Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
VYHLÁŠKA
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
xx xxx 16. xxxxx 1998,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x přípravků
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 xxxx. 1 xxxx. c) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx dalších xxxxxx:
§1
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx škodlivých, žíravých, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (dále xxx "toxicita chemických xxxxx x xxxxxxxxx").1)
§2
(1) Xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx zkouškami xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze této xxxxxxxx.
(2) Ke zjišťování xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxx citlivé, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx použití xxxxxxxxx xxxxxx2) x metody xxxxxxxxxx Organizací xxx xxxxxxxxxxxx spolupráci x xxxxxx (XXXX).3)
§3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. ledna 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. David, CSc. x. x.
Příloha x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXXXX POJMY
1.1 XXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxxxx xx objeví xxxxx určité xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXX XXXXXXXX
xx xxxxxxxxx termín popisující xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx rizika x xxxx by být xxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx očekáván xxxxx xxxxxxx toxických xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.
1.3 XXXXX
xx množství podávané xxxxxxxxx xxxxx. Dávka xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx jednotku xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xx kilogram xxxxxxx xxxxxxxxx), nebo xxxx konstantní dietní xxxxxxxxxxx (díly na xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 DISKRIMINUJÍCÍ XXXXX
xx nejvyšší ze xxxx pevných dávkových xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXXXXX
xx všeobecný xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx dobu xxxxxxxx.
1.6 XX50 (STŘEDNÍ XXXXXX XXXXX)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx smrt 50 % xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (STŘEDNÍ XXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx do xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx u 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx XX50 xx udává jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx standardním xxxxxx xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 XXXXX
xx zkratka pro "xx observed xxxxxxx xxxxxx xxxxx" (hladinu xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x je xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxickým xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx nepříznivé účinky, xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxxx opakovaného xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu.
1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX DÁVKA (XXX - MAXIMUM XXXXXXXXX DOSE)
xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx x zvířat vyvolává xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx na přežití x ohledem na xxxxxx, který xx xxxxxxxx.
1.11 XXXXXXXXXX XXXX
xx vyvolání xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
xx xxxxxxxx xxxx xx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXXXX XXXXXXXXX DERMATITIDA)
xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
xx vyvolání xxxxxxxxxx tkáňového xxxxxxxxx xxxx při působení xxxxxxxxx xxxxx po xxxx xx 3 xxxxx do 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.
1.16 XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx vstupuje xx xxxx.
1.17 EXKRECE
xxxxxxxx proces(y), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx z těla.
1.18 DISTRIBUCE
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx.
1.19 XXXXXXXXXXXX
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. AKUTNÍ - XXXXXXXXX APLIKACE/SUBCHRONICKÁ X XXXXXXXXX TOXICITA
Akutní xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo systémová xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (metody X.1 - X.5), xx kterých xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx toxicity.
X xxxxxxxxxx na toxicitě xxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxx xx xx kompletní stanovení XX50. Xxx inhalační xxxxxx není xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jednorázové xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pozornost xx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx utrpení xxxxxxx, xxxxxxxxx metoda xxxxx xxxxx (xxxxxx B.1 xxx) a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 xxxx). Xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx vyvozené x xxxxx xxxxxx. V xxxxx xxxxxxx xxxx xxx použita standardní xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx počtu zvířat.
Xxxxxx toxicity s xxxxxxxxxx aplikací (metody X.7, B.8 x X.9) se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx vznikající x xxxxxxxx opakované xxxxxxxx. Důležité xx xxxxxxxx pozorování zvířat xxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx orgány xxxxxxxx a toxické x xxxxxxxxx xxxxx. Xx dlouhodobých xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - X.30 x X.33).
3. MUTAGENITA - XXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xx vztahuje k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx genetického xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Tyto změny ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx nebo celé xxxxxxxxxx. Xxxxxx na xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx projevovat xxxxxx xxxxxx struktury xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (xxxxxx) xxxxxx x baktériích (xxxxxx B.13/14) xxxxx xx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx B.10).
Xxxxxxxxxx jsou také xxxxxxx in xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx test (xxxxxx X.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx chromozomů xxxxxx xxxxx (metoda X.11). Xx xxxx xxxxx dávat xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, pokud nejsou xxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxx látky xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx x kontrolu xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx další xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx. Tyto studie xxx xxxxxx x xxxxxxxx účelům: xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx základním xxxxxxxx testů; xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; zahájení xxxx rozšíření studií xx xxxx.
Xxx xxxx xxxxx zahrnují xxxxxx X.15 až X.25 xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx in vivo x xx xxxxx, xxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx informace x bodových xxxxxxxx x xxxxxx účincích x organismech xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx souboru xxxxx.
Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx poskytly relevantní xxxxxxxxxx informace x xxxxxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxxxxxx xxxxxx, vhodná xxx xxxx případ, xxxx záviset xx xxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity x xxxxxxx způsobů xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx x dispozici xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx v xxxx xxxxxxx), nebo xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, např. xxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx u myší (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx xxx použít xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x velmi xxxxxxx xxxxx potřebných xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx locus xxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx karcinogeny, v xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Předběžné xxxxxxxxx x genotoxickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xx čerpají xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Test xxxxxxxx xxx opakované aplikaci, xxxxxx B.7, x xxxxxxxxxxxxx studie x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx mohly xxx xxxx významné. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx chemické xxxxx x karcinogenním xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx aspektu pomocí xxxxx xxxxxxxxxxxxx (metoda X.32) xxxx xxxxx x kombinované studii xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.33).
X dispozici xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx - xx xxxx (xxxxxx X.21). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx typů a xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx.
5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Reprodukční xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x samic (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx xxxxx nedědičných xxxxxxxxxx účinků na xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx X.31) xxx studie xxxxxxxx xx teratogenitu jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx podáváním. Alternativně xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxx aplikace x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxxxxx vhodně xxxxxxx.
Xxxxx je xxxxxxxxx třígenerační reprodukční xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx test (xxxxxx X.35) xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx způsoby, xxxx. xxxxx xxxxxxxxx změn xxxx strukturních a xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Předběžné xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx toxicity. Xxxx toxicity při xxxxxxxxx xxxxxxxx (metoda X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxx xxxxxxx chemické xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, hloubkové xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Navíc xx důležité xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx odhaleny x jiných xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx B.37 x X.38 po jednorázovém xxxx opakovaném xxxxxx xxxxx.
7. IMUNOTOXICITA
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, například xxxxx xxxxxxxxxxxx anebo podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, které xx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx B.7), zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx.
8. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx testované chemické xxxxx x výsledky xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx dalších studií xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx, xx xxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). U xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx B.36).
Informace x xxxxxxxx xxxxxxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx xxxxx také xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx odhad xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx. Přispět xxxxx xxxx informace x xxxxxxxxxxxxxxxxx parametrech x předcházejících xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXXX TESTOVANÉ XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx významnějších xxxxxxxx, x xxxx relevantní xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx studie.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti testované xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx konkrétní xxxxxx x xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testované xxxxx (x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx nečistot) x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx materiálu xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx týkající xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx o xxxxx.
10. PÉČE X XXXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, ve kterém xxxx xxxxxxx xxxxxxx, x správná xxxx x xxxxxxx podstatnou xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx pokusná zvířata xx xxxxx přizpůsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxxx, xxxx a xxxxxxx xx vhodná xxxxxxx xxxxxxxxx 22 xX ± 3 xX xxx relativní xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %.
Xxxxxxx experimentální xxxxxxxx xxxxxxx jsou zvláště xxxxxxx xx teplotu. Xxx xxxx případy xxxx podrobnosti x xxxxxxxxxxx podmínkách xxxxxxx x popisu xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx toxických xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx x xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xx být xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx a tmy xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx týkající xx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx pokusu.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jiný xxxxxx, mohou xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, ne xxxx xxx 5 zvířat x jedné xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxx xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx, tak xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx všem xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx, xxxx xx výživová xxxxxxx xxxxxx vzájemným působením xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx takové xxxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxx xxxxxxxxxxxx výsledků. Používají xx xxxxxxxxx laboratorní xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx k pitné xxxx. Pokud je xxxxxxxxx látka podávána x potravě, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx.
Příměsi x potravě, které xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX ZVÍŘAT
Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx věnována xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x stresu xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx metody fixní xxxxx (X.1.xxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx akutní xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx o 70 % zvířat xxxx xxx metoda B.1.
Xxxxxxx xx závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx dávkách a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx limitních xxxxx, xxxxx v testech xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1, X.2 x X.3), xxx xxxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (metody X.11 a X.12), xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxx neprovést xxxx xxx omezit xx xxxxxx x jednoho xxxxxxx, je-li xx xxxxxxxxxx vědecky zdůvodnitelné. Xxxxxx vědecké xxxxxxxxxx xxxx být založeno xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx provedených xxxxx nebo na xxxxxxxxxx xxxxx validizovaných xxxxx in xxxxx. Xxxxxxxxx, byla-li x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x dávkou používanou x xxxxxxxx xxxxx (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx kožní dráždivosti (xxxxxx X.4) xxxx xxx zbytečné; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4), nesmějí xxx xxxx xxxxxxxxx xx dráždění xxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x ověřovat xxxxxxxxxxxx postupy, xxxxx xxxxx poskytovat stejnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, budou xxxxxxx xxxx utrpení xxxx se xxxxx xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxx použití xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nebezpečnosti xxxxx x xxxxx xxxxx xxx, kde xx xx xxxxx.
12. XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX
Xxx xxxxxxxxx x interpretaci xxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx in vitro xx xxxxx xxx xx zřeteli, xx xxxxx extrapolace na xxxxxxx xx možná xxx x omezené xxxx; doklady o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx, pokud xxxx x dispozici, mohou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx testování.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x označování xxxxxx x xxxxxxxxxxx látek xxxxx xxxxxx na xxxxxx člověka na xxxxxxx xxxxxxxxxx zjištěných x xxxxxxxxxxxxxxxx těmito xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx také xxxxxxx pro studie, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
B.1. XXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (XXX XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Testovaná xxxxx xx podává x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx orientačního xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxx metoda xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x stres xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx testem se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.
Pokud xx xxxxx, připraví xx xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx vehikulu. Xxxxxxxxxx xx xxxx první xxxxxx použití vodného xxxxxxx, další volbou xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx, teprve xxxxx jako další xxxxxxx roztok x xxxxxx vhodných vehikulích xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx před xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx relevantní toxikologické xxxxxxxxxx. U xxxxxxxx xx objem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti; xxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx podávat až 20 xx.xx-1. Variabilita xxxxxx látky podávané x testech by xx xxxx minimalizovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se zajistil xxxxxxxxxx objem na xxxxx hladinách dávek. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xx xxxxxxx xxxxx xx x obou xxxxxxx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Pro každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx z obou xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Poznámka: Používají-li xx v xxxxxxxx xxxxxxx toxicity xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx hlodavci, xxxx xx xx zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx zvolit x xx třeba xxxxxxxx, aby xxxxxx xxxxxxxxxx úroveň xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx tři, x mají xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx xxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx viditelný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Získané xxxxx xxxx xxxxxx xx znázornění vztahu xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx stanovení XX50 x přijatelnou spolehlivostí.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
S xxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxxx xxxxxxx test xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx skupinách 5 samců a 5 xxxxx x xxxxxxxx výše xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx podaná xxxxx způsobí xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Doba xxxxxxxxxx by měla xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze xx xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxx, rychlosti vývoje xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx objeví a xxxxxx, a xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, xxx je xxxxxx tendence k xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx hladová. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx večer xxxx xxxxxx. U zvířat x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; přístup x xxxxx xxxx xxxx omezen. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx látka se xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, lze xxxxx aplikovanou xxxxx xx menších xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxx xx pozorování xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky, xxx xxxxx xxxxx xx vedou samostatné xxxxxxx. Během prvního xxx xx xxxxx xxxxxxxx častá pozorování. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x zaznamenat místní xxxxxx aplikované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx jednou během xxxxxxx pracovního dne xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx. Xxxx pozorování se xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, např. xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx usmrcení xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, křečovým xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Zvířata, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xx, xxxxx přežijí xx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx nálezy se xxxxxxxxxxx. Je-li xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Hodnocení xxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx, podá xx xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx o xxxx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx x cílem xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxxxx xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx xxxxx vynechat.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxxxx xx tabulky. Z xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx účinků x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx stanovit x xxxxxxxxxx, přežívají-li zvířat xxxx než xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx vyvolané xxxxxxx xxxxxx, xx zaznamenávají xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx látkou. XX50 xx vypočte uznávanou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx údajů xx melo xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality a xxxxxxxxx toxických xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx údaje o xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxx xxxxx (počet xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx xxxxx, důvody x xxxxxxxx xxx humánní xxxxxxxx zvířat - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx XX50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx byl xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx pro 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50, xxxxx xx xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx x její xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx testů xx xxxxxx pohlaví,
- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx pozornost xx xxxxx xxxxxxx účinku, xxxxx xx xxxxx xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx během testu xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50),
- interpretace xxxxxxxx.
X.1. xxx XXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (XXX XX) - XXXXXX FIXNÍ XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací metody
Xxxx xxxxxx toxicity xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx doby xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx x fixní xxxxxx xx provádí xx dvou etapách.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx účinky xxxxxxxx dávek xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x zvířat xxxxx xxxxxxx, vždy xxxxx xxxxx na xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx poskytuje xxxxxxxxx o xxxxxx xxxxx x toxicity, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Normálně xx x xxxx xxxxx xxxxx nepoužije xxx xxx pěti xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx sondou xxxxxxxx xxxx samců x pěti xxxxx x jedné z xxxxxx xxxxxxx dávek: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, x xx jako dávka, xxxxx pravděpodobně xxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx B - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xxx ne xxxxxxx.
Po xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx vybraná výchozí xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx toxicitu, xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx další xxxxxxxxx. Když na xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx pozorována xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky.
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxx "diskriminující xxxxx" (xxx část X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx dávky, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, aniž xx xxxxx x xxxxx (xxxxxx případů xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx svých leptavých xxxx dráždivých vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx by x xxxx pohlaví xxxxxx variační rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem se xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x hlavní studie. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxx x xxxxxxxx dávky
Xxxxx je xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxx ve vhodném xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxx xxxxx uvážit xxxxxxx vodného xxxxxxx, xxxxx xxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, teprve xxxxx xxxx další xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. U nevodných xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem nebo xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 ml.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xx se xxxx minimalizovat takovou xxxxxxx koncentrací, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx odebere xxxxx xxxx xxxxxx; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx orálně x xxxxxx dávce. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Xx podání xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx určitého xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávek xx jednotlivá zvířata. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx údaje, xx jsou samci xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávky xx podávají sekvenčně, xxxx xx alespoň 24 xxxxx před xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx xxxxxxx pozorují x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx nejméně xx sedm xxx; xxxxx přetrvávají projevy xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, zvíře xx xxxx xxxxxxxxx ještě xx xxxxxxx xxxx xxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx zvolená xxxxxxx xxxxx nevyvolá xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx uhynutí, xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xx měl xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) příznaky xxxxxx, x x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávku podle xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx k dispozici, xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxx dávky 500 xx.xx-1. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx nepozorují xxxxxxxx xxxxxx, vyšetřuje xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x uhynutí při 2000 mg.kg-1, je xxxxxxxxxx studie xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx. Jestliže xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 mg.kg-1). Xxxxxxxx xxxx zvíře xxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx fixními xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx více xxx 5 zvířat.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx hladinu xx xx mělo xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx xxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx dávky je xxxxxxx pouze xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx látky.
Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx x xxxxx, má xxx xxxxxxx z xxxxx xx 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 nebo 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx měla xxx ta, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx utracení x xxxxxxxxx xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, ale xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx nevyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx toxická xxxxxxx xxxxxxxx humánní xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xx projeví xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx být xxxxx znovu xxxxxxxxx xx další xxxxx xxxxxx dávek. Opět xx xxxxxxx, xxxxx xxxx nutné xxxxxxx xxxxxxx, by měla xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx období.
Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx každé xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxx xx xxxxxxxx.
Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx být xxxxxx podle xxxxxx xxxxxx, rychlosti xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx zotavení. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxx xx doba, xxx xx projevy xxxxxx xxxxxxx a xxxxxx x xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, kde xx xxxxxx tendence x pozdnímu vzniku xxxxxxxxx příznaků.
Xxxxxxx xxxxxxxx vyšetření xx xxxxx xxxxxxxx nejméně xxxxxxx xxxxx den xx podání xxxxx x xxxxxxx jedenkrát xx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx. Častější xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx po xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Test xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx změny xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní a xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx třeba věnovat xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xx xxxxx 3 xxx x potom xxxxxx týdně. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx vyšetření xxxxx xxxx výjimečně třetí xxxxxxx xxxxx.
X xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx mortalitu xxx xxxxx 5 mg.kg-1 (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mortalitu xxx xxxx xxxxx), xx xxxxx dále xxxxxxxxxx akutní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx z xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. X xx xxxx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; počet xxxxxx xxxxxxxxx během testu xxxx utracených x xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxx pozorován zřejmý xxxxxxx účinek, xxxxx xxx připsat xxxxxxxxx xxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx pitvy. X xxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx a zaznamenat xxxxx hmotnosti.
Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, krmení, xxx.,
- experimentální xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (včetně vehikula, xxxxx se použije) x koncentrace,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxxxxxxxxx úrovní xxxxx,
- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; změny xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; počet xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, stupeň x xxxxxx účinků),
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx x kritéria xxxxxxx xxx indikaci xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxxxxxx dávkové xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx
Xxxxx | Xxxxxxxx | Xxxxxxxxxxxx |
5 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % přežití 100 % přežití, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxx Látky, xxxxx xxxx jedovaté Xxx xxxxxxxx při 50 mg.kg-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx 5 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx zdraví škodlivé Xxx xxxxxxxx x 500 mg.kg-1 | |
500 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx | Látky, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x 50 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, ale zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxx považovat xx xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Viz xxxxxxxx x 2000 xx.xx-1 | |
2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx toxicity | Xxx xxxxxxxx x 500 mg.kg-1 Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx |
B.1. xxxx XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX XXXXX XXXXXX XXXXXXXX
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jak xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxx účely xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx používá xxx xxxxx stanovených xxxxx x xxxxxxxxxxx odstupech, xxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx metodu xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxx xxxxxx buď xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxx rozhodovacího xxxxxxx, nebo xxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx zpřesnění.
Metoda xxxxxxx xxxxx stanovené xxxxxxxxx xxxxx x xxxx určena xxx xxxxxxx přesné XX50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx kterém xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx i x xxxx xxxxxx xxxxxxx kritériem xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx trvání xxxxx xxxxx být xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxx B.1. Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx zvířat xxx x xxxxxx xxxxxx toxicity (xxxxxx)(B.1) x xxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx se xxxxxx orálně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx ze xxxxxxxxxxx xxxxx. Testování xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Není xxxxx provádět předběžnou xxxxxx. Xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx úhynu zvířat xx vztahu k xxxxxxxx xxxxx rozhodne x xxxxxx xxxxx, x.x.
- xxxx zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x vyšší xxxx nižší úrovní xxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, označena xxx, xxx byla xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, x chována ve xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mohla zvyknout xx laboratorní podmínky. Xxxxxxx xxxxx být x klecích xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx, ale xxxxx xxxxxx x xxxxx kleci xxxx xxxxxxx jasné pozorování xxxxxxx zvířete.
Testovaná látka xx aplikována zvířatům x jediné dávce xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx kanylou.
Pokud je xx třeba, xxxxxxxxx xxxxx xx rozpustí xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxx roztoku/suspenze, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. kukuřičném) x xxx xxxxxxx x jiných xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx vehikula xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx charakteristika; xxxxx není xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx určitou xxxx bez xxxxxxx (xxxx. xxxxxxx přes xxx a xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx xxxxxx proti xxxx. Samice xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx březí.
Na xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxxxxx ze xxx xxxxxxx xxxxxx, tzn. 25, 200 a 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Výchozí úroveň xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, aby x největší xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx uhynutí alespoň xxxxxxxxx zvířat, jimž xxxx xxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx příslušného diagramu xxxxxxx popsaného v Xxxxxxx 1.
Xxx xxxxx xxxxxxx x výchozí xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x vztahu struktury x xxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx nejsou žádné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx se - s xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata - xxxxxx výchozí xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X některých xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx jak xx dovoluje xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx uvažovat o xxxxxx testování xxx xxxxxxxxxxx pevných xxxxxxx xx výši 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx způsobují xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx účinky xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxx při xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx, xxxxx není xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxx x jedinou xxxxxx xxxxx xx xxxx 2000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx třech xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s podáním xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 mg.kg-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx zvířata xx xxxxx pozorovat xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx zvířat. Xxxxxx pozorování xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxx toxických reakcí, xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx objeví x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx látky xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xx dobu dalších 3 - 4 xxxxx. Kde xx xxxxx podávána po xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxx xxx - x xxxxxxxxxx xx délce xxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx potravu x xxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx může xxx xxxxx najednou, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx. U hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x tělesné hmotnosti, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 ml xx 100 g xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x podávaném xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx byl xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxxx není xxxxx xxxxx xxxxx celou xxxxxxxx, xx možné xx aplikovat xx xxxxxxx po xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 hodin.
Podrobnosti xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx x Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx (den xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx, xxxxx to xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx látky, x xxxx nejméně jednou xxxxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, nebo xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx silného xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxx: xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zvířata uhynulá.
Ať xx xxxx zvířata xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, dobu xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxx, na očích x xxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx, vegetativním a xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx věnovat výskytu xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargie, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxx přežívající xxxxxxx zvážena před xxx, než xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Pitva
U xxxxx xxxxxx použitých xx studii, včetně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx testu, se xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxx zaznamenány xxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zvířat xxxxxxxxxxxxx 24 a více xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx shrnuty xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x humánních xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, popis, časový xxxxxx x vratnost xxxxxxxxx účinků, x xxxxxxx nálezy.
Všeobecné poučení x interpretaci xxxxxxxx xxx klasifikaci je xxxxxxx x Xxxxxxx 2.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx stav xxxxxx, xx-xx znám;
- xxxxx, xxxxx x pohlaví xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxx v týdenních xxxxxxxxxxx a xx xxxxx testu.
Podmínky testování:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- podrobné xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx aplikace;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
- xxxxxxxxxx xxxxxx počáteční xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx každého xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (tzn. zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, charakter, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx);
- nástup x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx nálezy x histopatologické xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x interpretace:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX XX 423.
DODATEK 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxx xxxx uvedeno x xxxx 1.4.2.3, výchozí xxxxx xx xxxx xxx xx ze xxx pevně stanovených xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx uhynutí xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx následující informace:
- xxxxx o fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,
- všechny xxxxx x xxxxxx xxxxx toxicity a
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx dodatku stanovují xxxxxx xxx každou xxxxxxx dávku. X xxxxxxxxxx xx počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx zvířat postupuje xxxxxxxxx tak, jak xxxxxxxxx šipky.
3. Pokud xx aplikaci xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxx xxxx netestuje. Xxxxx však přitom xxxxxx u xxxxxxxxx 5 zvířat xxxxx xxxxxxx příznaky, je xxxxx xxxxxx ověřit xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx potvrdí, xx xxxxx pokračovat x testování xx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4. Xxxxx xx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx každého xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx hodnota XX50 xxxxxxxx dávku 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx to xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx posoudit xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx pohlaví: xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx klasifikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx LD50 xx xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, nebo xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxx testování xx xxxxxx úrovni xxxxx.
5. Xxxxxx xxxxxxxx testování x třemi xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávkami (xxxxxxxx 2). Této xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x daném xxxx xxxxxxxxxxxxx procesu, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx varianty 1.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx udána xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx doplňkovou dávkou.
Ukončení xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx testování s xxxxxxx dávkou 200 xx.xx-1 tělesné hmotnosti
V xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x pohlaví (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx počet xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx xxxxxx xx x testování xxxxxxxxx xx směru xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rámečku xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Pokračování testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx testu: Klasifikace xx xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích je xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x pohlaví (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x testování xxxxxxxxx xx směru xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx rámečku.
Varianta 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx uvedeného x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx založených xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
X xxxxxxxxx xx xxxxx dávka, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx xx počet xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx klasifikaci. Po xxxxxxxxx podle xxxxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nedosáhne xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Hodnoty v xxxxxxxxx vyznačují xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx XX50 je xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx tělesné hmotnosti
(c) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 2000 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
x) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
c) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx hmotnosti
X.2. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx získat xxxxx x xxxxxxxxx velikosti xxxxxx, xxxxx xxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx vzplanutí x xxxxxxxxxx (jsou-li xxxxxxxxxxxx) testované látky
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx exponováno studované xxxxx po xxxxxxx xxxx x odstupňovaných xxxxxxxxxxxxx, x xx xxxxx koncentraci x xxxxx skupině. Potom xx xxxxxxx pozorují x xxxxxxxx se xxxxxx a případy xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu uhynou, x xx, která xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx pitvají.
Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a bolesti xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx vlastností.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx experimentálních skupin. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx používaného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, není třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx velikosti. Pokud xx xxxxx, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x ovzduší xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx; v xxx xxxxxxx se xxxxxx xxxx kontrolní skupina x vehikulem. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx být o xxxx známo, že xxxxxx toxický účinek. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Experimentální xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx důvody xxxxx xxxx. Používá xx xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % střední hodnoty (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx).
1.3.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxx hladinu xx xxxxx xxxxxx nejméně 10 xxxxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Samice musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx testech xxxxxxxx zvířata vyšších xxxxx, než jsou xxxxxxxx, mělo xx xx zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxx x xx třeba xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx toxické dávky. X xxxxxx testech xx třeba xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx testované xxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, a mají xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a mortality. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx znázornění xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx umožnit xxxxxxxxx LC50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx po 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 samců x 5 samic plynu x koncentraci 20 xx.x-1 xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx pevné xxxxx x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (xxxx - x xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sledované xxxxx xxxxxx rizika xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosažitelné xxxxxxxxxxx) během 14 xxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, považují xx xxxxx pokusy za xxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxx 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Pro xxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx nejméně 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx rozdělení xxxxx x expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx co xxxxxxx xxxxxxxxx shlukování xxxxxx x aby xxxxxxxxx expozice testované xxxxx xxxx maximální. Xxx zajištění stability xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx by neměl x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, na xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xx trvání xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxxxxx je xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx je xxxxxx xxxxxxxx ke zpožděné xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx zváží. Xxxxxxxx xx po xxxx 4 hodin od xxxxxxxx rovnováhy koncentrace xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx. Teplota xxxxx xxxxxx má xxx 22 xX ± 3 x X. Relativní xxxxxxx xx být xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (např. xxxxxxxxxxx x aerosoly). Xxxxxxxxx xxxxx negativního xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 mm vodního xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxx. Během xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxx. Xxxxxx musí xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx),
(x) skutečná koncentrace xxxxxxxxx látky xx xxxx v xxxxxxx xxxx alespoň třikrát xxxxx expozice (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. aerosoly xx vysoké koncentraci, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Během xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty x xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx úrovně regulace xxxx možné dosáhnout, xx připouští xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxx xxxxxx x aerosolů, xxxx xx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx tak často, xxx to xxxxx xxxxxxxx (xxx nejméně xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx i xx jejím xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x zaznamenávají systematicky. Xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, křečovým xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x kómatu. Xxxxxxx uhynutí je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx se stanovuje xx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx.
Zvířata, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx do konce xxxxxx, se pitvají xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx traktu. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x odeberou se xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky. Z xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx. Změny xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx přežijí xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, která xxxx humánně xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx vyvolaná testovanou xxxxxx. XX50 se xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Xxxx se xxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx, včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx hmotnosti, mortality x všech xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, vlhkosti vzduchu, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx odchylkou). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x xxxxxxxxxx zařízení;
x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;
c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx objemem xxxxxxx);
Xxxx.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látek x roztoku (např. xx xxxx) xx xxxxx uvádět xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, pokud je xx možné, koncentraci xxxxxx látky xx xxxxxxxx.
d) povaha xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;
e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx;
x) xxxxxxxxxx xxxxxx aerodynamického průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD);
x) doba xx xxxxxxxx xxxxxxxxx;
x) xxxx expozice;
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx expozice (xx. xxxxx zvířat, která x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx exponovaných zvířat);
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx skončení, xxxxxx x kritéria xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx;
- všechna xxxxxxxxxx;
- xxxxxxx XX50 xxx xxxxx xxxxxxx stanovená po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x uvedením metody xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx spolehlivosti pro XX50 (pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxx);
- křivka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx dávce (xxxxxxxxxxx) a xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx);
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (se xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x humánních důvodů xxxxx testu xx xxxxxxxxxx xxxxxxx LC50);
- interpretace xxxxxxxx.
X.3. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx uhynutí. Xxxxxxx, xxxxx uhynou během xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o kterých xx xxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxx 24 xxxxx xxxx zahájením xxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx ostříhá xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo holení xxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx se xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) kůže, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx připraví xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Při xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx připravenými x xxxxxxxx xxxxx, xx třeba látku xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl dobrý xxxxxxx x kůží. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nutné xxxx x xxxxx vliv xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx látky kůží. Xxxxx xxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxx, v xxxx xxxxx xx xxxx xxxx látka xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxx xxxx, x xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ten, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Testované xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo králíků. Xxx xxxxxx i xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxx xx důvody. Je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 5 zvířat xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx x xxxx xxxxxxx xx výrazně xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx toxicity xxxxxxx xxxxxxx druhů, xxx xxxx hlodavci, mělo xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx zvolit x je xxxxx zajistit, xxx xx nepřekročily xxxxx toxické dávky. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx tři, x xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx vznikly testovací xxxxxxx xx zřetelným xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxx x úrovních xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx leptavé xxxxxx testované látky. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx znázornění xxxxxx mezi xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx xxxxx umožnit xxxxxxxxx LD50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Lze xxxxxxx xxxxxxx xxxx jednou xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx popsaných xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx má xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx být určena xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxx. Rozhodující xx doba, xxx xx xxxxxxx otravy xxxxxxx x xxxxxx x xxxx do xxxxxxx, zvláště xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx uhynutí.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nanese xxxxxxxxxx xx xxxxxx, která xxxx asi 10 % xxxxxxxxx povrchu xxxx. Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx; xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
Testovaná látka xx xx expoziční xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx plochu xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx látka xxxxxxxx a xxx xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. X zamezení xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít i xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx expozice se xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, pokud možno xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xx zvířata xxxxxxxx často. Nejméně xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx každodenní xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxxxxx pro xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx slabých xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xx xxxxxx xxxx provedena xxxxxxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx nejpřesněji. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Hodnocení xxxxxxxx x druhého pohlaví
Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx látka xxxxxxx jedné xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látku. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx xx x dispozici spolehlivá xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx xx možno xxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx projevy xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x pitevních xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x před xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx stanovit x xxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx než xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx na stres x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx látkou, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx touto xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Dále xx xxxxxxx vztah, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a výskytem x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx pokusu (xxxxxx xxxxxxx očištění xxxx a xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx užito) x koncentrace,
- xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat,
- tabulky xxxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- všechna xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx LD50 xxx to xxxxxxx, x xxxxxxx byl xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx pro 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx LD50 (xxxxx xxx lze xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx a xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx všech xxxxx xx druhém xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx pozornost xxxxxxx xxxxxxx ovlivnění xxxxxxxxx xxxxxxx LD50 v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x humánních xxxxxx xxxxx testu),
- interpretace xxxxxxxx.
X.4. XXXXXX XXXXXXXX (KOŽNÍ XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Výchozí xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx zvážit všechny xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx s xxxxx snížit na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx testování.
x) Fyzikálně-chemické xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX xxxxx xx xxxxx 2 nebo xX rovné xx xxxxx 11,5) xxxx xxxxx testovat xx xxxxxxxx xxxxx dráždivost, xxxxxxxx mohou být xxxxxxxxx leptavé xxxxxx. Xx xxxxx vzít x úvahu xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx in vitro xxxxx, není xxxxxxxxx xxxxx xxxx.
x) Xxxxxxxx xx studií xxxxxx toxicity. Xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx akutní xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti) x nebylo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Rovněž xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx vysoce toxické xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx každé xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxx xx odečte, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx posouzení xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxx zhodnotit také xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.
Xxxxxxx xx závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx a bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zvířat xx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx třeba xxxx xx xx, aby xx xxxxxxxxxxx kůže (xxxx. xxxxxx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxx králíka xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxx výraznější x některých obdobích xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx tyto zóny xxxxx husté xxxxx.
Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dostatečně xxxxxxxx vodou, případně xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx brát x úvahu xxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxx xxxxx savců, xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx králíka.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx x xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx úvah xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxx), xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx testu xxxxxxxxxxx leptavé xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxxx.
Pro xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx třeba zvláštních xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinu, xxx xxxxxxxxx případů xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx zvířata.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx jiný xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxx místo xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 g xxxx xxxx polotuhé xxxxx. Přilehlé xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx zvířete xxxxxx v xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx není možno xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vratnost xxxx xxxxxxxxxx účinků. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx po xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx chovají xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nanese xx malou xxxxxx (xxx 6 xx2) xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx mulu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx náplastí. X kapalin a xxxxxxxxx past může xxx xxxxxx nanést xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx, x xxx jej xxxxxxxxx xx xxxx. Po xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je třeba xxxxxxxx tomu, xxx xx zvíře xxxxxxx x xxxx x xxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxx xxxxxx nebo xx vdechnout.
Na xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx je xx xxxxx, xxxx xxxxxxx rozpouštědlem, xxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 4 xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx látka xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. tím, xx xxxxxx poleptání, xx xxxxx xxxxxxx délku xxxxxxxx (např. na 1 xxxxxx nebo 3 minuty). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nejprve xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx akutní dermální xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx. Xxxxx plátek xx xxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx reakce, xxxxxxxx xx druhý xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx v xxxx fázi xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx principu xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx plátek xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxx 4hodinová xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xx xxxx kontraindikováno x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. jestliže xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx pozorována xxxxxxx xxxx).
Xxxxxxxx je xxxxxxx xxxxx reakce (xxxx. xxxxxxx) pozorována xx 3 minutách xxxx xx 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxxxxx podmínek xx xxxxx xxxxxxxxx delší xxxxxxxx, xxxxxxxxx pokud xx odpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx je třeba xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx kůže xx 60 minutách x xxxx 24, 48 x 72 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxx podráždění xxxx xx klasifikuje x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 hodin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx kůže xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx léze xxxx poleptání (xxxxxxxx xxxxxxxxx kožní tkáně) x xxxx toxické xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, maskovaných zabarvením xxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxx řasy.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx rovněž xxxxx xxxxxxx závažné xxxx, xxxxx stupně x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a všechny xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxx obvazu: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- ve xxxxx xxxxxxx údaje x kožní xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx xxx každém xxxxxxxxxx (za 1, 24, 48 x 72 hodin xxx. xx xxxxxxxxxx xxxx),
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx | |
1. Hodnocení xxxxxxx x příškvaru | |
1.1 Xxxxx xxxxxx | 0 |
1.2 Xxxxx xxxxx erytém (stěží xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx | 2 |
1.4 Mírný xx výrazný erytém | 3 |
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxx tvorba xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Xxxxxxxxx xxxxx | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx viditelný) | 1 |
2.3 Xxxxx edém (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx ohraničena xxxxxxxxx xxxxxxxxx) | 2 |
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxx x 1 xx) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (xxxxxxx více xxx 1 xx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx exponované plochy) | 4 |
4.2 Klasifikace xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
XXX xx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxx průměr xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx odečtu x xxxxxxx xxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx aritmetický xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | IKI |
xxxxxxxx | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx dráždí | 0,5 &xx; IKI ≤ 3 |
xxxxxxx xxxxxx | 3 < IKI ≤ 5 |
silně xxxxxx | XXX &xx; 5 |
B.5. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXX XXXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
1.1.1 Výchozí xxxxx
Je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx na xxxxxxx testování látky xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. K xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
a) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti a xxxxxxxx reaktivita. Xxxx. xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx látky, xxxxx - jak xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx x xxx xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX rovné xx xxxxx 11,5, xxxx xxxxx testovat, xxxxx xxx očekávat xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx třeba xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rezervu.
b) Xxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x xxxxxxxxxxx potenciálně xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx vlastnostmi xxxxxx xxx dále xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxx, xxxxxxx lze xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx budou xxx xxxxxxx účinky na xxx xxx testování xxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx zřejmé xxxxxxx xxxx výrazně xxxxxxxx účinky xx xxxx xx xxxxxx xxxxx dráždivosti, xxxx xxxxx dále xxxxxxxx xx dráždivost pro xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, že budou xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx v xxxxxxxxxxx dávce xxxxxxxx xx jednoho xxx xxxxxxxx xxxxxxxx zvířatům, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx odečte x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx se xxxx xxxxxx, aby xxxx možno provést xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx pozorování musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx také xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
24 hodin xxxx xxxxxx xx x každého x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx očí. Zvířata, x xxxxxxx se xxxxxx podráždění xxx, xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx x experimentu xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Ačkoliv xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, doporučuje xx xxxxx přednost xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet xxxxxx
Xxxxxxxx xx očekávají xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx výsledky xxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx má výrazně xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxxxx (irreversibilní xxxxxx) xxxxxx xxx xxx při použití xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx další xxxxxxxxx xxxx dráždivosti x xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být případně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
X ostatních případech xx třeba xxxxxx xxxxxxx tří xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyžadovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Úroveň xxxxx
Xxx testování xxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,1 xx. X xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxx 0,1 xx nebo xxxxxxxx xxx 0,1 g (xxxxxxxx xx vždy xxxxx xxxxx). Xxxxx-xx xx x tuhou xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, xx třeba xx rozemlít xx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx látky se xxxxxxx až po xxxxxxxx zhutnění, xxxx. xxxxxxxxxxxx xx měrnou xxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx vystříknout x sebrat 0,1 xx látky x xxxxxxxxxx xx xx xxx podle popisu xxx kapaliny.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx doby xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx bylo možno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx pozorovaných účinků. Xxxxxxxx xxxx stačí 21 xxx po xxxxxxxx studované xxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx vaku xxxxxxx xxx xxx, xx se xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxx xxx na 1 xxxxxxx xxxxx x xxxx přidrží, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx oko, xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, slouží xxxx kontrolní.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx instilací xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx lokální xxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxx zvolit typ, xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxx xxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 24 xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 xxxxxxxx xx možno oči xxxxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxx za xxxxxx.
X některých xxxxx, xxxxx při xxxx testovací metodě xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx doporučuje použít 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx po xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx průtoku, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Oči xx xxxxxxxxx po 1, 24, 48 a 72 xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx-xx xx po 72 xxxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxx lézí, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx rohovky xxxx xxxx příznaky xxxxxxxxxx xxx tak, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx změn x jejich xxxxxxxx xx nevratnost. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xx třeba zaznamenat x xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx.
Intenzitu xxxxxx xxx je xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx v příloze x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx pomůcku xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xx, xxx provádějí xxxxxxxxx, xx možno xxxxxx ilustrovanou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx zařízení. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 24 xxxxxxxx je xxxxx xxx některých xxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx mimoto xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxx xxxxx stupně x charakteru xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx mimooční xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),
- x xxxxxxxxx formě výčet xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx jednotlivá xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx (např. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lézí,
- xxxxxxxx popis xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podráždění x xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx xxxxxxx rohovky,
- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 a 72 xxx.), xxxx. xxxxxxxxxx lampa, xxxx xxxxxxxxx, fluorescein atd.,
- xxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Stupnice xxxx xx xxx
Xxxxxxx | |
A. Xxxxxxxx - otok | |
Xxxx není xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxx zahrnující mžurku | 1 |
Xxxxxxx xxxx x xxxxxx víčka | 2 |
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx víček xx xxxxxxxx | 3 |
Xxxx xxxxxxxxxx víčka xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxx zcela | 4 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxx | |
Xxxxxx není xxxxxxxx | 0 |
Slabé xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx vnitřním xxxxxx) | 1 |
Xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxxxxxx xxx | 2 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxx | 3 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxxx | |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx cév zřetelně xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx | 1 |
Splývající cévní xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx nesnadné, xxxxxxxxxx xxxxx červená xxxxx | 2 |
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx | |
Anomálie nejsou xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, nastříknutí xxx xxxxx xxxxxxx (jedna xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx xx xxxxxx je xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx | 1 |
Xxxxxx na xxxxxx xxxx xxxxxxxx, rozsáhlé xxxxxxxxx a xxxxxxxxx | 2 |
v xxxxxxx (xxxxx nebo xxxx xxxxxx charakteristik) | |
X. Rohovka - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx zůstávají xxxxx xxxxxxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx | 2 |
Xxxxxxxxxx zóny xxxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky nejsou xxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxxxx stěží viditelný | 3 |
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx je xxxxx neviditelná | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx plocha xx ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 plochy xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx xxxxx x xxxxx interval hodnocení xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx
XXX = 2.(X + B + C) + 5.X + 5.E.F
Xxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (IOP) xxx xxxxx xxxxxxxx hodnocení xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx z XXX.
Akutní index xxxx xxxxxxxxxxx IOA xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx
4.3 Klasifikace
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx dráždí | 30 - 59,9 |
xxxxx xxxxx xxxxxx | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
X.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx schopnost testů xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx lidskou xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx systém toxicity x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Neexistuje xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xx dostatečně spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx lidskou xxxx x xxxxx xx xx hodila xxx všechny xxxxx.
Xxx volbě xxxxx xx xxxxx uvažovat xxxxxxx jako např. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
Testy xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx s xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA), x xx xxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx x xxxxxxxx xx zdají xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx senizibilizačního xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx než xxxxxx xxx Xxxxxxxxx kompletního xxxxxxxx, a xxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx.
Maximizační test xx xxxxxxxxx (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Test - XXXX) je xxxxx xxxxxxxxx test x xxxxxxxx. Ačkoliv x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, je XXXX xxxxxxxxx xx preferovanou xxxxxxxx x xxxxxxxx.
X mnoha xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx bez adjuvans (xxxxxxxx xx dává Xxxxxxxxxx testu) xxxxxxxxxx xx méně xxxxxxx.
X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx zdůvodnit volbu Xxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v maximizačním xxxxx xx morčatech. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
X xxxx metodické xxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx (GPMT) x Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx i xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx.
Pokud xxxxxxxxxxxx xxxx provedený xxxxxxxxx xxxxxxx dá pozitivní xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx senzibilizátor xxx dalšího xxxxxxxxx xx morčatech. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx na morčeti, xxx xxx je xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx dermatitida) je xxxxxxxxxxxx zprostředkovaná kožní xxxxxx na xxxxx. X člověka xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx (velkými xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx být xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx xxxx otok.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: experimentální expozice xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx přecitlivělosti.
Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx rozvinout xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx): experimentální expozice xxxxxxxx dříve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx období xxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx x spolehlivost xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx.
X správně xxxxxxxxxxx xxxxx xx očekává xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % x xxxxxx x adjuvans x xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx XXX | Xxxxx XXXXXX | xxxxxxxx xxxxx | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | xxxxxx |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, kdy při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zdůvodnění xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Princip xxxxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx testované látce xxxxxxxxxxxxxxx injekcemi xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (indukční xxxxxxxx). Po xxxxxx 10 xx 14 xxx (xxxxxxxx xxxxxx), x xxxxxxx xxxxxxx xx může rozvinout xxxxxxxx reakce, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx provokační xxxxx. Rozsah x xxxxxx kožní xxxxxx xx xxxxxxxxxx expozici x xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x stupněm xxxxxx x kontrolních xxxxxx, která xxxxxxxxx xxxxxxx expozici x xxxx xxxxxxx x xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx je xxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx se to x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.1 Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (XXXX)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá xxxxxxx albinotická morčata xx aklimatizují xx xxxxxxxxxxx podmínky xx xxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx testem xx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx xxxxx dbát xx xx, xxx xxxxxxx x poškození xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Pokusná zvířata
Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Počet x pohlaví
Lze xxxxxx samce x xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx být březí. Xxxxxxxxxxx skupinu tvoří xxxxxxx 10 xxxxxx x nejméně 5 xxxxxx je třeba x kontrolní skupině. Xxxxxxx-xx se xxxxxxx xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx morčat x xxxx možné xxxxx x xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxxxxx, doporučuje xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx mírné xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx maximální xxxxxxxxxxx, xxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx koncentrace xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxx xxx uvážit xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.1.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Testovaná xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx subkutánních xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, se xxxxxx xx lopatkové xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx střední xxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA) xxxxxxx x vodou xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x objemovém poměru 1 : 1;
Xxxxxxx 2: testovaná xxxxx xx vhodném xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
Injekce 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx směsi XXX x xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Pro xxxxxxx 3 xx xxxxx xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxx před xxxxxxxx x XXX xx vodné xxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx nebo látky xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 3 má xxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxx 2.
Injekce 1 a 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx 3 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx plochy.
Xxx 0 - Kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx podají xx stejných xxxx xxxx x testovaných xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx x objemovém xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: neředěné xxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: Směs xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx hodin xxxx xxxxxxx indukční xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxx kůži, xx na testovací xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 ml 10% xxxxxxxxxxxxx sodného xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. den - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Testovací xxxxxx xx zbaví xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodném vehikulu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), který xx xxx přiloží xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx obvazu na xxxx 48 xxxxx. Xxxxx vehikula xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx látky jsou xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx přímo.
6. - 8. xxx - Kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxx plocha xx xxxxx zbaví xxxxx. Xxxxxxx vehikulum xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 48 xxxxx.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx exponovaných x xxxxxxxxxxx zvířat xxxx zbaveny srsti. Xx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxx nebo x xxxxxxx x na xxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (pokud xx xx xxxxx). Xxxxxx se pomocí xxxxxxxxxxx obvazu xxxxxxx x kontaktu x xxxx po 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxxxx, xxxxxxxx ostříhá xxxxxxxx xxxxx x x případě xxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx dalších xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx xx začátku xxxxxxxx xxxxxxxxxx dávky) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxx stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "slepého xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, které zvíře xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx provokace (tj. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx přibližně o xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx znovu x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx xxx také xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxx reakce x xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxxx xxxx xxxxxxxxx indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (viz xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx měření tloušťky xxxxxxx řas.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx testu. Před xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx srsti xx provede xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Je xxxxx xxxx xx xx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx kůže. Zvířata xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx testu a xx xxxxx xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx morčat.
1.5.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Xxxxxxx xx minimálně 20 xxxxxx x xxxxxxxxx skupině x xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx úroveň, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx mírné, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx maximální xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolává xxxxxxxxxx xxxx. V případě xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx stanovit x předběžném xxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx zvířatech.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx vodě xx xxxxxx použít vodu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xx preferován 80% xxxxxx etanol/voda xxx xxxxxxx x xxxxxx xxx provokaci.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Jeden xxx xx zbaven xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx testu se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikovat přímo).
Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x kontaktu s xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx komůrkou x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx testu xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx bavlněný xxxxxxxxx, xx už xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x plochou přibližně 4 - 6 xx2. Je preferováno xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx okluze. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx xx zbaven xxxxx (důkladně ostříhán). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx naneseno pouze xxxxxxxxx, a xx xxxxxxxx způsobem jako x xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx a přidržován x kontaktu x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx možno xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxx, lze xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx aplikace.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx x den 0 xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx plochu xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx případně xxxxx) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Provokace
27. - 29. den - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx nedráždivé xxxxxxxxxxx xx aplikuje xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxx. Překrývací xxxxxx xxxx komůrky xxxx xxxxxxxxxxx v kontaktu x xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Pozorování x xxxxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 hodin xx xxxxxxxxxx plátku xx xxxxxxxxxx plocha xxxxx srsti;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx později (xxxxxxxxx 30 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxx kožní xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x dodatku;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 hodin xx aplikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Doporučuje xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, které zvíře xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxx nutná xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx provokace), provede xx přibližně x xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx potřeby xxxxx x kontrolní xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx také xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx důsledkem xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (viz xxxxxxx). K xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít dalších xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx tloušťky xxxxxxx xxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX (GPMT X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xx sestaví xx tabulky, xx xxxxx musí být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx patrná xxxxxx xxxx xxx každém xxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xxx proveden xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx uvést xxxxx tohoto xxxxx xxxx xxxx xxxxxx (xxxx. XXXX - xxxx regionálních lymfatických xxxxx, MEST - xxxx xxxxxxxxx xxxx x myší) xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx postupu x xxxxxxxx získaných xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx (XXXX x Xxxxxxxxx xxxx)
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx xxxxxx;
- xxxxx, stáří a xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx, strava xxx.;
- hmotnost xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Experimentální xxxxxxxx:
- xxxxxx přípravy xxxxx xxx plátkový xxxx;
- podrobné xxxxxxxxx x materiálech x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- výsledek xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx koncentracích xxx xxxxxxx test;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, aplikaci x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;
- xxxxxxxxxxx a celková xxxxxxxx testované látky x xxxxxxxx, použitá xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx citlivosti a xxxxxxxxxxxxx (viz 1.3.) xxxxxx xxxxxxx referenční xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx pozorovaných účinků;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx analogická x metodou XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
0 = xxxxx viditelná xxxxx;
1 = xxxxx xxxx skvrnité xxxxxxxxx xxxx;
2 = středně xxxxxxx x splývající xxxxxxxxx xxxx;
3 = xxxxxxxxxx zarudnutí x xxxxxxx xxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx senzibilizace
Xxxxx xxxxxxxxx pozitivity při xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx bylo danou xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx
xxxxx alergen (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx alergen (XX. xx.) - 9 - 28 % zvířat
xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx alergen (XX. xx.) - 65 - 80 % zvířat
xxxxxxxx xxxxxxx (V. xx.) - 81 - 100 % zvířat
X.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxx, x xx každé xxxxxxx jedna úroveň xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx pečlivě pozorují, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx zvířat, která xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx během xxxxxx; xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx utratí a xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Klece xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx xx xxxxxxx vyloučil xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx zvíře xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxx studie jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx sondou xxxx x potravě nebo x xxxxx xxxx, xxxxx účelu xxxxxx x fyzikálně-chemických vlastností xxxxx.
Pokud je xx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (vehikulu). Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x jiných xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx není xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx stabilitu xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Dává se xxxxxxxx xxxxxxxx, ale xx možno xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, než xxxxxxx xxxxxxxx věku 9 xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Xxxxx xx tato xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxx studiích xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Počet x pohlaví
Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) po xxxx 28 dnů xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx po podávání xxxxxxxx vratnost, trvání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx satelitní xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx).
1.2.2.3 Volba xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x to xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.
Pokud xx xxxxx dostupných informací xxxx xxxxxxxx účinek xxx denní xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, je možno xxxxxxx xxxxxxx test. Xxxxxx-xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, lze xxxxxxx xxxxxxxxxx vyhledávací xxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxx.
Při xxxxxx dávek je xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických studií x testované xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx vyvolat toxické xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx vyberou xxxxx x klesající řadě xxx, aby umožnily xxxxxxxx závislost xxxxxx xx xxxxx. Nejnižší xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (XXXXX). Xxxxxxx je xxxxxx xxxx- xx čtyřnásobný xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, než xxxxxx příliš velký xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxx xxx 10).
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx v potravě xxxx xxxxx vodě, xx důležité xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx v potravě, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx koncentrace (x xxx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; použitou xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx dobu x dávkování přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Pokud xx xxxx studie sloužit xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx studií, xx xxxxx v xxxx studiích xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Neprokáže-li xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx 1000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx vodě, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky nevyplývá x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx dávkových úrovních xxxxxxx. Toto pravidlo xxxxxxxxx testu platí, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx nenaznačují, xx xx třeba xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx 28 xxx. Zvířata xxxxxxxxx skupiny jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx přetrvávání xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířatům xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 dnů, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 dní x xxxxx. Denní dávka xx podává xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx intubační xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx tekutiny, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x tělesné xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx minimalizovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx byl xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxx xx u xxxxx dráždivých x xxxxxxxxx, x kterých xx xxxxx obvykle xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Xxxxxxxxx xxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx, nejlépe x xxxxx denní xxxx a s xxxxxxxx doby očekávaného xxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx. Zaznamenává xx xxxxxxxxx xxxx zvířat. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxx zjištění xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx projevující xxxxxx xxxxxx nebo stres xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx způsobem a xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx (za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx se děje xxxx chovnou xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx stejnou xxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se pečlivě xxxxxxxxxxxxx, nejlépe x xxxxxxxx skórovacího xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx x testující xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx pozorování měnily xx nejméně; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, očí x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x exkretů, xxxxx xxxxxxx x vegetativních xxxxxx (xxxxxx, zježení xxxxx, velikost zornic) x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, polohy, dále xxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) xxxx bizarních xxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxx, pohyb pozadu).
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx se otestují xxxxxx xx různé xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx xx xxxx xxxxxx x celková xxxxxxxxx aktivita. Další xxxxxxxx informace x xxxxxxxxx, které xx xxxxx k testování xxxxxx, jsou xxxxxxx x xxxxxxxxxx (viz Xxxxxxxxx xxxx, část X).
Pozorování funkčních xxxxxx ve xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx lze xxxxxxxx vynechat, xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx následující studii xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx této xxxxxxxxxx studie. Xxxxx x v xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx poruchách xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx pozorování funkčních xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx vadily.
1.2.3.2 Xxxxxxx hmotnost a xxxxxx potravy x xxxx
Zvířata xx xxxx nejméně jednou xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x vody xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, také x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x změření xxxxxxxxxxx krve.
Xxxx xx odebere xxxxx xxxx nebo x xxxxxxx utracení zvířete, xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx, se xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xx tkáně, zvláště xx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx před nebo x xxxxxxx utracení (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx přes xxx xxxxxxx krve1). Xxxxxxxxx xxxxxx a séra xxxxxxxx stanovení xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx proteinů, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx indikujících účinky xx xxxxxxx buňky (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx fosfatáza, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx) x žlučových xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx xx časově xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx během xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx xxxxx vzhled, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xX, xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx xxxx. xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání x xxxx.
Další xxxxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx x látek xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx funkce: xxxxxxxxx vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, specifických hormonů, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xx určitých xxxxxx látek xxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxx nebo očekávané xxxxxx dané xxxxx.
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxx začátkem xxxxxx.
1) Xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxx řadu xxxxxx x xxxx x xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx toto xxxxxxxxxx xx xx, xx x nehladovějících xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx straně, hladovění xxxx xxx xx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x u xxxxxxxx x potravě by xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se odebírá xxxx na lačno, xx xxxxx biochemické xxxxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve 4. xxxxx xxxxx.
1.2.3.5 Xxxxx
U všech xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx se xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx pečlivé xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxx, a xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx, slezina, xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx od xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxx se xxxxx xx xxxxxx stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (reprezentativní oblasti xxxxxx hemisfér, xxxxxxx x mostu), xxxxx, xxxxxxx, tenké x xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx plátů), xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, slezinu, xxxxx, brzlík, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem x xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxx, xxxxxxxx), xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx uzliny (xxxxxxxxxx xxxxx xxx oblast xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), periferní xxxx (x. xxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxx), xxxxxxx v blízkosti xxxxx, řez kostní xxxxx (nebo xxxxxxx xxxxx z nasáté xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxx cílovým orgánem xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Histopatologické vyšetření
X všech zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u zvířat xxxxxxxxx skupiny je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx uchovaných xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx v orgánech x tkáních ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxxxxxxxxxx léze je xxxxx vyšetřit.
U xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx orgány x tkáně, ve xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXX X ZÁZNAM XXXXX
K xxxxxxxxx xxxx být xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx tabulkové xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx vykazujících příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx nebo utracených x humánních xxxxxx, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx každého xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx.
Výsledky x xxxxxxx formě xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistickou xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxx plánování xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx atd.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx začátku xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a na xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx než xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx dávek;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx diety, x xxxxxxxxxx koncentracích, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- podrobné xxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- přepočet x xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx nebo xxxx (xxx) xx skutečnou xxxxx xxxxx x xx na xx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx x aplikaci x xxxxx xxxx xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx vody (xxxxxx druhu a xxxxxx);
Výsledky:
- xxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx potravy x xxxx;
- xxxxx x toxických xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx úrovně, xxxxxx xxxxxx příznaků xxxxxxxx;
- povaha, xxxxxxxxx x trvání klinických xxxxxx, xxxx. xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, úchopové xxxx x motorické xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s příslušnými xxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx hmotnost xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx získány;
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Závěry:
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx XXXX XX 407.
X.8. XXXXXX XXXXXXXX INHALAČNÍ (28DENNÍ XXXXXXXXX APLIKACE)
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxx xxxxxxx xx xxxxx získat xxxxx x xxxxxxxxx látce: xxxxxxxxx velikosti xxxxxx, xxxxx xxx, xxx xxxx, bod varu, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx studované xxxxx denně xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to xx 28 dní. Xxxxxxx-xx xx pro dosažení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxx skupinu xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zjišťují xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Příprava
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x testované xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx využít.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx se xx xxxxxxx zdravých xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných kmenů. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 samic x 5 samců). Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx zpožděný výskyt xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - pokud xx užije - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se se xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo jen x malém xxxxx. Xxxxxxxx koncentrace by xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx toxický xxxxxx na hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xx být 6 xxxxx denně; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx pokusy xx zvířaty xx xxxxxxx xxxxxxxxx expoziční xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx rozdělení látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, je třeba xx konstruovat xxx, xxx xx xxxxxxxx xx nejvíce shlukování xxxxxx x aby xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx byla xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx jinými xxxxxxx.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Pokusná xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx během xxxxxx období xxxxxxxx x zotavení x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí a xxx, xx kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx bez xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x otravy nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx být 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx není xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx mírně xxxxxxxxxxx tlaku xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx do xxxxx. Xxxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxxx ani xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx systém x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx získání xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rychlost xxxxxxx vzduchu je xxxxx nastavit xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx boxu xxxx stejné. Xxxxxx xxxx zaručovat, že xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo co xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
x) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx se měří x xxxxxxx zóně. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ± 15 %. X některých xxxxxx x xxxxxxxx, xxx této úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx rozsah kolísání. Xx xxxxx xxxx xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, jak xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxx xxxxxx x aerosolů, xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x každé testované xxxxxxx.
x) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx jejím skončení xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky; xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xx příznaky toxických xxxxxx x zaznamenávat xxxxxx xxxxxx, stupeň x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx zaznamenávat xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, pitvají. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx či xxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a pitvat.
Xx xxxxx xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zahrnovat alespoň xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx krve.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: x posouzení xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x těchto xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxxx, xxxxxxx, chloridů, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx studium xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3.1 Pitva
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx se co xxxxxxxx po sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Orgány x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, varlata, nadledviny x xxxxx, x xxxxxxx orgány s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx velikosti) xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. Xxxxx xx xxxxx vyjmout xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, tak aby xx xxxxxxxxx struktura.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx. Xxxxx xx x orgánech x xxxxxxx xx skupině x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx způsobená xxxxxxxxxx látkou, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx x u všech xxxxxx s nižšími xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx orgány x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx formami xxxxxxxxx.
Xxxxxxx zjištěné výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx má pokud xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, krmení xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: popis expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx tabulky x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; b) xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx; x) nominální xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx látky přiváděné xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně; x) hmotnostní xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x geometrická směrodatná xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx,
- xxxxxx xxx účinku,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich výsledky,
- biochemická xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- detailní popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.9. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX OPAKOVANÁ XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé skupině xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, která uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, která přežijí xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Xxxxxx před xxxxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx pokusných zvířat. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx se xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx potřeba opakovat xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx těla. Xx xxxxx vzít x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x tuhými látkami, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx formy, xx xxxxx danou látku xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxx kontakt x xxxx. Testované xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx denně 5 xx 7 dnů x xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx potkany, xxxxxxx xxxx morčata. Je xxxxx použít x xxxx zvířecí xxxxx, xxxxxx xxxxxxx však xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % střední xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx) xx xxxxxxx kůží. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx počet zvířat x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou zabita xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx zvířat (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x xxxxx kontrolní xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx vehikula - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 6 hodin denně. Xxxxxxxx testované látky xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou dobu. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx udržovala xxxxx xxxxxxx dávky ve xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx usnadnění aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xx xxxxxxxx skupině x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx tuto xxxxxxx překračovat. Ideálně xx xxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx účinek na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx by počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků obtížné.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxx kůže, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x vysoké xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, je xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ukončit x xxxxxxx jej xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx při xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx dávky, xxxxx xxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, žádné xxxxxxx xxxxxx, xxxx další xxxxxxx nutná.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxxx, xxx xx objeví x xxxxxxxx opět xxxxxx xxxxxxxx otravy.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 dnů x týdnu xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny, xxxxx xxxx určena xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických xxxxxx xxxx jejich xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx těla; x xxxxxx toxických xxxxx xxxx xxx xxxx plocha xxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx co xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xx xxxxxxxx vrstvě.
Xxxxxxxxx xxxxx je xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx s xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mulového xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Testovanou plochu xx dále xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx a testovaná xxxxx fixovaly x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx požití xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx immobilizaci xxxx xxxxx doporučit. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxx".
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx denně xxxxxxxxx x zaznamenávat xxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, kůže, xxx x sliznic x také xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x centrální nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx i xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat, xxxx xxxx. x xxxxxxxx kanibalismu, autolýzy xxxxx xxxx chybného xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx satelitních xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x těžkém xxxxxx xx trpící bolestí xx třeba okamžitě xxxxxxx, humánně utratit x xxxxxx.
Na xxxxx pokusu se x všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního počtu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: k xxxxxxxxx funkce xxxxx x ledvin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx z xxxxxx parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx známá xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: vápníku, xxxxxxx, chloridů, xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy xx xxxxx, xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx spektra xxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxx a varlata xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, srdce x všechny xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxxx xx vhodném médiu x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů a xxxxx. Xxxxx xx x orgánech x xxxxxxx xx skupině x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x všech xxxxxx s nižšími xxxxxxx. U zvířat xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje se xxxxxxx do tabulky. X ní musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx formami xxxxxxxxx.
Xxxxxxx zjištěné výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- údaje x zvířatech (xxxx, xxxx, xxxxx, podmínkách xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx podmínky (xxxxxx xxxxx obvazu; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx ji lze xxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- doba xxxxxxx během experimentu, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx zvířat do xxxxx sledovaní,
- xxxxxxx nebo xxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální příznaky x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.10. XXXXXXXXXX - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX U XXXXX XX XXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx replikací OECD XX 473, Xx Xxxxx Mammalian Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx je xxxxxx xxxxx, jež x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx chemickými xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx však xxx k aberacím xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx naznačovat, xx xxxx chemická xxxxx xx schopna xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx navržena k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x běžně xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx jevy xxxx příčinou xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx x onkogenech x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx, hrají xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka a xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
Tento xxxx xx xxxxxxx x odhalení xxxxxxx xxxxxxx mutagenů x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx testu xxxxxxxxx, je xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx dostatečná xxxxxxxx mezi tímto xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace xxxxxx xx xxxxx látky x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx o xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nezjistí, xxxxxxx zřejmě xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx XXX.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vitro xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx primární xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu x xxxxxxx, stability xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx spontánních chromozómových xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zdroj xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx systém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedokáže xxxxxxxx napodobit xxxxxxxx x xxxxx in xxxx. Xx xxxxx xx vyvarovat xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx způsobeny xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx cytotoxicitou (4) (5).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, nebo xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx aberace xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx).
Zlom chromatidy: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx za předpokladu, xx vzniklá mezera xx struktuře xxxxxxxxxx xx větší, xxx xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále pak x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment v xxxxx zlomu je xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx delece.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, kde xx S-fázi replikace XXX nepřechází xxxxx xx xxxxxx, nýbrž xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx než šířka xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Mitotický xxxxx: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx proliferace xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx diploidní xxxxx (xxxx 3n, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroskopickou analýzou xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx delece x xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Buněčné xxxxxxx se vystaví xxxxxxxx testované xxxxx, x to x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx například Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, buňky se xxxxxx, xxxxxx se x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx
Je možno xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
X udržování xxxxxx je třeba xxxxxxxx vhodná kultivační xxxxx x inkubační xxxxxxxx (kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, teplota x vlhkost). X xxxxxxxxx linií a xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx dobu buněčného xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie x xxxxx: xxxxx se xxxxx ze zásobních xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx konfluentní xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 xX.
Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxx xxx xxxx xxxx x xxxxxxx antikoagulantem (xxxx. xxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx získané xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx testovanou xxxxxx působí x xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx suplementovaná xxxxxxxxxxxxxxx frakce (S9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx činidly xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (10) (11) (12).
Xxxxxxx koncentrace mitochondriální xxxxxx x médiu xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Aktivita metabolického xxxxxxxxxxx systému xxxx xxxxxxx xx tom, xxxxxx typu xx xxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Pro účely xxxxxxxxx aktivace mohou xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx exprimující specifické xxxxxxxxx enzymy. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx by xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx mohou do xxxxxxx xxxxxxxx přímo xxxx se xxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx delší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vlastnosti.
1.5 XXXXXXXX XXXXX
1.6 XXXXXXXXXXXX
X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx xx mohlo x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx se xxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx všem xxx, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.6.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxx kritéria, xxx xx xxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, rozpustnost x xxxxxxx x xxxxx pH resp. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx x hlavním xxxxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx indikace xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, například xxxxxx xxxxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxx cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx maximální xx xxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lišit více xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 a √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx musí xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pokles xxxxxxxxxxxxx růstu, xxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx (vždy x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nepřímou xxxxx xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx x xx xxxxxxx na době xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou. Je xxxx xxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx kultury, xxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx informace je xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; ten xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxx x malé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx času xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx činí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx z xxxxxx 5 µx/xx, 5 xx/xx xxxx 0,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx jsou netoxické x koncentracích xxxxxxx, xxx je xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace vyšší, xxx je mez xxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu na xxxxx kultivace s xxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx dochází-li k xxxxxxxxx účinku xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx počátku x na konci xxxxxxxx, protože xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vlivem xxxxxxxxxxx xxxxx, séra, X9 xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx dá xxxxxxx x prostým xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxx buněk.
1.6.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Xx každého experimentu, xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xx, xx xxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (rozpouštědlo, nebo xxxxxxxxx). Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx být pozitivní xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x detekovatelný xxxxxx xxxxxxx xxx pozadí, xxxxxxxxxxx citlivost xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Koncentrace xxx xxxxxxxxx kontrolu je xxxxx xxxxxx xxx, xxx účinek xxx xxxxxx, xxx neodhaloval xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Mezi xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Xx | xxxxxx methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mitomycin C 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Ano | xxxx[x]xxxxx cyklofosfamid xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxx. Tam, xxx xx to xxxxx, xx vhodné xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx každý časový xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx, zpracované stejným xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3 Postup
1.6.3.1 Expozice testovanou xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx začít působit xxx 48 hodin xx stimulaci mitogenem.
Xxxxxxx xx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx; x xxxxx se doporučuje xxx negativní kontroly x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx lze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx prokázat, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou minimální (13) (14), xx xxxxxxxxxx, aby se xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx jenom xxxxx xxxxxxx.
X případě xxxxxxxx nebo těkavých xxxxx je xxxxx xxxxxxxx v testu xxxxxx postupy, xxxx xx xxxxxxx neprodyšně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nádob (15).
1.6.3.2 Xxxx sklízení kultury
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vystaví xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx xx xxxx 3 - 6 xxxxx a xxxxxx se xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxx xxxxx buněčného xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Pokud xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x bez xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normálního xxxxxxxxx xxxxx. Některé xxxxx xx hodnotí xxxxx při xxxx xxxxxxxx delší, xxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Negativní xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se posuzují xxxxxx od xxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Příprava chromozómů
Xx xxxxxxx xxxxxxx xx působí Xxxxxxxxxx® xxxx kolchicinem xxxxxxx xx xxxx 1 - 2 xxxxx xxxx ukončením kultivace. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zpracovává xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x ovlivnění xxxxx xxxxxxxxxxxx roztokem, xxxxxx x xxxxxxxxx.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Všechny xxxxxxxxx, xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, se xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx podílu metafázických xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být x všech typů xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx číslu ± 2. Xxx xxxxxx koncentraci x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx minimálně 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx. X případě, xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxx xxxxxx testu xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace, je xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Jelikož experimentální xxxxxxxxx je xxxxx, xx třeba vyhodnotit xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi. Xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx a četnosti x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kulturách.
Xxxxxxx xx data xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx tabulce.
Verifikace xxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx bylo xxxxxxxxx x odst. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx podmínek. K xxxxxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx zjišťování pozitivního xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx kritérií, například xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx závislá frekvence xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx inhibovat xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx s endoreduplikovanými xxxxxxxxxx může naznačovat, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost inhibovat xxxx buněčného xxxxx (17) (18).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx uvedená xxxxxxxx, xx v tomto xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jasně xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx data xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx experimentů. Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
XXXXXX X XXXXXXX XXXXXX
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x zdroj xxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx-xx xx nutné,
- xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx dárce krve, xxx xxxx xxxxxxx xxxx krev nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, použitý xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxx, xx-xx xx nutné - xxxxxx udržování xxxxxxx xxxxxxx, je-li xx xxxxx
- xxxxxxx xxxxx chromozomů.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxx blokující xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx
- zdůvodnění xxxxx použitých koncentrací x počtu xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, je-li xx xxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx vehikula a xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx,
- xxxx působení,
- xxxxxxx buněk na xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- xxx a složení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- metoda xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, negativní nebo xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xX x xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx gapů,
- xxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Diskuse výsledků.
Xxxxxx.
X.11. XXXXXXXXXX - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X KOSTNÍ XXXXX XXXXX IN XXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 475, Mammalian Bone Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx vivo xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx dřeně xxxxxx, xxxxxxx hlodavců (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx dvojího druhu: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx polyploidie xxxx xxxxxxxxxx, xx daná xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx chromozómového xxxx dochází xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mutace a xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, že xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, jež xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxx rakovině x xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxx xxxx, protože xx xxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx rychle xx xxxxxxxx xxxxx, jež xx dají xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx druhy x xxxxxx xxxxx xx v xxxxx xxxxx nepoužívají.
Xxxxx xxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxxx rizika, xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx faktory xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx xxxxx být xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx také xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.
Existují-li xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, nebo xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx jako xxxx x xxxxxxxx spojení xxxx chromatid xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx vzniklá mezera xx struktuře chromatidy xx xxxxx, než xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále xxx x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx zlomu je xxxxxxxxxxx (xxxx mimo xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, kde xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX nepřechází xxxxx xx mitózy, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou chromozómy x 4, 8, 16, ... chromatidami.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx než xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.
Mitotický index: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx buněčné populaci; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx populace.
Numerická xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx hapoidního počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (tedy 3x, 4x atd.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou buněčného xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná jako xxxxxx x fragmenty x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx vhodnou dobu xx působení xx xxxxxx. Před xxxxxxxxx xx xx ně xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (například kolchicinem xxxx Xxxxxxxxxx®). X xxxxx xxxxxx dřeně xx xxx připraví xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx buňkách xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x čínští křečci, xxx xxxxx použít x xxxxxxxxx jiný xxxxxx xxxxx druh. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální a x xxxxxxx pohlaví xxxxxx přesahovat ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X, xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx x experimentální skupiny. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po dobu xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek
Xx-xx testovaná xxxxx x pevném xxxxx, xxxx xxxxxxx zvířatům xx xxxxxxxx nebo xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x případně se xxxxx. Kapalné testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx podáváním xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx ji neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x xxxxxxxxxxx dávkách nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xx příliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx testu je xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, kdy xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx. Xxxxx při xxxxxxxxx kontrole xx xxxx xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx podávat xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx odebírat x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, xx třeba xxxxxxxx pozitivní kontrolu xx xxxxxx chemické xxxxxxx, jako je xxxxxxxxx xxxxx. Příklady xxxxx vhodných xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Látka | XXX | EINECS |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo vehikulem x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx xxx zařazeny xx xxxxx časových xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx pouze xxxxx xxxxx vzorků, xx nejvhodnější dobou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx xxxxxxxx historické xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx prokazující, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx a kontrolní xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx x době, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě podstatné xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jednorázově. Xxxxx xx jedná x objemnou dávku, xxxx xx x xxxxxxxxx aplikace xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxx podané x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Jiné režimy xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxx různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx podání xxxxx xxx. U xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx délky xxxxxxxxx cyklu (xxxxx xxxx obvykle 12 - 18 xxxxx) xx xxxxxx látky. Xxxxxxx doba potřebná xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxx po 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x daném xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx den, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vzorků 1,5xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu po xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje xxxxxx dávka Colcemidu® xxxx kolchicinu x xxxxxxxx xx x xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx xx xxxxx interval zhruba 3 - 5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4 - 5 hodin. X kostní xxxxx xx xxxxxxxx buňky x xxxxxxxx xx x xxxx chromozómové xxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, protože xxxxxx x xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x hlavní xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, aby pokrývaly xxxxxxx xx maximální xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx xx pak xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx takové xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx účinky xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x nízkých netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx individuálně xxxxxx xx případu. Xxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx definována xxxx xxxxx, která xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx o xxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx při xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v jeden xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxxxxx xx xx základě údajů x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx použití xxx xxxxxxxxx úrovní. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xx den xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx trvání xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx očekávané xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx použití x xxxxxxxx testu xxxxx xxxxxxx úrovně.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Testovaná xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx buď xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, která xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxx překročit 2 xx/100x hmotnosti; xxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx třeba upravit xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx zvířete xx xxxxxxx kostní xxxx, xxxxxx xx ni xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx se fixuje. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx na podložní xxxx x xxxxxx xx.
1.5.7 Analýza
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx 1000 xxxxx x každého xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx minimálně 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx při jejich xxxxxxxx xxxxxxx často x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx chromozómů, xxxx xxx počet xxxxxxxxx v hodnocených xxxxxxx 2n ± 2.
2. ÚDAJE
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Xxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx jedinec. U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx hodnocených xxxxx, počet aberací xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, jejich xxxxx x xxxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť x xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx se xx xxxxxxx frekvence xxxxxxx nezahrnují. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx x xxx, xx obě xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx obě pohlaví xxx statistickou analýzu xxxxxxx.
2.2 Vyhodnocení x xxxxxxxxxxxx výsledků
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx dávkou xxx xxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx faktorem pozitivního xxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx testováním, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk může xxxxxxxxx, že testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx procesy x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx má schopnost xxxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx výsledky, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx ze získaného xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx nevyvolává.
Xx xxxxx xxxx x úvahu, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx používána, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx zasáhne (např. xxxxxxxxx toxicita).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx tyto informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud je xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- počet, xxx x pohlaví xxxxxxx,
- původ, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, xx xx xxxxx dostala xx xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxx tkáně,
- případně převod xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a vody,
- podrobný xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxx vzorků,
- metody hodnocení xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, její xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx,
- metody xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx zvíře,
- kritéria, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx toxicity,
- xxxxxxxxx index,
- xxx x xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, jejich xxxxxx x směrodatná odchylka,
- případné xxxxx xxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
B.12. XXXXXXXXXX - XX XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX V XXXXXXX ERYTROCYTECH
1. METODA
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Mikronukleus xxxx in xxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx v xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxx xxxxx xxxx. x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx mikrojader představujících xxxxxxxxxxxx fragmenty nebo xxxxxx xxxxxxxxxx.
Když x erytroblastu xxxxxx xxxxx vznikne polychromatický xxxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx mikrojádro. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx buňkám xxxxx xxxxx. Xxxxxx četnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx chromozómů.
V xxxxx xxxxx xx xxxxxx dřeň xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx proto, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x této xxxxx tvoří. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xxxx prokázáno, xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx odstraňovat xxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx numerické chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx kritérií, xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx kinetochoru (centromery), xxxx xxxxxxxxxxxxx XXX x mikrojádru. Konečným xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxx počet zralých (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx použít x xxxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx u savců xx xxxxxxx vhodný x hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx metabolismu xx vivo, farmakokinetiky x procesů reparace XXX, x xxxx xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx a xxxx konečným xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx také xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx byl předtím xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx xx testovaná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx metabolit xx xxxxxx tkáně xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): xxxxxxx xxxxxxxxxx, se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx xxxxx xxxxxxxx xx jádra buňky (xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx opožďujícími xx fragmenty xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: zralý xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx erytrocytů xxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx jsou dosud xxxxxxxx ribozómy, takže xxx xxx xxxxxxx xx zralých, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pomocí barviva xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx používá xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx ve vhodnou xxxx xx působení xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xx izoluje x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxx (1-7). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx vhodné xxxx xx působení xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxx, xxx xx xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx používá periferní xxxx, xxxx xxx xxxx od poslední xxxxxxxx xx zpracování xxxxx xx nejkratší. X preparátech se xxxxxxxx přítomnost xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx jako xxxxxxx xxxxxxx myši xxxx xxxxxxx; může xxxx xxx xxxxxx jiný xxxxxx savčí druh. Xxxxxxx-xx xx periferní xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Xxx ovšem xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx druh za xxxxxxxxxxx, xx xx x něj xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx x něj xxxx xxxxxxxxx dostatečná citlivost xxxx látkám, xxx xxxxxxxxx strukturální nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx označí x po xxxx xxxxxxxxx pěti xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních xxxxxxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou podávat xxxxx xxxx se xxxx podáváním xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx je xx xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Do xxxxxxx testu je xxxxx pro xxxxx xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.
U xxxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx nalezena xxxxxxxxxx xx xxxx xxx dávkách, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole xx xxxx tak, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx možné xxxxxxx odlišným xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxx xxxxxxxx x jednom xxxxxxx xxxxxxxxx. Kde je xx xxxxx, xx xxxxx používat pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx skupiny, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx pozitivní kontrolu:
Xxxxx | XXX | EINECS |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
N-ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx rozpouštědlem nebo xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx časových xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx k dispozici xxxxxxxxxx historické údaje x xxxxxxxxx xxxxx x mikrojádry x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx první xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x neovlivněných xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxx mutagenní xxxxxx.
Používá-li xx xxxxxxxxx xxxx, může xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola přijatelný x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx pouze x xxxxx krátkodobých xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 xxxxx), kde xxxxxxxx xxxxx leží x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx pět analyzovatelných xxxxxxx každého xxxxxxx (11). Xxxxx x xxxx, xxx se xxxxxx provádí, xxxxxxxx xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx pohlavími xxxxxx v toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx chemikáliím xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxx například x xxxxxxxxx farmaceutických přípravků, xxxxxxx xx test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxx, dvě xxxx více xxxxx x 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxx použít delší xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx v xxxxx xxxxxxxxxxx neprokáže xxxxxxxxx xxxxx; v xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx toxicita, nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x podávání xxxxxxxxxxx xx do xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx dávku xxxxxxxxx xxxxx, může xx k usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx den xxxxxx x rozmezí nanejvýše xxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
(a) Xx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, poprvé xx xxxxx než xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx ne xxxxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx po 24 hodinách, musí xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx dvakrát, xxxxxx ne xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, se vhodnými xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxx 72 xxxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx časovém intervalu xxxxxx xxxxxxxxx odpověď, xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxx (xxxx. dvě xxxx xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxx kostní xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx posledním xxxxxx xxxxx (12).
Je-li xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx mimoto použít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je třeba xx provádět x xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (13). Při xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxxx xxxxx, xxxx nulové. Pro xxxxxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx vzorků xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Xx je definována xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx vyšších xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx by xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, jež x xxxxxxx xxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx mitogeny, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx dávek x vyhodnocují se xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka může xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (např. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx krvi).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 mg/kg hmotnosti x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx a jestliže xx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx provedena xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx dlouhodobé xxxxxx xx limitní xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx době xxxxxx xxxxx xxx 14 dnů. Podle xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx dávkové xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 ml/100 x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba upravit xxxxxxxxxxx látky tak, xxx xxxxx byl xx všech dávkových xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx dřeně / xxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx usmrcení xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx x femuru nebo xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx metodami. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x ocasní xxxx xxxx xxxx vhodné xxxx. Xxxxxx xxxxx xx okamžitě za xxxxxxxxx stavu xxxxxx (8) (9) (10), xxxx se xxxxxxx xxxxxx, které xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx specifického xxx XXX (např. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x artefaktů vznikajících xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xx nedala použít xxxxx xxxxxxx (např. Xxxxxx). Xxx použít x xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx kolony xx sloupcem celulózy x odstranění buněk x jádrem (16) - xxxxx tyto xxxxxx jsou x xxxxxxxxxx rutinně xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). K xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x případě kostní xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx a x xxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx jedince xx vyhodnocuje xxxxxxxxx 2000 xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx se xxxxx erytrocytů s xxxxxxxxxx. Doplňující xxxxxxxxx xxx získat xxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zralých xxxxxxxxxxxx. Při analýze xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx než 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx dobu xxxx xxxxx nebo xxxxx, xxx také xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Možnou xxxxxxxxxxxx x manuálnímu xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy (analýza xxxxxx a průtoková xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx cytometry), xxxxx xxxx zdůvodněny x xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx zaznamená xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx nezralých xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx byl xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů xxxx xxxx, je xxxxx xxxxx xxxx xxxxx o zralých xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxxx). Podíl nezralých xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx erytrocytů x mikrojádry se xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx žádné xxxxxxx x tom, xx xxx pohlaví xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx údaje za xxx pohlaví pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx s xxxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování výsledků xxxxx se mohou xxxxxx statistické xxxxxx (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, se x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx negativní výsledky, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx poškození xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka v xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx erytrocytech.
Xx xxxxx xxxxxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx testované látky x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, chovné xxxxxxxx, xxxxxx apod.,
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx počátku xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx,
- údaje xx xxxxxx xxx určení xxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx o přípravě xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- případné xxxxxx x xxxxxxx, že xx látka xxxxxxx xx xxxxxxxxx oběhu xxxx do xxxxxx xxxxx,
- případný xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg hmotnosti),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- podrobný xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x odběru xxxxxx,
- metody xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- podíl xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x celkovému xxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů s xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxxx počet ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxx každou skupinu,
- xxxxx dávka - účinek, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy x metody,
- xxxxx ze souběžných x historických xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- údaje xx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.13/14. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX
1. METODA
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx tryptofan). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx detekovat genové xxxxxx vzniklé mechanismem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx několika xxxxxxxxxx x chromozómu xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxx xxxxxx spočívá x xxx, xx xx xxxxxxxx mutace, xxxxx zpětně vracejí xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx aminokyselinu. Xxxxx změněná xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx základě xxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx aminokyseliny, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxx x člověka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx supresorových xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx roli xxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxxxx mutace xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, díky xxxx xxxx citlivější xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx x eliminace xxxxxxx reparace XXX xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx DNA, xxx xxxx xxxxxxxx x chybám. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx umožňuje xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, jež xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací je x xxxxxxxxx velmi xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx širokou xxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx chemikálií x xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx chemikálií xxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Test xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx kmenů Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (histidinu xxxx. tryptofanu), xxx xxxxx ke vzniku xxxxx, xxxxx je xx dodávce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nezávislý.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx bází x XXX. Při xxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx mutace xxxx xx jiném xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (mutageny vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx odebrání xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxx v XXX, xxxx xx xxxx xxxxx rámec x XXX.
1.3 XXXXXXX XXXXX
X bakteriálním xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx buňky, které xx xx xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx látek xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx opravy XXX. Xxxxx in xxxxx xxxxxx xxxxxxxx exogenní xxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xx xxxxx ovšem xxxxxxxx dokonale xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx in xxxx, xxxxx test xxxxxxxxxxx přímé informace x xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dané xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx test xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx používá xxxx xxxxxxx xxxxxxxx genotoxické xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx genové xxxxxx. Pomocí xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx testu pozitivní, xxxxxxxx také x xxxxxx xxxxxxx mutagenní xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, jež xx xxxxx testem neodhalí; xxxxxxx tohoto nedostatku xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx veličin, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx druhé xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu reverzní xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, jakými jsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (kupříkladu xxxxxx antibiotika) a xxxxx, x xxxxx xx předpokládá xxxx xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx replikační systém xxxxxxx buněk (xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx topoizomerázy xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx); v xxxxxxx xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx, ovšem korelace xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx tímto xxxxxx xxxxxxxx nejsou, protože xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Suspenze xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx x xx nepřítomnosti exogenního xxxxxxx metabolické aktivace. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx "xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxx x vrchním xxxxxx x vylije xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx směs inkubuje x smísí x xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xx xxxxxx na minimální xxxxxx xxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx xx xxx xx xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx x počtem xxxxxxxxx revertujících xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx miskách x xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx provedení xxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xxxx klasická xxxxxxx xxxxxx ["xxxxx xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) a suspenzní xxxxxx (11). Xxxx xxxx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxx pro testování xxxxx nebo xxx (12).
Postupy xxxxxxx x rámci xxxxxx xx týkají xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x metody xxxxxxxxxxxx. Xxx tyto xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací, tak xxx ní. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx preinkubační xxxxxxx; xxxxx se x xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx alifatické xxxxxxxxxxx x krátkým řetězcem, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3). Xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx třídy xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx standardních procedur xxxx xxxxxxxx. Xx xx xx xxxxx xxxxxxxx jako na "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx identifikovány xxxxxxxxxxx "speciální xxxxxxx" (xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx x diazosloučeniny (3) (5) (6) (13), xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. XXXXX XXXXXX
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Bakterie
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vypěstují xx xxxxxxxx exponenciálního xxxx xxxxxxxxxxx stacionárního stadia xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx stacionárním xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx, aby kultury xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vysoký xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Titr xx xx prokázat xxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx růstových křivek, xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Doporučená xxxxxxxxx teplota xxxx 37xX.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx pět bakteriálních xxxxx, které xxxxx xxxxxxxxx xxxxx kmeny X. xxxxxxxxxxx (TA 1535; XX 1537 xxxx XX97x nebo 1X97; XX98; x XX100); u xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx různými xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx mají xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx bází XX x xx známo, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx vyvolávající xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx látky xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx X. xxxx XX2 nebo X. xxxxxxxxxxx TA102 (19), xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx XX. Xxxxx je doporučená xxxxxxxxx kmenů xxxx:
- X. xxxxxxxxxxx XX1535 x
- X. typhimurium XX1537 xxxx XX97 nebo XX97x a
- X. typhimurium XX98 x
- S. xxxxxxxxxxx XX100 a
- X. xxxx XX2 xxxX xxxx X. coli WP2 xxxX (xXX101) xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102.
X detekci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vazby xxxx být nejvhodnější xxxxxx XX102 xxxx xxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx X. xxxx (xxxx. X. xxxx WP2 xxxx X. coli WP2 (xXX101)).
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zásobní xxxxxxx, xxxxxxx markeru x xxxxxxxxxx. Pro každý xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxxxxx závislost na xxxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx, tryptofan x xxxxxxx xxxxx E. xxxx). Xxxxxxx xx xxxxx zkontrolovat x xxxxx xxxxxxxxxxx charakteristiky, x xx: přítomnost xx xxxxxxxxxxxx R-faktor xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx x xxxxx (xxxx. rezistence xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx XX98, TA100 x TA97a xxxx XX97, WP2 xxxX (xXX101) a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx u xxxxx XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx xxxxxx u X. xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxX xxxxxx x X. xxxx xxxx uvrB xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx revertujících xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx očekávaném xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dat xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx možno x x xxxxxxx uvedeném x literatuře.
1.5.1.2 Médium
Xxxxxxx xx vhodný xxxxxxxxx agar (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X a xxxxxxxx) a xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx histidin x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několik xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx jak xx xxxxxxxxxxx, tak za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx látkami, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x koncentracích xxxx 5 a 30 % x/x xx xxxxx S9. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X některých případech xxxx xxx xxxxxx xxxxxx post-mitochondriální frakci x xxxxxxxx koncentracích. X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).
1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx připraví xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Kapalné xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx ředí. Je xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx přijatelné.
1.5.2 Xxxxxxxx testu
1.5.2.1 Xxxxxxx kmeny (viz 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Koncentrace
Xx xxxxxxxxx, která xx xxxxx vzít x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého množství xxxxxxxxx xxxxx, patří xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxx směsi, xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx.
Může xxx xxxxxx stanovit xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vymizením xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx přežití xxxxxxxxx kultur. Xx xxxxxxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx změnit. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxx okem.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx x těchto xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, by xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx nerozpustných. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxxxxx již xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx než 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx, se xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Sraženina xxxxx rušit při xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx pěti xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx intervalem (xx. √10) mezi xxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Zkoumá-li xx koncentrační xxxxxxxxx, xxxx xxx vhodný xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx koncentrací vyšších xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx v xxxxx, xxxxxxx-xx se látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutagenních nečistot.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxx zahrnovat x xxxxxxxxx kmenově specifickou xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací, tak xxx ní. Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxx takové xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx efektivnost xxxxxx xxxxx.
X xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu volí xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx v testech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 |
Následující xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx kontrolou xxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Látka | XXX | XXXXXX |
Kongo xxxxxx | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-xxxxxxxxxxxxx xx nepoužívá jako xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx X9. Xxxxx xx 2-aminoantracen xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx X9 charakterizovat xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Příklady xxxxx, jež jsou xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, uvádí tato xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX | |
Azid xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 a XX 100 |
2-xxxxxxxxxxxx | 607-57-8 | 210-138-5 | XX 98 |
9-xxxxxxxxxxxx | 90-45-9 | 201-995-6 | TA 1537, XX 97 a XX 97a |
ICR 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, TA 97 a TA 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | TA 102 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 | XX xxxX x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, XX2xxxX a XX2xxxX (xXX101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (AF2) | 3688-53-7 | kmeny xxxxxxxxxx plazmidy |
X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx dostupné, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx se vztahem x xxxxxxxx xxxxx.
Xx třeba použít x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x rozpouštědla xx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx testované xxxxx, se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xx použijí x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx ovlivnění xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx mutagenní xxxxxx.
1.5.3 POSTUP
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) a 0,5 xx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X testech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) s 2,0 xx vrchního xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx /testovaným xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Vrchní xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx preinkubovat x xxxxxxxx xxxxxx (obsahujícím xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) a xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 xxx xxxx déle xxx 30 - 37 xX; xxxxx xx xxxxx x vrchním xxxxxx a xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Obvykle xx mísí 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx xxxxxxxx a 0,5 xx směsi X9 nebo sterilního xxxxx x 2,0 xx vrchního xxxxx. Xxxxxxxx xx během xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx dávku xxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx vědecky xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx xx xxxxxx misky, xxxxxx xx test xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nádobách (12) (14) (15) (16).
1.5.4 INKUBACE
Všechny xxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx při xxxxxxx 37 xX xxx xxxx 48 - 72 xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x negativní kontroly (xxxxxxxxxxxx, popřípadě kontrola xxx xxxxxxxx, byla-li xxxxxxx), tak x xxxxxxxx pozitivní. Xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx) xx xxxxxx počty xxx xxxxxxxxxx misky x průměrný počet xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxx xxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Verifikace xxxxxx xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepovažuje xx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx experimentech xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx studijním xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx modifikovat, xxxxx xxxxxxx xxxx koncentracemi, xxxxxx xxxxxxxx ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" nebo xxxxxxxxxxx x tekutém xxxxxxxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxx pozitivního výsledku xxxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx závislý xxxxxx ve sledovaném xxxxxxx a/nebo reprodukovatelný xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx více xxxxxxxxxxxxx x minimálně xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem xxxx xxx xxx (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx relevance xxxxxxxx. Jako xxxxxxx xxx vyhodnocování výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (24), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx, xxxxx xxxxxxxx výše xxxxxxx kritéria nesplňují, xx v tomto xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Většina xxxxxxxxxxx xxxx poskytuje jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx však xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx typu xxxxxxxxxx xxxx xxxx posuzovaných xxxxxx x xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx daných zkušebních xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx je třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xx známa.
Kmeny:
- xxxxxxx kmeny,
- xxxxx buněk x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- množství xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxx (x xx xxxx μx) xx xxxxxxxxxxx volby xxxxx x xxxxx xxxxx xxx jednu xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-typ x xxxxxxx systému metabolické xxxxxxxx (včetně kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- postupy xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- počty na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních (rozpouštědlo/vehikulum) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných odchylek.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.15. XXXXXX XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxx haploidní x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx genových xxxxxx indukovaných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x x xxxxxxxxxxxx aktivací.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx systémy x xxxxxxxxxxx kmenů, xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x červených, xxxxxx vyžadující xxxxxx (xxx-1, xxx-2) xx xxxxxxx, adenin xxxxxxxxxx xxxx mutanty a xxxxxxxxxx systémy, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Nejlépe xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx systém xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx XX 185-14 X x okrovými (xxxxx) xxxxxxxx mutacemi xxx 2-1, arg 4-17, lys 1-1 x trp 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx bazí, které xxxxxxxx mutace xx xxxxxxxxxxx místě, nebo xxxxxx supresorové mutace. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 marker, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx revertován xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
U xxxxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X7, který je xxxxxxxxxxx pro xxx 1-92.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Roztoky xxxxxxxxxxx xxxxx x kontrol xxxx xxx připraveny xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx vhodného xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx ve vodě xxxxxxxxxxxxx xx nemá xxxx roztok xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x organických xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit životnost x xxxxxxxxxxxxxxx růstu.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkám xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx systémem xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx z jater xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy x xxxxxxxx kofaktory. Xxxxx xxxxxx druhů, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx vhodné xxx metabolickou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Haploidní xxxx XX 158-14X x xxxxxxxxx xxxx X7 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx xxx rovněž xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx x mutovaných xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má být xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx koncentrací. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Látky xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx až xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx xxxxx netoxické, xx vodě xxxxxxxxx, xx xxxxxx případ xx případu.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx po xxxx xxx při 28 xx 30 xX xx xxx.
1.2.2.6 Frekvence xxxxxxxxxxx mutací
Frekvence xxxxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxx má být x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnot.
1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx
Xx nutno xxxxxx nejméně xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx x prototrofními buňkami x x životnosti xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 3-10 x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx získány xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx stacionární xxxx xxxxxxxx buňky. Základní xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx na rostoucích xxxxxxx: 1-5 x 107 buněk/ml je xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 až 30 xX xx třepání. Xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx buňky x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx první xxxxx negativní, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx s buňkami xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx dalším vhodným xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx mají xxx potvrzeny nezávislým xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx informace o:
- použitých xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx ve stacionární xxxx xxxx rostoucí, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx vlastního xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.16. MITOTICKÁ XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxxxxxx rekombinace x Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx a jeho xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, kdežto xxxxx případ xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx recesivních xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, genová xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx tvorby xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx heteroalelického xxxxx, xxxxx nese xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx kmeny xxx detekci xxxxxxxxx xxxxxx konverse xxxx X4 (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 2 x xxx 5), D7 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 5), XX34 (heteroalelický x xxx 4) x XX1 (xxxxxxxxxxxxxx x his 4 x xxx 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx produkující xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx může být xxxxxxxxx x D5 xxxx X7 (xxxxx xxxxxx xxxx mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx komplementární xxxxx xxx 2.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Roztoky xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxx užít roztok xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx dimetylsulfoxid (XXXX). Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx aktivace
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx jak x xxxxxxxxxxx, xxx v xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx systémem xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakce xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx aplikaci xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Testovací xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx D4, X5, X7 x XX1. Xxxxx jiných xxxxx může xxx xxxxxx vhodné.
1.2.2.2 Média
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx specifickou xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxx xx cytotoxicitu x rozpustnost. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xx životnost xxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx nerozpustné xxxx xxx xxxxxxxxx xx xx mez xxxxxxxxxxxx xxxxx za použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx od xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx působení testované xxxxx buď xxxxxxxxxxx xxxx, nebo xxxxx xxxxx po xxxx xx 18 x. Xxxxxxx xxxxxxxxxx ovlivňované xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxx znehodnocuje.
1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xx tmě xx xxxxx xx xxxx dní při 28 - 30 xX. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx červených x růžových sektorů xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x chladničce (cca 4 oC) xx xxxxx 1 - 2 xxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxx utvořit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Spontánní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx x frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Počet replikací
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx misek xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx tvořených xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxx určení xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx recesivní xxxxxxxxxxxx xxxxxxx mitotickým xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Postup
Xxxxxxxxx S. cerevisiae xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx stacionární, xxxx rostoucí xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx vystaveno testované xxxxx xx dobu xx 18 h. xxx 28 xx 30 xX za xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xx přidáno v xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx.
Xx skončení xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx vhodné kultivační xxxxxx. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x buňky x indukcí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx xxxxx negativní, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx potvrzen xxxxxx xxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, přežívajících xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, složení xxxxx, xxxxxxx x trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: hladina xxxxxxxx, postup x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx rekombinant, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvence xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxx, pokud xx xx možné, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat,
- diskusi xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
X.17. MUTAGENITA - XXXX GENOVÝCH XXXXXX X SAVČÍCH XXXXXXX XX VITRO
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX TG 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx in xxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X5178X, xxxxx CHO, XXX-XX52 a X79 xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x lidské lymfoblastoidní xxxxx XX6 (1). X těchto buněčných xxxxx xx nejčastěji xxxx xxxxxxx genetický xxxxx zjišťují xxxxxx x thymidinkináze (XX) x hypoxanthin-guanin xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x x xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxx xxxxxx x XX, HPRT x XXXX se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Autosomální xxxxxxxxxx XX a XXXX xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxx xxxxxx), které xx na xxxxxx XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
K xxxxx na xxxxxx xxxxxx x savčích xxxxxxx xx vitro xx dají xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx kultury x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxx vyžadují xxxxxxxx zdroj metabolické xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx podmínky xx xxxx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. X pozitivním xxxxxxxxx, xxx xxxxxx důsledkem xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxx pH, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).
Xxxxx test xx xxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxxx savčích mutagenů x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxx, xxxxx jsou x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx testem x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx látky a xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx zřejmě xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kódovaného xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxx xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx bází x XXX.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, během xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx genové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: počet xxxxxxxxxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx růst: xxxxxx xxxxx buněk x čase x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxx buněk; vypočítává xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx kontrolou) x xxxxxxx klonovací xxxxxxxxx xxxxxxx efficiency (x xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx růst: xxxxxxx nárůst počtu xxxxx xxxxx období xxxxxxx x xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): klonovací xxxxxxxx (xxxxxxx efficiency) ovlivněných xxxxx x době xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx exprese.
Přežití: xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) ovlivněných buněk xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxx se xxxxxxx x porovnánís xxxxxxxx kontrolní buněčné xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Buňky, deficientní xx thymidinkinázu (XX) x důsledku xxxxxx XX+/- → XX-/-, xxxx rezistentní xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx thymidinkinázu xxxx xxxx XXX xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx další xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx XXX xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx mutovan xxxxx, xxxxxxx normální xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx buňky s xxxxxxxxxxx XXXX nebo XXXX selekčně xxxxxxxxxxx xxxx 6-xxxxxxxxxxx (TG) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx je xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se selekčním xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mutace v xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx každé xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vůči xxxxxx x xxxxxxxx x bez xxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx, xx je xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Xxxxx x suspenzi nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx a xxxxxxxxx xx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Cytotoxicita xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx relativní klonovací xxxxxxxxx (xxxxxxx) (cloning xxxxxxxxxx) xxxx relativního xxxxxxxxx xxxxxxx kultur xx xxxxxxxx látky. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx dostatečnou xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx daný xxxxx x xxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx expresi xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx selekční xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a v xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, ke stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx kolonie spočítají. Xxxxxxx frekvence xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x z xxxxx xxxxxxx x neselekčním xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx typů, xxxxxx xxxxxxxx xxxxx L5171Y, XXX, CHO-AS52, X79 x XX6. X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx testu xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxxxxx, vysoká xxxxxxxxx xxxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx se xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx kontaminovány xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx nesmějí.
Test xx třeba naplánovat xxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxx). Počet xxxxx, xxxxx xxxxxx x koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx těmto xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyhovovat (14). Minimální xxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecným xxxxxxxx je, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx desetinásobkem xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxxxxxx 106 xxxxx. Xxxx xx xxx x dispozici xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, kterými xx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testu.
1.4.1.2 Média x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentraci XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx xx pro xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx buňky. Zvláště xxxxxxxx je, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněk xxxxx expresní xxxxxxx x schopnost jak xxxxxxxxxx, tak xxxxxxxxxxxx xxxxx tvořit xxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx namnoží xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX. Xxxx provedením xxxxx, je třeba xxxxxxx zbavit dříve xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.4 Metabolická xxxxxxxx
Xx buňky xx xxxxxxxxxx látkou xxxxxx x přítomnosti x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx indukujícími enzymy xxxx xx Aroclor 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx činí xxxxxxx 1 - 10% x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému xxxx xxxxxxx xx xxx, jakého xxxx xx testovaná xxxxxxxxxx. X některých xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx modifikované buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx xxxxx by xxx být xxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx suspenze xx xxxxxxx rozpouštědle a xxxxxxxx naředí. Kapalné xxxxxxxxx látky xx xxxxx xx systému xxxxxxxx přímo xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, ledaže xxxxx x jejich xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx mohlo x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx známé rozpouštědlo xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxx xxx, xxx je xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě zvažováno xxxxxxx jako rozpouštědla xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx xx vodě xxxxxxx, musí být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Xxxx xx xx odstranit xxxxxxxxxxxx sítem.
1.4.2.2 Koncentrace
Mezi kritéria, xxx se xxxxxxx xxx stanovování xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x změny xX xxxx. osmolality.
Cytotoxicita se xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (přežití) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx nebo xxxxxx toxicity. Xx xxxxxxx znamená, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx více xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx mezi hodnotami 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, měla xx xxxx x xxxxxxxxxxx přežití (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx celkovému xxxxx x 10-20 %, xx však xxxx xxx 10 %. X relativně xxxxxxxxxxx xxxxx xx maximální xxxxxxxxx dávka xxxx xxx xxxxxxxx z xxxxxx 5 xx/xx, 5 μx/xx a 1,01 M.
U relativně xxxxxxxxxxxxx xxxxx, jež xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, než xx koncentrace, při xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, má xxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, než xx mez xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, X9, séra xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx dá xxxxxxx x prostým okem. Xxxxxxxxx xxxxx být xx překážku při xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.3 Kontroly
V rámci xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx provést i xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, vehikulum) xxxxxxxx, x to xxx x metabolickou xxxxxxxx, xxx xxx xx. Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx účinku. Xxxx látkami xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx methansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (malé a xxxxx xxxxxxx) | xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx koncentrace X-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
xxxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx látky; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx historickou xxxxx x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (XXX 59-14-3, xxxxx XXXXXX 200-415-9), xxx xxxxxx x tuto xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx, kde xx to xxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx každý xxxxxx interval sklízení xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx kultury. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxxxxxx ovlivnění, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xx mutagenní účinky.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx proliferující xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx jak x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxxxxx xxxxxxx po vhodnou xxxx (xxxxxxx je xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Doba xxxxxxxx xxxx přesáhnout xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx každou xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx kultury xxxxxxxxxx xxxx jenom xxxxx. Používá-li xx xxxxx jedna xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx se zajistil xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x analýze (tj. xxxxxxxxx osm xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx duplicitní.
V xxxxxxx plynných nebo xxxxxxxx látek xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx expozici xx obvykle xxxxxx x analýzou cytotoxicity xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - cloning xxxxxxxxxx xxxx relativního celkového xxxxx.
Xxxxx lokus xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx téměř xxxxxxxxx xxxxxxx nově xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx se xxxxxxx x xxxxx x x bez xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx exprese xx xxxxx x xxxxxxxx životnosti (xxxxxxxxx x výpočtu četnosti xxxxxxx) inokulací xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx látka v xxxxx X5178X XX+/- xxxxxxxxx, je třeba xxxxxxxxx xx jedné x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x tomto testu xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx s XX6XX+/-.
2. ÚDAJE
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx x životnosti, počty xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. X xxxxxxx pozitivní xxxxxx v xxxxx X5178XX+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx koncentraci testované xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx velkých i xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx prostudovány x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx testu TK+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx nejrozsáhlejší xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx zdvojení, x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx. Rozmezí xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Tvorba malých xxxxxxx je xxxxxxxxxx x expozicí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx postižené xxxxxxx xxxxxx podobnou rychlostí xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x vytvářejí velké xxxxxxx.
Xx xxxxx uvádět xxxx přežití (relativní xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx efficiency) xxxx relativní celkový xxxx. Mutační xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxx přežívajících xxxxx.
Xxxxxxx xx individuální xxxxx o kultivačních xxxxxxxxxx; xxxxxxx se xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní výsledky xx xxxx potvrdit xxxxxx od xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx potvrzení negativních xxxxxxxx nepovažuje za xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx studie xxx, xxx se rozšířilo xxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x experimentu xxxxxxxxxxx, patří rozdíly xxxx jednotlivými xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx metabolické xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx stanovení xxxxxxxxxxx výsledku existuje xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx nárůst xxxx reprodukovatelný xxxxxx xxxxxxx frekvence. Nejprve xx třeba uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní výsledky, x ojedinělých případech xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xx genové xxxxxx v savčích xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx savčích buněk xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx dávka - xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx genové mutace.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx testované látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.
Buňky:
- typ x xxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x cytotoxicitě x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, koncentrace XX2,
- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,
- objem xxxxxxxx x xxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxx teplota,
- xxxx xxxxxxxx,
-xxxx xxxxxxxx xxxxx,
- hustota xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxx metabolické aktivace, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx,
- délka expresní xxxxxxx (případně xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, u xxxxx xx hodnotí velikost x typ (xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "xxxxxxx" koloniemi).
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xX x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx, xxxx-xx stanoveny,
- xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx,
- xxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx malé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X5178X TK+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x negativních (rozpouštědlo/vehikulum) x pozitivních kontrol, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX SYNTÉZA DNA - XXXXX BUŇKY XX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Test neplánované xxxxxxx XXX (XXX) xxxxxxxx měřit xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Test je xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx tymidínu (3X-XxX) xx XXX savčích xxxxx, xxxxx nejsou x X xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vzestup 3X-XxX xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x exponovaných xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. XXX xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xx xxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxx referenční xx xxxxxxxx xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx jenom xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk.
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx, xxxxxxxx lymfocytů xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx fibroblasty).
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx bod xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx buněčných xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx kultur (nebo xxxx, xx-xx xx xxxxxxx zdůvodnitelné) xxx XXX XXX.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
X xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly v xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Jako pozitivní xxxxxxxx lze xxx xxxxxxx hepatocyty xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-AAF). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxx xxx autoradiografii, xxx i pro XXX xxx metabolické xxxxxxxx xxx použít 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Xxxx xxxxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lze xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávat toxický xxxxx.
Látky ve xxxx xxxxxx rozpustné xxxx xxx xxxxxxxxx x koncentracích xx xx hranici xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx rozpustné se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xx případu.
1.2.2.4 Buňky
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, teplota x vlhkost. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxxx xxx pravidelně xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Mycoplasmat.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx experiment
1.2.3.1 Příprava xxxxxx
Stabilizovaná buněčná xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx z povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx), inokuluje xx do xxxxxxxxxxxx xxxxx xx vhodné xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx se připravují xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx metody.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx potkana jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx vhodnou xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx jsou ponořena xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxxxx film), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x vyhodnocena.
Stabilizované xxxxxxx linie x xxxxxxxxx
Autoradiografické xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxx xxxx x pak xxxx xxxxxxxxx působení 3X-XxX. Xxxx působení xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx systému a xx xxxx buněk. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX je xxxxx 3X-XxX xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx mezi těmito xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx interakcí xxxx xxxxxxxxxx látkou x 3X-XxX. K xxxxxxxx xxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA xx užívá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx média, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxxxxxx XXX pomocí LSC: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx X-xxxx, jak xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Na xxxxx kultivace xx XXX xxxxxxxxxxx z xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx DNA x určen xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx ve xxxxx uvedených xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, je x nestimulovaných xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX zbytečná.
1.2.4 Analýza
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Při xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x S-fázi xxxxxxxxx. Hodnotí xx xxxxxxx 50 buněk x každém xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx zakódovat xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X každém xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx náhodně vybraných xxxx. Množství xxxxxxxxxxxxxxx 3X-XxX x xxxxxxxxxx xx určí x xxxx o xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx každé xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxx xxxxxxxxx XXX XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx počet xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx kontroly.
Xxxxxxxx xxxx být potvrzeny x nezávislých experimentech.
2. XXXXX
Xxxxx musí xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Xxxxxxxxxxx autoradiografie
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxxxxx a xxxxx zrn xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx jádro xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxx a xxxxx xxx v xxxxx xx hodnocen xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Inkorporace 3X-XxX xx xxxxxxxxxxx xxxx xxx/μx DNA. Xxxxxxxx xxxxxxx dpm/μg XXX xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx používají x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, jejich xxxxxxx a xxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxxxxx kultur,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, médiu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- testované látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx jejich xxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx aktivačním systému,
- pokusném schématu,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx autoradiografických xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx buněk xx X-xxxx,
- postup xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX x k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XXX xxx xxxxxx XXX,
- vztahu xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.19. XXX - VÝMĚNA XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XX VITRO
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
XXX xx xxxxxxxxxx test xxx xxxxxxx recipročních xxxxx XXX mezi xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxx replikačními xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) lokusech. XXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx spojení, xxx xx xxxxx xxxx znalostí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatid. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XxxX) do xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x přítomnosti x xxx xxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xx-xx xx potřebné. Xxxxxxxxx se xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx v médiu xxxxxxxxxxx XxxX. Xx xxxxx kultivace xx xxxxx ovlivní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vřeténka (xxxx. xxxxxxxxx) k xxxxxxxxx xxxxx v x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (xxxxxx lymfocyty) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Buněčné xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx z hlediska xxxxxxxxxxx Mycoplasmaty.
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2 x xxxxxxx).
Testovaná xxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace rozpouštědla xxxxx významně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, rychlost xxxxx xxxx xxxxxxxxx XXX.
Buňky se xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx savčího metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx použití xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx úroveň x xxxxxxxxxx této aktivity xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly s xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s použitým xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: etylmetansulfonát
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx třeba, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx dávky. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx mít signifikantní xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk. Xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx xx xx hranici xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie se xxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (trypsinací nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx nádob xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx takový počet xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xx xxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xx připraví x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx a inkubují xxx 37 oC.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Buňky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx. Ve xxxxxxx případů stačí xxxxx xx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx na xxx xxxxxxx cykly, je-li xx třeba. Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxx látkou v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na konci xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x růstovém xxxxx x XxxX xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x XxxX xx dobu xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx buněčného xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x XxxX xx třeba xxxxxxxx v xxxxx xxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx žárovky, xxx xx zabránilo fotolýze XXX, xx xxxxx xx inkorporovaný XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx buněk
Jednu xx čtyři xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dělicího xxxxxxxx (xxxx. kolchicín). Xxxxx kultura se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx cytogenetickou xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx XXX může xxx xxxxxxxxx několika xxxxxxxxxx (xxxx. fluorescenční xxxx Xxxxxx).
1.2.3.5 Analýza
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxx. Xxxxxxx xx hodnotí nejméně 25 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxx. Preparáty xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se analyzují xxxxx xxxxxxxx s 46 xxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx pouze xxxxxxxx, xxxxx se xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxx centromer. Xx třeba xxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx být ověřeny x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxxxxxxx tabulkovou formou. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxxxx x xxxxx XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Údaje se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx i jeho xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx kultur xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx,
- způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (odděleně xxx xxxxxx kulturu),
- xxxxxxxxx xxxxx XXX/xxxxx x XXX/xxxxxxxxx (odděleně xxx každou xxxxxxx),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx dávka/účinek, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx vyhodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.20. RECESIVNÍ XXXXXXX XXXXXX XXXXXX XX POHLAVÍ U XXXXXXXXXX MELANOGASTER
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxx na xxxxxxxxx letální xxxxxx xxxxxx na xxxxxxx (XXXX) na Drosophila xxxxxxxxxxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxx, jak xxxxxxxx, xxx i xxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Je xx test xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx mutací x přibližbě 800 xxxxxxxx chromozómu X. Xxxx reprezentují xxx 80 % xxxxx xxxxxx X-chromozómu. X-chromozóm xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx v X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx nesoucích xxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx na xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx ze xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx rodí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. SRLS test xx xxxxxxx vzhledem x xxxxxxxxxx xxxxxxx x uspořádání xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx definované xxxxxx linie a xxxxxx xxxxx Muller-5. Xxxxx xxx použity x xxxx xxxxxx xxxxx popsané linie xxxxx x vícenásobnou xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx
Testované látky xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. směs etanolu x Tweenu-60 nebo 80), xxxx xxxxxxxx xx dále xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO) xxxx xxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Test xx xxxxxx určenou citlivost. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxxxxxx per xx, injekčně xxxx xxxxxxxx plynům nebo xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx NaCl x xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
X xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx negativní (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx historické xxxxxxxxx xxxxx, xxxx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.6 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx tři xxxxx testované xxxxx. Xxx xxxxxxxxx orientační xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx maximální tolerované xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Popis xxxxxxx
Xxxxx divokého xxxx (xx stáří 3-5 xxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou a xxxxxxxxxxxx kříženi x xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxx Muller-5 nebo x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxx xxx, xxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx letální efekt xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx expozice xx xxxxx spermie, na xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx stadiu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx X1 samice xxxxxxxx x tohoto xxxxxxx xxxx xxxx kříženy xxxxxxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx. X X2 xxxxxxxx xx x xxxxx kultuře xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Jestliže v xxxxxxx xxxxxxxx F1 xxxxxx nesoucí xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx chromozómem), dcery xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx, zda xxxxxxxx xx opakuje x dalších generacích.
2. XXXXX
Získané xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx hodnocených X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx pro každou xxxxxxxxxxx, pro xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx xxxxxxx testovaného xxxxx. Zaznamenává xx xxxxx clusterů různých xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Výsledky xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nahromadění xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx v xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx Drosophily, xxxx, počtu xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx X2 xxxxxx, xxxxx X2 kultur xxx potomků, xxxxx xxxxxxxxxx nesoucích xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx odběru xxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x rozpouštědlem) x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx počítání xxxxxxxxx mutací,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx údajů,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.21. XXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX - IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Savčí xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx fenotypických xxxx xx vitro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkami xxxxxxxxx x maligní xxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx C3H10T1/2, 3X3, XXX, Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx se xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, tvorbu xxxxxxx nebo xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx agaru. Xxxx xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x buňkách xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx in xxxxx testu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx hodnocení xxxxxxxxxxxx xx vychází xx xxxxxxxxxxx, xx expozice xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxxxxxxxx relevantní, ale xxxxxx xx nelze xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Buňky
Xxxxxxxx xxxx buněčných xxxxx x primokultur xxxxxxxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx musí xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx transformace xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx test používaný xxxxxxxxxx je xxxxxx x xx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx podmínky xxxx xxx vhodné pro xxxxxxx test transformace.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx médiu xxxx xx xxxxxxx rozpouštědle xxxx ovlivněním buněk. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x kultuře xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxxxxx rychlost xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Metabolická xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx její vlastnosti xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x použitím xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx také negativní xxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontroly:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx: 2-acetylaminofluoren, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx třeba, xx xxxxx zařadit xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se nejméně xxx dávky. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxx závislý xx koncentraci, nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x nejnižší xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxxxx kontrole. Xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx xx xx hranici xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Buňky xxxx být exponovány xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Ta xxxx xxxxxxxxx x opakovanou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx (ev. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx se xxxxx o prolongovanou xxxxxxxx. Xxxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného metabolického xxxxxxxxxxx systému. Na xxxxx expozice xx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx pro transformaci. Xxx xx zaznamenáván xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx prezentovány x xxxxxxxxx formě. Xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx transformací xxxx počet xxxxxxxxxxxx xx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu pokusu xxxxxxxx, je-li to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, kultivačních xxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx sledovaného xxxxxxxx, xxxxxxx selektivního systému (xx-xx to xxxxxx), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- metodách xxxxxxxxx xxxxxx x transformovaných xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.22. DOMINANTNÍ XXXXXXX TEST X XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx letalita způsobuje xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Indukce xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx, xx dominantní xxxxxxx mutace jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromozómů (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxx embrya xxxxxxxxxx samice xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku.
Samci xxxx exponováni xxxxxxxxx xxxxx a pářeni x xxxxxxxxxxxxx, intaktními xxxxxxxx. Xxxxxxx mrtvých xxxxxxxxxx xx samičku x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Preimplantační xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx počtu žlutých xxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx implantací na xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx- x postimplantačních xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx založen xx srovnání živých xxxxxxxxxx xx samici x exponované xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx skupině. Snížení xxxxx implantací x xxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (t.j. xxxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx vodě xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx s testovanou xxxxxx xxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podává pouze xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxxxxxx informací je xxxxx xxxxxxx látku xxxxxxxxx. Xxxxxxx způsob xxxxxxxx je orální xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxx i xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Experimentální xxxxxxx
Xxx test xx doporučují xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx biologické charakteristiky. Xxxxx xx xxxx xxxxxx zjištěnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx volí xxxxxx xxxxx samců, xxx xx dosáhlo 30 - 50 březích xxxxx xx připouštěcí xxxxxxxx.
1.2.2.4 Negativní a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní x xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) kontroly xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxxxx experimentu. Jestliže xxxx xx xxxxxxxxx x dispozici přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol x xxxxxxxxx experimentů, xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx ve xxxxxxxx, xxxxxxx dávkách, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Nejčastěji xx xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxxxxxxx známky xxxxxxxx nebo snížené xxxxxxxxx x exponovaných xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x jedné xxxxx 5 x.xx-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Existuje xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jednorázová xxxxxxxx. Může však xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx.
Jeden xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx aplikaci xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx cyklu xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xx xxx schématem xxxxxxxx x musí xxxxxxxxx všechna stadia xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxx xx expozici.
Samice xxxx xxxxxxxx cervikální xxxxxxxxx xx druhé xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x určení xxxxx mrtvých x xxxxxx xxxxxxxxxx. Vaječníky xxxx xxx vyšetřeny x určení xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx o xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx. Xxxxxxxx každého páření xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x samice xxxx uváděny xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxx, x počtu živých x mrtvých implantací.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dominantního xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxx xx srovnání xxxxx živých implantací xx samici x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx ku xxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx poměru x xxxxxxxxx skupině xx xxxxxxx vypovídá x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrátách.
X xxxxxxx musí být xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx letalita. Xxxx xxx zaznamenány x preimplantační xxxxxx. Xx xxxxx být xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu obsahuje, xx-xx možno, xxxxxxxxx x:
- druhu, xxxxx, xxxx a xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx od každého xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, negativních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, údajích x xxxxxxxx,
- xxxxxxx podání x xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx páření,
- xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx,
- doba xxxxxxxx,
- kritéria xxx počítání xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx dávka/odpověď,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX ABERACÍ X XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Chromosome Aberration Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxx xxxxx je xx vivo xxxxxxxxxxxxx xxxxx způsobující strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx xxxxxxxx chemickými xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu xxxxxxx rovněž. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x běžně xx k xxxxxx xxxxx nepoužívá. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Tímto xxxxxx xx analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, x proto xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx predikovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hlodavci. Tímto xxxxxxxxxxxxxx testem xx xxxx xx zjišťují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx nepoužívá xxxx xxxxxx buňky.
Aby xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx mitózu xx působení xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx než xx poškození ztratí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx informace x ovlivněných xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx zjišťují xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx in xxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx mutageny xxxxxxx x somatických xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Mimoto xx test xxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx tím, xx xxxxxxxx posuzovat xxxxxxx metabolismu xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX.
X xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx tedy představují xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, kde xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spermatogonie. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx spermatogonií xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx-xxxxxxxxxxxx bariéře.
Existují-li xxxxxxx toho, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx cílové xxxxx xxxxxxxxx, není xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx chromatidového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx se projevuje xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx obou xxxxxxxxx, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Aberace chromozómového xxxx: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyjádřená xxxx xxxx respektive jako xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx jako aberace xxxx dicentrický xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx chromozóm-ring)
Xxxx xxxxxxxxxx: jako xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx jedné nebo xxxx chromatid za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx ve struktuře xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx v xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx jedna xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx menší xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx charakteristickému pro xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx (3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové struktury xxxxxxxxxxx mikroskopickou analýzou xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx testované xxxxx x xx xxxxxxx xxxx po xxxxxxxx xx xxxxxx. Před xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). Xx zárodečných xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx se x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx čínských xxxxxx x xxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxx jakéhokoliv xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx druhu. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx nemají přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Všeobecné podmínky xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x části B.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx mladí xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx označí x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx se xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Klece xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, aby se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlivy xxxx, xxx a xxx jsou klece xxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava dávek
Xx-xx testovaná xxxxx x pevném xxxxx x xx-xx to xxxxx, látka se xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky se xxxxx xxxxxxx přímo xxxx xx před xxxxxxxxx xxxx. xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, ledaže údaje x stálosti (stabilitě) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Rozpouštědlo/vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx je xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx každého testu xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx kontroly xx xxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx.
Dávky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látku a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Příklady xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Látka | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
akrylamid xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Negativní xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx všech xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné historické xxxxx o xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx xxx minimálně xxx analyzovatelných xxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx se podává xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx dvou xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx x xxxxxxxx dávku, xxxx se x xxxxxxxxx aplikace rozdělit, xx. xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx dávkování xxxxxx být vědecky xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx s nejvyšší xxxxxx xx vzorky xx expozici xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka může xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 24 a 48 xxxxx po xxxxxxxx. X ostatních xxxxx (xx. mimo xxxxx nejvyšší) xx xxxxx vzorků xxxxxxx xx 24 hodinách xxxx po 1,5násobku xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx znám vhodnější xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (6).
Xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx xxxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxx. jedná-li xx x látku xxxxxxxxxxx pohyb chromozómů xxxxx mitózy, nebo xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx na S-fázi xxxxx, jsou vhodnější xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).
Zda xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xx případu. Pokud xx xxxxxxx aplikace xxxxx opakovaně, xxxxxxxx xx xxxxxxx po 24 xxxxxxxx (1,5násobku xxxxxxxxx xxxxx) od xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx provádět i x dalších xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx xx xx xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx z xxxx xx xxxxxxx intervalu xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou k xxxxxxxxx žádné vhodné xxxxx, je třeba xx provádět x xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx použijí x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx toxicity xx užívají pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Pro pozdější xxx odběru xxxxxx xx pak xxxxx xxxxxx jenom xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, že při xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxx, jež x nízkých netoxických xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou představovat xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx pro stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx k xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx spermatogoniích (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x xxxxx meiotické xxxxxxxx( xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx při xxxxx xxxxxxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x jeden den xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí být xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx použití xxx xxxxxxxxx úrovní. Xxxxx xxxxxxxxx humánní expozice xx může použít x xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávky.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx sondou nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxx překročit 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx zdůvodněné. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x minimalizovala xx xxx objemová variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx z xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx připraví buněčná xxxxxxxx, xx xxxxxx xx působí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x fixuje xx. Xxxxxxx suspenze xx xxxxxx na xxxxxxxx sklo x xxxxxx.
1.5.7 Analýza
X xxxxxxx jedince xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx xx xxxxxx, xx-xx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx postupy xxxxx xxxxx x xxxxxxx určitého podílu xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x všech xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x hodnocených xxxxxxx xxxxx xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. U každého xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými aberacemi x počet xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových aberací, xxxxxx xxxxx a xxxxxxx. Gapy se xxxxxxxxxxxxx zvlášť, xxxxxxx xx, ale xxxxxxx xx xx celkové xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x meióza, xxxxxxx xx x všech xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxxxxx míra xxxxxxxxxxxx poměr mitóz xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xxx, xx xx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx buněk. Je-li xxxxxxxxxxx pouze mitóza, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx používá xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxx xxxxxx a s xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx systému považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxx ohledu xx xxxxx opakovaných xxxxxxxxxxx.
Pozitivní výsledky xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx oberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Je třeba xxxxxxxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění volby xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x xxx xxxxxx,
-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx počátku xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx skupiny.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované látky,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx testované xxxxx,
- zdůvodnění xxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v potravě/pitné xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx / xxx),
- podrobnosti x xxxxxxx potravy x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- mitotický xxxxx,
- poměr xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx metafázi,
- xxx a xxxxx xxxxxxx xxx každého xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx počet xxxxxxx x xxxx skupině,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- údaje xx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx ploidie.
Diskuse xxxxxxxx.
Závěry.
B.24. XXXX XXXX X MYŠÍ
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xx xx xx vivo xxxx xx myších, x xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx chemickým xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xx, xxxxx kontrolují xxxxxxxxxx xxxxx. Embrya xxxx heterozygoti xxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx ztráty xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vyjádřeny xxxxxxxxxx fenotypem x xxxxxxxxx xxxxxxx vytvářejících xxxxxx (xxxxx) pozměněné xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Počet xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x potomků x kontrol. Xxxx xxxx test detekuje xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx buňkách.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx jsou xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxx X (xxxxxxxxx, x/x; chinchilla, pink xxx, xxx x/xxx x; xxxxx, x/x; xxxxxx, short xxx, x xx/x se; xxxxxxx xxxxxxxx, x/x) xxxx xxxxxxx buď x xxxxxx XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, brachypody, xx a xx/xx x xx; xxxxxx xxxxx, xx xx/ /xx xx; xxxxx xx/xx) nebo s xxxxxx X57 XX (xxxxxxxxx, x/x).
Mohou xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xx budou xxxxxxx xxxxxxxxx potomci. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx NMRI (nonagouti, x/x; albino, x/x) x XXX (xxxxxxxxx, x/x; brown, x/x; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Počet x pohlaví xxxxxx
Xxxxxxx se dostatečný xxxxx zabřezlých samic, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxx. Vhodná xxxxxxxx vzorku xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x x kontrolních xxxx. Xxxxxxxxx výsledky jsou xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx nejméně 300 xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Negativní x pozitivní xxxxxxxx
Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pouze xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx kontroly). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnoty x xxxx laboratoře xx předpokladu, že xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx látce se xxxxxx mutagenním xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxx se používá xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx xxxxx myši. Xx-xx xx vhodné, je xxxxx použít xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxx dvě xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx zmenšení xxxxxxxxx vrhu.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. xxxx 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx den xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxx odpovídají 7.25, 8.25 a 9.25 xxx xx koncepci. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx.
Xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx skvrn xxxx xxxxxx a čtvrtým xxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx skvrn:
(x) xxxx xxxxxx x xxxxxxx 5 mm xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x kterých xx předpokládá, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);
(x) xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx vyskytují x xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx, hrdla, xxxx, xxxxxxx slabin x xxxxxxxxx čela x xxxxxxxxxxx se, že xxxxxxxx v důsledku xxxxxx diferenciace (XXX);
(x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxxx x srsti xxxx výsledek somatických xxxxxx (RS).
Všechny xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx, XX, je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx x odlišením xxxx XXX a XX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chlupů xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Zaznamenávají xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx potomků.
2. XXXXX
Xxxxxxx data xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxx majících xxxxx xxxx více xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx porovnávají xxxxxxxx xxxxxxxx. Údaje xxxx xxxx uváděny xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu pokusu xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxx použitém xxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx samic x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx skupině,
- xxxxxxxx velikosti xxxx v experimentální x v xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx rozpouštědle,
- xx kterém xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- x způsobu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx sledovaných xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx x WMVS, XXX x XX x experimentální x xxxxxxxxx skupině,
- xxxxxxx morfologických xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x RS, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX U MYŠÍ
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
Test xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxxxx zárodečných buňkách xxxxxxxxx v první xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx potomků xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a XO-samice xxxxxxxx sníženou xxxxxxxxx, xxxxx se využívá xxx xxxxx F1 xxxxxxxxx pro cytogenetickou xxxxxxx. Úplná xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx některými xxxx xxxxxxxxxxx (X-xxxxxxx x x-x xxx). Xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx stadiu xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, xxxx X1 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx F1 xxxxx. Samice XX xxxx xxxxxxxxxxxxx identifikovány xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx v mitózách x xxxxxx dřeně.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx toxické xxxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou být xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx křížení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xx xxxx xxx xxxxx xxx xxx x xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx zvířat
Xxxxx xxxxxx nutně xxxxxx xx frekvenci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxx indukovaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx samců F1 xxxxxxx. Nejméně 500 xxxxx x F1 xxxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže budou xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx X1 xxxxxxxx potomků, xxx xx xxxxxxxx 300 samců a 300 samic.
1.2.1.4 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x předchozích xxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx z xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx se jedna xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxx, xxx xxx vlivu xx xxxxxxxxxxx chování nebo xxxxxxxxx. Xxx stanovení xxxxxx dávka/odpověď xx xxxxx dvou xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxx xx možná xxxxxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxxx xx 35 dnů.
Xxxxx xxxxxxxxx xx expozici xx xxxxx schématem xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx zárodečných xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx konci období xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx vrhu x xxxxxxx mláďat. Xx vrhu xxxx xxxxx i xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xx experimentu.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Používá xx jedna xx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx možných xxxxxxxx xxxxxxxxxxx cytogenetickou xxxxxxxx xxxx cytogenetická xxxxxxx xxxxx samců X1 xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx testu xxxxxxxxx.
(x) Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x F1 xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx určení normální x xxxxxxx fertility xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx: X1 xxxxx xxxxxx x testování xxxx odděleni xxxxxxxxxx xx xxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx denně počínaje 18. dnem xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx x pohlaví X2 xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx porodu, xxxx xxxx jsou xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx testovány X1 samice, X2 xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx uchováváni xxx xxxxx testy. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potomka. XO-samice xxxx xxxxxx změnou xxx ratio xxxx xxxxxx xxxxxxx x 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx vs. xxxxxx. V následném xxxxx xxxx normální X1 xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testování, xxxxxxxx xxxxx X2 xxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx hodnotu, xxxxx xxxx zaznamenány xxxxx x xxxxx xxxx. X1 zvířata, xxxxx xxxxxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxx F2 xxxx, jsou dále xxxxxxxxx buď xxxxxxxx xxxxxx dělohy, nebo xxxx xxxxx podrobena xxxxxxxxxxxxx analýze.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx u xxxxxx translokací je xxxxxxxxx smrtí xxxxxx, xxxxx xxxxxx počet xxxxxxx implantací xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxx X1 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx denní ranní xxxxxxxxx vaginální zátky. Xxxxxx jsou xxxxxxxx 14. - 16. xxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx zárodky.
(x) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxx X x primárních spermatocytech. Xxxxx nejméně xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx splňuje xxxxxxxxxx xxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx je nositelem xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx no xxxxxxxx, xxxxxxx F1 xxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Na každého xxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně 25 xxxxx v xxxxxxxxx - metafáze X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve spermatogoniích xxxx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx s xxxxxx testes a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx x X1 xxxxx xxxxxxxxxxx XX. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx krátkého xxxxxxxxxx x každé x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx samčí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (c-t xxx). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx samčí xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Přítomnost 39 xxxxxxxxxx xx všech 10 xxxxxxxx je xxxxxxx pro XX xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxxxx xxxxx xxxx prezentovány xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx připouštění xx zaznamenána xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu x xxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx).
Pro xxxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx F1 xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx analýzu xxxxxx dělohy xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a mrtvých xxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx X1 nosičů xxxxxxxxxxx.
Xxx cytogenetické xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx I xx xxxxx počet xxxx multivalentních xxxxx x celkový xxxxx xxxxx xxx každého xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx X1 xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx se uvádí xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
U XX xxxxx se uvádí xxxxxxxx xxxxxxxx trhu, xxx ratio X2 xxxxxxx x výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx, že xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů.
Xxxx být xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxx x pozitivních xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- kmenu xxxx, xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- experimentálních xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx ovlivňování xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx samici, počet x xxxxxxx potomků xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- době x kritériích xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- počet x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.26. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX ORÁLNÍ
(90denní xxxxxxxxx podávání per xx, studie xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, x kapslích xxxx x pitné xxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx případě xx xx xxxxxxx podávání xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx než 6 xxxxx, x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 xxxxx. Xx xxxxxxx studie xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx předběžný test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v obou xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 dnů xxxxxxxx xxxxx a během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx skupině xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, které se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx nebo xxx malý počet. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx vyvolat xxx xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 úrovně xxxxx, mají xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx skupině x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx dávky x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx být xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxx xx použít xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x ppm xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx sondou, xxxx xx xx tak xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx, x dávkování x xxxxxxxxxxxx intervalech (týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx se 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxx (nebo xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) žádné toxické xxxxxx, xx možno xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx toxická xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxx xxxxxxxxxx množství xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky nebránily xxxxxxxx výživě zvířat.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx a xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
X ideálním případě xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx látka 7 xxx v týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxxx skupinách, která xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (a xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx x pitné vodě) x hmotnost xxxxxx xx zaznamenávají týdně.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu zvířat, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx zařazení.
Po xxxxxxxx studie se xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx skupin, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě vyřadit, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx alespoň x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx trombocytů.
(x) Xx xxxxx pokusu xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx jater x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se volí xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx toxicity.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx uvážit xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech tělních xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx dutiny xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx vysychání.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny tkáně x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, tkáň xx místě xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, (slinné xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxx xxxxx xx třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x závorkách xx xxxxxxxx v xxxxxxx, xxxxx lze xx xxxxxx postižení xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx skupiny, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Je třeba xxxxxxxx xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.
(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v jiných xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx zvířat xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx k zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx stavu xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxx x xxxxxx x těchto xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x xxxxxx xxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx kterých bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx s vysokou xxxxxx.
(x) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxx a xxxxxxxx, x xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Je k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- experimentální xxxxxxxx - úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis toxických xxxx jiných xxxxxx,
- doba, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- spotřeba potravy x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx analýz xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde je xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává denně xxxxxx xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx), x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Zvířata, která xxxxxx během xxxxxx, x xxxxxxx, která xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během experimentu. Xxxx testem se xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx náhodně přiřadí xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxx nebo xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx způsoby orální xxxxxxxx. Všem zvířatům xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx stejnou xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx: xxxx se přednost xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba pracovat xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxx xx xx x xxxxxxxxx začít xx xxxx od 3 xx 6 xxxxxx x xx starším xxx 9 xxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx se má xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx x xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx každou xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx (4 xxxxxx a 4 xxxxx). Počet xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx testované xxxxx xx xx zvířaty x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx. Nejnižší xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx existují xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dávky měla xxxxxxx jen toxický xxxxxx na hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, mají xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx.
Ve xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx by x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx málo xxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx ani aplikované xxxxxxxx ani další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
Podává-li se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx buď xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (v xxx xxxx mg.kg-1 xxxxxxx) xxxx konstantní xxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx alternativu xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xx xx látka přímo, xxxxxxxxx x kapslích, xxxx xx se xxx dít xxxxx xxx ve xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Provede-li 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti xx den (nebo xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, je-li tato xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Podává-li se xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx množství xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířat.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx a xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
X ideálním xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Podává-li xx xxxxx jiným xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx se xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 xxx x xxxxx.
Pozorování xxxxxxxx (xxx xxxx xx xx omezeno) xxxxx xxxx, srsti, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx (x příjem xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pitné xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx se zaznamenávají xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k minimalizaci xxxxx zvířat xxx xxxxxx. Po skončení xxxxxx xx pitvají xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx třeba okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx x xx konci studie xxxxxxx u všech xxxxxx, ale xxxxxxx x xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.
(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx srážlivosti xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x xxxxx buď x xxxxxxxxx intervalech xxxx xxxxxxxxx x dále xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny studie xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (přičemž trvání xxxx hladovění xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (dříve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx glutamát-oxalacetát xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Mezi další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: lipidů, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxx vzorků krve xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (ne více xxx 24 hodin).
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx postup, xxx xxx na podkladě xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx těla, xxxxx tělních otvorů, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx včetně xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a varlata xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx možná xxxxxxxx histopatologická vyšetření: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx místě xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), žlučník, jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, tenké, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), xxxxxx kost x xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx včetně kloubních xxxxx) x (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx se posuzují, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a tkání xx xxxxx provést x všech xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xx xx indikováno xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx s jednotlivými xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx obsahovat tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx nebo xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx podmínky,
- xxxxxx dávek (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxx účinku, xxxxx xx xxx stanovit,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (zejména xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální příznaky x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, kde xx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX
(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx hlodavcích)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se aplikuje xxxxx na xxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx skupině jedna xxxxxx dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Krátce xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx pokusných xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx xxxx experimentem. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx potřeba xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx nepoškodila xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx nanášení xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xx třeba vzít x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxx pokusech x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx upraveny do xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, králíky xxxx xxxxxxx, případně x xxxx xxxxxxx xxxxx, jejich xxxxxxx xxxx musí xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx by nemělo xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx úroveň xxxxx použít nejméně 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Samice musí xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx se zvířata xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 90 dnů xxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Dávkování
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx dávek x xxxxx kontrolní xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 6 xxxxx denně. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se mělo xxxxxxxx každý xxx xx xxxxxxx dobu. X intervalech xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx udržovala xxxxx xxxxxxx dávky ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění aplikace, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným skupinám, x xx ve xxxxxxx množství, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx hladina xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné uhynutí xxxx jen x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx odhady expozice x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx tuto xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 xxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx voleny xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx skupině s xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx skupině xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Vede-li xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxx koncentraci, což x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx vést x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxických xxxxxx. Došlo-li x xxxxxxx xxxxxxxxx kůže, xx dokonce xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx studii xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx člověka, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, není xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx zvířata xx třeba xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx a xxx, xx kterém xx xxxxxx x opět xxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx xx studované xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx pro následné xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Doba xxxxxxxx činí xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx látku xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx celou plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % povrchu xxxx, u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxx tato xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx pokrýt xx xxxxxxxx část xxxxxxx xxxxxx rovnoměrně x xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x kontaktu x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x nedráždivé náplasti. Xxxxxxxxx xxxxxx je xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx obvaz x xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxx xx zabránilo orálnímu xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxx xxxxx xxxx jiným xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx, a xxxx xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx zaznamenávat xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx zařazení. Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx satelitních skupin, xxxxxxx. Umírající zvířata x zvířata v xxxxxx stresu či xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření oftalmoskopem xxxx rovnocenným přístrojem xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx a na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx alespoň x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.
(b) Xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx dobu srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx trombocytů.
(x) Xx konci xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxxx trvání xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx), xxxxxxxxxxx transferáza (xxxxx glutamát-pyruvát transamináza xxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x séru. Xxxx xxxxx charakteristiky, které xxxxx být potřebné xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další biochemické xxxxxxx mohou být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx studium xxxxxxx spektra xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx postup, xxx xxx xx podkladě xxxxxxxxx nebo pozorované xxxxxxxx.
Xxxxx nejsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, hrudní x břišní xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba přechovávat xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, štítná xxxxx, příštítná xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, (průdušnice), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, přídatné xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx žláza), (xxxxxxxx sval), periferní xxxx, (oči), (hrudní xxxx x xxxxxx xxxxx), (kost stehenní xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx normální x xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx x tkání xx třeba provést x všech zvířat xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx postižení.
(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x ostatních xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, plíce xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxx histopatologicky xxxxxxxxxx x zjištění příznaků xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx zdravotního xxxxx xxxxxx. Další xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x zvířat těchto xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxx xxxxxxx xxxx xx orgánech, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx ve skupině x vysokou xxxxxx.
(x) Používá-li se xxxxxxxxx skupiny, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx zjištěny xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s jednotlivými xxxx lézí. Výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx,
- úrovně dávek (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xx xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx bez xxxxxx, xxxxx xx lze xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx během experimentu, xxxxxxxx údaj o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy a xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- oftalmologické nálezy,
- hematologická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx případných xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx je to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx pokusných zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to xx 90 xxx. Použije-li xx pro xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx x atmosféře xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, která přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x podmínkách xxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, přidá xx x testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx příslušná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx je xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx známy xxxxxx xxxxx tomu. Xxxxxxx xx xx mladých xxxxxxxx zvířatech z xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 samic x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je nutno xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx exponovat další xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx koncentraci x během následujících 28 dnů po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxx výskyt toxických xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxx úrovní koncentrace x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx s xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxxxx - v xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x skupiny x xxxxxxxx koncentrací testované xxxxx). X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx se zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx jen x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat toxický xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx by počet xxxxxxx xxx být xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
1.2.2.4 Xxxxxx expozice
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 6 hodin xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. X případě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx i jiných xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxx xx používá xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx za xxxxxx, aby byl xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx box, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx boxu xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx přesáhnout 5 % xxxxxx xxxx. Xx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx individuální xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jinými xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x zotavení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, xx xxxxxx xx objeví x opět xxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.3. Popis postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx aplikace, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xxxxx experimentu xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být mezi 30 % a 70 %, x xxxxxxxx případů, kde xx není xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Během expozice xx nepodává xxxxxxx xxx xxxx.
Používá xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx xx provést xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx podmínky x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx nejrychleji.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:
a) Měření xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty o xxxx xxx ±15 %. X některých xxxxxx x aerosolů, xxx této úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, se připouští xxxxx rozsah xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx koncentrace xxx xxxxxxxx, jak xx xx prakticky xxxxx. Xxx xxxxxx generátoru xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxx, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx
x) Xxxxx xxxxxxxx x po xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx; xxxxx zvíře xx xxxx individuální protokol. Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a zaznamenávat xxxxxx xxxxxx, stupeň x trvání. Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx chybného zařazení. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X všech xxxxxx xxxxxx kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření oftalmoskopem xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Quickův), xxxxxxxxxx čas xx xxxxx trombocytů.
(c) Xx konci pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx jater x ledvin. Výběr xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx dřívější xxxxxxxxx xxxx, xx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických parametrů xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx dutiny x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) a xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x tkáně xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx (mají xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, tak aby xx xxxxxxxxx struktura xxxx - xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx vhodnou), tkáň xxxxxxxxxxx, mozek - x xxxxxx medula/pons, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx místě xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (kůže), xxxxxxx (je-li přítomen), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, tlusté x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, reprezentativní xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí xxxxxx žláza), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), hrudní xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx ve třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Tkáně v xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx příznaků xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx s cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická vyšetření
(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx systému x xxxxxxxxx orgánů x xxxxx je xxxxx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx exponována xxxxxxxx koncentraci, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(b) Je xxxxx vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze.
(x) Xx třeba vyšetřit xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinách.
(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx se mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože xx poskytuje xxxxx xxxxxxxxxxx stavu xxxxxx. Xxxxx histopatologická xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rutinně, xxxx xx xxxx provést xxxx xx orgánech, xx kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx satelitní xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na tkáních x xxxxxxxx, x xxxxxxx byly zjištěny xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx a xxxxx xxxxxx s xxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx počet zvířat x xxxxxxxxxxxx typy xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, krmení,
- xxxxxxxx xxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpadního xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrací x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx sestaví xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristikou xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatnou xxxxxxxxx). Mají obsahovat xxxx xxxxx:
x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením,
x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
x) povaha xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx,
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (x aerosolu),
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx během experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx sledování,
- xxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x jejich xxxxxxxx,
- biochemická vyšetření x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.30. TESTOVÁNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx expozici xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx sledování xxxxxxx toxicity.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx testem jsou xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx i xxxxx xxxxx (hlodavce nebo xxxx). Xx třeba xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx běžně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx zvířat xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx subchronické xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx stejný xxxx a kmen x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 samců), xxxxxx x pro xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx měly xxx xxxxxxxxx x neměly xx být xxxxx. Xxxxx xx záměrem xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
X případě xxxxxx druhů xxxxxx (xxxxxxxxxx) xx možné xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxx xxx 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx skupině.
1.2.2.3 Dávky x frekvence expozic
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx toxicity xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx prokazatelné xxxxxxx xxxxxxxx. Střední xxxxx xx měly xxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx dávek xx xxx xxxx x xxxxx výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx, xx testovaná látka xx podávána x xxxxx vodě xxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx identická x každém ohledu x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx zvláštních xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní kontrolní xxxxxxx, xxxxx není xxxxxxxxxx ani vehikulu.
1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Dva xxxxxx způsoby aplikace xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx systémová toxicita x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x předchozích xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx
Tam, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xx-xx xxxxxx jedna z xxxx, jimiž xxxx xxx exponován xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx aplikaci, xxxxx xxxxxx proti tomu xxxxxx důvody. Zvířata xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.
Ideálně xx xx xxxx xxxxx podávat sedm xxx v xxxxx, xxxxxxx dávkování xxx xxx x xxxxx xxxx vést x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx v xxxxxx xxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, především x xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx je považováno xx přijatelné.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx jsou technicky xxxxxxxxxxxxxxx než xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx uvedeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx cestě podání. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace může xxx xxxxxxx alternativou x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx lidské xxxxxxxx, takže xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxx denně xx xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), s xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx zvířat xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X obou xxxxxxxxx jsou zvířata xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx je x xxx, že v xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x ještě delším xxxxxxx během xxxxxxx.
Xxxxx přerušované xxxx xxxxxxxxxxx expozice xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxxxxxx, která xx xxx simulována. Xxxxxxx, xx třeba vzít x úvahu určité xxxxxxxxx obtíže. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx narušeny xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) generace xxxxxxxx xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx a technik xxxxxxxxxxxx.
Expoziční xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x rovnoměrná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by x xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x komoře xxxxx zvířat xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontinuálně;
(x) xxxxxxxxxxx: během denní xxxxxxxx xx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx více xxx 15 % xxxxxxx xxxxxxx;
(x) teplota x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 oC x xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx by měly xxx xxxxxxxxxxxx průběžně;
(x) xxxxxx velikosti xxxxxx: xxxx by xxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx atmosféry xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému suspendovanému xxxxxxxx, x když xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Analýza xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx prováděna xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx stabilitu aerosolu, x poté během xxxxxxx tak často, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Pozorování
Xxxxxxx klinické xxxxxxxxx xx mělo xxx xxxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxx zvířat xx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx u xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx mrtvá a xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx sledovat, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků, x xxxx xx xxxxxx minimalizace xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx kanibalismu.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurologických x xxxxxx změn x všech xxxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxx objevení x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.
Hmotnost xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat jednou xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x aspoň xxxxxx xx xxxxx xxxxx po xxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx (a xxxx xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxx xxxxx tělesné xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx ukazatele srážlivosti) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, šest xxxxxx a poté x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx z xxxxx skupiny. Xxx xxx je xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxx potkanů. Navíc xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx zhoršený xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx studie, xxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx a u xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx nebo xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx se x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Vzorky xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx možno xx xxxxxxxx zvířat x xx stejných intervalech xxxx xxxxxxxxxxxxx zkoušky. Xxxxxxxxxxx stanovení jsou xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx skupiny xxxxx xxxxx x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, objem x xxxxxxx u jednotlivých xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- kvantitativně).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx před xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx je připravena xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx následující zkoušky:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- koncentrace xxxxxxxx,
- testy xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx bázické xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, např. krevní xxxxxxx xx xxxxx,
- testy xx xxxxxx ledvin, např. xxxxx močoviny x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx aspartát aminotransferáza
1.2.3.5 Xxxxx
Kompletní xxxxx se provede x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx léze, které xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxx a xxxxx xx měly být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To se xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx mozkového, štítné xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, srdce, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, ledvin3), xxxxxxxxxxx3), jícnu, žaludku, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, močového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, slinivky, xxxxx3), xxxxxxxxxxx pohlavních xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, svaloviny, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx a xxxxxxx), sterna s xxxxxx dření x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x očí. Xxxxxxxx plic a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx; xxxxxxxx plic x inhalačních studiích, xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx studiích, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, xx být xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně xxxx, xxxxxx a hrtanu.
Xxxx-xx xxxxxxxxx jiná xxxxxxxx vyšetření, informace xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx měly xxx x dispozici xxxx mikroskopickým vyšetřením, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) xxxx xxxxxx x 10 zvířat xx pohlaví x xx xxxxxxx x xxxxxxxx x ze xxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx tělísky) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx viditelné xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx, mají být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(x) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x tkání x xxxxxxxxxx popisem xxxxx xxxx xxxxxxxxxx:
1. x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx utracena xxxxx xxxxxx,
2. x všech xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupiny,
(b) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxx xxxx ve xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx,
(c) xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx života xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxx ovlivnit xxxxxxxx xxxxxxx, skupina s xxxxxxxx nižší xxxxxx xx xxxxxxx popsaným xxxxxxxx,
(x) informace x incidenci xxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podmínkách, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změn xxxxxxxxxxxx x zvířat x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxx xxx sumarizovány xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx x xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxxxxxx xxxx lézí. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxx odpovídající statistickou xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx jakékoliv uznávané xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x testu xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, dieta,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba popsat xxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxx. standardní xxxxxxxx) x měly xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky vstupující xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx)
(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx použito
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx částic (xx-xx xx xxxxxxxxxx)
- xxxxxxx úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x koncentrace
- údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx
- xxxxxxxx (dávková) xxxxxx
- doba xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xx xxxxx
- popis xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx
- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
- oftalmologické xxxxxx
- xxxxxxx hematologické xxxxx x výsledky
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (včetně výsledků xxxxxxx xxxx)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X NEHLODAVCI
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx v xxx xxxxxx březosti, xx xxxxxx dochází x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx porodu xxxx březí xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx i s xxxxxxx xx použita x dalšímu xxxxxx. Xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryo- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxx, xxxxxxx samice, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, stejného věku x velikosti jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx laboratorních xxxxxxxxxx aspoň 5 xxx před započetím xxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Oplodnění xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Testovaná látka xx xxxxxxxx samicím xxxxx. Xxxxxxxx začíná xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx během xxxxxx organogeneze. Xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x podrobeny sledování xxxxxxxxxx skeletu x xxxxxxxxx orgánů xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Testovací xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx, myš, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x králík. Xx xxxxx používat xxxxxxxxx xxxxxxxx kmeny. Xxxxxxxxx xxxx xx neměl xxx nízkou xxxxxxxx x měly xx xxx u xxx xxxxx reakce na xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 20 březích xxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxx xxxx 12 březích xxxxxxx. Xx sledování xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx dostatečný počet xxxx a xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx aspoň tři xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupinu. X xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx do xxxxxx i xxxxxxx, xxxxx bylo xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx také xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx zvířaty v xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) se xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx biologické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx testované xxxxx xx v ideálním xxxxxxx měla x xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxx snížení xxxx, xxx xx xx xxxx xxx 10 % xxxxx. Xxxxx úroveň dávek xx neměla xxxxxxx xxxxxxxxx účinky. Xxxxxxx xxxxx xx měly xxx voleny xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nízkou x xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx, xx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx xxx xxxxx nejméně 1000 xx.xx-1 prokazatelně xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx teratogenicity, není xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxx xx xxx, kdy je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x/xxxx spermie (xxxxx xxxxx). Doba xxxxxxxx xx xxxx zahrnovat xxxxxx xxxxxx organogeneze. Xx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 6. až 15. xxx x potkana x myši, 6. xx 14. xxx x xxxxxx x 6. xx 18. xxx u xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx za nultý xxx považován xxx, xxx bylo xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx umělá inseminace, xx xxxxx xxxxxxxxxx x předchozím údajům xxxxx xxx. Xxxxx xxxx alternativy končí xxxxxxxx jeden xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxx je xxxxx xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis postupu
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx sondou, xxxxx xx stejnou xxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx být xxxxxxxx xx xxxx xxxxx na počátku xxxxxxxx látky xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx během xxxxxxxx, zvířata mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx upravována xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx toxicity xx třeba xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxx makroskopicky xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx i xx ukončení xxxxxxxx xxxxx až xx xxxx přibližně xxxxx xxx před porodem. Xxxxxxx účelem xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxxx xx komplikacím xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, dále xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vážit zvířata.
1.2.3.1 Xxxxx
Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx x samic xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo patologické xxxxx, xxxxx xxxxx xxx vliv xx xxxxxx březosti. Xxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x její xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx úmrtí embryí x xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Obvykle xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx zárodků x xxxxxx. X potkanů x králíků xx xxxxx stanovit počet xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx určit xxxxxxx xxxxxxx x zaznamenat xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X potkanů, xxxx x křečků xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxx třetiny xx xxxxxxxx vrhu x x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xx xxxxx xxxxx zárodek xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx vnitřností x xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx formě xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx, která xxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx a vztah xxxxxxx abnormit x xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx uznávané xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1. Zpráva x xxxxx
Xxxxxx x testu xx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- druh, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxx použito) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx účinku (xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx),
- dobu xxxxx xxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx hmotnosti x spotřebě xxxxxxx,
- délka xxxxxxxx x xxxxx x xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),
- údaje x zárodcích (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, defekty skeletu x xxxxxxx xxxxx),
- údaje o xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, pohlaví, defekty xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.32. TEST XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip metody
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, po větší xxxx života xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx denně xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx chovají x xxxxxxxxx podmínkách xxxxxxxx x krmení xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx zvířata náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx i další xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx by měla xxx započata co xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx by xxxxx xxx rozdíl ve xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X případě, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx studiích.
1.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, počty xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx před xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx se xxx xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx pokles xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx doby dožití xxxxxx xxxxxx účinky xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx interferovat s xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x délkou xxxxxx xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx známky toxicity. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx středním xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx x xxxxx předchozí xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx podávána x xxxxx xxxx nebo xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx být xxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx zvláštních xxxxxxxxx, jako jsou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx aktivita není xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani vehikulu.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Tři xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx orální, dermální x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx xxxxxx závisí xx fyzikálních x xxxxxxxxxx charakteristikách testované xxxxx x pravděpodobném xxxxxxx expozice u xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx z xxxx, xxxxx může být xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost orální xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx testovanou látku x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx by xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" příznaky x xxxxxx bez xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx praktické aspekty, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Dermální xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx simulace xxxxxx cesty xxxxxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx způsoby aplikace, xxxx zde uvedeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx platnou alternativou xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, takže xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx pět xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), x xxxxxxxxx jednou xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx ve xxxxxxx dobu dne, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx koncentracím xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx přerušovanou x stálou expozicí xx v xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx ústup xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx víkendu.
Volba xxxxxxxxxxx nebo kontinuální xxxxxxxx závisí na xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx expozici, xxxxx má xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, je xxxxx vzít x xxxxx xxxxxx technické xxxxxx. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx nutnosti xxxx x xxxxxx během xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x spolehlivé) xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx par x technik xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro nejméně 12 xxxxx vzduchu xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx komory xx xxxx xxx identickou xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx podmínky xxxxxxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se obvykle xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x tím se xxxxx xxxxx testované xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx by xxxx minimalizovat shlukování xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x zájmu xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx objem xxxxxx neměl přesáhnout 5 % objemu xxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) Xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu komorou xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontinuálně.
(x) Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx by xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: pro hlodavce, xxxxxxx xx xxxx xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx je voda xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
(x) Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx xxxx xxx x respirabilní velikosti xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se odebírají x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx distribuci xxxxxx, xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by gravimetricky xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i když xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Analýza xxxxxxxxx částic xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx vývoje xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx aerosolu, x xxxx během xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx použitého xxx test. Test xx měl xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx u myší x křečků x 24 měsících x xxxxxxx. Nicméně, pro xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx. s xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx doba xxxxxxxx xx měla být 24 měsíců xxx xxxx a xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Alternativně, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx přijatelné, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx dávky xxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxx na 25 %. Xxx xxxxxxxx testu, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl odpovědi, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx zvlášť. Tam, xxx xxxxx předčasně xxx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou ze xxxxxxxx toxických příčin, xxxxxx xx nutné xxxx k ukončení xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx skupiny xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem nebo x důsledku chyb xxxxxxx) x žádné xxxxxxx xxxxx než 10 % a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx a x 24 měsících x potkanů.
1.3 Popis xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Denní xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxx, xxx x sliznic, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Pravidelná kontrola xxxxxx xx xxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chyb v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx utracena a xxxxxxx.
Klinické xxxxxxxx x mortalita by xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx vývoji xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx by xxxxxxxxx stav xxxx xxxxx tělesné xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx xxxxxx xx čtyři týdny xx xxxxx období.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx o zhoršeném xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xx 12 měsíců, xx 18 xxxxxx x před utracením xxxxxx xx provede xxxxxx xxxxx xx xxxxx zvířat. Diferenciál xxxxxx krvinek xx xxxxxxx xx vzorcích xx xxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx, zvláště xxxxx xxxxxxx xxxx utracením, xxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx i x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx je xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx
Kompletní xxxxx xx měla xxx provedena x xxxxx zvířat, xxxxxx xxxx, xxxxx zemřela xxxxx pokusu nebo xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, nebo xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx tumory, je xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxx xxx možné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx (xxxxxx řezů xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, mozečkové xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx a příštítná xxxxxxx, tkáň thymu, xxxxxxx x xxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, slezina, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx, xxxxxx, děloha, xxxxxxxxx xxxxxxxx orgány, xxxx, xxxxx, žaludek, dvanácterník, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, tračník, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx x kostní xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx) x xxx.
Xxxxxxxx plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx studiích xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. X xxxxxxxxxxx studiích xx xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx nosní xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx během xxxxx, x u všech xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x nevyšší xxxxxx.
(b) Všechny xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u všech xxxxxx.
(x) Je-li xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx neoplastických lézí xxxx skupinou s xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, histopatologické xxxxxxxxx xx provede x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxx xx skupině s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxx nižší dávkou.
(x) Xx-xx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx doklad o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mohly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné během xxxxx, doba jejich xxxxxxxxx a počet xxxxxx x tumory xxx xxxxxxxx. Výsledky xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx statistické xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxx
Xxxxxx x xxxxx bude, xxxxx xxxxx, obsahovat následující xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- podmínky xxxxx: Xxxxx expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx vycházejícího z xxxxxxxxx a způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatná xxxxxxxx) a měly xx zahrnovat:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x inhalačním zařízení,
(x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(d) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (tam xxx xx relevantní),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx tumorů podle xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx během xxxxxx nebo xxx xxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxx,
- xxxxxx toxických xxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx další xxxxx,
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- použité hematologické xxxxx x výsledky,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxx xxxxxxxx s popisem xxxxxxxxx metod,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.33. KOMBINOVANÝ XXXX XXXXXXXXX TOXICITY/KARCINOGENITY
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Cílem xxxxxxxxxxxxx xxxxx chronické xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx určit xxxxxxxxx x karcinogenní xxxxxx látky x xxxxxxxxx druhu xxxxx xx dlouhodobé xxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx satelitní skupinou x kontrolní satelitní xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxx satelitní xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jak xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Zvířata v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx.
Testovaná xxxxx se xxxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika skupinám xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx část xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x po xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx tumorů.
1.2 Popis xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx pět xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních x xxxxxxxxxxxx skupin.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít x xxxxx druhy (xxxxxxxx x nehlodavce). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx odstavení xxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx neměl xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, že vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx orální xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Počet a xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) na xxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina. Xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Je-li plánováno xxxxxxxx utrácení xxxxxx, xxxxx se xxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx) xxx xxxxxxxxx patologie xxxx, xxx jsou xxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx každé pohlaví, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by měla xxxxxxxxx 10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Dávkové xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx zvolí xxxxxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx úroveň xx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xx mírný xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx jinými účinky xxx tumory. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x délkou xxxxxx xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx než 10 % vysoké xxxxx. Střední dávku/dávky xx třeba stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx dávkových úrovní xx xx měly xxxx v xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx kontrolní satelitní xxxxxxx. Vysoká dávka xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx měla xxxxxxx zřetelné příznaky xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Kontroly
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx případech, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx charakterizována, zařadí xx další negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx orální, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx fyzikálních x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Orální xxxxxx
Xxx, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx x gastrointestinálního xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, jimiž xxxx xxx xxxxxxxxx člověk, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx nebo xxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx dávkování xxx xxx v xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx vyvolat "abstinenční" xxxxxxxx x období xxx aplikace, x xxxxx xxxxxxxx výsledky x následné hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx na praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx považováno xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Aplikace přímo xx xxxx xxxx xxx zvolena xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx kožního xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx jiné způsoby xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx šest hodin xxxxx po xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx expozici v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx sedm dní x týdnu (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx čištění expozičního xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx a stálou xxxxxxxx xx x xxx, xx v xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx expozice x ještě delším xxxxxxx během víkendu.
Xxxxx přerušované xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx vzít x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx obtíže. Například xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx komplikovanější (a xxxxxxxxxx) generace xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx exponují x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x rovnoměrná distribuce xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxxxxx x expoziční xxxxxx xx xxxx mít xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx srovnatelné ve xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxx xx brání xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(b) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx expozice xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx neměla xxxxxxx xxxx než ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X x vlhkost x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx testované xxxxx x atmosféře xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(d) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx xxxx xxx v respirabilní xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx by měl xxx reprezentativní xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x měl xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx posoudit stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx zvířata xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx x 18 měsících u xxxx x křečků x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx s delší xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx měla xxx 24 měsíců xxx xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx ukončení takové xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx klesne xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx kterém xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, každé xxxxxxx xx xxxxxxxx zvlášť. Xxx, kde xxxxx xxxxxxxxx xxx skupina x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx celého xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx uznat xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx použitelných xxxxx (autolýzou, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx skupině větší xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 50 % v 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x v 24 xxxxxxxx u xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx zvířat pro xxxxx xxxxxxx x 10 připojených xxxxxxxxxxx xxxxxx každého xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx v xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. U těchto xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx patologie, která xx vztah k xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxxx projevů xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Xxxxx pozorování xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxx, xxx a xxxxxxx, jakož x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování.
U xxxxxx exponované satelitní xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx nutná, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx chyb x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xx xxxx xxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Xxxxxxxx příznaky včetně xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x mortalita xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx vývoji xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, vzhled x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.
Xx xxxxx provádět xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x pitné xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x pak přibližně xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx by xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx váhy xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. xxxxx xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, celkový xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx měření srážlivosti) xx měla xxx xxxxxxxxx za tři xxxxxx, xxxx měsíců x poté v xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 potkanů xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx to xxxxx, xxxxxx ve xxxxx intervalech xx xxxx xxx od xxxxx xxxxxxx.
Pokud xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stavu xxxxxx xxxxx studia, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx ze zvířat xx xxxxxxx s xxxxxxxx dávkou x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx nebo xxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x x xxxxxxx x dávkou xxxxxxxx nižší, než xx vysoká xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Vzorky xxxx xx 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x ve stejných xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx provedena xxx xx vzorcích jednotlivých xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxx dávek x pohlaví:
- xxxxxx moči, xxxxx x hustota u xxxxxxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxx, glukóza, ketolátky, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),
- mikroskopické xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
V přibližně xxxxxxxxxxxxxx intervalech a xx závěr xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx nehlodavců x 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví, pokud xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx. Od xxxxxxxxxx xx xxxxx toho xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:
- xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx funkci jater (xxxx. aktivita bázické xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx. krevní xxxxxxx xx xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx známá jako xxxxxx aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx pitva xx provede x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx všech xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Mělo by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxx x xxxxx xx měly xxx xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x tkání: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx mozkového, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx tělísek, xxxxx, xxxxxxx a plic, xxxxx, aorty, slinných xxxx, xxxxx3), sleziny, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, konečníku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí xxxxxx xxxxx, kůže, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (krční, hrudní x bederní), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx kosti xxxxxx xxxxxx, a xxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je optimální xxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxx tkání; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vyšetření, xxxxxxxxx získané z xxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx x xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx patologovi xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx.
1.3.2.5 Histopatologie
Xxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx satelitní xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x satelitní xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxxxxxxx xxxxxx, vyšetří xx histologicky xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x ze xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx jejím ukončení.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
(x) úplná xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx a tkáních xxxxx zvířat, která xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x nevyšší xxxxxx;
(b) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x léze, které xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx;
(x) xx-xx xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx skupinou s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupinou, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se provede x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x x dalších skupinách;
(x) xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
(x) je-li xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, je xxxxx kompletně xxxxxxxx xxxxxxxx nižší xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx x tumory xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxx xxx použity jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxx
Zpráva x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx testu: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx a způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx používá. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, a xxx, kde je xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x xxxxxxxx: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx zařízení,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx inhalační aparatury xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx použito,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxx velikosti částic (xxx kde relevantní),
- dávkové xxxxxx (xxxxxx vehikula, je-li xxxxx) x koncentrace,
- xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- výskyt xxxxxxxxx účinků podle xxxxxxx a xxxxx ,
- xxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- data x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx hematologické xxxxx a xxxxxxxx,
- testy xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx moči),
- xxxxxx patologicko-anatomické,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx použitých xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.34. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx několika xxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku x xxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx spermatogenního xxxxx (přibližně 56 xxx x myší x 70 dnů x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) dostávají látku xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx byl zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, x xxxx gravidity x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Pro inhalační xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx dvou xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx chována xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x těch podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx v pitné xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx používá x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx jiné xxxxxxxx, xxxx být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxx 7 dní v xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxx
Dává xx přednost potkanům xxxx myším. Používají xx xxxxxx xxxxxxx, xx té xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Nepoužívá xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x váhy x/xxxx věku. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx odstavena xxxx xxxxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxx termínem xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxxx a potomstva, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx chování x X xxxxxxxx, kojení, xxxx a xxxxx xxxxxxxxx generace F1 xx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata ad xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx těhotné xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx mateřských xxxxx a xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Použijí se xxxxxxx xxx exponované xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx dostávají xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx příjem x xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxx kontrolní xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx výživy.
Testovaná xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má v xxxxxxxx případě - xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx dávka by xxxxxx vyvolávat xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxx u xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx samic xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Limitní xxxx
X xxxxxxx xxxxx x nízkou toxicitou, xxxxx xx ani xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx žádným xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxx xx provádět xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx vysoká dávka, xxxxxxxxxxxx x matek xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx provádět xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Popis postupu
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx samcům rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxx xx věku pěti xx xxxxxx xxxxx, xx nejméně pětidenní xxxxxxxxxxxx xx odstavení. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx deset týdnů xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx pro xxxx). Xxxxx se xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxxx a xxxxx xxx použiti xxx xxxxxxxx xxxxxxx vrhů x xxxx pak xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx aplikace xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx po xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx před obdobím xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx týdny xxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxx gravidity xx xx odstavení X1 xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx dávkovacího plánu xxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx při připouštění
Xx xxxxx použít xxxxxxxx 1 : 1 (jedna xxxxxx x xxxxx samec) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
X případě 1 : 1 párování, xxxxxx se xxxxxxx x týmž xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx anebo xx dobu 3 xxxxx. Každé xxxx xxxx samice vyšetřeny xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx vaginální zátky. Xxx 0 těhotenství xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx x oplodnění, xx třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx páru. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x osvědčenými jedinci xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx vyšetřením xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx použitým xxx xxxxxxxxx plodnosti je xxxxxxxxx možnost xxxxxxx xxxxxxxx x pečovat x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx vrhů xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx dodržet xxxxxxxxxxx postup: xxxx 1. a 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx všech xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx se dosáhlo xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; pokud xx xxxx proveditelné, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx jiné počty, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx zvíře xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou xx xxx. Xxxxxxxx změny xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x všechny příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx potravy xxxxx. Xx xxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xx měří příjem xxxxxxx (a xxxx, xxxxx xx látka xxxxxx x pitné xxxx) xx xxxxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X xxxxxxx se xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx a xxx xxxxx. Všechna xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Doba xxxxxxx xx počítá xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx vrh se xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xx počty x xxxxxxx mláďat, xxxxx mrtvých x xxxxxx porodů x xxxxxxxxxx hrubých anomálií.
Xxxxx mláďata x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx dnu xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx mláďata se xxxxxxxxx a celé xxxx xx zváží xxxx po xxxxxx, xx 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx studie, xxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x fyzickém xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx
1.3.5.1 Pitva
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx generace X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx abnormality anebo xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx váčky, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X případě, xx xxxx orgány xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx zvířat kontrolní xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxx x xxxx x xxxxxx, xxxxx zemřela x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx, xxxxx jevily xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, se xxxxxxx i x X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx již xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx podezřelých z xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx těhotných xxxxx, xxx změn x procento zvířat xxxxxxxxx tyto změny.
Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx statistickou metodou. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxxxxxx by měla xxxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx zvířat,
- údaje o xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gestace x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xxxxxxxx pokusu,
- tabulka uvádějící xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,
- toxické x xxxxx účinky na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx byly xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud xx xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx několika xxxxxxxx samic x xxxxx x odstupňovaných xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx (X) generace dostávají xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx a xxxxxxx x průběhu xxxxxxx spermatogenního cyklu (xxxxxxxxx 56 dnů x xxxx x 70 xxx u xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xx spermatogenezu.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx látku xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx cyklů, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek testovací xxxxx xx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx zvířatům xxxx xxxxxxx x xxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx, xxxxx samicím. Xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 x xxxxxxx růstu xx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx x xx xx xxxx odstavení X2 xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx testovací metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Před zahájením xxxxx jsou zdravá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Rodičovská xxxxxxx (X) xxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x jakých xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx nebo x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx možné. Všechna xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem v xxxxxxx celého testu. Xxxxx se používá x usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo jiné xxxxxxxx, xxxx xxx x nich známo, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Látka se xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx P xxxxxxx, xx té doby xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx být xxxx charakterizována xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxx xxxx xxxx. Plodnost xxxx xxx ověřena x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, exponované x xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx spolehlivé xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, průběh xxxxxxxxx x xxxxxxxx chování, xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 od xxxxxx xx xxxxxxxxxx, a xxxxx jejich potomstva xxxxxxxx X2 až xx xxxxxxxxx.
1.2.4 Podmínky xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se těhotné xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx vytvoření xxxxxx.
1.2.5 Dávkování
Xxxxxxx xx xxxxxxx tři xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx objemu. Pokud xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx další xxxxxxxxx skupiny, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má x ideálním případě, xxxxx to xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat toxicitu x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) vyvolat xxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxx xx se daly xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx dávka xx xxxxxx vyvolávat xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, ani u xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx týden podle xxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx těhotenství.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxx dávka 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx studie na xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Xxxxx xxxxxxxxx studie xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx jasnou xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Plán xxxxxx
Denní aplikace xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxxx ve xxxx pěti až xxxxxx týdnů, xxxxx xx xxxxxxxxx aklimatizaci xx odstavení. U xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx myši). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxx případnou xxxxxxxx xxxxxxx xxxx a xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx pokusu.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx rodičovské xxxxxxxx X xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx pokračuje xxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx xx xx odstavení X1 xxxxxxxxx. Je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx podle znalostí x xxxxxxxxxxxx studované xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxxxx x končí xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Postup při xxxxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx párování 1 : 1 (xxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxx) anebo 1 : 2 (jeden xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, samice xx xxxxxxx x týmž xxxxxx ve společné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Každé xxxx xxxx samice xxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx xx definován xxxx den xxxxxx xxxxxxxxx zátky xxxx xxxxxxxx.
Vzhledem x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, zvířata xxxxxxxx X1 se xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx x myší x 13 týdnů x xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X1 se xxxxxxx xxxxxxx xxxx z xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx odstavu.
Dvojice, x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx možné buď xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx estrálního xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Zvířatům xxxxxxxx xxx vyšetření xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx normálně x pečovat x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx standardizuje, xx xxxxx dodržet následující xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxx vrhů xxxxxx xxxxxxxxx nadbytečných xxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxx počtu 4 xxxxx x 4 xxxxx na xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, např. 5 xxxxx x 3 samice. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxx generace F2 xx provede xxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx změny xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx před, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx denně. Xx porodu x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X x X1 xxxxxxx xx váží xxxxx xxx xxxxxxxx x xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx individuálně pro xxxxx dospělé zvíře.
Xxxx gestace xx xxxxxx od xxx 0 těhotenství. Xxxxx xxx se xx xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx x stanoví xx počty x xxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxxx x živých xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx anomálií.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx se uchovají xxx vyšetření na xxxxx defekty. Živá xxxxxxx se spočítají x xxxx xxxx xx xxxxx xxxx xx porodu, ve 4. a 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxx x chování x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Pitva
Všechna xxxxxxx zvířata generací X a F1 xx xxxxxxxx, jakmile xxxx xxxxx xx xxxx uchovávat xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx F1 xxxxxxxxx xxx připouštění x xxxxxxx zvířata xxxxxxxx X2 xx xxxxxx xx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X a X1 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx strukturní abnormality xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x orgánům xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx hrdlo, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, koagulační xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x další cílové xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx P a X1 xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studiích, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx X a X1 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, a xxxx x zvířat, xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx. Orgány, které xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx vyšetří x x zvířat ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx již xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx sumarizují x xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx na začátku xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx tyto xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx zpracovány příslušnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x experimentu xx xxxx pokud možno xxxxxxxxx následující xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxx a pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx plodnosti, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx ukončení xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x individuální xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- toxické a xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx hmotnost xxxxxx X x X1 xxxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx možné,
- diskuse xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.36. TOXIKOKINETIKA
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx podávána xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx stanovené xxxx, xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Látka xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx účelu xxxxxx stanovovány x xxxxxxx tekutinách, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx x "neznačenou" xx "xxxxxxxx" xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx tak, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx informací x xxxxx sloučeniny x xxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx laboratorní xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx pěti dnů xxxx testováním. Xxxx xxxxxxxxx testování xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx otázek xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, pregnantních xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Toxikokinetické xxxxxx xx provádějí xx xxxxxx či xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx na druzích xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx studiích xxxxxxxxxxxx xx testovanou xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx a vylučování xx užije nejprve 4 xxxxxx pro xxxxxx jednotlivou xxxxx. Xxx xxxxxxxxx není xxxxxx přednost určitému xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx odpovědi x různých xxxxxxx, xxxxx je třeba xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxx xxxxxxxx) xx možné xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
Je-li studována xxxxxxx xxxxxxxxxx, pak xxx xxxxxx počáteční xxxxxxxxx skupiny xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxx, xxx xxxxx časových xxxx, x xxxxx xxxx testování xxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx počítat x počtem časových xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxx xx xxxxxxx xxxxx xxx méně než 2 xxxxxxx. Velikost xxxxxxx xxxxxx by xxxx být dostatečná xx xx, xxx xxx látku resp. xxxx xxxxxxxxxx poskytla xxxxxxxxxx charakteristiky xx xxxx xxxxxxx, rovnovážného xxxxx x xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 různé xxxxx testované xxxxx. Xxxx xx xx xxx nízká dávka xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx změny x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolává toxické xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx podávání xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx látky. Xx určitých podmínek xxxx xxx xxxxxxxx x podávání xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx prováděny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xx-xx to xxxxxx i xx xxxxxxx vehikulem xxx, xxx jsou používány x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Testovaná xxxxx xx xxxxxxx podávána xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx kůži, xxxx xxxxxxxx inhalačně xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat. Intravenózní xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx relativního xxxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx po intravenózní xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx by se xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx vehikula x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx měla xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx, xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx sondou xxxx v xxxxxxx, x xxxxxxx přesného xxxxxxxxx dávky, xxxxxxx xx-xx testovaná látka xxxxxxxx v potravě.
1.2.2.5 Xxxx sledování
Xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx x příznaky xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x trvání.
1.3 Xxxxx postupu
Xx xxxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xx zdůvodněných xxxxxxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Absorpce
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx mohou xxx xxxxxxx různé xxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny1), x xx např.:
- xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx a ev. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxx. v xxxx, žluči, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx jejích zbytků x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx biologické xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx referenční xxxxxxxx,
- porovnání množství xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx vylučovaných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx plochy xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx x xx. jejích metabolitů x xxxxxx na xxxx a xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1) V xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podávána xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
V současné xxxx xxxx dostupné 2 přístupy, x xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx jeden xx xxx:
- xxx použití xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx kvalitativní xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx x orgánech xxxxxxxxx xx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Vylučování
Při xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx moč, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx x xx. jejích xxxxxxxxxx se x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, x to xxx xx xxxxxxxxx 95 % x xxxxxxxx množství xxxx xxxxxxx 7 xxx xx počátku xxxxxxxxxx.
Xx speciálních xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx vylučování xxxxxxxxx látky v xxxxx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
K určení xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx technikami. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxx odpovědět xx otázky x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických studií. Xxx xxxxxxx informací x metabolismu xxxx xxx prospěšné provedení xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx získat x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxx účinků xxxxx xx enzymy xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx studie xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx možno xxxxxxxxxx xxxxxxxxx znázorněním.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx uvedou xxxxxxx x charakteristiky variability xx vztahu x xxxx, dávce, tkáni x xxxxxxx (pokud xx to xxxxxxxxxx). Xxxxxx vstřebávání x xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx studované xxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx by zpráva x testu měla xxxxxxxxx pokud možno xxxxxxxxxxx údaje:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx podání,
- xxxxxx(x) podání a xxxxxxx použitá vehikula,
- toxické x x ostatní xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v biologickém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- tabulky xxxxxxxx rozdělené podle xxxxxxx, xxxxx, režimu, xxxx, xxxxx a xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx v závislosti xx xxxx,
- xxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx biochemická xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx,
- navrhované xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
B.37. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH XXXXXXXXX XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx schopnost xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, který xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxx a mají xxx testovány xxxxx xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx xxxxx mohou xxx použity pro xxxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx však není xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx metody xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, fosfonové xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx amidothiofosforečných, xxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx způsobit xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx neurotoxicita xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx ataxií, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx v xxxx a periferním xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x dále inhibicí x stárnutím specifické xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx tkáni.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Xxxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx testovaných xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx neurotoxickým xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, xxxxxxxx název: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (XXXX).
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx dávce xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx cholinergními účinky. Xxxxxxx xx xx xxxx 21 dnů xxxxxxxx, zaznamenává xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, ataxie x paréza. Biochemické xxxxxxxxx, zvláště inhibice XXX, xx xxxxxxx x slepic náhodně xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxx látky. 21 xxx xx xxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxx slepice utraceny x je provedeno xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání.
1.5 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx náhodně xxxxxxx xx experimentální a xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxxx studie jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx slepic a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se podávají xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx doporučuje xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx by xx xxxxxxxx dostatečně xxxxxxxx. X nevodných xxxxxx musí xxx xxxxx nebo určeny xxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx kura xxxxxxxx (Xxxxxx gallus xxxxxxxxxx) xx věku 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxx x standardní xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx volný xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx testovací skupiny xx použije xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem, xxx pozitivní kontrolní xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými.
V xxxxx xxxxxxx má xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, aby aspoň xxxx x nich xxxxx xxx utraceno xxx xxxxxxxxxxx vyšetření (xx xxxxx prvý x xxxxx xxx xx podání) a xxxx přežilo 21xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx může použít xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxx aspoň xxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx látka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx doplňovat xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxx, potrava, xxxxxxxx xxxxx).
1.6.1.3 Volba xxxxx
Má xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx příslušného xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx x hlavní xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx x této xxxxxxxxx studii xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Aby xx xxxxxxxxx úmrtí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx účinky, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx neletální xxxxx testovaných látek xxxx xxx použito xxxxxxx typů xxxxxxxxxxx xxxxx (viz xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx také xxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x hornímu limitu xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 dnech xxx xxxxxxxxxx (šest). Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx přípravek, x xxxxxx je xxxxx, xx neinterferuje x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx má xxxxxx xxxx ochrana xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.6.1.4 Xxxxxxx test
Jestliže xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx postupů popsaných xxx tuto xxxxxx, xxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx strukturou xxxx xxxxx toxicitu xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx o xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx neprovádí, xxxxx xxxxxxxx vyskytující se x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx použití xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx 21 xxx.
1.6.2 Popis xxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx následky xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x jediné xxxxx.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Pozorování xx začít okamžitě xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx pozorují xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx dnů a xxx xxxxx xxxxxx xxxxx po dobu 21 xxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx plánu. Xxxxxxx xxxxxxxx toxicity se xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx nejméně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx slepice vykazující xxxxxxxxxxx xxxxx vyjmou x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jako např. xxxxxxxxxxx po xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, humánním způsobem xxxxxxx a pitvat.
1.6.2.2 Xxxxxxx hmotnost
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky a xxx aspoň xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxxxx x xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny (xx-xx skupina použita) xx xxxxxx x xxxxxxx dnech xx xxxxxxxx látky. Pro xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxxxx xxxx n. ischiadicus x xxxxxxxxxx xxxx xxxx na xxxxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x kontrolní x xxxxx testované xxxxxxx xx 24 hodinách x další tři xx 48 hodinách, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx usmrcují pouze xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx klinických xxxxxxxx naznačuje, xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxx xx nástup xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx xxxxxxx ze xxx xxxxxx, x xx xxxx 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx látky.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx případně xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). In xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx k podcenění xxxxx jako xxxxxxxxxx XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x utracených xxx špatný celkový xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx stavu mozku x xxxxx.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx tkáň x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx pro biochemické xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (střední xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx krční xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx nervů xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. xxxxxxxx (x xxxx větve x x. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx barvivy xx xxxxxx x xxxxx.
2. XXXX A XXXXXX XXXXX
Negativní xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, histopatologie x xxxxx xxxxxxx) běžně xxxxxxxxxx xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx údaje xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx poškození, xxxxx chování nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x stupeň xxxxxx xxxxxxxxx xxxx účinků x procento zvířat xxxxxxxxxxxx každý xxx x xxxxxx poškození xxxx účinku.
Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x korelace xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx a histopatologickými xxxxxx x dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x obecně xxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx plánované xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx plemeno;
- xxxxx a xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;
- podrobné xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxxxx xxxx;
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx dávek;
- specifikace podávaných xxxxx, včetně xxxxxxxxxx xxxxx o vehikulu, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx;
- údaje x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx vratných nebo xxxxxxxxxx);
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich výsledky;
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx to xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Hodnocení x Interpretace
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 418.
B.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH SLOUČENIN XXXXXXX 28XXXXX OPAKOVANÁ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx specifický xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx studiích xxxxxxxx. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx fosforu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx testovány touto xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek, které xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nález x xx vitro xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx 28xxxxx test pozdní xxxxxxxxxxxxx poskytuje informace x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxx opakovaných xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Poskytne xxxxxxxxx x závislosti xxxxxxxx xx xxxxx x xxxx poskytnout xxxxx xxxxxxx dávkových xxxxxx, xx kterém xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Tato úroveň xx používá xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx bezpečné xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x názvu této xxxxxx jako "organické xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx amidofosforečné xxxx xxxxxxxxxxx kyselin xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x některých xxxxx této xxxxxxx.
Xxxxxx neurotoxicita xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx, distální xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x periferním xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx esterase) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně orálně xxxxxxxx po xxxx 28 xxx. Zvířata xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně, xxxxxxxxxxx xx abnormální xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxxxx xxxxxxxx NTE, se xxxxxxx u slepic xxxxxxx vybraných x xxxxx skupiny 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx slepice xxxxxxxx a xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx léčby x x normální xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx umožňující xxxxx pohyb xxxxxx x xxxxxx pozorování xxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx podává xxxxxx, xxxxx 7 xxx x xxxxx, buď xxxxxx, xxxxxxxxxxxx tobolkami xxxx jinou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, neboť xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x želatinových xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx mladá xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx domesticus) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx za xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx pohyb.
1.4.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx aspoň šest x xxxx xxxxx xxx utraceno xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (po xxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx) x xxxx xxxxxxx čtrnáctidenní xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.3 Xxxxx dávek
Xxxxxxx xxxxxx se xxxxx x xxxxxxxxxxxx ke xxxx výsledkům x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx neurotoxicitu a x dalším údajům x toxicitě xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, nejlépe příznaky xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, nezpůsobit xxxxx xxxxxxx ani xxxxxx utrpení. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Nejnižší xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx test
Jestliže xxxx s dávkou xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, xx použití xxxxxxx popsaných pro xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx není důvod xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx třeba xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx u xxxx naznačuje xxxxxxx xxxxxxx ještě vyšší xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx x 14 dnů po xx, xxxx do xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxx dní v xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Xxxxxxxxxx má xxxxx xxxxxxxx xx začátku xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x dalších 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, do xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx příznaky xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx xx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stupnice, xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x klecí x xxxxxxx nucené xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx usnadnilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx vyloučit, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.4.3.2 Tělesná hmotnost
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx těsně xxxx xxxxxx xxxxxxx testované xxxxx x pak xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Šest xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxx analýzu xxxxxxxx XXX xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx mícha. Je xxxxxx vypreparovat xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jeho tkáň xx xxxxxxxx NTE. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx a každé xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 hodinách x xxxxx tři po 48 xxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studie xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) naznačují, že xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx usmrcení po xxxxxxxx aplikaci, xxx xx doporučuje xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx.
X těchto xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx provede také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). Xx vivo může xxxx nastat spontánní xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Xxxxx
Xxxxx všech zvířat (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) zahrnuje xxxxxxxxxxxxx posouzení xxxxx xxxxx a míchy.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Nervová xxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx studie) xx xxxxxxxxxxxx vyšetří. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx (xxxx xxxxx xx provádí x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx hrudní x xxxxxxxxxxxxx), z xxxxxxxxxxx nervů se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. tibialis (x xxxx xxxxx x x. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx specifickými xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
Nejprve xx xxxxxxx fixované xxxxx xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se najdou x xxxxxx skupiny x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x na xxxxxxxxx xx skupin, které xxxxxxx dávku střední x xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxx jsou výsledky xxxxxxx xxxxx metodou (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx chování) xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx neurčité výsledky xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx zvířat xxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x histopatologickými nálezy x dalšími pozorovanými xxxx x xxxxxxxxxxx x kontrolních skupin.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Statistické xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxx xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobné xxxxx x potravě x xxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxxxx vybrané xxxxxx dávek,
- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, xxxxxx podrobných xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx formě xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je-li jiná xxx 24 x 48 xxxxx.
Výsledky:
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx včetně xxxxxxxxx,
- úroveň bez xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, stupeň x xxxxxx klinických xxxxxxxx (xx vratných xxxx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Hodnocení x Xxxxxxxxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx s metodou XXXX XX 419.
X.39. Test xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx XXX Xxxxxxxxx (XXX) Test With Xxxxxxxxx Xxxxx Xxxxx Xx Vivo (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx DNA synthesis, XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (1) (2) (3) (4).
Xxxxx xxxx xx xxxx představuje xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx DNA x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx následnou xxxxxxxx. Xxxxx jsou obvykle xxxxxxx místem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sloučenin; jsou xxxxx xxxxxxx objektem xxx xxxxxxx poškození XXX xx xxxx.
Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, xx xx xxxxxxxxx látka do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (XXX) xx xxxxxxx xxx, xx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx plánovanou (X-xxxx) xxxxxxxx DNA. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxxxx xx autoradiograficky xxxxxxx thymidin xxxxxxx xxxxxxx (3X-XxX). Xxx xxxxx XXX xx xxxx xx nejčastěji xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxx než xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx metody.
Xxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxx xxxx XXX, xxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx metoda UDS xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx repair" (1 - 3 xxxx) je xxxx xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx k xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxx lézí XXX. Xxxxxx odpovědi XXX xxxxxx xxx x xxxxxxxxx procesu xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx sice x XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx DNA xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, že XXX xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx poskytuje xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxx x reparaci: xxx xxxxxxx xxxxx (NNG) xxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx stanovená hodnota, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxx (NNG): xxxxxxxxxxxxx míra XXX xxxxxxxx buněk xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx jako xxxxxx xxxx počtem xxx x xxxxx (XX) x průměrným xxxxxx xxx x cytoplasmě (XX): NNG = XX - CG. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky x xxxxxxx, v xxxxxxxxxxx kulturách apod.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x odstranění xxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx XXX v xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx indikuje xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx vychází xxxxxxx x xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx XXX xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx nízkým xxxxxx xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx technika xxxx tak xxxxxxxx x interferenci s xxxxxxx x X-xxxx, xxxx xx např. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a u xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx X.
Vlhkost by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx jednoznačně xxxxxx x xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních podmínkách. Xxxxx je třeba xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x xxx jsou xxxxx umístěny.
1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxx s testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx podpořeno údaji x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Doporučuje xx, aby kde xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / vehikulum.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Do každého xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx se zvířaty xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx kontroly xx xxxx xxxxxxxxx XXX při xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xx středně xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx při pozitivní xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx nenapovídaly hodnotiteli xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátu. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxx xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | CAS | XXXXXX |
odběr x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 xxxxx) | X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx použít x jiné xxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxxx cestou, než xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Počet x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelní jedinci. Xxxxx xxxxxxxx historická xxxxxxxx, xxx pro xxxxxxxx xxxxxxx negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jeden, nebo xxx xxxxxxx.
Xxxxx x době, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx s xxxx xxxxxxxxxx druhem využívajících xxx expoziční xxxx, xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je možné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx jednom xxxxxxx, xxxxxxx na samcích. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx testovaných xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jak xx xxxx například u xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací schéma
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podává jednorázově.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx se xxxxxxxx letální xxxxxx. Xxxxx dávka xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.
Xxxxx, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, mohou představovat xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx xx případ xx xxxxxxx. Provádí-li se xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxx živočišného druhu, xxxxx, pohlaví x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxx x hlavní xxxxxx.
Xxxx nejvyšší xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx určité xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx dávkách x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx a xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkách xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx může být xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vpravuje xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxxxx xxxxx. Intraperitoneální xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xx tím xxxxx xxxxx vystavit xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přímo, xxxxxx krevním oběhem. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx xxxx injekcí xxxxxxxx vpravit, závisí xx velikosti pokusného xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx ve xxxxx xxxxxxxxx úrovních xxxxxx x minimalizovala se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx buňky xx z pokusných xxxxxx xxxxxxxxxxxx obvykle 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx je zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx xx xxxxxx xxxxx), ledaže xx xx 12 - 16 hodinách xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxx i xxxx xxxx odběru vzorků, xx-xx xx xxxxxxxxxx xx základě toxokinetických xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle zakládají xxxxxxx jater in xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx buňky xxxxx xxxxxxxxx xx vhodnému xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx xxxx (xxxx. 3 - 8 xxxxx) obvykle xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Xx inkubaci xx xxxxxx odstraní( xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx obsahujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Xxxxx se xxx promyjí, xxxxxx x vysuší. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se "xxxx xxxxx" provádět. Sklíčka x preparáty xx xxxxxx xx autoradiografické xxxxxx, xxxxxxxx ve xxx (např. xx xxxx xxxxxxx nebo xxxx týdnů x xxxxxxxxxx), vyvolají, xxxxxx x počítají se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx připraví xxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Mikroskopické xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxx morfologií, aby xxxx možno XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (např. xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx radioaktivního xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxx preparátech x xxxxxxx jedince xx obvykle hodnotí 100 xxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxx xxx 100 na xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx být xxxxxxxxxx. Xxx počítání zrn xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x S-fázi, xxx xxxxx xxxxx v X-xxxx se xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx metodou xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxx x cytoplazmy x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx data xxxxxx x tabelární xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxx se xxxxxxx xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx XX od xxxxx XX. Počítají-li xx "xxxxx v xxxxxx", musí xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx buňky určují, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx x historických xxxx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx.
Numerické xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxx studie.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
pozitivní | (I) xxxxxxx XXX xxx předem xxxxxxxxxx prahem, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx | |
xxxx | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxx | |
xxxxxxxxx | (X) xxxxxxx XXX xx xxxxxx/xxx xxxxxx historického xxxxx x xxxxxxx | |
xxxx | (II) xxxxxxx XXX nejsou signifikantně xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxx. |
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, což xxxxxxx, xx je xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx získaného xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být stále xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x když xx xxxxxxxxxx několikrát opakuje.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx buňkami xx xxxx ukazuje, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxxxxxxxx XXX, xxxxx xxx xxxxxxx neplánovanou xxxxxxxx XXX xx xxxxx. Negativní výsledek xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka nevyvolává xxxxxx xxxxxxxxx XXX, xxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx x xxxxx, jaká je xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx dosáhne širokého xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,
- počet, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx faktickou xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx a vody,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx metoda,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxx hodnoty počtů xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx grains" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x skupiny,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, bylo-li xxxxxxxxx,
- známky toxicity,
- údaje ze xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných odchylek,
- xxxxx "xxxxx x opravě", xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx v X-xxxx, xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
Xxxxxx X.39. xxxx vložena xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.40. XXXXXXX ÚČINKY XX XXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Centre for xxx Validation xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, ECVAM, Xxxxx Research Xxxxxx, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx validní xxx testy in xxxxx na xxxxxxx xxxxxx na xxxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx transkutánního elektrického xxxxxx kůže potkana (xxxxxxxxxxxxxx electrical resistance, XXX) x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx lidské xxxx. Validizační xxxxxx XXXXX prokázala, xx xxx testy dokáží xxxxxxxxxx rozlišovat mezi xxxxxxx xxxxxxx leptajícími x xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx umožňuje správně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků (známé xxxxx způsobující těžké xxxxxxxxx xxxx X35, x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, X34). Xx uveden xxxxx a xxxxxxx xxxx xxxxx; xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx konkrétních xxxxxxxxxxx a na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx nevratného xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, viz xxxx xxxx. 1.5.3.4 a 1.7.2.3.
1.4 PRINCIP METODY - TEST TER XX KŮŽI XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanese xx dobu až 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx potkanů xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx schopnosti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx corneum.Tato schopnost xx měří xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látky XXX xxx prahovou hodnotu xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxx x xxx. (6)) xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx pozitivních xxxxxxxx, xxx se x xxxxxx typů xxxxxxxxxx xxxxx vyskytují (2) (7).
1.5 POPIS XXXXXX - XXXX XXX XX XXXX POTKANA
1.5.1 Xxxxxxx zvířata
Pro přípravu xxxxxxx terčíků xxxx xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx odstraní xxxx x dorzální x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxx omyjí xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, penicilinu, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, x koncentracích xxxxxxxxxxxx xxxx bakterií. Xxxxx xxxx xxxxxx xxx xx prvním xxxxx xx zvířata omyjí xxxxxxxxxxx znovu x xxxxx 3 dní xx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků xxxxxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx se humánním xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x té xx xxxxxxx sloupne xxxxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxx, x to xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx přetáhne xxxxxx X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxx, a xxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x O-kroužku ukazuje xxx. 1. Gumový X-xxxxxxx xx pak xxxxxxx xxxxxxx ke xxxxx TPFE xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx ponoří xx xxxxxx obsahující xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), xxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx stavu, xxxxxx xx na xxxxxxxxxxx povrch uvnitř xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx stavu xxxxxx, xxxxxx xx xx terčík v xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, na xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx vody x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx s xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X některých xxxxxxx látek xxxx xxx xxxxxxxxx zahřátím xxxxx na 30 xX, aby se xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx vždy tři xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx na xxxx 24 xxxxx (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vody xxxxx xxxxxxxxx 30 xX tak xxxxxx, xxxxx xx látka xxxxxxxxx. Odstranění xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx v xxxxxxx xxxxxx, xx xx xxxxxxxx vymýváním xxxxxxx proudem xxxx xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (XXX) xx měří xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx impedančního můstku xxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 či xxxxxxxxxxxxxx). Před xxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% ethanolu, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxx otočí, x tkáň xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 mM xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxx a xxxxx xx xxxxx x xΩ/xxxxxx (obr. 2). Rozměry xxxxxxxx x délku xxxx xxxxxxxxx pod krokosvorkou xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx uloží xxxxxx XXXX trubice tak, xxx byla xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vždy xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) elektroda xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx na xxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx pružinové xxxxxx a xxxxxxx XXXX trubice (xxx. 1), xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx hodnotu xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx je-li naměřený xxxxx vyšší xxx 20 kΩ, může xx být xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíku xxxx. Xx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, například tak, xx xx XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx 10 xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx roztokem.
Průměrná xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxxxxxxx, pokud xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx metodu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx popisovanou xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx tyto:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí odporu (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
10 – 25
|
1.5.3.3 Modifikovaný xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x neutrální xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx povrchově xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx hodnota XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 kΩ, lze xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Tímto xxxxxxxx se zjistí, xxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx na xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx terčíků xxxxxx xx 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxx se xxx zhruba po xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx prudkým proudem xxxxxxxxx xxxx, která xx nejvýše xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xx xx xxxxxxxxx přebytečné (xxxxxxxxxx) barvivo. Xxxxx xxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx x XXXX trubice x xxxxx do xxxxxxx (xxxx. do 20 xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx vody. Nádobky xx xx dobu 5 xxxxx jemně xxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zbytky xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Pak xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx do xxxxxxx x 5 ml 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx teplotě 60 xX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x zlikvidují a xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxx xx dobu 8 xxxxx při xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx odstředivá síla ∼ 175). Xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxx xx pak xxxxx 30 % (w/v) xxxxxxxx XXX v xxxxxxxxxxx vodě x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx SDS). Xxxxxxx xxxxxxx (XX) xxxxxxx xx měří xxx cca 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx obsahu xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X se xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx se xxxxxxxx hodnota. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx akceptovatelného xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx se x xxxxxxxxxxx xxxxx při xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx uspořádání považují:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (mg/terčík)
|
|
Pozitivní
|
10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
|
Negativní
|
destilovaná voda
|
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx možné zvolit xxxxxx xxxx působení xxxxxxxxx látky na xxxxxx kůže (xxxx. 2 xxxxxx) za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxx TER xxxxxxxxx xxxxxxx schopnosti některých xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx xx terčíky xxxx xx 2 xxxxxx (2), jakkoliv xxxxxxxx xxxxxxxx identifikaci xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 24hodinovém působení.
Získané xxxxxxx XXX mohou xxx xxxxxxxxx vlastnostmi x xxxxxxx zkušební xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Prahová xxxxxxx xxx leptavé účinky 5 xΩ byla xxxxxxxxx xx základě xxxxx získaných na xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx aplikaci xxxxxxx xxxxxxxxx xxx. Pokud xx xx zkušební xxxxxxxx výrazně xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx použít xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x prahovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x xxxxx, xxx byly xxxxxxx xxx validační xxxxxx (3).
1.6 XXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX - XXXX S XXXXXXX XXXXXX KŮŽE
Testovaný xxxxxxxx xx nanáší xxxxxxx xx xxxx xx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx model xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx epidermis s xxxxxxx statum corneum. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx "XXX reduction xxxxx" (MTT = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 difenyl tetrazolium xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx definovanou pro xxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxx vychází x předpokladu, xx xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx xxxx xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx corneum (xxxxxx xxxx xxxxx) x jsou dostatečně xxxxxxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxx buněk v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 XXXXX METODY - XXXX S XXXXXXX XXXXXX KŮŽE
1.7.1 Modely xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x různých zdrojů, xxxx však xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Bariérová xxxxxx xxxxxxx corneum xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxx prokázat xxx, xx xxxxx xxxx rezistentní xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x nichž xx známo, xx xxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx skrze stratum xxxxxxx neprocházejí. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxx xxx dostačující x xxxx, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx například xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xx. XX xxxxxxxx) po xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kontrola xxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx x případě látky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xx srovnání x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) musí hodnoty xxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx predikční xxxxx xxxxxxxx mezinárodnímu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx se xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, nanese xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx zvlhčí, xxx xx s xxxx zajistil dobrý xxxx. Pokud xx xx xxxxx, xxxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx, xx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx kůže xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx životnosti xxxxx
X měření životnosti xxxxx xx dá xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx redukce XXX, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx že x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx kůže xx xx xxxx 3 xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20 - 28 xX. Xxxxxxxxx xxxxx formazanový xxxxxxx se xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx měřením XX xxx xxxxxx xxxxx 545 x 595 xx.
1.7.2.3 Doplňující xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x přesné dodržení xxxx působení, xxxxxxxxxxx xxxxxxx atd. mají xx životnost xxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx okalibrovat xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx standardů xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Je xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx prokázáno, xx xx použitá metoda xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx mezinárodních xxxxxxxxx xxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx musí xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2) a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx studie xxxx být zveřejněny x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
1.8.1 Xxxx XXX xx xxxx potkana
Hodnoty xxxxxx (x xΩ) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx x pro případné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx formě, a xx data pro xxxxxxx replikace x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, průměrné xxxxxxx a x xxxx vyvozená klasifikace.
1.8.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx xxx všechny xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx hodnoty x x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
1.9.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx
Xxxxx je xxxxxxxx hodnota XXX xxx testovaný xxxxxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, je látka xxxxxxxxxxx. Je-li xxxxxxx XXX nižší xxxx xxxxx 5 kΩ x xxxxxxx se xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (detergent) xx neutrální organickou xxxxx, pak xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx účinky xx.
X xxxxxxxxx aktivních xxxxx (xxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx organických xxxxx, xxx xxxxxxxxx hodnoty XXX nepřesahující 5 xΩ, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x terčíku xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx barviva x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrole x 36 % XXx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pozitivní x xxxx xx xxxxxxx účinky, xxxxxx xx-xx obsah xxxxxxx x xxxxxxx menší, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx.
1.9.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxx XX xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx vypočte xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxxxx. Hraniční xxxxxxxxxxx xxxxx životaschopných buněk, xxxxx xxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx těch, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx vlastností, xxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx metoda xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx stav, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; pokud xx používají xxxxxxxxxx xxxxx, uvedou se xxxx xxxxx x xxx ně.
Podmínky xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx hodnot xxxxxx (xxxx XXX) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk (xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxxx pro všechny xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxxx xxxxxx pozorovaných efektů.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Obrázek 2
Metoda X.40. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXX 3T3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 ÚVOD
Fotoxicita xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), x xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx poprvé vystavena xxxxxxx chemickým xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx je-li xxxxxxx xxxx ozářena xx xxxxxxxx podání xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx slouží xx stanovení fototoxického xxxxxxxxxx xxxx testované xxxxx, xxxx xx xxxxxxxx, xxx daná xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x viditelnému xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kombinovaným působením xxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxx je xxxxx zjistit xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx fototoxické xx vivo xx xxxxxxx aplikaci a xxxxxxxxxx v kůži, x xxxxxxxxxx, jež xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx topickém xxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxx vypracován x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx projektu XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx testům xx xxxx. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xxxx porovnávány s xxxxxxxx xxxxxx fototxicity/fotoiritace xx xxxx x xxxxxx x lidí x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xx pro xxxxxxx xxxxxx vynikající predikční xxxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx k tomu, xxx předpovídal jiné xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx fotokarcinogenita, x xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx umožňoval xxxxxxxxx xxxxxx fotoxicity.
Sekvenční xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látek je xxxxxxxx xxx dodatek.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; měřená ve X/x2 xxxx v XX/xx2.
Xxxxx světla: množství (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (UV) xxxx viditelného (XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx, vyjádřené x xxxxxxx (= X x x) xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 xxxx X/xx2.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx doporučení XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx se i xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx xxxx pásmy XXX x XXX xx často považuje 320 xx x XXX xx xxxxx xxxx na XX-X1 x XX-X2 s xxxxxxx xxxxxx u 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: parametr, xxxxxx xx měří xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx živou buňku, xxxxxxxxx xxxxxxx, do xxxxxxxxx xxxxxxxx), jež xxxxx xxxxxxxxx měřených xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx koreluje x xxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost (viabilita) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x porovnání x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx testu (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx metodickém návodu xxx xxxx je xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxx veličin PIF x XXX.
XXX (photo xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): koeficient xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx cytotoxických xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx (-XX) a v xxxxxxxxxxx (+XX) necytotoxického XXX/XXX ozáření.
MPE (mean xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): xxxx míra xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx kompletního průběhu xxxx xxxxxx koncentrace-odezva xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) a x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.
Fototoxicita: xxxxxx xxxxxxx reakce (xxxxxx), xxxxx xxxxxx po xxxx expozici xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxx reakce, xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kůže xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nimž xxxxxxx x xxxx poté, xx na xx xxxxxx (topicky xxxx xxxxxx xxxxxxx) nějaká xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx x nespecifickému xxxxxxxxx xxxxx (reakce podobné xxxx xxx nadměrném xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: získaná imunologická xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx prvním působení xxxxx x světla xxxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxx jednotýdenní xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx poté, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx dávce XX/XXX záření a xxxxxxxxxxxxx látky.
Fotokarcinogenita: karcinogenita xxxxxxxx opakovanou xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx UV zářením xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx chlorpromazinu jako xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx, která xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx studii, xx xxx zavedení xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX doporučuje použít xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x látek, xxxxx byly použity xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).
1.4 XXXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), jejichž xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx to, xx xxxxxx absorbovat xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx záření. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx fotochemie (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx zákon) vyžaduje xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx by xx xxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxx testování xxxxx xxxxxx metodického xxxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x UV/VIS xxxxxxx (xxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxx XXXX x. 101). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x xx-1, nemá xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x není xxxxx xx xx škodlivé xxxxxxxxxxxx účinky testovat xxx testem na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, ani xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxxxx).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, kterými xxxx xxxxxxxx světla (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx vyústit xx xxxxxxxxxxxx reakci (7), přičemž xxxxxxx xxxxx x poškození xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx testované x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxx tomto xxxxx vyjadřuje jako xxxxxxxxxxxx závislý xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx barviva, xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx, NR) (9), 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx.
Xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx kultura xxxxx v xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx). Pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx dvě xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x látkou x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx dobu 1 xxxxxx. Xxxxx x xxxx destiček xx xxx vystaví xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x dávce 5 X/xx2 XXX (+UV xxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx (-UV xxxxxxxxxx). X xxxx destičkách xx pak médium xxxxxxx médiem xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx kultivace xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx xxxxxx, XXX) xx dobu 3 xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx každou x xxxx koncentrací xx stanoví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, vyjádřená xxxx procento hodnot x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx porovnají xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx (+XX) a x xxxxxxxxxxxxx (-UV) záření, xxxxxxx xx xxxxxx XX50, tj. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx o 50 % v porovnání x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.6 XXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx vůči xxxxxx XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx provádět xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX. Buňky xx nasadí x xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxxxxx xxx se vystaví xxxxxx UVA x xxxxx 1 - 9 X/xx2 x xxxxx xxx xx xxxxxx NRU xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk. Buňky xxxxxxx kritéria xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx dávkou XXX xxxxxx 5 X/xx2 xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx kontrolních vzorků xxxxxxxxxxxx v xxxxx. Xxx nejvyšší dávce XXX xxxxxx 9 X/xx2 nemá xxx xxxxxxxxxxxxxxx nižší než 50 % životaschopnosti xxxxxx uchovávaných x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx zhruba xx xxxxx xxxxxx xxxxxx buněk.
Citlivost xxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: test xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (buňky x Earlově vyváženém xxxxxx xxxxxxx [Earl´s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] s 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx ethanolu (XxXX) nebo xxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx x témž xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: absolutní optická xxxxxxx (XX540 NRU) xxxxxx x XX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, zda oněch 1 x 104 xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx jamce xxxxxx xxxxx dvou dnů xxxxx x xxxxxxxx xxxxx zdvojnásobení. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx průměrná xxxxxxx XX540 XXX u xxxxxxx xxx ovlivnění xxxxx xxxx xxxxx 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx známou xxxxxxxxxxxx látkou. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (CPZ); xxxxx se xxxx xxxxx doporučuje. Xxx XXX testovaný xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti: CPZ xxxxxxx (+XXX): EC50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-UVA): EC50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Fotoiritační xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx xxxxxxx XX50, xx xxx minimálně 6.
Xxxxx CPZ se xxx souběžnou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx použít x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx vhodné pro xxxxxxxxxxxxxxx chemické xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx testované (xxxxxxxxx) xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX50 x XXX xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XXXXX XXXXXX
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx validační xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx fibroblastů Balb/c 3X3 xxxx 31, x to xxx x XXXX xxxx x XXXXX; ta xx xxxxx doporučuje. Xxxxx stejného xxxxxxxxx xx dají s xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx potřeb; je xxxx třeba xxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.
X xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxx jen x případě, xx xx výsledek xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx citlivost xxxxx xxxx XXX xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxx narůstat, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 x xxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx XXX xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx návodu.
1.7.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
Xxx rutinní xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 xx jedná x XXXX xxxxxxxxx 10 % xxxx novorozených xxxxx, 4 xX xxxxxxxxx, penicilinem x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX / 7,5 % CO2. Xx nezbytné, xxx xxxxxxxx kultivace zajišťovaly xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx buňky xxxx. xxxxxxxx xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nasadí x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx v xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx pasážují.
Pro test xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x takové xxxxxxx, aby na xxxxx xxxxx (xx. xxx xx stanovuje xxxxxxxxxxxxxxx buněk 48 xxxxx po xxxxxxxx) xxxxxxx ke konfluenci (xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx vrstvu xxxxx). X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 x 104 xxxxx x jedné xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx destičky x 96 xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx identických xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, kdy xx jedna x xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XXX/XXX) x druhá xx xxxxxxxxxx v temnu (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Metabolická aktivace
Zatímco xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx genotoxického nebo xxxxxxxxxxxxxx potenciálu je xxxxxxx požadavkem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx nebo xx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx ani xx xxxxx, xxx xx vědecky xxxxxxxxxx, xxx xx tento xxxx prováděl s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxxx látka / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx před xxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxx stabilitě xxxxxxxxx, xx xx xx xxxxxxxxx. Xxxxx je xxxxxxxxxxxxx, že xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x Xxxxxxx vyváženém solném xxxxxxx (EBSS) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxx (phosphate xxxxxxxx xxxxxx, XXX), xxxxx - xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx - nesmí xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx barevné xxxxxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx omezeně xxxxxxxxx, rozpustí xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stonásobně xxxxx, xxx je xxxxxxxxxx konečná xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx solným xxxxxxxx. Xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx v konstantním xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx i v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx rozpouštědlo xx xxxxxxxxxx dimethylsulfoxid (XXXX) xxxx ethanol (XxXX). Vhodná xxxxx xxx i xxxxx xxxxxxxxxxxx x nízkou xxxxxxxxxxxxx, například xxxxxx, xx však třeba xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx fototoxického xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx se xxxxxx xxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx, popřípadě xxxxx xx 37 oC.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / příprava
Světelný xxxxx: xxxxx správného xxxxxxxxxx xxxxxx x správná xxxxxxxx je xxx xxxxxxxxx fototoxicity klíčovým xxxxxxxx. Xxxxxx x XXX a xx xxxxxxxxx oblasti xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx XXX xx v xxxxx xxxxx méně relevantní, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se při xxxxxxxx xx 313 xx k 280 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx zásadní xxxxxxxxx, xxx emitoval xxxxxx xxxxx, xxx testovaná xxxxx absorbuje, x xxx xxxx světelná xxxxx (xxxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx xxxx) postačující xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxx (infračervená xxxxxx).
Xx optimální xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx se používají xxxxxxxx výbojky x xxxx (xxxxxxxxxxx) rtuťové xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx xxxx xx xxxxxx, že xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx, sluneční xxxxxx však imitují xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx simulátory xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX, xx xxxxx xxxxxx filtrovat xxx, xxx se xxxx xxxxxx cytotoxické xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx xx fototoxicitu 3T3 XXX in xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx záření, kde xx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého xxx validační studii xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU in xxxxx xx v xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (iradiance) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru, který xxxx xxx kalibrován xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx, k xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx typu x kalibrace. Xxxxxxx xx, xxxx xx x delších xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx světelného xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx širokopásmového XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; taková xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx obsluhu vyškoleného xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx studii xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx2 xx xxx buňky Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx fototoxické látky. Xxx xx xxxx xxxxx dosáhlo během 50 xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx nastavena xx 1,666 mW/cm2. Xxxxxxx-xx xx jiná xxxxxxx xxxxx nebo xxxx zdroj xxxxxx, xxxx xx dávka xxxxxx UVA xxxxxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx a byla xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx fototoxinů. Doba xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxx xxxxxx (J/cm2) x 100
|
&xxxx; |
| &xxxx;
x (xxx) =
|
________________________
|
(1 X = 1 X x)
|
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxxx (xX/xx2) x 60
|
&xxxx; |
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx převýšit xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx fototoxické xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx koncentracích xxxxxxx, xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Xxxxxxx xX xxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxx látky xxxx xxx přijatelná (oblast xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxxx (+UVA) x xxx xxx (-XXX) xx xxxxx xxxxxxxx x rámci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rozsah x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx tak, xxx xxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx - odezva xxxx xxxxxxxxxx podloženy xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (x konstantním xxxxxxxx ředění).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx suspenze 1 x 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx periferních xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx kultury xx odpipetuje xx 100 μl xxxxxxxxx xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx ostatních xxxxx xx xxxxxxx xx 100 μx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx (= 1 x 104 xxxxx xx jamku). Xxx xxxxxx testovanou xxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxx - xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX), xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX), xxx xx vytvořil xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx umožňuje xxxxxxxxxx x adherenci xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX xx xxxxxx jamku. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Testovaná xxxxx xx přidává x xxxx koncentracích. Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx inkubují v xxxxx po xxxx 60 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx xxxxx x XXX (+XXX) xx xxxxxxx tak, že xx buňky za xxxxxxxx teploty ozařují xx xxxx 50 xxxxx skrz víčko xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / xx2). Xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-XXX) xx xx xxxx 50 xxxxx (= expoziční xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx pokojové teploty x xxxxxx xxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxx a xxxxx xx promyjí xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx médiem x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) se xxxxxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx hodnocení
Buňky xx xxxxxxxxxx pod xxxxxxxxxxx x fázovým kontrastem. xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxx kontrola xx doporučuje, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxxxx cytotoxicity xxxx xxxxxxxxxxxx se tyto xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx příjmu xxxxxxxxx xxxxxxx (NR)
Buňky xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Promývací xxxxxx xx odstraní jemným xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μl xxxxx x XX x xxxxxxxx xx xxx 37 oC xx xxxxxxxx xxxxxxxxx se 7,5 % XX2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx inkubaci se xxxxxx x NR xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx objemem 150 μl XXXX/XXX, xxxx xx pak xxxxx a důkladně xxxxxxxx (xx také xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxx xx přesně 150 μx xxxxxxx xx xxxxxxxx NR (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx dobu 10 xxxxx xxxxxx xxxxxx xx třepačce, dokud xx XX z xxxxx nevyextrahuje a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx hustota xxxxxxxx XX xxx 540 xx za xxxxxxx slepého pokusu xxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxx xx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxx (xxxx. ASCII) xxx xxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXX A KVANTITA XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx aplikaci XXX/XXX xxxxxx a xxx ní. Je-li xxxxxxxx cytotoxicita, koncentrační xxxxxx a postup xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxxxxxx údaje xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x xxxxxxxxxxx xx xxx (-XXX) necytotoxická, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxx, že xx xxxxxxxxxxxx rozsahy v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx muset xxxxxx xxxxx, xxx byl xxxxxx xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxx dat. Xxxxx xxxx cytotoxicita zjištěna x žádné x xxxx xxxxx experimentu (xxx při -XXX, xxx xxx +XXX), xxxxxxxxx testování x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx třeba xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xx opakování xxxxx xx potřebné, xxxx xxx xxxxxxxx pozměnit xxxxxxxxxxxxxx podmínky, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Klíčovou xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx příprava roztoků xxxxxxxxx xxxxx, nejvhodnější xxx xxxx xxxxxxxxx xx variace xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Lze xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx xxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx doby.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx je to xxxxx, stanoví xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x 50 % inhibici buněčného xxxxxx XX (EC50). Xx lze xxxxxx xxx, že se xx data xxxxxxxxxxx - odezva xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx regrese (xxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxx xx xxxxxxx jiná xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxx xx xxxxxxx XX50 použije xxx xxxxx výpočty, xx xxxxx zkontrolovat xxxxxxx proložení. K xxxxxxx xxxxxxx XX50 xx také možno xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X tomto xxxxxxx xx doporučuje použít xxxxxxxxxxxxxxxxx papír (xxx x: xxx, osa x: xxxxxx), xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX MODELY)
1.10.1 Xxxxxxxxx model, verze 1: fotoiritační faktor (XXX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx (+UVA), xxx za xxxxxxxxxxxxx (-XXX) xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx podle xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX =
|
&xxxx;
____________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
XXX < 5, xxxxxxxxxxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx látka xxxxxxxxxxx pouze při +XXX, xxxxxx xxx -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx se PIF xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, který xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx potenciál. X xxxxxxx xxxxxxx se xx xxxxxxxxx xxx. "&xx; PIF", když xx test xxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx) x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) > XXX =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+UV)
|
Pokud se xx vypočítat pouze "&xx; XXX", pak xxxxx xxxxxxx &xx; 1 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx XX50 (-XX), ani XX50 (+XX), xxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx až xx nejvyšší xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx nemá xxxxx xxxxxxxxxxx potenciál. V xxxxxxx případě se xxxxxxx xxxxxxxx "XXX = *1", xxxx xx charakterizuje xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+XX)
|
Xxxxx xx dá získat xxxxx xxxxxxx "PIF = *1", xxxxxxxxxx xx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (x) x (x) xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzít xxxxxxx v úvahu xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx testu dosáhlo.
1.10.2 Xxxxxxxxx model, xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxxx (XXX)
Xx možno také xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxx studie xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vitro x xxxxx UV xxxxxx (13). V xxxxx modelu xxxx xxxxxxxxx omezení modelu XXX x těch xxxxxxxxx, kde xxxxx xxxxxx hodnotu EC50. X xxxxx xxxxxx xx používá xxxxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx xx porovnání xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva. Xxx xxxxxxxx modelu XXX xxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx vyvinut speciální xxxxxxxxxx software, xxxxx xxx obdržet zdarma.
1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (PIF ≥ 5 nebo XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxx výsledku xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx pravděpodobné, že xxxxx xxxx působit xxxx xxxxxxxxx také xx různých xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vivo. Xxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxx zkušební koncentraci (100 (x/xx), xxxx xxx xxxxxxxxx nebezpečnosti xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx látky nejspíše xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x možné xxxxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx alternativním testu, xxxxxxxxx xx použití xxxxxx lidské xxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx MPE < 0,1) ukazuje, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pro použité xxxxx buňky x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xx látka dala xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx koncentraci 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx xx xx považovat xx xxxxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx získány xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislosti xxxxxxx xxxxxx (XX50 + XX x XX50 - XX), xx interpretace xxx xxxxxx. Naproti tomu xxxxx xxxxxx prokázána xxxxx toxicita (+UV xxx -XX) x xxx omezenou xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, je možno xxxxxxxxx tento xxxx xxx xxxxx látku xx xx zcela xxxxxx x mělo xx xx xxxxxxxx x jiném, potvrzujícím xxxxx (xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx kůže xx xxxxx nebo xxxxxx xxxx ex xxxx xxxx xx xxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:
Testovaná xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,
- fyzikální xxxxxx a xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- stabilita x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- procentický xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx médiu (XXXX xxxx PBS).
Buňky:
- xxx x zdroj xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- číslo xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx UVA xxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jež xx x xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx vitro xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxx xxxx ovlivněním x po xxx:
- xxx x složení xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (koncentrace XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- doba xxxxxxxx (zpracování před xx x xx xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (b) - xxxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx x xxx xxx,
- v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a absence xxxxxxxxxxxx zdůvodnění nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx),
- xxxx ovlivňování xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (c) - xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx světelného xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx světelného zdroje,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx použitého xxxxxx (xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a podrobnosti x xxxx kalibraci,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx XXX (x x X/xx2) při xxxx xxxxxxxxxxx,
- doba xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,
- xxxxx záření UVA (xxxxxxxxx x čas) x X/xx2,
- teplota xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (d) - test XXX:
- xxxxxxx média x XX,
- doba xxxxxxxx x NR,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (koncentrace XX2, xxxxxxx, vlhkost),
- xxxxxxxx xxxxxxxx XX (extrakční xxxxxxx, xxxx extrakce),
- xxxxxx xxxxx, při xxxxx xx spektrofotometricky xxxxxxxxx optická hustota XX,
- xxxxxxx vlnová xxxxx (referenční), xxxx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), xxxxx byl xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx jednotlivých koncentracích xxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kontrol,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (koncentrace testované xxxxx νx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +XXX x -XXX,
- analýza xxxxxx koncentrace - xxxxxx: podle xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 (+XXX) x EC50 (-XXX),
- porovnání xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xxxx středního xxxxxxxxxx (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx,
- historické xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x směrodatná xxxxxxxx,
- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (b) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx XX50 (+UVA), XX50 (-XXX) x XXX xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu,
- xxxxxxxxxx údaje látky xxxxxxx pro pozitivní xxxxxxxx: xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX, průměry x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx B.41. xxxx xxxxxxx právním předpisem x. 208/2001 Xx. x účinností xx 22.6.2001
Informace
Právní předpis x. 251/98 Sb. xxxxx xxxxxxxxx dnem 1.1.1999.
Xx xxxxx tohoto xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x.:
208/2001 Xx., kterým xx xxxx xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx a xxxxxxxxx - novela bude xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx
x účinností od 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Xx. byl xxxxxx právním předpisem č. 443/2004 Sb. x xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Znění xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx norem xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se jich xxxxxx derogační xxxxx xxxxx xxxxxxxxx právního xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 písm. x) až n) xxxxxx č. 157/1998 Xx., o chemických xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x o xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx xxxxxxx xxxxxx proti xxxxxx, xx xxxxx zákonů x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Xx. x č. 30/1998 Xx.
3) Směrnice Xxxxxxxxxx xxx hospodářskou xxxxxxxxxx x xxxxxx xxx zkoušení chemikálií. Xxxxx 4 - xxxx na zdraví (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx xx Chemicals. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Effects).