxxxx a vyočkovány xx vhodné xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx inkubaci xxxx počítány přežívající xxxxx x xxxxx x indukcí mitotické xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx pokus xxxxxxxxx, xx být xxxxxxxx xxxxx pokus x xxxxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxx. Jestliže xx xxxxx pokus xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx počet kolonií, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx mají xxx potvrzeny x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o průběhu xxxxxx má pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx fázi xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx a trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: hladina xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx dávky x xxxxxx, pokud xx xx možné, xxxxxxxxxxx hodnocení xxx,
- diskusi výsledků,
- vyhodnocení xxxxxxxx.
X.17. MUTAGENITA - XXXX GENOVÝCH MUTACÍ X XXXXXXX XXXXXXX XX VITRO
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx vhodné xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X5178X, xxxxx CHO, XXX-XX52 x X79 xxxxx čínského křečka x lidské xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx XX6 (1). X těchto xxxxxxxxx xxxxx xx nejčastěji xxxx konečný genetický xxxxx zjišťují xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x v xxxxxxxxxx xanthin-guanin fosforibosyltransferáze (XXXX). Xxxxx xxxxxx x XX, HPRT x XPRT xx xxxxxxxx xxxxx spektra xxxxxxxxxxx změn. Autosomální xxxxxxxxxx XX a XXXX může xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx změny (např. xxxxx delece), xxxxx xx xx lokusu XXXX chromozomů X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
X xxxxx na xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx in xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx stabilizovaných buněčných xxxxx xxxx buněčných xxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx x úvahu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx obecně vyžadují xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxxx systém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx savčí xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx by výsledky xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu. X pozitivním xxxxxxxxx, xxx nejsou důsledkem xxxxxxx mutagenity xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).
Xxxxx test xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx savčích xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx, které jsou x xxxxx testu xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx testem a xxxxxxxxxxxxxx. Tato korelace xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx stále xxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xx tímto testem xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxx: genová xxxxxx xxxxxxxxx typu xxxxxxxx formy, jež xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx substituci páru xxxx: látky způsobující xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx mutageny (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxx x DNA.
Doba xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx jsou x xxxx zmutovaných buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx mutací: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx růst: xxxxxx xxxxx xxxxx x čase x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; vypočítává xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx růstu (x porovnání s xxxxxxxxx xxxxxxxxx) a xxxxxxx klonovací xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx exprese.
Přežití: xxxxxxxxx účinnost (cloning xxxxxxxxxx) ovlivněných xxxxx xxxxxxxxxxxxx na miskách xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx (TK) x xxxxxxxx xxxxxx XX+/- → XX-/-, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx působení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (TFT). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx TFT xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx XXX proto xxxxx proliferovat xxxxxxx xxxxx, zatímco xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx thymidinkinázu, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx buňky x xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX selekčně rezistentní xxxx 6-xxxxxxxxxxx (XX) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx analyzována v xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx podezření xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxxxxx strukturně xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx, xx třeba potvrdit, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx x metabolickou xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxxxx xx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx fenotypické exprese xxxx xxxxxxx xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Cytotoxicita xx stanoví obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx působení látky. Xxxxxxx xx ponechají x růstovém xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx pro daný xxxxx x typ xxxxx, xxx xxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx expresi xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se stanoví xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx selekční xxxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxx xxx tohoto xxxxxxx, xx stanovení xxxxxxxxx účinnosti (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (životnosti). Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx x počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x selekčním xxxxx x x xxxxx xxxxxxx x neselekčním xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx typů, xxxxxx xxxxxxxx buněk L5171Y, XXX, XXX-XX52, X79 x TK6. U xxxxxxxxx typů používaných x tomto xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. X xxxxx se kontroluje, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; infikované xxxxx xx použít xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx měl xxxxxxxx citlivost a xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, xxxxx kultur x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyhovovat (14). Minimální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxx xxxxxxxx je, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 106 xxxxx. Xxxx xx být x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvládnutí xxxxx.
1.4.1.2 Xxxxx x kultivační podmínky
Je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx podmínky (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx xx xxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx systému x xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx kultivace zajišťovaly xxxxxxxxx růst xxxxx xxxxx expresní periody x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx nemutovaných xxxxx tvořit kolonie.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x inkubují xxx xxxxxxx 37 xX. Xxxx provedením xxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mutovaných xxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10% v/v. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxx záviset xx xxx, xxxxxx xxxx xx testovaná xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakci v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx modifikované buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx vědecky xxxxxx (např. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxxxx xx buňky rozpustí xxxx xx připraví xxxx suspenze ve xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxx xxxxxx. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, že xxxxx skladování neovlivňuje xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
X zvoleného xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx by xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat, a xxxxx xxxxxxxxx přežívání xxxxx x xxxxxxxx X9. Používá-li se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje se, xxx všude tam, xxx je to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx zvažováno xxxxxxx xxxx rozpouštědla xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx organické xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.
1.4.2.2 Koncentrace
Mezi kritéria, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxx pH xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx x xxx xx x hlavním xxxxxxxxxxx, přičemž se xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx integrity x xxxxx xxxxx, jako xx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x předběžných experimentech.
Použijí xx xxxxxxxxx čtyři xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx koncentrace pokrývat xxxxxx xx maximální xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxx xxxx xxx násobkem, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 a √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx koncentrace x xxxxxxxxxxxx, měla xx xxxx x xxxxxxxxxxx přežití (relativní xxxxxxxxx účinnosti) xxxx xxxxxxxxxxx celkovému růstu x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx maximální xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx, 5 μx/xx a 1,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, při xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšší, než xx mez xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx na konci xxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx rozpustnost xxxx během expozice x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, X9, xxxx xxx. xxxxx. Nerozpustnost xx xx xxxxxxx x prostým xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx překážku xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X xxxxx xxxxxxx experimentu se xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, x xx xxx x metabolickou xxxxxxxx, tak xxx xx. Pokud se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mutagenního xxxxxx. Xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XXXX | xxxxx metansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (xxxx x xxxxx kolonie) | cyklofosfamid monohydrát xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx X-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
xxxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxx vhodné xxxxx; xxxxxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje x 5-brom-2'-deoxyuridinu (XXX 59-14-3, číslo EINECS 200-415-9), xxx xxxxxx x tuto referenční xxxxx. Xxx, xxx xx xx možné, xx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxx ze stejné xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum v xxxxxxxxxxx xxxxx, zpracované xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxxxxxxxx kultury. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx proliferující buňky xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací, tak xxx xx. Expozice xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Xxxx expozice xxxx xxxxxxxxxx jeden xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxx koncentrací tak, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx počet xxxxxx x analýze (tj. xxxxxxxxx osm xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Kultury s xxxxxxxxx xxxxxxxxx (rozpouštědlem/vehikulem) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx plynných nebo xxxxxxxx xxxxx je xxxxx uplatnit v xxxxx xxxxxx postupy, xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kultivačních xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx frekvence
Po xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx cytotoxicity xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx lokus xx xxxxxxx xxxxxxxxx časový xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx expresi xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (HPRT x XPRT vyžaduje xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, TK xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx xx pěstují x xxxxx x x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx začne x xxxxxxxx životnosti (xxxxxxxxx x výpočtu xxxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx selekční xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx x xxxxx X5178X XX+/- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x experimentálních xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxx testu xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a pozitivní xxxxxxxx. Měření se xxxx provést i xx xxxxxxxx x XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx stanovení cytotoxicity x životnosti, xxxxx xxxxxxx x mutační xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx X5178XX+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a velkých xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx velkých x xxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx testu XX+/- xx xxxxxxx hodnotí xxxxx kritéria kolonií xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) x pomalého xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx dobu zdvojení, x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx. Rozmezí xxxxxx poškození xxxxxxx xxxx od ztráty xxxxxx genu po xxxxxxxxxxxx viditelné chromozómové xxxxxxx. Xxxxxx malých xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x expozicí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Méně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rychlostí xxxx xxxxx rodičovské x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (relativní xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx efficiency) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx počtem přežívajících xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx shrnou x xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx reakce xx nepožaduje. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx případu. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx negativních xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, je xxxxx xxxxx zdůvodnění. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tak, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nárůst xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx být xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.
Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx x tomto xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní. Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx xxxxxxxxx výsledky, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx souboru dat xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Výsledky mohou xxx xxxxx nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx mutace. Nejprůkaznější xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx - xxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx látka v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx genové xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva o xxxxxxx pokusu
Ve zprávě x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, pokud xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x zdroj xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx kultur,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- absence xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx k xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- koncentrace testované xxxxx,
- objem xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- inkubační xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
-xxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx buněk xxxxx xxxxxxxx látky,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx,
- délka xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx včetně xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx činidla,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx živých x xxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxx xxxxxxx, u xxxxx xx xxxxxxx velikost x xxx (včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx "malými" x "xxxxxxx" koloniemi).
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xX a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx stanoveny,
- xxxxxxxx kolonií, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx,
- případné možnosti xxxxxxxxxx zjistit xxxx xxxxxxx mutantů xxxxxx xxxxxxx L5178Y TK+/-,
- xxxxx dávka - xxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x negativních (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.18. XXXXXXXXX XXX REPARACE - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - XXXXX XXXXX XX VITRO
1. METODA
1.1 Princip xxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx DNA xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3H-TdR) xx DNA savčích xxxxx, xxxxx xxxxxx x X fázi xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xx xxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx x sloučeniny xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx ředění xx provádí jenom xxxxxxxxxxx médiem. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla x xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx fibroblasty).
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx potřeba xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (nebo xxxx, je-li xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX XXX.
1.2.2.2 Negativní x pozitivní xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx negativní a xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx.
Xxxx pozitivní xxxxxxxx xxx pro xxxxxxx hepatocyty použít 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) nebo 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxx pro xxxxxxxxxxxxxxx, xxx x pro XXX bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx lze xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx být xxxxxxx xxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx toxický xxxxx.
Látky xx xxxx špatně xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx až xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vhodných xxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx případ xx případu.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx kultur xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx kontrolovány xx přítomnosti Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxxx xxxxxxxxx. Stabilizované buněčné xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx připravuje xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), inokuluje xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxx, že xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx vhodném médiu x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Kultury xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x médiu xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx vhodnou xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx médium xxxxxxxxxx, buňky xxxxxxx, xxxxxxxx x sušeny. Xxxxxxx xxxx ponořena xx autoradiografické xxxxxx (xxxxxxxxxxxx může být xxxxxx xxxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Stabilizované xxxxxxx linie a xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxx xxxx x pak xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 3H-TdR. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx typu xxxxx. X xxxxxxxxx nejvyššího xxxxxxx UDS xx xxxxx 3X-XxX xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx. Xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx je ovlivněn xxxxxx interakcí xxxx xxxxxxxxxx látkou x 3X-XxX. X odlišení xxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxxxx replikací DNA xx užívá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxxxxxx XXX xxxxxx XXX: Xxxx expozicí xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx vstup xxxxx xx S-fáze, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx popsáno xxx autoradiografii. Xx xxxxx xxxxxxxxx je XXX xxxxxxxxxxx z xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx obsah XXX x určen rozsah xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, je x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX zbytečná.
1.2.4 Xxxxxxx
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx kultuře xx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx 50 xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx. X každém xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xxxx. Množství xxxxxxxxxxxxxxx 3X-XxX v xxxxxxxxxx xx určí x xxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxx xxxxxxxxx XXX XXX xx použije xxxxxxxxx počet kultur xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx kontroly.
Xxxxxxxx xxxx být potvrzeny x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Vyhodnocení xxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx jádro xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxx a xxxxx xxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxx.
2.2 Vyhodnocení XXX
Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxxx jako xxx/μx XXX. Průměrná xxxxxxx xxx/μx XXX xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Údaje se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, jejich xxxxxxx x číslu xxxxxx v době xxxxxxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxxxxx kultur,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, koncentracích x xxxxxxxxxx xxxxxx výběru x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- pokusném schématu,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx kontrolách,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx metodách,
- způsobech blokování xxxxxx buněk xx X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxx XXX a x xxxxxxxxxxx celkového obsahu XXX xxx metodě XXX,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.19. SCE - VÝMĚNA SESTERSKÝCH XXXXXXXXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
SCE xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx DNA xxxx xxxxx sesterskými xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxx xxxxxx identických xxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x identických (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx je xxxxx xxxx znalostí o xxxxxxxxxxxx základě tohoto xxxxxxx. Detekce XXX xxxxxxxx diferenční xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XxxX) xx xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx potřebné. Xxxxxxxxx se xx xxxx xxxx replikačních xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx XxxX. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx ovlivní inhibitorem xxxxxxxx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx v x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx ukončení xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx) xxxx stabilizované xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x hlediska xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentrace XX2 x xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx xxxxx významně ovlivnit xxxxxxxxx buněk, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x přítomnosti x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx buněčných xxxx s vnitřní (xxxxxxx) metabolickou aktivitou, xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx aktivity xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx kultur
Xxx xxxxx experimentální xxx xx xxxxxxx nejméně xxx kultury.
1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dále xxxx xxx použita xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: etylmetansulfonát
- xxxxxxx působící xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx xxxxx, xx možné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx musí xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx vodě relativně xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx až xx hranici xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 xX. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx než x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx kultur. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx běžnými xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 oC.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx x exponenciální xxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxx případů stačí xxxxx až dvě xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxx cykly, je-li xx třeba. Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx metabolickou aktivitu, xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx z xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x růstovém xxxxx x BrdU xxx xxxxxxxxxx cykly. Alternativně xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx x XxxX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx cyklů.
Xxxxxx lymfocytární kultury xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx mitotickém xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx buněčného xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx s XxxX xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zabránilo fotolýze XXX, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx buněk
Jednu xx čtyři hodiny xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx kultur xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. kolchicín). Xxxxx kultura xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx preparátů ke xxxxxxxxxx XXX xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxx).
1.2.3.5 Analýza
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx nejméně 25 dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx zakódovány před xxxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx analyzují xxxxx xxxxxxxx x 46 centromerami. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, které xx xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx centromer. Xx xxxxx stanovit, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx SCE x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x každé xxxxxxxx a xxxxx XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx média, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, kultivačních xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, inhibitoru xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxx působení, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxx xxxxx experimentální xxx,
- způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx kulturu),
- xxxxxxxxx xxxxx XXX/xxxxx x SCE/chromozóm (xxxxxxxx xxx xxxxxx kulturu),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- zdůvodnění xxxxxx koncentrací,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX XXXXXX XX POHLAVÍ X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx mutace xxxxxx xx pohlaví (XXXX) na Drosophila xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx genových, xxx i xxxxxx xxxxxx, v zárodečných xxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxx na xxxxxxx mutace xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx chromozómu X. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxx 80 % všech xxxxxx X-chromozómu. X-chromozóm xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx x X-chromozómu xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx nesoucích xxxxxxxx xxx. Xxxx xx mutace xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx na xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. SRLS test xx výhodný vzhledem x zvláštnímu vzhledu x uspořádání chromozómů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx Xxxxxx-5. Xxxxx xxx xxxxxxx x jiné xxxxxx xxxxx xxxxxxx linie xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx látky xx rozpouštějí xx xxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxx etanolu x Tweenu-60 xxxx 80), xxxx xxxxxxxx xx dále ředí xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx dimetylsulfoxid (XXXX) xxxx vehikulu.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Test xx xxxxxx určenou citlivost. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx ovlivňuje nutný xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx plynům xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xx nutné, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx XxXx a xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx břišní xxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
V xxxxxx pokusu se xxxxxxxx xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.6 Dávkování
Xxxxxxxxx xx tři xxxxx testované látky. Xxx předběžný xxxxxxxxxx xxxxx se používá xxxxx xxxxx rovnající xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx divokého xxxx (xx xxxxx 3-5 xxx) jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx kříženi s xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxx Muller-5 xxxx x jiné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxx dny, aby xxx pokryt xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx efekt xxxxxxxxxxxxxx x účinkem xxxxxxxxx xxxxx x xxxx expozice xx xxxxx spermie, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x spermatogonie.
Xxxxxxxxxxxxx X1 samice xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xx. jedna xxxxxx/xxxxxxxx) se svými xxxxxx. X X2 xxxxxxxx je v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx divokého xxxx. Jestliže v xxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx nesoucí letální xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (nejsou nalezeni xxxxx samci x xxxxxxxxxx chromozómem), dcery xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, zda xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Uvádí xx xxxxx hodnocených X-xxxxxxxxxx, počet xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, pro xxxxx xxxxxx křížení x xxx xxxxxxx testovaného xxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx každého xxxxx. Výsledky se xxxx potvrdit v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x jednom xxxxx má xxx xxxxx x úvahu x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx liniích xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx sterilních xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx X2 xxxxxx, xxxxx X2 xxxxxx xxx potomků, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- podmínkách testu: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx odběru xxxxxx, výše dávek, xxxxx o toxicitě, xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxxxxxxx počítání xxxxxxxxx mutací,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxx údajů,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.21. XXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX - IN VITRO
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxx xxxxx lze xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxxxx xxxx xx vitro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx s maligní xxxxxxxxxxxx xx vivo. Xxxxxxxxxx xx používají xxxxx X3X10X1/2, 3T3, XXX, Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxxx x změny xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x uchycení x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx systémy xxxxxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxxx xx morfologické xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx výsledek xx xxxxx xxxxx není xxxxxxx karcinogenity. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx promotorů. Cytotoxicita xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinku testované xxxxx na schopnost xxxxxxxx kolonie (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx cytotoxicity xx xxxxxxx ze xxxxxxxxxxx, xx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx relevantní, ale xxxxxx xx xxxxx xxxxxx k xxxxxx xxxxxxxxx transformace xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, protože x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx k prodloužení xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Buňky
Existuje xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx musí xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx test používaný xxxxxxxxxx je xxxxxx x xx je xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx podmínky musí xxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx xxxxx xx rozpouštějí xxxx suspendují v xxxxxxxxxxx médiu nebo xx xxxxxxx rozpouštědle xxxx ovlivněním xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx životnost xxxxx, xxxxxxxx rychlost nebo xxxxxx transformace.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Buňky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx její xxxxxxxxxx xxxx vhodné pro xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx přímo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx. Xxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (s rozpouštědlem).
Xxxxxxxx látek xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxx působící xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-propiolakton,
- xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx třeba, xx možné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx dávky. Tyto xxxxxxxxxxx musí vyvolávat xxxxxxx xxxxx závislý xx xxxxxxxxxxx, nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx koncentraci xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx jako x negativní kontrole. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xx xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx závislou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Ta xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s výměnou xxxxx (ev. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), jestliže xx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Buňky bez xxxxxxxxxx vlastní metabolické xxxxxxxx musí být xxxxxxxxxx testované látce x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaná látka x xxxxxxxxx probíhá xxxx za vhodných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx. Xxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné vyjadřovat xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx přežívajících xxxxx. Xxxx je xxxxx xxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, xxxxxxxxx o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx inkubace, xxxxxxxxxxxx, kultivačních xxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx během xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenotypu, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx xx xxxxxx), xxxxxxxxxx výběru koncentrací,
- metodách xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,
- statistickém xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.22. DOMINANTNÍ XXXXXXX XXXX U XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx exponovaného xxxxxxxxx xxxxx. Obecně xx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromozómů (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx samice xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku.
Samci xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, intaktními xxxxxxxx. Xxxxxxx mrtvých xxxxxxxxxx na samičku x exponované xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx postimplantační xxxxxx. Preimplantační ztráty xx xxxxxxx na xxxxxxx počtu žlutých xxxxxxx nebo porovnáním xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x exponované x kontrolní skupině. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx součet xxx- x postimplantačních xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx srovnání živých xxxxxxxxxx na xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x živým xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx skupině. Snížení xxxxx implantací v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx zánikem xxxxx (t.j. spermatocytů x/xxxx spermatogonií).
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Testovanou xxxxx rozpustit xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx vodě xx xxxx xxxx suspendují xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxxx látka se xxxxxxx podává xxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx podávat xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx je orální xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxx i xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx myši. Xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx a xxxxxxx
Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx exponovaných xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx variabilitu xxxxxxxxx biologické xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx řídí xxxxxx xxxxxxxxx detekční xxxxxxxxxx x silou xxxxxxxxxxxxx testu. X xxxxxxxx případě se xxxxxxxxx volí takový xxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxx 30 - 50 březích xxxxx xx připouštěcí xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Xxxxxxxxx x negativní (x xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivních xxxxxxx x xxxxxxxxx experimentů, xxxxx být xxxxxxx. Xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx ve xxxxxxxx, xxxxxxx dávkách, xxx xxxx prokázána xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. MMS, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx postačující xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx
Netoxické xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx dávce 5 x.xx-1 nebo x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Existuje xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jednorázová xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx použito xxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xx opakovaně xxxxxx x jednou xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, intaktními xxxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxx x samců xxxxxxx po dobu xxxxxx xxxxxxx cyklu xxxx, nebo pokud xx xxxxxxxxx spermie xx xxxxxx xx xxxxxxxxx zátka.
Počet xxxxxx po expozici xx xxx schématem xxxxxxxx a musí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx dělohy je xxxxxxxx x určení xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx vyšetřeny x určení xxxxx xxxxxxx tělísek.
2. XXXXX
Xxxxx x xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx. Xxxxxxxx každého páření xxxxxx identifikace každého xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx záznam o xxxxx xxxxxx, o xxxxx xxxxxx samci, x xxxxx xxxxxx x mrtvých xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx celkového xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrátách.
X xxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx letalita. Xxxx být xxxxxxxxxxx x preimplantační xxxxxx. Xx xxxxx být xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx corpora xxxxx x počtem xxxxxxxxxx nebo jako xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx dělohu xx srovnání x xxxxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxxxxxxx vhodnými statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx možno, xxxxxxxxx x:
- druhu, xxxxx, věku x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx každého xxxxxxx x exponovaných x xxxxxxxxxxx skupinách,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách, xxxxxxx x toxicitě,
- xxxxxxx podání a xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx replikací OECD XX 483, Mammalian Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Aberration Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx dvojího druhu: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rovněž. Xxxx xxxxxx xxxx určena x xxxxxxx numerických xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx nepoužívá. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx jsou x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx se analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, x proto xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx indukci xxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxxxx buňkách.
X xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx testem xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Tato xxxxxx nepoužívá jiné xxxxxx xxxxx.
Xxx xx xx spermatogoniích xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx třeba xxxxxxxxxx první mitózu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx než xx xxxxxxxxx ztratí x následujícím xxxxxxxx xxxxxx. Další xxxxxxxxx x ovlivněných xxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, x xxxx xx ovlivněné buňky xxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx in xxxx je xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx mutageny xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx zárodečných. Mimoto xx xxxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx procesů XXX.
X xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx generací xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látkám. Zjištěné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx ovlivněných xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx generace spermatogonií xxxxx, ale xxxxxxxx xxx exponovány xxxxxxx xxxxxx kvůli xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx bariéře Xxxxxxxxx buněk a xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx toho, xx xx testovaná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx látka pro xxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx jako xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx chromatid xx xxxxxxxxxxx, že vzniklá xxxxxx ve xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je větší, xxx xx šířka xxxxxxxxx chromatidy. Xxxx xxx v xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x místě xxxxx xx xxxxxxxxxxx (nebo xxxx osu xxxxxxxxxx), xxxxxxxx jedna xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Gap: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Polyploidie: xxxxxxx haploidního počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx počet xxxx (3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, a xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ve vhodnou xxxx xx xxxxxxxx xx usmrtí. Xxxx xxxxxxxxx se na xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx metafázi (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxx®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx se v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr živočišného xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx čínských xxxxxx x xxxx, xxx ovšem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx jiného xxxxxxxx xxxxxxx druhu. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny mladých xxxxxxxx dospělých jedinců. Xxxxxxxxxx rozdíly by xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx být minimální x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Všeobecném úvodu x xxxxx B.
Xxxxxxx by měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci se xxxxxxxxxxx xxxxxx a xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlivy xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx stavu x xx-xx xx xxxxx, látka xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx. xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (stabilitě) xxxxxxxxx, xx skladování xx neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x používaných dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx použití podpořeno xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x testovanou látkou. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxx skupinách xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xx spermatogoniích xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx při xxxxxxxxx kontrole xx xxxx tak, aby xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx totožnost zakódovaného xxxxxxxxx. Pozitivní kontrolu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxx odebírat v xxxxxx xxxxxxx intervalu. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu.
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxx xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx intervalů zpracování, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx historické xxxxx x frekvenci xxxxx x xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x neovlivněných xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx zkušební x kontrolní skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxxxxxxx xxxxx se podává xxxxxxx jednorázově xxxx xx xxxx xxxxxxx. Xxxxx se jedná x objemnou xxxxx, xxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xx xxx xxxxx za den xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx vědecky xxxxxxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx xx vzorky xx expozici xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 24 x 48 xxxxx po xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx (tj. xxxx xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx vzorků xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xxxx po 1,5násobku xxxxx buněčného cyklu xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx vhodnější xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx účinku (6).
Xxxxx toho xxxxx xxx použity xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Např. xxxxx-xx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx pohyb chromozómů xxxxx xxxxxx, nebo xxxxx x účinky xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).
Zda xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx cyklu) xx xxxxxxxx aplikace. Odběry xxx xxxxxxxx i x xxxxxxx intervalech, xxxxxxxx-xx xx xx xx účelné.
Xxxx xxxxxxxxx se zvířatům xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx z xxxx xx vhodném xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx xx xxxxx xxxxxxxx zhruba 3-5 xxxxx, u čínských xxxxxx zhruba 4-5 xxxxx.
1.5.3 Dávkování
Provádí-li xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxx laboratoři za xxxxxxx stejného živočišného xxxxx, kmene x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx (7). Xxx zjištění toxicity xx xxxxxxx pro xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx rozmezí xx xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx jenom nejvyšší xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx dávkách xx xxxxxxx xxxxxx podávání xx účinky xxxx xxxxxxx.
Xxxxx, xxx x nízkých netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx dávka, xxxxx xxxx x xxxxxxx známkám toxicity xx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx poměru mitóz xxxxxxxxxxxxx k první x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx( tento xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx dávkách xxxxxxxx x jeden xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx úrovní. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx testu xxxxx dávky.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx způsoby xxxxxxxx. Maximální objem xxxxxxxx, která se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 g hmotnosti; xxxxx xxxxx xxxx xxx zdůvodněné. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx vykazují při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx koncentrace látky xxx, aby xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx úrovních xxxxxx x minimalizovala se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx chromozómů
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx zvířete xx x jednoho xxxx x obou xxxxxx připraví xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx. Buněčná xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx xx snížit, xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx) se před xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx postupy xxxxx vedou x xxxxxxx určitého xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx chromozómů, xxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx x hodnocených xxxxxxx roven xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx prezentují x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx chromozómových aberací, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxxxxxxx zvlášť, xxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xx xx celkové xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x meióza, stanoví xx u všech xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx z negativní xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx meiotické xxxxxxxx, a to xxx, že xx x každého xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx buněk. Je-li xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx mitotický xxxxx x xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx jedince.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x aberacemi xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx intervalem xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické metody (8); statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, při xxxxxx použití výsledky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Ačkoliv xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pozitivní, xxxx xxxxxxxxx výsledky, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx získaná xxxx xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx nejisté, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx živočišného druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek testovaná xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx chromozómové xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Je třeba xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx dosáhne xxxxxxxx xxxxxxx nebo je xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx,
- rozpustnost x xxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x věk xxxxxx,
-xxxxx, chovné xxxxxxxx, xxxxxx apod.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů a xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- údaje xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx doby xxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxx xxxxxx koncentrace xxxxx v potravě/pitné xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx xxxxxxxxx / den),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx potravy x xxxx,
- podrobné xxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx a odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx toxicity,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx koncentrace a xxxxx působení,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- kritéria, xxxxx se studie xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- mitotický xxxxx,
- poměr xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx a druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxx počet aberací x xxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, je-li to xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- údaje xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,
- případně pozorované xxxxx ploidie.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.24. XXXX XXXX X MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xx xx xx xxxx xxxx xx myších, x kterých xxxx xxxxxxxxxx se embrya xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxx melanoblasty x cílovými geny xx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx srsti. Xxxxxx xxxx ztráty xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vyjádřeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (spots) xxxxxxxxx xxxxx srsti xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx potomků x těmito skvrnami, xxxxxxxx, je xxxxxxxxxx x jejich xxxxxxxxx xx srovnávána s xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx mutace x xxxxxxxxxxxxx buňkách.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx látky jsou xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo suspendovány xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx připravené xxxxxxx testované látky.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Myši xxxxx X (xxxxxxxxx, x/x; chinchilla, pink xxx, xxx p/cch x; brown, b/b; xxxxxx, short xxx, x se/d se; xxxxxxx xxxxxxxx, s/s) xxxx xxxxxxx xxx x xxxxxx XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xx x bp/pa x bp; leaden xxxxx, ln xx/ /xx fz; pearl xx/xx) nebo s xxxxxx X57 BL (xxxxxxxxx, x/x).
Xxxxx xxx xxxxxxx i xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx potomci. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx NMRI (xxxxxxxxx, x/x; albino, x/x) x DBA (xxxxxxxxx, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx zvířat
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx zabřezlých xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Vhodná xxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx myší a x kontrolních myší. Xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx pouze v xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx nejméně 300 xxxxxxx samic xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Negativní x pozitivní kontroly
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx kontroly). Xx zvýšení xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x téže xxxxxxxxxx xx předpokladu, xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx laboratoři při xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mutagenním xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxx xx používá xxxxxx aplikace xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekce xxxxx xxxx. Xx-xx xx xxxxxx, je xxxxx použít xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.5 Dávkování
Xxxxxxxxx xx nejméně xxx xxxxx, x nichž xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. nebo 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx zjištění xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 x 9.25 xxx po xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxx provést xxxxx xxxxxx dnů.
Xxxxxxx
X mláďat je xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx skvrn mezi xxxxxx x čtvrtým xxxxxx po xxxxxx. Xxxxxxxxx se tři xxxxx skvrn:
(a) xxxx skvrny v xxxxxxx 5 mm xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx xx předpokládá, že xxxxxxx xxxxxxx buněk (XXXX);
(x) xxxxx xxxxxx typu xxxxxx xx vyskytují v xxxxx xxxxxxxx žláz, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxxx xx, že xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx diferenciace (XXX);
(x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx výsledek xxxxxxxxxxx xxxxxx (XX).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx, XX, je xxxxxxxxx relevantní. Xxxxxx x xxxxxxxxx mezi XXX x XX xx možné xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxxxx mikroskopu.
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, velké xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Získaná data xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx počet sledovaných xxxxxxx x xxxxx xxxxxx majících jednu xxxx xxxx skvrn xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutacemi. Xxxxx získané x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx porovnávají xxxxxxxx metodami. Xxxxx xxxx také uváděny xxxx xxxxxxx hodnoty xx vrh.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x průběhu pokusu xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- kmeni xxxxxxxx xxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx velikosti xxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx při xxxxxx x xxx odstavení,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx rozpouštědle,
- xx kterém dni xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- x způsobu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx sledovaných xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx s XXXX, XXX a XX x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx dávka/odpověď x RS, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX U MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx přenosné translokace x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx jsou reciproké xxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x XX-xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx využívá xxx xxxxx X1 xxxxxxxxx pro cytogenetickou xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx některými xxxx xxxxxxxxxxx (X-xxxxxxx x c-t xxx). Xxxxxxxxxxx xxxx analyzovány xxxxxxxxxxxxx x meiotických xxxxxxx samců xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, xxxx X1 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx X1 xxxxx. Samice XO xxxx cytogeneticky xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pouze 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx dřeně.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztoku. Jestliže xxxx nerozpustné, jsou xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx reagovat x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx x jiné xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Nepožaduje xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxxx než osm x měla by xxx relativně xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx zdravá, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx zvířat
Počet xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx spontánních xxxxxxxxxxx a na xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx samců X1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x F1 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx budou xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx X1 generace potomků, xxx xx vyžaduje 300 xxxxx x 300 xxxxx.
1.2.1.4 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže jsou xxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx použity.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxx nejvyšší xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxx. Pro stanovení xxxxxx xxxxx/xxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx látek se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxx x oplodnění
Xxxxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá jedna xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx sedm dní x xxxxx xx 35 xxx.
Počet xxxxxxxxx po xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x musí xxxxxxxx, xx všechna xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx analyzována. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx samice xxxxxxxxxx rozděleny xx xxxxx. Po xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x pohlaví xxxxxx. Xx xxxx jsou xxxxx x xxxxxx xxxxxxx odděleni až xx xxxx xxxxxxxx xx experimentu.
1.2.2.2 Zjišťování xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx jedna xx xxxx možných xxxxx. Xxxx fertility X1 xxxxxxx x následná xxxxxxxxxx xxxxxxx nositelů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxx xxxxxxxxxxxxx analýza xxxxx xxxxx X1 xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx testu xxxxxxxxx.
(a) Test xxxxxxxxx
Snížená fertilita xxxxxx v X1 xxxxxxxx xx může xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x/xxxx analýzou xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx určení xxxxxxxx x snížené fertility xxxx xxx xxxxxxxxx xxx každý xxxx xxxxxxxxx myší.
Velikost xxxx: X1 xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx klecí xx xxxxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. dnem po xxxxxxxxx. Xxxxxxxx vrhu x pohlaví X2 xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx X1 samice, F2 xxxxxxx xxxxxx vrhů xxxx uchováváni xxx xxxxx xxxxx. Samice-nositelky xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx z 1 : 1 xx 1 : 2 samci vs. xxxxxx. X následném xxxxx xxxx normální X1 zvířata vyřazena x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx X2 xxx dosahuje xxxx xxxxxxxxx předem určenou xxxxxxxx hodnotu, xxxxx xxxx zaznamenány xxxxx x třetí vrhy. X1 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx F2 xxxx, xxxx dále xxxxxxxxx xxx analýzou xxxxxx dělohy, nebo xxxx přímo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx u xxxxxx translokací xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx translokací x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx X1 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ke 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zátky. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx 14. - 16. xxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx živé x xxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxx xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx translokací xxxx xxxxxx na základě xxxxxxxxxxx multivalentních figur xx xxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxx X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx dvou xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx je nositelem xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx byl xxxxxxxx xxxxx no xxxxxxxx, xxxxxxx F1 xxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xx každého xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně 25 buněk x xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Analýza xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx spermatogoniích xxxx v kostní xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxx testes a xxxxxxxxxx meiozy xxxx xxxxxxxxxx xxxx x X1 samic xxxxxxxxxxx XX. Přítomnost xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx x 10 xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x-x xxx). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx translokace xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx pruhováním xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx ve xxxxx 10 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx XO xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxxxx xxxxx xxxx prezentovány xxxxxxxxxx formou.
Pro xxxxx xxxxxxxx připouštění xx xxxxxxxxxxx průměrná xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx).
Xxx odhad xxxxxxxxx X1 xxxxxx xx uvádí xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx kontroly x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx x individuální počty xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxx každé xxxxxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx diakinéze-metafáze I xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx počet xxxxx pro každého xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx X1 xxxxxxxx xxxxxxx xx zaznamenává xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx uvádí xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx o xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X XX xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx ratio X2 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx, že xxxxxx xxxxx fertility byly xxxxxxxxx xxxxxxx možní xxxxxxxx X1 translokací, xx třeba v xxxxxxxxx uvést informaci x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx translokačních heterozygotů.
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x průběhu pokusu
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- kmenu xxxx, stáří x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- počtu rodičovských xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- experimentálních podmínkách, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, počet x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x detailní xxxxx xxxxxx translokací včetně xxxxx x březosti x obsahu xxxxxx,
- popis xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x mikroskopické xxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.26. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX ORÁLNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx podávání per xx, xxxxxx na xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx podává xxxxx xxxxxx xx 90 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.
Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Všem xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx po celou xxxx xxxxxx stejnou xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx aditiva, xxxx xxx o nich xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx případě by xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx měli xxx xxxxxxx mladší xxx 6 xxxxx, x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx každé pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx každou xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx a 10 xxxxx). Xxxxxx musí xxx nullipary a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx zvýšit celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx nejvyšší xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx se zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx xx stejném xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx dávka. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx počet. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx hodnotu překračovat. Xxxxxxx by xxxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 xxxxxx xxxxx, mají xxx xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx.
Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx úrovní xxxxx x x kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x ppm xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) nebo xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; použitou xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxx, mělo xx xx xxx xxx xxxxx den xx xxxxxxx dobu, x dávkování v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxx-xx xx 90xxxxx xxxx xxxx popsanou xxxxxxx a nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (xxxx xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx toxická látka x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx aplikované xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebránily xxxxxxxx výživě xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxxx dobu objevení, xxxxxx a xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, jsou xxxxxxxxxx dalších 28 xxx bez aplikace, x posouzení zotavení x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxických účinků.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, očí, sliznic, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, změny funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx potravy (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke ztrátám xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
U všech xxxxxx včetně kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx má provést xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx a xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx a x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx se oční xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx zvířata.
(x) Xx konci xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x diferenciálního počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), alaninaminotransferáza (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, kreatinin, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího spektra xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx postup, xxx jen xx xxxxxxxx očekávané xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx data, má xx uvážit xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx ještě před xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x ohledem xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx medula/pons, kůra xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x plíce, xxxxx, aorta, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata a xxxxxxxxx, xxxxxx, (přídatné xxxxxxxx orgány), (xxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x xxxxx střevo, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), xxxxxx kost s xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxx mícha xx xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, x (slzné žlázy). Xxxxx x xxxxxxxxx xx posuzují x xxxxxxx, pokud xxx xx jejich postižení xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx orgánů a xxxxx xx třeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx kontrolní xxxxxxx.
(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Je xxxxx vyšetřit xxxxxx xxxxxx x jiných xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx k zjištění xxxxxxxx infekce, xxxxxxx xx poskytuje xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx také xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxxx skupin. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx však provést xxxx na xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx postižení xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx byly xxxxxxxx účinky x xxxxxxxxx exponovaných skupin.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní musí xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou statistickou xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x podle dávek,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx další vývoj,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a jejich xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- pitevní xxxxxx,
- detailní popis xxxxx histopatologických nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.27. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, studie na xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx (nehlodavcům), x xx každé xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem se xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx xxx vhodnější podávání x xxxxxxxx. Xxxxx xxx použity xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Všem xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx po xxxxx xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, xx možno xx xxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx: xxxx xx přednost xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx používat i xxxxxx xxxxx nehlodavců. Xx xxxxx pracovat xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxx se má x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 xx 6 xxxxxx x xx xxxxxxx než 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx předběžný xxxx před dlouhodobým xxxxxx, x obou xxxxxxxx se má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 8 xxxxxx (4 xxxxxx a 4 xxxxx). Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx být takový, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx úrovně x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx nejnižší xxxxx xxxx hodnotu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxx jen toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx než 3 xxxxxx dávek, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Podává-li xx xxxx toxická xxxxx v potravě, xx třeba xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx ani xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx normální xxxxxx xxxxxx.
Podává-li xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, může se xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx mg.kg-1 potravy) xxxx konstantní dávkování xx xxxxxx x xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xx xx látka přímo, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx by xx xxx dít xxxxx xxx ve xxxxxxx xxxx, x dávkování x xxxxxxxxx intervalech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Provádí-li se xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx dieta.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx-xx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxx (nebo xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) žádné xxxxxxx xxxxxx, xx možno xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Podává-li se xxxx toxická látka x potravě, je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, xx kterém xx objeví a xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látka 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Podává-li xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx x potravě, xxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 dní x xxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje (xxx není xx xx xxxxxxx) xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Příjem xxxxxxx (x xxxxxx vody xxx xxxxxxxx testované xxxxx v xxxxx xxxx) x hmotnost xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx pečlivá klinická xxxxxxxxx x vhodnými xxxxxxxxxx k minimalizaci xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx pitvají xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx. Umírající xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xx konci xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx alespoň x nejvyšší dávky x u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, vyšetří xx všechna xxxxxxx.
(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x potom xxx v měsíčních xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx stanovení hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx počtu leukocytů x testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx například xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), trombinový xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxxxx testu, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu na xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx hladovění xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx a xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx transamináza xxxx) x aspartát aminotransferáza xxxx (dříve glutamát-oxalacetát xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin a xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Mezi další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx vzorků xxxx xx nehlodavci měli xxxxxxxx (xx xxxx xxx 24 xxxxx).
(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje jako xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx podkladě xxxxxxxxx nebo pozorované xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx použitých ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx zevní xxxxxxxxx xxxxxxx těla, xxxxx tělních otvorů, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x příštítnými xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx nejdříve xx xxxxx xxxxx xx vlhkém stavu, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, podvěsek xxxxxxx, xxxxxx žláza, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, srdce, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx pohlavní orgány), (xxxx), xxxxxxx, jícen, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, reprezentativní lymfatické xxxxxx, (samičí mléčná xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx kost x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) a (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx nejvyšší dávka, x x zvířat xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx dávkových xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx, xxxx xxxx xx xx xxxxxxxxxx xx základě klinických xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx, typy poškození x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxxxxx nebo xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, potrava,
- xxxxxxxxxxxxxx podmínky,
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxx,
- úroveň xxx xxxxxx, pokud xx lze xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x jejich další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx případných analýz xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx xx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX
(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx, studie xx hlodavcích)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx aplikuje xxxxx xx xxxx xx 90 dní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, a to xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx podávání se xxxxxxx denně pozorují, xxx se zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Zvířata, xxxxx uhynou během xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách ustájení x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx srst na xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx možné, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx experimentem. Xxxxxxxxx nebo oholení xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx nanášení xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxx pokusech x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit vodou, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx kontakt s xxxx. Testované xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xx možno xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a kmen.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx úroveň xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx studie, xx xxxxx zvýšit celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před xxxxxx pokusu. Mimoto xx možno xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít nejméně xxx xxxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx nejméně 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované látky xx se xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních xx xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx zachází stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x to ve xxxxxxx množství, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx hladina xxxxx xxxx xxxxxxx xxx toxický účinek xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 hladiny xxxxx, mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, což x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx znova x nižšími xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx studii xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 nebo xxxxx xxxxx, která xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, není xxxxx xxxxxxx nutná.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx a čas, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické účinky.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx se studované xxxxx nejlépe 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, která xxxx xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxx pozorovat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx nejméně 6 xxxxx denně.
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx celou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % povrchu xxxx, u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxx tato xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx co xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka je xx expoziční xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx xxxxxx xxxxx x testovaná látka xxxxxxxx x aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X zamezení xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx omezení xxxxxxxx xxxxxx, úplnou xxxxxxxxxxx však nelze xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx expozice se xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, pokud možno xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat a xxxxxxxxxxxx příznaky otravy xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx změny srsti, xxxx, xxx a xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxxxxxxx týdně. Xxxxxxxxxx xx zaznamenávat týdně x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxx pokud možno xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx zvířat jako xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení studie xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x zvířata x xxxxxx stresu xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx studie xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, vyšetří se xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx dobu srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx stanovovat vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx transamináza xxxx) a aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x celkové xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro studium xxxxxxx spektra xxxxxx.
(x) Xxxxxxx moči xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx nejsou xxxxxxxxx historická kontrolní xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx se xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x břišní xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx se co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na xxxxx pozdější histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, aorta, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, přídatné xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx (xx-xx přítomen), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, tenké, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (hrudní xxxx x xxxxxx xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx mícha xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx) x (xxxxx žlázy). Tkáně x závorkách xx xxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx normální x xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx x tkání xx xxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.
(x) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxxx makroskopická postižení.
(x) Xx třeba xxxxxxxx cílové xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(d) Xxxxxxx-xx xx potkanů, plíce xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx histopatologicky vyšetřovat x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx to xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Další xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxx xxxxxxx vždy xx xxxxxxxx, na xxxxxxx bylo zjištěno xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx na tkáních x orgánech, x xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx na počátku xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxx x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení,
- xxxxxxxx xxxxxx,
- úrovně dávek (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x toxických odpovědích xxxxx pohlaví x xxxxx dávek,
- xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy a xxxxx tělesné hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení výsledků, xxx xx to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.29. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX - INHALAČNÍ
(90xxxxx opakovaná xxxxxxxxx xxxxxxxx - studie xx hlodavcích)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to xx 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx dosažení xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx x atmosféře xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx uhynou, i xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx x krmení, x jakých budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx třeba, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxx příslušná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo jiná xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx data, xx xxxxx xx využít.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx testem, x xxxx studiích xx xx použít stejný xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 samic x 10 samců). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx a nesmí xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx v průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový počet xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před koncem xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní skupinu) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx koncentraci x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Expoziční xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx skupiny x xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (případně xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem - xxxxx xx xxxxxxx - v xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx). S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x kontrolní skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx překračovat. Ideálně xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx koncentrací, mají xxx voleny tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx koncentrací x x xxxxxxxxx xxxxxxx by počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je možné xxxxxx i xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, aby xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx x rovnoměrné xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx nejvíce bránil xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry x inhalačním xxxx xxxxx by x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; první dva xxxxxxx expozice xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx pozorovat xxxxx celého období xxxxxxxx x xxxxxxxx x zaznamenávat xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx se xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3. Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx aplikace, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx během xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx být xxxx 30 % a 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. experimenty s xxxxxxxx). Xxxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx voda.
Používá xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx potřebných xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx třeba nastavit xxx, aby xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx stabilních podmínek xxxxxxxx bude dosaženo xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).
x) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx. Během jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx a aerosolů, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx rozsah xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, jak xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx. Během xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx
d) Xxxxx xxxxxxxx a po xx se zvířata xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx zaznamenávají; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně pozorovat xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x krevního oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx všechna xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx včetně kontrolních xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních skupin. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, vyšetří se xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx konci xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx čas xx xxxxx trombocytů.
(x) Xx xxxxx pokusu xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx glutamát-pyruvát xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx rozšíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
(x) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, ale xxx xx podkladě xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx se xxxxxx xxxxxxxxx hematologických x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x břišní xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x tkáně xx třeba přechovávat xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým postižením, xxxxx (xxxx se xxxxxxx neporušeny, zvážit x xxxxxxx vhodným xxxxxx, tak xxx xx zachovala xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, mozek - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, srdce, xxxxx, xxxxxx žlázy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, varlata x vaječníky, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx přítomen), xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), (páteřní xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx je to xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x ostatních xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(b) Je xxxxx vyšetřit všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx zvířat xx xxxxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx stavu xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx u zvířat xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx provést xxxx na orgánech, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx skupiny, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx tkáních x xxxxxxxx, x xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx u ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x lézemi, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx počet zvířat x jednotlivými xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x tomu možno xxxxxx kteroukoliv uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx pokusu: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxxxxxxx částic a xxxxxxxx, klimatizačního xxxxxxx, xxxxx likvidace odpadního xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrací x distribuce velikosti xxxxxx aerosolu,
- xxxxx x xxxxxxxx xx sestaví xx xxxxxxx a uvedou xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristikou xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatnou xxxxxxxxx). Mají xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
a) xxxxxxxx průtoku vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
x) xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx,
c) nominální xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
x) povaha xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx,
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx,
x) xxxxxx velikostí xxxxxx (x xxxxxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- úroveň xxx účinku, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- biochemická vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.30. TESTOVÁNÍ XXXXXXXXX TOXICITY
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx sedm dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx expozici xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx účelem sledování xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx jsou xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx podmínkách xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx testu. Xxxx testem xxxx xxxxxx, xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx i xxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxx). Xx xxxxx xxxxxx zdravé x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Expozice xx xxxx xxx započata xx nejdříve po xxxxxxxxx mláďat. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx zvířat xxxxx xxxx xxx ± 20 % od xxxxxxx. X xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx subchronické xxxxxx toxicity, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x kmen x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 samců), xxxxxx i xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx být xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx dokončením xxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) xx možné xxxxxx xxxxx počet xxxxxx, ale xx xxxx xxx 4 xx každého xxxxxxx xx skupině.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx expozic
Xx třeba xxxxxx xxxxx tři dávky x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx vyvolat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx prokazatelné xxxxxxx toxicity. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx voleny ve xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxxx a nízkými xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxx xxxx x xxxxx výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Obvykle xxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxx. V případě, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx, je xxxxx zajistit, xxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxx přístup.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x každém xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx expozice testované xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, jehož xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx, xxxxx není xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx způsoby xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu xxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx technické xxxxxxxx. Xxxxxxxxx systémová xxxxxxxx x důsledku kožního xxxxxxxxxxx může být xxxxxxxx odvozena x xxxxxxxx xxxxxxxx testu x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x předchozích testů xxxxx toxicity.
Orální xxxxxx
Xxx, kde xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, jimiž může xxx exponován xxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, xxxxx xxxxxx proti xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx v pitné xxxx nebo podanou x xxxxxxx.
Ideálně xx se měla xxxxx podávat xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx dávkování xxx xxx x týdnu xxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, především x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx je považováno xx xxxxxxxxxx.
Inhalační xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx než jiné xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x této xxxxx podání. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), nebo x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s přibližně xxxxxx hodinou pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, že x xxxxx má xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx expozice x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx expozice závisí xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, která má xxx simulována. Xxxxxxx, xx třeba xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx kontinuální expozice xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx prostředí mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Expoziční xxxxxx
Xxxxxxx xx exponují x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx xxxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx přísun kyslíku x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx komory xx xxxx xxx xxxxxxxxxx konstrukci, tak xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx srovnatelné xx xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx komory se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaných zvířat. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v komoře xxxxx zvířat xxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(x) xxxxxxxxxxx: během xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx neměla xxxxxxx více xxx 15 % xxxxxxx xxxxxxx;
(x) teplota a xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 oC a xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány průběžně;
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx by xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové částice xx měly xxx x respirabilní velikosti xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky atmosféry xxxxx se xxxxxxxxx x dýchací zóny xxxxxx. Xxxxxx vzduchu xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, a xxx by gravimetricky xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx prováděna xxxxx během vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx často, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stabilitu distribuce xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx exponována.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx měla xxxxx xxxxxxx 12 měsíců.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx sledování xx xxxx být xxxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx pozorování xx měla xxx xxxxxxxxx denně s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, např. xxxxx xxxx uložení xx lednice x xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx mrtvá a xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxx moribundní. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx sledovat, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a progrese xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x také xx xxxxxx minimalizace xxxxx x xxxxxxxx nemocí, xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x očních xxxx x xxxxx zvířat, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Zaznamenává se xxxx xxxxxxxx a xxxxxx toxických příznaků xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx během xxxxxxx 13 týdnů období xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (a vody xxx, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx frekvence xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx měla být xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x poté x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx shromážděných xx xxxxx nehlodavců xxxx. xx 10 potkanů xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx xx xxxxx, vzorky xx xxxxx intervalech by xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx od xxxxxxxxxx.
Xxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx studie, xxx xx být stanoven xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx.
Diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a u xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx xxxx xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí nutnost, xxxxxxx se x x skupiny s xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx od xxxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx na xxxxxxxx jednotlivých zvířat, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro skupiny xxxxx dávek x xxxxxxx:
- vzhled xxxx, xxxxx x xxxxxxx u jednotlivých xxxxxx,
- proteiny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- kvantitativně).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx biochemická měření xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx vedle toho xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx a jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx funkci jater (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx transpeptidázy, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx na xxxxx,
- xxxxx na xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx močoviny x xxxx.
1) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx známá xxxx xxxxxx xxxxxxxx aminotransferáza
1.2.3.5 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx provede x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx během xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx utracením xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx xxxxxx xxxx léze, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx. Xxxx xx xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx následujících xxxxxx x xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, mozečkové xxxx, xxxx mozkové), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x příštítných xxxxxxx, thymu, trachey x plic, srdce, xxxxx, xxxxxxxx žláz, xxxxx3), sleziny, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, žaludku, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, ilea, xxxxxxx střeva, tračníku, xxxxxxxxx, močového měchýře, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, svaloviny, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx a xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, a xxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx cestou xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x hrtanu.
Xxxx-xx provedena xxxx xxxxxxxx vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx by měly xxx x dispozici xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx xxxxxxx x xx skupinu x xxxxxxxx x ze xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx tělísky) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxx léze xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(x) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx popisem xxxxx lézí xxxxxxxxxx:
1. u xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
2. x všech xxxxxx xx skupiny s xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx způsobené xxxx xxxxxxxxxxxxx způsobené xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx ve xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx xxxxxxx, skupina s xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx,
(d) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx x použitém xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx pozorovaných x xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx x procento xxxxxx vykazujících xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx uznávané xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: popis xxxxxxxxxxx zařízení včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje vzduchu, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, kde je xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. standardní xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx inhalační aparatury xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx)
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx
(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx zóně
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx to relevantní)
- dávkové úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) a xxxxxxxxxxx
- xxxxx o xxxxxxx odpovědi podle xxxxxxx x dávky
- xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxx
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxx
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx
- xxxx x xxxxxxxx potravy x tělesné xxxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx
- xxxxx klinické xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X XXXXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx koncentracích xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx každou skupinu, xxxxxxx v xxx xxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx je xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxx embryo- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx metody
1.2.1 Příprava
Xxxxx, xxxxxxx samice, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, stejného xxxx x xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx aspoň 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxxxxx samci x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx přirozenou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx podávána samicím xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx během xxxxxx organogeneze. Xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
Xxxxx xxxxxxxxxxx druhy jsou xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxxx. Preferovanými xxxxx jsou xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xxx u xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxx jednotlivě.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx dávku je xxxxx xxxxxx aspoň 20 xxxxxxx potkanů, xxxx nebo xxxxxx xxxx 12 březích xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx studované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx dostatečný počet xxxx a xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx aspoň tři xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, že xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx i xxxxxxx, xxxxx bylo podáno xxxxxxx vehikulum. Xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx xxx teratogenní xxx xxx vliv xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx zvířaty v xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx fyzikálně xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx, ale už xx xxxx jak 10 % xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx voleny xxx, xxx xxxx geometricky xxxxxxxxx mezi xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
V xxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxx toxicitou xxx dávce xxxxxxx 1000 xx.xx-1 prokazatelně xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx testu xx xxx, kdy xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zátka x/xxxx xxxxxxx (pokud xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xx měla xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx toto období xx xxxxx xxxxxxxxx 6. xx 15. xxx x xxxxxxx x myši, 6. xx 14. xxx x xxxxxx a 6. xx 18. xxx u králíka. X xxxxxxx, xx xx xx xxxxx xxx považován xxx, xxx bylo pozorováno xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xxxxx inseminace, xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx. Podle xxxx xxxxxxxxxxx končí xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Každý xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x opatření xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxxx orálně xxxxxx, xxxxx xx stejnou xxxx.
Xxxxxxxxxx samicím xx testovaná xxxxx xxxxxx denně xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx na xxxx xxxxx na počátku xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vážení. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx ihned xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, stupně x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx potratu xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx do xxxx xxxxxxxxx jeden xxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx období xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx změny xxxx x xxxxx, xxx x sliznic, dále xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxx xxxxx je třeba xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
Pokud xxxxx x xxxxxxx během xxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx x samic xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx morfologické xxxxxxxxx xxxx patologické xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx smrti xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx počet xxxxxxx tělísek. Xx xxxxx určit xxxxxxx xxxxxxx x zaznamenat xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xx xxxxx jednotlivě xxxxx xxxxxxxx xxxxx zárodek. X xxxxxxx, xxxx x křečků je xxxxx vyšetřit kosterní xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx je třeba xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pitvou z xxxxxxxx xxxxxxxx vnitřností x xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx formě xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx, která xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx abnormit x xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxx. Výsledky xx xxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Je možno xxxxxx jakékoliv uznávané xxxxxxxxxxx metody.
3. ZPRÁVA
3.1. Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x testu xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxx, kmen, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- dávky (xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx xxxxxx (pokud xx xxxx xxxxx xxxxxxxx),
- dobu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx konce xxxxx,
- údaje x xxxxxxx hmotnosti x xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx (včetně historických xxxxx),
- údaje x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, defekty xxxxxxx x měkkých xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx vrzích (xxxx/xxxxx xxxxx, pohlaví, defekty xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx obvykle xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx cestou, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx dávka na xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx zvířata xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx projevů xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nejméně xxx xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxx xxxxxx zvířata náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx skupin.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Používají se xxxxxx xxxxx xxxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx po odstavení xxxxxx. Na začátku xxxxxx by xxxxx xxx xxxxxx ve xxxx zvířat činit xxxx xxx ± 20 % od xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx stejný xxxx a kmen x obou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 samic x 50 xxxxx) xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx průběžné xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx před koncem xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx jinými xxxxxx xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx růstem, vývojem x délkou života xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx by neměla xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx dávku/dávky xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxx x xxxxxx dávkou.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx toxicity.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Je-li xxxxx podávána x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx potravy, xxxx xx xxx xxxxx x dispozici.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako jsou xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx orální xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx vehikulu.
1.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx orální, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx podání xxxxxx xx fyzikálních x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Orální studie
Xxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx vstřebává x gastrointestinálního xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x cest, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx tomu nějaké xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, rozpuštěnu x pitné xxxx xxxx podanou x xxxxxxx.
Xxxxxxx by xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx dnů x týdnu může xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" příznaky x období xxx xxxxxxxx, a tudíž xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx hodnocení. Nicméně, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx aspekty, xxxxxxxxx pětkrát týdně xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx studie
Xxxxxxxx přímo xx xxxx xxxx být xxxxxxx jako simulace xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx kožního poškození.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx aplikace, xxxx xxx uvedeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx podání. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace může xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx specifických situacích.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx lidské xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx obvykle exponováno xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx v xxxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxx x prostředí, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx dní x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x přibližně jednou xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx denně ve xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx x pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx případech xxxx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Hlavní xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x stálou xxxxxxxx xx v tom, xx x první xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxx obdobím xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx expozici, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Nicméně, xx xxxxx vzít x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Například, výhody xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx zevního xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxx nutnosti xxxx x xxxxxx během xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace xxx x xxxxxxx monitorování.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Zvířata xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx dynamický xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn vzduchu xx xxxxxx, aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx všech xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Uvnitř xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx podtlak x tím xx xxxxx xxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx shlukování xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) Xxxxxx xxxxxxx: rychlost xxxxxxx xxxxxxx komorou xx měla xxx xxxxxxx kontrolována xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxx: během xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % střední xxxxxxx.
(x) Teplota a xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 °C x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx je voda xxxxxxxxx k rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx by měly xxx kontrolovány xxxxxxxx.
(x) Xxxxxx velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité testovací xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx odebírají x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro distribuci xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx gravimetricky xxxxxxxxx celému suspendovanému xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx část aerosolu xxxx respirabilní. Analýza xxxxxxxxx částic xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx tak často, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx exponována.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Trvání testu xxxxxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx normální xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx test. Xxxx xx xxx být xxxxxxx x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x 24 měsících u xxxxxxx. Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx doba xxxxxxxx xx měla být 24 měsíců xxx xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx přežívajících x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx testu, ve xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl xxxxxxxx, xxxxx pohlaví xx xxxxxxxx xxxxxx. Tam, xxx uhyne xxxxxxxxx xxx skupina s xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx to xxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxx testu, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x důsledku chyb xxxxxxx) v xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x myší x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx je nutná, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy tkání xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x mortalita by xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx vývoji xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, rozměry, vzhled x xxxxxxxx každého xxxxxxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x vody xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx se zaznamenávají xxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx týdně xxxxx prvních 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx jednou xx xxxxx týdny xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stavu xxxxxx xxxxx studia, je xxxxx xxxxxxxx diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xx 12 xxxxxx, xx 18 měsíců x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx nátěr ze xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx ve vzorcích xx zvířat ve xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx tato xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx utracením, xxxx xxxxx z xxxxxxxxx patologických xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx i x skupiny x xxxxxx nejblíže xxxxx, xxx je vysoká xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, protože xx nemocná. Všechny xxxxxxxxx tumory xxxx xxxx, xxxx léze, xxxxx by xxxxx xxx tumory, xx xxxxx xxxxxxx.
Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx: xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, mozečkové xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x příštítná xxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxxxx x plíce, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, slezina, xxxxxxx, nadledviny, pankreas, xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, kůže, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, ileum, xxxxx xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, svalovina xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx kost xxxxxx kloubu, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x bederní) x xxx.
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Naplnění plic x xxxxxxxxxxx studiích xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx studiích xx xxx být xxxxxxx xxxx respirační xxxxx včetně xxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
1.3.2.3 Histopatologické xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x nevyšší xxxxxx.
(b) Všechny xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x léze, xxxxx xxxx xxxxxxxxx jako xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx.
(c) Xx-xx xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se provede x xxxxx xxxxxx xx xxxxx i x xxxxxxx skupinách.
(x) Je-li přežití xx skupině x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx zkoumána x skupina s xxxxxxxxx xxxxx dávkou.
(x) Xx-xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx sumarizují xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné během xxxxx, doba xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxx utracení. Xxxxxxxx xx hodnotí odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, zdroj, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,
- xxxxxxxx testu: Xxxxx expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, zneškodňování xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx pro měření xxxxxxx, xxxxxxxx, a xxx, kde xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x měly xx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx zařízení,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(c) xxxxxxxxx koncentrace (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(d) xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx,
(x) mediány velikosti xxxxxx (xxx xxx xx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, dávky a xxxx xxxxxx,
- xxxx úmrtí xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx přežila až xx xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx,
- popis xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- data x spotřebě potravy x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx,
- nálezy patologicko-anatomické,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx metod,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.33. XXXXXXXXXXX XXXX CHRONICKÉ XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Cílem xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x karcinogenní xxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxx účel xx xxxx karcinogenity xxxxxxx alespoň xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinou x kontrolní satelitní xxxxxxxx. Dávka použitá xxx tuto xxxxxxxxx xxxxxxx může být xxxxx xxx nejvyšší xxxxx použitá xxx xxxxx karcinogenity. Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxx toxicitu, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx toxicitu.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx dní x xxxxx, vhodnou xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Během x xx expozici xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx denně pozorována xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity a xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx pět xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx testem xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx kontrolních a xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxxxxxxx studií xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx chovaných xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx nejdříve xx xxxxxxxxx mláďat. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx váze xxxxxx xxxxx více než ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx orální xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x obou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xx každou xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx (skupiny) pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx tumory, xx každá měla xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx satelitní skupina xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Pro xxxx xxxxxxxxxxxxx xx zvolí xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx růstem, xxxxxxx x délkou života xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Střední xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx vysokou x xxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx úrovní xx xx xxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Vysoká xxxxx xxx exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx zřetelné příznaky xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx denně. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx přimíšena xx xxxxxxx, xxxx xx xxx stále x xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx v každém xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx inhalační xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx podání xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx jedna z xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx aplikaci, xxxxx xxxxxx proti tomu xxxxxx důvody. Xxxxxxx xxxxx dostat testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx nebo podanou x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx podávat sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx dávkování xxx xxx v xxxxx xxxx xxxx k xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v období xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, především x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, dávkování xxxxxxx xxxxx xx považováno xx přijatelné.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Aplikace přímo xx xxxx xxxx xxx zvolena jako xxxxxxxx xxxxxx cesty xxxxxx x xxxxxxx x jako modelový xxxxxx vyvolání xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Inhalační xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx způsoby xxxxxxxx, jsou zde xxxxxxx podrobněji xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx po ustálení xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx xxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx expozice), xxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx dní x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx x xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx v xxxxx má zvíře 17 - 18 xxxxx xx ústup xxxxxx xxxxx expozice x xxxxx xxxxxx xxxxxxx během víkendu.
Xxxxx přerušované xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx simulována. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx obtíže. Xxxxxxxxx xxxxxx kontinuální xxxxxxxx xxx simulaci podmínek xxxxxxx prostředí xxxxx xxx narušeny xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x technik xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx za hodinu, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x rovnoměrná distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx a xxx xx brání úniku xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaných xxxxxx. Xxxxxx by v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:
(x) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx denní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx než ± 15 % střední xxxxxxx,
(c) xxxxxxx x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx být udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °C x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx parametry xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx zvíře. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx z dýchací xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx by xxx xxx reprezentativní pro xxxxxxxxxx částic, kterým xx zvíře xxxxxxxxxx, x měl by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část xxxxxxxx není respirabilní. Xxxxxxx velikosti částic xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Trvání xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx normální xxxx xxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx xx xxx xxx ukončen x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x 24 xxxxxxxx x potkanů. Xxxxxxx xxx xxxxxxx kmeny xxxxxx x delší xxxxx xxxxxx xxxx. x nízkým xxxxxxxxxx xxxxxxxx tumorů, doba xxxxxxxx xx měla xxx 24 měsíců xxx xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx takové xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, když xxxxx xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx xxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx testu, xx kterém je xxxxxxxx sexuální xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx posuzuje zvlášť. Xxx, kde xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x vysokou dávkou xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx vést x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx větší xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 50 % v 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x v 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity by xxxx být x xxxxxx aspoň 12 xxxxxx. U xxxxxx xxxxxx xx mělo xxx plánováno xxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, která xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stárnutí.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování.
U xxxxxx exponované satelitní xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vyšetření.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ze studie xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx chyb x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xx xxxx xxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx x mortalita xx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx vývoji tumorů: xxxx objevení, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, vzhled x xxxxxxxx každého xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx tam, kde xx testovaná látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx zdravotní xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx frekvence xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx individuálně x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx po xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, celkový xxxxx bílých xxxxxxx, xxxxxxxx destiček nebo xxxxx měření srážlivosti) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, šest xxxxxx x xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x na xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx z xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx to xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx být xx xxxxx xxxxxxx.
Pokud xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx svědčí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stavu xxxxxx během xxxxxx, xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Diferenciál má xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx ze xxxxxx xx skupině x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx nebo xxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x u xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, než xx vysoká dávka.
1.3.2.2 Xxxxxxx moči
Xxxxxx xxxx od 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx sbírají xxx xxxxxxx xxxxx možno xx stejných xxxxxx x ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Následující xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď xx vzorcích xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx vzorku pro xxxxxxx xxxxx xxxxx x pohlaví:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x hustota x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx krvácení (semi-kvantitativně),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Biochemické xxxxxxxxx
X přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx závěr jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Od nehlodavců xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx před xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:
- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx funkci xxxxx (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita glutamát xxxxxxx transaminázy1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- metabolismus xxxxx, např. xxxxxx xxxxxxx na xxxxx,
- xxxxx na xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx močoviny x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx známá jako xxxxxx xxxxxxxx aminotransferáza
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx pitva xx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx všech xxxxxx pro diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx léze, xxxxxx nebo xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx. Mělo xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.
Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx kory, xxxx xxxxxxx), podvěsku mozkového, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x plic, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), nadledvinek3), jícnu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, močového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, gonád3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, periferního nervu, xxxxx (krční, xxxxxx x bederní), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x stehenní xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Naplnění xxxx x xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx konzervaci xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie, xx xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, hltanu x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx klinická xxxxxxxxx, xxxxxxxxx získané x xxxxxx xxxxxxxx by xxxx být x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx na xxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxx.
1.3.2.5 Histopatologie
Xxxxxxxx vyšetření se xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxx orgánech xxxxx xxxxxx satelitní xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx x satelitní skupině xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxxxxxxx xxxxxx, vyšetří xx histologicky cílové xxxxxx všech xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin x ze xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx jejím ukončení.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
(x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx provede x xxxxxxxx x tkáních xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x s xxxxxxx xxxxxx;
(x) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx;
(x) je-li xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx skupinou x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, histopatologické xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx;
(x) je-li přežití xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx by xxx kompletně xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
(x) xx-xx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxxxxxx odpověď, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx sumarizují ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, dobu xxxxxx xxxxxxxxx a počet xxxxxx x xxxxxx xxx utracení. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx statistické metody.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- podmínky xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatná xxxxxxxx) by xxxx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx vstupující xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vzduchu),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(e) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- data xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví, xxxxx x xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx do xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- výskyt xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxx x xxxxx ,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- xxxx x spotřebě potravy x tělesné xxxxxxxxx,
- oftalmologické nálezy,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx,
- testy xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (včetně výsledků xxxxxxx moči),
- xxxxxx patologicko-anatomické,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem použitých xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.34. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx dostávají xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx růstu a xxxxxxx x průběhu xxxxxxx úplného spermatogenního xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x myší x 70 xxx x potkanů), xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek testované xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx alespoň xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx připouštění xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x kojení xxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x exponované xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx chována xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x těch xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx x pitné xxxx. Xxxx způsoby xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Všechna xxxxxxx xxxxx dostávají xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx účinky. Xxxxx se aplikuje 7 dní x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxx
Dává xx xxxxxxxx potkanům xxxx xxxxx. Používají xx zdravá zvířata, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx x/xxxx xxxx. Plodnost xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x obou skupinách, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxx xxx odstavena xxxx zahájením xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx samic x xxxxxxxxx stejným termínem xxxxxx. Xxxxx je xxxxxx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vlivu xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx F1 xx xxxxxx do xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx testu
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxx. Před xxxxxxx xx xxxxxxx samice xxxxxxxx xx zvláštních xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a je xxx xxxxxxxxx materiál xxx vytvoření xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx tři xxxxxxxxxx xxxxxxx x jedna xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x nejvyšším xxxxxxxx xxxxxx. Pokud testovaná xxxxx snižuje xxxxxx x xxxxxxx potravy, xx xxxxx uvážit xxxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx co xx xxxxxx.
Testovaná xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo povahou xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Střední xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx xx daly xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx vyvolávat žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx u rodičů xxx x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx dávka xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete a xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx podle změny xxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx být případně xxxxxx na základě xxxxxxx xxxxxxxxx v 0. xxxx 6. xxx od začátku xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx, xxxxx se ani xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxxx studie xxxxx, xx xxxxxx dávka, xxxxxxxxxxxx x matek xxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx plodnost, xxxx xxxxx provádět xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Xxxx pokusu
Xxxxx xxxxxxxx samcům xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxx xxxx xx devíti xxxxx, xx nejméně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx odstavení. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx deset xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx se xxx xxxxxx x xxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx pak xxxxxxxx x vyšetřeni xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxxxxxxx aklimatizaci a xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx aplikace xxxxxxxxx xxx po xxxx xxx xxxxx xxxxxx připouštění, x xxxx gravidity xx xx xxxxxxxxx F1 xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx dávkovacího xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx bioakumulaci.
1.3.2 Xxxxxx xxx připouštění
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
X případě 1 : 1 párování, xxxxxx xx xxxxxxx x týmž xxxxxx xx společné xxxxx xx xxxxxxxxxx anebo xx dobu 3 xxxxx. Xxxxx ráno xxxx xxxxxx vyšetřeny xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxx nálezu vaginální xxxxx nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxx, x kterých xxxxxxx k oplodnění, xx xxxxx vyšetřit x cílem zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx páru. Xx xx xxxxx xxx poskytnutím xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx jedinci xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx možnost porodit xxxxxxxx x pečovat x xxx xxxxxxxxx xx okamžiku xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx standardizuje, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx porodu xx velikost xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx se xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 samic xx vrh; xxxxx xx není xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx standardizovat xx jiné xxxxx, xxxx. 5 xxxxx x 3 samice. Xxxx xxxxx než 8 nelze xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou xx xxx. Významné xxxxx xxxxxxx, příznaky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx potravy denně. Xx porodu x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx příjem xxxxxxx (a xxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxx v pitné xxxx) ve stejný xxx, xxx je xxxxxxxxx váženo. Xxxxxxxxxx X xxxxxxx se xxxx xxxxx den xxxxxxxx a xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx zaznamenávají individuálně xxx každé dospělé xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0 těhotenství. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx utracená xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx pro vyšetření xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx xxxxx xxxx xx porodu, xx 4. x 7. dnu x xxxxx xxxxx xxxxx xx ukončení xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx abnormality x xxxxxxx x fyzickém xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx
1.3.5.1 Xxxxx
Xx utracení xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx vyšetří xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx anebo xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx vyšetří xx defekty.
1.3.5.2 Histopatologická xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, vagina, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, prostata, xxxxxxxx a cílové xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx, xx tyto xxxxxx xxxxxx doposud xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku x xxxx x xxxxxx, která xxxxxxx x xxxxxxx pokusu.
Xxxxxx, xxxxx jevily xxxxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx x x X zvířat ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx makroskopicky postižené. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx podezřelých x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. XXXXX
Data xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, počet těhotných xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky mají xxx statisticky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Zpráva o xxxxxxxxxxx xx měla xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx zvířat,
- xxxxx x xxxxxxx odezvě x xxxxxxxxxx xx dávce x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gestace x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx xxxxxx nebo xxx zvířata xxxxxxx xx xxxxxxxx pokusu,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx každého xxxx, xxxxxxxxx hmotnost jednotlivých xxxxxx x konečnou xxxxxxxxxxxx hmotnost xxxxxxx,
- xxxxxxx x xxxxx účinky xx xxxxxxxxxx, potomstvo a xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, kdy byly xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx hmotnost xxxxxx X xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx, xxxxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.35. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx podává několika xxxxxxxx xxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx cyklu (xxxxxxxxx 56 dnů x xxxx x 70 xxx u xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxxxxx.
Samice xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx dvou xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx účinek testovací xxxxx xx estrus.
Xxxxxxx xxxx poté xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podává xxxxxxxx xxxx pohlaví x xxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x kojení, xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx F1 x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx a až xx xxxx xxxxxxxxx X2 xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx testovací metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx - kontrolní x xxxxxxxxxx skupiny. Rodičovská xxxxxxx (P) xxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx podání xxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx dostávají xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx testu. Xxxxx xx používá x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxx 7 xxx x týdnu.
1.2.2 Pokusná xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx P zvířata, xx té xxxx xxxxxxxxx pro jiné xxxxxxxxxxx. Nepoužívá xx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx. Xxxx být xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx co xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxx xxxx xxxx. Plodnost xxxx být ověřena x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Počet x xxxxxxx
Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx porodu. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, a tím xxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnocení xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx, xxxx a xxxxx xxxxxxxxx generace X1 od xxxxxx xx dospělosti, a xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx F2 xx xx xxxxxxxxx.
1.2.4 Podmínky xxxxx
Vodu x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx přemístí do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx, xxx zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Pokud xxxxxxxxx látka snižuje xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx do výživy.
Xxxxxxxxx látka x xxxxxxxx koncentraci xx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx to dovolí xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x nikoli mortalitu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx účinky, které xx xx daly xxxxxxx testované látce, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, ani x xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.
Při xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxx x přizpůsobuje xx xxxxx týden xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx určeny xx xxxxxxx xxxxxxx hmotnosti x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
V případě xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, pokud xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxxx studie na xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Xxxxx předběžná xxxxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx jasnou xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx účinky na xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Plán xxxxxx
Denní xxxxxxxx xxxxxx rodičovské xxxxxxxx X xxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxxx týdnů, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx odstavení. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx týdnů xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx myši). Xxxxx xx xxx xxxxxx x vyšetří xx xxxxx období xxxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxx případnou produkci xxxxxxx vrhů a xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx někdy xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx rodičovské xxxxxxxx X xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x pokračuje xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxx připouštění. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx celé xxx xxxxx období připouštění, x době xxxxxxxxx xx xx odstavení X1 xxxxxxxxx. Je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx, např. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx resp. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxxxx x končí xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Postup při xxxxxxxxxxx
Je možno xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx ke xxxxx xxxxxxx).
V xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxx ve společné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx po dobu 3 týdnů. Xxxxx xxxx jsou samice xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx xx definován xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxxxxxxx xxx připouštění xx xxxx 11 xxxxx u myší x 13 xxxxx x xxxxxxx. Pro xxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxxx X1 xx náhodně xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxx téže xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx.
Dvojice, x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, je xxxxx vyšetřit x xxxxx xxxxxxx důvod xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx možné buď xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nebo mikroskopickým xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx orgánů xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Zvířatům xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ponechána xxxxxxx porodit xxxxxxxx x xxxxxxx o xxx xxxxxxxxx do xxxxxxxx odstavení bez xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. dnem xx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx a 4 samic xx xxx; xxxxx to xxxx xxxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx počty, např. 5 samců x 3 samice. Vrhy xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Standardizace xxxx xxxxxxxx F2 xx provede xxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx se měří xxxxx xxx před, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Během gravidity xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx denně. Xx xxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx váženo. Xxxxxxxxxx X x X1 xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxx týdně. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zvíře.
Xxxx gestace xx xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx po porodu xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx mláďat, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx anomálií.
Mrtvá xxxxxxx a mláďata xxxxxxxx ve xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx spočítají x celé vrhy xx xxxxx ráno xx xxxxxx, ve 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx týden xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v chování x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x potomstva.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Pitva
Všechna xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X a X1 xx xxxxxxxx, jakmile xxxx xxxxx je xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx. Zvířata xxxxxxxx X1 xxxxxxxxx xxx připouštění x xxxxxxx zvířata xxxxxxxx X2 se utratí xx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx nebo úmrtí xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X x X1 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx strukturní abnormality xxxxx xxxxxxxxxxx změny, xx xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Vaječníky, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, hypofýza x xxxxx cílové xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx X x X1 xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X případě, že xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx X x F1 xxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxx dostávající xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx vybrána pro xxxxxxxxxxx, x xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx v průběhu xxxxxx. Orgány, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx zvířat, xx vyšetří i x xxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx xxx bylo xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx podezřelých x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zpracovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Může xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx statistická xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxx:
- xxxx/xxxx použitých xxxxxx,
- xxxxx x toxické odezvě x xxxxxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx,
- dobu xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx,
- tabulka xxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x individuální xxxxxxxx xxxxxxx před xxxxxxxxx,
- toxické a xxxxx účinky xx xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx růst,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxx xxxxxxxx zvířat X a X1 xxxxxxxx, vybraných xxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx údajů, xxxxx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.36. TOXIKOKINETIKA
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vhodnou cestou. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx stanovené xxxx, jedné xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx jsou xxx xxxxx účelu xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x "neznačenou" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx látky. Jestliže xx použito xxxxxxx, xxxxxx se xxx, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nejméně po xxxx xxxx xxx xxxx testováním. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx náhodně rozdělena xx skupin. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Toxikokinetické xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx více xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xx druzích xxxxxxxxx xxxx uvažovaných xxx užití x xxxxxx toxikologických studiích xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx používáni xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx variabilita xxxxxxxxx xxxxx než ± 20 % průměrné xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx nejprve 4 xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx určitému xxxxxxx, xxx za xxxxxxxx podmínek xxxx xxxxxxxxx potřeba xxxxxxxx xxxxxx na obou xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx odpovědi x xxxxxxx pohlaví, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx ostatních xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxx xxxxxxxx) xx možné xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
Xx-xx studována xxxxxxx distribuce, xxx xxx určení počáteční xxxxxxxxx skupiny zvířat xx xxxxx xxxx x xxxxx jak xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, v xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx skupiny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Zahrnuje-li xxxxxx větší xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx skupiny zvířat xx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxx 2 xxxxxxx. Velikost xxxxxxx zvířat xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx to, xxx xxx látku xxxx. xxxx xxxxxxxxxx poskytla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podání by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx by to xxx xxxxx dávka xxxxx, xx které xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolává toxické xxxxxx.
X případě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dávek látky. Xx určitých xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx studie by xxxx xxx prováděny xxxxxxx xxxxxxxx aplikace x xx-xx to xxxxxx x xx xxxxxxx vehikulem tak, xxx jsou xxxxxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávána xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx, nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx testované látky xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx relativního xxxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx aplikace. Xxxxx xxxxxx po intravenózní xxxxxxxx xxxxx mohou xxx získány xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx rozdílům xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx, xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx sondou xxxx x potravě, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávky, zvláště xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx sledování
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx sledována denně x příznaky xxxxxxxx x další xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x údaji x jejich xxxxxxx, xxxxxxxxx x trvání.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx testovaná látka xxxxxx xxxxxxxx přiměřeným xxxxx. Xx zdůvodněných xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx zvířata xxxx xxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx.
1.3.1 Absorpce
Ke xxxxxxxxx rychlosti x xxxxxxx absorpce xxxxxxxx xxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx1), x xx např.:
- xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, žluči, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx jejích xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) xxxx testovanou x xxxxxxxxx x xxxxxxxx referenční skupinou,
- xxxxxxxxx množství xxxxx resp. xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx x případně xxxxxxxxxx skupinou,
- xxxxxxxxx plochy xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx a xx. jejích metabolitů x plazmě na xxxx a porovnání x daty xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1) X této xxxxxx se referenční xxxxxxxx xxxxxx xx, xx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, z xxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx oba:
- xxx xxxxxxx celkotělové xxxxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx xxx, stolice, xxxxxxxxxxx vzduch, v xxxxxxxx xxxxxxxxx žluč. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx xx v xxxxxx xxxxxxxxx stanovuje xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, x xx xxx xx xxxxxxxxx 95 % z xxxxxxxx množství xxxx xxxxxxx 7 xxx xx xxxxxxx vylučování.
Xx xxxxxxxxxxx případech xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx také vylučování xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, kde xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických xxxxxx. Xxx získání xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx mezi metabolismem x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxx studií xxxx. xxxxxxx účinků látky xx xxxxxx metabolického xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx sloučenin xxxxxxxxxxxx - SH xxxxxxx x nebo xxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v tabulkách, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x charakteristiky xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxx, xxxxx, xxxxx x orgánům (xxxxx xx to relevantní). Xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx struktura xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx typu xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, životní xxxxxxxx, xxxxxx,
- charakteristika xxxxxxxxx materiálu, jestliže xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx dávky a xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx(x) xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx x x xxxxxxx pozorované xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx v biologickém xxxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx rozdělené podle xxxxxxx, dávky, xxxxxx, xxxx, xxxxx a xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx x závislosti xx čase,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx týkající xx xxxxxxxxxxx,
- navrhované xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- interpretaci xxxxxxxx.
X.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx specifický xxx xxxxxxxxxxxxx, který xxxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx studiích toxicity. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx vitro xxxxx xxx použity xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx elektricky neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, thiofosfonových xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
Pozdní xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, distální xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x nervové tkáni.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Referenční xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupině x xxxxxxx, xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx druhů xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (XXXX).
1.4 Xxxxxxx testovací metody
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx před možnými xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx se xx xxxx 21 xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx chování, xxxxxx x paréza. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx XXX, xx provádí x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, obvykle 24 x 48 xxxxx xx xxxxxx xxxxx. 21 dnů po xxxxxx látky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření vybraných xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx zdravé xxxxxxx xxxxxxx bez interferujících xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx náhodně xxxxxxx xx experimentální x xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx chovu a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx xxxxxx umožňující volný xxxxx xxxxxx x xxxxxx pozorování xxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxx sondou, xxxxxxxxxxxx tobolkami nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx nebo rozpuštěné xx vhodném xxxxxxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx rozpustit, xxxxx xxxxx dávky xxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx by xx nemusely dostatečně xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx mladá xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx domesticus) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx testovací xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.
X xxxxx skupině xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx aspoň xxxx x nich xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx třech prvý x xxxxx xxx xx xxxxxx) a xxxx přežilo 21denní xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx souběžně xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupina z xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxx xxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx látka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx biochemii x xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx se x provádějící xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxx testu (xxxx. xxxxxxx, potrava, xxxxxxxx xxxxx).
1.6.1.3 Volba xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxx předběžná xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx stanovit xxxxxx, xxxxx bude xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Určitá xxxxxxxx xx x této xxxxxxxxx xxxxxx nezbytná xxx stanovení xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx úmrtí pro xxxxxx xxxxxxxxxxx účinky, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx s pozdními xxxxxxxxxxxxxx účinky. K xxxxxx xxxxxxxxx neletální xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být použito xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (viz metoda B.1 bis). Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxx xxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studii by xxxx být xx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxx x výsledkům xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Případné xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx (xxxx) a xx 21 dnech xxx histologii (xxxx). Xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, xx neinterferuje x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx x dávkou xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, za xxxxxxx postupů xxxxxxxxx xxx tuto studii, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xxxxx údajů x látek x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx očekávat, xxx xxxx třeba xxxxxxxx o studii x xxxxxxx vyšší xxxxx. Xxxxxxx test xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx naznačuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx dávky.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx je 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx postupu
Xx xxxxxxxx prostředku, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx podána x jediné xxxxx.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx začít okamžitě xx podání xxxxx. Xxxxxxx slepice xx xxxxxxx pozorují xxxxxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxx xxx x xxx xxxxx jednou xxxxx xx dobu 21 xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Veškeré xxxxxxxx toxicity se xxxxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxx, xxxx, stupně x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx čtyřstupňové xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se paréza. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx a xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx jako xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Všechny xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx aspoň jednou xxxxx.
1.6.2.3 Biochemie
Šest xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x každé testované x kontrolní xxxxxxx x vehikulem a xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx skupina xxxxxxx) xx xxxxxx x xxxxxxx dnech xx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx vyjmou xxxxx x lumbální xxxxx. Xx vhodné vypreparovat xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx na inhibici XXX. Běžně xx xxxxxxxx xxx slepice x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 hodinách x xxxxx tři xx 48 hodinách, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx pozorování klinických xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (hodnotí xx nástup cholinergních xxxxxxxx), pak xx xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx dvakrát xx xxx xxxxxx, a xx mezi 24 xx 72 xxxxxxxx xx podání látky.
X těchto xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx může xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, což může xxxx x xxxxxxxxx xxxxx jako inhibitoru XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx x xxxxx zvířat (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Nervová tkáň x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx in xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx - řezy xxxxx xx provádějí x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x lumbosakrální, z xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx distální část x x. xxxxxxxx (x xxxx větve x m. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Řezy se xxxxx xxxxxxxxxxxx barvivy xx myelin x xxxxx.
2. XXXX A XXXXXX XXXXX
Negativní xxxxxxxx x účincích xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx) běžně xxxxxxxxxx další xxxxxxxxx xx xxxxxx neurotoxicitu. Xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx mohou vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx zvířata. Údaje xx xxxx xxxxxxx xx tabulky. X xx musí být xxx každou experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx chování nebo xxxxxxxxxxx účinky, typy x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x procento xxxxxx xxxxxxxxxxxx každý xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Výsledky xxxxxx se vyhodnotí x hlediska výskytu, xxxxxxxxxx x korelace xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx a obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx plánované studie.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxxxx zvířata:
- použité plemeno;
- počet a xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.;
- hmotnosti xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx studie.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x homogenitě xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- podrobné údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx dávek;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx o vehikulu, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupin xxxxxx úmrtnosti;
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx);
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů;
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Hodnocení x Interpretace
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX TG 418.
B.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX 28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Při xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx vzít x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx skupiny látek xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx fosforu byly xxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx testovány xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx vitro xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx vitro xxxxxx však xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Tento 28xxxxx test xxxxxx xxxxxxxxxxxxx poskytuje informace x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vznikajícím z xxxxxxx xxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx a xxxx poskytnout odhad xxxxxxx dávkových xxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné nepříznivé xxxxxx. Xxxx úroveň xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Definice
Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x názvu této xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" patří xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx u některých xxxxx xxxx skupiny.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx, distální xxxxxxxxxx, xxxxxxx x míše x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx inhibicí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Zvířata xxxx sledována xxxxxxx xxxxxx denně, zaznamenává xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx XXX, xx xxxxxxx u slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx skupiny 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nervových xxxxx.
1.4 Xxxxx xxxxxx testování
1.4.1 Xxxxxxxx
Mladé xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní skupiny. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx studie xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx velké klece xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Testovaná látka xx podává xxxxxx, xxxxx 7 xxx x týdnu, buď xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx srovnatelnou xxxxxxx. Tekutiny se xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,
jako xx xxxx. kukuřičný xxxx. Xxxxx se doporučuje xxxxxxxxx, xxxxx velké xxxxx pevných látek x želatinových tobolkách xx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx nosičů xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx před testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.4.2.1 Xxxxxxx zvířata
Doporučuje xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 až 12 měsíců. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx se xx xxxxxxxx, xxxxx dovolují xxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.
V xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx šest x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx x každém xx dvou časových xxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx expozice.
1.4.2.3 Xxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xx zvolí x xxxxxxxxxxxx ke xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx neurotoxicitu x x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx příznaky xxxxxx neurotoxicity, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx ani xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx zvolí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx umožní sledovat xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity.
1.4.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxx studii, xxxxxxxx xxxxx pozorované toxické xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx s xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx test se xxxxxxxxx, pokud expozice xxxxxxxxxxx xx u xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna zvířata xx pozorují xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx expozice x 14 dnů po xx, xxxx xx xxxxxxxx x do xxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxx xxx x xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx má xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxx xx 28 xxx x dalších 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, do xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx nemá xx xx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx podle nejméně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx slepice xxxxxx x klecí a xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx po žebříku, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx závažnými a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx, humánním xxxxxxxx utratit x xxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxx hmotnost
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx těsně xxxx xxxxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx x pak xxxxxxx jednou týdně.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx x prvních xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx NTE se xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx vypreparovat xxxx x. xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx jeho xxxx xx inhibici XXX. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx slepice x xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 hodinách x xxxxx tři xx 48 hodinách xx xxxxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studie xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx jiná xxxx usmrcení xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx spontánní xxxxxxxxxx XXxX, což xxxx vést x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Xxxxx
Xxxxx všech xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx špatný xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxx.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxx xxxx x přeživších xxxxxx (nepoužitých xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xx použití xxxxxxxxxx technik. Odebírá xx: mozeček (xxxxxxx xxxxxxx řez), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (řezy xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxx, střední xxxxxx x lumbosakrální), z xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx distální xxxx x x. xxxxxxxx (x xxxx větve x x. gastrocnemius) x x n. xxxxxxxxxxx. Řezy se xxxxx xxxxxxxxxxxx barvivy xx xxxxxx a xxxxx.
Nejprve xx xxxxxxx xxxxxxxx tkáně xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se najdou x xxxxxx skupiny x xxxxxxxx dávkou xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx vyšetření x na xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx dávku střední x nízkou.
2. SBĚR X ZÁZNAM XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx metodou (xxxxxxxxx, histopatologie a xxxxx chování) negativní, xxxxx xx neprovádí xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výsledky xxxxx vyžadovat další xxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxx sestaví do xxxxxxx. X xx xxxx být pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx zvířat xx počátku xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx těchto poškození xxxx xxxxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxx typ x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x korelaci xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx pozorovanými xxxx u testovaných x xxxxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou x xxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx v době xxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx xxxxx být získány:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx plemeno,
- xxxxx x stáří xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení atd.,
- hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxxx, stabilitě x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula,
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobné xxxxx x potravě x kvalitě xxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x vehikulu, objemu x fyzikální formě xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xxxx xxx 24 a 48 xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx xxxxxx úmrtnosti,
- xxxxxx xxx xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxx biochemických xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- podrobný xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx to možné.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Interpretace
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x metodou XXXX TG 419.
X.39. Test xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA x savčích jaterních xxxxxxx in xxxx
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX TG 486, Xxxxxxxxxxx XXX Xxxxxxxxx (XXX) Test With Xxxxxxxxx Liver Cells Xx Vivo (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx DNA xxxxxxxxx, XXX) v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx reparaci XXX x jaterních xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4).
Xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx pro zjišťování xxxxxxxxxxxxx xxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx buňkách x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx obvykle xxxxxxx xxxxxx metabolismu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx vivo.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxx.
Výsledek neplánované xxxxxxx DNA (UDS) xx xxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx značených xxxxxxxxxx x buňkách, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X-xxxx) xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx značený xxxxxxx (3X-XxX). Pro xxxxx XXX xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxx se xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxx bází DNA, xxx jsou v xxxxx poškození xxxxxxxxxx x nahrazeny. Proto xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) xx méně xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx replikace xxxx XXX. Rozsah xxxxxxxx XXX xxxxxx xxx x přesnosti xxxxxxx xxxxxxxx. Mimoto xx xxxxx, že xxxxxxx xxxx xxxx x XXX xxxxxxxx, ale xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx excizním xxxxxxxxxx xxxxxxxx. To, xx XXX xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxx: net xxxxxxx grain (XXX) xxxxx xxx určitá, xxxxxx stanovená xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx laboratoř xxxxxxxxxxx test.
Xxx xxxxxxx xxxxxx (NNG): xxxxxxxxxxxxx míra XXX xxxxxxxx buněk xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxx x jádře (NG) x průměrným xxxxxx xxx v xxxxxxxxxx (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx XXX se xxxxxxxxxxxx pro jednotlivé xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx x kultuře, x xxxxxxxxxxx kulturách xxxx.
Xxxxxxxxxxx syntéza XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): opravná xxxxxxx XXX po excizi x odstranění xxxxx XXX obsahujícího oblast xxxxxxxxx vyvolaného xxxxxxxxx xxxxxx xxxx fyzikálním xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxxxx buňkách xx xxxx indikuje xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx excizi x xxxxxxxxxx segmentu XXX xxxxxxxxxxxx oblast poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx vychází xxxxxxx x xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx XXX xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx nízkým xxxxxx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx tato xxxxxxxx xxxx xxx náchylná x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x X-xxxx, xxxx je xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Běžně xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx rozdíly xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a u xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx náhodně rozdělí xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí x xx xxxx xxxxxxxxx pěti xxx xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x xxx xxxx xxxxx umístěny.
1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v pevném xxxxx a xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx podáním xxxxxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx její xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo se xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx (xxxxxxxxx) prokazují, xx xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.
1.4.3 Podmínky xxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky a xxxxx s testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx se ne xxxxxx xxxxx rozpouštědlo, xxxx xxx xxxx xxxxxxx podpořeno údaji x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Doporučuje xx, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx použito vodné xxxxxxxxxxxx / vehikulum.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x negativní (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xx zvířaty xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx indukovat XXX při dávkách, xxx lze očekávat xxxxxx detekovatelné zvýšení xxx spontánní úroveň. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci xx xxxxxxxxx v dávkách xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx při pozitivní xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxx xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | CAS | XXXXXX |
odběr x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx v intervalu (12-16 hodin) | X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx možno xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx pozitivní kontroly xxxxx xxxxxx, než xx xxxxxxxx testovaná xxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx skupině xxxx xxx minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxx jedinci. Xxxxx existuje xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx jeden, xxxx xxx jedinci.
Xxxxx x době, xxx xx studie provádí, xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx pohlavími nejsou x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx testování xxxxx xx jednom xxxxxxx, xxxxxxx xx samcích. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx je xxxx například u xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx xxxxxxxxx odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx dvě xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx by se xxxxxxxx letální xxxxxx. Xxxxx dávka xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % dávky xxxxx.
Látky, jež x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nejsou x dispozici, je xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, pohlaví x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxx použijí x xxxxxx studii.
Xxxx xxxxxxxx dávku xxx xxxx definovat xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxx nebo xx xxxx dávkách x xxxxx xxx nevyvolává xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx úplná xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx může xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx vyšší xxxxx.
1.5.5 Aplikace látky
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. V odůvodněných xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx i xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxx vystavit xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx dá xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 ml/100 x hmotnosti xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx zdůvodněné. X xxxxxxxx dráždivých xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx vykazují xxx xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Příprava xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx buňky xx x pokusných xxxxxx zpracovávají xxxxxxx 12 - 16 xxxxx po xxxxxx xxxxx testované látky. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx xx xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx xx 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx zjevná. Xx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxx xxxxxx vzorků, xx-xx to odůvodněné xx xxxxxxx toxokinetických xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx in xxxx kolagenázou. Je xxxxx zajistit, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mohly xxxxxxxxx xx vhodnému xxxxxxx. Jaterní xxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxx kontroly xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Čerstvě xxxxxxxxx xxxxx jaterní xxxxx se po xxxxxxx dobu (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Po xxxxxxxx xx xxxxxx odstraní( xxxxx xx potom xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx nadbytek xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx snížila xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Xxxxx se xxx promyjí, xxxxxx x xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx "cold xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx do autoradiografické xxxxxx, exponují ve xxx (např. po xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, xxxxxx x počítají xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx jedince xx xxxxxxxx dva xxxx xxx preparáty.
1.5.8 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx obsahovat xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx možno XXX xxxxxxxxxx. Mikroskopicky se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxx se xxxx počítáním xxx xxxxxxxx. Vždy na xxxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx x každého xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 buněk; pokud xx buněk xxxx xxx 100 xx xxxxxxx jedince, xxxx xx xxx zdůvodněné. Xxx počítání xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x S-fázi, xxx xxxxx xxxxx v X-xxxx se xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx stupeň inkorporace 3X-XxX xx jader x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx podle depozice xxxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxx shrnou x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx jedince x xxxxxx xxxxx a xxx se xxxxxxx xxxxx počet "xxxxxxx xxxxx" (XXX) odečtením xxxxx XX xx xxxxx XX. Xxxxxxxx-xx xx "buňky x xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx.
Numerické xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xx statistické testy xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx zahrnují:
pozitivní | (I) xxxxxxx XXX xxx předem xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx dané laboratoře | |
xxxx | (II) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxx | |
negativní | (X) xxxxxxx XXX xx xxxxxx/xxx xxxxxx historického xxxxx x xxxxxxx | |
xxxx | (II) hodnoty XXX nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx. |
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat, xxx xxxxxxx, že xx xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx jedinci, vztah xxxxx - odpověď x xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx faktorem.
Většina xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx nebo problematické, x když se xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx xxxxxxxxx DNA, xxxxx xxx xxxxxxx neplánovanou xxxxxxxx XXX in xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních podmínek xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx XXX, xxx je tímto xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx dosáhne xxxxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx xxx určitou xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud je xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx skupiny.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx a negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx i xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx oběhu nebo xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (ppm) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxx schéma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx a kultivace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx připravených xxxxxxxxx x počet xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx analýzy,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, negativní nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx v xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx grains" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx provedeno,
- xxxxxx xxxxxxxx,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx,
- xxxxx "xxxxx x xxxxxx", byl-li xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x X-xxxx, xxx-xx stanoven,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxx X.39. byla xxxxxxx xxxxxxx předpisem č. 208/2001 Sb. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.40. XXXXXXX XXXXXX XX KŮŽI
1. METODA
1.1 XXXX
Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx alternativních xxxxx (Xxxxxxxx Xxxxxx xxx xxx Xxxxxxxxxx of Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, XXXXX, Xxxxx Research Xxxxxx, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) schválilo xxxxxxx vědecky validní xxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na xxxx: xxxx na xxxxxxxx xxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) x xxxx xxxxxxxxxxx modelu xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX prokázala, že xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozlišovat mezi xxxxxxx xxxxxxx leptajícími x neleptajícími xxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx způsobující xxxxx xxxxxxxxx xxxx X35, x ostatní xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, X34). Xx uveden xxxxx a postupy xxxx xxxxx; xxxxx xxxx xxxxx testy xxxxxx xx konkrétních xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxx uživatele.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx. 1.5.3.4 a 1.7.2.3.
1.4 PRINCIP XXXXXX - XXXX XXX XX KŮŽI POTKANA
Testovaný xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxx xx 24 hodin xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx utracených xxxxxxxx xxxxxxxx. Látky, xxxxx mají xxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx normální xxxxxxxxx x bariérové xxxxxx xxxxxx corneum.Tato schopnost xx xxxx jakožto xxxxxx xxxxxxxxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxx v xxx. (6)) je xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxx zařadit test xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx u xxxxxx xxxx chemických xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).
1.5 POPIS XXXXXX - XXXX TER XX KŮŽI XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx terčíků xxxx xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23denní) potkani, Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx nůžkami xx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx a xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxx omyjí xxxxxxxx otíráním x xxxxxx xx xxxxxx xx roztoku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx čtvrtý xxx xx xxxxxx omytí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx 3 dní xx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx než 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx terčíků xxxx
Xxxxxxx xx humánním xxxxxxxx xxxxxx, sejme xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x té xx xxxxxxx xxxxxxx přebytečný xxx. Xxxx se xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PTFE) xxxxxxx, x xx epidermální xxxxxxx x trubici. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx X-xxxxxxx, kterým se xxxx připne, x xxxxxxxxxx tkáň xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Gumový X-xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Popis xxxxxxx
1.5.3.1 Nanesení xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx uvnitř xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx terčík v xxxxxxx množství, aby xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx látky xx xxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx vody x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx s xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx látek toho xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 30 xX, aby xx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu na xxxxx xxxxxx. Použijí xx xxxx tři xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx. Látka se xxxxxx na xxxx 24 xxxxx (viz xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx vodovodní vody xxxxx maximálně 30 xX xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx ztuhla, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Xxxxxx TER
Transkutánní xxxxxxxxxx odpor (TER) xx xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxxxx impedančního xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. AIM 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx trubice otočí, x tkáň se xxxxxxxxx xxxxxxxxx tří xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx xxx xxxxxx kůže a xxxxx xx odpor x xΩ/xxxxxx (xxx. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx pod krokosvorkou xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (silné) xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxx navrch XXXX xxxxxxx xxx, xxx byla do xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx stejná xxxxx elektrody. Vnější (xxxxx) elektroda se xxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, aby xxxxxx xx dně. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx XXXX trubice (xxx. 1), xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx odporu.
Upozorňujeme, xx je-li naměřený xxxxx xxxxx xxx 20 xΩ, xxxx xx být xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx epidermální xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx možno se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx, xx xx XXXX xxxxxxx utěsní xxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxx 10 sekund xx protřepává, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx roztokem.
Průměrná xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx akceptována, xxxxx xxxxxxx xx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx přijatelných pro xxxx metodu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx tyto:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
10 – 25
|
1.5.3.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x neutrální xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, lze xx této xxxxx xxxxxxx hodnocení průniku (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxxxx, xxx xx nejedná x výsledky falešně xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Nanesení x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx prvotním xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (w/v) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x destilované xxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxx xx xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx nejvýše pokojovou xxxxxxx. Xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) barvivo. Každý xxxxxx xxxx se xxx opatrně sejme x XXXX xxxxxxx x uloží do xxxxxxx (xxxx. xx 20 xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx dobu 5 xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxxxx veškeré xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx vyjmou a xxxxx do xxxxxxx x 5 ml 30 % (w/v) xxxxxxx dodecylsulfátu xxxxxxx (XXX) x destilované xxxx, xxx xx xxxx xxx inkubují xxx xxxxxxx 60 xX. Xx inkubaci xx xxxxxxx vyjmou x zlikvidují x xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxx 8 minut při xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 ml xxxxxxxxxxxx xx pak xxxxx 30 % (w/v) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx denzita (XX) xxxxxxx se xxxx xxx xxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x xxxxxxx se xxxxxxxx z xxxxxxx XX (xxxxxxx extinkční xxxxxxxxxx sulforhodaminu B xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; molekulová hmotnost = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx kůže zvlášť x xxxxxxx se xxxxxxxx hodnota. Xxxxxxxx xxxxxxx navázaného barviva xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx rozsahu xxxx metody. Za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx u xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx uspořádání považují:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx barviva (mg/terčík)
|
|
Pozitivní
|
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx dobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx (xxxx. 2 xxxxxx) za xxxxxx xxxxxxxxx silně xxxxxxxxxxx látek. Xx xxxxxxxxxxx studii xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxx XXX přeceňuje xxxxxxx schopnosti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx terčíky xxxx xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx leptajících x xxxxxxxxxxxxx látek xx 24xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx TER mohou xxx ovlivněny xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx 5 kΩ xxxx xxxxxxxxx na základě xxxxx získaných xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxxx postupu xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx se zkušební xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx být xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx. Proto xx xxxxxxxxxx okalibrovat metodiku x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 PRINCIP XXXXXXXX XXXXXX - XXXX S MODELEM XXXXXX KŮŽE
Testovaný materiál xx nanáší topicky xx xxxx xx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, sestávající z xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx statum xxxxxxx. Xxxxxxxxx materiál se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx stanovené xxxxxxxxx xxxxxx "XXX xxxxxxxxx xxxxx" (MTT = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 difenyl tetrazolium xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx definovanou pro xxxxx xxxxxxxxx dobu. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x předpokladu, že xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jsou xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx corneum (xxxxxx xxxx erozí) x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby přivodily xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx lidské xxxx mohou pocházet x xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx splňovat xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx funkční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxx prokázat xxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx xxxxx, že xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx skrze xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v modelu xxxx být xxxxxxxxxxx x tomu, xxx xx dalo dobře xxxxxxxx xxxx látkami xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx například xxxxxxxxx xxxxxxx MTT, xx. XX xxxxxxxx) po xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx xxxx ležet x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx látky xxx pozitivní xxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) musí xxxxxxx xxxxxxxxxx spadat do xxxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx predikční xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx testovaného xxxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxx, xxxxxx se xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (minimální xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx kůži, x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx x xxxx zajistil xxxxx xxxx. Xxxxx je xx xxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. U metody xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx x povrchu kůže xxxxxxx smyje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx životnosti xxxxx
X xxxxxx životnosti xxxxx xx xx xxxxxx jakákoliv xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XXX, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx kůže xx xx xxxx 3 xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx teplotě 20 - 28 xX. Xxxxxxxxx xxxxx formazanový xxxxxxx se xxx xxxxxxxxx (extrakce xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XX při vlnové xxxxx 545 x 595 xx.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x xxxxxx dodržení xxxx xxxxxxxx, promývacího xxxxxxx xxx. mají xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx nutné, xxx xxxx prokázáno, že xx použitá xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx reprodukovatelná xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, tak xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vědecké xxxxxxxx xxxxxxxxxx dříve (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxx zveřejněním xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.8.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odporu (x xΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní kontrolu x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx formě, a xx data xxx xxxxxxx replikace x xxxxxxxxx experimenty, xxxxxxxx xxxxxxx x x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.8.2 Xxxx s xxxxxxx xxxxxx kůže
Hodnoty XX x xxxxxxxxx procento xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxx xxxxxxxxx materiál, xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx a případné xxxxxxxxxx referenční xxxxx xxxxxxx v tabelární xxxxx, a xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx hodnoty x x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.9.1 Xxxx TER xx xxxx potkana
Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, xx látka xxxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx xx xxxxxx x povrchově xxxxxxx látku (detergent) xx neutrální xxxxxxxxxx xxxxx, pak xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx účinky xx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, xxx xxxxxxx xxxxxxx penetrace xxxxxxx. Xx-xx xxxxx barviva x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx průměrnému xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x 36 % XXx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x tedy má xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx barviva x terčíku xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx.
1.9.2 Xxxx x xxxxxxx lidské kůže
Hodnota XX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxx OD xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Hraniční xxxxxxxxxxx xxxxx životaschopných xxxxx, xxxxx odděluje xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, xx xxxx, xxxxx poleptání xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx odlišuje xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx předtím, xxx xx xxxxxx validována, x následnou xxxxxxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxxx, že xx xxxx hraniční hodnota xxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x průběhu xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx stav, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, uvedou xx xxxx xxxxx x xxx ně.
Podmínky xxxxxx
- xxxxxxxx popis xxxxxxxxx xxxxxxx,
- popis x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx hodnot xxxxxx (xxxx TER) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk (xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx, x xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx resp. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx efektů.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2
Xxxxxx X.40. xxxx vložena xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. s xxxxxxxxx od 22.6.2001
B.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX FOTOTOXICITY 3T3 XXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 ÚVOD
Fotoxicita xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), k xxx xxxxxxx, je-li xxxx poprvé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látkám x následně xxx xxxxxx, xxxx je-li xxxxxxx kůže ozářena xx celkovém xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx testu xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xx spojení x xxxxxxxx ultrafialovému x viditelnému xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx nikoli.
Toxikologickým xxxxxxxxx xxxxx in vitro xx stanovení fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx po xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x kůži, x xxxxxxxxxx, jež xxxxxx xxxx fotoiritanty xx xxxxxxxx nanesení xx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxx xxxxxxxxxx x validován v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX x let 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx alternativa xx xxxxx xxxx xxxxxx používaným xxxxxx xx xxxx. V xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx xxxxxx OECD xxxxxxx následných xx xxxxx trestů xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxx porovnávány x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx x lidí x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xx pro uvedené xxxxxx vynikající predikční xxxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxx, xxx předpovídal xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, jež xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vzniknout, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, fotoalergie xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxx xxxx xxxxx xxxx specifické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, reaguje xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx fotoxicity.
Sekvenční xxxxxxx xxxxxxxxx fototoxicity x xxxxxxxxxx látek xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX) či xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx; měřená xx X/x2 xxxx v XX/xx2.
Xxxxx xxxxxx: množství (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (= X x x) na xxxxxxxx xxxxxxx, např. X/x2 xxxx X/xx2.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx doporučení XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xx L'Eclairage) xx xxxxxxx označení UVA (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 nm). Xxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx xxxx xxxxx XXX x XXX xx xxxxx xxxxxxxx 320 xx x XXX xx xxxxx xxxx xx XX-X1 x XX-X2 s xxxxxxx zhruba x 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: parametr, kterým xx měří celková xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx červeně, do xxxxxxxxx lysozomů), jež xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx testem x xxxx xxxxxxxxxx koreluje x celkovým xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost (viabilita) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x porovnání x negativními xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx procedurou xxxxx (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx predikce xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx k xxxxxxxx fotoxického xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx PIF x XXX.
XXX (xxxxx xxxxxxxxxx factor, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): koeficient xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x v xxxxxxxxxxx (+XX) necytotoxického XXX/XXX ozáření.
MPE (xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx křivek xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x v xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.
Fototoxicita: akutní xxxxxxx xxxxxx (odezva), xxxxx xxxxxx xx xxxx expozici xxxx xxxxxx látce a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ozářením kůže xx xxxxxxxxxx podání xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: nižší xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxx xxxx, xx xx xx xxxxxx (xxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx) xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx vždy x nespecifickému xxxxxxxxx xxxxx (reakce podobné xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, která xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx, a kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx dochází xxxx, xx byly xxxxx xxxxxxxxx negenotoxické dávce XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx látky.
Fotokarcinogenita: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovanou aplikací xxxxxx x látky. Xxxxx xx tumorogeneze xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx testována xxx xxxxx xxxxxx, xx xxx zavedení xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx referenční látky xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).
1.4 XXXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx společným xxxxx xx to, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx záření. Xxxxx xxxxxxx zákona xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx zákon) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxx testování xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxx absorpční xxxxxxxx testované látky x UV/VIS xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX č. 101). Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x xx-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x není xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky xxxxxxxx xxx testem xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro, xxx xxxxxx jiným xxxxxxxxxxx xxxxxx (viz dodatek).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx vyústit xx fototoxickou reakci (7), xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx fototoxicity 3T3 XXX in vitro xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx necytotoxické xxxxx XXX/XXX xxxxxx. Cytotoxicita xx xxx tomto xxxxx vyjadřuje xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx, XX) (9), 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ozařování.
Buňky Xxxx/x 3X3 xx kultivují xx xxxx 24 xxxxx xxx, xxx xx vytvořila xxxxxxx xxxxx x jedné xxxxxx (xxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxxxxxx dvě xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx s látkou x xxxx různých xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Jedna x xxxx xxxxxxxx xx pak xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UVA/VIS záření x dávce 5 X/xx2 UVA (+UV xxxxxxxxxx), druhá xxxxxxxx xx uchovává x xxxxx (-UV xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxxxx xx pak médium xxxxxxx xxxxxx kultivačním x po xxxxxxx 24 hodinách xxxxxxxxx xx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx xxxxxx, NRU) xx dobu 3 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx každou x xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx relativní xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x přítomnosti (+XX) a x xxxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxx, xxxxxxx na xxxxxx XX50, xx. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx životaschopnost xxxxx x 50 % v porovnání x xxxxxxxxxx bez xxxxxxxxx.
1.6 KRITÉRIA XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x buněk xx xxxxx pravidelně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxx UVA. Buňky xx xxxxxx x xxxxxxx, která xx xxxxxxx při testu xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx, příští xxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX x xxxxx 1 - 9 J/cm2 a xxxxx xxx se xxxxxx NRU xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx2 xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx v temnu. Xxx xxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxx 9 X/xx2 xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 50 % životaschopnosti xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx kontrola xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx buněk.
Citlivost xxxxx xxxxxxxxx kontroly vůči xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx jakosti, jestliže xxxxxxxxx xxxxxxxx (buňky x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] s 1 % xxxxxxxx dimethylsulfoxidu (XXXX) xxxx ethanolu (XxXX) xxxx bez xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx x témž xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx optická xxxxxxx (XX540 XXX) xxxxxx v XX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 104 xxxxx nasazených x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx x normální xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti, xx-xx xxxxxxxx xxxxxxx XX540 XXX x xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxx xxxx rovna 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx xxxx xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxxx chlorpromazin (XXX); xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx protokolu v xxxxx fototoxicity 3T3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx tato xxxxxxxx akceptovatelnosti: XXX xxxxxxx (+XXX): EC50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, CPZ xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx xxxxxxx EC50, xx být xxxxxxxxx 6.
Xxxxx CPZ se xxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxx známé xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx skupiny xxxx rozpustnosti xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX50 a XXX xxxx MPE (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XXXXX METODY
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx použita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxxxxx fibroblastů Xxxx/x 3X3 klon 31, x xx buď x ATCC xxxx x XXXXX; xx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dají x xxxxxxxx použít i xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx linie, xxxxx xx kultivační xxxxxxxx xxxxxx podle jejich xxxxxxxxxxxx potřeb; xx xxxx xxxxx prokázat, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.
X xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxx xxx x případě, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX záření xxxx x xxxxxx xxxxxx narůstat, xx xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3X3 x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx XXX xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx popsaným x xxxxx metodickém návodu.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a během xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. V případě xxxxx Xxxx/x 3X3 xx xxxxx x XXXX obohacený 10 % xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx vlhkém xxxxxxxxx při xxxxxxx 37 xX / 7,5 % CO2. Xx nezbytné, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx historickém xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxx linii.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kultur xx xxxxxx v xxxxxxxxx hustotě x xxxxxxxxxxx médiu a xxxxxxxxx jednou xx xxxx xxxxxxxx v xxxxx na fototoxicitu 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxxx.
Xxx test xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx v takové xxxxxxx, xxx na xxxxx xxxxx (tj. xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx xx nasazení) xxxxxxx xx konfluenci (xx splynutí x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). V případě xxxxx Xxxx/x 3T3 xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx doporučuje xxxxxxx 1 x 104 xxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx testovanou xxxxx xx buňky xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxx celým xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, s xxxxxxxx doby, xxx xx xxxxx z xxxxxxxx ozařována (+XXX/XXX) x xxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Zatímco xxx xxxxx testech xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx požadavkem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx systému, není x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xxx by x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx in xxxxx, xxxx metabolické xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx proto xxx xx nutné, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx tento xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx metabolickým aktivačním xxxxxxxx.
1.7.1.5 Testovaná xxxxx / příprava
Testovaná xxxxx xxxx xxx před xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx prokazují, xx xx xx xxxxxxxxx. Xxxxx je xxxxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx x fotodegradaci, xxxx xx příprava xxxxxxxx pod xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx rozpustí x xxxxxxxxxx solném xxxxxxx, xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (EBSS) xxxx xx fyziologickém roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxx (phosphate xxxxxxxx saline, XXX), xxxxx - aby xxxxxxx dojít k xxxxxxxxxxxx xxxxx ozařování - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx indikátory xX, xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx omezeně xxxxxxxxx, xxxxxxxx se xx vhodném xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stonásobně xxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, x následně xx xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx solným roztokem. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxxxxxx x konstantním xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo ethanol (XxXX). Xxxxxx xxxxx xxx x další xxxxxxxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, například xxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vlastnosti, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, dá xx xxxxxx míchání resp. xxxxxxxxxx, popřípadě xxxxx xx 37 xX.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx UV xxxxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxx zdroj: xxxxx správného xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx je xxx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx v XXX a ve xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx záření UVB xx v xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xx 313 xx x 280 xx zvyšuje xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx světelného xxxxxx xxxxx zásadní požadavek, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (dosažitelná xx xxxxxxxxxx xxxx) xxxxxxxxxxx xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Dále xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx délky x xxxxx nepatřičně poškozující xxxxxxxxx systém - xxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, jimiž xx simuluje sluneční xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx (vysokotlaké) rtuťové xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx mají tu xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxx a xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxx imitují xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx emitují xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX, xx třeba xxxxxx filtrovat xxx, xxx xx xxxx xxxxxx cytotoxické xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xx třeba použít xxxxxxxx záření, xxx xx složka XXX xxxxxxxxx nevyskytuje (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx validační studii xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx je v xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (iradiance) xx xxxx xxxxxxxxxx před xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx xxxx zdroj. Xxxxxxxxx UV-metru xx xxxxx kontrolovat, k xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx druhý, referenční XX-xxxx xxxxx typu x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx, když se x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx spektrální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x kontroluje xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx vyžaduje xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx studii xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx UVA záření 5 X/xx2 xx xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxx xx této xxxxx dosáhlo xxxxx 50 minut, xxxx xxx iradiance xxxxxxxxx xx 1,666 mW/cm2. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxx zdroj světla, xxxx xx xxxxx xxxxxx XXX upravit xxx, xxx buňky xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxx xxxxxx (J/cm2) x 100
|
&xxxx; |
| &xxxx;
x (xxx) =
|
&xxxx;
________________________
|
&xxxx;
(1 X = 1 X x)
|
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxxx (xX/xx2) x 60
|
&xxxx; |
1.7.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nemá převýšit xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx fototoxické xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx vyšších koncentracích xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pozitivních xxxxxxxx (13). Xxxxxxx pH xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx přijatelná (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxx použití xxxxxx (+UVA) x xxx něj (-UVA) xx xxxxx stanovit x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rozsah x xxxxxx xxxxxxxxxxxx řady xx xxxxx tak, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Používá xx koncentrační xxxxxxxxxxx xxxx (s konstantním xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Popis xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx den
Připraví xx xxxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxx 96xxxxxxx mikrotitrační xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx ostatních xxxxx se xxxxxxx xx 100 μl xxxxxxx suspenze x xxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx (= 1 x 104 xxxxx xx jamku). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx - xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx (-XXX), druhá xxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 oC), xxx se vytvořil xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx doba xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Druhý xxx
Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX xx xxxxxx jamku. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX obsahujícího xxxxxxxxxx látku x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx rozpouštědlo (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxx 60 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx xxxxx x XXX (+XXX) xx xxxxxxx tak, xx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx ozařují xx xxxx 50 xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= dávka 5 / cm2). Xxx nedocházelo ke xxxxxxxxxx xxxx pod xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-XXX) xx xx xxxx 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx boxu.
Roztok xx xxxxxxxx x xxxxx xx promyjí xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx kultivačním xxxxxx x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) xx inkubují (7,5 % CO2, 37 oC).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxxx pod xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Tato xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale xxx xxxxxxxxxxxxx cytotoxicity xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx příjmu xxxxxxxxx xxxxxxx (NR)
Buňky xx xxxxxxx objemem 150 μl xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Promývací xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μx xxxxx x NR x xxxxxxxx xx xxx 37 oC ve xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % XX2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx se xxxxxx x XX xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx objemem 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx pak xxxxx x důkladně xxxxxxxx (je xxxx xxxxx xxxxxxxx zcentrifugovat x xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx na xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx směs xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx třepou xx xxxxxxxx, dokud xx XX z xxxxx nevyextrahuje a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx hustota xxxxxxxx XX při 540 nm xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx formátu (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
1.8 XXXXXXX A XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx xxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx xx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, koncentrační xxxxxx x postup xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx tak, xxx xx experimntální xxxxx xxxx vyjádřit křivkou. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxx xx xx definované xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x experimentu ve xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxx, xx xx xxxxxxxxxxxx rozsahy x xxxx částech experimentu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxx byl xxxxxx xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxx xxx. Pokud xxxx cytotoxicita zjištěna x xxxxx x xxxx částí xxxxxxxxxxx (xxx xxx -UVA, xxx při +XXX), xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx koncentrace.
Jsou-li xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx xxxx xxx ověření xxxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx potřebné, xxxx xxx důležité pozměnit xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx dosáhlo jasného xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx testu xx příprava xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx těchto xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, triturace, xxxxxxxxxx). Lze xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx jsou xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx doby.
1.9 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx xx to xxxxx, stanoví xx xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxxx k 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx NR (XX50). Xx xxx xxxxxx xxx, že xx xx xxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx regrese (xxxxxxx Xxxxxxx funkce xxxx xxxxxxxxxx regrese) xxxx xx použije xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxx xx xxxxxxx XX50 xxxxxxx xxx další výpočty, xx třeba xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx XX50 xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxx x: xxx, xxx x: probit), protože xx této xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX MODELY)
1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 1: fotoiritační xxxxxx (XXX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx křivky xxxxxxxxxxx - xxxxxx jak xx xxxxxxxxxxx (+UVA), xxx xx nepřítomnosti (-XXX) světla, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) PIF =
|
____________
|
|
EC50 (+XX)
|
XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx předpovídá.
Je-li látka xxxxxxxxxxx pouze xxx +XXX, xxxxxx xxx -XXX je necytotoxická, xxxx xx XXX xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxx indikuje, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx potenciál. V xxxxxxx xxxxxxx xx xx vypočítat xxx. "&xx; XXX", když xx xxxx xxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxxx xx xx maximální xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Cmax) x xxxx hodnota xx xxxxxx do xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) > XXX =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", pak xxxxx xxxxxxx &xx; 1 předpovídá fototoxický xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxx XX50 (-XX), xxx EC50 (+XX), protože látka xxxxxxxxxx cytotoxicitu až xx nejvyšší xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxx, že xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx případě se xxxxxxx xxxxxxxx "XXX = *1", čímž xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX = *1 =
|
___________
|
|
Cmax (+XX)
|
Xxxxx xx xx získat xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X případech (b) x (x) je xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzít xxxxxxx x úvahu xxxxxxxxxxx, jichž xx xxx xxxxx xxxxxxx.
1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxxx (XXX)
Xx možno xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx predikci xxxxxxxxxxxxx potenciálu, vypracovaného xx použití xxx x xxxxxxxxx studie XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx xx podmínek xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x látek XX xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx omezení xxxxxx XXX v xxxx xxxxxxxxx, kde nelze xxxxxx xxxxxxx XX50. X xxxxx modelu xx xxxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxxx" (MPE) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx průběhu xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx aplikaci xxxxxx XXX xxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v Xxxxxxx vyvinut xxxxxxxxx xxxxxxxxxx software, který xxx obdržet xxxxxx.
1.11 Xxxxxxxxxxxx výsledků
Pozitivní výsledek xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx MPE ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxx látka xx xxxxxxxxxxx potenciál. Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx pravděpodobné, že xxxxx bude působit xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx xx pozitivní xxxxxxxx pouze při xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (100 (g/ml), xxxx xxx posouzení xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxx spadat xxxxxxxxx o xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxx údaje x xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx použití xxxxxx lidské xxxx xx vitro.
Negativní xxxxxxxx xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx buňky x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx by xx látka dala xxxxxxxx i xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx vivo xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X případech, xxx byly při xxxxxxx koncentracích získány xxxxxxxxx koncentrační závislosti xxxxxxx xxxxxx (EC50 + XX a XX50 - UV), xx interpretace xxx xxxxxx. Naproti xxxx xxxxx xxxxxx prokázána xxxxx toxicita (+XX xxx -XX) x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx nedalo xxxxxxxxx koncentrace 100 μx/xx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx danou látku xx ne zcela xxxxxx x mělo xx se uvažovat x xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx kůže xx xxxxx nebo xxxxxx kůže ex xxxx xxxx xx xxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx CAS, xx-xx známo,
- fyzikální xxxxxx x čistota,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx x provedení xxxxx důležité,
- stabilita x xxxxxxxxxxxxx, jsou-li xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- procentický xxxxx rozpouštědla x xxxxxxxxx médiu (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx pasáže, xx-xx xxxxx,
- citlivost buněk xxxx xxxxxx UVA xxxxxxxxx xxxxxx ozařovacího xxxxxxxx, xxx xx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (a) - xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xx něm:
- xxx x složení xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxx xxxxxxxx (zpracování před xx a po xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, které xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx x xxx xxx,
- x xxxxxxx xxxxxxx rozpustnosti xxxxxxxxx xxxxx a absence xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x xxxxxxx působícího xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx),
- xxxx ovlivňování xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - ozařování:
- zdůvodnění xxxxx daného světelného xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx),
- charakteristika xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxx kalibraci,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx testovaného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx XXX (x x X/xx2) při xxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx UV/VIS xxxxxx,
- xxxxx záření UVA (xxxxxxxxx x xxx) x J/cm2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x kultur xxxxxxxx uchovávaných v xxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (d) - xxxx XXX:
- xxxxxxx xxxxx x XX,
- xxxx inkubace x NR,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxxxxx NR (extrakční xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx délka, při xxxxx xx spektrofotometricky xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), byla-li xxxxxxx,
- xxxxxxx srovnávacího xxxxxxx xxx spektrofotometrii (xxxxxx), xxxxx xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- životaschopnost buněk xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, vyjádřená x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (koncentrace xxxxxxxxx xxxxx νs relativní xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +UVA x -UVA,
- xxxxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx: xxxxx možnosti xxxxxxx xxxxxx EC50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx - výpočtem xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XXX),
- klasifikace xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx,
- historické xxxxx negativních xxxxxxx, xxxxxx a směrodatná xxxxxxxx,
- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (b) - xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX xxxxx použité xxx pozitivní xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx látky xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxx XX50 (+XXX), EC50 (-XXX) x XXX, průměry x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx B.41. byla xxxxxxx právním xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Sb. xxxxx xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx předpisem x.:
208/2001 Xx., kterým xx xxxx xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx - novela xxxx xxxxxxxxxxx v příští xxxxxxxxxxx
x účinností xx 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Sb. byl xxxxxx právním předpisem č. 443/2004 Sb. x xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx norem xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) až n) xxxxxx č. 157/1998 Xx., o xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx týrání, xx znění xxxxxx x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Sb. x x. 30/1998 Xx.
3) Směrnice Xxxxxxxxxx xxx hospodářskou xxxxxxxxxx a xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx xx xxxxxx (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx of Chemicals. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).