Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
VYHLÁŠKA
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
ze xxx 16. října 1998,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
Ministerstvo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 157/1998 Sb., x xxxxxxxxxx látkách x xxxxxxxxxx přípravcích x o xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:
§1
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování nebezpečných xxxxxxxxxx chemických látek x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx škodlivých, žíravých, xxxxxxxxxx, senzibilizujících, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a toxických xxx xxxxxxxxxx (xxxx xxx "toxicita xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků").1)
§2
(1) Xxxxxxxx chemických xxxxx x přípravků se xxxxxxxx zkouškami xxxxxxxxxxx xxxxxxxx uvedenými x příloze xxxx vyhlášky.
(2) Ke zjišťování xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx i xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx2) x xxxxxx xxxxxxxxxx Organizací pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx (XXXX).3)
§3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx účinnosti xxxx 1. xxxxx 1999.
Ministr:
XXXx. Xxxxx, CSc. x. x.
Příloha x xxxxxxxx č. 251/1998 Xx.
Metody xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
B. XXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXXXX XXXXX
1.1 XXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXX XXXXXXXX
xx xxxxxxxxx termín xxxxxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx. Jsou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xx xxx xxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.
1.3 XXXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Dávka xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxx jako xxxxxxxx testované látky xx xxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxx zvířete (xxxx. xxxxxxxxx xx kilogram xxxxxxx xxxxxxxxx), nebo xxxx xxxxxxxxxx dietní xxxxxxxxxxx (xxxx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx na kilogram xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX
xx xxxxxxxx xx xxxx pevných xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx podat, xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx humánního xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx.
1.5 DÁVKOVÁNÍ
xx všeobecný xxxxxx xxxxxxxxxx dávku, xxxxxxxxx x celkovou xxxx xxxxxxxx.
1.6 LD50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)
je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx způsobí xx xxxxxxxxxxx dobu xxxx 50 % zvířat, xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx LD50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 LC50 (XXXXXXX XXXXXX KONCENTRACE)
xx xxxxxxxxxxx vypočtená koncentrace xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx smrt xx xxxxxx doby xx xxxxxxxx x 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx objemu xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 NOAEL
xx zkratka pro "xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) a xx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx dávka xxxx expoziční koncentrace, xxx xxxxx xxxxxxxxx x zjistitelným toxickým xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx objeví x pokusných xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chemické xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx očekávané xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu.
1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX XXXX)
xx xxxxxxxx dávka, která x xxxxxx vyvolává xxxxxxxx projevy xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx přežití x xxxxxxx na xxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx.
1.11 PODRÁŽDĚNÍ XXXX
je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx změn na xxxx po aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX OČÍ
xx xxxxxxxx změn xx xxx po aplikaci xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxxx vyvolaná xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.16 ABSORPCE
xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx do xxxx.
1.17 EXKRECE
xxxxxxxx proces(y), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x těla.
1.18 DISTRIBUCE
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) je xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x těle.
1.19 XXXXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx aplikované látky xxxxxx x těle xxxxxxxxxxxxx nebo neenzymatickými xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXX TOXICITA
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx počtu různých xxxxx xxxxxxxx (metody X.1 - B.5), xx xxxxxxx může xxx po xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
V xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx zvolit xxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx testu xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XX50. Pro xxxxxxxxx xxxxxx není xxxxxxx xxxx navržen, xxxxxxx xxxxxx možné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx měla být xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxxx xx nejmenší xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx utrpení zvířete, xxxxxxxxx xxxxxx pevné xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) a xxxxxx xxxxxxxxx třídy akutní xxxxxxxx (xxxxxx B.1 xxxx). Při testování xx xxxxxx xxxxx xxxx studie na xxxxxx druhu doplnit xxxxxx vyvozené x xxxxx xxxxxx. X xxxxx případě může xxx xxxxxxx standardní xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxx použito xxxxxxx počtu zvířat.
Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7, X.8 x X.9) se posuzují xxxxxxx xxxxxx vznikající x xxxxxxxx opakované xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxx. Tyto xxxxx xx xxxx pomoci xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx vyžaduje xxxxxxxx xxxxxx aspektů do xxxxx xxxxxxx (metody X.26 - X.30 x X.33).
3. XXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx přenosných xxxx x množství xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Účinky na xxxx chromozómy xx xxxxx projevovat změnou xxxxxx struktury xxxx xxxxx.
Mutagenní xxxxxxxx xxxxx xx stanoví xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (bodové) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.10).
Xxxxxxxxxx jsou xxxx xxxxxxx in vivo, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx B.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx chromozomů xxxxxx xxxxx (metoda X.11). Xx xxxx xxxxx dávat jednoznačně xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
Pro xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx xx zjištění xxxxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx účelům: xxxxxxxxx xxxxxxxx získaných základním xxxxxxxx testů; xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx základním xxxxxxxx metod; zahájení xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx.
Xxx xxxx účely xxxxxxxx xxxxxx B.15 až X.25 jak xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x xx vitro, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Tyto xxxxx poskytují informace x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx používané x xxxxxxxxx souboru xxxxx.
Xxxxxx platí, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, případně karcinogenním xxxxxxxxxx testované xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx, vhodná xxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x fyzikální xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity x xxxxxxx způsobů xxxxxxx látky.
Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x savců xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx savčím xxxxxxxxx, xx už xxxxxxxxxx xxxxxxxx (bodovými) xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x první xxxxxxxx (nezahrnuto x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, např. xxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx lze použít xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxx xxxxxxx. Vzhledem xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx x xxxxx xxxxxxx počtu potřebných xxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx pro takovou xxxxxx xxx na xxxxxxx závažných xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx postupuje xxxxx xxxxxxxxxxxx metodického protokolu xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xx projednání x Xxxxxxx referenční xxxxxxxxxx genetické xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx charakterizovány xxxx genotoxické nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx o genotoxickém xxxxxxxxxxxxx potenciálu látky xx čerpají ze xxxxxx mutagenity/genotoxicity. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Test toxicity xxx xxxxxxxxx aplikaci, xxxxxx B.7, a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx tkáních, xxxxx by xxxxx xxx také xxxxxxxx. Xxxx studie x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxxxx chemické xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, podrobnější zkoumání xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx karcinogenity (xxxxxx X.32) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.33).
X dispozici xxxx rovněž xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx souvislost x maligní xxxxxxxxxxxx - xx xxxx (xxxxxx X.21). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx.
5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx způsoby, např. xxxxx zhoršení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinků xx xxxxxxxxx (xxxxxxxx toxicita) xxxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxx x účinky x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx (metoda B.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx podáváním. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. V takových xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx metodu xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx reprodukční xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx metodu xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.35) rozšířit xxx, aby xxxxxx xxxxx generaci.
6. NEUROTOXICITA
Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx způsoby, xxxx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx periferním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx akutní xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx aplikaci (metoda X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s neurotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Navíc xx důležité xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx odhaleny x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx například xxxxxxxx, že jisté xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu xxxxxxxxx xxxxxx toxicitu, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx X.37 x X.38 xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx podání xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, například podle xxxxxxxxxxxx anebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx má xx následek buď xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx X.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx imunotoxických účinků. Xxxxxx xx měla xxxxxx xxxxxxx chemické xxxxx s imunotoxickým xxxxxxxxxxx, vyžadující xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pomáhají xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aspekty xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx pomoci xxx xxxxxx dalších xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx, xx xxxx x xxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bude nezbytná xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx nebo xx xxxx ukázat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.36).
Xxxxxxxxx x chemické xxxxxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx poskytnout xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx tkání. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x předcházejících xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX LÁTKY
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx významnějších xxxxxxxx, x její relevantní xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xx třeba xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx poskytují xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, pro xxxxx konkrétní xxxxxx x pro xxxxxxxxxx x látkou a xxxx xxxxxxxxxx.
Vypracování xxxxxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxxxx a kvantitativní xxxxxxxxx testované xxxxx (x xxxx xxxxx xxxxx větších nečistot) x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx měl xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, fyzikálně-chemických xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx zprávě x xxxxx.
10. XXXX X XXXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx kontrola xxxxxxxx xxxxxxxxx, ve xxxxxx xxxx xxxxxxx chována, x správná xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX CHOVU
Xxxxxxx xxxxxxxx x prostorech xxx xxxxxxx zvířata xx xxxxx přizpůsobit xxxxxxxxxxx druhům. Xxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 22 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx králíky má xxx teplota 20 xX ± 3 xX při xxxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx techniky xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx na teplotu. Xxx xxxx případy xxxx podrobnosti x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xx xxxxx sledovat xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, zaznamenávat je x uvést xx x závěrečné xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx má xxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx týkající xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxx xx zprávě o xxxxxxx pokusu.
Pokud xxxxxx nevyžaduje jiný xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x malých xxxxxxxxx jedinců xxxxxxx xxxxxxx, xx více xxx 5 zvířat x xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx jsou údaje x xxxxxxx chovu x xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx všem xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx použitý xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, může xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx xxxxxx potravy. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx vzít x xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx výsledků. Používají xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x neomezeným xxxxxxxxx k xxxxx xxxx. Pokud xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxxxx, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxx x xxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, ve xxxxxxx xx xx xxxxx xxxx projevil.
11. XXXXXXX XXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxx testovacích metod xxxx xxx věnována xxxxxxxx xxxxxxxxx ochraně xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx zvířat xxx dosáhnout xxxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (X.1.xxx) xxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx s pevnou xxxxxx nevyužívá xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx kritéria x vyžaduje xxxxx xxxxx zvířat. Metoda xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx vyžaduje x xxxxxxx x 70 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxx X.1.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx látky se xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx xx známo, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (metody X.1, X.2 a X.3), xxx také x xx vivo xxxxxxx xxxxxxxxxx (metody X.11 a X.12), xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx zbytečně velkými xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx možné xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx omezit na xxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx vědecké xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, na výsledcích xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx s xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx kožní toxicity x xxxxxx xxxxxxxxxx x limitním xxxxx (xxxxxx X.3) a xxxxxx-xx pozorováno xxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4) xxxx xxx xxxxxxxx; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx vyvolaly xxxxxxxxx xxxx silné xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx X.4), xxxxxxx xxx xxxx testovány xx xxxxxxxx xxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x ověřovat xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxx poskytovat xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx testy xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx využívat menšího xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx méně xxxxxxx xxxx se úplně xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Pokud xxxxx xxxxxx metody x xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx rizika, následnou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxx, xxx xx xx možné.
12. XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx zvířatech a xxxxx xx xxxxx xx nutno xxx xx xxxxxxx, xx xxxxx extrapolace na xxxxxxx je xxxxx xxx v xxxxxxx xxxx; xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx účincích x xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x ověření xxxxxxxx testování.
Výsledky xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx zjištěných x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Tyto xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxx studie, xxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx X - Všeobecný xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.1. AKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXX (PER XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx stanovit podle xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx pozorované xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx dávkách x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx chovu a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx je xxxxx, připraví xx xxxxxx nebo suspenze xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxx xxxxx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx oleji, teprve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx roztok x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx během xxxx xxxxxx relevantní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 tělesné hmotnosti; xxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xx měla xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx, xxx bylo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou známy xxxxxx proti xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Na xxxxxxx xxxxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx hodnoty.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Používá-li xx xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxx xxxxxxx.
Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx hlodavci, xxxx xx xx zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx se vyvarovat xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, nejméně xxx, x xxxx xxx xxxxxx odstupňovány tak, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx viditelný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx stačit xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, a xxxxx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x přijatelnou spolehlivostí.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx test xxxxxx dávkou xxxxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx na xxxxxxxxx 5 samců a 5 xxxxx x xxxxxxxx výše popsaných xxxxxxx. Pokud xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba uvážit xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx a trvání xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxx objeví x xxxxxx, x doba xx uhynutí, zvláště xxx, xxx je xxxxxx tendence x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx potrava xxxxxxx večer před xxxxxx. U xxxxxx x xxxxx rychlostí xxxxxxx xxxxxx postačí xxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx pokusu xx xxxxxxx zváží a xxxxxxxxx látka xx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx podat xxxxx xxxxxxxx, lze xxxxx aplikovanou xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx přístup x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx během určitého xxxxxx, xxxx být xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx období - xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx poskytnout.
Xx podání látky xx pozorování xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky, xxx každé zvíře xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx prvního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx sledovat x zaznamenat xxxxxx xxxxxx aplikované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxx na xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx pracovního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx klinická vyšetření. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, např. xxxxx xxxx zmrazení xxxxxxxxx zvířat, a xxxxxxx xx usmrcení xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, spánku a xxxxxx. Okamžik xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx nálezy xx xxxxxxxxxxx. Je-li xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
Po xxxxxxxxx xxxxxx xx jednom xxxxxxx, xxxx xx xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx druhého xxxxxxx nejsou xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Pokud xx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx testovaného pohlaví xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx pohlaví xx xxxxx vynechat.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx otravy, popis xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a x xxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx xxxxxx xxxx než xxxxx xxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x ohledem xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, se xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx látkou. XX50 xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx vztah, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx testované látce x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxxxxxx toxických xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (včetně vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx hladiny xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx exponovaných zvířat),
- xxxx xxxxxxx xx podání testované xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx pro humánní xxxxxxxx zvířat - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx LD50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx pro 14xxxxx pozorování (s xxxxxxxx metody xxxxxxx),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx LD50, xxxxx xx xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx a její xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx všech xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx věnovat xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx utracení xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnotu XX50),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.1. xxx XXXXXX TOXICITA XXXXXX (XXX OS) - XXXXXX XXXXX DÁVKY
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx toxicity xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx xxxx xx xxxxxxx podání xxxxx xxxxx testované xxxxx.
Xxxxxx x xxxxx xxxxxx xx provádí xx xxxx etapách.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx sledují xxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx téhož xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx minimální xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx v xxxx xxxxx xxxxx nepoužije xxx xxx xxxx xxxxxx.
V xxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx orálně xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx samic x xxxxx z xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Použitá xxxxx xx odvodí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx studie, x xx jako dávka, xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyvolá "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx B - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), ale xx xxxxxxx.
Po podání xx xxxxxxxx účinky. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx další xxxxxxxxx. Když xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx pozorována zřejmá xxxxxxxx, xxxxx se xxxxx otestuje na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx reakce xxxxxxxx humánní utracení, xxxxx xx znova xxxxxxxx xx nejbližší xxxxx xxxxxx dávky.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx dávku" (xxx část X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx úrovní xxxxx, xxxxxx xx možno xxxxx, aniž by xxxxx x xxxxx (xxxxxx xxxxxxx humánního xxxxxxxx).
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem utratit. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost potkanům, xxxxx nejsou známy xxxxxx proti xxxx.
Xx třeba xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx testu xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx náhodně přiřadí xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx xxxxxxxxxx studie x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Příprava x xxxxxxxx dávky
Xxxxx xx třeba, xxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x rostlinném xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx toxikologické vlastnosti. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; výjimkou xxxx vodné roztoky, xxxxx xx možno xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx by se xxxx minimalizovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx zajistil konstantní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek.
Xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx večer xxxx testem; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxx x jediné dávce. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx množstvích xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Xx podání xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx ještě 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx a xxxx zvířatům poskytnout.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Orientační xxxxxx
Vyšetřují se xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx jednotlivá xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx údaje, xx xxxx samci xxxxxxxxxxx pohlavím. Dávky xx xxxxxxxx sekvenčně, xxxx xx xxxxxxx 24 hodin před xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx zjistit xxxxxxx otravy xxxxxxx xx xxxx xxx; xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx otravy xxxxx xxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx ještě xx xxxxxxx xxxx xxx. Posuzují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx uhynutí, xxxxx xx xxxxx podat xxxxx potřeby jednu xxxx více xxxxxxxxxxx xxxxxx dávek. Xxxxx xxxxxx by xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx otravy, x x xxxxxxxx xxxxx, která vyvolává xxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxx xx vybrat xxxxxxx xxxxx podle xxxxx x příbuzných xxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxx k dispozici, xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxx xxxxx 500 xx.xx-1. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, vyšetřuje se xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx 2000 mg.kg-1, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x hlavní xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx úrovni xxxxx. Jestliže xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx těžké xxxxxx, xxxxxxxxxx humánní xxxxxxxx, je xxxxxx xxxxxxx zvířeti xxxxxxxxx nižší dávka (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx toto zvíře xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxx další xxxxxxx vhodné xxxxx xxxx xxxxxxxx fixními xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xx xxx tomto xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx než 5 zvířat.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Xxx každou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx být xxxxx.
Xxxxxxxxx metody xxxxx xxxxx xx xxxxxxx pouze mírně xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx látky.
Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx x testu, má xxx xxxxxxx z xxxxx xx 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx výchozí xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xx, která xxxxxxxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně utracení x xxxxxxxxx důvodů); xxxxxxx uhynutí xxxxxx xxxxxxxx, xxx mají xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx toxicitu, ale xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx znovu xxxxxxxx xx další vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx měla xxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx humánní xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx být xxxxx xxxxx testována xx xxxxx nižší xxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxx, která xxxx nutné humánně xxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x xxxxxxxxxxxxx systematicky. Xxx každé xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx a zaznamenat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zvířat xx xxxxxxxx.
Doba xxxxxxxxxx by měla xxx nejméně 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx by být xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, rychlosti xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx projevy xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pečlivá xxxxxxxx vyšetření xx xxxxx provádět xxxxxxx xxxxxxx první den xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxx. Zvířata xxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxx xxxx výrazné příznaky xxxxxx je třeba xxxxxxx utratit. Častější xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx několika xxxxxxx xxx po podání xxxxx, jestliže xxxxxxx xxxx vykazují xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, že xxxx xxxxxxx příliš xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx třeba věnovat xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx se provede xxxxxxxxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx, denně xx xxxxx 3 xxx x potom xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, se xxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx to indikováno, xxxxxxxx xx tkáně xxx histopatologické xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovně xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky.
X xxxxxxx, že látka xxxxxxxx mortalitu xxx xxxxx 5 xx.xx-1 (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mortalitu xxx xxxx xxxxx), xx třeba xxxx xxxxxxxxxx akutní xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
2. XXXXX
Xxxxx z orientační x xxxxxx studie xx sestavují xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. X xx xxxx xxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu; xxxxx xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; počet zvířat xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů; xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxx xxxxxx studii, zda xxx pozorován xxxxxx xxxxxxx účinek, který xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; xxxxxx průběh xxxxx toxických xxxxxx; xxxxxxxx pitvy. V xxxxxxx, že zvířata xxxxxxxxx déle xxx xxx, xx třeba xxxxxxxxx a zaznamenat xxxxx xxxxxxxxx.
Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzhledem xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx možno obsahovat xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx i xxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx použije) x koncentrace,
- xxxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx dávek,
- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx úrovní xxxxx (počet xxxxxxxxx xxxxxx; změny xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx utracených xxxxx xxxxx; počet zvířat x xxxxxxxx toxicity; xxxxxx, stupeň x xxxxxx účinků),
- xxxxxx xxxxxx nástupu xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx, xxxx úhynu xx podání xxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxxxxx v xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx
Xxxxx | Výsledky | Xxxxxxxxxxxx |
5 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % xxxxxxx 100 % přežití, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá toxicita | Xxxxx, xxxxx jsou xxxxx jedovaté Xxxxx, xxxxx jsou jedovaté Xxx xxxxxxxx xxx 50 mg.kg-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Xxxx než 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx nebo velmi xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx 5 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, ale zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, které xxxx xxxxxx škodlivé Xxx výsledky x 500 xx.xx-1 | |
500 xx.xx-1 tělesné hmotnosti | Xxxx než 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx x 50 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Látky, xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 2000 xx.xx-1 | |
2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx zřejmé xxxxxxxx | Xxx výsledky x 500 xx.xx-1 Látky, xxxxx nemají xxxxxxxxx xxxxxx toxicitu |
X.1. xxxx AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX XXXXX XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxx klasifikace xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávek x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx bylo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Kromě xxxx xxxxxx popsaný pro xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx výběr tří xxxxxxxxxxx pevně xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx lze xxxxxx xxx jako xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxx rozhodovacího xxxxxxx, nebo xxx xxxxx xxxxxxxxx. Použití xxxxxxx x těchto xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx žádoucí xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dávky x xxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx XX50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx rozsahu xxxxxxx, ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx smrt xxxxx xxxxxx xx x x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx testu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x sekvenčnímu xxxxxxx by xxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx B.1. Xxxxxx xxxxxxx xxxx metody xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx x metody xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx orálně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx ze stanovených xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx postupně, x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxxx xxxxxxx. Není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx kroku, x.x.
- není zapotřebí xxxxx další xxxxxxxxx;
- xxxxx krok xxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx tak, xxx byla xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx laboratorní xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx, ale xxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jediné dávce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxx suspenduje ve xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vodného roztoku/suspenze, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx známa xxxxxx xxxxxxx charakteristika; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx určitou xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxx xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx se přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx být březí.
Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Úrovně xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx úrovní, xxx. 25, 200 a 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx úroveň xxxxx by xxxx xxx xxxxxx, aby x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx uhynutí alespoň xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx podána. X závislosti na xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx příslušného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 1.
Pro xxxxx xxxxxxx x výchozí xxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxx úrovni xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx nejsou žádné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx se - x xxxxxxx xx pokusná xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxx zpřesnit xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xx dovoluje xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx uvažovat o xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx dávkách xx xxxx 5, 50 nebo 500 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, x kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx dráždícími xxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx skupinami je xxxxxxx xx rychlosti xxxxxxx, na xxxxxx x xxxxxxxxxx toxických xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxx xxx xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx dávku přežila.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx ve xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s podáním xxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 xx.xx-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx musí být xxxxxxx vyloučena z xxxxxxx pozorování x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx ochrany zvířat. Xxxxxx pozorování by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx předem pevně; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx nástupu x xxxxx zotavovacího xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dobu, kdy xx xxxxxx x xxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx toxické příznaky. Xxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxx zvážena. Xx xxxxxxxx látky jsou xxxxxxx bez xxxxxxx xx dobu dalších 3 - 4 xxxxx. Xxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, může být - v závislosti xx délce xxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vodu.
Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx podán xxxxxxxx, xxxxxx na velikosti xxxxxxx. U xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx objemu xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx byl podáván xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxxx není xxxxx xxxxx xxxxx celou xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx po xxxxxxx po dobu xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) xxxx častěji, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx zvířat na xxxxxx xxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, která xxxx nalezena x xxxxxxxxx stavu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx silného stresu, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxx zvířata xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x humánních xxxxxx xxxx byla xxxxxxxx mrtvá, dobu xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, doku xxxxxxx xxxxxxxx příznaky toxicity. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xx xxxx x xxxxx, na xxxxx x xxxxxxxxxx, a xxxx xx dýchacím, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x kómatu.
Veškerá xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx vedeny xxx každé xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx jsou zvážena xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Počítají xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxx přežívající xxxxxxx zvážena xxxx xxx, xxx budou xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx testu, xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx informací xx xxxxx xxxxxx mikroskopické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx makroskopické xxxxxxxxx x zvířat xxxxxxxxxxxxx 24 a více xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx xxx údaje x každém jednotlivém xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx formy, xxxxxxxxx u každé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, časový xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx klasifikaci je xxxxxxx x Dodatku 2.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx získány:
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx zvířat, xx-xx xxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- zdroj, podmínky xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx testu.
Podmínky testování:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x doby aplikace;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx a kvalitě xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxx dávky.
Výsledky:
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (tzn. xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, charakter, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx);
- xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx u každého xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx x histopatologické xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 423.
XXXXXXX 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxx xxxx uvedeno v xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx uhynutí xxxxx u xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx výběr xxxxxxx dávky xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx struktury x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx toxicity x
- xxxxxxxxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx uvedené x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pro každou xxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx šipky.
3. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx druhého xxxxxxx, obvykle xx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx pitvou xxxxxx xxxxxxx, že úmrtí xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Jestliže xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx na xxxxx úrovni dávky.
4. Xxxxx xx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx uhyne xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xx to xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx pohlaví: xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx příznaky x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx důvodem xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx LD50 xx xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xxxx xxxxx, xxxx mohou xxx podnětem pro xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxx xxxxx.
5. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x třemi doplňkovými xxxxx stanovenými xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx buď x xxxxxx alternativní xxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1.
Xxxxxx xxxxxxxxx s výchozí xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu uhynulých xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx šipek xx xx dosažení xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Dodatku 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx doplňkovou dávkou.
Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx testování x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx počet uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx xxxxxx se x testování xxxxxxxxx xx xxxxx šipek xx xx dosažení xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Ukončení testu: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx podle způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Pokračování xxxxx x příslušnou doplňkovou xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx na xxxxxxx konečných hodnot xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx rámečku.
Postup xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx
X rámečcích je xxxxx xxxxx, počet xxxxxx a pohlaví (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx počet xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x testování xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx do xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Pokračování xxxxx x příslušnou xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených v xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx založených xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Šedé rámečky xxx xxxxxxxx "ŽÁDNÉ XXXXX TESTOVÁNÍ" x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx konečné hodnoty xxx klasifikaci. Po xxxxxxxxx podle xxxxxxxx 1 se příslušná xxxxx sleduje, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Hodnoty x xxxxxxxxx xxxxxxxxx horní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx klasifikace. Ležatá xxxxxxx xxxxxxx, xx XX50 je xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx rámečku vlevo.)
(a) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx postup s xxxxxxx dávkou 2000 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx založených xx xxxxxxxxx variantě 1
x) Xxxxxxx dávka 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx dávka 200 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
x) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx hmotnosti
X.2. AKUTNÍ XXXXXXXX (INHALAČNÍ)
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx získat xxxxx x rozdělení velikosti xxxxxx, tenzi par, xxxxxxx tání, teplotě xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x výbušnosti (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) testované xxxxx
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x xx xxxxx koncentraci v xxxxx xxxxxxx. Potom xx zvířata xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx x případy xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Testované xxxxx se xxxxxx xxxxxxx v takových xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx následkem xxxxx leptavých nebo xxxxxxxxxx vlastností.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu. Před xxxxxx xx zdravá xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx používaného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, není třeba xxxxxxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, xxx x ovzduší xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx; x tom xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná historická xxxx, je xxxxx xx využít.
1.3.2 Experimentální xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xxxxxxx se xxxxx užívaných pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti zvířat xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 10 hlodavců (5 xxxxx x 5 xxxxx). Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx a xx třeba xxxxxxx, xxx nebyly xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx testech xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx testované xxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxx x testovacích skupin xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx mezi xxxxxx x mortalitou a, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx umožnit xxxxxxxxx XX50 s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 samců x 5 samic xxxxx x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 xxxx xxxxx xx xxxxxxxx tekuté xxxx pevné xxxxx x koncentraci 5 xx.x-1 (xxxx - x xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx použít x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sledované xxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx - při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx k žádné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, považují xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxx 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxx zařízení, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proudění xxxxxxx x výměnou xxxxxxx nejméně 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx x zásadě celkový xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Je xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx by měla xxxxx nejméně 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, na xxxxxxxxx jejich xxxxxx x na trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx je doba, xxx xx xxxxxx x opět xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx doba xx xxxxxxx, zvláště tam, xxx je patrna xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx zváží. Xxxxxxxx xx xx dobu 4 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx pokusu xx xxx 22 oC ± 3 x X. Xxxxxxxxx vlhkost xx xxx ideálně xxxx 30 % x 70 %, x výjimkou xxxxxxx, xxx to xxxx xxxxx (např. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 mm xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx unikání xxxxxxxxx xxxxx do xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Používají xx xxxxxx systémy xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx zaručovat, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx homogenní xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry x xxxxxx.
Je xxxxx zajistit xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) měření xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx),
(x) skutečná koncentrace xxxxxxxxx xxxxx se xxxx v xxxxxxx xxxx alespoň třikrát xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Během jedné xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx než ±15 %. X některých xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx dosáhnout, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Po xxxxx xxxx trvání xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx týká xxxxxx x aerosolů, xxxx xx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx xxx xxxxx, xxx to pokus xxxxxxxx (xxx nejméně xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx xx měří xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx skončení xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx třeba provádět xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx každý xxxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx zmrazením xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, křečovým jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx zachytit co xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx týdně x v xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xx zvláštním zřetelem xx všem xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx traktu. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x odeberou xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
2. ÚDAJE
Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx patrný počet xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx vykazujících xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx účinků a xxxxxxx nálezy. Změny xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenat, xxxxx xxxxxxx přežijí xxxx než xxxxx xxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx stresu xxxx k bolestem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx uznávanou metodou. Xxxx xx hodnotí xxxxx - pokud xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx a xxxxxxxx x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx poškození, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx dalších xxxxxxxxx účinků.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky ustájení, xxxxxx, atd.,
- xxxxxxxx pokusu: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, rozměrů, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx umístění zvířat x expozičním xxxx, xxxxx xx používán. Xx třeba popsat xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- údaje o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx odchylkou). Mají xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
a) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx;
x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx;
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Xxxx.: xxx xxxxxxxx aerosolům látek x roztoku (xxxx. xx xxxx) xx xxxxx uvádět xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, nýbrž xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, koncentraci xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx.
d) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;
e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD);
x) xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx;
h) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx expozice (xx. xxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxx uhynula xxxx xxxx humánně xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat);
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx jejím xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- hodnota XX50 xxx každé xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx spolehlivosti xxx XX50 (pokud xx xxxxx jej stanovit);
- křivka závislosti xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) x její xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx);
- xxxxxxx nálezy;
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x humánních xxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx LC50);
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.3. XXXXXX XXXXXXXX (DERMÁLNÍ)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x zaznamenávají xx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx konec xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Testované xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x takovým xxxxxxxx, o xxxxxxx xx známo, že xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá zvířata xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx experimentálních skupin. Xxx 24 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xx zádech ostříhá xxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) kůže, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxxx x pevnými xxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx formě, xx xxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nutné xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxx, x jaké xxxxx se xxxx xxxx látka xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx kůží, x xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ten, xxxxx xxxxxxx usnadňuje xxxxxx xxxx. Testované xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx králíků. Xxx xxxxxx x xxxx živočišné xxxxx, xxxxx xxxx xxx xx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxx dávek použít xxxxxxx 5 zvířat xxxxxxxx xxxxxxx. Používá-li xx xxxxx, xxxx xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx x obou xxxxxxx je výrazně xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Používají-li xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pečlivě zvolit x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx toxické xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx vyhnout xx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Má být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx, x mají xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx vznikly xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x účinkem, x xxxxx možno umožnit xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx jednou xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx látka způsobí xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx úplnou xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx být určena xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx příznak otravy xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx k výskytu xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx plochu, xxxxx xxxx xxx 10 % xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx může xxx xxxx plocha xxxxx; xxxx xx xx xxxx aplikovat xxxxxxxxxxx na co xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxx 24 hodin xxxxxxxxx x kontaktu x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx pohybu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx však nelze xxxxxxxxx.
Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxx nebo jiným xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx záznamy. První xxx xx zvířata xxxxxxxx často. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xxxx izolací x xxxxxxxxx slabých či xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xx xxxxxx xxxx provedena aplikace, xxx a sliznic, x xxxx dýchání x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické aktivity x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxxx až xx konce pokusu, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx pohlaví xx xxxx xxxxx xxxxxxx jedné skupině x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zjistilo, xxx xxxxxxx druhého pohlaví xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx odůvodněno xxxxxxx menšího počtu xxxxxx. Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že zvířata xxxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně před xxxxxxx testované xxxxx, xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx hmotnosti xx třeba xxxxxxxx x zaznamenat, xxxxxxx-xx xxxxxxx déle xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x bolesti xxxxxxxx xxxxxxx látkou, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx xxxxx látkou. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Xxxx xx hodnotí vztah, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxx, krmení atd.,
- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx způsobu xxxxxxxx xxxx a xxxx xxxxxx: okluzivní xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (včetně vehikula, xxxxx je xxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx toxických xxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx dávek (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx testu; xxxxx xxxxxx s příznaky xxxxxxxx; xxxxx exponovaných xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, důvody x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- všechna xxxxxxxxxx,
- hodnota XX50 xxx xx xxxxxxx, x kterého byl xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx výpočtu),
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx LD50 (xxxxx xxx lze xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx mortality na xxxxx a xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx danou metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx všech xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx xxxxxxxxx věnovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XX50 v xxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxx),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.4. XXXXXX XXXXXXXX (KOŽNÍ DRÁŽDIVOST)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxx
Je třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx látce s xxxxx snížit xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxxxx xxxxx reakce. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx posouzení, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zda xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
x) Fyzikálně-chemické xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx látky (např. xX xxxxx xx xxxxx 2 nebo xX xxxxx či xxxxx 11,5) xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx leptavé xxxxxx. Xx xxxxx vzít x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
b) Xxxxxxxx xxxx dostupné xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vitro xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx test.
c) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Rovněž xxxx třeba testovat xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx slouží xxxx xxxxx vlastní kontrola. Xx stanovené xxxx xx xxxxxx, vyhodnotí x následně xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxx provést xxxxx posouzení xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo možné xxxx xxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx se závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxx 24 hodin před xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zvířat na xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx holení srsti xx xxxxx dbát xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx kůže (xxxx. xxxxxx). Je xxxxx použít xxxxx xxxxxxx se zdravou, xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx mají xxxxxxxx husté xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx x některých xxxxxxxx xxxx. Testované xxxxx xx nesmí xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx látku dostatečně xxxxxxxx xxxxx, případně xxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx podráždění xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx xxxxx xxxxxx různé xxxxx xxxxx, je xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Jestliže xx x in xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx úvah xxxxxxxxx, že látka xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. je leptavá), xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxxxxxx tohoto testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxxx zvířatech.
Xxx xxxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx zvířata. Xxxx třeba zvláštních xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx nejsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx postup, xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 xx kapaliny xxxx 0,5 g xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx zvířete xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Dobu xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx dostatečně dlouhá, xxx bylo xxxxx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx účinků. Xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx xx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx chovají jednotlivě x klecích. Testovaná xxxxx se nanese xx malou plochu (xxx 6 xx2) xxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxx past xxxx xxx vhodné nanést xxxxxxx testovanou xxxxx xx xxx, x xxx xxx připevnit xx xxxx. Xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx vhodným okluzivním xxxx částečně xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx tomu, xxx xx xxxxx dostalo x mulu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo xx vdechnout.
Xx xxxxx doby xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látku xxxxx, xxxxx xx xx možné, xxxx xxxxxxx rozpouštědlem, ale xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx celistvost xxxxxxx.
Xxxx expozice xx xxxxxxx 4 xxxxxx.
Xxxxx existuje xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx vyvolat nekrózu (xxxx. xxx, že xxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx délku xxxxxxxx (xxxx. xx 1 hodinu xxxx 3 minuty). Při xxxxxxx testování xx xxxxx xxxxxx nejprve xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx dermální xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. První plátek xx xxxxxxxx po 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx pozorována xxxxxxx xxxxx xxxxxx, odstraní xx xxxxx xxxxxx xx 1 hodině. Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx je nezbytná 4xxxxxxxx expozice x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx plátek xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx odpovědi kůže. X xxxxxxx, že xxxx možná 4xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xx xxxx kontraindikováno x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx pozorována xxxxxxx xxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxx po 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx ukončen.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, například xxxxx xx xxxxxxxx očekávanému xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx po 60 xxxxxxxx a xxxx 24, 48 x 72 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx kůže xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx systému xxxxxxxxx x xxxxxxx 1. Xxxxxxxx nebylo xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx. Vedle xxxxxxxxxx xxxx je xxxxx podrobně xxxxxx xxxxxxx závažné xxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx tkáně) x xxxx xxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx zabarvením xxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx použít xxxxxxx histopatologického xxxxxxxxx xxxx měření xxxxxxxx xxxxx xxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx každé pokusné xxxxx patrný xxxxxx xxxxxxxxxx posouzením xxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx rovněž xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx, popis xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, reverzibilitu nebo xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x čištění xxxx, xxx xxxxxx: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- ve xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxx každé xxxxxxxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx (za 1, 24, 48 x 72 xxxxx xxx. xx odstranění xxxx),
- xxxxx zjištěných xxxxxxx poškození xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx všech xxxxxxx toxických účinků xxxxx xxxxxxxxxx kůže,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- vyhodnocení xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx | |
1. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx | |
1.1 Xxxxx xxxxxx | 0 |
1.2 Xxxxx xxxxx erytém (stěží xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx erytém | 2 |
1.4 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx | 3 |
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx zrudnutí) xxxx tvorba xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Xxxxxxxxx xxxxx | |
2.1 Žádný xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx lehký edém (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
2.3 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxx zřetelné, xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) | 2 |
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxx x 1 mm) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (xxxxxxx více xxx 1 xx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx exponované plochy) | 4 |
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kožní xxxxxxxxxxx (XXX)
XXX xx vypočte xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx xxxxxx reakce xxx xxxxxx a xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx odečtu x xxxxxxx jedince x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx jedinců xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; XXX ≤ 3 |
xxxxxxx xxxxxx | 3 &xx; XXX ≤ 5 |
xxxxx xxxxxx | IKI &xx; 5 |
X.5. XXXXXX XXXXXXXX (XXXX DRÁŽDIVOST)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
1.1.1 Výchozí xxxxx
Xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx látce x xxxxx snížit na xxxxxxx testování látky xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxx xxxxxx. X xxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Např. xxxxx kyselé nebo xxxxxxxx xxxxx, které - jak xx xxxxx očekávat - xxxxxxxx x xxx xX xxxxx či xxxxx 2 nebo xX xxxxx xx xxxxx 11,5, xxxx xxxxx testovat, xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Je xxxxx xxxx x xxxxx xxxx alkalickou xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studií; xxxxx x prokázanými xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxx mít xxxxxxx účinky xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
c) Xxxxxxxx xx studií xxxxx xxxxxxxxxxx. Látky, xxxxx vykazovaly xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx testovat xx dráždivost xxx xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xx budou xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx se x xxxxxxxxxxx dávce xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx neexponované oko xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx podráždění x xxxxxx xx xxxx popíše, aby xxxx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinku. Xxxx pozorování musí xxx dostatečně dlouhá, xxx bylo možné xxxxxxxxxxx zhodnotit xxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Zvířata xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je xxxxx humánním způsobem xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
24 hodin xxxx xxxxxx xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx. Zvířata, x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx očí, xxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx různé xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xx dávat xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet xxxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxxx (reverzibilní xxxxxx) xxxx leptavé (irreversibilní xxxxxx) xxxxxx pro xxx xxx použití xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx další xxxxxxxxx xxxx dráždivosti u xxxxxxx zvířat. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx případně xxxxxxxxx xxxxx zvířata.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nálezů xxxx vyžadovat použití xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Úroveň xxxxx
Při xxxxxxxxx xxxxxxx se používá xxxxx 0,1 ml. X xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxx xxxxx 0,1 xx nebo xxxxxxxx xxx 0,1 x (xxxxxxxx je xxxx xxxxx uvést). Xxxxx-xx xx x xxxxx xxxx hrubě xxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx na xxxxx xxxxxx. Objem xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxx.
U xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x pumpou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba vystříknout x xxxxxx 0,1 xx xxxxx x xxxxxxxxxx xx do xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx vratnost xxxx xxxxxxxxxx pozorovaných účinků. Xxxxxxxx xxxx xxxxx 21 xxx xx xxxxxxxx studované xxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx zvířeti xx xxxxxxxxxxxx vaku xxxxxxx xxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xx 1 xxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx, xxx xx žádná látka xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx, xx které xx xxxxx xxxxxxxxxx, slouží xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx předpokládá, xx xxxxx může xxxxxxx xxxxxxxxx bolest, lze xxxx instilací xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx lokální xxxxxxxxxxx. Aby xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nedojde x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx x dobu xxxxxxxx xxxxxxxxx anestetika. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx.
Xxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxx nejdříve 24 hodiny xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 hodinách xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xx považuje xx xxxxxx.
X některých xxxxx, xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx metodě xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx po xxxxxxxxx xxxxx vymyjí oči. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxx použít 3 králíky. Xxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx oči xxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x rychlosti xxxxxxx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx
Xxx xx xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx-xx xx po 72 xxxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx postižení xxxxxxx xxxx xxxx příznaky xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x jejich xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Vedle xxxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x uvést xx xxxxxx i jiné xxxxxxxx léze.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxx je xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx připouští xxxxx možnosti xxxxxxxxxxxx. Xxxx pomůcku pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx ilustrovanou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx oka.)
Xxxxxxxxxxx reakcí je xxxxx xxxxxxxx použitím xxxxxxxxxxx lupy, ruční xxxxxxxxxx lampy, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx po 24 xxxxxxxx xx xxxxx oči xxxxxxxxx xxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxx ještě xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxx xxxxxxx zvíře xxxxxx xxxxxx podráždění x daném xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je třeba xxxxx popis stupně x xxxxxxxxxx podráždění, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x zvířatech (xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx),
- x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx leptavých xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (např. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx závažných xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podráždění x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx rohovky,
- popis xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 x 72 xxx.), např. xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx.,
- popis xxxxx xxxxxxxxxx mimoočních místních xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. DODATEK
4.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxx
Hodnota | |
X. Xxxxxxxx - xxxx | |
Xxxx není xxxxxxxx | 0 |
Slabý xxxx zahrnující xxxxxx | 1 |
Výrazný xxxx x everzí xxxxx | 2 |
Edém způsobující xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxx | 3 |
Edém xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx na polovinu xxxx xxxxx | 4 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxx | |
Xxxxxx není xxxxxxxx | 0 |
Slabé xxxxxx (nutno odlišit xx běžné sekrece xx xxxxxxxx xxxxxx) | 1 |
Slzení xx xxxxxxxxx víček a xxxxx v xxxxxxxxx xxx | 2 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček x xxxxx x xxxxxxx okolí xxx | 3 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxxx | |
Xxxxx xxxxxx normální | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx normě | 1 |
Xxxxxxxxxx cévní xxxxxx, rozlišení xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx červená xxxxx | 2 |
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Duhovka - xxxxxxxx | |
Xxxxxxxx nejsou xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, nastříknutí cév xxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxx xxxx těchto xxxxxxxxxxxxxx), reakce xx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx přítomná, rozsáhlé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx | 2 |
x duhovce (xxxxx xxxx více xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx) | |
X. Rohovka - xxxxxx neprůhlednosti | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx přítomná | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxxx oblast je xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxx zastřené | 2 |
Xxxxxxxxxx zóny opalescence, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx viditelné; xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 3 |
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx je ≤ 1/4 plochy xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; plocha xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; xxxxxx neprůhlednosti ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx > 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOA)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx xxxxx x xxxxx interval xxxxxxxxx xx xxxxxxx podle xxxxxx
XXX = 2.(X + B + X) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOP) pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vypočte pro xxxxx interval xxxxxxxxx xxxx xxxxxx z XXX.
Xxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx XXX xx xxxxx nejvyššímu XXX xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx
4.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
dráždí | 15 - 29,9 |
xxxxx dráždí | 30 - 59,9 |
xxxxx xxxxx xxxxxx | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
B.6. SENZIBILIZACE XXXX
1. METODA
1.1. Úvod
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx senzibilizačním xxxxxxx xx lidskou xxxx xxxx považovány xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Neexistuje xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xx xxxxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxx x xxxxx xx se xxxxxx xxx xxxxxxx látky.
Xxx volbě xxxxx xx xxxxx uvažovat xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx lze rozdělit xx testy x xxxxxxxx, ve xxxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxx rozpuštěním nebo xxxxxxxxxxxxx testované xxxxx xx Xxxxxxxxx kompletním xxxxxxxx (XXX), a xx testy bez xxxxxxxx.
Xxxxx x xxxxxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx pravděpodobného xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro lidskou xxxx než xxxxxx xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x proto xx xxx xxxx xxxxxxxx.
Maximizační xxxx xx xxxxxxxxx (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxx schopnosti xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxxxx několik xxxxxxx xxxxx, xx XXXX xxxxxxxxx xx preferovanou xxxxxxxx x adjuvans.
X mnoha xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx se xxxx Xxxxxxxxxx testu) xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx volbu Xxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx Buehlerova xxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxx důvody.
X xxxx metodické xxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx (GPMT) a Xxxxxxxxx test. Xxx xxxxxx i xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx jsou odborné xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx.
Pokud screeningový xxxx xxxxxxxxx uznávanou xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxx xxxxx označit xxxx potenciální senzibilizátor xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Definice
Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx látku. X xxxxxxx mohou xxx reakce xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx těchto xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx reakce lišit x xxxx xxx xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx xxxx otok.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx záměrem navodit xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx týdne xx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx kterého se xxxx rozvinout xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxxxx období pro xxxxxxxxx, xxx subjekt xxxxxx xxxxxx přecitlivělosti.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Citlivost x xxxxxxxxxxxx použité xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx xx známo, že xxxx xxxxx xx xxxxxxx silný senzibilizační xxxxxx pro kůži.
X správně xxxxxxxxxxx xxxxx xx očekává xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % u xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx 15% u xxxxxx bez xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx látkám:
Xxxxx XXX | Xxxxx XXXXXX | xxxxxxxx název | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | alfa-hexylcinnamaldehyd |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-merkaptobenzothiazol | xxxxxx |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Mohou xxxxxx xxxxxxxxx, xxx při xxxxxxxxxxx odborném zdůvodnění xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Pokusná xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Po xxxxxx 10 xx 14 xxx (indukční xxxxxx), x průběhu xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Rozsah x xxxxxx kožní xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x testovaných xxxxxx xx porovnán s xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx podstoupí xxxxxxx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxx x xx jim xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx testovacích xxxxx
Xxxxxxxx je xxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou látku, xxxxxxx se xx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, aby nebyla xxxxxxxx vzniklá xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.1 Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (GPMT)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aklimatizují xx xxxxxxxxxxx podmínky xx xxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx expozičních x kontrolních xxxxxx. Xxxxxxxxxx srsti xx xxxxxxx stříháním, xxxxxxx xxxx chemickou depilací, x závislosti na xxxxxxx xxxxxxxxx metodě. Xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx se xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Experimentální xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx albinotických xxxxxx.
1.5.1.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxx i xxxxxx. Xxxxxx musí xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx 10 zvířat x nejméně 5 xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se menšího xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx morčat x xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx celkového xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 kontrolních xxxxxx.
1.5.1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx expozici xx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx snášejí x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, která u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolá xxxxxxxxxx kůže. V xxxxxxx potřeby xx xxxxx xxxxxx koncentrace xxxxxxxx x předběžném xxxxxx na xxxx xxxx xxxxx zvířatech. Xxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.1.3.1 Xxxxxxx
Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Následující 3 xxxxxxx subkutánních xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx xxxxxx xx lopatkové xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx linie:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (XXX) xxxxxxx s xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x objemovém xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx zvolené xxxxxxxxxxx;
Injekce 3: xxxxxxxxx látka ve xxxxxxx xxxxxxxxxxx připravená xx xxxxx FCA x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx roztokem x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxx xxxxxxx 3 se xxxxx ve vodě xxxxxxxxx xxxxxxxx před xxxxxxxx x XXX xx vodné fázi. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx nebo látky xxxxxxxxxxx xx rozptýlí x nezředěném FCA. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 3 má xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 2.
Xxxxxxx 1 x 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx 3 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx 0 - Kontrolní xxxxxxx
Následující 3 xxxxxxx subkutánních xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, se podají xx xxxxxxxx xxxx xxxx x testovaných xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx kompletní xxxxxxxx (XXX) smíšené x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxx xxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) se xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x poměru 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx a kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx indukční aplikací, xxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxx xxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx důkladném xxxxxxxxx xxxxxxxx oholení xxxxx 0,5 xx 10% laurylsulfátu sodného xx xxxxxxxx, za xxxxxx navození xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxx xxxxxx xx zbaví xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx napuštěn xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 cm), který xx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx plochu x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx látky jsou xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx do vhodného xxxxxxxx; kapaliny lze xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. xxx - Kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxx plocha xx xxxxx xxxxx srsti. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxx 48 hodin.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. den - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xx jeden xxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xx xxxxx bok xx xxxxxxx xxxxxxxx aplikuje xxxxx xxxxxxxxx (pokud xx to xxxxx). Xxxxxx xx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxx udržují x kontaktu s xxxx po 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupiny
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx náplasti xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, důkladně ostříhá xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (přibližně 48 xxxxx xx začátku xxxxxxxx provokační xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a zaznamenává xx xxxxx stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx 24 xxxxx po tomto xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx (72 hodin).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, které xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx nutná xxxxx provokace (tj. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), provede xx xxxxxxxxx x xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x kontrolní skupinou x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze také xxxxxxx xx původní xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxxx xxxx xxxxxxxxx indukčních x provokačních xxxxxxx, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (xxx xxxxxxx). K xxxxxxxxx xxxxxxxx nálezů xx xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx řas.
1.5.2 Buehlerův xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx aklimatizují xx laboratorní xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 dnů xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx se zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Odstranění xxxxx xx provede xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx x xx konci xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Používají xx xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxxxxxxxx morčat.
1.5.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx samce x/xxxx xxxxxx. Xxxxxx musí xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx 20 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 zvířat x kontrolní xxxxxxx.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Koncentrace xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx úroveň, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, ale xx xxxxx silné xxxxxxxxxx xxxx. Jako xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolává xxxxxxxxxx xxxx. X případě xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx koncentrace xxxxxxxx x xxxxxxxxxx pokusu xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx rozpustné xx xxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx zředěný xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxx jiné xxxxx xx xxxxxxxxxx 80% roztok xxxxxx/xxxx xxx indukci a xxxxxx xxx provokaci.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Indukce
Xxx 0 - Testovaná xxxxxxx
Xxxxx xxx xx zbaven xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx xxxxxx testovanou xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx xxxx odbornými xxxxxx; xxxxxxxx lze xxxxxxxx aplikovat přímo).
Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx na testovací xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx po xxxx 6 xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx být okluzivní. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x použitím xxxxxxxx přidržovače, xxx xx zajistila xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx být xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxx xxx xx zbaven xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Xx testovací xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x to xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx test je xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x přidržován x kontaktu x xxxx překrývacím plátkem xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupina xxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupiny xxx aplikace.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx jako x xxx 0 xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx boku (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx a xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Provokace
27. - 29. xxx - Testovaná x xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxx xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx část xxxxxxxxxxxx xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxx část xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Překrývací xxxxxx xxxx komůrky xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x hodnocení
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx srsti;
- xxxxxxxxx x tři xxxxxx později (xxxxxxxxx 30 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx pozorující xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx senzibilizováno x xxxxx je kontrolní.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx nutná xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx znovu x kontrolní xxxxxxxx x vehikulem. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx xx původní xxxxxxxxx skupině.
Všechny xxxxx reakce a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky kožních xxx.
2. SBĚR A XXXXXX XXXXX (XXXX X XXXXXXXXX TEST)
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx musí xxx xxx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx reakce xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX (XXXX A XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx uvést xxxxx tohoto xxxxx xxxx jeho xxxxxx (xxxx. LLNA - xxxx regionálních xxxxxxxxxxxx xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx ucha x xxxx) xxxxxx xxxxx podrobností xxxxxxx x xxxxxxxx získaných xxx testované x xxxxxxxxxx látky.
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx (XXXX x Buehlerův xxxx)
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx získány:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx morčat;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.;
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx a xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxx přípravy xxxxx xxx plátkový xxxx;
- podrobné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x přípravě, aplikaci x odstranění xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x vehikula, xxxxxxx xxx xxxxxxx a xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx citlivosti x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx použité xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx koncentracea xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx pozorovaných účinků;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Diskuse výsledků
Xxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx OECD XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Magnussona/Kligmana xxx xxxxxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;
2 = xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx pozitivity při xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx toho, xxxxx xxxxxx x rámci xxxxxx bylo danou xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx
xxxxx alergen (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
mírný xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % xxxxxx
xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
silný xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx
xxxxxxxx xxxxxxx (V. xx.) - 81 - 100 % zvířat
B.7. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX ORÁLNÍ (28DENNÍ XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx xx 28 xxx v odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx zvířat xxxxxx, x to xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx pozorují, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx u xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx během xxxxxx; xxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu, xx utratí a xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx se náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Klece xxxx xxxxxxxxxx tak, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx klece. Xxxxx xxxxxxxxxx zvíře xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxx studie jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxxx xxxxx lze xxxxxxx xxxxxx nebo x potravě xxxx x pitné xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx je xx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) a xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xx zvoleném xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, ale xx xxxxx xxxxxx x jiného xxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx z běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx a nesmí xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx by nemělo xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx předběžný xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, je třeba x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxxx zdroje.
1.2.2.2 Počet x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Pokud xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx studie, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx dávku x xxxxx následujících 14 xxx po podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxx dávek
Xx xxxxx použít xxxxxxx tři xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx skupinu. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx se kontrolní xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx skupinám, x to xx xxxxxxx množství, které xxxxxx xxxxxxx, které xx aplikuje nejvyšší xxxxx.
Xxxxx xx xxxxx dostupných xxxxxxxxx xxxx očekávat xxxxxx xxx xxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx-xx xxxxxx data x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vyhledávací xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx existující xxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií x testované xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx příbuzných.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx uhynutí xxx xxxxx utrpení. Dále xx xxxxxxx dávky x xxxxxxxxx xxxx xxx, xxx umožnily xxxxxxxx závislost účinku xx xxxxx. Nejnižší xxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat žádné xxxxxxxx toxicity (NOAEL). Xxxxxxx xx vhodný xxxx- xx xxxxxxxxxxx xxxxxx mezi sousedními xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx čtvrtou xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx velký xxxxxx xxxx dávkami (xxxx. xxxxxx větší xxx 10).
Xxxxx xx testovaná látka xxxxxx x xxxxxxx xxxx pitné xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx podávané xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x vodní rovnováhu. Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx použít xxx xxxxxxxxxx koncentrace (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxx sondou, mělo xx se xxx xxx každý den xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx studie sloužit xxxx xxxxxxxxx pokus xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx použít xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxxx-xx test xxxxxxxxx zde popisovaným xxxxxxxx žádné toxické xxxxxx xxx xxxxx 1000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v potravě xxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxx odpovídá, x pokud toxicita xxxxxxxxx xxxxx nevyplývá x xxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkami, xx xxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxxx při vyšších xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx je 28 dní. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx nejméně dalších 14 xxx xxx xxxxxxxx x cílem xxxxxxxx případné xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx přetrvávání xxxx xxxxxxxxx účinku.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 xxx, xx xxxxxxxxxxxx případech 5 xxx x xxxxx. Denní xxxxx xx podává xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sondou xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kanylou. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx lze podat x 2 ml xx 100 g xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx minimalizovat xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx xxx podáván xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x kterých xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx provádí nejméně xxxxxx denně, xxxxxxx x tutéž xxxxx xxxx x x xxxxxxxx xxxx očekávaného xxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx. Zaznamenává xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx provede zběžná xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx aplikací (xx xxxxxx intraindividuálního xxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Toto xxxxxxxxxx se xxxx xxxx xxxxxxx klec x xxxxxxxxxxx pozorovacím xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx dobu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx v testující xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxxxxx xxxxxx znát xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (slzení, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx zornic) x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx změny xxxxx, xxxxxx, xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx klonických x xxxxxxxxx pohybů, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx pohyby nebo xxxxxxxx) xxxx bizarních xxxxxx chování (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx pozadu).
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx podněty (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx xx xxxx xxxxxx a celková xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx informace x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxx x xxxxxxxxxx (viz Xxxxxxxxx úvod, xxxx X).
Pozorování funkčních xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx vynechat, xxxxx 28xxxxx studie xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx studie. Xxxxx x v tomto xxxxxxx xxxx xxxxx x funkčních xxxxxxxxx xx čtvrtém xxxxx 28xxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Výjimečně xxx xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx příznaky xxxxxxxx, které xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxx hmotnost x xxxxxx xxxxxxx a xxxx
Xxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Spotřeba xxxxxxx x xxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, také x xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx vodě.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx pokusu zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxx xx odebere xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířete, xxxxx, xxxxx se xxxx odebrala, se xxxxxxxxx. Krev xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx analýza xxxx xx xxxxxx posouzení xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xx tkáně, zvláště xx xxxxx a xxxxxxx, se xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxx xxxx nebo x xxxxxxx utracení (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx). Doporučuje xx xxxxxx zvířata bez xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx krve1). Xxxxxxxxx xxxxxx x séra xxxxxxxx stanovení sodíku, xxxxxxxx, glukózy, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx proteinů, xxxxxxxx, xxxxxxxx alespoň xxxx xxxxxx indikujících xxxxxx xx jaterní xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gama xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxxx enzymů (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx x některých xxxxxxxxx poskytnout užitečné xxxxxxxxx.
Xxxxx možnost xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx studie: hodnotit xx možno xxxxxx, xxxxx, osmolalitu xxxx xxxxxxxxxxx hmotnost, xX, xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx xxxx. xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx poškození tkání x xxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x působení xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, fosforu, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx hormonů, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxxxxx těchto vyšetření xx posuzuje xxxxx xxxxxxxxxxxx xx určitých xxxxxx látek nebo xxxxxx xx případu.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx pružně, xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx dané xxxxx.
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx hodnotách xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1) Vyšetření xx lačno xx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx v xxxx x xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx je xx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx mohla xxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxx mít vliv xx celkový metabolismus x x aplikace x xxxxxxx by xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxx se xxxxxxx xxxx xx xxxxx, xx xxxxx biochemické xxxxxxxxx provést až xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx xxxxx.
1.2.3.5 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, zahrnující xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx otvorů, xxxxxx xxxxx, hrudní x xxxxxx, a xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxx x xxxxx xxxxx zvířat se xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxxx xx xxxxx xx zváží xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (reprezentativní xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x mostu), xxxxx, xxxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, slezinu, xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxx ponořením), xxxxxx x xxxxxxxx pohlavní xxxxxx (xxxx. xxxxxx, xxxxxxxx), močový měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx pro oblast xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), periferní xxxx (n. xxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxx), xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, řez xxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxx xxxxx z nasáté xxxxxx dřeně). Podle xxxxxxxxxx nebo jiných xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i další xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx v xxxxxxxx x tkáních xx xxxxxxx s nejvyšší xxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx vyšetřit.
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xx xxxxxx zařazeny, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx exponovaných zvířat.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
X dispozici xxxx xxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx údaje sumarizovány xx xxxxxxxxx formy, xxxxxxxxx u každé xxxxxxxxx skupiny počet xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v průběhu xxxxx nebo utracených x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx úmrtí jednotlivých xxxxxx, popis toxických xxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, trvání x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx, typ xxxx x procento xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx.
Výsledky x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx vyhodnotit vhodnou x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx metodu xx třeba zvolit xxx při plánování xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být získány:
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxxxx druh/kmen;
- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx zvířat;
- xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx začátku testu, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx testu.
Podmínky xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx jiné xxx xxxx;
- zdůvodnění xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxx testované xxxxx xxx aplikaci, xxxxxxxx x přípravě xxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x homogenitě xxxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx x xxxxxxxx x xxxxx nebo xxxx);
- podrobné xxxxx x xxxxxxx x kvalitě xxxx (xxxxxx druhu x xxxxxx);
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx potravy x xxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pohlaví a xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx;
- povaha, xxxxxxxxx x trvání xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx smyslové xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x příslušnými xxxxxxx;
- výsledky xxxxxxxxxxxxx vyšetření s xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x hmotnosti xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx všech histopatologických xxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxx:
4. LITERATURA
Tato xxxxxx je analogická xxxxxx XXXX XX 407.
B.8. AKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxx pokusem xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx, xxx xxxx, bod xxxx, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx stanovitelné).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Několik xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx studované xxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx koncentraci, x xx xx 28 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx koncentrace testované xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vehikulum. Xxxxx xxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zjišťují xx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx přežijí xx konce xxxxxx, xx pitvají.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx před xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx xxxxxxxxxx data, xx xxxxx je xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx důvody proti xxxx. Xxxxxxx se xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx x běžně xxxxxxxxx pokusných kmenů. Xx začátku studie xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx budou xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, která budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxxxx vysoké xxxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx dobu 28 xxx a během xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx také satelitní xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x skupiny x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxx x malém počtu. Xxxxxxxx koncentrace by xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx odhady expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Ideálně xx xxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx toxický xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, mají xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Trvání xxxxxxxx xx xxx 6 xxxxx xxxxx; x případě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je možné xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxx xx zvířaty se xxxxxxx dynamické xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx tak, xxx se zamezilo xx nejvíce xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx byla xx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx boxu xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx přesáhnout 5 % objemu xxxx. Xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expozice; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx jinými cestami.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Pokusná xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat během xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx třeba zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx kterém xx objeví x xxxx odezní toxické xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být mezi 30 % x 70 %, s xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx není xxxxx (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx uvnitř xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx do okolí. Xxxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Používá xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro získání xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Systém xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxxx expozice xxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx expozice:
x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
b) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací zóně. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x více xxx ± 15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx a aerosolů, xxx xxxx úrovně xxxxxxxx není možné xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx xxxxxx kolísání. Xx celou xxxx xxxxxx experimentu xxxx xxx koncentrace xxx xxxxxxxx, jak xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx.
Xxxxx expozice a xx jejím xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně pozorovat xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx a zaznamenávat xxxxxx xxxxxx, stupeň x trvání. Pozorování xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx zaznamenávat xxxxx x spotřebu xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx prohlížení xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx zařazení.
Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata a xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx či trpící xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x pitvat.
Xx xxxxx xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zahrnovat alespoň xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx leukocytů a xxxxxxxxxxx krve.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x ledvin xxxxxxxx xxxxxxx jeden x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x séru.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, fosforu, chloridů, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků.
1.3.3.1 Xxxxx
X všech zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx provede pitva. Xxxxx játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxx xx co xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx vysychání. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, ledviny, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny x srdce, x xxxxxxx orgány x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx velikosti) je xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, tak xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
U xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx x xxxxxxx ve skupině x xxxxxxxx koncentrací xxxxxx xxxxxxxxx způsobená xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx xx orgány x tkáně, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXXX
Údaje se xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx formami xxxxxxxxx.
Xxxxxxx zjištěné výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx přípravy xxxxxx a aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxx, xxxxx je používán. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx teploty, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx spolu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx odchylkou). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx údaje: a) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx; x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) povaha vehikula, xxxxx bylo užito; x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx; x) xxxxxxxxxx medián xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx o toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx koncentrací,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- statistické vyhodnocení xxxxxxxx, kde xx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - DERMÁLNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx kůži xxxxx xx 28 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé skupině xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Krátce před xxxxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx před experimentem. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx potřeba xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je třeba xxxx xx xx, xxx se xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. abrazí). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % povrchu těla. Xx xxxxx vzít x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x x velikosti xxxxxxx xxxxxx. Při pokusech x xxxxxx látkami, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx denně 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx možno používat xxxxxxx potkany, králíky xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx použít x xxxx zvířecí xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Pro každou xxxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxx x 5 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 dnů xxxxxxxx xxxxx x xxxxx následujících 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxx sledovat vratnost, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx každého pohlaví).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - pokud xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx skupinu x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 6 hodin xxxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx xx xx mělo xxxxxxxx každý xxx xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx se se xxxxxxx v kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se kontrolní xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx aplikuje xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx nebo jen x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx dávka by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx jen xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x nízkou x střední xxxxxx x x kontrolní xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků obtížné.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx snížit xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx poškození xxxx, je xxxxxxx xx určitých xxxxxxxxx xxxxx pokus xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x xxxx, xxx xx objeví a xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx x klecích xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 dnů x xxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx xxxx určena xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Testovanou xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % povrchu xxxx; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha menší. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx co xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx vrstvě.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx dobu 24 xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx mulového xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Testovanou xxxxxx xx dále xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx požití xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx pohybu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít "ochranného xxxxx".
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, pokud xxxxx xxxxx nebo x xxxxxxxx jiného vhodného xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x sliznic x xxxx dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se zaznamenávají xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx nedocházelo xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx chybného xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx všechna xxxxxxx, která xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x těžkém stresu xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x pitvat.
Na xxxxx pokusu xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, celkového x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x srážlivosti xxxx.
2. Biochemická xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx funkce xxxxx x ledvin stanovit xxxxxxx xxxxx z xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx bílkoviny x xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx potřebné pro xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxxx, xxxxxxx, chloridů, sodíku, xxxxxxxx, glukózy xx xxxxx, lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx xxxxxx použitých xx studii se xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, ledviny, nadledvinky, xxxxx x xxxxxxx xx xx nejdříve xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxx, např. normální x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x makroskopickými xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx přechovávat xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x zvířat kontrolní xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx histologické vyšetření xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, je xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx orgány x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx do tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx zjištěné xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx statistickou metodou. Xx x tomu xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (druh, xxxx, xxxxx, podmínkách xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx ji lze xxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.10. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXX XX XXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 473, In Xxxxx Mammalian Chromosome Xxxxxxxxxx Test (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací xx xxxxx xx nalézt xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Strukturální aberace xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx metoda xxxx xxxx xxxxxxxx k xxxxxxx numerických xxxxxxx x běžně se x tomuto xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx příčinou xxxx xxxxxxxxxxx chorob u xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx doklady xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x příbuzné xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, hrají xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
Tento xxxx se používá x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx chemických xxxxx, které xxxx x xxxxx testu xxxxxxxxx, je sice xxx savce xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx dostatečná xxxxxxxx xxxx tímto xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace závisí xx xxxxx látky x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, že existují xxxxxxxx látky, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nezjistí, xxxxxxx zřejmě xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx než xxxxxx xxxxxxxxxx XXX.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx, buněčných kmenů xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Použité buňky xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, stability xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx diverzity x xxxxxxxx spontánních chromozómových xxxxxxx.
Xxxxx in xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zdroj metabolické xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx podmínky x xxxxx xx xxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, jež xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu, xxxxx xxxx způsobeny změnami xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx cytotoxicitou (4) (5).
1.2 XXXXXXXX
Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální xxxxxxxxx chromozómu, které xx xxxxxxxxx jako xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).
Zlom chromatidy: xxxx zlom xxx xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx xxxxx xxxx obou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx větší, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx zlomu je xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx replikace XXX nepřechází jádro xx xxxxxx, nýbrž xxxxxx xxxxx S-fáze. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx léze xxxxx než xxxxx xxxxx chromatidy x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x xxx.).
Strukturální aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení xx xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx a výměny.
1.3 XXXXXXX METODY
Buněčné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x to x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové aberace.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx celou xxxx xxxxxxxxx linií, xxxxx xxxx primárních xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx křečka xxxx xxxxxxxxx periferní xxxx xxxxxxx či xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxx kultivační xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx nádoby, xxxxxxxxxxx XX2, teplota x xxxxxxx). U xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx je xxxxx xxxxxx způsobem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxxxxx. Xx třeba znát xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx a kultivační xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx kultur
Stabilizované xxxxxxx linie a xxxxx: xxxxx se xxxxx xx zásobních xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx média x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx nedosáhly xxxxxxxxxxx xxxxxx před xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx při xxxxxxx 37 oC.
Lymfocyty: xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx přidá xxx xxxx krev x vhodným xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), nebo xxxxxxxxxx lymfocyty získané xx xxxxxxxx jedinců x xxxxxxxxx xx xxx teplotě 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Xx xxxxx xx testovanou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (S9) xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy xxxx xx Aroclor 1254 (6) (7) (8) (9), nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx a ß-xxxxxxxxxxxx (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx typu je xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx modifikované xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx linií xx xxx xxx vědecky xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx stavu, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx její xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx x případně xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx předtím xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX TESTU
1.6 ROZPOUŠTĚDLO
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx xx mohlo x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x aktivitu X9. Používá-li se xxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být podpořeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx, xxx xxxx xxx, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx rozpouštědla xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.6.1 Koncentrace
Xxxx xxxxxxxx, jež xx uvažují xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x xxxxxxx a xxxxx pH xxxx. xxxxxxxxxx.
Cytotoxicita se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x bez xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, například xxxxxx xxxxxxxxxx, počet živých xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Dochází-li x xxxxxxxxxxxx, musí xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx nízké xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx znamená, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lišit xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx mezi hodnotami 2 x √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx signifikantní xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx (vždy x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx x je xxxxxxx xx době xxxxxxxx xx expozici xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx akceptovatelný pro xxxxxxxxx xxxxxxx, kde xx jiná xxxxxxx xxxxxxxx xxxx obtížná x nepraktická. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx x kinetice xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx průměr, xxxxx ne vždy xxxxxx existenci x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X tak x xxxx prodloužení xxxxxxxxxx generačního času xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx od vhodné xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výtěžku xxxxxxx.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 µl/ml, 5 xx/xx xxxx 0,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx jsou xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx být xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx je xxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx dochází-li x xxxxxxxxx účinku xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx koncentracích s xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Může xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, protože se xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vlivem xxxxxxxxxxx buněk, séra, X9 apod. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxx buněk.
1.6.2 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx každého experimentu, xx xxx s xxxxxxxxxxxx aktivací xxxx xxx xx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx). Xxxxx xx xxxxxxxx metabolická aktivace, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx účinku.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx očekává, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx nárůst xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testovacího xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxx byl xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přímo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Mezi xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:
Metabolická aktivace | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Xx | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Ano | xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx i jiné xxxxxx xxxxx. Tam, xxx xx to xxxxx, xx xxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx chemické xxxxxxx.
Xxx každý časový xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít x negativní kontrolu, xx které xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x kultivačním xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx jakéhokoliv xxxxxxxxx.
1.6.3 Postup
1.6.3.1 Expozice xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx proliferující xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx za xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xx lymfocyty je xxxxx začít působit xxx 48 hodin xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx kultury; x xxxxx se doporučuje xxx xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx. Pokud lze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, aby se xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx jenom jedna xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxx neprodyšně xxxxxxxxxx kultivačních nádob (15).
1.6.3.2 Xxxx xxxxxxxx kultury
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vystaví xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx xx xxxx 3 - 6 hodin x xxxxxx se xxxxxxxxx x čase xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Xxxxx jsou xxx xxxxxxx aktivačního xxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx negativní, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx expozicí xx xx doby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxx době xxxxxxxx delší, xxx xx 1,5xxxxxxx délky xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx s metabolickou xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xx potvrzení negativních xxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Příprava xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx kultury xx xxxxxx Colcemidem® xxxx kolchicinem xxxxxxx xx dobu 1 - 2 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx buněčná xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zpracovává xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Všechny xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx postupy xxxxx xxxxx x rozbití xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x ztrátě xxxxxxxxxx, xxxx xxx x všech typů xxxxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx je třeba xxxxxxxx minimálně 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází, xxxxxxxxxxx z obou xxxxxx, pokud byly xxxxxxx. V xxxxxxx, xx je počet xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxx analyzovaných xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Jelikož experimentální xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť, xxx obvykle xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx se data xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx všechna xxxx uvedou x xxxxxxx tabulce.
Verifikace xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výsledky bylo xxxxxxxxx x xxxx. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Xxxxxxxxxxx významnost xx však neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.
Xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx indikovat, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx naznačovat, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (17) (18).
Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx uvedená kritéria, xx x xxxxx xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx většina xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx získaná data xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx opakovaných experimentů. Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx chromozómové xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v kultuře xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx nevyvolává.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
XXXXXX X PRŮBĚHU XXXXXX
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x zdroj xxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxxx daného xxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx x délce xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx krve, xxx xxxx použita xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, použitý xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxx, xx-xx xx nutné - xxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- modální xxxxx chromozomů.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx a xxxxxx rozpustnosti, jsou-li x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx média, xxxxxxxxxxx XX2, xx-xx xx xxxxx
- koncentrace xxxxxxxxx látky,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx,
- xxxx působení,
- xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, je-li xx xxxxx
- xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx kritérií akceptovatelnosti,
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx toxicity,
- xxxxxxxx, jimiž se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxxx konfluence, údaje x xxxxxxxx cyklu, x xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxx srážení,
- xxxxx x pH x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, jsou-li stanoveny,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx,
- xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx chromozómových xxxxxxx xxx xxxxxx experimentální x xxxxxxxxx kulturu xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
vztah xxxxx-xxxxxxx, je-li to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, včetně rozpětí, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
B.11. XXXXXXXXXX - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X XXXXXX XXXXX XXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 475, Mammalian Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx strukturální chromozómové xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx v buňkách xxxxxx xxxxx zvířat, xxxxxxx hlodavců (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx aberace mohou xxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx látka je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Aberace vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chromatidové, ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx přesvědčivé xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx změny x xxxxxxxxxx x tumorsupresorových xxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx u xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
K xxxxxx xxxxx xx xxxxx využívají xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xxxxx x tkáň xxxxxx vaskularizovanou, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx x zpracovat. Xxxx xxxxxxxxx druhy x cílové xxxxx xx x xxxxx xxxxx nepoužívají.
Tento xxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rizika, protože xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx metabolismu xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, i když xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx tkáněmi xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx byl předtím xxxxxxx testem xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx cílové xxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, nebo xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx mezi chromatidami.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx aberace typu xxxxxxxxxxx chromozóm, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx mezera xx xxxxxxxxx chromatidy xx větší, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx v xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), případně xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, kde xx X-xxxx replikace XXX xxxxxxxxxx jádro xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx další X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx dělený xxxxxxxx xxxxxx buněk v xxxx buněčné populaci; xxxxx stupeň proliferace xxxx populace.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (n) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x atd.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 PRINCIP XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx způsobem xxxxxxx xxxxxxxxx látce x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx na xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx kolchicinem xxxx Xxxxxxxxxx®). X xxxxx kostní dřeně xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx
Běžně xx xxxxxxxxx xxxxxxx, myši x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx x jakýkoliv jiný xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx by xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx X, xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx mladí dospělí xxxxxxx se náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx x experimentální xxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, aby xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x kde jsou xxxxx umístěny. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx pěti dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx stavu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x xxxxxxxx xx xxxxx. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx se mohou xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx podáváním xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ji neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx příliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx to xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zařadit souběžné xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx stejně.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx vivo xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx tak, xxx xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx odebírat v xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Xxx xx to xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Látka | XXX | EINECS |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje o xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx kontrol, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx údaje prokazující, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx x době, xxx xx studie xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx pohlavími nejsou x toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Tam, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxx látkám xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jednorázově. Xxxxx se jedná x xxxxxxxx xxxxx, xxxx se k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx nanejvýše několika xxxxx. Jiné režimy xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx odůvodněné.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxx xxxxx xxx. U xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxx 12 - 18 xxxxx) xx xxxxxx látky. Xxxxxxx doba xxxxxxxx xxx absorpci a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxx xx xxxxxxxx buněčného xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dobu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxx xx 24 xxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxx. Pokud xx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx látka xxxxxx vícekrát xxx xxxxxx xx xxx, xx třeba xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxxx délky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx podání látky.
Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx x xxxx xx vhodném xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx xx xxxxx xxxxxxxx zhruba 3 - 5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4 - 5 xxxxx. X xxxxxx xxxxx xx odeberou buňky x xxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x dispozici xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx provádět x téže xxxxxxxxxx xx xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene, xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx první xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx tři dávky xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx maximální xxxxxxxx x toxicitě xxxxx nebo xxxxxx. Xxx xxxxxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx vzorků xx pak xxxxx xxxxxx jenom nejvyšší xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x nízkých netoxických xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx x těchto kritérií xxx stanovení xxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx případ xx případu. Nejvyšší xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v kostní xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx indexu x xxxx než 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx při xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti v xxxxx xxxxx nebo xx xxxx dávkách xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x jestliže se xx základě xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx dlouhodobé studie xxxx limitní xxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xx xxx při xxxx trvání xx 14 xxx, a 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zapotřebí xxxxxxx x xxxxxxxx testu xxxxx dávkové xxxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxx žaludeční xxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x hmotnosti; xxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx roztokem x xxxx se xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx a obarví xx.
1.5.7 Xxxxxxx
Jakožto xxxx xxxxxxxxxxxx xx x xxxxx zvířat xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx xx analyzuje xxxxxxxxx 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx je možné xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx aberací. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních kontrol) xx před mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxx jejich xxxxxxxx xxxxxxx často x porušení xxxxxxxx xxxxxx metafází xxxxxxxxx xx ztrátou xxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx v hodnocených xxxxxxx 2x ± 2.
2. ÚDAJE
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. U xxxxxxx zvířete xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počet xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x registrují xx, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx o xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx obě xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxx.
2.2 Vyhodnocení x xxxxxxxxxxxx výsledků
Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx zřetelný nárůst xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxxxxxxx dávkou xxx jednom časovém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyjasnit xxxxxx testováním, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx mitotické procesy x xxxxxxxxx numerické xxxxxxxxxxxx aberace. Nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, při xxxxxx použití výsledky xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx vyvodit x aktivitě testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx chromozómové xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx nevyvolává.
Xx xxxxx vzít x xxxxx, xxxx xx pravděpodobnost, xx xxxxxxxxx látka bude xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x pohlaví xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx a negativní (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx studie xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx dostala xx xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxx tkáně,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx vodě (ppm) xx skutečnou xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, její xxxxxxxxxxx a doba xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx pro xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx index,
- xxx x xxxxx aberací xxx xxxxxxx jedince xxxxxx,
- xxxxxxx počet xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xxxxxx průměr x xxxxxxxxxx odchylka,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,
- údaje ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
X.12. XXXXXXXXXX - XX XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Test (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxx in xxxx x xxxxx slouží xx xxxxxxxx poškození, xxx testovaná xxxxx xxxxxxxxx x chromozómech xxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx erytroblastů; test xxxxxxx v xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z kostní xxxxx resp. x xxxxxxxxx krve xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx.
Účelem xxxxxxxxxxxx testu xx xxxxxxx látky, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx poškození, xxxxx výsledkem je xxxxx mikrojader xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx.
Když x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jádro xx x xxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx vzniklé xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx, že xxxxx buňkám xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx je x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
V xxxxx testu se xxxxxx xxxx hlodavců xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (polychromních) xxxxxxxxxx x mikrojádry x xxxxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, x xxxxxxx xxxx prokázáno, xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx kinetochoru (centromery), xxxx xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (polychromních) xxxxxxxxxx x mikrojádry. Xxxx xxxxx zralých (xxxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x xxxxxxxxx krvi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x rámci xxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxx x xxxxxxx, xx xx zvířata xxxxxxx xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Tento xx xxxx mikronukleus xxxx u xxxxx xx xxxxxxx vhodný x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, farmakokinetiky x procesů reparace XXX, x když xxx xxxxx být xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx tkáněmi x xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx vitro.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx xx testovaná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): oblasti xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx dělení xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx chromozómů x pólům xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx xxxxx oddělená xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) vytvářená xxxxx xxxxxxxx mitózy, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx fragmenty xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx dá xx xxxxxxxxx, polychromních xxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí barviva xxxxxxxxxxxx xxx ribozómy.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx stadium, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, takže xxx lze xxxxxxx xx zralých, normochromních xxxxxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx pro ribozómy.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxxx xx ve xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx se xxxxxxx x připraví se xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx (1-7). Pokud xx xxxxxxx periferní xxxx, xxxxxxx xx xx vhodné době xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxx, xxx se xxxxxx (4) (8) (9) (10). V xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx periferní xxxx, xxxx xxx xxxx xx poslední xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx nejkratší. X xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx přítomnost xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx druhu
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx myši nebo xxxxxxx; xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx druh. Xxxxxxx-xx xx periferní xxxx, doporučují xx xxxx. Xxx ovšem xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx, že xx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx x xxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx látkám, xxx xxxxxxxxx strukturální nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny mladých xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Všeobecné podmínky xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Zdraví xxxxx xxxxxxx jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x po xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx zvířata xxxxxxxxxxxx x laboratorních podmínkách. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toho, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v pevném xxxxx x xx-xx xx možné, xxxxx xx před podáním xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) prokazují, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x používaných dávkách xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx x nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx použití podpořeno xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.
U xxxxxxxxxxx kontrol by xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vivo xxx dávkách, xxx xxx očekávat jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx úroveň. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx byly xxxxxx xxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx odlišným xxxxxxxx xxx testovanou xxxxx x xxxxxx odebírat x jednom xxxxxxx xxxxxxxxx. Kde je xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx skupiny, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
X-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem nebo xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx historické xxxxx x frekvenci xxxxx x xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx variabilitě xxxx zvířaty. Xxxxxxxx-xx xx u negativních xxxxxxx pouze xxxxx xxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxxxxx xxxxx první xxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx prokazující, že xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx krev, může xxx jako souběžná xxxxxxxxx kontrola přijatelný x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx pouze x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx krvi (xxxx. 1 - 3 dávky), kde xxxxxxxx údaje leží x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Xxxxx v xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx prokazující, xx xxxx oběma xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxxxxxxx rozdíly, xx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx pohlaví xxxxxxxxxxx. Xxx, kde xxxxxxx xxxxxxxx chemikáliím xxxx xxx xxxxxxx na xxxxxxx, jak je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. jedna, xxx xxxx xxxx dávek x 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxx použít xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku tak xxxxxx, až xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx do xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx jedná x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx rozdělit, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx.
Test xx xxxx xxxxxxxx xxxxx způsoby:
(x) Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx kostní xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx ne xxxxxxx než po 48 xxxxxxxx od xxxxxx látky, x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Pokud xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx po 24 xxxxxxxx, xxxx xxx odůvodněné. Vzorky xxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx minimálně dvakrát, xxxxxx ne xxxxx xxx po 36 xxxxxxxx od xxxxxx xxxxx, se xxxxxxxx xxxxxxxxx po prvním xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx nikoli xxxx xxx 72 xxxxxx. Xxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx pozitivní xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx se xxxxx xxxxxx dvakrát nebo xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xxx nebo xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), odeberou xx vzorky x xxxxxxx kostní xxxxx xxxxxx mezi 18 x 24 xxxxxxxx xx posledním podání xxxxx x v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx (12).
Xx-xx xx relevantní, xxxxx xx mimoto xxxxxx x xxxxx odběrové xxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx provádět x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x pokusného režimu, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx vzorků xxx xxxxx xxx, xxx pokrývaly xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x toxicitě nízké, xxxx nulové. Pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků je xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx dávku. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx známky toxicity, xx xxx vyšších xxxxxxx xx stejném xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx stanovení dávek x vyhodnocují se xxxxxx xx případu. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx dávka, která xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (např. xxxxxx xxxxxx nezralých xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x jedné dávce xxxx ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxx za xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx dlouhodobé xxxxxx je xxxxxxx xxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx při xxxx xxxxxx delší než 14 xxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxx dávkové xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vpravuje xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx případech mohou xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx kapaliny, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x hmotnosti; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx xx tak xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Příprava xxxxxx dřeně / xxxx
Buňky xxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx okamžitě xx usmrcení xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxx x femuru xxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx se xxxxxxx x ocasní xxxx xxxx xxxx vhodné xxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (8) (9) (10), xxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxxxx obarví. Použitím xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro XXX (např. akridinové xxxxxx (14) nebo Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) se xxxxx eliminovat xxxxxxx x artefaktů vznikajících xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, že xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Lze xxxxxx x další systémy - xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx buněk x jádrem (16) - xxxxx xxxx xxxxxx jsou x xxxxxxxxxx rutinně používány xxx analýzu xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
X každého xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). K tomuto xxxxx se xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx minimálně 200 xxxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. X xxxxxxx jedince xx vyhodnocuje minimálně 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů s xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxx, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx analýze xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového počtu xxxxxxxxxx xxxxx než 20 % hodnoty x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po dobu xxxx xxxxx nebo xxxxx, lze xxxx xxxxx xxxxxxxxxx vyhodnotit x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx erytrocytů xx xxxxxxx xxxxxxx. Možnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx systémy xxxxxxxxxxx analýzy (xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx analýza - xxxx xxxxxxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx zvíře. U xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nezralých erytrocytů, xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x mikrojádry a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx test xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů xxxx xxxx, xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (pokud xxxx xxxxxxxxxx). Xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx procento xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx žádné xxxxxxx o tom, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx za xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xx skupině s xxxxxxxxxxxx dávkou při xxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx xxxxxx. Nejprve xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné výsledky xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx o aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, i xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx tvorbu xxxxxxxxxx, xxxx důsledek chromozómového xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx erytrocytech.
Je xxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka bude xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu pokusu xx xxxxx uvést xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx známa.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx jedinců,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx jednotlivých zvířat xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- údaje xx xxxxxx pro určení xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- zdůvodnění volby xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody x ověření, že xx xxxxx dostala xx celkového oběhu xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x potravině/pitné vodě (xxx) na faktickou xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- podrobný xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- kritéria, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- počet xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx počet ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, je-li xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx x historických negativních xxxxxxx,
- xxxxx xx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
X.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX REVERZNÍCH XXXXXX X XXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Mutatiton Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx x detekci xxxxxxxx mutací kmeny Xxxxxxxxxx typhimurium (auxotrofní xx vztahu x xxxxxxxxxxxxx histidin) x xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x aminokyselině tryptofan). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx detekovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxx mechanismem xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x tom, xx xx zjišťují xxxxxx, xxxxx xxxxxx vracejí xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx kmenu xx xxxxxxxxx stavu x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx syntetizovat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx detekována xx základě své xxxxxxxxxx xxxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx mateřský xxxxxxxx xxxx.
Genové mutace xxxx u xxxxxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx doklady toho, xx xxxxxx mutace x xxxxxxxxxx a xxxxxxxx supresorových genech xxxxxxxxxxx xxxxx hrají x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx vzniku xxxxxx. Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx jednoduchý. Řada xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx charakteristikami, díky xxxx jsou xxxxxxxxxx xxx detekci xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx sekvencí XXX x místech xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx velké xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx posílení xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx užitečné xxxxxxxxx o typech xxxxxx, jež xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx bakteriální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx x dispozici xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx výsledků xxx širokou xxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx osvědčené metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxx xxxxxxxxxx mutací s xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxxx xxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx), jež xxxxx xx vzniku xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nezávislý.
Mutageny xxxxxxxxxxxx substituci páru xxxx xxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx bází x XXX. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx x takové změně xxxxx na místě xxxxxxx xxxxxx xxxx xx jiném místě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Frameshift xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx) jsou xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx odebrání xxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxx x XXX, xxxx se xxxx xxxxx rámec x RNA.
1.3 XXXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, které xx xx savčích xxxxx xxxx x xxxxxx látek xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx opravy XXX. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx exogenní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx, xxxxx test xxxxxxxxxxx přímé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx potenci xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx test xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx používá jako xxxxxxx screenin xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx v xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx mutagenních xxxxx, xxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx specifická xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx veličin, xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x biologické dostupnosti. Xx druhé xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx zvyšují, xxxxx xxxx x tomu, xx xx mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx sloučeniny (kupříkladu xxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xx, že xxxxxxxxxx xxxxxxxx replikační xxxxxx xxxxxxx buněk (například xxxxxxx inhibitory xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx analoga xxxxxxxxxx); x takovém xxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx u savců.
Xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxx xxxxx pozitivní, jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxxx třídě, x existují xxxxxxxxxxx, xxxxx tímto testem xxxxxxxx nejsou, xxxxxxx xxxxxx jiným, negenotoxickým xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx, xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx x xx nepřítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx klasické xxxxxxx xxxxxx "xxxxx incorporation" xx suspenze smísí x xxxxxxx xxxxxx x vylije xx xxxxx x minimální xxxxxx půdou. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x smísí s xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xx xxxxxx xx minimální xxxxxx xxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx xx xxx xx xxx xxx xx inkubaci xxxxxxxxxxx kolonie xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx revertujících xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx miskách x xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx provedení xxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx misková xxxxxx ["xxxxx xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx metoda (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxx xxx testování xxxxx xxxx xxx (12).
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx metody xx týkají hlavně xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxx přijatelné xxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx preinkubační xxxxxxx; xxxxx se o xxxxxxxx třídy, kam xxxxxxx alifatické xxxxxxxxxxx x krátkým xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx a diazosloučeniny, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx x nitrosloučeniny (3). Xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxxx" (xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx se xxxx pro xxxxxx xxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x těkavé xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxx zdůvodnit.
1.5. XXXXX XXXXXX
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stacionárního xxxxxx xxxxx (zhruba 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx stacionárním stadiu xx xxxxxxxxxxx. Důležité xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx experiment xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx dá prokázat xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx v jednotlivých xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk očkováním xx xxxxxxx.
Doporučená xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37xX.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxx xxxxx, které budou xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. typhimurium (TA 1535; TA 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; XX98; a XX100); x xxxxx xxxx prokázána xxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnost xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx X. typhimurium mají xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx XX x je xxxxx, xx nemusejí xxxxxxxxx xxxxxx oxidační xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx pomocí xxxxx E. xxxx XX2 nebo S. xxxxxxxxxxx TA102 (19), xxxxx xxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx XX. Xxxxx je doporučená xxxxxxxxx kmenů xxxx:
- X. typhimurium XX1535 x
- X. typhimurium XX1537 xxxx XX97 xxxx XX97x a
- X. xxxxxxxxxxx XX98 x
- S. xxxxxxxxxxx TA100 a
- E. xxxx XX2 uvrA xxxx X. xxxx WP2 xxxX (xXX101) xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx křížové xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 nebo xxxxxx DNA reparačně xxxxxxxxxxxx kmen X. xxxx (např. X. xxxx XX2 xxxx X. coli XX2 (xXX101)).
Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx kultury, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx preparát xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx (xxxxxxxx v xxxxxxx kmenů S. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx E. xxxx). Podobně je xxxxx xxxxxxxxxxxx i xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: přítomnost xx xxxxxxxxxxxx X-xxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx x xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx XX98, XX100 x XX97x xxxx XX97, WP2 xxxX (xXX101) x xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu + xxxxxxxxxxxx x xxxxx XX 102); přítomnost xxxxxxxxxxxxxxxxxx mutací (xx. xxx mutace x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x uvrA xxxxxx x X. xxxx xxxx uvrB xxxxxx u X. xxxxxxxxxxx xxxxxx citlivosti xx ultrafialové xxxxxx) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx xxxx mít xxxxx spontánně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx očekávaném podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx laboratoře x xxxxx xxxxx x x xxxxxxx uvedeném x literatuře.
1.5.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx agar (např. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx E a xxxxxxxx) a vrchní xxxx xxxxxxxxxx histidin x xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několik xxxxxx buněk (1) (2) (9).
1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxx, tak xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx kofaktorem xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx Aroclor 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx fenobarbitalu x ß-naftoflavonu (18) (20) (21). Xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx obvykle xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 30 % x/x xx xxxxx X9. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx chemikálie. X některých xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx post-mitochondriální xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. X azobarviv x xxxxxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).
1.5.1.4 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx jejich xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Kapalné xxxxx xx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx přidávat xxxxx nebo xx xxxxxxx ředí. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx kmeny (viz 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx, která je xxxxx xxxx x xxxxx při stanovení xxxxxxxxxx použitého xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, patří xxxxxxxxxxxx x rozpustnost x konečné xxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxx účelné stanovit xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x předběžném experimentu. Xxxxxxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx růstu xx xxxxxx xxxx xxxxxx stupně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx skutečných xxxxxxxxx podmínek, xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx u xxxxxxxxxxx necytotoxických xxxxx 5 xx/xxxxx resp. 5 µl/misku. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx koncentracích xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx několik xxxxxxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxx pokusné xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxxxxxxx již xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx, xx xxxxxxx až xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx při xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx půllogaritmickým intervalem (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Testování xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx v xxxxx, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx podstatné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nečistot.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxx zahrnovat x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxx, jak x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxx takové xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
U xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx kmene.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx x testech x xxxxxxxxxxxx aktivací, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Xxxxx červeň | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx X9. Xxxxx xx 2-aminoantracen xxxxxxx, xx xxxxx každou xxxxx X9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx mutagenem, xxxxx xxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Příklady xxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxx kmenově xxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, uvádí tato xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX | |
Xxxx xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 x XX 100 |
2-xxxxxxxxxxxx | 607-57-8 | 210-138-5 | TA 98 |
9-xxxxxxxxxxxx | 90-45-9 | 201-995-6 | XX 1537, XX 97 a XX 97x |
ICR 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, TA 97 x XX 97x |
kumen-hydroperoxid | 80-15-9 | 201-254-7 | XX 102 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 | XX uvrA x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, WP2uvrA x XX2xxxX (xXX101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (XX2) | 3688-53-7 | xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
K xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx i jiné xxxxxx referenční xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx uvážit použití xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x chemické xxxxx.
Xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxxx x rozpouštědla xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx jako xxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx ovlivnění testovanou xxxxxx xxxxxx existují xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx mutagenní xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx buněk) a 0,5 ml xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx směsi) x 2,0 ml vrchního xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx roztokem. Xxxxx xxxxx zkumavky xx promísí x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx x minimálním xxxxxx. Vrchní xxxx xx xxxxx před xxxxxxxx ztuhnout.
Při xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx testovaná xxxxx / testovaný xxxxxx xxxxx preinkubovat s xxxxxxxx kmenem (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 min xxxx xxxx xxx 30 - 37 xX; potom xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxxxxx agarem. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx roztoku 0,1 xx xxxxxxxx a 0,5 xx xxxxx X9 xxxx xxxxxxxxxx xxxxx s 2,0 xx vrchního xxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxx. Duplicitní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx náhodně ke xxxxxx misky, nemusí xx test xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 INKUBACE
Všechny xxxxx v rámci xxxxxx testu se xxxxxxxx při xxxxxxx 37 oC xxx xxxx 48 - 72 xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx jako počet xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx jak x xxxxxxxxx kontroly (xxxxxxxxxxxx, popřípadě xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxx), xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxxx xxxxx i xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxx působení xxxxxxxxxxxx) xx xxxxxx počty xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií na xxxxx misku včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx musejí potvrdit xxxxxx xx případu. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepovažuje xx nutné, xx xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx studijním xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx modifikovat, patří xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xxxx xxxxxxxxxxx x tekutém xxxxxxxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx závislý xxxxxx ve sledovaném xxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx jedné xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx jednoho xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem xxxx xxx něj (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx biologická xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jako pomůcku xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (24), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx, xxxxx výsledky xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx nebo problematické, x když xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxx xxxxxx ukazují, že xxxxx xxxxxxxx genové xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx nebo posuzovaných xxxxxx v xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx resp. Xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, že xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Kmeny:
- použité xxxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx kmene.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx (x xx nebo μl) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x počtu xxxxx xxx jednu xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-typ x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- počty xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků.
Závěry.
X.15. XXXXXX XXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx kvasinek Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mohou xxx užity pro xxxxxx produkce xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx xxx x x metabolickou aktivací.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx míra xxxxxx xxxxxx z červených, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx-1, ade-2) xx xxxxxxx, xxxxxx vyžadující xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx, jako xx indukce xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx.
Nejlépe xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx XX 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 2-1, arg 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx typu xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx a xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny.
X xxxxxxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx kmenem X7, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx vhodného xxxxxxxx. X organických xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx roztok xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Finální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit životnost x charakteristiky xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x přítomnosti, tak x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy x doplněná xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx druhů, xxxxx, postmitochondriálních xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx rovněž vhodné xxx metabolickou aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14C a xxxxxxxxx kmen X7 xxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx mutací. Xxxx xxxxx mohou xxx xxxxxx vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Odpovídající xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x mutovaných xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní, xxxxxxxxxxx x rozpouštědlem xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má být xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx vodě relativně xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx po xxx xxxxxxxxxxxx látky xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx případ xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx sedm xxx xxx 28 xx 30 xX xx xxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx má xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnot.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxx na jednu xxxxxxxxxxx x testu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 3-10 x xxxxxx xxxxxxx rychlostí xxxx být xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Ovlivnění xxxxx X. cerevisiae je xxxxxxx prováděno xx xxxxxxxx x tekutém xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx. Základní xxxxxx mají být xxxxxxxxx xx rostoucích xxxxxxx: 1-5 x 107 buněk/ml xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx dobu xx 18 x. xxx 28 až 30 xX za xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx buňky x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, má xxx proveden xxxxx xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx je první xxxxx pozitivní, xx xxxxxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny nezávislým xxxxxxxxxxxx. Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx informace x:
- použitých xxxxxxx,
- podmínkách xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx médií, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx aktivační systém,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx dávky x xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae může xxx detekována xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. První xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x vytváří xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx genová xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, genová xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x auxotrofního heteroalelického xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx defektní xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx kmeny xxx detekci xxxxxxxxx xxxxxx konverse xxxx X4 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 x xxx 5), D7 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 5), XX34 (heteroalelický x xxx 4) x XX1 (xxxxxxxxxxxxxx x his 4 x trp 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxxxxxx x X5 xxxx X7 (xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx komplementární xxxxx xxx 2.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek a xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx roztok xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx dimetylsulfoxid (XXXX). Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxx významně xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx mají být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného exogenního xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx jiných druhů, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx vhodné xxx metabolickou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Nejužívanější xxxx xxxxxxxxx xxxxx X4, X5, X7 a XX1. Užití xxxxxx xxxxx může být xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx kultivační xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxx přežívajících xxxxx x frekvenci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx specifickou xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx chemické látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx být xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xx životnost xxxxx. X toxických xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pod 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx testovány xx xx xxx rozpustnosti xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx, ve xxxx xxxxxxxxx, je určena xxxxxx od případu.
Xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxx stacionární xxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 h. Xxxxxxx xxxxxxxxxx ovlivňované xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Misky jsou xxxxxxxxxx xx xxx xx čtyři xx xxxx dní xxx 28 - 30 xX. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx překřížením xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (cca 4 xX) xx xxxxx 1 - 2 xxx před xxxxxxxxx, xxx se xxxxx utvořit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kolonie.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx replikací
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx koncentraci x xxxxx prototrofních xxxxx tvořených xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx překřížením xx být počet xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx S. xxxxxxxxxx xxxxxxx obvykle xxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx prostředí a xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxx rostoucí buňky. Xxxxxxxx pokusy mají xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx vystaveno xxxxxxxxx xxxxx xx dobu xx 18 h. xxx 28 xx 30 xX xx xxxxxxx. Odpovídající množství xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx počítány xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Jestliže je xxxxx pokus xxxxxxxxx, xx být proveden xxxxx xxxxx s xxxxxxx xx stacionární xxxx. Jestliže xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje mají xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx rekombinací, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx mají xxx potvrzeny x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými metodami.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- podmínky xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx médií, xxxxxxx a trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: hladina xxxxxxxx, postup x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vztah dávky x xxxxxx, xxxxx xx to možné, xxxxxxxxxxx hodnocení xxx,
- xxxxxxx výsledků,
- vyhodnocení xxxxxxxx.
X.17. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X SAVČÍCH XXXXXXX XX VITRO
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 476, Xx Xxxxx Mammalian Xxxx Xxxx Mutation Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx vitro xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vyvolaných chemickými xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx linie xxxxx xxxx lymfomové xxxxx X5178X, xxxxx CHO, XXX-XX52 x V79 xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx lymfoblastoidní xxxxx TK6 (1). X těchto xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX) x x xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX). Testy mutací x XX, HPRT x XPRT xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Autosomální xxxxxxxxxx TK x XXXX xxxx umožnit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx delece), xxxxx xx xx xxxxxx XXXX chromozomů X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
K xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx in vitro xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx dané kultury x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx in xxxxx obecně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx systém xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx dokonale. Xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx by výsledky xxxxxxxxxx vlastní mutagenitu. X pozitivním xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).
Xxxxx xxxx se xxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxx, xxxxx jsou x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx korelace xxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx více xxxxxxx toho, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xx xxxxx testem xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx nějakým xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx mechanismem xx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxx: genová xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež xxxx ke změně xxxx ztrátě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kódovaného xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx substituci xxxx xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxx xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx jednoho xxxx xxxx xxxx xxxx x XXX.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx z xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx xxxxx xxxxx x čase x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxx buněk; vypočítává xx jako xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx růstu (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) a xxxxxxx klonovací xxxxxxxxx xxxxxxx efficiency (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx suspenzní xxxx: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx během období xxxxxxx v porovnání x negativní kontrolou.
Životnost (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx efficiency) xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x selekčních xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx: xxxxxxxxx účinnost (cloning xxxxxxxxxx) ovlivněných buněk xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx konci xxxxxxxx xxxxx; vyjadřuje xx xxxxxxx v porovnánís xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Buňky, xxxxxxxxxxx xx thymidinkinázu (XX) x důsledku xxxxxx XX+/- → TK-/-, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx trifluorthymidinu (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx thymidinkinázu xxxx xxxx XXX xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxxxxxxx x zastavuje xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx XXX xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx mutovan xxxxx, zatímco normální xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX selekčně xxxxxxxxxxx xxxx 6-xxxxxxxxxxx (TG) xxxx 8-azaguaninu (XX). Xxxxx je xxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx mutace x xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx vlastnosti testované xxxxx bedlivě xxxxxx. Xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx každé podezření xx selekční toxicitu xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxx xxxx. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx vhodné (8).
Xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx kultuře se xx vhodnou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxxxx xx ke stanovení xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx (přežití) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nárůstu kultur xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx médiu xx dostatečnou xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx x typ xxxxx, aby mohlo xxxxx k xx xxxxxxxxxxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx známého počtu xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xx stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Po xxxxxx inkubační době xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx frekvence xx xxxxxx z xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx buněk x selekčním xxxxx x x xxxxx xxxxxxx v neselekčním xxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Buňky
Dá xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, CHO-AS52, X79 x XX6. U xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx vůči chemickým xxxxxxxxx, xxxxxx klonovací xxxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) x stabilní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx kontaminovány xxxxxxxxxxxx; infikované xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx třeba naplánovat xxx, xxx xxx xxxxxxxx citlivost x xxxxxxxxxxx (power). Počet xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyhovovat (14). Minimální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx stadiích xxxxx, xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecným xxxxxxxx xx, že xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx desetinásobkem xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxxxxx xx xxxx použít xxxxxxx 106 buněk. Xxxx xx xxx x xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx prokázala xxxxxxxxxxxxx zvládnutí xxxxx.
1.4.1.2 Média x xxxxxxxxxx podmínky
Je xxxxx xxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx se pro xxxx xxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx buňky. Zvláště xxxxxxxx je, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx expresní periody x xxxxxxxxx jak xxxxxxxxxx, xxx nemutovaných xxxxx tvořit kolonie.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xx zásobních xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxx teplotě 37 xX. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx buňky xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x přítomnosti i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx indukujícími xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx fenobarbitalu a β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10% x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx typu xx testovaná xxxxxxxxxx. X některých xxxxxxxxx xx xxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx koncentracích.
Pro účely xxxxxxxxx aktivace xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx exprimující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx enzymy. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx být xxxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované látky
Je-li xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenze xx xxxxxxx rozpouštědle a xxxxxxxx naředí. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx o jejich xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x aktivitu X9. Používá-li xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxx xxx, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, musí být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Xxxx xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.
1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx pH xxxx. osmolality.
Cytotoxicita se xxxxxxx s metabolickou xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx indikace xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx klonovací xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx čtyři xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx maximální xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx znamená, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lišit xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx koncentrace x cytotoxicity, xxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx celkovému xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X relativně netoxických xxxxx by xxxxxxxxx xxxxxxxxx dávka xxxx xxx nejnižší x xxxxxx 5 mg/ml, 5 μx/xx a 1,01 M.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx netoxické v xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx xxxxxxxxxxx, při xxxxx xx již xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx finálním kultivačním xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx konci xxxxxxxx, xxxxxxx se rozpustnost xxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, X9, xxxx xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx okem. Xxxxxxxxx nesmí xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx i xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (rozpouštědlo, vehikulum) xxxxxxxx, x to xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak bez xx. Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mutagenního xxxxxx. Xxxx látkami xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx nitrosomočovina | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
TK (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx methansulfonát | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XPRT | ethyl xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cyklofosfamidu benzo[a]pyren 3-methylcholantren | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XPRT | N-nitrosodimethylamin (pro xxxxxx xxxxxxxxxxx X-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
xxxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx xxxxxx i xxxx vhodné xxxxx; xxxxxxxx má například xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x 5-brom-2'-deoxyuridinu (XXX 59-14-3, číslo XXXXXX 200-415-9), lze použít x xxxx referenční xxxxx. Xxx, xxx xx to xxxxx, xx vhodné použít xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum x xxxxxxxxxxx médiu, xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxx xxxxx nepříznivé xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx působí xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Expozice xxxxxxx xx vhodnou xxxx (obvykle xx xxxxxx doba 3-6 xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx. Používá-li xx xxxxx xxxxx kultura, xx xxxxx zvýšit xxxxx koncentrací tak, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (tj. xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Kultury x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx postupy, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx uzavřených kultivačních xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx promyjí x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxx začíná x analýzou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti - xxxxxxx efficiency xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxxxx časový xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (HPRT x XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 dny). Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx s x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx mutantů x xxxxxxxxx účinnosti. Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx začne x xxxxxxxx životnosti (xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx médium.
Pokud xx xxxxx x xxxxx X5178X XX+/- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x experimentálních kultur (xxxxxxxx pozitivní koncentrace) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx velikost xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx provést x xx xxxxxxxx x XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx data xxxxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x mutační xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx X5178XX+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx kritérií xxxxxx a velkých xxxxxxx přinejmenším x xxxxx koncentraci testované xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx a cytogenetické xxxxxxxxxx xxxxxxx i xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx XX+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) x xxxxxxxx růstu (xxxx) (25). mutanty, xxxxx utrpěly xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx poškození, mají xxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxx tvoří xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx obvykle xxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx asociována x xxxxxxxx látkám xxxxxxxxxxx hrubé xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx velké xxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (relativní xxxxxxxxx účinnost - xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx relativní xxxxxxx xxxx. Mutační frekvence xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx buněk xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx o kultivačních xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx shrnou x tabelární xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xx xxxxxxxxx negativních xxxxxxxx nepovažuje xx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxx nejednoznačných xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvážit modifikaci xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx rozšířilo xxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx koncentracemi x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx existuje xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci testované xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx reprodukovatelný xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost výsledků. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx výsledku.
Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze ze xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxx xxxxxx. Nejprůkaznější xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx - xxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxxxxxx genové mutace.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx testované xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, pokud xx xxxxx.
Xxxxx:
- typ x xxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx kultivace xxxxxxx xxxxxxx,
- absence xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx kultur, xxxxxx např. xxxxx x cytotoxicitě x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x dispozici,
- xxxxxxx média, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x přidané testované xxxxx,
- xxxxxxxxx teplota,
- xxxx xxxxxxxx,
-xxxx působení xxxxx,
- hustota xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx,
- délka xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, negativní nebo xxxxxxxxxxxxx,
- metody xxxxxxxxxx xxxxx živých a xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxx xx hodnotí velikost x typ (xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx mezi "malými" x "velkými" koloniemi).
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- údaje x xX a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx,
- případné xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx mutantů xxxxxx xxxxxxx X5178X XX+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- souběžné xxxxx z negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - XXXXX BUŇKY XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (XXX) xxxxxxxx měřit reparační xxxxxxx DNA po xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx DNA obsahující xxxxxx poškození indukovaného xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3X-XxX) xx XXX xxxxxxx xxxxx, xxxxx nejsou x S fázi xxxxxxxxx xxxxx. Vzestup 3X-XxX xx stanoven xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x exponovaných xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které jsou xxxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxx x přítomnosti, xxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxx být také xxxxxxxxx x xxxxxxx xx vivo.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx a sloučeniny xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx referenční xx xxxxxxxx xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx médiem. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx (xxxx xxxx, xx-xx xx xxxxxxx zdůvodnitelné) xxx XXX XXX.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X každém xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx pozitivní xxxxxxxx xxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx použít 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-DMBA) nebo 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx i xxx XXX bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx použít X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Xxxx xxx použito xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Látky xx xxxx špatně rozpustné xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xx hranici rozpustnosti xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxx rozpustné se xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx použito xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx kontrolovány xx přítomnosti Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx aktivace
Xxx xxxxxxxxxxxx hepatocytů xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém xxxxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx x lymfocyty xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx
1.2.3.1 Příprava xxxxxx
Stabilizovaná buněčná xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx připravují xxx, xx xx xxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx vhodném médiu x povrchu kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vhodné metody.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx potkana jsou xxxxxxxxxx testované látce x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, buňky xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxxxxxx xx autoradiografické emulze (xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxx stripping xxxx), xxxxxxxxxx, vyvolána, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 3X-XxX. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx systému x xx typu xxxxx. X xxxxxxxxx nejvyššího xxxxxxx UDS je xxxxx 3X-XxX xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx několik xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x 3X-XxX. K xxxxxxxx xxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, nízký xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx média, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA.
Xxxxxxxxx XXX pomocí XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx X-xxxx, jak xxxx xxxxx uvedeno. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx bylo xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx XXX xxxxxxxxxxx z xxxxx a stanoven xxxxxxx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Jestliže xxxx xxxxxxx xx xxxxx uvedených xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx kulturách xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Analýza
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x S-fázi xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx 50 xxxxx x xxxxxx experimentálním xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx zakódovat xxxx xxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx inkorporovaného 3X-XxX v xxxxxxxxxx xx určí x xxxx o velikosti xxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx hodnocené xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxx stanovení XXX XXX se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky a xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx inkorporace 3X-XxX xx xxxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxxxxx a xxxxx zrn x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxx.
2.2 Vyhodnocení XXX
Xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxxxxxx jako xxx/μx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx/μx DNA xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, koncentraci XX2,
- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x experimentu,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- pokusném schématu,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx kontrolách,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx blokování xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx x extrakci XXX x k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XXX při metodě XXX,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistickým xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.19. XXX - VÝMĚNA XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
SCE xx krátkodobý xxxx xxx xxxxxxx recipročních xxxxx XXX xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. XXX reprezentují xxxxxx identických xxxxxxxx XXX mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v identických (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx spojení, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx základě tohoto xxxxxxx. Xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx inkorporací xxxxxxxxxxxxxxxxx (XxxX) do xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Savčí xxxxx xx xxxxx jsou xxxxxxxxxx testované látce x přítomnosti i xxx xxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xx-xx to xxxxxxxx. Xxxxxxxxx se po xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx XxxX. Ke xxxxx xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx) x akumulaci xxxxx v c-metafázi xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Používají xx xxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx (ovariální xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Buněčné xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Mycoplasmaty.
Xxxxxxxxx xx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx (xxxxxxx, kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2 x vlhkost).
Testovaná xxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx buněk, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx XXX.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupinu xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Pro xxxxx experimentální xxx xx použijí xxxxxxx xxx kultury.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
X každém xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s přímým xxxxxxxxxx účinkem x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s použitým xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx pozitivní xxxxxxxx xxx xxxxxx:
- přímo xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx látka.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx dávky. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinek, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx replikaci xxxxx. Xx vodě relativně xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx se určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx kultur
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx zásobní xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx při 37 xX. Xxx xxxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx nevytvářely xxxx xxx x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx kultur. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur
Buňky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx dvě xxxxxx, ale xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxx cykly, xx-xx xx xxxxx. Buňky, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx metabolickou xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na konci xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x média xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x dále xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x XxxX dva xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx současně s xxxxxxxxxx xxxxxx a XxxX xx dobu xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxxx xxxx x semisynchronizovaných xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x druhém xxxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxxxx xxxxxxxx v nejcitlivějším xxxxxx buněčného cyklu. Xxxxxxx kultury s XxxX je třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zabránilo xxxxxxxx XXX, xx které xx xxxxxxxxxxxxx BrdU.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxx hodiny xxxx ukončením xxxxxxxxx xx xx kultur xxxxx inhibitor xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x barvení
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx XXX může xxx provedeno několika xxxxxxxxxx (např. fluorescenční xxxx Giemsa).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx SCE x kontrole. Xxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx 25 dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Preparáty xxxx xxx xxxxxxxxxx před xxxxxxxx. X lidských xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s 46 xxxxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx linií pouze xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxx centromer. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx SCE x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx ověřeny x xxxxxxxxxxx experimentech.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx se počet XXX x xxxxx xxxxxxxx x počet XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx metafázi x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx vhodnými statistickými xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx média, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, inhibitoru xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxx působení, metabolickém xxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (odděleně pro xxxxxx kulturu),
- xxxxxxxxx xxxxx SCE/buňku x XXX/xxxxxxxxx (odděleně xxx každou kulturu),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- zdůvodnění xxxxxx koncentrací,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX XXXXXX XX XXXXXXX X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Test xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx (XXXX) na Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx, xxx x malých xxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx vhodný xxx screening xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx xxxxxxxxxxxx ani 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx fenotypicky xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx. Když xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx na její xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. SRLS xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx vzhledu x uspořádání xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx dobře definované xxxxxx xxxxx a xxxxxx linie Muller-5. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx linie xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Testované xxxxx
Testované látky xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx xx xxxx nerozpustné se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx (xxxx. směs etanolu x Tweenu-60 nebo 80), xxxx xxxxxxxx xx dále xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO) xxxx vehikulu.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx frekvence xxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nutný xxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxx testované xxxxx xx uskutečňuje per xx, injekčně nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx. Zkrmování testované xxxxx se provádí x cukerném xxxxxxx. Xx-xx to nutné, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx NaCl x xxxxxxxx se xx xxxxxx nebo břišní xxxxxx.
1.2.1.5 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
X xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx k dispozici xxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxx, xxxx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kontroly.
1.2.1.6 Dávkování
Xxxxxxxxx se xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx předběžný xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávající xxxxxx toxicity. Xxxxxxxxx xxxxx xx testují x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Popis xxxxxxx
Xxxxx divokého xxxx (xx stáří 3-5 xxx) jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Xxxxxx-5 nebo x jiné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-chromozómu). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx samice xxxxx xxx až xxx xxx, xxx xxx xxxxxx celý xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx letální efekt xxxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx expozice xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pozdním xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, spermatocyty x spermatogonie.
Xxxxxxxxxxxxx X1 samice narozené x xxxxxx xxxxxxx xxxx dále xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (tj. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) se xxxxx xxxxxx. V F2 xxxxxxxx xx x xxxxx kultuře xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx divokého xxxx. Jestliže v xxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx nesoucí letální xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (nejsou xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx chromozómem), xxxxx xxxxxx samic xx xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxx testovány, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx údaje xx zpracují xx xxxxx tabulky. Xxxxx xx počet xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, počet afertilních xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x letální xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, pro xxxxx xxxxxx křížení a xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx každého xxxxx. Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Údaje xx zhodnotí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mutací xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx X2 kultur, xxxxx F2 xxxxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx letální xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zárodečných xxxxx,
- kritériích pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx (s rozpouštědlem) x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx počítání xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, je-li xx možné,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.21. XXXX XXXXXXXXXXXX SAVČÍCH XXXXX - XX VITRO
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxx xxx použít xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vivo. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx C3H10T1/2, 3X3, XXX, Xxxxxxxxxxxx potkanů x xxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx morfologie, xxxxxx xxxxxxx xxxx změny x uchycení x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx fyziologické xx xxxxxxxxxxxx změny x buňkách xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx testu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx promotorů. Xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kultury. Xxx hodnocení cytotoxicity xx vychází xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx transformace ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx mohlo xxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx linií x primokultur použitelných x testu xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx musí xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxx transformace.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Testované xxxxx xx rozpouštějí xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx médiu xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx buněk. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx životnost buněk, xxxxxxxx rychlost nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx metabolickou aktivitou, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-acetylaminofluoren, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Koncentrace
Xxxxxxx xx nejméně xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx závislý xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx buněk, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx přežívání xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x negativní kontrole. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx testovacím xxxxxxx. Ta xxxx xxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx (xx. výměnou xxxxxxx metabolické xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx se xxxxx o prolongovanou xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx testované látce x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx x xxxxx propláchnutím xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxxxxx probíhá xxxx xx vhodných xxxxxxxx xxx transformaci. Xxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xxxx xxx prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x frekvenci xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx transformací xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Data je xxxxx xxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Zpráva x průběhu pokusu xxxxxxxx, je-li to xxxxx, informace x:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: koncentraci testované xxxxx, době xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádobách, xxxxx a frekvenci xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, hustotě xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenotypu, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx to xxxxxx), xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
X.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX TEST X XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxx. Indukce xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxx poškozuje xxxxxxxxx xxxxx exponovaného xxxxxxxxx xxxxx. Obecně xx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx poškozením xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxx výsledkem xxxxxxxxx xxxxxx.
Samci xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x pářeni x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Vzestup xxxxxxx xxxxxxxxxx xx samičku x exponované xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx ztráty xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx dominantní letalita xx xxxxxx xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrát. Xxxxxxx celkové xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxx živých xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx skupině x xxxxx implantacím xx xxxxxx x xxxxxxxxx skupině. Xxxxxxx xxxxx implantací v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx spermatogonií).
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx rozpustit xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Látky xxxxxxxxxxx xx xxxx se xxxx nebo xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx rozpouštědlo nesmí xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx naředěnou xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx podává xxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx podávat látku xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Experimentální xxxxxxx
Pro xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx náhodně xxxxxxxxx xx exponované x kontrolní xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xx spontánní variabilitu xxxxxxxxx biologické xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx řídí xxxxxx zjištěnou detekční xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx samců, aby xx dosáhlo 30 - 50 březích xxxxx xx připouštěcí xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx do xxxxxxx experimentu. Jestliže xxxx má xxxxxxxxx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xx vhodných, xxxxxxx dávkách, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 mg.kg-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx u exponovaných xxxxxx. V některých xxxxxxxxx xx postačující xxxxx vysoká xxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxx test
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx 5 x.xx-1 nebo x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxxx xxxxxxx postupů. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Může xxxx xxx použito xxxx xxxxxx.
Xxxxx samec xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po aplikaci xxxxx. Samičky xxxx xxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx, xxxx pokud xx xxxxxxxxx spermie xx vagině xx xxxxxxxxx zátka.
Xxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx stadia xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x určení xxxxx mrtvých x xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx vyšetřeny x určení xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx x počtu xxxxx, xxxxx březích xxxxx x počtu xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x tabulkách. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxx x xxxxx páření, o xxxxx xxxxxx samci, x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx živých xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxx implantací x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx mrtvých xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině ke xxxxxxxx poměru x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx vypovídá x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrátách.
V xxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx srovnání x xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxx, xxxxx, věku x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x exponovaných x kontrolních xxxxxxxxx,
- testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx hladinách x důvodech jejich xxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx expozice,
- xxxxxx páření,
- xxxxxxxx x průkazu xxxxxx,
- doba xxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx dávka/odpověď,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX ABERACÍ V XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD XX 483, Mammalian Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Aberration Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx způsobující strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx spermatogoniích (1) (2) (3) (4) (5). Strukturální xxxxxxx xxxx dvojího druhu: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx numerických xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx nepoužívá. Chromozómové xxxxxx x xxxxxxxx xxxx jsou u xxxxxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx se analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx indukci xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách.
X xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx xxxxxxxx. Tímto xxxxxxxxxxxxxx testem xx xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx spermatogonií. Tato xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx.
Xxx xx xx spermatogoniích xxxxxxxx xxxxxxx chromatidového xxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx mitózu xx xxxxxxxx testované xxxxx, dříve xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x následujícím xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx spermatogonií xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, xxx xx xxxxxxxx aberace xxxxxxxxxxxxxx typu x xxxxxxxxx, x xxxx xx ovlivněné xxxxx xxxx xx spermatocyty.
Xxxxx xxxx in xxxx je xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx mutageny xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxx zárodečných. Mimoto xx xxxx význam xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX.
X testes xx xxxxxxxx řada xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx představují xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, kde xxxxxxxxxx diferencované spermatogonie. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx varleti xxx xxxxx xxxxxxxx spermatogonií xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x fyziologické bariéře Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Existují-li xxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx cílové xxxxx nedostane, xxxx xxxx látka pro xxxx vhodná.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx vyjádřená xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx dicentrický chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx jedné xxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx ve struktuře xxxxxxxxxx xx větší, xxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x místě xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx osu xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx menší než xxxxx jedné xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx haploidního počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx (3n, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroskopickou analýzou xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, x výměny.
1.3 XXXXXXX METODY
Zvířata xx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ve vhodnou xxxx po xxxxxxxx xx xxxxxx. Před xxxxxxxxx xx xx xx působí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxx®). Xx zárodečných buněk xx pak připraví xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx a myší, xxx xxxxx použít xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx druhu. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx rozdíly xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx být minimální x u xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Všeobecné xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B.
Xxxxxxx by měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci se xxxxxxxxxxx označí a xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní se xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlivy xxxx, xxx x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Xx-xx testovaná látka x xxxxxx xxxxx x xx-xx to xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx xxxxx vyvolávat toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx nepříliš známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo/vehikulum.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx xxxxx xx třeba xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx vivo xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad spontánní xxxxxx.
Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx tak, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx možné podávat xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxx odebírat x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je to xxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx vhodných xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Látka | XXX | XXXXXX |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxx monomer | 79-06-1 | 201-173-7 |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx skupiny xxxx xx být xxxxxxxx xx všech xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx nejsou x xxxxxxxxx přijatelné historické xxxxx o xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x o interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo publikované xxxxx prokazující, že xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx nebo mutagenní xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx minimálně xxx analyzovatelných samců.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jednorázově nebo xx xxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx x xxxxxxxx dávku, xxxx se k xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxx, xx. xx xxx xxxxx za xxx xxxxxx x rozmezí xxxxxxxxx xxxxxxxx hodin. Xxxxxx xxxxxx dávkování xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx expozici xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Jelikož xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx kinetiku xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 24 x 48 hodin xx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx (xx. xxxx xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx vzorků xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xxxx xx 1,5násobku xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx expozici, xxxxxx xx znám xxxxxxxxx xxxxxx interval pro xxxxxxx xxxxxx (6).
Xxxxx toho xxxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxx. jedná-li xx x látku xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).
Zda xx xxxxxx nechat xxxxx xxxxxxx opakovaně, xx xxxxxxxx případ xx případu. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx opakovaně, usmrcují xx xxxxxxx po 24 xxxxxxxx (1,5násobku xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx aplikace. Xxxxxx xxx xxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx xx xx účelné.
Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x následně xx z xxxx xx vhodném intervalu xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4-5 xxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx provádět v xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene a xxxxxxxxx režimu, jaké xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Pro xxxxxxxx xxx odběru xxxxxx xx pak xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxx, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx a vyhodnocují xx xxxxxx od xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx k xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx (např. xxxxxx poměru xxxxx xxxxxxxxxxxxx k první x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xxxxxx xxxx xxx vyšší xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx dávkách xxxxxxxx x jeden xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx s podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx studie xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx použít x xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávky.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx intraperitoneální xxxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxxx být přijatelné x jiné xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx najednou xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete a xxxx překročit 2 xx/100 g xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx zdůvodněné. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek, xxx xxxxxxxx vykazují xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx úrovních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx chromozómů
Okamžitě xx xxxxxxxx xxxxxxx xx x jednoho xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx. Buněčná xxxxxxxx xx xxxxxx na xxxxxxxx sklo a xxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
X xxxxxxx jedince se xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. minimálně 500 xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxx). Tento počet xx xx xxxxxx, xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx preparáty (včetně xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx postupy xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx x jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxxx xx xxxxx buňku. X experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť, xxxxxxx xx, ale xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx u všech xxxxxxxxx xxxxxx i xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xxx, xx xx x xxxxxxx jedince xxxxxxx 100 dělících xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx u minimálně 1000 xxxxx z xxxxxxx jedince.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislá frekvence xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxx časovým intervalem xxxxxx xxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx statistické metody (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx výsledky, ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx získaná xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx opakovaných xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ukazují, že xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x zárodečných buňkách xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx chromozómové oberace. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx za daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx x zárodečných xxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo je xxxxxxxxxx xxx určitou xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x věk xxxxxx,
-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava apod.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- údaje xx xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx převod koncentrace xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (ppm) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx xxxxxxxxx / xxx),
- podrobnosti o xxxxxxx potravy x xxxx,
- podrobné xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx koncentrace x xxxxx působení,
- xxxxxx přípravy xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- kritéria xxx hodnocení xxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxx xx jedno xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- mitotický xxxxx,
- poměr xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx a počet xxxxxxx pro každého xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxx xxxxx aberací x xxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x aberacemi na xxxxx skupinu,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- údaje ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- případně xxxxxxxxxx xxxxx ploidie.
Diskuse xxxxxxxx.
Závěry.
B.24. XXXX XXXX U MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xx xx xx xxxx xxxx na myších, x kterých jsou xxxxxxxxxx se embrya xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xx, které xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx genů ovlivňujících xxxxx srsti. Mutace xxxx ztráty xxxxxxxxxxxx xxxxx x genech xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fenotypem x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxx narozených xxxx. Xxxxx potomků x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, je xxxxxxxxxx x jejich xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx x kontrol. Xxxx xxxx test xxxxxxxx xxxxxxxxx somatické xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx x izotonickém fyziologickém xxxxxxx. Látky nerozpustné xx xxxx jsou xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Používají xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Myši xxxxx X (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, xxx x/xxx x; xxxxx, x/x; xxxxxx, short xxx, x xx/x xx; xxxxxxx xxxxxxxx, x/x) xxxx xxxxxxx xxx x xxxxxx XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, brachypody, xx x xx/xx x xx; xxxxxx xxxxx, xx fz/ /xx xx; xxxxx xx/xx) nebo s xxxxxx C57 XX (xxxxxxxxx, a/a).
Xxxxx xxx použita x xxxx xxxxxxx, za xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx potomci. Xxxx. křížení mezi xxxxxx XXXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxx, c/c) x DBA (nonagouti, x/x; xxxxx, b/b; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Xxxxx x pohlaví zvířat
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx byl zajištěn xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx myší x x kontrolních xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx bylo xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx samic xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xxxx xxx použity xxxxxxxx ovlivněné xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mohou být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x téže laboratoře xx předpokladu, xx xxxx homogenní. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx získané x xxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxx látce xx xxxxxx mutagenním účinkem xxxxx xxx v xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx používá xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx. Je-li xx vhodné, xx xxxxx použít inhalační xxxx xxxx způsob xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Používají xx xxxxxxx xxx xxxxx, x nichž xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jednou 8., 9. xxxx 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx březosti xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 a 9.25 xxx xx koncepci. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dnů.
Analýza
X xxxxxx xx xxxxxxx x zaznamenáván xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xx porodu. Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx skvrn:
(x) xxxx xxxxxx v xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);
(x) žluté xxxxxx xxxx agouti xx vyskytují x xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx čela x xxxxxxxxxxx se, xx xxxxxxxx v důsledku xxxxxx xxxxxxxxxxxx (XXX);
(x) xxxxxxxx a xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxxx v srsti xxxx xxxxxxxx somatických xxxxxx (XX).
Všechny xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx, RS, xx xxxxxxxxx relevantní. Obtíže x xxxxxxxxx xxxx XXX a XX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Zaznamenávají xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Získaná xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx počet sledovaných xxxxxxx a xxxxx xxxxxx majících jednu xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx somatickými xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx se porovnávají xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx také uváděny xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx vrh.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, je-li to xxxxx, informace o:
- xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x experimentální x x kontrolní xxxxxxx,
- xxxxxxxx velikosti xxxx x xxxxxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x při odstavení,
- xxxxxxxxx úrovních xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x jejich xxxxx s XXXX, XXX a RS x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x RS, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.25. PŘENOSNÉ XXXXXXXXXXX U MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxx xx přenosné xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x první xxxxxxxx xxxxxxx. Indukované xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x XO-samice xxxxxxxx sníženou xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx X1 xxxxxxxxx pro cytogenetickou xxxxxxx. Úplná xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx translokací (X-xxxxxxx x x-x typ). Xxxxxxxxxxx xxxx analyzovány xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx ve stadiu xxxxxxxxx-xxxxxxxx I, nebo X1 samců či xxxxxxx xxxxxxx F1 xxxxx. Samice XX xxxx cytogeneticky xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x mitózách x xxxxxx dřeně.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxx nerozpustné, xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx orálně xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx křížení a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Nepožaduje se xxxxx xxxxxxxxxx kmen. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx měla xxx xxxxx xxx xxx x xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx dospělá zvířata.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Počet xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xx obvykle xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx X1 xxxxxxx. Nejméně 500 xxxxx v X1 xxxxxxxx je testováno x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx X1 xxxxxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxx 300 xxxxx x 300 samic.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx laboratoře, mohou xxx použity.
1.2.1.5 Dávkování
Xxxxxxx xx jedna xxxxx, obyčejně xxxxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx dávek. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se dva xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxx dní x xxxxx xx 35 xxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx zárodečných xxxxx xxxxx analyzována. Xx xxxxx období xxxxxxxxxxx jsou samice xxxxxxxxxx rozděleny xx xxxxx. Po xxxxxx xx třeba zaznamenat xxxxx, xxxxxxxx xxxx x pohlaví xxxxxx. Xx xxxx xxxx xxxxx x samičí xxxxxxx xxxxxxxx xx xx doby xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů
Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx možných xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx F1 xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx cytogenetická xxxxxxx xxxxx xxxxx X1 xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(a) Test xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x X1 xxxxxxxx xx může xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxx a/nebo analýzou xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx normální x xxxxxxx fertility xxxx xxx xxxxxxxxx xxx každý xxxx xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx: F1 xxxxx xxxxxx k testování xxxx odděleni xxxxxxxxxx xx klecí xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo stejné xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx vrhu x xxxxxxx X2 xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx, hned xxxx jsou odděleni. Xxxxxxxx xxxx testovány X1 samice, F2 xxxxxxx xxxxxx vrhů xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx testy. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx verifikovány xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potomka. XO-samice xxxx xxxxxx změnou xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx z 1 : 1 xx 1 : 2 samci vs. xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx X1 zvířata xxxxxxxx x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx F2 xxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx zaznamenány xxxxx x třetí vrhy. X1 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx X2 xxxx, xxxx dále xxxxxxxxx buď analýzou xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx dělohy: Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx u xxxxxx translokací xx xxxxxxxxx smrtí embryí, xxxxx xxxxxx počet xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx X1 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx každý xx 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx usmrceny 14. - 16. xxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx živé x xxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxx-xxxxxx jsou připraveny xxxxxxxxx z xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx multivalentních xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx - metafáze X x primárních xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx nejméně xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx požadovaný xxxxx, že testované xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxx xxxxxxxx výběr xx xxxxxxxx, všichni F1 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vyšetřeno xxxxxxx 25 xxxxx v xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx spermatogoniích xxxx x kostní xxxxx xx xxxxxxxx x samců x xxxxxx testes a xxxxxxxxxx meiozy xxxx xxxxxxxxxx xxxx u X1 xxxxx xxxxxxxxxxx XX. Xxxxxxxxxx neobvykle xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x každé x 10 xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx samčí translokační xxxxxxxxx (x-x xxx). Xxxxxxx X-autosomální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx sterilitu xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx xx všech 10 mitózách je xxxxxxx pro XX xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx připouštění xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu x xxxxx pohlaví (xxx xxxxx).
Xxx xxxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx F1 nosičů xxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a mrtvých xxxxxxx x xxxxxxxx x individuální xxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxx každé xxxxxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx diakinéze-metafáze I xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x celkový xxxxx xxxxx xxx každého xxxxxx translokací.
Xxx X1 xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
U XO xxxxx xx uvádí xxxxxxxx velikost xxxx, xxx xxxxx F2 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx, že xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx vybráni xxxxx xxxxxxxx X1 translokací, xx třeba v xxxxxxxxx uvést xxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxx uvedeny xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx xxxxx, informace x:
- xxxxx xxxx, xxxxx a xxxx exponovaných zvířat,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- experimentálních xxxxxxxxxx, xxxxxxxx popis xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x schéma xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x pohlaví xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- době x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x detailní popis xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx x xxxxxx dělohy,
- xxxxx cytogenetické xxxxxx a mikroskopické xxxxxxx, xxxxx možno x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.26. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx podává xxxxx xxxxxx po 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, a xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx podávání xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 dní před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx v podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx lze xxxxxxx v xxxxxxx, xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx po celou xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x nich xxxxx, že nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Experimentální podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx třeba používat xxxxxxx zdravých xxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx případě by xx xxxxxxx podávání xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 6 týdnů, x xxxxxx xxxxxxx starší xxx 8 týdnů. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Provádí-li se xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx xxxxxxxxx test xxxx dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x kmen.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou hladinu xxxxx použít xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx). Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx studie, xx xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita před xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx dobu 90 dnů xxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx podávání sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx úrovně xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Používá-li xx vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx ve stejném xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx dávka. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx neměla vyvolat xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx existují xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx odstupňované toxické xxxxxx.
Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, jinak je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx v potravě, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x ppm nebo xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, mělo xx xx xxx xxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx xx 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (nebo xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx tato xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, aby xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířat.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx a xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx aplikace, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx xxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx vodě) x xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají týdně.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx zařazení.
Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx utratit a xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx přístrojem xx xx xxxxxxx xxxx podáváním testované xxxxx a xx xxxxx studie xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx xxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx zahrnovat stanovení xxxxxxxxxxx, koncentrace hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx volí xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx pyruvát-transamináza) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, dusík močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
(d) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx data, má xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x břišní xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx ve vlhkém xxxxx, aby se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx brzlíku, xxxxxxxxxx x plíce, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata a xxxxxxxxx, xxxxxx, (přídatné xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x xxxxx střevo, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx nerv, (oči), xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx posuzují x xxxxxxx, pokud lze xx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx orgánů a xxxxx xx xxxxx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v jiných xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(d) Xxxxx zvířat xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx dávkou xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx třeba také xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx však xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Údaje se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx a procentuálně xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky ustájení, xxxxxxx,
- experimentální xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x podle xxxxx,
- úroveň xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledování,
- popis xxxxxxxxx xxxx jiných účinků,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx další vývoj,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.27. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (nehlodavcům), x xx xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx xxx vhodnější xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Všem xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx po xxxxx xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx o xxxx xxxxx, že xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx používá pes: xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx používat x xxxxxx druhů nehlodavců. Xx třeba pracovat xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx; v případě xxx xx má x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 do 6 xxxxxx x xx starším xxx 9 měsíců. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 zvířat (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx zvířat xx konci pokusu xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx úrovně x xxxxx kontrolní xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx. Nejnižší úroveň xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx by xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, mají xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky.
Ve xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx by x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx málo toxická xxxxx x xxxxxxx, xx třeba zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx uvést. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x kapslích, xxxx by xx xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx, a dávkování x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.
Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx předběžný test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx studiích xx xx xxxxxx xxxxxx dieta.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Provede-li 90denní xxxx níže popsanou xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, je-li tato xxxxx) žádné xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Podává-li xx xxxx toxická xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx aplikované množství xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky nebránily xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x trvání. Xx xxxxx zaznamenat xxxx uhynutí x xxx, ve kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxx xx zvířatům podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx způsobem xxx v xxxxxxx, xxxxxxxx xx za xxxxxxxxxx podávat xxxxx 5 xxx x xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxx xx xx omezeno) změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání a xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Příjem xxxxxxx (x příjem vody xxx podávání xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx) x hmotnost xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Nejméně xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x vhodnými xxxxxxxxxx x minimalizaci xxxxx xxxxxx pro xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
X xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx xx obvykle xxxxxxxx následující vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xx konci xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx změny, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Na začátku xxxxx, a xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx na xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx hematologické xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, protrombinový xxx (Quickův), trombinový xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxxxx testu, x xxxxx buď v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx xx konci xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx pozorováním způsobu xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx stanovovat vápník, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx transamináza xxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Mezi další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: lipidů, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx studium xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xx více xxx 24 xxxxx).
(x) Analýza moče xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U všech xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxxx dutiny včetně xxxxxx xxxxxx. Játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (s příštítnými xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci zváží xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující orgány x tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na možná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx tělíska, tkáň xx xxxxx brzlíku,(průdušnice), xxxxx, srdce, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxxxx břišní, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (xxxx), xxxxxxx, jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, reprezentativní xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí mléčná xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx) a (páteřní xxxxx ve třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx). Tkáně v xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Histopatologické xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx orgánech, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx, xxxx xxxx xx xx xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx, typy poškození x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx k tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, potrava,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx lze xxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření a xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx případných xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx xx možné,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX
(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx, studie xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxx xx kůži xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, x to xxxxx skupině xxxxx xxxxxx dávky. Během xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx se zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, i zvířata, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pokusu, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx možné, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx se xxxxxxxxxxx xxxx (např. xxxxxx). Xxx nanášení xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % povrchu xxxx. Xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x velikosti připravované xxxxxx xxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxx x tuhými xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Testované xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka se xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx potkany, xxxxxxx xxxx morčata, xxxxxxxx x xxxx zvířecí xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx začátku xxxxxx by nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před dlouhodobým xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx xxxxxx úroveň xxxxx použít xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx a 10 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx podávat xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Dávkování
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx se použilo xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx expozice xx xxx nejméně 6 xxxxx denně. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx dobu. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace testované xxxxx xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx xx xxxxxxx množství, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx.
Nejvyšší xxxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx xxxxx. Nejnižší xxxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, má xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 hladiny xxxxx, mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx testované látky x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx, což x xxxxxx dávkové xxxxxxx xxxx vést x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx poškození kůže, xx dokonce za xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxx znova x nižšími xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx další xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, xx xxxxxx se xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické účinky.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx x xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx denně.
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx xxxx, x vysoce xxxxxxxxx látek xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pokusné xxxxxx rovnoměrně x xx nejtenčí xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx je xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mulového xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxx plochu je xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a aby xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx pohybu, xxxxxx xxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vhodným x xxxxxxxx xxxxxxx.
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x kleci xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx, a xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx týdně. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x spotřebu xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Umírající zvířata x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
X všech xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným přístrojem xx xx provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx pokusu xx má provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, koncentrace hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx glutamát-pyruvát xxxxxxxxxxxx xxxx) a aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x séru. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, hormonů, acidobasické xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx spektra účinků.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx začátkem xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x ohledem na xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny tkáně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, xxxx xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (slinné xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx orgány, xxxxxxx (xx-xx přítomen), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x slepé xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxx), (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Tkáně x xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx xx xx indikováno xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx orgánem.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxx, které xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx skupiny.
(b) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx cílové orgány x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Používá-li xx potkanů, plíce xxxxxx xx skupinách x xxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxx histopatologicky vyšetřovat x zjištění příznaků xxxxxxx, xxxxxxx to xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx orgánech, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx skupině x vysokou xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxxxx, musí xx provést histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, u xxxxxxx xxxx zjištěny xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx musí být xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x lézemi x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx lézí. Výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení,
- xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx dávek,
- xxxxxxx xxx účinku, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- hematologická xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků případných xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx je to xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx - xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xx 90 xxx. Použije-li xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx v atmosféře xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx, která během xxxxxx xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, x jakých budou xxxxx experimentu. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, xxxx být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx testem, v xxxx studiích xx xx xxxxxx xxxxxx xxxx a kmen.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a nesmí xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx následujících 28 xxx po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx koncentrace x jedna kontrolní xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací testované xxxxx). S výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx se zvířaty x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx jen v xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x člověka, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li se xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x jiných xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx expozici xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx inhalační zařízení, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, aby byl xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx nejvíce xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x inhalačním xxxx xxxxx by x xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx přesáhnout 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jinými xxxxxxx.
1.2.2.6 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxx zvířata je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, ve xxxxxx se xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3. Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se exponují xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx dobu 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x otravy xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx experimentu xx xxx 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % a 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx není xxxxx (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx voda.
Xxxxxxx xx dynamický inhalační xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx zaručovat, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx nejrychleji.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).
x) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxx této xxxxxx xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxx, se připouští xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx experimentu xxxx xxx koncentrace tak xxxxxxxx, xxx je xx prakticky možné. Xxx xxxxxx generátoru xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx tak xxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic.
x) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
x) Během xxxxxxxx a xx xx se zvířata xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx x zaznamenávat xxxxxx výskyt, stupeň x xxxxxx. Pozorování x xxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, srsti, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce autonomní x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Hmotnosti xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx se zaznamenávají xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx pravidelnou xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx chybného xxxxxxxx. Xx skončení studie xx všechna xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata je xxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx xxxxxxxxxxx přístrojem xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx a xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.
(b) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx čas (Quickův), xxxxxxxxxx čas či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx rozšíření xxxxxxx pozorovaných xxxxxx.
(x) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx na podkladě xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kontrolní xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx zvířat použitých xx studii xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx pozdější histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým postižením, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, mozek - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx místě xxxxxxx, xxxxxxxxxx, srdce, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, reprezentativní xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx stehenní včetně xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo pokud xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická vyšetření
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx respiračního xxxxxxx x ostatních xxxxxx x xxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx histopatologická vyšetření xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx však xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(e) Xxxxxxx-xx xx satelitní xxxxxxx, xxxxxxx xx histopatologické xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx být xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x jednotlivými typy xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx pokusu: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, typu, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, klimatizačního xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxxx. Popsat xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx vzduchu, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x uvedou xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxxxxxx xxxx údaje:
x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením,
b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx inhalačního zařízení, xxxxxx objemem xxxxxxx),
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx,
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,
x) medián velikostí xxxxxx (x xxxxxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- oftalmologické xxxxxx,
- hematologická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,
- pitevní nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Testovaná xxxxx je podávána xxxxxxxx xxxx xxx x týdnu, vhodnou xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Během x xx expozici xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx standardních podmínkách xxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena do xxxxxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx (xxxxxxxx nebo xxxx). Je třeba xxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxx běžně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Expozice xx xxxx xxx započata xx nejdříve po xxxxxxxxx mláďat. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx rozdíl ve xxxx zvířat činit xxxx než ± 20 % od xxxxxxx. X xxxxxxx, xx vlastní studii xxxxxxxxx xxxx subchronické xxxxxx toxicity, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx a kmen x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 samic x 20 xxxxx), xxxxxx i pro xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx a xxxxxx xx být xxxxx. Xxxxx xx záměrem xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx dokončením xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx ne xxxx xxx 4 xx xxxxxxx pohlaví xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x frekvence xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx měla vyvolat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx nadměrné xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx voleny xx xxxxxxxx pásmu mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Výběr xxxxx xx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx studií.
Obvykle xxxx xxxxxxx exponována xxxxx. X případě, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx x ní xxxx xxxxxxx stálý přístup.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx skupině, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx vehikulu.
1.2.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx xxxxxx závisí na xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx člověka.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx technické xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x důsledku kožního xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x znalosti xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx testů xxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx
Xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx xxxxx z xxxx, jimiž xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx sedm xxx v xxxxx, xxxxxxx dávkování xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx x xxxxxx xxx aplikace, x xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx je xxxxxxxxxx xx přijatelné.
Inhalační xxxxxx
Protože xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx než xxxx xxxxxxx aplikace, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx platnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení koncentrace xxxx xxxxx xxxxx xx pět xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx sedm dní x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx zvířat xxxxx xx stejnou xxxx xxx, použitou x xxx xxxxxxx expozičního xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx expozice x xxxxx xxxxxx xxxxxxx během xxxxxxx.
Xxxxx přerušované xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx xxxxxx x xx lidské xxxxxxxx, která xx xxx simulována. Xxxxxxx, xx třeba vzít x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx narušeny xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx komplikovanější (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Expoziční xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce zaručuje xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x expoziční xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx komory se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx v komoře xxxxx zvířat neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: rychlost xxxxxxx xxxxxxx komorou xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(b) xxxxxxxxxxx: během denní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 15 % xxxxxxx hodnoty;
(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 xX x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx případů, xxx xx voda xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průběžně;
(x) měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx by xxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x dýchací xxxx xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx xxx distribuci xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by gravimetricky xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx prováděna xxxxx xxxxx vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx aerosolu, x poté xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, xxx bylo možno xxxxxxxx stabilitu distribuce xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx látky xx xxxx trvat xxxxxxx 12 měsíců.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxx klinické xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx zákroky x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx mrtvá x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, která xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx zachytil xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků, x xxxx za xxxxxx minimalizace xxxxx x důsledku nemocí, xxxxxxxx xxxx kanibalismu.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx změn x xxxxx zvířat, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx.
Hmotnost xx xxxxxxxxxxx individuálně x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx prvních 13 týdnů xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx tomto xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x pitné vodě) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx intervalech, xxxxxx xx zdravotní xxxx xxxx změny tělesné xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. obsah xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx bílých xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx ukazatele xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x na xxxxx xx vzorcích xxxx xxxxxxxxxxxxx od xxxxx nehlodavců xxxx. xx 10 xxxxxxx xx pohlaví x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx to xxxxx, vzorky ve xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xx xxxxxxxx potkanů. Navíc xx xxx xxx xxxxxxx vzorek xxxx xxxxxx od xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx zhoršený xxxxxxxxx stav xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat ve xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx a x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxx údaje x vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí xxxxxxx, xxxxxxx se x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx nižší.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx od xxxxxxxx xxxxxx a xx stejných intervalech xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx směsném xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, ketolátky, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- kvantitativně).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx závěr xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx skupině, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Od xxxxxxxxxx xx xxxxx toho xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxx xx funkci xxxxx (xxxx. aktivita bázické xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, např. krevní xxxxxxx na lačno,
- testy xx xxxxxx ledvin, např. xxxxx močoviny v xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx aminotransferáza
2) xxxx známá xxxx xxxxxx aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx
1.2.3.5 Pitva
Kompletní xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, která xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx utracením xx xxxxxxxx vzorky krve xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, které xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx by xxx xxxxxxxxx porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.
Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx měly být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To se xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x tkání:mozku3) (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, mozečkové xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, štítné xxxxx x příštítných xxxxxxx, xxxxx, trachey x xxxx, srdce, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, ledvin3), xxxxxxxxxxx3), jícnu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, ilea, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí mléčné xxxxx, kůže, svaloviny, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, hrudní x xxxxxxx), sterna x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, a očí. Xxxxxxxx plic x xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx konzervaci xxxxxx xxxxx; naplnění plic x xxxxxxxxxxx studiích, xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zkoumání. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx respirační xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx a hrtanu.
Xxxx-xx provedena jiná xxxxxxxx xxxxxxxxx, informace xxxxxxx z těchto xxxxxxxx by xxxx xxx k dispozici xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou dát xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodítko.
3) xxxx orgány x 10 zvířat xx xxxxxxx x xx xxxxxxx x xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx tělísky) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx viditelné xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxx léze xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(a) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx uchovaných xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx lézí nalezených:
1. u všech xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx utracena xxxxx xxxxxx,
2. x všech zvířat xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
(b) xxxxxx či xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x nižšími xxxxxxx,
(x) xxx, xxx xxxxxxxx svědčí xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx délky xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, které xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx nižší xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx lézí, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx nezbytné xxx xxxxxxx posouzení xxxxxxxxxxx xxxx pozorovaných x xxxxxx x xxxxxxxxxxx látkou.
2. XXXXX
Xxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx lézí. Výsledky xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, kde xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x xxxxxxxx: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) a měly xx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx inhalační aparatury xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx)
(x) xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxxxx
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně
(f) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx to xxxxxxxxxx)
- dávkové xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) a xxxxxxxxxxx
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx
- neúčinná (xxxxxxx) xxxxxx
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx až do xxxxx
- popis xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx
- doba, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x xxxx další xxxxx
- data x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
- oftalmologické xxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx
- testy klinické xxxxxxxxx x všechny xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx moči)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x xxxxxxx použitých xxxxx
- diskuse xxxxxxxx
- interpretace xxxxxxxx.
X.31. STUDIE XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X NEHLODAVCI
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx několika xxxxxxxx březích pokusných xxxxxx, jedna dávka xx xxxxxx skupinu, xxxxxxx v xxx xxxxxx březosti, xx xxxxxx dochází x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx před xxxxxxxxxx xxxxx porodu xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxxx x x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx- x fetotoxicity.
1.2 Popis xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, xxxxxxx samice, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx věku x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx při laboratorních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx samci s xxxxxxxx plodností. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx experimentálních xxxxxx.
Oplodnění xxxx xxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx umělou xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx začíná xxxxx xx xxxxxxxxxx x pokračuje xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx termínem jsou xxxxx vyjmuty hysterektomií x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx osifikace x krvácení xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
Běžně xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx, myš, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx x králík. Xx xxxxx xxxxxxxx všeobecně xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx by xxxxx xxx nízkou plodnost x měly xx xxx x něj xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx aspoň 20 xxxxxxx potkanů, xxxx nebo xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx studované xxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Je xxxxx xxxxxx aspoň xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, že je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx vehikulu, xx xxxxx zahrnout xx xxxxxx i xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx také znát xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx být teratogenní xxx xxx vliv xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) se xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xx xxxxxxx x testovací xxxxxxx x výjimkou aplikace xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx fyzikálně xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx u xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxx snížení xxxx, ale už xx xxxx xxx 10 % xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxxxxxx účinky. Střední xxxxx xx měly xxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nízkou x xxxxxxx dávkou.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
X xxxxxxx, xx látka x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 prokazatelně xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx úrovních xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Nultým xxxx xxxxx je xxx, kdy xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxxx (pokud xxxxx). Doba xxxxxxxx xx měla xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx toto xxxxxx xx xxxxx považovat 6. xx 15. xxx x xxxxxxx x xxxx, 6. xx 14. den x xxxxxx x 6. xx 18. xxx x králíka. X případě, xx xx xx nultý xxx považován den, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx připočítat x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx. Podle xxxx alternativy xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx očekávaným xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx pozorování
Xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx sledování x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis postupu
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxxx xxxxxx sondou, xxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx denně během xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx být xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx během xxxxxxxx, zvířata xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx známky toxicity xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X pozorování xx xxxxx pokračovat x xx ukončení xxxxxxxx xxxxx xx do xxxx přibližně xxxxx xxx před xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx porodu. Xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x srsti, xxx x sliznic, dále xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Každý xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vážit zvířata.
1.2.3.1 Xxxxx
Pokud xxxxx x uhynutí xxxxx xxxx xx konci xxxxxx, xx třeba x samic xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx morfologické xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx vliv na xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx smrti xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x její obsah xxxxxxxx s ohledem xx xxxxx embryí x xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx dobu xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. X xxxxxxx x králíků xx xxxxx stanovit xxxxx xxxxxxx tělísek. Xx xxxxx xxxxx pohlaví xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx jednotlivých xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xx xxxxx jednotlivě zevně xxxxxxxx každý xxxxxxx. X xxxxxxx, xxxx x křečků xx xxxxx xxxxxxxx kosterní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx abnormity xxxxxxx xxxxx. U xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxx pitvou z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x skeletu.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx možno xxxxxx jakékoliv uznávané xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZPRÁVA
3.1. Zpráva x xxxxx
Xxxxxx x testu xx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- druh, xxxx, xxxxx, podmínky ustájení, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- projevy xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx účinku (xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx),
- xxxx xxxxx xxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxx,
- údaje x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx,
- délka xxxxxxxx x údaje x xxxx (xxxxxx historických xxxxx),
- xxxxx x zárodcích (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- xxxxx o xxxxxxxxxxxx vrzích (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka je xxxxxxxx obvykle sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, po xxxxx xxxx xxxxxx zvířat. Xxxxx a po xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx vývinu tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nejméně xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx je potkan. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx x běžně chovaných xxxxx laboratorních zvířat. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx neměl xxx xxxxxx xx xxxx zvířat činit xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx subchronické xxxxxx toxicity, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x kmen x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 samců) xxx každou úroveň xxxxx a souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx x negravidní. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx takto xxxxxxxx před koncem xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xx při xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx pokles xxxxxxxx xxxxxxxxx (méně xxx 10 %), xxx podstatnějších změn xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx tumory.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx by neměla xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx třeba stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx vysokou x xxxxxx xxxxxx.
Volba xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x studie toxicity.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx denně. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx být xxxxx k dispozici.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x každém xxxxxx x exponovanou skupinou, xxxxx expozice testované xxxxx.
Xx zvláštních xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, jehož xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxx negativní kontrolní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani vehikulu.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx xxxxxx, dermální x inhalační. Volba xxxxxxx xxxxxx závisí xx fyzikálních a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx.
1.2.5.1 Orální xxxxxx
Xxx, kde se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx traktu x xx-xx požití xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx podanou v xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx látka xxxxxxx sedm xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx pět dnů x týdnu může xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" příznaky x xxxxxx bez xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Dermální studie
Xxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx studie
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx komplikovanější xxx xxxx způsoby aplikace, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou alternativou xx xxxxxxxxxxxx situacích.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx pět dnů x týdnu (přerušovaná xxxxxxxx), nebo v xxxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx dní v xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), x přibližně xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx denně xx xxxxxxx xxxx dne, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X obou xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x stálou xxxxxxxx xx x xxx, xx v xxxxx xx xxxxx 17 - 18 hodin xx ústup xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším obdobím xxxxx víkendu.
Volba xxxxxxxxxxx xxxx kontinuální xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxx x xx lidské xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxx zevního xxxxxxxxx mohou být xxxxxxxx nutnosti xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x potřebou xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx monitorování.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expoziční xxxxxxxxx. Kontrolní a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Uvnitř xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx podtlak x xxx xx xxxxx úniku testované xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx shlukování xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře objem xxxxxx neměl přesáhnout 5 % xxxxxx xxxxxx.
Měření nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) Xxxxxx vzduchu: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx komorou xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontinuálně.
(x) Koncentrace: xxxxx xxxxx expozice xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % střední hodnoty.
(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X a xxxxxxx x komorách 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx průběžně.
(x) Měření xxxxxxxxx xxxxxx: měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo pevných xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx xxxx xxx x respirabilní velikosti xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx odebírají x dýchací xxxx xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx exponováno, x xxx xx gravimetricky xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx aerosolu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být prováděna xxxxx xxxxx vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx během xxxxxxx xxx často, xxx xxxx možno xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Trvání testu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx větší xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx xx xxx být xxxxxxx v 18 xxxxxxxx x myší x xxxxxx a 24 měsících u xxxxxxx. Xxxxxxx, pro xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx dobou xxxxxx xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx výskytem xxxxxx xxxx ukončení xx měla být 24 měsíců pro xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx přijatelné, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx dávky xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx uhyne předčasně xxx skupina x xxxxxxx dávkou xx xxxxxxxx toxických xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, pokud xxxxxxx xxxxxxx nevykazují xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx činily xxxxxxxx. Xxx xxxx možno xxxxx xxxxxxxxx výsledek xxxxx, nesmí být xxxxxx použitelných xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem nebo x důsledku xxxx xxxxxxx) x žádné xxxxxxx xxxxx xxx 10 % a xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxx být xxxxx než 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx a x 24 měsících x potkanů.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx x xxxxx, xxx a sliznic, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nervového systému, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx xx xxxxx, xxx se zabránilo xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx chyb x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxx x všech xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx věnovat xxxxxx xxxxxx: doba objevení, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, vzhled x progrese každého xxxxxxxxxxx xx hmatného xxxxxx se xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě) xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx a pak xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx by xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx jiné xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx období xxxxx x xxxxx jednou xx čtyři xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Klinická xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Pokud pozorování xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x zhoršeném xxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xx 12 xxxxxx, xx 18 xxxxxx x před utracením xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Diferenciál xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx ve vzorcích xx xxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx a x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx, zvláště xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxxxxxx xx vyšetří i x skupiny x xxxxxx xxxxxxxx nižší, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxxx xxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx tumory nebo xxxx, nebo léze, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx.
Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx možné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx mozkové), xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xxxxx, xxxxxxx a xxxxx, xxxxx, aorta, slinné xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, tračník, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzlina, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, periferní xxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxx, stehenní kost xxxxxx xxxxxx, mícha xx xxxxx xxxxxxxx (xxxxx, xxxxxxx hrudní x xxxxxxx) a xxx.
Xxxxxxxx plic x xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Naplnění xxxx x xxxxxxxxxxx studiích xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx studiích xx xxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx nosní xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxx x tkáních xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo byla xxxxxxxx během xxxxx, x x xxxxx xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x s xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx okem x xxxx, xxxxx xxxx podezřelé xxxx xxxxxx, se vyšetří xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxxx rozdíl v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x x dalších xxxxxxxxx.
(x) Je-li přežití xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx zkoumána x skupina x xxxxxxxxx xxxxx dávkou.
(x) Xx-xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků, které xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nižší xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx sumarizují ve xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx statistické xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,
- podmínky testu: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx konstrukce, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a způsobu xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro měření xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, kde xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x expozici: ve xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatná xxxxxxxx) x měly xx zahrnovat:
(x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x inhalačním xxxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu,
(x) xxxxxxxxx koncentrace (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx objemem xxxxxxx),
(d) povahu xxxxxxxx, xx-xx použito,
(x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx kde xx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx užito) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxx tumoru,
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx xxxxx xxxxx,
- xxxx x spotřebě potravy x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx hematologické xxxxx x xxxxxxxx,
- nálezy xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- detailní popis xxxxx histopatologických nálezů,
- statistické xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.33. XXXXXXXXXXX XXXX CHRONICKÉ TOXICITY/KARCINOGENITY
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Cílem xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx druhu xxxxx xx dlouhodobé xxxxxxxx.
Xxx xxxxx účel xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx alespoň xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinou x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxx satelitní xxxxxxx může xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx zkoumána xxx xx obecnou toxicitu, xxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx testována xx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx sedm dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika skupinám xxxxxxxxx zvířat, jedna xxxxx na skupinu, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity x xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx nejméně xxx xxx xxxx započetím xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních x xxxxxxxxxxxx skupin.
1.2.1 Experimentální xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít x xxxxx druhy (xxxxxxxx i nehlodavce). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx chovaných xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Expozice xx měla xxx xxxxxxxx co xxxxxxxx xx odstavení xxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx neměl xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % xx průměru. X xxxxxxx, že vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx orální xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx použije xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) na xxxxxx xxxxxx dávky x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxx nullipary x xxxxxxxxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx takto xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx) xxx xxxxxxxxx patologie xxxx, xxx xxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx xxxxx pohlaví, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Pro xxxx xxxxxxxxxxxxx se zvolí xxxxxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxx kromě souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx úroveň xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxx pokles xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx jinými xxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx interferovat x xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx neměla xxx nižší xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx třeba stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx vysokou x xxxxxx xxxxxx.
Při xxxxx dávkových xxxxxx xx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx zahrnuty xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx satelitní xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx obvykle denně. Xx-xx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, měla xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina xx xxxxxxxxx x každém xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx se xxx xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx charakterizována, zařadí xx další negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Způsob xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx orální, xxxxxxxx x inhalační. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x chemických charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x člověka.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx jedna x xxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx důvody. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.
Ideálně xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx dávkování xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v xxxxxx xxx aplikace, x xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxx zvolena jako xxxxxxxx hlavní xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx kožního xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Inhalační xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jsou zde xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x této xxxxx xxxxxx. Intratracheální xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Dlouhodobé xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx pět xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo x návaznosti xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), s xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx zvířat xxxxx xx stejnou xxxx xxx, použitou i xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X obou xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx rozdíl mezi xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx je x xxx, xx v xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx denní xxxxxxxx x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx cílech xxxxxx x xx lidské xxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx prostředí xxxxx xxx xxxxxxxx nutností xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) generace xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx a technik xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x xxxxxxxxx xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx byly expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx komory xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a tím xx xxxxx úniku xxxxxxxxx látky do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx vzduchu: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by měla xxx nejlépe kontrolována xxxxxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx než ± 15 % střední xxxxxxx,
(x) teplota x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °C x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x atmosféře komory. Xxx parametry by xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx komor x tekutých nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx komor xx xxxxxxxxx x dýchací xxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxx by xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx částic, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x měl xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aerosolu, x xxxx značná xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx často během xxxxxx generujícího systému, xxx xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx část xxxxxxxx xxxx života xxxxxxx xxxxxxxxx xxx test. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x 24 měsících x xxxxxxx. Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx měla xxx 24 xxxxxx xxx myši a xxxxxx a 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx kterém xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx posuzuje xxxxxx. Xxx, xxx uhyne xxxxxxxxx jen xxxxxxx x vysokou dávkou xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx testu, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx toxické projevy, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) v xxxxx xxxxxxx větší xxx 10 % x xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % v 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x v 24 xxxxxxxx u potkanů.
Xxxxxxxxx skupiny 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx pohlaví x 10 připojených xxxxxxxxxxx xxxxxx každého pohlaví xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity xx xxxx xxx x xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. U xxxxxx xxxxxx by xxxx xxx plánováno xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx vztah x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxxx projevů stárnutí.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx pozorování xxxxxx x klecích zahrnuje xxxxx xxxx a xxxxx, xxx a xxxxxxx, jakož x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
U xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx v přiměřených xxxxxxxxxxx klinické vyšetření.
Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx xx nutná, xxx xx xxxxxxxxx ztrátám xxxxxx ze xxxxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx chyb x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxxx a očních xxxxxx x mortalita xx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx vývoji xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, lokalizace, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx viditelného xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů x xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx zdravotní xxxx nebo změny xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx za xxxxx týdny xx xxxxx období.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, celkový xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx destiček xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) xx měla být xxxxxxxxx za tři xxxxxx, xxxx měsíců x poté x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x na xxxxx xx xxxxxxxx krve xx 10 potkanů xx xxxxxxx z xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx být xx xxxxx potkanů.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stavu xxxxxx během xxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat xx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x x xxxxxxx s dávkou xxxxxxxx nižší, xxx xx vysoká xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Vzorky xxxx od 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx pokud xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Následující xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx podle xxxxx x xxxxxxx:
- xxxxxx moči, xxxxx x hustota u xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, glukóza, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),
- mikroskopické xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx závěr xxxx xxxxxxxx krevní xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví, pokud xxxxx pro xxxxx xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx. Od xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxxx. Z těchto xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- testy xx xxxxxx jater (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ornithin xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx. krevní xxxxxxx xx xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) nyní xxxxx jako sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx aspartát aminotransferáza
1.3.2.4 Makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx všech xxxxxx xxx diferenciální xxxxx bílých xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx nebo xxxx, xxxx xxxx, které xx mohly xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx. Mělo xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxx x tkáně xx měly xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx kory, xxxx xxxxxxx), podvěsku xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, thymu, xxxxxxx a xxxx, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, jater3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, gonád3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), sterna x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, a xxx. Xxxxxxxx plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx trakt včetně xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Byla-li xxxxxxxxx xxxx klinická xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx xxxxxxx x na xxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx orgánech všech xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vysokou xxxxxx x satelitní xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nevyšší xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx ostatních xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx satelitních skupin x xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxx části xxxxxx xxxxxxxx karcinogenitě xxx jejím ukončení.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
(x) xxxxx histopatologie xx xxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx testu x x xxxxx xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x s xxxxxxx xxxxxx;
(b) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx okem x xxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u všech xxxxxx;
(x) xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx x daném xxxxxx xx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx;
(x) xx-xx přežití xx xxxxxxx s xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx zkoumána x xxxxxxx s xxxxxxxxx nižší xxxxxx;
(x) xx-xx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků, xxxxx xx mohly ovlivnit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxx dávkovou xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sumarizují xx xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx xxxxxxxx během xxxxx, dobu xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx utracení. Xxxxxxxx xx hodnotí odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx použity jakékoliv xxxxxxxx statistické metody.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx xxxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x expozici: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) by xxxx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vstupující xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx objemem xxxxxxx),
(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx zóně,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx částic (xxx kde xxxxxxxxxx),
- dávkové úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x koncentrace,
- xxxx incidence xxxxxx podle pohlaví, xxxxx x typu xxxxxx,
- doba xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx až do xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx ,
- xxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxx,
- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx potravy x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a výsledky,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a všechny xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxx xxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Samci xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (přibližně 56 xxx x xxxx x 70 xxx x potkanů), xxx xxx zachycen jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx látku xx xxxx alespoň xxxx estrálních cyklů, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx připouštění xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx modifikovat.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx dvou xxxxxx - kontrolní x exponované skupiny. Xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx pokusu x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx jsou také xxxxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xxxxx dostávají stejným xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Pokusná zvířata
1.2.2.1 Xxxxx druhu
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx myším. Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xx xx doby xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx charakterizována xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxx x/xxxx věku. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx u xxxx pohlaví. Zvířat x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x kontrolní, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx zahájením xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx stejným termínem xxxxxx. Xxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vlivu xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx v X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx x vývoj xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx početí do xxxxxxx.
1.2.3 Podmínky xxxxx
Xxxx x potravu xxxxxxxxx xxxxxxx ad xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx samice xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xx xxx xxxxxxxxx materiál xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Pokud se xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x nejvyšším použitém xxxxxx. Xxxxx testovaná xxxxx snižuje xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx výživy.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxx případě - xxxxx xx není xxxxxxx jejími fyzikálně-chemickými xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinku - xxxxxxxxx toxicitu, ale xxxxx uhynutí x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx xx daly připsat xxxxxxxxx látce, a xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxx u xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xx xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx podle xxxxx xxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx hmotnosti x 0. nebo 6. xxx xx začátku xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx látek x nízkou xxxxxxxxx, xxxxx xx ani xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx toxickým xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity, xxxx nepříznivé xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (P) začne xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx obdobím připouštění (8 týdnů xxx xxxx). Samci xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, nebo xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x mohou xxx použiti xxx xxxxxxxx xxxxxxx vrhů x xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxxxxxxx aklimatizaci a xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx aplikace xxxxxxxxx xxx xx xxxx tři týdny xxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxx xxxxxxxxx xx xx odstavení F1 xxxxxxxx. Je přípustná xxxxx dávkovacího plánu xxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. o xxxxxxx xxxxxxxxxxx a/nebo bioakumulaci.
1.3.2 Xxxxxx xxx připouštění
Xx možno xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx samec xx xxxxx xxxxxxx).
X případě 1 : 1 párování, xxxxxx se xxxxxxx x týmž xxxxxx xx xxxxxxxx kleci xx otěhotnění xxxxx xx dobu 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx vyšetřeny xx přítomnost spermatu xxxx vaginální zátky. Xxx 0 těhotenství xx xxxxxxxxx jako xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx, u kterých xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx neplodnosti xxxx. Xx je xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx vyšetřením xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx použitým xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx možnost xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxx potomstvo xx xxxxxxxx odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx se xxxxxxxx vrhů standardizuje, xx xxxxx dodržet xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx vyřazením xxxxxxxxxxxx jedinců tak, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx proveditelné, xx možno xxxxxxxxxxxxxx xx jiné xxxxx, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx menší xxx 8 xxxxx standardizovat.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou za xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx se měří xxxxx xxx xxxx, xxx během doby xxxxxxxxxxx. Během xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (x vody, xxxxx se xxxxx xxxxxx v pitné xxxx) xx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X zvířata xx xxxx první xxx xxxxxxxx x xxx xxxxx. Všechna pozorování xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx počítá od xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx se xx xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx se počty x xxxxxxx mláďat, xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx utracená xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx mláďata xx xxxxxxxxx a celé xxxx se xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. a 7. xxx a xxxxx xxxxx xxxxx xx ukončení xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx a zaznamenávají xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx
1.3.5.1 Pitva
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx abnormality xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx defekty.
1.3.5.2 Histopatologická vyšetření
Xxxxxxxxx, děloha, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx P xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetřeny x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx nejvyšší dávku x xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x těchto xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx x u X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx již bylo xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx mají xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Data xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, kde xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxxx, xxxxx plodných xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x procento zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx statisticky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx použít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxxxxxx xx měla xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxx x pohlaví včetně xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx ukončení xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx každého vrhu, xxxxxxxxx hmotnost jednotlivých xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx potomků,
- toxické x xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx hmotnost xxxxxx X generace,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis všech xxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud je xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx v odstupňovaných xxxxxxx.
Samci rodičovské (X) generace xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku x xxxx růstu x xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 dnů x xxxx x 70 xxx u xxxxxxx), xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx látku xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx testovací xxxxx xx estrus.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx xxxxxxxxxxx se testovaná xxxxx podává xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx, xxxxx samicím. Po xxxxxxxxx je látka xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx a xx xx xxxx xxxxxxxxx X2 xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx modifikovat.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Před zahájením xxxxx xxxx zdravá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxx - kontrolní x xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (X) xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx podávat x xxxxxxx nebo v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx. Všechna xxxxxxx látku xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem x xxxxxxx celého xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo jiné xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxx 7 xxx x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx potkanům xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx X xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Musí být xxxx charakterizována co xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxx xxxx xxxx. Plodnost xxxx být ověřena x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxxx zahájením xxxxxxxx.
1.2.3 Počet a xxxxxxx
Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx zvířat, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 březích samic x přibližně stejným xxxxxxxx porodu. Xxxxx xx získat dostatečný xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, a tím xxxxxxxx spolehlivé xxxxxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxx, xxxxxx gravidity x xxxxxxxx chování, xxxxxx, xxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 od xxxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxxx jejich potomstva xxxxxxxx F2 až xx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx klecí x xx jim xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx alespoň tři xxxxxxxxxx skupiny x xxxxx kontrolní. Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, pak zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx snižuje xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupiny, xxxxxxxxx xx xx výživy.
Xxxxxxxxx látka v xxxxxxxx koncentraci xx x xxxxxxxx případě, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x rodičovské xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxx xx se xxxx xxxxxxx testované xxxxx, x xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, ani u xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx hmotnosti zvířete x xxxxxxxxxxxx se xxxxx týden xxxxx xxxxx hmotnosti. V xxxxxxx xxxxxxxxx samic, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx určeny na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
V xxxxxxx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx dávkových xxxxxxxx. Xxxxx předběžná xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx rodičovské xxxxxxxx X xxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. U xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx připouštění (8 xxxxx xxx myši). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x jsou použiti xxx xxxxxxxxx produkci xxxxxxx xxxx x xxxx utraceni x xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X začne xx pětidenní xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň xxx týdny xxxx xxxxxxx připouštění. Denní xxxxxxxx pokračuje xxx xx celé tři xxxxx období připouštění, x xxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx X1 potomstva. Je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x vlastnostech studované xxxxx, např. o xxxxxxx metabolismu xxxx. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxxxx x končí xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) anebo 1 : 2 (jeden xxxxx ke dvěma xxxxxxx).
V případě 1 : 1 xxxxxxxx, samice xx xxxxxxx x xxxx xxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx do otěhotnění xxxxx xx xxxx 3 týdnů. Xxxxx xxxx jsou samice xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx zátky xxxx xxxxxxxx.
Vzhledem x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxxxxxxx xxx připouštění xx xxxx 11 xxxxx x myší x 13 xxxxx x potkanů. Xxx xxxxxxxxxxx zvířat generace X1 xx náhodně xxxxxxx xxxx z xxxxxxx xxxx téže xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx odstavu.
Dvojice, x kterých nedojde x xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxxx důvod xxxxxxxxxxx páru. To xx možné xxx xxxxxxxxxxx další příležitosti x oplodnění x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx reprodukčních orgánů xxxx vyšetřením xxxxxxxxxx xxxxx x spermatogenezy.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx pro vyšetření xxxxxxxxx xx ponechána xxxxxxx xxxxxxx normálně x xxxxxxx x xxx potomstvo do xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx dodržet následující xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx porodu xx xxxxxxxx xxxxx vrhů xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx počtu 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxx počty, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Vrhy xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxx generace X2 xx xxxxxxx obdobně.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxx pozorováno xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxxx mortality, xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx xx xxxx xxxxx jak před, xxx xxxxx doby xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx denně. Xx xxxxxx x x průběhu xxxxxxx xx xxxx příjem xxxxxxx ve stejný xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X x X1 xxxxxxx xx váží xxxxx xxx aplikace x xxx xxxxx. Xxxxxxx pozorování xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx se xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx co xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx a stanoví xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx anomálií.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx uchovají xxx vyšetření na xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx xxxxx ráno xx xxxxxx, ve 4. x 7. xxx a xxxxx xxxxx týden xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx zvážena xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxx v chování x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Pitva
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X x X1 xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx reprodukci. Xxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxxxx xxx připouštění a xxxxxxx zvířata generace X2 se xxxxxx xx odstavení.
Po xxxxxxxx xxxx úmrtí xx všechna xxxxxxxxxx xxxxxxx P x X1 makroskopicky vyšetří xx strukturní abnormality xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xx zvláštní pozorností x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mláďata xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Vaječníky, xxxxxx, děložní hrdlo, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x další xxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx X x X1 xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx orgány xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se mikroskopické xxxxxxxxx u všech X a F1 xxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxx dostávající xxxxxxxx xxxxx, která xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx, x dále x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xxxxxx abnormality u xxxxxx xxxxxx zvířat, xx xxxxxxx x x xxxxxx ostatních xxxxxxxxx skupin. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxx makroskopicky xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx mají xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, kde xx xxxxxx pro každou xxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxxx těhotných xxxxx, typ xxxx x procento zvířat xxxxxxxxx xxxx změny.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx příslušnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx použít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x experimentu
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje:
- xxxx/xxxx použitých xxxxxx,
- údaje x toxické xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx ukončení xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x individuální xxxxxxxx xxxxxxx před xxxxxxxxx,
- toxické a xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx byly xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X a F1 xxxxxxxx, vybraných pro xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.36. XXXXXXXXXXXXXX
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx látka se xxxxxx vhodnou cestou. X závislosti xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx podávána xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x průběhu xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx podle účelu xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx, tkáních xxxxx x exkretech.
Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx s "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxx" xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxx co xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx sloučeniny x xxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx po xxxx xxxx dnů xxxx xxxxxxxxxx. Před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxx xxxxxx speciálních xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Toxikokinetické studie xx provádějí xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx by xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx hmotnosti xxxxx než ± 20 % průměrné xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Pro xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 4 xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx testování xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ale xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx potřeba xxxxxxxx xxxxxx na obou xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx rozdílné odpovědi x různých xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx ostatních druhů xxxxxx (xxxxxx než xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
Je-li xxxxxxxxx xxxxxxx distribuce, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxx x xxxxx jak xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxxx časových xxxx, v xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx velikost skupiny xxxxxx je úměrná xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxx větší xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx xxxx xxxxxxx x xxxxxx časových xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx skupině xxxxx xxx xxxx xxx 2 xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxx xx to, xxx xxx látku xxxx. xxxx xxxxxxxxxx poskytla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx a deplece.
1.2.2.3 Xxxxx
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx testované xxxxx. Xxxx by to xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, po xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx parametrech nebo xxxxx vyvolává toxické xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dávek látky. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být nezbytné x podávání xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx studie xx xxxx být prováděny xxxxxxx způsobem xxxxxxxx x je-li xx xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxx, aplikována xx xxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx dobu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx relativního xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx aplikace. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x distribuci xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Pozornost xx xxxx xxx xxxxxx věnována xxxxxxxx xx vstřebávání x xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx sondou xxxx v potravě, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x potravě.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxx xxx sledována xxxxx x xxxxxxxx toxicity x další relevantní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x trvání.
1.3 Xxxxx postupu
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xx zdůvodněných xxxxxxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx.
1.3.1 Absorpce
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx mohou být xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx1), x xx např.:
- xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xx. xxxxxx metabolitů x xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx jejích zbytků x karkasu,
- xxxxxxxxx biologické xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x kontrolní x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- porovnání množství xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ledvinami xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx x případně xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx plochy pod xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x plazmě xx xxxx a xxxxxxxxx x xxxx získanými x xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1) X xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx rozumí xx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, z xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx schématu mohou xxx použity xxxxx xx xxx:
- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx kvalitativní informace;
- kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovení koncentrací x xxxxxxxx testované xxxxx x xx. xxxxxx metabolitů x xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx ze zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Xxx xxxxxx vylučování se xxxxx moč, stolice, xxxxxxxxxxx vzduch, x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x ev. jejích xxxxxxxxxx xx v xxxxxx xxxxxxxxx stanovuje xxxxxxxxxx po podání xxxxx, a to xxx do vyloučení 95 % x xxxxxxxx množství xxxx xxxxxxx 7 dnů xx xxxxxxx vylučování.
Xx xxxxxxxxxxx případech xxxx být potřebné xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x době xxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
K xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx vzorky xxxxxxxxx xxxxxxxx technikami. Xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx třeba odpovědět xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx studií. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxx informace o xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x toxicitou xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx např. xxxxxxx účinků látky xx enzymy metabolického xxxxxxx, sledováním xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - SH xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx doplněných xxxxxxxxx znázorněním.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu xx xxxxxx xxxxxxx x charakteristiky variability xx xxxxxx k xxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx metabolických xxxxxx xx měla být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x navrženy xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx by zpráva x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx podmínky, xxxxxx,
- charakteristika xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx dávky x xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx(x) podání x xxxxxxx použitá vehikula,
- xxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx testované látky x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- tabulky xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxx, tkání a xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx čase,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx,
- metody xxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,
- navrhované xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Při xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx vzít x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx zjištěn v xxxxxx studiích toxicity. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx testovány touto xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx vitro xxxxx xxx použity pro xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx vyvolat pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx vitro xxxxxx xxxx není xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx skupiny látek xxxxxxxxxx x názvu xxxx metody jako "xxxxxxxxx sloučeniny fosforu" xxxxx elektricky xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, thiofosfonových xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx látky, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, pozorovanou u xxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx neurotoxicita xx syndrom xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, změnami v xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x xxxx inhibicí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx esterase) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Referenční xxxxx xxxx být xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupině k xxxxxxx, že v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx druhů xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx neurotoxickým xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, xxxxxxxx název: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx fosforečné, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (XXXX).
1.4 Xxxxxxx testovací metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx se po xxxx 21 xxx xxxxxxxx, zaznamenává se xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx inhibice XXX, xx xxxxxxx x xxxxxx náhodně xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxx xxxxx. 21 xxx xx xxxxxx látky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx léčby x x xxxxxxxx chůzí xx xxxxxxx xxxxxxx xx experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx dostatečně xxxxx klece xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx pozorování chůze.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx orálně xxxxxx, xxxxxxxxxxxx tobolkami xxxx xxxxx srovnatelnou xxxxxxx. Xxxxxxxx xx podávají xxxxxxxx xxxx rozpuštěné xx vhodném xxxxxxxx, xxxx xx např. xxxxxxxxx olej, xxxxx xx doporučuje rozpustit, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx látek v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx by xx nemusely xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.6 Experimentální xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx kura xxxxxxxx (Xxxxxx gallus xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx plemena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx volný xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx testovací skupiny xx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx x vehikulem, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.
V xxxxx skupině má xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx aspoň xxxx z xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx prvý x xxxxx den xx xxxxxx) a xxxx přežilo 21xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx souběžně xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Má xxx xxxxx šest xxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx látka vyvolávající xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx určeny xxx biochemii x xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx prvků testu (xxxx. plemeno, potrava, xxxxxxxx xxxxx).
1.6.1.3 Volba xxxxx
Má xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx x různých xxxxxxxx dávek, xxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, která xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx úmrtnost xx x této xxxxxxxxx studii xxxxxxxx xxx stanovení přiměřené xxxxx v xxxxxx xxxxxx. Aby se xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxx jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, x kterém xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x pozdními xxxxxxxxxxxxxx účinky. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx typů xxxxxxxxxxx xxxxx (viz xxxxxx B.1 bis). Historické xxxxx xxx slepice nebo xxxx toxikologické informace xxxxx být xxxx xxxxxxxxx při výběru xxxxx.
Xxxxxx dávky xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxx x přihlédnutím x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx výběru xxxxx x hornímu xxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Případné xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx (xxxx) a xx 21 xxxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx přípravek, o xxxxxx je xxxxx, xx neinterferuje x xxxxxxxx neurotoxickými xxxxxx, xx má xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx cholinergními účinky.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx s dávkou xxxxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti, za xxxxxxx xxxxxxx popsaných xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx strukturou xxxx xxxxx xxxxxxxx očekávat, xxx není xxxxx xxxxxxxx o xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Limitní xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx naznačuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx je 21 xxx.
1.6.2 Popis xxxxxxx
Xx xxxxxxxx prostředku, xxxxxxxxxxxxx xxxx úmrtím xx následky xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx pozorují xxxxxxxxxx x xxxxxxx prvních xxxx xxx a xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 21 dní nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Veškeré xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx, včetně nástupu, xxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx chování. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stupnice x xxxxxxxxxxx se paréza. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vyjmou x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.6.2.2 Xxxxxxx hmotnost
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx před podáním xxxxxxxxx látky a xxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxxx v xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx mícha. Xx vhodné xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x analyzovat xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Běžně se xxxxxxxx xxx slepice x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupiny xx 24 xxxxxxxx x xxxxx tři xx 48 hodinách, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx klinických xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxx xx x organismu xxxxxxxx xxxxx pomalu (xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx xxxxxxx ze xxx xxxxxx, x xx mezi 24 xx 72 xxxxxxxx xx podání xxxxx.
X těchto xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx k podcenění xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x utracených xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx makroskopické xxxxxxxxx stavu xxxxx x míchy.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Nervová tkáň x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) se histologicky xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx se provádějí x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x lumbosakrální, x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx distální xxxx x x. xxxxxxxx (x jeho větve x m. gastrocnemius) x x n. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx barvivy xx myelin a xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxx) běžně xxxxxxxxxx xxxxx testování xx pozdní xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx údaje pro xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx chování xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nebo účinků x procento xxxxxx xxxxxxxxxxxx každý xxx x stupeň poškození xxxx xxxxxx.
Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx.
Číselné xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx x obecně xxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o xxxxxx xxxxxxxx tyto xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx zvířata:
- použité xxxxxxx;
- počet a xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx a homogenitě xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx;
- podrobné údaje x způsobu aplikace xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávek;
- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx látky;
- podrobné xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx;
- údaje x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx);
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky;
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, u xxxxxxx xx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX TG 418.
X.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX 28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx důležité xxxx x xxxxx schopnost xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx nemůže xxx zjištěn x xxxxxx xxxxxxxx toxicity. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Negativní nález x xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx považovat za xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x možném xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxxxx časového xxxxxx. Xxxxxxxx informace x závislosti odpovědi xx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxxxx. Tato xxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "organické xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx amidofosforečné xxxx xxxxxxxxxxx kyselin xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x některých xxxxx této xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx, distální xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x pozdním xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, a xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx specifické esterázy - XXX (neuropathy xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx tkáni.
1.3 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka se xxxxxx denně xxxxxx xxxxxxxx po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, zaznamenává xx xxxxxxxxxx chování, xxxxxx x paréza xxxxx 14 dnů xx xxxxxxxx dávce. Xxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xx poslední dávce xxxx zbývající slepice xxxxxxxx x je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání.
1.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx slepice xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx léčby x s xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zvířata chována x podmínkách xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou během xxxxxxxxxxx.
Používají se xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx xxxxxx umožňující xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx pozorování xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxx 7 dní x xxxxx, xxx xxxxxx, želatinovými tobolkami xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxx,
xxxx je xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx pevných látek x želatinových tobolkách xx se nemusely xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx nosičů xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxx zvířata
Doporučuje xx mladá xxxxxxx xxxx domácího (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx xx plemena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx se xx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Počet x xxxxxxx
Xx xxxxx použít nejméně xxx xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako s xxxxxxxxx.
X každé xxxxxxx má xxx xxxxxxxxxx xxxxx slepic, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (po xxxxx x xxxxxx xx dvou xxxxxxxx xxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx ukončení xxxxxxxx.
1.4.2.3 Xxxxx dávek
Dávkové xxxxxx se xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx studii, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x jestliže xxxxx xxxxx u xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx důvod xxxxxxxx očekávat, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx s xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxx potřebu xxxxxxx xxxxx vyšší xxxxxx dávky.
1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx pozorují nejméně xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx a 14 dnů xx xx, xxxx xx xxxxxxxx x xx xxxxx podle xxxxx.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxx dní x xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx začít xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Všechny xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx aplikace, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx příznaky toxicity xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx, stupně x trvání. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx na ně xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx podle nejméně xxxxxxxxxxxx pořadové stupnice, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx slepice xxxxxx x klecí x xxxxxxx nucené motorické xxxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x bolesti xx xxxxx vyloučit, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxx hmotnost
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxxxx xx usmrtí x prvních xxxxx xx xxxxxxxx poslední xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx NTE se xxxxxx mozek x xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx xxxx tkáň xx xxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx slepice x xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxx xxx po 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxx xxxxx z xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx usmrcení po xxxxxxxx aplikaci, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dobu x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx.
X těchto xxxxxx tkáně xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx může xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx AChE, xxx xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Xxxxx
Xxxxx xxxxx zvířat (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení xxxxx xxxxx a xxxxx.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx in xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (řezy xxxxx xx xxxxxxx x horní krční xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), z xxxxxxxxxxx nervů xx xxxxxxx distální část x x. xxxxxxxx (x xxxx větve x x. xxxxxxxxxxxxx) x z x. xxxxxxxxxxx. Řezy xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
Nejprve se xxxxxxx fixované xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a skupiny x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxx, provede xx histologické xxxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xx xxxxxx, které xxxxxxx dávku xxxxxxx x xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, histopatologie x xxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx, xxxxx se neprovádí xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx neurčité xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Uvádějí xx xxxxx xxx jednotlivá xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx biochemické xxxxxx, xxxx x xxxxxx těchto poškození xxxx xxxxxx a xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx a xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x korelaci mezi xxxxxxx chování, biochemickými x xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezy x xxxxxxx pozorovanými xxxx u testovaných x xxxxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x obecně uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx x době xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx a stáří xxxxxx,
- zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx atd.,
- hmotnosti jednotlivých xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx testování:
- xxxxxxxx údaje x přípravě, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxx vehikula,
- xxxxxxxx údaje o xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxxxx vybrané xxxxxx dávek,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávek, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx jiná xxx 24 a 48 xxxxx.
Xxxxxxxx:
- údaje o xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx podle xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, stupeň a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx vratných nebo xxxxxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxx biochemických vyšetření x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- podrobný xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx to xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Interpretace
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx s metodou XXXX XX 419.
B.39. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx XXX Synthesis (XXX) Xxxx With Xxxxxxxxx Liver Xxxxx Xx Vivo (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx DNA xxxxxxxxx, XXX) v xxxxxxx xxxxxxxxx buňkách xx xxxx je xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx reparaci XXX x jaterních xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (1) (2) (3) (4).
Xxxxx xxxx xx vivo xxxxxxxxxxx xxxxxx pro zjišťování xxxxxxxxxxxxx xxxxxx chemických xxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx následnou reparaci. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx metabolismu xxxxxxxxxxxxx sloučenin; jsou xxxxx vhodným xxxxxxxx xxx xxxxxxx poškození XXX xx xxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxx tkáně xxxxxxxxx, xxxx xxxxx test xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (XXX) xx xxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx značených nukleosidů x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx plánovanou (X-xxxx) xxxxxxxx DNA. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, při xxxxx se autoradiograficky xxxxxxx thymidin xxxxxxx xxxxxxx (3X-XxX). Pro xxxxx UDS in xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx játra. Xxxx xxxxx xxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx použít, xxxxxx však xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxx xxxx XXX, xxx xxxx v xxxxx poškození xxxxxxxxxx x nahrazeny. Xxxxx xx xxxxxx UDS xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx látky xxxxxxxxxx "shortpatch xxxxxx" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Xxxxxx odpovědi XXX xxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxx xxxx sice x XXX xxxxxxxx, ale xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx excizním xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, že XXX xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx poskytuje xxxxxxxx v celém xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Buňky x reparaci: net xxxxxxx xxxxx (XXX) xxxxx xxx určitá, xxxxxx stanovená hodnota, xxxxxx xxxxxxxx laboratoř xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxx xxxxxxx grains (XXX): xxxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxxxxx buněk xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx xxxxxx xxx x jádře (XX) x průměrným xxxxxx xxx x cytoplasmě (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x následně xxxxxxxxxxx xx xxxxx x kultuře, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx apod.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx DNA xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx syntéza XXX po xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX obsahujícího xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx xxxx fyzikálním xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx XXX x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx excizi x xxxxxxxxxx segmentu XXX xxxxxxxxxxxx oblast xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx vychází obvykle x xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx DNA jaterních xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x interferenci x xxxxxxx v X-xxxx, xxxx xx např. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx potkani, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx dospělých xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx a u xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu jsou xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x části X.
Xxxxxxx xx xxxx být 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jedinci xx náhodně xxxxxxx xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x laboratorních podmínkách. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx tak, aby xx minimalizovaly případné xxxxx toho, xxx x kde xxxx xxxxx umístěny.
1.4.2.2 Testovaná xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx a xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx mohou podávat xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.3 Podmínky xxxxx
1.4.3.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx možné, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx vodné xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx každé pohlaví xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozitivní kontroly xx xxxx xxxxxxxxx XXX při xxxxxxx, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx středně xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx byly xxxxxx xxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátu. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxx xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
odběr x xxxxxxxxx (2-4 hodiny) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx v xxxxxxxxx (12-16 hodin) | X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx xxxxxx x jiné xxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx podávána testovaná xxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx jedinci. Xxxxx xxxxxxxx historická xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx jeden, nebo xxx jedinci.
Pokud x době, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx s xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx test, xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx nejsou x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pouze xx jednom xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jak je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podává jednorázově.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx dvě xxxxx xxxxx. Nejvyšší xxxxx je definována xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx vyšší xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx by xx xxxxxxxx letální účinek. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.
Látky, jež x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxxxx údaje nejsou x xxxxxxxxx, je xxxxx ji realizovat x xxxx xxxxxxxxxx x za xxxxxxx xxxxxxxx živočišného xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx pak xxxxxxx x xxxxxx studii.
Xxxx xxxxxxxx dávku xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx test xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxx x jedné xxxxx xxxx ve xxxx dávkách x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxx úplná studie. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x limitním xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx i jiné xxxxxxxxx cesty. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx by xx xxx xxxxx xxxxx vystavit působení xxxxxxxxx xxxxx přímo, xxxxxx krevním oběhem. Xxxxxxxxx objem kapaliny, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx velikosti pokusného xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek, xxx xxxxxxxx vykazují při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, aby objem xxx ve xxxxx xxxxxxxxx úrovních stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx jaterních xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx x pokusných xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 12 - 16 xxxxx po xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 hodiny po xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx xx 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx reakce xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxx x jiné xxxx odběru vzorků, xx-xx to xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jaterních buněk xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx disociované xxxxxxx buňky mohly xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Jaterní buňky xx xxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx savčí xxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxx dobu (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x médiu xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xx potom xxxxx xxxxxxxxx v xxxxx obsahujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Buňky xx xxx xxxxxxx, xxxxxx x vysuší. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx intervalech xxxxxx xx "xxxx xxxxx" provádět. Xxxxxxx x preparáty xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, exponují ve xxx (xxxx. xx xxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), vyvolají, xxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx stříbrná xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxx tři xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Mikroskopické preparáty xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx buněk s xxxxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (např. pyknóza, xxxxxxx xxxxxx radioaktivního xxxxxxx).
Preparáty xx xxxx xxxxxxxxx zrn xxxxxxxx. Xxxx na xxxxxxxxx dvou preparátech x každého xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 buněk; xxxxx xx buněk xxxx xxx 100 xx xxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxx xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x X-xxxx, ale xxxxx buněk v X-xxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxx x cytoplazmy x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxxxx zrnek.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Výsledky xxxxxxxx údaje z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx data shrnou x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx dávku x xxx se xxxxxxx xxxxx počet "xxxxxxx xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx XX xx xxxxx XX. Počítají-li xx "xxxxx v xxxxxx", xxxx být xxxxxxxx, kterými xx xxxx buňky xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, je xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxx pozitivní/negativní xxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxx | (X) hodnoty XXX xxx xxxxxx xxxxxxxxxx prahem, zdůvodněným xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx dané xxxxxxxxxx | |
xxxx | (II) xxxxxxx XXX významně xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxx | |
negativní | (X) xxxxxxx XXX na xxxxxx/xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x kontrol | |
xxxx | (XX) hodnoty XXX xxxxxx signifikantně xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx. |
Xx xxxxx xxxxxx biologickou významnost xxxxxxxxx dat, xxx xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxx x xxxxx parametry, xxxx xxxx variabilita xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx statistické metody; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx být xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx faktorem.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx poskytuje jednoznačné xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Xxxxxxxxx výsledek testu XXX xx savčími xxxxxxxxx buňkami in xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka vyvolává x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx vivo xxxxxxxxx XXX, xxxxx xxx opravit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx XXX, xxx je tímto xxxxxx zjistitelné.
Xx xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx určitou xxxxxxx tkáň (např. xxxxxxxxx toxicita).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx tyto informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x pohlaví xxxxxxx,
- původ, xxxxxx podmínky, strava xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx xxxxxx xxx určení rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx i xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, že se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx oběhu nebo xx xxxxxx tkáně,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí jako xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx v xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx nuclear xxxxxx" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxx toxicity,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek,
- počet "xxxxx x opravě", byl-li xxxxxxxx,
- počet xxxxx x X-xxxx, xxx-xx stanoven,
- xxxxxxxxxxxxxxx buněk.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Metoda X.39. byla xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.40. LEPTAVÉ XXXXXX XX KŮŽI
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Xxxxxx xxx xxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, XXXXX, Xxxxx Research Centre, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) schválilo xxxxxxx xxxxxxx validní xxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx kůži: xxxx na xxxxxxxx xxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx lidské xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, xx xxx testy xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x neleptajícími xxxx. Xxxxxx xxxx vycházející x modelu xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (známé xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kůže X35, x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, X34). Xx uveden xxxxx a xxxxxxx xxxx xxxxx; xxxxx xxxx oběma testy xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a na xxxxxxxxxxxx uživatele.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx nevratného xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 PRINCIP XXXXXX - TEST XXX XX XXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx se nanese xx xxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx odebrané z xxxxxxx xxxxxxx utracených xxxxxxxx způsobem. Látky, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx schopnosti xxxxxxx xxxxxxxx integritu x bariérové xxxxxx xxxxxx corneum.Tato schopnost xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu (TER) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (jejichž xxxxxxxx viz x xxx. (6)) xx xxxxx xx zkušebního xxxxxxx zařadit xxxx xxxxxx barviva, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxxx typů xxxxxxxxxx xxxxx vyskytují (2) (7).
1.5 XXXXX XXXXXX - TEST TER XX XXXX XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx terčíků xxxx xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx nebo srovnatelný xxxx. Malými xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx odstraní xxxx x xxxxxxxx x xxxxx plochy. Zvířata xx pak xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx antibiotika, xxxxxxxxx streptomycinu, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxx inhibujících xxxx xxxxxxxx. Třetí xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx 3 xxx xx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx kožních vzorků xxxxxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx terčíků xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx usmrtí, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xx se xxxxxxx sloupne xxxxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) trubice, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx konec xxxxxxx xx xxxxxxxx gumový X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx tkáň xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x O-kroužku xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx xx pak xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx TPFE trubice xxxxxx vazelínou. Xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx hořečnatého (154 xX), xxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sponou (xxx. 2).
1.5.3 Popis xxxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx povrch xxxxxx xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx ve xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxx v xxxxxxx množství, xxx xx pokryl xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, na xxxxxx látky xx xxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx vody a xxxxxxxxx xx jemně xxxxxxx. Testovaná látka xxxx xxx x xxxx maximální xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx zahřátím xxxxx xx 30 xX, aby xx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx tři xxxxxxx pro každou xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx dobu 24 xxxxx (viz xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx 30 xX tak xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Odstranění xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx v xxxxxxx ztuhla, xx xx xxxxxxxx vymýváním xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx zhruba 30 xX.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpor (XXX) xx měří pomocí xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx proud (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Před xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx povrchové napětí xxxx přídavkem dostatečného xxxxxx 70% ethanolu, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx několika xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx otočí, x xxxx xx xxxxxxxxx přídavkem xxx xxxxxxxxx 154 mM xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx na obě xxxxxx kůže x xxxxx xx odpor x xΩ/xxxxxx (obr. 2). Rozměry xxxxxxxx x délku xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obr. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx XXXX trubice xxx, xxx xxxx xx xxxxxxx síranu hořečnatého xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xx dně. Xx xxxxx dodržovat xxxxxxxxxx vzdálenost mezi xxxxxx xxxxxx pružinové xxxxxx x xxxxxxx XXXX xxxxxxx (xxx. 1), xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx naměřený xxxxx vyšší xxx 20 xΩ, xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx překrývá xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíku kůže. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx tak, xx se PTFE xxxxxxx xxxxxx palcem x rukavici x xxxxxx 10 xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx x měření xxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx akceptována, pokud xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx leží v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx akceptovatelná xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 M xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
10 – 25
|
1.5.3.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx povrchově aktivní xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Pokud xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látek (detergentů) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx hodnota TER xxxxx xxxx xxxxx 5 kΩ, lze xx této xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) barviva. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x odstranění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx prvotním xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx na xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx na 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxx zhruba xx xxxx 10 sekund xxxxxxxxx xxxxxxx proudem xxxxxxxxx vody, xxxxx xx xxxxxxx pokojovou xxxxxxx. Tím xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) barvivo. Xxxxx xxxxxx xxxx xx xxx opatrně sejme x XXXX trubice x uloží xx xxxxxxx (xxxx. xx 20 xx xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx xxxx. Nádobky xx po dobu 5 xxxxx xxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (nenavázaného) xxxxxxx. Xxxxx oplach xx xxxxxxx. Pak xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx nádobek x 5 ml 30 % (w/v) xxxxxxx dodecylsulfátu xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx, kde xx xxxx xxx inkubují xxx xxxxxxx 60 xX. Xx inkubaci xx terčíky vyjmou x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx roztok se xxxxxxxxxx po xxxx 8 minut xxx xxxxxxx 21 oC (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Vzorek 1 ml xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX v xxxxxxxxxxx vodě v xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx SDS). Xxxxxxx xxxxxxx (OD) xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx obsahu xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x terčíku xx xxxxxxxx x xxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx sulforhodaminu B xxx 565 nm xxxx 8,7 . 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Obsah xxxxxxxxxxxxxx X se xxxxxxxx xxx každý xxxxxx kůže xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx hodnota. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx spadají xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahu xxxxxxx se u xxxxxxxxxxx látek při xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx uspořádání považují:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (mg/terčík)
|
|
Pozitivní
|
10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
|
Negativní
|
destilovaná voda
|
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx možné xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx (např. 2 xxxxxx) xx xxxxxx xxxxxxxxx silně xxxxxxxxxxx látek. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek aplikovaných xx xxxxxxx kůže xx 2 hodiny (2), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx identifikaci xxxxxxxxxxx x neleptajících xxxxx xx 24hodinovém působení.
Získané xxxxxxx XXX xxxxx xxx ovlivněny vlastnostmi x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx 5 xΩ byla xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx získaných xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx postupu xxxxxxxxx xxx. Pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx výrazně xxxxxxx, xxxxx by být xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metodiku x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx řady referenčních xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxx byly xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 XXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX - XXXX S XXXXXXX XXXXXX XXXX
Xxxxxxxxx materiál xx xxxxxx topicky xx dobu xx 4 hodin xx xxxxxxxxxxxx model xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx materiál xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pokles životnosti xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx "MTT xxxxxxxxx xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx tetrazolium xxxxxx) pod xxxxxxxx xxxxxxx definovanou xxx xxxxx expoziční xxxx. Xxxxxxx testu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx ty, xxxxx xxxxxx proniknout xxxxx stratum xxxxxxx (xxxxxx nebo xxxxx) x jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxx vrstvách.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx lidské xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx zachována. Xx xxx prokázat xxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x nichž xx známo, xx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx však xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xx definovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vykazovat xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx živých xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxx, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx. Xxxxxxxxx buněk (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xx. XX hodnotou) po xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx negativní kontrola xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx látky xxx pozitivní kontrolu (xx srovnání x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx mezí. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx predikční xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx, nanese se xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx pevná, xxxxxx xx tak, xxx xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx se xxxxxx, xxx xx s xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. Pokud xx xx xxxxx, xxxxx xxxxx xx před xxxxxxxx roztírají na xxxxxx. U metody xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx, xx je xxxxxx xxx široký xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx doby xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Měření xxxxxxxxxx xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se dá xxxxxx jakákoliv validizovaná xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxxxx XXX, x které xxxx prokázáno xx x xxxxxxx laboratořích xxxxxxxxx přesné x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx se xx dobu 3 xxxxx ponoří xx xxxxxxx MTT x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20 - 28 xX. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se pak xxxxxxxxx (xxxxxxxx rozpouštědlem) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XX xxx vlnové xxxxx 545 a 595 nm.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx kůže x xxxxxx dodržení xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xx metodu x xxxxxxxxx model okalibrovat xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx metoda xx použití xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx mezinárodních standardů xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx dříve (2) x xxxxxxxx xxxxxx validizační xxxxxx xxxx xxx zveřejněny x takovém vědeckém xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 ZPRACOVÁNÍ VÝSLEDKŮ
1.8.1 Xxxx TER xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odporu (x xΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x z xxxx xxxxxxxx klasifikace.
1.8.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx OD x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x x xxxx xxxxxxxx klasifikace.
1.9 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE VÝSLEDKŮ
1.9.1 Xxxx TER xx xxxx potkana
Pokud je xxxxxxxx xxxxxxx TER xxx testovaný xxxxxxxx xxxxx než 5 xΩ, xx látka xxxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxx nebo xxxxx 5 kΩ x nejedná se xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx leptavé xxxxxx xx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek, xxx xxxxxxxxx hodnoty XXX nepřesahující 5 xΩ, lze provést xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxx xxxxx průměrnému xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx souběžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x 36 % XXx, je testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxx, kdežto xx-xx xxxxx xxxxxxx x terčíku menší, xx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx.
1.9.2 Test s xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX pro negativní xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxx XX xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx vypočte xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx procentický xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxx odděluje xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, než xx xxxxxx validována, x následnou validační xxxxxx xx musí xxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx je třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- identifikační xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx se xxxx údaje x xxx ně.
Podmínky xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx případných xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (test XXX) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (test x modelem xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx, x to xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;
- popis všech xxxxxx xxxxxxxxxxxx efektů.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2
Xxxxxx X.40. xxxx vložena xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX FOTOTOXICITY 3X3 XXX XX VITRO
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), x xxx dochází, xx-xx xxxx poprvé vystavena xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxx, nebo xx-xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx podání xxxxxx látky.
Informace získané x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxx, zda xxxx xxxxx xx spojení x xxxxxxxx ultrafialovému x xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxxx možné nebezpečí xxxx nikoli.
Toxikologickým xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x světla, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx po xxxxxxx aplikaci a xxxxxxxxxx x xxxx, x sloučeniny, jež xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx pokožku.
Test xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx byl vypracován x xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx alternativa xx xxxxx vůči xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. V xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx následných in xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx porovnávány s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx u xxxxxx x xxxx x xxxx zjištěno, xx tento xxxx xx xxx uvedené xxxxxx xxxxxxxxxx predikční xxxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx k xxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx účinky, jež xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx fotogenotoxicita, fotoalergie xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxx xxxx látek xxxx xxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx fototoxicity x xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: intenzita xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; xxxxxx ve X/x2 xxxx v XX/xx2.
Xxxxx světla: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx viditelného (VIS) xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx, vyjádřené v xxxxxxx (= W x x) xx xxxxxxxx povrchu, např. X/x2 nebo X/xx2.
Xxxxx xxxxxxxx délek ultrafialového xxxxxx: xxxxx doporučení XXX (Commission Xxxxxxxxxxxxx xx L'Eclairage) xx xxxxxxx xxxxxxxx UVA (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 nm). Xxxxxxxxx xx i xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx xxxx xxxxx XXX x UVB xx často xxxxxxxx 320 xx a XXX xx xxxxx xxxx na UV-A1 x UV-A2 x xxxxxxx zhruba x 340 nm.
Životaschopnost (viabilita) xxxxx: parametr, kterým xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. příjem xxxxxxx xxxxxxxxxxxx živou xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx lysozomů), jež xxxxx xxxxxxxxx měřených xxxxx testem x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x celkovým xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (vitalitou) xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx testu (xxx + UV xxxx - XX), xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
Predikční xxxxx: xxxxxxxxxx, kterým xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxx metodickém návodu xxx test xx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx PIF x XXX.
XXX (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, fotoiritační xxxxxx): xxxxxxxxxx představující xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) testované xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx (-XX) a v xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
XXX (mean xxxxx xxxxxx, střední xxxxxxxxx): xxxx míra xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx průběhu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+XX) necytotoxického XXX/XXX xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx: akutní xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), xxxxx vzniká xx xxxx xxxxxxxx kůže xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx expozici xxxx xxxxxx, nebo xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ozářením kůže xx systémovém podání xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx fototoxických reakcí, x xxxx xxxxxxx x xxxx poté, xx xx ni xxxxxx (xxxxxxx nebo xxxxxx přijatá) xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx imunologická xxxxxxxxxx, která xx xxx prvním xxxxxxxx xxxxx x světla xxxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxx jednotýdenní xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx k tomu, xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (odezva) s xxxxxxxxxxx xxxxxxx, ke xxxxx xxxxxxx xxxx, xx byly xxxxx xxxxxxxxx negenotoxické dávce XX/XXX záření x xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx aplikací xxxxxx a látky. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, mluvíme x fotokokarcinogenitě.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX doporučuje použít xxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x látek, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx porovnávání xxxxxx testu (1) (3) (13).
1.4 XXXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), jejichž xxxxxxx společným rysem xx xx, xx xxxxxx absorbovat světelnou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx zákon) xxxxxxxx xxxxx fotoreakce xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx by xx xxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxxx stanovit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x XX/XXX xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx OECD x. 101). Xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x xx-1, nemá xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x není xxxxx xx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro, xxx xxxxxx xxxxx biologickým xxxxxx (xxx xxxxxxx).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx absorpce xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx vyústit xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7), xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxx xx porovnání xxxxxxxxxxxx xxxxx testované x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx necytotoxické xxxxx XXX/XXX xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxx tomto xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vitálního xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx (neutral xxx, XX) (9), 24 xxxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx x ozařování.
Buňky Xxxx/x 3X3 se xxxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx xxx, xxx xx vytvořila xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx látku xx preinkubují xxx xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x látkou x xxxx různých xxxxxxxxxxxxx po xxxx 1 hodiny. Jedna x xxxx destiček xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UVA/VIS záření x xxxxx 5 X/xx2 XXX (+XX xxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X obou xxxxxxxxxx xx pak xxxxxx xxxxxxx xxxxxx kultivačním x po xxxxxxx 24 hodinách xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (neutral xxx uptake, XXX) xx xxxx 3 xxxxx xxxxxxx životaschopnost xxxxx. Xxx xxxxxx x osmi xxxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxx procento xxxxxx x negativních kontrol. X xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx xx porovnají xxxxxxxxxxxx xxxxxxx reakce xxxxxxx v xxxxxxxxxxx (+XX) x x xxxxxxxxxxxxx (-UV) záření, xxxxxxx xx úrovni XX50, xx. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx o 50 % x porovnání x xxxxxxxxxx bez xxxxxxxxx.
1.6 XXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx záření XXX, historické xxxxx: x xxxxx xx xxxxx pravidelně provádět xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx, xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX x xxxxx 1 - 9 J/cm2 x xxxxx den se xxxxxx XXX stanoví xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx2 xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx. Xxx xxxxxxxx dávce XXX záření 9 X/xx2 xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx zhruba xx každé xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vůči xxxxxx UVA, xxxxx xxxx: test splňuje xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx roztoku [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx solution, XXXX] x 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo xxxxxxxx (XxXX) nebo xxx xxxx vykazují x xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx experimentu v xxxxx (-UVA).
Životaschopnost xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx optická xxxxxxx (OD540 NRU) xxxxxx x XX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, zda xxxxx 1 x 104 xxxxx nasazených x xxxxx xxxxx rostlo xxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Test xxxxxxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx průměrná hodnota XX540 NRU x xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxx xxxx rovna 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: při xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xx xxxxx xxxxxxx souběžný xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx jako xxxxx xxx pozitivní kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXX); xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxx definována xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: CPZ xxxxxxx (+UVA): EC50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-XXX): EC50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Fotoiritační xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx xxxxxxx XX50, xx xxx xxxxxxxxx 6.
Xxxxx XXX xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x XXX xxxx XXX (střední xxxxxxxxx).
1.7 XXXXX XXXXXX
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx byla xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx fibroblastů Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x xx xxx x XXXX xxxx x XXXXX; xx xx xxxxx doporučuje. Xxxxx xxxxxxxx protokolu xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx i xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx kultivační xxxxxxxx xxxxxx xxxxx jejich xxxxxxxxxxxx potřeb; xx xxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.
X xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, x smí xx xxxxxx xxx x xxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx UVA záření xxxx x xxxxxx xxxxxx narůstat, je xxxxx používat xxxxx Xxxx/x 3X3 x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx možno xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx buněk Xxxx/x 3X3 xxxx XXX xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx postupem kontroly xxxxxxx popsaným v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxx x XXXX xxxxxxxxx 10 % séra xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, penicilinem a xxxxxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx teplotě 37 oC / 7,5 % XX2. Xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozmezí xxx xxxx buňky xxxx. buněčnou xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx ze xxxxxxxxxx zásobních xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiu a xxxxxxxxx jednou xx xxxx použitím v xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx x takové xxxxxxx, aby na xxxxx xxxxx (tj. xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx xx xxxxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). V xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx v destičkách x 96 jamkami xx xxxxxxxxxx hustota 1 x 104 xxxxx x jedné xxxxx.
Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxx celým xxxxxxxx za identických xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, kdy xx xxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx (+UVA/VIS) x xxxxx je xxxxxxxxxx v xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx genotoxického xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx požadavkem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, není x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx x xxxx, aby xxxxxxxx xxxx fotoxin in xxxx xxxx in xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Nepokládá xx xxxxx ani xx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx prováděl x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.1.5 Testovaná xxxxx / příprava
Testovaná xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxx stabilitě prokazují, xx xx dá xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx k xxxxxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx pod červeným xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (EBSS) nebo xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, XXX), xxxxx - xxx xxxxxxx dojít x xxxxxxxxxxxx během xxxxxxxxx - xxxxx obsahovat xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xX, pohlcující xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stonásobně xxxxx, xxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) ve xxxxx xxxxxxxxx, tj. ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx testované xxxxx x x xxxxxxxxxxx kontrolách.
Jako rozpouštědlo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxx (XxXX). Vhodná xxxxx xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx x nízkou xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx aceton, xx však xxxxx xxxx pečlivě zvážit xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx fototoxického xxxxxx xxxx vychytávání xxxxxxxx.
Xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx se xxxxxx xxxxxxx resp. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx ohřev xx 37 xX.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx v XXX x xx xxxxxxxxx oblasti xx xxxxxxx spojováno x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx XXX xx v tomto xxxxx méně xxxxxxxxxx, xx xxxxx vysoce xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xx 313 xx x 280 xx xxxxxxx tisícinásobně. Xxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx zásadní požadavek, xxx emitoval vlnové xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xxx byla xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx xxxx) postačující xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém - xxxxx xxx x xxxxxxxxxx tepla (infračervená xxxxxx).
Xx xxxxxxxxx světelný xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Jako xxxx xxxxxxxxxx xx používají xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx (xxxxxxxxxxx) rtuťové xxxxxxxxxx výbojky - xx xxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxx a xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx však xxxxxxx xxxx. Jelikož xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxx XXX, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx xx fototoxicitu 3X3 XXX xx xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, kde xx složka XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Příklad xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU in xxxxx je x xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (iradiance) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx fototoxicity xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, který xxxx být kalibrován xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx UV-metru xx xxxxx kontrolovat, k xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Ideální xx, když xx x delších xxxxxxxxxxx xxxx spektrální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx širokopásmového XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx validační xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx XXX xxxxxx 5 J/cm2 je xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx nastavena xx 1,666 mW/cm2. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx světla, xxxx se dávka xxxxxx XXX xxxxxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx x průkazu xxxxxxxxxxxx fototoxinů. Doba xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxx xxxxxx (X/xx2) x 100
|
&xxxx; |
| &xxxx;
x (min) =
|
&xxxx;
________________________
|
&xxxx;
(1 X = 1 X s)
|
|
záření (xX/xx2) x 60
|
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx fototoxické xxxxx xxxx detekovány xxx koncentracích xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx četnost xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Xxxxxxx xX xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx přijatelná (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx koncentrací testované xxxxx xxx použití xxxxxx (+XXX) x xxx xxx (-XXX) xx xxxxx stanovit x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rozsah a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx zvolí tak, xxx křivky závislosti xxxxxxxxxxx - odezva xxxx dostatečně podloženy xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (s konstantním xxxxxxxx ředění).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx den
Připraví xx xxxxxxxx 1 x 105 buněk/ml x xxxxxxxxxxx médiu. Xx xxxxxxxxxxx jamek 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= slepý xxxxx), do ostatních xxxxx xx xxxxxxx xx 100 μl xxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx (= 1 x 104 xxxxx na xxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx destičky - xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX), xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx se xxxxxxxx xx dobu 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX), xxx se vytvořil xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Druhý xxx
Xx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX xx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx 100 μx EBSS/PBS xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxxxxx koncentraci nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx (negativní xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx přidává x xxxx xxxxxxxxxxxxx. Buňky x testovanou xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxx 60 xxxxx (7,5 % CO2, 37 xX).
Xxxx xxxxx s XXX (+XXX) xx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu 50 xxxxx skrz xxxxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx UVA x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / xx2). Xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-XXX) xx xx xxxx 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) uchovávají xx pokojové xxxxxxx x temném xxxx.
Xxxxxx xx odstraní x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Poté xx xxxxxx kultivačním xxxxxx x přes xxx (18 - 22 xxxxx) se xxxxxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx způsobené xxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx experimentální xxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx nepoužijí.
Test xxxxxx xxxxxxxxx červeně (XX)
Xxxxx xx promyjí objemem 150 μx xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Promývací roztok xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μx xxxxx x NR a xxxxxxxx xx při 37 xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % CO2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx xx xxxxxx x NR xxxxxxxx x xxxxx xx promyjí xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx xxx xxxxx x důkladně xxxxxxxx (xx xxxx xxxxx destičky zcentrifugovat x xxxxxxxx poloze).
Přidá xx xxxxxx 150 μx roztoku xx xxxxxxxx XX (čerstvě xxxxxxxxxx xxxx ethanol/kyselina xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx třepou xx třepačce, xxxxx xx XX x xxxxx nevyextrahuje x xxxxxxxxx xx homogenní xxxxxx.
Xx spektrofometru se xxxxx optická xxxxxxx xxxxxxxx NR při 540 xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx srovnávacího roztoku. Xxxxx se uchovají xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx musí umožňovat xxxxxxxxxxx analýzu xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx při aplikaci XXX/XXX xxxxxx a xxx xx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx x postup xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx, aby xx experimntální xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxx až xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl/ml x xxxxxxxxxxx xx xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) vysoce xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxx, xx se xxxxxxxxxxxx rozsahy x xxxx částech experimentu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, aby xxx xxxxxx požadavek xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Pokud xxxx cytotoxicita xxxxxxxx x xxxxx x xxxx částí xxxxxxxxxxx (xxx xxx -UVA, xxx při +UVA), xxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx až xx nejvyšší koncentrace.
Jsou-li xxxxxxxx hraniční - xxxxxx dělicí čáry xxxxxxxxxxx modelu - xx xxxxx test xxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podmínky, xxx xx xxxxxxx jasného xxxxxxxx. Klíčovou proměnnou x xxxxx xxxxx xx příprava xxxxxxx xxxxxxxxx látky, nejvhodnější xxx xxxx opakování xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Xxx také xxxxxxxx x změnách xxxxxxxxx doby xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx jsou xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x 50 % inhibici xxxxxxxxx xxxxxx XX (EC50). Xx xxx učinit xxx, že xx xx data xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx regrese (nejlépe Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) nebo xx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Než xx xxxxxxx EC50 xxxxxxx xxx další xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. K xxxxxxx xxxxxxx XX50 xx xxxx možno xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx případě xx doporučuje použít xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxx x: xxx, xxx x: xxxxxx), xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva mnohdy xxxxx lineární.
1.10 VYHODNOCENÍ XXXXXXXX (PREDIKČNÍ XXXXXX)
1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx xxx xx přítomnosti (+XXX), xxx xx nepřítomnosti (-XXX) xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) PIF =
|
&xxxx;
____________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
XXX < 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx pouze při +XXX, kdežto xxx -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx XXX xxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xx vypočítat tzv. "&xx; XXX", když xx test xxxxxxxxxxxx (-XX) provede xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Cmax) x xxxx hodnota xx xxxxxx xx vzorce:
|
Cmax (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) &xx; XXX =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", xxx xxxxx hodnota > 1 xxxxxxxxxx fototoxický xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx se nedá xxxxxxxxx ani EC50 (-XX), xxx EC50 (+XX), xxxxxxx látka xxxxxxxxxx cytotoxicitu xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx to xxxxxxxx toho, xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx "PIF = *1", xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+XX)
|
Xxxxx xx dá získat xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", předpovídá xx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X případech (b) x (x) xx xxxxx xxx predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxx xxxxxxx.
1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: střední fotoefekt (XXX)
Xx možno xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, vypracovaného xx xxxxxxx dat x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) a xxxxxxxxxxxx xx podmínek xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx in xxxxx x xxxxx UV xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx modelu XXX v těch xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx hodnotu EC50. X xxxxx modelu xx xxxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxxx" (MPE) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx průběhu xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva. Xxx xxxxxxxx xxxxxx XXX xxx na Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx speciální xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx.
1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx MPE ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxx látka xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se k xxxxxx výsledku dojde xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx xxxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in xxxx. Xxxxx-xx xx pozitivní xxxxxxxx pouze xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (100 (x/xx), bude xxx posouzení xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx látky nejspíše xxxxxxxxx dalších xxxxxxxxx. Xxx mohou spadat xxxxxxxxx x penetraci, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx látky v xxxx, xxxx údaje x xxxxxxxxx xxxx xxxxx x jiném xxxxxxxxxxxx alternativním xxxxx, xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxx lidské xxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX < 5 xxxx MPE &xx; 0,1) xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxx xxx použité xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xx xx xxxxx dala xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a fotoxicita xx vivo se xx považovat za xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrační xxxxxxxxxx xxxxxxx reakce (EC50 + XX a XX50 - UV), xx xxxxxxxxxxxx dat xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx toxicita (+XX xxx -UV) x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xx xx zcela xxxxxx x xxxx xx xx xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx (například x xxxxxxxx xxxxxx kůže xx vitro nebo xxxxxx xxxx xx xxxx xxxx in xxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx údaje x číslo XXX, xx-xx známo,
- xxxxxxxxx xxxxxx x čistota,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx x provedení xxxxx xxxxxxxx,
- stabilita x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- rozpustnost xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx rozpouštědle,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- typ x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx pasáže, xx-xx xxxxx,
- citlivost buněk xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T XXX xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (a) - xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x po xxx:
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (koncentrace XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- doba xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xx x xx xx).
Xxxxxxxx pokusu (x) - xxxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx koncentrací xxxxxxxxx látky, které xx použijí x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx x xxx xxx,
- x případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x složení xxxxxxxxxx xxxxx (pufrovaný xxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (x) - ozařování:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx světelného xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (filtrů),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a podrobnosti x xxxx kalibraci,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx testovaného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx XXX (v x X/xx2) xxx xxxx vzdálenosti,
- xxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,
- xxxxx xxxxxx XXX (xxxxxxxxx x xxx) x X/xx2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx uchovávaných x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - test NRU:
- xxxxxxx xxxxx s XX,
- xxxx xxxxxxxx x NR,
- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- podmínky xxxxxxxx XX (extrakční xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx délka, xxx xxxxx xx spektrofotometricky xxxxxxxxx xxxxxxx hustota XX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (referenční), byla-li xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spektrofotometrii (xxxxxx), pokud byl xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená x xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxx životaschopnosti kontrol,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx νx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +XXX x -XXX,
- analýza xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx faktoru (XXX) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx negativní xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx denzita extraktu XX) xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-UVA) a XXX xxxxx použité xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx látky xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. byla xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx předpis x. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx dnem 1.1.1999.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx podchyceny xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x.:
208/2001 Sb., xxxxxx xx mění vyhláška XX x. 251/98 Xx., xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx - xxxxxx bude xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxx předpis x. 251/98 Xx. xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. s xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Znění xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx norem xxxxxx xxxxxxxx předpisů x xxxxxxxx xxxx aktualizováno, xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx právního xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 písm. x) xx x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx a chemických xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., na xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx x. 162/1993 Sb., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Xx. x x. 30/1998 Xx.
3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a rozvoj xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx xx xxxxxx (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx of Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Effects).