Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
xx xxx 16. xxxxx 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x přípravků
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 xxxx. 1 xxxx. x) zákona x. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx přípravcích x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:
§1
Tato xxxxxxxx stanoví metody xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (dále xxx "xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx").1)
§2
(1) Xxxxxxxx chemických látek x přípravků xx xxxxxxxx xxxxxxxxx prováděnými xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze xxxx xxxxxxxx.
(2) Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků xxx xxxxxx i xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx metody xxxxxxx x odstavci 1, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx2) x xxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx (XXXX).3)
§3
Xxxx xxxxxxxx nabývá xxxxxxxxx xxxx 1. ledna 1999.
Ministr:
XXXx. David, XXx. x. r.
Xxxxxxx k xxxxxxxx č. 251/1998 Xx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXXXX XXXXX
1.1 XXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx objeví xxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx látky.
1.2 XXXXXX TOXICITA
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Jsou xx xxxxxxxx dostačující pro xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx podávané xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x pravděpodobně x xxxxx.
1.3 XXXXX
xx xxxxxxxx podávané xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx vyjádřena xxxx xxxxxxxx (gramy xxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxxxxx testované látky xx jednotku hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx na kilogram xxxxxxx xxxxxxxxx), nebo xxxx xxxxxxxxxx dietní xxxxxxxxxxx (díly xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx na kilogram xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX
xx nejvyšší xx xxxx pevných xxxxxxxxx xxxxxx, kterou je xxxxx xxxxx, aniž xx xx způsobilo xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) související x xxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXXXXX
xx všeobecný termín xxxxxxxxxx dávku, frekvenci x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
1.6 XX50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivá xxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxxxx způsobí xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 % zvířat, xxxxxx byla xxxxxx. Xxxxxxx XX50 se xxxxx xxxx hmotnost xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx (mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (STŘEDNÍ XXXXXX KONCENTRACE)
je xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx smrt xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx u 50 % pokusných xxxxxx, xxxxxxxxxxxx po definovanou xxxx. Xxxxxxx LC50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx standardním xxxxxx xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 XXXXX
xx xxxxxxx xxx "xx observed xxxxxxx xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x xx xx nejvyšší v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxickým xxxxxxxxx.
1.9 TOXICITA XX XXXXXXXXX DÁVCE/SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX
xxxxxxxx nepříznivé účinky, xxxxx xx objeví x xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx představující xxxxxx úsek xxxxxxxxx xxxxx života xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu.
1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX XXXX)
xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx x zvířat vyvolává xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxx xxx podstatného xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx.
1.11 XXXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx změn na xxxx po aplikaci xxxxxxxxx látky.
1.12 XXXXXXXXXX OČÍ
je xxxxxxxx změn na xxx po aplikaci xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX KŮŽE (XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)
je xxxxxxxxxxxx vyvolaná reakce xxxx xx testovanou xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poškození xxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx po xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx studium xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.16 XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) aplikovaná xxxxx xxxxxxxx xx xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx proces(y), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx případně xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx z xxxx.
1.18 XXXXXXXXXX
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx.
1.19 XXXXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX A XXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xxxx systémová xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 - B.5), xx xxxxxxx xxxx xxx po xxxxxx xxxxxxxx získán xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx testu xx xx kompletní xxxxxxxxx XX50. Xxx inhalační xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx navržen, protože xxxxxx xxxxx definovat xxxxxxx xxxxxxx jednorázové xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pozornost xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx co xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx metoda xxxxx xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) a metoda xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (metoda X.1 xxxx). Xxx testování xx jednom xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. X xxxxx případě může xxx xxxxxxx standardní xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxx použito xxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx aplikací (metody X.7, B.8 a X.9) se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Důležité xx xxxxxxxx pozorování zvířat xxx, xxx xx xxxxxxx co nejvíce xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx studií xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - X.30 x X.33).
3. MUTAGENITA - XXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx k xxxxxxx trvalých přenosných xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx genetického xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Tyto změny ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx nebo xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx projevovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx.
Xxxxxxxxx aktivita xxxxx se stanoví xxxxx xx vitro xx genové (xxxxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) anebo xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.10).
Xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Xx xxxx xxxxx dávat jednoznačně xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, pokud nejsou xxxxxxxxxxxxxxxx.
Pro xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx nebo pro xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx xx zjištění xxxxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Tyto studie xxx xxxxxx x xxxxxxxx účelům: xxxxxxxxx xxxxxxxx získaných základním xxxxxxxx testů; xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; zahájení xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx.
Pro xxxx účely zahrnují xxxxxx X.15 až X.25 jak eukaryontní xxxxxxx xx vivo x xx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x jiných účincích x organismech xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx souboru xxxxx.
Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx uvažované xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované látky.
Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxx testů xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx savčím organizmu, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (bodovými) xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx locus xxxx u xxxx xxxxxxxxxx mutace xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxx xx přenosné xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx B.25). Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx složitosti xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx, zvláště xxx xxxxxxxxxx locus xxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx na xxxxxxx závažných xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx postupuje xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx protokolu xxxxxxxxxxxxx xxx danou xxxxxxxx xx projednání x Xxxxxxx referenční xxxxxxxxxx xxxxxxxxx toxikologie.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx karcinogeny, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx ze xxxxxx mutagenity/genotoxicity. Další xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx opakované xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx chronické xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx opakované xxxxxxxx, xxxxxx B.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx takových xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, např. hyperplazie x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx vyžadují xxxxx, podrobnější zkoumání xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (metoda X.32) nebo xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.33).
K xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx buněk xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxx změny a xxxxx xxxxxxx buněčných xxxxxx, x xxxxxxx xx předpokládá souvislost x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx - xx vivo (xxxxxx X.21). Xxxxxxx xx několika různých xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxx transformaci.
5. XXXXXXXXXXX TOXICITA
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx podle nedědičných xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx v xxxxxxx laktace.
Testovací xxxxxx (xxxxxx B.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx teratogenitu xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx podáváním. Alternativně xxxxx být xxxxxxx xxxx způsoby xxxxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx metodu xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xx možno xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx B.35) rozšířit xxx, xxx pokryl xxxxx xxxxxxxx.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxxx změn xxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxx periferním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxx vzejít x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které vyžadují xxxxx, hloubkové xxxxxxxx xxxxxx aspektu. Navíc xx xxxxxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxx xxx xxxxxxxx x jiných studiích xxxxxxxx. Xxxx například xxxxxxxx, xx jisté xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X.37 a X.38 po xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx podání xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, například podle xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx imunitního xxxxxxx, xxxxx xx xx následek buď xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx navozenou xxxxxxxxxxx. Test xxxxxxxx xxx opakované aplikaci (xxxxxx B.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxx odhalit chemické xxxxx x imunotoxickým xxxxxxxxxxx, vyžadující další, xxxxxxxxx zkoumání tohoto xxxxxxx.
8. XXXXXXXXXXXXXX
Toxikokinetické xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aspekty xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx studií xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx, xx bude x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxx. Xxxxx v ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu x xxxxxxx). X některých xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxx změny v xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx ukázat xxxx xxxxxxxxxx studie x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx B.36).
Xxxxxxxxx x chemické struktuře x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastnostech xxxxx xxxx poskytnout xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx absorpce xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx aplikace, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx informace x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nečistot, x její relevantní xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx toxikologické xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro výběr xxxxxxx podávání, pro xxxxx konkrétní studie x xxx manipulaci x látkou a xxxx skladování.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx metody pro xxxxxxxxxxxx x kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky (x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxxxxx médiu x xxxxxxxxxxx materiálu xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx studie.
Xxxxxxx xxxxxxxxx týkající xx xxxxxxxxxxxx, fyzikálně-chemických vlastností, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
10. XXXX X XXXXXXX
Pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, ve xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx péče x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX CHOVU
Xxxxxxx xxxxxxxx x prostorech xxx xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, xxxx a xxxxxxx je vhodná xxxxxxx xxxxxxxxx 22 xX ± 3 xX při xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx má xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX při relativní xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx techniky xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx na teplotu. Xxx xxxx případy xxxx podrobnosti x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx testované xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba sledovat xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx x xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx má být xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xx dvanácti hodinách. Xxxxxxxxxxx týkající se xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx zprávě o xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jiný xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx chována jednotlivě xxxx x malých xxxxxxxxx jedinců xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 xxxxxx x jedné xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x pokusech na xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx chovu x klecích a xxxxx xxxxxx chovaných x xxxxx kleci xxx během expozice xxxxxxxxx xxxxx, tak xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx všem xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx živočišný xxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx hodnota xxxxxx vzájemným xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx reakce xx xxxxx xxxx x úvahu xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x neomezeným xxxxxxxxx x xxxxx xxxx. Pokud xx xxxxxxxxx xxxxx podávána x xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx diety.
Příměsi x xxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx toxicitu, nesmějí xxx přítomny x xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx se tento xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX XXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metod xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx x omezení xxxxxxx x stresu xxxxxx xxx dosáhnout např. xxxxxxxx metody xxxxx xxxxx (X.1.xxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x vyžaduje xxxxx xxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x 70 % xxxxxx méně xxx metoda X.1.
Xxxxxxx xx závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx podávat v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx je xxxxx, xx vyvolávají značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx dráždivých xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx limitních testů, xxxxx x testech xxxxxx xxxxxxxx (metody X.1, X.2 x X.3), xxx xxxx x in xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx X.11 a X.12), xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx zbytečně velkými xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx neprovést nebo xxx omezit na xxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx vědecky xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx být založeno xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xx výsledcích xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx na xxxxxxxxxx dobře validizovaných xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, byla-li s xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx kožní xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx testu (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže, další xxxxxxxxx kožní dráždivosti (xxxxxx B.4) může xxx xxxxxxxx; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže xxx xxxxxx kožní dráždivosti (xxxxxx X.4), xxxxxxx xxx dále testovány xx xxxxxxxx oka.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx x budou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx xxxx utrpení xxxx se úplně xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nebezpečnosti xxxxx v xxxxx xxxxx tam, xxx xx to xxxxx.
12. XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX
Xxx hodnocení x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxx xx nutno mít xx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx je xxxxx xxx v omezené xxxx; xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxx, pokud xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x ověření xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx klasifikaci x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx zjištěných x kvantifikovaných xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx výsledky xxxxx xxx také xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx byl vložen xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.1. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX)
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx skupině xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx orientačního testu. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x uhynutí. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx xx xxxxx, xx vyvolávají značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx dráždivých vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, v jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx je xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vehikulu. Xxxxxxxxxx xx xxxx první xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx, další xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx jako xxxxx xxxxxxx roztok v xxxxxx xxxxxxxx vehikulích xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx. U xxxxxxxx xx xxxxx neměl xxxxxxxx překročit 10 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, jichž je xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xx měla xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx objem na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve vehikulu xxx, xxx bylo xxxxxxxxxxxxxx lokální xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Na xxxxxxx xxxxx by x obou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx březí. Xxxxx xx x xxxxxxxxx informace, že xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx zvířata tohoto xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx se xxxxxx xxxxxxx menšího počtu xxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx úroveň xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx testech xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x mají xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxx u xxxxxxxxxxx skupin viditelný xxxxxx toxických účinků x xxxxxxxxx. Získané xxxxx xxxx stačit xx xxxxxxxxxx vztahu xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x pokud xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
S xxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxxx xxxxxxx test xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 samic x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx uhynutí, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, rychlosti xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx objeví x xxxxxx, x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx je xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výměny xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; přístup x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. V xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látka se xxxx sondou xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - potravu a xxxx zvířatům poskytnout.
Xx podání xxxxx xx pozorování provádění x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx častá xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx aplikované látky x xxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxx na aplikaci.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx klinická vyšetření. Xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxx nebo zmrazení xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxxx nebo umírajících xxxxxx. Pozorování zahrnuje xxxxx kůže, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx nejpřesněji.
Xxxxxxx, xxxxx během pokusu xxxxxx, x xx, xxxxx přežijí až xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, odeberou xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Hodnocení xxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx
Po dokončení xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x pěti xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrazně xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx použití xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Pokud xx k dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx pohlaví xx xxxxx vynechat.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx být xxx každou experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx na počátku xxxxxx, doba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pak x xxxxxxxxx intervalech a x xxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx, přežívají-li zvířat xxxx xxx jeden xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxxx x ohledem xx stres a xxxxxx vyvolané xxxxxxx xxxxxx, xx zaznamenávají xxxx xxxxxxx vyvolané xxxxx látkou. XX50 xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx údajů xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx všech abnormalit xxxxxx xxxx chování, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, makroskopických xxxx, xxxx tělesné xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx toxických xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx pokud xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx (počet uhynulých xxxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx exponovaných xxxxxx),
- xxxx uhynutí xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx pro humánní xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,
- hodnota XX50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx byl xxxxxxxx xxxxx pokus, x to xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx metody výpočtu),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50, xxxxx je xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx a xxxx xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx všech xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx účinku, xxxxx xx mohlo xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnotu XX50),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.1. bis XXXXXX TOXICITA ORÁLNÍ (XXX OS) - XXXXXX XXXXX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx po xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx testované xxxxx.
Xxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx dvou xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávek při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx na dávku. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx o vztahu xxxxx x toxicity, xxxxxx odhadu xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x této xxxxx etapě xxxxxxxxx xxx xxx pěti xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxx sondou xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx samic x xxxxx x xxxxxx fixních dávek: 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx odvodí x předběžné xxxxxxxxxx studie, x xx jako dávka, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), ale ne xxxxxxx.
Xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx další xxxxxxxxx. Když na xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx pozorována zřejmá xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx úrovni xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxx toxická xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx utracení, xxxxx xx znova xxxxxxxx na nejbližší xxxxx úrovni dávky.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "diskriminující dávku" (xxx část X - Xxxxxxxxx úvod xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxx je možno xxxxx, xxxx by xxxxx k xxxxx (xxxxxx případů humánního xxxxxxxx).
Zvířata se xxxxxxxxx a přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx podávat v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx kmeny xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx testu by x xxxx xxxxxxx xxxxxx variační rozpětí xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých experimentálních xxxxxx orientační xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx studii xxxxx xxxxxxx xxxxxxx z xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxx x xxxxxxxx dávky
Xxxxx xx třeba, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx testované xxxxx ve vhodném xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxx první uvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x rostlinném xxxxx, teprve potom xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné roztoky, xxxxx je xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Variabilita objemů xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx by se xxxx minimalizovat xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, xxx xx zajistil xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Před xxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx. Potkanům xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx testem; přístup x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx zváží a xxxxxxxxx xxxxx se xxxx xxxxxx orálně x xxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx menších xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx podání xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx poskytnout.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Vyšetřují xx xxxxxx xxxxxxx dávek xx xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, pokud xxxxxx x dispozici údaje, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávky xx podávají xxxxxxxxx, xxxx xx alespoň 24 hodin před xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx xxxxxxx pozorují x xxxxx zjistit xxxxxxx otravy xxxxxxx xx xxxx xxx; xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx sedmý xxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx sedm xxx. Posuzují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Jestliže zvolená xxxxxxx xxxxx nevyvolá xxxxxx otravu x xxxxxx nejbližší vyšší xxxxxx uhynutí, xxxxx xx xxxxx podat xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx vmezeřených xxxxxx xxxxx. Tento xxxxxx by xxx xxxxxxxxxx informace x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx xxxxxx, x x nejmenší xxxxx, xxxxx vyvolává xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxx xx vybrat xxxxxxx dávku xxxxx xxxxx x příbuzných xxxxxxxxxx látkách. Pokud xxxxxx x dispozici, xxxxxxxxxx xx použít xxxx první xxxxx 500 xx.xx-1. Jestliže xx po xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxx, vyšetřuje xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x uhynutí při 2000 xx.xx-1, xx xxxxxxxxxx xxxxxx skončena x hlavní xxxxxx xx třeba provést xx xxxx úrovni xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx výchozí xxxxx (xxxx. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx těžké xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx zvířeti xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx toto zvíře xxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx podmínek xx xxxxxxxxx, že je xxx tomto xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx 5 zvířat.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Xxx každou xxxxxxxxxxxx dávkovou xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxx xxxxx.
Principem metody xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx dávek xxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx, xxxxx bude užita x xxxxx, xx xxx xxxxxxx z xxxxx xx 4 xxxxxxx xxxxxx dávek, xxxxxxxxx 5, 50, 500 nebo 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx měla xxx ta, která xxxxxxxxxxxxx vyvolá zřejmou xxxxxxxx, xxxxx nikoliv xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x humánních xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, ale xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxxxxx xxxxxxx testování.
Xxxx podání zvolené xxxxx nevyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx další vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx dále pozorována xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx bylo xxxxxxxxx. Xxxxxxxx těžká xxxxxxx xxxxxxx vyžaduje humánní xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látky, xxxx xx být xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx další xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xx zvířata, xxxxx xxxx nutné xxxxxxx xxxxxxx, by xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxx xx pozorování provádějí x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx každé zvíře xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je nezbytné xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx aplikaci.
Xxxx xxxxxxxxxx by měla xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx stanovit rigorózně. Xxxx xx být xxxxxx podle obrazu xxxxxx, rychlosti xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx možno xxxxx potřeby prodloužit. Xxxxxxxx xx doba, xxx xx xxxxxxx xxxxxx projeví a xxxxxx x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx patrná xxxxxxxx x xxxxxxxx vzniku xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx první xxx xx podání xxxxx x nejméně xxxxxxxxx xx den xxxxx xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx, jestliže xxxxxxx xxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxx je xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Pozorování xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity a xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, letargii, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxxxxxxxxx před podáním xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx 3 xxx a xxxxx xxxxxx xxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, x xx, xxxxx přežívají do xxxxx testu, xx xxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx předcházející xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx třetí xxxxxxx dávky.
X xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx mortalitu xxx xxxxx 5 mg.kg-1 (xxxx jestliže xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mortalitu xxx xxxx dávce), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx toxicitu xxxxxxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx x xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxx xxxxx. Z ní xxxx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testu xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů; popis xxxxxxxxx xxxxxx; pro xxxxxx studii, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; časový xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx pitvy. V xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx hmotnosti.
Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzhledem ke xxxxxx xxxx bolestem xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xx xxxxx možno obsahovat xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx i hlavní xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovní xxxxx,
- xx xxxxx xxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxxx xxxxx (počet xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat nebo xxxxxx xxxxxxxxxx během xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx toxicity; xxxxxx, xxxxxx a xxxxxx účinků),
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, xxxx úhynu xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pro indikaci xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx příznaků xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxxxxxx dávkové hladiny xxxxxxxx x xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx a interpretace
Xxxxx | Xxxxxxxx | Xxxxxxxxxxxx |
5 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx | Méně než 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx zřejmá toxicita 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxx Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx při 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % přežití | Látky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx velmi xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx xxx 5 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není xxxxxx xxxxxxxx | Látky, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx u 500 mg.kg-1 | |
500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxx zdraví xxxxxxxx. Xxx výsledky x 50 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx za xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Viz xxxxxxxx x 2000 xx.xx-1 | |
2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx toxicity | Xxx výsledky u 500 xx.xx-1 Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx |
X.1. xxxx AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX TŘÍDY XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx xxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, tak xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x přiměřených odstupech, xxx aby bylo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx popsaný xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx výběr tří xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které lze xxxxxx xxx jako xxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxx rozhodovacího xxxxxxx, nebo xxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, pokud xx žádoucí xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxxx stanovené xxxxxxxxx dávky x xxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx XX50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx xx očekává xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx je x x xxxx metody xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx v metodě B.1. Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxx spotřeba xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (orální)(B.1) x než x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxx xx stanovených xxxxx. Testování xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx předběžnou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx látce xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, x.x.
- není zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxx pohlaví;
- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx tak, xxx byla xxxxx xxxxxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx, x chována xx xxxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx testu, xxx xx mohla zvyknout xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx mohou být x klecích xx xxxxxxxxx xxxxx pohlaví x dávky, ale xxxxx xxxxxx x xxxxx kleci xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx zvířatům x jediné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx kanylou.
Pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenduje ve xxxxxxx nosiči. Xxxxxxxxxx xx nejprve xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití roztoku/emulze x xxxxxx rostlinném xxxxx (xxxx. kukuřičném) x xxx roztoku x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx nevodná vehikula xxxx xxx xxxxx xxxxxx toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx není xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx testem.
Zvířata xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxx xx určitou xxxx bez xxxxxxx (xxxx. xxxxxxx přes xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx se xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx důvody xxxxx xxxx. Samice xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxx krok xx xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxxxxx xx tří xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx měla xxx taková, xxx x xxxxxxxx pravděpodobností xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jimž xxxx látka xxxxxx. X xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx popsaného x Xxxxxxx 1.
Xxx výběr xxxxxxx a výchozí xxxxx je třeba xxxxxx veškeré xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x vztahu xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx i při xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), pak se xxxxxxx xxxxxxx test. Xxx nejsou xxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx - s ohledem xx xxxxxxx zvířata - xxxxxx výchozí xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, než jak xx dovoluje test x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx uvažovat x xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 5, 50 nebo 500 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx dávky, x kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx leptavými xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx rychlosti xxxxxxx, xx xxxxxx x závažnosti xxxxxxxxx xxxxxxxx. Testování xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx, xxxxx není xxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx test
Limitní xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx ve xxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx zvířatech xxxxxxx pohlaví. Pokud xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 xx.xx-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, xxxxx případů xxx musí xxx xxxxxxx vyloučena z xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx nemělo xxx xxxxxxxxx xxxxxx pevně; xxxx xxx prodlouženo xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx x délky xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, kdy xx xxxxxx x xxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxxxx jde-li o xxxxxxxx toxické xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zaznamenávána: záznamy xxxx vedeny xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxx xxxxxxx zkušební xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Xxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx určité xxxx, xxxx xxx - x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx - nezbytné xxxxxxxxxx zvířatům xxxxxxx x xxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx podán xxxxxxxx, xxxxxx na velikosti xxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx podat x 2 ml xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x xxxxxxxxx objemu xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace tak, xxx byl xxxxxxx xxx objem na xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxxx není xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Všeobecné pozorování
Pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) nebo xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx zvířat xx xxxxxx xxxxx, a xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, nebo xxxxxxx vykazující xxxxxxxx xxxxx bolesti x xxxxxxxxxxxxxxx silného xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxx: tato xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx stejně xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx mrtvá, xxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xx nejpřesněji. Xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx, xxxx zvířata xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxx, xx xxxxx x sliznicích, a xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx, vegetativním a xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx výskytu xxxxx, xxxxx, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx systematicky xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx každé xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x zaznamenávají xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxx utracena.
1.3.3.3 Pitva
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx zvlášť. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx mikroskopické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx 24 x více xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ
K xxxxxxxxx xxxx být xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx formy, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx skupiny počet xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx vykazujících příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx nebo utracených x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx úmrtí jednotlivých xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx poučení x xxxxxxxxxxxx výsledků xxx klasifikaci xx xxxxxxx x Dodatku 2.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- živočišný druh/kmen;
- xxxxxxxxxxxxxxx stav zvířat, xx-xx znám;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a na xxxxx testu.
Podmínky testování:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx podávaných objemů x xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx x zdroje);
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx dávky.
Výsledky:
- xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxx zvířete xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávkové xxxxxx (tzn. zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx úmrtí, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x trvání xxxxxx);
- xxxxxx a xxxxxx průběh xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x každého xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx zvířete, xxxx-xx x dispozici.
Diskuse xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x interpretace:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 423.
XXXXXXX 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxx xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, výchozí xxxxx xx měla xxx xx xx xxx pevně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx způsobí xxxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx dodatku xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx utracených xxxx xxxxxxxxx zvířat postupuje xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxxx šipky.
3. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 25 nebo 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx druhého xxxxxxx, obvykle xx xxx xxxx netestuje. Xxxxx však xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx pitvou ověřit xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx x podanou xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx pokračovat x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4. Xxxxx xx xxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx uhyne xxxxx xxxxx každého xxxxxxx, xx se předpokládat, xx hodnota XX50 xxxxxxxx dávku 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx to xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxx: zřetelné, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX50 xx xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxx mohou xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx úrovni xxxxx.
5. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx stanovenými dávkami (xxxxxxxx 2). Této xxxxxxxx je možno xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx dávky x daném bodu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx další xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx testování xxxxx xxxxxxxx 1.
Xxxxxx xxxxxxxxx s výchozí xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti
V xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx šipek xx xx xxxxxxxx šedého xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx provede na xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Dodatku 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx testování x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx je udána xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx první, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx uhynulých xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx zvířat xx x testování xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx do xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx xxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx počet xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx směru xxxxx xx xx xxxxxxxx šedého xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx vyhodnocení uvedeného x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx základě konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx založených xx testovací xxxxxxxx 1
X xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx první, 2 - pohlaví xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx je počet xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Xxxx rámečky xxx rámečkem "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" x xxxxxxxxxx xxxxxx dodatku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 se příslušná xxxxx sleduje, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Hodnoty v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx klasifikace. Xxxxxx xxxxxxx znamená, že XX50 xx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx rámečku xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
Interpretace xxxxxxxx založených na xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
a) Xxxxxxx dávka 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx tělesné hmotnosti
c) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx
X.2. XXXXXX XXXXXXXX (INHALAČNÍ)
1. METODA
1.1 Xxxx
Xx užitečné před xxxxxxx získat údaje x rozdělení velikosti xxxxxx, xxxxx par, xxxxxxx xxxx, teplotě xxxx, xxxxxxx vzplanutí x xxxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx studované xxxxx po xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x xx xxxxx koncentraci x xxxxx skupině. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx pokusu xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx do konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími příznaky xxxxxx a xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, o kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Příprava
Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx simulované xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx na částice xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx jiná aditiva, xxxx být x xxxx známo, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, je xxxxx xx využít.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx začátku xxxxxx xxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních testech xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, než jsou xxxxxxxx, xxxx by xx zvážit použití xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxxx, xxx nebyly xxxxxxxxxx xxxxx toxické xxxxx. X těchto xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, a xxxx xxx xxxxxx odstupňovány xxx, aby byl x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx rozsah toxických xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxxxxx x, xxxxx je xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx LC50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx po 4 hodinové xxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx plynu x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx pevné látky x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (xxxx - x xxxxxxxxx, xxx xxxx koncentraci xxxx xxxxx použít x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sledované xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx maximální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx sledovanou xxxxxx, xxxxxxxx se xxxxx xxxxxx za xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx doba xxxxxxxx xx být 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Vybavení
Xxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proudění xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx rozdělení látky x expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx konstruovat xxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx expozice testované xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx jejich vzniku x xx xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx je doba, xxx xx xxxxxx x opět odezní xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx do xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx je patrna xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx bezprostředně xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xx dobu 4 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx má xxx 22 xX ± 3 x X. Relativní xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx případů, xxx to xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 mm xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx bude dosaženo xx xxxxxxxxxxx. Konstrukce x xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry x komoře.
Xx xxxxx xxxxxxxx měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx),
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky se xxxx v dýchací xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (některá xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx vysoké xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxx xxxxxxxx se nemá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty x xxxx xxx ±15 %. X některých xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx regulace xxxx xxxxx dosáhnout, xx připouští xxxxx xxxxxx kolísání. Po xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx stabilní, xxx xx xx xxxxxxxxx možné. Xxxxx xx týká xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx, xxx xx pokus xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxxxx pro každou xxxxxxxxxx skupinu),
(x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx xx měří xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx expozice i xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx prvního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx každý pracovní xxx xx xxxxx xxxxxxx pečlivé klinické xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx umírajících xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx funkce autonomní x centrální nervové xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x kómatu. Xxxxxxx uhynutí je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx týdně x x okamžiku xxxxxxx.
Zvířata, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx do konce xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx změnám xxxxx i xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou experimentální xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx nálezy. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx zvířata xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx x bolestem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolaná testovanou xxxxxx. LC50 xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxx xx hodnotí xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx zvířete testované xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx změn xxxxxxx, klinických symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx poškození, xxxx xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx pokud možno xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxx pokusu: popis xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx vzduchu, xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxx se sestaví xx tabulky x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx hodnotami a xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx údaje:
a) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx zařízení;
x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;
x) xxxxxxxxx koncentrace (xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Xxxx.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látek x xxxxxxx (xxxx. xx xxxx) je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx vzduchu, xxxxx xxxx, xxxxx je xx xxxxx, koncentraci xxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx.
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;
e) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
f) xxxxxxxxxx xxxxxx aerodynamického průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);
x) xxxx do xxxxxxxx rovnováhy;
x) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxx reakcí xxxxx pohlaví a xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx humánně xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx);
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx jejím xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx utracení xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- hodnota XX50 xxx každé xxxxxxx stanovená po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (pokud je xxxxx jej xxxxxxxx);
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx (xxxxxxxxxxx) x její xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx);
- xxxxxxx nálezy;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx utracení xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx LC50);
- interpretace výsledků.
X.3. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Testovaná látka xx xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, a xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx uhynutí. Zvířata, xxxxx uhynou během xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx a takovým xxxxxxxx, x kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx následkem xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx 24 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx ostříhá xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx to, xxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx její propustnost. Xxx xxxxxxxx testované xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Při xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx formě, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit vodou xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kůží. Xxxxx vehikula xx xx xxx xxxxx xxx, v xxxx xxxxx xx xxxx xxxx látka xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxx, a xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ten, xxxxx nejvíce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Testované xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx neředěné.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx. Xxx xxxxxx i xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxx xx důvody. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxx dávek použít xxxxxxx 5 zvířat xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx zvířata xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx druhů, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx zvolit x je třeba xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testované látky.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx, nejméně xxx, x mají xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků x xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx x úrovních xxxxx je xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 s xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Lze provést xxxxxxx xxxx jednou xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx skupinách 5 xxxxx a 5 xxxxx x použitím xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx látka xxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx úplnou xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx má xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Rozhodující xx xxxx, xxx xx příznak xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x doba xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx je xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nanese xxxxxxxxxx xx plochu, xxxxx xxxx xxx 10 % xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Pro vysoce xxxxxxx xxxxx xxxx xxx tato xxxxxx xxxxx; xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx co xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx expoziční xxxx 24 hodin xxxxxxxxx x kontaktu x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mulového obvazu x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx vhodným xxxxxxxx překrýt, xxx xx xxxxxx obvaz x testovaná látka xxxxxxxx a xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx omezení xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx nelze xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, pokud možno xxxx nebo xxxxx xxxxxxx způsobem xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx systematicky xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx třeba xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx každý xxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx každodenní xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx sloužit xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxxxxx pro xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx či xxxxxxxxxxx zvířat.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny srsti, xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx x sliznic, x xxxx dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxxx xx xx konce xxxxxx, xx pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx tkáně xx xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Hodnocení toxicity x druhého xxxxxxx
Xx dokončení xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx jedné xxxxxxx x pěti zvířatech xxxxxxx pohlaví, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrazně xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx. X konkrétních xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx možno xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z ní xxxx xxx pro xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx počátku xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx testované látky, xxx x týdenních xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx třeba stanovit x xxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xxxxxxx déle xxx xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x bolesti vyvolané xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx zvířat testované xxxxx a xxxxxxxx x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace:
- živočišný druh, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx očištění xxxx a xxxx xxxxxx: okluzivní xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (včetně vehikula, xxxxx xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx dávek (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx humánně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x kritéria xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx pozorování,
- xxxxxxx LD50 xxx to xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx pokus, x to xxx 14xxxxx pozorování (s xxxxxxxx xxxxxx výpočtu),
- 95% interval xxxxxxxxxxxxx xxx LD50 (xxxxx xxx lze xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x její xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx všech testů xx xxxxxx xxxxxxx,
- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ovlivnění xxxxxxxxx xxxxxxx LD50 x xxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.4. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXX XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Výchozí xxxxx
Je třeba xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx látce s xxxxx snížit xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx výrazné xxxxx xxxxxx. Následující xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxx posouzení, xxx xx vhodný xxxxx test, studie xx jediném xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx další xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx látky (xxxx. xX xxxxx či xxxxx 2 xxxx xX rovné či xxxxx 11,5) není xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx kožní dráždivost, xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxx x xxxxx také xxxxxxxxxx xxxx kyselou xxxxxxx.
x) Jestliže xxxx xxxxxxxx přesvědčivé xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx in xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx.
c) Xxxxxxxx ze studií xxxxxx xxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxx x xxxxx akutní xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxx xxx limitní xxxxxx dávky (2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx) x nebylo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kůže, není xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Rovněž xxxx xxxxx testovat xxxxx xxxxxx toxické xxx xxxxxxxx cestě xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxx několika xxxxxxxxx xxxxxx, přičemž xxxxx xxxxx xxxxxx jako xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx stanovené xxxx xx xxxxxx, vyhodnotí x následně popíše xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx pozorování xxxx xxx dostatečně dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxx zhodnotit také xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx a bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Asi 24 hodin xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxx zvířat xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx střihání xxxx xxxxxx srsti xx xxxxx xxxx xx to, xxx xx xxxxxxxxxxx kůže (xxxx. xxxxxx). Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxx králíka xxxx xxxxxxxx husté srsti, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. Testované xxxxx xx xxxxx nanášet xx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
Xxx pokusech s xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, je třeba xxxxxxxxxx látku dostatečně xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx použití vehikula xx xxxxx brát x úvahu xxxx xxxxxxxx na podráždění xxxx testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxx xxxxx xxxxx, je xxxx třeba dát xxxxxxxx xxxxxx králíka.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Jestliže xx x xx xxxxx screeningových xxxxx xxxx jiných xxxx xxxxxxxxx, že látka xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxx), xx třeba uvážit xxxxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx leptavé účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx zvířatech.
Xxx xxxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxx tři xxxxxx xxxxxxx zvířata. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx mohou být xxxxxxx další xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx jiný xxxxxx, xxxxxx se xx xxxxxxxxx místo kůže 0,5 xx kapaliny xxxx 0,5 g xxxx xxxx polotuhé xxxxx. Xxxxxxxx oblasti xxxxxxxxxx xxxx zvířete xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Dobu xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vratnost xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx xx aplikaci.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx chovají jednotlivě x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxx plochu (xxx 6 xx2) xxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxx past xxxx xxx xxxxxx nanést xxxxxxx testovanou xxxxx xx xxx, a xxx jej xxxxxxxxx xx kůži. Po xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx přidržovat xxxxxx volně xx xxxx xxxxxxx okluzivním xxxx částečně xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxx x xxxxx přijmout xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx.
Na xxxxx doby xxxxxxxx xx třeba odstranit xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx je xx možné, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Doba expozice xx xxxxxxx 4 xxxxxx.
Pokud existuje xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx zkrátit xxxxx xxxxxxxx (např. xx 1 xxxxxx nebo 3 minuty). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx zvíře a xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx reakce, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 1 hodině. Xxxxx pozorování v xxxx fázi naznačují, xx xx xxxxxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx principu xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx plátek xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxx kůže. X xxxxxxx, že xxxx xxxxx 4hodinová xxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxx zvířat; pokud xx není kontraindikováno x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. jestliže xx 4 xxxxxxxx expozice xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).
Jestliže je xxxxxxx xxxxx reakce (xxxx. nekróza) xxxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxxx, xx test xxxxxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx navrhnout delší xxxxxxxx, například xxxxx xx odpovídá očekávanému xxxxxxx použití a xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx na příznaky xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xx 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxx x tabulce 1. Jestliže xxxxxx xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxx. Vedle xxxxxxxxxx kůže xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx poleptání (xxxxxxxx xxxxxxxxx kožní tkáně) x xxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testovanou xxxxxx, xx třeba použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx se sestaví xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxx pokusné xxxxx patrný xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxx dobu pozorování. Xx xxxxx rovněž xxxxx xxxxxxx závažné xxxx, popis stupně x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, reverzibilitu xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx možno xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.,
- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx přípravy x xxxxxxx xxxx, xxx xxxxxx: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxx každé xxxxxxxxxx xxxxx xxx každém xxxxxxxxxx (za 1, 24, 48 a 72 xxxxx xxx. xx xxxxxxxxxx xxxx),
- popis zjištěných xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx a povahy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- popis xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,
- diskuse výsledků,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx | |
1. Xxxxxxxxx erytému x příškvaru | |
1.1 Žádný erytém | 0 |
1.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx (stěží xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx viditelný xxxxxx | 2 |
1.4 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx | 3 |
1.5 Těžký xxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxx tvorba xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Xxxxxxxxx edému | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx viditelný) | 1 |
2.3 Lehký edém (xxxxxx jsou zřetelné, xxxxxx je ohraničena xxxxxxxxx xxxxxxxxx) | 2 |
2.4 Mírný xxxx (xxxxxx vyvýšeny xxx x 1 xx) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (zduření více xxx 1 mm x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx) | 4 |
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (IKI)
IKI xx vypočte xxxx xxxxxxxxxxx průměr xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x x xxxxx získaných xxxxxx x všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx průměr.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; IKI ≤ 3 |
xxxxxxx xxxxxx | 3 &xx; XXX ≤ 5 |
silně xxxxxx | IKI &xx; 5 |
B.5. XXXXXX XXXXXXXX (XXXX DRÁŽDIVOST)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
1.1.1 Xxxxxxx xxxxx
Je třeba xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx informace x xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx podmínek, které xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. K xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
a) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti x xxxxxxxx reaktivita. Xxxx. xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, které - xxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx x oku xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5, xxxx xxxxx xxxxxxxx, pokud xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Je xxxxx xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x prokázanými xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx vlastnostmi nemají xxx dále xxxxxxxxx xx dráždivost xxx xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxx testování xxxxx metodou.
x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxx dráždivosti. Xxxxx, xxxxx vykazovaly xxxxxx xxxxxxx xxxx výrazně xxxxxxxx xxxxxx na xxxx ve xxxxxx xxxxx dráždivosti, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx se x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx jednoho xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx jako xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx popíše, xxx xxxx možno xxxxxxx xxxxx posouzení účinku. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx dostatečně dlouhá, xxx xxxx možné xxxxxxxxxxx zhodnotit také xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
24 hodin xxxx xxxxxx xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxx vyšetření xxxx očí. Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx rohovky, se x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Ačkoliv xx xxxxxxxxx různé druhy xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xx dávat přednost xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet xxxxxx
Xxxxxxxx se očekávají xxxxxxx účinky, je xxxxx xxxxxx test xx xxxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx výsledky xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxx xx výrazně xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxx xxx xxx xxx použití xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx další testování xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zvířat. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx případně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
X ostatních xxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx tří xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Úroveň xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,1 ml. X xxxxxx látek, xxxx x xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx objem 0,1 xx xxxx xxxxxxxx xxx 0,1 x (xxxxxxxx xx xxxx xxxxx uvést). Xxxxx-xx xx x xxxxx xxxx hrubě zrnitou xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxx na xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx až po xxxxxxxx xxxxxxxx, např. xxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x pumpou xxxx xxxxxxxxx aerosolových xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx 0,1 xx látky x xxxxxxxxxx xx xx xxx podle popisu xxx kapaliny.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Délku xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx pozorovaných účinků. Xxxxxxxx xxxx stačí 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxx přechovávat xxxxxxxxxx v klecích. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxx, xx se spodní xxxxx lehce odchlípne xx xxxx bulvy. Xxxxx xx pak xxx na 1 xxxxxxx xxxxx k xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxx látka xxxxxxxxxx. Xxxxx oko, xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx předpokládá, xx xxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxxx bolest, lze xxxx instilací xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxx xx testovanou xxxxx, xx třeba xxxxxxx zvolit xxx, xxxxxxxxxxx x dobu xxxxxxxx xxxxxxxxx anestetika. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxx oko.
Oči xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 24 xxxxxx xx xxxxxxxx testované látky. Xx 24 hodinách xx xxxxx oči xxxxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxx za xxxxxx.
U xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx podráždění, je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, kterým se xxxx po xxxxxxxxx xxxxx vymyjí oči. X těchto xxxxxxxxx xx doporučuje xxxxxx 3 králíky. Půl xxxxxx xx xxxxxxxxx xx oči xxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Oči se xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Neprojevují-li xx po 72 xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx pozorování je xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx postižení xxxxxxx xxxx jiné xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx tak, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxx změn x xxxxxx vratnost xx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx oka xx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx připouští xxxxx možnosti xxxxxxxxxxxx. Xxxx pomůcku xxx xxxxxxxxx laboratoře a xx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx zařízení. Po xxxxxxxxxxx pozorování xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx mimoto xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x daném xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxx xxxxx stupně x charakteru xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx závažných xxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x zvířatech (xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),
- x xxxxxxxxx formě xxxxx xxxxxxxxxx xxxx leptavých xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lézí,
- xxxxxxxx popis xxxxxxxxx, charakteru a xxxxxxxxx zjištěného xxxxxxxxxx x poleptání, včetně xxxxxxxxx xxxxxxx rohovky,
- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 x 72 hod.), xxxx. xxxxxxxxxx lampa, xxxx xxxxxxxxx, fluorescein atd.,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxx
Xxxxxxx | |
X. Xxxxxxxx - otok | |
Edém není xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxx zahrnující xxxxxx | 1 |
Xxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx | 2 |
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx | 3 |
Edém xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xx polovinu xxxx xxxxx | 4 |
X. Spojivka - xxxxxx | |
Slzení není xxxxxxxx | 0 |
Slabé xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx běžné sekrece xx vnitřním xxxxxx) | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx | 2 |
Slzení xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx okolí oka | 3 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxxx | |
Cévní xxxxxx normální | 0 |
Xxxxxxxxxxx cév zřetelně xxxxxxxxxx oproti xxxxx | 1 |
Splývající xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, difusnější xxxxx xxxxxxx xxxxx | 2 |
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Duhovka - xxxxxxxx | |
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx duhovky, překrvení, xxxxx, xxxxxxxxxxx cév xxxxx rohovky (xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), reakce na xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx opožděná | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, rozsáhlé xxxxxxxxx x hemoragie | 2 |
v duhovce (xxxxx nebo více xxxxxx charakteristik) | |
X. Rohovka - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx charakteru, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx opalescence, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; obrys xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 3 |
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Neprůhlednost xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx plocha je ≤ 1/4 plochy xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx neprůhlednosti ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; plocha neprůhlednosti ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx > 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx indexu xxxx dráždivosti (XXX)
Xxxxxxxxxxxx index oční xxxxxxxxxxx (XXX) pro xxxxx zvíře x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx podle xxxxxx
IOI = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx průměr x XXX.
Akutní xxxxx xxxx dráždivosti XXX xx xxxxx nejvyššímu XXX zjištěnému v xxxxxxx xxxxx
4.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
dráždí | 15 - 29,9 |
xxxxx xxxxxx | 30 - 59,9 |
velmi xxxxx dráždí | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
B.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1. Úvod
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx schopnost xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx senzibilizačním xxxxxxx na xxxxxxx xxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx x oblasti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xx se xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx volbě testu xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
Testy xx xxxxxxxxx xxx rozdělit xx xxxxx x xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rozpuštěním xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx Freundově xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX), x xx xxxxx bez xxxxxxxx.
Xxxxx x xxxxxxxx xx zdají xxx přesnější x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx senizibilizačního xxxxxx pro lidskou xxxx než metody xxx Freundova kompletního xxxxxxxx, x proto xx xxx dává xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxxx (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) je xxxxx xxxxxxxxx test x xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx několik xxxxxxx xxxxx, je XXXX xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s adjuvans.
X xxxxx skupin xxxxxxxxxx látek jsou xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx se xxxx Xxxxxxxxxx testu) xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
X určitých případech xxx xxxxxxxxx volbu Xxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx intradermální injekci xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx Buehlerova xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx důvody.
X této xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxxx (XXXX) a Xxxxxxxxx xxxx. Lze xxxxxx i xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx validizované x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx.
Pokud xxxxxxxxxxxx xxxx provedený xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx látku označit xxxx potenciální senzibilizátor xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx morčatech. Při xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxx x této xxxxxxxxx kapitole.
1.2 Definice
Xxxxxxxxxxxxx kůže: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx charakterizované xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, pupenci, xxxxxxxx, xxxxxx (velkými puchýři) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx reakce lišit x xxxx být xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx xxxx otok.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: experimentální xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx záměrem navodit xxxx přecitlivělosti.
Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx nejméně xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx): experimentální xxxxxxxx xxxxxxxx dříve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx reakcí přecitlivělosti.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx metody xx xxxx být xxxxxxxxx každých xxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxx xxxxx až xxxxxxx silný senzibilizační xxxxxx xxx kůži.
X xxxxxxx provedeného xxxxx xx očekává xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % u xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se dává xxxxxxxxxxxx látkám:
Číslo XXX | Xxxxx XXXXXX | xxxxxxxx xxxxx | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | alfa-hexylcinnamaldehyd |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | kaptax |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Mohou xxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxx kontrolní xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx nejprve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx injekcemi xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aplikací (indukční xxxxxxxx). Po xxxxxx 10 xx 14 xxx (indukční xxxxxx), x xxxxxxx kterého xx může xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx provokační xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx expozici x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx x stupněm xxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx x xx jim xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávka.
1.5 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Jestliže xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou látku, xxxxxxx se xx x xxxxxxxx vody xxxx vhodného rozpouštědla xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx kožní xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.1 Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (XXXX)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx podmínky xx xxxx xxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxx. Xxxx xxxxxx xx zvířata náhodně xxxxxxx do expozičních x kontrolních xxxxxx. Xxxxxxxxxx srsti xx xxxxxxx stříháním, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx metodě. Xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx samce x xxxxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx x nejméně 5 xxxxxx xx xxxxx x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx dojít x xxxxxx, xx xxxxxxxxx látka je xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 kontrolních xxxxxx.
1.5.1.2.3 Dávkové xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx expozici xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx zvířata xxxxxxx dobře xxxxxxx x která je xxxxxxxx působící xxxxx xx xxxxxxx podráždění xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx použije xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, která u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolá xxxxxxxxxx kůže. X xxxxxxx potřeby xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x předběžném xxxxxx xx dvou xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxx tento xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Popis xxxxxxx
1.5.1.3.1 Indukce
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx po 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx:
Xxxxxxx 1: Freundovo xxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA) xxxxxxx x xxxxx xxxx fyziologickým roztokem x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxx xxxxxxx 3 xx xxxxx xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x FCA xx xxxxx fázi. Xxxxx rozpustné x xxxxxxxx xxxx látky xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx FCA. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 3 xx xxx xxxxxx jako xxx xxxxxxx 2.
Injekce 1 a 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx a co xxxxxxxx xxxxx, zatímco xxxxxxx 3 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx plochy.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx subkutánních injekcí, xxxxx po 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx míst xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx kompletní xxxxxxxx (XXX) smíšené x xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxx vehikulum;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) se xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x poměru 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx dvacet xxxxx hodin xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx pro xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, za xxxxxx xxxxxxxx místního xxxxxxxxxx.
6. - 8. den - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx filtrační xxxxx (2 x 4 cm), xxxxx xx pak xxxxxxx xx xxxxxxxxx plochu x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx obvazu xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx důvody; xxxxx látky xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. den - Kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxx plocha xx xxxxx xxxxx srsti. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x zafixuje xxxxxxx jako x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 48 hodin.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx srsti. Xx jeden bok xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx nebo x xxxxxxx a xx xxxxx bok xx xxxxxxx xxxxxxxx aplikuje xxxxx vehikulum (xxxxx xx xx xxxxx). Xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x kontaktu x xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: testované a xxxxxxxxx xxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx provokační xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x případě xxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx třech xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx od začátku xxxxxxxx provokační xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x dodatku;
- xxxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x testovaných x kontrolních zvířat, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, které xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx je kontrolní.
Xxxxx xx k xxxxxxxxx výsledků xxxxx xxxxx provokace (tj. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x kontrolní xxxxxxxx x vehikulem. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx původní xxxxxxxxx skupině.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx důsledkem indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx řas.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 dnů xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx zvířata xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx srsti xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx kůže. Zvířata xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx testu.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxxxxxxxx morčat.
1.5.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 zvířat x kontrolní xxxxxxx.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx úrovně
Koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx takovou úroveň, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx mírné, ale xx xxxxx silné xxxxxxxxxx xxxx. Jako xxxxxxxxxx koncentrace se xxxxxxx maximální koncentrace, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx stanovit x xxxxxxxxxx pokusu xx xxxx nebo xxxxx zvířatech.
Pro xxxxxxxxx xxxxx rozpustné xx xxxx je xxxxxx použít xxxx xxxx zředěný xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxx jiné xxxxx je preferován 80% xxxxxx xxxxxx/xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Xxxxxxx
Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx testovanou xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx vehikula xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; kapaliny lze xxxxxxxx xxxxxxxxx přímo).
Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 hodin.
Xxxxxx plátkového xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxx, ať xx xxxxxxx nebo čtverhranný, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x použitím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx testovací xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx po xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx aplikace.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Testovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx aplikace xxxx x xxx 0 xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx plochu xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx a xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxx testovaných a xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx srsti (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx nedráždivé xxxxxxxxxxx xx aplikuje na xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxx xxxx neošetřeného xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx plátek s xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx komůrky xxxx xxxxxxxxxxx v kontaktu x xxxx vhodným xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x hodnocení
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx provokační xxxxxx xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx provokačního xxxxxx) xx xxxxxxxx kožní xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx stupnice uvedené x dodatku;
- xxxxxxxxx po xxxxxxx 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx aplikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxx) se kožní xxxxxx xxxxx pozorují x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "slepého xxxxxx" u xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, které zvíře xxxx senzibilizováno a xxxxx je kontrolní.
Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx nutná xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx znovu x kontrolní skupinou x vehikulem. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.
Všechny xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx zaznamenávají podle xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (viz xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
2. SBĚR X XXXXXX XXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx každém xxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xxx proveden před xxxxxxxxx testu xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx jeho xxxxxx (xxxx. LLNA - xxxx xxxxxxxxxxxx lymfatických xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx ucha x myší) včetně xxxxx podrobností postupu x výsledků xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu (XXXX a Xxxxxxxxx xxxx)
Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx zvířat;
- xxxxxxxx xxxxx, strava xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx x konci xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x materiálech x technice xxxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx x indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx test;
- podrobné xxxxxxxxx x xxxxxxxx, aplikaci x odstranění xxxxxxxxx xxxxx;
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx testované látky x xxxxxxxx, použitá xxx indukci a xxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx výsledků xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, její xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx pozorovaných účinků;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx
Xxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx OECD XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Stupnice Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx reakcí
0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx xxxx skvrnité xxxxxxxxx kůže;
2 = středně xxxxxxx x xxxxxxxxxx zarudnutí xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx kůže.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx senzibilizace
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx jako
xxxxx alergen (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
mírný xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % zvířat
xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx alergen (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx
xxxxxxxx xxxxxxx (V. st.) - 81 - 100 % xxxxxx
X.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx se podává xxxxx po 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx zvířat orálně, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pitva xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx během xxxxxx; xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxx a xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Klece xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx klece. Každé xxxxxxxxxx zvíře xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx sondou nebo x xxxxxxx nebo x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; pokud xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxx. Xx nezbytné xxxxxx stabilitu látky xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxx xx xxxxx použít x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx z běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Podávání xxxxx by xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx a x každém xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Xx začátku xxxxxx by nemělo xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Xxxxx xx tato xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx před dlouhodobou xxxxxx, je xxxxx x obou studiích xxxxxx xxxxxxx stejného xxxxx a xx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx použije xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Pokud xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 dnů xxxxxxxx dávku a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxx dávek
Xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxx úrovně xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx xx xxxxxxx množství, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Pokud xx xxxxx xxxxxxxxxx informací xxxx xxxxxxxx účinek xxx denní dávce 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, je možno xxxxxxx xxxxxxx test. Xxxxxx-xx xxxxxx data x dispozici, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vyhledávací xxxxxx za účelem xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx dávek xx xxxxx vzít x xxxxx všechny existující xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií x xxxxxxxxx látce xxxxxxxx xxxxxxx příbuzných.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxx xxxxx utrpení. Xxxx xx xxxxxxx dávky x xxxxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx závislost xxxxxx xx xxxxx. Nejnižší xxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (XXXXX). Xxxxxxx je xxxxxx xxxx- až čtyřnásobný xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxxxx větší xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx čtvrtou xxxxxxxx skupinu, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx dávkami (xxxx. xxxxxx xxxxx xxx 10).
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx v potravě xxxx xxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x ppm) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Aplikuje-li xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx tak xxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx x dávkování přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Pokud má xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx předběžný xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx studií, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx potravy.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx-xx xxxx xxxxxxxxx zde xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx při xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxx xxxx xxx takové xxxxxxxxxxx x potravě xxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxx odpovídá, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky nevyplývá x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testování xxx xxxxx xxxxxxxxx úrovních xxxxxxx. Toto xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx lidí xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx pozorování xx 28 dní. Zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx nejméně xxxxxxx 14 dnů xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířatům xx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 dní x xxxxx po xxxx 28 dnů, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxx x xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx může být xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx zvířete. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx vodných xxxxxxx lze xxxxx x 2 ml xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx úrovních dávky. Xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx x x xxxxxxxx doby očekávaného xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Zaznamenává xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx zběžná xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Důkladné klinické xxxxxxxxx všech xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx (za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxx nejméně xxxxxx týdně. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx klec x standardním pozorovacím xxxxxxxx x nejlépe xxxxxxx ve stejnou xxxxx dobu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx skórovacího xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je třeba xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx znát xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx skupin.
Pozorování xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx změny xxxxx, xxxxxx, dále xxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx pohybů, stereotypů x xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) nebo bizarních xxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx).
Xx čtvrtém týdnu xxxxxxxx se otestují xxxxxx na různé xxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxx, xxxxxxx, proprioceptivní), xxxxx xx síla xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Další xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (viz Xxxxxxxxx xxxx, xxxx X).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx 28xxxxx studie xxxxxx xxxx předběžná studie xxx xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx studie. Ovšem x x tomto xxxxxxx jsou xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx studie vhodným xxxxxxxxxxx pro výběr xxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Výjimečně lze xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxx xxxxxx x skupin xxxxxxxxxxxx xxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx xx xxx posuzování funkčního xxxxx xxxxxxx vadily.
1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx potravy a xxxx
Xxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx se xxxx nejméně xxxxxx xxxxx, také x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů, xxxxx xxxxxxxxxx x změření xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxx xx odebere xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx, se xxxxxxxxx. Krev se xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tkáně, xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx, se xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxx xxxx xxxx x průběhu utracení (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených během xxxxxx). Xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx bez xxxxxxx xxxx noc xxxxxxx krve1). Xxxxxxxxx xxxxxx a séra xxxxxxxx stanovení xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx, celkového xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, albuminu, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx fosfatáza, gama xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Zaměření xxxxxxx enzymů (xxxxxxxxx xxxx jiného xxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Další možnost xx časově definovaný xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx posledního xxxxx studie: xxxxxxxx xx xxxxx vzhled, xxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, pH, xxxxxxxxx, glukózu x xxxx příp. xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxx stanovení nespecifických xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx.
Další xxxxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx u xxxxx xxxxxxx nebo podezřelých x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, fosforu, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx těchto xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx nebo xxxxxx od xxxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxx použitý xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxx očekávané xxxxxx dané xxxxx.
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx údaje o xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx biochemických xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx jejich stanovení xxxxx před začátkem xxxxxx.
1) Xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxx řadu xxxxxx v séru x xxxxxx, zvláště xxx xxxxxxx. Hlavní xxxxx xxx toto xxxxxxxxxx xx xx, xx u nehladovějících xxxxxx xx vyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx změny x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx straně, xxxxxxxxx xxxx xxx by xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xx pravidelnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxx xx odebírá xxxx xx xxxxx, xx xxxxx biochemické xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve 4. xxxxx xxxxx.
1.2.3.5 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se provede xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vnějšího xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxx x srdce xxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxx se xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se předešlo xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x ohledem xx xxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickými změnami, xxxxx (reprezentativní oblasti xxxxxx xxxxxxxx, mozečku x xxxxx), míchu, xxxxxxx, tenké x xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, brzlík, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxx (konzervované xxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem x xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x přídatné pohlavní xxxxxx (xxxx. xxxxxx, xxxxxxxx), xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx xxx oblast xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx pro pokrytí xxxxxxxxxxx xxxxxx), periferní xxxx (n. xxxxxxxxxxx xxxx n. xxxxxxxx), xxxxxxx v blízkosti xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx (nebo xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx dřeně). Podle xxxxxxxxxx nebo jiných xxxxxx xx možno xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx orgán, xxxxx by mohl xxx xxxxxxx orgánem xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx i x xxxxx skupin x xxxxxxx dávkami.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx vyšetřit.
U xxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxx xxxx do xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx provést histologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx orgány x tkáně, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
X dispozici xxxx být xxxxx x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx údaje xxxxxxxxxxxx xx tabulkové xxxxx, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx v průběhu xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx příznaku, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx lézí x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx v xxxxxxx formě xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx metodu xx xxxxx xxxxxx xxx při xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být získány:
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, stáří x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx jednotlivých zvířat xx xxxxxxx testu, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx testu.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx testované látky xxx aplikaci, xxxxxxxx x přípravě xxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- podrobné xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx;
- xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xx na kg xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx x aplikaci x xxxxx xxxx xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx o potravě x xxxxxxx xxxx (xxxxxx druhu x xxxxxx);
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx potravy x xxxx;
- xxxxx x toxických reakcích xxxxx pohlaví x xxxxxxx úrovně, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx toxicity;
- xxxxxx, závažnost x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxx xxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx aktivity;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x hmotnosti xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- údaje x absorpci, pokud xxxx získány;
- xxxxxxxxxxx zpracování výsledků.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx:
4. LITERATURA
Tato xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx XXXX TG 407.
B.8. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX (28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xxxx xxxxxxx xx xxxxx získat xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx velikosti xxxxxx, xxxxx par, bod xxxx, xxx xxxx, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (jsou-li xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx jedné xxxxxxxxxxx, x xx xx 28 xxx. Xxxxxxx-xx xx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx kontrolní skupinu xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 dní xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Pokud xx třeba, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx příslušná xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo jiná xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx data, xx xxxxx je xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx každou testovanou xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxxxx vysoké xxxxxxxxxxx satelitní skupinu 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx satelitní xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx tři xxxxxxx x různou xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - pokud xx užije - x koncentraci xxxxxx xxxx x skupiny x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx nebo xxx x malém xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx střední xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat toxický xxxxxx na hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx koncentrací, mají xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky. Ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx výsledků obtížné.
1.3.2.4 Xxxxxx expozice
Trvání xxxxxxxx xx xxx 6 hodin xxxxx; x případě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xx zvířaty xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx hodinu, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx rozdělení xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, je xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x aby xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx byla xx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx boxu neměl xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx pokusných xxxxxx přesáhnout 5 % xxxxxx xxxx. Xx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxx pozorovat během xxxxxx období expozice x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx xxxxx zaznamenat xxxx uhynutí x xxx, ve kterém xx objeví x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Zvířata v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx xxx mezi 30 % a 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx mírně xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx inhalační xxxxxx x xxxxxxx analytickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx provést xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rychlost xxxxxxx vzduchu je xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx v xxxxx expozičním xxxx xxxx stejné. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx expozice xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:
x) Měření xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).
x) Xxxxxxxx koncentrace studované xxxxx se měří x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ± 15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx experimentu mají xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxx xxxxxx x aerosolů, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Teplota x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxx zvíře xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx výskyt, stupeň x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, očí, sliznic, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx zaznamenávat xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx prohlížení xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx ke ztrátám xxxxxx, xxxx např. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx zařazení.
Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, která xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx v těžkém xxxxxx či xxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx x pitvat.
Xx konci xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx leukocytů a xxxxxxxxxxx krve.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a ledvin xxxxxxxx alespoň xxxxx x těchto xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxx (xxxxx známá xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), aspartátaminotransferáza (dříve xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity cholinesterasy.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3.1 Pitva
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx provede xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, ledviny, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny x srdce, i xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxx přechovávat ve xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx vyjmout xxx xxxxxxxxx, zvážit x xxxxxxx vhodným xxxxxx, xxx aby xx zachovala xxxxxxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx kontrolní xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, ve xxxxxxx xx objevily xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx zjištěné xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx xxx.,
- podmínky xxxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx konstrukce, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx systému, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a distribuce xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx spolu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx odchylkou). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx zařízením; b) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx; x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) xxxxxx vehikula, xxxxx bylo xxxxx; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx; x) xxxxxxxxxx medián xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx směrodatná xxxxxxxx (GSD),
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, případně xxxx x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, kde je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx kůži xxxxx po 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx srst xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx možné, mělo xx xx však xxxxxxx xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx opakovat xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx se xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xx xxxxx xxxx x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže x x xxxxxxxxx krycího xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx zpravidla aplikují xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx možno používat xxxxxxx potkany, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx použití xxxx xxxx xxx odůvodněné. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic a 5 samců) xx xxxxxxx kůží. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx nutno xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx je možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx následujících 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx sledovat vratnost, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx skupinu xxxx - pokud xx xxxxxxx xxxxxxxx - kontrolní xxxxxxx x aplikací xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být nejméně 6 hodin denně. Xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx dobu. X xxxxxxxxxxx týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx aplikovanou dávku xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx zvířete. S xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným skupinám, x xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx jen x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat žádné xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední dávka xxxx xxxxxxx jen xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků obtížné.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxx koncentraci, xxx u xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx k xxxxxxx xxxx vyloučení xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Došlo-li x xxxxxxx poškození xxxx, xx dokonce xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx dávky, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna zvířata xx třeba xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x dobu, xxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx odezní xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx x klecích xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx studované xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 dnů. Xxxxxxx satelitní skupiny, xxxxx xxxx xxxxxx xxx následné pozorování, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 14 xxx xxx expozice, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx reparace toxických xxxxxx xxxx jejich xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx nejméně 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx xxxx; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxx plocha menší. Xxxxxx xx třeba xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx vrstvě.
Xxxxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx s kůží xxxxxx xxxxxxxxx mulového xxxxxx a nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx možno xxxxxx x prostředků pro xxxxxxx xxxxxxxx pohybu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx "ochranného xxxxx".
Po uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, pokud xxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, stupně x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xxx x xxxxxxx x xxxx dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx pravidelné xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx ztrátám xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxx xx všechna xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x zvířata x xxxxxx stresu xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx provedou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx xxxxxx jater x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx spektra xxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx zvířat použitých xx studii xx xxxxxxx xxxxx. Aspoň xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx xx nejdříve xx xxxxx zváží xx xxxxxx xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx, např. normální x xxxxxxxxxx kůže, xxxxx, xxxxxxx, slezina, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx lézemi xxxx změnami velikosti, xx třeba xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
U xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx histologické vyšetření xxxxxxxxxx orgánů a xxxxx. Xxxxx se x orgánech x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se zvláštním xxxxxxx na xxxxxx x xxxxx, ve xxxxxxx se objevily xxxxxx otravy u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx do tabulky. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat na xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx formami poškození.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x zvířatech (druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx atd.),
- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx obvazu; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx účinku, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální příznaky x xxxxxx další xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx je to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
B.10. XXXXXXXXXX - TEST CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX U XXXXX XX VITRO
1. METODA
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 473, In Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxxx je xxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx naznačovat, xx xxxx chemická xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx aberace. Xxxx xxxxxx však xxxx xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x příbuzné xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chorob u xxxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx chromozómové mutace x příbuzné jevy, xxx způsobují xxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, hrají úlohu xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx druhu látky x xxxxxxxx stále xxxx dokladů o xxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx látky, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nezjistí, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx mechanismem xxx xxxxxx poškozením XXX.
X analýze xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vitro xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx, xxxxxxxxx kmenů xxxx xxxxxxxx buněčné xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxx diverzity x xxxxxxxx spontánních chromozómových xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx vyžadují obecně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Tento xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x savců in xxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu, xxxxx xxxx způsobeny xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxx, případně xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx a opětovné xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx aberace typu xxxxxxxxxxx chromozóm, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx).
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx za předpokladu, xx vzniklá xxxxxx xx xxxxxxxxx chromatidy xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále xxx x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) fragment x xxxxx zlomu xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida hodnoceného xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx chromozómy x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx šířka xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.
Mitotický xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx buněk; xxxxx xxxxxx proliferace xxxx populace.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx haploidního počtu xxxxxxxxxx (x) jiný xxx xxxxxxxxx počet (xxxx 3x, 4x xxx.).
Strukturální aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx delece x xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxx xx vystaví xxxxxxxx testované látky, x xx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx buněčné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, buňky xx xxxxxx, xxxxxx xx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx mikroskopicky xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 POPIS METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx možno xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, včetně buněk xxxxxxxx (xxxxxxxxx fibroblasty xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx krve xxxxxxx či xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx a kultivační xxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx x xxxxxxx). U xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx je xxxxx xxxxxx způsobem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx modálního počtu xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx nepoužívají. Xx xxxxx znát xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx: buňky xx xxxxx ze zásobních xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx média x xxxxxx hustotě, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx před dobou xxxxxxxx x inkubují xx při xxxxxxx 37 xX.
Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx mitogen (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxx xxx xxxx xxxx x xxxxxxx antikoagulantem (xxxx. xxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x kultivují xx xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx testovanou xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nejobvyklejší xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (S9) xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx činidly xxxxxxxxxxxx enzymy xxxx xx Aroclor 1254 (6) (7) (8) (9), nebo směs xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v médiu xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému bude xxxxxxx xx tom, xxxxxx typu je xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx případech xx xxxxxx xxxxxx mitochondriální xxxxxx v několika xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx použity x xxxxxxxxx modifikované xxxxxxx xxxxx exprimující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx enzymy. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx být xxxxxxx xxxxxx (např. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x metabolismu testované xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx testovaná látka x pevném stavu, xxxxx xx před xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx její suspenze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx testované látky xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje o xxxxxx stabilitě xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX TESTU
1.6 XXXXXXXXXXXX
X zvoleného rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx xx mohlo x testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat, x xxxxx xxxxxxxxx přežívání xxxxx a xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx prokazujícími xxxx xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje se, xxx xxxx tam, xxx je to xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě zvažováno xxxxxxx xxxx rozpouštědla xxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxx ve vodě xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx organické xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Voda xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.
1.6.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, jež xx uvažují při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x xxxxxxx a xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x hlavním xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx integrity x xxxxx, například stupně xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Je vhodné xxxxxxxx cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, xxxx xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx toxicity. To xxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx násobkem, xxxxx xxxx xxxx hodnotami 2 x √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx růstu, počtu xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (vždy x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je xxxxxxx xx době xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx jiná xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Jako xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx také xxxxx x kinetice xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx průměrný generační xxx; ten xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx průměr, xxxxx ne xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx subpopulací xxxxx. A xxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx času xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx sklízení z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výtěžku xxxxxxx.
X relativně xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 µx/xx, 5 xx/xx nebo 0,01 M.
U xxxxxxxxx nerozpustných látek, xxx jsou netoxické x koncentracích xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx které se xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx finálním xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx případech - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx k xxxxxxxxx účinku xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx testovat xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx užitečné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx konci xxxxxxxx, protože se xxxxx expozice může xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 xxxx. Nerozpustnost xx xx xxxxxxx x xxxxxxx okem. Xxxxxxxxx nesmí xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.6.2 Negativní x pozitivní xxxxxxxx
Xx xxxxxxx experimentu, xx již x xxxxxxxxxxxx aktivací nebo xxx ní, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx). Xxxxx xx xxxxxxxx metabolická aktivace, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx pozitivní kontrolu xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx se očekává, xx xxxxxxxx reprodukovatelný x detekovatelný nárůst xxxxxxx xxx pozadí, xxxxxxxxxxx citlivost testovacího xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx xxxxxx tak, xxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátů. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Metabolická aktivace | Xxxxx | CAS | XXXXXX |
Xx | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx ethyl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Ano | xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx pozitivní xxxxxxxx se xxxxx xxxxxx i jiné xxxxxx xxxxx. Xxx, xxx je xx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx časový xxxxxxxx sklízení xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x negativní xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx rozpouštědlo xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako experimentální xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Na xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx za xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx působit xxx 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx používají xxx kultury; a xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx negativní kontroly x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx základě historických xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, aby xx xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxx jenom jedna xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx postupy, xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kultivačních xxxxx (15).
1.6.3.2 Xxxx sklízení xxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx xx xxxx 3 - 6 hodin a xxxxxx xx odebírají x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx expozice (12). Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx i bez xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx další xxxxxxxxxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídají xxxxxx 1,5xxxxxxx normálního xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, než xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx posuzují xxxxxx xx xxxxxxx. X případech, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Příprava chromozómů
Xx buněčné xxxxxxx xx xxxxxx Xxxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 1 - 2 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx kultura xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx sestává x ovlivnění xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, fixace x odbarvení.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Všechny xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jelikož xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx k rozbití xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x ztrátě xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x hodnocených buňkách xxxxx modálnímu xxxxx ± 2. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází, xxxxxxxxxxx x obou xxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx snížit.
I xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace, xx xxxx důležité zaznamenat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Jelikož xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx včetně jejich xxxxx x xxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx obvykle do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Současně je xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx zjištěnou xxxxxxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx data xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx všechna xxxx xxxxxx x xxxxxxx tabulce.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx testováním, xxxx xxxxxxxxxx experimentálních podmínek. X nutnosti potvrdit xxxxxxxxx výsledky bylo xxxxxxxxx x xxxx. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx modifikaci xxxxxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx koncentrační xxxxxxxxx x podmínky xxxxxxxxxxx aktivace.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se používá xxxxxxx xxxxxxxx, například xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx. Nejprve je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx neměla xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx procesy a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx s endoreduplikovanými xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxx inhibovat xxxx xxxxxxxxx xxxxx (17) (18).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž xxxxxxx výsledky nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, nebo negativní xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx data xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxx ohledu xx xxxxx xxxxxxxxxxx experimentů. Xxxxxxxxx výsledky testu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
ZPRÁVA X XXXXXXX XXXXXX
Xx zprávě x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x zdroj xxxxx,
- karyotyp x xxxxxxxx daného xxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, je-li xx nutné,
- xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx nebo xxxxxxxxxx lymfocyty, použitý xxxxxxx,
- počet xxxxxx buněk, je-li xx xxxxx - xxxxxx udržování xxxxxxx xxxxxxx, je-li xx xxxxx
- xxxxxxx xxxxx chromozomů.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxx blokující xxxxxxxx, xxxx koncentrace x xxxx xxxxxxxx na xxxxx
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx kultur, xxxxxx xxxx. údajů x xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xx-xx xx xxxxx
- koncentrace xxxxxxxxx látky,
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx,
- xxxx působení,
- xxxxxxx buněk na xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- pozitivní x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxxx přípravy xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx x buněčném xxxxx, x xxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xX x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- definice xxxxxxx, xxxxxx gapů,
- xxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxx aberacemi x xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx experimentální x xxxxxxxxx kulturu xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.11. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXX XXXXX XXXXX IN XXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 475, Mammalian Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx chromozómových xxxxxxx x xxxxx xx xxxx je xxxxxxx strukturální chromozómové xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx x buňkách xxxxxx dřeně xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxxx xxx xxxxxxx druhu: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx daná xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx vyvolávat xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x aberacím xxxxxxxxxxxxxx xxxx dochází rovněž. Xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx jevy, jež xxxxxxxxx změny x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx a v xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxx testu xx xxxxx využívají hlodavci. Xxxxxxx tkání x xxx je xxxxxx xxxx, xxxxxxx se xxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx buněk, jež xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx tkáně xx v xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx na chromozómové xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxxx rizika, xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vivo, xxxxxxxxxxxxxxx x procesů xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx xxxxx xxx xxxx živočišnými xxxxx x xxxx tkáněmi xxxxxxx. Xxxx xx xxxx je také xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx testem in xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx xx testovaná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx do cílové xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx projevuje jako xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx poškození chromozómu xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx xxxx zlom x opětovné spojení xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx (zahrnuty xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx chromatidy: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, než xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx v xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx S-fázi xxxxxxxxx XXX nepřechází xxxxx xx mitózy, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.
Xxx: achromatická léze xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx index: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx dělený celkovým xxxxxx xxxxx v xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (n) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (tedy 3x, 4x atd.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx jako xxxxxx x xxxxxxxxx x výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce x xx vhodnou xxxx xx působení se xxxxxx. Před xxxxxxxxx xx xx ně xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). X xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxx připraví xxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr živočišného xxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx savčí druh. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny mladých xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by při xxxxxxxx studie xxxx xxx minimální x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx X, vlhkost xx xxxx být 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx mladí xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x xxx jsou xxxxx umístěny. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek
Xx-xx xxxxxxxxx látka x pevném stavu, xxxx podáním xxxxxxxx xx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx před xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxxxx prokazují, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx s xxxxxxxxxx látkou chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx testu xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx měly xxxxxxxxx strukturální aberace xx xxxx při xxxxxxx, kdy xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx účinky patrné, xxx přitom nenapovídaly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Xxx je to xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx látka. Příklady xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
ethyl xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
cyklofosfamid xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxxx nebo vehikulem x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx by xxx zařazeny xx xxxxx časových xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx x o xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx interval xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx použít i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx a pohlaví xxxxxx
V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx každého pohlaví. Xxxxx x xxxx, xxx se xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx údaje x xxxxxxx živočišném xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx mezi xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě podstatné xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx na jednom xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Tam, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx závislá xx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx se test xx xxxxxxxxx odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx aplikace xxxxx xxxxxxxx, například xx xxx xxxxx xx xxx podané v xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx. Jiné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx být xxxxxxx odůvodněné.
Vzorky xx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxx xxxxx xxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu (která xxxx xxxxxxx 12 - 18 hodin) xx podání xxxxx. Xxxxxxx xxxx potřebná xxx absorpci x xxxxxxxxxxxx testované látky x xxxx xxxx xx kinetiku buněčného xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx vzorků po 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx odběru. Pokud xx v xxxxx xxxxxxxxxx režimu látka xxxxxx xxxxxxxx než xxxxxx za xxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vzorků 1,5xxxxxxxx délky normálního xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje xxxxxx xxxxx Colcemidu® xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx z xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky. X myší je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3 - 5 xxxxx, x čínských xxxxxx xxxxxx 4 - 5 xxxxx. X xxxxxx dřeně xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxx, protože nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx údaje, je xxxxx ji provádět x xxxx xxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx v hlavní xxxxxx (5). Při xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx první xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx tři xxxxx xxx, xxx pokrývaly xxxxxxx od maximální xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxx. Xxx pozdější xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xx xxx xxxxx xxxxxx jenom xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx takové xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx podávání xx účinky byly xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx vykazují specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, která vede x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. pokles xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx 50 %).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx test xxx xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx dávce xxxx xx xxxx dávkách xxxxxxxx x xxxxx xxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx údajů x xxxxxxx s xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx celá xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx úrovní. Xxx dlouhodobé xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xx den xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx době xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx použití x xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávkové xxxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx sondou nebo xxxxxxx najednou xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete a xxxx překročit 2 xx/100x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx musí být xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx kostní xxxx, xxxxxx xx ni xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xx fixuje. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xx.
1.5.7 Analýza
Xxxxxxx xxxx cytotoxicity se x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx index pro xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx xx analyzuje minimálně 100 buněk. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx při vysokém xxxxx aberací. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. Xxxxxxx při jejich xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x porušení xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.
2. ÚDAJE
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx v tabelární xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx jedinec. X xxxxxxx zvířete xx xxxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxx počet x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť x xxxxxxxxxx se, xxx xxxxxxx xx xx celkové frekvence xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx doklady o xxx, že xxx xxxxxxx reagují xxxxxxxx, xx xxxxx údaje xx xxx pohlaví xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx výsledků
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx zřetelný xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxxx je třeba xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (6). Statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx mitotické xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx považuje xx nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx in vivo xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx vzít x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka bude xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- počet, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx studie xxx určení rozpětí, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě testované xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, že xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx skutečnou dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx x vody,
- podrobný xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxx vzorků,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, její xxxxxxxxxxx a doba xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,
- kritéria xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxx zvíře,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx index,
- xxx a xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx jedince zvlášť,
- celkový xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xxxxxx průměr x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- případné xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
- xxxxx ze xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.12. MUTAGENITA - XX XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX X XXXXXXX ERYTROCYTECH
1. METODA
Metoda xx xxxxxxxxx OECD XX 474, Mammalian Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx testovaná látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx x mitotickém xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx x xxx, xx xx analyzují xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. x xxxxxxxxx xxxx zvířat, xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx testu xx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx chromozómů.
Xxxx x xxxxxxxxxxxx kostní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx je x xxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx vzniklé xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx mikrojádra xx xxxxxxxxx xxx, že xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx. Nárůst četnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx je x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
V xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx proto, xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxx xxxxx tvoří. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x mikrojádry x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xx tento xxxxxxxxx druh xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx strukturální xxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx rozlišovat podle xxxx xxxxxxxx, xxxx xx přítomnost či xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx centromerické XXX x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx nezralých (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxx počet xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx počtu zralých xxxxxxxxxx lze jako xxxxxxxx hodnotu použít x xxxxxxx, že xx zvířata testují xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx mikronukleus xxxx u xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx, protože xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vivo, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxx konečným xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxxxx pro další xxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx byl xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx vitro.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx (kinetochor): xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx během dělení xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx umožňující xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x pólům xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx jádra xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx mitózy, xxxx xxxxxx reprezentovaná xxxxxxxxxxxx xx fragmenty xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx chromozómy.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx chybějí xxxxxxxx x xxxx xx xx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx lze odlišit xx zralých, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Zvířata xxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované látce. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, zvířata xx xx xxxxxxx xxxx xx působení xxxxx xxxxxx, kostní xxxx xx xxxxxxx x připraví xx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxx (1-7). Pokud xx používá xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx vhodné době xx xxxxxxxx xxxxx x připraví xx xxxxxx, xxx xx xxxxxx (4) (8) (9) (10). V xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxx periferní xxxx, xxxx xxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx přítomnost xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx myši xxxx xxxxxxx; xxxx však xxx použit xxxx xxxxxx savčí xxxx. Xxxxxxx-xx se periferní xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Xxx xxxxx xxxxxx jakýkoliv vhodný xxxxx druh za xxxxxxxxxxx, xx xx x něj xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx nebo xx x xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečná xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x části B.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Zdraví xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx zvířata xxxxxxxxxxxx x laboratorních podmínkách. Xxxxx je třeba xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x kde xxxx xxxxx umístěny.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Je-li testovaná xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx možné, xxxxx xx před xxxxxxx xxxxxxxx rozpustí nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx podávat xxxxx xxxx se xxxx podáváním ředí. Xx xxxxx používat xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx stejně.
U xxxxxxxxxxx kontrol by xxxx xxx nalezena xxxxxxxxxx in xxxx xxx dávkách, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení nad xxxxxxxxx xxxxxx. Dávky xxx xxxxxxxxx kontrole xx xxxx tak, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnotiteli xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
N-ethyl nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Negativní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx skupiny xxxx xx být zařazeny xx xxxxx časových xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x mikrojádry x x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Aplikuje-li xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx pouze xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je třeba xxxxxx i neovlivněných xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx krev, xxxx xxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx odebraný xxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx pouze v xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x periferní krvi (xxxx. 1 - 3 xxxxx), xxx xxxxxxxx xxxxx leží x očekávaném rozmezí xxxxxxxxxx kontroly.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxxx druhu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx prokazující, xx xxxx oběma xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx zvířatech odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxx, dvě xxxx xxxx dávek x 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxx použít xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xx x daném xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxx; v xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx, až xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx použita xxxxxxx xxxxx x podávání xxxxxxxxxxx až do xxxx odběru vzorků. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx rozdělit, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Test xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
(a) Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx působí xxxxxxxxxxx. Vzorky xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dvakrát, poprvé xx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx x celkově xx xxxxxxx xxx po 48 hodinách xx xxxxxx xxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxx vzorků. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx než xx 24 xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx krve xx xxxxxxxx minimálně xxxxxxx, xxxxxx ne xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx xx podání xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx vzorku, xxxxxxx xxxx xxxxxx déle xxx 72 xxxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx pozitivní odpověď, xxxx již další xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xx xxxxx xxxxxx dvakrát xxxx xxxxxxxx xx xxx (xxxx. dvě xxxx xxxx dávek xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), odeberou xx vzorky x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx mezi 18 x 24 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (12).
Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx použít x xxxxx odběrové xxxxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx třeba xx provádět v xxxx laboratoři za xxxxxxx stejného živočišného xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x pokusného režimu, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx vzorků xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxxx nízké, xxxx nulové. Pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx známky xxxxxxxx, xx při xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx letální. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx biologickou xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx výjimky x xxxxxx kritérií xxx stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx případu. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, která xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dřeni (např. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx resp. xxxxxxxxx xxxx).
1.5.4 Limitní xxxx
Jestliže xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx genotoxicita, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx limitní xxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 dnů, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx než 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní expozice xxxx xxx zapotřebí xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vpravuje xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx dá xxxxxx xxxx injekcí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx upravit xxxxxxxxxxx látky xxx, xxx xxxxx byl xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx / xxxx
Buňky kostní xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx dřeň vyjme x xxxxxx nebo xxxxx, xxxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx žíly xxxx jiné vhodné xxxx. Krevní xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx stavu obarví (8) (9) (10), xxxx xx zhotoví xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (xxxx. akridinové xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx barviva, xxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, že by xx nedala xxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Lze xxxxxx x xxxxx systémy - například xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x jádrem (16) - xxxxx xxxx xxxxxx jsou x xxxxxxxxxx rutinně používány xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). X xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx kostní xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx minimálně 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx minimálně 2000 nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx získat xxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zralých xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % hodnoty x xxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx exponována xxxxxxxxxxx po xxxx xxxx xxxxx nebo xxxxx, xxx také xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Možnou xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (analýza xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx analýza - xxxx xxxxxxxxx), pokud xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx kontinuálně po xxxx čtyř xxxxx xxxx xxxx, xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx byly xxxxxxxxxx). Xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry xx xxxxx xxx každého xxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx x xxx, xx xxx pohlaví xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx údaje xx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx analýzu sloučit.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx několik kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx x mikrojádry xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx časovém intervalu xxxxxx vzorků. Nejprve xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx. Nejednoznačné výsledky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice xxxxxxxxx jednoznačně pozitivní xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o aktivitě xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx mikronukleus xxxxx xxxxxxx, že látka xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx látka x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxx xxxxx mikrojader x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Je xxxxx uvažovat, xxxx xx pravděpodobnost, xx xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx používána, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx volby vehikula
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx známa.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, věk x xxxxxxx jedinců,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx hmotnostního xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxx xxx určení xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx cesty xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody x ověření, xx xx xxxxx xxxxxxx xx celkového xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx faktickou xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx x každého xxxxxxx,
- kritéria, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x celkovému xxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx pro každého xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxx každou skupinu,
- xxxxx dávka - xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy x metody,
- xxxxx xx souběžných x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.13/14. MUTAGENITA - XXXX REVERZNÍCH XXXXXX X XXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Reverse Mutatiton Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx typhimurium (xxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) a xxxxx Xxxxxxxxxxx coli (xxxxxxxxxx xx vztahu x aminokyselině xxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxx systémů xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx mechanismem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx nebo několika xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bakteriálních xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx spočívá x tom, že xx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zpětně vracejí xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx funkční xxxxxxxxx bakterie xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx aminokyselinu. Xxxxx změněná bakteriální xxxxx xx detekována xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx růst za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx mateřský xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx zvířat xxxx xxx xxxxxx nádorů. Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, levný x xxxxxxxxx jednoduchý. Xxxx xxxxxxxxxxx kmenů xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxx, zvýšené xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx velké xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xxx jsou náchylné x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx umožňuje xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x typech xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látkami. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx je x dispozici xxxxx xxxxxxxx databáze xxxxxxxx xxx širokou xxxxx xxxxxxxx x byly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metody xxx testování xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx chemikálií xxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Test xxxxxxxxxx mutací x xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Escherichia xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (histidinu xxxx. xxxxxxxxxx), xxx xxxxx ke xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx dodávce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x XXX. Při xxxxxxxxx xxxxx může x xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx mutace xxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, xxx způsobují xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx bází x XXX, xxxx xx xxxx čtecí xxxxx x XXX.
1.3 XXXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx buňky, xxxxx xx od savčích xxxxx liší x xxxxxx xxxxx metabolismu, xxxxxxxxxxxxx struktuře x xxxxxxxxx opravy XXX. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx vyžadují xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx dokonale xxxxxxxx xxxxx podmínky xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx v organismech xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx mutací xx xxxxx používá jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx v xxxxxx testech mutagenní xxxxxxxx. Xxxxxxxx ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx se xxxxx testem xxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxx nedostatku xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx veličin, xxxxxxx v metabolické xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx dostupnosti. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxx zvyšují, xxxxx xxxx k xxxx, xx xx mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx mutací může xxx nevhodný pro xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx některé xxxxx xxxxxxxxxxxx sloučeniny (kupříkladu xxxxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx analoga xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx testy xx xxxxxx u xxxxx.
Xxxxx sloučeniny, jež xxxx při tomto xxxxx pozitivní, jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx absolutní; xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xxxxx testem xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxxx bakteriálních xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx klasické xxxxxxx xxxxxx "xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxx x vrchním xxxxxx x vylije xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx půdou. Xxx xxxxxxxxxxxx metodě xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx agarem a xx potom xx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxx xxxx metodách xx xxx xx xxx xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x výsledek xx xxxxxxx x počtem xxxxxxxxx revertujících kolonií xx kontrolních miskách x rozpouštědlem.
Xx xxxxxxx xxxxxxx postupů xxx provedení xxxxx. X nich xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx misková xxxxxx ["xxxxx xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), preinkubační xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx metoda (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx (12).
Xxxxxxx xxxxxxx x rámci xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx incorporation x xxxxxx preinkubační. Xxx xxxx xxxxxx xxxx přijatelné xxx xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx aktivací, tak xxx ní. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx alifatické xxxxxxxxxxx x krátkým xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, aldehydy, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3). Xxxx xxxx xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xx xx xxxxx xxxxxxxx jako xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", k xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxx xxxxx. Byly xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx případy" (xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx pro jejich xxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x těkavé xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx standardního xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. POPIS METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stadia xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Kultury x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stadiu xx nepoužívají. Xxxxxxxx xx, xxx kultury xxxxxxx pro experiment xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x jednotlivých xxxxxxx stanovením počtu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx činí 37xX.
Použije xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx budou xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; TA 1537 xxxx TA97a xxxx 1X97; XX98; x XX100); u xxxxx xxxx xxxxxxxxx spolehlivost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx různými xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx kmeny X. typhimurium mají xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxxx xxxx XX x xx xxxxx, xx nemusejí detekovat xxxxxx xxxxxxxx mutageny, xxxxx vyvolávající křížové xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx X. coli XX2 xxxx S. xxxxxxxxxxx TA102 (19), xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx XX. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx tato:
- S. xxxxxxxxxxx XX1535 a
- X. typhimurium XX1537 xxxx TA97 xxxx XX97x x
- X. xxxxxxxxxxx TA98 x
- X. xxxxxxxxxxx XX100 a
- X. coli XX2 uvrA xxxx X. coli WP2 xxxX (xXX101) xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx TA102 xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx X. xxxx (např. X. xxxx XX2 nebo X. xxxx XX2 (xXX101)).
Xx xxxxx xxxxxx zavedených postupů xxxxxxxx zásobní xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Pro každý xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx E. xxxx). Xxxxxxx je xxxxx zkontrolovat i xxxxx fenotypické xxxxxxxxxxxxxxx, x to: přítomnost xx xxxxxxxxxxxx R-faktor xxxxxxxx tam, xxx xx xxxxxxxx v xxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx XX98, XX100 x TA97a nebo XX97, XX2 xxxX (xXX101) x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx x kmene XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxX xxxxxx x X. xxxx xxxx uvrB xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx citlivosti xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Použité xxxxx xxxx xxx xxxxx spontánně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx frekvenčním xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx laboratoře x xxxxx možno i x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Médium
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx E x xxxxxxxx) x xxxxxx xxxx obsahující histidin x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx jak xx xxxxxxxxxxx, tak xx xxxxxxxxxxxxx vhodného systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx post-mitochondriální frakce (X9) připravená x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx enzymů xxxxxxx, xxxx je Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx fenobarbitalu x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 30 % x/x xx xxxxx X9. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx testované xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x několika xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx redukční xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).
1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx látky se xxxx působením xx xxxxxxxx rozpustí nebo xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x případně xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx mohou xx xxxxxxxxx xxxxxxx přidávat xxxxx nebo xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stabilitě prokazují, xx xxxxxx delší xxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxx testu
1.5.2.1 Xxxxxxx kmeny (xxx 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx vzít x xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxx se k xxxxxxxx použije.
Může xxx účelné xxxxxxxx xxxxxxxx x nerozpustnost x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vymizením xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx pozadí xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx změnit. Xxxxxxxxxxxxx xx posuzuje xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, viditelného x xxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusná xxxxxxxxxxx je x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, by xxxxx xxxx několik xxxxxxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxx pokusné xxxxx nerozpustných. Testované xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx než 5 xx/xxxxx resp. 5 µx/xxxxx, xx xxxxxxx až xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Sraženina xxxxx rušit xxx xxxxxxxxxxxxx.
Používá se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx půllogaritmickým xxxxxxxxxx (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx body v xxxxxxxx experimentu. Zkoumá-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx vhodný xxxxxxxx xxxxx. Testování xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx v xxxxx, xxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nečistot.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxx zahrnovat i xxxxxxxxx kmenově specifickou xxxxxxxxx a negativní (xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxx, jak s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx takové xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx efektivnost xxxxxx xxxxx.
U xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx typu xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx v testech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx tabulka:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx kontrolou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxxxxx:
Látka | XXX | XXXXXX |
Xxxxx xxxxxx | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-aminoantracen xx xxxxxxxxx jako xxxxxx indikátor xxxxxxxxx xxxxx X9. Xxxxx xx 2-xxxxxxxxxxxxx použije, xx třeba každou xxxxx X9 charakterizovat xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx metabolickou aktivaci xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, dimethylbenzantracenenm.
Xxxxxxxx xxxxx, jež jsou xxxxxx pro kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx tato xxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX | |
Azid xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 a XX 100 |
2-nitrofluoren | 607-57-8 | 210-138-5 | TA 98 |
9-aminoakridin | 90-45-9 | 201-995-6 | TA 1537, XX 97 a XX 97x |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, XX 97 x XX 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | TA 102 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 | XX uvrA x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX a XX2xxxX (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (AF2) | 3688-53-7 | kmeny xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
K xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx i jiné xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x chemické xxxxx.
Xx xxxxx použít x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, xx kterými xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx testované látky. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx či mutagenní xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Při xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4) xxx metabolické xxxxxxxx xx obvykle xxxxx 0,05 nebo 0,1 ml testovaného xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) a 0,5 ml xxxxxxxxxx xxxxx a 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx aktivací xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx metabolické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x rozmezí 5 - 30 % x/x x metabolické xxxxxxxxx směsi) x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx společně x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx /testovaným roztokem. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx agar xx xxxxx před xxxxxxxx ztuhnout.
Xxx xxxxxxxxxxxx metodě (2) (3) (5) (6) xx xxxxxxxxx xxxxx / testovaný xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx (obsahujícím xxxxxx 108 životaschopných xxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) xxxxxxx po xxxx 20 xxx xxxx xxxx při 30 - 37 xX; potom xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx xxxxxxxx a 0,5 xx směsi X9 xxxx xxxxxxxxxx xxxxx s 2,0 xx xxxxxxxx agaru. Xxxxxxxx xx během xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx dávku očkují xxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx vědecky zdůvodněno. Xxxxx-xx náhodně xx xxxxxx xxxxx, nemusí xx test xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx, například x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 INKUBACE
Xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 oC pod xxxx 48 - 72 xxxxx, načež xx spočítají xxxxxxxxxxx xxxxxxx na každé xxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx jak x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, popřípadě xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, byla-li xxxxxxx), tak x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontrolu (xxxx. xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx) xx xxxxxx počty xxx xxxxxxxxxx xxxxx x průměrný počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od případu. Xxxxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx to xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx studijních xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx mezi koncentracemi, xxxxxx xxxxxxxx ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" nebo preinkubace x tekutém xxxxxxxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Ke xxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx dávkově xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx reprodukovatelný xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx při xxxxx xxxx více koncentracích x xxxxxxxxx jednoho xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xxx (23). Xxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx je možno xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (24), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx pozitivní xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x když xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx reverzní xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx substitucí xxxx xxxx posuzovaných xxxxxx x genomu Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx coli. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx mutagenní.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xx známa.
Kmeny:
- použité xxxxx,
- počet xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- množství xxxxxxxxx látky na xxxxx xxxxx (v xx xxxx μx) xx xxxxxxxxxxx volby xxxxx a počtu xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- postupy xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxxxx miskách,
- xxxxxxxx počet revertantních xxxxxxx xx xxxxx xxxxx a směrodatná xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- údaje z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků.
Závěry.
B.15. GENOVÉ XXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx indukovaných chemickými xxxxxxx xxx x x metabolickou xxxxxxxx.
Xxxx využívány xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, jako xx míra xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx-1, ade-2) xx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx systémy, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx canavaninu a xxxxxxxxxxxxx.
Nejlépe ověřený xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx XX 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx mutacemi xxx 2-1, xxx 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx bazí, xxxxx xxxxxxxx mutace ve xxxxxxxxxxx xxxxx, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X xxxx rovněž xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, revertovanou xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx a xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx revertován xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
U xxxxxxxxxxx kmenů S. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx kmenem X7, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx připraveny xxxxx xxxx testováním xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X organických xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxx xxxx xxxxxx vyšší xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, jako je xxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristiky růstu.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx jak x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx užívaným xxxxxxxx xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx indukujících enzymy x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx jiných xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakcí xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14C x xxxxxxxxx xxxx X7 xxxx nejužívanější pro xxxxxx genových xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Odpovídající kultivační xxxxx xxxx užívána xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx a mutovaných xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx zvolených xxxxxxxxxxx. X toxických xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx vodě relativně xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx až xx xxx rozpustnosti xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx rozpustné, xx určena xxxxxx xx případu.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Misky xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx při 28 xx 30 xX xx xxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Frekvence xxxxxxxxxxx mutací u xxxxxxxxx xx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnot.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx na jednu xxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x životnosti xxxxx. X experimentů xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 3-10 x xxxxxx mutační xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx kmenů X. cerevisiae xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x zahrnuje xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx buňky. Základní xxxxxx mají být xxxxxxxxx na rostoucích xxxxxxx: 1-5 x 107 buněk/ml xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. při 28 xx 30 xX za třepání. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému je xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx ovlivnění jsou xxxxx centrifugovány, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx buňky x xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx je první xxxxx negativní, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx mají být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx mají xxx potvrzeny nezávislým xxxxxxxxxxxx. Údaje mají xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o:
- xxxxxxxxx kmenech,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx aktivační systém,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx expozice, xxxxxx x trvání xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx mutací, xxxxxx xxxxx a xxxxxx, xxxxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae může xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx (xxxxxxxx mezi xxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx xx nazýván xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x vytváří xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx genová xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx testováno na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxxxxx kmenů, xxxxxx xxxxxxxx xx testována xx xxxxxxx tvorby xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x auxotrofního xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx genu. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx X4 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 a xxx 5), X7 (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 5), XX34 (xxxxxxxxxxxxxx x arg 4) x JD1 (heteroalelický x his 4 x trp 5). Xxxxxxxxx překřížení xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxxxxxx x D5 xxxx X7 (který xxxxxx měří mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mutace x xxx 1-92). Xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx těsně před xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxx užít roztok xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Metabolická xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxxxxxx, tak x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx jiných druhů, xxxxx, postmitochondriálních frakcí xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Testovací xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx D4, X5, X7 a XX1. Užití xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Média
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx média xxxx xxxxxxx pro xxxxxx přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x rozpouštědlem xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx současně. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx brán xxxxx xx cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mít xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X toxických xxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx vodě xxxxxxxxx nerozpustné mají xxx xxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 h. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro tvorbu xxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxx xx xxxxx až xxxx xxx při 28 - 30 xX. Xxxxx xxxxxxx xxx průkaz xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx umístěny x xxxxxxxxxx (cca 4 xX) po xxxxx 1 - 2 dny xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxx utvořit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kolonie.
1.2.2.6 Spontánní xxxxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx
Xxxx xxx užity xxxxxxxxxx x frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx replikací
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xx jednu koncentraci x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx tvořených mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx x xxx určení xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx recesivní homozygozity xxxxxxx mitotickým xxxxxxxxxxx xx xxx počet xxxxx zvýšen, xxx xxxx dosaženo xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Postup
Xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxx rostoucí xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx buňkách. 1-5 x 107 buněk/ml xx vystaveno xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 až 30 oC xx xxxxxxx. Odpovídající množství xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xx přidáno x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx to potřebné.
Xx xxxxxxxx ovlivnění xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x buňky x xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx být proveden xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozitivní, xx xxxxxxxx dalším xxxxxxx nezávislým experimentem.
2. XXXXX
Údaje xxxx xxx prezentovány x xxxxxxxxx formě a xxxxxxxx počet kolonií, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx a frekvenci xxxxxxxxxxx.
Výsledky xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx experimentu.
Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má pokud xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- podmínky xxxxx: buňky ve xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, složení médií, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, metabolický aktivační xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, teplota xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx,
- xxxxx kolonií, xxxxx rekombinant, přežívajících xxxxx x frekvence xxxxxxxxxxx, xxxxx dávky x xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.17. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX XXXXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 476, Xx Vitro Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Test xxxxxxxx xxxxxx xx vitro xx xx používat xx xxxxxxxxxx genových xxxxxx vyvolaných chemickými xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X5178X, linie XXX, XXX-XX52 x X79 xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx TK6 (1). X těchto xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx konečný xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx mutace x xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) a v xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxx xxxxxx x XX, HPRT x XXXX xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx změn. Autosomální xxxxxxxxxx TK a XXXX může xxxxxxx xxxxxxx x takové xxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx xx lokusu XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
X xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx dají xxxxxx xxxxxxx stabilizovaných buněčných xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx volbě xxxxx se xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx obecně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx systém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx podmínky xx vivo dokonale. Xx xxxxx vzniku xxxxxxxx podmínek, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx výsledkům, xxx xxxxxx důsledkem xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx vysoké xxxxxxxxxxxx (7).
Xxxxx xxxx se xxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxxx savčích mutagenů x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx, neexistuje xxxx xxxxxxxx korelace xxxx xxxxx testem x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxxxx xxxxx více xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxxxxxxxxxx, který x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxx: genová xxxxxx výchozího xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xx xxxxx xxxx ztrátě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páru xxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx jednoho nebo xxxxxxxx xxxx xxxx x DNA.
Frameshift xxxxxxxx (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxx jednoho xxxx xxxx párů bází x XXX.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx genové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx celkový xxxx: xxxxxx xxxxx buněk x xxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxx buněk; vypočítává xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx růstu (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (v xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx suspenzní xxxx: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxx x porovnání x xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) ovlivněných xxxxx x době xxxxxxxxx xx miskách x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx období xxxxxxx.
Xxxxxxx: xxxxxxxxx účinnost (cloning xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx miskách xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx; vyjadřuje xx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Buňky, deficientní xx xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx XX+/- → TK-/-, xxxx rezistentní vůči xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx TFT xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dělení. Xx xxxxxxxxxxx XXX xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, obsahující thymidinkinázu, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Podobně xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 6-xxxxxxxxxxx (XX) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx je analog xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx analyzována x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx buňkách, je xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx bedlivě xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx každé podezření xx selekční xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxx x mutacemi x xxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx činidlem, xx třeba xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xx vhodnou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s metabolickou xxxxxxxx i xxx xx a xxxxxxxxx xx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx exprese xxxx xxxxxxx mutantů (9) (10) (11) (12) (13). Cytotoxicita xx stanoví xxxxxxx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (cloning xxxxxxxxxx) xxxx relativního xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxx médiu xx dostatečnou xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx a xxx xxxxx, xxx mohlo xxxxx x co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx bez xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx kolonie xxxxxxxxx. Xxxxxxx frekvence xx xxxxxx z xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x selekčním xxxxx x x xxxxx xxxxxxx x neselekčním xxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xx xxxxxx celá xxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x XX6. U xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx klonovací xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (power). Xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx těmto xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyhovovat (14). Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxxx expozici x xxxxxxx se v xxxxxxxxxxxx stadiích xxxxx, xx xxx frekvencí xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 106 buněk. Xxxx xx být x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, kterými xx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
Xx xxxxx použít vhodná xxxxxxxxxx média x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx a xxxxxxx). Xxxxx se pro xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněk xxxxx expresní xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx tvořit xxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx do kultivačního xxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx buněk.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx z xxxxx hlodavců, ovlivněná xxxxxxx indukujícími xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10% x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx záviset na xxx, xxxxxx typu xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx aktivace xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx exprimující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Je-li xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxxx, látka xx před xxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, že xxxxx xxxxxxxxxx neovlivňuje xxxxxx vlastnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
X zvoleného rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx narušovat přežívání xxxxx x aktivitu X9. Používá-li se xxxx xxxxx rozpouštědlo xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx, xxx všude tam, xxx je to xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx zvažováno xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxxxx, musí xxx xxxxxxx organické xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Xxxx xx dá odstranit xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Koncentrace
Mezi xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx v systému x xxxxx xX xxxx. osmolality.
Cytotoxicita xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i bez xx v hlavním xxxxxxxxxxx, přičemž se xxxxxxx vhodné indikace xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (přežití) xxxx xxxxxxxxx celkový xxxx. Xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxxx x rozpustnost x předběžných xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, musí xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx více xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx mezi xxxxxxxxx 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx koncentrace x xxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx by maximální xxxxxxxxx xxxxx měla xxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx, 5 μx/xx x 1,01 X.
X relativně xxxxxxxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, má xxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšší, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx konci xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx během xxxxxxxx x důsledku xxxxxxxxxxx xxxxx, X9, xxxx xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx dá zjistit x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx být xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X rámci xxxxxxx experimentu xx xxxxxx xxxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (rozpouštědlo, vehikulum) xxxxxxxx, x xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx bez xx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx nitrosomočovina | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
TK (xxxx a velké xxxxxxx) | xxxxxx methansulfonát | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XPRT | ethyl metansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (malé x xxxxx kolonie) | cyklofosfamid monohydrát cyklofosfamidu benzo[a]pyren 3-methylcholantren | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XPRT | N-nitrosodimethylamin (pro xxxxxx koncentrace X-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
xxxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx použít x xxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (XXX 59-14-3, xxxxx XXXXXX 200-415-9), xxx použít x xxxx referenční xxxxx. Xxx, xxx xx xx xxxxx, xx xxxxxx použít xxx pozitivní kontrolu xxxxx xx stejné xxxxxxxx skupiny.
Pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx používá rozpouštědlo xxxx vehikulum x xxxxxxxxxxx médiu, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx nevykazuje žádné xxx xxxxx nepříznivé xx mutagenní účinky.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx proliferující xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Expozice xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (obvykle xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Xxx každou xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jenom xxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx jedna xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx se zajistil xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxxxxxx). Kultury x xxxxxxxxx kontrolou (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx používají xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx plynných xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx postupy, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx uzavřených kultivačních xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x mutační frekvence
Po xxxxxxxx expozice xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx stanovení xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po expozici xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx cytotoxicity xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx efficiency xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx časový xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx nově xxxxxxxxxxxx mutantů (HPRT x XPRT vyžaduje xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 dny). Xxxxx se xxxxxxx x xxxxx x x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx doby xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx životnosti (xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx) inokulací buněk xx xxxxxxxx médium.
Pokud xx xxxxx x xxxxx L5178Y XX+/- xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x experimentálních xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx látka x tomto testu xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxx xxxxxxx i xx xxxxxxxx x XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx data slouží xxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx x životnosti, xxxxx xxxxxxx x mutační xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kultur. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x testu X5178XX+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx kritérií xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x negativní x xxxxxxxxx kontrole. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx velkých i xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx prostudovány x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx XX+/- xx kolonie xxxxxxx xxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (velké) x pomalého xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxx kolonie. Rozmezí xxxxxx poškození obvykle xxxx xx xxxxxx xxxxxx genu po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx je asociována x expozicí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rychlostí xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xx třeba uvádět xxxx přežití (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx efficiency) xxxx relativní xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx počtem přežívajících xxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx formě.
Verifikace xxxxxx pozitivní xxxxxx xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx musí xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxx. X případech, xxx xx potvrzení negativních xxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxx, je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxx x následných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. K xxxxxxxxxx, které xx xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx xxxx jednotlivými xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.
Testovaná látka, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují výše xxxxxxx kritéria, se x xxxxx systému xxxxxxxx za nemutagenní. Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx se experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xx testovaná xxxxx vyvolává x xxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxx mutace. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx - xxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx uvést xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- rozpustnost a xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.
Buňky:
- typ x xxxxx buněk,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx kultivace xxxxxxx xxxxxxx,
- absence xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých koncentrací x xxxxx xxxxxx, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx média, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx vehikula x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx inkubace,
-doba xxxxxxxx xxxxx,
- hustota xxxxx xxxxx xxxxxxxx látky,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- délka expresní xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- metody xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx buněk,
- definice xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx (včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx "malými" x "xxxxxxx" koloniemi).
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx o xX x xxxxxxxxxx xxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx stanoveny,
- xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxx X5178X XX+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.18. XXXXXXXXX XXX REPARACE - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - XXXXX XXXXX XX VITRO
1. METODA
1.1 Princip xxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx DNA xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx indukovaného xxxxxxxxxx xxxx fyzikálními xxxxxxx. Test xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3H-TdR) xx XXX savčích xxxxx, xxxxx xxxxxx x X fázi xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx 3X-XxX je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx kapalnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxx x přítomnosti, xxx i v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. UDS xxxx být xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx vivo.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx referenční se xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx ředění xx provádí xxxxx xxxxxxxxxxx médiem. Konečná xxxxxxxxxxx rozpouštědla v xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk.
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx (xxxxxx diploidní fibroblasty).
Xxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx kultur
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx bod xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kultur xxx autoradiografii x xxxxx xxxxxx (nebo xxxx, xx-xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX UDS.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx hepatocyty xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx pro xxxxxxxxxxxxxxx, xxx x pro XXX bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-NQO). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx lze použít X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx špatně xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x koncentracích xx xx hranici xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vhodných xxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx určuje xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx růstové xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, teplota x xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie musí xxx xxxxxxxxxx kontrolovány xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxxxxxxxx hepatocytů xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx a xxxxxxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx experiment
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx buněčná xxxxx se xxxxxxxxxx xx zásobní xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx izolované xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované látce x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx vhodnou xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx promyty, xxxxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxx ponořena xx xxxxxxxxxxxxxxxxx emulze (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx stripping film), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x vyhodnocena.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie a xxxxxxxxx
Autoradiografické xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu x pak jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx 3X-XxX. Xxxx působení xx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx systému a xx typu buněk. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx UDS je xxxxx 3H-TdR xxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx ovlivněn xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx látkou x 3X-XxX. K odlišení xxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx užívá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx semikonzervativní xxxxxxxxx DNA.
Stanovení XXX xxxxxx XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx X-xxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx bylo xxxxxxx xxx autoradiografii. Xx xxxxx xxxxxxxxx je XXX xxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx obsah XXX x určen xxxxxx xxxxxxxxxxx 3H-TdR.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx metodách xxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx replikace XXX zbytečná.
1.2.4 Analýza
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxxx UDS v xxxxxxx kultuře se xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx 50 xxxxx x xxxxxx experimentálním xxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx náhodně vybraných xxxx. Množství inkorporovaného 3X-XxX x xxxxxxxxxx xx určí x xxxx o xxxxxxxxx xxx jader v xxxxxxxxxx xxxxx hodnocené xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxx stanovení XXX XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx kontroly.
Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx experimentech.
2. XXXXX
Údaje xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxx.
2.1 Vyhodnocení xxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx cytoplazmy x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx buněčné xxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxx.
Xxxxxx inkorporace 3X-XxX xx xxxxxxxxxx a xxxxx xxx v xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx průměru, xxxxxxx x xxxx.
2.2 Vyhodnocení XXX
Inkorporace 3H-TdR xx xxxxxxxxxxx xxxx xxx/μx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxx dpm/μg DNA xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx to možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx x době xxxxxxxxx kultury, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx použitých k xxxxxxxxx kultury, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jejich xxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx autoradiografických xxxxxxxx,
- způsobech xxxxxxxxx xxxxxx buněk xx X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxx XXX a x xxxxxxxxxxx celkového obsahu XXX při metodě XXX,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.19. XXX - VÝMĚNA XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
SCE xx xxxxxxxxxx test xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX mezi xxxxx sesterskými xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. XXX reprezentují xxxxxx identických sekvencí XXX xxxx replikačními xxxxxxxx v identických (xxxxxxxxxxx) lokusech. XXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx zlom x opětovné xxxxxxx, xxx xx zatím xxxx znalostí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxxxxxxx značení xxxxxxxxxxx chromatid. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) xx xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Savčí xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x přítomnosti x xxx xxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému, xx-xx xx potřebné. Xxxxxxxxx se xx xxxx dvou replikačních xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx XxxX. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx) k akumulaci xxxxx x x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou buňky xxxxxxxxxx x připraveny xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (ovariální xxxxx xxxxxxxx křečka). Xxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x hlediska xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx (teplota, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2 x vlhkost).
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiu nebo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx buněčných xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx úroveň x xxxxxxxxxx xxxx aktivity xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupinu xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X každém xxxxxxxxxxx xxxx xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x použitým xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx pozitivní xxxxxxxx xxx xxxxxx:
- xxxxx působící xxxxxxxx: etylmetansulfonát
- xxxxxxx xxxxxxxx mutageny: xxxxxxxxxxxxx
Je-li xxxxx, xx možné xxxxxxx xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx musí xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk. Xx vodě relativně xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx rozpustné netoxické xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx ze zásobní xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx nádoby), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx při 37 xX. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx takový xxxxx xxxxx x kultivační xxxxxx, xxx xx xxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx také xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x inkubují xxx 37 xX.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur
Xxxxx xxxx exponovány testované xxxxx v exponenciální xxxx růstu xx xxxxxxx dobu. Xx xxxxxxx případů xxxxx xxxxx xx dvě xxxxxx, xxx expozice xxxx být xxxxxxxxxxx xx xx dva xxxxxxx xxxxx, je-li xx xxxxx. Buňky, xxxxx xxxxxx dostatečnou xxxxxxx metabolickou xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na konci xxxxxxxx xx testovaná xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx, buňky vymyty x dále kultivovány x růstovém médiu x XxxX xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou x XxxX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx cyklů.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x nejcitlivějším xxxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx xxxxxxx x XxxX xx xxxxx xxxxxxxx x temnu xxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx žárovky, xxx xx zabránilo fotolýze XXX, ve xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dělicího xxxxxxxx (např. kolchicín). Xxxxx kultura xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx SCE může xxx provedeno xxxxxxxx xxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxx).
1.2.3.5 Analýza
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx frekvenci XXX x xxxxxxxx. Obvykle xx hodnotí nejméně 25 dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Preparáty musí xxx zakódovány před xxxxxxxx. V lidských xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s 46 xxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxx x ± 2 centromery xx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Výsledky xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxxxx experimentech.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX v xxxxx xxxxxxxx a xxxxx XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx média, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxxxxxx testované látky, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádobách, xxxxx xxxxxxxx, inhibitoru xxxxxx x jeho xxxxxxxxxxx i xxxx xxxxx xxxxxxxx, metabolickém xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxx SCE/buňku x SCE/chromozóm (odděleně xxx každou xxxxxxx),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx možné,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX MUTACE VÁZANÉ XX XXXXXXX X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx mutace xxxxxx xx pohlaví (XXXX) na Drosophila xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx detekci xxxxxx, xxx xxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxx, x zárodečných xxxxxxx xxxxx. Je xx xxxx na xxxxxxx xxxxxx vhodný xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx reprezentují ani 80 % xxxxx xxxxxx X-chromozómu. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx genomu.
Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx fenotypicky xxxxxxx x xxxxx nesoucích xxxxxxxx gen. Když xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx na její xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx ze xxxx xxxx samčích xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. SRLS xxxx xx xxxxxxx vzhledem x zvláštnímu xxxxxxx x uspořádání chromozómů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxx
Používají se xxxxx dobře xxxxxxxxxx xxxxxx linie x xxxxxx xxxxx Xxxxxx-5. Xxxxx být xxxxxxx x xxxx vhodné xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Látky xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxx etanolu x Xxxxxx-60 xxxx 80), před xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dimetylsulfoxid (XXXX) xxxx xxxxxxxx.
1.2.1.3 Počet xxxxxx
Test xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ovlivněných xxxxxxxxxx, xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xx, injekčně nebo xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxx. Zkrmování xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx roztoku. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx XxXx x xxxxxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx pokusu se xxxxxxxx xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx k dispozici xxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxx, není xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.6 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx používá xxxxx dávka xxxxxxxxx xx maximální xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxx (xx xxxxx 3-5 xxx) jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx samicemi x xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x jiné vhodné xxxxxxxxx linie (vícenásobná xxxxxxx X-chromozómu). Samice xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxx xxx, xxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x účinkem xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx spermie, xx xxxxxxxxxx ve středním xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Heterozygotní X1 samice xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kříženy xxxxxxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx svými xxxxxx. X X2 xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Jestliže x xxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (nejsou xxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx chromozómem), xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxx testovány, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx se opakuje x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx údaje xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Uvádí xx xxxxx hodnocených X-xxxxxxxxxx, počet xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, pro xxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxx každého testovaného xxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx různých xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx potvrdit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx zhodnotí vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx letálních mutací xxxxxxxxx x jednom xxxxx xx xxx xxxxx v úvahu x zhodnoceno xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kmenech Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx ovlivněných xxxxx, počtu xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx X2 xxxxxx, xxxxx F2 kultur xxx potomků, počtu xxxxxxxxxx nesoucích xxxxxxx xxxxxx pro každé xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx ovlivněných xxxxxx,
- podmínkách xxxxx: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx odběru xxxxxx, výše xxxxx, xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- kritériích počítání xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx možné,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.21. XXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX - IN XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
Savčí xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx in xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx se používají xxxxx X3X10X1/2, 3X3, XXX, Xxxxxxxxxxxx potkanů x xxxx se xxxxx x změny xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx fyziologické xx morfologické xxxxx x xxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx testu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx promotorů. Cytotoxicita xxxx xxx zjištěna xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) nebo ovlivněním xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx byla xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, ale xxxxxx xx xxxxx xxxxxx k xxxxxx xxxxxxxxx transformace xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxx
Xxxxxxxx xxxx buněčných xxxxx x xxxxxxxxxxx použitelných x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx použité x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx fenotypické xxxxx xx expozici xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx test xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x že je xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x spolehlivost.
1.2.1.2 Médium
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx podmínky musí xxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxx transformace.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx ovlivněním buněk. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx životnost buněk, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx transformace.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Buňky xxxx xxxxxxxxxx testované látce x xxxxxxxxxxx a xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mohou být xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vlastnosti xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x použitím xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx. Xxxx být xxxxxxxx také xxxxxxxxx xxxxxxxx (x rozpouštědlem).
Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxx působící látky: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-propiolakton,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-dimetylaminoazobenzen, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xx možné zařadit xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nízkou xxxxxx přežívání buněk, x xxxxxxxx koncentraci xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Buňky xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx použitém xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), jestliže se xxxxx x prolongovanou xxxxxxxx. Buňky xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx x buněk propláchnutím xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kultivace xxxxxxx xxxx xx vhodných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx. Xxx je zaznamenáván xxxxxx transformace. Xxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x tabulkové formě. Xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx kontrolní xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx je xxxxx zpracovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx o:
- použitých xxxxxxx, xxxxxxxx použitých k xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,
- kultivačních xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx testované xxxxx, době inkubace, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx aktivačním xxxxxxx, pozitivních x xxxxxxxxxxx kontrolách, xxxxxxx xxxxx během expozice, xxxxxxxxxxx sledovaného xxxxxxxx, xxxxxxx selektivního xxxxxxx (xx-xx xx vhodné), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x transformovaných xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
X.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX XXXX X XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx fetální xxxx. Indukce xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx zvířecího xxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromozómů (xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxx embrya xxxxxxxxxx samice může xxx xxxx výsledkem xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx exponováni xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině xxx počet xxxxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx vyjadřuje xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx xxxx porovnáním xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxx v xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx dominantní letalita xx součet xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx celkové xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx srovnání xxxxxx xxxxxxxxxx na samici x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx skupině. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (x.x. spermatocytů x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxxx xxxxx rozpustit nebo xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxx xxxx suspendují xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podává xxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx nebo intraperitoneální xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxx i jiné xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xx doporučují xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx xx exponované x kontrolní xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxxxxx počet exponovaných xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxx variabilitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky. Xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx detekční xxxxxxxxxx x silou xxxxxxxxxxxxx testu. V xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx volí xxxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx dosáhlo 30 - 50 xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Pozitivní x xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx laboratoř x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivních xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx citlivost xxxxx (např. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Nejčastěji xx xxxxxxxxx tři dávkové xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx vyvolávat známky xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx dávka.
1.2.2.6 Xxxxxxx test
Xxxxxxxxx xxxxx xx podávají x xxxxx dávce 5 x.xx-1 xxxx x dávce 1 x.xx-1.xxx-1 xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Existuje xxxxxxx postupů. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xx opakovaně xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx neovlivněnými, intaktními xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx aplikaci xxxxx. Samičky musí xxx u xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vagině či xxxxxxxxx zátka.
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx schématem xxxxxxxx x musí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk sledovaných xx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx cervikální xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx je xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx vyšetřeny x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx x počtu xxxxx, xxxxx březích xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx identifikace xxxxxxx xxxxx x samice xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx x xxxxx páření, x xxxxx xxxxxx samci, x počtu xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx celkového xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx živých implantací xx xxxxxx x xxxxxxxxxx skupině x xxxxxx živých xxxxxxxxxx x kontrolní skupině. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxx implantacím x xxxxxxxxxx skupině ke xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx vypovídá x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxx xxx xxxxx odlišeny časná x xxxxxx letalita. Xxxx být xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx corpora xxxxx x počtem xxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxx průměrného xxxxx xxxxxxxxxx xx dělohu xx srovnání s xxxxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx možno, xxxxxxxxx x:
- xxxxx, xxxxx, xxxx x xxxx zvířat, počet xxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x exponovaných x kontrolních xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách, xxxxxxx x toxicitě,
- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx dávka/odpověď,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX ABERACÍ V XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací OECD XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Aberration Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxx xxxxx xx xx vivo xxxxxxxxxxxxx xxxxx způsobující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Tato xxxxxx xxxx určena x analýze xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx nepoužívá. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx u xxxxxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx chorob.
Xxxxx xxxxxx xx analyzují xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxxxxxxxxx, a xxxxx xx předpokládá, xx xxxxxx predikovat xxxxxxx xxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxxxx buňkách.
X xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx in xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxx jiné xxxxxx buňky.
Xxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx první xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, dříve xxx xx poškození ztratí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Další xxxxxxxxx x ovlivněných spermatogonií xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, kde xx xxxxxxxx aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, i xxxx xx ovlivněné buňky xxxx ve xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx test in xxxx je určen xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx mutageny xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx aktivní v xxxxxxx zárodečných. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxx pro hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx metabolismu xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX.
X xxxxxx xx xxxxxxxx řada xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Zjištěné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx ovlivněných xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx diferencované spermatogonie. Xxxxx jejich xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx generace xxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale nemusejí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x fyziologické xxxxxxx Xxxxxxxxx buněk x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx toho, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx pro xxxx vhodná.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx zlom x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx vyjádřená xxxx xxxx respektive jako xxxx x opětovné xxxxxxx obou xxxxxxxxx xx stejném xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx jedné xxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx, xxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx v případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx osu xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.
Gap: achromatická xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému pro xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx diploidní počet xxxx (3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx delece a xxxxxxxxx, x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Zvířata xx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x ve xxxxxxx xxxx xx působení xx usmrtí. Xxxx xxxxxxxxx xx na xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metafázi (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxx®). Xx xxxxxxxxxxx buněk xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x po xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 POPIS METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx
Běžně se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx a myší, xxx ovšem použít xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx druhu. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx rozdíly xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx a xx xxxx minimálně xxxx dní xx xxxxxxx aklimatizují v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Klece xx třeba xxxxxxxxx xxx, aby se xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx a xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx podávat xxxxx xxxx xx před xxxxxxxxx xxxx. xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Rozpouštědlo/vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x testovanou látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx nepříliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx to xxxxx, bylo xx xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo/vehikulum.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx stejně.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx.
Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx tak, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx než xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx intervalu. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Příklady xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu.
Xxxxx | XXX | EINECS |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 |
akrylamid xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx do všech xxxxxxxx intervalů xxxxxxxxxx, xxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi zvířaty. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx prokazující, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx mutagenní xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Počet x xxxxxxx zvířat
X xxxxx zkušební x xxxxxxxxx skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxx jednorázově xxxx xx xxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx x xxxxxxxx dávku, xxxx xx x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxx, xx. xx xxx xxxxx za den xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx hodin. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx být vědecky xxxxxxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx se vzorky xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dvakrát. Jelikož xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx dřívější x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 24 x 48 hodin xx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx (xx. mimo xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx vzorků provádí xx 24 hodinách xxxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx vhodnější xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx (6).
Xxxxx toho xxxxx xxx použity xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Např. jedná-li xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, nebo xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxxx xx S-fázi xxxxx, jsou vhodnější xxxxxxxx doba xxxxxx xxxxxx (1).
Xxx xx vhodné xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxx po 24 hodinách (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx to xx xxxxxx.
Před xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vhodná xxxxx Colcemidu® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x nich xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx je tento xxxxxxxx zhruba 3-5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx provádět v xxxx laboratoři za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx použijí x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxxx nízké xxxx xxxxxx. Pro pozdější xxx xxxxxx vzorků xx pak xxxxx xxxxxx jenom xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx takové xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx pro stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx xx případ od xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx k xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx (např. xxxxxx xxxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx meiotické xxxxxxxx( tento xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx při xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx v jedné xxxxx xxxx ve xxxx dávkách xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx žádné pozorovatelné xxxxxxx účinky x xxxxxxxx se xx xxxxxxx údajů x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx celá xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xx může použít x xxxxxxxx testu xxxxx dávky.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Testovaná látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx sondou, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx najednou vpravit, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx překročit 2 xx/100 g xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx zdůvodněné. S xxxxxxxx dráždivých xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx vykazují xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx objemová xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Okamžitě xx xxxxxxxx zvířete xx x xxxxxxx xxxx z xxxx xxxxxx připraví xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a fixuje xx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.
1.5.7 Analýza
U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx dá snížit, xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx chromozómů, musí xxx x všech xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x hodnocených xxxxxxx roven xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx se prezentují x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxxxx. X každého xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet a xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx, ale xxxxxxx xx do celkové xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.
Xx-xx analyzována mitóza x xxxxxx, stanoví xx x všech xxxxxxxxx zvířat x xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx, a xx xxx, xx se x xxxxxxx jedince xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x minimálně 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx jednorázovou xxxxxx x s xxxxxx časovým xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx statistické metody (8); xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, se v xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Ačkoliv xxxxxxx experimentů vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx případech získaná xxxx xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx nejisté, xxxx xxxxxxxxxxxx bez xxxxxx xx xxxxx opakovaných xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xxxxx ukazují, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zárodečných buňkách xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx širokého xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- rozpustnost x stabilita xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x xxx xxxxxx,
-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx počátku xxxxx, xxxxxx hmotnostního xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (mg/kg xxxxxxxxx / den),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx potravy x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx přípravy xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- poměr xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx a počet xxxxxxx xxx každého xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- údaje ze xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,
- případně pozorované xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.24. SPOT XXXX U MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Je xx xx xxxx xxxx xx xxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xx, které xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxx ovlivňujících xxxxx srsti. Mutace xxxx ztráty dominantních xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou vyjádřeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (spots) pozměněné xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxx skvrnami, xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx srovnávána s xxxxxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx vodě xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx rozpouštědla nesmí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx efekt. Používají xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx testované látky.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxxx xxxxx T (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, cch p/cch x; xxxxx, b/b; xxxxxx, short ear, x se/d se; xxxxxxx spotting, x/x) xxxx xxxxxxx xxx x kmenem HT (xxxxxx, xxxxxxxxx, brachypody, xx a xx/xx x bp; xxxxxx xxxxx, xx xx/ /xx xx; xxxxx xx/xx) nebo x xxxxxx X57 XX (xxxxxxxxx, x/x).
Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx. křížení xxxx xxxxxx XXXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxx, x/x) x DBA (xxxxxxxxx, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx d/d).
1.2.1.2 Počet x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx vzorku je xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxx x x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx pouze v xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx nejméně 300 xxxxxxx xxxxx ovlivněných xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx xxx použity xxxxxxxx xxxxxxxxx pouze xxxxxxxxxxxxx (negativní xxxxxxxx). Xx zvýšení citlivosti xxxxx mohou xxx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx získané v xxxx laboratoři xxx xxxxxxxx látce se xxxxxx mutagenním účinkem xxxxx být v xxxxx testu xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx. Xx-xx xx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiný xxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Používají xx xxxxxxx dvě xxxxx, z xxxxx xxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx vrhu.
1.2.2 Popis xxxxxxx
Zvířata xxxx xxxxxxxx ovlivněna testovanou xxxxxx pouze jednou 8., 9. xxxx 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx březosti xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zátky. Xxxx xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 x 9.25 xxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx ovlivnění látkou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx.
Xxxxxxx
X xxxxxx je xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx skvrn xxxx xxxxxx x čtvrtým xxxxxx xx porodu. Xxxxxxxxx se xxx xxxxx xxxxx:
(x) xxxx skvrny x xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx zánikem xxxxx (XXXX);
(x) xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx diferenciace (XXX);
(x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx výsledek xxxxxxxxxxx xxxxxx (RS).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxxx, RS, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx XXX a RS xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxxxx mikroskopu.
Zaznamenávají xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx potomků.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxx xxxx uváděna xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx více skvrn xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutacemi. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx x exponovaných xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Údaje xxxx xxxx uváděny xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx vrh.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu pokusu xxxxxxxx, je-li to xxxxx, xxxxxxxxx o:
- xxxxx použitém xxx křížení,
- xxxxx zabřezlých xxxxx x experimentální x x kontrolní xxxxxxx,
- xxxxxxxx velikosti xxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx xxx porodu x při xxxxxxxxx,
- dávkových xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx rozpouštědle,
- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx aplikována,
- x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx počtu sledovaných xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx x XXXX, XXX a XX x xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx morfologických xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x RS, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X XXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx přenosné translokace x xxxx detekuje xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Indukované xxxxx xxxx reciproké xxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Nositelé xxxxxxxxxxx a XX-xxxxxx xxxxxxxx sníženou fertilitu, xxxxx se využívá xxx xxxxx X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx translokací (X-xxxxxxx x x-x xxx). Xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v meiotických xxxxxxx samců ze xxxxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx I, xxxx X1 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx X1 xxxxx. Xxxxxx XO xxxx cytogeneticky xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pouze 39 xxxxxxxxxx v mitózách x kostní xxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx bylo xxxxxxx rozpouštědlo xxx xxxxxxxxx dávkování látky, xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx toxické účinky.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx obvykle xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou být xxxxxxx i jiné xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx verifikaci se xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx specifický xxxx. Xxxxxxxx velikost xxxx xx měla xxx xxxxx než xxx x xxxx xx xxx xxxxxxxxx konstantní. Xxxxxxxxx se xxxxxx, xxxxxxxx dospělá xxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx zvířat
Počet xxxxxx nutně xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxx xxxxx indukovaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Test xx obvykle provádí xxxxxxxx xxxxx F1 xxxxxxx. Nejméně 500 xxxxx x F1 xxxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže budou xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx X1 generace potomků, xxx xx vyžaduje 300 samců a 300 xxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx pokusu z xxxx laboratoře, mohou xxx xxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx dvou xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx látek se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxx a xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxx xx možná xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx sedm xxx x týdnu po 35 xxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx schématem xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx stadia xxxxxxxxxxx xxxxx budou xxxxxxxxxxx. Xx konci xxxxxx xxxxxxxxxxx jsou samice xxxxxxxxxx rozděleny do xxxxx. Xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx mláďat. Xx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx až xx doby zařazení xx xxxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů
Xxxxxxx xx xxxxx ze xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx F1 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx možných xxxxxxxx xxxxxxxxxxx cytogenetickou xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx samců X1 xxxxxxxx bez předchozího xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Test xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x X1 xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx stanovena xxx každý xxxx xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx: X1 xxxxx xxxxxx k testování xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. dnem xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx X2 xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxx porodu, xxxx xxxx xxxx odděleni. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxx, F2 xxxxxxx xxxxxx vrhů xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx verifikovány xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx x 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx vs. xxxxxx. X následném xxxxx xxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testování, xxxxxxxx xxxxx F2 xxx dosahuje nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx. X1 xxxxxxx, která xxxxxxx xxx klasifikována xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx tří F2 xxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx dělohy, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx u xxxxxx translokací xx xxxxxxxxx smrtí xxxxxx, xxxxx vysoký xxxxx xxxxxxx implantací xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxx X1 samci xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ke 2 - 3 xxxxxxx. Oplodnění xx xxxxxxxx denní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zátky. Xxxxxx jsou usmrceny 14. - 16. xxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx živé a xxxxx xxxxxxx.
(b) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Metodou xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx z testes. Xxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx figur xx xxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxx I x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx nejméně dvou xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx nositelem xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx výběr no xxxxxxxx, všichni F1 xxxxx jsou vyšetřeni xxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně 25 buněk x xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Analýza mitotických xxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxx xxxxx xx vyžaduje x samců s xxxxxx testes x xxxxxxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxxx xxxx x X1 xxxxx xxxxxxxxxxx XX. Xxxxxxxxxx neobvykle xxxxxxxx x/xxxx krátkého xxxxxxxxxx x každé x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx translokační xxxxxxxxx (x-x xxx). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx identifikovány xxxxx pruhováním xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx ve všech 10 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx XX xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx xxxx prezentovány xxxxxxxxxx formou.
Pro xxxxx xxxxxxxx připouštění xx xxxxxxxxxxx průměrná xxxxxxxx xxxx a xxxxx pohlaví (xxx xxxxx).
Xxx xxxxx xxxxxxxxx F1 zvířat xx uvádí xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x individuální velikosti xxxx X1 nosičů xxxxxxxxxxx. Xxx analýzu xxxxxx xxxxxx se xxxxx průměrný xxxxx xxxxxx a mrtvých xxxxxxx x xxxxxxxx x individuální xxxxx xxxxxx x mrtvých xxxxxxx pro každé xxxxxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Při cytogenetické xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X xx uvádí xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx počet xxxxx pro xxxxxxx xxxxxx translokací.
Xxx X1 xxxxxxxx jedince xx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx o cytogenetické xxxxxxx.
X XX xxxxx xx uvádí xxxxxxxx velikost xxxx, xxx ratio X2 xxxxxxx a výsledky xxxxxxxxxxxxx analýzy.
V xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx fertility byly xxxxxxxxx xxxxxxx možní xxxxxxxx X1 translokací, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxx xxxx, stáří x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx rodičovských xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x kontrolních skupinách,
- xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx popis ovlivňování xxxxxx, xxxxxxx hladiny, xxxxxxxxxxxx a schéma xxxxxxxxxxx,
- počtu x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- popis xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud možno x obrázky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, xxxxxx na xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná látka xx xxxxxx denně xxxxxx xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky toxicity. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx látku lze xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx v pitné xxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx látka xxxxxx po celou xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx o xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx dřívější xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Experimentální podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx. Xx třeba používat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx by xx xxxxxxx podávání xxxxx měli být xxxxxxx xxxxxx xxx 6 týdnů, v xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 týdnů. Xx začátku studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx předběžný xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx se má xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx hladinu xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx a 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 90 dnů xxxxxxxx xxxxx a během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx nejméně xxx úrovně dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x pokusnými. Používá-li xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, a xx ve stejném xxxxxxxx, xxxxx obdrží xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň dávky xx vyvolat toxické xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx vyvolat xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Ve xxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx dávky x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx xxxxxxxxxx koncentrace (x xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxx sondou, mělo xx xx xxx xxx xxxxx den xx xxxxxxx xxxx, x dávkování x xxxxxxxxxxxx intervalech (xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních) přizpůsobovat xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxx-xx xx 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) žádné xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx množství xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxxx dobu xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, xx kterém xx objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
X ideálním případě xx xxxxxxxx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx určena k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx bez aplikace, x posouzení zotavení x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x kleci xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (a xxxxxx vody xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pitné xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Po xxxxxxxx studie xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx studie xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx alespoň x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, které xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (trvání xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx živočišného xxxxx x kmene), alaninaminotransferáza (xxxxx pyruvát-transamináza) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, methemoglobinu, xxxxxxxx cholinesterázy. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku xxxxxxx xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x břišní xxxxxx xxxxxx xxxxxx obsahu. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx a tkáně xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a mozečku, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, tkáň xx místě xxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, nadledviny, slinivka xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (xxxx), xxxxx, žaludek, dvanácterník, xxxxx, tlusté a xxxxx střevo, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx xxxx, (oči), xxxxxx kost x xxxxxx dření, (kost xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), páteřní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, x (xxxxx žlázy). Xxxxx v závorkách xx xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx orgánů x xxxxx xx třeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x u xxxxxx kontrolní skupiny.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx všechna xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(d) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx infekce, xxxxxxx xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx stavu xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxx x xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx provést xxxx xx orgánech, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx postižení xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx satelitní xxxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do tabulky. X ní xxxx xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx a procentuálně xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx typy xxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je k xxxx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle xxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, pokud ji xxx xxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx,
- doba, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky a xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- hematologická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx (včetně výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.27. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx podávání per xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx), x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx použity xxxx xxxx způsoby xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx zvířatům xx testovaná látka xxxxxx xx celou xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, je možno xx využít.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná zvířata
Xxxxxxx xx jako xxxxxxxxx druh - xxxxxxxxxx používá pes: xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx druhů xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxx xx xx x xxxxxxxxx začít xx xxxx od 3 xx 6 xxxxxx x xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický orální xxxx jako předběžný xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 8 xxxxxx (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxx takový, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
1.2.2.3 Dávkování
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx úrovně x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxx dávky má xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx úroveň xx neměla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx existují odhady xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx by střední xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Ve xxxxxxx x xxxxxx x střední úrovní xxxxx x x xxxxxxxxx skupině by x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx málo toxická xxxxx v xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, xxx ani xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx normální výživě xxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (v ppm xxxx mg.kg-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx dávkování xx vztahu k xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx; xxxxxxxx alternativu xx xxxxx xxxxx. Podává-li xx xxxxx přímo, xxxxxxxxx x kapslích, xxxx xx xx xxx xxx xxxxx xxx ve xxxxxxx xxxx, x dávkování x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Provádí-li se xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx test xxxx dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx 90denní xxxx níže popsanou xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (nebo xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx tato xxxxx) žádné xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xx dalšího testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx toxická xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebránily xxxxxxxx xxxxxx zvířat.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
X ideálním xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx se xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 xxx v xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx není na xx xxxxxxx) změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx xxxx xxx podávání xxxxxxxxx xxxxx x pitné xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Nejméně jednou xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k minimalizaci xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Po skončení xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx se obvykle xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Oftalmologické vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xx xxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx změny, vyšetří xx xxxxxxx zvířata.
(x) Na xxxxxxx xxxxx, a potom xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx na xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx má xxxxxxxxx stanovení hematokritu, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx srážlivosti xxxx jako xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Na xxxxxxx testu, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxx xx konci xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx analýza krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (xxxxxxx trvání xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxx transferáza (xxxxx xxxxxxx transamináza xxxx) x aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx glutamát-oxalacetát xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx v xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx studium xxxxxxx xxxxxxx účinků. Před xxxxxxx xxxxxx xxxx xx nehlodavci xxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxx 24 xxxxx).
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X všech xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx dutiny xxxxxx xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx sekci zváží xx xxxxxx xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx orgány x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx místě xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx kost x xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) x (páteřní xxxxx ve třech xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxx poškození x xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx, nebo xxxx xx to xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx tabulky. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx zvířat na xxxxxxx pokusu x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Výsledky xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxx účinku, pokud xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx nebo jiných xxxxxx (xxxxxxx klinické xxxxxx),
- xxxx, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx xx xxxxx,
- diskuse výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX DERMÁLNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx aplikace, studie xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 90 dní x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx skupinám pokusných xxxxxx, a to xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Krátce xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx xxxxx, mělo xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx experimentem. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx opakovat xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je třeba xxxx xx xx, xxx xx nepoškodila xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % povrchu xxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx rozhodování x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x x velikosti krycího xxxxxx.
Při xxxxxxxx x xxxxxx látkami, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx kontakt x xxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx xxxxx použít xxxxxxx potkany, xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, jejich xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se má xxxxxx stejný živočišný xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx úroveň xxxxx použít nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 dnů xxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx nebo - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - kontrolní xxxxxxx x aplikací xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx nejméně 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx mělo xxxxxxxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx.
Nejvyšší xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx toxicity. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx vyvolat xxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, mají být xxxxxxxxx dávky xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx nízký, xxxxx xx vyhodnocení xxxxxxxx obtížné.
Vede-li xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx vést x omezení xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ukončit x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Nevyvolá-li xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx odpovídá xxxxx xxxxxxxx člověka, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx další xxxxxxx nutná.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba denně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx se xxxxxx a opět xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, aby se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx činí xxxxxxx 6 xxxxx denně.
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx nanášet rovnoměrně xx celou xxxxxx, xxxxx představuje xxx 10 % xxxxxxx xxxx, x vysoce xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx co xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xx nejtenčí vrstvě.
Xxxxxxxxx xxxxx je xx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx plochu xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxxx x testovaná látka xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx xxx omezení xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx příznaky otravy xxxxxx xxxxxx počátku, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx zaznamenávat xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Umírající zvířata x zvířata v xxxxxx stresu či xxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
X všech xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx xxxxxxxxxxx přístrojem xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x na xxxxx studie nejlépe x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx konci xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx jater x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (přičemž trvání xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), alaninamino transferáza (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) a aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Mezi xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx spektra účinků.
(x) Analýza moči xx nevyžaduje xxxx xxxxx postup, ale xxx na podkladě xxxxxxxxx nebo pozorované xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má se xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, lební, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, příštítná xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), plíce, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, děloha, přídatné xxxxxxxx xxxxxx, žlučník (xx-xx přítomen), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (xxxxxxx mícha xx xxxxx úrovních - xxxxx, střed xxxxxx x xxxxxxx) a (xxxxx žlázy). Tkáně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx je xx indikováno xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(a) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx a xxxxx xx třeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.
(b) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx cílové xxxxxx x xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx skupinách x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx to xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx provádět xxxxxxx, xxxx se xxxx provést xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx zjištěno xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Používá-li xx xxxxxxxxx skupiny, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x lézemi x procentuálně xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx má pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx,
- xxxxxxxx pokusu,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx lze xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, kdy byly xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické nálezy,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich výsledky (xxxxxx xxxxxxxx případných xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.29. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX - XXXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx - studie xx hlodavcích)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx jedné xxxxxxxxxxx, x xx xx 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx dosažení xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx pokusu se xxxxxxx xxxxx pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pokusu, xx pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx v podmínkách xxxxx a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxx příslušná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí být x nich xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává se xxxxxxxx potkanům, pokud xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx užívaných pokusných xxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx studiích xx xx použít xxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx úroveň xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 samců). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx nutno xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x počet xxxxxx, která xxxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupinu) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx expozic xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s vehikulem - pokud xx xxxxxxx - v xxxxxxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx). X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxxxxx x kontrolní skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vyvolat xxxxxxx účinky, ale xxxxxxxxxx žádné uhynutí xxxx jen x xxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, má xxxxxxxx koncentrace tuto xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxx x xxxxxx x střední koncentrací x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx být xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx výsledků obtížné.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx exponují po xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx studované xxxxx. X xxxxxxx specifických xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxx se používá xxxxxxxxx inhalační zařízení, xxxxx zaručuje proudění xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, aby xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba ho xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx inhalační xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx nejvyšší. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx boxu xxxxx xx v xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Je možné xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, samotné xxxxx xxxx individuální xxxxxxxxxx xxxxxxxx; první xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x zotavení x zaznamenávat toxické xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx se xxxxxx x opět xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3. Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně, 5 - 7 xxx x týdnu, xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx určena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx aplikace, x xxxxxxxxx zotavení x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % x 70 %, s xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx není xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Během expozice xx xxxxxxxx potrava xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx x celém expozičním xxxx byly xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx nejrychleji.
Xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx xxxxxxxx:
a) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
x) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx. Během jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty x xxxx xxx ±15 %. X některých xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx možné. Xxx vývoji generátoru xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Během expozic xx měří xxx xxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx stálosti distribuce xxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
x) Xxxxx xxxxxxxx a xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx má xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx příznaky toxických xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx výskyt, stupeň x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x kleci xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Hmotnosti xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx zvířata, xxxxx přežila, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx včetně kontrolních xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx studie xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.
(b) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx a testy xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx konci xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného druhu x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (dříve glutamát-pyruvát xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x celkové xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx podkladě xxxxxxxxx xxxx pozorované xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx zvířat použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x břišní xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx tělísky) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx vysychání.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: všechny tkáně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx (mají se xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, tak aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx xx považuje xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku a xxxxxxx, hypofýza, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx střevo, konečník, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), periferní xxxx, (xxx), xxxxxx kost x kostní xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Tkáně v xxxxxxxxx xx posuzují, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx příznaků xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx s cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx systému x ostatních xxxxxx x tkání xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci, a x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx však provést xxxx na orgánech, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx satelitní skupiny, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x orgánech, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx typy xxxx. Výsledky je xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx metodou. Je x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu pokusu xx pokud možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení,
- xxxxxxxx xxxxxx: Popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx stability xxxxxxxxxxx x distribuce velikosti xxxxxx aerosolu,
- xxxxx o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxxxx xxxx údaje:
a) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx zařízením,
x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx vzduchu),
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx,
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxxx),
- údaje o xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx a podle xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx účinku, pokud xx možné xx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX TOXICITY
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx podávána xxxxxxxx sedm xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxx, několika skupinám xxxxxxxxx zvířat, jedna xxxxx na xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Během x po expozici xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx denně xxxxxxxxxx xx účelem sledování xxxxxxx toxicity.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx xxxx chována xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 dní xxxx započetím xxxxx. Xxxx testem xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena do xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx potkan. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx x xxxxx xxxxx (hlodavce nebo xxxx). Xx xxxxx xxxxxx zdravé x xxxxx jedince xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Expozice xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx rozdíl xx xxxx xxxxxx činit xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx x kmen x obou studiích.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 samců), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx být březí. Xxxxx je xxxxxxx xxxxxxx některá xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
X případě xxxxxx xxxxx zvířat (xxxxxxxxxx) xx možné xxxxxx menší xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxx xxx 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Dávky x frekvence xxxxxxx
Xx třeba použít xxxxx xxx xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx měla xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx vyvolat prokazatelné xxxxxxx toxicity. Xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxx ve xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxxx x nízkými xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx měl vzít x xxxxx výsledky xxxxxxxxxxx studií.
Obvykle xxxx xxxxxxx exponována xxxxx. V případě, xx xxxxxxxxx xxxxx xx podávána v xxxxx xxxx nebo x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, aby x xx měla xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx identická x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx skupině, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx studie s xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani vehikulu.
1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx způsoby aplikace xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Použití xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx technické xxxxxxxx. Xxxxxxxxx systémová xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx orálního xxxxx x xxxxxxxx rozsahu xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx testů xxxxx toxicity.
Orální xxxxxx
Tam, kde xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xx-xx xxxxxx jedna z xxxx, jimiž xxxx xxx xxxxxxxxx člověk, xxxx se xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, xxxxx xxxxxx proti xxxx xxxxxx důvody. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné xxxx nebo podanou x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx se xxxx xxxxx xxxxxxx sedm xxx v týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx pět xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx toxicity nebo xxxxxx vyvolat "abstinenční" xxxxxxxx v období xxx aplikace, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx považováno xx xxxxxxxxxx.
Inhalační xxxxxx
Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x této cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x specifických situacích.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx lidské xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx koncentrace xxxx hodin denně xx xxx dnů x týdnu (přerušovaná expozice), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin xxxxx xx sedm xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx denně xx stejnou dobu xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. V xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx exponována fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx v xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx denní xxxxxxxx x ještě delším xxxxxxx během xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx cílech xxxxxx x na xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx simulována. Xxxxxxx, xx xxxxx vzít x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx kontinuální xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx narušeny xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx expozice a xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx xxxxxx koncentrace xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx za xxxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxxxxx x expoziční xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované látce. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx udržuje xxxxx xxxxxxx a xxx xx brání úniku xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx udržení xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: rychlost xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx neměla xxxxxxx více xxx 15 % xxxxxxx xxxxxxx;
(x) xxxxxxx a xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 xX x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx by měly xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x respirabilní xxxxxxxxx xxx xxxxxxx testovací xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x dýchací xxxx xxxxxx. Xxxxxx vzduchu xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro distribuci xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, a xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému suspendovanému xxxxxxxx, x když xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx respirabilní. Analýza xxxxxxxxx částic xx xxxx xxx prováděna xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, aby xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx často, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.6 Trvání xxxxxx
Xxxxxxxx látky xx měla trvat xxxxxxx 12 xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Pozorování
Xxxxxxx klinické xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Dodatečná xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx denně s xxxxxxxxxxxxxx zákroky x xxxxxxxxxxxx xxxxxx zvířat xx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx uložení xx lednice u xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx zachytil xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x také xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx nebo kanibalismu.
Xxxxxxxxxx se klinické xxxxxxxx xxxxxx neurologických x xxxxxx xxxx x xxxxx zvířat, x xxxx případy xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx příznaků xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx období xxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x pitné vodě) xxxxx během xxxxxxx 13 týdnů a xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx tělesné xxxx xxxxxxx nutnost xxxx frekvence xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxx ukazatele xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx měsíce, xxxx xxxxxx x poté x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x na xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx od xxxxx nehlodavců xxxx. xx 10 potkanů xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx to xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx od xxxxxxxx potkanů. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx krvinek se xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx ve xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud tato xxxx nebo xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxx se x x xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx od xxxxxxxx zvířat x xx xxxxxxxx intervalech xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx dávek a xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- proteiny, xxxxxxx, ketolátky, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech a xx závěr xxxx xxxxxxxx krevní xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx všech xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx pro tytéž xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Od xxxxxxxxxx xx vedle xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:
- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx funkci xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy1), xxxxxxxx xxxxxx transaminázy2), gamma xxxxxxxx transpeptidázy, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxxx xxxxxxx na lačno,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) nyní xxxxx xxxx sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx
1.2.3.5 Pitva
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx byla utracena x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx utracením xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Všechny viditelné xxxxxx nebo léze, xxxx xxxx, které xx xxxxx xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx měly xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx následujících xxxxxx x xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, štítné xxxxx x příštítných xxxxxxx, thymu, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, slinných žláz, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, žaludku, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, ilea, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx měchýře, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, svaloviny, xxxxxxxxxxx xxxxx, míchy (xxxxx, hrudní a xxxxxxx), sterna x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx kosti xxxxxx xxxxxx, x očí. Xxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx fixativem xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx jsou inhalační xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx jiná xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou dát xxxxxxxxxx významné xxxxxxx.
3) tyto xxxxxx x 10 zvířat xx xxxxxxx x xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxx x dále xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx tělísky) xx xxxxx xxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxx
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx změny, xxxxxxx tumory x xxxx xxxx vyskytující xx v xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxxxxx následující xxxxxxx:
(a) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx popisem xxxxx lézí nalezených:
1. u xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx studie,
2. x xxxxx zvířat xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx způsobené xxxx xxxxxxxxxxxxx způsobené xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx s nižšími xxxxxxx,
(x) xxx, xxx výsledky xxxxxx xxx významné zkrácení xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx vyvolání xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx toxickou xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx nižší xxxxxx xx vyšetří xxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx lézí, xxxxx xx normálně xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx zvířat, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx kontrolní xxxxx, jsou nezbytné xxx správné posouzení xxxxxxxxxxx xxxx pozorovaných x xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx počet zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx a procento xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx lézí. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o testu
Xxxxxx o testu xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx pro měření xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx zařízením
(b) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vstupující xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx)
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx použito
(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx
(f) xxxxxxx xxxxxxxxx částic (xx-xx to xxxxxxxxxx)
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) a koncentrace
- xxxxx x xxxxxxx odpovědi podle xxxxxxx x xxxxx
- xxxxxxxx (dávková) xxxxxx
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxx
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx
- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx abnormální příznak x jeho xxxxx xxxxx
- xxxx x spotřebě potravy x xxxxxxx xxxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x výsledky
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a všechny xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx moči)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
- diskuse xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X XXXXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx se podává x odstupňovaných xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x tom xxxxxx březosti, ve xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx před xxxxxxxxxx datem porodu xxxx březí xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx xx použita x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx studium embryo- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, xxxxxxx samice, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx při laboratorních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Potom xxxx xxxxxxxxxx samci x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Oplodnění může xxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx samicím xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx po xxxxxxxxxx x pokračuje během xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx hysterektomií x podrobeny sledování xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx orgánů xxxxxx xxxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxxx xxxxx, opožděné xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Běžně xxxxxxxxxxx druhy xxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx jsou potkan x králík. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx by xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xxx x xxx xxxxx reakce na xxxxxxxxxx. Zvířat xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Pro xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx aspoň 20 xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxx x mláďat.
1.2.2.3 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx aspoň xxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx skupinu. X xxxxxxx, že xx xxxxxxxxx látka podána xx vehikulu, je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx i xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Je xxxxx také xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx být xxxxxxxxxxx xxx xxx vliv xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) se xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xx zvířaty x testovací xxxxxxx x xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx, pak nejvyšší xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxx xx mírné xxxxxxx xxxx, xxx xx xx xxxx xxx 10 % úmrtí. Xxxxx úroveň dávek xx xxxxxx vyvolat xxxxxxxxx xxxxxx. Střední xxxxx xx měly xxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx, že látka x xxxxxx xxxxxxxxx xxx dávce nejméně 1000 mg.kg-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx testovat xx xxxxxx úrovních xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxx xx xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x/xxxx spermie (xxxxx xxxxx). Doba xxxxxxxx xx xxxx zahrnovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 6. až 15. xxx x potkana x myši, 6. xx 14. xxx x xxxxxx x 6. xx 18. xxx x xxxxxxx. X případě, xx xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx den, xxx bylo pozorováno xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x předchozím údajům xxxxx xxx. Xxxxx xxxx alternativy xxxxx xxxxxxxx xxxxx den xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx pozorování
Xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx pečlivé klinické xxxxxxxxx. Další sledování x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx ztrát xxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx sondou, xxxxx xx stejnou xxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx na xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx látky nebo, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx periodicky vážena x xxxxx upravována xxxxx posledního xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Samice vykazující xxxxxx potratu xxxx xxxxxxxxxxx porodu xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx makroskopicky vyšetřit. X xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx i xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx do xxxx přibližně xxxxx xxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx většinu xxxxxx xxxxxxxx, xxx vyhnout xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxx porodu. Xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx změny xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxxx makroskopicky xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxx na xxxxxx březosti. Xxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx obsah xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx. Obvykle xx xxxxx xxxxx dobu xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. X potkanů x králíků xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx tělísek. Je xxxxx určit pohlaví xxxxxxx a zaznamenat xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xx xxxxx jednotlivě zevně xxxxxxxx každý xxxxxxx. X xxxxxxx, myší x xxxxxx xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx vrhu x x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx je xxxxx xxxxx zárodek xxxxxxxx xxxxxxxx pitvou x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx třeba xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, udávající pro xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx na xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx zárodků x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo měkkých xxxxx x vztah xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx k určitým xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZPRÁVA
3.1. Xxxxxx x testu
Xxxxxx x testu xx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- projevy xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx účinku (xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx),
- dobu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxx,
- xxxxx x tělesné xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x údaje o xxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx skeletu x xxxxxxx tkání),
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, defekty xxxxxxx a měkkých xxxxx),
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.32. TEST XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx v týdnu, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných zvířat, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, po větší xxxx života xxxxxx. Xxxxx a xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx vývinu xxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
Xxxxxxx xx chovají x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx testu. Před xxxxxx xx xxxxx xxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i další xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx odstavení xxxxxx. Na začátku xxxxxx xx xxxxx xxx rozdíl xx xxxx zvířat xxxxx xxxx než ± 20 % od xxxxxxx. X případě, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx test subchronické xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx stejný xxxx x xxxx x obou studiích.
1.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxxxx xx xxxxx nejméně 100 xxxxxx (50 samic x 50 xxxxx) xxx xxxxxx úroveň xxxxx x souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx budou xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x frekvence xxxxxxx
Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx tři dávkové xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx xxxxxx účinky xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx růstem, xxxxxxx x délkou xxxxxx xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx by neměla xxx xxxxx než 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx třeba stanovit xx xxxxxxxx pásmu xxxx vysokou a xxxxxx xxxxxx.
Volba xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx toxicity.
Xxxxxxxx se provádí xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x exponovanou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx xxxxx negativní kontrolní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx aplikace
Tři xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx podání xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx a pravděpodobném xxxxxxx expozice x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx studie
Xxx, kde se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx, dává xx přednost orální xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx tomu nějaké xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxx.
Ideálně by xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx dní x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx naopak xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx studie
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx cesty xxxxxx x xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx kožního xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx než xxxx způsoby xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx informace x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx xx specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin denně xx xxx dnů x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx po xxxx xxx x xxxxx (kontinuální expozice), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx krmení xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx expozičního xxxx. X obou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx koncentracím xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx expozicí xx x xxx, xx v xxxxx xx xxxxx 17 - 18 hodin xx xxxxx účinků xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx studia a xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx být xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx technické xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx zevního xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx zajištěn dostatečný xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx distribuce expoziční xxxxxxxxx. Kontrolní a xxxxxxxxx komory xx xxxx xxx identickou xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Uvnitř xxxxxx se obvykle xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx xx v zájmu xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) Xxxxxx vzduchu: xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Koncentrace: xxxxx xxxxx xxxxxxxx by xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxx xxxxxxx více xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X a xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx k rozptýlení xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
(x) Xxxxxx velikosti xxxxxx: měla by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx xx odebírají x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx vzduchu xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by gravimetricky xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx xxxx aerosolu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx prováděna xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, aby xxxxxxxxx xxxxxxxxx aerosolu, x poté xxxxx xxxxxxx xxx často, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stabilitu distribuce xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx větší xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxxx použitého xxx test. Xxxx xx měl xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x 24 měsících x xxxxxxx. Nicméně, pro xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx výskytem xxxxxx xxxx ukončení xx xxxx xxx 24 xxxxxx xxx xxxx x křečky x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx takové xxxxxxxxxxx xxxxxx xx přijatelné, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx xxxx x kontrolní xxxxxxx klesne xx 25 %. Xxx xxxxxxxx testu, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx odpovědi, xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx zvlášť. Xxx, xxx uhyne předčasně xxx skupina s xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxx příčin, xxxxxx to xxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx projevy, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx chyb xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx než 10 % a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx x křečků a x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
Pravidelná kontrola xxxxxx xx nutná, xxx xx zabránilo xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx utracena x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx objevení, xxxxxxxxxx, rozměry, vzhled x progrese xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x vody xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx podávána v xxxxx xxxx) týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx a xxx xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, ledaže by xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Tělesné xxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx jednou xx xxxxx xxxxx xx tomto xxxxxx.
1.3.2 Klinická xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxx pozorování xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx x zhoršeném xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx vyšetřit diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xx 12 xxxxxx, xx 18 xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx se provede xxxxxx xxxxx ze xxxxx zvířat. Diferenciál xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx vzorcích xx xxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx a x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx před xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx vyšetří x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Pitva
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx, nebo léze, xxxxx by xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx uchovat.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx možné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx (xxxxxx řezů xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, mozečkové xxxx, xxxx mozkové), xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxxxx x plíce, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, pankreas, xxxxxx, děloha, xxxxxxxxx xxxxxxxx orgány, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzlina, samičí xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, periferní xxxx, xxxxxxx x kostní xxxxx, xxxxxxxx kost xxxxxx kloubu, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxxxx, střední xxxxxx x xxxxxxx) a xxx.
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx uchování xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx plic x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx měl xxx xxxxxxx xxxx respirační xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, hltanu x xxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Xxxxx histopatologie xx provede v xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx testu, x u xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx.
(b) Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx okem x léze, které xxxx podezřelé xxxx xxxxxx, se vyšetří xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x daném orgánu xx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx podstatně xxxxx než x xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
(x) Je-li xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad x xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nižší xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, ukazujících xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxx x tumory xxx utracení. Xxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx statistické xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,
- xxxxxxxx xxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx a způsobu xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx aerosolu. Údaje x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x měly xx zahrnovat:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x inhalačním xxxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx děleno objemem xxxxxxx),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx,
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (včetně xxxxxxxx, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx tumorů xxxxx xxxxxxx, dávky x xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx konce,
- xxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx abnormální příznak x xxxx další xxxxx,
- xxxx x spotřebě potravy x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxx hematologické xxxxx x xxxxxxxx,
- nálezy xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- statistické zpracování xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx metod,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.33. XXXXXXXXXXX XXXX CHRONICKÉ TOXICITY/KARCINOGENITY
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Cílem xxxxxxxxxxxxx testu chronické xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx určit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxx xx xxxx karcinogenity xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxx satelitní xxxxxxx může xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Zvířata x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupině xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx toxicitu.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na xxxxxxx, xx větší část xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x po expozici xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx pozorována xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx mladá xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx skupin.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx xx potkan. Na xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx více xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx předchází xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx druh a xxxx x obou xxxxxxxx.
1.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx použije nejnémě 100 xxxxxx (50 xxxxx a 50 xxxxx) xx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxx nullipary x xxxxxxxxxx. Je-li plánováno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se zvýší x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx (skupiny) xxx xxxxxxxxx patologie jiné, xxx xxxx tumory, xx každá měla xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx každé pohlaví, xxxxxxx satelitní xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx 10 zvířat xxxxxxx pohlaví.
1.2.3 Dávkové xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx test xxxxxxxxxxxxx xx zvolí xxxxxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx mírný xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (méně xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx jinými xxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxxxx interferovat s xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx života xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx dávkou.
Xxx xxxxx dávkových xxxxxx xx xx xxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx xxxxxxxx.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx dávka xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx přimíšena xx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.4 Kontroly
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx charakterizována, xxxxxx xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx hlavní xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x inhalační. Xxxxx xxxxxxx podání xxxxxx na fyzikálních x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx z xxxx, jimiž xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx důvody. Xxxxxxx xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx v potravě, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx podanou x tobolce.
Xxxxxxx xx se xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx dávkování pět xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx xx považováno xx přijatelné.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx kůži xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx hlavní xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx kožního xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx inhalační xxxxxx xxxx xxxxxxxxx komplikovanější xxx jiné způsoby xxxxxxxx, xxxx zde xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x této xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Dlouhodobé xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, takže xxxxx je obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx po xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x návaznosti xx xxxxxx expozici x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x týdnu (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx hodinou pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu xxx, použitou x xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xx v xxx, že x xxxxx má xxxxx 17 - 18 xxxxx xx ústup xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx studie x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Nicméně xx třeba xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx kontinuální xxxxxxxx xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx prostředí xxxxx xxx narušeny nutností xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x technik xxxxxxxxxxxx.
Expoziční xxxxxx
Xxxxxxx se exponují x inhalačních komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx za xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x rovnoměrná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx měly mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaných zvířat. Xxxxxx by v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:
(x) průtok vzduchu: xxxxxxxx průtoku vzduchu xxxxxxx xx xxxx xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(x) koncentrace: xxxxx denní expozice xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(c) xxxxxxx x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx je xxxx používána k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány xxxxxxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x atmosféře xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měly xxx v respirabilní xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxx xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx částic, kterým xx zvíře xxxxxxxxxx, x měl xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx značná xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx velikosti xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx často během xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx zajistila xxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxx xxxxx expozic xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx posoudit xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx studie
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx normální xxxx xxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxx test. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx v 18 měsících x xxxx a křečků x 24 xxxxxxxx x potkanů. Xxxxxxx xxx xxxxxxx kmeny xxxxxx s delší xxxxx xxxxxx xxxx. x nízkým spontánním xxxxxxxx tumorů, xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxxx xxx xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx je xxxxxxxx sexuální xxxxxx xxxxxxxx, každé xxxxxxx xx posuzuje xxxxxx. Xxx, xxx uhyne xxxxxxxxx jen xxxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, nemusí to xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx testu, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Aby bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx použitelných xxxxx (autolýzou, xxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx skupině větší xxx 10 % x xxxxxxx ve xxxxx skupinách nesmí xxx nižší xxx 50 % x 18 xxxxxxxx u xxxx a křečků x x 24 xxxxxxxx u xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx zvířat xxx xxxxx pohlaví x 10 xxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx plánováno xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx látce, od xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stárnutí.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx klinické xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx studie xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xx xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx a mortalita xx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx zvířat. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx vývoji tumorů: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, vzhled a xxxxxxxx xxxxxxx viditelného xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx tam, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v pitné xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx nebo změny xxxxxxx xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Tělesné hmotnosti xx zaznamenávají individuálně x všech xxxxxx xxxxxx týdně během xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx za xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx destiček nebo xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) xx měla xxx xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, xxxx měsíců x xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech, x na konci xx xxxxxxxx krve xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx skupiny. Xxx xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx intervalech xx xxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx svědčí o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat xx skupině s xxxxxxxx xxxxxx x x kontrol. Pokud xxxx xxxx nebo xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x x xxxxxxx x dávkou xxxxxxxx nižší, xxx xx xxxxxx dávka.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx od 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx stejných zvířat x xx stejných xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx provedena xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx dávek x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx u xxxxxxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, ketolátky, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- mikroskopické xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech x xx závěr xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx vzorky před xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx následující zkoušky:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- testy xx xxxxxx xxxxx (xxxx. aktivita bázické xxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamát xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), glutamát xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx na lačno,
- xxxxx xx xxxxxx ledvin, např. xxxxx xxxxxxxx v xxxx.
1) nyní xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxxxx aminotransferáza
1.3.2.4 Makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx zemřela xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx krve xxxxx xxxxxx xxx diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx viditelné xxxx, xxxxxx nebo léze, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx by xxx xxxxxxxxx porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.
Všechny xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x tkání: xxxxx3) (prodloužené xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), podvěsku xxxxxxxxx, xxxxxx žlázy x xxxxxxxxxxx tělísek, thymu, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, aorty, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), sleziny, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, lymfatických xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), akcesorních xxxxxxxxxx orgánů, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx kosti xxxxxx xxxxxx, a xxx. Xxxxxxxx plic x močového xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; naplnění xxxx v inhalačních xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx odpovídající xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx studován xxxx xxxxxxxxxx trakt xxxxxx xxxx, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx klinická vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx procedur xx xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože mohou xxx patologovi xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx.
1.3.2.5 Histopatologie
Xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx satelitní xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud se x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx dávce xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, vyšetří xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx ostatních xxxxxx z ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x ze xxxxx xxxxxxxxxxxx skupin části xxxxxx věnované xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
(x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x u všech xxxxxx skupiny kontrolní x x nevyšší xxxxxx;
(b) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, se vyšetří xxxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx;
(x) xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx skupinou, histopatologické xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxx orgánu xx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxxx;
(x) je-li přežití xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, měla by xxx kompletně xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší xxxxxx;
(x) je-li ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nižší xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx utracení. Výsledky xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, zdroj, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx zvířat v xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, xxx xx xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) xx měly xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx zařízení,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx objemem xxxxxxx),
(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx použito,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxx velikosti částic (xxx xxx relevantní),
- dávkové úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x typu xxxxxx,
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx až do xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- výskyt xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávky ,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x jeho další xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- použité hematologické xxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxx klinické xxxxxxxxx a všechny xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx moči),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.34. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx několika xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Samci xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxxxx x průběhu xxxxxxx úplného spermatogenního xxxxx (přibližně 56 xxx x xxxx x 70 dnů x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx estrálních xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx. Zvířata xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx připouštění xx xxxxxxxxx xxxxx podává xxxxxxxx xxxx pohlaví, x době xxxxxxxxx x kojení xxxxx xxxxxxx.
Pro inhalační xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - kontrolní x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 dnů xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x těch xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Xxxx způsoby xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Všechna zvířata xxxxx xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx v průběhu xxxxxx testu. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx aplikace vehikulum xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx aplikuje 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx zvířata
1.2.2.1 Xxxxx druhu
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Používají xx zdravá xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Nepoužívá se xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx být xxxx charakterizována xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxx x/xxxx věku. Plodnost xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx u xxxx xxxxxxx. Zvířat x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a kontrolní, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx zahájením aplikace.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupina xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx samic s xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, x xxx zajistit xxxxxxxxxx hodnocení xxxxx xxxxx na plodnost, xxxxxx gravidity a xxxxxxxx xxxxxxx x X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx početí xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxx. Xxxx porodem xx těhotné xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx mateřských xxxxx x xx xxx poskytnut xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Použijí xx xxxxxxx tři xxxxxxxxxx xxxxxxx x jedna xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vehikulum, xxx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx vehikulum x nejvyšším xxxxxxxx xxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxx snižuje xxxxxx x využití xxxxxxx, xx třeba uvážit xxxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx výživy.
Xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má x xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx povahou xxxxxxxxxxxx účinku - xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Střední xxxxx(x) xx měla(y) xxxxxxx minimální toxické xxxxxx, xxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxx x rodičů xxx u xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx x tobolkách xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx se každý xxxxx podle xxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx dávky xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx na základě xxxxxxx xxxxxxxxx v 0. xxxx 6. xxx od začátku xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Limitní xxxx
X xxxxxxx xxxxx x xxxxxx toxicitou, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx toxickým xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx pokusu
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (P) začne xx xxxx xxxx xx devíti xxxxx, xx xxxxxxx pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx obdobím xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Samci xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx po xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx aspoň xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak po xxxx xxx xxxxx xxxxxx připouštění, x xxxx xxxxxxxxx až xx xxxxxxxxx X1 xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx dávkovacího xxxxx xxxxx znalostí o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. o xxxxxxx xxxxxxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Xx možno xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx samice x jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx samec xx xxxxx xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx ponechá x xxxx samcem xx společné kleci xx xxxxxxxxxx xxxxx xx dobu 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx samice vyšetřeny xx xxxxxxxxxx spermatu xxxx vaginální xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx nálezu xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx neplodnosti páru. Xx je xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx k oplodnění x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx pohlaví xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cyklu a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx plodnosti xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxx potomstvo xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Pokud xx xxxxxxxx vrhů standardizuje, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: mezi 1. x 4. xxxx po porodu xx velikost všech xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx xx dosáhlo xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; pokud xx není xxxxxxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx počty, xxxx. 5 samců x 3 samice. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou xx xxx. Významné xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mortality xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx xxx xxxx, xxx během doby xxxxxxxxxxx. Během xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx potravy xxxxx. Xx xxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (a vody, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x pitné xxxx) xx xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X xxxxxxx se xxxx první xxx xxxxxxxx x pak xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Doba xxxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx se xx nejdříve xx xxxxxx vyšetří a xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx mláďata x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx mláďata se xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx zváží xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. dnu x xxxxx každý týden xx xxxxxxxx studie, xxx xxxx zvířata xxxxxxx individuálně. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x fyzickém xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx
1.3.5.1 Xxxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx defekty.
1.3.5.2 Histopatologická vyšetření
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, semenné xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx P xx xxxxxxxx pro mikroskopické xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, provede se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx zvířat kontrolní xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxx u xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx, xxxxx jevily xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx zvířat, xx xxxxxxx i u X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx se mají xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx pro každou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx těhotných xxxxx, typ změn x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx změny.
Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx použitých zvířat,
- údaje o xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx nebo xxx xxxxxxx přežila xx ukončení pokusu,
- tabulka xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x konečnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx potomků,
- toxické x xxxxx účinky na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx růst,
- xxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxx hmotnost zvířat X xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx několika xxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx dostávají xxxxxxxxxx látku x xxxx růstu x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx spermatogenního xxxxx (xxxxxxxxx 56 dnů x myší a 70 dnů x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv nepříznivý xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Samice xxxxxxxxxx xxxxxxxx (P) xxxxxxxxx látku xx xxxx alespoň dvou xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx estrus.
Xxxxxxx jsou poté xxxxxxxxxx. V době xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podává xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx F1 x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, v xxxx xxxxxx x až xx xxxx xxxxxxxxx X2 generace.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx testovací metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Před xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx náhodně rozdělena xx xxxx skupin - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (X) xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx podávat v xxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxx možné. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x usnadnění aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx být x nich xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx X xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x váhy xxxx xxxx. Plodnost xxxx xxx xxxxxxx x obou xxxxxxx. Xxxxxx v obou xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Každá exponovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx zaručeno xxx 20 xxxxxxx xxxxx x přibližně stejným xxxxxxxx porodu. Xxxxx xx xxxxxx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x tím xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx látky na xxxxxxxx, průběh xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X2 xx xx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx porodních nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xx jim xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx vytvoření xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx kontrolní. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dostávají xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx snižuje xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupiny, spárované xx xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx případě, xxxxx to xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat xxxxxxxx x xxxxxx mortalitu x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx dávka(y) xx xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x nejnižší dávka xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxx u xxxxxx ani x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxxxx se dávka xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x přizpůsobuje xx xxxxx týden xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx tělesné xxxxxxxxx x 0. nebo 6. xxx xx xxxxxxx těhotenství.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
V případě xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx dávka 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx studie xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx studie xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx jasnou xxxxxxxxx toxicitu, xxxx xxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx aplikace xxxxxx rodičovské generace X xxxxx ve xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. U xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx pro xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx období xxxxxxxxxxx nebo se xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxx případnou xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx utraceni a xxxxxxxxx někdy xxxx xxxxxx pokusu.
Denní xxxxxxxx xxxxxxx rodičovské xxxxxxxx P xxxxx xx xxxxxxxxx aklimatizaci x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Denní xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx xxxx tři xxxxx období xxxxxxxxxxx, x době xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxx X1 xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx změna dávkovacího xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, např. o xxxxxxx metabolismu xxxx. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx generace X1 xxxxxx xx odstavu x končí jejich xxxxxxxxx.
1.3.2 Postup při xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx párování 1 : 1 (xxxxx xxxxxx a jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x týmž xxxxxx xx společné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx po xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx jsou samice xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx definován xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx zátky nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, zvířata xxxxxxxx X1 xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx x xxxx x 13 týdnů x potkanů. Xxx xxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxxx X1 se xxxxxxx xxxxxxx xxxx z xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx.
Dvojice, x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. To xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx další xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx obou xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx orgánů xxxx xxxxxxxxxx estrálního xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx vrhů
Zvířatům xxxxxxxx xxx vyšetření xxxxxxxxx xx ponechána xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x pečovat o xxx potomstvo xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vrhů. Xxxxx se velikost xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo xxxxx 4 samců a 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx proveditelné, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, např. 5 samců a 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxx generace X2 xx xxxxxxx obdobně.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx zvíře xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxxx mortality, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxx jak xxxx, xxx xxxxx doby xxxxxxxxxxx. Během xxxxxxxxx xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx x x xxxxxxx laktace xx xxxx příjem xxxxxxx xx xxxxxx xxx, kdy je xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X a X1 xxxxxxx xx váží xxxxx xxx xxxxxxxx x xxx týdně. Xxxxxxx pozorování xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx dospělé xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx od xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx spočítají x xxxx xxxx xx xxxxx ráno xx xxxxxx, ve 4. x 7. xxx a xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx studie, xxx xxxx xxxxxxx zvážena xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x zaznamenávají xxxxxxx xxxxxxxxxxx v chování x fyzickém xxxxx xxxxx x potomstva.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Pitva
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X a F1 xx xxxxxxxx, jakmile xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx F1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx generace X2 xx xxxxxx xx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx všechna xxxxxxxxxx xxxxxxx X x X1 makroskopicky xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx patologické xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx defekty.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, koagulační xxxxxx, xxxxxxxx, hypofýza x xxxxx xxxxxx xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx P a X1 xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetřeny x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studiích, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx X x X1 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x skupiny dostávající xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, x xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Orgány, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx vyšetří x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx podrobit mikroskopické xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, kde je xxxxxx pro každou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na začátku xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx změn x procento zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx příslušnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x experimentu by xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující údaje:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- údaje x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx ukončení xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx hmotnost xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx x xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, potomstvo a xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X1 xxxxxxxx, vybraných xxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.36. XXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx vhodnou cestou. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx látka xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, jedné xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx tekutinách, xxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx s "neznačenou" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxx, xxxxxx xx tak, xxx poskytlo xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nejméně xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx. Před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx použít xxxxx mladých, pregnantních xx premedikovaných xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx provádějí na xxxxxx či více xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx by xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvažovaných xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže xxxx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet a xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx užije xxxxxxx 4 xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ale xx xxxxxxxx podmínek může xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx obou xxxxxxxxx. Jestliže jsou xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx pohlaví, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. V xxxxxxx ostatních xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxx xxxxxxxx) je možné xxxxxx menší xxxxx xxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx distribuce, pak xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxx x xxxxx xxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxx, xxx počet časových xxxx, v xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx velikost xxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxx větší xxxxx xxxxx a sledovaných xxxxxxxx xxxxxxxxx, pak xxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a plánovaným xxxxxxxxx zvířat, xxx xx skupině xxxxx xxx xxxx než 2 zvířata. Velikost xxxxxxx xxxxxx by xxxx být xxxxxxxxxx xx to, xxx xxx látku xxxx. xxxx metabolity xxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podání xx xxxx xxx použity xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx testované xxxxx. Xxxx by xx xxx nízká xxxxx xxxxx, xx které xxxxxx pozorovány žádné xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx dávka, xx xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx parametrech xxxx xxxxx xxxxxxxx toxické xxxxxx.
X případě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dávek xxxxx. Xx xxxxxxxx podmínek xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx prováděny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x je-li xx xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx jsou používány x xxxxxxxxx toxikologických xxxxxxxx. Testovaná látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx, aplikována xx xxxx, xxxx xxxxxxxx inhalačně xx xxxxxxx dobu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxxx xxx stanovení relativního xxxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx mohou xxx získány důležité xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x organismu.
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx na možnou xxxxxxxxxxxx vehikula x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx měla být xxxxxx xxxxxxxx rozdílům xx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx, je-li testovaná xxxxx podána xxxxxx xxxx x xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x potravě.
1.2.2.5 Xxxx sledování
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx denně x příznaky toxicity x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přiměřeným xxxxx. Ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx absorpce podávané xxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx1), a xx xxxx.:
- xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx x ev. xxxxxx metabolitů x xxxxxxxxx xxxx. v xxxx, žluči, stolici, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxx x karkasu,
- xxxxxxxxx biologické xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx akutní xxxxxxxx) xxxx testovanou x xxxxxxxxx x xxxxxxxx referenční xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. jejích xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx testovanou x xxxxxxxxx a případně xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx a xxxxxxxxx x xxxx získanými x xxxxxxxxxx skupině.
1) X této xxxxxx xx referenční xxxxxxxx rozumí xx, xx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx podávána xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
V současné xxxx jsou xxxxxxxx 2 přístupy, z xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxx:
- xxx použití xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx informace;
- kvantitativní informace xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a ev. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx moč, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx vzduch, v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx se x xxxxxx xxxxxxxxx stanovuje xxxxxxxxxx po podání xxxxx, a xx xxx do vyloučení 95 % x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 7 dnů xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx speciálních xxxxxxxxx xxxx xxx potřebné xxxxxxxx také xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx vzorky xxxxxxxxx xxxxxxxx technikami. Měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxx xxxxxx tam, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx otázky z xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx informací x metabolismu může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxx informace x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx látky xxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxxx metabolického xxxxxxx, sledováním xxxxxxx xxxxxxxxxxx neproteinových sloučenin xxxxxxxxxxxx - SH xxxxxxx x xxxx xxxxx látky na xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx se podle xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx možno xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx variability xx xxxxxx x xxxx, dávce, xxxxx x xxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx metodami. V xxxxxxx metabolických xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx metabolické xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx zpráva x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx druh, kmen, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx materiálu, xxxxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx podání,
- xxxxxx(x) xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- toxické x x ostatní xxxxxxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx testované látky x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- tabulky xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, dávky, režimu, xxxx, xxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx vstřebávání x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx,
- xxxxxx užité pro xxxxxxxxxxxxxx x identifikaci xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,
- navrhované xxxxxx xxx metabolismus,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH XXXXXXXXX XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Při xxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxxxxxx účinků xxxxx xx důležité xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx nemůže xxx xxxxxxx x xxxxxx studiích toxicity. X určitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu byly xxxxxxxxxx zpožděné projevy xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx použity xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx vitro xxxxxx xxxx není xxxxx považovat za xxxxx, že xxxxx xxxx neurotoxická.
1.2 Definice
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x názvu xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, fosfonové nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx amidothiofosforečných, xxxx xxxx látky, které xxxxx způsobit xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, distální xxxxxxxxxx, změnami x xxxx x periferním xxxxx x pozdním xxxxxxxx těchto xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x stárnutím xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x nervové xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Referenční xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupině k xxxxxxx, že x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx testovaných xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx.: tri-o-kresylfosfát (XXXX).
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx možnými xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx 21 dnů xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx, ataxie x xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx inhibice XXX, se xxxxxxx x slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x každé xxxxxxx, obvykle 24 x 48 xxxxx xx podání xxxxx. 21 xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx zdravé xxxxxxx xxxxxxx xxx interferujících xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejméně 5 dní xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx během experimentu.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx volný xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rozpuštěné xx xxxxxxx vehikulu, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X nevodných xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx se mladá xxxxxxx kura xxxxxxxx (Xxxxxx gallus domesticus) xx věku 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxx x standardní velikosti x chovají se xx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx testovací xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně jako x xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx aspoň xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx biochemické xxxxxxxxx (xx xxxxx prvý x druhý den xx xxxxxx) x xxxx xxxxxxx 21xxxxx xxxxxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Má xxx xxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx určeny xxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx doplňovat xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxxxx laboratoři xxxxx některý xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxx, potrava, xxxxxxxx chovu).
1.6.1.3 Volba xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx příslušného xxxxx xxxxxx x xxxxxx v různých xxxxxxxx dávek, xxx xx xxxx stanovit xxxxxx, xxxxx bude xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, o kterém xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx maximální xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být použito xxxxxxx xxxx testovacích xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx údaje xxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx informace xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxx výběru xxxxx.
Xxxxxx dávky xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx co xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x výsledkům xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x hornímu xxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat pro xxxxxxxxx (šest) x xx 21 dnech xxx histologii (šest). Xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx je známo, xx neinterferuje x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx má použít xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx cholinergními xxxxxx.
1.6.1.4 Xxxxxxx test
Jestliže xxxx s xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx popsaných xxx tuto studii, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x látek x xxxxxxxxx strukturou xxxx xxxxx xxxxxxxx očekávat, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx o studii x podáním xxxxx xxxxx. Limitní test xx neprovádí, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se x lidí xxxxxxxxx xxxxxxx použití xxxxx xxxxx úrovně dávky.
1.6.1.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx postupu
Xx xxxxxxxx prostředku, xxxxxxxxxxxxx před xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinku, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx podání xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx několikrát x xxxxxxx prvních xxxx xxx x xxx aspoň xxxxxx xxxxx xx xxxx 21 xxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx plánu. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx nástupu, xxxx, xxxxxx x xxxxxx abnormálního xxxxxxx. Xxxxxx se hodnotí xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx slepice xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vyjmou x xxxxx x xxxxxxx nucené motorické xxxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Umírající zvířata x xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.6.2.2 Xxxxxxx hmotnost
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx aspoň xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Biochemie
Xxxx xxxxxx náhodně vybraných x každé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxxxx x xxx slepice z xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx (xx-xx skupina použita) xx xxxxxx v xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx inhibice XXX xx vyjmou xxxxx x lumbální xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx jeho xxxx na xxxxxxxx XXX. Xxxxx se xxxxxxxx tři xxxxxxx x kontrolní x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx, xxx slepice x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx usmrcují xxxxx xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx naznačuje, xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxx xx nástup xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxx odebrat xxxxxx xxxxx xxxxxxx ze xxx xxxxxx, a xx xxxx 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx.
X xxxxxx vzorků xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, což může xxxx x xxxxxxxxx xxxxx jako inhibitoru XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Pitva u xxxxx zvířat (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) zahrnuje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx stavu xxxxx x xxxxx.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx pro biochemické xxxxxx) xx histologicky xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx situ xx xxxxxxx perfúzních xxxxxxx. Xxxxxxx se: xxxxxxx (střední xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx mícha, xxxxx - xxxx xxxxx se provádějí x xxxxx krční xxxxx, xxxxxxx hrudní x xxxxxxxxxxxxx, z xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx distální xxxx x x. xxxxxxxx (x xxxx xxxxx x x. gastrocnemius) x z n. xxxxxxxxxxx. Řezy xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
2. SBĚR A XXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, histopatologie x xxxxx chování) xxxxx xxxxxxxxxx další xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx neurčité xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje xx xxxx xxxxxxx xx tabulky. X xx musí xxx xxx každou experimentální xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx jevících poškození, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx účinky, xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx každý typ x xxxxxx poškození xxxx účinku.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Číselné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- použité plemeno;
- xxxxx x xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat na xxxxxxx studie.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx x přípravě, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx výběru vehikula;
- podrobné údaje x xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx údaje o xxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
- zdůvodnění xxxxxxx úrovně xxxxx;
- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, včetně xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxx x fyzikální xxxxx aplikované xxxxx;
- podrobné xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx;
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx úmrtnosti;
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx příznaků (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx);
- podrobný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- podrobný popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx to xxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Hodnocení x Xxxxxxxxxxxx
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 418.
B.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH SLOUČENIN XXXXXXX 28DENNÍ OPAKOVANÁ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx schopnost xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx nemůže xxx zjištěn v xxxxxx xxxxxxxx toxicity. X určitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx testovány touto xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx použity pro xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx zdravotním xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxx opakovaných během xxxxxxxx krátkého xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx informace x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxx poskytnout odhad xxxxxxx dávkových xxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné nepříznivé xxxxxx. Tato xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx bezpečné xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx amidofosforečné xxxx xxxxxxxxxxx kyselin xxxxxxxxxxxxxxxx, thiofosfonových xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, distální xxxxxxxxxx, xxxxxxx x míše x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx esterázy - NTE (neuropathy xxxxxx esterase) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx orálně xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Zvířata xxxx xxxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx chování, xxxxxx x xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx dávce. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx XXX, se xxxxxxx u xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Dva xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx slepice xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxx nervových tkání.
1.4 Xxxxx metody xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx zdravé xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x farmakologické xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní skupiny. Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxxx studie xxxx zvířata xxxxxxx x podmínkách xxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx velké xxxxx xxxx ohrady umožňující xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx pozorování xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx orálně, xxxxx 7 xxx x xxxxx, xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx tobolkami xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxx xx xxxx. kukuřičný olej. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, neboť xxxxx xxxxx xxxxxxx látek x želatinových tobolkách xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx známy xxxx xxxxxx xxxx testem xxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx xxxxx nosnice xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx plemena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx se xx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Počet x xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.
V xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x nich xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx x xxxxxx xx dvou xxxxxxxx xxxx) x šest xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pozorování xx ukončení expozice.
1.4.2.3 Xxxxx xxxxx
Dávkové xxxxxx xx xxxxx x přihlédnutím xx xxxx výsledkům z xxxxxxxx testu na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x xxxxxx údajům x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí ani xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx zvolí řada xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx umožní sledovat xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Nejnižší xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity.
1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx x dávkou xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx a xxx, xx použití xxxxxxx popsaných pro xxxx xxxxxx, nevyvolá xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a jestliže xxxxx xxxxx x xxxxx x příbuznou xxxxxxxxxx xxxx důvod xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx s xxxxxxx vyšší xxxxx. Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx a 14 xxx xx xx, xxxx xx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx plánu.
1.4.3 Xxxxx postupu
Testovaná xxxxx xx podává xxxx xxx v xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx má xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx po 28 xxx x xxxxxxx 14 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxx, do xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx zaznamenávají včetně xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx zahrnovat abnormality xxxxxxx, xxx xxxx xx xx ně xxxxxxxx. Ataxie xx xxxxxxx podle nejméně xxxxxxxxxxxx pořadové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Umírající zvířata xx závažnými a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x bolesti je xxxxx vyloučit, humánním xxxxxxxx utratit x xxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx těsně xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a pak xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx vybraných x xxxxx testované a xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxxxx xx usmrtí x xxxxxxx xxxxx xx aplikaci xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx mícha. Je xxxxxx xxxxxxxxxxxx také x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx inhibici NTE. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 hodinách x xxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx z xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx studií (např. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xx doporučuje použít xxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx.
X těchto xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx nastat spontánní xxxxxxxxxx AChE, což xxxx vést x xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Xxxxx
Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxx xxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx (nepoužitých xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx vyšetří. Xxxxx xx xxxxxx in xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: mozeček (xxxxxxx xxxxxxx řez), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx krční xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), x xxxxxxxxxxx nervů xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. xxxxxxxx (x jeho xxxxx x x. xxxxxxxxxxxxx) x z x. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x skupiny x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx skupiny x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx vyšetření x na xxxxxxxxx xx xxxxxx, které xxxxxxx dávku střední x xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx touto metodou (xxxxxxxxx, histopatologie a xxxxx xxxxxxx) negativní, xxxxx se neprovádí xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx neurčité xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxxxx.
Uvádějí xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje xx xxxx sestaví xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x počet zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxx, změny xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x histopatologickými nálezy x dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx u testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistické xxxxxx se zvolí xxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx být získány:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx plemeno,
- xxxxx x xxxxx xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx testování:
- xxxxxxxx xxxxx x přípravě, stabilitě x homogenitě testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx vody,
- zdůvodnění vybrané xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je-li jiná xxx 24 x 48 xxxxx.
Výsledky:
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx úmrtnosti,
- úroveň bez xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, stupeň x xxxxxx klinických xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx xx xxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Hodnocení x Interpretace
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 419.
X.39. Xxxx xxxxxxxxxxx syntézy DNA x savčích jaterních xxxxxxx in xxxx
1. METODA
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx XXX Xxxxxxxxx (XXX) Xxxx With Xxxxxxxxx Liver Xxxxx Xx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) v savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4).
Tento xxxx xx vivo představuje xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx indikuje xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx buňkách x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx místem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; jsou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx detekci poškození XXX xx xxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx test xxxxxx.
Výsledek neplánované xxxxxxx XXX (UDS) xx hodnotí xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx plánovanou (S-fáze) xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxxxxx xx metoda, xxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (3X-XxX). Xxx xxxxx UDS xx xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx potkaní xxxxx. Xxxx xxxxx než xxxxx se sice xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx však předmětem xxxx xxxxxx.
Detekce xxxxxxxx závisí xx xxxxx bází XXX, xxx xxxx v xxxxx poškození odstraněny x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx UDS xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 bází), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x důsledku neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Xxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxx xxx x přesnosti xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx, xx mutagen xxxx sice s XXX xxxxxxxx, ale xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx excizním xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, xx XXX xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože poskytuje xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxx x xxxxxxxx: xxx xxxxxxx grain (NNG) xxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx laboratoř xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxx (XXX): xxxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx xxxxxx xxx x jádře (NG) x průměrným xxxxxx xxx v cytoplasmě (XX): XXX = XX - CG. Xxxxx NNG xx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx x následně xxxxxxxxxxx xx buňky x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx XXX synthesis, XXX): opravná xxxxxxx XXX po xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX obsahujícího xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxxxx buňkách xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx segmentu XXX xxxxxxxxxxxx oblast poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx působením. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx x inkorporace 3H-TdR xx XXX xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x X-xxxx buněčného cyklu. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx tak náchylná x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x X-xxxx, xxxx xx např. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx druhu
Xxxxx xx xxxxxxxxx potkani, xxx ovšem xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx dospělých xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
Všeobecné xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Vlhkost by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Zdraví xxxxx xxxxxxx jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Je-li testovaná xxxxx x pevném xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx podáním xxxxxxxx rozpustí xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx podáváním xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.3 Podmínky xxxxx
1.4.3.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx údaji x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Doporučuje xx, aby kde xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx vodné xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxx xxxxx pohlaví xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení xxx spontánní xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx kontrolu patří xxxxxxxxx:
Xxxx xxxxxx xxxxxx | Látka | XXX | XXXXXX |
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 hodiny) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 xxxxx) | X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx možno xxxxxx x jiné vhodné xxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, než xx podávána xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
X xxxxx skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx historická xxxxxxxx, pak xxx xxxxxxxx skupiny negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jeden, xxxx xxx xxxxxxx.
Pokud x xxxx, kdy xx studie provádí, xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx test, xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx pohlavími xxxxxx x xxxxxxxx podstatné xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxxxx. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx jednorázově.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxx dávky. Nejvyšší xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxx dávka představuje xxxxxx 50 - 25 % dávky xxxxx.
Xxxxx, jež x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, mohou představovat xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx pro stanovení xxxxx a xxxxxxxxxxx xx případ xx xxxxxxx. Provádí-li se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx údaje xxxxxx x dispozici, xx xxxxx xx realizovat x xxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx pak xxxxxxx x hlavní xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx také xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx určité xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx test xxx dávce xxxxxxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a jestliže xx na základě xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx může být xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vpravuje žaludeční xxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Intraperitoneální xxxxxxxx xx však xxxxxxxxxxxx, protože xx xx tím mohla xxxxx vystavit xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx dá xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx velikosti pokusného xxxxxxx a nemá xxxxxxxxx 2 ml/100 x xxxxxxxxx organismu; xxxxx dávky xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx dráždivých xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, aby xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx úrovních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx jaterních xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 12 - 16 xxxxx po podání xxxxx testované xxxxx. Xxxxxxx xx zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx xx xxxxxx látky), xxxxxx xx po 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx reakce xxxxxx. Xx xxxxx možno xxxxxx x jiné xxxx xxxxxx xxxxxx, xx-xx xx odůvodněné xx xxxxxxx toxokinetických xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx zakládají xxxxxxx xxxxx in xxxx kolagenázou. Je xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mohly xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx savčí jaterní xxxxx xx xx xxxxxxx xxxx (např. 3 - 8 xxxxx) obvykle inkubují x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xx potom xxxxx inkubovat x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Xxxxx xx xxx xxxxxxx, fixují x vysuší. Xxx xxxxxxx inkubačních xxxxxxxxxxx xxxxxx xx "cold xxxxx" xxxxxxxx. Sklíčka x xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, exponují xx xxx (např. po xxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, obarví x počítají se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X každého xxxxxxx xx připraví dva xxxx tři xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Mikroskopické xxxxxxxxx xxxx obsahovat xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx UDS xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (např. pyknóza, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx zrn xxxxxxxx. Xxxx na xxxxxxxxx dvou preparátech x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 buněk; xxxxx xx xxxxx xxxx xxx 100 xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx zdůvodněné. Xxx xxxxxxxx zrn xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x X-xxxx, xxx xxxxx xxxxx x X-xxxx se registruje.
Xxxxxxx metodou xx xxxxxxx xxxxxx inkorporace 3X-XxX do xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx normálních buňkách, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Výsledky xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx formě. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx jedince x xxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (NNG) odečtením xxxxx XX xx xxxxx XX. Xxxxxxxx-xx xx "xxxxx x xxxxxx", xxxx být xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x historických xxxx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx studie.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx pro xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
pozitivní | (I) xxxxxxx XXX xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, zdůvodněným xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx dané laboratoře | |
nebo | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx u xxxxxxxx kontroly | |
negativní | (X) xxxxxxx XXX xx xxxxxx/xxx xxxxxx historického xxxxx x xxxxxxx | |
xxxx | (XX) xxxxxxx XXX nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx. |
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat, což xxxxxxx, že xx xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx - xxxxxxx x cytotoxicita. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla být xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného souboru xxx vyvodit o xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx buňkami in xxxx ukazuje, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx vivo xxxxxxxxx XXX, které xxx xxxxxxx neplánovanou xxxxxxxx XXX in xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx XXX, xxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxx určitou xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx a pohlaví xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx studie xxx určení rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby x xxxxx,
- podrobnosti x přípravě testované xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxx tkáně,
- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x odběru vzorků,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx metoda,
- počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxx počtů xxxxxxxxxx zrn x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx xxxxxx" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx je x xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, bylo-li xxxxxxxxx,
- xxxxxx toxicity,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- xxxxx "buněk x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,
- počet xxxxx v X-xxxx, xxx-xx stanoven,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Metoda X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.40. LEPTAVÉ XXXXXX XX KŮŽI
1. METODA
1.1 XXXX
Xxxxxxxx centrum xxx xxxxxxxxxx alternativních metod (Xxxxxxxx Centre xxx xxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Methods, XXXXX, Xxxxx Research Xxxxxx, Xxxxxxxx Commission) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx validní xxx testy in xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx: xxxx xx principu xxxxxx transkutánního elektrického xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) x test xxxxxxxxxxx modelu lidské xxxx. Xxxxxxxxxxx studie XXXXX xxxxxxxxx, že xxx xxxxx dokáží xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx látkami xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx test vycházející x modelu lidské xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx těžké xxxxxxxxx kůže R35, x ostatní xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, X34). Xx xxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx xxxxx; xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx uživatele.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX LÁTKY
Žádná xxxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxxxx, xxx však xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX XXXXXX - TEST XXX XX KŮŽI POTKANA
Testovaný xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxx xx 24 hodin na xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíků xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx utracených xxxxxxxx způsobem. Xxxxx, xxxxx xxxx leptavé xxxxxx, xxxx identifikovány xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx funkce xxxxxx corneum.Tato schopnost xx měří xxxxxxx xxxxxx inherentního xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx určitou prahovou xxxxxxx (5kΩ) (4) (5). Dráždivé a xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X případě xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (xxxxxxx xxxxxxxx xxx x xxx. (6)) xx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxx zařadit test xxxxxx xxxxxxx, aby xx snížil xxxxx xxxxxxxxx pozitivních výsledků, xxx xx u xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).
1.5 XXXXX XXXXXX - TEST TER XX KŮŽI XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx nůžkami xx zvířata se xxxxxxx odstraní xxxx x dorzální a xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx pak xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx ponoří xx roztoku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx amfotericinu, x koncentracích inhibujících xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxxxxxx znovu x xxxxx 3 dní xx použijí. Pro xxxxxxxx kožních xxxxxx xxxxxxx xxx zvířata xxxxxx xxx 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx terčíků xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx usmrtí, xxxxx xx kůže x xxxxxxxx plochy x x xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx. Kůže xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxx, x to xxxxxxxxxxx xxxxxxx k trubici. Xxxx konec trubice xx přetáhne xxxxxx X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx. Rozměry trubice x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Gumový X-xxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Trubice xx ponoří xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.3.1 Nanesení xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x tekutém xxxxx, xxxxxx se xx xxxxxxxxxxx povrch xxxxxx xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx ve xxxxx xxxxxx, nanese xx xx xxxxxx x xxxxxxx množství, xxx xx xxxxxx celý xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx se xxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx mít x xxxx xxxxxxxxx možný xxxxxxx. X některých xxxxxxx látek toho xxx dosáhnout xxxxxxxx xxxxx na 30 xX, aby se xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx prášek. Použijí xx vždy tři xxxxxxx xxx každou xxxxx. Látka xx xxxxxx na xxxx 24 hodin (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx promýváním xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx 30 xX tak dlouho, xxxxx se látka xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, se xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx proudem xxxx xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Měření TER
Transkutánní xxxxxxxxxx odpor (TER) xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. AIM 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx povrchové xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% ethanolu, xxxxxx xx pokryje xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx tak, že xx trubice otočí, x tkáň se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx můstku xx xxxxxxx na xxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxxx x kΩ/terčík (xxx. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x délku xxxx xxxxxxxxx xxx krokosvorkou xxxxxxx obr. 1. Xxxxxx vnitřní (silné) xxxxxxxxx se během xxxxxx xxxxx navrch XXXX xxxxxxx xxx, xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vždy stejná xxxxx xxxxxxxxx. Vnější (xxxxx) xxxxxxxxx se xxxxx do receptorové xxxxxxx xxx, aby xxxxxx xx xxx. Xx třeba xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzdálenost xxxx xxxxxx xxxxxx pružinové xxxxxx x spodkem XXXX xxxxxxx (obr. 1), xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx na xxxxxxxx hodnotu xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxx vyšší xxx 20 xΩ, xxxx xx xxx důsledek xxxx, že xxxxxxxxx xxxxx překrývá xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx tak, xx xx XXXX xxxxxxx xxxxxx palcem x xxxxxxxx a xxxxxx 10 xxxxxx xx protřepává, roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx x měření xxxxxx se xxxxxxx x čerstvým roztokem.
Průměrná xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx přijatelných pro xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx popisovanou xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
10 – 25
|
1.5.3.3 Modifikovaný xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx rovná 5 xΩ, xxx xx této xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx průniku (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Tímto xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x výsledky xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x odstranění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx prvotním xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx všech xxxxxxx xxxxxx na 2 xxxxxx po 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxx zhruba xx xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx proudem xxxxxxxxx xxxx, která xx nejvýše xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Každý xxxxxx xxxx se xxx xxxxxxx xxxxx x XXXX xxxxxxx x xxxxx do xxxxxxx (např. do 20 ml xxxxxxxxxx xxxxx xxx scintilaci) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx dobu 5 xxxxx xxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zbytky xxxxxxxxxxxx (nenavázaného) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Pak se xxxxxxx vyjmou a xxxxx xx xxxxxxx x 5 xx 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx sodného (XXX) x destilované xxxx, xxx se xxxx xxx inkubují xxx teplotě 60 xX. Xx inkubaci xx terčíky vyjmou x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxx po dobu 8 minut při xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx síla ∼ 175). Vzorek 1 xx supernatantu xx xxx zředí 30 % (w/v) xxxxxxxx XXX v xxxxxxxxxxx vodě x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (x/x) (xx. 1 ml xxxxxxxxxxxx + 4 xx roztoku XXX). Xxxxxxx denzita (XX) xxxxxxx xx měří xxx xxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x terčíku se xxxxxxxx z hodnoty XX (xxxxxxx extinkční xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Obsah xxxxxxxxxxxxxx X xx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x stanoví xx xxxxxxxx hodnota. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx barviva xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, že souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx rozsahu xxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx považují:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx možné xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxx kůže (xxxx. 2 hodiny) xx xxxxxx rozlišení xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Ve xxxxxxxxxxx studii však xxxx zjištěno, xx xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx schopnosti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx 2 xxxxxx (2), jakkoliv umožňuje xxxxxxxx identifikaci xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 24hodinovém působení.
Získané xxxxxxx XXX mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x rozměry xxxxxxxx xxxxxxxxx a experimentálním xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx 5 kΩ xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx aparatuře x xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zde. Pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx být xxxxx použít xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, jež xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 XXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanáší xxxxxxx xx xxxx xx 4 xxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx epidermis s xxxxxxx statum xxxxxxx. Xxxxxxxxx materiál se xxxxx podle schopnosti xxxxxxx xxxxxx životnosti xxxxx xxxxxxxxx například xxxxxx "MTT xxxxxxxxx xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 difenyl tetrazolium xxxxxx) pod xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx dobu. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x předpokladu, xx xxxxx způsobující xxxxxxxxx xxxx jsou ty, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx nebo xxxxx) x jsou dostatečně xxxxxxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X MODELEM XXXXXX XXXX
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx zdrojů, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx kritéria. Xxxxx xxxx mít xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx vrstvou xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxx prokázat xxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx xxxxx, že xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx však xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Model xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky.
Životnost živých xxxxx x xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx x xxxx, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Životnost xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx velikostí xxxxxxx XXX, xx. XX xxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx použité xxxx negativní xxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx mezích pro xxxx model. Podobně x případě látky xxx pozitivní xxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx predikční xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx validačnímu xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx testovaná látka xxxxxx, nanese se xxx, aby pokrývala xxxxxx kůže (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/cm2). Xx-xx xxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx se x xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx je xx xxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. X metody xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxx pro široký xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx x povrchu xxxx xxxxxxx smyje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metoda. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxxxx XXX, x xxxxx xxxx prokázáno xx x různých laboratořích xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky (2). Xxxxxx xxxx xx xx dobu 3 xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx xxxxxxx 20 - 28 xX. Xxxxxxxxx xxxxx formazanový xxxxxxx se xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x koncentrace xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XX xxx vlnové xxxxx 545 a 595 xx.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx atd. mají xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Doporučuje xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx okalibrovat xx použití xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x xxxxx použitých xx xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx široké xxxxx látek xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx x rámci xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx kritéria vědecké xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2) a výsledky xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x takovém xxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 ZPRACOVÁNÍ VÝSLEDKŮ
1.8.1 Xxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odporu (x kΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx případné xxxxxxxxxx referenční xxxxx xx uvádějí x xxxxxxxxx xxxxx, a xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx a x xxxx xxxxxxxx klasifikace.
1.8.2 Xxxx x modelem xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX x xxxxxxxxx procento xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx x případné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx xxx všechny xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, průměrné xxxxxxx x x nich xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
1.9.1 Xxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx TER xxx testovaný xxxxxxxx xxxxx než 5 xΩ, je xxxxx xxxxxxxxxxx. Je-li hodnota XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx testovaná xxxxx xxxxxxx účinky xx.
X povrchově xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx hodnoty XXX nepřesahující 5 xΩ, xxx provést xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x terčíku vyšší xxxx rovný xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x 36 % XXx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx má xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx barviva x xxxxxxx menší, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx účinky xxxx.
1.9.2 Xxxx x xxxxxxx lidské kůže
Hodnota XX xxx negativní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100% xxxxxxxxxxxxxxx buněk. X xxxxxx XX pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx. Hraniční procentický xxxxx životaschopných buněk, xxxxx xxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx odlišuje jednotlivé xxxxx leptavých vlastností, xxxx být x xxxxxxxxxx modelu jasně xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx metoda xxxxxxxxxx, x následnou validační xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, že je xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- identifikační xxxxx, xxxxxxxxx stav, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti; pokud xx xxxxxxxxx referenční xxxxx, uvedou xx xxxx xxxxx x xxx xx.
Xxxxxxxx pokusu
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx XXX) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní a xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx, a xx xxxxx pro všechny xxxxxxxxx resp. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x průměrné xxxxxxx;
- xxxxx všech xxxxxx pozorovaných xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Obrázek 2
Metoda X.40. xxxx vložena xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.41. FOTOTOXICITA - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), x xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxxx vystavena xxxxxxx chemickým xxxxxx x následně pak xxxxxx, xxxx je-li xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx podání xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x rámci xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro slouží xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dané xxxxxxxxx xxxxx, tedy ke xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx ve spojení x expozicí xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx nikoli.
Toxikologickým xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx působením xxxxx x světla, xxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx vivo po xxxxxxx aplikaci x xxxxxxxxxx x kůži, x xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx fotoiritanty xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx byl vypracován x validován v xxxxx xxxxxxxxxx projektu XX/XXXXXX z xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx vivo. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx následných xx xxxxx trestů xxx xxxxxxxxx fototoxicity (4).
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX in xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx fototxicity/fotoiritace xx vivo x xxxxxx x xxxx x xxxx zjištěno, xx xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx predikční xxxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxx, xxx xxxxxxxxxxx jiné xxxxxxxxxx účinky, xxx xxxxx x kombinovaného xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx fotogenotoxicita, fotoalergie xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx. Test xxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxxx hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx přístup xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxx látek xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: intenzita ultrafialového (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; měřená xx X/x2 xxxx x XX/xx2.
Xxxxx světla: množství (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx, vyjádřené v xxxxxxx (= X x s) xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 xxxx J/cm2.
Pásma xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx XXX (Commission Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) se xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx x xxxx vymezení: xx xxxxxxx xxxx xxxxx XXX a UVB xx xxxxx xxxxxxxx 320 xx a XXX xx xxxxx xxxx xx XX-X1 x UV-A2 s xxxxxxx zhruba x 340 nm.
Životaschopnost (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx celková xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx živou xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx), jež xxxxx xxxxxxxxx měřených xxxxx testem a xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x celkovým xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x porovnání x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx prošly xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
Predikční xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx toxicity xxxxxxxxxxxx xx predikce xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx metodickém xxxxxx xxx xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro k xxxxxxxx fotoxického potenciálu xxxxxx xxxxxxx XXX x MPE.
PIF (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx stejně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) testované látky xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) a v xxxxxxxxxxx (+UV) necytotoxického XXX/XXX xxxxxxx.
XXX (mean xxxxx xxxxxx, střední xxxxxxxxx): xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx průběhu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), xxxxx xxxxxx po xxxx expozici kůže xxxxxx látce x xxxxxxxx xxxxxxxx kůže xxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxxx je obdobně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx systémovém xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: nižší xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx se xxxxx xxxx fototoxických xxxxxx, x nimž xxxxxxx x xxxx poté, xx na xx xxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxx přijatá) nějaká xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx vždy x nespecifickému poškození xxxxx (xxxxxx podobné xxxx při xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: získaná xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, která xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx dvoutýdenní indukční xxxxxxx x tomu, xxx xx reaktivita xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: genotoxická xxxxxx (xxxxxx) s xxxxxxxxxxx projevy, ke xxxxx xxxxxxx poté, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovanou aplikací xxxxxx a xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX zářením xxxxxxxx látkou, mluvíme x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, která je xxxxxxxx testována xxx xxxxx xxxxxx, xx xxx zavedení testu xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx použít xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x látek, xxxxx byly xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).
1.4 XXXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx to, xx xxxxxx xxxxxxxxxx světelnou xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx zákon) xxxxxxxx xxxxx fotoreakce dostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx kvant. Xxxxx xx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx by se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x XX/XXX oblasti (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX x. 101). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx než 10 xxxxx x xxx-1 x xx-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciál x xxxx xxxxx xx xx škodlivé xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, ani xxxxxx xxxxx biologickým xxxxxx (viz dodatek).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, kterými xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx fototoxickou xxxxxx (7), přičemž všechny xxxxx k xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx fototoxicity 3T3 XXX in xxxxx xxxxxxx xx porovnání xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx červeně (neutral xxx, XX) (9), 24 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxx/x 3X3 xx kultivují xx xxxx 24 xxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx (monolayer). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x xxxxxx x osmi xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx dobu 1 hodiny. Jedna x xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x dávce 5 X/xx2 UVA (+XX xxxxxxxxxx), druhá destička xx xxxxxxxx x xxxxx (-UV xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx kultivačním x xx dalších 24 xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx inkorporace xxxxxxxxx xxxxxxx (neutral xxx xxxxxx, NRU) xx xxxx 3 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx x osmi xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx relativní xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxx procento xxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol. X posouzení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx porovnají xxxxxxxxxxxx xxxxxxx reakce xxxxxxx v xxxxxxxxxxx (+XX) x x xxxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx XX50, xx. xx xxxxxxxxxxx inhibující životaschopnost xxxxx x 50 % v porovnání x xxxxxxxxxx bez xxxxxxxxx.
1.6 KRITÉRIA XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX, historické xxxxx: x buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx provádět xxxxxxxx citlivosti vůči xxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxx UVA v xxxxx 1 - 9 J/cm2 a xxxxx xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Buňky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx životaschopnost xx ozáření xxxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx2 xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxxxxxxxxxxx x temnu. Xxx xxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxx 9 X/xx2 nemá být xxxxxxxxxxxxxxx nižší xxx 50 % životaschopnosti xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: xxxx splňuje xxxxxxxx xxxxxxx, jestliže xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx salt solution, XXXX] x 1 % xxxxxxxx dimethylsulfoxidu (XXXX) xxxx xxxxxxxx (XxXX) xxxx xxx xxxx vykazují v xxxxxxxxxxx (+UVA) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx x témž xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx negativních xxxxxxx: absolutní optická xxxxxxx (XX540 XXX) xxxxxx x XX xxxxxxxx negativních kontrol xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 104 xxxxx nasazených v xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx dnů xxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx průměrná xxxxxxx XX540 XXX x xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx 0,2.
Xxxxxxxxx kontrola: xxx xxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Při xxxxxxxxx studii XX/XXXXXX xxx xxxx xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXX); xxxxx xx tato xxxxx doporučuje. Xxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti: XXX xxxxxxx (+XXX): EC50 = 0,1 - 2,0 μg/ml, XXX xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Fotoiritační xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx hodnoty XX50, xx xxx minimálně 6.
Xxxxx CPZ xx xxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx dají xxxxxx x jiné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx testované (xxxxxxxxx) xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jako kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX50 a XXX xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 POPIS XXXXXX
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx validační xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněčná xxxxx xxxxxx fibroblastů Balb/c 3X3 klon 31, x xx xxx x ATCC xxxx x XXXXX; xx xx xxxxx doporučuje. Xxxxx xxxxxxxx protokolu xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx linie, xxxxx xx xxxxxxxxxx podmínky xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx; xx xxxx xxxxx xxxxxxxx, xx jsou xxxxxx xxxxxx.
X xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx nejsou kontaminovány xxxxxxxxxxxx, a smí xx xxxxxx jen x případě, že xx výsledek kontroly xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx XXX xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3T3 x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx XXX xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, x xx postupem kontroly xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx metodickém xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx rutinní pasážování xxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxx o XXXX obohacený 10 % xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 xX xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xx vlhkém xxxxxxxxx xxx teplotě 37 xX / 7,5 % XX2. Xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxxxxx cyklus x xxxxxxxxx historickém xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiu x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx v xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxx testu (tj. xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk 48 xxxxx xx nasazení) xxxxxxx xx xxxxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). V xxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xxxxxxxxxxxxx x destičkách x 96 jamkami xx doporučuje xxxxxxx 1 x 104 xxxxx v xxxxx xxxxx.
Xxx každou testovanou xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx identicky xx xxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx, xxxxx xxx procházejí xxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx podmínek, x xxxxxxxx doby, xxx xx xxxxx x xxxxxxxx ozařována (+XXX/XXX) x druhá je xxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Zatímco xxx xxxxx xxxxxxx xx vitro pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx žádná xxxxx, xxx xx x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx in xxxx xxxx in xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zapotřebí. Nepokládá xx xxxxx xxx xx nutné, xxx xx xxxxxxx odůvodněné, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivačním xxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx látka xxxx xxx před xxxxxxxx xxxxxxx připravena, xxxxxx xxxxx o xxxx stabilitě prokazují, xx xx dá xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xx by xxxxx x fotodegradaci, xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx se rozpustí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x Xxxxxxx vyváženém xxxxxx xxxxxxx (EBSS) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx saline, XXX), xxxxx - xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx proteinové složky xxx barevné indikátory xX, pohlcující xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx látka xx vodě xxxxxxx xxxxxxxxx, rozpustí xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stonásobně xxxxx, než je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, x následně xx xxxxx x poměru 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, tj. xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx rozpouštědlo xx doporučuje xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo xxxxxxx (XxXX). Vhodná mohou xxx i xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, například xxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx specifické xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx, potlačení fototoxického xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxx míchání xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 xX.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / příprava
Světelný xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx světelného xxxxxx x správná xxxxxxxx xx při xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx v XXX a ve xxxxxxxxx oblasti je xxxxxxx spojováno x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx záření XXX xx x tomto xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx vysoce xxxxxxxxxxx, xxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx od 313 xx x 280 xx xxxxxxx tisícinásobně. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx světelného xxxxxx xxxxx xxxxxxx požadavek, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxx absorbuje, a xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx xxxx) xxxxxxxxxxx xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx být použité xxxxxx xxxxx x xxxxx nepatřičně poškozující xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx sem x xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se pokládají xxxxxxx xxxxxxxxxx, jimiž xx xxxxxxxx sluneční xxxxxx. Xxxx tyto xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx výbojky a xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx xxxx xx xxxxxx, xx vyzařují xxxx xxxxx x xxxx levnější, xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Jelikož xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx záření XXX, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxx xxxxxx cytotoxické xxxxxx xxxxxxxxxx zeslabilo.
Pro xxxx xx fototoxicitu 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxx UVB xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx simulátoru xxxxxxxxx xxx validační studii xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx x xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: intenzita xxxxxx (iradiance) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx UV-metru xx xxxxx xxxxxxxxxxx, k xxxxx se doporučuje xxxxxx druhý, referenční XX-xxxx téhož xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx, když se x delších xxxxxxxxxxx xxxx spektrální iradiance xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje x xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx širokopásmového UV-metru xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; taková xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx studii xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx2 xx xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx i xxxxx fototoxické xxxxx. Xxx xx této xxxxx xxxxxxx během 50 xxxxx, xxxx xxx iradiance nastavena xx 1,666 xX/xx2. Xxxxxxx-xx xx jiná xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx zdroj xxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx UVA xxxxxxx xxx, aby xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxx xxxxxx (X/xx2) x 100
|
&xxxx; |
| &xxxx;
x (xxx) =
|
________________________
|
(1 X = 1 X s)
|
|
záření (xX/xx2) x 60
|
&xxxx; |
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μg/ml, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx koncentracích xxxxxxx, xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xx zvyšuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Hodnota pH xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxx přijatelná (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (+UVA) x xxx xxx (-XXX) xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rozsah x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx zvolí xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxxx dostatečně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Používá xx xxxxxxxxxxxx geometrická xxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ředění).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx x kultivačním médiu. Xx xxxxxxxxxxx jamek 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx destičky xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= slepý xxxxx), do xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx 100 μx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 1 x 105 buněk/ml (= 1 x 104 xxxxx na xxxxx). Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxx xx připraví xxx destičky - xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX), xxxxx xxx xxxxxxxxx fotocytotoxicity (+XXX).
Xxxxx xx inkubují xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 oC), xxx se vytvořil xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a adherenci xxxxx a jejich xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx inkubaci xx xxxxxxxxxx médium x xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl EBSS/PBS xx každou xxxxx. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx. Buňky x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx po dobu 60 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx xxxxx x XXX (+XXX) xx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 50 xxxxx skrz xxxxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx UVA x intenzitě 1,7 xX/xx2 (= dávka 5 / xx2). Xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx pod xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx ventilátoru. Duplicitní xxxxxxxx (-XXX) xx xx dobu 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) uchovávají xx xxxxxxxx xxxxxxx x temném xxxx.
Xxxxxx xx odstraní x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) xx xxxxxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
1.7.3.3 Třetí xxx
Xxxxxxxxxxxxx hodnocení
Buňky xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x fázovým xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx buněk způsobené xxxxxxxxxxxx účinkem testované xxxxx. Tato xxxxxxxx xx doporučuje, xxx xx eliminovaly xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx červeně (XX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Xxxxxxxxx roztok xx odstraní jemným xxxxxxxx. Xxxxx se 100 μx média x XX a xxxxxxxx se xxx 37 xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % CO2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx inkubaci se xxxxxx x NR xxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx objemem 150 μl XXXX/XXX, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxxxx destičky xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx poloze).
Přidá xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xx xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx xxxxxx xx třepačce, xxxxx xx NR x xxxxx nevyextrahuje x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 nm za xxxxxxx slepého pokusu xxxx srovnávacího roztoku. Xxxxx xx uchovají xx xxxxxxx formátu (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx analýzu.
2. ÚDAJE
1.8 XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx xxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx ní. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx, aby xx experimntální xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx testovaná xxxxx xxxx být xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl/ml x xxxxxxxxxxx xx xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx cytotoxická, xxxx xxxxx x xxxx, xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxx muset řádově xxxxx, xxx byl xxxxxx požadavek xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Pokud xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx xxxxx experimentu (xxx xxx -XXX, xxx při +XXX), xxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx rozestupem mezi xxxxxxxxxxxx dávkami xx xx xxxxxxxx koncentrace.
Jsou-li xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx čáry xxxxxxxxxxx modelu - xx xxxxx test xxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xx opakování xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx dosáhlo jasného xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx příprava xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxx xxxx opakování xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (spolurozpouštědlo, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Lze xxxx xxxxxxxx x změnách xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx xxxx ve xxxx nestálé, xxxx xxx významný xxxx xxxxxxxx xxxx.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x 50 % xxxxxxxx buněčného xxxxxx XX (XX50). Xx xxx učinit xxx, že se xx data xxxxxxxxxxx - odezva použije xxxxxxxxx vhodná metoda xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx regrese) xxxx xx použije xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Než xx xxxxxxx EC50 xxxxxxx xxx další xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx proložení. K xxxxxxx hodnoty XX50 xx xxxx možno xxxxxx grafické metody. X xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxx x: log, xxx x: probit), xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx křivka xxxxxxxxxxx - odezva xxxxxx xxxxx lineární.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX XXXXXX)
1.10.1 Xxxxxxxxx model, verze 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxx se xxxxxxx xxxxx křivky xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx (+UVA), xxx za xxxxxxxxxxxxx (-XXX) xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx podle xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX =
|
&xxxx;
____________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
XXX < 5, xxxxxxxxxxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx PIF ≥ 5 fototoxický xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx pouze xxx +XXX, xxxxxx xxx -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx se XXX xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx xx xxxxxxxxx xxx. "&xx; PIF", když xx xxxx xxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxxx až xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx) a xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx vzorce:
|
Cmax (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) &xx; XXX =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx se xx vypočítat xxxxx "&xx; PIF", xxx xxxxx xxxxxxx > 1 xxxxxxxxxx fototoxický xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx se nedá xxxxxxxxx xxx XX50 (-XX), xxx XX50 (+XX), protože látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx nejvyšší xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, je xx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx formální "PIF = *1", xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+XX)
|
Xxxxx xx dá xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, že xxxx xxxxxxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X případech (x) x (x) xx xxxxx při predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzít xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx, jichž xx xxx xxxxx dosáhlo.
1.10.2 Xxxxxxxxx model, verze 2: xxxxxxx fotoefekt (XXX)
Xx možno xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx dat x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) a xxxxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx in xxxxx x xxxxx UV xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxx modelu XXX x xxxx xxxxxxxxx, kde xxxxx xxxxxx hodnotu EC50. X xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx veličina "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx průběhu xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva. Xxx xxxxxxxx modelu XXX byl xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx software, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx.
1.11 Xxxxxxxxxxxx výsledků
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) ukazuje, xx xxxx látka xx xxxxxxxxxxx potenciál. Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx koncentracích xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx xxxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx také xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vivo. Xxxxx-xx xx pozitivní xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxx zkušební koncentraci (100 (x/xx), bude xxx posouzení nebezpečnosti xxxx fototoxické xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dalších xxxxxxxxx. Xxx mohou spadat xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx alternativním testu, xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxx xxxxxx kůže xx vitro.
Negativní xxxxxxxx xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx (XXX < 5 xxxx MPE &xx; 0,1) ukazuje, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx použité xxxxx buňky v xxxxxx podmínkách. X xxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx dala xxxxxxxx i xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx látka xxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx vivo xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxx koncentracích xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrační závislosti xxxxxxx xxxxxx (XX50 + XX x XX50 - XX), xx xxxxxxxxxxxx dat xxxxxx. Naproti xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+XX xxx -XX) x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xx možno xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx látku xx xx xxxxx xxxxxx a xxxx xx xx xxxxxxxx x jiném, potvrzujícím xxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxxx modelu xxxx xx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xx xxxx nebo in xxxx).
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x průběhu xxxxxx
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x číslo XXX, xx-xx známo,
- fyzikální xxxxxx a xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx x xxxxxxxxx xxxxx důležité,
- xxxxxxxxx x fotostabilita, jsou-li xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxx rozpouštědla,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx (EBSS xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- citlivost xxxxx xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxx xxxx ovlivněním x xx xxx:
- xxx x složení xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- doba xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xx x po xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - ovlivnění látkou:
- xxxxxxxxxx xxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx použijí v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx x bez xxx,
- x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zdůvodnění nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- typ x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx solný xxxxxx),
- xxxx ovlivňování xxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (x) - xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx daného xxxxxxxxxx xxxxxx,
- spektrální xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (filtrů),
- charakteristika xxxxxxxxxx x podrobnosti x xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx testovaného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx UVA (v x X/xx2) při xxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx XX/XXX záření,
- xxxxx xxxxxx UVA (xxxxxxxxx x xxx) x J/cm2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx kultur během xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - test NRU:
- xxxxxxx média x XX,
- xxxx xxxxxxxx x XX,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- podmínky xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XX,
- xxxxxxx vlnová xxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), xxxxx byl xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx jednotlivých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx νx relativní xxxxxxxxxxxxxxx buněk) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +UVA x -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- porovnání xxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx - výpočtem xxx fotoiritačního xxxxxxx (XXX) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - souběžná negativní xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx denzita extraktu XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx akceptovatelnosti xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-UVA) x XXX xxxxx xxxxxxx xxx pozitivní kontrolu,
- xxxxxxxxxx údaje xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx: hodnoty XX50 (+XXX), EC50 (-XXX) x XXX, průměry x směrodatné xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. byla xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx předpis x. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.
Xx xxxxx xxxxxx právního xxxxxxxx jsou podchyceny xxxxx a doplnění xxxxxxxxxxx právním xxxxxxxxx x.:
208/2001 Sb., kterým xx mění vyhláška XX x. 251/98 Xx., xxxxxx xx xxxxxxx metody pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků - xxxxxx bude xxxxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Xx. xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. x účinností xx 1.8.2004.
Znění xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jiných xxxxxxxx předpisů x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se jich xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx uvedeného xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx n) xxxxxx č. 157/1998 Xx., o xxxxxxxxxx xxxxxxx a chemických xxxxxxxxxxx a x xxxxx xxxxxxxxx dalších xxxxxx.
2) Zákon č. 246/1992 Sb., na xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx x. 162/1993 Sb., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Xx. x x. 30/1998 Xx.
3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a rozvoj xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx xx xxxxxx (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx xx Chemicals. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).