EPIS® Právní systém | Plné znění

Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.

Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Vyhláška

§1 §2 §3

Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod

B.1. Akutní toxicita orální (per os)

B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky

B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity

B.2. Akutní toxicita (inhalační)

B.3. Akutní toxicita (dermální)

B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)

B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)

B.6. Senzibilizace kůže

B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)

B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)

B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)

B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro

B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo

B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech

B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií

B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae

B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae

B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro

B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro

B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro

B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster

B.21. Test transformace savčích buněk in vitro

B.22. Dominantní letální test u hlodavců

B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích

B.24. Spot test u myší

B.25. Přenosné translokace u myší

B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)

B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)

B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)

B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)

B.30. Testování chronické toxicity

B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci

B.32. Test karcinogenity

B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity

B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test

B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test

B.36. Toxikokinetika

B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice

B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice

B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo

B.40. Leptavé účinky na kůži

B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro

INFORMACE

XXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx

ze xxx 16. října 1998,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 odst. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 157/1998 Sb., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:

§1

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemických látek x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, toxických, xxxxxx škodlivých, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxx xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx").¹⁾

§2

(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v příloze xxxx xxxxxxxx.

(2) Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx x jiné xxxxxx, pokud jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a reprodukovatelné xxxx xxxxxx uvedené x odstavci 1, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx²⁾ a metody xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx (XXXX).³⁾

§3

Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. ledna 1999.

Ministr:

XXXx. David, XXx. x. r.

Xxxxxxx x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.

Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků

X. XXXXXXXXX XXXX

1. ZÁKLADNÍ XXXXX

1.1 XXXXXX TOXICITA

xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxx určité xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx xxxxxx jedné xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2 XXXXXX TOXICITA

xx xxxxxxxxx termín xxxxxxxxxx xxxxx příznaky toxicity xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xx xxx xxxxxx, že po xxxxxxx podávané xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx těžkých xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.

1.3 DÁVKA

xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx vyjádřena xxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx jednotku xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti), xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx xx xxxxxx dílů xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx).

1.4 DISKRIMINUJÍCÍ DÁVKA

xx nejvyšší xx xxxx xxxxxxx dávkových xxxxxx, kterou je xxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx x xxxxxxx látkou.

1.5 XXXXXXXXX

xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, frekvenci x xxxxxxxx dobu xxxxxxxx.

1.6 XX₅₀ (STŘEDNÍ XXXXXX DÁVKA)

xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivá xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxxxxxx dobu xxxx 50 % xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx XX₅₀ xx xxxxx xxxx hmotnost xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx (xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx).

1.7 XX₅₀ (STŘEDNÍ XXXXXX KONCENTRACE)

xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx x 50 % pokusných xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx XX₅₀ xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx objemu xxxxxxx (xx.x^-1).

1.8 NOAEL

xx xxxxxxx xxx "xx observed xxxxxxx xxxxxx xxxxx" (hladinu xxx pozorovaného xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x xx xx nejvyšší v xxxxxx xxxxxxx dávka xxxx xxxxxxxxx koncentrace, xxx xxxxx xxxxxxxxx x zjistitelným xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.9 XXXXXXXX PO XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA

xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx xx objeví x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx opakovaného xxxxxxx podávání nebo xxxxxxxx chemické látce, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx úsek očekávané xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu.

1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX DOSE)

je xxxxxxxx xxxxx, která x zvířat xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxx, který xx xxxxxxxx.

1.11 XXXXXXXXXX XXXX

je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx změn xx xxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.

1.12 XXXXXXXXXX XXX

xx xxxxxxxx změn xx xxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxx.

1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)

xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx na testovanou xxxxx.

1.14 XXXXXXXXX XXXX

je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx od 3 xxxxx do 4 xxxxx.

1.15 TOXIKOKINETIKA

xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.16 XXXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx vstupuje xx xxxx.

1.17 XXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx z těla.

1.18 XXXXXXXXXX

označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) je xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x těle.

1.19 XXXXXXXXXXXX

označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) je chemická xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x těle xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxx počtu různých xxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 - B.5), xx xxxxxxx xxxx xxx po xxxxxx xxxxxxxx získán předběžný xxxxx xxxxxxxx.

X xxxxxxxxxx na toxicitě xxxxx lze xxxxxx xxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxx xx xx kompletní xxxxxxxxx XX₅₀. Pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx hodnotu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx metodám, xxxxx xxxxxxxxx co xxxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx metoda pevné xxxxx (xxxxxx B.1 xxx) a xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx (metoda X.1 xxxx). Při testování xx jednom druhu xxxx studie xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxx použito xxxxxxx počtu zvířat.

Xxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx aplikací (xxxxxx X.7, B.8 a X.9) xx posuzují xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx opakované xxxxxxxx. Důležité xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx co nejvíce xxxxxxxxx. Tyto testy xx měly pomoci xxxxxxx xxxxxx orgány xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx studií xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - X.30 x B.33).

3. XXXXXXXXXX - GENOTOXICITA

Xxxxxxxxxx xx vztahuje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx struktuře xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxx, blok xxxx xxxx celé xxxxxxxxxx. Účinky xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx projevovat změnou xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx.

Mutagenní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (bodové) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) anebo xx strukturální chromozómové xxxxxxx x savčích xxxxxxx (metoda B.10).

Xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx B.12) xxxx xxxxxxx metafáze xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (metoda X.11). Xx xxxx xxxxx dávat xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vitro xxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxx ve velkém xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x kontrolu xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx ještě další xxxxxx xx zjištění xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx vyšetření na xxxxxxxxxxxxx. Tyto studie xxx využít x xxxxxxxx xxxxxx: potvrzení xxxxxxxx získaných xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxxxx nezachycených xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx studií xx xxxx.

Xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx B.15 xx X.25 xxx eukaryontní xxxxxxx in vivo x xx vitro, xxx rozšiřují xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Tyto xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx mutacích x jiných xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx uvažované xxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx, případně karcinogenním xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky.

Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx daný případ, xxxx záviset xx xxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxxxxx bakteriálních a xxxxxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx látky.

Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx) mutacemi, xxxx. specifický locus xxxx x myší xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, např. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x myší (xxxxxx B.25). Xxxxxx xxxxx lze xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, zvláště xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx takovou xxxxxx jen na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx genotoxicity xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx protokolu xxxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xx projednání x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

4. XXXXXXXXXXXXX

Chemické látky xxxxx být xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx genotoxické xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxx na předpokládaném xxxxxxxxxx působení.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x genotoxickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx poskytují xxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx X.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zahrnují xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx tkáních, xxxxx by xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.32) xxxx často x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (metoda X.33).

X xxxxxxxxx xxxx rovněž xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx buněčných xxxxxx, u xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx souvislost x maligní xxxxxxxxxxxx - xx xxxx (xxxxxx X.21). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx pro transformaci.

5. XXXXXXXXXXX TOXICITA

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx způsoby, xxxx. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx (xxxx na xxxxxxxx) xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x účinky x xxxxxxx laktace.

Xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx X.31) xxx studie xxxxxxxx xx teratogenitu xxxx xxxxxxx vývojové xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx. Alternativně xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x závislosti xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx metodu xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx test (xxxxxx X.35) rozšířit xxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

6. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx neurotoxicitu xxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxx toxicity. Xxxx toxicity při xxxxxxxxx aplikaci (metoda X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx neurotoxického xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x neurotoxickým xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky, xxxxx xxxxxxx být xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx jisté xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx posuzována xxxxxxxx B.37 a X.38 xx jednorázovém xxxx xxxxxxxxxx podání xxxxx.

7. XXXXXXXXXXXXX

Imunotoxicita xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx imunitního xxxxxxx, xxxxx má xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx navozenou xxxxxxxxxxx. Test toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx B.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx imunotoxických xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx s imunotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

8. TOXIKOKINETIKA

Toxikokinetické xxxxxx pomáhají xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aspekty xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Nepředpokládá se, xx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx parametry. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx posloupnost toxikokinetických xxxxxx (xxxxxx absorpce, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). U některých xxxxxxxxx mohou být xxxxxx změny x xxxx xxxxxxxx nebo xx xxxx xxxxxx xxxx dostatečná studie x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx B.36).

Informace x xxxxxxxx xxxxxxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx také xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií.

9. XXXXXXXXXXXXXXX TESTOVANÉ XXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nečistot, x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx toxikologické xxxxxx.

Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x pro manipulaci x látkou x xxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxx pokud xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxxxxx médiu x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx předcházet xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx, fyzikálně-chemických vlastností, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx zahrnuty v xxxxxxxxx zprávě o xxxxx.

10. PÉČE X XXXXXXX

Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxx kontrola xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována, x správná péče x zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

10.1 XXXXXXXX CHOVU

Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxxx, myši x xxxxxxx xx vhodná xxxxxxx xxxxxxxxx 22 ^xX ± 3 ^xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx 20 ^xX ± 3 ^xX xxx relativní xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %.

Xxxxxxx experimentální xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx tyto případy xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uvedeny x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx je x uvést je x závěrečné xxxxxx x průběhu pokusu.

Xxxxxxxxx má xxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxx xx zprávě x xxxxxxx pokusu.

Xxxxx xxxxxx nevyžaduje jiný xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x malých xxxxxxxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 xxxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx zprávy x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx jsou xxxxx x způsobu chovu x xxxxxxx x xxxxx zvířat chovaných x jedné xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.

10.2 XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx všem xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx živočišný xxxx. Podávají-li se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, může xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx potravy. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx vzít x xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Používají xx xxxxxxxxx laboratorní xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x pitné xxxx. Pokud xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x potravě, xx xxxxx xxxx přizpůsobit xxxxx xxxxx.

Xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx prokazatelně xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, ve xxxxxxx xx se xxxxx xxxx xxxxxxxx.

11. XXXXXXX XXXXXX

Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ochraně xxxxxx.

Snížení počtu x omezení bolesti x xxxxxx xxxxxx xxx dosáhnout např. xxxxxxxx metody xxxxx xxxxx (B.1.bis) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx (B.1.tris). Xxxxxx s pevnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx menší xxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x 70 % xxxxxx xxxx xxx metoda B.1.

Xxxxxxx xx závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit; xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkách x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx v xxxxxxx xxxxxx toxicity (metody X.1, X.2 x X.3), ale xxxx x xx vivo xxxxxxx mutagenity (xxxxxx X.11 x X.12), xxxxxxxx vyhnout xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx, je-li xx xxxxxxxxxx vědecky xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx vědecké xxxxxxxxxx xxxx xxx založeno xx fyzikálně-chemických vlastnostech xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx již xxxxxxxxxxx xxxxx nebo na xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx in xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxx provedena studie xxxxxx kožní xxxxxxxx x xxxxxx používanou x limitním testu (xxxxxx B.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx kožní dráždivosti (xxxxxx X.4) může xxx xxxxxxxx; xxxxx, xxxxx prokazatelně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx silné xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx X.4), nesmějí xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx.

Xx xxxxx neustále xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupy, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx testy xx xxxxxxxxx x budou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx utrpení xxxx se xxxxx xxxxxxx xxx používání xxxxxx.

Xxxxx budou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx rizika, následnou xxxxxxxxxxx a označování xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxx xxx, xxx xx xx xxxxx.

12. XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX

Při hodnocení x interpretaci pokusů xx zvířatech x xxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxx xx xxxxxxx, xx xxxxx extrapolace xx xxxxxxx je xxxxx xxx v xxxxxxx xxxx; xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx účincích x xxxx, xxxxx xxxx x dispozici, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxx klasifikaci x xxxxxxxxxx nových x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx vlastností xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx těmito xxxxxxxx.

Xxxx výsledky xxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxx xx posuzování xxxxxx nových x xxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx byl xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx od 22.6.2001

X.1. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx každé skupině xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxx xxxxx je xxxxx stanovit podle xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxx metoda xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx vyvolávají značnou xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx testem se xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx první xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx, další xxxxxx xx roztok x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx roztok x xxxxxx xxxxxxxx vehikulích xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx vehikulí xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem xxxx xxxxx něho xxxxxx xxxxxxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, jichž je xxxxx podávat až 20 xx.xx^-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxxxxxxx x testech xx xx měla xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxx xx vehikulu xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou známy xxxxxx proti tomu. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx užívaných xxxxxxxxx kmenů. Xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx hodnoty.

1.2.2.2 Počet xxxxxxx

Xxx každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Používá-li xx xxxxx, xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx březí. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x obou xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx druhů, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, aby nebyla xxxxxxxxxx xxxxxx středně xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx xxxxx

Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx odstupňovány tak, xxx byl x xxxxxxxxxxx skupin viditelný xxxxxx xxxxxxxxx účinků x mortality. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀ x přijatelnou xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

S xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx x xxxxxxxx výše xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxx xxxxx způsobí uhynutí, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx studie.

1.2.2.5 Xxxx pozorování

Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Xxxxx xx xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, rychlosti xxxxxx xxxxxx x trvání xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx projevy xxxxxx objeví x xxxxxx, a xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, kde xx xxxxxx tendence k xxxxxxxx mortalitě.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky mají xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx před xxxxxx. X xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxx x xxxxx vodě xxxx omezen. X xxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, lze xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx tohoto období - potravu a xxxx zvířatům poskytnout.

Xx podání xxxxx xx xxxxxxxxxx provádění x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx, xxx každé zvíře xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Během prvního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx sledovat x xxxxxxxxxx místní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.

Xxxxxxx jednou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx. Xxxx pozorování se xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx opatřeními x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, slinění, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xx nejpřesněji.

Zvířata, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, i xx, xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx nálezy se xxxxxxxxxxx. Xx-xx to xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx

Xx dokončení xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx o pěti xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx zjistit, xxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx použití menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pohlaví xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx xxxxx xxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx provede bezprostředně xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx, xxx v xxxxxxxxx intervalech x x době xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx zvířat xxxx než jeden xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx stres x xxxxxx xxxxxxxx podanou xxxxxx, xx zaznamenávají xxxx uhynutí xxxxxxxx xxxxx látkou. XX₅₀ xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zahrnovat xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, mezi xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxx x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, změn tělesné xxxxxxxxx, mortality x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx zvířat,

- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),

- doba xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,

- hodnota XX₅₀ xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x to xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx metody xxxxxxx),

- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx pro XX₅₀, xxxxx je lze xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x její xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx danou metodou xxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx všech xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx účinku, xxxxx by mohlo xxx humánní utracení xxxxxx během xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnotu XX₅₀),

- interpretace xxxxxxxx.

X.1. xxx XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX FIXNÍ XXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxx akutní toxicity xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx následovat xxxxx xxxxxx doby xx xxxxxxx xxxxxx jedné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxx s xxxxx xxxxxx xx provádí xx xxxx xxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx sledují xxxxxx xxxxxxxx dávek xxx xxxxxx aplikaci xxxxxx x zvířat xxxxx xxxxxxx, xxxx jedno xxxxx xx dávku. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx a toxicity, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx v xxxx xxxxx etapě xxxxxxxxx xxx než pěti xxxxxx.

X xxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxx sondou xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx z předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxx dávka, xxxxx pravděpodobně xxxxxx "xxxxxxx toxicitu" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), ale xx xxxxxxx.

Xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx výchozí xxxxxx dávky xxxxxx xxxxxxx toxicitu, ale xxxxxx mortalitu, není xxxxx žádné další xxxxxxxxx. Když xx xxxxxxx úrovni xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx když xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx humánní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx nejbližší xxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxx postup umožňuje xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx dávku" (xxx xxxx B - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx dávky, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx by xxxxx k xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).

Zvířata xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu a xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx proti tomu.

Xx třeba používat xxxxx xxxxxxx kmeny xxxxxxxxx zvířat. Na xxxxxxx xxxxx by x xxxx xxxxxxx xxxxxx variační rozpětí xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx studie. Xxxxx stačí xxx xxxxxx studii xxxxx xxxxxxx xxxxxxx z xxxx pohlaví.

1.2.1.2 Xxxxxxxx x podávání xxxxx

Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx se xxxxxx xxxx suspenze testované xxxxx xx vhodném xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx volbou je xxxxxx v rostlinném xxxxx, xxxxxx potom xxxx další xxxxxxx xxxxxx x jiných xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx určeny xxxx xxxxxx nebo xxxxx xxxx jejich xxxxxxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; výjimkou xxxx xxxxx roztoky, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx^-1. Xxxxxxxxxxx objemů xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx by xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx všech xxxxxxxxx dávek.

Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx množstvích xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx a xxxx zvířatům poskytnout.

1.2.2 Xxxxx postupu

1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxxx různých xxxxx xx xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxxxxx xx používají xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pohlavím. Xxxxx xx podávají sekvenčně, xxxx xx xxxxxxx 24 hodin xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pozorují x xxxxx zjistit xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx; xxxxx přetrvávají projevy xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, xxxxx xx xxxx pozorovat xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx výchozí xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx^-1. Jestliže zvolená xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx otravu x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nutné podat xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Tento xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx informace x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx xxxxxx, x o nejmenší xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Je xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávku xxxxx xxxxx o příbuzných xxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxx x dispozici, xxxxxxxxxx xx použít xxxx xxxxx dávky 500 xx.xx^-1. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx nepozorují xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Jestliže xxxxxxx x xxxxxxx při 2000 mg.kg^-1, xx xxxxxxxxxx studie xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx třeba provést xx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx^-1) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx humánní xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 xx.xx^-1). Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, mohou být xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx vhodné dávky xxxx určenými fixními xxxxxxx. Za xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx je xxx xxxxx postupu xxxxxxxxx xxxx xxx 5 xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx dávkovou hladinu xx se xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xx xxxx xxx nullipary x xxxxxx xx být xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx mírně xxxxxxxxx dávek xxx xxxxxx studii. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx xxxxx.

Dávka, xxxxx xxxx užita x testu, xx xxx xxxxxxx x xxxxx ze 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx výchozí xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, avšak xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx utracení x humánních xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, ale xxxx xxx zaznamenána. Jestliže xxxx dávka xxxxxx xxxxxxx toxicitu, ale xxxxxxxx mortalitu, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx znovu xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx dále pozorována xxx, xxx pozorovací xxxxxx bylo kompletní. Xxxxxxxx xxxxx toxická xxxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx se projeví xxxxxxxxx vlivem xxxxx, xxxx xx být xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx dávek. Opět xx zvířata, xxxxx xxxx nutné humánně xxxxxxx, xx xxxx xxx pozorována xx xxxx pozorovací období.

Xx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky. Xxx každé xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je nezbytné xxxxxxxx x zaznamenat xxxxxx xxxxxx aplikované xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.

Doba xxxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze xx xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxx zotavení. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxx xx doba, xxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx patrná xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx příznaků.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx nejméně xxxxxxx xxxxx den xx podání látky x nejméně xxxxxxxxx xx den další xxx. Xxxxxxx vykazující xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx výrazné xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx po podání xxxxx, jestliže zvířata xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx ukončen v xxxxxxx, když xx xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, dýchání a xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx pozornost xx xxxxx věnovat xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx.

Xxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx látky, denně xx další 3 xxx x xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, i xx, xxxxx xxxxxxxxx do xxxxx testu, se xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx to xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

X závislosti xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx vyšetření xxxxx xxxx výjimečně třetí xxxxxxx xxxxx.

V xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5 mg.kg^-1 (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mortalitu xxx xxxx xxxxx), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx x orientační x hlavní xxxxxx xx sestavují xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. X ní xxxx být patrný xxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx během testu xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx; popis xxxxxxxxx účinků; xxx xxxxxx xxxxxx, zda xxx pozorován zřejmý xxxxxxx xxxxxx, který xxx xxxxxxx testované xxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků; xxxxxxxx pitvy. X xxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx déle než xxx, xx třeba xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánně xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx i xxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení, xxx.,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,

- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx,

- ve formě xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx použitých xxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx; případně xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; počet xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; xxxxxx, stupeň x xxxxxx xxxxxx),

- xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx zvířata xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, doba xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx nálezy,

- xxxxxxx histopatologické xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, včetně xxxxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxxxxxx dávkové hladiny xxxxxxxx x xxxxx.

3.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx

Xxxxx	Xxxxxxxx	Interpretace
5 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx toxicita 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx jedovaté Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx xxx 50 mg.kg^-1
50 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % přežití	Látky, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx xxx 5 xx.xx^-1
	100 % xxxxxxx, ale zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx	Látky, xxxxx xxxx xxxxxx škodlivé Xxx xxxxxxxx u 500 xx.xx^-1
500 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % přežití	Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx výsledky x 50 xx.xx^-1
	100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Látky, xxxxx xxx považovat xx xxxxx bez významné xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 2000 xx.xx^-1
2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti	Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxx výsledky u 500 xx.xx^-1 Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx

X.1. xxxx XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX XXXXX XXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, tak xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávek x xxxxxxxxxxx odstupech, xxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx výsledků xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx výběr xxx xxxxxxxxxxx pevně stanovených xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx dávky pro xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx. Použití xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx dávek je xxxxx xxxxxx, pokud xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx zpřesnění.

Metoda xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxx pro xxxxxxx přesné XX₅₀. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx xx očekává úmrtnost, xxxxxxx smrt xxxxx xxxxxx xx i x této xxxxxx xxxxxxx kritériem účinku. Xxxxxxxx xxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxx by trvání xxxxx mohlo být xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxx B.1. Hlavní výhodou xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxx toxicity (xxxxxx)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx metody xxxxx xxxxx (B.1 bis).

1.2 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx postupně, x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxxx pohlaví. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx kroku, x.x.

- xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxx krok xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx druhého xxxxxxx;

- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx nižší xxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx laboratorní xxxxxxxx. Xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx ve xxxxxxxxx podle pohlaví x dávky, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx pozorování xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx je xx třeba, testovaná xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxx nosiči. Xxxxxxxxxx xx nejprve zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx vehikula xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx známa, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx testem.

Zvířata xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx potravy (xxxx. xxxxxxx xxxx xxx a myši 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx neomezuje.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí.

Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.

1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxx xxxx xxx použito kterékoli xxxxxxx.

1.3.2.3 Úrovně xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx xx tří xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 x 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Výchozí úroveň xxxxx by xxxx xxx taková, aby x xxxxxxxx pravděpodobností xxxxxxxxx uhynutí xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, jimž xxxx xxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx diagramu xxxxxxx popsaného v Xxxxxxx 1.

Xxx výběr xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxxxxx je xxxxxxxxxxxxxxx i při xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), pak se xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx - s xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata - xxxxxx xxxxxxx xxxxx 200 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx získanou xxxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx test x třemi pevnými xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx hmotnosti. X xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 5, 50 xxxx 500 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xx aplikovat xxxxx, x kterých xx xxxxx, xx způsobují xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx skupinami je xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Testování xx xxxxxxxxx druhého pohlaví xxxx xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx není xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx dávku xxxxxxx.

1.3.2.4 Xxxxxxx test

Limitní xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx provádí xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví. Pokud xxxxx x uhynutí xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx 200 mg.kg^-1 (xxxx 500 xx.xx^-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx obvykle xx xxxx 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx nemělo xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx toxických xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx důležité xxxxxxxxxxxx xxxx, kdy xx xxxxxx x xxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé zvíře.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxx xxxxxxx zkušební xxxxx zvážena. Po xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx bez xxxxxxx xx xxxx dalších 3 - 4 xxxxx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, může xxx - x závislosti xx xxxxx této xxxx - nezbytné xxxxxxxxxx zvířatům xxxxxxx x vodu.

Maximální objem xxxxxxxx, který může xxx podán xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. U hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 ml xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx byl podáván xxx xxxxx xx xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxxx není možné xxxxx dávku celou xxxxxxxx, xx možné xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx po xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x Xxxxxxx 1.

1.3.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) nebo xxxxxxx, xxxxx to xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx, x xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, která xxxx nalezena v xxxxxxxxx xxxxx, nebo xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxx: tato xxxxxxx xxxx hodnocena xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xx xx xxxx zvířata xxxxxxxx z humánních xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx, dobu xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxx pozorování xx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx, vegetativním a xxxxxxxxxx nervovém systému, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx věnovat xxxxxxx xxxxx, křečí, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx systematicky zaznamenávána: xxxxxxx xxxx vedeny xxx xxxxx jednotlivé xxxxx.

1.3.3.2 Tělesná xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx látky a xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Počítají se x zaznamenávají xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx jsou přežívající xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxx utracena.

1.3.3.3 Pitva

U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, se xxxxxxx pitva. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx dalších xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologie x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx 24 x xxxx xxxxx.

2. XXXX A XXXXXX ÚDAJŮ

K dispozici xxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx tabulkové xxxxx, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx vykazujících xxxxxxxx xxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxx x průběhu xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx poučení x interpretaci výsledků xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x Xxxxxxx 2.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx xxxxx xxx získány:

Pokusná xxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;

- xxxxxxxxxxxxxxx stav zvířat, xx-xx znám;

- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;

- zdroj, xxxxxxxx xxxxx, potrava atd.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx začátku testu, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx testu.

Podmínky xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx, xxxxx je xxxx xxx voda;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx podávaných xxxxxx x doby xxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxxxx xxxx (xxxxxx druhu x xxxxxx);

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx údajů x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx tabulek xxxxx xxxxxxx x dávkové xxxxxx (xxx. xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x trvání xxxxxx);

- xxxxxx x xxxxxx průběh xxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxx x histopatologické xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx k xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx:

4. XXXXXXXXXX

Xxxx metoda je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 423.

XXXXXXX 1

XXXXXX XXXXXXXXX

1. Xxx xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx ta xx xxx pevně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx způsobí xxxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxx dávky xxx xxxxxx následující informace:

- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx x jiných xxxxx xxxxxxxx x

- xxxxxxxxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxxx.

2. Příslušné vývojové xxxxxxxx uvedené x xxxxx dodatku stanovují xxxxxx xxx každou xxxxxxx dávku. X xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx postupuje xxxxxxxxx tak, jak xxxxxxxxx xxxxx.

3. Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx uhyne pouze xxxxx zvíře xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxx xxxx netestuje. Xxxxx xxxx přitom xxxxxx x xxxxxxxxx 5 xxxxxx žádné xxxxxxx příznaky, xx xxxxx pitvou xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx.

4. Xxxxx xx xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx LD₅₀ xxxxxxxx dávku 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx to xxxx jen xxxxxxxx xxxxxxxx, je třeba xxxxxxx posoudit reakce xxxxxxxxxxx dvou zvířat xxxxxxx xxxxxxx: zřetelné, xxxxxxx toxické xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx důvodem xxx klasifikaci odpovídající xxxxxxx XX₅₀ xx xxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx hmotnosti nebo xxxxx, xxxx mohou xxx podnětem pro xxxxx testování na xxxxxx xxxxxx xxxxx.

5. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Této xxxxxxxx xx možno xxxxxx buď k xxxxxx alternativní dávky x daném bodu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nebo xxx další xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx varianty 1.

Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 25 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).

Xxx xxxxxxx xx xxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx šipek xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx na základě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx zvířat x pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).

Xxx rámečky xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle počtu xxxxxxxxx zvířat xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx směru šipek xx do xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx uvedeného v Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Pokračování xxxxx x příslušnou xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx testu: Klasifikace xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx je xxxxx dávka, počet xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx jako xxxxx).

Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx až xx xxxxxxxx šedého rámečku.

Varianta 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx hodnot uvedených x příslušném xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx uvedeného x Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

XXXXXXX 2

Xxxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx variantě 1

X xxxxxxxxx xx xxxxx dávka, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx první, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).

Xxx xxxxxxx xx počet xxxxxxxxx nebo utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).

Xxxx xxxxxxx xxx rámečkem "ŽÁDNÉ XXXXX XXXXXXXXX" x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx konečné xxxxxxx xxx klasifikaci. Xx xxxxxxxxx xxxxx varianty 1 se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxx. (Hodnoty x xxxxxxxxx vyznačují xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx klasifikace. Ležatá xxxxxxx znamená, že XX50 xx xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx rámečku xxxxx.)

(x) Xxxxxxxxx postup s xxxxxxx dávkou 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx

(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx dávkou 2000 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx 1

a) Xxxxxxx dávka 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

&xxxx;

x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx tělesné xxxxxxxxx

x) Xxxxxxx dávka 2000 xx/xx xxxxxxxxx

X.2. AKUTNÍ XXXXXXXX (INHALAČNÍ)

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx získat xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx, xxxxxxx tání, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx vzplanutí x výbušnosti (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx

1.2 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x odstupňovaných xxxxxxxxxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxx a případy xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx pokusu xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx do konce xxxxxx, se pitvají.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x takovým xxxxxxxx, x kterých xx známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.3 Popis xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx používaného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Pevné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx na částice xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx, přidá xx x testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace testované xxxxx; v xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx jiná xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx možno xx využít.

1.3.2 Experimentální xxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx. Používá se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti zvířat xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).

1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx použít nejméně 10 hlodavců (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx se x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu zvířat. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx volit x xx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx překročeny xxxxx xxxxxxx dávky. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxxxxx koncentrace

Má xxx dostatečný xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxx xxxxxx x mortality. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx znázornění xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx a, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀ x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.3.2.4 Limitní xxxx

Xxxxxxx-xx xx 4 xxxxxxxx expozici 5 samců x 5 xxxxx plynu x koncentraci 20 xx.x^-1 nebo xxxxx xx xxxxxxxx tekuté xxxx xxxxx látky x koncentraci 5 xx.x^-1 (xxxx - x xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx - při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx sledovanou xxxxxx, považují xx xxxxx xxxxxx za xxxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx doba expozice xx být 4 xxxxxx.

1.3.2.6 Vybavení

Xxx xxxxxx xx zvířaty xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxxxxxx xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx rozdělení xxxxx x expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx x xxxxxx celkový xxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx způsoby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx cestami.

1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, na xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxxxxx je xxxx, xxx xx objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx otravy, xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Exponují xx xx dobu 4 hodin xx xxxxxxxx rovnováhy koncentrace xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxx 22 ^oC ± 3 ^x X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být ideálně xxxx 30 % x 70 %, x výjimkou xxxxxxx, xxx xx není xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x aerosoly). Xxxxxxxxx xxxxx negativního tlaku xxxxxx komory (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.

Xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx zaručovat, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře.

Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:

(x) xxxxxx xxxxxxx vzduchu (kontinuálně),

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxx v dýchací xxxx alespoň xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (některá xxxxxxx, xxxx. aerosoly xx vysoké xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Během jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat od xxxxxxx hodnoty o xxxx než ±15 %. U xxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx trvání xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx týká xxxxxx x aerosolů, xxxx xx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx xxx xxxxx, xxx to xxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx),

Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx skončení xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx často. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a odpovídající xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxx studii, např. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx kůže, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dýchání, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, letargii, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx stanovuje xx xxxxxxxx xxxxx x v okamžiku xxxxxxx.

Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx všem xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx dýchacího xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x odeberou xx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx se sestaví xx tabulky. X xx musí xxx xxx každou experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Změny xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx zvířata přežijí xxxx než jeden xxx. Zvířata, xxxxx xxxx humánně xxxxxxxx xxxxxxxx xx stresu xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. LC₅₀ xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se hodnotí xxxxx - pokud xxxxxxxx - mezi xxxxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx, včetně xxxx xxxxxxx, klinických symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x všech xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx informace:

- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,

- xxxxxxxx pokusu: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx vzduchu, systému xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx systému a xxxxxxx umístění xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx je používán. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx vzduchu, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,

- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx tabulky x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx odchylkou). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:

x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx;

x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;

x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx objemem xxxxxxx);

Pozn.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx (xxxx. xx xxxx) je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx koncentraci xxxxx xx xxxxxxx, nýbrž xxxx, pokud xx xx xxxxx, koncentraci xxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx.

d) xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxx;

x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx;

x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD);

x) xxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx;

x) xxxx expozice;

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxx uhynula xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; počet xxxxxx x příznaky toxicity; xxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat);

- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x kritéria xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx;

- všechna xxxxxxxxxx;

- xxxxxxx XX₅₀ pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);

- 95% xxxxxxxx spolehlivosti xxx XX₅₀ (pokud xx xxxxx jej xxxxxxxx);

- xxxxxx závislosti xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx);

- pitevní nálezy;

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- diskuse xxxxxxxx (xx zvláštním xxxxxxxx x vlivu xxxxxxxxxx utracení xxxxxx x humánních xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀);

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.3. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx a zaznamenávají xx xxxxxx x xxxxxxx uhynutí. Xxxxxxx, xxxxx uhynou během xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zvířat xx zádech xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) kůže, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Při xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxx x práškové xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx dobrý xxxxxxx x xxxx. Xxx použití vehikula xx xxxxx xxxx x xxxxx vliv xxxxxxxx na průnik xxxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xx xxx řídit xxx, x jaké xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx styku s xxxxxxx xxxx, x xx všech relevantních xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxx xxxxxxx usnadňuje xxxxxx kůží. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx neředěné.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxxxxx xx dospělých xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx jsou pro xx xxxxxx. Je xxxxx volit xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx začátku testu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Počet x xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx samic, musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, mělo xx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Dávky xx xxxxx pečlivě xxxxxx x xx xxxxx zajistit, xxx xx nepřekročily xxxxx toxické xxxxx. X těchto xxxxxxx xx třeba vyhnout xx podávání letálních xxxxx xxxxxxxxx látky.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx být xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx, xxxxxxx tři, x xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických xxxxxx x mortality. Xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxx, a xxxxx možno xxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀ x xxxxxxxxxxx spolehlivostí.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti xx skupinách 5 xxxxx a 5 xxxxx s použitím xxxx popsaných xxxxxxx. Xxxxx xxxxx způsobí xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx úplnou xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji však xxxxxxxx xxxxxxxxx. Měla xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Rozhodující xx xxxx, xxx xx příznak otravy xxxxxxx x xxxxxx x doba xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x výskytu xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3 Popis xxxxxxx

Zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx nanese rovnoměrně xx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx 10 % xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxx látky xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx; xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx co xxxxxxxx xxxx této xxxxxx.

Testovaná látka xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 hodin xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x aby xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx systematicky xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx třeba xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Nejméně xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Xxxxx každodenní xxxxxxxxxx x odpovídající xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx snížení ztrát xxxxxx pro xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx uhynulým xxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx či xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxxx, xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Zvláštní xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx xxxxx, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x komatu. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, i xxxxx přežijí až xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické změny xx zaznamenávají x xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx podá xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zjistilo, zda xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrazně citlivější xx xxxxxxxxxx xxxxx. X konkrétních xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je možno xxxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet zvířat x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx x pitevních xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x před xxxxxxxxx. Změny xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, přežijí-li xxxxxxx déle xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx byla humánním xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx látkou, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx látkou. XX₅₀ se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx x výskytem x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, klinických xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x xxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx pokud možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx atd.,

- podmínky xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),

- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx je užito) x koncentrace,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle xxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx humánně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx s příznaky xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),

- xxxx xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- všechna pozorování,

- hodnota XX₅₀ xxx to xxxxxxx, x xxxxxxx byl xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx pro 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx výpočtu),

- 95% interval xxxxxxxxxxxxx pro XX₅₀ (xxxxx xxx lze xxxxxxxx),

- křivka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,

- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx pozornost věnovat xxxxxxx ovlivnění vypočtené xxxxxxx LD₅₀ x xxxxxxxxxxx x utracením xxxxxx x humánních xxxxxx během testu),

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.4. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXX XXXXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxxxx xxxxx

Je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxx výrazné xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx test, studie xx jediném xxxxxxx xxxx xxx není xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x chemická reaktivita. Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5) xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx dráždivost, xxxxxxxx mohou být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx vzít x úvahu xxxx xxxxxxxxxx xxxx kyselou xxxxxxx.

x) Jestliže xxxx dostupné xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx in xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx.

c) Xxxxxxxx xx studií xxxxxx toxicity. Jestliže xxxx látka x xxxxx akutní xxxxxxxx xxx dermální xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx dávky (2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti) x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, není xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Rovněž xxxx třeba xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx dávce na xxxx několika pokusných xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx jako xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx, vyhodnotí x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx provést xxxxx posouzení účinků. Xxxx pozorování xxxx xxx dostatečně dlouhá, xxx xxxx možné xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxx 24 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx kůže (xxxx. abrazí). Xx xxxxx použít xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx husté xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x některých xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nanášet xx tyto xxxx xxxxx xxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx látkami, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou, případně xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx brát x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx podráždění xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx aplikují nezředěné.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx savců, xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx albínu králíka.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx xx x xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx testů xxxx xxxxxx úvah xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx vyvolávat nekrózu (xxxx. xx xxxxxxx), xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxxxx zvířata. Xxxx třeba xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xxxxx nejsou xxxxx zvláštní důvody xxx jiný postup, xxxxxx xx na xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx oblasti xxxxxxxxxx kůže zvířete xxxxxx x testu xxxx vlastní xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx bylo možno xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nevratnost účinků. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx xx xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx chovají xxxxxxxxxx x klecích. Xxxxxxxxx xxxxx xx nanese xx xxxxx xxxxxx (xxx 6 cm²) xxxx a pokryje xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx testovanou látku xx mul, a xxx xxx xxxxxxxxx xx kůži. Xx xxxx xxxxxx expozice xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx okluzivním xxxx částečně okluzivním xxxxxxx. Je třeba xxxxxxxx xxxx, aby xx zvíře xxxxxxx x xxxx x xxxxx přijmout testovanou xxxxx xxxxxx xxxx xx vdechnout.

Na xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx je xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx případná xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 4 xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. tím, xx xxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx. na 1 xxxxxx xxxx 3 xxxxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx současně, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx plátek xx xxxxxxxx xx 3 minutách. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx reakce, odstraní xx xxxxx xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx nezbytná 4xxxxxxxx xxxxxxxx a xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, odstraní xx xxxxx xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x klasifikují xx xxxxxx xxxxxxxx kůže. X případě, xx xxxx xxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxx zvířat; pokud xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x humánních důvodů (xxxx. jestliže po 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxx. nekróza) xxxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xx xxxxxxxx podmínek xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx xx 60 minutách x xxxx 24, 48 x 72 hodin xx odstranění xxxxxx x testovanou látkou. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx systému xxxxxxxxx v xxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx odeznění xxxxxx, provádí se xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx kůže xx xxxxx podrobně xxxxxx xxxxxxx závažné xxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx tkáně) x xxxx toxické xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testovanou xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx měření xxxxxxxx xxxxx xxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxx dobu xxxxxxxxxx. Xx xxxxx rovněž xxxxx xxxxxxx závažné xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx podráždění xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Zpráva o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx chovu, krmení xxx.,

- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxx obvazu: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,

- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 x 72 xxxxx atd. xx odstranění xxxx),

- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx,

- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx histopatologických nálezů,

- popis xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx podráždění xxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- vyhodnocení xxxxxxxx.

4. XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx

	Xxxxxxx
1. Xxxxxxxxx erytému x příškvaru
1.1 Xxxxx xxxxxx	0
1.2 Velmi xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxxx)	1
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx	2
1.4 Xxxxx xx xxxxxxx erytém	3
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx zrudnutí) xxxx xxxxxx příškvaru (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx	4
2. Hodnocení xxxxx
2.1 Xxxxx xxxx	0
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxxx)	1
2.3 Lehký xxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx)	2
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxxxxxx asi x 1 xx)	3
2.5 Výrazný xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 mm x otok xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx)	4

4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx indexu xxxxx xxxxxxxxxxx (IKI)

XXX xx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx odečtu x xxxxxxx jedince x x takto xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxx	X_XX
nedráždí	X_XX ≤ 0,5
xxxxx xxxxxx	0,5 &xx; X_XX ≤ 3
středně xxxxxx	3 < X_XX ≤ 5
xxxxx xxxxxx	X_XX &xx; 5

X.5. AKUTNÍ XXXXXXXX (OČNÍ XXXXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

1.1.1 Výchozí xxxxx

Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx informace x xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx, které xxxxx vyvolat těžké xxxxxx. X xxxx xxxxx být užitečné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx. xxxxx kyselé xxxx xxxxxxxx látky, které - jak xx xxxxx očekávat - xxxxxxxx x oku xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5, xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx očekávat xxxxxxx xxxxxxxxx. Je xxxxx xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rezervu.

b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nemají xxx xxxx testovány xx dráždivost xxx xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx vykazovaly xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx účinky xx xxxx xx xxxxxx xxxxx dráždivosti, xxxx xxxxx xxxx testovat xx xxxxxxxxxx pro xxx, xxxxxxx lze xxxxxxxxxxxx, xx budou xxx xx xxx xxxxxxx účinky.

Xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxxxx dávce xxxxxxxx xx xxxxxxx oka xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx kontrola. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx odečte x xxxxxxxxx xxxxxx podráždění x xxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinku. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx bylo možné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti je xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

24 xxxxx xxxx xxxxxx xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx. Zvířata, x kterých xx xxxxxx xxxxxxxxxx očí, xxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx rohovky, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Ačkoliv xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxxxxxxx xx xxxxx přednost xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Počet xxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx výsledky xxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxxxx (irreversibilní xxxxxx) účinky xxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx postupu, není xxxxx další xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zvířat. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aspektů xxxxx xxx případně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyžadovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Úroveň xxxxx

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx se používá xxxxx 0,1 xx. X xxxxxx látek, xxxx x zrnitých xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 0,1 xx xxxx xxxxxxxx xxx 0,1 x (xxxxxxxx je xxxx xxxxx xxxxx). Jedná-li xx o tuhou xxxx xxxxx zrnitou xxxxx, xx xxxxx xx rozemlít xx xxxxx prášek. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.

X látek xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxx aerosolových xxxxxxxxx xx xxxxx vystříknout x xxxxxx 0,1 xx xxxxx x xxxxxxxxxx ji xx xxx xxxxx popisu xxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Doba xxxxxxxxxx

Xxxxx doby xxxxxxxxxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx vratnost nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx však xxxxx 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx třeba přechovávat xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx zvířeti xx spojivkového xxxx xxxxxxx oka xxx, xx se xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxx xxx na 1 xxxxxxx xxxxx k xxxx přidrží, xxx xx žádná xxxxx xxxxxxxxxx. Druhé xxx, xx xxxxx xx xxxxx neaplikuje, slouží xxxx kontrolní.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx bolest, xxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx lokální xxxxxxxxxxx. Xxx bylo xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx změnám x xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx zvolit xxx, xxxxxxxxxxx x dobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx anestezovat x xxxxxxxxx xxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 24 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 xxxxxxxx xx možno oči xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx.

X některých xxxxx, které xxx xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx doporučuje xxxxxx 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxx vymývají xxxxxx xx xxx xxxxxx s použitím xxxxxxxx objemu xxxxxxxx x xxxxxxxxx průtoku, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx

Xxx xx xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 a 72 xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx-xx xx po 72 xxxxxxxx žádné příznaky xxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx postižení xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx vývoj xxxx x xxxxxx vratnost xx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx na rohovce, xxxxxxx x spojivce xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx x jiné xxxxxxxx léze.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx interpretace. Xxxx pomůcku xxx xxxxxxxxx laboratoře a xx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.)

Xxxxxxxxxxx reakcí xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, ruční xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx zařízení. Po xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 24 hodinách je xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx mimoto xxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx sestaví do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lézí x všechny xxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),

- x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. po 1, 24, 48 x 72 hodinách)

- popis xxxxx xxxxxxxxxx závažných xxxx,

- podrobný popis xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podráždění x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 x 72 xxx.), xxxx. xxxxxxxxxx lampa, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx.,

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

4. DODATEK

4.1 Stupnice xxxx xx xxx

	Xxxxxxx
X. Xxxxxxxx - xxxx
Xxxx xxxx xxxxxxxx	0
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx	1
Xxxxxxx edém x xxxxxx xxxxx	2
Edém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx	3
Xxxx xxxxxxxxxx víčka xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxx	4
X. Xxxxxxxx - xxxxxx
Xxxxxx není xxxxxxxx	0
Xxxxx xxxxxx (xxxxx odlišit xx xxxxx sekrece xx vnitřním xxxxxx)	1
Slzení xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx	2
Slzení xx zvlhčením xxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxx	3
C. Xxxxxxxx - enantém
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx normě	1
Splývající xxxxx xxxxxx, rozlišení xxxxxxxxxxxx xxx nesnadné, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx	2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx	3
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx
Anomálie xxxxxx xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, překrvení, xxxxx, xxxxxxxxxxx cév xxxxx xxxxxxx (jedna xxxx xxxx těchto xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx xx xxxxxx je xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx	1
Xxxxxx xx světlo xxxx xxxxxxxx, rozsáhlé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx	2
x xxxxxxx (xxxxx xxxx více xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx)
X. Xxxxxxx - xxxxxx neprůhlednosti
Xxxxxxxxxxxxx xxxx přítomná	0
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx charakteru, xxxxxxx xxxxxxx zůstávají xxxxx viditelné	1
Xxxxxxxxxxx oblast je xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, detaily duhovky xxxxx xxxxxxxx	2
Xxxxxxxxxx xxxx opalescence, xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxx viditelné; xxxxx xxxxxxx xxxxx viditelný	3
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx	4
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx plocha xx ≤ 1/4 plochy xxxxxxx	1
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 plochy xxxxxxx	2
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx	3
plocha xxxxxxxxxxxxxx > 3/4 xxxxxx xxxxxxx	4

4.2 Xxxxxxx akutního xxxxxx xxxx dráždivosti (I_OA)

Xxxxxxxxxxxx index oční xxxxxxxxxxx (X_XX) xxx xxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxx hodnocení xx xxxxxxx podle xxxxxx

X_XX = 2.(X + B + X) + 5.X + 5.X.X

Xxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (X_XX) xxx xxxxx interval xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x X_XX.

Xxxxxx index xxxx dráždivosti XXX xx roven xxxxxxxxxx X_XX xxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx

4.3 Klasifikace

Xxxxxxxxxxx	X_XX
nedráždí	0 - 4,9
xxxxx xxxxxx	5 - 14,9
xxxxxx	15 - 29,9
xxxxx xxxxxx	30 - 59,9
xxxxx xxxxx xxxxxx	60 - 79,9
extrémně xxxxxx	80 – 110

B.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX

1. METODA

1.1. Xxxx

Xxxxxxxx:

Citlivost a xxxxxxxx schopnost xxxxx xxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx senzibilizačním xxxxxxx na xxxxxxx xxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx systém toxicity x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx všechny látky x xxxxxxxxxxxx senzibilizačním xxxxxxx xxx lidskou xxxx x která xx xx xxxxxx xxx všechny xxxxx.

Xxx xxxxx xxxxx xx třeba uvažovat xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx charakteristiky xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.

Xxxxx na xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx testy x xxxxxxxx, xx kterých xx alergický xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx testované látky xx Freundově xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX), a xx xxxxx xxx xxxxxxxx.

Testy x xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx pravděpodobného xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xx jim xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxx xx morčatech (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) xx xxxxx xxxxxxxxx test s xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxxxx několik dalších xxxxx, xx XXXX xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s adjuvans.

X mnoha skupin xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx se xxxx Xxxxxxxxxx testu) xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.

X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx zdůvodnit volbu Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx aplikací xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx injekci xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx. Xxx použití Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.

X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx (XXXX) x Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx x jiných xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx jsou odborné xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx.

Pokud xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, je možno xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx senzibilizátor xxx dalšího xxxxxxxxx xx morčatech. Při xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xx morčeti, xxx xxx je xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx na látku. X člověka xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zarudnutím xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, puchýřky, xxxxxx (xxxxxxx puchýři) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. U jiných xxxxxxxxxxx druhů se xxxxx reakce xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx xxxx otok.

Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx záměrem xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx expozice (xxxxxxxxx): experimentální xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vystaveného xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

1.3 Xxxxxxxxxx látky

Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx každých šest xxxxxx s xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxx mírný xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx.

X správně xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % x xxxxxx x adjuvans x xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx XXX	Číslo XXXXXX	xxxxxxxx xxxxx	xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx
101-86-0	202-983-3	2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx	xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx
149-30-4	205-736-8	2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx	kaptax
94-07-7	202-303-5	Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx	xxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx být použity xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx.

1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx jsou nejprve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Po xxxxxx 10 xx 14 xxx (xxxxxxxx období), x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx reakce, jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx u kontrolních xxxxxx, xxxxx podstoupí xxxxxxx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxx x xx xxx aplikována xxxxxxxxxx xxxxx.

1.5 Popis xxxxxxxxxxx xxxxx

Jestliže xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou látku, xxxxxxx se xx x použitím xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx integrita xxxxxxx.

1.5.1 Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxxx (XXXX)

1.5.1.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx podmínky xx xxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do expozičních x kontrolních skupin. Xxxxxxxxxx srsti se xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx depilací, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx před zahájením xxxxx a na xxxxx xxxxx.

1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.5.1.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxx i xxxxxx. Xxxxxx musí xxx nullipary a xxxxx xxx březí. Xxxxxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxx 5 xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx menšího xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx možné xxxxx x závěru, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx, doporučuje xx xxxxxxxxx xx dalších xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.1.2.3 Xxxxxxx úrovně

Xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dobře snášejí x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podráždění xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx maximální xxxxxxxxxxx, která x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx zvířatech. Xxx xxxxx účel xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXX.

1.5.1.3 Popis xxxxxxx

1.5.1.3.1 Xxxxxxx

Den 0 - Testovaná xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx symetricky xxxxx střední linie:

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;

Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

Injekce 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx FCA x xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx roztokem x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;

Xxx xxxxxxx 3 xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x FCA xx xxxxx xxxx. Xxxxx rozpustné v xxxxxxxx nebo látky xxxxxxxxxxx se rozptýlí x xxxxxxxxxx FCA. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxx xxxxxxx 3 má být xxxxxx jako xxx xxxxxxx 2.

Injekce 1 x 2 xx xxxxxxxx blízko xxxx x xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx 3 xxxxxx xx kaudální xxxxx xxxxxxxxx plochy.

Den 0 - Kontrolní xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx po 0,1 xx, xx podají xx stejných xxxx xxxx x testovaných xxxxxx:

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;

Injekce 2: xxxxxxxx xxxxxxxxx;

Xxxxxxx 3: Směs xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx směsí XXX/xxxx nebo fyziologického xxxxxxx x xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).

5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx

Přibližně xxxxxx xxxxx xxxxx před xxxxxxx indukční aplikací, xxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxx xxx kůži, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 ml 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx místního xxxxxxxxxx.

6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Testovací xxxxxx se zbaví xxxxx. Testovanou xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), který xx xxx xxxxxxx xx testovací plochu x xxxxxx pomocí xxxxxxxxxxx obvazu xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxx odbornými xxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxxxx rozetřeny x xxxxxxxxx xx vhodného xxxxxxxx; kapaliny lze xxxxxxxxx xxxxx.

6. - 8. den - Xxxxxxxxx skupina

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx srsti. Xxxxxxx vehikulum xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 48 hodin.

1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx

20. - 22. den - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxx exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx zbaveny xxxxx. Xx xxxxx bok xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx nebo x xxxxxxx x xx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxx). Xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx obvazu udržují x xxxxxxxx x xxxx xx 24 xxxxxx.

1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx

- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxxxx, xxxxxxxx ostříhá xxxxxxxx oholí a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx od xxxxxxx xxxxxxxx provokační xxxxx) xx pozoruje xxxxx xxxxxx x zaznamenává xx podle stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;

- xxxxxxxxx 24 xxxxx po xxxxx xxxxxxxxxx xx provede xxxxx pozorování a xxxxxx reakce kůže (72 xxxxx).

Xxxxxxxxxx xx systém "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x kontrolních zvířat, xxx pozorující xxxxx xxxx, které xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx kontrolní.

Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx přibližně x xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze také xxxxxxx na původní xxxxxxxxx skupině.

Xxxxxxx xxxxx reakce x xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx důsledkem indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (viz xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx nálezů je xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, xxxx xxxx. histopatologického xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx řas.

1.5.2 Buehlerův xxxx

1.5.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se aklimatizují xx xxxxxxxxxxx podmínky xx dobu aspoň 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Odstranění xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx použité xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx testu x xx konci xxxxx.

1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxx a/nebo xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx 20 xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx

Koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx upraví xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace, xxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění xxxx. V xxxxxxx xxxxxxx je možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx pokusu xx dvou nebo xxxxx xxxxxxxxx.

Pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx je xxxxxx použít vodu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jako xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 80% xxxxxx xxxxxx/xxxx xxx xxxxxxx a xxxxxx xxx xxxxxxxxx.

1.5.2.3 Xxxxxx

1.5.2.3.1 Xxxxxxx

Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Jeden xxx xx zbaven srsti (xxxxxxxx ostříhán). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx nasytí xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx řídí xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).

Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx a přidržován x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem xx xxxx 6 xxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, ať xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx přibližně 4 - 6 xx². Je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx je použito xxxxxxxx, mohou xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.

Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxx xx zbaven xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xx xxxxxxxxx plochu xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, a xx xxxxxxxx způsobem xxxx x xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx na testovací xxxxxx x přidržován x xxxxxxxx s xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx obvazem po xxxx 6 hodin. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, xx negativní xxxxxxxxx skupina není xxxxx, lze xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx.

6. - 8. a 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xxxx x den 0 xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tomtéž xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx x znovu 13. - 15. xxx.

1.5.2.3.2 Provokace

27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

Neošetřený xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Okluzivní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx koncentraci xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx neošetřeného xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxx xxxx neošetřeného xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx plátek x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx x kontaktu x xxxx vhodným xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.

1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx

- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx plátku xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxx o xxx xxxxxx později (přibližně 30 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x dodatku;

- xxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 hodinách (xx. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx aplikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx pozorují x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "slepého xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx pozorující xxxxx xxxx, xxxxx zvíře xxxx senzibilizováno x xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx znovu x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx indukčních x xxxxxxxxxxxx postupů, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (xxx xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx xxx.

2. XXXX A XXXXXX XXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxx xxx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX (GPMT X XXXXXXXXX XXXX)

Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx tohoto testu xxxx xxxx citaci (xxxx. LLNA - xxxx regionálních xxxxxxxxxxxx xxxxx, MEST - xxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx) včetně xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx testované x xxxxxxxxxx látky.

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (XXXX x Xxxxxxxxx xxxx)

Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx tyto xxxxxxxxx, pokud mohly xxx xxxxxxx:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- použitý xxxx morčat;

- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.;

- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx a xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx plátkový xxxx;

- podrobné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x technice xxxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxx studie xx xxxxxxx o indukčních x xxxxxxxxxxxx koncentracích xxx xxxxxxx test;

- xxxxxxxx xxxxxxxxx x přípravě, xxxxxxxx x odstranění xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x vehikula, použitá xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, její xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

- xxxxxx xxxxx charakteru x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx histopatologické xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 406.

Xxxxxxx

5.1 Stupnice Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

1 = xxxxx xxxx skvrnité xxxxxxxxx xxxx;

2 = xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx zarudnutí xxxx;

3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.

5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxx pozitivity při xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x rámci xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx senzibilizováno, xx xxxxx klasifikuje xxxx

xxxxx alergen (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx

xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % xxxxxx

xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx

xxxxx alergen (XX. st.) - 65 - 80 % xxxxxx

extrémní xxxxxxx (V. xx.) - 81 - 100 % xxxxxx

B.7. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXX (28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat orálně, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pečlivě xxxxxxxx, xxx xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx provede u xxxxx xxxxxx, která xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx pokusu; xxxx xxxxxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx mladá xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx x jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Klece xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx xx xxxxxxx vyloučil xxxx xxxxxxxx xxxxx. Každé xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx označeno. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.

Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxx xxxx x pitné xxxx, xxxxx xxxxx studie x fyzikálně-chemických vlastností xxxxx.

Xxxxx je xx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka ve xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x jedlém xxxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxxxxxxx) a pak xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx. Pro nevodná xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx není xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx stabilitu xxxxx xx xxxxxxxx vehikulu.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, ale xx xxxxx použít x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx mělo xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx x x každém xxxxxxx xxxxx, xxx zvířata xxxxxxxx věku 9 xxxxx.

Na začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx tato xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxx x obou studiích xxxxxx xxxxxxx stejného xxxxx x ze xxxxxxxx zdroje.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxx xx xxxxxxx budou zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx koncem xxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx následujících 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Používá xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxx xxxxx

Xx třeba xxxxxx xxxxxxx tři úrovně xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx stejným způsobem xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.

Pokud xx xxxxx xxxxxxxxxx informací xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx denní xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx test. Xxxxxx-xx taková xxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx předběžnou xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Při xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx všechny xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx látce xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx vyberou dávky x xxxxxxxxx řadě xxx, xxx umožnily xxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xx dávce. Nejnižší xxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (XXXXX). Xxxxxxx je xxxxxx xxxx- xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; pokud je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx velký xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. faktor xxxxx xxx 10).

Pokud xx testovaná xxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxx vodě, xx důležité xxxxxxxx, xxx podávané xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx rovnováhu. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x ppm) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; použitou xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxx. Aplikuje-li xx xxxxx sondou, mělo xx xx xxx xxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx x dávkování xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx má xxxx xxxxxx sloužit xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx studií, xx xxxxx x xxxx studiích xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Limitní xxxx

Xxxxxxxxx-xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx xxx dávce 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx za den xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x potravě xxxx vodě, xxxxx xxxx dávce odpovídá, x pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x analogie x xxxxxxxxxx látkami, je xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testování při xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx údaje x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xx xx třeba xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx pozorování je 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 xxx bez xxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx případné xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx po xxxx 28 xxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxx x xxxxx. Denní xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sondou xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx tekutiny, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx by neměl xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x tělesné xxxxxxxxx, x xxxxxxx vodných xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx byl podáván xxx objem na xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxx xx x xxxxx dráždivých x xxxxxxxxx, u xxxxxxx xx třeba obvykle xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx klinické xxxxxxxxxx xx xxxxxxx nejméně xxxxxx denně, xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx x x xxxxxxxx xxxx očekávaného xxxxxx účinku po xxxxxxxx. Zaznamenává xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx provede xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx projevující xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx vyřazena, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx provede před xxxxx aplikací (za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx týdně. Xxxx xxxxxxxxxx xx děje xxxx xxxxxxx xxxx x standardním pozorovacím xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx ve stejnou xxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx; xxxxx, xxxxxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx neměla znát xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, očí a xxxxxxx, přítomnost sekretů x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx a vegetativních xxxxxx (slzení, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x případně další. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxx, dále xxxxxx xx manipulaci, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (vytrvalé xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx) xxxx bizarních xxxxxx chování (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx pozadu).

Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx otestují xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx podněty (např. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx se síla xxxxxx x celková xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx x testování xxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx xxxx, xxxx X).

Pozorování funkčních xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx aplikace lze xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx studie xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx případě xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx této xxxxxxxxxx studie. Xxxxx x x tomto xxxxxxx jsou údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx u skupin xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx posuzování funkčního xxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxx hmotnost x xxxxxx xxxxxxx x xxxx

Xxxxxxx xx xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxx nejméně jednou xxxxx, xxxx x xxxxxxx aplikace x xxxxx vodě.

1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx krve.

Krev xx xxxxxxx těsně xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířete, xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Krev xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx posouzení xxxxxxxxx toxických xxxxxx xx tkáně, zvláště xx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Doporučuje se xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx přes xxx xxxxxxx xxxx¹⁾. Xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx, celkového xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky xx jaterní xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gama xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Zaměření xxxxxxx enzymů (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx) x žlučových xxxxxxx xxxx x některých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxx xx časově definovaný xxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxxx posledního xxxxx studie: xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, pH, xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx xxxx. krvinky.

Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání x xxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx nebo podezřelých x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx funkce: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx hormonů, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx nebo xxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxx použitý xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx dané látky.

Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.

1) Vyšetření xx lačno xx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx x séru x xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xx xx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx změny x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Na xxxxx straně, xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x u aplikace x xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx xx odebírá xxxx xx lačno, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provést xx xx pozorování funkčních xxxxxx xx 4. xxxxx xxxxx.

1.2.3.5 Xxxxx

U xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx se provede xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx otvorů, xxxxxx lební, xxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, brzlík, xxxxxxx, xxxxx a xxxxx xxxxx zvířat xx xxxxx očistí xx xxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxxx po xxxxx xx zváží xx xxxxxx stavu, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx pozdější histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx změnami, xxxxx (reprezentativní xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, mozečku x xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxx i xxxxxx xxxxxx (včetně Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, slezinu, xxxxx, xxxxxx, štítnou xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (konzervované naplněním xxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxxxxxxx), gonády x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (např. dělohu, xxxxxxxx), xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xxxx (n. xxxxxxxxxxx xxxx n. tibialis), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, řez xxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxx xxxxx z nasáté xxxxxx dřeně). Xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxx by mohl xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx působení testované xxxxx, xx třeba xxxxxxx.

1.2.3.6 Histopatologické xxxxxxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Xxxxx xx x orgánech x xxxxxxx ve xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxx xxxx do xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx orgány x tkáně, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx otravy u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXX X XXXXXX XXXXX

X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx u každé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx nebo utracených x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxx.

Výsledky x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Statistickou xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx při plánování xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxxxx druh/kmen;

- xxxxx, stáří a xxxxxxx zvířat;

- xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxxx atd.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx začátku xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx.

Podmínky xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx jiné xxx xxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx dávek;

- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxx testované xxxxx xxx aplikaci, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x dosažených koncentracích, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx nebo xxxx (xxx) xx skutečnou xxxxx xxxxx x xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx (pokud xxx x xxxxxxxx x dietě nebo xxxx);

- xxxxxxxx xxxxx x potravě x xxxxxxx vody (xxxxxx xxxxx a xxxxxx);

Xxxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx;

- xxxxx x xxxxxxxxx reakcích xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx úrovně, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx toxicity;

- xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. zda xxxx vratné nebo xxxxxxxx;

- posouzení xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, úchopové xxxx x xxxxxxxxx aktivity;

- výsledky hematologického xxxxxxxxx s příslušnými xxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx;

- údaje x absorpci, pokud xxxx xxxxxxx;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Závěry:

4. XXXXXXXXXX

Tato xxxxxx xx analogická xxxxxx OECD XX 407.

X.8. AKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxxx pokusem je xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látce: xxxxxxxxx velikosti částic, xxxxx par, bod xxxx, xxx xxxx, xxx vzplanutí x xxxxxxxxx (xxxx-xx stanovitelné).

1.2 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx jedné koncentraci, x xx xx 28 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx xxxxxx, i xx, xxxxx přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 dní před xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Pokud xx třeba, přidá xx k testované xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).

1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x nesmí xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx před xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx exponovat xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 28 xxx x během xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).

1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupina, případně xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - pokud xx xxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x skupiny x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx aplikace testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx nezpůsobit žádné xxxxxxx xxxx xxx x malém počtu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, má xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky. Ve xxxxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx koncentrací x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.4 Xxxxxx expozice

Xxxxxx xxxxxxxx xx xxx 6 xxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.3.2.5 Expoziční xxxxxxxx

Pro xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu s xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx konstruovat xxx, xxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Xxx zajištění xxxxxxxxx atmosféry v xxxxxxxxxx xxxx neměl xx x zásadě xxxxxxx xxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expozice; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jinými xxxxxxx.

1.3.2.6 Xxxx pozorování

Xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx uhynutí a xxx, ve xxxxxx xx objeví x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx se exponují xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx dalších 14 xxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x otravy nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx během xxxxxxxxxxx xx xxx 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % x 70 %, s xxxxxxxx případů, kde xx xxxx možné (xxxx. experimenty s xxxxxxxx). Udržování mírně xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx expozice xx xxxxxxxx potrava xxx xxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx provést předběžný xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rychlost xxxxxxx vzduchu xx xxxxx xxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek expozice xxxx dosaženo co xxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek expozice:

x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).

x) Xxxxxxxx koncentrace studované xxxxx se xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxx expozice xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ± 15 %. X některých xxxxxx a xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, se připouští xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx experimentu mají xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, jak xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx týká xxxxxx a xxxxxxxx, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

c) Teplota x vlhkost xxxxxxx xxxxx xxxxx kontinuálně.

Xxxxx xxxxxxxx a xx jejím skončení xx pozorování xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx výskyt, xxxxxx x trvání. Pozorování xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxxxxxxx týdně. Xxxxxxxxxx xx zaznamenávat xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, jako např. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xx u všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx alespoň xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x posouzení xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jeden x xxxxxx parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v séru (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx jako glutamátoxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.

Xxxx xxxxx charakteristiky, které xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxxx, fosforu, xxxxxxxx, xxxxxx, draslíku, xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterasy.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx xxxxxxx použity xxx studium xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.3.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva. Xxxxx játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx se xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx vysychání. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx x xxxxx, i xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxxxxx změnami nebo xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx poškození, zvážit x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, tak xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx ve skupině x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxx poškození způsobená xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx provést histologické xxxxxxxxx xxxxxx tkání x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných zvířat.

2. XXXXX

Údaje se xxxxxxx do xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení xxx.,

- xxxxxxxx xxxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx konstrukce, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpadního xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx o xxxxxxxx xx sestaví xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx údaje: x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením; x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx; x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx; x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD),

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,

- úroveň xxx účinku,

- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx tělesné xxxxxxxxx,

- hematologická vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, a xx každé skupině xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Krátce před xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx potřeba xxxxxxxx xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx nebo holení xxxxx je třeba xxxx xx to, xxx xx nepoškodila xxxx (xxxx. abrazí). Xxx nanášení xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % povrchu těla. Xx třeba xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx připravované xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx pokusech x xxxxxx látkami, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx danou látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxx kontakt s xxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxx, králíky xxxx morčata. Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx však xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % střední xxxxxxx.

1.2.2.2 Počet x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 samic x 5 xxxxx) xx xxxxxxx kůží. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x nesmí být xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx nutno zvýšit xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx budou zabita xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx je možno xxxxxxx další skupině (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx ukončení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx skupinu xxxx - pokud xx xxxxxxx xxxxxxxx - kontrolní skupinu x xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované látky xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xxxxxxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxx stálá xxxxxxx dávky xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx pokusným skupinám, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx. Xxxxxxxx dávka má xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx vyvolat žádné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s nízkou x xxxxxxx dávkou x x kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl být xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx u vysoké xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx vyloučení xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx určitých xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ukončit x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx test

Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 nebo xxxxx dávky, která xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx nutná.

1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Všechna xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x dobu, xxx xx xxxxxx x xxxxxxxx opět xxxxxx xxxxxxxx otravy.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata se xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx. Exponují xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx po xxxx 28 dnů. Xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny, xxxxx xxxx xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, xxx se mohla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo jejich xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx nejméně 6 xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx těla; x vysoce xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxx plocha xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx největší xxxx pokusné xxxxxx xxxxxxxxxx v xx xxxxxxxx vrstvě.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx dobu 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Testovanou xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx x testovaná xxxxx xxxxxxxx a xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx volnosti xxxxxx, xxxxxx immobilizaci xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx použít "xxxxxxxxxx xxxxx".

Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx s xxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx včetně jejich xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, kůže, xxx x sliznic x xxxx xxxxxxx x krevního oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx zajistit pravidelné xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx možno nedocházelo xx ztrátám xxxxxx, xxxx např. v xxxxxxxx kanibalismu, autolýzy xxxxx xxxx chybného xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Umírající xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx bolestí xx třeba okamžitě xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.

Na xxxxx xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: k xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: alaninaminotransferáza x xxxx (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.

Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx stanovení: vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Aspoň xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxx a xxxxxxx xx xx nejdříve xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxx, např. normální x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, srdce x xxxxxxx orgány x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx změnami xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, a x zvířat kontrolní xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tkání x x všech xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. U zvířat xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se zvláštním xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx se objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.

Xxxxxxx zjištěné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x koncentrace,

- xxxxxx bez účinku, xxxxx xx lze xxxxxxxx,

- xxxxx x toxických odpovědích xxxxx xxxxxxx x xxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx,

- doba, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx další xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx a vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení výsledků, xxx xx to xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx.

B.10. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXX XX XXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD XX 473, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Test (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxxx je xxxxxx xxxxx, jež x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx strukturální chromozómové xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxx dvojího druhu: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx chemickými xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx k aberacím xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx daná xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx numerické xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx navržena k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x běžně xx x xxxxxx účelu xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx chorob u xxxxxxx a existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx způsobují xxxxx x onkogenech a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx úlohu xxx xxxxxx rakoviny x člověka a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxx se používá x odhalení možných xxxxxxx mutagenů x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxx xxxxx, které xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxx karcinogenní, xxxx však dostatečná xxxxxxxx xxxx tímto xxxxxx x karcinogenitou. Xxxx xxxxxxxx závisí xx druhu xxxxx x existuje xxxxx xxxx xxxxxxx o xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vlastnosti xx xxxxx testem xxxxxxxx, xxxxxxx zřejmě xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx DNA.

X analýze xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx stabilizovaných xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx kmenů xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x kultuře, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Testy xx xxxxx xxxxxxxx obecně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx systém xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxx. Xx xxxxx xx vyvarovat xxxxxxxx, xxxxx by mohly xxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx neodrážejí xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx projevuje jako xxxx xxxxx, případně xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx jako zlom x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid na xxxxxxx místě (zahrnuty xxxx aberace xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx).

Zlom chromatidy: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx vzniklá mezera xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx větší, xxx xx xxxxx poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx zlomu xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, kde xx X-xxxx replikace XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou chromozómy x 4, 8, 16, .. chromatidami.

Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx buněk; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.

Polyploidie: xxxxxxx haploidního počtu xxxxxxxxxx (x) jiný xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3n, 4n xxx.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx metafáze, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx x výměny.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxx se vystaví xxxxxxxx testované xxxxx, x xx x xxxxxxxxxxxx aktivací x xxx xx. Xx xxxxxxxxxxx intervalech xx xxxxxxxx xxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxx, se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® nebo xxxxxxxxxxx, buňky xx xxxxxx, xxxxxx xx x v metafázických xxxxxxx xx mikroskopicky xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx

Xx xxxxx xxxxxx celou xxxx xxxxxxxxx xxxxx, kmenů xxxx xxxxxxxxxx buněčných xxxxxx, včetně buněk xxxxxxxx (například fibroblasty xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx či jiného xxxxx).

1.4.1.2 Xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kultivační xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx x vlhkost). U xxxxxxxxx linií a xxxxx je třeba xxxxxx způsobem kontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x nepřítomnost xxxxxxxxxxx x xxxxxxx. X xxxxxxx kontaminace xx buňky xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.3 Xxxxxxxx kultur

Stabilizované xxxxxxx xxxxx a xxxxx: xxxxx se xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx vysetím xx xxxxxxxxxxxx média v xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx před xxxxx xxxxxxxx x inkubují xx xxx teplotě 37 ^xX.

Lymfocyty: xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxx xxx xxxx xxxx x vhodným xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. heparinem), nebo xxxxxxxxxx lymfocyty získané xx xxxxxxxx xxxxxxx x kultivují se xxx xxxxxxx 37 ^xX.

1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxx xx testovanou xxxxxx působí v xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (10) (11) (12).

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx x médiu xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx bude xxxxxxx xx tom, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx případech je xxxxxx použít mitochondriální xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx vědecky xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její suspenze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx přímo xxxx xx xxxxxxx xxxx. Je třeba xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

1.5 XXXXXXXX XXXXX

1.6 ROZPOUŠTĚDLO

X zvoleného xxxxxxxxxxxx xxxxx existovat xxxxxxxxx, xx by xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat, a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a aktivitu X9. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx, xxx všem xxx, xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Voda xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.

1.6.1 Xxxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxx, xxx xx uvažují při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x systému x xxxxx pH resp. xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxx xxxxxx indikace xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx živých xxxxx, xxxx mitotický xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx cytotoxicitu a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx minimálně tři xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, musí xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx toxicity. Xx xxxxxxx znamená, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx násobkem, xxxxx xxxx mezi hodnotami 2 x √10. X době xxxxxxxx xxxxx musí xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx o xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx index xx xxxxx nepřímou xxxxx xxxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xx expozici xxxxxxxxxx xxxxxx. Je xxxx xxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx jiná xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x nepraktická. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx také xxxxx o kinetice xxxxxxxxx dělení, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx celkový xxxxxx, xxxxx xx vždy xxxxxx existenci x xxxxxx zpožděných xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx od vhodné xxxx sklízení x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentrace testované xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 µx/xx, 5 xx/xx xxxx 0,01 X.

U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx jsou xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx látka xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx x xxxxxxxxx účinku xxx xxxxxxxxxxxxx vyšších, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx koncentracích x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Může xxx xxxxxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxx na počátku x na xxxxx xxxxxxxx, protože se xxxxx expozice může xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk, xxxx, X9 apod. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx okem. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx buněk.

1.6.2 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxx experimentu, xx xxx s xxxxxxxxxxxx aktivací xxxx xxx ní, xx xxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx). Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx účinku.

Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx používá známý xxxxxxxxx, a xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx očekává, xx xxxxxxxx reprodukovatelný x xxxxxxxxxxxxx nárůst xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Koncentrace xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx zvolit xxx, xxx účinek xxx xxxxxx, xxx neodhaloval xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx například:

Xxxxxxxxxxx aktivace	Xxxxx	CAS	XXXXXX
Xx	methyl methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mitomycin X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx	66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5	200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1
Xxx	xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	50-32-8 50-18-0 6055-19-2	200-028-5 200-015-4

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Xxx, xxx je xx xxxxx, je xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxx každý xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultur xx xxxxx použít x xxxxxxxxx kontrolu, xx xxxxx xx xxxxxxx rozpouštědlo nebo xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxx xxxxx zařadit xxxxxxxx xxx jakéhokoliv xxxxxxxxx.

1.6.3 Xxxxxx

1.6.3.1 Expozice testovanou xxxxxx

Na proliferující xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx je xxxxx začít působit xxx 48 hodin xx stimulaci mitogenem.

Xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx; x xxxxx se doporučuje xxx xxxxxxxxx kontroly x rozpouštědlem, nebo xxxxxxxxx. Xxxxx lze xx xxxxxxx historických xxxxx prokázat, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, aby xx xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.

X případě xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nádob (15).

1.6.3.2 Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx experimentu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx po xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu xx začátku xxxxxxxx (12). Xxxxx jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx negativní, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx bez aktivace, x xxxxxxxxxxx expozicí xx do xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídají xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx hodnotí xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx delší, xxx xx 1,5násobek délky xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx se posuzují xxxxxx od xxxxxxx. X případech, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.6.3.3 Příprava xxxxxxxxxx

Xx xxxxxxx kultury xx xxxxxx Xxxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxxx obvykle xx xxxx 1 - 2 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx přípravu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvlášť. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x ovlivnění buněk xxxxxxxxxxxx roztokem, fixace x odbarvení.

1.6.3.4 Xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx mikroskopickou analýzou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx často xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metafázických xxxxx a ztrátě xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x hodnocených buňkách xxxxx modálnímu číslu ± 2. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xx počet xxxxxxx vysoký, může xx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxxx experimentální xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi. Xx třeba registrovat xxxxxxxxxx typy strukturálních xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x četnosti x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kultur. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx x testu xxxxxxxxxxxx také zjištěnou xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních kulturách.

Xxxxxxx se xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx xxxx uvedou x xxxxxxx xxxxxxx.

Verifikace xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx experimentálních podmínek. X xxxxxxxx potvrdit xxxxxxxxx xxxxxxxx bylo xxxxxxxxx x odst. 1.4.3.3. V xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (3) (13). Xxxxxxxxxxx významnost xx však neměla xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního výsledku.

Xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx numerické chromozómové xxxxxxx. Nárůst počtu xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx inhibovat xxxx xxxxxxxxx xxxxx (17) (18).

Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx negativní xxxxxxxx, xx výjimečných xxxxxxxxx získaná xxxx xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx diskutabilní xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx chromozómové xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx testovaná látka xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx somatických buněk xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx nevyvolává.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

XXXXXX X XXXXXXX POKUSU

Xx xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Buňky:

- xxx x zdroj xxxxx,

- xxxxxxxx x vhodnost daného xxxx xxxxx,

- xxxxxxx mykoplasmat, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxx x délce xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxx, xxx byla xxxxxxx xxxx xxxx nebo xxxxxxxxxx lymfocyty, xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxx xxxxx, xx-xx xx xxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx to xxxxx

- xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx na xxxxx

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx koncentrací x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,

- xxxxxxx média, xxxxxxxxxxx XX₂, xx-xx to xxxxx

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxxxx teplota,

- xxxx xxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx buněk na xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx nutné

- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,

- pozitivní a xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx přípravy podložních xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxx,

- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx toxicity, tj. xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx cyklu, x xxxxx buněk, xxxxxxxxx index,

- xxxxxx srážení,

- xxxxx x xX x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, jsou-li xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx aberací, xxxxxx xxxx,

- xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,

vztah xxxxx-xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,

- statistické xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.

Diskuse výsledků.

Xxxxxx.

X.11. MUTAGENITA - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X KOSTNÍ XXXXX SAVCŮ XX XXXX

1. XXXXXX

Metoda xx xxxxxxxxx OECD XX 475, Xxxxxxxxx Bone Xxxxxx Chromosome Aberration Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x savců xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx daná xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vyvolávat xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x aberacím chromozómového xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mutace a xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x člověka x existují přesvědčivé xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, hrají xxxxx xxx xxxxxxxx u xxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxxxxx systémech.

X xxxxxx xxxxx xx xxxxx využívají hlodavci. Xxxxxxx xxxxx v xxx je xxxxxx xxxx, protože se xxxxx o tkáň xxxxxx vaskularizovanou, obsahující xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xx x xxxxx xxxxx nepoužívají.

Xxxxx xxxx xx chromozómové xxxxxxx xx zvláště xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx mohou xxx xxxx živočišnými druhy x mezi tkáněmi xxxxxxx. Test xx xxxx je xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx byl předtím xxxxxxx testem xx xxxxx.

Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, xx xx testovaná xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx cílové xxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx chromatid, nebo xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx (zahrnuty xxxx xxxxxxx typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)

Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx předpokladu, xx vzniklá xxxxxx xx struktuře chromatidy xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx pak x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je kratší x xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX nepřechází xxxxx xx xxxxxx, nýbrž xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou chromozómy x 4, 8, 16, ... chromatidami.

Xxx: xxxxxxxxxxxx léze xxxxx xxx xxxxx xxxxx chromatidy x x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx dělený xxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx populace.

Numerická xxxxxxx: změna počtu xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx charakteristickému pro xxxxxxx buňky.

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) mimo xxxxxxxxx počet (xxxx 3x, 4x atd.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Zvířata se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx se xxxxxx. Před usmrcením xx xx xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx kolchicinem xxxx Xxxxxxxxxx®). X xxxxx kostní dřeně xx pak xxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Běžně xx xxxxxxxxx xxxxxxx, myši x xxxxxx xxxxxx, xxx ovšem použít x xxxxxxxxx jiný xxxxxx xxxxx druh. Xxxxxxxxx se běžné xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx chovu

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx B, vlhkost xx xxxx být 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x experimentální xxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly případné xxxxx xxxx, jak x xxx jsou xxxxx umístěny. Zvířata xx xxxxx jednoznačně xxxxxxx. Xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4.1.4 Příprava xxxxx

Xx-xx testovaná xxxxx x pevném xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx rozpustí nebo xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x případně xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxxx xxxxx nebo xx před xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx prokazují, že xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Rozpouštědlo / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx příliš známé xxxxxxxxxxxx, musí být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx je xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Kontroly

Xx xxxxxxx testu xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx zařadit souběžné xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx ve všech xxxxxxxxx stejně.

Pozitivní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad spontánní xxxxxx. Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní kontrolu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx intervalu. Xxx xx to xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
ethyl xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	759-73-9	212-072-2
xxxxxxxxx C	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako experimentální xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx intervalů xxxxxxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x o xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx odběr xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx použít i xxxxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx zvolené xxxxxxxxxxxx, xxxx vehikulum xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.5 POSTUP

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

X každé xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx každého xxxxxxx. Xxxxx x době, xxx xx studie xxxxxxx, existují údaje x stejném xxxxxxxxxx xxxxx x použití xxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx nejsou x toxicitě podstatné xxxxxxx, xx testování xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, jak je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jednorázově. Xxxxx xx xxxxx x objemnou xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxx podané v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Jiné xxxxxx xxxxxxxxx musejí být xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxx xx odebírají xx xxxx xxxxxxx časových xxxxxxxxxxx xx podání xxxxx xxx. X xxxxxxxx je první xxxxxxxx xxxxxx vzorků 1,5xxxxxxx xxxxxxxx délky xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx obvykle 12 - 18 xxxxx) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx potřebná xxx absorpci x xxxxxxxxxxxx testované látky x xxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx další xxxxx vzorků xx 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx vícekrát xxx xxxxxx xx xxx, xx xxxxx provést xxxxx xxxxx vzorků 1,5xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxxxx podání xxxxx.

Xxxx usmrcením se xxxxxxxx intraperitoneálně xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Colcemidu® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx se z xxxx xx vhodném xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky. X xxxx xx xxxxx interval xxxxxx 3 - 5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4 - 5 xxxxx. X xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx buňky x xxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.3 Dávkování

Xxxxxxx-xx xx studie xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x téže xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx xxx dávky xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx nebo nulové. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru vzorků xx pak xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Ta je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx takové známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Látky, jež x xxxxxxx netoxických xxxxxxx vykazují specifickou xxxxxxxxxxx aktivitu, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat x těchto xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx případ xx případu. Nejvyšší xxxxx xxxx xxx xxxx definována jako xxxxx, xxxxx vede x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx indexu o xxxx xxx 50 %).

1.5.4 Limitní test

Xxxxxxxx xxxx při xxxxx xxxxxxxxx 2 000 xx/xx hmotnosti x xxxxx dávce xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx se xx základě údajů x xxxxxxx x xxxxxxxx chemickou strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx za použití xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 dnů, x 1&xxxx;000 mg/kg hmotnosti xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx očekávané xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx testu xxxxx dávkové xxxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx látky

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx intraperitoneální xxxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx přijatelné x jiné způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky tak, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný a xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxx se ni xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x obarví xx.

1.5.7 Analýza

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx xxxxxxx.

X každého xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx xx možné xxxxxx xxx vysokém xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx dochází xxxxx x xxxxxxxx určitého xxxxxx metafází spojeného xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.

2. ÚDAJE

2.1 Zpracování xxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx aberací xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenají jednotlivé xxxx strukturálních chromozómových xxxxxxx, jejich počet x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx o xxx, xx obě xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx xxx pohlaví xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

2.2 Vyhodnocení x xxxxxxxxxxxx výsledků

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xx xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x chromozómovými xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx je třeba xxxxxx biologickou významnost xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx faktorem pozitivního xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.

Xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.

Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx výsledky, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx vyvodit x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x když xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx příslušného xxxxxxxxxxx druhu strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace nevyvolává.

Xx xxxxx xxxx x xxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx používána, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.

Xxxxxxx zvířata:

- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,

- počet, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx jednotlivé skupiny.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) kontroly,

- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,

- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- podrobnosti x podávání testované xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, xx xx xxxxx dostala xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx tkáně,

- případně převod xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x vody,

- xxxxxxxx popis xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- látka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x doba xxxxxxxx,

- metody xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- kritéria xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Výsledky:

- známky xxxxxxxx,

- mitotický index,

- xxx a xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,

- celkový xxxxx xxxxxxx x dané xxxxxxx, xxxxxx průměr x xxxxxxxxxx odchylka,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,

- vztah xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- statistické xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.

- údaje xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.12. MUTAGENITA - XX XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX V XXXXXXX XXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD XX 474, Mammalian Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Test (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxxxxxxxx xxxx xx vivo x savců slouží xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx testovaná xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx x tom, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxx xxxxx xxxx. z xxxxxxxxx xxxx zvířat, xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx cytogenetické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx fragmenty xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

Když x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx vznikne xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx x buňky vyloučeno; xxxxxxxx zbude v xxxxxxxxxx vzniklé xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxxxx tím, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx. Nárůst četnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xx u xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxxxx chromozómů.

X xxxxx testu se xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx strukturální xxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, jako xx přítomnost či xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx centromerické XXX x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx obsahujících xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxx x případě, xx xx xxxxxxx testují xx xxxx xxxxxxxxx xxxx týdnů.

Tento xx vivo xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x hodnocení rizika xxxxxxxxxx, xxxxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx metabolismu xx vivo, farmakokinetiky x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx mohou xxx xxxx živočišnými xxxxx, xxxx tkáněmi x xxxx konečným xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxxxx pro další xxxxxx mutagenního efektu, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx metabolit xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx vhodné.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx během xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x pólům dceřiných xxxxx.

Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx xxxxx xxxxxxxx xx jádra xxxxx (xxxxxxx) vytvářená xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx reprezentovaná xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: zralý xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx dosud xxxxxxxx xxxxxxxx, takže xxx lze xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované látce. Xxxxx se používá xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx ve vhodnou xxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxx x připraví se xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx (1-7). Xxxxx xx používá xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx vhodné xxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx xxxxxx (4) (8) (9) (10). V xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx používá xxxxxxxxx xxxx, musí xxx xxxx od xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx nejkratší. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx přítomnost mikrojader.

1.4 XXXXX METODY

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx živočišného druhu

Xxxxx se používá xxxxxx dřeň, xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx myši nebo xxxxxxx; xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx periferní xxxx, doporučují xx xxxx. Lze xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx za xxxxxxxxxxx, xx se x něj slezinou xxxxxxxxxxxx erytrocyty s xxxxxxxxxx nebo xx x něj byla xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Všeobecném úvodu x části X.

Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x po xxxx xxxxxxxxx pěti dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toho, jak x kde xxxx xxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Je-li xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx připraví její xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba používat xxxxxxx preparáty, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.

1.4.2 Podmínky testu

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx o kompatibilitě x testovanou látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě použito xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx stejně.

U xxxxxxxxxxx kontrol xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx in vivo xxx xxxxxxx, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole xx xxxx xxx, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx odebírat x jednom xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx možné, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx testovaná látka. Xxxxxxxx látek xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
N-ethyl xxxxxxxxxxxxxxx	759-73-9	212-072-2
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu	6055-19-2
triethylenmelamin	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx být xxxxxxxx xx xxxxx časových xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx historické údaje x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Aplikuje-li xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx krev, xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx působením xxxxx, xxxxx pouze x xxxxx krátkodobých xxxxxx x xxxxxxxxx krvi (xxxx. 1 - 3 xxxxx), xxx xxxxxxxx xxxxx leží x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kontroly.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

X každé xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Xxxxx v xxxx, kdy xx xxxxxx provádí, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx oběma xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx rozdíly, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx standardní rozvrh (xxxx. jedna, xxx xxxx xxxx xxxxx x 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxx použít xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx v daném xxxxxxxxxxx neprokáže xxxxxxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx, až xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx limitní xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx xxxxx x objemnou xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx k usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx dávky xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:

(x) Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Vzorky xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx než xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxx látky, s xxxxxxxx intervaly mezi xxxxxx xxxxxx. Pokud xx xxxxxx odeberou xxxxx xxx xx 24 hodinách, xxxx xxx odůvodněné. Xxxxxx xxxxxxxxx krve xx xxxxxxxx minimálně xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx prvním xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxx 72 hodiny. Xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pozitivní odpověď, xxxx xxx xxxxx xxxxx zapotřebí.

(x) Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx za den (xxxx. xxx nebo xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx kostní xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 hodinami xx posledním xxxxxx xxxxx a v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 hodinami xx xxxxxxxxx podání xxxxx (12).

Je-li xx relevantní, mohou xx xxxxxx xxxxxx x xxxxx odběrové xxxxxxxxx.

1.5.3 Dávkování

Xxxxxxx-xx xx studie ke xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x hlavní studii (13). Při xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xxx dávky tak, xxx pokrývaly xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x toxicitě nízké, xxxx nulové. Pro xxxxxxxx xxxxxx interval xxxxxx vzorků xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší dávku. Xx xx definována xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx vyšších xxxxxxx xx stejném xxxxxx xxxxxxxx by xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, jež x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx mitogeny, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx od případu. Xxxxxxxx dávka může xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx k xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx podílu nezralých xxxxxxxxxx z celkového xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx dřeni xxxx. xxxxxxxxx krvi).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx test xxx xxxxx minimálně 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx podaných x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx o látkách x xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx xxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx xx den xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx delší xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxx xxx zapotřebí xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.5.5 Aplikace xxxxx

Xxxxxxxxx látka se xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx kapaliny, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a nemá xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při vyšších xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx variabilita.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx / xxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx x femuru xxxx xxxxx okamžitě xx xxxxxxxx zvířete. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx dřeň xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x obarví xxxxxxxxxx metodami. Xxxxxxxxx xxxx se xxxxxxx x ocasní žíly xxxx jiné vhodné xxxx. Krevní buňky xx okamžitě za xxxxxxxxx xxxxx obarví (8) (9) (10), xxxx xx xxxxxxx xxxxxx, které se xxxxxxx obarví. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (např. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 s xxxxxxxxx-X (15)) se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx není XXX xxxxxxxxxx. Xxxx výhoda xxxxxxxxx, xx by xx xxxxxx použít xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Lze xxxxxx x xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx celulózy x xxxxxxxxxx xxxxx x jádrem (16) - xxxxx tyto xxxxxx jsou v xxxxxxxxxx rutinně xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxx.

1.5.7 Xxxxxxx

X xxxxxxx xxxxxxx xx stanoví xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (nezralé + xxxxx). X xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx kostní xxxxx minimálně 200 xxxxxxxxxx a x xxxxxxx použití periferní xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. X xxxxxxx xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxxxxxx 2000 nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx. Doplňující informace xxx xxxxxx tak, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx než 20 % xxxxxxx x kontrole. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů nebo xxxxx, lze xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy (xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx xxxxxxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxx. X xxxxxxx jedince xx xxxxxx zaznamená xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx x xxxxx nezralých xxxxxxxxxx xx všech xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx test xxxxxxxx kontinuálně xx xxxx čtyř xxxxx xxxx xxxx, xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx x zralých xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx x tom, xx obě xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, xx xxxxx xxxxx za xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx sloučit.

2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX

Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (18) (19). Statistická xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx být jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné výsledky xx třeba vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, xx x tomto systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx dát xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx xx experiment xxxxxxxxxx opakuje.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx důsledek xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Negativní výsledky xxxxxxx, xx za xxxxxx experimentálních podmínek xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mikrojader x xxxxxxxxx erytrocytech.

Je xxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx třeba xxxxx xxxx informace:

Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx známa.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, chovné xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Podmínky xxxxxx:

- pozitivní a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx xxx určení xxxxxxx, byla-li provedena,

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx dávky,

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx cesty podávání,

- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx do xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx koncentrace látky x potravině/pitné xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx),

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,

- podrobný xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x odběru xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s mikrojádry,

- xxxxx analyzovaných xxxxx u každého xxxxxxx,

- kritéria, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,

- počet xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx xxx každého xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxx xxxxxx skupinu,

- vztah xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x metody,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX REVERZNÍCH XXXXXX X XXXXXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX TG 471, Xxxxxxxxx Reverse Xxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx typhimurium (xxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x aminokyselině xxxxxxxxx). Xxxxxx uvedených xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx vzniklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxx mutací xxxxxxx x xxx, xx xx zjišťují xxxxxx, xxxxx zpětně xxxxxxx xxxxxx přítomné v xxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx změněná xxxxxxxxxxx xxxxx je detekována xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx růst xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

Genové mutace xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxx mutace x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx hrají x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, díky xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx detekci mutací, xxxxxx citlivých xxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxx, zvýšené propustnosti xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx x eliminace xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx DNA, xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kmenů umožňuje xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látkami. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací xx x xxxxxxxxx velmi xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx širokou škálu xxxxxxxx x byly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x různých xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Escherichia xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (histidinu xxxx. xxxxxxxxxx), jež xxxxx xx xxxxxx xxxxx, který je xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx substituci xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx změnu bází x DNA. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx změně xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx genomu.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mutace) jsou xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx xxxx více xxxx xxxx x XXX, xxxx xx xxxx čtecí rámec x XXX.

1.3 XXXXXXX XXXXX

X xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx buňky, které xx xx savčích xxxxx liší x xxxxxx látek metabolismu, xxxxxxxxxxxxx struktuře a xxxxxxxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx vitro xxxxxx xxxxxxxx exogenní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vitro xxxxx xxxxxxxx dokonale imitovat xxxxx podmínky xx xxxx, takže xxxx xxxxxxxxxxx přímé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dané xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx mutací xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x zvláště xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx genové xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx pozitivní, xxxxxxxx také v xxxxxx xxxxxxx mutagenní xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx se xxxxx testem neodhalí; xxxxxxx tohoto xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx vyhodnocovaných xxxxxxx, xxxxxxx x metabolické xxxxxxxx nebo rozdíly x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx straně xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx zvyšují, xxxxx xxxx x xxxx, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx třídy xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxx silně xxxxxxxxxxxx sloučeniny (kupříkladu xxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxx, x xxxxx xx předpokládá xxxx xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx replikační xxxxxx xxxxxxx xxxxx (například xxxxxxx inhibitory topoizomerázy xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx); v xxxxxxx xxxxxxx mohou být xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x savců.

Xxxxx sloučeniny, jež xxxx xxx xxxxx xxxxx pozitivní, xxxx xxxxxxxx karcinogenní xxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx absolutní; xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xxxxx testem xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4 PRINCIP XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx přítomnosti a xx nepřítomnosti exogenního xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx "plate xxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx agarem x xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx půdou. Xxx xxxxxxxxxxxx metodě se xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xx potom xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx xx xxx až xxx xxx xx inkubaci xxxxxxxxxxx xxxxxxx spočítají x výsledek se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx revertujících xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x rozpouštědlem.

Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ["plate xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx testování xxxxx nebo par (12).

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx týkají hlavně xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx tyto xxxxxx xxxx přijatelné xxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx alifatické xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx kovy, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3). Také bylo xxxxxxxx, xx existují xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Na xx xx třeba xxxxxxxx xxxx na "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Byly identifikovány xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxxx" (xxxxx s příklady xxxxxxx, xxxxx se xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx a těkavé xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.5. POPIS METODY

1.5.1 Xxxxxxxx

1.5.1.1 Bakterie

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vypěstují xx xxxxxxxx exponenciálního xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx 10⁹ xxxxx/xx). Kultury v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx nepoužívají. Xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx titr xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xxx x historických xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx.

Doporučená xxxxxxxxx teplota činí 37^xX.

Použije xx xxxxxxxxx xxx bakteriálních xxxxx, které budou xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; XX 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; XX98; x XX100); x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx reverzním místě xxxx xxxx XX x xx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx látky xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx E. xxxx XX2 nebo X. xxxxxxxxxxx TA102 (19), xxxxx mají xx xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxx xxxx XX. Xxxxx xx doporučená xxxxxxxxx xxxxx xxxx:

- S. typhimurium XX1535 x

- X. xxxxxxxxxxx TA1537 xxxx XX97 xxxx XX97x a

- X. xxxxxxxxxxx TA98 x

- S. xxxxxxxxxxx XX100 a

- X. xxxx XX2 xxxX xxxx X. xxxx XX2 xxxX (xXX101) nebo X. typhimurium XX102.

X xxxxxxx mutagenů xxxxxxxxxxxxx křížové xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 xxxx xxxxxx XXX reparačně xxxxxxxxxxxx xxxx E. xxxx (např. X. xxxx WP2 nebo X. xxxx XX2 (xXX101)).

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Pro každý xxxxxxxx preparát zásobní xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx závislost na xxxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx X. xxxx). Podobně je xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: xxxxxxxxxx xx nepřítomnost R-faktor xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx v xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx XX98, XX100 x TA97a nebo XX97, XX2 xxxX (xXX101) a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx x xxxxx XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx xxxxxx x X. typhimurium pomocí xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxX xxxxxx x E. xxxx nebo uvrB xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx spontánně revertujících xxxxxxx xx frekvenčním xxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxx x literatuře.

1.5.1.2 Médium

Xxxxxxx se vhodný xxxxxxxxx agar (např. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx E x xxxxxxxx) x vrchní xxxx xxxxxxxxxx histidin x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).

1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx jak xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) připravená z xxxxx hlodavců po xxxxxxx enzymů látkami, xxxx xx Aroclor 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx xx obvykle xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 30 % v/v xx směsi X9. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxx testované xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx případech xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakci x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).

1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / příprava

Xxxxx látky xx xxxx působením xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo vehikulu x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx přidávat xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx jejich xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

1.5.2 Podmínky testu

1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (viz 1.5.1.1.)

1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx látky, patří xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x konečné xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx.

Může xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x nerozpustnost x xxxxxxxxxx experimentu. Xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx snížením počtu xxxxxxxxxxxxx kolonií, vymizením xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx stupně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se může xxxxxxxxxxxx změnit. Xxxxxxxxxxxxx xx posuzuje podle xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusná xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx necytotoxických xxxxx 5 mg/misku resp. 5 µx/xxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, jež x xxxxxx koncentracích xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx nerozpustných. Xxxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx nižších než 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µl/misku, se xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxx xxxxx rušit xxx xxxxxxxxxxxxx.

Používá se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx experimentu. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx závislost, xxxx xxx vhodný xxxxxxxx menší. Testování xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx v xxxxx, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.5.2.3 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx

Každý test xxxx zahrnovat x xxxxxxxxx kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum) xxxxxxxx, jak x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

X xxxxx s metabolickým xxxxxxxxxx systémem se xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx použitého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx v xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:

Xxxxx	XXX	EINECS
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx	781-43-1	212-308-4
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx	57-97-6	200-359-5
xxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5
2-xxxxxxxxxxxxx	613-13-8	210-330-9
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu	6055-19-2

Následující xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx kontrolou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:

Xxxxx	CAS	XXXXXX
Xxxxx červeň	573-58-0	209-358-4

2-xxxxxxxxxxxxx xx nepoužívá xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx X9. Xxxxx xx 2-aminoantracen xxxxxxx, xx třeba každou xxxxx X9 charakterizovat xxxx xxxxxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, dimethylbenzantracenenm.

Příklady xxxxx, xxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu x testech xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx:

Látka	CAS	XXXXXX
Xxxx xxxxx	26628-22-8	247-852-1	XX 1535 x XX 100
2-xxxxxxxxxxxx	607-57-8	210-138-5	XX 98
9-aminoakridin	90-45-9	201-995-6	XX 1537, XX 97 x XX 97a
ICR 191	17070-45-0	241-129-4	XX 1537, XX 97 x XX 97x
kumen-hydroperoxid	80-15-9	201-254-7	XX 102
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6	XX uvrA x XX 102
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx	70-25-7	200-730-1	XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (pKM101)
4-nitrochinolin-1-oxid	56-57-5	200-281-1	XX2, XX2xxxX a WP2uvrA (xXX101)
Furylfuramid (AF2)	3688-53-7		xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxxxxx kontrole lze xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x chemické xxxxx.

Xx xxxxx použít x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx testované xxxxx, se kterými xx xxxxx zachází xxxxxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx se xxxxxxx x negativní xxxxxxxx xxx ovlivnění xxxxxxxxxx xxxxxx ledaže existují xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx zvolené xxxxxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxx xx mutagenní xxxxxx.

1.5.3 POSTUP

Při xxxxxxxx xxxxxxx metodě (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,05 nebo 0,1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx zhruba 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 xx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx aktivací se xxxxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx post-mitochondriální xxxxxx (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x x metabolické xxxxxxxxx xxxxx) x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx společně x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx /testovaným roztokem. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xx nechá před xxxxxxxx ztuhnout.

Xxx xxxxxxxxxxxx metodě (2) (3) (5) (6) xx testovaná látka / testovaný xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx kmenem (obsahujícím xxxxxx 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x sterilním xxxxxx xxxx metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 xxx xxxx xxxx xxx 30 - 37 ^xX; potom se xxxxx x vrchním xxxxxx x nalije xx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx mísí 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx xxxxxxxx x 0,5 xx xxxxx X9 xxxx xxxxxxxxxx xxxxx s 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx odhad xxxxxxx xx pro xxxxxx dávku xxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx vědecky xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx ke xxxxxx misky, xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxx nebo xxxxxx látky xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x zatavených xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).

1.5.4 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx při xxxxxxx 37 ^oC pod xxxx 48 - 72 hodin, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx na každé xxxxx.

2. ÚDAJE

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx misku. Xxxxxx xx xxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx jak x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, popřípadě kontrola xxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxx), xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxxx látku i xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (resp. xxx působení rozpouštědlo) xx uvedou počty xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxx misku xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx pozitivní xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. Negativní výsledky xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx studijních parametrů xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx mezi koncentracemi, xxxxxx xxxxxxxx ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx) x podmínky metabolické xxxxxxxx.

2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Ke xxxxxxxxx pozitivního výsledku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx reprodukovatelný xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxx (23). Xxxx první xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (24), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx pro pozitivní xxxxxx.

Testovaná látka, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují, xx x tomto xxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.

Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxx xxxxxx ukazují, xx xxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx v genomu Xxxxxxxxxx typhimurium resp. Xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx pokusu

Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx rozpouštědle, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxx:

- xxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Podmínky xxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxx xxxxx (v xx xxxx μx) xx zdůvodněním xxxxx xxxxx x počtu xxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx,

-typ x xxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),

- postupy xxxxxxxx (zpracování).

Xxxxxxxx:

- xxxxxx toxicity,

- xxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x směrodatná xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx,

- xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.

Xxxxxxx výsledků.

Xxxxxx.

X.15. XXXXXX XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxx haploidní x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae xxxxx xxx užity xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx bez x x xxxxxxxxxxxx aktivací.

Xxxx využívány forward xxxxxxx systémy u xxxxxxxxxxx xxxxx, jako xx xxxx xxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx-1, xxx-2) na xxxxxxx, adenin xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx systém xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx XX 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx mutacemi xxx 2-1, xxx 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mutagenů xxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx mutace ve xxxxxxxxxxx místě, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 marker, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx místě x xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx revertován xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

U xxxxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx využívaným xxxxxx X₇, který xx xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x kontrol xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx testováním xx použití xxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 objemová % x organických xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx jak x přítomnosti, tak x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx užívaným systémem xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy x doplněná xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx aktivaci.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Testovací xxxxx

Xxxxxxxxx kmen XX 158-14X a xxxxxxxxx xxxx D7 xxxx nejužívanější xxx xxxxxx xxxxxxxx mutací. Xxxx xxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx

Odpovídající kultivační xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

Pozitivní, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx specifickou xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx odpovídající pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Má xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx zvolených xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx po xxx xxxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx rozpustné, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx při 28 xx 30 ^oC xx tmě.

1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx

Frekvence xxxxxxxxxxx mutací u xxxxxxxxx xx xxx x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx hodnot.

1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx jednu xxxxxxxxxxx u xxxxx x prototrofními xxxxxxx x x životnosti xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx markery xxxx xxx 3-10 x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxx zvýšen, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.3 Popis xxxxxxx

Ovlivnění xxxxx X. cerevisiae xx xxxxxxx prováděno xx xxxxxxxx x tekutém xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxx stacionární xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 10⁷ buněk/ml xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx až 18 x. xxx 28 až 30 ^xX xx třepání. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx x průběhu xxxxxxxxx, xxxxx je xx potřebné. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx centrifugovány, promyty x xxxxxxxxxx xx xxxxxx kultivační xxxxxx. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x buňky x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx proveden xxxxx xxxxx s buňkami xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, počet xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx výsledky xxxx xxx xxxxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x:

- použitých kmenech,

- podmínkách xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxx médií, xxxxxxx x xxxxxx inkubace, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx expozice, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx mutací, xxxxxx dávky a xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxx výsledků.

B.16. MITOTICKÁ XXXXXXXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx (obecněji xxxx xxxxx x jeho xxxxxxxxxxx) x uvnitř xxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxx a vytváří xxxxxxxxxx produkty, xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx nereciproční x xx nazýván genová xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx vzniklých x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, genová xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx základě tvorby xxxxxxxxxxxxx revertant vzniklých x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxx xxx různé xxxxxxxx xxxxx xxxxx genu. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx detekci mitotické xxxxxx konverse xxxx X₄ (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 a xxx 5), D₇ (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 5), BZ₃₄ (heteroalelický x xxx 4) x XX1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x trp 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx produkující xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x X₅ xxxx X₇ (xxxxx xxxxxx xxxx mitotickou xxxxxxx konversi x xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx komplementární xxxxx xxx 2.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx roztok xxxxx než 2 xxxxxxxx % v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, jako xx etanol, aceton xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx aktivace

Xxxxx mají být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx v xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx indikujících xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, postmitochondriálních frakcí xx postupů může xxx rovněž vhodné xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Testovací xxxxx

Nejužívanější jsou xxxxxxxxx kmeny D₄, X₅, X₇ a XX1. Xxxxx xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Média

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx užívána pro xxxxxx přežívajících xxxxx x frekvenci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx současně. Xxx xxxxxx specifickou mutační xxxxx mají být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx být brán xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nesmí mít xxxx na xxxxxxxxx xxxxx. U toxických xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx testovány xx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx za použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx od případu.

Xxxxx mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxx během xxxxx xx xxxx xx 18 x. Xxxxxxx dlouhodobě ovlivňované xxxx být mikroskopicky xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx jsou xxxxxxxxxx ve tmě xx čtyři xx xxxx xxx xxx 28 - 30 ^xX. Misky xxxxxxx xxx průkaz xxxxxxxxx x růžových xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx překřížením xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx 4 ^xX) xx xxxxx 1 - 2 xxx před xxxxxxxxx, xxx se xxxxx utvořit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Xxxx xxx užity xxxxxxxxxx x frekvencí xxxxxxxxxxx mutací x xxxxxxx akceptovaných normálních xxxxxx.

1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx

Xx nutno použít xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx koncentraci x testu xxxxxxxxxxxxx xxxxx tvořených mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx a xxx určení životnosti xxxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx zvýšen, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

1.2.2.8 Xxxxxx

Xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx buňkách. 1-5 x 10⁷ xxxxx/xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx dobu xx 18 x. xxx 28 xx 30 ^xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xx přidáno v xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx ovlivnění xxxx xxxxx centrifugovány, xxxxxxx x vyočkovány xx vhodné xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx přežívající xxxxx x xxxxx x indukcí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx negativní, xx xxx proveden xxxxx xxxxx x xxxxxxx ve stacionární xxxx. Jestliže xx xxxxx pokus xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx počet xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: buňky ve xxxxxxxxxxx fázi xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx médií, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, metabolický xxxxxxxxx xxxxxx,

- podmínky xxxxxxxxx experimentu: xxxxxxx xxxxxxxx, postup a xxxxxx ovlivnění, xxxxxxx xxx ovlivnění, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx xx možné, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.17. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X SAVČÍCH XXXXXXX XX XXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX TG 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xx xx používat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx linie xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X5178X, linie XXX, XXX-XX52 x V79 xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx XX6 (1). X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx konečný xxxxxxxxx xxxxx zjišťují xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (TK) x hypoxanthin-guanin xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x v xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX). Xxxxx xxxxxx x XX, HPRT x XXXX xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX a XXXX může umožnit xxxxxxx i takové xxxxxxxxx změny (xxxx. xxxxx delece), xxxxx xx na lokusu XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).

X xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx dají xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx buněčných xxxxx. Xxx volbě xxxxx se xxxxx x xxxxx růstové xxxxxxxxxx xxxx kultury x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací.

Testy xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx dokonale. Xx třeba xxxxxx xxxxxxxx podmínek, za xxxxxxx by xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. X pozitivním výsledkům, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxx v xxxxxxxx xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).

Xxxxx xxxx xx xxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx testu xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xx xxxxx testem xxxxxxxx, protože xxxxxx xxxxxx xxxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (6).

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx mutace: xxxxxx xxxxxx výchozího xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kódovaného xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx x DNA.

Frameshift xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx posunové xxxxxx): látky, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx párů bází x XXX.

Xxxx fenotypické xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx jsou x xxxx zmutovaných buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx mutací: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx počtem xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx celkový růst: xxxxxx počtu buněk x čase x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx růstu (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) a xxxxxxx klonovací xxxxxxxxx xxxxxxx efficiency (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx).

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx růst: xxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx během xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx efficiency) xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxxx xx miskách xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxx, deficientní xx xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx XX^+/- → XX^-/-, xxxx xxxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pyrimidinového xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx thymidinkinázu xxxx xxxx XXX xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx metabolismu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx TFT xxxxx xxxxx proliferovat mutovan xxxxx, zatímco normální xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Podobně xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 6-thioguaninu (XX) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx xx analog xxxx xxxx sloučenina xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx mutace x xxxxxxx buňkách, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bedlivě xxxxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx s mutacemi x xxx nich. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxxxxx strukturně xxxxxxxx xx xxxxxxxxx činidlem, xx třeba potvrdit, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).

Xxxxx x suspenzi nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx dobu xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx a xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x k xxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxx xxxxxxx mutantů (9) (10) (11) (12) (13). Cytotoxicita xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx relativního xxxxxxxxx nárůstu xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx dostatečnou xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx x typ xxxxx, xxx xxxxx xxxxx x co xxxxxxxxxxxxxxx fenotypické expresi xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Frekvence xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx v médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xxx detekci mutovaných xxxxx a x xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, ke stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Po xxxxxx inkubační xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx frekvence xx xxxxxx z xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x selekčním xxxxx x z počtu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Příprava

1.4.1.1 Xxxxx

Xx se xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxx buněk L5171Y, XXX, CHO-AS52, X79 x XX6. U xxxxxxxxx xxxx používaných x xxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx vůči chemickým xxxxxxxxx, vysoká klonovací xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx se xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx kontaminovány xxxxxxxxxxxx; infikované xxxxx xx xxxxxx nesmějí.

Test xx xxxxx naplánovat xxx, xxx měl xxxxxxxx citlivost x xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x koncentrace testované xxxxx xxxx těmto xxxxxxxxxxx parametrům xxxxxxxxx (14). Minimální počet xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx je, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx desetinásobkem xxxxxxxxxx hodnoty xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10⁶ xxxxx. Xxxx by xxx x dispozici adekvátní xxxxxxxxxx xxxxx, kterými xx se prokázala xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.4.1.2 Média x xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx podmínky (kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO₂, xxxxxxx a vlhkost). Xxxxx xx pro xxxx xxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx je, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx růst buněk xxxxx xxxxxxxx periody x xxxxxxxxx jak xxxxxxxxxx, tak nemutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xx namnoží xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx a inkubují xxx teplotě 37 ^xX. Před provedením xxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxx dříve xxxxxxxxx xxxxxxxxxx buněk.

1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx buňky xx xxxxxxxxxx xxxxxx působí x přítomnosti i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx indukujícími xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce x médiu xxxx xxxxxxx 1 - 10% x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx záviset xx xxx, jakého xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx koncentracích.

Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx použity x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx xxxxx xx xxx být vědecky xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx se připraví xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx naředí. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx přímo nebo xx předtím ředí. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxx neovlivňuje xxxxxx vlastnosti.

1.4.2 Xxxxxxxx testu

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Používá-li xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx podpořeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxx tam, xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx organické rozpouštědlo xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxx, xxx se uvažují xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xX xxxx. osmolality.

Cytotoxicita se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx integrity x xxxxx xxxxx, jako xx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxx (přežití) nebo xxxxxxxxx xxxxxxx růst. Xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx minimálně xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, xxxx xxxx koncentrace pokrývat xxxxxx od maximální xx xxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, že xx jednotlivé xxxxxxxxxxx xxxxxxx lišit xxxx xxx násobkem, xxxxx xxxx xxxx hodnotami 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx koncentrace x xxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxx (relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx celkovému xxxxx x 10-20 %, xx však xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx by maximální xxxxxxxxx xxxxx měla xxx nejnižší x xxxxxx 5 xx/xx, 5 μx/xx x 1,01 X.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, má xxx xxxxxxxx použitá xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxx rozpustnosti xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx konci xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx a xx xxxxx působení, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx během xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, S9, séra xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.4.2.3 Xxxxxxxx

X xxxxx xxxxxxx experimentu se xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, vehikulum) xxxxxxxx, x to xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxx	Xxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxxxxx
Xx	XXXX	xxxxx methansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
	XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx)	xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	66-27-3	200-625-0
	XXXX	xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
Xxx	XXXX	3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx	56-49-5 62-75-9 57-97-6	200-276-4 200-549-8 200-359-5
	XX (malé x xxxxx xxxxxxx)	xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cyklofosfamidu benzo[a]pyren 3-methylcholantren	50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5	200-015-4

				200-028-5 200-276-5
	XPRT	N-nitrosodimethylamin (pro xxxxxx koncentrace X-9)	62-75-9	200-549-8
		xxxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx použít i xxxx vhodné xxxxx; xxxxxxxx xx například xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (CAS 59-14-3, xxxxx EINECS 200-415-9), xxx xxxxxx x tuto referenční xxxxx. Xxx, xxx xx to xxxxx, xx vhodné použít xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxx skupiny.

Pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx médiu, xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx rovněž xxxxx xxxxxxx kontrolu bez xxxxxxxxxxx ovlivnění, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xx mutagenní xxxxxx.

1.4.3 Xxxxxx

1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx působí xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací, xxx xxx xx. Xxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Doba xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jeden xxxx více buněčných xxxxx.

Xxx xxxxxx koncentraci xx xxxxxxxxx kultury xxxxxxxxxx xxxx jenom xxxxx. Používá-li xx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx zajistil xxxxxxxxx xxxxx kultur x analýze (tj. xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Kultury s xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

X xxxxxxx plynných nebo xxxxxxxx xxxxx je xxxxx uplatnit x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx použití xxxxxxxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).

1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, viability x mutační frekvence

Po xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx promyjí x xxxxxxxxx xx stanovení xxxxxxxxx x fenotypické xxxxxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x analýzou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - cloning xxxxxxxxxx xxxx relativního celkového xxxxx.

Xxxxx lokus xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XPRT vyžaduje xxxxxxxxx 6 - 8 dní, XX xxxxxxxxx 2 dny). Xxxxx xx xxxxxxx x médiu x x bez selekčního xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx doby xxxxxxx xx začne x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (používané x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx médium.

Pokud xx xxxxx v xxxxx X5178X XX⁺/^- xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx velikost xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x tomto testu xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx kolonií x xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx provést i xx xxxxxxxx x XX6XX⁺/^-.

2. ÚDAJE

2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxx data xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx u experimentálních x xxxxxxxxxxx kultur. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v testu X5178XX⁺/^- xx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx x velkých xxxxxxx přinejmenším x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrole. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx kolonií xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx XX⁺/^- xx kolonie xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx dobu xxxxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx. Rozmezí xxxxxx xxxxxxxxx obvykle xxxx xx xxxxxx xxxxxx genu po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x expozicí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx postižené xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xx třeba xxxxxx xxxx xxxxxxx (relativní xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx celkový xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx počtem xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxx xx individuální xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; nakonec xx xxxxxxx data xxxxxx x tabelární xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx pozitivní xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx testováním, nejlépe xx modifikovaných experimentálních xxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx výsledků je xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvážit xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tak, xxx se rozšířilo xxxxxxx podmínek. K xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx xxxx jednotlivými koncentracemi x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Ke stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx frekvence. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx významnost by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx systému xxxxxxxx xx nemutagenní. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx dat xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxx nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xx genové xxxxxx x savčích xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx vyvolává v xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxx xxxxxx. Nejprůkaznější xx reprodukovatelný xxxxxxxxx xxxxx xxxxx - xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx mutace.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xx zprávě x xxxxxxx pokusu xx xxxxx uvést xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,

- rozpustnost x xxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.

Xxxxx:

- xxx x zdroj buněk,

- xxxxx buněčných xxxxxx,

- xxxxxxxx počet xxxxxx,

- xxxxxxxx metody xxxxxxxxx xxxxxxx kultury,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx pokusu:

- zdůvodnění xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x počtu xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x cytotoxicitě x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx vehikula x přidané testované xxxxx,

- xxxxxxxxx teplota,

- xxxx xxxxxxxx,

-xxxx působení xxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx látky,

- xxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx)

- selekční xxxxxxx,

- xxxxxxxx, jimiž se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx buněk,

- xxxxxxxx xxxxxxx, x nichž xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx (včetně xxxxxxxxxx kritérií pro xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "velkými" xxxxxxxxx).

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- známky xxxxxxx,

- xxxxx x xX a osmolalitě xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxxxxxxx, minimálně pro xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx malé xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxx X5178X XX⁺/^-,

- xxxxx dávka - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- souběžné xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních kontrol, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - XXXXX XXXXX XX XXXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (UDS) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx DNA obsahující xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx inkorporaci xxxxxxxxx xxxxxxxx (³X-XxX) xx XXX xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x X xxxx xxxxxxxxx cyklu. Vzestup ³X-XxX xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx kapalnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx (LSC) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx v xxxxxxxxxxx, xxx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. UDS xxxx xxx také xxxxxxxxx v systému xx xxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Testované xxxxx x sloučeniny xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x kultivačním médiu xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx ředění xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx nesmí nepříznivě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx lymfocytů xxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných linií (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx kultur

Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxx xxxx, xx-xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX UDS.

1.2.2.2 Negativní x pozitivní xxxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) nebo 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx pro xxxxxxxxxxxxxxx, xxx i pro XXX xxx metabolické xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-NQO). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lze xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx testované xxxxx

Xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx toxický xxxxx.

Xxxxx xx xxxx xxxxxx rozpustné xxxx být testovány x xxxxxxxxxxxxx až xx xxxxxxx rozpustnosti xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx určuje případ xx případu.

1.2.2.4 Xxxxx

Xxx udržování xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx médium, xxxxxxxxxxx XX₂, teplota x xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx aktivační xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx

1.2.3.1 Příprava xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx nádoby), xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 ^xX.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx kultivační xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx založeny xxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx

Primární hepatocyty xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx potkana xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx ³X-XxX po xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x vyhodnocena.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx testované látce xx xxxxxxx dobu x pak jsou xxxxxxxxx působení ³X-XxX. Xxxx působení je xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx typu buněk. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxx ³X-XxX xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx po expozici. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx interakcí mezi xxxxxxxxxx xxxxxx x ³X-XxX. K xxxxxxxx xxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA xx užívá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx séra xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx média, xxx xxxxxxx inhibici xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX.

Stanovení XXX xxxxxx XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vstup buněk xx X-xxxx, xxx xxxx xxxxx uvedeno. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxx xxxx popsáno xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxxx xx XXX xxxxxxxxxxx z xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx DNA x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx ³H-TdR.

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx metodách xxxxxx lymfocyty, xx x nestimulovaných xxxxxxxxx xxxxxxx semikonzervativní replikace XXX xxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxx

1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx x S-fázi xxxxxxxxx. Hodnotí xx xxxxxxx 50 xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx. X každém xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ³X-XxX x xxxxxxxxxx xx určí x xxxx x xxxxxxxxx xxx jader x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.4.2 Vyhodnocení XXX

Xxx xxxxxxxxx LSC XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kultur xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx x xxx kontroly.

Výsledky xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx xxx uvedeny v xxxxxxxxx.

2.1 Vyhodnocení xxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxxxxx ³H-TdR xx cytoplazmy x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají odděleně.

Xxxxxx inkorporace ³X-XxX xx xxxxxxxxxx a xxxxx xxx v xxxxx xx hodnocen xxxxxx xxxxxxx, mediánu x xxxx.

2.2 Vyhodnocení XXX

Inkorporace ³X-XxX xx zaznamenává xxxx xxx/μx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx/μx XXX xxxxx se směrodatnou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Údaje xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx použitých k xxxxxxxxx kultury, médiu, xxxxxxx, koncentraci CO₂,

- testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx výběru x experimentu,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému,

- pokusném xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx metodách,

- xxxxxxxxx blokování xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,

- postup xxxxxxxxx k xxxxxxxx XXX x k xxxxxxxxxxx celkového xxxxxx XXX xxx metodě XXX,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- diskusi xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.19. XXX - XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XX XXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

SCE xx krátkodobý xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxx xxxxx sesterskými xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxx replikačními xxxxxxxx x identických (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx základě xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx SCE xxxxxxxx diferenční značení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx dosahuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XxxX) do xxxxxxxxxxxxx DNA xx xxxx dvou buněčných xxxxx.

Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx potřebné. Xxxxxxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx XxxX. Xx xxxxx kultivace se xxxxx ovlivní inhibitorem xxxxxxxx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx x x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (lidské xxxxxxxxx) xxxx stabilizované xxxxxxx xxxxx (ovariální xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Mycoplasmaty.

Používají xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx (xxxxxxx, kultivační xxxxxx, koncentrace CO₂ x vlhkost).

Testovaná xxxxx xx rozpouští xxxx suspenduje v xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx buněk, xxxxxxxx xxxxx xxxx frekvenci XXX.

Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx použití xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) metabolickou xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx chemických xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx

Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx účinkem a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dále musí xxx použita xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx:

- xxxxx působící xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx

Xx-xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx xxx dávky. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx až xx hranici xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xx xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx buněk z xxxxxxx xxxxxxxxxx nádoby), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx nádob ve xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 ^xX. Xxx xxxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx než z 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx kultur. Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx krve xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 ^xX.

1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x exponenciální xxxx růstu xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx stačí xxxxx xx dvě xxxxxx, ale expozice xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xx dva xxxxxxx cykly, xx-xx xx třeba. Xxxxx, xxxxx nemají xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na konci xxxxxxxx je testovaná xxxxx z média xxxxxxxxxx, xxxxx vymyty x xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x XxxX xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Alternativně xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx současně x xxxxxxxxxx xxxxxx x XxxX po dobu xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách.

Xxxxx xxxx analyzovány x druhém xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x XxxX je třeba xxxxxxxx v xxxxx xxxx ve světle xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, ve xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.

1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxx hodiny xxxx xxxxxxxxx kultivace xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx cytogenetickou technikou. Xxxxxxx preparátů xx xxxxxxxxxx XXX může xxx provedeno xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. fluorescenční xxxx Xxxxxx).

1.2.3.5 Analýza

Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx závislý xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx SCE x xxxxxxxx. Obvykle xx hodnotí xxxxxxx 25 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx před xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x 46 xxxxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, které xx xxxx x ± 2 centromery xx xxxxxxxxx xxxxx centromer. Xx třeba stanovit, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx centromery. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou. Xxxxxxxxxxx se počet XXX x xxxxx xxxxxxxx a počet XXX/xxxxxxxxx zvlášť xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Údaje xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx buňkách, metodách xxxxxxxxx k udržování xxxxxxx,

- kultivačních xxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx CO₂, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice, xxxxxxxxxx xxxxxx x jeho xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxx působení, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- počtu xxxxxx xxx xxxxx experimentální xxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,

- počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),

- xxxxxxxxx xxxxx XXX/xxxxx x XXX/xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),

- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,

- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx dávka/účinek, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx vyhodnocení,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX MUTACE XXXXXX XX POHLAVÍ X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxx

Test xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx (XXXX) xx Drosophila xxxxxxxxxxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxx, jak xxxxxxxx, xxx x malých xxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxx hmyzu. Xx xx test na xxxxxxx xxxxxx vhodný xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxx 80 % všech xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx nesoucích xxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx stavu, xxx na xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx rodí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. XXXX test xx výhodný vzhledem x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxx

Používají xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx linie x xxxxxx linie Xxxxxx-5. Xxxxx xxx použity x jiné xxxxxx xxxxx popsané xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-chromozómu.

1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx ve xxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx suspendují xx xxxxxxx rozpouštědle (xxxx. xxxx etanolu x Xxxxxx-60 nebo 80), před xxxxxxxx xx xxxx ředí xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx vehikulu.

1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx

Test xx xxxxxx určenou xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx ovlivňuje xxxxx xxxxx ovlivněných xxxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx

Xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx per xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx plynům xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx testované xxxxx xx provádí x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx NaCl x xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx má xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.6 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx testované xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší dosažitelné xxxxx.

1.2.2 Xxxxx postupu

Xxxxx xxxxxxxx xxxx (xx stáří 3-5 xxx) jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x jiné xxxxxx xxxxxxxxx linie (vícenásobná xxxxxxx X-chromozómu). Xxxxxx xxxx vyměněny za xxxxxxx xxxxxxxx samice xxxxx xxx xx xxx xxx, aby xxx pokryt xxxx xxxxxxx cyklus zárodečných xxxxx. X potomků xxxxxx samic je xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx expozice xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ve středním xxxx pozdním stadiu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx X₁ xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx. X X₂ xxxxxxxx je x xxxxx xxxxxxx zaznamenávána xxxxxxx xxxxx divokého xxxx. Jestliže v xxxxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (nejsou xxxxxxxx xxxxx samci s xxxxxxxxxx chromozómem), xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx genotypem xxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx generacích.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, počet afertilních xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx křížení a xxx xxxxxxx testovaného xxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx každého xxxxx. Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx letálních xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx v xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, informace x:

- použitých liniích xxxx kmenech Xxxxxxxxxx, xxxx, počtu xxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx F₂ kultur, xxxxx X₂ xxxxxx xxx potomků, počtu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,

- kritériích xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin,

- podmínkách testu: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx počítání xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxxxx údajů,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.21. TEST XXXXXXXXXXXX XXXXXXX BUNĚK - XX XXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxx xxx použít xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx in xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkami xxxxxxxxx s maligní xxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx C3H10T1/2, 3X3, XXX, Fischerových xxxxxxx x xxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx systémy xxxxxxxxxx xxxxxxx fyziologické xx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxxxx xx xxxxxxxx karcinogenním xxxxxx. Xxxxx výsledek xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx schopné xxxxxxx xxxxxxxxx. Cytotoxicita xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonie (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx hodnocení xxxxxxxxxxxx xx vychází ze xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xx nelze xxxxxx x určení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, protože x xxxxxxxxx mohlo xxxxx x prodloužení xxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Buňky

Xxxxxxxx xxxx buněčných xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx transformace xxxxxxxx příslušné xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x xx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.2 Xxxxxx

Xxxxxxx média x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx test xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx rozpouštějí xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx rozpouštědle xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx x kultuře xxxxx xxxxxxxx životnost buněk, xxxxxxxx rychlost xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx a xxx přítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx buňky s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx její xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx látky.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxx experimentu xxxx xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x vyžadujících xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (x rozpouštědlem).

Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontroly:

- xxxxx xxxxxxxx látky: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-acetylaminofluoren, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Je-li xxxxx, xx xxxxx zařadit xxxxx pozitivní kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Tyto xxxxxxxxxxx musí vyvolávat xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx koncentraci, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx buněk, x nejnižší xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxx jako x negativní xxxxxxxx. Xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx testovacím xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxxxxx x výměnou xxxxx (ev. xxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí být xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxx expozice xx x xxxxx propláchnutím xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx probíhá xxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx xxx transformaci. Xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Údaje xxxx xxx prezentovány x tabulkové xxxxx. Xx vhodné vyjadřovat xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx přežívajících xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- použitých xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx inkubace, xxxxxxxxxxxx, kultivačních nádobách, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx systému (xx-xx xx xxxxxx), xxxxxxxxxx výběru koncentrací,

- metodách vyčíslení xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,

- statistickém xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretaci xxxxxxxx.

X.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX TEST X XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobuje xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx dominantních xxxxxxxxx mutací xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx exponovaného xxxxxxxxx xxxxx. Obecně xx xxxxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxx mutace jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromozómů (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Smrt embrya xxxxxxxxxx samice xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Vzestup mrtvých xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx vyjadřuje postimplantační xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx počtu žlutých xxxxxxx xxxx porovnáním xxxxx implantací na xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině. Xxxxxxx dominantní xxxxxxxx xx součet xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrát. Xxxxxxx celkové xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxx xx srovnání xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x živým xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx spermatogonií).

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ve fyziologickém xxxxxxx. Látky nerozpustné xx xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx naředěnou xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Způsob xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podává xxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx informací je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx způsob xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxx i jiné xxxxxxx aplikace.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxx xxxx xx doporučují xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, pohlavně xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx na exponované x xxxxxxxxx skupiny.

1.2.2.3 Xxxxx a pohlaví

Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x ohledem xx spontánní xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky. Xxxxx xx řídí xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu. X xxxxxxxx případě se xxxxxxxxx volí takový xxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx 30 - 50 xxxxxxx xxxxx xx připouštěcí xxxxxxxx.

1.2.2.4 Negativní x xxxxxxxxx kontroly

Pozitivní x negativní (x xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx experimentu. Jestliže xxxx xx laboratoř x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx použity. Xxxxx pro pozitivní xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx vhodných, xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx prokázána xxxxxxxxx xxxxx (např. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx^-1).

1.2.2.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx podávají x xxxxx xxxxx 5 g.kg^-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx^-1.xxx^-1 xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Existuje xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá jednorázová xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx.

Jeden samec xx xxxxxxxxx křížen x jednou xxxx xxxxx neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx musí xxx x xxxxx xxxxxxx xx dobu xxxxxx xxxxxxx cyklu xxxx, xxxx pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxx.

Počet xxxxxx po xxxxxxxx xx dán schématem xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx všechna stadia xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx.

Samice xxxx utraceny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx dělohy xx xxxxxxxx k xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx implantací. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx x počtu xxxxx, počtu xxxxxxx xxxxx x počtu xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx v tabulkách. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx identifikace xxxxxxx xxxxx x samice xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx záznam x xxxxx páření, o xxxxx podané xxxxx, x počtu živých x xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dominantního xxxxxxxxx efektu xx xxxxxxxx xx srovnání xxxxx živých xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx skupině x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxx implantacím x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupině xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrátách.

X xxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxx časná x pozdní xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxxx x preimplantační xxxxxx. Xx xxxxx být xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx x počtem xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx srovnání x xxxxxxxxx.

Xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx možno, informace x:

- xxxxx, xxxxx, xxxx x xxxx xxxxxx, počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x exponovaných x kontrolních skupinách,

- testované látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, údajích x xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx páření,

- xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx počítání dominantních xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx dávka/odpověď,

- xxxxxxxxxxx hodnocení,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX ABERACÍ X XXXXXXX SPERMATOGONIÍCH

1. XXXXXX

Metoda xx replikací OECD XX 483, Mammalian Xxxxxxxxxxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx xxxxx je xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané chemickými xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx chromozómového xxxx xxxxxxx xxxxxx. Tato xxxxxx není xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x běžně xx k xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Chromozómové xxxxxx x xxxxxxxx xxxx jsou u xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx predikovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

X xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx.

Xxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx chromatidového xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mitózu xx působení xxxxxxxxx xxxxx, dříve xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx buněčném xxxxxx. Xxxxx informace x ovlivněných xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx zjišťují aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx, x když xx ovlivněné xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xx xxxx je xxxxx xx xxxxxxxxxx, zda xxxx mutageny xxxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxxx posuzovat xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX.

X xxxxxx je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx látkám. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx ovlivněných xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spermatogonie. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx varleti pak xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx krevním xxxxxx xxxxx anatomické x fyziologické xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx látka xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, není xxxx látka xxx xxxx vhodná.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx obou xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx respektive xxxx xxxx a opětovné xxxxxxx obou xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx dicentrický xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)

Zlom xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx vzniklá xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx, xxx je xxxxx xxxxxxxxx chromatidy. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx dislokovaný (xxxx xxxx osu xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.

Gap: achromatická xxxx menší než xxxxx jedné xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx buňky.

Polyploidie: xxxxxxx haploidního počtu xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx diploidní xxxxx xxxx (3x, 4x xxx.).

Strukturální xxxxxxx: xxxxx chromozómové struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, x xxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x ve xxxxxxx xxxx po xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se xx xx působí látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxx®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 XXXXX METODY

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx

Xxxxx se xxxxxxxxx samci xxxxxxxx xxxxxx a xxxx, xxx ovšem použít xxxxx jakéhokoliv xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx druhu. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx rozdíly xx xxx zahájení xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Podmínky xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou uvedeny xx Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx X.

Xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Příprava xxxxxx

Zdraví xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxx x experimentální xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Klece xx xxxxx uspořádat xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx a xxx xxxx klece xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxx stavu x xx-xx to xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo se xxxxxxxx její xxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle xxxx vehikulu. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx ředí. je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže údaje x xxxxxxxx (stabilitě) xxxxxxxxx, xx skladování xx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx testu

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Rozpouštědlo/vehikulum x používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx nepříliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, aby xxx je to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo/vehikulum.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx testu xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx tak, xxx xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx časovém intervalu. Xxx je to xxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx xxxxx. Příklady xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxx	108-91-8	203-629-0
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxx xxxxxxx	79-06-1	201-173-7
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx skupiny xxxx xx být xxxxxxxx xx všech xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx historické xxxxx o xxxxxxxxx xxxxx x aberacemi x o interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

X xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být minimálně xxx analyzovatelných xxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx schéma

Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx dávkách. Xxxxx xx jedná x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xx xxx xxxxx xx den xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx hodin. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

X případě xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx se vzorky xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxx kinetiku xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx a xxxxx pozdější odběr xxxxxx 24 x 48 xxxxx po xxxxxxxx. X ostatních xxxxx (xx. xxxx xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xxxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (6).

Xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxx. jedná-li xx o látku xxxxxxxxxxx pohyb xxxxxxxxxx xxxxx mitózy, xxxx xxxxx x účinky xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, jsou vhodnější xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).

Xxx xx vhodné xxxxxx xxxxx působit opakovaně, xx posuzuje xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, usmrcují xx zvířata po 24 hodinách (1,5násobku xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Odběry xxx xxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx xx xx xxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx se zvířatům xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje xxxxxx xxxxx Colcemidu® xxxx xxxxxxxxxx x následně xx x xxxx xx vhodném intervalu xxxxxxxx xxxxxx. U xxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4-5 xxxxx.

1.5.3 Dávkování

Provádí-li xx studie xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx živočišného xxxxx, kmene a xxxxxxxxx xxxxxx, jaké xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xxx xxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx pozdější xxx odběru xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Ta je xxxxxxxxxx jako dávka xxxxxxxxxxxx takové xxxxxx xxxxxxxx, že při xxxxxxx dávkách xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx byly xxxxxxx.

Xxxxx, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat xxxxxxx z těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Nejvyšší dávka xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx k xxxxxxx známkám toxicity xx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx( xxxxx pokles xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx podaných x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx se na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí být xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx úrovní. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xx může použít x xxxxxxxx testu xxxxx xxxxx.

1.5.5 Aplikace xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx sondou, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx se xx sondou nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx překročit 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xxx, xxx objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Okamžitě xx usmrcení xxxxxxx xx z jednoho xxxx z xxxx xxxxxx připraví xxxxxxx xxxxxxxx, na xxxxxx xx xxxxxx hypotonickým xxxxxxxx x xxxxxx xx. Xxxxxxx suspenze xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx.

1.5.7 Analýza

X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. minimálně 500 xxxxxxxx x jedné xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx dá snížit, xx-xx xxxxx pozorovaných xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx nezávisle zakódují. Xxxxxxx xxxxxxx postupy xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, musí xxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x hodnocených xxxxxxx xxxxx číslu 2x ± 2.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x tabelární formě. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se vyhodnocuje xxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx buňku. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxx počet x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, uvádějí xx, ale xxxxxxx xx do celkové xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx-xx analyzována xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx x všech xxxxxxxxx zvířat i xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx jakožto míra xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé meiotické xxxxxxxx, x xx xxx, že xx x každého xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx buněk. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x minimálně 1000 xxxxx x xxxxxxx jedince.

2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx používá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx počtu buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx intervalem xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx třeba uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx vyjasnit dalším xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek.

Xxxxxxxxx xxxxx, při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.

Ačkoliv xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxxxxxxx případech získaná xxxx nedovolují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx počet opakovaných xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ukazují, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx x zárodečných xxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx třeba xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx širokého xxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- použitý xxxxxxxxx druh/kmen,

- xxxxx x xxx xxxxxx,

-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- údaje xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx-xx provedena,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx aplikace xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx doby xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx koncentrace xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx / xxx),

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,

- podrobné xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx toxicity,

- xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx koncentrace x xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- kritéria xxx xxxxxxxxx aberací,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- známky xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxx spermatogonií k xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxx a xxxxx xxxxxxx pro každého xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx,

- xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.24. SPOT XXXX X XXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xx xx in vivo xxxx na xxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxxxx se embrya xxxxxxxxxx chemickým xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x cílovými geny xx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx heterozygoti xxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx srsti. Mutace xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vyjádřeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx vytvářejících xxxxxx (spots) xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Počet xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, je xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x potomků x kontrol. Xxxx xxxx test xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx látky jsou xxxxxxxxxx xxxx suspendovány x xxxxxxxxxxx fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky.

1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata

Xxxx xxxxx T (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, c^ch x/x^xx x; xxxxx, x/x; xxxxxx, short xxx, x xx/x xx; xxxxxxx spotting, s/s) xxxx kříženy buď x kmenem XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, brachypody, xx x bp/pa x bp; leaden xxxxx, xx fz/ /xx xx; pearl xx/xx) xxxx x xxxxxx X57 BL (xxxxxxxxx, x/x).

Xxxxx xxx použita x xxxx křížení, xx xxxxxxxxxxx xx budou xxxxxxx xxxxxxxxx potomci. Xxxx. křížení mezi xxxxxx NMRI (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxx, x/x) x DBA (xxxxxxxxx, x/x; brown, x/x; xxxxxx d/d).

1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx zvířat

Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx zabřezlých xxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx dávku. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx a x xxxxxxxxxxx myší. Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx pouze x xxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx ovlivněných xxxxxxxx dávkou.

1.2.1.3 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pouze xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx zvýšení xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx laboratoře xx předpokladu, že xxxx homogenní. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx laboratoři při xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Způsob aplikace

Xxxxxxx xx používá xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx intraperitoneální injekce xxxxx xxxx. Xx-xx xx vhodné, xx xxxxx použít inhalační xxxx jiný xxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Používají xx xxxxxxx dvě xxxxx, x xxxxx xxxxx vyvolává známky xxxxxxxx nebo zmenšení xxxxxxxxx xxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pouze jednou 8., 9. xxxx 10. den xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx den zjištění xxxxxxxxx xxxxx. Tyto xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 a 9.25 xxx xx koncepci. Xxxxxxxxx ovlivnění látkou xxx xxxxxxx během xxxxxx dnů.

Xxxxxxx

X xxxxxx je xxxxxxx a zaznamenáván xxxxx skvrn mezi xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx porodu. Xxxxxxxxx se tři xxxxx xxxxx:

(a) xxxx xxxxxx v xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx předpokládá, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);

(x) xxxxx xxxxxx xxxx agouti xx vyskytují x xxxxx mléčných xxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxxx xx, že xxxxxxxx v důsledku xxxxxx xxxxxxxxxxxx (MDS);

(x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx výsledek somatických xxxxxx (XX).

Xxxxxxx xxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx, RS, xx xxxxxxxxx relevantní. Xxxxxx x odlišením mezi XXX x XX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

Získaná xxxx xxxx xxxxxxx jako xxxxxxx xxxxx sledovaných xxxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx více xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx a exponovaných xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx uváděny xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, xxxxxxxxx o:

- kmeni použitém xxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxx samic x xxxxxxxxxxxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x experimentální x x xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx x xxx odstavení,

- dávkových xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx rozpouštědle,

- xx kterém xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,

- x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx počtu sledovaných xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx x XXXX, XXX a RS x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx malformacích,

- vztahu dávka/odpověď x XX, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x myší detekuje xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x první xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x XO-samice xxxxxxxx xxxxxxxx fertilitu, xxxxx xx využívá xxx xxxxx X₁ xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx sterilita xx xxxxxxxxx některými xxxx translokací (X-xxxxxxx x c-t typ). Xxxxxxxxxxx xxxx analyzovány xxxxxxxxxxxxx v meiotických xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx I, xxxx X₁ xxxxx či xxxxxxx potomků X₁ xxxxx. Samice XX xxxx cytogeneticky xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Příprava

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx nerozpustné, xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky testované xxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx dávkování látky, xxxxx reagovat x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo intraperitoneální xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Pro xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxx specifický xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxxx xxx osm x xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx dospělá xxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx

Počet xxxxxx xxxxx závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx počtu indukovaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu.

Test xx obvykle xxxxxxx xxxxxxxx samců X₁ xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx v X₁ xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx exponované xxxxxxx. Jestliže xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx X₁ xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx 300 samců x 300 xxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx laboratoře, xxxxx xxx použity.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxx vlivu xx xxxxxxxxxxx chování xxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx dvou xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx látek se xxxxxxx xxxxxxxx dosažitelná xxxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxx x oplodnění

Xxxxxxxxx se dva xxxxxxx expozice. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxx xx možná xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxxx xx 35 dnů.

Počet xxxxxxxxx po xxxxxxxx xx řízen xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x musí xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx budou xxxxxxxxxxx. Xx konci xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx samice xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Xx porodu xx xxxxx zaznamenat xxxxx, xxxxxxxx vrhu x pohlaví xxxxxx. Xx xxxx xxxx xxxxx i xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xx doby zařazení xx experimentu.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx jedna xx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx fertility X₁ xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx cytogenetickou xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx F₁ xxxxxxxx xxx předchozího xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

(x) Test xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v X₁ xxxxxxxx se může xxxxxxxx x velikosti xxxx x/xxxx analýzou xxxxxx dělohy samic. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x snížené xxxxxxxxx xxxx xxx stanovena xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx xxxx: X₁ xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx odděleni xxxxxxxxxx xx klecí se xxxxxxxx xx stejného xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx. Klece xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx počínaje 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx vrhu x xxxxxxx X₂ xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx X₁ samice, F₂ xxxxxxx xxxxxx vrhů xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxx testy. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx translokací x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. XO-samice xxxx určeny xxxxxx xxx ratio mezi xxxxxx xxxxxxx z 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx vs. xxxxxx. X následném xxxxx xxxx normální X₁ zvířata vyřazena x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx X₂ xxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx předem určenou xxxxxxxx xxxxxxx, jinak xxxx xxxxxxxxxxx druhé x xxxxx xxxx. X₁ xxxxxxx, která xxxxxxx být klasifikována xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx X₂ xxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxx analýzou xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx analýze.

Xxxxxxx xxxxxx dělohy: Xxxxxxx xxxxxxxxx vrhu u xxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx smrtí xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx implantací indikuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat. Testovaní X₁ xxxxx jsou xxxxxxxxxxx každý ke 2 - 3 xxxxxxx. Oplodnění xx xxxxxxxx xxxxx ranní xxxxxxxxx xxxxxxxxx zátky. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx 14. - 16. xxx a xxxx xxxxxxxxxxxxx živé x xxxxx xxxxxxx.

(b) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Metodou xxx-xxxxxx xxxx připraveny xxxxxxxxx x testes. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx diakinézy - xxxxxxxx X x primárních xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx splňuje požadovaný xxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx X₁ xxxxx jsou vyšetřeni xxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 buněk v xxxxxxxxx - metafáze X. Xxxxxxx mitotických xxxxxxxx xx spermatogoniích xxxx v kostní xxxxx xx xxxxxxxx x samců x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx x X₁ samic xxxxxxxxxxx XX. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx x 10 xxxxx xx důkazem xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (c-t xxx). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mitotických xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx xx všech 10 mitózách xx xxxxxxx xxx XO xxxxxx.

2. XXXXX

Získané xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Pro xxxxx xxxxxxxx připouštění xx xxxxxxxxxxx průměrná xxxxxxxx xxxx a xxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx).

Pro xxxxx xxxxxxxxx X₁ xxxxxx xx uvádí průměrná xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx X₁ nosičů xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx průměrný xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxx každé xxxxxxxxxxx F₁ xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x celkový počet xxxxx pro každého xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxx X₁ sterilní xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

U XX xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx trhu, xxx xxxxx X₂ xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx analýzy.

X xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx byly xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxxxxxxx, xx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxx informaci x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxx x pozitivních kontrolách.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- kmenu xxxx, xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx ovlivňování xxxxxx, xxxxxxx hladiny, xxxxxxxxxxxx x schéma xxxxxxxxxxx,

- počtu x xxxxxxx mláďat xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx potomků xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx x kritériích xxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- počet x detailní xxxxx xxxxxx translokací xxxxxx xxxxx o březosti x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx možno x obrázky,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, xxxxxx na xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx denně xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé skupině xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky toxicity. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.

Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx v xxxxxxx, xxxxxx, v xxxxxxxx xxxx x pitné xxxx. Všem xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, xxxx xxx x nich xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxx data, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x běžně užívaných xxxxxxxxx kmenů. X xxxxxxxx případě by xx počátku xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx 6 xxxxx, x xxxxxx případě starší xxx 8 xxxxx. Xx začátku xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx každé pohlaví xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx orální test xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx se má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx každou xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx a 10 xxxxx). Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx xxxxxx o xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého xxxxxxx) po dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx podávání sledovat xxxxxxxx, přetrvávání nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Dávkování

Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x xxxxx kontrolní xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxx skupinám, x xx xx stejném xxxxxxxx, xxxxx obdrží xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx dávka. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxx xxxx počet. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx měla vyvolat xxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se více xxx 3 xxxxxx xxxxx, mají být xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xx xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.

Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx nebo xx.xx^-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Aplikuje-li xx xxxxx sondou, xxxx xx xx xxx xxx xxxxx xxx xx stejnou dobu, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních) přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Limitní xxxx

Xxxxxxx-xx se 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti xx den (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx toxická xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě zvířat.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, xx xxxxxx xx objeví a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx změny kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (a xxxxxx xxxx při xxxxxxxx testované látky x pitné xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx např. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx studie se xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx zvířat, xxx alespoň x xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx krve jako xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), alaninaminotransferáza (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx v séru. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx analýzy mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx použity pro xxxxxxx širšího spektra xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx běžný xxxxxx, xxx jen xx xxxxxxxx očekávané xxxx xxxxxxxxxx toxicity.

Pokud xxxxxx přiměřené xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx uvážit stanovení xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Pitva

X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx studii se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx dutiny xxxxxx jejich xxxxxx. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx a tkáně xx xxxxx přechovávat xx vhodném médiu x xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, aorta, (slinné xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxx, žaludek, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx a xxxxx střevo, konečník, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (stehenní sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxx mícha xx xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, x (xxxxx žlázy). Xxxxx x závorkách xx xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx podána nejvyšší xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.

(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx skupinách.

(d) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx mají histopatologicky xxxxxxxxxx x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx stavu xxxxxx. Xx třeba xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x těchto xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx u zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx orgánech, xx kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx.

(x) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x orgánech, x xxxxxxx byly xxxxxxxx účinky x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.

2. XXXXX

Údaje se xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx typy poškození. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - úrovně xxxxx (včetně vehikula, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx zvířat xx konce xxxxxxxxx,

- popis xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx,

- doba, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky x xxxxxx xxxxx vývoj,

- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx analýz xxxx),

- pitevní xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.27. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX

(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, studie na xxxxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx po 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx), x to každé xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx zjistily příznaky xxxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Testovanou látku xxx xxxxxxx x xxxxxxx nebo xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx také xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Všem xxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx po xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, xxxx xxx o xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx jako xxxxxxxxx druh - xxxxxxxxxx používá pes: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx plemeni. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx druhů nehlodavců. Xx třeba pracovat xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx; x případě xxx xx xx x xxxxxxxxx začít xx xxxx od 3 xx 6 xxxxxx a xx starším xxx 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický orální xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx a xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 zvířat (4 xxxxxx a 4 xxxxx). Xxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxx xxxx xxx takový, xxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx účinků.

1.2.2.3 Dávkování

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tři úrovně x jednu kontrolní xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se zvířaty x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx. Xxxxxxxx úroveň xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx hodnotu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxx xxx toxický xxxxxx na hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx než 3 xxxxxx dávek, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Ve xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x v xxxxxxxxx skupině by x xxxxxxx rovněž xxxxxx docházet.

Podává-li xx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx ani xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx, může xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x ppm xxxx mg.kg^-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx uvést. Xxxxxx-xx xx látka xxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xx se xxx xxx xxxxx xxx ve stejnou xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx testem, x xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx-xx 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxx (xxxx xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx možno xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx toxická xxxxx x potravě, je xxxxx zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířat.

1.2.2.5 Xxxx pozorování

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx toxické účinky, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, ve xxxxxx xx objeví a xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Popis xxxxxxx

X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx jiným xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx se xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 xxx v xxxxx.

Xxxxxxxxxx zahrnuje (xxx není xx xx xxxxxxx) xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.

Xxxxxx potravy (x příjem xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx) a hmotnost xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx x vhodnými xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx následující vyšetření:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx konci xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxx x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx změny, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Na začátku xxxxx, a potom xxx v měsíčních xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx na xxxxx xxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx například xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), trombinový xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.

(c) Xx xxxxxxx xxxxx, a xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx a dále xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny studie xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (přičemž trvání xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxx transferáza (dříve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x xxxxxxxx aminotransferáza xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, dusík xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (ne xxxx xxx 24 hodin).

(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje jako xxxxx xxxxxx, ale xxx na podkladě xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx zevní xxxxxxxxx povrchu těla, xxxxx xxxxxxx otvorů, xxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxx včetně xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, štítná xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x varlata xx xx xxxxxxxx xx xxxxx zváží xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Následující orgány x tkáně je xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xx možná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, podvěsek xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx místě brzlíku,(průdušnice), xxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx pohlavní xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a slepé xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, reprezentativní lymfatické xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) a (páteřní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx se posuzují, xxxxx je to xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx dávkových xxxxxx xx provedena xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxx když xx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx zvířat xx xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx, xxxx poškození x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Výsledky xx třeba vyhodnotit xxxxxxx statistickou metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx statistickou metodu.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxxxxx nebo xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x koncentrace,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxx,

- xxxxxx xxx účinku, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,

- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx (xxxxxxx klinické xxxxxx),

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální příznaky x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx výsledky (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxx analýz xxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- detailní xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx možné,

- diskuse xxxxxxxx,

- interpretace výsledků.

X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX DERMÁLNÍ

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Testovaná xxxxx se xxxxxxxx xxxxx xx kůži xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Zvířata, xxxxx uhynou během xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx se však xxxxxxx cca 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx opakovat xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xx nepoškodila xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxx x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx kontakt x xxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka se xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, králíky xxxx morčata, xxxxxxxx x xxxx zvířecí xxxxx, jejich xxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (pro každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x kmen.

1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) se xxxxxxx xxxx. Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx březí. Xxxxx se zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 zvířat (10 zvířat každého xxxxxxx) po xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx.

1.2.2.3 Dávkování

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo - xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx - kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba expozice xx xxx xxxxxxx 6 hodin xxxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xxxxxxxxxxxxx xxx, aby xx udržovala xxxxx xxxxxxx xxxxx ve xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx zvířete. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx v kontrolní xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx se kontrolní xxxxxxx stejným způsobem xxxx xxxxxxxx skupinám, x to xx xxxxxxx množství, které xxxxxx skupina, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Nejvyšší xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx x xxxxx počtu. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx střední xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 hladiny xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx dávky x x kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx xx vyhodnocení xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx, což x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx jej xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx^-1 xxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx další xxxxxxx nutná.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x opět xxxxxx xxxxxxx účinky.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata xx chovají x xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x týdnu xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xx dalších 28 xxx bez xxxxxxxx, xxx xx xxxxx pozorovat xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx činí xxxxxxx 6 xxxxx denně.

Xxxxxxxxxx látku je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx celou xxxxxx, xxxxx představuje asi 10 % povrchu xxxx, u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha xxxxx. Xxxxxx je xxxxx pokrýt xx xxxxxxxx xxxx pokusné xxxxxx rovnoměrně x xx xxxxxxxx vrstvě.

Xxxxxxxxx xxxxx je xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxx plochu xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxxx x testovaná látka xxxxxxxx a xxx xx zabránilo orálnímu xxxxxx. X zamezení xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx pohybu, úplnou xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx otravy xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx změny srsti, xxxx, očí a xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chybného zařazení. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Umírající zvířata x xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx či xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx přístrojem xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx studie nejlépe x všech xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávky a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.

(b) Xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního počtu xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx čas či xxxxx xxxxxxxxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat vápník, xxxxxx, chloridy, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxxx trvání xxxx hladovění se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx transferáza (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx transamináza xxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x séru. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být potřebné xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx moči xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pozorované xxxxxxxx.

Pokud xxxxxx xxxxxxxxx historická xxxxxxxxx xxxx, má xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx parametrů xxxxx xxxx začátkem xxxxxxxx.

1.2.3.1 Pitva

U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Následující xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx na místě xxxxxxx, (průdušnice), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, děloha, xxxxxxxx xxxxxxxx orgány, xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx x kostní xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních ploch), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx) a (xxxxx žlázy). Tkáně x xxxxxxxxx se xxxxxxxx, pokud je xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx souvisejí x xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(a) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření normální x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx x tkání xx xxxxx provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

(b) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x ostatních xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(d) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat x xxxxxxxx příznaků xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx zdravotního xxxxx zvířat. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxx xxxxxxx xxxx xx orgánech, xx xxxxxxx bylo zjištěno xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx skupiny, musí xx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x orgánech, x xxxxxxx xxxx zjištěny xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx musí xxx xxx každou experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx lézí. Xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx k tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x průběhu xxxxxx má pokud xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- xxxxxxxx pokusu,

- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, pokud xx použije) a xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx dávek,

- xxxxxxx xxx účinku, xxxxx xx lze xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledování,

- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx vývoj,

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné hmotnosti,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),

- xxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx xx xxxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx.

B.29. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX - XXXXXXXXX

(90xxxxx opakovaná inhalační xxxxxxxx - xxxxxx xx xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Několik xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx studované xxxxx denně po xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, xxxxx xxxxxxx jedné xxxxxxxxxxx, x to po 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx dosažení xxxxxxxx koncentrace testované xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je třeba xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Pokud xx xxxxx, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, musí být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Pracuje xx na xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx testem, v xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxx a xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx každou úroveň xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 samic x 10 samců). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx o počet xxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní skupinu) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx expozic xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx nejméně xxx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx (xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací testované xxxxx). S xxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xx se xxxxxxx x kontrolní skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xx vyvolat xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx koncentrací x x kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl být xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxx expozice

Xxxxxxx xx exponují xx xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx možné xxxxxx x xxxxxx xxx expozice.

1.2.2.5 Expoziční xxxxxxxx

Pro expozici xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení, xxxxx xxxxxxxx proudění xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx 12krát za xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxx a rovnoměrné xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba ho xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx inhalační expozice xxxxxxxxx látce xxxx xx nejvyšší. Xxx xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x inhalačním xxxx xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, samotné xxxxx xxxx individuální celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky jinými xxxxxxx.

1.2.2.6 Doba xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx účinky.

1.2.3. Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx skupinách, která xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x otravy xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx během xxxxxxxxxxx xx xxx 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % x 70 %, s xxxxxxxx xxxxxxx, kde xx xxxx možné (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.

Používá xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx se provést xxxxxxxxx pokus xxx xxxxxxx potřebných koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx podmínky x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx.

Měření xxxx monitorování podmínek xxxxxxxx:

x) Xxxxxx xxxxxxx vzduchu (xxxxxxxxxxx).

x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky se xxxx x dýchací xxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx hodnoty o xxxx xxx ±15 %. X některých xxxxxx x aerosolů, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx experimentu mají xxx koncentrace tak xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx vývoji xxxxxxxxxx xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx. Xxxxx expozic xx měří tak xxxxx, jak xx xx potřeba pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

x) Xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx

x) Xxxxx xxxxxxxx x xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx x zaznamenávat xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování x kleci xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Hmotnosti xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx pokud xxxxx nedocházelo xx xxxxxxx xxxxxx jako xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx přežila, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx vyřadit x xxxxxx.

U xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx dávky a x kontrolních skupin. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Quickův), xxxxxxxxxx čas xx xxxxx trombocytů.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx analýza krve. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat vápník, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx druhu x xxxxx), alaninamino xxxxxxxxxxx (xxxxx glutamát-pyruvát xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, hormonů, acidobasické xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x případě potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

(x) Analýza moče xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx podkladě xxxxxxxxx xxxx pozorované xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx dřívější xxxxxxxxx xxxx, má se xxxxxx stanovení hematologických x biochemických xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx se xxxxxxx pitva zahrnující xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx dutiny x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx sekci xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně xx xxxxx přechovávat xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx neporušeny, xxxxxx x xxxxxxx vhodným xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx xx považuje xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, hypofýza, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx místě brzlíku, xxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, varlata x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, žaludek, dvanácterník, xxxxx, tlusté x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx žláza), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx stehenní xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (xxxxxxx xxxxx xx třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx se posuzují, xxxxx xx to xxxxxxxxxx xxxxx příznaků xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx systému x ostatních xxxxxx x tkání xx xxxxx xxxxxxx u xxxxx zvířat skupiny, xxxxx xxxx exponována xxxxxxxx koncentraci, a x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

(b) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze.

(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx orgány x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xxxxx zvířat xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx se mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rutinně, musí xx xxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx postižení xx xxxxxxx s vysokou xxxxxxxxxxx.

(x) Xxxxxxx-xx xx satelitní xxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Výsledky je xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x tomu možno xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx částic x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx zvířat v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx pro měření xxxxxxx, xxxxxxxx vzduchu, xxxxxxxxx stability xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,

- xxxxx x expozici xx xxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají obsahovat xxxx xxxxx:

x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,

x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx vzduchu),

x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx,

x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx,

x) medián xxxxxxxxx xxxxxx (u aerosolu),

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledování,

- xxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- hematologická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.30. TESTOVÁNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX

1. METODIKA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx skupinu, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Během x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx jsou chována xxx xxxxxxxxxxxx podmínkách xxxxx 5 dní xxxx započetím xxxxx. Xxxx testem jsou xxxxxx, mladá zvířata xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Preferovaným xxxxxx je potkan. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx x další xxxxx (hlodavce nebo xxxx). Xx xxxxx xxxxxx zdravé x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx nejdříve xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx činit xxxx než ± 20 % od xxxxxxx. X xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx test subchronické xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x kmen x xxxx studiích.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx úroveň xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 samic x 20 xxxxx), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx x neměly xx být březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx některá xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vyšší xxxxx xxxxxx.

V xxxxxxx xxxxxx druhů zvířat (xxxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx menší xxxxx xxxxxx, ale xx xxxx než 4 xx každého xxxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx expozic

Xx xxxxx použít xxxxx tři dávky x xxxxx kontrolní xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxx vyvolat prokazatelné xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx měly xxx xxxxxx ve xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxxx x nízkými xxxxxxx. Výběr xxxxx xx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X případě, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxx nebo x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxx přístup.

1.2.2.4 Xxxxxxxx

Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x exponované xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Ve zvláštních xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx není xxxxxxxxxx xxx vehikulu.

1.2.2.5 Xxxxxx aplikace

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx člověka.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicita x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx odvozena x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vstřebávání, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx testů xxxxx toxicity.

Orální xxxxxx

Xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x gastrointestinálního xxxxxx x je-li xxxxxx xxxxx z xxxx, xxxxx xxxx xxx exponován xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, pokud xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx důvody. Xxxxxxx xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.

Xxxxxxx xx xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx pět xxx x týdnu xxxx vést x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx v xxxxxx xxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, dávkování xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx

Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx aplikace, jsou xxx uvedeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx podání. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx denně xx xxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx expozice), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx hodinou pro xxxxxx zvířat denně xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. V xxxx xxxxxxxxx jsou zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx je v xxx, xx x xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx během víkendu.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx kontinuální xxxxxxxx xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nutnosti xxxx a krmení xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx xxxxxx koncentrace xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Expoziční xxxxxx

Xxxxxxx xx exponují x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx xxxxxx, xxx byl zajištěn xxxxxxxxxx přísun kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx prostřední. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaných xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx v komoře xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx:

(a) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;

(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx více xxx 15 % xxxxxxx xxxxxxx;

(x) teplota x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 ^xX a xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx. Oba xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány xxxxxxxx;

(x) měření velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx aerosolu xxxx respirabilní. Analýza xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxx vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2.6 Trvání xxxxxx

Xxxxxxxx látky xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

1.2.3.1 Pozorování

Xxxxxxx klinické xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx ztráty xxxxxx xx studie, xxxx. xxxxx xxxx uložení xx xxxxxxx u xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxx moribundní. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx spolehlivě zachytil xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx toxických xxxxxx, x také za xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x důsledku nemocí, xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxxx x očních změn x xxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx objevení a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.

Hmotnost xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx jednou xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx xxxxxx xxxxx a aspoň xxxxxx za čtyři xxxxx po tomto xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx spotřeby xxxxxxx (a vody xxx, xxx je xxxxxxxxx látka podávána x xxxxx vodě) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů x xxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost xxxx frekvence xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, celkový xxxxx bílých xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx ukazatele xxxxxxxxxxx) xx měla být xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx a poté x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx skupiny. Xxx xxx xx to xxxxx, xxxxxx xx xxxxx intervalech xx xxxx xxx od xxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xx měl xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxxx naznačí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx nebo údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí nutnost, xxxxxxx xx x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.3.3 Xxxxxxx moči

Vzorky xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx možno xx xxxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx zkoušky. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx jednotlivých zvířat, xxxx xx směsném xxxxxx pro skupiny xxxxx dávek x xxxxxxx:

- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxxx, ketolátky, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).

1.2.3.4 Biochemické xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx všech xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Od nehlodavců xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X těchto xxxxxx xx připravena xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:

- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- testy xx funkci xxxxx (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy¹⁾, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx²⁾, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ornithin xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx na lačno,

- xxxxx na xxxxxx xxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.

1) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

2) xxxx xxxxx jako xxxxxx aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx

1.2.3.5 Xxxxx

Kompletní xxxxx xx provede x xxxxx zvířat xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx byla xxxxxxxx x moribundním xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx léze, xxxxx xx xxxxx být xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Mělo xx xxx xxxxxxxxx porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx x tkáně xx xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx:xxxxx³⁾ (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx mozkové), xxxxxxxx xxxxxxxxx, štítné xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x plic, srdce, xxxxx, slinných žláz, xxxxx³⁾, xxxxxxx, xxxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx měchýře, xxxxxxxxxxxx xxxxx, slinivky, xxxxx³⁾, akcesorních xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, kůže, svaloviny, xxxxxxxxxxx xxxxx, míchy (xxxxx, hrudní x xxxxxxx), sterna x xxxxxx dření a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx studiích, xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx inhalační xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx nosu, xxxxxx x hrtanu.

Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx by měly xxx x xxxxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx dát xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodítko.

3) xxxx orgány x 10 xxxxxx xx pohlaví x xx xxxxxxx u xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxx a dále xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) ze xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx

1.2.3.6 Histopatologie

Xxxxxxx viditelné změny, xxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxx vyskytující xx v kterémkoli xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Navíc xxxx doporučeny xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

(x) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všech uchovaných xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx:

1. x všech xxxxxx, xxxxx uhynula xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,

2. x všech xxxxxx xx skupiny s xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx skupiny,

(x) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx způsobené xxxx xxxxxxxxxxxxx způsobené xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx ve xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx,

(c) xxx, xxx xxxxxxxx svědčí xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx života xxxxxx xxxx vyvolání xxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, skupina s xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx popsaným xxxxxxxx,

(d) informace x xxxxxxxxx xxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxx správné posouzení xxxxxxxxxxx změn xxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx by xxxx xxx sumarizovány xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx x xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx odpovídající statistickou xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxx

Xxxxxx x testu xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující informace:

- živočišný druh, xxxx, zdroj, podmínky xxxxxxxx, xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx pro vytváření xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat v xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx je xx žádoucí, stability xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:

(x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx)

(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx

(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx to relevantní)

- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx

- xxxxxxxx (dávková) xxxxxx

- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx

- xxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxx

- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx abnormální příznak x jeho xxxxx xxxxx

- data x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx

- xxxxxxxxxxxxxx nálezy

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx

- testy xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (včetně výsledků xxxxxxx xxxx)

- xxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx použitých xxxxx

- xxxxxxx xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X XXXXXXXXXX

1. XXXXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx podává x odstupňovaných dávkách xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx březích xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx xxxxxx skupinu, xxxxxxx v xxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx před xxxxxxxxxx xxxxx porodu xxxx xxxxx samice xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryo- x xxxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody

1.2.1 Příprava

Xxxxx, dospělé samice, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx věku x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx při laboratorních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Potom xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Oplozené xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx experimentálních xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxx xxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx termínem xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx sledování xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxxxxx zpomaleného xxxxx, opožděné xxxxxxxxx x krvácení do xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxx druhy xxxx xxxxxx, myš, xxxxxx x králík. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx x xxxxxx. Je xxxxx používat xxxxxxxxx xxxxxxxx kmeny. Xxxxxxxxx xxxx by xxxxx xxx nízkou xxxxxxxx x měly xx xxx u xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Zvířat jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2.2 Počet x pohlaví

Xxx xxxxxx dávku xx xxxxx xxxxxx aspoň 20 xxxxxxx potkanů, xxxx xxxx křečků xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx studované xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxx x xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx

Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupinu. X xxxxxxx, xx je xxxxxxxxx látka xxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx do xxxxxx i xxxxxxx, xxxxx bylo xxxxxx xxxxxxx vehikulum. Xx xxxxx také znát xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vehikula: xxxxx být xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx zvířaty x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x testovací xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx fyzikálně xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx x ideálním xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxx toxicity, xxxx xx xxxxx snížení xxxx, ale už xx více xxx 10 % xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nízkou x xxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx test

V xxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxx dávce nejméně 1000 xx.xx-1 prokazatelně xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx

Nultým xxxx xxxxx xx xxx, kdy je xxxxxxxxxx vaginální zátka x/xxxx xxxxxxx (pokud xxxxx). Doba xxxxxxxx xx měla xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx organogeneze. Xx xxxx období xx možno xxxxxxxxx 6. xx 15. xxx x xxxxxxx x myši, 6. xx 14. xxx x xxxxxx x 6. až 18. xxx x xxxxxxx. X xxxxxxx, že xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx bylo pozorováno xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx umělá inseminace, xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx jeden xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxx pozorování

Xxxxx xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x opatření jsou xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx ztrát xxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx orálně xxxxxx, xxxxx ve xxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx denně během xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx být xxxxxxxx xx xxxx xxxxx na počátku xxxxxxxx xxxxx nebo, xxxxxxxx x rychlému xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, stupně x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxx makroskopicky xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx i xx ukončení xxxxxxxx xxxxx až xx xxxx přibližně jeden xxx xxxx porodem. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx porodu. Xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx kůže x srsti, xxx x sliznic, xxxx xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vážit xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

Pokud xxxxx x uhynutí xxxxx xxxx xx konci xxxxxx, je xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo patologické xxxxx, které mohly xxx vliv xx xxxxxx březosti. Ihned xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxx x zárodků x xxxxxxx počet živých xxxxxxx. Obvykle je xxxxx xxxxx dobu xxxxx zárodků v xxxxxx. U xxxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zárodků x xxxxxxxxx průměr. Xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx zárodek. X xxxxxxx, xxxx x křečků je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx u zhruba xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx abnormity xxxxxxx tkání. U xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x skeletu.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx formě xxxxxxx, udávající pro xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx měkkých xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZPRÁVA

3.1. Zpráva x xxxxx

Zpráva x testu xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:

- druh, kmen, xxxxx, podmínky ustájení, xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx,

- dávky (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxx xxxxxx (xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx),

- xxxx xxxxx xxxxx studie xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xxxxx xxxxx,

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x spotřebě potravy,

- xxxxx xxxxxxxx x údaje x xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, defekty xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),

- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, defekty xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip metody

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx sedm xxx v xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx větší xxxx života zvířat. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

Zvířata xx xxxxxxx v xxxxxxxxx podmínkách ustájení x krmení xxxxxxx xxx xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx chovaných xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx subchronické xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx hlodavce se xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx průběžné xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx takto xxxxxxxx před xxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxx kromě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (méně xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx účinky xxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxxxx interferovat x xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx neměla xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Střední dávku/dávky xx třeba stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx úrovní xx xxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx se provádí xxxxxxx denně. Je-li xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx by být xxxxx k dispozici.

1.2.4 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx identická x xxxxxx ohledu x exponovanou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo použije-li xx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxx aplikace

Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x inhalační. Xxxxx xxxxxxx podání xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pravděpodobném xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx

Xxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li požití xxxxx z cest, xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx tomu nějaké xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látku x potravě, rozpuštěnu x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.

Ideálně xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx sedm xxx x týdnu, protože xxxxxxxxx xxx dnů x xxxxx může xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnocení. Nicméně, xxxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx xx považováno za xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx cesty xxxxxx x xxxxxxx x xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx poškození.

1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx

Protože xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxxxx komplikovanější xxx xxxx způsoby aplikace, xxxx zde uvedeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou alternativou xx specifických situacích.

Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx denně xx pět xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x prostředí, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx jednou xxxxxxx xxx krmení xxxxxx denně xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx i pro xxxxxxx expozičního xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Hlavní xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x stálou xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx xx zvíře 17 - 18 hodin xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Volba xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx xxxxxx x xx lidské expozici, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice pro xxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx pití x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a potřebou xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx komory

Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx komorách, jejichž xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxxx dostatečný xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve všech xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx obvykle xxxxxxx mírný xxxxxxx x xxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx atmosféry x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

(a) Xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

(x) Xxxxxxxxxxx: během xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx hodnoty.

(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx x komorách 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx je voda xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průběžně.

(x) Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx by xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x respirabilní xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx atmosféry xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx xxxx aerosolu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic by xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxx vývoje xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.6 Trvání xxxxxx

Xxxxxx testu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx větší xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxxx použitého xxx xxxx. Test xx xxx xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x xxxx x křečků x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Nicméně, pro xxxxxxx xxxxx xxxxxx x delší xxxxx xxxxxx xxxx. s xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx doba xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxxx pro xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx potkany. Alternativně, xxxxxxxx takové xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x kontrolní xxxxxxx klesne xx 25 %. Xxx xxxxxxxx testu, ve xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx odpovědi, xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx. Tam, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxxx dávkou ze xxxxxxxx toxických příčin, xxxxxx to nutné xxxx x xxxxxxxx xxxxxx testu, pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx možno xxxxx xxxxxxxxx výsledek xxxxx, xxxxx být xxxxxx použitelných údajů (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx x xxxxxxxx chyb xxxxxxx) v xxxxx xxxxxxx xxxxx než 10 % a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.3 Popis xxxxxxx

1.3.1 Pozorování

Denní xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx je nutná, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx v důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx utracena a xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx by xxxx xxx zaznamenány x všech xxxxxx. Xxxxxxxx pozornost xx xxxxx xxxxxxx vývoji xxxxxx: doba xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, rozměry, xxxxxx x xxxxxxxx každého xxxxxxxxxxx či hmatného xxxxxx xx zaznamenává.

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx spotřeby potravy (x xxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxx podávána x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x pak xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx jiné xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx jednou xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx období xxxxx x xxxxx xxxxxx xx čtyři xxxxx xx xxxxx xxxxxx.

1.3.2 Klinická xxxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v klecích xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xx 12 xxxxxx, xx 18 xxxxxx x před xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx nátěr xx xxxxx xxxxxx. Diferenciál xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx vyšetří x x skupiny x xxxxxx nejblíže xxxxx, xxx je xxxxxx xxxxx.

1.3.2.2 Xxxxx

Kompletní xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, včetně xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx utracena, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx tumory nebo xxxx, xxxx léze, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx měly xxx xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx (xxxxxx řezů xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x příštítná xxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx orgány, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, ileum, xxxxx xxxxxx, tračník, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, representativní xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx žláza, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx s xxxxxx xxxxx, stehenní kost xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxxxx, střední xxxxxx x bederní) x xxx.

Xxxxxxxx plic x močového xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx uchování těchto xxxxx. Xxxxxxxx plic x inhalačních xxxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx a xxxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx testu, x u xxxxx xxxxxx xxxxxxx kontrolní x s xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx okem x xxxx, které xxxx podezřelé jako xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx.

(c) Xx-xx xxxxxxxx rozdíl v xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx skupinou, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx provede x daném xxxxxx xx tkáni x x dalších skupinách.

(x) Xx-xx přežití xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než u xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxx nižší dávkou.

(x) Je-li xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, které xx mohly ovlivnit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx nižší dávkovou xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx zvířat xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx jejich xxxxxxxxx x počet xxxxxx s xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Mohou xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.

3. XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxx

Xxxxxx o xxxxx bude, pokud xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,

- xxxxxxxx testu: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x expozici: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. směrodatná xxxxxxxx) x xxxx xx zahrnovat:

(x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x inhalačním xxxxxxxx,

(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxxx koncentrace (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),

(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,

(x) skutečné koncentrace x dýchací xxxx,

(x) mediány velikosti xxxxxx (xxx xxx xx xxxxxxxxxx),

- xxxxxxx úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, je-li užito) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx tumorů podle xxxxxxx, dávky x xxxx xxxxxx,

- xxxx úmrtí během xxxxxx xxxx zda xxxxxxx přežila xx xx konce,

- xxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx pohlaví a xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx,

- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx,

- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,

- nálezy xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx metod,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX TOXICITY/KARCINOGENITY

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxx

Cílem xxxxxxxxxxxxx testu chronické xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x karcinogenní xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx druhu xxxxx xx dlouhodobé xxxxxxxx.

Xxx tento xxxx xx test xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxxxxxxxx satelitní xxxxxxxx x kontrolní xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxx satelitní xxxxxxx může xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxx karcinogenity xxxx xxxxxxxx jak xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx satelitní skupině xxxx testována xx xxxxxxx xxxxxxxx.

Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na skupinu, xx xxxxx xxxx xxxxxx zvířat. Xxxxx x po xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx sledování xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

Zvířata se xxxxxxx v pokusných xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Preferovaným druhem xx potkan. Xx xxxxxxx předchozích studií xx možno použít x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx co nejdříve xx odstavení mláďat. Xx začátku studie xx neměl xxxxxx xx xxxx zvířat xxxxx více než ± 20 % xx průměru. X xxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx a xxxx v obou xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 zvířat (50 xxxxx x 50 xxxxx) na každou xxxxxx dávky a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxx nullipary x xxxxxxxxxx. Xx-xx plánováno xxxxxxxx utrácení xxxxxx, xxxxx xx xxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx takto xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

Exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx) pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx jiné, xxx xxxx xxxxxx, xx každá xxxx xxxxxxxxx 20 zvířat xxx každé pohlaví, xxxxxxx satelitní skupina xxxxxxx by měla xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx kromě xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx účinky xxx xxxxxx. Nejnižší xxxxxxx úroveň by xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx známky toxicity. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx než 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx dávku/dávky xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx.

Při xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Expozice se xxxxxxx xxxxxxx denně. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x pitné vodě xxxx xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx k xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx charakterizována, xxxxxx xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxx hlavní xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x chemických charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice x xxxxxxx.

1.2.5.1 Orální xxxxxx

Xxx, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx jedna x xxxx, jimiž může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx podanou x xxxxxxx.

Ideálně xx xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx pět xxx x týdnu xxxx vést x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, a xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx na praktické xxxxxxx, dávkování xxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx

Aplikace xxxxx xx kůži xxxx xxx xxxxxxx jako xxxxxxxx hlavní xxxxx xxxxxx u člověka x jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.5.3 Inhalační xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx komplikovanější xxx jiné xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx expozice, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin denně xx xxxx xxx x týdnu (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx stejnou xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx čištění expozičního xxxx. V xxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxxxx a stálou xxxxxxxx xx v xxx, xx v xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx má xxx simulována. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx obtíže. Například xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx simulaci podmínek xxxxxxx prostředí mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x krmení xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx přísun kyslíku x rovnoměrná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx konstrukci, tak xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx udržuje xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx udržení xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:

(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxx by měla xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

(b) koncentrace: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % střední xxxxxxx,

(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx by xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X x vlhkost x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, kdy xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx komory. Xxx parametry by xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) měření xxxxxxxxx xxxxxx: měla xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx x atmosféře xxxxx x tekutých xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x dýchací xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx zvíře xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx odpovídat celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx měla být xxxxxxxxx často xxxxx xxxxxx generujícího xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, a poté xxxxx expozic xxx xxxxx, aby xxxx xxxxx posoudit xxxxxxxxx xxxxxxxxxx částic, kterým xxxx xxxxxxx exponována.

1.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Trvání xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx část normální xxxx života zvířete xxxxxxxxx pro test. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x xxxx x křečků x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Nicméně xxx některé xxxxx xxxxxx s xxxxx xxxxx života xxxx. x xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 měsíců xxx xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx nebo x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx kterém xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx pohlaví xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou xx zjevných xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx skupiny xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx by činily xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x důsledku xxxx obsluhy) v xxxxx xxxxxxx větší xxx 10 % x přežití xx xxxxx skupinách xxxxx xxx nižší než 50 % x 18 xxxxxxxx u xxxx a křečků x v 24 xxxxxxxx u potkanů.

Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxxxxxxx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx být v xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx plánováno xxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx patologie, která xx vztah x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx postupu

1.3.1 Xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x klecích xxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (skupin) xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx kontrola zvířat xx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měla být xxxxxxxx a xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x mortalita xx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx tumorů: xxxx xxxxxxxx, lokalizace, xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.

Xx xxxxx xxxxxxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx tam, xxx xx testovaná látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x pak xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx zdravotní xxxx nebo změny xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx hmotnosti xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx týdně během xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx týdny xx xxxxx období.

1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx

1.3.2.1 Hematologie

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx destiček nebo xxxxx měření srážlivosti) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx tři xxxxxx, šest xxxxxx x xxxx v xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 potkanů xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx je xx xxxxx, xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx svědčí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx xxxx xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxx i x xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.

1.3.2.2 Xxxxxxx moči

Xxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx sbírají xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx zvířat x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx provedena xxx xx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx nebo na xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:

- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxxx, ketolátky, xxxxxxx krvácení (semi-kvantitativně),

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).

1.3.2.3 Biochemické xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech a xx xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx všech xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx pro tytéž xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx před xxxxxx. X těchto xxxxxx xx připravena xxxxxx a jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamát xxxxxxx transaminázy¹⁾, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx²⁾, gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,

- metabolismus xxxxx, např. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,

- testy xx xxxxxx xxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.

1) xxxx xxxxx xxxx sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

2) xxxx xxxxx jako xxxxxx aspartát aminotransferáza

1.3.2.4 Makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxx, xxxxx zemřela xxxxx xxxxxx xxxx xxxx utracena x xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx všech xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx léze, xxxxx xx mohly být xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.

Všechny xxxxxx x tkáně xx měly xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To se xxxxxxx xxxx následujících xxxxxx a tkání: xxxxx³⁾ (prodloužené míchy/mostu, xxxxxxxxx kory, kory xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx žlázy x xxxxxxxxxxx tělísek, thymu, xxxxxxx a xxxx, xxxxx, aorty, slinných xxxx, xxxxx³⁾, xxxxxxx, xxxxxx³⁾, nadledvinek³⁾, jícnu, xxxxxxx, dvanácterníku, jejuna, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, konečníku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, gonád³⁾, akcesorních xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx žlázy, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x bederní), xxxxxx x kostní xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx kloubů, x xxx. Xxxxxxxx plic x xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxx xxx odpovídající histopatologické xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx klinická vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx procedur xx xxxx xxx k xxxxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

3) Xxxx xxxxxx z 10 xxxxxx xx xxxxxxx x na xxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx patologické změny xxxxxxxxx xxxxxx, vyšetří xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx jejím xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:

(x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x x všech xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x s xxxxxxx xxxxxx;

(b) xxxxxxx xxxxxx viditelné xxxx x léze, které xxxx podezřelé jako xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx;

(x) xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx skupinou x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx provede x daném xxxxxx xx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxxx;

(x) je-li přežití xx skupině x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;

(x) xx-xx xx xxxxxxx s vysokou xxxxxx doklad o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx kompletně vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, dobu xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Výsledky xx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxx xxx použity jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxx

Xxxxxx x xxxxx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,

- xxxxxxxx testu: xxxxx expozičního zařízení xxxxxx konstrukce, typu, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot a xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) xx měly xxxxxxxxx:

(x) rychlost xxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx zařízení,

(b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vstupující xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx objemem vzduchu),

(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,

(f) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xxxxxxxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x koncentrace,

- data xxxxxxxxx xxxxxx podle pohlaví, xxxxx a xxxx xxxxxx,

- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx do xxxxx včetně xxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx ,

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- doba, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x jeho xxxxx xxxxx,

- xxxx x spotřebě potravy x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- oftalmologické nálezy,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a výsledky,

- xxxxx klinické xxxxxxxxx a všechny xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxx),

- xxxxxx patologicko-anatomické,

- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x popisem použitých xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.34. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - JEDNOGENERAČNÍ XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Samci xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx x 70 xxx x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx spermatogenezu.

Xxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) dostávají látku xx xxxx xxxxxxx xxxx estrálních xxxxx, xxx xxx zachycen xxxxxxxxx nepříznivý xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx připouštění xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx pohlaví, x době xxxxxxxxx x kojení pouze xxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxxxx mladá xxxxxxx zvířata náhodně xxxxxxx do dvou xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx chována xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x jakých xxxxx xxxxx experimentu.

Xxxxxxxxxx xx testovanou látku xxxxxxx x xxxxxxx xxxx x pitné xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx také xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx testu. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxické účinky. Xxxxx se xxxxxxxx 7 dní v xxxxx.

1.2.2 Pokusná xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx. Nepoužívá xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx být xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx co xx druhu, kmene, xxxxxxx a xxxx x/xxxx xxxx. Plodnost xxxx xxx ověřena xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx. Zvířat x obou xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx odstavena xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx je xxxxxx dostatečný počet xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx plodnost, xxxxxx gravidity x xxxxxxxx xxxxxxx x X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx generace X₁ xx xxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx a je xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx vytvoření xxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx exponované xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx pro aplikaci xxxxxxxxx xxxxx vehikulum, xxx zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx dostávají vehikulum x nejvyšším xxxxxxxx xxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx potravy, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má x xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx to není xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo povahou xxxxxxxxxxxx účinku - xxxxxxxxx toxicitu, ale xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, které by xx daly xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx u xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.

Xxx podání xxxxxx xxxx x tobolkách xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx změny xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx samic dávky xxxxx být xxxxxxxx xxxxxx xx základě xxxxxxx hmotnosti x 0. xxxx 6. xxx xx začátku xxxxxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxxx test

X xxxxxxx látek x xxxxxx toxicitou, xxxxx xx ani xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na reprodukci, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx dávka, xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx provádět xxxxxx xx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Xxxx pokusu

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx xx věku xxxx xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx týdnů xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx pro xxxx). Samci se xxx xxxxxx x xxxxxxx xx konci xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx vrhů x xxxx xxx xxxxxxxx x vyšetřeni xxxxx xxxx koncem xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx po xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx před obdobím xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx připouštění, x xxxx gravidity xx xx xxxxxxxxx F₁ xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx dávkovacího xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. o xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.3.2 Xxxxxx při xxxxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx samec) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx samicím).

X případě 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx kleci xx otěhotnění xxxxx xx dobu 3 xxxxx. Každé xxxx xxxx samice xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx zátky. Xxx 0 těhotenství xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx, xx xxxxx vyšetřit x cílem zjistit xxxxx neplodnosti páru. Xx je xxxxx xxx poskytnutím xxxxx xxxxxxxxxxxx x oplodnění x osvědčenými jedinci xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx vyšetřením xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx standardizace xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx postup: mezi 1. x 4. xxxx po xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx upraví vyřazením xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx vrh; pokud xx není xxxxxxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 samců x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx než 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Xxxxx zvíře xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx jak xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (a xxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx) ve xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx váženo. Xxxxxxxxxx X xxxxxxx se xxxx xxxxx den xxxxxxxx x xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx dospělé xxxxx.

Doba xxxxxxx xx počítá xx xxx 0 těhotenství. Xxxxx xxx se xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx mláďata x xxxxxxx utracená ve xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x celé xxxx xx zváží xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx týden xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx jsou zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx abnormality x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx.

1.3.5 Xxxxxxxxx

1.3.5.1 Pitva

Xx xxxxxxxx nebo xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx se vyšetří xx defekty.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, vagina, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x cílové xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx X se xxxxxxxx xxx mikroskopické xxxxxxxxx. V xxxxxxx, xx tyto xxxxxx xxxxxx doposud vyšetřeny x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, provede se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x skupiny xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxx u xxxxxx, xxxxx zemřela x průběhu xxxxxx.

Xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxxxx x těchto xxxxxx xxxxxx, se xxxxxxx x x X zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. V xxxxxx případech se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, reprodukční xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx se mají xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, kde xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na začátku xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx změny.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx statisticky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxx:

- xxxx/xxxx použitých zvířat,

- údaje x xxxxxxx odezvě v xxxxxxxxxx xx xxxxx x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gestace x xxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx ukončení xxxxxx,

- tabulka xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,

- toxické x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, potomstvo a xxxxxxxxxxx xxxx,

- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx hmotnost xxxxxx X xxxxxxxx,

- xxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - DVOUGENERAČNÍ XXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx x odstupňovaných xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxx (X) generace dostávají xxxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx spermatogenního xxxxx (xxxxxxxxx 56 dnů x myší x 70 dnů x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxxxxxx xxxxx po xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx účinek testovací xxxxx xx estrus.

Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx pohlaví x xxxxx, v době xxxxxxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxx je látka xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X₁ x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, v xxxx xxxxxx a až xx xxxx odstavení X₂ xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx aplikaci je xxxxx metodu xxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Před xxxxxxxxx xxxxx xxxx zdravá xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Rodičovská xxxxxxx (P) xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během experimentu. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx nebo x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx podání xxxx xxxx možné. Všechna xxxxxxx látku xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx používá x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x týdnu.

1.2.2 Pokusná xxxxxxx

Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Používají xx xxxxxx X xxxxxxx, xx xx doby xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx charakterizována co xx druhu, xxxxx, xxxxxxx x xxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx a xxxxxxx

Každá xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx mít dostatečný xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx cca 20 březích xxxxx x přibližně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx spolehlivé hodnocení xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, průběh gravidity x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx, růst x xxxxx potomstva xxxxxxxx X₁ xx početí xx xxxxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X₂ až xx xxxxxxxxx.

1.2.4 Podmínky xxxxx

Vodu x xxxxxxx dostávají xxxxxxx xx xxxxxxx. Před xxxxxxx xx těhotné xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx poskytnut xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.5 Xxxxxxxxx

Použijí xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx kontrolní. Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx snižuje xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx do xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má x ideálním xxxxxxx, xxxxx xx dovolí xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat xxxxxxxx x xxxxxx mortalitu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) vyvolat xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolávat xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xx dávka xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx těhotných samic, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx tělesné xxxxxxxxx x 0. nebo 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2.6 Limitní xxxx

V xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx jasnou xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, není nutné xxxxxxxx studie na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Plán xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X začne ve xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx týdnů před xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx a xxxxxxx xx konci období xxxxxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx produkci xxxxxxx xxxx x xxxx utraceni x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx pokusu.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxxx xx pětidenní xxxxxxxxxxxx x pokračuje xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx celé xxx xxxxx období xxxxxxxxxxx, x době xxxxxxxxx xx do odstavení X₁ potomstva. Je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx studované xxxxx, např. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx resp. x xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx jejich xxxxxxxxx.

1.3.2 Postup xxx xxxxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (jedna xxxxxx x xxxxx xxxxx) anebo 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx dvěma xxxxxxx).

X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx společné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx samice xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx den xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.

Xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, zvířata xxxxxxxx X₁ se xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx věku 11 xxxxx x xxxx x 13 xxxxx x xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxxx X₁ xx náhodně xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxx téže xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxxx, x xxxxxxx nedojde x xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx další xxxxxxxxxxxx x oplodnění x xxxxxxxxxxx jedinci obou xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyšetřením xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšetření xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx porodit xxxxxxxx x pečovat x xxx xxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx se xxxxxxxx všech vrhů xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo počtu 4 samců x 4 xxxxx na xxx; pokud xx xxxx xxxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx počty, např. 5 samců a 3 xxxxxx. Vrhy xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxx generace X₂ xx xxxxxxx xxxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Každé xxxxx xx xxx pozorováno xxxxxxx jednou xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, příznaky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx se měří xxxxx xxx xxxx, xxx během doby xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx denně. Xx xxxxxx x x průběhu xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx váženo. Xxxxxxxxxx X x X₁ xxxxxxx se váží xxxxx xxx xxxxxxxx x pak xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx xxxxxxx zvíře.

Xxxx gestace se xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx po porodu xxxxxxx x xxxxxxx xx počty a xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx a přítomnost xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx defekty. Živá xxxxxxx se xxxxxxxxx x celé vrhy xx xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, kdy xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx stavu xxxxx x xxxxxxxxx.

1.3.5 Xxxxxxxxx.

1.3.5.1 Xxxxx

Všechna xxxxxxx zvířata xxxxxxxx X x F₁ xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx je xxxx uchovávat pro xxxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X₂ xx xxxxxx xx xxxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X x X₁ makroskopicky xxxxxxx xx strukturní xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xx zvláštní pozorností x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mláďata zemřelá xxxx umírající xx xxxxxxx na xxxxxxx.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx hrdlo, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx kanálky, koagulační xxxxxx, prostata, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx X a X₁ xx uchovají xxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření. X případě, xx xxxx orgány xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx mnohadávkových studiích, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx X x X₁ xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx dostávající xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, x xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx vyšetří x x xxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx xxx bylo xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxx xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, kde je xxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx začátku xxxxxx, xxxxx těhotných xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxx zpracovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx kterákoliv xxxxxx xxxxxxxxx statistická xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx

Zpráva x experimentu xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxx:

- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx x toxické xxxxxx x závislosti na xxxxx x xxxxxxx xxxxxx ukazatelů plodnosti, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx,

- dobu uhynutí x průběhu xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx hmotnost x xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mláďat x individuální xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx,

- xxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X a X₁ xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx údajů, xxxxx je možné,

- diskuse výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.36. XXXXXXXXXXXXXX

1. METODIKA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vhodnou xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxxxxx stanovené xxxx, xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Xxxxx resp. xxxx metabolity xxxx xxx xxxxx účelu xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x exkretech.

Xxxxxx mohou být xxxxxxxxx x "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx se tak, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx informací o xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx pěti dnů xxxx testováním. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx náhodně rozdělena xx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx otázek xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, pregnantních xx xxxxxxxxxxxxxxx zvířat.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Toxikokinetické studie xx xxxxxxxxx na xxxxxx xx více xxxxxxxx živočišných xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xx druzích xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxx toxikologických xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx testovanou xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, neměla xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxxx x vylučování xx xxxxx xxxxxxx 4 xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx testování xxxx xxxxxx přednost xxxxxxxx xxxxxxx, ale xx xxxxxxxx podmínek může xxxxxxxxx potřeba xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx odpovědi x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx druhů xxxxxx (xxxxxx xxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx menší xxxxx xxxxxx.

Xx-xx studována xxxxxxx distribuce, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx xxxxx brát x xxxxx xxx xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx bodu, xxx počet xxxxxxxx xxxx, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx skupiny xxxxxx xx měla xxxxxxx x počtem xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, ale xx skupině xxxxx xxx méně xxx 2 xxxxxxx. Velikost xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx dostatečná xx to, xxx xxx xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, rovnovážného xxxxx x xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx

X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 různé xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx to xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxx, xx xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

X případě xxxxxxxxxxx podávání xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dávek látky. Xx určitých xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx aplikace x xx-xx to xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávána xxxxxx xxxxxx xxxx x potravě, xxxxxxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx dobu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx užitečné xxx stanovení relativního xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx aplikace. Xxxxx xxxxxx po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx v organismu.

Xxxxxx by xx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Pozornost xx xxxx xxx xxxxxx věnována xxxxxxxx xx vstřebávání x xxxxxxx, je-li xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx sondou xxxx x potravě, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx sledování

Xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx denně x příznaky xxxxxxxx x xxxxx relevantní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přiměřeným xxxxx. Ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je možno xxxxxx xxxxxxx před xxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx.

1.3.1 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx podávané xxxxx mohou xxx xxxxxxx různé metody x nebo bez xxxxxxxxxx skupiny¹⁾, x xx xxxx.:

- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. xxxxxx metabolitů v xxxxxxxxx např. v xxxx, žluči, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxx x karkasu,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) xxxx testovanou x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,

- xxxxxxxxx množství xxxxx resp. xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ledvinami xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx plochy xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx na xxxx a xxxxxxxxx x daty získanými x referenční xxxxxxx.

1) X této xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx rozumí ta, xx které xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávky.

1.3.2 Xxxxxxxxxx

V současné xxxx jsou xxxxxxxx 2 přístupy, x xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx schématu xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx oba:

- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx informace;

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x množství xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx časových xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxxxx

Xxx xxxxxx vylučování se xxxxx moč, stolice, xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. jejích xxxxxxxxxx xx v xxxxxx xxxxxxxxx stanovuje xxxxxxxxxx xx podání xxxxx, x xx xxx xx vyloučení 95 % z xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx 7 xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx speciálních případech xxxx být potřebné xxxxxxxx xxxx vylučování xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x době xxxxxxx testovaných xxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxxxx

X určení xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx otázky x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx informací x metabolismu xxxx xxx xxxxxxxxx provedení xx xxxxx xxxxxx.

Xxxxx informace o xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx získat z xxxxxxxxxxxxx studií např. xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, sledováním xxxxxxx xxxxxxxxxxx neproteinových xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Získané xxxxx xx xxxxx xxxx prováděné xxxxxx xxxxxxxxxx x tabulkách, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Pro xxxxxx testovanou xxxxxxx xx xxxxxx průměry x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxx, dávce, tkáni x xxxxxxx (xxxxx xx to relevantní). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x rychlost xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx metodami. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metabolitů x xxxxxxxx metabolické xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxx prováděné xxxxxx xx xxxxxx x xxxxx měla xxxxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx údaje:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- charakteristika xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxx,

- xxxxxxxx dávky a xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx(x) podání x xxxxxxx použitá xxxxxxxx,

- xxxxxxx x x ostatní pozorované xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx testované látky x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxxx, dávky, režimu, xxxx, xxxxx a xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxx vstřebávání x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx čase,

- xxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- metody xxxxx pro biochemická xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretaci xxxxxxxx.

X.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX - XXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx toxicity. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu byly xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a mají xxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx vitro xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Negativní xxxxx x in xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2 Definice

Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx metody xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx anhydridy kyseliny xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo příslušných xxxxxxx thiofosforečných, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx látky, xxxxx xxxxx xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx projevující xx ataxií, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, změnami x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx s pozdním xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx target xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxxxxxxx látky

Xxxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxx xx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, že x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx testovaných druhů xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Příkladem xxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx fosforečné, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (XXXX).

1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx možnými xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky. Xxxxxxx xx po xxxx 21 dnů xxxxxxxx, zaznamenává xx xxxxxxxxxx chování, ataxie x paréza. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx XXX, xx xxxxxxx x slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x každé xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxx látky. 21 dnů xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx slepice xxxxxxxx x je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání.

1.5 Popis xxxxxx xxxxxxxxx

1.5.1 Příprava

Xxxxx zdravé dospělé xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx léčby a x xxxxxxxx xxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu.

Xxxxxxxxx xx dostatečně xxxxx xxxxx nebo xxxxxx umožňující volný xxxxx slepic a xxxxxx pozorování xxxxx.

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx tobolkami xxxx xxxxx srovnatelnou xxxxxxx. Xxxxxxxx se podávají xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx, pevné xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.6.1.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx mladá xxxxxxx xxxx domácího (Xxxxxx gallus domesticus) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx se plemena x standardní xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, které xxxxxxxx volný pohyb.

1.6.1.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxxxx testovací xxxxxxx xx použije kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxx testované látky xx se zvířaty x kontrolní skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.

X xxxxx skupině xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxx x nich xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx prvý x druhý den xx podání) a xxxx přežilo 21denní xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx může xxxxxxxx souběžně xxxx xx může xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxx xxxxx xxxx xxxxxx, kterým se xxxxxx látka vyvolávající xxxxxx neurotoxicitu, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxx slepice xxx xxxxxxxxxx. Doporučuje se xxxxxxxxxx doplňovat historické xxxxx, xxxx se x provádějící laboratoři xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx).

1.6.1.3 Volba xxxxx

Xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x využitím xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx dávek, xxx xx xxxx stanovit xxxxxx, která xxxx xxxxxxx x hlavní xxxxxx. Určitá úmrtnost xx x xxxx xxxxxxxxx studii nezbytná xxx xxxxxxxxx přiměřené xxxxx x hlavní xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx cholinergní xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx maximální neletální xxxxx testovaných xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx typů xxxxxxxxxxx xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx xxxxx xxx slepice xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxx výběru xxxxx.

Úroveň dávky xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x výsledkům xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx limitu xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx (xxxx) a xx 21 xxxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx xxxx jiný xxxxxxxx přípravek, x xxxxxx je známo, xx neinterferuje x xxxxxxxx neurotoxickými účinky, xx xx použít xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky.

1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx

Jestliže xxxx x dávkou xxxxxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx studii, xxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx podle xxxxx x xxxxx s xxxxxxxxx strukturou xxxx xxxxx toxicitu xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx o studii x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x lidí naznačuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx úrovně xxxxx.

1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Doba xxxxxxxxxx xx 21 xxx.

1.6.2 Xxxxx xxxxxxx

Xx aplikaci prostředku, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx podána x xxxxxx xxxxx.

1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx prvních xxxx dnů a xxx aspoň xxxxxx xxxxx xx xxxx 21 xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxx, včetně nástupu, xxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx čtyřstupňové xxxxxxxx stupnice x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Umírající zvířata x xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky a xxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.6.2.3 Biochemie

Xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxx x xxxxx testované x kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx a xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny (xx-xx xxxxxxx xxxxxxx) xx usmrtí x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx látky. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné vypreparovat xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Běžně xx xxxxxxxx xxx slepice x xxxxxxxxx x xxxxx testované skupiny xx 24 xxxxxxxx x xxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xx xxxxxxxx pouze xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx naznačuje, xx xxxxxxx xxxxx xx x organismu pohybuje xxxxx pomalu (xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx dvakrát xx xxx xxxxxx, x xx xxxx 24 xx 72 hodinami xx xxxxxx látky.

X těchto vzorků xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx analýza xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). Xx xxxx může xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx může xxxx k xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxx XXxX.

1.6.2.4 Xxxxx

Xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) zahrnuje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.

1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně se xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Odebírá xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx - řezy xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx krční xxxxx, střední xxxxxx x lumbosakrální, z xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x n. xxxxxxxx (x xxxx větve x x. xxxxxxxxxxxxx) x x n. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx specifickými xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.

2. XXXX A XXXXXX ÚDAJŮ

Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx touto metodou (xxxxxxxxx, histopatologie x xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx těchto xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx typ x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx účinku.

Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx změnami chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Číselné výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx studie.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxxxx:

- použité xxxxxxx;

- počet a xxxxx xxxxxx;

- xxxxx, podmínky xxxxxxxx xxx.;

- hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.

Podmínky xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxx x přípravě, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;

- podrobné údaje x způsobu aplikace xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxxxx xxxx;

- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x vehikulu, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx látky;

- xxxxxxxx údaje x xxxxxx ochranného xxxxxxxxx.

Výsledky:

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupin xxxxxx úmrtnosti;

- xxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx vratných xxxx xxxxxxxxxx);

- podrobný xxxxx biochemických vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxx nálezy;

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx to xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx

4. LITERATURA

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 418.

B.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX 28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Úvod

Xxx xxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx specifický xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx fosforu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx.

Vyšetřovací testy xx vitro xxxxx xxx použity pro xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx však xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxx 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx informace x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vznikajícím z xxxxxxx opakovaných během xxxxxxxx krátkého xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x závislosti xxxxxxxx xx dávce x xxxx poskytnout xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx úrovní, xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé xxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Definice

Do xxxxxxx xxxxx označených x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo jiné xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx této xxxxxxx.

Xxxxxx neurotoxicita xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx, distální axonopatií, xxxxxxx v míše x periferním xxxxx x xxxxxxx počátkem xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (neuropathy xxxxxx xxxxxxxx) v xxxxxxx tkáni.

1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx denně xxxxxx xxxxxxxx xx dobu 28 xxx. Xxxxxxx xxxx sledována xxxxxxx xxxxxx denně, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx XXX, se xxxxxxx u xxxxxx xxxxxxx vybraných x xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx posledním xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xx poslední xxxxx xxxx zbývající xxxxxxx xxxxxxxx a xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx nervových tkání.

1.4 Xxxxx xxxxxx testování

1.4.1 Xxxxxxxx

Xxxxx zdravé xxxxxxx xxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxxxx virových xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x normální xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx velké xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx slepic x snadné xxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxx, xxxxx 7 dní x týdnu, xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx tobolkami xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tekutiny xx xxxxxxxx neředěné xxxx xxxxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxx,

xxxx je xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx doporučuje xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx nemusely xxxxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx nosičů xxxx xxx známy xxxx xxxxxx před testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Doporučuje xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) ve xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Používají xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx pohyb.

1.4.2.2 Počet x xxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx látky se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.

X xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx aspoň xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (po xxxxx x xxxxxx xx dvou časových xxxx) x šest xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx ukončení expozice.

1.4.2.3 Xxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx se zvolí x přihlédnutím xx xxxx výsledkům z xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicity, nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx dávek xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx sledovat xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Nejnižší xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx.

1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx x dávkou xxxxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti a xxx, za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx u xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx očekávat, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x studii s xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx test se xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxx potřebu xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx pozorují xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx expozice x 14 xxx xx xx, xxxx xx xxxxxxxx x xx xxxxx podle xxxxx.

1.4.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxxxx xxxxx se podává xxxx dní x xxxxx po 28 xxx.

1.4.3.1 Xxxxxxxxx pozorování

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx včetně xxxxxxx, xxxx, stupně x trvání. Xxxxxxxxxx xx zahrnovat abnormality xxxxxxx, xxx xxxx xx na xx xxxxxxxx. Ataxie xx xxxxxxx xxxxx nejméně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx slepice xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx se usnadnilo xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Umírající xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

1.4.3.2 Tělesná xxxxxxxx

Xxxxxxx slepice xx xxxxx xxxxx před xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.4.3.3 Xxxxxxxxx

Šest xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxxxx xx usmrtí x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx poslední xxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Je xxxxxx xxxxxxxxxxxx také x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jeho xxxx xx xxxxxxxx XXX. Xxxxxxx se usmrcují xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx po 24 xxxxxxxx x xxxxx tři xx 48 hodinách xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx údaje x xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxxx) naznačují, xx xx výhodnější xxxx xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx.

U xxxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). Xx xxxx může xxxx xxxxxx spontánní xxxxxxxxxx AChE, xxx xxxx vést x xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx XXxX.

1.4.3.4 Pitva

Xxxxx všech xxxxxx (xxxxxxxxx usmrcených i xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx stav) zahrnuje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxx.

1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

Nervová xxxx x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx vyšetří. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx za použití xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, mícha (řezy xxxxx se xxxxxxx x horní krční xxxxx, xxxxxxx hrudní x lumbosakrální), x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx část x n. xxxxxxxx (x jeho xxxxx x m. xxxxxxxxxxxxx) x z x. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx barvivy xx xxxxxx x xxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx x zvířat skupiny x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xx slepicích xx xxxxxx, které xxxxxxx xxxxx střední x nízkou.

2. SBĚR X XXXXXX XXXXX

Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx metodou (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx) negativní, xxxxx xx neprovádí xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx neurotoxicitu. Neprůkazné xxxx neurčité xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxx pro jednotlivá xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx typ x xxxxxx poškození nebo xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x korelaci xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx x testovaných x kontrolních xxxxxx.

Xxxxxxx výsledky xx xxxxx vyhodnotit vhodnou x xxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistické xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx studie.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být získány:

Xxxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx plemeno,

- xxxxx x xxxxx xxxxxx,

- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.,

- xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.

Podmínky testování:

- xxxxxxxx xxxxx x přípravě, xxxxxxxxx x homogenitě testované xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x potravě x xxxxxxx xxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávek,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávek, xxxxxx xxxxxxxxxx údajů x vehikulu, objemu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xx biochemické xxxxxxxxx, xx-xx xxxx xxx 24 x 48 hodin.

Xxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxx,

- xxxxxx bez xxxxxx (NOAEL),

- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx),

- podrobný xxxxx biochemických xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- pitevní xxxxxx,

- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, u xxxxxxx xx xx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx

4. LITERATURA

Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 419.

B.39. Test xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo

1. XXXXXX

Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx XXX Synthesis (XXX) Xxxx Xxxx Xxxxxxxxx Xxxxx Cells Xx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx XXX synthesis, XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxx buňkách xx xxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x jaterních xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4).

Xxxxx test xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxxxxxxx účinků chemických xxxxx v játrech. Xxxxxxxx xxxxx indikuje xxxxxxxxx DNA v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx následnou reparaci. Xxxxx jsou obvykle xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxx detekci poškození XXX xx xxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx se xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx tkáně xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (UDS) xx hodnotí xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, které xxxxxxxxxxxx plánovanou (S-fáze) xxxxxxxx DNA. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, při xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (³X-XxX). Xxx xxxxx UDS xx xxxx xx nejčastěji xxxxxxxxx potkaní xxxxx. Xxxx tkáně než xxxxx se xxxx xxxx mohou xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx metody.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx XXX, xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx metoda XXX xxxxxxx vhodná x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx repair" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Xxxx může xxxxxxxx k xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx replikace xxxx XXX. Rozsah odpovědi XXX neříká xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Mimoto xx xxxxx, xx mutagen xxxx xxxx s XXX xxxxxxxx, ale xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, xx XXX xxxx xxxxxxxxxxx x mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx poskytuje xxxxxxxx x celém xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Buňky x xxxxxxxx: xxx xxxxxxx grain (XXX) xxxxx než xxxxxx, xxxxxx stanovená xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx test.

Net xxxxxxx xxxxxx (XXX): xxxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxxxxx buněk xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx UDS, xxxxxxxxx jako xxxxxx xxxx počtem zrn x xxxxx (XX) x xxxxxxxxx xxxxxx xxx x cytoplasmě (XX): XXX = XX - CG. Xxxxx NNG xx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx kulturách apod.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX obsahujícího oblast xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx fyzikálním xxxxxxxx.

1.3 PRINCIP XXXXXX

Xxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx indikuje xxxxxxxxx syntézu XXX xx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx působením. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx x inkorporace ³X-XxX xx DNA xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx buněk x X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx ³X-XxX se xxxxxxx stanoví xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x interferenci s xxxxxxx x S-fázi, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxxxx metoda.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx. Používají xx xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní rozdíly xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x části X.

Vlhkost by xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jedinci xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx zvířata aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx tak, aby xx minimalizovaly případné xxxxx xxxx, jak x kde jsou xxxxx xxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x je-li xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) prokazují, xx xxxxxxxxxx ji neovlivní.

1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.3.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx ne xxxxxx známé rozpouštědlo, xxxx xxx xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x kompatibilitě s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx kde xx xx xxxxx, xxxx xx prvním xxxxx použito vodné xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.3.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx třeba xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x negativní (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx měly xxxxxxxxx XXX při xxxxxxx, xxx lze očekávat xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx úroveň. Xxxxxxxxx xxxxxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx aktivaci xx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx ke středně xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se volí xxx, xxx byly xxxxxx patrné, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnotiteli xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:

Doba odběru xxxxxx	Látka	XXX	XXXXXX
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx)	X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx	62-75-9	200-249-8
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 xxxxx)	N-2-fluorenylacetamid (2-XXX)	53-96-3	200-188-6

Xx možno xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx cestou, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.5 POSTUP

1.5.1 Počet x xxxxxxx zvířat

X každé skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelní jedinci. Xxxxx xxxxxxxx historická xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxx, nebo xxx xxxxxxx.

Xxxxx x xxxx, xxx xx studie xxxxxxx, xxxxxxxx údaje xx xxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx test, xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx nejsou x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx jednom xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxxxx. Xxx, kde xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx látkám xxxx xxx pohlavně xxxxxxxxxx, xxx je xxxx například x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx test xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Dávkovací schéma

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxx jednorázově.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx dvě xxxxx dávky. Nejvyšší xxxxx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxx vyšší xxxxx ve xxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxx letální xxxxxx. Xxxxx dávka xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.

Xxxxx, jež x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z těchto xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x vyhodnocují xx případ xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nejsou x dispozici, xx xxxxx xx realizovat x téže laboratoři x xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxx použijí x xxxxxx xxxxxx.

Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx vyvolávající určité xxxxxx toxicity x xxxxxxx (např. pyknotická xxxxx).

1.5.4 Limitní xxxx

Xxxxxxxx test xxx dávce xxxxxxxxx 2&xxxx;000 mg/kg hmotnosti xxxxxx v xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxxxxx xx xx základě xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkách xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx vpravuje xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx by xx xxx mohla xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx oběhem. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a nemá xxxxxxxxx 2 ml/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek, xxx xxxxxxxx vykazují xxx xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx ve všech xxxxxxxxx úrovních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxx xx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 12 - 16 xxxxx xx podání xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx je zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 hodiny xx xxxxxx látky), xxxxxx xx xx 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxx x jiné xxxx xxxxxx xxxxxx, xx-xx xx odůvodněné xx základě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle zakládají xxxxxxx jater xx xxxx xxxxxxxxxxx. Je xxxxx zajistit, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx vhodnému xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).

1.5.7 Xxxxxxxxx UDS

Xxxxxxx xxxxxxxxx savčí jaterní xxxxx xx xx xxxxxxx xxxx (např. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x médiu obsahujícím ³X-XxX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xx potom xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx obsahujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (tzv. "xxxx xxxxx"). Xxxxx se xxx xxxxxxx, fixují x vysuší. Xxx xxxxxxx inkubačních intervalech xxxxxx se "xxxx xxxxx" xxxxxxxx. Sklíčka x xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, exponují xx xxx (xxxx. xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), vyvolají, xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx připraví dva xxxx tři xxxxxxxxx.

1.5.8 Xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx obsahovat dostatečný xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. pyknóza, xxxxxxx úroveň radioaktivního xxxxxxx).

Preparáty xx xxxx xxxxxxxxx zrn xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx dvou preparátech x xxxxxxx jedince xx obvykle xxxxxxx 100 buněk; pokud xx xxxxx xxxx xxx 100 xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxx počítání zrn xx nevyhodnocují xxxxx x S-fázi, xxx xxxxx xxxxx x X-xxxx se xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx metodou se xxxxxxx stupeň xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx jader x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx normálních buňkách, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Mimoto xx xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx každou xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx a xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (NNG) xxxxxxxxx xxxxx XX od xxxxx XX. Počítají-li xx "buňky x xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx souběžných negativních xxxxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; pokud xx xxxxxxxxxxx testy xxxxxxx, xx třeba xx xxxxxx a xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:

xxxxxxxxx		(X) xxxxxxx XXX xxx předem xxxxxxxxxx prahem, zdůvodněným xx xxxxxxx historických xxx dané xxxxxxxxxx
	xxxx	(XX) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxxx xxxxxxxx
xxxxxxxxx		(I) xxxxxxx XXX na xxxxxx/xxx xxxxxx historického xxxxx x kontrol
	xxxx	(II) xxxxxxx XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxx.

Je xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx, že xx xxxxx vzít x xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vztah xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx xxxxxxxxxxx metody; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx být xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Většina xxxxxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx závěr. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx xxxxxxxxx DNA, které xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX in xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx XXX, xxx je xxxxx xxxxxx zjistitelné.

Xx xxxxx xxxx x xxxxx, jaká je xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Zpráva o xxxxxxx pokusu

Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx je třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.

Pokusná xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- počet, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,

- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx jednotlivé xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,

- xxxxx ze xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx volby x xxxxx,

- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxx xxxxx,

- případný xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx vodě (ppm) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx hmotnosti/den),

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,

- podrobné xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vzorků,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- metoda xxxxxxxx x kultivace xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx autoradiografická xxxxxx,

- počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx grains" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x skupiny,

- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx je x xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, bylo-li provedeno,

- známky xxxxxxxx,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx údaje x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek,

- xxxxx "buněk x opravě", xxx-xx xxxxxxxx,

- počet xxxxx x S-fázi, xxx-xx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx buněk.

Diskuse xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Metoda X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001

X.40. LEPTAVÉ XXXXXX XX XXXX

1. XXXXXX

1.1 XXXX

Xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Centre for xxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, XXXXX, Xxxxx Research Centre, Xxxxxxxx Commission) xxxxxxxxx xxxxxxx vědecky xxxxxxx xxx xxxxx in xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx kůži: xxxx xx principu xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx elektrického xxxxxx xxxx potkana (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx lidské xxxx. Xxxxxxxxxxx studie XXXXX prokázala, že xxx testy xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx leptajícími x xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx test vycházející x modelu xxxxxx xxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx X35, x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kůže, X34). Xx xxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx xxxxx; výběr xxxx oběma testy xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a na xxxxxxxxxxxx uživatele.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxx: způsobení nevratného xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx.

1.3 REFERENČNÍ LÁTKY

Žádná xxxxxxxxxx látka není xxxxxxxxxxxxx, viz xxxx xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.

1.4 XXXXXXX XXXXXX - TEST XXX XX KŮŽI XXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx dobu xx 24 hodin xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx utracených xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx mají xxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx normální integritu x xxxxxxxxx funkce xxxxxx corneum.Tato xxxxxxxxx xx měří jakožto xxxxxx xxxxxxxxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látky XXX xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxx x neutrálních xxxxxxxxxxx xxxxx (jejichž xxxxxxxx viz v xxx. (6)) xx xxxxx xx zkušebního xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx barviva, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx se u xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).

1.5 XXXXX METODY - XXXX XXX XX XXXX POTKANA

1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23xxxxx) potkani, Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx nůžkami xx zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxx srst x xxxxxxxx x xxxxx plochy. Xxxxxxx xx pak xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx streptomycinu, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo amfotericinu, x xxxxxxxxxxxxx inhibujících xxxx xxxxxxxx. Třetí xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx omytí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx 3 xxx xx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx kožních xxxxxx xxxxxxx být xxxxxxx xxxxxx než 31 xxx.

1.5.2 Xxxxxxxx terčíků xxxx

Xxxxxxx xx humánním xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx a x xx xx xxxxxxx sloupne xxxxxxxxxx xxx. Xxxx se xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxx, x xx epidermální xxxxxxx k xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx přetáhne gumový X-xxxxxxx, kterým xx xxxx xxxxxx, a xxxxxxxxxx tkáň se xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x X-xxxxxxx ukazuje xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx xx xxx xxxxxxx pečlivě xx xxxxx XXXX trubice xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx ponoří xx xxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx hořečnatého (154 xX), xxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).

1.5.3 Xxxxx xxxxxxx

1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx stavu, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx povrch uvnitř xxxxxxx (obr. 2). Xx-xx ve stavu xxxxxx, xxxxxx xx xx terčík v xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 30 ^xX, xxx xx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Použijí xx xxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Látka xx xxxxxx na dobu 24 xxxxx (xxx xxx 1.5.3.4) a xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vody xxxxx maximálně 30 ^xX xxx xxxxxx, xxxxx xx látka xxxxxxxxx. Odstranění testované xxxxx, která v xxxxxxx xxxxxx, xx xx napomoci vymýváním xxxxxxx proudem xxxx xxxxx xxxxxx 30 ^xX.

1.5.3.2 Měření XXX

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (XXX) xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx impedančního xxxxxx xxx xxxxxxxx proud (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx povrchové xxxxxx xxxx přídavkem xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx se pokryje xxxxxxxxx. Xx několika xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx tak, že xx trubice otočí, x xxxx se xxxxxxxxx přídavkem tří xxxxxxxxx 154 mM xxxxxxx síranu hořečnatého. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxx x xxxxx se odpor x xΩ/xxxxxx (obr. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx holé xxxxxxxxx xxx krokosvorkou xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx vnitřní (xxxxx) xxxxxxxxx se během xxxxxx uloží xxxxxx XXXX trubice xxx, xxx byla xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Vnější (xxxxx) elektroda xx xxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xx xxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxx hranou pružinové xxxxxx x spodkem XXXX xxxxxxx (obr. 1), tato vzdálenost xx xxxx na xxxxxxxx hodnotu xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx naměřený xxxxx vyšší xxx 20 kΩ, může xx xxx xxxxxxxx xxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx epidermální xxxxxx terčíku xxxx. Xx možno se xxxxxxx tento xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx, xx xx XXXX xxxxxxx xxxxxx palcem x xxxxxxxx a xxxxxx 10 sekund xx protřepává, xxxxxx xxxxxx hořečnatého xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx se opakuje x xxxxxxxx roztokem.

Průměrná xxxxxxxx hodnota XXX xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx. Navrhované xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxx:

&xxxx; Xxxxxxxx	&xxxx; Xxxxx	&xxxx; Xxxxxxx odporu (xX)
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; 10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx (36%)	&xxxx; 0,5 - 1,0
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; xxxxxxxxxxx voda	10 – 25

1.5.3.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx povrchově xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, lze xx této xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx zjistí, xxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).

1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx všech xxxxxxx xxxxxx xx 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x xxxxxxxxxxx vodě. Xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxx po xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx nejvýše xxxxxxxxx xxxxxxx. Tím xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Každý xxxxxx kůže xx xxx opatrně sejme x PTFE xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx (např. xx 20 ml xxxxxxxxxx xxxxx xxx scintilaci) xxxxxxxxxx 8 ml xxxxxxxxxxxx vody. Xxxxxxx xx xx dobu 5 xxxxx jemně xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx veškeré xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx vyjmou x xxxxx xx xxxxxxx x 5 ml 30 % (w/v) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x destilované xxxx, kde se xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 60 ^xX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx vyjmou x zlikvidují x xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxx xx dobu 8 xxxxx xxx xxxxxxx 21 ^xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 ml xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx 30 % (w/v) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx vodě x xxxxxxxxx poměru 1 x 5 (x/x) (xx. 1 ml xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx denzita (XX) xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 565 xx.

1.5.3.3.2 Xxxxxxx obsahu xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x terčíku xx xxxxxxxx x hodnoty XX (xxxxxxx extinkční xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 xx xxxx 8,7 . 10⁴; xxxxxxxxxx hmotnost = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahu xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx látek xxx xxxx metodě a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx považují:

Kontrola	Látka	Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; 10 X kyselina chlorovodíková	40 - 100
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; xxxxxxxxxxx xxxx	&xxxx; 15 – 35

1.5.3.4 Doplňující xxxxxxxxx

Xx možné zvolit xxxxxx xxxx působení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx kůže (xxxx. 2 hodiny) za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Ve xxxxxxxxxxx studii xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx identifikaci leptajících x neleptajících xxxxx xx 24hodinovém působení.

Získané xxxxxxx XXX mohou xxx ovlivněny xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zkušební xxxxxxxxx a experimentálním xxxxxxxx. Prahová xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx 5 kΩ xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx získaných xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx se zkušební xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx. Proto xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx řady referenčních xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxx (3).

1.6 XXXXXXX XXXXXXXX METODY - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanáší topicky xx xxxx xx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, sestávající z xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx životnosti xxxxx xxxxxxxxx například xxxxxx "XXX reduction xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 difenyl xxxxxxxxxxx xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx expoziční dobu. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x předpokladu, xx xxxxx způsobující xxxxxxxxx xxxx jsou ty, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx corneum (xxxxxx nebo xxxxx) x xxxx dostatečně xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X MODELEM XXXXXX KŮŽE

1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx

Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx pocházet x xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx mít xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx corneum xxxx xxx přiměřeně xxxxxxxxx. Xx xxx prokázat xxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, o nichž xx xxxxx, že xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx neprocházejí. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx živých xxxxx x xxxxxx xxxx xxx dostačující x xxxx, xxx xx xxxx dobře xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx například velikostí xxxxxxx XXX, xx. XX hodnotou) xx xxxxxxxx látce použité xxxx negativní xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxx xxxxx. Podobně x xxxxxxx látky xxx pozitivní xxxxxxxx (xx srovnání s xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) musí xxxxxxx xxxxxxxxxx spadat do xxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx mezinárodnímu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).

1.7.2 Xxxxx xxxxxxx

1.7.2.1 Nanesení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxx, nanese xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (minimální xxxxxxxx 25 (μ/xx²). Xx-xx xxxxx, xxxxxx xx tak, xxx xxxxxxxxx xxxx, a xxxxxxxx se zvlhčí, xxx xx x xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx je xx třeba, xxxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxx roztírají xx xxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx se materiál x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx

X měření xxxxxxxxxx xxxxx xx dá xxxxxx jakákoliv xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxxxx XXX, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx že x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx přesné x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx xx xx xxxx 3 xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx xxxxxxx 20 - 28 ^xX. Xxxxxxxxx modrý xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XX xxx xxxxxx xxxxx 545 x 595 nm.

1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxx xxxx x přesné dodržení xxxx xxxxxxxx, promývacího xxxxxxx atd. mají xx životnost xxxxx xxxxxxxx xxxx. Doporučuje xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx okalibrovat xx xxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx použitých xx xxxxxxxxxxx studii XXXXX (3). Xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx široké xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx x rámci xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx různými xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vědecké xxxxxxxx definované dříve (2) x xxxxxxxx xxxxxx validizační xxxxxx xxxx xxx zveřejněny x takovém xxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

1.8 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

1.8.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx

Xxxxxxx odporu (x xΩ) xxx xxxxxxxxx materiál, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx uvádějí v xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx experimenty, průměrné xxxxxxx x z xxxx xxxxxxxx klasifikace.

1.8.2 Xxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxx

Xxxxxxx XX x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, x to xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, průměrné xxxxxxx x x xxxx xxxxxxxx klasifikace.

1.9 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

1.9.1 Xxxx TER na xxxx xxxxxxx

Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx TER xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Je-li xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx se xxxxxx x povrchově xxxxxxx látku (xxxxxxxxx) xx neutrální organickou xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx leptavé účinky xx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, lze xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx barviva. Xx-xx xxxxx barviva x terčíku xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x 36 % XXx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx má xxxxxxx účinky, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x terčíku menší, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx.

1.9.2 Test x xxxxxxx lidské xxxx

Xxxxxxx XX pro xxxxxxxxx xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx buněk. X xxxxxx OD pro xxxxxxxxxx zkušební vzorky xx xxxxxxx procentuální xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx procentický xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxx odděluje látky, xxxxx nezpůsobují xxxxxxxxx xxxx, xx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivé xxxxx xxxxxxxxx vlastností, xxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxxx jasně xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxx, že xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x průběhu pokusu

Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx stav, popřípadě xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; pokud xx používají xxxxxxxxxx xxxxx, uvedou se xxxx údaje x xxx ně.

Podmínky xxxxxx

- xxxxxxxx popis použitého xxxxxxx,

- popis a xxxxxxxxxx xxxxx případných xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxx hodnot xxxxxx (xxxx TER) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk (xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx) xxx testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxx standardní xxxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxxx xxx všechny xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x průměrné xxxxxxx;

- xxxxx všech xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx 1

Obrázek 2

Xxxxxx X.40. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001

B.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX IN VITRO

1. XXXXXX

1.1 ÚVOD

Fotoxicita je xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), x xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx chemickým látkám x xxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xx-xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx x rámci xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx slouží xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dané xxxxxxxxx xxxxx, tedy xx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx ultrafialovému x xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx nikoli.

Toxikologickým xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx působením xxxxx x xxxxxx, xxxxx testem je xxxxx xxxxxxx sloučeniny, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx v xxxx, x xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx fotoiritanty xx topickém xxxxxxxx xx pokožku.

Test fototoxicity 3X3 NRU xx xxxxx xxx vypracován x xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX z let 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx validní alternativa xx vitro vůči xxxxxx používaným testům xx xxxx. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx OECD xxxxxxx xxxxxxxxxx in xxxxx trestů xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).

Výsledky xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx účinky xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx vivo x xxxxxx x xxxx x bylo xxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xx pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Test xxxx xxxxxxx x tomu, xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx účinky, xxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látky a xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, fotoalergie xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, i xxxx řada xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxxxxxxxx. Xxxx není xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx umožňoval xxxxxxxxx xxxxxx fotoxicity.

Sekvenční přístup xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látek je xxxxxxxx xxx xxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx ultrafialového (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; xxxxxx xx X/x² xxxx x XX/xx².

Xxxxx světla: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx viditelného (XXX) xxxxxx dopadajícího xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (= X x x) na xxxxxxxx povrchu, xxxx. X/x² xxxx J/cm².

Pásma xxxxxxxx délek ultrafialového xxxxxx: xxxxx doporučení XXX (Commission International xx X'Xxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx x xxxx vymezení: xx xxxxxxx xxxx xxxxx XXX x XXX xx často považuje 320 nm x XXX xx někdy xxxx xx UV-A1 x XX-X2 s xxxxxxx xxxxxx x 340 xx.

Xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxx, xxxxxx xx měří celková xxxxxxxx buněčné populace (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, do xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xxxxx parametrů xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx koreluje x celkovým xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (vitalitou) xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v porovnání x negativními kontrolami (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx procedurou xxxxx (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx bez působení xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, kterým xx xxxxxxxx testu toxicity xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx potenciálu. X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro x xxxxxxxx fotoxického xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX x XXX.

XXX (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, fotoiritační xxxxxx): xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx dvou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací (XX₅₀) testované látky xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x v xxxxxxxxxxx (+XX) necytotoxického XXX/XXX xxxxxxx.

XXX (xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace-odezva xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (odezva), xxxxx xxxxxx xx xxxx expozici xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, nebo reakce, xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx ozářením xxxx xx xxxxxxxxxx podání xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx xxxxx "fototoxicita", xxxxxxxx se xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx reakcí, x nimž xxxxxxx x kůži xxxx, xx xx xx xxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxx přijatá) nějaká xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx vždy x nespecifickému xxxxxxxxx xxxxx (reakce podobné xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx).

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx prvním xxxxxxxx xxxxx a světla xxxxxxxxxxx, x xxx xx zapotřebí jednotýdenní xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx k xxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (odezva) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xx byly xxxxx xxxxxxxxx negenotoxické xxxxx XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x látky. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx UV zářením xxxxxxxx xxxxxx, mluvíme x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

1.3 XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxx chlorpromazinu xxxx xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, se xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx referenční xxxxx xxxxxxxxx z látek, xxxxx xxxx použity xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).

1.4 PRVOTNÍ XXXXX

Xxxxxxxxxxx účinky byly xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx, že xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx zákona fotochemie (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxx fotoreakce dostatečnou xxxxxxxx světelných xxxxx. Xxxxx by xx xxxxxxx, než xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x XX/XXX oblasti (xxxxxxxxx podle zkušební xxxxxx XXXX x. 101). Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx^-1 x cm^-1, nemá xxxxx fotoreaktivní xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky xxxxxxxx xxx xxxxxx na xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx vitro, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxxxx).

1.5 XXXXXXX XXXXXX

Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx světla (xxxxxxxxx) chromoforem xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7), přičemž xxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx necytotoxické xxxxx XXX/XXX xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx při xxxxx xxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx závislý xxxxxx xxxxxx vitálního barviva, xxxxxxxxx červeně (neutral xxx, XX) (9), 24 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ozařování.

Buňky Xxxx/x 3X3 se kultivují xx xxxx 24 xxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxx kultura xxxxx x jedné xxxxxx (monolayer). Pro xxxxxx testovanou látku xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx po 96 xxxxxxx x látkou x osmi různých xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 hodiny. Jedna x xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x dávce 5 X/xx² XXX (+XX xxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxx (-XX experiment). X xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx kultivačním x xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx xxxxxxxxx xx pomocí inkorporace xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx xxxxxx, XXX) xx xxxx 3 xxxxx xxxxxxx životaschopnost xxxxx. Xxx xxxxxx x osmi koncentrací xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená xxxx xxxxxxxx xxxxxx x negativních xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé reakce xxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XX) x x xxxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxx, xxxxxxx xx úrovni XX₅₀, xx. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x 50 % x porovnání x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.

1.6 KRITÉRIA XXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxxx vůči záření XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx provádět xxxxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxx XXX. Buňky xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx vitro, xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX v xxxxx 1 - 9 J/cm² a xxxxx xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Buňky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx dávkou XXX záření 5 X/xx² xxxx nižší xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxxxxxxxxxxx x temnu. Xxx nejvyšší xxxxx XXX xxxxxx 9 X/xx² nemá xxx xxxxxxxxxxxxxxx nižší než 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Tato xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: test xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jestliže xxxxxxxxx kontroly (xxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx salt solution, XXXX] x 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo ethanolu (XxXX) nebo xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: absolutní optická xxxxxxx (OD_{540 NRU}) xxxxxx v XX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx, xxx oněch 1 x 10⁴ xxxxx nasazených x xxxxx jamce rostlo xxxxx dvou xxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx průměrná xxxxxxx XX_{540 XXX} x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx 0,2.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro je xxxxx provést xxxxxxxx xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx studii EU/COLIPA xxx jako látka xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxxx chlorpromazin (XXX); xxxxx xx tato xxxxx xxxxxxxxxx. Pro XXX xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti: XXX xxxxxxx (+UVA): XX₅₀ = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-UVA): XX₅₀ = 7,0 - 90,0 μg/ml. Fotoiritační xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx xxxxxxx XX₅₀, xx být xxxxxxxxx 6.

Xxxxx CPZ xx xxx souběžnou xxxxxxxxx xxxxxxxx dají použít x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látky, pokud xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx dat adekvátně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX₅₀ x PIF xxxx XXX (střední xxxxxxxxx).

1.7 POPIS XXXXXX

1.7.1 Xxxxxxxx

1.7.1.1 Xxxxx

Xxx xxxxxxxxx xxxxxx byla použita xxxxxxxxxxxxx buněčná xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx Balb/c 3X3 xxxx 31, x xx xxx x XXXX nebo x ECACC; ta xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx stejného protokolu xx xxxx x xxxxxxxx použít i xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx; je xxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx stejně xxxxxx.

X buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxx jen x xxxxxxx, xx xx výsledek kontroly xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx citlivost xxxxx xxxx XXX záření xxxx x počtem xxxxxx narůstat, xx xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3T3 x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx buněk Xxxx/x 3X3 xxxx UVA xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx postupem xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.7.1.2 Xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xx jedná x XXXX obohacený 10 % xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, penicilinem a xxxxxxxxxxxxxx x o xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^oC / 7,5 % XX₂. Xx xxxxxxxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozmezí xxx dané buňky xxxx. buněčnou linii.

1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kultur xx nasadí v xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx jednou xx xxxx použitím v xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxxx.

Xxx test xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxx (xx. xxx xx stanovuje xxxxxxxxxxxxxxx buněk 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx ke xxxxxxxxxx (xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx vrstvu xxxxx). X případě xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x 96 jamkami xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 x 10⁴ xxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxx identicky xx xxx xxxxxxxx x 96 jamkami, xxxxx xxx xxxxxxxxxx celým xxxxxxxx xx identických xxxxxxxxxxxx podmínek, x xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX/XXX).

1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace

Zatímco xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx genotoxického xxxx xxxxxxxxxxxxxx potenciálu xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx látka, xxx by x xxxx, xxx působila xxxx fotoxin xx xxxx nebo in xxxxx, xxxx metabolické xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Nepokládá xx proto ani xx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx prováděl x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivačním xxxxxxxx.

1.7.1.5 Xxxxxxxxx látka / příprava

Testovaná xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx se xx xxxxxxxxx. Xxxxx je xxxxxxxxxxxxx, že by xxxxx k xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx pod xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx se rozpustí x pufrovaném xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx fosfátem (phosphate xxxxxxxx saline, PBS), xxxxx - xxx xxxxxxx dojít k xxxxxxxxxxxx xxxxx ozařování - xxxxx obsahovat xxxxx proteinové xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xX, pohlcující xxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx látka xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xx vhodném xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, než je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se používá xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx x konstantním xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx koncentracích xxxxxxxxx xxxxx i v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dimethylsulfoxid (XXXX) xxxx ethanol (XxXX). Xxxxxx xxxxx xxx i xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx aceton, xx však třeba xxxx pečlivě zvážit xxxxxx xxxxxxxxxx vlastnosti, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, potlačení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vychytávání xxxxxxxx.

Xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx se xxxxxx míchání xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 ^xX.

1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / xxxxxxxx

Xxxxxxxx zdroj: xxxxx správného xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx je při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx klíčovým xxxxxxxx. Záření v XXX x ve xxxxxxxxx oblasti xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx XXX xx x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx vysoce xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xx 313 xx x 280 xx zvyšuje tisícinásobně. Xxxx kritéria xxx xxxxx světelného xxxxxx xxxxx zásadní požadavek, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxx testovaná xxxxx xxxxxxxxx, x xxx byla světelná xxxxx (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx) postačující xx zjištění známých xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx xxx i xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx simulátory, jimiž xx simuluje xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx (xxxxxxxxxxx) rtuťové xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx xxxx xx xxxxxx, xx vyzařují xxxx xxxxx x xxxx levnější, xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx záření XXX, je xxxxx xxxxxx filtrovat tak, xxx se toto xxxxxx xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Příklad spektrálního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého xxx validační studii xxxxx na fototoxicitu 3X3 NRU xx xxxxx xx x xxxxx (3).

Dozimetrie: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxx pravidelně xxxx xxxxxx testem fototoxicity xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx je xxxxx kontrolovat, k xxxxx xx doporučuje xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx typu x kalibrace. Xxxxxxx xx, xxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx xxxxxx spektroradiometru; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx vyžaduje xxxxxxxxxxxxxx obsluhu vyškoleného xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx studii xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx XXX xxxxxx 5 J/cm² xx xxx buňky Xxxx/x 3X3 necytotoxická a xxxxxx dostatečně xxxxx, xxx excitovala i xxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx nastavena xx 1,666 mW/cm². Xxxxxxx-xx se jiná xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx XXX xxxxxxx xxx, aby buňky xxxxxxxxxxxxx x byla xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx fototoxinů. Doba xxxxxxxx expozice xx xxxxxxxxxx podle xxxxxx:

&xxxx;	&xxxx; xxxxx xxxxxx (X/xx²) x 100	&xxxx;
&xxxx; x (xxx) =	&xxxx; ________________________	&xxxx; (1 X = 1 X s)
	záření (xX/xx²) x 60

1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μg/ml, xxxxx všechny fototoxické xxxxx byly detekovány xxx koncentracích xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků (13). Hodnota pH xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx (oblast xX 6,5 - 7,8).

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxxx (+XXX) x xxx xxx (-UVA) xx třeba stanovit x xxxxx předběžných xxxxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxxx koncentrační xxxx xx xxxxx xxx, xxx křivky závislosti xxxxxxxxxxx - odezva xxxx dostatečně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx geometrická xxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ředění).

1.7.3 Popis xxxxxxx

1.7.3.1 Xxxxx den

Připraví xx xxxxxxxx 1 x 10⁵ buněk/ml x xxxxxxxxxxx médiu. Xx xxxxxxxxxxx xxxxx 96xxxxxxx mikrotitrační xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx po 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx ostatních xxxxx se xxxxxxx xx 100 μl xxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxx 1 x 10⁵ xxxxx/xx (= 1 x 10⁴ xxxxx xx xxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx destičky - xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX), xxxxx xxx xxxxxxxxx fotocytotoxicity (+XXX).

Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX₂, 37 ^xX), xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx monolayer. Tato xxxxxxxxx doba xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.

1.7.3.2 Xxxxx xxx

Xx inkubaci xx xxxxxxxxxx médium x xxxxx odstraní x xxxxxxx dvakrát objemem 150 μx EBSS/PBS xx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxxxxx koncentraci xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Testovaná látka xx přidává v xxxx koncentracích. Xxxxx x testovanou látkou xx inkubují x xxxxx po xxxx 60 xxxxx (7,5 % CO₂, 37 ^xX).

Xxxx testu x XXX (+XXX) xx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx ozařují xx xxxx 50 xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx s 96 xxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx² (= xxxxx 5 / xx²). Xxx nedocházelo xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, je třeba xxxxxx ventilátoru. Duplicitní xxxxxxxx (-UVA) xx xx xxxx 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx UVA) uchovávají xx xxxxxxxx xxxxxxx x temném boxu.

Roztok xx xxxxxxxx x xxxxx xx promyjí xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx médiem x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) se inkubují (7,5 % XX₂, 37 ^xX).

1.7.3.3 Xxxxx xxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx xx změny xxxxxxxxxx xxxxx způsobené xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx kontrola xx xxxxxxxxxx, xxx xx eliminovaly xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx při xxxxxxxxxxxxx cytotoxicity xxxx xxxxxxxxxxxx xx tyto xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX)

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl předehřátého XXXX/XXX. Promývací xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μl média x XX x xxxxxxxx se xxx 37 ^oC ve xxxxxxxx xxxxxxxxx se 7,5 % XX₂ xx dobu 3 xxxxx.

Xx xxxxxxxx se xxxxxx x NR xxxxxxxx a xxxxx xx promyjí objemem 150 μl XXXX/XXX, xxxx xx pak xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx (xx také xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx).

Xxxxx xx přesně 150 μx xxxxxxx na xxxxxxxx NR (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx XX z xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xx spektrofometru xx xxxxx optická hustota xxxxxxxx NR xxx 540 nm za xxxxxxx slepého xxxxxx xxxx srovnávacího roztoku. Xxxxx xx uchovají xx vhodném xxxxxxx (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx analýzu.

2. XXXXX

1.8 XXXXXXX X KVANTITA XXXXX

Xxxxx xxxx umožňovat xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx při xxxxxxxx XXX/XXX záření x xxx xx. Je-li xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx údaje xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxx až xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x xxxxxxxxxxx xx xxx (-XXX) necytotoxická, xxx xxx ozařování (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx dojít x xxxx, xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx experimentu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zjištěna x žádné z xxxx xxxxx experimentu (xxx při -XXX, xxx při +XXX), xxxxxxxxx testování s xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx dávkami xx xx xxxxxxxx koncentrace.

Jsou-li xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx třeba xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxx důležité pozměnit xxxxxxxxxxxxxx podmínky, aby xx dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx proměnnou x xxxxx xxxxx xx příprava xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, nejvhodnější xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, triturace, xxxxxxxxxx). Lze xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. U xxxxx, xxx jsou xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx doby.

1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxxx k 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XX (XX₅₀). Xx xxx xxxxxx xxx, xx xx xx xxxx koncentrace - odezva xxxxxxx xxxxxxxxx vhodná xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (nejlépe Xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxx xx xxxxxxx XX₅₀ xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx XX₅₀ xx xxxx xxxxx xxxxxx grafické xxxxxx. X xxxxx případě xx doporučuje xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxx x: xxx, xxx x: xxxxxx), protože xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx mnohdy xxxxx xxxxxxxx.

1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (PREDIKČNÍ XXXXXX)

1.10.1 Xxxxxxxxx model, xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx xxx xx přítomnosti (+UVA), xxx xx xxxxxxxxxxxxx (-XXX) xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (PIF) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx

&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (-XX)
&xxxx; (x) PIF =	&xxxx; ____________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+XX)

XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, kdežto XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx pouze xxx +XXX, xxxxxx při -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx PIF xxxxxxxxx, i když xx xxxxx x xxxxxxxx, který xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx potenciál. X xxxxxxx případě xx xx vypočítat xxx. "&xx; XXX", když xx test xxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxxx až xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (X_xxx) x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxx:

&xxxx;	&xxxx; X_xxx (-XX)
&xxxx; (x) > XXX =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+XX)

Xxxxx xx xx vypočítat xxxxx "&xx; XXX", xxx xxxxx hodnota &xx; 1 předpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxx XX₅₀ (-XX), xxx XX₅₀ (+XX), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx cytotoxicitu xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx toho, že xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx xxxxxxx formální "XXX = *1", čímž xx xxxxxxxxxxxxxx výsledek

	C_max (-XX)
&xxxx; (x) XXX = *1 =	___________
	C_max (+XX)

Xxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "PIF = *1", xxxxxxxxxx xx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

X případech (b) x (x) xx xxxxx při predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx dosáhlo.

1.10.2 Xxxxxxxxx model, verze 2: xxxxxxx xxxxxxxxx (XXX)

Xx xxxxx také xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx použití xxx x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx xx podmínek xxxxx studie stanovení xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x látek XX xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx modelu XXX x xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx XX₅₀. X tomto xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx křivek xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx aplikaci xxxxxx XXX byl na Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx vyvinut speciální xxxxxxxxxx xxxxxxxx, který xxx xxxxxxx zdarma.

1.11 Xxxxxxxxxxxx výsledků

Pozitivní xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx daná xxxxx xx fototoxický potenciál. Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx koncentracích xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx také xx xxxxxxx expozičních xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxxxxx pouze při xxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx (100 (g/ml), xxxx xxx posouzení xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx schopnosti xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx informací. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx látky v xxxx, nebo údaje x xxxxxxxxx dané xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx alternativním testu, xxxxxxxxx xx použití xxxxxx lidské xxxx xx vitro.

Negativní výsledek xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in vitro (XXX &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxx xxx použité xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy by xx xxxxx xxxx xxxxxxxx i xxx xxxxxxxx koncentraci 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že látka xxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx vivo se xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. V případech, xxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx získány xxxxxxxxx koncentrační xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (EC₅₀ + XX x XX₅₀ - XX), xx interpretace xxx xxxxxx. Naproti tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+UV xxx -XX) x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx nedalo xxxxxxxxx koncentrace 100 μx/xx, je xxxxx xxxxxxxxx tento xxxx xxx xxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxxx a mělo xx xx xxxxxxxx x jiném, xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx kůže xx xxxx xxxx in xxxx).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxxxxxx údaje x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,

- fyzikální xxxxxx a čistota,

- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx x fotostabilita, xxxx-xx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx volby xxxxxx rozpouštědla,

- rozpustnost xxxxxxxxx látky x xxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx (EBSS xxxx PBS).

Buňky:

- typ x xxxxx buněk,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx pasáže, je-li xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx pomocí ozařovacího xxxxxxxx, xxx se x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X NRU xx xxxxx používá.

Podmínky xxxxxx (a) - xxxxxxxx před ovlivněním x po něm:

- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx média,

- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx, xxxxxxx),

- doba xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xx x xx xx).

Xxxxxxxx xxxxxx (b) - xxxxxxxxx látkou:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx ozařování XX/XXX xxxxxxx x xxx xxx,

- x xxxxxxx xxxxxxx rozpustnosti testované xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace,

- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pufrovaný solný xxxxxx),

- xxxx ovlivňování xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,

- spektrální xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx zdroje,

- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce xxxxxxxxx xxxxxx (filtrů),

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx světelného xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxx UVA (x x X/xx²) při xxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx UV/VIS xxxxxx,

- xxxxx záření UVA (xxxxxxxxx x čas) x X/xx²,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxx NRU:

- xxxxxxx xxxxx s XX,

- xxxx inkubace x XX,

- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX², xxxxxxx, xxxxxxx),

- podmínky xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, doba extrakce),

- xxxxxx délka, xxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx hustota XX,

- xxxxxxx vlnová xxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx-xx xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), pokud byl xxxxxx.

Xxxxxxxx:

- životaschopnost xxxxx xxx jednotlivých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kontrol,

- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (koncentrace xxxxxxxxx xxxxx νx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +XXX x -UVA,

- analýza xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: podle xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX₅₀ (+XXX) x XX₅₀ (-XXX),

- porovnání xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx ozařování XX/XXX xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (MPE),

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - souběžná xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxx denzita xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x směrodatná xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola:

- xxxxxxx XX₅₀ (+XXX), XX₅₀ (-XXX) x XXX xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx látky xxxxxxx pro pozitivní xxxxxxxx: hodnoty XX₅₀ (+XXX), XX₅₀ (-XXX) x XXX, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxx X.41. byla xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001

Informace

Právní xxxxxxx x. 251/98 Xx. nabyl xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx předpisem x.:

208/2001 Sb., kterým xx xxxx xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., xxxxxx se xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx - xxxxxx bude xxxxxxxxxxx x příští xxxxxxxxxxx

x xxxxxxxxx xx 22.6.2001

Xxxxxx předpis x. 251/98 Sb. xxx xxxxxx xxxxxxx předpisem č. 443/2004 Sb. x xxxxxxxxx xx 1.8.2004.

Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx předpisů v xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx změna xxxxx uvedeného xxxxxxxx xxxxxxxx.

1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., o xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx některých dalších xxxxxx.

2) Zákon č. 246/1992 Sb., na ochranu xxxxxx proti xxxxxx, xx znění xxxxxx x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Xx. x č. 30/1998 Xx.

3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx hospodářskou xxxxxxxxxx a xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx na zdraví (XXXX Xxxxxxxxxx for Xxxxxxx xx Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Effects).

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu. Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.