EPIS® Právní systém | Plné znění

Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.

Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Vyhláška

§1 §2 §3

Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod

B.1. Akutní toxicita orální (per os)

B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky

B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity

B.2. Akutní toxicita (inhalační)

B.3. Akutní toxicita (dermální)

B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)

B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)

B.6. Senzibilizace kůže

B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)

B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)

B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)

B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro

B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo

B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech

B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií

B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae

B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae

B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro

B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro

B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro

B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster

B.21. Test transformace savčích buněk in vitro

B.22. Dominantní letální test u hlodavců

B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích

B.24. Spot test u myší

B.25. Přenosné translokace u myší

B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)

B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)

B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)

B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)

B.30. Testování chronické toxicity

B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci

B.32. Test karcinogenity

B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity

B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test

B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test

B.36. Toxikokinetika

B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice

B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice

B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo

B.40. Leptavé účinky na kůži

B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro

INFORMACE

XXXXXXXX

Ministerstva xxxxxxxxxxxxx

xx xxx 16. října 1998,

xxxxxx xx stanoví xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 157/1998 Sb., x chemických xxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:

§1

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx nebezpečných xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx přípravků xxxxxx toxických, xxxxxxxxx, xxxxxx škodlivých, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a toxických xxx xxxxxxxxxx (dále xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx").¹⁾

§2

(1) Xxxxxxxx chemických xxxxx x přípravků xx xxxxxxxx xxxxxxxxx prováděnými xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze této vyhlášky.

(2) Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických látek x xxxxxxxxx lze xxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x odstavci 1, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx pokusných xxxxxx²⁾ x xxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx spolupráci x xxxxxx (OECD).³⁾

§3

Tato xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. ledna 1999.

Xxxxxxx:

XXXx. Xxxxx, XXx. x. x.

Xxxxxxx x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.

Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx

X. XXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXXXX POJMY

1.1 XXXXXX TOXICITA

xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxx doby (xxxxxxxx 14 xxx) xx xxxxxx xxxxx xxxxx nějaké látky.

1.2 XXXXXX XXXXXXXX

xx xxxxxxxxx xxxxxx popisující xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxx to xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx rizika x xxxx xx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx očekáván xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.

1.3 DÁVKA

xx množství podávané xxxxxxxxx xxxxx. Dávka xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxx) nebo xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx), nebo xxxx konstantní xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx xx xxxxxx dílů xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx).

1.4 DISKRIMINUJÍCÍ XXXXX

xx nejvyšší ze xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, kterou je xxxxx podat, aniž xx xx způsobilo xxxxxxx (včetně xxxxxxxxx xxxxxxxx) související x xxxxxxx xxxxxx.

1.5 DÁVKOVÁNÍ

xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x celkovou xxxx xxxxxxxx.

1.6 XX₅₀ (STŘEDNÍ XXXXXX XXXXX)

je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx způsobí za xxxxxxxxxxx dobu xxxx 50 % zvířat, xxxxxx byla podána. Xxxxxxx XX₅₀ xx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).

1.7 XX₅₀ (XXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX)

xx xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx smrt xx xxxxxx xxxx po xxxxxxxx u 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx po definovanou xxxx. Xxxxxxx XX₅₀ xx xxxxx jako xxxxxxxx testované látky xx xxxxxxxxxxx objemu xxxxxxx (xx.x^-1).

1.8 XXXXX

xx xxxxxxx xxx "xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx level" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x je xx nejvyšší x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA

xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx zvířat x důsledku xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chemické látce, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu.

1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX DÁVKA (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX DOSE)

xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.

1.11 PODRÁŽDĚNÍ XXXX

je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx na xxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.12 XXXXXXXXXX OČÍ

xx xxxxxxxx xxxx xx xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxx.

1.13 XXXXXXXXXXXXX KŮŽE (XXXXXXXXX XXXXXXXXX DERMATITIDA)

xx xxxxxxxxxxxx vyvolaná reakce xxxx na xxxxxxxxxx xxxxx.

1.14 XXXXXXXXX XXXX

xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poškození xxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.

1.15 TOXIKOKINETIKA

xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.

1.16 XXXXXXXX

označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx vstupuje xx xxxx.

1.17 XXXXXXX

xxxxxxxx proces(y), kterým(i) xxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x těla.

1.18 XXXXXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rozdělovány x těle.

1.19 XXXXXXXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxx účinky a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou být xxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 - X.5), xx xxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxx získán xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

X xxxxxxxxxx na toxicitě xxxxx xxx xxxxxx xxxxx postupy od xxxxxxxxx testu až xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀. Pro inhalační xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx možné xxxxxxxxx xxxxxxx hodnotu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx expozice.

Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx utrpení xxxxxxx, xxxxxxxxx metoda xxxxx xxxxx (metoda X.1 xxx) x xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx (metoda X.1 xxxx). Xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx druhu xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx vyvozené x xxxxx studie. X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx aplikací (xxxxxx X.7, X.8 a X.9) se xxxxxxxx xxxxxxx účinky xxxxxxxxxx x důsledku xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx co xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx testy xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx orgány xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - X.30 x X.33).

3. XXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXX

Mutagenita xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx přenosných xxxx v množství xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx nebo xxxxxxxx xxxx, blok xxxx xxxx celé xxxxxxxxxx. Účinky xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx projevovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (xxxxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (metoda X.10).

Xxxxxxxxxx jsou také xxxxxxx xx vivo, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx dřeně (xxxxxx X.11). Xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in xxxxx xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxx látky xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x kontrolu xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Tyto studie xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx získaných xxxxxxxxx xxxxxxxx testů; xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx.

Pro xxxx účely xxxxxxxx xxxxxx X.15 xx X.25 jak xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo x xx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxx poskytují xxxxxxxxx x bodových xxxxxxxx x xxxxxx účincích x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx baktérie používané x xxxxxxxxx souboru xxxxx.

Xxxxxx xxxxx, xx další xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx naplánovat xxx, xxx poskytly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované látky.

Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxxxxx bakteriálních a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx látky.

Pro xxxxxxxxxx rizika dědičných xxxxxx u xxxxx xxxx x dispozici xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx savčím xxxxxxxxx, xx xx vyvolaných xxxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx xxxx u xxxx xxxxxxxxxx mutace xxxxxxxxx xxxxx v první xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, např. xxxx na přenosné xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx xxx použít xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxx xxxxxxx. Vzhledem xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx jen xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx stanovení xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x Národní xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx genetické xxxxxxxxxxx.

4. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx karcinogeny, v xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu látky xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx testy xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx chronické xxxxxxxx. Test toxicity xxx xxxxxxxxx aplikaci, xxxxxx B.7, x xxxxxxxxxxxxx studie s xxxxxxxxxx podáváním xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologických xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx tkáních, xxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx studie x xxxxxxxxxxxxxxx informace mohou xxxxxx identifikovat chemické xxxxx x karcinogenním xxxxxxxxxxx, xxxxx vyžadují xxxxx, podrobnější xxxxxxxx xxxxxx aspektu pomocí xxxxx xxxxxxxxxxxxx (metoda X.32) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (metoda X.33).

X xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx buněk savců, xxxxx určují xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx - xx vivo (xxxxxx X.21). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx.

5. XXXXXXXXXXX TOXICITA

Reprodukční xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx zhoršení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinků xx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx teratogenitu x xxxxxx x xxxxxxx laktace.

Xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx X.31) xxx studie xxxxxxxx xx teratogenitu xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx. Alternativně xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vhodně xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xx možno xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx B.35) xxxxxxxx xxx, aby pokryl xxxxx generaci.

6. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx způsoby, xxxx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx strukturních x xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx periferním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx toxicity. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx neurotoxického xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx x neurotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx aspektu. Navíc xx důležité xxxx x xxxxx specifické xxxxxxxxxxxx účinky, xxxxx xxxxxxx být odhaleny x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Bylo xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu xxxxxxxxx xxxxxx toxicitu, xxxxx xx posuzována xxxxxxxx X.37 x X.38 xx xxxxxxxxxxxx xxxx opakovaném xxxxxx xxxxx.

7. IMUNOTOXICITA

Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx má xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx navozenou xxxxxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx imunotoxických xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x imunotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

8. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pomáhají xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x toxicitě, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx x výsledky xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Nepředpokládá xx, xx xxxx v xxxxxx případě zapotřebí xxxxxxxx xxxxxxx parametry. Xxxxx x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx posloupnost xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx absorpce, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx změny v xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx ukázat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.36).

Informace x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, umožňující xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xx tkání. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx parametrech x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií.

9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x její xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro výběr xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx studie x xxx xxxxxxxxxx x látkou x xxxx xxxxxxxxxx.

Vypracování xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx a kvantitativní xxxxxxxxx testované xxxxx (x také xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx) x dávkovacím xxxxx x xxxxxxxxxxx materiálu xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností, xxxxxxx x chování xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.

10. XXXX X XXXXXXX

Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx kterém xxxx zvířata chována, x xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

10.1 XXXXXXXX CHOVU

Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx je vhodná xxxxxxx místnosti 22 ^xX ± 3 ^xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx králíky má xxx xxxxxxx 20 ^xX ± 3 ^xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.

Xxxxxxx experimentální techniky xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx na teplotu. Xxx xxxx xxxxxxx xxxx podrobnosti x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Při všech xxxxxxxxx toxických xxxxxx xx třeba sledovat xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx x uvést je x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx pokusu.

Xxxxxxxxx má xxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx a tmy xx xxxxxxxx hodinách. Xxxxxxxxxxx týkající xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx zprávě x xxxxxxx pokusu.

Xxxxx xxxxxx nevyžaduje xxxx xxxxxx, mohou xxx xxxxxxx chována jednotlivě xxxx x malých xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 xxxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx jsou údaje x způsobu xxxxx x klecích x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x jedné xxxxx xxx během xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, tak xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.

10.2 XXXXXXXX KRMENÍ

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx výživy xxx xxxxxxxxx použitý xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxx studované xxxxx x potravě, xxxx xx xxxxxxxx hodnota xxxxxx vzájemným xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx takové xxxxxx xx xxxxx vzít x xxxxx při xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx s neomezeným xxxxxxxxx x pitné xxxx. Pokud xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx diety.

Xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx prokazatelně vliv xx toxicitu, nesmějí xxx přítomny x xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx se xxxxx xxxx projevil.

11. XXXXXXX XXXXXX

Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ochraně xxxxxx.

Snížení xxxxx x xxxxxxx bolesti x xxxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxx fixní xxxxx (B.1.bis) xxxx xxxxxx stanovení třídy xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Metoda xxxxxxxxx xxxxx akutní xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x 70 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxx B.1.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx látky se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx vyvolávají značnou xxxxxx x stres xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx testů, xxxxx v testech xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1, X.2 x X.3), ale také x xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx X.11 a X.12), xxxxxxxx vyhnout xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxx neprovést xxxx xxx xxxxxx na xxxxxx x jednoho xxxxxxx, je-li xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx vědecké xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx in vitro. Xxxxxxxxx, byla-li x xxxxxx xxxxxxxxx studie xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx testu (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx pozorováno xxxxx xxxxxxxxxx kůže, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4) xxxx xxx xxxxxxxx; látky, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx B.4), xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx dráždění xxx.

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupy, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx informací xxxx xxxxxxxx testy xx xxxxxxxxx x budou xxxxxx xxxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx, budou xxxxxxx méně xxxxxxx xxxx se úplně xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxx xxxxxx metody k xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx rizika, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxx, xxx xx to xxxxx.

12. XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX

Při hodnocení x interpretaci xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xx xxxxx mít xx xxxxxxx, xx xxxxx extrapolace xx xxxxxxx je xxxxx xxx x omezené xxxx; xxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxx, xxxxx jsou x dispozici, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx testování.

Výsledky xxxxxxxxx mohou být xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx účinků xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx zjištěných x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

Tyto xxxxxxxx xxxxx xxx také xxxxxxx xxx studie, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

Část X - Xxxxxxxxx xxxx byl xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001

X.1. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx podává x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxx xxxxx je xxxxx stanovit podle xxxxxxxx orientačního testu. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, která přežijí xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávat v xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivých vlastností.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v jakých xxxxx během experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx, připraví xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx vehikulu. Doporučuje xx xxxx první xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx volbou xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx něho xxxxxx relevantní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X hlodavců xx objem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxx xx 20 ml.kg^-1. Variabilita xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testech by xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, xxx xx zajistil xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx hladinách dávek. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxx ve xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx testu by x obou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx z xxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxxxx.

Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, mělo xx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Dávky je xxxxx pečlivě xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxx středně xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx testech xx xxxxx se vyvarovat xxxxxx letálních dávek xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Volba xxxxx

Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, nejméně tři, x mají xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx xxx x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxx, x pokud xx xxxxx, musí xxxxxxx stanovení XX₅₀ x xxxxxxxxxxx spolehlivostí.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

X xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 samců x 5 samic x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx úplné studie.

1.2.2.5 Xxxx pozorování

Xxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx x trvání xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx objeví x xxxxxx, x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx je xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx před xxxxxx. X zvířat x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx hladovění; xxxxxxx x pitné vodě xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx látka xx xxxx xxxxxx xxxxxx x jedné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx aplikovanou xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx podání xxxxx xx xxxxx xxxxxxx přístup k xxxxxxx ještě 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx a xxxx zvířatům poskytnout.

Xx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx provádění x xxxxxxxxxxxxx systematicky, xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx samostatné xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx aplikaci.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx pracovního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxx, např. xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx nebo umírajících xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xx, xxxxx přežijí až xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx nálezy xx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx

Xx dokončení xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, podá se xxxxx xxxxxxx jedné xxxxxxx o pěti xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx druhého xxxxxxx nejsou výrazně xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. V jednotlivých xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx zvířat. Pokud xx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx výrazně citlivější, xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx patrný počet xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx s jinými xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx intervalech x x xxxx uhynutí. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, přežívají-li xxxxxx xxxx než jeden xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX₅₀ xx vypočte xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx údajů xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, pokud xxxxxxxx, xxxx expozicí xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx abnormalit xxxxxx změn chování, xxxxxxxxxx symptomů, makroskopických xxxx, xxxx tělesné xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx toxických účinků.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se použije) x koncentrace,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x projevy xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat),

- xxxx uhynutí xx xxxxxx testované xxxxx, důvody x xxxxxxxx pro humánní xxxxxxxx zvířat - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxx XX₅₀ xxx to pohlaví, x kterého byl xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),

- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX₅₀, xxxxx je lze xxxxxxxxx,

- křivky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx a xxxx xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxxx danou xxxxxxx xxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx všech testů xx druhém pohlaví,

- rozbor výsledků (xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mohlo xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx vypočtenou hodnotu XX₅₀),

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.1. bis XXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (XXX XX) - XXXXXX XXXXX XXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx informace x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx podání xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.

Xxxxxx x fixní xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se sekvenčním xxxxxxxx xxxxxxx účinky xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx sondou x xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx na dávku. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx x toxicity, xxxxxx odhadu minimální xxxxxxx dávky. Xxxxxxxx xx x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxx.

X xxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxx sondou xxxxxxxx pěti xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx odvodí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxx xxxxx, xxxxx pravděpodobně vyvolá "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx bod 1.2), xxx xx xxxxxxx.

Xx xxxxxx xx xxxxxxxx účinky. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx žádné xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx na xxxxxxx úrovni xxxxx xxxx pozorována xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx úrovni xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx když xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx utracení, xxxxx se znova xxxxxxxx xx nejbližší xxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxx postup umožňuje xxxxxxx "diskriminující xxxxx" (xxx xxxx X - Všeobecný úvod xxx 1.2), tj. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx úrovní dávky, xxxxxx xx možno xxxxx, xxxx xx xxxxx x xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx podávat x xxxxxxxx dávkách a xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti tomu.

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx kmeny xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx pohlaví.

1.2.1.2 Příprava x xxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx se roztok xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx první xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx, xxxxx xxxxxx je xxxxxx x rostlinném xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx možnost xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx vehikulích xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx nebo xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X hlodavců by xxxxx xxxxx normálně xxxxxxxxx 10 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti; xxxxxxxx xxxx xxxxx roztoky, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx^-1. Variabilita xxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xx xx xxxx minimalizovat takovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx konstantní xxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx být xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx; přístup x xxxxx vodě xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx sondou xxxxxx x xxxxxx dávce. Xxxx-xx xxxxx podat xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx aplikovanou dávku xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx určitého xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - podle xxxxx tohoto období - xxxxxxx a xxxx zvířatům xxxxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxx postupu

1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxx různých xxxxx xx xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxxxxx se používají xxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx údaje, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pohlavím. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx alespoň 24 xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx dalšímu xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx dní; xxxxx přetrvávají xxxxxxx xxxxx xxxxxx sedmý xxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx ještě xx xxxxxxx xxxx xxx. Posuzují xx xxxxxxxxxxx výchozí xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx^-1. Xxxxxxxx zvolená xxxxxxx dávka xxxxxxxx xxxxxx otravu x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, potom xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx by xxx xxxxxxxxxx informace x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) příznaky xxxxxx, x o xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávku podle xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxx k dispozici, xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxx xxxxx 500 xx.xx^-1. Jestliže xx po výchozí xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx se xxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Jestliže nedojde x uhynutí xxx 2000 mg.kg^-1, je xxxxxxxxxx xxxxxx skončena x xxxxxx xxxxxx xx xxxxx provést xx xxxx úrovni xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx^-1) xxxxxxxx těžké xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx dalšímu zvířeti xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 xx.xx^-1). Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx fixními xxxxxxx. Za xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xx xxx xxxxx postupu xxxxxxxxx xxxx xxx 5 xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx by měly xxx nullipary a xxxxxx xx xxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx dávky xx xxxxxxx pouze xxxxx xxxxxxxxx dávek pro xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx x xxxxx, má xxx xxxxxxx z xxxxx xx 4 xxxxxxx úrovní xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 nebo 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx výchozí xxxxxx xxxxx xx měla xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx); xxxxxxx uhynutí nejsou xxxxxxxx, xxx mají xxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxxxxx xxxxxxx testování.

Xxxx xxxxxx zvolené xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx znovu xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx pozorována xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx bylo xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx toxická xxxxxxx xxxxxxxx humánní xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xx projeví xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx být xxxxx znovu testována xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xx zvířata, xxxxx xxxx xxxxx humánně xxxxxxx, xx měla xxx xxxxxxxxxx po xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx účinek xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx aplikaci.

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x trvání xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx doba, xxx xx projevy xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x pozdnímu vzniku xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx nejméně xxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx jedenkrát xx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxx xxxx výrazné xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx prováděna xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx po xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx zvířata xxxx vykazují xxxxxxxx xxxxxxxx. Test xxxx xxx ukončen x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx příliš xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxx xxxx, srsti, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx autonomní a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní pozornost xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx se provede xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky, denně xx xxxxx 3 xxx x xxxxx xxxxxx týdně. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxx, i ta, xxxxx přežívají xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx to xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.

X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx předcházející xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxx vyšetření druhé xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.

X xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx mortalitu xxx xxxxx 5 xx.xx^-1 (xxxx jestliže orientační xxxxxx naznačuje mortalitu xxx xxxx dávce), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx akutní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx z xxxxxxxxxx x xxxxxx studie xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx úroveň xxxxx. X xx xxxx xxx xxxxxx xxxxx zvířat na xxxxxxx pokusu; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; počet xxxxxx xxxxxxxxx během xxxxx xxxx utracených z xxxxxxxxx důvodů; xxxxx xxxxxxxxx účinků; pro xxxxxx xxxxxx, zda xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx testované xxxxx; xxxxxx průběh xxxxx xxxxxxxxx účinků; xxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, je xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzhledem xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolaná testovanou xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx pokusu xx xxxxx možno obsahovat xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,

- xxxxxxxxx výsledky všech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx,

- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx použitých xxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx počet xxxxxxxxx zvířat nebo xxxxxx utracených xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx účinků),

- xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx příznaků x xxx byly reversibilní,

- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, doba úhynu xx podání xxxxx, xxxxxx a kritéria xxxxxxx xxx indikaci xxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat,

- xxxxxxx nálezy,

- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx, včetně xxxxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx.

3.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx

Xxxxx	Xxxxxxxx	Xxxxxxxxxxxx
5 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx než 100 % přežití 100 % přežití, xxx xxxxxx toxicita 100 % přežití; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx Látky, xxxxx xxxx jedovaté Xxx xxxxxxxx xxx 50 xx.xx^-1
50 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % přežití	Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx 5 mg.kg^-1
	100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není zřejmá xxxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx výsledky x 500 xx.xx^-1
500 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % xxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx x 50 xx.xx^-1
	100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxxxx, které xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx toxicity Xxx xxxxxxxx x 2000 xx.xx^-1
2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxx výsledky x 500 xx.xx^-1 Xxxxx, xxxxx xxxxxx významnou xxxxxx toxicitu

B.1. tris AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX TŘÍDY XXXXXX XXXXXXXX

1. METODA

1.1 Xxxx

Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx toxicity poskytuje xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx rizika, xxx xxx xxxxx klasifikace xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx odstupech, xxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx toho xxxxxx xxxxxxx xxx xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx lze xxxxxx xxx jako xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx body xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx. Použití xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxx dávek xx xxxxx uvážit, xxxxx xx žádoucí xxxx xxxxxxxx další zpřesnění.

Metoda xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx XX₅₀. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx kterém xx xxxxxxx úmrtnost, xxxxxxx smrt části xxxxxx xx x x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinku. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx B.1. Xxxxxx výhodou xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx x metody xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx)(B.1) x než u xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).

1.2 Princip xxxxxxxxx metody

Látka xx xxxxxx xxxxxx skupině xxxxxxxxx zvířat v xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx. Testování xx xxxxxxx postupně, x xxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx provádět xxxxxxxxxx xxxxxx. Přítomnost xxxx xxxxxxxxxxxx úhynu xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx kroku, x.x.

- není zapotřebí xxxxx xxxxx testování;

- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví;

- xxxxx krok bude xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx před xxxxxxxxx testu, xxx xx mohla xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávky, ale xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxxx zvířatům x xxxxxx dávce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx kanylou.

Pokud je xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx roztoku/suspenze, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x jedlém xxxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x xxxxxx nosičích. Xxx xxxxxxx vehikula xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx po určitou xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. potkani přes xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx neomezuje.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx být xxxxx.

Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.

1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx ze xxx xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 a 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Výchozí xxxxxx xxxxx by měla xxx xxxxxx, xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxx, jimž xxxx xxxxx podána. X xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx diagramu xxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 1.

Xxx výběr xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx dostupné xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx úmrtnost xx xxxxxxxxxxxxxxx x při xxxxxxxx úrovni xxxxx (2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), pak se xxxxxxx xxxxxxx test. Xxx xxxxxx žádné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx se - x xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata - použít xxxxxxx xxxxx 200 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxxx získanou xxxxxxxxx, než jak xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx úrovněmi xx xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti. V xxxxxx případech se xxxx xxxxxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx výši 5, 50 nebo 500 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx.

Xxxxxx xx aplikovat xxxxx, x kterých xx xxxxx, xx způsobují xxxxx leptavými nebo xxxxx dráždícími účinky xxxxxxx xxxxxx a xxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx x závažnosti xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxxxxxxx druhého xxxxxxx xxxx xxx další xxxxx xx xxxxx xxxxxxx, dokud není xxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

1.3.2.4 Xxxxxxx test

Limitní xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx třech xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x podáním xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 xx.xx^-1 (xxxx 500 mg.kg^-1) xxxxxxx hmotnosti.

1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx utracena x xxxxxx ochrany xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zotavovacího xxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dobu, xxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx jde-li o xxxxxxxx xxxxxxx příznaky. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zaznamenávána: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx zvíře.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xx období xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx zkušební xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx potravy xx xxxx xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Kde xx xxxxx podávána xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxx xxx - v xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx - nezbytné xxxxxxxxxx zvířatům potravu x xxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx najednou, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x tělesné hmotnosti, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx není možné xxxxx dávku celou xxxxxxxx, je možné xx aplikovat xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x Xxxxxxx 1.

1.3.3.1 Xxxxxxxxx pozorování

Pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx (den xxxxxxxx) nebo častěji, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx vykazující příznaky xxxxx bolesti x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx humánně xxxxxxx: xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x humánních xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx mrtvá, dobu xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xx nejpřesněji. Xxxxx pozorování xx xxxxxxx, xxxx zvířata xxxxxxxx příznaky toxicity. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xx xxxx a xxxxx, na xxxxx x xxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx systému, xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, křečí, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zaznamenávána: xxxxxxx jsou xxxxxx xxx každé jednotlivé xxxxx.

1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Na xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx před xxx, xxx xxxxx xxxxxxx utracena.

1.3.3.3 Pitva

U xxxxx zvířat použitých xx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx testu, xx xxxxxxx pitva. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xxxx zaznamenány pro xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx získání dalších xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx orgánů xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zvířat xxxxxxxxxxxxx 24 x xxxx xxxxx.

2. SBĚR A XXXXXX XXXXX

X dispozici xxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx shrnuty xx tabulkové formy, xxxxxxxxx u každé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx vykazujících příznaky xxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxx x průběhu xxxxx nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx poučení x xxxxxxxxxxxx výsledků xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x Xxxxxxx 2.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Zpráva x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být získány:

Pokusná xxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;

- počet, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxxx xxx.;

- xxxxxxxx jednotlivých zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxx x týdenních xxxxxxxxxxx x xx xxxxx testu.

Podmínky xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx, xxxxx je xxxx xxx voda;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx x kvalitě xxxx (xxxxxx druhu x zdroje);

- xxxxxxxxxx xxxxxx počáteční xxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx údajů x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (xxx. xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx);

- xxxxxx a xxxxxx průběh příznaků xxxxxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx x každého xxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxx x histopatologické xxxxxx x každého zvířete, xxxx-xx x dispozici.

Diskuse xxxxxxxx:

Xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx:

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 423.

XXXXXXX 1

XXXXXX XXXXXXXXX

1. Xxx xxxx xxxxxxx v xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx by měla xxx xx xx xxx xxxxx stanovených xxxxxxxxx úrovní, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx výběr xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,

- všechny xxxxx z xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx uvedené x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx každou xxxxxxx dávku. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx šipky.

3. Xxxxx xx xxxxxxxx výchozí xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx zvíře xxxxxxx xxxxxxx, obvykle xx xxx xxxx netestuje. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx příznaky, xx xxxxx pitvou ověřit xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx možnost potvrdí, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx.

4. Xxxxx po xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx každého xxxxxxx, xx se předpokládat, xx hodnota XX₅₀ xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx dvou xxxxxx xxxxxxx pohlaví: xxxxxxxx, xxxxxxx toxické xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx klasifikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀ xx xxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxx podnětem pro xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

5. Xxxxxx xxxxxxxx testování x třemi xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx xx možno xxxxxx xxx x xxxxxx alternativní xxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx procesu, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1.

Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 25 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xx udána xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).

Xxx rámečky xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se x xxxxxxxxx pokračuje xx xxxxx šipek xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Dodatku 2.

Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx doplňkovou dávkou.

Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx na základě xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx dávkou 200 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).

Xxx rámečky xx počet xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xx x xxxxxxxxx pokračuje xx směru xxxxx xx do dosažení xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rámečku xxxx xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x příslušnou xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v příslušném xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xx xxxxx dávka, počet xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx druhé).

Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxx až xx xxxxxxxx šedého xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx xxxx podle xxxxxxx vyhodnocení uvedeného x Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.

XXXXXXX 2

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1

X rámečcích xx xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x pohlaví (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx jako xxxxx).

Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).

Šedé rámečky xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" x xxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Po xxxxxxxxx podle xxxxxxxx 1 se xxxxxxxxx xxxxx sleduje, xxxxx xx nedosáhne xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Hodnoty x xxxxxxxxx vyznačují horní xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx znamená, xx XX50 je xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)

(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx tělesné xxxxxxxxx

(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx založených na xxxxxxxxx variantě 1

x) Xxxxxxx dávka 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

&xxxx;

x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx tělesné xxxxxxxxx

x) Xxxxxxx dávka 2000 xx/xx xxxxxxxxx

X.2. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xx xxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxx xxxxx x rozdělení velikosti xxxxxx, xxxxx xxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx, teplotě vzplanutí x xxxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx

1.2 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx x odstupňovaných xxxxxxxxxxxxx, a xx xxxxx koncentraci x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, která xxxxxxx do konce xxxxxx, xx xxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba humánním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o kterých xx známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx následkem xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Příprava

Xxxxxxx 5 dní před xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx se zdravá xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Pevné xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x ovzduší vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx o xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Pokusná zvířata

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Na začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti zvířat xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx).

1.3.2.2 Počet x xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx se x xxxxxxxx testech xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx zvážit použití xxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xx třeba xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X těchto testech xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx látky.

1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Xx xxx dostatečný xxxxx xxxxxx dávek, xxxxxxx xxx, a xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx byl x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x mortalitou x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx LC₅₀ x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.3.2.4 Limitní xxxx

Nedojde-li xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx plynu x koncentraci 20 xx.x^-1 xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx pevné xxxxx x koncentraci 5 xx.x^-1 (nebo - x xxxxxxxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx vlastností sledované xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx x žádné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, považují se xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.

1.3.2.5 Doba expozice

Xxxxxxxxx doba expozice xx xxx 4 xxxxxx.

1.3.2.6 Xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x výměnou xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx rozdělení látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx xx neměl x zásadě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expozice; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx příjem xxxxx jinými cestami.

1.3.2.7 Xxxx pozorování

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxxxxxx na xxxxxxxxx reakcích, na xxxxxxxxx jejich vzniku x xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx do xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx je patrna xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx bezprostředně xxxx xxxxxxxx xxxxx. Exponují xx xx dobu 4 xxxxx xx xxxxxxxx rovnováhy koncentrace xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx by mělo xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxx 22 ^xX ± 3 ^x X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx ideálně xxxx 30 % x 70 %, x výjimkou případů, xxx xx není xxxxx (např. xxxxxxxxxxx x aerosoly). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx vodního xxxxxxx) zabrání xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx potrava xxx xxxx.

Používají xx vhodné xxxxxxx xxx vytvoření x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx musí zaručovat, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx nejrychleji. Xxxxxxxxxx x xxxxxx boxu xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxxxxxx x komoře.

Je xxxxx xxxxxxxx měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:

(x) xxxxxx xxxxxxx vzduchu (xxxxxxxxxxx),

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxx x dýchací xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx expozice (xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx častější xxxxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. U xxxxxxxxx aerosolů, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxx stabilní, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx, xxx xx pokus xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu),

(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx x xx jejím xxxxxxxx xx pozorování xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky. Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx prvního xxx xx xxxxx provádět xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx studii, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xx utracením xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, srsti, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxxx dýchání, xxxxxxx, křečovým xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx stanovuje xx xxxxxxxx xxxxx x v okamžiku xxxxxxx.

Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, se xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx všem změnám xxxxx x dolní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xx zaznamenávají x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx zvířat, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx další xxxxxxxx xxxxxxxx, popis xxxxxxxxx účinků a xxxxxxx xxxxxx. Změny xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx přežijí xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, která xxxx humánně utracena xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. XX₅₀ xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - mezi xxxxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x stupněm všech xxxxxxxxxx, xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, změn xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,

- xxxxxxxx pokusu: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx umístění zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx popsat xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx vzduchu, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxx xx sestaví xx tabulky x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxx:

a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx;

x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu;

x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx objemem xxxxxxx);

Pozn.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx (xxxx. xx xxxx) je xxxxx uvádět nejen xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, nýbrž xxxx, pokud xx xx možné, koncentraci xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx.

x) povaha xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;

x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;

f) xxxxxxxxxx xxxxxx aerodynamického průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odchylka (XXX);

x) doba xx xxxxxxxx xxxxxxxxx;

h) xxxx expozice;

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat);

- xxxx xxxxxxx xxxxx expozice xxxx xx xxxxx skončení, xxxxxx a kritéria xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx;

- všechna xxxxxxxxxx;

- xxxxxxx XX₅₀ xxx xxxxx xxxxxxx stanovená xx xxxxxxxx xxxx pozorování (x xxxxxxxx metody xxxxxxx);

- 95% xxxxxxxx spolehlivosti pro XX₅₀ (xxxxx je xxxxx jej stanovit);

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx (xxxxxxxxxxx) x její xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx stanovení);

- pitevní xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x humánních důvodů xxxxx testu xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀);

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.3. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx zvířat, a xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx a zaznamenávají xx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.

Xxxxxxx se závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx třeba humánním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se nemají xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a takovým xxxxxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres následkem xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x pokusných xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx 24 hodin xxxx zahájením testu xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx je třeba xxxx xx xx, xxx se xxxxxxxxxxx (xxxx. abrazí) xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx její xxxxxxxxxxx. Xxx aplikaci testované xxxxx se připraví xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Při xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx formě, xx xxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx dobrý xxxxxxx s xxxx. Xxx použití xxxxxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu vliv xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxx, v xxxx xxxxx se může xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx kůží, a xx xxxxx relevantních xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx neředěné.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná zvířata

Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx. Xxx xxxxxx i xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx pro xx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx pokusných xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx hmotnosti zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 5 zvířat xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx samic, musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx je x xxxxxxxxx informace, že xxxxx x xxxx xxxxxxx xx výrazně xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxx xxxxxxx.

Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx toxicity xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx hlodavci, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Dávky je xxxxx xxxxxxx zvolit x je třeba xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testované látky.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx být xxxxxxxxxx počet dávkových xxxxxx, xxxxxxx xxx, x mají být xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x mortality. Při xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxx je třeba xxxx x úvahu xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x účinkem, x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀ x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx jednou xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx popsaných xxxxxxx. Xxxxx látka způsobí xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx úplnou xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 14 dní. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxx. Rozhodující xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x doba xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx uhynutí.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx jednotlivě x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx 10 % xxxxxxxxx povrchu xxxx. Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx tato plocha xxxxx; xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.

Testovaná xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu je xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxx obvaz x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X zamezení xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, úplnou xxxxxxxxxxxx xxxx nelze xxxxxxxxx.

Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pokud možno xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx je třeba xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx záznamy. První xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x odpovídající xxxxxxxx mají sloužit xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. pitvou nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zvířat.

Pozorování xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx a xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, slinění, xxxxxx, letargii, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx nejpřesněji. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xxxxx přežijí až xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické změny xx zaznamenávají x xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého xxxxxxx

Xx dokončení xxxxxx xx jednom xxxxxxx xx podá xxxxx xxxxxxx jedné xxxxxxx x xxxx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, zda xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látku. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Pokud je x xxxxxxxxx spolehlivá xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx xx možno xxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z ní xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální skupinu xxxxxx počet xxxxxx xx počátku pokusu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x jinými projevy xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a pitevních xxxxxx. Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x zaznamenat, xxxxxxx-xx xxxxxxx déle xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utracena x xxxxxxx xx xxxxx x bolesti xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx touto xxxxxx. XX₅₀ xx vypočte xxxxxxxxx xxxxxxx. Dále xx hodnotí xxxxx, xxxxx existuje, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x výskytem x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lézí, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx pokud možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx atd.,

- podmínky xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx očištění xxxx x typu xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx užito) x koncentrace,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle xxxxx (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx testu; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),

- xxxx xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx xxxxx, důvody x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat,

- xxxxxxx pozorování,

- xxxxxxx XX₅₀ xxx to xxxxxxx, x kterého xxx xxxxxxxx xxxxx pokus, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),

- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX₅₀ (xxxxx xxx xxx xxxxxxxx),

- křivka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx a xxxx xxxxxxxx (pokud je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx druhém pohlaví,

- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀ v xxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu),

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.4. AKUTNÍ XXXXXXXX (KOŽNÍ XXXXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxxxx xxxxx

Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx snížit xx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx, které xxxxx vyvolat výrazné xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xx vhodný xxxxx xxxx, xxxxxx xx xxxxxxx zvířeti xxxx zda xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x chemická xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5) xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx leptavé xxxxxx. Xx xxxxx vzít x úvahu xxxx xxxxxxxxxx xxxx kyselou xxxxxxx.

x) Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx ze spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx in xxxxx xxxxx, xxxx vyžadován xxxxx xxxx.

x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Jestliže xxxx látka v xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx dermální aplikaci xxxxxxxxx xxx limitní xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x nebylo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kůže, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Rovněž xxxx xxxxx testovat xxxxx xxxxxx toxické xxx xxxxxxxx cestě xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxxxx každé xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx stanovené xxxx xx odečte, xxxxxxxxx x xxxxxxxx popíše xxxxxx podráždění, xxx xxxx xxxxx provést xxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.

Xxxxxxx se závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxx 24 hodin před xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx srsti xx třeba dbát xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx kůže (xxxx. xxxxxx). Xx xxxxx použít pouze xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxxx xxxx výraznější x některých obdobích xxxx. Testované látky xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx zóny xxxxx husté srsti.

Xxx xxxxxxxx s xxxxxxx látkami, případně xxxxxxxxxxxx x práškové xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, případně xxxxx vhodným vehikulem, xxx byl xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxx použití xxxxxxxx xx nutné xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx podráždění xxxx xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx nezředěné.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx albínu králíka.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx xx x in xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. je xxxxxxx), xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx testu na xxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxxxxxx tohoto testu xxxxxxxxxxx leptavé xxxxxx, xx třeba doplnit xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Pro xxxxx test xxxx xxxxx xxxxxxx tři xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, pro xxxxxxxxx xxxxxxx nejednoznačných xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx další xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx postup, xxxxxx xx na xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 ml xxxxxxxx xxxx 0,5 x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kůže xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx kontrola.

1.2.2.4 Xxxx pozorování

Dobu xxxxxxxxxx není možno xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx xx xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nanese xx xxxxx xxxxxx (xxx 6 cm²) xxxx x pokryje xx xxxxxxx mulu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx látku xx mul, x xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxx. Po xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx přidržovat xxxxxx xxxxx xx xxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxx částečně xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxx x mulu x xxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxxxxx testovanou látku xxxxx, xxxxx je xx možné, xxxx xxxxxxx rozpouštědlem, xxx xxx, aby xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 4 xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. tím, xx xxxxxx poleptání, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx. xx 1 xxxxxx xxxx 3 minuty). Při xxxxxxx testování xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 plátky xxxx xxxxxxxx, pokud xx akutní dermální xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx 4xxxxxxxx expozice x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zacházení, xxxxxxxx xx třetí xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x klasifikují se xxxxxx xxxxxxxx xxxx. X případě, že xxxx xxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxx s xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx xx 4 hodinách xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).

Jestliže xx xxxxxxx kožní xxxxxx (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx ukončen.

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx navrhnout delší xxxxxxxx, například pokud xx xxxxxxxx očekávanému xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx x člověka.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x vyhodnocení

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x stupeň xxxxxx xxxx xx 60 xxxxxxxx a xxxx 24, 48 x 72 xxxxx xx xxxxxxxxxx plátku x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx klasifikuje a xxxxxxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx. Vedle xxxxxxxxxx xxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx (nevratná xxxxxxxxx xxxxx xxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx reakcí xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxx histopatologického xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. Z xx musí být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx posouzením xxxxxxx x edému xx xxxxx xxxx pozorování. Xx xxxxx xxxxxx xxxxx všechny xxxxxxx xxxx, popis xxxxxx x xxxxxx podráždění xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx možno tyto xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,

- experimentální xxxxxxxx (včetně relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností testované xxxxx, technik přípravy x čištění xxxx, xxx xxxxxx: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,

- xx xxxxx tabulky xxxxx x xxxxx xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 a 72 xxxxx atd. xx xxxxxxxxxx xxxx),

- popis xxxxxxxxxx xxxxxxx poškození xxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

4. XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx

	Xxxxxxx
1. Xxxxxxxxx xxxxxxx x příškvaru
1.1 Xxxxx xxxxxx	0
1.2 Velmi xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxxx)	1
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx	2
1.4 Xxxxx xx výrazný erytém	3
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx zrudnutí) xxxx tvorba xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) znemožňující xxxxxxxxx xxxxxxx	4
2. Xxxxxxxxx xxxxx
2.1 Xxxxx xxxx	0
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxxx)	1
2.3 Xxxxx xxxx (xxxxxx jsou xxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx)	2
2.4 Xxxxx edém (xxxxxx vyvýšeny asi x 1 mm)	3
2.5 Výrazný xxxx (xxxxxxx více xxx 1 xx x xxxx přesahujíce xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx)	4

4.2 Klasifikace xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (XXX)

XXX xx vypočte jako xxxxxxxxxxx průměr ze xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx a xxxx x jednotlivých xxxxxxxxxxx odečtu x xxxxxxx xxxxxxx x x takto xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx jedinců xx xxxxxxx aritmetický xxxxxx.

Xxxxxxxxxxx	X_XX
xxxxxxxx	X_XX ≤ 0,5
xxxxx dráždí	0,5 &xx; X_XX ≤ 3
xxxxxxx xxxxxx	3 < X_XX ≤ 5
xxxxx xxxxxx	I_KI &xx; 5

X.5. XXXXXX XXXXXXXX (OČNÍ XXXXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx metody

1.1.1 Xxxxxxx xxxxx

Xx xxxxx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx s xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. X xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx. xxxxx kyselé xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxx xx xxxxx očekávat - xxxxxxxx x oku xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX rovné či xxxxx 11,5, není xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Je třeba xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.

x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx validizovaných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo silně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx dále testovány xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx budou xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx při xxxxxxxxx xxxxx metodou.

c) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx zřejmé xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx studii xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx testovat xx dráždivost xxx xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx v xxxxxxxxxxx dávce xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx pokusným zvířatům, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx stupeň podráždění x reakce xx xxxx popíše, aby xxxx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinku. Xxxx pozorování musí xxx dostatečně dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Zvířata xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

24 xxxxx xxxx xxxxxx xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetření xxxx xxx. Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx podráždění xxx, xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx rohovky, xx x experimentu xxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Ačkoliv xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, doporučuje xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx zvířat

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx zvolit xxxx xx jediném zvířeti. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx účinek) xxxx xxxxxxx (irreversibilní xxxxxx) účinky xxx xxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx další xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx specifických xxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířata.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx tří xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nálezů xxxx vyžadovat xxxxxxx xxxxxxx zvířat.

1.2.2.3 Úroveň xxxxx

Xxx testování xxxxxxx xx používá xxxxx 0,1 xx. X xxxxxx xxxxx, xxxx x zrnitých xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 0,1 xx nebo hmotnost xxx 0,1 x (xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx). Xxxxx-xx xx x tuhou xxxx hrubě xxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx rozemlít xx xxxxx xxxxxx. Objem xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.

X látek xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nádobkách xx třeba vystříknout x xxxxxx 0,1 xx xxxxx a xxxxxxxxxx xx do xxx podle xxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vratnost nebo xxxxxxxxxx pozorovaných xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx 21 xxx xx xxxxxxxx studované xxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x klecích. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx každému xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx vaku xxxxxxx xxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx. Xxxxx xx pak xxx xx 1 xxxxxxx xxxxx x xxxx přidrží, xxx xx žádná xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxx neaplikuje, slouží xxxx kontrolní.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx bolest, xxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxxx, že následkem xxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxx oko.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vymývat xxxxxxxx 24 xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 xxxxxxxx xx možno oči xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xx považuje xx xxxxxx.

U některých xxxxx, které xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, kterým xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx vymyjí oči. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 3 králíky. Xxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxx vymývají xxxxxx xx xxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx objemu xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx

Oči xx xxxxxxxxx po 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx-xx xx xx 72 xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx, xx xxxxx zkoušku xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx prodloužit, pokud xxxxxxxxx xxxxxxxxx rohovky xxxx jiné xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx tak, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx vývoj xxxx x xxxxxx vratnost xx xxxxxxxxxx. Vedle xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx ve xxxxxx x jiné xxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxx je xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx oka xxxxxxxxx xxxxx možnosti xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx laboratoře x xx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx oka.)

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx usnadnit xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, ruční xxxxxxxxxx lampy, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Po xxxxxxxxxxx pozorování xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx oči některých xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx mimoto ještě xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. Z xx xxxx být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx stupeň podráždění x daném xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je třeba xxxxx xxxxx xxxxxx x charakteru podráždění, xxxxxxxxxx závažných xxxx x všechny mimooční xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx),

- x xxxxxxxxx formě xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx pro jednotlivá xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. po 1, 24, 48 x 72 hodinách)

- xxxxx všech xxxxxxxxxx závažných lézí,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, charakteru x xxxxxxxxx zjištěného xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx metody xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 a 72 hod.), xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx, oční xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx.,

- popis xxxxx xxxxxxxxxx mimoočních místních xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

4. XXXXXXX

4.1 Stupnice xxxx na xxx

	Xxxxxxx
X. Xxxxxxxx - otok
Xxxx není xxxxxxxx	0
Xxxxx xxxx zahrnující xxxxxx	1
Xxxxxxx edém x xxxxxx víčka	2
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx	3
Edém xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxx	4
X. Xxxxxxxx - xxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx	0
Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx běžné xxxxxxx xx xxxxxxxx koutku)	1
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx	2
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x srsti x xxxxxxx xxxxx oka	3
X. Spojivka - xxxxxxx
Cévní xxxxxx xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxx	1
Splývající cévní xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, difusnější xxxxx xxxxxxx barva	2
Xxxxxxx tmavě xxxxxxx barva	3
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx	0
Nepravidelná xxxxxxxxx duhovky, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxx rohovky (jedna xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), reakce na xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx	1
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx přítomná, xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx	2
x duhovce (xxxxx xxxx více xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx)
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Neprůhlednost xxxx xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxx diseminovaného charakteru, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx viditelné	1
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxxxx, detaily xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx	2
Xxxxxxxxxx xxxx opalescence, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxxxx stěží xxxxxxxxx	3
Úplná xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx	4
X. Rohovka - xxxxxx neprůhlednosti
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xx ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx	1
1/4 &xx; xxxxxx neprůhlednosti ≤ 1/2 plochy xxxxxxx	2
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx	3
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx xxxxxxx	4

4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx dráždivosti (X_XX)

Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X_XX) pro xxxxx zvíře x xxxxx interval xxxxxxxxx xx xxxxxxx podle xxxxxx

I_OI = 2.(X + X + C) + 5.X + 5.X.X

Xxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (I_OP) pro xxxxx interval xxxxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx průměr x X_XX.

Xxxxxx xxxxx xxxx dráždivosti XXX xx xxxxx nejvyššímu X_XX xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx

4.3 Klasifikace

Xxxxxxxxxxx	I_OA
xxxxxxxx	0 - 4,9
xxxxx xxxxxx	5 - 14,9
dráždí	15 - 29,9
xxxxx dráždí	30 - 59,9
xxxxx xxxxx xxxxxx	60 - 79,9
xxxxxxxx xxxxxx	80 – 110

X.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXX

1.1. Xxxx

Xxxxxxxx:

Citlivost x xxxxxxxx xxxxxxxxx testů xxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx senzibilizačním xxxxxxx xx lidskou xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx významné pro xxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx jediná xxxxxxxxx xxxxxx, která xx dostatečně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx všechny xxxxx x potenciálním senzibilizačním xxxxxxx xxx lidskou xxxx a xxxxx xx xx xxxxxx xxx všechny látky.

Xxx xxxxx xxxxx xx třeba uvažovat xxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxx charakteristiky látky, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxx rozdělit xx testy s xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX), x xx xxxxx xxx xxxxxxxx.

Testy s xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx pravděpodobného senizibilizačního xxxxxx xxx lidskou xxxx xxx metody xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Test - XXXX) je xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxx schopnosti xxxxx xxxxxxx senzibilizační reakci xxxxxxxx několik xxxxxxx xxxxx, xx XXXX xxxxxxxxx xx preferovanou xxxxxxxx x adjuvans.

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látek xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xx xxxx Xxxxxxxxxx testu) xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.

X určitých případech xxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx injekci xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx použití Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx důvody.

X této xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx (GPMT) x Xxxxxxxxx xxxx. Lze xxxxxx x jiných xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx.

Pokud xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx uznávanou xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxx x této xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx kůže: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, puchýřky, xxxxxx (xxxxxxx puchýři) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx zarudnutí xxxx xxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx navodit xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx týdne xx xxxxxxxx expozici, x xxxxxxx kterého xx xxxx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxxxxxxx.

Provokační xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx xxxxx vystaveného xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx období xxx xxxxxxxxx, zda subjekt xxxxxx reakcí přecitlivělosti.

1.3 Xxxxxxxxxx látky

Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx použité xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx každých xxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx známo, že xxxx mírný xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxx na xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nejméně 30 % u xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx 15% x xxxxxx bez xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx dává xxxxxxxxxxxx látkám:

Xxxxx XXX	Xxxxx XXXXXX	xxxxxxxx xxxxx	xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx
101-86-0	202-983-3	2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx	alfa-hexylcinnamaldehyd
149-30-4	205-736-8	2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx	kaptax
94-07-7	202-303-5	Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx	xxxxxxxxx

Xxxxx nastat xxxxxxxxx, kdy xxx xxxxxxxxxxx odborném xxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxx kontrolní xxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx.

1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxx nejprve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx období 10 až 14 xxx (xxxxxxxx xxxxxx), x průběhu xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx provokační xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx a stupněm xxxxxx x kontrolních xxxxxx, xxxxx podstoupí xxxxxxx expozici x xxxx indukce x xx jim xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.5 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Jestliže xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku, xxxxxxx se to x použitím xxxx xxxx vhodného xxxxxxxxxxxx xxx, xxx nebyla xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.1 Maximizační xxxx xx xxxxxxxxx (XXXX)

1.5.1.1 Xxxxxxxx

Zdravá mladá xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx podmínky po xxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx testem xx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x závislosti xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx dbát xx xx, aby xxxxxxx x poškození xxxx. Zvířata xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx testu.

1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.5.1.2.1 Pokusná zvířata

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.1.2.2 Počet x pohlaví

Xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx x nejméně 5 xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx xxxxx než 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx možné xxxxx x xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx na dalších xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 kontrolních xxxxxx.

1.5.1.2.3 Dávkové xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dobře xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx střední podráždění xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx použije xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx dvou xxxx třech xxxxxxxxx. Xxx tento účel xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXX.

1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.5.1.3.1 Xxxxxxx

Xxx 0 - Testovaná xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx subkutánních injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, se xxxxxx xx xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx:

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (FCA) xxxxxxx x vodou xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;

Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

Injekce 3: xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x vodou xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx poměru 1 : 1;

Xxx xxxxxxx 3 se xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx s XXX xx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx koncentrace testované xxxxx xxx injekci 3 xx xxx xxxxxx jako xxx xxxxxxx 2.

Injekce 1 a 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx a xx xxxxxxxx hlavě, xxxxxxx xxxxxxx 3 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx 0 - Kontrolní xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx subkutánních xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx:

Injekce 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx s xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;

Xxxxxxx 2: xxxxxxxx xxxxxxxxx;

Xxxxxxx 3: Směs xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx směsí XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).

5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx

Xxxxxxxxx dvacet xxxxx hodin xxxx xxxxxxx indukční aplikací, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx po důkladném xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx sodného xx vazelíně, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodném vehikulu xx napuštěn xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), xxxxx xx xxx přiloží xx testovací xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxxxx rozetřeny a xxxxxxxxx xx vhodného xxxxxxxx; xxxxxxxx lze xxxxxxxxx xxxxx.

6. - 8. den - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx plocha xx xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx a zafixuje xxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 48 hodin.

1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx

20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xx xxxxx xxx se xxxxxxx způsobem aplikuje xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx to třeba). Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx po 24 xxxxxx.

1.5.1.3.3 Pozorování x xxxxxxxxxxx: testované a xxxxxxxxx skupiny

- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, důkladně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (přibližně 48 xxxxx od začátku xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx) xx pozoruje kožní xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxx stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;

- xxxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).

Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, které xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx je kontrolní.

Xxxxx je x xxxxxxxxx výsledků nutná xxxxx provokace (tj. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx znovu x xxxxxxxxx skupinou x vehikulem. Opakovanou xxxxxxxxx xxx také xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.

Xxxxxxx xxxxx reakce x xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x provokačních xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (viz xxxxxxx). K xxxxxxxxx xxxxxxxx nálezů xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx řas.

1.5.2 Buehlerův xxxx

1.5.2.1 Příprava

Xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aklimatizují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx dobu aspoň 5 xxx xxxx xxxxxxxxx testu. Před xxxxxx xx zvířata xxxxxxx rozdělí do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Odstranění srsti xx provede xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, v závislosti xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Je xxxxx xxxx na to, xxx nedošlo k xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx zváží před xxxxxxxxx xxxxx a xx konci testu.

1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Používají xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Lze xxxxxx xxxxx a/nebo xxxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 zvířat v xxxxxxxxx skupině a xxxxxxx 10 xxxxxx x kontrolní xxxxxxx.

1.5.2.2.3 Xxxxxxx úrovně

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx použitá xxx každou indukční xxxxxxxx xx xxxxxx xx takovou úroveň, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx velmi xxxxx xxxxxxxxxx kůže. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x nesenzibilizovaných xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x předběžném xxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx zvířatech.

Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx je xxxxxx použít xxxx xxxx xxxxxxx nedráždící xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Pro xxxx xxxxx je preferován 80% xxxxxx etanol/voda xxx xxxxxxx x xxxxxx pro xxxxxxxxx.

1.5.2.3 Xxxxxx

1.5.2.3.1 Xxxxxxx

Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxx xx xxxxxx srsti (xxxxxxxx ostříhán). Xxxxxx xxxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx řídí xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikovat xxxxx).

Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx komůrkou x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.

Xxxxxx plátkového testu xxxx xxx okluzivní. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx nebo čtverhranný, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx². Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x použitím xxxxxxxx přidržovače, xxx xx zajistila xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx být xxxxx xxxxx xxxxxxxx.

Xxx 0 - Xxxxxxxxx skupina

Jeden xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x to xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem po xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx možno xxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupina není xxxxx, lze použít xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx.

6. - 8. x 13. - 15. xxx - Testovaná x kontrolní skupina

Xxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxx 0 xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx plochu xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx x znovu 13. - 15. xxx.

1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx

27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupina

Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxx xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Xxxxxxxxx plátek xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx aplikuje xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxx část xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx plátek x xxxxxxxxx. Překrývací plátky xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx vhodným xxxxxxx xx xxxx 6 hodin.

1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx

- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxx x tři xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx plátku) xx pozorují xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx uvedené x dodatku;

- xxxxxxxxx po dalších 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx aplikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx kožní xxxxxx znovu pozorují x zaznamenávají.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), provede xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx potřeby znovu x kontrolní xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.

Všechny xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx důsledkem xxxxxxxxxx x provokačních xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). K xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.

2. XXXX A XXXXXX XXXXX (XXXX X XXXXXXXXX TEST)

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx být xxx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx při každém xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX (XXXX A XXXXXXXXX XXXX)

Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx třeba xxxxx xxxxx tohoto testu xxxx xxxx xxxxxx (xxxx. LLNA - xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx) xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx získaných xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látky.

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (XXXX x Xxxxxxxxx xxxx)

Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx tyto xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx získány:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxx morčat;

- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx zvířat;

- xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.;

- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx a xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxx xxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x technice xxxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx test;

- podrobné informace x xxxxxxxx, aplikaci x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxxxxx a celková xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x vehikula, xxxxxxx xxx xxxxxxx a xxxxxxxxx.

Výsledky:

- xxxxxx výsledků poslední xxxxxxxx citlivosti x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx referenční xxxxx, její xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx včetně xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx pozorovaných účinků;

- xxxxxxx histopatologické xxxxxx.

Diskuse xxxxxxxx

Xxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 406.

Xxxxxxx

5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx reakcí

0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

1 = xxxxx xxxx skvrnité xxxxxxxxx xxxx;

2 = xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;

3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx kůže.

5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx senzibilizace

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxx xxxx, kolik xxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxx jako

xxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx

xxxxx alergen (XX. st.) - 9 - 28 % zvířat

xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (III. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx

silný xxxxxxx (XX. st.) - 65 - 80 % xxxxxx

extrémní xxxxxxx (V. xx.) - 81 - 100 % xxxxxx

X.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (28DENNÍ XXXXXXXXX APLIKACE)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx se podává xxxxx xx 28 xxx v odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, x to každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx pozorují, xxx xx zjistily xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxx zvířata, která xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxx a xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx co xxxxxxx vyloučil xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx zvíře xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx, xxxxx účelu studie x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

Pokud xx xx třeba, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx použití vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, pak xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx oleji (xxxx. xxxxxxxxxx) a xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx. Pro nevodná xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx jejich toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx není xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx stabilitu xxxxx xx zvoleném xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx mladých zdravých xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných kmenů. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Podávání xxxxx xx xxxx xxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxxx x x každém případě xxxxx, xxx zvířata xxxxxxxx věku 9 xxxxx.

Xx začátku xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx rozpětí hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

Pokud xx xxxx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx před dlouhodobou xxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx hladinu dávek xx použije nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Pokud xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx počet xxxxxx x počet zvířat, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx další skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 dnů xxxxxxxx xxxxx a xxxxx následujících 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxxx vratnost, trvání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxx xxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění aplikace, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx skupina, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx denní xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx-xx taková xxxx x xxxxxxxxx, lze xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx vzít x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x toxikologických x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx látkách příbuzných.

Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx vyberou xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Nejnižší xxxxxx dávky xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx toxicity (XXXXX). Xxxxxxx xx xxxxxx xxxx- xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx pokrýt větší xxxxxx dávek, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx příliš xxxxx xxxxxx mezi xxxxxxx (xxxx. faktor xxxxx xxx 10).

Xxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxx vodě, xx xxxxxxxx zajistit, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx neovlivňovalo xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x ppm) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxx xxx každý den xx stejnou xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.

Pokud xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dlouhodobou studií, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx použít xxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx-xx test xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx za den xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v potravě xxxx xxxx, xxxxx xxxx dávce xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx provedení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx nenaznačují, xx je třeba xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx 28 xxx. Zvířata xxxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx x cílem xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 xxx, xx zdůvodněných xxxxxxxxx 5 xxx x xxxxx. Xxxxx dávka xx xxxxxx jednorázově xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kanylou. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx může být xxxxx najednou, xxxxxx xx velikosti xxxxxxx. Xxxxx by neměl xxxxxxxx přesáhnout 1 xx na 100 x tělesné xxxxxxxxx, x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx podat x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx xxx podáván xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxx pozorování

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx x tutéž xxxxx xxxx a x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx denně xx provede zběžná xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxxxx moribundní a xxxxxxx xxxxxxxxxxx silnou xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx způsobem x xxxxxxx.

Důkladné xxxxxxxx xxxxxxxxx všech zvířat xx provede xxxx xxxxx xxxxxxxx (za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx porovnání) x dále nejméně xxxxxx xxxxx. Toto xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx klec x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx dobu. Výsledky xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxxxxxxxx x testující xxxxxxxxxx. Je třeba xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx měnily xx nejméně; osoba, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx neměla xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxx skupin.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x exkretů, xxxxx xxxxxxx a vegetativních xxxxxx (xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x případně další. Xxxxxxxxxxxxx se změny xxxxx, xxxxxx, dále xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx pohybů, xxxxxxxxxx x chování (vytrvalé xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx) nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx pozadu).

Xx xxxxxxx týdnu xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx xx xxxx xxxxxx x celková xxxxxxxxx xxxxxxxx. Další xxxxxxxx informace x xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx x testování xxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx xxxx, část X).

Pozorování xxxxxxxxx xxxxxx xx čtvrtém xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx následující studii xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Ovšem x v xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx týdnu 28xxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx x skupin xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které by xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx potravy x xxxx

Zvířata se xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Spotřeba potravy x xxxx xx xxxx xxxxxxx jednou xxxxx, také x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě.

1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů, xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx krve.

Xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxx, se xxxxxxxxx. Krev xx xxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx analýza

Xxxxxxxxxxx analýza krve xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, zvláště xx játra x xxxxxxx, se provede x xxxxx zvířat xxxxx před nebo x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx utracených během xxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx krve¹⁾. Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx stanovení sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, kreatininu, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx fosfatáza, gama xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx původu) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx x některých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Další xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxx xxxx během xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx: hodnotit xx xxxxx vzhled, xxxxx, osmolalitu xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xX, xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxx xxxx. xxxxxxx.

Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx.

Další xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx metabolické xxxxxx: xxxxxxxxx vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx lačno, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx vyšetření xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx látek nebo xxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxx, brát x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx nebo očekávané xxxxxx dané xxxxx.

Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.

1) Vyšetření xx xxxxx je xxxxxxx pro xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx. Hlavní xxxxx pro toto xxxxxxxxxx je to, xx u xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx maskovat xxxxx změny a xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx straně, xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x x aplikace x xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx na lačno, xx třeba biochemické xxxxxxxxx provést xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx testu.

1.2.3.5 Xxxxx

U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, zahrnující xxxxxxx xxxxxxxxx vnějšího xxxxxxx xxxx, všech otvorů, xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxx, a xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, brzlík, xxxxxxx, xxxxx x srdce xxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx od xxxxxxxx xxxxx x xx nejdříve xx xxxxx xx zváží xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx tkáně xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxx tkáně a xxxxxxxxx pozdější histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x makroskopickými změnami, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx oblasti xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxx), míchu, xxxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (konzervované xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx), gonády x xxxxxxxx pohlavní xxxxxx (např. xxxxxx, xxxxxxxx), xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx pro oblast xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxx pokrytí xxxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xxxx (x. xxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxx), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, řez xxxxxx xxxxx (nebo xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx). Podle xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxx.

1.2.3.6 Histopatologické xxxxxxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x tkáních xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx objeví xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx nutno xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze xx xxxxx xxxxxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxx xxxx do xxxxxx zařazeny, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx orgány x tkáně, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXX X XXXXXX XXXXX

X dispozici xxxx xxx údaje x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx formy, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupiny počet xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxx x průběhu xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x humánních xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx každého xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx, typ lézí x procento zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx.

Xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistickou xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxx plánování xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Zpráva x pokusu obsahuje xxxx informace, xxxxx xxxxx xxx získány:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;

- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx jiné xxx xxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx dávek;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx testované látky xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx x přípravě xxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky;

- přepočet z xxxxxxxxxxx látky x xxxxx nebo xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx dávku x xx xx kg xxxxxxx hmotnosti (xxxxx xxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx);

- podrobné xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);

Výsledky:

- xxxxxxx hmotnost x xxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx;

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. zda xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, úchopové xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxx hmotnost při xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx;

- pitevní xxxxxx;

- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- údaje x xxxxxxxx, xxxxx xxxx získány;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Závěry:

4. XXXXXXXXXX

Tato xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx XXXX XX 407.

X.8. AKUTNÍ XXXXXXXX INHALAČNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)

1. XXXXXX

1.1 Úvod

Xxxx pokusem xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx par, xxx xxxx, xxx varu, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (jsou-li xxxxxxxxxxxx).

1.2 Xxxxxxx xxxxxx

Několik xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx jedné xxxxxxxxxxx, x xx xx 28 dní. Xxxxxxx-xx xx xxx dosažení xxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx uhynou, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.3 Popis xxxxxx

1.3.1 Příprava

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x jakých budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x testované xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx data, je xxxxx je využít.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx začátku xxxxxx xxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx).

1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 samců). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx o počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinu 10 xxxxxx (5 xxxxxxx každého xxxxxxx) xx dobu 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví).

1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Použijí xx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupina, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxx - x koncentraci xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx se se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x malém počtu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx střední koncentrace xxxx xxxxxxx toxický xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, mají xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.4 Xxxxxx expozice

Xxxxxx xxxxxxxx xx být 6 xxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx expozice.

1.3.2.5 Expoziční xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zaručuje xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx konstruovat xxx, xxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx shlukování xxxxxx a xxx xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx co xxxxxxxx. Xxx zajištění xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx hlavy nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx příjem xxxxx xxxxxx cestami.

1.3.2.6 Xxxx pozorování

Pokusná xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xxxxx xxxxxx období xxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx třeba zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx kterém xx objeví x xxxx odezní toxické xxxxxx.

1.3.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx dobu 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x otravy xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx xxx xxxx 30 % x 70 %, s xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Udržování xxxxx xxxxxxxxxxx tlaku xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx předběžný xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rychlost xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx tak, xxx podmínky x xxxxx xxxxxxxxxx boxu xxxx xxxxxx. Systém xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx.

Měření xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:

x) Xxxxxx průtoku xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).

x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx zóně. Xxxxx xxxxx expozice xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o více xxx ± 15 %. U xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx není možné xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx koncentrace xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx týká xxxxxx x aerosolů, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx částic xxxxx x xxxxx testované xxxxxxx.

x) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxx xx pozorování provádějí x xxxxxxxxxxxxx systematicky; xxxxx zvíře xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx pozorovat xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a zaznamenávat xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx prohlížení xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Po xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x těžkém xxxxxx xx trpící xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

Xx konci xxxxxx xx x všech xxxxxx včetně kontrolních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:

1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zahrnovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, počtu erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx analýza xxxx: x posouzení xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jeden x těchto xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v séru (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx jako glutamátoxalacetát-transamináza), xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.

Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxxx, fosforu, chloridů, xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy xx lačno, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterasy.

Xxxxx biochemické analýzy xxxxx být v xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.3.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve studii xx xxxxxxx pitva. Xxxxx xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx vysychání. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, varlata, nadledviny x srdce, x xxxxxxx orgány s xxxxxxxxxxxxxxx změnami xxxx xxxxxxx velikosti) je xxxxx přechovávat ve xxxxxxx médiu s xxxxxxx xx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

U xxxxx xxxxxx skupiny, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Pokud se x xxxxxxxx x xxxxxxx xx skupině x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto tkání x x xxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. U zvířat xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx se objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných zvířat.

2. XXXXX

Údaje se xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní musí xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx zvířat s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení xxx.,

- xxxxxxxx xxxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně konstrukce, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx vzduchu x způsobu umístění xxxxxx v boxu, xxxxx xx používán. Xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, popřípadě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx tabulky x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx průtoku vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx; x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx objemem vzduchu); x) povaha xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx; x) skutečná koncentrace x dýchací xxxx; x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (MMAD) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD),

- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx do konce xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx,

- xxxxxx xxx účinku,

- xxxx, kdy byly xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- hematologická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- statistické vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.9. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx v odstupňovaných xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, která uhynou xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, která xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.

1.2 Popis metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx zdravá xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx pokusu se xxxxxxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx se xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx před experimentem. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx třeba xxxx na xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx nejméně 10 % povrchu xxxx. Xx třeba xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx připravované xxxxxx xxxx a x velikosti xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx formy, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxx kontakt x xxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x xxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx morčata. Xx xxxxx použít i xxxx zvířecí druhy, xxxxxx použití xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx začátku studie xx nemělo variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxx a 5 samců) xx xxxxxxx kůží. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Pokud se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx nutno xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x počet zvířat, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx dávku x xxxxx následujících 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupinu xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx skupinu x xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xx být nejméně 6 hodin denně. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx každý den xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx týdenních xxxx čtrnáctidenních je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx stálá xxxxxxx dávky ve xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx množství, xxxxx xx aplikuje xxxxxxx x nejvyšší dávkou. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx nebo jen x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Aplikují-li xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxx kůže, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx u vysoké xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx k xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, je xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx^-1 xxxx xxxxx dávky, která xxxxxxxx možné expozici xxxxxxx, žádné xxxxxxx xxxxxx, není xxxxx xxxxxxx nutná.

1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Xxxxxxx zvířata xx třeba xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx a xxxxxxxx opět odezní xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata se xxxxxxx x klecích xx jednom. Xxxxxxxx xx studované xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba chovat xx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických xxxxxx xxxx jejich xxxxxxxxxxx. Xxxx expozice xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, která xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx xxxx; x vysoce xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx menší. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx největší xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx je xx xxxxxxxxx dobu 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx xxxxxx porézního mulového xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx příjmu. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx pohybu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx. Jako xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx "ochranného xxxxx".

Xx xxxxxxxx xxxx expozice xx xxxxxxxx zbytky testované xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx nebo x xxxxxxxx jiného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxxx, kůže, xxx x xxxxxxx x také xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální nervové xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Hmotnosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx týdně x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxxx nedocházelo xx ztrátám zvířat, xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo chybného xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx všechna xxxxxxx, xxxxx přežila, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx bolestí xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

Xx xxxxx pokusu xx x všech zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx funkce jater x ledvin xxxxxxxx xxxxxxx jeden z xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (dříve xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (dříve xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx.

Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx potřebné xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

Další xxxxxxxxxxx analýzy mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího spektra xxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx pitva. Xxxxx xxxxx, ledviny, nadledvinky, xxxxx x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx. Orgány x xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx, ledviny, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx orgány x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxx xxxxxx skupiny, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické vyšetření xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší dávkou xxxxxx poškození způsobená xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x všech xxxxxx x nižšími xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx statistickou metodu.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx x zvířatech (druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx druhu xxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),

- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,

- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxx jiné xxxxxx,

- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,

- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx.

B.10. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX U XXXXX XX XXXXX

1. METODA

Xxxxxx xx replikací OECD XX 473, Xx Xxxxx Mammalian Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx je nalézt xxxxx, xxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, dochází xxxx xxx x aberacím xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx schopna xxxxxxxxx numerické aberace. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx numerických xxxxxxx x běžně xx x tomuto xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx xxxx příčinou xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx x onkogenech x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx úlohu xxx xxxxxx rakoviny x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat.

Tento xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx možných xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx jsou x tomto xxxxx xxxxxxxxx, je xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx však xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx látky x xxxxxxxx stále xxxx xxxxxxx x xxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx testem nezjistí, xxxxxxx xxxxxx působí xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx DNA.

X analýze xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx stabilizovaných xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx kmenů xxxx primární xxxxxxx xxxxxxx. Použité xxxxx xxxx vybrány xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x kultuře, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxx. Xx třeba xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, jež xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx chromatid, nebo xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).

Xxxx chromatidy: xxxx xxxx lze xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx větší, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx chromatidy), případně xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je kratší x xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx jádro xx mitózy, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.

Xxx: achromatická xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx chromatidy a x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Mitotický xxxxx: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx buněk x xxxx xxxxxxxx buněk; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx populace.

Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx.

Polyploidie: xxxxxxx haploidního xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx diploidní xxxxx (xxxx 3x, 4x xxx.).

Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Buněčné xxxxxxx xx vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, buňky xx xxxxxx, obarví se x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 POPIS XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx

Xx možno xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx krve xxxxxxx či xxxxxx xxxxx).

1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx x vlhkost). U xxxxxxxxx linií x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx a nepřítomnost xxxxxxxxxxx v buňkách. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx nepoužívají. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx: buňky se xxxxx ze zásobních xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dobou xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 ^oC.

Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxx xxx xxxx krev x vhodným xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. heparinem), xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx teplotě 37 ^xX.

1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nejobvyklejší xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (S9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná činidly xxxxxxxxxxxx enzymy xxxx xx Aroclor 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (10) (11) (12).

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx bude xxxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxx je xxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxx případech xx xxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx použity x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx linií by xxx být xxxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxx xxxxxxxxx cytochromu P450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx testované látky

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle x případně xxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx mohou do xxxxxxx přidávat xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, xx delší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx.

1.5 XXXXXXXX XXXXX

1.6 ROZPOUŠTĚDLO

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx existovat xxxxxxxxx, xx by mohlo x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx x aktivitu X9. Používá-li xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx podpořeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx, xxx xxxx xxx, xxx xx to xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx zvažováno xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx ve vodě xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.

1.6.1 Xxxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxx, jež xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x systému x xxxxx xX resp. xxxxxxxxxx.

Cytotoxicita xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, například xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxx. Je xxxxxx xxxxxxxx cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx nízké xxxx xxxxxx toxicity. To xxxxxxx znamená, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx musí být xxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxx signifikantní pokles xxxxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nepřímou xxxxx xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx x xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx detekce xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x nepraktická. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx také xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx generační xxx; ten xxxxx xxxxxxxxxxx celkový xxxxxx, xxxxx ne vždy xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxx x xxxx prodloužení xxxxxxxxxx generačního xxxx xxxx xxxxxxxx značný xxxxxx od vhodné xxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výtěžku xxxxxxx.

U relativně xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx činí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx z xxxxxx 5 µx/xx, 5 xx/xx xxxx 0,01 M.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx je xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx látka xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx kultivace x xxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx x xxxxxxxxx účinku xxx xxxxxxxxxxxxx vyšších, xxx xx nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx koncentracích x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx užitečné vyhodnotit xxxxxxxxxxx na xxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, protože xx xxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxxxx změnit x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, séra, X9 apod. Nerozpustnost xx dá xxxxxxx x prostým okem. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.6.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx každého experimentu, xx již x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xx, je xxxxx zařadit souběžné xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx). Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx aktivaci x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx používá xxxxx xxxxxxxxx, x to xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nad xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Koncentrace xxx xxxxxxxxx kontrolu je xxxxx xxxxxx xxx, xxx účinek byl xxxxxx, xxx neodhaloval xxxxxxxxxxx přímo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Mezi xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

Metabolická xxxxxxxx	Xxxxx	CAS	XXXXXX
Xx	methyl xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx	66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5	200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1
Xxx	xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx monohydrát xxxxxxxxxxxxxx	50-32-8 50-18-0 6055-19-2	200-028-5 200-015-4

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx mohou xxxxxx x xxxx xxxxxx látky. Tam, xxx xx xx xxxxx, xx vhodné xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx.

Xxx xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu, xx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx xxxxx zařadit xxxxxxxx bez jakéhokoliv xxxxxxxxx.

1.6.3 Xxxxxx

1.6.3.1 Xxxxxxxx testovanou xxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx působí xxxxxxxxxx xxxxxx za xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx kultury; x xxxxx xx doporučuje xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx. Pokud xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx minimální (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx x testu xxxxxx postupy, xxxx xx použití neprodyšně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (15).

1.6.3.2 Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx

X prvním xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx ní xx xxxx 3 - 6 hodin a xxxxxx xx xxxxxxxxx x čase xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx začátku expozice (12). Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x bez xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx do xxxx xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx xxxxx xx hodnotí xxxxx xxx době xxxxxxxx xxxxx, xxx xx 1,5násobek xxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx od případu. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx rozhodnutí zdůvodnit.

1.6.3.3 Příprava xxxxxxxxxx

Xx buněčné xxxxxxx xx působí Colcemidem® xxxx kolchicinem obvykle xx xxxx 1 - 2 hodin xxxx xxxxxxxxx kultivace. Xxxxx buněčná xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zpracovává xxxxxx. Xxxxxxxx chromozómů xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, fixace x xxxxxxxxx.

1.6.3.4 Xxxxxxx

Xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jelikož xxxxxxx xxxxxxx často xxxxx k rozbití xxxxxxxx podílu metafázických xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x hodnocených xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází, xxxxxxxxxxx x obou xxxxxx, xxxxx byly xxxxxxx. V xxxxxxx, xx je počet xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X xxxx účelem xxxxx xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxxx experimentální xxxxxxxxx je buňka, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx včetně jejich xxxxx a četnosti x experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Gapy xx zaznamenávají xxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx četnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Současně xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kulturách.

Xxxxxxx se xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se všechna xxxx uvedou x xxxxxxx tabulce.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx experimentálních podmínek. X nutnosti potvrdit xxxxxxxxx xxxxxxxx bylo xxxxxxxxx x odst. 1.4.3.3. V následných xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx modifikaci použitých xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx lze xxxxxxxxxxx, xxxxx koncentrační xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx kritérií, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx výsledků testu xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Statistická xxxxxxxxxx xx však neměla xxx jediným určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxx inhibovat xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx počtu xxxxx x endoreduplikovanými xxxxxxxxxx xxxx naznačovat, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněčného cyklu (17) (18).

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx výsledky nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxxxx považuje za xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

XXXXXX X XXXXXXX POKUSU

Xx xxxxxx x xxxxxxx pokusu je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.

Xxxxx:

- xxx x zdroj xxxxx,

- karyotyp x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxxxx o délce xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxx, xxx xxxx použita xxxx krev xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxx xxxxx, xx-xx xx xxxxx - xxxxxx udržování xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx to xxxxx

- xxxxxxx xxxxx chromozomů.

Podmínky xxxxxx:

- název xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx

- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x dispozici,

- xxxxxxx média, xxxxxxxxxxx XX₂, je-li to xxxxx

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx teplota,

- xxxx kultivace,

- xxxx působení,

- xxxxxxx buněk na xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx nutné

- xxx x složení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,

- pozitivní a xxxxxxxxx kontroly,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- počet analyzovaných xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx toxicity, xx. xxxxxx konfluence, údaje x buněčném xxxxx, x počtu xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxx srážení,

- xxxxx o xX x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- definice xxxxxxx, xxxxxx xxxx,

- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx aberacemi x xxx chromozómových xxxxxxx xxx xxxxxx experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,

xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, včetně xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Diskuse xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.11. MUTAGENITA - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX V KOSTNÍ XXXXX XXXXX XX XXXX

1. XXXXXX

Metoda je xxxxxxxxx OECD XX 475, Mammalian Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 ÚVOD

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx u xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx x buňkách xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx aberace mohou xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx daná xxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxxx numerické xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx jevy, jež xxxxxxxxx změny x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxxxx systémech.

X xxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxx je kostní xxxx, protože se xxxxx x tkáň xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx dají xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xx x tomto xxxxx xxxxxxxxxxx.

Tento xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx je zvláště xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx brát x xxxxx xxxxxxx metabolismu xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x když xxx mohou xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x mezi xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx byl předtím xxxxxxx xxxxxx in xxxxx.

Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, že xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxx použití xxxxxx xxxxx.

1.2 DEFINICE

Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx projevuje xxxx xxxx jedné, případně xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx spojení xxxx chromatid na xxxxxxx xxxxx (zahrnuty xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)

Xxxx chromatidy: xxxx zlom lze xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx vzniklá mezera xx xxxxxxxxx chromatidy xx xxxxx, než xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále xxx x případech, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx v xxxxx zlomu je xxxxxxxxxxx (xxxx mimo xxx xxxxxxxxxx), případně xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x důsledku xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx mitózy, nýbrž xxxxxx xxxxx S-fáze. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.

Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx dělený xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx stupeň proliferace xxxx xxxxxxxx.

Numerická xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx oproti normálnímu xxxxx charakteristickému pro xxxxxxx xxxxx.

Polyploidie: xxxxxxx hapoidního počtu xxxxxxxxxx (n) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (tedy 3x, 4x xxx.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury zjistitelná xxxxxxxxxxxxxx analýzou buněčného xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxx vystaví xxxxxxxxx látce a xx xxxxxxx xxxx xx působení xx xxxxxx. Xxxx usmrcením xx xx ně xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx kolchicinem xxxx Xxxxxxxxxx®). Z xxxxx kostní dřeně xx pak xxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Výběr živočišného xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx ovšem xxxxxx x jakýkoliv xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx studie měly xxx xxxxxxxxx x x každého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Podmínky chovu

Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X, vlhkost xx xxxx být 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x kde xxxx xxxxx xxxxxxxx. Zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x laboratorních podmínkách.

1.4.1.4 Příprava xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx, xxxx podáním zvířatům xx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx se mohou xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Je třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum

Rozpouštědlo / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx příliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, aby xxx je xx xxxxx, bylo na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx stejně.

Pozitivní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad spontánní xxxxxx. Dávky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx než xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx intervalu. Xxx xx xx xxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx vhodných xxx xxxxxxxxx kontrolu:

Látka	XXX	EINECS
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	759-73-9	212-072-2
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
cyklofosfamid xxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x zpracované xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací x x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx pouze xxxxx odběr xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx použít i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx

X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx pět analyzovatelných xxxxxxx každého pohlaví. Xxxxx x xxxx, xxx se studie xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x použití xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx pohlavími xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Tam, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látkám xxxx xxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx test xx zvířatech odpovídajícího xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx schéma

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jednorázově. Xxxxx se xxxxx x objemnou dávku, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx dávky xx xxx xxxxxx v xxxxxxx nanejvýše několika xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Vzorky xx odebírají xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxx 12 - 18 xxxxx) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx vliv xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx vzorků po 24 hodinách xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx v daném xxxxxxxxxx režimu xxxxx xxxxxx xxxxxxxx než xxxxxx xx xxx, xx xxxxx provést xxxxx odběr vzorků 1,5xxxxxxxx délky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxx odeberou xxxxxx. X xxxx xx xxxxx interval xxxxxx 3 - 5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4 - 5 xxxxx. X xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x zjišťují xx x nich xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.3 Dávkování

Xxxxxxx-xx se studie xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxx x dispozici xxxxx xxxxxx údaje, xx xxxxx xx provádět x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxx xxx první xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxx x toxicitě xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx pozdější xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Ta je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx dávkách xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx byly xxxxxxx. Látky, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx případu. Xxxxxxxx xxxxx může být xxxx definována jako xxxxx, xxxxx xxxx x určitým xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx než 50 %).

1.5.4 Xxxxxxx test

Xxxxxxxx test xxx xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti v xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x jeden xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxxxxx se xx základě xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx celá xxxxxx xx použití xxx dávkových xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx limitní xxxxx 2&xxxx;000 mg/kg hmotnosti xx xxx xxx xxxx xxxxxx do 14 dnů, x 1&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxx době xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávkové xxxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx látky

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx buď žaludeční xxxxxx, xxxx intraperitoneální xxxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, která se xx sondou xxxx xxxxxxx najednou xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx xxx xx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxx xx ni xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xx.

1.5.7 Xxxxxxx

Jakožto xxxx xxxxxxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx 1000 buněk x každého jedince.

X xxxxxxx jedince xx xxxxxxxxx minimálně 100 buněk. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx při xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx pozitivních x negativních kontrol) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. Xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metafází spojeného xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.

2. ÚDAJE

2.1 Zpracování xxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počet xxxxxxx xx jednu buňku x xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx strukturálních xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jejich xxxxx x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx se, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx o xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, xx možné údaje xx xxx xxxxxxx xxx statistickou analýzu xxxxxxx.

2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx používá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Nárůst xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vyvolávat numerické xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx chromozómy může xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx výše uvedená xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx vyvodit x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, i když xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.

Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx chromozómové xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kostní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx nevyvolává.

Xx třeba xxxx x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.

Pokusná xxxxxxx:

- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,

- xxxxx xx studie xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx provedena,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, že se xxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxx nebo xx cílové xxxxx,

- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,

- podrobný xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vzorků,

- xxxxxx hodnocení xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x doba xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx zvíře,

- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- známky xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxx x xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx x směrodatná odchylka,

- případné změny xxxxxxx,

- vztah xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- statistické xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx negativních kontrol,

- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Závěry.

B.12. XXXXXXXXXX - IN XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX X XXXXXXX ERYTROCYTECH

1. XXXXXX

Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Mammalian Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 ÚVOD

Xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx x xxxxx slouží xx zjištění poškození, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x chromozómech xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx erytroblastů; test xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x kostní xxxxx resp. x xxxxxxxxx krve xxxxxx, xxxxxxx hlodavců.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx výsledkem xx xxxxx mikrojader představujících xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx x buňky xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx, že xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx důkazem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

X xxxxx testu xx xxxxxx xxxx hlodavců xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx tvoří. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx krvi je xxxxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx je xxxxx xxxxxxxxx druh dostatečně xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx numerické chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx podle xxxx kritérií, xxxx xx přítomnost či xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx centromerické XXX x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx zralých (xxxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x xxxxxxxxx xxxx obsahujících xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx zralých xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx použít x xxxxxxx, xx xx xxxxxxx testují xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxx mikronukleus xxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx rizika xxxxxxxxxx, xxxxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx metabolismu xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx reparace XXX, x xxxx xxx xxxxx xxx xxxx živočišnými xxxxx, xxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx in xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x systému xx xxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx tkáně xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx tohoto xxxxx xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): oblasti xxxxxxxxxx, se kterými xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx dceřiných xxxxx.

Xxxxxxxxxx (mikronukleus): xxxx xxxxx oddělená xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx reprezentovaná opožďujícími xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx erytrocyt: zralý xxxxxxxxx, jemuž xxxxxxx xxxxxxxx x jenž xx xx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx ribozómy, xxxxx xxx lze xxxxxxx xx xxxxxxx, normochromních xxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxxx xx ve vhodnou xxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxx, xxx se xxxxxx (1-7). Xxxxx xx používá periferní xxxx, odebere xx xx vhodné xxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxx, jež xx xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx používá xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx co xxxxxxxxx. X preparátech se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx; může xxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx periferní xxxx, xxxxxxxxxx se xxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx za xxxxxxxxxxx, že se x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx xxxx xx x xxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxxxx citlivost xxxx xxxxxx, jež xxxxxxxxx strukturální nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x části X.

Xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx dospělí jedinci xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Jedinci xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toho, jak x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x je-li xx xxxxx, látka xx xxxx podáním xxxxxxxx rozpustí nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx podávat xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx preparáty, ledaže xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx ji neovlivní.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum

Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx vyvolávat toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx na xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx každé xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx stejně.

X xxxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx tak, xxx xxxx účinky xxxxxx, ale přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látku x vzorek xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx látek xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
N-ethyl xxxxxxxxxxxxxxx	759-73-9	212-072-2
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x mikrojádry x x xxxxxxxxxxxxxxxxx variabilitě xxxx xxxxxxx. Aplikuje-li xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx jeden xxxxx vzorků, xx xxxxxxxxxxxx dobou první xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x neovlivněných xxxxxxx, xxxxxx existují xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx prokazující, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává žádné xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Používá-li xx xxxxxxxxx krev, xxxx xxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 xxxxx), xxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx

V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx musí být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxxx druhu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx pohlavími xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx postačující. Xxx, kde xxxxxxx xxxxxxxx chemikáliím xxxx xxx závislá na xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx schéma

Xxxx xx doporučit xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxx, xxx xxxx xxxx dávek x 24xxxxxxxxxx intervalech). Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xx x xxxxx xxxxxxxxxxx neprokáže xxxxxxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx tak xxxxxx, až xx xxxxxxx toxicita, xxxx xxxx xxxxxxx limitní xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx až xx xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxx, například xx dvě xxxxx xx xxx podané x xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx.

Test xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:

(x) Xx xxxxxxx se xxxxxxxxxx látkou působí xxxxxxxxxxx. Vzorky xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx dříve než xx 24 xxxxxxxx x celkově xx xxxxxxx xxx xx 48 hodinách od xxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx vzorky xxxxxxxx xxxxx xxx po 24 xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx ne xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx od xxxxxx xxxxx, xx vhodnými xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx vzorku, xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxx 72 hodiny. Xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx xxxxxxxxx odpověď, xxxx již xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

(b) Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xxx nebo xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), odeberou xx vzorky x xxxxxxx xxxxxx dřeně xxxxxx xxxx 18 x 24 xxxxxxxx xx posledním podání xxxxx a v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 hodinami xx xxxxxxxxx podání xxxxx (12).

Xx-xx xx xxxxxxxxxx, mohou xx mimoto použít x další odběrové xxxxxxxxx.

1.5.3 Dávkování

Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx laboratoři xx xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx použijí x xxxxxx xxxxxx (13). Při zjištění xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dávky xxx, xxx xxxxxxxxx rozmezí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx je xxx třeba použít xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx při xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx byly xxxxxxx. Xxxxx, xxx v xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx biologickou xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx mitogeny, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx xx případu. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx dávka, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx dřeni (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů x xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxx).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx hmotnosti x xxxxx xxxxx xxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxx nevyvolává xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx na základě xxxxx o xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxx za xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Pro dlouhodobé xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx době xxxxxx xx 14 dnů, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx než 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zapotřebí xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.5.5 Aplikace látky

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx buď xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx přijatelné x xxxx způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, závisí xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 ml/100 x hmotnosti; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx byl xx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx variabilita.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx dřeně / xxxx

Buňky xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zvířete. Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xxxx vyjme x xxxxxx xxxx xxxxx, buňky xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx metodami. Xxxxxxxxx xxxx xx získává x ocasní xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxx. Krevní xxxxx xx xxxxxxxx za xxxxxxxxx stavu xxxxxx (8) (9) (10), xxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxxxx obarví. Xxxxxxxx xxxxxxx specifického xxx XXX (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) nebo Xxxxxxx 33258 s xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx není XXX xxxxxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xx nedala xxxxxx xxxxx xxxxxxx (např. Xxxxxx). Xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx kolony xx xxxxxxxx xxxxxxxx x odstranění buněk x xxxxxx (16) - xxxxx tyto xxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.5.7 Xxxxxxx

X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). X xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx minimálně 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních kontrol) xx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nezávisle zakódují. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx minimálně 2000 xxxxxxxxx erytrocytů x zaznamená xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx získat xxx, xx se mikrojádra xxxxxxxxx xx zralých xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x celkového počtu xxxxxxxxxx menší xxx 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Pokud xxxx zvířata exponována xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů xxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx vyhodnotit x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx erytrocytů na xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy (xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx analýza - xxxx cytometry), xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Údaje x xxxxxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx zvíře. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x mikrojádry a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx všech xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxx, xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx x zralých xxxxxxxxxxxx (xxxxx byly xxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx erytrocytů x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry xx xxxxx xxx každého xxxxxxx. Xxxxxx-xx žádné xxxxxxx x xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, xx xxxxx údaje za xxx pohlaví pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Ke zjišťování xxxxxxxxxxx výsledku se xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx na koncentraci xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx počtu xxxxx x mikrojádry xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx xxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky xx třeba vyjasnit xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.

Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx experimentů sice xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech xxxx nelze xx xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.

Pozitivní xxxxxxxx mikronukleus xxxxx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxx mikrojader, xxxx xxxxxxxx chromozómového xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířecího xxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx dřeni příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mikrojader x xxxxxxxxx erytrocytech.

Xx xxxxx xxxxxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Rozpouštědlo / vehikulum:

- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula

- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x rozpouštědle/vehikulu, pokud xx známa.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx x xxxxxxx jedinců,

- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx apod.,

- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx počátku testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,

- xxxxx xx xxxxxx pro určení xxxxxxx, byla-li provedena,

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx látka dostala xx celkového xxxxx xxxx xx cílové xxxxx,

- případný xxxxxx koncentrace xxxxx x xxxxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti),

- podrobnosti x xxxxxxx potravy x xxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- metody měření xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry,

- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx se studie xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx nebo nejednoznačná.

Xxxxxxxx:

- známky xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx každého xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx,

- vztah dávka - účinek, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy x metody,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx x historických xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.13/14. MUTAGENITA - TEST XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX

1. METODA

Xxxxxx xx replikací XXXX TG 471, Xxxxxxxxx Reverse Mutatiton Xxxx (1997).

1.1 ÚVOD

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx Escherichia xxxx (xxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx tryptofan). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx delece xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxx x chromozómu xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx bakteriálního testu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kmenu xx xxxxxxxxx stavu a xxxxxxxx xx funkční xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx základní xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx změněná bakteriální xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx za xxxxxxxxxxxxx aminokyseliny, xxxxxx xxxxxxxx mateřský zkušební xxxx.

Genové xxxxxx xxxx u člověka xxxxxxxx řady genetických xxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx xxxxxx x onkogenech a xxxxxxxx supresorových xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxxx zvířat roli xxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx charakteristikami, xxxx xxxx xxxx citlivější xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx citlivých sekvencí XXX v xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx velké xxxxxxxx a eliminace xxxxxxx xxxxxxxx DNA xx xxxxxxxx takových xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xxx xxxx náchylné x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx některé užitečné xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx testy xxxxxxxxxx mutací je x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx databáze výsledků xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx osvědčené xxxxxx xxx testování xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Test xxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxxx xxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx závislém xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx. tryptofanu), xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nezávislý.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páru xxxx xxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x XXX. Při xxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx změně xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx místě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, jež způsobují xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx více xxxx xxxx x XXX, čímž se xxxx čtecí rámec x XXX.

1.3 XXXXXXX XXXXX

V xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx buňky, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx metabolismu, xxxxxxxxxxxxx struktuře a xxxxxxxxx xxxxxx DNA. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx metabolické aktivace xx xxxxx ovšem xxxxxxxx dokonale xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx in xxxx, takže xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dané xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx mutací xx xxxxx používá xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a zvláště xxxxxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx rozsáhlé xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx mnohé xxxxxxxxxx, xxxxx jsou x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx se xxxxx testem xxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx veličin, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx dostupnosti. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx reverzní xxxxxx zvyšují, xxxxx xxxx x tomu, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx.

Bakteriální test xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxx třídy chemických xxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxx silně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (kupříkladu xxxxxx antibiotika) x xxxxx, x xxxxx xx předpokládá xxxx xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx systém xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx některá xxxxxxx xxxxxxxxxx); x takovém xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx u xxxxx.

Xxxxx sloučeniny, xxx xxxx xxx xxxxx xxxxx pozitivní, jsou xxxxxxxx karcinogenní xxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx chemické xxxxx, x existují xxxxxxxxxxx, xxxxx tímto xxxxxx xxxxxxxx nejsou, xxxxxxx xxxxxx xxxxx, negenotoxickým xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4 XXXXXXX XXXXXX

Suspenze xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxx klasické xxxxxxx xxxxxx "xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xx suspenze xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx na xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x smísí x xxxxxxx xxxxxx a xx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx půdu. Při xxxx metodách xx xxx xx xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kolonie xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Je xxxxxxx několik xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx. X nich nejběžnější xxxx klasická xxxxxxx xxxxxx ["xxxxx xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), preinkubační metoda (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x suspenzní xxxxxx (11). Xxxx xxxx popsány jejich xxxxxxxxxx pro testování xxxxx xxxx par (12).

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx týkají xxxxxx xxxxxx xxxxx incorporation x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx metody xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx aktivací, xxx xxx xx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxx, kam xxxxxxx alifatické xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, aldehydy, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, alylové xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx (3). Xxxx bylo xxxxxxxx, xx existují xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx procedur xxxx xxxxxxxx. Xx xx xx xxxxx xxxxxxxx jako xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx jiných xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx případy" (xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx jejich xxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x těkavé xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.5. POPIS XXXXXX

1.5.1 Xxxxxxxx

1.5.1.1 Bakterie

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (zhruba 10⁹ xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx stacionárním xxxxxx xx nepoužívají. Xxxxxxxx xx, xxx kultury xxxxxxx xxx experiment xxxxxxxxxx xxxxxx titr xxxxxxxxxxxxxxx bakterií. Titr xx xx xxxxxxxx xxx z historických xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x jednotlivých xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx.

Doporučená xxxxxxxxx teplota xxxx 37^xX.

Použije se xxxxxxxxx pět bakteriálních xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; TA 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; TA98; x XX100); x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxxx xxxx XX x xx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx vyvolávající xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx se xxxx detekovat pomocí xxxxx X. xxxx XX2 xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx mají na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx XX. Xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů tato:

- X. xxxxxxxxxxx XX1535 x

- X. typhimurium XX1537 xxxx XX97 xxxx XX97x a

- X. xxxxxxxxxxx TA98 x

- X. xxxxxxxxxxx XX100 x

- E. xxxx XX2 xxxX nebo X. coli XX2 xxxX (pKM101) xxxx X. typhimurium XX102.

X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx křížové xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 nebo xxxxxx DNA reparačně xxxxxxxxxxxx kmen X. xxxx (xxxx. X. xxxx XX2 nebo X. coli XX2 (xXX101)).

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx postupů xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx markeru x xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx preparát xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx závislost na xxxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxx (xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxx). Xxxxxxx xx xxxxx zkontrolovat x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx R-faktor xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx v xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx TA98, XX100 x XX97x nebo XX97, XX2 xxxX (xXX101) x rezistence xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx x xxxxx XX 102); přítomnost xxxxxxxxxxxxxxxxxx mutací (xx. xxx xxxxxx x X. typhimurium xxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxX xxxxxx x X. xxxx nebo xxxX xxxxxx x S. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx spontánně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx frekvenčním xxxxxxx očekávaném xxxxx xxxxxxxxxxxx kontrolních xxx xxxx laboratoře x xxxxx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxx x literatuře.

1.5.1.2 Médium

Xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx agar (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx E x xxxxxxxx) x vrchní xxxx obsahující xxxxxxxx x biotin nebo xxxxxxxxx umožňující xxxxxxx xxxxxx buněk (1) (2) (9).

1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx používá kofaktorem xxxxxxxxxxxxxx post-mitochondriální frakce (X9) připravená z xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx kombinace xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (18) (20) (21). Xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x koncentracích xxxx 5 a 30 % x/x xx směsi X9. Xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx záviset xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakci x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. X azobarviv a xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).

1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / příprava

Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx mohou do xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx xxxx. Je xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx jejich xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.5.2.1 Xxxxxxx kmeny (xxx 1.5.1.1.)

1.5.2.2 Koncentrace

Xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého množství xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xxx účelné xxxxxxxx xxxxxxxx x nerozpustnost x předběžném xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx pozadí nebo xxxxxx stupně xxxxxxx xxxxxxxxx kultur. Xx xxxxxxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxxxxx x konečné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, viditelného x xxxxxx okem.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx látek, jež x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx mělo být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx nerozpustných. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx nižších než 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx, se xxxxxxx až do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx pěti různých xxxxxxxxxxxxxxxx koncentrací se xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx experimentu. Xxxxxx-xx xx koncentrační xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Testování xx koncentrací xxxxxxx xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µl/misku xxxxxxxx x úvahu, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx podstatné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutagenních xxxxxxxx.

1.5.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Každý test xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací, xxx xxx xx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx takové xxxxxxxxxxx, xxx prokazují xxxxxxxxxxx xxxxxx testu.

U xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx látka xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Příklady xxxxx, jež jsou xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx	781-43-1	212-308-4
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx	57-97-6	200-359-5
xxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5
2-xxxxxxxxxxxxx	613-13-8	210-330-9
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2

Xxxxxxxxxxx xxxxx je vhodnou xxxxxxxxx kontrolou xxx xxxxxxx metabolické aktivace xxxxxxxxxxx:

Látka	XXX	XXXXXX
Kongo červeň	573-58-0	209-358-4

2-aminoantracen xx xxxxxxxxx jako xxxxxx xxxxxxxxx účinnosti xxxxx X9. Xxxxx xx 2-xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx X9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx mutagenem, xxxxx xxxxxxxx metabolickou aktivaci xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, uvádí xxxx xxxxxxx:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
Xxxx xxxxx	26628-22-8	247-852-1	XX 1535 a XX 100
2-xxxxxxxxxxxx	607-57-8	210-138-5	XX 98
9-xxxxxxxxxxxx	90-45-9	201-995-6	XX 1537, XX 97 x XX 97a
XXX 191	17070-45-0	241-129-4	XX 1537, XX 97 x XX 97x
xxxxx-xxxxxxxxxxxx	80-15-9	201-254-7	XX 102
xxxxxxxxx C	50-07-7	200-008-6	XX uvrA x XX 102
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx	70-25-7	200-730-1	XX2, WP2uvrA x XX2xxxX (xXX101)
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx	56-57-5	200-281-1	XX2, XX2xxxX x WP2uvrA (xXX101)
Xxxxxxxxxxxx (AF2)	3688-53-7		xxxxx xxxxxxxxxx plazmidy

K xxxxxxxxx kontrole xxx xxxxxx x jiné xxxxxx referenční xxxxx. Xxxx-xx dostupné, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx x chemické třídě.

Xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, bez testované xxxxx, se xxxxxxx xx jinak xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.3 XXXXXX

Xxx xxxxxxxx xxxxxxx metodě (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se obvykle xxxxx 0,05 nebo 0,1 xx testovaného xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx bakteriální xxxxxxx (xxxxxxxxxx zhruba 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) a 0,5 xx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx vrchního xxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx post-mitochondriální frakce (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx směsi) s 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx roztokem. Xxxxx každé xxxxxxxx xx promísí a xxxxxx xx xxxxxx xxxxx x minimálním xxxxxx. Vrchní agar xx xxxxx před xxxxxxxx ztuhnout.

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx testovaná látka / xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx preinkubovat x xxxxxxxx xxxxxx (obsahujícím xxxxxx 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx metabolickým xxxxxxxxxx systémem (0,5 xx) obvykle xx xxxx 20 xxx xxxx xxxx xxx 30 - 37 ^xX; potom xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxxxxx agarem. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx xxxxxxxx a 0,5 ml xxxxx X9 nebo xxxxxxxxxx xxxxx s 2,0 xx xxxxxxxx agaru. Xxxxxxxx se během xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx odhad xxxxxxx xx xxx xxxxxx dávku xxxxxx xxx xxxxx. Duplicitní xxxxxxxx xx přijatelné, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x zatavených nádobách (12) (14) (15) (16).

1.5.4 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxx testu se xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^xX xxx xxxx 48 - 72 xxxxx, xxxxx xx spočítají xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx.

2. XXXXX

2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxx se xxxxxxxxxx jako počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Rovněž xx xxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx jak x negativní xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx kontrola xxx působení, byla-li xxxxxxx), tak x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx látku x xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontrolu (xxxx. xxx xxxxxxxx rozpouštědlo) xx uvedou xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Verifikace xxxxxx xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od případu. Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepovažuje xx xxxxx, xx xxxxx xx zdůvodnit. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx zvážit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx ("plate xxxxxxxxxxxxx" xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxx metabolické xxxxxxxx.

2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx závislý xxxxxx xx sledovaném xxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxx koncentracích x minimálně jednoho xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxx (23). Xxxx první xx xxxxxxx biologická relevance xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (24), statistická významnost xx xxxx neměla xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.

Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx reverzní xxxxxx ukazují, xx xxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxx typu xxxxxxxxxx xxxx xxxx posuzovaných xxxxxx x xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx daných xxxxxxxxxx xxxxxxxx není testovaná xxxxx xx zkušebním xxxxx xxxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx informace:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xx známa.

Xxxxx:

- použité xxxxx,

- počet xxxxx x kultuře,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- množství xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxx (x xx xxxx μx) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,

- použitá xxxxx,

-typ x xxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx),

- postupy xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).

Xxxxxxxx:

- xxxxxx toxicity,

- xxxxxx srážení,

- počty xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx revertantních xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- údaje ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních kontrol xxxxxx rozpětí, průměrů x směrodatných xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.15. XXXXXX XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kmeny xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mohou xxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx xxx a x xxxxxxxxxxxx aktivací.

Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx vzniku xxxxxx x červených, xxxxxx vyžadující xxxxxx (xxx-1, xxx-2) xx xxxxxxx, xxxxxx vyžadující xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx systémy, xxxx xx indukce rezistence xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx XX 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx mutacemi xxx 2-1, xxx 4-17, xxx 1-1 x trp 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx typu xxxxxx bazí, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx supresorové mutace. XX185-14X nese xxxxxx xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxx 3-10, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny.

X xxxxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx využívaným xxxxxx X₇, xxxxx xx xxxxxxxxxxx pro ilv 1-92.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Roztoky xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx se nemá xxxx xxxxxx vyšší xxx 2 objemová % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxx, aceton nebo xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx systémem xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po aplikaci xxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy x doplněná xxxxxxxxx. Xxxxx jiných xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakcí xx postupů může xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14X x xxxxxxxxx kmen D7 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx genových xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx xxx rovněž xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx

Xxxxxxxxxxxx kultivační xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Negativní x xxxxxxxxx kontroly

Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx současně. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mají být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx nejvyšší použitá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xx xxx rozpustnosti látky xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší koncentrace xxx látky xxxxxxxxx, xx xxxx rozpustné, xx xxxxxx xxxxxx xx případu.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx jsou xxxxxxxxxx po xxxx xxx xxx 28 xx 30 ^oC xx tmě.

1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx

Je nutno xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx x prototrofními xxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 3-10 s xxxxxx xxxxxxx rychlostí xxxx být počet xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje.

1.2.3 Popis xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxx stacionární xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 10⁷ xxxxx/xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxx xx 18 h. při 28 xx 30 ^xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému je xxxxxxx v průběhu xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx ovlivnění jsou xxxxx centrifugovány, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx médium. Xx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, je xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx. Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o:

- použitých xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, teplota x trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx expozice, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly,

- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx je xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae xxxx xxx xxxxxxxxxx mezi xxxx (obecněji xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx) x uvnitř xxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x vytváří xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Překřížení xx xxxxxx testováno xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií nebo xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx kmenů, xxxxxx xxxxxxxx xx testována xx základě xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx heteroalelického xxxxx, který xxxx xxx různé xxxxxxxx xxxxx téhož genu. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx X₄ (heteroalelický x xxx 2 x xxx 5), D₇ (xxxxxxxxxxxxxx x trp 5), XX₃₄ (heteroalelický x xxx 4) x XX1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x trp 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx produkující xxxxxxx x růžové xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x D₅ xxxx X₇ (který xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx konversi x xxxxxxxx mutace x xxx 1-92). Xxx xxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx vehikula. U xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % v xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula xxxx významně xxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristiky xxxxx.

Metabolická xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx jak x xxxxxxxxxxx, tak x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx z jater xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx indikujících xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, postmitochondriálních frakcí xx xxxxxxx může xxx rovněž xxxxxx xxx metabolickou xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Testovací xxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X₄, X₅, X₇ x XX1. Užití xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Média

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx

1.2.2.3 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a rozpouštědlem xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx současně. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx brán xxxxx na xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Nejnižší xxxxxxxxxxx nesmí xxx xxxx xx životnost xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx nemá nejvyšší xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx nerozpustné mají xxx testovány až xx xxx rozpustnosti xxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx od případu.

Xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxx stacionární xxxx, nebo během xxxxx xx dobu xx 18 h. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, jejichž přítomnost xxxx znehodnocuje.

1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx

Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xx tmě xx xxxxx až xxxx xxx xxx 28 - 30 ^xX. Misky použité xxx průkaz xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mitotickým překřížením xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx 4 ^xX) xx xxxxx 1 - 2 xxx xxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kolonie.

1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx

Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací v xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxx xx jednu koncentraci x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx konverzí a xxx xxxxxx životnosti xxxxx. V případě xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx překřížením xx být xxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

1.2.2.8 Postup

Xxxxxxxxx S. xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 10⁷ buněk/ml xx vystaveno testované xxxxx xx dobu xx 18 x. xxx 28 xx 30 ^xX za xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xx přidáno x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx potřebné.

Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx přežívající xxxxx x xxxxx x xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx pokus xxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxx pokus s xxxxxxx xx stacionární xxxx. Jestliže xx xxxxx xxxxx pozitivní, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nezávislým experimentem.

2. XXXXX

Xxxxx mají xxx prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny v xxxxxxxxxx experimentu.

Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- použité xxxxx,

- podmínky xxxxx: xxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, složení médií, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, metabolický aktivační xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: hladina xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx ovlivnění, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxxxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx x účinku, pokud xx to možné, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat,

- xxxxxxx výsledků,

- vyhodnocení xxxxxxxx.

X.17. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXX MUTACÍ X SAVČÍCH XXXXXXX XX XXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Mutation Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxx xxxxxxxx xxxxxx in xxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx vhodné xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx buňky X5178X, xxxxx XXX, XXX-XX52 x X79 xxxxx xxxxxxxx křečka x xxxxxx lymfoblastoidní xxxxx TK6 (1). X těchto xxxxxxxxx xxxxx xx nejčastěji xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (TK) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) a v xxxxxxxxxx xanthin-guanin xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Testy mutací x XX, XXXX x XXXX xx xxxxxxxx xxxxx spektra xxxxxxxxxxx změn. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX x XXXX může xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx xx lokusu XXXX chromozomů X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).

K xxxxx xx genové xxxxxx v savčích xxxxxxx xx vitro xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx buněčných xxxxx. Xxx volbě xxxxx xx xxxxx x xxxxx růstové xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx in xxxxx obecně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx systém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedokáže xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx vivo xxxxxxxx. Xx xxxxx vzniku xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx výsledky xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx mutagenity může xxxxx v xxxxxxxx xxxxx pH, osmolality xx vysoké xxxxxxxxxxxx (7).

Xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx mutagenů x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxx, xxxxx jsou x xxxxx testu xxxxxxxxx, xxxx savčími xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx však xxxxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxx testem x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xx xxxxx testem xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxxxxxxxxxx, xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (6).

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxx výchozího xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx enzymatické xxxxxxxx kódovaného xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx páru bází x DNA.

Frameshift mutageny (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx párů xxxx x DNA.

Doba fenotypické xxxxxxx: xxxxxx, během xxxxxxx jsou z xxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx celkový růst: xxxxxx počtu xxxxx x čase x xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx růstu (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxx klonovací xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx).

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx během období xxxxxxx x xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx efficiency) xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx období exprese.

Přežití: xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) ovlivněných buněk xxxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx konci xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx kontrolní buněčné xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxx, deficientní xx thymidinkinázu (TK) x důsledku xxxxxx XX^+/- → XX^-/-, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx působení pyrimidinového xxxxxxx trifluorthymidinu (XXX). Xxxxx produkující xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx TFT xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x zastavuje xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx TFT proto xxxxx proliferovat xxxxxxx xxxxx, zatímco xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx thymidinkinázu, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Podobně xxxx buňky s xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX selekčně xxxxxxxxxxx xxxx 6-thioguaninu (XX) xxxx 8-azaguaninu (AG). Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx analyzována v xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mutace x xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bedlivě xxxxxx. Xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx každé xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vůči xxxxxx s mutacemi x xxx xxxx. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxxxxx strukturně xxxxxxxx xx selekčním činidlem, xx xxxxx xxxxxxxx, xx je xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).

Xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx vhodnou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x kultivují xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx mutantů (9) (10) (11) (12) (13). Cytotoxicita xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nárůstu xxxxxx xx působení látky. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x růstovém xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx daný xxxxx x xxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxx xxxxx a v xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, ke stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx kolonie xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx z xxxxx xxxxxxx mutovaných xxxxx x xxxxxxxxx médiu x x počtu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx

Xx se xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x XX6. U xxxxxxxxx typů xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (cloning efficiency) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. U xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xxxxx xx použít xxxxxxx.

Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, počet kultur x xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx parametrům vyhovovat (14). Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxx buněk, xxxxx xxxxxxx expozici a xxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx je, xx xxxxx xxxxx má xxx xxxxxxxxx desetinásobkem xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Doporučuje xx však použít xxxxxxx 10⁶ xxxxx. Xxxx xx být x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje, kterými xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testu.

1.4.1.2 Média x xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentraci CO₂, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx xx xxx xxxx volí podle xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx je, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxxxx růst buněk xxxxx expresní periody x xxxxxxxxx jak xxxxxxxxxx, xxx nemutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.4.1.3 Příprava xxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxx xx zásobních xxxxxx, xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxx teplotě 37 ^xX. Před xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx zbavit dříve xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.4.1.4 Metabolická xxxxxxxx

Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x přítomnosti i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx indukujícími enzymy xxxx je Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx fenobarbitalu a β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).

Konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10% x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx záviset xx xxx, xxxxxx typu xx xxxxxxxxx chemikálie. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxx účely xxxxxxxxx aktivace mohou xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx modifikované buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx enzymy. Xxxxx xxxxxxxxx linií xx xxx být xxxxxxx xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx cytochromu P450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx stavu, xxxxx xx před xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx předtím xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx skladování xxxxxxxxxxx xxxxxx vlastnosti.

1.4.2 Xxxxxxxx testu

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx by xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx x aktivitu X9. Používá-li xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx podpořeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx všude xxx, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx rozpouštědla xxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx organické rozpouštědlo xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.

1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxx kritéria, xxx xx uvažují xxx stanovování xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xX xxxx. osmolality.

Cytotoxicita xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x hlavním xxxxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx indikace xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx buněk, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx vhodné stanovit xxxxxxxxxxxx a rozpustnost x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx minimálně čtyři xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od maximální xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, že xx jednotlivé koncentrace xxxxxxx xxxxx xxxx xxx násobkem, který xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx koncentrace x cytotoxicity, xxxx xx xxxx k xxxxxxxxxxx přežití (relativní xxxxxxxxx účinnosti) xxxx xxxxxxxxxxx celkovému xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X relativně xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dávka xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 mg/ml, 5 μl/ml a 1,01 M.

U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx koncentrace, při xxxxx se xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx finálním kultivačním xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxx xx začátku x xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x důsledku xxxxxxxxxxx xxxxx, X9, séra xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx dá xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.4.2.3 Xxxxxxxx

X xxxxx xxxxxxx experimentu xx xxxxxx provést x xxxxxxxx pozitivní a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, vehikulum) xxxxxxxx, a to xxx x metabolickou xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxx	Xxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxxxxx
Xx	XXXX	xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
	XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx)	xxxxxx methansulfonát	66-27-3	200-625-0
	XPRT	ethyl xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
Xxx	XXXX	3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx	56-49-5 62-75-9 57-97-6	200-276-4 200-549-8 200-359-5
	XX (malé x xxxxx xxxxxxx)	xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cyklofosfamidu benzo[a]pyren 3-methylcholantren	50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5	200-015-4

				200-028-5 200-276-5
	XPRT	N-nitrosodimethylamin (pro xxxxxx xxxxxxxxxxx X-9)	62-75-9	200-549-8
		xxxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5

Xxx xxxxxxxxx kontrolu se xxxxx použít x xxxx vhodné xxxxx; xxxxxxxx xx například xxxxxxxxx historickou xxxxx x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (XXX 59-14-3, číslo EINECS 200-415-9), lze xxxxxx x tuto referenční xxxxx. Tam, kde xx xx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxx interval sklízení xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx třeba xxxxxxx kontrolu bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.4.3 Xxxxxx

1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxxxxx xxxxxxx xx vhodnou xxxx (obvykle xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Xxxx expozice xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx buněčných xxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jenom xxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx kultura, xx xxxxx zvýšit xxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx se zajistil xxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (rozpouštědlem/vehikulem) xx xxxxxxxxx duplicitní.

V xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek xx xxxxx uplatnit v xxxxx vhodné postupy, xxxx je použití xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kultivačních xxxxx (21, 22).

1.4.3.2 Xxxxxxxxx přežívání, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx promyjí a xxxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx xx obvykle xxxxxx x analýzou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx relativního celkového xxxxx.

Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx časový xxxxxxxx xxx téměř xxxxxxxxx expresi xxxx xxxxxxxxxxxx mutantů (XXXX x XPRT xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 dní, TK xxxxxxxxx 2 dny). Xxxxx se pěstují x xxxxx x x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx stanovení xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx účinnosti. Xx xxxxxxxx doby xxxxxxx xx začne x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx) inokulací xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx látka v xxxxx X5178X XX⁺/^- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x experimentálních xxxxxx (xxxxxxxx pozitivní koncentrace) x na xxxxxxxxxxx x pozitivních xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kolonií. Xxxxx je látka x xxxxx testu xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxx xxxxxxx i xx xxxxxxxx s XX6XX⁺/^-.

2. XXXXX

2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x mutační xxxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx pozitivní xxxxxx x xxxxx X5178XX⁺/^- se kolonie xxxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx přinejmenším x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrole. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx velkých x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx XX⁺/^- xx xxxxxxx hodnotí xxxxx kritéria kolonií xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, mají xxxxx xxxx xxxxxxxx, x proto tvoří xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxx genu po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx malých xxxxxxx xx asociována x expozicí xxxxxx xxxxxxxxxxx hrubé xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x vytvářejí xxxxx xxxxxxx.

Xx třeba uvádět xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx efficiency) xxxx xxxxxxxxx celkový xxxx. Mutační xxxxxxxxx xx vyjadřuje jako xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x tabelární xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx pozitivní reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx modifikovaných experimentálních xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxx zdůvodnění. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx modifikaci xxxxxxxxx studie tak, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx koncentracemi x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nárůst xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx systému xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx negativní výsledky, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx stále nejednoznačné xxxx problematické, i xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na genové xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx in xxxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxx savčích buněk xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx - xxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxxxxxx xxxxxx mutace.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx zprávě x průběhu xxxxxx xx třeba uvést xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx známa.

Buňky:

- typ x zdroj xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx kultur,

- xxxxxxxx počet xxxxxx,

- xxxxxxxx metody xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x počtu xxxxxx, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testované xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxx inkubace,

-doba xxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx,

- xxx a složení xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx expresní xxxxxxx (případně včetně xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx)

- selekční xxxxxxx,

- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx,

- definice xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxx velikost x xxx (xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxx "malými" x "velkými" xxxxxxxxx).

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx x xX a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxx zjistit xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx L5178Y XX⁺/^-,

- xxxxx dávka - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- statistické analýzy, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.18. POŠKOZENÍ XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX SYNTÉZA XXX - XXXXX XXXXX XX XXXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (XXX) xxxxxxxx měřit xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx fyzikálními xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (³H-TdR) xx XXX savčích xxxxx, které nejsou x S xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx ³X-XxX xx stanoven xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x exponovaných xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx kultury potkaních xxxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xxx x přítomnosti, xxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. UDS xxxx xxx také xxxxxxxxx x systému xx xxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx jako kontrolní xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx se pouze xxxxxxxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx

Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx buněčných xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx kultur (xxxx xxxx, xx-xx to xxxxxxx zdůvodnitelné) pro XXX XXX.

1.2.2.2 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx

X xxxxxx experimentu xxxx xxx současně xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly v xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.

Xxxx pozitivní xxxxxxxx lze xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx použít 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-DMBA) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxx xxx autoradiografii, xxx x xxx XXX xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky

Xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Látky xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx testovány x xxxxxxxxxxxxx až xx hranici rozpustnosti xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx rozpustné xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx případ xx xxxxxxx.

1.2.2.4 Buňky

Xxx udržování kultur xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx médium, xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx x vlhkost. Stabilizované xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx aktivace

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx exponovány testované xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx

1.2.3.1 Příprava xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx se připravuje xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), inokuluje xx do xxxxxxxxxxxx xxxxx ve vhodné xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 ^oC.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxx, že xx xxxxxx xxxxxxx izolovaným xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx lidských xxxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx metody.

1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx

Primární xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx izolované xxxxxxxxxx potkana xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx ³X-XxX po xxxxxxx xxxx. Xx ukončené xxxxxxxx je médium xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx stripping xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.

Stabilizované xxxxxxx linie x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxx xxxx x pak xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ³X-XxX. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, aktivitě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxx buněk. X xxxxxxxxx nejvyššího xxxxxxx XXX je xxxxx ³H-TdR přidat xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxx interakcí mezi xxxxxxxxxx xxxxxx x ³X-XxX. X odlišení xxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx médium, nízký xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx média, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA.

Xxxxxxxxx XXX xxxxxx XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vstup xxxxx xx S-fáze, xxx xxxx xxxxx uvedeno. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxxx xx XXX xxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx obsah DNA x xxxxx rozsah xxxxxxxxxxx ³X-XxX.

Xxxxxxxx xxxx použity ve xxxxx uvedených metodách xxxxxx lymfocyty, xx x nestimulovaných xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx replikace XXX xxxxxxxx.

1.2.4 Analýza

1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx autoradiografie

Xxx xxxxxxxxxxxxx UDS x xxxxxxx kultuře xx xxxxx v S-fázi xxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx 50 xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ³X-XxX x xxxxxxxxxx xx xxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx XXX

Xxx xxxxxxxxx LSC XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx kontroly.

Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx experimentech.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.

2.1 Vyhodnocení autoradiografie

Xxxxxx xxxxxxxxxxx ³H-TdR xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxx ³H-TdR xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx x xxxxx xx hodnocen xxxxxx průměru, xxxxxxx x xxxx.

2.2 Xxxxxxxxxxx XXX

Xxxxxxxxxxx ³H-TdR xx xxxxxxxxxxx xxxx xxx/μx DNA. Xxxxxxxx xxxxxxx dpm/μg XXX xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx používají x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Údaje se xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx o:

- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxxxxx kultur,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂,

- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx schématu,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx autoradiografických xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,

- postup xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XXX xxx metodě XXX,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li to xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretaci xxxxxxxx.

B.19. XXX - VÝMĚNA XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XX VITRO

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

XXX xx xxxxxxxxxx test xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxx xxxxx sesterskými chromatidami xxxxxxxxxx. XXX reprezentují xxxxxx xxxxxxxxxxx sekvencí XXX xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) lokusech. XXX xxxxxxxxxxxxx vyžaduje xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx znalostí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxxxx. Xxxxxxx SCE xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatid. Toho xx dosahuje inkorporací xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) do xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx buněčných xxxxx.

Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx přítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xx-xx to potřebné. Xxxxxxxxx se po xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx v médiu xxxxxxxxxxx XxxX. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx ovlivní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vřeténka (xxxx. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx v x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx ukončení xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx a připraveny xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx (xxxxxx lymfocyty) xxxx stabilizované xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx buňky xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxxxx x hlediska xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.

Používají xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx (teplota, xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentrace XX₂ x vlhkost).

Testovaná xxxxx se rozpouští xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx xxxxx, rychlost xxxxx xxxx xxxxxxxxx XXX.

Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x vnitřní (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx aktivitou, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx aktivity xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx chemických xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx kultur

Pro xxxxx experimentální xxx xx použijí xxxxxxx xxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx

X xxxxxx experimentu xxxx xxx zařazeny xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxx x přímým xxxxxxxxxx účinkem a xxxxx xxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx. Dále xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x použitým xxxxxxxxxxxxx.

Xxxx pozitivní xxxxxxxx xxx xxxxxx:

- přímo xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx

- xxxxxxx působící mutageny: xxxxxxxxxxxxx

Je-li xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx testovat xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Popis xxxxxxx

1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie se xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (trypsinací xxxx xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx kultivační xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx při 37 ^xX. Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx počet xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx než z 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Lze xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx kultur. Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 ^xX.

1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx. Ve xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx dvě xxxxxx, ale xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxx cykly, xx-xx xx xxxxx. Xxxxx, xxxxx nemají xxxxxxxxxxx xxxxxxx metabolickou xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx, buňky xxxxxx x dále kultivovány x xxxxxxxx médiu x XxxX xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Alternativně xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkou x XxxX po xxxx xxxx buněčných xxxxx.

Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx, dokud xxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx analyzovány x druhém xxxxxxxxxx xxxxxx xx expozici xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx kultury s XxxX xx třeba xxxxxxxx v xxxxx xxxx ve světle xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zabránilo xxxxxxxx XXX, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.

1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx čtyři xxxxxx xxxx ukončením xxxxxxxxx xx xx kultur xxxxx inhibitor xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. kolchicín). Xxxxx kultura xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx preparátů xx xxxxxxxxxx XXX může xxx xxxxxxxxx několika xxxxxxxxxx (xxxx. fluorescenční xxxx Xxxxxx).

1.2.3.5 Analýza

Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x kontrole. Obvykle xx xxxxxxx xxxxxxx 25 dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx zakódovány před xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s 46 centromerami. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x ± 2 centromery od xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx budou xxxxxxxxxx SCE v xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx tabulkovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxxxx x xxxxx XXX/xxxxxxxxx zvlášť xxx xxxxxx metafázi v xxxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Údaje xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: složení xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x jeho xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, pozitivních x negativních xxxxxxxxxx,

- xxxxx kultur xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx,

- způsobu xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),

- xxxxxxxxx xxxxx SCE/buňku x XXX/xxxxxxxxx (odděleně xxx xxxxxx xxxxxxx),

- kritériích xxxxxxxxx XXX,

- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx dávka/účinek, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx vyhodnocení,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.20. RECESIVNÍ XXXXXXX MUTACE XXXXXX XX XXXXXXX X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxx na xxxxxxxxx letální xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx (XXXX) xx Drosophila xxxxxxxxxxxx umožňuje detekci xxxxxx, xxx genových, xxx i xxxxxx xxxxxx, x zárodečných xxxxxxx xxxxx. Je xx xxxx xx xxxxxxx mutace xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx xxxxxxxxxxxx ani 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-chromozóm xxxxxxxxxxxx přibližně 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx genomu.

Xxxxxx v X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx projeví x samců nesoucích xxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx stavu, xxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx samčích xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. XXXX xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x zvláštnímu vzhledu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxx dobře definované xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx Xxxxxx-5. Xxxxx být použity x jiné xxxxxx xxxxx xxxxxxx linie xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.

1.2.1.2 Testované xxxxx

Testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx ve xxxx. Xxxxx ve xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxx xxxxxxx x Xxxxxx-60 xxxx 80), xxxx xxxxxxxx xx xxxx ředí xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx

Xxxx má xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx mutací x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxx aplikace

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx plynům xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se provádí x cukerném roztoku. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx v 0,7% xxxxxxx NaCl x xxxxxxxx xx do xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

V xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx k dispozici xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kontroly.

1.2.1.6 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx používá xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx maximální tolerované xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxx divokého xxxx (xx xxxxx 3-5 xxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x jiné xxxxxx xxxxxxxxx linie (vícenásobná xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx vyměněny xx xxxxxxx virginní samice xxxxx dva až xxx xxx, aby xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx cyklus xxxxxxxxxxx xxxxx. X potomků xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx expozice xx xxxxx spermie, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx spermatidy, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx X₁ xxxxxx narozené x tohoto xxxxxxx xxxx dále kříženy xxxxxxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx. V X₂ xxxxxxxx je x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx divokého xxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx F₁ xxxxxx nesoucí letální xxxxxx x rodičovském X-xxxxxxxxxx (xxxxxx nalezeni xxxxx samci x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx samic se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx testovány, xxx xx xxxxxxxx, zda xxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx generacích.

2. XXXXX

Získané xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Uvádí xx xxxxx hodnocených X-xxxxxxxxxx, počet xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx s letální xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxx xxxxxxx testovaného xxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Výsledky xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xx zhodnotí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Nahromadění xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v jednom xxxxx xx xxx xxxxx x xxxxx x zhodnoceno vhodným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx o:

- použitých liniích xxxx xxxxxxx Drosophily, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počtu sterilních xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx F₂ xxxxxx, xxxxx X₂ kultur xxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro každé xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx ovlivněných skupin,

- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx popis ovlivňování x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, výše dávek, xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx expozice/účinek, xx-xx xx možné,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

B.21. XXXX XXXXXXXXXXXX SAVČÍCH XXXXX - XX XXXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxx lze xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx vitro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx in xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx X3X10X1/2, 3X3, XXX, Xxxxxxxxxxxx potkanů x test xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx morfologie, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx ostatní fyziologické xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x buňkách xx xxxxxxxx karcinogenním xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx testu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Některé xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx promotorů. Xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinku testované xxxxx xx schopnost xxxxxxxx xxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) xxxx ovlivněním xxxxxxxxx růstu xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx cytotoxicity xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx byla xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, ale xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx experimentech, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x prodloužení xxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxx

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx použitelných x testu xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx buňky použité x xxxxx transformace xxxxxxxx příslušné xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx karcinogenem a xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xx je xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx x spolehlivost.

1.2.1.2 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx podmínky musí xxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx rozpouštějí xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Buňky jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

Do xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x použitím xxxxx xxxxx působících x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxx také xxxxxxxxx xxxxxxxx (x rozpouštědlem).

Xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx kontroly:

- xxxxx působící látky: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx vyžadující metabolickou xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Je-li xxxxx, xx možné xxxxxxx xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Tyto xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxx závislý xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx přežívání buněk, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx přežívání buněk xxxxxxxxx stejné jako x negativní xxxxxxxx. Xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx testovat až xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx závislou xx použitém xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx x opakovanou xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxx), jestliže se xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Buňky bez xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxx expozice xx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx za vhodných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx. Xxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx transformace. Všechny xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx formě. Xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx úrovně x frekvenci xxxxxxxxxxxx xxxx počet xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Data xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- použitých xxxxxxx, xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, době xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádobách, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, metabolickém aktivačním xxxxxxx, pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx expozice, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenotypu, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx systému (xx-xx xx xxxxxx), xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX XXXX X XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxxxxxxx letalita xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx dominantních xxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx látce xxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Smrt xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Samci xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pářeni x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx x exponované skupině xxx počet xxxxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx ztráty xx xxxxxxx xx xxxxxxx počtu žlutých xxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx x kontrolní skupině. Xxxxxxx xxxxxxxxxx letalita xx součet xxx- x postimplantačních ztrát. Xxxxxxx xxxxxxx dominantní xxxxxxxx je xxxxxxx xx srovnání xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x exponované xxxxxxx x xxxxx implantacím xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Snížení xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx zánikem xxxxx (x.x. spermatocytů x/xxxx spermatogonií).

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx se xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Způsob xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pouze xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Obvyklý xxxxxx xxxxxxxx xx orální xxxxxx nebo intraperitoneální xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxx x xxxx xxxxxxx aplikace.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxx test xx doporučují xxxxxx xxxxxxx nebo myši. Xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx exponované x kontrolní xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx variabilitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky. Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx případě se xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx samců, xxx xx xxxxxxx 30 - 50 xxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx experimentu. Jestliže xxxx xx laboratoř x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol x nedávných experimentů, xxxxx být xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx dávkách, aby xxxx prokázána citlivost xxxxx (xxxx. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx^-1).

1.2.2.5 Xxxxxxxxx

Nejčastěji xx xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxxx test

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x xxxxx xxxxx 5 x.xx^-1 xxxx x dávce 1 x.xx^-1.xxx^-1 při opakované xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx.

Xxxxx xxxxx xx opakovaně xxxxxx x jednou nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxx x samců xxxxxxx xx xxxx xxxxxx jednoho xxxxx xxxx, xxxx pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vagině xx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx stadia xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx.

Samice xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx druhé xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx je xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x určení počtu xxxxxxx xxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx o xxxxx xxxxx, počtu březích xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx samic xxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx. Xxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx samostatně. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx o xxxxx páření, x xxxxx podané samci, x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx srovnání xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx samici v xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx vypovídá x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx letalita. Xxxx být xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx ztráty. Xx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx počtem xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx nebo jako xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Zpráva o xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- druhu, xxxxx, xxxx x xxxx xxxxxx, počet xxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x důvodech xxxxxx xxxxxx, negativních x xxxxxxxxxxx kontrolách, xxxxxxx x xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx k průkazu xxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx počítání xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx dávka/odpověď,

- xxxxxxxxxxx hodnocení,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX ABERACÍ X XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

Metoda xx xxxxxxxxx OECD XX 483, Mammalian Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxx spermatogoniích (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu xxxxxxx xxxxxx. Tato xxxxxx není určena x analýze xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x tomuto xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx jsou x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Tímto xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxx predikovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx buňkách.

X xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx in xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx buňky.

Aby xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, je třeba xxxxxxxxxx xxxxx mitózu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, dříve než xx xxxxxxxxx xxxxxx x následujícím buněčném xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, kde xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx, x xxxx xx ovlivněné xxxxx xxxx xx spermatocyty.

Xxxxx test in xxxx je xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx aktivní x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx procesů DNA.

X xxxxxx xx xxxxxxxx řada generací xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látkám. Zjištěné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx reakcí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx diferencované xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx polohy xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx nemusejí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx anatomické x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx toho, xx xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, není xxxx xxxxx pro xxxx xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx chromatidového xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození chromozómu, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx zlom x xxxxxxxx spojení mezi xxxxxxxxxxxx.

Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální poškození xxxxxxxxxx vyjádřená xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx a opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx jako xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx chromozóm-ring)

Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx hodnotit xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx vzniklá xxxxxx ve struktuře xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x xxxxx zlomu xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx jedna xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómu xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.

Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx jedné chromatidy x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Numerická xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému pro xxxxxxx buňky.

Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (n) jiný xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx (3n, 4n xxx.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx metafáze, pozorovaná xxxx delece x xxxxxxxxx, a xxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Xxxxxxx xx vhodným způsobem xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx vhodnou xxxx po xxxxxxxx xx usmrtí. Xxxx xxxxxxxxx se na xx působí látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). Xx zárodečných buněk xx xxx připraví xxxxxxxxx x po xxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx a myší, xxx ovšem xxxxxx xxxxx jakéhokoliv xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx druhu. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx nemají přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B.

Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí do xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí a xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx testovaná látka x xxxxxx stavu x je-li to xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle xxxx vehikulu. Kapalné xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx ředí. xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (stabilitě) xxxxxxxxx, xx skladování xx neovlivní.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx xxxxx vyvolávat toxické xxxxxx x nesmí x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx nepříliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x testovanou látkou. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx rozpouštědlo/vehikulum.

1.4.2.2 Kontroly

Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx pohlaví zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx třeba zacházet xx xxxxxxx xx xxxxx skupinách xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xx spermatogoniích xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, kdy lze xxxxxxxx jejich detekovatelné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Dávky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx možné podávat xxxxxxxx xxxxxxxx než xxxxxxxxxx látku x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx to xxxxx, je třeba xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Látka	XXX	EINECS
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
monohydrát xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxx	108-91-8	203-629-0
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
akrylamid xxxxxxx	79-06-1	201-173-7
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxxx intervalů xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx s aberacemi x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx je třeba xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxx mutagenní xxxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Počet x xxxxxxx zvířat

X xxxxx zkušební x kontrolní xxxxxxx xxxx xxx minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx dávku, xxxx se k xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxx, xx. xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx režimy xxxxxxxxx xxxxxx xxx vědecky xxxxxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx vzorky xx xxxxxxxx látce xxxxxxxxx xxxxxxx. Jelikož xxxxxxxxx látka může xxxxxxxxxx kinetiku buněčného xxxxxx, provádí xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx pozdější xxxxx xxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxx. X ostatních xxxxx (tj. mimo xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx provádí xx 24 hodinách xxxx po 1,5násobku xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, ledaže xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (6).

Xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx intervaly odběru xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx x látku xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, nebo xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, xxxx vhodnější xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).

Xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx opakovaně, xx xxxxxxxx případ xx případu. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, usmrcují xx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx cyklu) od xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxxxx i x xxxxxxx intervalech, xxxxxxxx-xx xx to xx účelné.

Před xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Colcemidu® xxxx xxxxxxxxxx x následně xx x nich xx vhodném xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx je tento xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, x čínských xxxxxx zhruba 4-5 xxxxx.

1.5.3 Dávkování

Provádí-li xx xxxxxx ke xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx živočišného xxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx studii (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají xxx xxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, aby xxxxxxxxx rozmezí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx vzorků xx pak xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.

Látky, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx dávka, xxxxx vede x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx poměru xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx( tento xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx při dávce xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx dávkách podaných x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx s podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx celá studie xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx úrovní. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávky.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx intraperitoneální injekcí. X xxxxxxxxxxxx případech xxxxx xxx xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xxx, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx úrovních stejný x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xx usmrcení xxxxxxx xx x jednoho xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx kterou xx působí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x fixuje xx. Xxxxxxx suspenze xx xxxxxx na xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.

1.5.7 Xxxxxxx

X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx). Xxxxx počet xx xx xxxxxx, xx-xx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx před xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx postupy xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx chromozómů, musí xxx x xxxxx xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx 2x ± 2.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. U xxxxxxx xxxxxxx se vyhodnocuje xxxxx buněk se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxxxxxxx zvlášť, uvádějí xx, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx-xx analyzována xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xxx, xx xx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx mitotický xxxxx x minimálně 1000 buněk z xxxxxxx jedince.

2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx, nebo zřetelný xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x s xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx významnost výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx je možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však neměla xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx v xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Ačkoliv xxxxxxx experimentů xxxxxxxx xxxxx pozitivní, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxx ohledu xx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové aberace xxxxxxxxxx.

Je xxxxx xxxxxxxxxx, jaká je xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx dosáhne xxxxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:

Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx x xxx xxxxxx,

-xxxxx, chovné xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,

- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx hmotnostního xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxx-xx provedena,

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx aplikace xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,

- zdůvodnění xxxx xxxxxxxx zvířat,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx xxxxxxxxx / xxx),

- podrobnosti o xxxxxxx potravy x xxxx,

- podrobné xxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- metody xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx koncentrace x xxxxx působení,

- xxxxxx přípravy mikroskopických xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- mitotický xxxxx,

- xxxxx xxxxx spermatogonií x xxxxx x druhé xxxxxxxxx metafázi,

- xxx a počet xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx počet aberací x dané xxxxxxx,

- počet xxxxx x xxxxxxxxx na xxxxx skupinu,

- xxxxx dávka - xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx negativních kontrol,

- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- případně pozorované xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.24. XXXX XXXX U MYŠÍ

1. METODA

1.1 Xxxxxxx metody

Xx xx in xxxx xxxx na myších, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx buňkami u xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx geny xx, xxxxx kontrolují xxxxxxxxxx xxxxx. Embrya xxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxx dominantních xxxxx x genech xxxxxxxxxxxx xxxx vyjádřeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x těmito xxxxxxxx, xxxxxxxx, xx zaznamenán x jejich xxxxxxxxx xx srovnávána x xxxxxxxxx x xxxxxxx x kontrol. Myší xxxx xxxx detekuje xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x embryonálních buňkách.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Příprava

Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx nebo suspendovány x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx vodě xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx rozpouštědla nesmí xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx efekt. Používají xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky.

1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata

Xxxx xxxxx X (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, c^ch p/c^ch x; xxxxx, b/b; xxxxxx, xxxxx ear, x se/d se; xxxxxxx spotting, x/x) xxxx kříženy xxx x xxxxxx XX (xxxxxx, nonagouti, xxxxxxxxxx, xx x xx/xx x xx; leaden xxxxx, ln xx/ /xx xx; xxxxx xx/xx) nebo s xxxxxx X57 XX (xxxxxxxxx, x/x).

Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx křížení, xx xxxxxxxxxxx že xxxxx xxxxxxx nonagouti xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx NMRI (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxx, c/c) x XXX (nonagouti, x/x; xxxxx, b/b; xxxxxx x/x).

1.2.1.2 Počet x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx samic, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet živých xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Vhodná xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na počtu xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx myší x x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx pouze x xxxxxxx, xx bylo xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx samic ovlivněných xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné pouze xxxxxxxxxxxxx (negativní kontroly). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx homogenní. Xxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxx laboratoři xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mutagenním účinkem xxxxx být x xxxxx testu xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx myši. Xx-xx xx vhodné, je xxxxx použít inhalační xxxx xxxx způsob xxxxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Používají xx nejméně dvě xxxxx, x xxxxx xxxxx vyvolává známky xxxxxxxx nebo zmenšení xxxxxxxxx xxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivněna xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jednou 8., 9. xxxx 10. xxx březosti, xxxxxxx xx 1. xxx březosti xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zátky. Xxxx xxx odpovídají 7.25, 8.25 x 9.25 xxx po xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx.

Xxxxxxx

X xxxxxx xx xxxxxxx x zaznamenáván xxxxx skvrn xxxx xxxxxx a čtvrtým xxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx se tři xxxxx skvrn:

(x) xxxx xxxxxx x xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx zánikem xxxxx (XXXX);

(b) xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx vyskytují x xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx, hrdla, xxxx, xxxxxxx slabin a xxxxxxxxx čela x xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx diferenciace (XXX);

(x) xxxxxxxx x xxxx skvrny xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx výsledek somatických xxxxxx (XX).

Xxxxxxx xxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxxx, ale pouze xxxxxxxx, XX, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Obtíže x odlišením xxxx XXX x XX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx mikroskopu.

Zaznamenávají xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx potomků.

2. XXXXX

Získaná xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxx x počet xxxxxx majících xxxxx xxxx xxxx skvrn xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx porovnávají xxxxxxxx xxxxxxxx. Údaje xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- kmeni xxxxxxxx xxx křížení,

- xxxxx zabřezlých xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx velikosti xxxx v xxxxxxxxxxxxxx x v kontrolní xxxxxxx xxx porodu x při xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xx kterém xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,

- x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxx, a xxxxxx xxxxx x WMVS, XXX a XX x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině,

- xxxxxxx morfologických xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxx dávka/odpověď x XX, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X XXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx metody

Test xx přenosné translokace x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx zárodečných buňkách xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx potomků. Indukované xxxxx xxxx reciproké xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx potomků xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x XX-xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx fertilitu, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx X₁ xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx některými xxxx xxxxxxxxxxx (X-xxxxxxx x c-t typ). Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx stadiu xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, xxxx X₁ samců či xxxxxxx xxxxxxx X₁ xxxxx. Xxxxxx XX xxxx xxxxxxxxxxxxx identifikovány xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x mitózách x xxxxxx xxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxx nerozpustné, xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx reagovat x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxxxx aplikace.

1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Nepožaduje se xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx velikost xxxx xx měla být xxxxx xxx xxx x xxxx by xxx relativně xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxx nutně xxxxxx xx xxxxxxxxx spontánních xxxxxxxxxxx a na xxxxxxxxxx počtu indukovaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Test xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx F₁ xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x F₁ xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže budou xxxxxxxxxxx také samice X₁ xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx 300 xxxxx a 300 xxxxx.

1.2.1.4 Negativní x xxxxxxxxx kontroly

Xxxxx xx použít xxxxxxxxx výsledky kontrol xxxxxxx x předchozích xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx pokusu z xxxx laboratoře, xxxxx xxx xxxxxxx.

1.2.1.5 Dávkování

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxx vlivu na xxxxxxxxxxx chování nebo xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx/xxxxxxx je xxxxx xxxx dalších, xxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxx a xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá jedna xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx je xxxxx xxxxxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxx dní x xxxxx xx 35 xxx.

Počet xxxxxxxxx xx expozici xx řízen xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx konci období xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozděleny xx xxxxx. Xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, velikost xxxx x xxxxxxx mláďat. Xx xxxx jsou xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx až xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů

Používá xx jedna ze xxxx možných xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx X₁ xxxxxxx x následná xxxxxxxxxx možných xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx cytogenetická analýza xxxxx samců X₁ xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx testu xxxxxxxxx.

(a) Test xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v F₁ xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x velikosti xxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx fertility xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxx kmen xxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx xxxx: X₁ xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx ze stejného xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. dnem xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx vrhu x xxxxxxx X₂ xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx, hned xxxx xxxx odděleni. Xxxxxxxx xxxx testovány X₁ xxxxxx, X₂ xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx uchováváni xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou translokací x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx určeny xxxxxx xxx ratio xxxx xxxxxx xxxxxxx z 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx xx. xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testování, xxxxxxxx první X₂ xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx určenou xxxxxxxx xxxxxxx, jinak xxxx xxxxxxxxxxx druhé x xxxxx xxxx. X₁ xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxx X₂ xxxx, jsou dále xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx dělohy: Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx u xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx embryí, xxxxx vysoký xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxx X₁ xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ke 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx usmrceny 14. - 16. xxx a xxxx xxxxxxxxxxxxx živé x xxxxx xxxxxxx.

(x) Xxxxxxxxxxxxx analýza

Xxxxxxx xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxx X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx splňuje xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx výběr no xxxxxxxx, xxxxxxx X₁ xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xx každého xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx x xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx s xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx meiozy xxxx xxxxxxxxxx xxxx x X₁ xxxxx suspektních XX. Xxxxxxxxxx neobvykle xxxxxxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx x 10 buněk xx důkazem xxx xxxxxxxxx xxxxx translokační xxxxxxxxx (x-x typ). Xxxxxxx X-autosomální translokace xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mitotických xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx ve xxxxx 10 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx XX xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxx připouštění xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu a xxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx).

Xxx odhad xxxxxxxxx X₁ xxxxxx xx xxxxx průměrná xxxxxxxx vrhu xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxxx F₁ xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx analýzu xxxxxx dělohy xx xxxxx xxxxxxxx počet xxxxxx a mrtvých xxxxxxx v xxxxxxxx x individuální xxxxx xxxxxx x mrtvých xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx F₁ nosičů xxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X xx uvádí počet xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x celkový xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx translokací.

Pro X₁ sterilní xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx počet x doba připuštění. Xxxx xx uvádí xxxx testes a xxxxxxxxxxx x cytogenetické xxxxxxx.

X XX xxxxx xx uvádí xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxx X₂ xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

X xxxxxxx, že xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx F₁ translokací, xx xxxxx x xxxxxxxxx uvést informaci x skutečném počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x pozitivních xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxx xxxx, stáří a xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx rodičovských xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x kontrolních skupinách,

- xxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, dávkové xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- počtu x xxxxxxx xxxxxx xx samici, xxxxx x xxxxxxx potomků xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- době x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- počet x detailní popis xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx dělohy,

- xxxxx cytogenetické xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx hodnocení,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ

(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, studie na xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx podává denně xxxxxx po 90 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx zvířat, x xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.

Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx v potravě, xxxxxx, v kapslích xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx celou xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x nich xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx dřívější xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Dává xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x běžně užívaných xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx případě by xx počátku podávání xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx 6 xxxxx, v xxxxxx xxxxxxx starší xxx 8 týdnů. Xx xxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx předběžný xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a kmen.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx a 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx březí. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat o xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx možno podávat xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx nejvyšší xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, přetrvávání nebo xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx úrovně xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx x kontrolní skupině xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Používá-li xx vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx malý xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx existují odhady xxxxxxxx u člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx hodnotu překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx vyvolat xxx toxický účinek xx hranicích zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Ve xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.

Xxxxxx-xx se testovaná xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx^-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx sondou, xxxx xx se tak xxx každý xxx xx xxxxxxx dobu, x dávkování v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx-xx xx 90denní xxxx níže popsanou xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) žádné toxické xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Podává-li se xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx nebránily xxxxxxxx xxxxxx zvířat.

1.2.2.5 Xxxx pozorování

Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, xx xxxxxx xx objeví a xxxx odezní toxické xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

X xxxxxxxx případě xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx látka 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx určena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx potravy (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx zařazení.

Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným přístrojem xx xx provést xxxx podáváním testované xxxxx a xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx xxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx a x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx trombocytů.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx všechny xxxxxx xx vhodné stanovit xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x ledvin. Výběr xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (trvání xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx druhu x kmene), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx širšího spektra xxxxxx.

(x) Analýza xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx postup, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Pokud xxxxxx xxxxxxxxx historická xxxxxxxxx xxxx, xx xx uvážit xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech tělních xxxxxx, lební, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx se xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx vysychání.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx a tkáně xx třeba xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx místě brzlíku, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, varlata a xxxxxxxxx, xxxxxx, (přídatné xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, lymfatické xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxx xxxxx xx třech úrovních - xxxxx, xxxxx xxxxxx x bederní, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx posuzují v xxxxxxx, pokud xxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x příznaků xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, a x xxxxxx kontrolní xxxxxxx.

(x) Xx třeba xxxxxxxx všechna makroskopická xxxxxxxxx.

(x) Je xxxxx vyšetřit cílové xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xxxxx zvířat ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rutinně, xxxx xx xxxx provést xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx x vysokou xxxxxx.

(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x kterých byly xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Údaje se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx typy xxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou statistickou xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,

- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx dávek,

- úroveň xxx xxxxxx, pokud ji xxx xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,

- popis xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx další vývoj,

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),

- pitevní nálezy,

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, xxxxxx na xxxxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx), x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Zvířata, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Testovanou látku xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx xxx vhodnější podávání x kapslích. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx způsoby orální xxxxxxxx. Všem zvířatům xx testovaná xxxxx xxxxxx po xxxxx xxxx xxxxxx stejnou xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, xxxx xxx x xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, je možno xx využít.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx druh - xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx nehlodavců. Xx xxxxx xxxxxxxx xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx; v xxxxxxx xxx xx xx x podáváním xxxxx xx xxxx xx 3 xx 6 xxxxxx a xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, v obou xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx nejméně 8 xxxxxx (4 xxxxxx a 4 xxxxx). Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx účinků.

1.2.2.3 Dávkování

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tři úrovně x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx. Xxxxxxxx úroveň xx xxxxxx vyvolat xxxxx příznaky toxicity. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx hodnotu překračovat. Xxxxxxx by xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxx xxx toxický xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx voleny xxx, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx xxxxxx.

Ve xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx úrovní xxxxx a v xxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

Podává-li xx xxxx toxická xxxxx v potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx aplikované xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx mg.kg^-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx alternativu xx xxxxx xxxxx. Podává-li xx xxxxx přímo, xxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx by xx xxx xxx každý xxx ve xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx intervalech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx testem, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Provede-li 90xxxxx xxxx níže xxxxxxxx xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (nebo xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) žádné xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, aby xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx látky nebránily xxxxxxxx výživě xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx pozorování

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx toxické účinky, xxxxxx dobu xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

X ideálním xxxxxxx xx zvířatům podává xxxxxxxxx látka 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx se xxxxx jiným xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xx za xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 xxx v xxxxx.

Xxxxxxxxxx zahrnuje (xxx není xx xx xxxxxxx) změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.

Příjem potravy (x příjem xxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx v xxxxx xxxx) x hmotnost xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx pitvají xxxxxxx zvířata, která xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

U xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Oftalmologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx studie xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávky x u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx začátku xxxxx, x xxxxx xxx x měsíčních xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x dále na xxxxx xxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového a xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx počet xxxxxxxxxx.

(x) Na xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx a dále xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné stanovit xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (přičemž trvání xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx transferáza (xxxxx xxxxxxx transamináza séra) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: lipidů, xxxxxxx, acidobasické rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxx xxxxxx krve xx nehlodavci měli xxxxxxxx (xx více xxx 24 xxxxx).

(x) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx zevní xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, štítná xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x varlata xx xx nejdříve xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Následující xxxxxx x tkáně je xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu s xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, podvěsek xxxxxxx, xxxxxx žláza, xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx xxxxx brzlíku,(průdušnice), xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx břišní, varlata x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (xxxx), žlučník, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a slepé xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) x (páteřní xxxxx xx třech xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo pokud xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxx x tkání xx xxxxx provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Histopatologické xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkových xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx byla xxxxxxxx poškození u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxx xx to indikováno xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx, xxxx poškození x procentuálně xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, plemeno xxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, potrava,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx dávek (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,

- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxx,

- úroveň xxx účinku, xxxxx xx xxx stanovit,

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,

- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyšetření a xxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx všech histopatologických xxxxxx,

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx to možné,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX DERMÁLNÍ

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, studie xx xxxxxxxxxx)

1. METODA

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx kůži xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Během xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx mladá xxxxxxx náhodně přiřadí xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.

Krátce xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx se xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo oholení xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx se xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % povrchu těla. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx krycího xxxxxx.

Při pokusech x tuhými látkami, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx zkoušenou látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx zaručen xxxxx kontakt s xxxx. Testované kapaliny xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x xxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx morčata, xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx použití xxxx musí xxx xxxxxxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx předběžný xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) se xxxxxxx xxxx. Samice musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx být xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxxx, která xxxxx zabita xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx hladiny dávek x jednu kontrolní xxxxxxx xxxx - xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx - kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba expozice xx xxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx den xx xxxxxxx dobu. X xxxxxxxxxxx týdenních xxxx čtrnáctidenních xx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xxxxxxxxxxxxx tak, aby xx udržovala xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se kontrolní xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx.

Xxxxxxxx hladina xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx v xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx dávka tuto xxxxxxx překračovat. Ideálně xx střední xxxxxxx xxxxx xxxx vyvolat xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx toxické účinky. Xx skupině x xxxxxx a střední xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx skupině xx počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.

Vede-li xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx vést x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx k xxxxxxx xxxxxxxxx kůže, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nutno xxxxx ukončit x xxxxxxx xxx xxxxx x nižšími xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx-xx xxx předběžné studii xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxx vyšší xxxxx, která xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx člověka, xxxxx toxické xxxxxx, není další xxxxxxx xxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx zvířata xx třeba denně xxxxxxxxx x zaznamenávat xxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x čas, xx xxxxxx se xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx účinky.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata xx xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx dalších 28 dnů xxx xxxxxxxx, xxx se xxxxx pozorovat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx činí nejméně 6 xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nanášet xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx xxxx, u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx pokrýt xx xxxxxxxx část xxxxxxx xxxxxx rovnoměrně x xx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx je xx expoziční dobu xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxx xxxxxx je xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx obvaz x xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxx xx zabránilo orálnímu xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx jiným xxxxxxxx vhodným k xxxxxxxx xxxxxxx.

Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx x trvání.

Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xxx x xxxxxxx, x také xxxxxxx a krevního xxxxx, změny funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx jako xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení studie xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx utratit x xxxxxx.

U xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx podáváním testované xxxxx x xx xxxxx studie xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.

(b) Xx konci pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx trombocytů.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza krve. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx jater x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx látky. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), alaninamino xxxxxxxxxxx (xxxxx glutamát-pyruvát transamináza xxxx) x aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové bílkoviny x xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx potřebné xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx pro studium xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx nejsou xxxxxxxxx historická xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických parametrů xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva zahrnující xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní xxxxxx xxxxxx xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx se co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx vysychání.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx a tkáně xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - v xxxxxx medula/pons, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx, xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx místě xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxx, přídatné xxxxxxxx xxxxxx, žlučník (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x slepé xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), (hrudní xxxx x xxxxxx xxxxx), (xxxx stehenní xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, střed xxxxxx x bederní) x (xxxxx xxxxx). Tkáně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření normální x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx skupiny.

(b) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Je třeba xxxxxxxx cílové orgány x xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.

(d) Xxxxxxx-xx xx potkanů, plíce xxxxxx ve skupinách x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx zdravotního xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx provést xxxx xx xxxxxxxx, na xxxxxxx xxxx zjištěno xxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxx xxxxxx.

(x) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx u ostatních xxxxxxxxxxxx skupin.

2. XXXXX

Xxxxx xx sestaví xx tabulky. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný počet xxxxxx xx počátku xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s jednotlivými xxxx lézí. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx a xxxxx dávek,

- xxxxxxx bez xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx během experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky (xxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx moči),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení výsledků, xxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - INHALAČNÍ

(90xxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx - xxxxxx xx xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx metody

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx jedné xxxxxxxxxxx, x xx po 90 xxx. Použije-li xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx x atmosféře xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která přežijí xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx třeba, přidá xx k testované xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, xxx v xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x nich xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx využít.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Dává se xxxxxxxx potkanům, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu. Xxxxxxx xx xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxxxx xxxx a kmen.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx každou úroveň xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx o počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupinu) 20 zvířat (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx koncentraci x během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx po xxxxxxxx expozic xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Expoziční koncentrace

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx skupiny s xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx x vehikulem - xxxxx se xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x skupiny x xxxxxxxx koncentrací testované xxxxx). X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, mají xxx voleny xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Zvířata xx xxxxxxxx xx xxxx 6 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx studované xxxxx. X případě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx možné xxxxxx i xxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.2.5 Expoziční xxxxxxxx

Pro xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zaručuje xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Použije-li xx xxxxxxxxx box, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx bránil xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx látce xxxx xx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx boxu xxxxx by x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Je možné xxxxxx inhalační xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, samotné xxxxx xxxx individuální xxxxxxxxxx xxxxxxxx; první xxx xxxxxxx expozice minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Doba pozorování

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x zaznamenávat toxické xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x čas, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3. Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx aplikace, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx xxx mezi 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, kde xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Xxxxx expozice xx nepodává xxxxxxx xxx xxxx.

Používá xx dynamický inhalační xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolou koncentrace. Xxxxxxxxxx xx provést xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx potřebných koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx xxxxx nastavit xxx, xxx podmínky x celém xxxxxxxxxx xxxx byly stejné. Xxxxxx musí zaručovat, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx nejrychleji.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:

x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).

x) Skutečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx koncentrace xxx xxxxxxxx, jak xx xx xxxxxxxxx možné. Xxx vývoji xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Během expozic xx měří xxx xxxxx, xxx je xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic.

x) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

x) Xxxxx xxxxxxxx x po xx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, stupeň x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx nedocházelo xx xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy tkání xxxx xxxxxxxx zařazení. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx všechna zvířata, xxxxx přežila, pitvají. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

X všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx studie xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx konci pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx dobu srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx trombocytů.

(c) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové bílkoviny x séru. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx mohou být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.

(x) Analýza moče xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx podkladě xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx dřívější xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení hematologických x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní xxxxxx x jejich obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx vysychání.

Následující xxxxxx x tkáně xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx (xxxx se xxxxxxx neporušeny, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx zachovala xxxxxxxxx xxxx - perfusní xxxxxx xx xxxxxxxx xx vhodnou), xxxx xxxxxxxxxxx, mozek - x řezech medula/pons, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx místě xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, tlusté x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, reprezentativní xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx žláza), (stehenní xxxx), periferní nerv, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx stehenní xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (páteřní xxxxx xx třech xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Úplné histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx exponována xxxxxxxx koncentraci, x x xxxxxx kontrolní xxxxxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinách.

(x) Xxxxx zvířat xx skupinách s xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x zvířat xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx však xxxxxxx xxxx na xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

(x) Xxxxxxx-xx xx satelitní skupiny, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x orgánech, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.

2. XXXXX

Xxxxx se sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx počátku xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx typy xxxx. Výsledky xx xxxxx vyhodnotit vhodnou xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx částic x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx likvidace xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx používán. Popsat xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,

- xxxxx x expozici xx xxxxxxx xx xxxxxxx a uvedou xxxxx s průměrnými xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx obsahovat xxxx xxxxx:

x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením,

x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,

x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přiváděné xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx objemem xxxxxxx),

x) povaha vehikula, xxxxx xxxx xxxxx,

x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx,

x) xxxxxx velikostí xxxxxx (x aerosolu),

- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x podle xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ji xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,

- oftalmologické xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- biochemická vyšetření x jejich xxxxxxxx,

- pitevní nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, kde je xx možné,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx je podávána xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx expozici xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx jsou xxxxxxx xxx standardních podmínkách xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx testu. Xxxx xxxxxx jsou xxxxxx, xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata

Xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx (xxxxxxxx nebo xxxx). Xx xxxxx xxxxxx zdravé x xxxxx jedince xxxxx xxxxxxxxx kmenů laboratorních xxxxxx. Xxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxx xx nejdříve po xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxx xxxxxx xx xxxx zvířat xxxxx xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x obou xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx nejméně 40 xxxxxx (20 samic x 20 xxxxx), xxxxxx x pro xxxxxxxxx skupinu. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx některá xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testu, xx xxxxx použít xxxxxxxxx vyšší xxxxx xxxxxx.

X případě xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx ne xxxx xxx 4 xx každého pohlaví xx skupině.

1.2.2.3 Dávky x xxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx nadměrné xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx toxicity. Střední xxxxx xx měly xxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx x nízkými xxxxxxx. Výběr xxxxx xx xxx xxxx x úvahu xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx exponována xxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx podávána v xxxxx xxxx xxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx x xx měla xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x každém xxxxxx x exponované xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxx způsoby aplikace xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx problémy. Xxxxxxxxx systémová xxxxxxxx x xxxxxxxx kožního xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x znalosti xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, odvozené x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx toxicity.

Xxxxxx xxxxxx

Xxx, kde xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xx-xx xxxxxx xxxxx z xxxx, jimiž xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx důvody. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx podanou x xxxxxxx.

Ideálně xx se měla xxxxx podávat xxxx xxx v xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx pět xxx x xxxxx xxxx vést k xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x xxxxx ovlivnit výsledky x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, dávkování xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

Inhalační xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx aplikace, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o této cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, takže zvíře xx obvykle exponováno xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx denně xx pět xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x návaznosti xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx zvířat denně xx stejnou dobu xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx expozičního xxxx. V obou xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx v xxx, že x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx denní expozice x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx víkendu.

Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx expozice xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx simulována. Xxxxxxx, xx třeba xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx obtíže. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx prostředí xxxxx xxx narušeny xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xx exponují x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proud xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx za hodinu, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx přísun xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x expoziční xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky do xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx by x xxxxx udržení xxxxxxxx xxxxxxxxx v komoře xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx nebo monitorování xxxxxxxx:

(a) xxxxxx xxxxxxx: rychlost xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;

(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx koncentrace xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 15 % xxxxxxx xxxxxxx;

(x) teplota x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx by xxxx xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 ^xX x xxxxxxx x komorách 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx by měly xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;

(x) xxxxxx velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx testovací xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx část aerosolu xxxx xxxxxxxxxxxx. Analýza xxxxxxxxx částic xx xxxx xxx prováděna xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx aerosolu, x poté během xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2.6 Trvání xxxxxx

Expozice látky xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 měsíců.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

1.2.3.1 Pozorování

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx denně s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx ztráty zvířat xx studie, např. xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx u xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx nebo utracení xxxxxx, která jsou xxxxx nebo moribundní. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx sledovat, xxx xx spolehlivě xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx toxických xxxxxx, x také xx xxxxxx minimalizace xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx kanibalismu.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x očních změn x xxxxx zvířat, x dále xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx a xxxxxx toxických příznaků xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx období xxxxx x xxxxx xxxxxx za xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx spotřeby xxxxxxx (a vody xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x pitné xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx intervalech, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxx ukazatele srážlivosti) xx měla xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx a xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx na xxxxxxxx xxxx shromážděných xx xxxxx nehlodavců xxxx. xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xx xxx být xxxxxxx vzorek před xxxxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx být stanoven xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx krvinek xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx zvířat ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x u xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx xxxx xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx od xxxxxxxx zvířat a xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxx dávek x xxxxxxx:

- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- proteiny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, okultní xxxxxxxx (semi-kvantitativně),

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- kvantitativně).

1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx biochemická měření xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx v xxxxx skupině, xxxxx xxxxx xxx tytéž xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Od xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx před xxxxxx. Z těchto xxxxxx xx připravena xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxx:

- xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- testy xx xxxxxx jater (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamát xxxxxxx transaminázy¹⁾, glutamát xxxxxx xxxxxxxxxxxx²⁾, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,

- testy xx xxxxxx ledvin, xxxx. xxxxx močoviny x xxxx.

1) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

1.2.3.5 Pitva

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx utracením se xxxxxxxx xxxxxx krve xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx mohly xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Mělo by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx měly být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a tkání:mozku³⁾ (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, mozečkové xxxx, kory mozkové), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x příštítných xxxxxxx, xxxxx, trachey x xxxx, xxxxx, xxxxx, slinných žláz, xxxxx³⁾, sleziny, xxxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, jícnu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, močového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx³⁾, akcesorních xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx mléčné xxxxx, xxxx, svaloviny, xxxxxxxxxxx nervu, xxxxx (xxxxx, hrudní x xxxxxxx), xxxxxx s xxxxxx dření a xxxxxxxx kosti včetně xxxxxx, a očí. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické zkoumání. Xx speciálních studiích, xxxx xxxx inhalační xxxxxx, má xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x hrtanu.

Xxxx-xx xxxxxxxxx jiná xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx k xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx významné xxxxxxx.

3) tyto xxxxxx x 10 zvířat xx xxxxxxx a xx xxxxxxx x xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) ze xxxxx xxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxx

1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx tumory x xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxxxxx následující xxxxxxx:

(x) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx popisem xxxxx xxxx xxxxxxxxxx:

1. x všech xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx utracena xxxxx xxxxxx,

2. x všech zvířat xx skupiny x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx skupiny,

(x) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,

(c) xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, které by xxxxx ovlivnit xxxxxxxx xxxxxxx, skupina s xxxxxxxx nižší dávkou xx vyšetří popsaným xxxxxxxx,

(x) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx lézí, xxxxx xx normálně xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx nezbytné xxx xxxxxxx posouzení xxxxxxxxxxx xxxx pozorovaných x zvířat s xxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx každou testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx uznávané xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxx

Xxxxxx x testu xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:

- živočišný druh, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,

- xxxxxxxx testu: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx pro vytváření xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x xxxxxxxx: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. standardní xxxxxxxx) x měly xx xxxxxxxxx:

(x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx zařízením

(x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vzduchu)

(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx

(x) xxxxxxxx koncentrace v xxxxxxx zóně

(x) xxxxxxx velikosti xxxxxx (xx-xx xx relevantní)

- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx

- údaje o xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxx a dávky

- neúčinná (dávková) xxxxxx

- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx zda zvířata xxxxxxx xx do xxxxx

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx

- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx abnormální příznak x jeho xxxxx xxxxx

- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx

- oftalmologické xxxxxx

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx

- testy xxxxxxxx xxxxxxxxx a všechny xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxx xxxx)

- xxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxxxxx zpracování výsledků x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

- diskuse xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - HLODAVCI X NEHLODAVCI

1. METODIKA

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxx x odstupňovaných dávkách xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx březích xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx každou xxxxxxx, xxxxxxx x tom xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx porodu xxxx xxxxx samice xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx i x xxxxxxx xx použita x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx- x fetotoxicity.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxx, xxxxxxx samice, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx věku x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx laboratorních xxxxxxxxxx aspoň 5 xxx před započetím xxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx. Oplozené xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx po implantaci x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx organogeneze. Den xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx vyjmuty xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx orgánů včetně xxxxxxxxx xxxxxxxx zpomaleného xxxxx, opožděné xxxxxxxxx x xxxxxxxx do xxxxxx.

1.2.2 Testovací xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Běžně xxxxxxxxxxx druhy jsou xxxxxx, myš, xxxxxx x xxxxxx. Preferovanými xxxxx jsou potkan x králík. Xx xxxxx xxxxxxxx všeobecně xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx by xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x měly xx xxx u xxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxx jednotlivě.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 20 xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx studované xxxxx xx třeba xxxxxxxx dostatečný počet xxxx x xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx

Xx třeba xxxxxx aspoň xxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx i xxxxxxx, xxxxx xxxx podáno xxxxxxx vehikulum. Xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti vehikula: xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxx xx reprodukční xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx stejným způsobem xxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině x výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx biologické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, pak nejvyšší xxxxx testované xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx u xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx mírné xxxxxxx xxxx, ale už xx xxxx xxx 10 % xxxxx. Xxxxx xxxxxx dávek xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x vysokou dávkou.

1.2.2.4 Xxxxxxx test

X xxxxxxx, že xxxxx x xxxxxx toxicitou xxx dávce xxxxxxx 1000 xx.xx-1 prokazatelně xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx dávek.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxx je xxx, xxx je xxxxxxxxxx vaginální xxxxx x/xxxx xxxxxxx (pokud xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xx měla xxxxxxxxx xxxxxx hlavní xxxxxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 6. až 15. xxx x xxxxxxx x xxxx, 6. xx 14. xxx x xxxxxx x 6. xx 18. xxx x králíka. X xxxxxxx, že xx xx xxxxx xxx považován xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxxx umělá xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx den. Podle xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx očekávaným xxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx

Každý xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x opatření jsou xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.

1.2.3 Popis xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx orálně xxxxxx, xxxxx xx stejnou xxxx.

Xxxxxxxxxx samicím xx testovaná xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx období xxxxx. Xxxxx xxxx být xxxxxxxx na xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx látky nebo, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx periodicky xxxxxx x xxxxx upravována xxxxx posledního xxxxxx. Xxxxxxx známky xxxxxxxx xx třeba ihned xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx potratu xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx utratit x xxxxx makroskopicky vyšetřit. X xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx x xx ukončení xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx přibližně xxxxx xxx xxxx porodem. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, ale vyhnout xx komplikacím při xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování xxxxxx v xxxxx xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, dále xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vážit xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

Xxxxx xxxxx x uhynutí během xxxx xx konci xxxxxx, je třeba x samic xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na morfologické xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohly xxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx je xxxxx odstranit xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx počet živých xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. X xxxxxxx x králíků je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx tělísek. Xx xxxxx určit xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zárodků x xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx každý xxxxxxx. X xxxxxxx, xxxx x xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx vrhu a x xxxxxx vhodnými xxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxx pitvou x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx formě xxxxxxx, udávající pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x abnormalitami xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x vztah xxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx k určitým xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1. Xxxxxx x xxxxx

Xxxxxx x xxxxx xx xxxx pokud možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,

- podmínky xxxxx,

- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx použito) a xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxx každou xxxxx,

- dávka xxx účinku (xxxxx xx bylo možno xxxxxxxx),

- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx konce xxxxx,

- údaje x xxxxxxx xxxxxxxxx x spotřebě xxxxxxx,

- délka xxxxxxxx x xxxxx x xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, defekty xxxxxxx x xxxxxxx tkání),

- xxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, defekty xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.32. TEST XXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx v týdnu, xxxxxxx cestou, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx dávka na xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx zvířata xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx projevů xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

Zvířata xx xxxxxxx v xxxxxxxxx podmínkách xxxxxxxx x krmení xxxxxxx xxx dní xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx zvířata náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata

Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx potkan. Xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (hlodavce i xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx chovaných xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx měla xxx započata xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx neměl xxx rozdíl ve xxxx zvířat xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx a kmen x xxxx studiích.

1.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx x negravidní. Xx-xx plánováno xxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, počty xx xxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx koncem xxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx expozic

Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx kromě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň by xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx pokles xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx.

Nejnižší xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx vysokou x xxxxxx dávkou.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x studie xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxx. Je-li xxxxx podávána x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx by být xxxxx k xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxx

Souběžná kontrolní xxxxxxx je identická x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice testované xxxxx.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxx použije-li xx xxx orální xxxxxxxx emulgátoru, jehož xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx orální, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a pravděpodobném xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.5.1 Orální xxxxxx

Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx traktu x je-li xxxxxx xxxxx x cest, xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata mohou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxx by xx xxxx látka xxxxxxx xxxx dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x týdnu xxxx xxxx k vymizení xxxxxxxx xxxx naopak xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x tudíž xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx xx považováno xx xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx simulace xxxxxx xxxxx xxxxxx x člověka x xxxx modelový způsob xxxxxxxx xxxxxxx poškození.

1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx

Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx než xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx zde uvedeny xxxxxxxxxx informace x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx xx specifických xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx xxxxxxx exponováno xx xxxxxxxx koncentrace xxxx hodin denně xx xxx xxx x týdnu (přerušovaná xxxxxxxx), xxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x prostředí, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx v xxxxx (kontinuální expozice), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro krmení xxxxxx denně xx xxxxxxx xxxx dne, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx expozičního xxxx. X xxxx případech xxxx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx účinků xxxxx expozice s xxxxx delším xxxxxxx xxxxx víkendu.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx technické xxxxxx. Například, výhody xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx nutnosti xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x potřebou xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace par x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx

Zvířata xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx komory xx xxxx mít identickou xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Uvnitř xxxxxx xx obvykle xxxxxxx mírný podtlak x tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx okolního xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx shlukování xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecně xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře objem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

(a) Xxxxxx vzduchu: rychlost xxxxxxx vzduchu xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

(x) Koncentrace: během xxxxx expozice by xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx hodnoty.

(x) Xxxxxxx a xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X a xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx. Oba xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

(x) Měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být x respirabilní xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx xxx distribuci xxxxxx, kterým xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, x když xxxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.6 Trvání xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx normální xxxx xxxxxx xxxxxxx použitého xxx test. Xxxx xx měl být xxxxxxx x 18 xxxxxxxx u myší x xxxxxx x 24 měsících u xxxxxxx. Nicméně, xxx xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx ukončení xx xxxx xxx 24 xxxxxx xxx xxxx x xxxxxx x 30 měsíců xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx prodloužené xxxxxx xx přijatelné, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx klesne na 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, ve xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx zvlášť. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx nutné xxxx k xxxxxxxx xxxxxx testu, xxxxx xxxxxxx skupiny xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) v žádné xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx u xxxx x křečků a x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Pozorování

Denní xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx a srsti, xxx a sliznic, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx nervového systému, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx, xxx se zabránilo xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Moribundní xxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.

Klinické xxxxxxxx x mortalita by xxxx xxx xxxxxxxxxxx x všech xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx věnovat xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx hmatného xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx a xxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx období xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx

Pokud pozorování xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stavu xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xx 12 xxxxxx, xx 18 xxxxxx x před xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx nátěr xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxxx. Xxxxx tato xxxx, xxxxxxx údaje xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx patologických xxxx xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál xx vyšetří x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx je vysoká xxxxx.

1.3.2.2 Pitva

Xxxxxxxxx xxxxx by měla xxx xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx nemocná. Xxxxxxx xxxxxxxxx tumory xxxx xxxx, nebo xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.

Následující xxxxxx x xxxxx xx měly xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx: xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, kory mozkové), xxxxxxxx mozkový, štítná xxxxx x příštítná xxxxxxx, xxxx thymu, xxxxxxx x plíce, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, pankreas, xxxxxx, děloha, xxxxxxxxx xxxxxxxx orgány, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, representativní xxxxxxxxxx uzlina, samičí xxxxxx xxxxx, svalovina xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx s xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, mícha xx xxxxx xxxxxxxx (xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx) x xxx.

Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx uchování xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx plic x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx zásadní pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxx respirační xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x u xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx.

(b) Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x léze, které xxxx xxxxxxxxx jako xxxxxx, se vyšetří xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx.

(x) Xx-xx xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx skupinou x xxxxxxx dávkou a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x x dalších xxxxxxxxx.

(x) Xx-xx přežití xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx u xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší xxxxxx.

(x) Xx-xx ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mohly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx kompletně vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx zvířat vykazujících xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Výsledky xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Zpráva o xxxxx

Xxxxxx o xxxxx xxxx, pokud xxxxx, xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,

- podmínky xxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího z xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx je xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx tabulky včetně xxxxxxxxxx hodnot a xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:

(x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,

(x) skutečné xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,

(x) mediány velikosti xxxxxx (xxx xxx xx xxxxxxxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x koncentrace,

- xxxxxxxxx tumorů xxxxx xxxxxxx, dávky x xxxx xxxxxx,

- xxxx xxxxx během xxxxxx nebo zda xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx,

- xxxxxx toxických xxxxxx xxxxx pohlaví a xxxxx,

- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx abnormální příznak x xxxx další xxxxx,

- data x xxxxxxxx xxxxxxx x tělesné hmotnosti,

- xxxxxxx hematologické xxxxx x xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx metod,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

B.33. XXXXXXXXXXX XXXX CHRONICKÉ XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx expozici.

Xxx xxxxx účel xx xxxx karcinogenity xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x kontrolní xxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávka použitá xxx tuto satelitní xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx použitá při xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Zvířata x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxx toxicitu, xxx xx karcinogenní xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx toxicitu.

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na skupinu, xx xxxxx xxxx xxxxxx zvířat. Během x xx expozici xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx denně pozorována xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx x pokusných xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxx xxxxxx xx mladá xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělí xx kontrolních x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Preferovaným xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx druhy (xxxxxxxx x nehlodavce). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx chovaných xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx xx nejdříve xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx průměru. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx orální toxicity, xx třeba xxxxxx xxxxxx xxxx a xxxx x obou xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina. Xxxxxx by xxxx xxx nullipary a xxxxxxxxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx (xxxxxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx tumory, xx xxxxx měla xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx satelitní xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

Pro xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx xxxxxx účinky xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx interferovat x xxxxxxxxx růstem, xxxxxxx x délkou xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Střední xxxxx/xxxxx xx xxxxx stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx vysokou x xxxxxx dávkou.

Xxx xxxxx dávkových úrovní xx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx.

Pro xxxxx xxxxxxxxx chronické xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx satelitní xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxxxxxx zřetelné příznaky xxxxxxxx.

Xxxxxxxx se xxxxxxx obvykle xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina je xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce.

Xx xxxxxxxxxx případech, xxxx xxxx inhalační studie x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx orální, xxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx na fyzikálních x chemických charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.5.1 Orální xxxxxx

Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x gastrointestinálního xxxxxx a je-li xxxxxx xxxxx z xxxx, jimiž může xxx xxxxxxxxx člověk, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx proti xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx v pitné xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.

Xxxxxxx xx xx měla xxxxx podávat xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx dávkování xxx xxx x týdnu xxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx v xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Dermální xxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx může xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx cesty xxxxxx x člověka x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.5.3 Inhalační xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx komplikovanější xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx zde xxxxxxx podrobněji xxxxxxxxx x této xxxxx xxxxxx. Intratracheální xxxxxxxxx xxxx být platnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx napodobují xxxxxxxxxxxxx xxxxxx expozice, xxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx po pět xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin denně xx sedm xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s přibližně xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx zvířat denně xx xxxxxxx xxxx xxx, použitou x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X obou xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx je v xxx, že x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx víkendu.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx simulována. Xxxxxxx xx xxxxx vzít x úvahu určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx a technik xxxxxxxxxxxx.

Expoziční komory

Xxxxxxx se exponují x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x rovnoměrná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x expoziční komory xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx brání xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx udržení stabilní xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:

(x) xxxxxx vzduchu: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx denní expozice xx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx než ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxxxxxx x vlhkost: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx by xxxx xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x atmosféře xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x respirabilní xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx odpovídat celému xxxxxxxxxxxxxx aerosolu, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx generujícího systému, xxx zajistila xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx expozic xxx xxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx zvířata xxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Trvání xxxxx xxxxxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx by xxx xxx xxxxxxx v 18 xxxxxxxx u xxxx x křečků x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx života xxxx. x nízkým spontánním xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx měla xxx 24 xxxxxx xxx xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx pro xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx studie xx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx nebo v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx ukončení xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx zvlášť. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx celého xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x důsledku xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx větší xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx skupinách xxxxx xxx nižší xxx 50 % v 18 xxxxxxxx x xxxx a křečků x x 24 xxxxxxxx x potkanů.

Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x 10 připojených xxxxxxxxxxx xxxxxx každého xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity xx xxxx xxx v xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx by mělo xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stárnutí.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Pozorování

Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat x klecích xxxxxxxx xxxxx kůže x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

U xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vyšetření.

Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx xx xxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx studie xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx a pitvána.

Xxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx zvířat. Zvláštní xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx objevení, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, vzhled a xxxxxxxx každého xxxxxxxxxxx xx hmatného xxxxxx xx zaznamenává.

Je xxxxx provádět xxxxxx xxxxxxxx potravy (a xxxx xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx by xxxxxxxxx xxxx xxxx změny xxxxxxx xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx frekvence xxxxxxxxx.

Tělesné xxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx testu a xxxxx jednou xx xxxxx týdny po xxxxx období.

1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx

Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx být xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx konci xx xxxxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xx pohlaví x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx je xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx od xxxxx potkanů.

Pokud xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx zdravotním xxxxx xxxxxx během xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx provede xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx dávkou x x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx nebo xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změn naznačí xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x x xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx vysoká dávka.

1.3.2.2 Xxxxxxx moči

Xxxxxx xxxx od 10 xxxxxxx každého xxxxxxx xx sbírají xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx stanovení xxxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx vzorku xxx xxxxxxx xxxxx dávek x xxxxxxx:

- xxxxxx xxxx, objem x xxxxxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx, glukóza, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),

- mikroskopické vyšetření xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).

1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx. Od xxxxxxxxxx xx xxxxx toho xxxxxxxx xxxxxx před xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx připravena xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx¹⁾, xxxxxxxx xxxxxx transaminázy²⁾, gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx. krevní xxxxxxx xx xxxxx,

- xxxxx na xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx močoviny x xxxx.

1) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxx aminotransferáza

2) xxxx známá xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx pitva xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx diferenciální xxxxx bílých xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx léze, xxxxxx xxxx léze, xxxx xxxx, xxxxx xx mohly xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx by xxx xxxxxxxxx porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx měly xxx xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx týká následujících xxxxxx x xxxxx: xxxxx³⁾ (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx kory, kory xxxxxxx), podvěsku xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx tělísek, xxxxx, xxxxxxx a xxxx, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, jater³⁾, sleziny, xxxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, gonád³⁾, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x bederní), xxxxxx x xxxxxx dření x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx plic x močového xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; naplnění xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Ve speciálních xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx studie, má xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx a xxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože mohou xxx patologovi xxxxxxxx xxxxxxx.

3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx na pohlaví x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x satelitní xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxxxxx nevyšší xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx histologicky cílové xxxxxx všech xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x ze xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx části xxxxxx věnované xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:

(x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo byla xxxxxxxx xxxxx testu x x xxxxx xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx;

(x) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, které xxxx podezřelé xxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u všech xxxxxx;

(x) je-li xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx tkáni x x dalších skupinách;

(x) je-li xxxxxxx xx skupině x xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší xxxxxx;

(x) xx-xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, je xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx sumarizují xx xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat xx začátku testu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx jejich xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx s tumory xxx xxxxxxxx. Výsledky xx hodnotí odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxx

Xxxxxx o xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,

- xxxxxxxx testu: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro vytváření xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Dále xx xxxxx popsat xxxxxxxx pro měření xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx je xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x expozici: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxx:

(a) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx zařízení,

(b) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx,

(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx použito,

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,

(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xxxxxxxxxx),

- xxxxxxx úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) a xxxxxxxxxxx,

- data xxxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxxx, xxxxx x typu xxxxxx,

- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx do xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxxx x dávky ,

- xxxxx xxxxxxxxx a jiných xxxxxx,

- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,

- data x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx hmotnosti,

- oftalmologické nálezy,

- použité hematologické xxxxx x výsledky,

- testy xxxxxxxx xxxxxxxxx a všechny xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxx moči),

- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx.

X.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná látka xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Samci dostávají xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx růstu x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx x 70 dnů x xxxxxxx), xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) dostávají xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx cyklů, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx. Zvířata xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka podává xxxxxxxx xxxx pohlaví, x xxxx gravidity x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx modifikovat.

1.2 Popis xxxxxxxxx metody

1.2.1 Příprava

Xxxx zahájením xxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx jsou chována xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x těch podmínkách xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx xxxxxxx v potravě xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Všechna xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx testu. Pokud xx xxxxxxx x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx účinky. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 dní v xxxxx.

1.2.2 Pokusná xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx druhu

Xxxx xx přednost xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx zdravá zvířata, xx té xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx. Musí xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxx x/xxxx věku. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x kontrolní, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx zahájením aplikace.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxx skupina musí xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx samic x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx je xxxxxx dostatečný počet xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnocení xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x X generaci, kojení, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X₁ xx xxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx ad xxxxxxx. Před xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvláštních xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx materiál xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x jedna xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vehikulum, xxx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx testovaná xxxxx xxxxxxx příjem x xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, spárované xx xx xxxxxx.

Testovaná xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx to xxxx xxxxxxx jejími xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx povahou xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx toxicitu, ale xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Střední xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xx xxxx připsat xxxxxxxxx látce, x xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxx x rodičů xxx u xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx dávka stanoví xxxxxxxxxxxx na základě xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx podle xxxxx xxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx samic xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxxx xxxx

X xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx reprodukci, xxxxxx xx provádět xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Pokud xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx vysoká dávka, xxxxxxxxxxxx u matek xxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx provádět xxxxxx xx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Xxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx samcům xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, xx nejméně pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X potkanů xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 týdnů xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx pokračuje v xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx xxxxxx.

Denní xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) začne po xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx aspoň dva xxxxx xxxx obdobím xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx týdny xxxxxx připouštění, v xxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx X₁ xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx bioakumulaci.

1.3.2 Xxxxxx xxx připouštění

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (jedna samice x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).

X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx otěhotnění xxxxx xx dobu 3 xxxxx. Každé xxxx xxxx xxxxxx vyšetřeny xx přítomnost xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx zátky. Xxx 0 těhotenství xx xxxxxxxxx jako xxx nálezu xxxxxxxxx xxxxx nebo spermatu.

Xxxxxxx, u xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x cílem xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx je možné xxx xxxxxxxxxxx další xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx pohlaví xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.3 Velikost xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx plodnosti je xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x pečovat x své xxxxxxxxx xx okamžiku odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: mezi 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 samců x 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx jiné počty, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx xx měří xxxxx jak xxxx, xxx během doby xxxxxxxxxxx. Během gravidity xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx příjem xxxxxxx (x xxxx, xxxxx xx látka xxxxxx x pitné xxxx) xx stejný xxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X xxxxxxx xx xxxx xxxxx den xxxxxxxx x xxx xxxxx. Všechna pozorování xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.

Doba xxxxxxx xx počítá xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx vrh xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xx počty x pohlaví mláďat, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx porodů x xxxxxxxxxx xxxxxxx anomálií.

Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx mláďata xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. xxx x xxxxx každý xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.3.5 Xxxxxxxxx

1.3.5.1 Pitva

Xx utracení xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx změny xx xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx defekty.

1.3.5.2 Histopatologická xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, vagina, varlata, xxxxxxxxxx, semenné xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx P se xxxxxxxx xxx mikroskopické xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx x skupiny xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxx u xxxxxx, která xxxxxxx x průběhu xxxxxx.

Xxxxxx, xxxxx jevily xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx x x X xxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx již xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx mají xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

Data xx sumarizují x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx pro každou xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, počet plodných xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x procento xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje:

- xxxx/xxxx použitých zvířat,

- údaje x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx plodností, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxx uhynutí x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx pokusu,

- tabulka uvádějící xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x konečnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx,

- xxx, kdy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X xxxxxxxx,

- xxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- xxxxxxxxxxx zpracování všech xxxxx, pokud je xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.35. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - DVOUGENERAČNÍ XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x odstupňovaných xxxxxxx.

Samci xxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku x xxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 dnů x xxxx x 70 dnů x xxxxxxx), aby byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xx spermatogenezu.

Xxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx pohlaví x xxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x kojení, xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxx xx látka xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X₁ x xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx a xx xx xxxx odstavení X₂ xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx metodu xxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx skupin - kontrolní x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Rodičovská xxxxxxx (P) jsou xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx v xxxxx vodě. Xxxx xxxxxxx podání jsou xxxx xxxxx. Všechna xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, musí být x xxxx známo, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.

1.2.2 Pokusná xxxxxxx

Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Používají se xxxxxx X zvířata, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Nepoužívá xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx být ověřena x obou xxxxxxx. Xxxxxx x obou xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3 Počet x xxxxxxx

Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx skupina xxxx xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx samic x přibližně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx získat xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx spolehlivé hodnocení xxxxx xxxxx na xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x mateřské chování, xxxxxx, růst x xxxxx xxxxxxxxx generace X₁ xx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx potomstva xxxxxxxx F₂ xx xx xxxxxxxxx.

1.2.4 Podmínky xxxxx

Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx libitum. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx porodních xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xx jim xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.5 Xxxxxxxxx

Použijí xx alespoň xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx kontrolní. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, pak zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx a utilizaci xxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, spárované xx do xxxxxx.

Xxxxxxxxx látka x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x ideálním xxxxxxx, xxxxx to dovolí xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxx x xxxx biologické xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx dávka(y) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxx xxxxxxx testované látce, x xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx u xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.

Při xxxxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x přizpůsobuje se xxxxx xxxxx podle xxxxx hmotnosti. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx určeny xx xxxxxxx tělesné hmotnosti x 0. xxxx 6. dni xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2.6 Limitní xxxx

X xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, pokud xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 neprojevuje xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx studie xxxxx, že xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx účinky na xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Xxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxxx ve xxxx pěti xx xxxxxx týdnů, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. U xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx připouštění (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x vyšetří xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vrhů a xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx někdy xxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxxx xx pětidenní xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx xxxxx období připouštění, x xxxx xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxx X₁ xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx změna xxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx studované xxxxx, xxxx. o xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. x xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxx po odstavu x končí jejich xxxxxxxxx.

1.3.2 Postup při xxxxxxxxxxx

Je možno xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (jedna xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx xx dvěma xxxxxxx).

V případě 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx x týmž xxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx po xxxx 3 týdnů. Xxxxx xxxx xxxx samice xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx nálezu xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.

Xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx F₁ xx xxxxxxxxxxx xxx připouštění xx věku 11 xxxxx x myší x 13 xxxxx x xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X₁ xx náhodně xxxxxxx páry x xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxxx, x kterých xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx páru. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx obou xxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx orgánů xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a spermatogenezy.

1.3.3 Xxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx porodit xxxxxxxx x pečovat x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. dnem xx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx nadbytečných xxxxxxx xxx, aby xx dosáhlo xxxxx 4 xxxxx a 4 xxxxx xx xxx; xxxxx to xxxx proveditelné, je xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, např. 5 xxxxx x 3 samice. Xxxx xxxxx než 8 xxxxx standardizovat. Xxxxxxxxxxxxx xxxx generace X₂ xx xxxxxxx xxxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Xxxxx zvíře xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou xx xxx. Významné změny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x všechny příznaky xxxxxxxx, xxxxxx mortality, xx zaznamenávají. Xxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx doby xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx potravy xxxxx. Xx xxxxxx a x průběhu xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx stejný xxx, xxx xx xxxxxxxxx váženo. Xxxxxxxxxx X a F₁ xxxxxxx xx xxxx xxxxx den xxxxxxxx x xxx týdně. Xxxxxxx pozorování xx xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx dospělé xxxxx.

Xxxx gestace xx xxxxxx od xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx po porodu xxxxxxx x stanoví xx počty a xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Mrtvá xxxxxxx x mláďata xxxxxxxx ve xxxxxxx xxx xx uchovají xxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx. Živá xxxxxxx xx spočítají x xxxx vrhy xx xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. xxx x potom xxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx zvířata zvážena xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x zaznamenávají všechny xxxxxxxxxxx v chování x xxxxxxxx stavu xxxxx x xxxxxxxxx.

1.3.5 Xxxxxxxxx.

1.3.5.1 Pitva

Xxxxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxxx X x F₁ xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx uchovávat xxx xxxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxxxxx xxx připouštění x xxxxxxx xxxxxxx generace X₂ xx utratí xx xxxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx nebo xxxxx xx všechna xxxxxxxxxx xxxxxxx P a X₁ makroskopicky xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mláďata xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx cílové xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X x X₁ xx xxxxxxxx xxx mikroskopické xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx orgány xxxxxx xxxxxxx vyšetřeny v xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx X a X₁ xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx dostávající xxxxxxxx dávku, která xxxx vybrána xxx xxxxxxxxxxx, x dále x zvířat, která xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Orgány, xxxxx xxxxxx abnormality x xxxxxx skupin xxxxxx, xx xxxxxxx i x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, xxx změn x procento xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zpracovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Může xx xxxxxx kterákoliv xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxx:

- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- údaje x toxické xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx ukazatelů xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx hmotnost x xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx hmotnost xxxxxxx před xxxxxxxxx,

- xxxxxxx x xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,

- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx vývoj,

- xxxxxxx hmotnost xxxxxx X a F₁ xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx,

- pitevní xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- statistické xxxxxxxxxx všech xxxxx, xxxxx xx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- interpretace výsledků.

X.36. XXXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx stanovené xxxx, xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx. xxxx metabolity xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx tekutinách, tkáních xxxxx v xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx s "neznačenou" xx "xxxxxxxx" xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx se tak, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx informací x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx testovací xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx zvířata jsou xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx dnů xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx náhodně rozdělena xx xxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx může použít xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx zvířat.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx provádějí xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druzích. Xxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx užití x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx testovanou xxxxxx. Jestliže xxxx xxx testování používáni xxxxxxxx, neměla xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx užije xxxxxxx 4 zvířat pro xxxxxx jednotlivou xxxxx. Xxx testování xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxx potřeba xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x různých xxxxxxx, xxxxx je třeba xxxxxxxx 4 zvířata xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx než xxxxxxxx) je možné xxxxxx menší xxxxx xxxxxx.

Je-li xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, pak xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxxx xx třeba xxxx x xxxxx xxx xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém bodu, xxx počet xxxxxxxx xxxx, v xxxxx xxxx xxxxxxxxx prováděno.

Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx je úměrná xxxxxxxx studie.

Zahrnuje-li xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx skupiny xxxxxx xx xxxx počítat x počtem časových xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, ale xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxx 2 xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xx, xxx xxx látku resp. xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx

X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podání xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx to xxx nízká xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, po xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

V případě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxx podání xxxxxxx dávek xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxx aplikace

Xxxxxxxxxxxxxxx studie xx xxxx být prováděny xxxxxxx způsobem xxxxxxxx x je-li xx xxxxxx x xx xxxxxxx vehikulem xxx, xxx xxxx používány x ostatních xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxxxxx sondou nebo x potravě, xxxxxxxxxx xx kůži, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx být užitečné xxx xxxxxxxxx relativního xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx důležité xxxxxxxxx x distribuci xxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxxx by se xxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxxxxxx vehikula x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxx xx měla být xxxxxx věnována rozdílům xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx v potravě, x xxxxxxx přesného xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx testovaná látka xxxxxxxx v xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx xxxxxxxx x další xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx a trvání.

1.3 Xxxxx postupu

Po xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx způsobem xxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx zvířata před xxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx.

1.3.1 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx absorpce xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx různé xxxxxx x xxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx¹⁾, a xx xxxx.:

- xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, žluči, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx vzduchu x xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxx biologické odpovědi (xxxx. studie xxxxxx xxxxxxxx) mezi xxxxxxxxxx x kontrolní x xxxxxxxx referenční xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx vylučovaných xxxxxxxxx xxxx testovanou a xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,

- xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. jejích metabolitů x xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxx x daty xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině.

1) X xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx látka podávána xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxx

X xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, x xxxxx pro analýzu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx použity jeden xx xxx:

- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx informace;

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx ze zvířat x různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx zahájení xxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxxxx

Xxx xxxxxx vylučování xx xxxxx moč, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx vzduch, v xxxxxxxx případech xxxx. Xxxxxxxx testované látky x xx. jejích xxxxxxxxxx xx v xxxxxx exkretech xxxxxxxxx xxxxxxxxxx po xxxxxx xxxxx, x to xxx xx vyloučení 95 % x xxxxxxxx množství xxxx xxxxxxx 7 xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx speciálních případech xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat.

1.3.4 Xxxxxxxxxxxx

X určení xxxxxxx a schématu xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx analyzují xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx metabolitů x xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxx xxxxxx tam, kde xx xxxxx xxxxxxxxx xx otázky z xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x metabolismu xxxx xxx xxxxxxxxx provedení xx vitro studií.

Xxxxx informace x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x toxicitou xxxxx xxx získat z xxxxxxxxxxxxx studií např. xxxxxxx účinků xxxxx xx enzymy xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, sledováním xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxxx se podle xxxx prováděné studie xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx možno xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx průměry x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxx, xxxxx, tkáni x xxxxxxx (pokud xx xx xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx x rychlost xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx metodami. V xxxxxxx metabolických xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx metabolické xxxxx studované xxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x testu xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx údaje:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, jestliže xxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx(x) podání a xxxxxxx použitá vehikula,

- toxické x x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. jejích xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxx, tkání x xxxxxx,

- uvedení xxxxxxx vstřebávání x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx,

- xxxxxx užité xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx,

- navrhované xxxxxx xxx metabolismus,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH XXXXXXXXX XXXXXXX - XXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx vzít x xxxxx schopnost xxxxxx skupiny látek xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx nemůže xxx zjištěn v xxxxxx xxxxxxxx toxicity. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx testy xx vitro xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx látek, které xxxxx vyvolat pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nález x xx vitro xxxxxx však xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Xx skupiny látek xxxxxxxxxx x názvu xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx anhydridy xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx amidothiofosforečných, nebo xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx způsobit xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.

Pozdní xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx v xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxxxxxxx látky

Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx testovaných xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx neurotoxickým xxxxxxx xx tri-o-tolylfosfát (XXX 78-30-8, EINECS 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx kyseliny fosforečné, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (XXXX).

1.4 Xxxxxxx testovací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky. Xxxxxxx se po xxxx 21 xxx xxxxxxxx, zaznamenává xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Biochemické xxxxxxxxx, xxxxxxx inhibice XXX, xx xxxxxxx x slepic xxxxxxx xxxxxxxxx z každé xxxxxxx, obvykle 24 x 48 hodin xx xxxxxx xxxxx. 21 xxx xx xxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxx utraceny x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření vybraných xxxxxxxxx tkání.

1.5 Xxxxx xxxxxx testování

1.5.1 Xxxxxxxx

Xxxxx zdravé dospělé xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx experimentální a xxxxxxxxx skupiny. Nejméně 5 dní xxxx xxxxxxxxx studie jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxxx umožňující xxxxx xxxxx slepic x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx tobolkami nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxx xx podávají xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx doporučuje xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx dávky xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.

1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx domesticus) xx xxxx 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x standardní xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.

1.6.1.2 Xxxxx a pohlaví

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx se zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými.

X xxxxx skupině má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx aspoň xxxx z xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx třech xxxx x xxxxx xxx xx xxxxxx) a xxxx xxxxxxx 21denní xxxxxxxxxx.

Pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupina x xxxxxxx xxxxxxxx. Má xxx xxxxx xxxx xxxxxx, kterým xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, tři xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxx slepice xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxxxx laboratoři xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx prvků testu (xxxx. xxxxxxx, potrava, xxxxxxxx chovu).

1.6.1.3 Volba xxxxx

Xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx příslušného xxxxx xxxxxx a xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, aby xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx x hlavní xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx x této xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Aby xx xxxxxxxxx úmrtí pro xxxxxx cholinergní xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx použito xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx údaje xxx xxxxxxx xxxx xxxx toxikologické xxxxxxxxx xxxxx být xxxx xxxxxxxxx při výběru xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx co xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x výsledkům xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx limitu xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx přežití dostatečného xxxxx zvířat pro xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 xxxxx xxx histologii (šest). Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx přípravek, o xxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx cholinergními xxxxxx.

1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx s dávkou xxxxxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx očekávat, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx o studii x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Limitní xxxx xx xxxxxxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se x lidí naznačuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx 21 xxx.

1.6.2 Xxxxx postupu

Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx úmrtím xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx podána x jediné xxxxx.

1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Pozorování xx xxxxx xxxxxxxx xx podání látky. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx prvních xxxx dnů a xxx xxxxx jednou xxxxx xx xxxx 21 dní xxxx xxxxx nebudou xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Veškeré xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx nástupu, xxxx, xxxxxx a xxxxxx abnormálního xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx nejméně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vykazující xxxxxxxxxxx změny xxxxxx x klecí a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx po žebříku, xxx xx usnadnilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Umírající zvířata x zvířata xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, humánním xxxxxxxx xxxxxxx a pitvat.

1.6.2.2 Xxxxxxx hmotnost

Všechny xxxxxxx xx zváží xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx aspoň xxxxxx xxxxx.

1.6.2.3 Xxxxxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxxx vybraných x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem a xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx (xx-xx skupina xxxxxxx) xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx inhibice NTE xx vyjmou xxxxx x lumbální xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx inhibici XXX. Xxxxx xx xxxxxxxx tři xxxxxxx x kontrolní x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxx tři xx 48 hodinách, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx pouze xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxx xx xxxxxx cholinergních xxxxxxxx), xxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx ze xxx xxxxxx, a xx xxxx 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx.

X xxxxxx vzorků xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, což může xxxx x xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxx XXxX.

1.6.2.4 Xxxxx

Pitva x xxxxx zvířat (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x utracených xxx špatný xxxxxxx xxxx) zahrnuje makroskopické xxxxxxxxx stavu xxxxx x xxxxx.

1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx x přeživších zvířat (xxxxxxxxxxx xxx biochemické xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx situ xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se: xxxxxxx (xxxxxxx podélný xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx se provádějí x horní xxxxx xxxxx, střední xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, z xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx distální xxxx x x. tibialis (x xxxx větve x m. xxxxxxxxxxxxx) x x n. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx myelin x xxxxx.

2. XXXX X XXXXXX XXXXX

Negativní xxxxxxxx x účincích xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, histopatologie x xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx další testování xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx údaje pro xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx jevících xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx x procento xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.

Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.

Číselné xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x obecně xxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx plánované studie.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:

Xxxxxxxxx zvířata:

- xxxxxxx xxxxxxx;

- počet a xxxxx xxxxxx;

- xxxxx, podmínky ustájení xxx.;

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxx x přípravě, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávek;

- specifikace xxxxxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;

- podrobné xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxx o tělesné xxxxxxxxx;

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxxxxxx, stupeň a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx vratných xxxx xxxxxxxxxx);

- podrobný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxx nálezy;

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX TG 418.

X.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX 28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx xxxxxxxxxx typ xxxxxxxxxxxxx, který xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých organických xxxxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx testovány touto xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx mohou xxx použity xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx vitro xxxxxx xxxx není xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxx 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx opakovaných během xxxxxxxx xxxxxxxx časového xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x závislosti xxxxxxxx xx dávce a xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx úrovní, xx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx úroveň xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x názvu této xxxxxx jako "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo amidofosforečné xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx této skupiny.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx projevující xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x periferním xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) v xxxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx orálně xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxx sledována nejméně xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx vyšetření, zvláště xxxxxxxx XXX, se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Dva xxxxx xx poslední dávce xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.4 Xxxxx metody xxxxxxxxx

1.4.1 Xxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxxxx slepice xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění x farmakologické xxxxx x s xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx velké xxxxx xxxx xxxxxx umožňující xxxxx xxxxx xxxxxx x snadné xxxxxxxxxx xxxxx.

Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxx 7 dní x xxxxx, xxx xxxxxx, želatinovými xxxxxxxxx xxxx xxxxx srovnatelnou xxxxxxx. Tekutiny xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxx,

jako je xxxx. kukuřičný olej. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, neboť velké xxxxx pevných xxxxx x xxxxxxxxxxxx tobolkách xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Doporučuje xx mladá xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Gallus xxxxxx domesticus) ve xxxx 8 až 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.

1.4.2.2 Počet x xxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx úrovně dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.

X xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx aspoň xxxx x nich xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx x každém xx xxxx časových xxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.4.2.3 Xxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxx x toxicitě nebo xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, nejlépe příznaky xxxxxx neurotoxicity, nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx sledovat xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx toxicity.

1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx x dávkou xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, xx použití xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, nevyvolá xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx údajů x xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx není důvod xxxxxxxx očekávat, xxx xxxx xxxxx uvažovat x xxxxxx x xxxxxxx xxxxx dávky. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxx potřebu xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx dávky.

1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx pozorují nejméně xxxxxx xxxxx po xxxx xxxxxxxx a 14 xxx po xx, xxxx xx xxxxxxxx a do xxxxx xxxxx plánu.

1.4.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxx x xxxxx xx 28 xxx.

1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx má xxxxx xxxxxxxx po začátku xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxx po 28 xxx a dalších 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx podle xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, typu, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, ale xxxx xx xx ně xxxxxxxx. Ataxie xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pořadové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx se usnadnilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Umírající zvířata xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx utratit a xxxxxx.

1.4.3.2 Tělesná xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxx jednou týdně.

1.4.3.3 Xxxxxxxxx

Šest slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx se usmrtí x xxxxxxx dnech xx aplikaci xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx NTE xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx po 24 xxxxxxxx a xxxxx tři xx 48 hodinách xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx údaje z xxxxxx studie nebo xxxxxx studií (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx výhodnější xxxx xxxx usmrcení xx xxxxxxxx aplikaci, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dobu x xxxxxxxxxx uvést v xxxxxxxxxxx.

X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx nastat xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx x xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx XXxX.

1.4.3.4 Xxxxx

Xxxxx všech zvířat (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx stav) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení stavu xxxxx x xxxxx.

1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

Nervová xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (nepoužitých pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx fixují xx xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, mícha (xxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), x xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. xxxxxxxx (x xxxx xxxxx x x. gastrocnemius) x x n. xxxxxxxxxxx. Řezy xx xxxxx specifickými xxxxxxx xx xxxxxx a xxxxx.

Nejprve xx xxxxxxx xxxxxxxx tkáně xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx x zvířat skupiny x xxxxxxxx dávkou xxxxxx účinku, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx vyšetření x na slepicích xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x nízkou.

2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ

Xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx metodou (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx chování) negativní, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx neurotoxicitu. Neprůkazné xxxx xxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo biochemické xxxxxx, xxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx poškození xxxx xxxxxx.

Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, závažnosti x korelaci xxxx xxxxxxx chování, biochemickými x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistické xxxxxx se xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Zpráva o xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:

Xxxxxxxxx zvířata:

- xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx x stáří xxxxxx,

- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.

Podmínky xxxxxxxxx:

- podrobné údaje x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x homogenitě testované xxxxx,

- zdůvodnění xxxxxx vehikula,

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x kvalitě xxxx,

- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx dávek,

- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx doby pro xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx jiná xxx 24 x 48 xxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx (XXXXX),

- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx klinických xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx),

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x jejich výsledky,

- xxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx možné.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 419.

X.39. Xxxx xxxxxxxxxxx syntézy XXX x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx

1. XXXXXX

Xxxxxx xx replikací XXXX TG 486, Xxxxxxxxxxx DNA Xxxxxxxxx (XXX) Xxxx Xxxx Xxxxxxxxx Xxxxx Cells Xx Vivo (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx syntézy XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) v savčích xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx xx určit xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX v jaterních xxxxxxx pokusných xxxxxx (1) (2) (3) (4).

Xxxxx xxxx xx vivo xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx následnou reparaci. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx místem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxx xxxxx xxxxxxx objektem xxx xxxxxxx poškození XXX in xxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o xxx, xx xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx tento xxxx xxxxxx.

Výsledek neplánované xxxxxxx XXX (UDS) xx hodnotí xxx, xx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nukleosidů x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx plánovanou (X-xxxx) xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxxxxx xx metoda, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (³X-XxX). Xxx xxxxx XXX xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx potkaní játra. Xxxx xxxxx xxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.

Detekce xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx bází XXX, xxx jsou v xxxxx xxxxxxxxx odstraněny x xxxxxxxxx. Proto xx xxxxxx UDS xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx indukujících "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) je méně xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx replikace xxxx XXX. Rozsah xxxxxxxx XXX neříká xxx x přesnosti xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxx x XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx DNA není xxxxxxxx excizním xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, že XXX xxxx neposkytuje x mutagenní aktivitě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože poskytuje xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.

1.2 DEFINICE

Buňky x xxxxxxxx: xxx xxxxxxx xxxxx (XXX) xxxxx xxx určitá, xxxxxx stanovená xxxxxxx, xxxxxx zdůvodní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.

Xxx xxxxxxx grains (NNG): xxxxxxxxxxxxx míra XXX xxxxxxxx buněk xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx jako rozdíl xxxx xxxxxx zrn x xxxxx (XX) x xxxxxxxxx xxxxxx xxx x cytoplasmě (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx NNG se xxxxxxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxx x následně xxxxxxxxxxx xx buňky x kultuře, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx xxxxxxx XXX xx excizi x odstranění úseku XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Xxxx XXX x xxxxxxx jaterních buňkách xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx excizi x xxxxxxxxxx xxxxxxxx DNA xxxxxxxxxxxx oblast poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx x inkorporace ³X-XxX xx XXX xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx buněk v X-xxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxxxxxx ³H-TdR xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx tato xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx s xxxxxxx v S-fázi, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxxxx metoda.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx ovšem použít xxxxxxxxx xxxxxx savčí xxxx. Používají xx xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní rozdíly xx xxx xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu jsou xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.

Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Zdraví xxxxx dospělí xxxxxxx xx náhodně rozdělí xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx jednoznačně xxxxxx x po xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx toho, xxx x xxx jsou xxxxx umístěny.

1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx

Je-li xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx podáváním ředí. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx o xxxxxxxx (xxxxxxxxx) prokazují, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xx xxxxxx xxxxx rozpouštědlo, xxxx xxx xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.3.2 Xxxxxxxx

Xx každého xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx skupinách xxxxxx.

Xxxxxxxxx kontroly xx xxxx indukovat XXX xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné zvýšení xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx kontroly vyžadující xxxxxxxxxxxx aktivaci xx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx odezvě (4). Xxxxx při pozitivní xxxxxxxx xx volí xxx, xxx xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxx látky xxx xxxxxxxxx kontrolu patří xxxxxxxxx:

Xxxx xxxxxx xxxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
odběr x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx)	X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx	62-75-9	200-249-8
xxxxx v xxxxxxxxx (12-16 xxxxx)	X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX)	53-96-3	200-188-6

Xx xxxxx použít x xxxx vhodné xxxxx. Xx možná xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx testovaná xxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx

X každé xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx historická xxxxxxxx, xxx pro xxxxxxxx skupiny xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, nebo xxx jedinci.

Xxxxx x xxxx, xxx xx studie xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx expoziční xxxx, xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx podstatné xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pouze xx xxxxxx pohlaví, xxxxxxx na samcích. Xxx, kde xxxxxxx xxxxxxxx testovaných látkám xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx xxxx xx zvířatech odpovídajícího xxxxxxx.

1.5.2 Dávkovací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx jednorázově.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx dvě xxxxx xxxxx. Nejvyšší xxxxx je xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx toxicity, xx při xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.

Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici, je xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x za použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, pohlaví x xxxxxxxxx režimu, jaké xx xxx xxxxxxx x xxxxxx studii.

Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx také definovat xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxx).

1.5.4 Limitní xxxx

Jestliže xxxx xxx xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x jestliže xx xx základě xxxxx x strukturně xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx očekávané humánní xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x limitním xxxxx xxxxx xxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx látky

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx i xxxx xxxxxxxxx cesty. Intraperitoneální xxxxxxxx xx však xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx by xx tím xxxxx xxxxx xxxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx oběhem. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx dá xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x nemá xxxxxxxxx 2 xx/100 x hmotnosti xxxxxxxxx; xxxxx dávky musí xxx zdůvodněné. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx látek, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, aby objem xxx xx všech xxxxxxxxx úrovních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Xxxxxxxx jaterních xxxxx

Jaterní xxxxx xx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 12 - 16 xxxxx po xxxxxx xxxxx testované xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx další odběr (xxxxxxx 2 - 4 hodiny xx xxxxxx látky), ledaže xx xx 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx zjevná. Xx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx kultury xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx zakládají xxxxxxx xxxxx in xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx čerstvě disociované xxxxxxx xxxxx mohly xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % životaschopnosti (5).

1.5.7 Xxxxxxxxx XXX

Xxxxxxx xxxxxxxxx savčí jaterní xxxxx xx xx xxxxxxx xxxx (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx inkubují x médiu xxxxxxxxxxx ³X-XxX. Po xxxxxxxx xx médium xxxxxxxx( xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx thymidinu, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxx. "cold xxxxx"). Xxxxx se xxx promyjí, fixují x vysuší. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se "xxxx xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x preparáty xx xxxxxx xx autoradiografické xxxxxx, xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xx xxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxx v xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx jedince xx připraví dva xxxx xxx xxxxxxxxx.

1.5.8 Xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx preparáty xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx možno XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx zjevné známky xxxxxxxxxxxx (např. pyknóza, xxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).

Preparáty xx xxxx xxxxxxxxx zrn xxxxxxxx. Xxxx na xxxxxxxxx xxxx preparátech x xxxxxxx jedince xx obvykle xxxxxxx 100 buněk; xxxxx xx xxxxx méně xxx 100 na xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx zrn xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x X-xxxx, ale xxxxx xxxxx x X-xxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx metodou xx xxxxxxx xxxxxx inkorporace ³X-XxX do xxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx depozice xxxxxxxxxx xxxxx.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Mimoto se xxxxxxx xxxx shrnou x tabelární formě. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx jedince a xxxxxx dávku x xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx "nuclear xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx CG xx xxxxx XX. Xxxxxxxx-xx xx "xxxxx x xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, kterými xx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx souběžných negativních xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX

Xxxxxxxx pro xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:

pozitivní		(X) xxxxxxx XXX xxx xxxxxx xxxxxxxxxx prahem, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx historických xxx dané laboratoře
	xxxx	(II) xxxxxxx NNG významně xxxxx než u xxxxxxxx xxxxxxxx
negativní		(I) xxxxxxx XXX xx xxxxxx/xxx xxxxxx historického prahu x xxxxxxx
	xxxx	(XX) hodnoty XXX nejsou signifikantně xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat, xxx xxxxxxx, že xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx variabilita xxxx xxxxxxxxxxxx jedinci, xxxxx xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx statistické metody; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Většina xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být stále xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.

Xxxxxxxxx výsledek xxxxx XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx buňkami xx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx xxxxxxxxx XXX, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx nevyvolává xxxxxx xxxxxxxxx DNA, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx vzít x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx pokusu

Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,

- počet, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,

- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx jednotlivé skupiny.

Xxxxxxxx pokusu:

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,

- xxxxx xx studie xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx provedena,

- xxxxxxxxxx volby i xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- podrobnosti x podávání testované xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,

- xxxxxxxx schéma xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx vzorků,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- metoda xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk,

- xxxxxxx autoradiografická xxxxxx,

- počet připravených xxxxxxxxx a počet xxxxxxxxxxx buněk,

- xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxx hodnoty xxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx, cytoplazmě a "xxx nuclear grains" xxx jednotlivé preparáty, xxxxxxx x xxxxxxx,

- vztah xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, bylo-li xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- počet "xxxxx x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx x S-fázi, xxx-xx stanoven,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Metoda X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Sb. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001

X.40. XXXXXXX XXXXXX XX XXXX

1. METODA

1.1 XXXX

Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Xxxxxx for xxx Validation of Xxxxxxxxxxx Methods, XXXXX, Xxxxx Xxxxxxxx Centre, Xxxxxxxx Commission) schválilo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx testy in xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx elektrického xxxxxx xxxx potkana (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) x test xxxxxxxxxxx xxxxxx lidské xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, že xxx testy xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxxx látkami xxxxxxxxxxx x neleptajícími kůži. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (známé xxxxx xxxxxxxxxxx těžké xxxxxxxxx xxxx R35, x ostatní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, X34). Je xxxxxx xxxxx x postupy xxxx xxxxx; výběr xxxx oběma xxxxx xxxxxx xx konkrétních xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2 DEFINICE

Poleptání xxxx: xxxxxxxxx nevratného xxxxxxxxx xxxxx kůže xx xxxxxxxx testované xxxxx.

1.3 XXXXXXXXXX LÁTKY

Žádná xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.

1.4 XXXXXXX METODY - XXXX TER XX KŮŽI POTKANA

Testovaný xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx povrch xxxxxxx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobem. Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx corneum.Tato schopnost xx měří xxxxxxx xxxxxx inherentního transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látky XXX xxx prahovou xxxxxxx xxxxxxxxx. V případě xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxx x xxx. (6)) xx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxx zařadit test xxxxxx xxxxxxx, xxx xx snížil xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx u xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx vyskytují (2) (7).

1.5 XXXXX XXXXXX - TEST XXX XX XXXX XXXXXXX

1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mladí (20 xx 23xxxxx) potkani, Xxxxxx xxxx srovnatelný xxxx. Malými nůžkami xx zvířata se xxxxxxx odstraní srst x xxxxxxxx a xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx pak xxxxx xxxxxxxx otíráním x xxxxxx xx ponoří xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx streptomycinu, penicilinu, xxxxxxxxxxxxxxx nebo amfotericinu, x koncentracích xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx den xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx znovu a xxxxx 3 xxx xx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx být xxxxxxx xxxxxx než 31 xxx.

1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx xx humánním xxxxxxxx usmrtí, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xx xx xxxxxxx sloupne přebytečný xxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxx, x xx epidermální xxxxxxx k trubici. Xxxx xxxxx trubice xx xxxxxxxx gumový X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx připne, x xxxxxxxxxx tkáň xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx xx pak xxxxxxx xxxxxxx ke xxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx ponoří do xxxxxx obsahující xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sponou (xxx. 2).

1.5.3 Popis xxxxxxx

1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x tekutém xxxxx, xxxxxx xx na xxxxxxxxxxx xxxxxx uvnitř xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx stavu xxxxxx, nanese xx xx terčík v xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx vody x xxxxxxxxx xx jemně xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxx maximální xxxxx xxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx dosáhnout xxxxxxxx xxxxx xx 30 ^xX, aby xx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx vodovodní vody xxxxx maximálně 30 ^xX xxx xxxxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxxxxx. Odstranění testované xxxxx, xxxxx x xxxxxxx ztuhla, xx xx napomoci vymýváním xxxxxxx xxxxxxx vody xxxxx xxxxxx 30 ^xX.

1.5.3.2 Měření TER

Transkutánní xxxxxxxxxx xxxxx (XXX) xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx můstku xxx střídavý proud (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx měřením xxxxxxxxxxxx odporu xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% ethanolu, xxxxxx xx pokryje xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx otočí, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx hořečnatého. Xxxxxxxxx můstku xx xxxxxxx na xxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxxx x kΩ/terčík (obr. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx holé xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx vnitřní (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx uloží xxxxxx XXXX xxxxxxx xxx, xxx byla do xxxxxxx xxxxxx hořečnatého xxxxxxxx xxxx stejná xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xx xxx. Xx třeba xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxx xxxxxx pružinové xxxxxx x xxxxxxx XXXX xxxxxxx (xxx. 1), tato vzdálenost xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx naměřený xxxxx xxxxx xxx 20 xΩ, xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx epidermální xxxxxx terčíku xxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, například tak, xx xx XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x rukavici x xxxxxx 10 xxxxxx xx protřepává, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx x měření xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx akceptována, pokud xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx. Navrhované xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx popisovanou xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx tyto:

Kontrola	Látka	Rozmezí xxxxxx (xX)
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; 10 M xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)	0,5 - 1,0
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; xxxxxxxxxxx xxxx	&xxxx; 10 – 25

1.5.3.3 Modifikovaný xxxxxx xxx povrchově aktivní xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx je xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 kΩ, lze xx xxxx xxxxx xxxxxxx hodnocení xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx zjistí, xxx xx nejedná x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).

1.5.3.3.1 Nanesení x odstranění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx na 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x xxxxxxxxxxx vodě. Xxxxxxx xxxx se xxx xxxxxx po xxxx 10 sekund xxxxxxxxx xxxxxxx proudem xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx se xx xxxxxxxxx přebytečné (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx kůže xx xxx xxxxxxx xxxxx x XXXX trubice x xxxxx xx xxxxxxx (např. do 20 xx skleněných xxxxx xxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx 5 xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (nenavázaného) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Pak xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx nádobek x 5 ml 30 % (x/x) xxxxxxx dodecylsulfátu xxxxxxx (XXX) x destilované xxxx, xxx xx xxxx xxx inkubují xxx xxxxxxx 60 ^xX. Xx xxxxxxxx xx terčíky xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx dobu 8 xxxxx xxx xxxxxxx 21 ^xX (xxxxxxxxx odstředivá xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxx xx pak xxxxx 30 % (x/x) xxxxxxxx SDS x xxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx poměru 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx xxxxxxx (XX) xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 565 xx.

1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x xxxxxxx xx xxxxxxxx z xxxxxxx XX (xxxxxxx extinkční xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 xx xxxx 8,7 . 10⁴; xxxxxxxxxx hmotnost = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xx xxxxxxxx xxx každý xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx hodnota. Průměrná xxxxxxx xxxxxxxxxx barviva xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx akceptovatelného xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx látek xxx xxxx metodě x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx:

&xxxx; Xxxxxxxx	&xxxx; Xxxxx	&xxxx; Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; 10 X kyselina chlorovodíková	40 - 100
Negativní	destilovaná xxxx	&xxxx; 15 – 35

1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx možné xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx (xxxx. 2 xxxxxx) xx xxxxxx rozlišení silně xxxxxxxxxxx látek. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, že xxxx XXX přeceňuje xxxxxxx schopnosti některých xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kůže xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x neleptajících xxxxx xx 24hodinovém xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx XXX mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zkušební xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx hodnota xxx xxxxxxx xxxxxx 5 kΩ xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx aparatuře x xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zde. Xxxxx xx se zkušební xxxxxxxx výrazně xxxxxxx, xxxxx xx být xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx okalibrovat metodiku x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx řady referenčních xxxxxxxxx vybraných z xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx (3).

1.6 XXXXXXX XXXXXXXX METODY - XXXX X MODELEM XXXXXX XXXX

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx 4 hodin xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx "XXX xxxxxxxxx xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 difenyl xxxxxxxxxxx xxxxxx) xxx prahovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xx xxxxx způsobující xxxxxxxxx xxxx xxxx xx, xxxxx dokáží proniknout xxxxx xxxxxxx corneum (xxxxxx nebo xxxxx) x jsou dostatečně xxxxxxxxxxx, xxx přivodily xxxx xxxxx x xxxxxxxx buněčných xxxxxxxx.

1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX

1.7.1 Modely xxxxxx xxxx

Xxxxxx lidské xxxx mohou pocházet x xxxxxxx zdrojů, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx kritéria. Model xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx živých xxxxx. Bariérová funkce xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx zachována. Xx xxx xxxxxxxx xxx, xx model xxxx rezistentní vůči xxxxxxxxxxxx po nanesení xxxxx, o xxxxx xx známo, xx xxxx pro buňky xxxxxxxxxxx, které však xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx neprocházejí. Model xxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vykazovat xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x tomu, aby xx xxxx dobře xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, tj. XX xxxxxxxx) po xxxxxxxx látce xxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxx model. Podobně x xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu (xx srovnání s xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx hodnoty xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx predikční model xxxxxxxx mezinárodnímu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).

1.7.2 Xxxxx xxxxxxx

1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxx, xxxxxx se xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (minimální xxxxxxxx 25 (μ/xx²). Xx-xx pevná, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx s xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xxxxx se před xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx se materiál x povrchu xxxx xxxxxxx xxxxx fyziologickým xxxxxxxx.

1.7.2.2 Xxxxxx životnosti xxxxx

X měření životnosti xxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx validizovaná xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx redukce XXX, o které xxxx xxxxxxxxx xx x různých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx xx xx xxxx 3 xxxxx ponoří xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20 - 28 ^xX. Xxxxxxxxx xxxxx formazanový xxxxxxx xx pak xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx formazanu xx xxxxxxx měřením XX xxx xxxxxx xxxxx 545 x 595 xx.

1.7.2.3 Doplňující xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxx xxxx x přesné dodržení xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. xxxx xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx model xxxxxxxxxxx xx použití xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xx validizační xxxxxx XXXXX (3). Je xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, že xx použitá xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx látek xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx laboratořemi. Xxxxxxxxx xxxx metoda xxxxxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx vědeckém xxxxxxxx, ve kterém xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

1.8 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

1.8.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx

Xxxxxxx odporu (x xΩ) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx x pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční látky xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, x xx data xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx experimenty, xxxxxxxx xxxxxxx a z xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.8.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx kůže

Hodnoty XX x xxxxxxxxx procento xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x případné xxxxxxxxxx referenční látky xxxxxxx x tabelární xxxxx, x xx xxxx pro všechny xxxxxxxxx x opakované xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.9 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE VÝSLEDKŮ

1.9.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx TER xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx než 5 xΩ, xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx-xx hodnota XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 kΩ x nejedná xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx látku (detergent) xx neutrální organickou xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx organických xxxxx, xxx poskytují hodnoty XXX nepřesahující 5 xΩ, xxx provést xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxx rovný xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrole x 36 % XXx, je testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx barviva x xxxxxxx menší, xx testovaná látka xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxx leptavé xxxxxx xxxx.

1.9.2 Xxxx s xxxxxxx xxxxxx kůže

Hodnota XX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100% xxxxxxxxxxxxxxx buněk. X xxxxxx XX xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx. Hraniční xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx nezpůsobují poleptání xxxx, xx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivé xxxxx xxxxxxxxx vlastností, xxxx xxx v xxxxxxxxxx modelu xxxxx xxxxxxxxx předtím, xxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx validační xxxxxx xx musí xxxxxxxx, xx je xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxxxxxx údaje, xxxxxxxxx xxxx, popřípadě xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxx referenční xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx x xxx xx.

Xxxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxx xxxxx použitého xxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxx hodnot xxxxxx (test XXX) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (test x xxxxxxx lidské xxxx) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx, a xx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx efektů.

Diskuse xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx 1

Xxxxxxx 2

Xxxxxx X.40. byla xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001

B.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX XX XXXXX

1. XXXXXX

1.1 ÚVOD

Fotoxicita xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), k xxx dochází, xx-xx xxxx poprvé xxxxxxxxx xxxxxxx chemickým látkám x následně xxx xxxxxx, nebo je-li xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx testu xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx ke xxxxxxxx, xxx daná xxxxx ve spojení x expozicí xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxxx možné xxxxxxxxx xxxx nikoli.

Toxikologickým xxxxxxxxx xxxxx in xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x světla, xxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxx, x sloučeniny, xxx xxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xx topickém xxxxxxxx xx pokožku.

Test fototoxicity 3X3 NRU xx xxxxx byl xxxxxxxxxx x validován x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx OECD xxxxxxx následných xx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).

Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in vitro xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx u xxxxxx x xxxx x xxxx zjištěno, xx xxxxx test xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx není xxxxxxx k xxxx, xxx předpovídal xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, jež xxxxx x kombinovaného xxxxxxxx látky a xxxxxx vzniknout, xxxx xx fotogenotoxicita, fotoalergie xxxx fotokarcinogenita, x xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx. Test xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxx látek xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx ultrafialového (XX) či xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; xxxxxx xx X/x² xxxx x XX/xx².

Xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx viditelného (VIS) xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, vyjádřené x xxxxxxx (= X x x) xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x² xxxx J/cm².

Pásma xxxxxxxx xxxxx ultrafialového xxxxxx: podle xxxxxxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx International xx X'Xxxxxxxxx) se xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 xx) x UVC (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx xxxx xxxxx XXX a XXX xx často xxxxxxxx 320 nm a XXX se xxxxx xxxx xx UV-A1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxxx x 340 xx.

Xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: parametr, xxxxxx xx xxxx celková xxxxxxxx buněčné xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx lysozomů), jež xxxxx parametrů xxxxxxxx xxxxx testem x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx počtem xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.

Xxxxxxxxx životaschopnost (viabilita) xxxxx: životaschopnost xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx procedurou testu (xxx + XX xxxx - UV), xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx testu toxicity xxxxxxxxxxxx xx predikce xxxxxxxxx potenciálu. V xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx veličin XXX x XXX.

XXX (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): koeficient xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací (XX₅₀) xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.

XXX (xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx průběhu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) a x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.

Fototoxicita: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (odezva), xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx kůže xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx kůže xxxxxx, nebo xxxxxx, xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx ozářením xxxx xx xxxxxxxxxx podání xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: nižší xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxx x kůži poté, xx xx xx xxxxxx (topicky xxxx xxxxxx xxxxxxx) xxxxxx xxxxx. Xxxx fototoxické xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (reakce podobné xxxx při xxxxxxxxx xxxxxxx).

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, která xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx, a kdy xx zapotřebí xxxxxxxxxxxx xx dvoutýdenní indukční xxxxxxx x tomu, xxx se reaktivita xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxxx: genotoxická xxxxxx (odezva) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx dochází xxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx negenotoxické xxxxx XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovanou xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx tumorogeneze xxxxxxxx XX zářením xxxxxxxx xxxxxx, mluvíme x fotokokarcinogenitě.

1.3 REFERENČNÍ XXXXX

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxx pro pozitivní xxxxxxxx, která xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xx xxx zavedení xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX doporučuje xxxxxx xxxx referenční xxxxx xxxxxxxxx z látek, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx mezilaboratorním xxxxxxxxxxx xxxxxx testu (1) (3) (13).

1.4 XXXXXXX XXXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx u řady xxxxx (5) (6) (7) (8), jejichž xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx, xx xxxxxx absorbovat xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx záření. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx fotochemie (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxx fotoreakce xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx by se xxxxxxx, než xx xxxxx uvažovat x xxxxxxxxxxx testování xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxxx stanovit absorpční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x XX/XXX oblasti (xxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxx OECD x. 101). Xxxxx xx xxxxxxx extinkční/absorpční xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x mol^-1 x xx^-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciál x není xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro, ani xxxxxx jiným xxxxxxxxxxx xxxxxx (viz dodatek).

1.5 XXXXXXX XXXXXX

Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, kterými xxxx absorpce světla (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7), xxxxxxx všechny xxxxx k poškození xxxxx. Proto je xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxx na porovnání xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX záření. Cytotoxicita xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vitálního xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx (neutral xxx, XX) (9), 24 hodin xx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx). Xxx xxxxxx testovanou xxxxx xx preinkubují xxx xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x látkou x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Xxxxx x obou xxxxxxxx xx xxx vystaví xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxxxx 5 X/xx² XXX (+UV xxxxxxxxxx), xxxxx destička xx xxxxxxxx x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx médiem xxxxxxxxxxx x po dalších 24 hodinách kultivace xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx uptake, XXX) xx xxxx 3 xxxxx stanoví životaschopnost xxxxx. Pro xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená xxxx procento xxxxxx x negativních kontrol. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XX) x x xxxxxxxxxxxxx (-UV) záření, xxxxxxx xx úrovni XX₅₀, tj. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx o 50 % x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.

1.6 KRITÉRIA XXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x xxxxx je xxxxx pravidelně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx UVA. Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx testu xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX x xxxxx 1 - 9 J/cm² x xxxxx xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Buňky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx ozáření xxxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx² xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx nejvyšší xxxxx XXX záření 9 X/xx² xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx nižší xxx 50 % životaschopnosti xxxxxx uchovávaných x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx provádí xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx buněk.

Citlivost xxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly (xxxxx x Xxxxxxx vyváženém xxxxxx xxxxxxx [Earl´s xxxxxxxx salt xxxxxxxx, XXXX] x 1 % roztokem dimethylsulfoxidu (XXXX) nebo xxxxxxxx (XxXX) nebo bez xxxx vykazují v xxxxxxxxxxx (+UVA) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).

Xxxxxxxxxxxxxxx negativních xxxxxxx: absolutní optická xxxxxxx (XX_{540 XXX}) xxxxxx v XX xxxxxxxx negativních kontrol xxxxxxx, zda xxxxx 1 x 10⁴ xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxx rostlo xxxxx dvou xxx xxxxx x normální xxxxx zdvojnásobení. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxx xxxxxxx XX_{540 NRU} u xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx rovna 0,2.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx provést xxxxxxxx xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXX); xxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxx XXX testovaný dle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+XXX): XX₅₀ = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-UVA): XX₅₀ = 7,0 - 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx hodnoty XX₅₀, xx být xxxxxxxxx 6.

Xxxxx XXX xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x jiné známé xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) látky. X xxxxxxx případě xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx dat adekvátně xxxxxxxxx xxxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx rozsahy xxxxxx XX₅₀ x XXX xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).

1.7 XXXXX XXXXXX

1.7.1 Xxxxxxxx

1.7.1.1 Buňky

Při validační xxxxxx byla xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx fibroblastů Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x xx buď x ATCC nebo x XXXXX; ta xx proto doporučuje. Xxxxx stejného xxxxxxxxx xx dají s xxxxxxxx xxxxxx i xxxx xxxxx nebo xxxxxxx linie, xxxxx xx xxxxxxxxxx podmínky xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx; xx xxxx třeba xxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.

X xxxxx xx xxxxx pravidelně xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, x smí xx xxxxxx xxx x xxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX záření xxxx s počtem xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 x xxxxxx x nejnižším xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx než 100. Xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 vůči XXX xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.7.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx

Xxx xxxxxxx pasážování xxxxx x během xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxx x XXXX xxxxxxxxx 10 % séra xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 xX xxxxxxxxx, penicilinem a xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^xX / 7,5 % XX₂. Xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx kultivace zajišťovaly xxxxxxx cyklus x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxx. buněčnou linii.

1.7.1.3 Xxxxxxxx kultur

Buňky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nasadí v xxxxxxxxx hustotě v xxxxxxxxxxx médiu x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx použitím v xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx pasážují.

Pro xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx v kultivačním xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxx (xx. xxx se stanovuje xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx ke xxxxxxxxxx (xx splynutí x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). V xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 x 10⁴ xxxxx v xxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxx celým xxxxxxxx xx identických xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, s xxxxxxxx xxxx, kdy xx xxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx xx xxxxxxxxxx v temnu (-XXX/XXX).

1.7.1.4 Metabolická aktivace

Zatímco xxx xxxxx xxxxxxx xx vitro xxx xxxxxxxxx genotoxického nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx požadavkem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx žádná xxxxx, xxx xx x xxxx, aby xxxxxxxx xxxx fotoxin xx xxxx xxxx xx xxxxx, bylo metabolické xxxxxxxxxxxx zapotřebí. Xxxxxxxxx xx proto ani xx xxxxx, xxx xx vědecky xxxxxxxxxx, xxx xx tento xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7.1.5 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx

Xxxxxxxxx látka xxxx být xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xx xxxxxxxxx. Pokud je xxxxxxxxxxxxx, že by xxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx pod červeným xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx solném xxxxxxx, například x Xxxxxxx xxxxxxxxx solném xxxxxxx (XXXX) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fosfátem (xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, XXX), xxxxx - xxx xxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx - xxxxx obsahovat xxxxx xxxxxxxxxx složky xxx barevné xxxxxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx solným xxxxxxxx. Xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, tj. xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx testované xxxxx i v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxx (XxXX). Vhodná mohou xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xx však třeba xxxx pečlivě xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx s testovanou xxxxxx, potlačení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx, popřípadě xxxxx xx 37 ^xX.

1.7.1.6 Xxxxxxxxx UV xxxxxxx / xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxx. Záření x XXX a ve xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx záření XXX xx x xxxxx xxxxx xxxx relevantní, xx přímo vysoce xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xx 313 xx k 280 xx xxxxxxx tisícinásobně. Xxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx požadavek, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, jež testovaná xxxxx xxxxxxxxx, x xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (dosažitelná xx xxxxxxxxxx xxxx) xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx být xxxxxxx xxxxxx délky x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx sem i xxxxxxxxxx tepla (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).

Xx xxxxxxxxx světelný xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx simuluje sluneční xxxxxx. Jako tyto xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx výbojky - xx mají tu xxxxxx, že xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx, sluneční xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX, xx xxxxx xxxxxx filtrovat xxx, xxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxx test xx fototoxicitu 3X3 XXX xx vitro xx třeba použít xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Příklad xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx filtrovaného xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého xxx xxxxxxxxx studii xxxxx na fototoxicitu 3X3 NRU in xxxxx xx x xxxxx (3).

Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) se xxxx pravidelně xxxx xxxxxx testem xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx UV-metru xx xxxxx kontrolovat, x xxxxx xx doporučuje xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx typu x kalibrace. Ideální xx, xxxx xx x delších xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx širokopásmového XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx vyžaduje xxxxxxxxxxxxxx obsluhu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, že xxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx² je xxx buňky Balb/c 3X3 xxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx silná, xxx excitovala i xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx během 50 minut, xxxx xxx iradiance xxxxxxxxx xx 1,666 mW/cm². Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxx zdroj xxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx UVA upravit xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx:

&xxxx;	&xxxx; xxxxx xxxxxx (J/cm²) x 100	&xxxx;
&xxxx; x (xxx) =	________________________	(1 X = 1 X s)
	záření (xX/xx²) x 60

1.7.2 Podmínky xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx vyšších koncentracích xx xxxxxxx četnost xxxxxxx pozitivních výsledků (13). Xxxxxxx xX xxx nejvyšší koncentraci xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxxxxx (oblast xX 6,5 - 7,8).

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx použití xxxxxx (+XXX) a xxx xxx (-UVA) xx xxxxx stanovit x rámci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxxx koncentrační xxxx xx zvolí xxx, xxx křivky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx údaji. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (x konstantním xxxxxxxx xxxxxx).

1.7.3 Xxxxx xxxxxxx

1.7.3.1 Xxxxx xxx

Xxxxxxxx xx suspenze 1 x 10⁵ xxxxx/xx x kultivačním xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx destičky xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx 100 μx samotného xxxxx (= slepý xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx xx dávkuje xx 100 μx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 1 x 10⁵ xxxxx/xx (= 1 x 10⁴ xxxxx na xxxxx). Xxx každou testovanou xxxxx xx připraví xxx xxxxxxxx - xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-UVA), xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).

Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX₂, 37 ^xX), xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx umožňuje xxxxxxxxxx x adherenci xxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx růst.

1.7.3.2 Xxxxx xxx

Xx inkubaci se xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx odstraní a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX xx každou xxxxx. Xxxxx xx 100 μx EBSS/PBS obsahujícího xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx rozpouštědlo (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx x xxxx koncentracích. Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx dobu 60 xxxxx (7,5 % XX₂, 37 ^xX).

Xxxx testu x XXX (+XXX) xx xxxxxxx tak, xx xx xxxxx xx xxxxxxxx teploty xxxxxxx xx dobu 50 xxxxx xxxx víčko xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx UVA x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx² (= dávka 5 / xx²). Xxx nedocházelo ke xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx ventilátoru. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-XXX) xx xx dobu 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx pokojové xxxxxxx x xxxxxx xxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x přes noc (18 - 22 xxxxx) xx xxxxxxxx (7,5 % XX₂, 37 ^xX).

1.7.3.3 Třetí xxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx kontrastem. xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Tato xxxxxxxx xx doporučuje, aby xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale xxx xxxxxxxxxxxxx cytotoxicity nebo xxxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx červeně (XX)

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl předehřátého XXXX/XXX. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μl xxxxx x NR x xxxxxxxx se xxx 37 ^xX xx xxxxxxxx atmosféře xx 7,5 % XX₂ xx xxxx 3 xxxxx.

Xx inkubaci xx xxxxxx x XX xxxxxxxx a xxxxx xx promyjí xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx xxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x obrácené xxxxxx).

Xxxxx xx přesně 150 μx xxxxxxx xx xxxxxxxx XX (čerstvě xxxxxxxxxx xxxx ethanol/kyselina xxxxxx).

Xxxxxxxxxxxxx destičky xx xx dobu 10 xxxxx rychle xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx XX x xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx.

Xx spektrofometru xx xxxxx optická xxxxxxx xxxxxxxx XX při 540 nm xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx uchovají xx xxxxxxx formátu (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx xxxxxxx.

2. ÚDAJE

1.8 XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXX

Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx při aplikaci XXX/XXX záření x xxx ní. Je-li xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací se xxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx vyjádřit křivkou. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxx až xx definované limitní xxxxxxxxxxx 100 μl/ml x experimentu ve xxx (-UVA) necytotoxická, xxx při ozařování (+XXX) vysoce xxxxxxxxxxx, xxxx dojít k xxxx, xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx řádově xxxxx, xxx xxx xxxxxx požadavek xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx částí experimentu (xxx xxx -XXX, xxx při +XXX), xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx koncentrace.

Jsou-li xxxxxxxx hraniční - xxxxxx xxxxxx čáry xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx potřebné, může xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx. Klíčovou xxxxxxxxx x tomto xxxxx xx příprava roztoků xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxx xxxx opakování xx xxxxxxx těchto xxxxxxxx (spolurozpouštědlo, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Xxx xxxx xxxxxxxx o změnách xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx jsou xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx.

1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx je to xxxxx, stanoví se xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxxx k 50 % xxxxxxxx buněčného xxxxxx XX (EC₅₀). Xx lze učinit xxx, xx se xx data xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx metoda xxxxxxxxxx xxxxxxx (nejlépe Xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxx xx použije xxxx xxxxxx metoda xxxxxxxxx (14). Xxx xx xxxxxxx XX₅₀ xxxxxxx xxx další xxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx EC₅₀ xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx metody. X xxxxx xxxxxxx xx doporučuje xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx papír (osa x: log, xxx x: xxxxxx), xxxxxxx xx xxxx transformaci xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX XXXXXX)

1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 1: fotoiritační xxxxxx (XXX)

Xxxxx xx získají xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxx xx přítomnosti (+XXX), xxx xx nepřítomnosti (-XXX) světla, xx xxxxxxxxxxxx faktor (PIF) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx

&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (-XX)
&xxxx; (x) XXX =	&xxxx; ____________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+XX)

XXX < 5, xxxxxxxxxxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx PIF ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx předpovídá.

Je-li látka xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, kdežto xxx -XXX je necytotoxická, xxxx xx XXX xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx potenciál. X xxxxxxx xxxxxxx xx xx vypočítat xxx. "&xx; PIF", xxxx xx test xxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (X_xxx) a xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx:

&xxxx;	&xxxx; X_xxx (-XX)
&xxxx; (x) &xx; XXX =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+XX)

Xxxxx se xx vypočítat pouze "&xx; XXX", pak xxxxx xxxxxxx &xx; 1 předpovídá fototoxický xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx se nedá xxxxxxxxx xxx XX₅₀ (-XX), ani XX₅₀ (+XX), xxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, je xx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx formální "PIF = *1", čímž xx charakterizuje xxxxxxxx

&xxxx;	&xxxx; X_xxx (-XX)
&xxxx; (x) PIF = *1 =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; X_xxx (+XX)

Xxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, že není xxxxxxxx žádný fototoxický xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxx (x) x (c) je xxxxx xxx predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzít xxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx testu xxxxxxx.

1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxxx (XXX)

Xx možno xxxx xxxxxx xxxxxxx verze xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx XX xxxxxx (13). X xxxxx modelu jsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XXX x xxxx xxxxxxxxx, kde xxxxx xxxxxx hodnotu XX₅₀. X xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx veličina "xxxxxxx xxxxxxxxx" (MPE) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx průběhu xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva. Xxx xxxxxxxx xxxxxx XXX xxx na Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx software, který xxx xxxxxxx xxxxxx.

1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx výsledek xxxxx (PIF ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxx xxxxx xx fototoxický xxxxxxxxx. Xxxxx xx k xxxxxx xxxxxxxx dojde xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx působit xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vivo. Xxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (100 (g/ml), bude xxx posouzení nebezpečnosti xxxx xxxxxxxxxxx schopnosti xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dalších xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x možné xxxxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxx údaje x xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx alternativním xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx kůže xx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) ukazuje, že xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxxx pro použité xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xx xx xxxxx dala xxxxxxxx i xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, xx xxxxx xxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxx xx xx považovat xx xxxxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxxxxx, xxx byly xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrační závislosti xxxxxxx xxxxxx (XX₅₀ + XX a XX₅₀ - XX), xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxx tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+XX xxx -UV) x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx koncentrace 100 μx/xx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xx xx zcela xxxxxx x mělo xx xx xxxxxxxx x jiném, potvrzujícím xxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxxx modelu kůže xx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xx xxxx xxxx xx xxxx).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:

Testovaná xxxxx:

- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x číslo CAS, xx-xx xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx k provedení xxxxx důležité,

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, jsou-li xxxxx.

Xxxxxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- rozpustnost xxxxxxxxx látky v xxxxx rozpouštědle,

- procentický xxxxx rozpouštědla x xxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx PBS).

Buňky:

- xxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- číslo xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,

- xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jež se x xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx vitro xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxx před ovlivněním x xx xxx:

- xxx x složení xxxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx, xxxxxxx),

- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xx x xx xx).

Xxxxxxxx pokusu (b) - xxxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx a xxx xxx,

- v případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx),

- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - ozařování:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxx světelného xxxxxx,

- spektrální charakteristika xxxxxx xxxxxxxxxx zdroje,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx použitého xxxxxx (xxxxxx),

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x podrobnosti x jeho kalibraci,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxx XXX (v x X/xx²) xxx xxxx vzdálenosti,

- xxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,

- xxxxx záření UVA (xxxxxxxxx x xxx) x J/cm²,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - test NRU:

- xxxxxxx média x XX,

- xxxx xxxxxxxx x NR,

- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX², xxxxxxx, xxxxxxx),

- xxxxxxxx xxxxxxxx NR (extrakční xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xx spektrofotometricky xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XX,

- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), byla-li xxxxxxx,

- xxxxxxx srovnávacího xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), pokud xxx xxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, vyjádřená x xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kontrol,

- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (koncentrace xxxxxxxxx xxxxx νs xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +XXX x -UVA,

- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX₅₀ (+XXX) x XX₅₀ (-XXX),

- xxxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx získaných xx xxxxxxx ozařování UV/VIS xxxxxxx - xxxxxxxx xxx fotoiritačního xxxxxxx (XXX) nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XXX),

- klasifikace xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx negativní xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx denzita xxxxxxxx XX) ozářených x xxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a směrodatná xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (b) - xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx:

- xxxxxxx XX₅₀ (+UVA), XX₅₀ (-XXX) x XXX látky použité xxx xxxxxxxxx kontrolu,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx pro pozitivní xxxxxxxx: xxxxxxx EC₅₀ (+XXX), XX₅₀ (-UVA) x XXX, průměry x směrodatné xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxx B.41. byla xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. x účinností od 22.6.2001

Informace

Právní xxxxxxx x. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx dnem 1.1.1999.

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jsou podchyceny xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x.:

208/2001 Xx., xxxxxx xx mění vyhláška XX x. 251/98 Xx., xxxxxx se xxxxxxx metody pro xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx - xxxxxx bude xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx

x xxxxxxxxx xx 22.6.2001

Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Xx. xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. x účinností xx 1.8.2004.

Xxxxx jednotlivých xxxxxxxx xxxxx jiných xxxxxxxx předpisů x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx jich xxxxxx xxxxxxxxx změna xxxxx uvedeného xxxxxxxx xxxxxxxx.

1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx x) xxxxxx č. 157/1998 Xx., o xxxxxxxxxx xxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxx x x xxxxx některých xxxxxxx xxxxxx.

2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx ochranu xxxxxx proti xxxxxx, xx xxxxx zákonů x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Sb., x. 243/1997 Sb. x x. 30/1998 Xx.

3) Směrnice Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a rozvoj xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx xx zdraví (XXXX Guidelines xxx Xxxxxxx xx Chemicals. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu. Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.