Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
XXXXXXXX
Ministerstva xxxxxxxxxxxxx
xx xxx 16. října 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx §4 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 157/1998 Sb., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx zákonů:
§1
Xxxx xxxxxxxx stanoví metody xxx xxxxxxxxxx nebezpečných xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x chemických přípravků xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx, žíravých, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx reprodukci (xxxx xxx "toxicita xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx").1)
§2
(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx zkouškami xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze xxxx vyhlášky.
(2) Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků xxx xxxxxx i xxxx xxxxxx, pokud jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxx citlivé, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx metody xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx xxxx metody xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx2) x metody xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx (XXXX).3)
§3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx účinnosti xxxx 1. ledna 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. Xxxxx, XXx. x. x.
Xxxxxxx x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků
X. XXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXXXX POJMY
1.1 XXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx doby (xxxxxxxx 14 xxx) xx podání xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXX XXXXXXXX
xx xxxxxxxxx termín xxxxxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx xx aplikaci testované xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xx být xxxxxx, xx po xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx toxických xxxxxxxx x pravděpodobně x úmrtí.
1.3 DÁVKA
xx množství podávané xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx), xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx xx xxxxxx dílů xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX
xx xxxxxxxx ze xxxx pevných dávkových xxxxxx, xxxxxx je xxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx.
1.5 DÁVKOVÁNÍ
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
1.6 LD50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)
je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivá xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx dobu smrt 50 % xxxxxx, xxxxxx byla xxxxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (STŘEDNÍ XXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxx, xxxxx pravděpodobně xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx x 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx standardním xxxxxx xxxxxxx (mg.l-1).
1.8 XXXXX
xx zkratka xxx "xx observed xxxxxxx xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx pozorovaného xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x xx xx nejvyšší x xxxxxx xxxxxxx dávka xxxx expoziční xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.9 TOXICITA XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx chemické xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX DÁVKA (XXX - MAXIMUM XXXXXXXXX XXXX)
xx xxxxxxxx xxxxx, která x zvířat xxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x ohledem xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.
1.11 XXXXXXXXXX XXXX
je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx změn xx xxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
je xxxxxxxx xxxx xx xxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX KŮŽE (XXXXXXXXX XXXXXXXXX DERMATITIDA)
xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
je vyvolání xxxxxxxxxx tkáňového poškození xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx studium absorpce, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx testovaných xxxxx.
1.16 ABSORPCE
xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) aplikovaná xxxxx xxxxxxxx xx xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx případně xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx.
1.18 XXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx metabolity rozdělovány x těle.
1.19 XXXXXXXXXXXX
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx neenzymatickými xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx systémová xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx xxxxx různých xxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 - X.5), xx kterých xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxx získán předběžný xxxxx toxicity.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx lze zvolit xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx testu až xx xxxxxxxxx stanovení XX50. Xxx inhalační xxxxxx xxxx limitní xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx možné definovat xxxxxxx xxxxxxx jednorázové xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx nejmenší xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx pevné xxxxx (metoda B.1 xxx) a metoda xxxxxxxxx xxxxx akutní xxxxxxxx (xxxxxx X.1 xxxx). Xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx doplnit xxxxxx xxxxxxxx z xxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx použita xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7, B.8 a X.9) xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx se xxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxx. Tyto xxxxx xx měly xxxxxx xxxxxxx cílové xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx dlouhodobých studií xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - B.30 x X.33).
3. XXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXX
Mutagenita xx xxxxxxxx k xxxxxxx trvalých přenosných xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx nebo celé xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx projevovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (bodové) xxxxxx x baktériích (xxxxxx X.13/14) anebo xx strukturální chromozómové xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (metoda X.10).
Xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xx vivo, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.12) nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Xx xxxx xxxxx dávat xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxx látky xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx nebo pro xxxxxxxxx a kontrolu xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx ke zjištění xxxxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxx využít k xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx základním xxxxxxxx xxxxx; zkoumání xxxxxx nezachycených základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vivo.
Pro xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx X.15 xx X.25 xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo x in xxxxx, xxx rozšiřují xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxx poskytují informace x xxxxxxxx xxxxxxxx x jiných xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx složitějších xxx xxxxxxxx používané x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx uvažované xxxxxx mutagenity je xxxxx xxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx relevantní xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx xxxx případ, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx faktorech, včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx bakteriálních x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity x známých způsobů xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx u xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx detekci xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx savčím xxxxxxxxx, xx xx vyvolaných xxxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx locus xxxx x myší xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (nezahrnuto x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, např. xxxx na přenosné xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x velmi xxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx takovou xxxxxx xxx na xxxxxxx xxxxxxxxx důvodů.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx po projednání x Národní referenční xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx látky xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Předběžné xxxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx čerpají xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Test toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx X.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx podáváním zahrnují xxxxxxxxx takových histopatologických xxxx, např. hyperplazie x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxx významné. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, podrobnější xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.32) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxx toxicity/karcinogenity (xxxxxx X.33).
K dispozici xxxx xxxxxx testy xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx určují xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx transformací - in xxxx (xxxxxx X.21). Používá xx xxxxxxxx různých xxxxxxxxx typů a xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx.
5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx způsoby, např. xxxxx xxxxxxxx reprodukčních xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx a samic (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx teratogenitu x xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx.
Testovací xxxxxx (metoda X.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx podáváním. Alternativně xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx aplikace x xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx vlastnostech testované xxxxx xxxx podle xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxxxxx. V takových xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx B.35) xxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxx generaci.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxxx změn xxxx strukturních x xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx nebo periferním xxxxxxxx systému. Předběžné xxxxxxxxxx na neurotoxicitu xxxx vzejít x xxxxx akutní xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by měla xxxxxx odhalit chemické xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Navíc xx důležité vzít x xxxxx specifické xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx být xxxxxxxx x jiných xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx například xxxxxxxx, xx jisté xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx posuzována xxxxxxxx X.37 x X.38 po jednorázovém xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Imunotoxicita xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx anebo podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx má xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx opakované xxxxxxxx (xxxxxx X.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x imunotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx dalších xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx, xx bude x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bude nezbytná xxxx posloupnost xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx změny v xxxx xxxxxxxx nebo xx xxxx ukázat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.36).
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx struktuře x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastnostech xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx absorpce xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx také xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX LÁTKY
Xxxxxxx testované xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x její xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti včetně xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxikologické studie.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro výběr xxxxxxx podávání, pro xxxxx xxxxxxxxx studie x pro manipulaci x xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx.
Vypracování xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx x kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx nečistot) x xxxxxxxxxx médiu x biologickém xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx o xxxxx.
10. PÉČE X ZVÍŘATA
Pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx, ve xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx, x správná xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX CHOVU
Xxxxxxx xxxxxxxx v prostorech xxx pokusná xxxxxxx xx xxxxx přizpůsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, myši x xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxx místnosti 22 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx má xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou zvláště xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx o xxxxxxxxxxx podmínkách uvedeny x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx, zaznamenávat xx x xxxxx xx x xxxxxxxxx zprávě x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xx být xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx a xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Pokud xxxxxx nevyžaduje jiný xxxxxx, mohou xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 xxxxxx x jedné xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxx xxxxxx chovaných x xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce, tak xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Krmení xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx použitý xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxx studované xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx výživová xxxxxxx xxxxxx vzájemným xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx xxxxxx potravy. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx vzít x úvahu xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx. Xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx podávána x xxxxxxx, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx.
Příměsi x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, nesmějí xxx přítomny x xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx se xxxxx xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX XXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxx testovacích xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx bolesti x stresu xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1.bis) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx toxicity (X.1.xxxx). Xxxxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx smrti xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x 70 % zvířat xxxx xxx xxxxxx X.1.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem utratit; xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx v xxxxxxx xxxxxx toxicity (xxxxxx X.1, X.2 x X.3), xxx xxxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx X.11 x X.12), xxxxxxxx vyhnout xx xxxxxxxxx xxxxxxxx velkými xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxxxx nebo xxx omezit na xxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx vědecké xxxxxxxxxx xxxx xxx založeno xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xx výsledcích xxxxxx xxx provedených xxxxx xxxx na xxxxxxxxxx dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x dávkou používanou x limitním xxxxx (xxxxxx B.3) x xxxxxx-xx pozorováno žádné xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx kožní xxxxxxxxxxx (xxxxxx B.4) xxxx xxx zbytečné; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx kůže při xxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx X.4), nesmějí xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, budou xxxxxxx xxxx utrpení xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx používání xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx metody k xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx použití xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nebezpečnosti xxxxx x úvahu xxxxx tam, xxx xx xx xxxxx.
12. XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xx nutno xxx xx xxxxxxx, že xxxxx extrapolace xx xxxxxxx je možná xxx x xxxxxxx xxxx; xxxxxxx o xxxxxxxxxxxx účincích x xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, mohou xxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Výsledky xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxx klasifikaci x xxxxxxxxxx nových x stávajících látek xxxxx xxxxxx xx xxxxxx člověka xx xxxxxxx vlastností xxxxxxxxxx x kvantifikovaných xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxx studie, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx X - Všeobecný xxxx byl vložen xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.1. AKUTNÍ XXXXXXXX ORÁLNÍ (PER XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxxxx dávky je xxxxx stanovit podle xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx pozorované xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxx metoda xx xxxxxxx především xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Zvířata se xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx stresu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je známo, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx dráždivých vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, x jakých xxxxx během experimentu. Xxxx testem xx xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých experimentálních xxxxxx.
Pokud xx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx první xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx, další xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx jako další xxxxxxx roztok v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx něho xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. U xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx překročit 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxxxxxxx x testech xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se zajistil xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Experimentální podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx dávek použít xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx samic, musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx z xxxx xxxxxxx je výrazně xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx zvířata tohoto xxxxxxx.
Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, než xxxx hlodavci, mělo xx xx xxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx středně xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx letálních dávek xxxxxxxxx látky.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, nejméně xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx x mortality. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxx, musí xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x přijatelnou xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx dávkou xxxxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 samců a 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx podaná xxxxx způsobí xxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, rychlosti vývoje xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx, x xxxx xx uhynutí, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mají xxx zvířata hladová. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx večer před xxxxxx. X zvířat x xxxxx rychlostí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxx x xxxxx vodě xxxx xxxxxx. V xxx pokusu se xxxxxxx zváží a xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x jedné dávce. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx aplikovanou xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Po podání xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx - xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx, xxx každé xxxxx xx vedou samostatné xxxxxxx. Během xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx častá xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x bezprostřední reakci xxxxxx na xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx pracovního xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx opatřeními k xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx studii, xxxx. xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, slinění, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí xx xxxxx zaznamenat xx nejpřesněji.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx nálezy xx xxxxxxxxxxx. Je-li xx xxxxxxxxxx, odeberou xx xxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx jednom xxxxxxx, xxxx xx xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx x xxxxx zjistit, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx nejsou výrazně xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pohlaví xxxx výrazně xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx na zvířatech xxxxxxx pohlaví je xxxxx vynechat.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný počet xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx nálezů. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x době xxxxxxx. Xxxxx hmotnosti je xxxxx stanovit a xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx zvířat xxxx xxx jeden xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x ohledem xx stres x xxxxxx xxxxxxxx podanou xxxxxx, xx zaznamenávají xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx látkou. XX50 xx vypočte uznávanou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zahrnovat xxxx vztah, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx abnormalit xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, makroskopických xxxx, změn xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx se použije) x koncentrace,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx údaje o xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x projevy otravy, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx uhynutí xx xxxxxx testované xxxxx, důvody x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx XX50 xxx xx xxxxxxx, x kterého byl xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx pro 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% meze xxxxxxxxxxxxx xxx XX50, xxxxx xx lze xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx a její xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxxx xxxxx metodou xxxxx),
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx humánní utracení xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50),
- interpretace xxxxxxxx.
B.1. bis XXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (XXX OS) - XXXXXX XXXXX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx doby xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx testované xxxxx.
Xxxxxx s xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx etapách.
X xxxxxxxxx orientační xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx sledují xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x zvířat téhož xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx odhadu xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx než xxxx xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xx látka xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx dávek: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx, x xx jako xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxx" (viz xxxx B - Xxxxxxxxx úvod bod 1.2), xxx xx xxxxxxx.
Xx xxxxxx xx xxxxxxxx účinky. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx žádné další xxxxxxxxx. Když na xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxx reakce xxxxxxxx humánní utracení, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx nejbližší xxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxx "diskriminující xxxxx" (xxx část X - Xxxxxxxxx úvod xxx 1.2), tj. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx úrovní xxxxx, xxxxxx xx možno xxxxx, xxxx xx xxxxx x xxxxx (xxxxxx xxxxxxx humánního xxxxxxxx).
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu a xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx užívané kmeny xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx testu xx x xxxx pohlaví xxxxxx variační rozpětí xxxxxxxxx zvířat (pro xxxxx pohlaví zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx náhodně přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx z xxxx pohlaví.
1.2.1.2 Příprava x podávání dávky
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx roztok xxxx suspenze testované xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxx první uvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx, teprve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem xxxx xxxxx něho xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx objemů xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx by xx xxxx minimalizovat takovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek.
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být zvířata xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx odebere xxxxx xxxx testem; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx omezen. X xxx pokusu xx xxxxxxx zváží x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx aplikovanou xxxxx xx xxxxxxx množstvích xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx přístup k xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se látka xxxxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx tohoto období - xxxxxxx x xxxx zvířatům xxxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx dávek xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx používají xxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxx samci xxxxxxxxxxx pohlavím. Dávky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx 24 xxxxx před xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Všechna xxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxx x cílem zjistit xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx sedm dní; xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx otravy xxxxx xxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx ještě xx dalších xxxx xxx. Posuzují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx nejbližší xxxxx xxxxxx uhynutí, potom xx nutné podat xxxxx potřeby xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Tento xxxxxx by xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx(xxx) dávek, která(é) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx xxxxxx, x x xxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávku xxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxx 500 xx.xx-1. Jestliže xx po xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Jestliže xxxxxxx x uhynutí xxx 2000 mg.kg-1, je xxxxxxxxxx xxxxxx skončena x xxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxx xx této xxxxxx xxxxx. Jestliže jsou xxx použití xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx těžké xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx toto zvíře xxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx xxx další xxxxxxx vhodné xxxxx xxxx určenými xxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx, že xx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx dávky xx xxxxxxx pouze xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx x testu, xx xxx xxxxxxx x xxxxx xx 4 xxxxxxx úrovní dávek, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx ta, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zřejmou xxxxxxxx, xxxxx nikoliv xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx); xxxxxxx uhynutí xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxx zaznamenána. Jestliže xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx nevyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyšší xxxxxx dávek. Zvířata xx xxxx xxxx xxx dále xxxxxxxxxx xxx, aby pozorovací xxxxxx xxxx kompletní. Xxxxxxxx těžká xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat nebo xxxx se projeví xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx další xxxxx xxxxxx dávek. Xxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx nutné xxxxxxx xxxxxxx, by měla xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx by xxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx patrná xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx příznaků.
Xxxxxxx xxxxxxxx vyšetření xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx první xxx xx podání látky x xxxxxxx xxxxxxxxx xx den xxxxx xxx. Zvířata xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx bolesti xxxx výrazné xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx jsou prováděna xxxxx xxxxxxxx prvních xxx xx xxxxxx xxxxx, jestliže xxxxxxx xxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxx může xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxx je xxxxxx, že xxxx xxxxxxx xxxxxx vysoká xxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx, srsti, očí, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před podáním xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx 3 xxx x xxxxx xxxxxx týdně. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx testu, xx xxxxx x pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx indikováno, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx třetí xxxxxxx xxxxx.
X xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx 5 mg.kg-1 (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx této xxxxx), xx třeba xxxx xxxxxxxxxx akutní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx x orientační x xxxxxx studie xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx úroveň xxxxx. X ní xxxx xxx xxxxxx xxxxx zvířat na xxxxxxx pokusu; počet xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; počet xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testu xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx; popis xxxxxxxxx xxxxxx; xxx xxxxxx xxxxxx, zda xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx testované xxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků; xxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx déle než xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Zvířata, xxxxx xxxx humánně xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx zaznamenána xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu má xxxxx xxxxx obsahovat xxxx informace xxx xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení, xxx.,
- experimentální xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovní xxxxx,
- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx použitých xxxxxx; xxxxx tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx utracených xxxxx xxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx toxicity; xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx),
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- pokud zvířata xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, doba úhynu xx podání xxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxx indikaci xxxxxxxxx utracení xxxxxx,
- pitevní nálezy,
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, včetně příznaků xxxxxx toxicity a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxxxxx x xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx a interpretace
Xxxxx | Xxxxxxxx | Xxxxxxxxxxxx |
5 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Méně xxx 100 % přežití 100 % přežití, xxx xxxxxx toxicita 100 % přežití; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxx, xxxxx xxxx jedovaté Xxx xxxxxxxx při 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx 5 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx výsledky x 500 xx.xx-1 | |
500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x 50 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Látky, xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxx významné xxxxxx xxxxxxxx Viz xxxxxxxx u 2000 xx.xx-1 | |
2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x nebo xxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxx výsledky x 500 mg.kg-1 Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx |
X.1. xxxx XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX XXXXX XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jak pro xxxxxxxxxx rizika, xxx xxx účely klasifikace xxxxxx.
Xxxxxx používá xxx xxxxx stanovených xxxxx x xxxxxxxxxxx odstupech, xxx aby xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx výsledků xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx pevně stanovených xxxxx, xxxxx lze xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx body xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx pro xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx dávek xx xxxxx xxxxxx, pokud xx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dávky a xxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx LD50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx rozsahu xxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx smrt xxxxx xxxxxx xx x x této xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx klasifikaci látky. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxxx xxxxx mohlo xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx B.1. Xxxxxx výhodou xxxx xxxxxx xx xxxxx spotřeba xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx metody fixní xxxxx (B.1 bis).
1.2 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx ze stanovených xxxxx. Testování xx xxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx úhynu zvířat xx xxxxxx x xxxxxxxx látce xxxxxxxx x xxxxxx kroku, x.x.
- xxxx xxxxxxxxx xxxxx další xxxxxxxxx;
- xxxxx krok xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx s xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxx metody
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx jsou náhodně xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx byla xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx zvyknout xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx mohou být x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávky, ale xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx musí xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zvířete.
Testovaná xxxxx xx aplikována xxxxxxxx x jediné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxx, testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx nejprve xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx rostlinném xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx vehikula xxxx xxx xxxxx xxxxxx toxická charakteristika; xxxxx xxxx známa, xxxx xxx stanovena xxxxx xxxx testem.
Zvířata xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx xxx potravy (xxxx. potkani xxxx xxx x myši 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx se přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx březí.
Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví
Pro xxxxx xxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx xxxx xxx použito kterékoli xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx úrovní, tzn. 25, 200 x 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, aby x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx alespoň xxxxxxxxx zvířat, jimž xxxx xxxxx xxxxxx. X závislosti na xxxxxxx dávce xx xxxxxxx příslušného diagramu xxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 1.
Pro xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxx veškeré xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx informací x xxxxxx struktury x xxxxxx. Pokud xxxx informace xxxxxxxxx, xx úmrtnost xx xxxxxxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx úrovni dávky (2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx - x xxxxxxx xx pokusná xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti.
V xxxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxx xxxxxxxx získanou xxxxxxxxx, xxx xxx xx dovoluje xxxx x třemi pevnými xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx uvažovat x xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx výši 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti.
Nemají xx xxxxxxxxx xxxxx, x kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx leptavými nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na rychlosti xxxxxxx, na xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Testování xx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxx při xxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx, dokud xxxx xxxxx, že zvířata xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx test x jedinou úrovní xxxxx ve výši 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx provádí xx xxxxx zvířatech xxxxxxx pohlaví. Xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxx další xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 mg.kg-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx musí být xxxxxxx vyloučena z xxxxxxx pozorování x xxxxxxx utracena x xxxxxx ochrany xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx předem xxxxx; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx jejich xxxxxxx x délky zotavovacího xxxxxx. Je důležité xxxxxxxxxxxx dobu, kdy xx objeví x xxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxxxx jde-li x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: záznamy xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxx xxxxxxx zkušební xxxxx zvážena. Po xxxxxxxx látky xxxx xxxxxxx xxx potravy xx xxxx dalších 3 - 4 xxxxx. Xxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxx xxx - x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířatům xxxxxxx x vodu.
Maximální objem xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx najednou, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. X hlodavců xx objem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx na 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx podat x 2 xx xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx x Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx dvakrát za xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx, xxxxx to vyžaduje xxxxxx zvířat xx xxxxxx látky, x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxx zvířata xxxx xxxxxxxxx stejně xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xx xx xxxx zvířata xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx, dobu xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xx nejpřesněji. Xxxxx pozorování xx xxxxxxx, doku xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xx xxxx x xxxxx, xx očích x sliznicích, x xxxx xx dýchacím, xxxxxxxx, vegetativním a xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, křečí, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x kómatu.
Veškerá pozorování xxxx xxxxxxxxxxxx zaznamenávána: xxxxxxx xxxx vedeny xxx xxxxx jednotlivé xxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx zvážena xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx se x zaznamenávají xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxx přežívající xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Pitva
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx pitva. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx získání dalších xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologie x xxxxxx přežívajících 24 a více xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx být údaje x každém xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx formy, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, počet zvířat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx jednotlivých xxxxxx, popis, xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx nálezy.
Všeobecné poučení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x Xxxxxxx 2.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- živočišný xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx atd.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx testu, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x způsobu xxxxxxxx testované látky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx a xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx tabulek podle xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx (tzn. xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x trvání xxxxxx);
- nástup a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x každého zvířete, xxxx-xx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 423.
DODATEK 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Jak xxxx uvedeno v xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx by měla xxx ta ze xxx xxxxx stanovených xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx uhynutí xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxx dávky lze xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx z jiných xxxxx xxxxxxxx a
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. Příslušné vývojové xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx stanovují xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxx xx počtu xxxxxxx utracených nebo xxxxxxxxx zvířat postupuje xxxxxxxxx tak, jak xxxxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxx xx aplikaci výchozí xxxxx 25 nebo 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, obvykle se xxx xxxx netestuje. Xxxxx však xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx pitvou ověřit xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxx potvrdí, xx třeba pokračovat x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx dávky.
4. Xxxxx po xxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx uhyne jedno xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx se předpokládat, xx hodnota XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xx xx xxxx xxx hraniční xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx posoudit reakce xxxxxxxxxxx dvou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx: zřetelné, xxxxxxx xxxxxxx příznaky x xxxxxx zvířat xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX50 xx xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti xxxx xxxxx, xxxx mohou xxx podnětem pro xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
5. Xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx x xxxxx doplňkovými xxxxx xxxxxxxxxxx dávkami (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx buď x xxxxxx xxxxxxxxxxxx dávky x xxxxx bodu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nebo xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích xx udána xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx xxxxxx xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxx až xx dosažení xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Klasifikace xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot uvedených x příslušném xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx dávkou 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx je udána xxxxx, xxxxx xxxxxx x pohlaví (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx zvířat xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx do dosažení xxxxxx rámečku.
Varianta 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Pokračování testu x příslušnou doplňkovou xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx konečných hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx dávkou 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x pohlaví (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx xx x testování xxxxxxxxx xx směru xxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxx rámečku.
Varianta 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx testovací xxxxxxxx 1
X xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Šedé xxxxxxx xxx rámečkem "XXXXX XXXXX TESTOVÁNÍ" x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, dokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Xxxxxxx v xxxxxxxxx vyznačují horní xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, že XX50 xx větší xxx hodnota x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx postup s xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx tělesné hmotnosti
(b) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
(c) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 2000 xx/xx tělesné hmotnosti
Interpretace xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
x) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx dávka 200 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
c) Xxxxxxx dávka 2000 xx/xx xxxxxxxxx
X.2. XXXXXX XXXXXXXX (INHALAČNÍ)
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xx užitečné před xxxxxxx získat xxxxx x rozdělení velikosti xxxxxx, xxxxx xxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx, teplotě vzplanutí x výbušnosti (jsou-li xxxxxxxxxxxx) testované látky
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Několik xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x to xxxxx koncentraci x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx zvířata pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu uhynou, x ta, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x takovým xxxxxxxx, o kterých xx známo, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx následkem xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx experimentu. Před xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx nevyžaduje xxx používaného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pevné xxxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxxxx xx částice xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x ovzduší xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx; v xxx xxxxxxx se zařadí xxxx xxxxxxxxx skupina x xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx pro xxxxxxxxx aplikace vehikulum xxxx xxxx aditiva, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Používá xx xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Pro každou xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxxx: Používají-li se x xxxxxxxx testech xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, než jsou xxxxxxxx, mělo xx xx zvážit použití xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx volit x xx třeba xxxxxxx, xxx nebyly xxxxxxxxxx xxxxx toxické xxxxx. X těchto xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xx xxx dostatečný počet xxxxxx dávek, nejméně xxx, x mají xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx údaje musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x mortalitou x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 samců a 5 xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 xxxx xxxxx xx aerosolu tekuté xxxx xxxxx látky x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (xxxx - x případech, kdy xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx použít x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx maximální dosažitelné xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx k xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx sledovanou xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx pokusy za xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx být 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Pro xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proudění xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, xxx se xx xxxxxxx omezovalo xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx byla xxxxxxxxx. Xxx zajištění xxxxxxxxx xxxxxxxxx x inhalačním xxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jinými xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx měla xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx záviset xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, na xxxxxxxxx xxxxxx vzniku x xx trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx doba, xxx se objeví x opět xxxxxx xxxxxxx otravy, stejně xxxx xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Zvířata xx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx zváží. Xxxxxxxx xx po xxxx 4 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Nastavení xxxxxxxxx xx mělo xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 x X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx to není xxxxx (např. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx negativního tlaku xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) zabrání xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx nepodává potrava xxx voda.
Xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxx xxx vytvoření x xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxx. Xxxxxx musí xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx nejrychleji. Konstrukce x xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxxxxxx x xxxxxx.
Je xxxxx zajistit xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně),
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx vysoké xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx častější xxxxxxxxxxxx). Během jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx hodnoty x xxxx než ±15 %. X některých xxxxxxxx, xxx xxxx úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx dosáhnout, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají být xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxx částic x aerosolů, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxx často, xxx xx xxxxx xxxxxxxx (ale nejméně xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx možno xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx skončení xx xxxxxxxxxx provádějí x xxxxxxxxxxxxx systematicky. Xxxxx zvíře má xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx často. Minimálně xxxxxx každý pracovní xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx každodenní xxxxxxxxxx x odpovídající xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx snížení xxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx umírajících xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x v okamžiku xxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají xx xxxxxxxxx zřetelem xx xxxx xxxxxx xxxxx x dolní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické patologické xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx účinků a xxxxxxx nálezy. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx přežijí xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx humánně utracena xxxxxxxx xx stresu xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx zaznamenána jako xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx. XX50 se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx hodnotí xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx, xxxxxx změn xxxxxxx, klinických xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx poškození, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pokud možno xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx třeba popsat xxxxxxxxx pro měření xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx tabulky x xxxxxx spolu s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx údaje:
a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x inhalačním xxxxxxxx;
x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;
x) xxxxxxxxx koncentrace (xxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxx do inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Pozn.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látek x xxxxxxx (xxxx. xx vodě) je xxxxx xxxxxx nejen xxxxxxxxx koncentraci xxxxx xx vzduchu, nýbrž xxxx, pokud je xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx látky ve xxxxxxxx.
d) povaha xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;
e) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);
x) xxxx do xxxxxxxx rovnováhy;
h) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxx reakcí xxxxx pohlaví a xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx, která x pokuse xxxxxxx xxxx byla xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx);
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xx jejím skončení, xxxxxx x xxxxxxxx xxx humánní utracení xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- xxxxxxx XX50 pro xxxxx xxxxxxx stanovená xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro XX50 (xxxxx xx xxxxx jej xxxxxxxx);
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx (xxxxxxxxxxx) x její xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx);
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x vlivu xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu xx xxxxxxxxxx hodnotu XX50);
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.3. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxxx x zaznamenávají xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i zvířata, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nemají xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx značnou bolest x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx. abrazí) kůže, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx připraví xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Při xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx připravenými x práškové formě, xx xxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou xxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x kůží. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx brát x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xx měl řídit xxx, v xxxx xxxxx xx může xxxx látka dostat xx xxxxx x xxxxxxx xxxx, x xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxx nejvíce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxx xx dospělých xxxxxxx nebo xxxxxxx. Xxx použít x xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx pro xx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx pokusných xxxxxx. Xx začátku xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx informace, že xxxxx x obou xxxxxxx xx výrazně xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Poznámka: Používají-li xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx druhů, xxx xxxx xxxxxxxx, mělo xx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x je xxxxx zajistit, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx toxické dávky. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba vyhnout xx podávání letálních xxxxx testované xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx, xxxxxxx tři, x xxxx xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se zřetelným xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků x xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx x použitím xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx látka xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Doba xxxxxxxxxx má být xxxxxxx 14 dní. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxx fáze xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx příznak otravy xxxxxxx x vymizí x xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx, která xxxx xxx 10 % celkového povrchu xxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha xxxxx; xxxx xx xx xxxx aplikovat xxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx část této xxxxxx.
Testovaná látka xx po xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx xxxxxx je xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx obvaz x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x aby xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx zaznamenávat. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx vést xxxxxxxxxx záznamy. Xxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxx často. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx pracovní xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx slabých xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxxx, xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx a sliznic, x xxxx xxxxxxx x krevního oběhu, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xxxxx xxxxxxx xx xx konce xxxxxx, xx pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx tkáně xx xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxx xxxxxxx
Xx dokončení xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx látka xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x pěti xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zjistilo, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látku. X konkrétních xxxxxxxxx xxxx xxx odůvodněno xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Pokud xx x xxxxxxxxx spolehlivá xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku pokusu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, popis toxických xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx x týdenních xxxxxxxxxxx x před xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx stanovit x zaznamenat, přežijí-li xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx na xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx látkou, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx touto xxxxxx. XX50 xx vypočte xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx hodnotí xxxxx, xxxxx existuje, mezi xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a výskytem x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx pokusu (xxxxxx způsobu xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví x podle dávek (xxxxx xxxxxx uhynulých xxxx humánně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx pozorování,
- hodnota XX50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% interval xxxxxxxxxxxxx pro XX50 (xxxxx jej lze xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx a její xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx danou xxxxxxx xxxxx),
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx všech xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx pozornost xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vypočtené xxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx),
- interpretace xxxxxxxx.
X.4. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXX DRÁŽDIVOST)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx látce x xxxxx snížit xx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx reakce. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může být xxxxxxxx xxx posouzení, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x chemická reaktivita. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx látky (xxxx. xX xxxxx či xxxxx 2 xxxx xX rovné xx xxxxx 11,5) není xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
x) Jestliže xxxx xxxxxxxx přesvědčivé xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx in xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx akutní xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxx pozorováno xxxxxxxxxx kůže, není xxxxx dále xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Rovněž xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx vysoce xxxxxxx xxx xxxxxxxx cestě xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx několika xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx každé xxxxx slouží jako xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxx xx odečte, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx provést xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxx zhodnotit xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx utratit.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zvířat xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx dbát xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Je xxxxx použít xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx mají xxxxxxxx husté srsti, xxxxx xxxx výraznější x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. Testované xxxxx xx nesmí xxxxxxx xx tyto zóny xxxxx xxxxx srsti.
Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx látkami, případně xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, případně xxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx dobrý xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nutné xxxx x xxxxx vliv xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx kapaliny se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxx třeba xxx xxxxxxxx albínu xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Jestliže xx z xx xxxxx screeningových xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. je xxxxxxx), xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxxxxxx tohoto xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx zvířatech.
Xxx xxxxx test xxxx xxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx třeba zvláštních xxxxxx pro neošetřenou xxxxxxxxx skupinu, pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx jiný xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxx místo kůže 0,5 ml xxxxxxxx xxxx 0,5 x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx oblasti xxxxxxxxxx xxxx zvířete xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx kontrola.
1.2.2.4 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx není možno xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx dostatečně dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx není třeba xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx xx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx chovají jednotlivě x xxxxxxx. Testovaná xxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx (xxx 6 xx2) xxxx x pokryje xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxx past xxxx xxx vhodné xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx látku xx mul, x xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxx. Xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxx, aby xx xxxxx xxxxxxx x mulu a xxxxx přijmout testovanou xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxxxxx testovanou xxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, ale xxx, xxx nebyla xxxxxxxxx případná reakce xxxx xxxx celistvost xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 4 xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxx, že xxxxxx poleptání, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx. na 1 hodinu xxxx 3 minuty). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx akutní dermální xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx odstraní xx 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx pozorována xxxxxxx xxxxx reakce, xxxxxxxx xx xxxxx plátek xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx nezbytná 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zacházení, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxx s xxxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xx xxxx kontraindikováno x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx xx 4 hodinách xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx nekróza xxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx kožní xxxxxx (xxxx. nekróza) pozorována xx 3 xxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxxx, je test xxxxxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx použití x xxxxxxxx x člověka.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a stupeň xxxxxx xxxx po 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x tabulce 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 hodin xxxxxxxx úplného xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx dále. Vedle xxxxxxxxxx kůže xx xxxxx xxxxxxxx popsat xxxxxxx závažné xxxx xxxx xxxxxxxxx (nevratná xxxxxxxxx xxxxx tkáně) x jiné toxické xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx histopatologického xxxxxxxxx xxxx měření xxxxxxxx xxxxx řasy.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx xxxxx pokusné xxxxx patrný stupeň xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxx pozorování. Xx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxx závažné xxxx, xxxxx xxxxxx x povahy podráždění xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x všechny xxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu obsahuje xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx přípravy x čištění kůže, xxx xxxxxx: okluzivní, xxxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxx tabulky xxxxx x xxxxx reakci xxx xxxxx jednotlivé xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 x 72 xxxxx xxx. xx xxxxxxxxxx xxxx),
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx poškození včetně xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx všech xxxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx | |
1. Hodnocení erytému x xxxxxxxxx | |
1.1 Žádný xxxxxx | 0 |
1.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx viditelný xxxxxx | 2 |
1.4 Xxxxx xx xxxxxxx erytém | 3 |
1.5 Xxxxx xxxxxx (silné xxxxxxxx) xxxx tvorba xxxxxxxxx (xxxxxxxxx poškození - xxxxxxx) znemožňující xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Hodnocení edému | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
2.3 Lehký edém (xxxxxx xxxx zřetelné, xxxxxx xx ohraničena xxxxxxxxx xxxxxxxxx) | 2 |
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxx x 1 xx) | 3 |
2.5 Výrazný xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 mm x otok xxxxxxxxxxx xxxxxxx exponované xxxxxx) | 4 |
4.2 Klasifikace xxxxx indexu xxxxx xxxxxxxxxxx (IKI)
IKI xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx průměr xx xxxxxx xxxxxx reakce xxx xxxxxx x xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx a x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx průměr.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
nedráždí | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; XXX ≤ 3 |
středně dráždí | 3 &xx; IKI ≤ 5 |
xxxxx xxxxxx | XXX &xx; 5 |
X.5. XXXXXX XXXXXXXX (OČNÍ XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
1.1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xx třeba xxxxxxx zvážit všechny xxxxxxxx informace o xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxx těžké xxxxxx. X tomu xxxxx xxx užitečné xxxxxxxxxxx informace.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx. xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx látky, xxxxx - xxx je xxxxx očekávat - xxxxxxxx x xxx xX xxxxx či xxxxx 2 xxxx xX rovné xx xxxxx 11,5, xxxx xxxxx xxxxxxxx, pokud xxx očekávat xxxxxxx xxxxxxxxx. Je třeba xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx validizovaných xxxxxxxxxxxxxx studií; xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx vlastnostmi nemají xxx xxxx testovány xx dráždivost xxx xxx, protože lze xxxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx účinky xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxx dráždivosti. Xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx ve studii xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, protože lze xxxxxxxxxxxx, xx budou xxx xx xxx xxxxxxx účinky.
Xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxxxx dávce xxxxxxxx xx jednoho xxx xxxxxxxx pokusným zvířatům, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx kontrola. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx provést xxxxx xxxxxxxxx účinku. Xxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx možné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx nevratnost xxxxxxxxxxxx účinků.
Zvířata xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
24 xxxxx xxxx testem xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx očí. Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx rohovky, se x xxxxxxxxxxx vyloučí.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx různé xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, doporučuje xx dávat xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet xxxxxx
Xxxxxxxx xx očekávají xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvolit test xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx výsledky xxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxx leptavé (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxx xxx xxx xxx použití xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivosti u xxxxxxx zvířat. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířata.
X ostatních případech xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří zvířat. Xxxxxxxxx nejednoznačných xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx zvířat.
1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx
Při testování xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,1 xx. X xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx objem 0,1 xx nebo xxxxxxxx xxx 0,1 g (xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx). Xxxxx-xx xx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx na xxxxx prášek. Objem xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxx.
U látek xxxxxxxxxx ve sprejích x pumpou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nádobkách xx třeba vystříknout x xxxxxx 0,1 xx xxxxx a xxxxxxxxxx xx xx xxx podle xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Doba xxxxxxxxxx
Délku doby xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vratnost xxxx xxxxxxxxxx pozorovaných xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx 21 xxx xx xxxxxxxx studované látky.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx oka xxx, xx xx spodní xxxxx lehce xxxxxxxxx xx oční xxxxx. Xxxxx xx pak xxx na 1 xxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Druhé xxx, xx které xx xxxxx xxxxxxxxxx, slouží xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nedojde x xxxxxxxxx změnám x xxxxxx xx testovanou xxxxx, xx třeba xxxxxxx zvolit xxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx anestezovat i xxxxxxxxx xxx.
Oči xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 24 xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx se xx považuje za xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx při xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, kterým xx xxxx po xxxxxxxxx xxxxx vymyjí xxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx použít 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx půl xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pozorování x xxxxxxxxxxx
Xxx se xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 x 72 hodinách. Xxxxxxxxxxx-xx xx xx 72 xxxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxxx ukončit. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx bylo možno xxxxxxxx xxxxx xxxx x jejich xxxxxxxx xx nevratnost. Vedle xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx zaznamenat x xxxxx xx xxxxxx i xxxx xxxxxxxx léze.
Intenzitu xxxxxx oka je xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x příloze x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx připouští xxxxx možnosti xxxxxxxxxxxx. Xxxx pomůcku pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx ilustrovanou xxxxxxxxxx xxxxxxx podráždění xxx.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx lupy, xxxxx xxxxxxxxxx lampy, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx sestaví xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx intervalu xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx popis stupně x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxx x zvířatech (xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností testované xxxxx),
- x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo leptavých xxxxxx xxx jednotlivá xxxxxxx xxx každém xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 hodinách)
- popis xxxxx xxxxxxxxxx závažných lézí,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x poleptání, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx rohovky,
- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 x 72 xxx.), xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx, fluorescein atd.,
- xxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx místních xxxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxx
Hodnota | |
A. Xxxxxxxx - xxxx | |
Edém xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx | 1 |
Xxxxxxx edém x everzí xxxxx | 2 |
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx víček xx xxxxxxxx | 3 |
Xxxx xxxxxxxxxx víčka xxxx xxx na xxxxxxxx xxxx zcela | 4 |
X. Spojivka - xxxxxx | |
Xxxxxx není xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx vnitřním xxxxxx) | 1 |
Slzení se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx | 2 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček x srsti x xxxxxxx xxxxx xxx | 3 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxxx | |
Xxxxx xxxxxx normální | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx normě | 1 |
Xxxxxxxxxx cévní xxxxxx, xxxxxxxxx jednotlivých xxx nesnadné, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx | 2 |
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx | |
Anomálie xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, nastříknutí cév xxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx na xxxxxx je xxxxxxxxx, xxxxxxxx opožděná | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx přítomná, xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx | 2 |
x xxxxxxx (xxxxx xxxx xxxx xxxxxx charakteristik) | |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Neprůhlednost xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx charakteru, xxxxxxx xxxxxxx zůstávají xxxxx xxxxxxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxxx oblast je xxxxxxxxx, snadno se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxx zastřené | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx opalescence, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 3 |
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx je xxxxx neviditelná | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx neprůhlednosti | |
Neprůhlednost xx pozorovatelná, ale xxxx xxxxxx xx ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; plocha xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx > 3/4 xxxxxx rohovky | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx indexu xxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx oční xxxxxxxxxxx (XXX) pro xxxxx zvíře a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx
XXX = 2.(X + X + C) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOP) pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vypočte xxx xxxxx interval xxxxxxxxx xxxx průměr x XXX.
Akutní index xxxx xxxxxxxxxxx IOA xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx
4.3 Klasifikace
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
dráždí | 15 - 29,9 |
xxxxx xxxxxx | 30 - 59,9 |
velmi xxxxx xxxxxx | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
X.6. SENZIBILIZACE XXXX
1. XXXXXX
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Citlivost a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx zjišťování xxxxx x potenciálním senzibilizačním xxxxxxx na lidskou xxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity x oblasti veřejného xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx jediná xxxxxxxxx metoda, xxxxx xx dostatečně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx lidskou xxxx x xxxxx xx se xxxxxx xxx všechny xxxxx.
Xxx volbě xxxxx xx xxxxx uvažovat xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx charakteristiky xxxxx, xxxxxx schopnosti xxxxxxx xxxx.
Testy xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, ve xxxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx Xxxxxxxxx kompletním xxxxxxxx (XXX), a xx testy xxx xxxxxxxx.
Xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxx přesnější x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx lidskou xxxx xxx xxxxxx xxx Xxxxxxxxx kompletního xxxxxxxx, x proto xx xxx xxxx xxxxxxxx.
Maximizační xxxx xx morčatech (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxx. Ačkoliv x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxxxx několik xxxxxxx xxxxx, je XXXX xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx.
X mnoha xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xx dává Xxxxxxxxxx xxxxx) považovány xx xxxx citlivé.
X určitých případech xxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx aplikací xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v maximizačním xxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx test na xxxxxxx (XXXX) a Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx validizované a xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xxx jejich xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx provedený xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx látku označit xxxx potenciální xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xx morčeti, xxx xxx je xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Definice
Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx kožní xxxxxx na xxxxx. X xxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, pupenci, puchýřky, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. U jiných xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx zarudnutí xxxx xxxx.
Indukční xxxxxxxx: experimentální xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Indukční xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx expozici, x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx rozvinout stav xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx dříve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx reakcí xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Citlivost x xxxxxxxxxxxx použité xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx každých xxxx xxxxxx x použitím xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxx mírný xx xxxxxxx xxxxx senzibilizační xxxxxx xxx xxxx.
X správně xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nejméně 30 % x xxxxxx x adjuvans a xxxxxxx 15% u xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx dává xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx XXX | Xxxxx EINECS | xxxxxxxx název | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | alfa-hexylcinnamaldehyd |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-merkaptobenzothiazol | kaptax |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxx odborném xxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx nejprve xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aplikací (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxx 10 xx 14 xxx (indukční xxxxxx), x průběhu kterého xx může xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx exponována provokační xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx expozici x testovaných zvířat xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x stupněm xxxxxx u kontrolních xxxxxx, xxxxx podstoupí xxxxxxx expozici x xxxx indukce a xx jim xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx je xxxxxxxxxx za nezbytné xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx se xx x xxxxxxxx vody xxxx xxxxxxxx rozpouštědla xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx vzniklá xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.1 Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (GPMT)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx aspoň 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před testem xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx stříháním, xxxxxxx xxxx chemickou depilací, x závislosti xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Zvířata xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxxxx se běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx 10 zvířat x xxxxxxx 5 xxxxxx xx třeba x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se menšího xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx x závěru, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxx 20 testovaných x 10 kontrolních xxxxxx.
1.5.1.2.3 Dávkové úrovně
Xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, kterou xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx mírné xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx provokační xxxxxxxxxxx xx použije xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, která x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x předběžném xxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx použití xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxxxxx FCA.
1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.1.3.1 Indukce
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx subkutánních xxxxxxx, xxxxx po 0,1 xx, se xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx linie:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx s vodou xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: testovaná xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx připravená xx směsi FCA x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxx xxxxxxx 3 xx xxxxx xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx s XXX xx xxxxx fázi. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxx FCA. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx pro xxxxxxx 3 xx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 2.
Xxxxxxx 1 a 2 xx xxxxxxxx blízko xxxx x xx xxxxxxxx hlavě, xxxxxxx xxxxxxx 3 směrem xx kaudální xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Následující 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx podají xx xxxxxxxx xxxx xxxx x testovaných xxxxxx:
Injekce 1: Xxxxxxxxx kompletní xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: neředěné vehikulum;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) se xxxxx XXX/xxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx indukční aplikací, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxxxxx případně xxxxxxx xxxxx 0,5 xx 10% laurylsulfátu xxxxxxx xx vazelíně, za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Testovací xxxxxx se xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx vehikulu xx napuštěn xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), xxxxx xx pak xxxxxxx xx testovací xxxxxx x fixuje xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxx odbornými xxxxxx; xxxxx látky xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx do vhodného xxxxxxxx; kapaliny lze xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. xxx - Kontrolní skupina
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx srsti. Xxxxxxx vehikulum se xxxxxx a zafixuje xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxx 48 hodin.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx exponovaných x kontrolních xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xx jeden xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látka v xxxxxx nebo v xxxxxxx a xx xxxxx bok se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vehikulum (xxxxx xx xx xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx udržují x xxxxxxxx x xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: testované x xxxxxxxxx xxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, důkladně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
- přibližně xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (přibližně 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx dávky) xx pozoruje xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx 24 xxxxx po xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorování x xxxxxx xxxxxx kůže (72 hodin).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x testovaných x kontrolních xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, které zvíře xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx reakcí, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx postupů, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (viz xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx řas.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx testu. Před xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Odstranění xxxxx xx xxxxxxx stříháním, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Zvířata xx zváží xxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Používají se xxxxx laboratorní kmeny xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxx se minimálně 20 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Koncentrace xxxxxxxxx xxxxx použitá xxx xxxxxx indukční xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx mírné, xxx xx xxxxx silné xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace, xxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx detergentu xxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx je preferován 80% xxxxxx xxxxxx/xxxx xxx indukci x xxxxxx pro xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx bok xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx nasytí xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; kapaliny lze xxxxxxxx xxxxxxxxx přímo).
Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x přidržován x kontaktu x xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx komůrkou x xxxxxxx obvazem po xxxx 6 hodin.
Xxxxxx xxxxxxxxxx testu xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, ať už xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxxx expozice.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Jeden xxx je xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xx xxxxxxxxx plochu xx naneseno xxxxx xxxxxxxxx, a xx xxxxxxxx způsobem jako x testované xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem xx xxxx 6 hodin. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupina není xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx kontrolní skupiny xxx xxxxxxxx.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní skupina
Xxxxxx aplikace xxxx x xxx 0 xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx x znovu 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Provokace
27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxxx xxx testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Xxxxxxxxx plátek xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx aplikuje na xxxxx část xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxx část xxxxxxxxxxxx xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx vhodným xxxxxxx po xxxx 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Pozorování x xxxxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxx kožní xxxxxx a zaznamenávají xxxxx stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx po xxxxxxx 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 hodin xx aplikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxx) se kožní xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zaznamenávají.
Doporučuje xx systém "slepého xxxxxx" u testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat, xxx pozorující xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx senzibilizováno x xxxxx je xxxxxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx výsledků xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx přibližně o xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx na původní xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx postupů, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx nálezů je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření nebo xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX (XXXX X XXXXXXXXX TEST)
Xxxxx xx sestaví xx tabulky, xx xxxxx xxxx xxx xxx každé pokusné xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Pokud xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx uvést xxxxx xxxxxx testu xxxx xxxx xxxxxx (xxxx. LLNA - xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, MEST - xxxx ztluštění xxxx x xxxx) xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu (XXXX a Xxxxxxxxx xxxx)
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud mohly xxx xxxxxxx:
Pokusná xxxxxxx:
- použitý xxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx a konci xxxxx.
Experimentální xxxxxxxx:
- způsob přípravy xxxxx xxx plátkový xxxx;
- podrobné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx plátkového xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx studie xx xxxxxxx x indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx vlastní xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxx x odstranění testované xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x vehikula, xxxxxxx xxx indukci x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx výsledků poslední xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx použité xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx koncentracea xxxxxxxx;
- všechna xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx systému xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx charakteru a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Tato xxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Magnussona/Kligmana xxx hodnocení vyvolaných xxxxxxxxxxxxx reakcí
0 = žádná xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx xxxx skvrnité xxxxxxxxx kůže;
2 = středně xxxxxxx x splývající zarudnutí xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx pozitivity při xxxxxxxxxx expozici, xx. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, se xxxxx klasifikuje xxxx
xxxxx xxxxxxx (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx alergen (XX. st.) - 9 - 28 % xxxxxx
xxxxxxx xxxxx alergen (III. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. st.) - 65 - 80 % zvířat
extrémní xxxxxxx (X. xx.) - 81 - 100 % zvířat
X.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (28DENNÍ XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat orálně, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pitva xx provede x xxxxx xxxxxx, která xxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx během xxxxxx; xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx utratí x xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx do kontrolní xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Klece xxxx uspořádány xxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx zvíře xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx sondou xxxx x potravě xxxx x xxxxx vodě, xxxxx xxxxx studie x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx je xx xxxxx, rozpustí xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka ve xxxxxxx nosiči (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxxxxxxx) a xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx použít x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x nesmí xxx březí. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx co nejdříve xx xxxxxxx a x xxxxxx případě xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx věku 9 xxxxx.
Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (pro každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx tato xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x obou studiích xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x ze xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx použije xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou zabita xxxx koncem pokusu.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx následujících 14 xxx po podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx satelitní xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Volba dávek
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx úrovně xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx skupinu. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x to ve xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx očekávat xxxxxx xxx xxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx test. Xxxxxx-xx taková xxxx x dispozici, lze xxxxxxx předběžnou xxxxxxxxxxx xxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Při xxxxxx dávek xx xxxxx vzít x xxxxx xxxxxxx existující xxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx látkách xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx. Dále xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx, xxx umožnily xxxxxxxx závislost xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (NOAEL). Xxxxxxx xx xxxxxx xxxx- xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx sousedními xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx čtvrtou xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx příliš velký xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxx xxx 10).
Xxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx x potravě xxxx xxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx množství xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx konstantní koncentrace (x ppm) xxxx xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx se tak xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Xxxxx má xxxx studie sloužit xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx studií, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Neprokáže-li xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx při xxxxx 1000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxx xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxxx x potravě xxxx xxxx, která xxxx dávce odpovídá, x xxxxx toxicita xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testu platí, xxxxx údaje x xxxxxxxx lidí xxxxxxxxxxx, xx xx třeba xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx pozorování xx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx nejméně dalších 14 dnů xxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířatům xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 dnů, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxx x xxxxx. Xxxxx dávka xx xxxxxx jednorázově xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kanylou. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx zvířete. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x případě vodných xxxxxxx xxx podat x 2 ml xx 100 x xxxxxxx hmotnosti. Rozdíly x podávaném objemu xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx byl xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx x xxxxx dráždivých a xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx provádí nejméně xxxxxx denně, nejlépe x xxxxx denní xxxx x x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Zaznamenává xx xxxxxxxxx stav zvířat. Xxxxxxx xxxxxxx denně xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxx zjištění xxxxxxxxx a mortality. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx silnou xxxxxx nebo xxxxx xxxx xxxxxxxx, utracena xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx všech zvířat xx provede před xxxxx aplikací (xx xxxxxx intraindividuálního porovnání) x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx chovnou klec x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx dobu. Výsledky xxxxxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx x testující xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx pozorování měnily xx xxxxxxx; osoba, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování xxxxxxxx změny kůže, xxxxx, xxx x xxxxxxx, přítomnost xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx a vegetativních xxxxxx (xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx klonických x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx pozadu).
Xx čtvrtém xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx xx síla xxxxxx x celková xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx informace o xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxx x xxxxxxxxxx (viz Xxxxxxxxx úvod, xxxx X).
Xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx vynechat, pokud 28xxxxx studie xxxxxx xxxx xxxxxxxxx studie xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xxxxxxxx xx této xxxxxxxxxx studie. Xxxxx x v tomto xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx lze xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířete vadily.
1.2.3.2 Xxxxxxx hmotnost x xxxxxx xxxxxxx a xxxx
Xxxxxxx xx xxxx nejméně jednou xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x vody se xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, také x xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx vyšetření na xxxxx xxxxxx zahrnuje xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x změření xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxx xx odebere těsně xxxx xxxx v xxxxxxx xxxxxxxx zvířete, xxxxx, odkud xx xxxx odebrala, se xxxxxxxxx. Krev xx xxxxxxxx za vhodných xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxických xxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxx, se xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxx zvířata xxx xxxxxxx xxxx noc xxxxxxx xxxx1). Xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxx stanovení sodíku, xxxxxxxx, glukózy, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, albuminu, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx indikujících účinky xx xxxxxxx xxxxx (xxxx alaninaminotransferáza, aspartátaminotransferáza, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, sorbitoldehydrogenáza). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (jaterního xxxx xxxxxx původu) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx užitečné xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx definovaný xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx posledního xxxxx xxxxxx: hodnotit xx možno xxxxxx, xxxxx, osmolalitu nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xX, xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx xxxx. krvinky.
Xxxx je třeba xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání x séru.
Další xxxxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx x látek xxxxxxx xxxx podezřelých x působení xx xxxxxx xxxxxxxxxxx funkce: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx hormonů, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx vyšetření xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx do určitých xxxxxx látek xxxx xxxxxx xx případu.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx dané látky.
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1) Vyšetření xx xxxxx je xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxx x plazmě, zvláště xxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxx xx xx, xx u xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, hladovění xxxx noc xx xxxxx mít xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x x aplikace x xxxxxxx by xxxxxxx xx pravidelnosti xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxx xx lačno, xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx testu.
1.2.3.5 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx se xxxxxxx xxxxx, zahrnující xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx otvorů, xxxxxx lební, xxxxxx x xxxxxx, a xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxx x srdce xxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xx nejdříve po xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxx tkáně x xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickými změnami, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x mostu), xxxxx, xxxxxxx, tenké x xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, brzlík, štítnou xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem x xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x přídatné xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxx, xxxxxxxx), močový xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (přednostně xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), periferní xxxx (x. xxxxxxxxxxx xxxx n. tibialis), xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, xxx kostní xxxxx (xxxx xxxxxxx xxxxx z xxxxxx xxxxxx dřeně). Podle xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i další xxxxx. Každý orgán, xxxxx by xxxx xxx cílovým xxxxxxx xxx působení testované xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx uchovaných orgánů x xxxxx. Xxxxx xx v orgánech x xxxxxxx ve xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx objeví poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxx i x xxxxx skupin x xxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx vyšetřit.
U xxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxx xxxx do xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx na orgány x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx exponovaných zvířat.
2. XXXX X ZÁZNAM XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx být xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx údaje xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx včetně doby xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx každého xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx lézí x procento zvířat x xxxxxxxxxxxx typy xxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxxx formě xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx metodu xx xxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxxx atd.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx dávek;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxxxx koncentracích, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx testované látky;
- xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxx (xxx) xx skutečnou xxxxx xxxxx v xx xx xx xxxxxxx hmotnosti (pokud xxx x aplikaci x xxxxx xxxx xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x kvalitě xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, příp. xxx xxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx;
- posouzení xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, úchopové xxxx x motorické aktivity;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření s xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx všech histopatologických xxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxx, pokud xxxx získány;
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Závěry:
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx analogická xxxxxx XXXX XX 407.
B.8. AKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX (28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx, xxx xxxx, xxx varu, xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (jsou-li stanovitelné).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, každá xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to xx 28 xxx. Použije-li xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx denně pozorují x xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx vznikla příslušná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx zdravých xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných kmenů. Xx xxxxxxx studie xxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx zvířat překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinu 10 zvířat (5 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx x během xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx vratnost, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx satelitní xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx skupina, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - pokud xx xxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x skupiny x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx počtu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx překračovat. Ideálně xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx voleny xxx, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxxxx s nízkou x xxxxxxx koncentrací x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Trvání xxxxxxxx xx xxx 6 hodin denně; x xxxxxxx specifických xxxxxxxxx xx možné xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Pro xxxxxx xx zvířaty xx xxxxxxx xxxxxxxxx expoziční xxxxxxxx, xxxxx zaručuje xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx konstruovat tak, xxx se zamezilo xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx byla xx xxxxxxxx. Xxx zajištění xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxx. Xx možné použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx způsoby xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx jinými cestami.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Pokusná xxxxxxx je třeba xxxxx pozorovat xxxxx xxxxxx období xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, jsou xxxxxxxxxx dalších 14 xxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx během experimentu xx xxx 22 xX ± 3 xX. Relativní vlhkost xx xxx mezi 30 % x 70 %, x xxxxxxxx případů, kde xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx do okolí. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx systém x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx předběžný xxxxx xxx získání xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx nastavit tak, xxx xxxxxxxx x xxxxx expozičním boxu xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx expozice xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx průtoku xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx měří x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ± 15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx této úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx celou xxxx xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, xxx xx xx prakticky xxxxx. Xxxxx se xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxx x vlhkost vzduchu xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx expozice a xx jejím xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky; xxxxx xxxxx xx xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně pozorovat xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, stupeň x trvání. Pozorování xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx týdně x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxx prohlížení xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx ztrátám xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Xx konci xxxxxx xx x všech xxxxxx včetně kontrolních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
1. Hematologické vyšetření xx xxxxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů a xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x posouzení xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x celkové bílkoviny x séru.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, fosforu, chloridů, xxxxxx, draslíku, glukózy xx lačno, lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxx pitva. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, plíce x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Orgány x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, i xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xx zachovala xxxxxxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx skupině x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx způsobená xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tkání x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X zvířat xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx orgány x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx tabulky x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxx: a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx; c) nominální xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx objemem xxxxxxx); x) xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx xxxxx; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx; x) xxxxxxxxxx medián xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (MMAD) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD),
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- hematologická vyšetření x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX OPAKOVANÁ APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xx kůži xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx pokusných xxxxxx. Xxxxxxxx srsti je xxxxxx xxxxx, mělo xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx experimentem. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx potřeba opakovat xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (např. xxxxxx). Xxx nanášení se xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx rozhodování x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x x velikosti xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x tuhými xxxxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxx kontakt x xxxx. Testované kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xx možno používat xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx morčata. Je xxxxx xxxxxx x xxxx zvířecí xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro každou xxxxxxx dávek použít xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic a 5 samců) se xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Pokud se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x průběhu studie, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 dnů xxxxxxxx dávku x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx skupiny 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx xx se mělo xxxxxxxx xxxxx den xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace testované xxxxx se se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění aplikace, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xx aplikuje xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit žádné xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx počtu. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx dávka xxxx vyvolat xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx než 3 úrovně xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s nízkou x střední xxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx by počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x těžkému xxxxxxxxxx kůže, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx k xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx účinků. Xxxxx-xx x xxxxxxx poškození xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx okolností xxxxx pokus ukončit x provést jej xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx při xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 mg.kg-1 xxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x dobu, xxx xx objeví a xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx x xxxxxxx xx jednom. Exponují xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 dnů x xxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx mohla xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx nejméně 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx těla; x vysoce xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx požití látky xx možno použít x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx immobilizaci xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx metody je xxxxx použít "xxxxxxxxxx xxxxx".
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxx očištění xxxxxxx.
Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně pozorovat x xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x sliznic x xxxx dýchání x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx potravy. Je xxxxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, aby xxxxx možno xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx x zvířata x těžkém xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Na xxxxx pokusu xx x všech zvířat xxxxxx kontrolních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního počtu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Biochemická xxxxxxx xxxx: k xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jeden z xxxxxx xxxxxxxxx: alaninaminotransferáza x séru (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamát-oxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx pro xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy mohou xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx zvířat použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Aspoň xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxx x xxxxxxx xx xx nejdříve xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kůže, xxxxx, ledviny, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x makroskopickými xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
X xxxxx xxxxxx skupiny, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, a x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Pokud xx x orgánech x xxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tkání x u xxxxx xxxxxx s nižšími xxxxxxx. X zvířat xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx na orgány x tkáně, ve xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, podmínkách xxxxx, xxxxxx atd.),
- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx obvazu; xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx bez xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxx jiné xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.10. MUTAGENITA - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X XXXXX XX XXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx replikací OECD XX 473, In Xxxxx Mammalian Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx je xxxxxx xxxxx, jež v xxxxxxxxx savčích buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx (1) (2) (3). Strukturální xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx k aberacím xxxxxxxxxxxxxx typu. Vznik xxxxxxxxxxx může naznačovat, xx daná xxxxxxxx xxxxx xx schopna xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x příbuzné xxxx xxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy, xxx xxxxxxxxx xxxxx x onkogenech x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx, xxxxx úlohu xxx xxxxxx rakoviny x xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Tento xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx mutagenů x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxx xxxxx, které jsou x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxx savce xxxxxxxxxxxx, xxxx však dostatečná xxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxx a karcinogenitou. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx látky x existuje xxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, že existují xxxxxxxx látky, jejichž xxxxxxxxxxxx vlastnosti se xxxxx xxxxxx nezjistí, xxxxxxx zřejmě xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx DNA.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vitro xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx stabilizovaných xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx primární buněčné xxxxxxx. Použité xxxxx xxxx vybrány xx xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu x xxxxxxx, stability xxxxxxxxx, xxxxx chromozómů, xxxxxx diverzity x xxxxxxxx spontánních xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zdroj xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Tento systém xxxxxxxxxxx aktivace nedokáže xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxx. Xx třeba xx xxxxxxxxx podmínek, xxxxx by xxxxx xxxx x pozitivním xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, nýbrž xxxx xxxxxxxxx změnami xX, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx aberace xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).
Xxxx chromatidy: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx vzniklá xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx zlomu je xxxxxxxxxxx (nebo mimo xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx S-fázi xxxxxxxxx XXX nepřechází xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx léze xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx buněk x xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx populace.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x to s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xx. Xx xxxxxxxxxxx intervalech xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® nebo xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, xxxxxx se x v metafázických xxxxxxx xx mikroskopicky xxxxxxxx chromozómové aberace.
1.4 POPIS METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx řadu xxxxxxxxx linií, kmenů xxxx primárních xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx fibroblasty xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx krve xxxxxxx či jiného xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
K xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, teplota x vlhkost). X xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x nepřítomnost xxxxxxxxxxx x buňkách. X případě kontaminace xx buňky xxxxxxxxxxx. Xx třeba znát xxxxxxxx dobu buněčného xxxxx x kultivační xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx: buňky se xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx hustotě, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx před dobou xxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 xX.
Xxxxxxxxx: xx kultivačnímu médiu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxx xxx xxxx xxxx x vhodným xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x kultivují se xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx testovanou xxxxxx působí x xxxxxxxxxxx i v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nejobvyklejší xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v médiu xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx na xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx látka. X xxxxxxxxx případech je xxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx účely xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx vědecky xxxxxx (např. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxxx, xxxxx xx před xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x případně xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxxx přidávat přímo xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx delší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX XXXXX
1.6 ROZPOUŠTĚDLO
X zvoleného xxxxxxxxxxxx xxxxx existovat podezření, xx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Používá-li xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxxx tam, xxx je xx xxxxx, bylo na xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx jako rozpouštědla xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx ve xxxx xxxxxxx, musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Voda xx xx odstranit xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.6.1 Koncentrace
Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x xxxxxxx x xxxxx pH resp. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x bez xx x hlavním xxxxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx integrity a xxxxx, xxxxxxxxx stupně xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Je xxxxxx xxxxxxxx cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x xxxxxxxxxxxx, musí xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx nízké xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx znamená, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx násobkem, který xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. X době xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxx, xxxx mitotického xxxxxx (vždy x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx mírou xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx x je xxxxxxx na době xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx detekce xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Jako xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx generační xxx; xxx ovšem xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx vždy xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx zpožděných subpopulací xxxxx. X tak x xxxx prodloužení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx znamenat značný xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výtěžku xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx z xxxxxx 5 µl/ml, 5 xx/xx xxxx 0,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx látka xxxxxxxxxxx, xx xxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšší, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx finálním xxxxxxxxxxx médiu xx xxxxx kultivace s xxxxxxxxxx látkou. V xxxxxxxxx případech - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx k xxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, než xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx testovat xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx užitečné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx počátku x na xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx systému vlivem xxxxxxxxxxx buněk, séra, X9 xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx dá xxxxxxx x prostým okem. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.6.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx s xxxxxxxxxxxx aktivací xxxx xxx xx, xx xxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx). Pokud se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx mutagenního xxxxxx.
Xxx pozitivní kontrolu xx xxxxxxx známý xxxxxxxxx, a xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx se očekává, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x detekovatelný nárůst xxxxxxx xxx pozadí, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přímo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx pro pozitivní xxxxxxxx xxxxx například:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Xx | methyl xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Xxx | xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Pro pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx látky. Xxx, xxx xx to xxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx časový xxxxxxxx sklízení kultur xx xxxxx použít x negativní xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x kultivačním xxxxx, zpracované stejným xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx třeba zařadit xxxxxxxx xxx jakéhokoliv xxxxxxxxx.
1.6.3 Postup
1.6.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx působí xxxxxxxxxx látkou za xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx působit xxx 48 xxxxx xx xxxxxxxxx mitogenem.
Xxxxxxx xx xxx xxxxxx koncentraci používají xxx xxxxxxx; x xxxxx se doporučuje xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx základě historických xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx duplicitními xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, aby se xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx v testu xxxxxx postupy, xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nádob (15).
1.6.3.2 Xxxx sklízení xxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx xx xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx odpovídajícím xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Xxxxx jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x bez xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídají xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx při xxxx xxxxxxxx delší, xxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx od případu. X případech, xxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepokládá xx xxxxx, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx Colcemidem® xxxx kolchicinem xxxxxxx xx dobu 1 - 2 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx kultura xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvlášť. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx roztokem, xxxxxx x xxxxxxxxx.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx kontrol, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, musí xxx x všech typů xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx modálnímu xxxxx ± 2. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx minimálně 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x obou xxxxxx, xxxxx byly xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx vysoký, xxxx xx xxxxx analyzovaných xxxxxxxx snížit.
X xxxx účelem testu xx zjistit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx zaznamenat xxxxxxxxx polyploidii x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Jelikož xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx buňka, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi. Xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jejich xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx četnosti aberací xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx v testu xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx data xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx pozitivních výsledků xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx testováním, xxxx xxxxxxxxxx experimentálních podmínek. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx bylo xxxxxxxxx v odst. 1.4.3.3. X následných xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxxx, patří koncentrační xxxxxxxxx x podmínky xxxxxxxxxxx aktivace.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x chromozómovými xxxxxxxxx. Xxxxxxx je xxxxx uvážit biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx metody (3) (13). Xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost inhibovat xxxx buněčného xxxxx (17) (18).
Xxxxxxxxx xxxxx, při jejímž xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, xxxx negativní xxxxxxxx, ve výjimečných xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx opakovaných xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
XXXXXX X PRŮBĚHU XXXXXX
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxxx daného xxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx x délce xxxxxxxxx cyklu,
- xxxxxxx xxxxx krve, xxx xxxx xxxxxxx xxxx krev xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx buněk, je-li xx xxxxx - xxxxxx udržování buněčné xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- modální xxxxx xxxxxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx působení na xxxxx
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x počtu xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x cytotoxicitě x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x dispozici,
- xxxxxxx xxxxx, koncentrace XX2, xx-xx xx xxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx teplota,
- xxxx xxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx kultivace, xx-xx xx xxxxx
- xxx x složení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx přípravy podložních xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx toxicity,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx toxicity, xx. xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx cyklu, x xxxxx buněk, xxxxxxxxx index,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xX x osmolalitě xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx,
- xxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx chromozómových aberací xxx každou xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ploidie,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
B.11. XXXXXXXXXX - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X KOSTNÍ XXXXX SAVCŮ IN XXXX
1. XXXXXX
Metoda je xxxxxxxxx XXXX XX 475, Mammalian Bone Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx analýzy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx vyvolané testovanou xxxxxx x buňkách xxxxxx dřeně xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx numerické xxxxxxx. Aberace xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chromatidové, ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx dochází xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy jsou xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x člověka x existují přesvědčivé xxxxxxx toho, že xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx jevy, jež xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx x tumorsupresorových xxxxxx, hrají xxxxx xxx rakovině x xxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxxxx tkání v xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx se xxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx rychle se xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx druhy x cílové tkáně xx x tomto xxxxx nepoužívají.
Tento xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x když xxx xxxxx xxx xxxx živočišnými druhy x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx in xxxx je xxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx předtím xxxxxxx testem in xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx látka xxxx její reaktivní xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatidami.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození chromozómu xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx aberace xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx)
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx nebo obou xxxxxxxxx xx předpokladu, xx vzniklá xxxxxx xx xxxxxxxxx chromatidy xx větší, xxx xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále pak x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx replikace XXX xxxxxxxxxx jádro xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.
Xxx: achromatická léze xxxxx než šířka xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Mitotický xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx populaci; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oproti normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) mimo xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x atd.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x fragmenty x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx způsobem xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx vhodnou xxxx xx působení xx xxxxxx. Před xxxxxxxxx xx na xx xxxxxx látkou zastavující xxxxxxxx (například kolchicinem xxxx Xxxxxxxxxx®). X xxxxx kostní xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Běžně xx xxxxxxxxx xxxxxxx, myši x čínští xxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx x jakýkoliv xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Hmotnostní xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx X, xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx mladí xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, jak x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po dobu xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava dávek
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxxx přímo xxxx xx před xxxxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx s xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx o kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx vivo xxx xxxxxxx, kdy xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Dávky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx možné podávat xxxxxxxx způsobem než xxxxxxxxxx látkou x xxxxxx odebírat v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx pozitivní kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Látka | XXX | EINECS |
ethyl xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
cyklofosfamid xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxxx intervalů xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací x o interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx nejvhodnější dobou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx použít i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx x době, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, existují xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx způsobů expozice xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx pohlavími xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx na jednom xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Tam, xxx humánní expozice xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jednorázově. Xxxxx se xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx aplikace xxxxx xxxxxxxx, například xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx nanejvýše několika xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx odůvodněné.
Vzorky xx xxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx podání xxxxx xxx. U xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (která xxxx xxxxxxx 12 - 18 xxxxx) xx podání xxxxx. Xxxxxxx xxxx potřebná xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxx xxxx xx kinetiku buněčného xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dobu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xx 24 hodinách xx xxxxxxx odběru. Xxxxx xx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxx, xx xxxxx provést xxxxx odběr xxxxxx 1,5xxxxxxxx xxxxx normálního xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx dávka Colcemidu® xxxx kolchicinu a xxxxxxxx xx x xxxx ve vhodném xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky. X xxxx xx xxxxx interval xxxxxx 3 - 5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4 - 5 xxxxx. X kostní xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxx x xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx provádět x téže xxxxxxxxxx xx xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x pokusného xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx tři xxxxx xxx, xxx pokrývaly xxxxxxx od maximální xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xx xxx třeba xxxxxx jenom xxxxxxxx xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx dávkách xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx představovat x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx případu. Nejvyšší xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx jako xxxxx, která xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx (xxxx. pokles xxxxxxxxxxx xxxxxx o xxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx test xxx xxxxx xxxxxxxxx 2 000 xx/xx hmotnosti x xxxxx xxxxx nebo xx dvou dávkách xxxxxxxx x jeden xxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x jestliže xx xx základě údajů x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx genotoxicita, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xx den xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx než 14 xxx. Podle očekávané xxxxxxx expozice xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Testovaná xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx buď xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxx přijatelné x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx překročit 2 xx/100x hmotnosti; vyšší xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx normálně xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx upravit xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx byl xx všech dávkových xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx se fixuje. Xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx na xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xx.
1.5.7 Analýza
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol stanoví xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx jedince.
X každého jedince xx analyzuje xxxxxxxxx 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx před mikroskopickou xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. Xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx spojeného xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x hodnocených xxxxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Údaje od xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx jedinec. U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx strukturálními chromozómovými xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx xx zaznamenají xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, jejich xxxxx x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x registrují xx, xxx xxxxxxx se xx xxxxxxx frekvence xxxxxxx nezahrnují. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx x xxx, že obě xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx možné xxxxx xx obě pohlaví xxx statistickou analýzu xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx několik xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx odběru vzorků. Xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx mitotické xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx buněk s xxxxxxxxxxxxxxxxxxx chromozómy xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx poskytuje xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx xxxxxxxxx výsledky, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i když xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na chromozómové xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx třeba vzít x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula,
- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,
- původ, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, xx xx xxxxx dostala xx xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxx xxxxx,
- případně xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx hmotnosti/den),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x odběru xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- látka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- kritéria, xxxxx xx studie hodnotí xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- celkový xxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx, jejich xxxxxx x směrodatná xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
- xxxxxxxxxx údaje x negativních kontrol xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných odchylek.
- údaje ze xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,
Xxxxxxx výsledků.
Závěry.
B.12. XXXXXXXXXX - XX XXXX XXXXXXXXXXXX TEST X XXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Mammalian Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Test (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxx xx vivo x savců slouží xx zjištění poškození, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. x xxxxxxxxx krve xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx cytogenetické poškození, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx fragmenty nebo xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx x xxxxxxxxxxxx kostní xxxxx xxxxxxx polychromatický xxxxxxxxx, jádro je x xxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx zbude x xxxxxxxxxx vzniklé mikrojádro. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxx jádro xxxxx. Nárůst xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx důkazem xxxxxxxxx chromozómů.
X xxxxx xxxxx xx xxxxxx dřeň xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxx xxxxx tvoří. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx krvi xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx bylo xxxxxxxxx, xx jeho slezina xxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx je xxxxx xxxxxxxxx druh xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx strukturální xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx rozlišovat xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx přítomnost xx xxxxxxxxxxxx kinetochoru (xxxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxx XXX x mikrojádru. Xxxxxxxx xxxxx xx stanovení xxxxxxxx nezralých (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) erytrocytů v xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x rámci xxxxxx xxxxx zralých xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx použít x případě, xx xx xxxxxxx testují xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Tento xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x savců xx xxxxxxx vhodný x xxxxxxxxx rizika xxxxxxxxxx, protože xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx metabolismu xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, i když xxx mohou xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx efektem xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx také xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx (kinetochor): xxxxxxx xxxxxxxxxx, se xxxxxxx xx xxxxx dělení xxxx vlákna xxxxxxxx xxxxxxxx umožňující xxxxxxxxxxxx xxxxx dceřiných xxxxxxxxxx x pólům dceřiných xxxxx.
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) vytvářená xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx reprezentovaná xxxxxxxxxxxx xx fragmenty xxxxxxxxxx xxxx celými chromozómy.
Xxxxxxxxxxxx erytrocyt: zralý xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x jenž xx xx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx ribozómy.
Xxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxxxx xxxxxxxxx, vývojové xxxxxxx, xxx jsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx lze odlišit xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované látce. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxxx xx ve xxxxxxx xxxx xx působení xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxx x připraví xx xxxxxxxxx, jež xx xxxxxx (1-7). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx se xx vhodné době xx působení látky x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx se xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, musí xxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mikrojader.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx používá xxxxxx xxxx, doporučují xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx; xxxx však xxx použit xxxx xxxxxx savčí druh. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx druh xx xxxxxxxxxxx, xx se x něj xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx nebo xx x xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečná xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny mladých xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx úvodu x části X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx jednoznačně xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, aby xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx v xxxxxx xxxxx x je-li xx xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx podávat xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx xx xxxxx, bylo na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je xxxxx zacházet se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxxxx kontrol xx xxxx být nalezena xxxxxxxxxx xx vivo xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení nad xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx preparátu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx testovanou xxxxx x vzorek xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
N-ethyl nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem nebo xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxxxxxxxx skupiny měly xx xxx xxxxxxxx xx všech časových xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje x frekvenci buněk x xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx variabilitě xxxx xxxxxxx. Aplikuje-li xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx jeden xxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxxxxx xxxxx první xxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx prokazující, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx působením látky, xxxxx pouze v xxxxx krátkodobých studií x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 xxxxx), xxx xxxxxxxx xxxxx leží x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
V každé xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Xxxxx x xxxx, kdy se xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx druhu a xxxxxxx stejných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, kde xxxxxxx xxxxxxxx chemikáliím může xxx závislá xx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxx, xxx xxxx xxxx dávek x 24hodinových xxxxxxxxxxx). Xxx použít delší xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx x daném xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxx; x případě xxxxxxxxxxx výsledku xxx xxxxxx, xx se xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx limitní xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx až xx xxxx odběru vzorků. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx dávku xxxxxxxxx látky, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx rozdělit, xxxxxxxxx xx dvě xxxxx xx xxx podané x xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx.
Test xx může xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
(a) Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Vzorky xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx ne xxxxxxx xxx po 48 xxxxxxxx od xxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx intervaly xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx vzorky xxxxxxxx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx krve xx xxxxxxxx minimálně xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx po 36 xxxxxxxx xx podání xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx nikoli déle xxx 72 xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx pozitivní odpověď, xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xx xxxxx xxxxxx dvakrát xxxx xxxxxxxx xx den (xxxx. xxx nebo xxxx xxxxx ve 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xx vzorky x xxxxxxx xxxxxx dřeně xxxxxx xxxx 18 x 24 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx a x xxxxxxx periferní xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (12).
Xx-xx xx xxxxxxxxxx, mohou xx mimoto použít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxx, xx třeba xx provádět v xxxx laboratoři za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x pokusného xxxxxx, xxxx xx použijí x hlavní studii (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xxx xxxxx tak, xxx pokrývaly xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx dávku. Xx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx vyšších xxxxxxx xx stejném xxxxxx podávání by xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx definována xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dřeni (xxxx. xxxxxx podílu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx dávce xxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xx základě xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx genotoxicita, xxxxxx xxx provedena xxxx studie xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx za den xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx době xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxx xxx zapotřebí xxxxxx x limitním xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Aplikace látky
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. V xxxxxxxxxxxx případech xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 ml/100 x hmotnosti; vyšší xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež normálně xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx upravit xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem byl xx xxxxx dávkových xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx / xxxx
Xxxxx kostní xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx tibie xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx způsobem xx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx metodami. Periferní xxxx se xxxxxxx x xxxxxx žíly xxxx jiné xxxxxx xxxx. Krevní xxxxx xx xxxxxxxx za xxxxxxxxx stavu xxxxxx (8) (9) (10), xxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro XXX (např. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx barviva (např. Xxxxxx). Xxx použít x další systémy - xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x jádrem (16) - xxxxx xxxx xxxxxx jsou v xxxxxxxxxx xxxxxxx používány xxx analýzu mikrojader.
1.5.7 Xxxxxxx
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). X tomuto xxxxx xx počítá x xxxxxxx xxxxxx xxxxx minimálně 200 xxxxxxxxxx a v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol) xx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxxxxxx 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx informace xxx xxxxxx tak, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx analýze xxxxxxxxx nemá xxx xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x celkového xxxxx xxxxxxxxxx menší xxx 20 % xxxxxxx x kontrole. Xxxxx xxxx zvířata exponována xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů nebo xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x minimálně 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jsou systémy xxxxxxxxxxx analýzy (xxxxxxx xxxxxx x průtoková xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx xxxxxxxxx), pokud xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Údaje z xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx xxxxx. U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx zaznamená xxxxx xxxxxxxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů. Xxxxx xxx test xxxxxxxx kontinuálně xx xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxx, je xxxxx xxxxx také xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (pokud byly xxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx o xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX
Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx počtu xxxxx x mikrojádry xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x mikrojádry xx skupině s xxxxxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (18) (19). Statistická xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Výsledky xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aparátu v xxxxxxxxxxxxxx testovaného zvířecího xxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx příslušného xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx erytrocytech.
Je xxxxx xxxxxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Ve zprávě x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby vehikula
- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx jedinců,
- xxxxx, chovné xxxxxxxx, xxxxxx apod.,
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Podmínky pokusu:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx určení xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- zdůvodnění volby xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, xx xx látka xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx cílové xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x potravině/pitné vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení nezralých xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- podíl xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx pro každého xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx,
- vztah xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy x xxxxxx,
- xxxxx ze souběžných x xxxxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,
- xxxxx xx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.13/14. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXXXX XXXXXX U XXXXXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací xx xxxxxxxxx k detekci xxxxxxxx mutací xxxxx Xxxxxxxxxx typhimurium (xxxxxxxxxx xx vztahu k xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx Escherichia xxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx tryptofan). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx detekovat genové xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bakteriálních xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx bakteriálního xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx spočívá x xxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx stavu x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx bakterie syntetizovat xxxxxxx základní xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx bakteriální xxxxx xx detekována xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx mateřský zkušební xxxx.
Genové mutace xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx řady genetických xxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx zvířat xxxx xxx xxxxxx nádorů. Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx mutací, xxxxxx citlivých sekvencí XXX v xxxxxxx xxxxxxx, zvýšené propustnosti xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx DNA xx xxxxxxxx takových xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xxx jsou xxxxxxxx x xxxxxx. Specifita xxxxxxxxxxx kmenů xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, jež xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx testy xxxxxxxxxx mutací xx x dispozici velmi xxxxxxxx databáze výsledků xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx testování xxxxxxxxxx x xxxxxxx fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx kmenů Salmonella xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxxx xxxx slouží ke xxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx), jež xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx aminokyseliny xxxxxx nezávislý.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx substituci xxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxx změnu bází x XXX. Při xxxxxxxxx xxxxx xxxx x takové xxxxx xxxxx xx místě xxxxxxx mutace xxxx xx jiném xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, xxx způsobují xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxx x XXX, čímž xx xxxx xxxxx xxxxx x XXX.
1.3 XXXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx savčích xxxxx xxxx x xxxxxx látek xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx DNA. Xxxxx in xxxxx xxxxxx xxxxxxxx exogenní xxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vitro ovšem xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx informace x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx potenci xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx používá xxxx xxxxxxx xxxxxxxx genotoxické xxxxxxxx x zvláště xxxxxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx. Pomocí xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx v xxxxx testu xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx ovšem x příklady mutagenních xxxxx, xxx se xxxxx xxxxxx neodhalí; xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx být specifická xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x biologické dostupnosti. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx reverzní xxxxxx zvyšují, xxxxx xxxx k xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx.
Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx třídy xxxxxxxxxx xxxxx, jakými jsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxx, x xxxxx xx předpokládá nebo xx, že xxxxxxxxxx xxxxxxxx replikační systém xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx inhibitory xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx); v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx testy na xxxxxx x savců.
Xxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx při xxxxx xxxxx pozitivní, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx, ovšem xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x existují xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx testem xxxxxxxx nejsou, xxxxxxx xxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx mechanismem, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx a xx nepřítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx miskové xxxxxx "xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx smísí x vrchním xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx s minimální xxxxxx půdou. Při xxxxxxxxxxxx metodě xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx s xxxxxxx agarem x xx xxxxx xx xxxxxx xx minimální xxxxxx xxxx. Při xxxx xxxxxxxx se xxx až tři xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kolonie xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Je xxxxxxx xxxxxxx postupů xxx xxxxxxxxx xxxxx. X nich xxxxxxxxxxx xxxx klasická xxxxxxx xxxxxx ["plate incorporation"] (1) (2) (3) (4), preinkubační metoda (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx popsány xxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx (12).
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx týkají xxxxxx xxxxxx plate xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx tyto xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou; xxxxx xx x xxxxxxxx třídy, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nitrosaminy x krátkým řetězcem, xxxxxxxxx xxxx, aldehydy, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx alkaloidy, alylové xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3). Xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xx xx třeba xxxxxxxx xxxx xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx detekci je xxxxx použít jiných xxxxx. Xxxx identifikovány xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx případy" (xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx): azobarviva x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. XXXXX METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Kultury x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx nepoužívají. Xxxxxxxx xx, xxx kultury xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx bakterií. Titr xx xx xxxxxxxx xxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x jednotlivých xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx miskách.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx teplota činí 37xX.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx bakteriálních xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. typhimurium (TA 1535; TA 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; XX98; x XX100); x nichž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxx laboratořemi. Xxxx čtyři xxxxx X. typhimurium xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx GC x xx známo, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx vyvolávající xxxxxxx xxxxx x hydraziny. Xxxx látky xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx E. xxxx XX2 xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx mají xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx místě xxx xxxx XX. Xxxxx je doporučená xxxxxxxxx kmenů xxxx:
- X. xxxxxxxxxxx XX1535 x
- X. xxxxxxxxxxx XX1537 xxxx XX97 xxxx XX97x x
- X. xxxxxxxxxxx XX98 x
- S. xxxxxxxxxxx XX100 x
- X. coli XX2 xxxX nebo X. coli XX2 xxxX (xXX101) nebo X. xxxxxxxxxxx XX102.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx být nejvhodnější xxxxxx XX102 nebo xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kmen E. xxxx (xxxx. E. xxxx XX2 nebo X. xxxx WP2 (xXX101)).
Xx xxxxx xxxxxx zavedených postupů xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx markeru a xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zásobní xxxxxxx je třeba xxxxxxxx závislost xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxx). Xxxxxxx xx xxxxx zkontrolovat i xxxxx xxxxxxxxxxx charakteristiky, x to: xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx X-xxxxxx xxxxxxxx xxx, kde xx přichází x xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx u xxxxx TA98, XX100 x TA97a xxxx XX97, XX2 xxxX (xXX101) x rezistence xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx x xxxxx XX 102); přítomnost xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxx xxxxxxx x uvrA xxxxxx x X. xxxx nebo uvrB xxxxxx u S. xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx záření) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx očekávaném podle xxxxxxxxxxxx kontrolních xxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx se vhodný xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx E a xxxxxxxx) x vrchní xxxx obsahující xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx
Bakterie xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx kofaktorem xxxxxxxxxxxxxx post-mitochondriální xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx je Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x koncentracích xxxx 5 a 30 % v/v xx směsi X9. Xxxxx x podmínky xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému xxxxx záviset xx xxxxx testované chemikálie. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být vhodné xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakci x několika xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx použít redukční xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace (6) (13).
1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / příprava
Xxxxx xxxxx xx xxxx působením na xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x případně xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx přidávat xxxxx nebo xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx delší xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (xxx 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Koncentrace
Xx xxxxxxxxx, která xx xxxxx vzít x xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x konečné směsi, xxxxx xx k xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxx xxxxxx stanovit xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vymizením xxxx xxxxxxxxx růstu xx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultur. Za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxxxxx x konečné xxxxx za skutečných xxxxxxxxx podmínek, xxxxxxxxxxx x pouhým okem.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx je x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx látek, jež x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx několik xxxxxxxxxxx xxxx xxx x konečné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Testované xxxxx, jež jsou xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx resp. 5 µx/xxxxx, xx xxxxxxx xx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Sraženina xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx intervalem (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx experimentu. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx závislost, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Testování xx koncentrací xxxxxxx xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µl/misku xxxxxxxx x úvahu, xxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nečistot.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx i xxxxxxxxx kmenově specifickou xxxxxxxxx a negativní (xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx prokazují xxxxxxxxxxx xxxxxx testu.
U xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx volí xxxxx použitého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Příklady xxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 |
Následující xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx kontrolou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Látka | XXX | XXXXXX |
Kongo xxxxxx | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx S9. Xxxxx xx 2-xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx X9 charakterizovat xxxx mutagenem, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx pro kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x testech xxx xxxxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX | |
Azid xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 x XX 100 |
2-xxxxxxxxxxxx | 607-57-8 | 210-138-5 | TA 98 |
9-aminoakridin | 90-45-9 | 201-995-6 | TA 1537, XX 97 x XX 97x |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, XX 97 x TA 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | XX 102 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 | XX xxxX x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, WP2uvrA a XX2xxxX (xXX101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX a WP2uvrA (xXX101) |
Furylfuramid (XX2) | 3688-53-7 | xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
X xxxxxxxxx kontrole xxx xxxxxx i jiné xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx použití xxxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, se kterými xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx při xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx ovlivnění testovanou xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Při xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4) bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se obvykle xxxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 ml sterilního xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) s 2,0 ml xxxxxxxx xxxxx společně x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx testovaná xxxxx / xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) a xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) obvykle po xxxx 20 min xxxx xxxx xxx 30 - 37 xX; xxxxx se xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x nalije xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx mísí 0,05 xxxx 0,1 ml xxxxxxxxx látky / xxxxxxxxxxx roztoku 0,1 xx bakterií x 0,5 xx xxxxx X9 xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx během xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxx xxxxxx dávku očkují xxx misky. Duplicitní xxxxxxxx xx přijatelné, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx náhodně ke xxxxxx xxxxx, nemusí xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 INKUBACE
Xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx při xxxxxxx 37 oC pod xxxx 48 - 72 hodin, xxxxx xx xxxxxxxxx revertantní xxxxxxx na xxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Rovněž xx uvede xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xxx x xxxxxxxxx kontroly (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, byla-li xxxxxxx), xxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx) xx uvedou xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x průměrný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx misku xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx se potvrzení xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xx xxxxx, je xxxxx to zdůvodnit. X xxxxxxxxxx experimentech xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby se xxxxxxxx xxxxxx posuzovaných xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx modifikovat, patří xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx působení ("plate xxxxxxxxxxxxx" xxxx xxxxxxxxxxx x tekutém prostředí) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx dávkově xxxxxxx xxxxxx ve sledovaném xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx při xxxxx xxxx více koncentracích x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx něj (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx biologická xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (24), statistická významnost xx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky bakteriálního xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx ukazují, xx xxxxx vyvolává genové xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx nebo posuzovaných xxxxxx x xxxxxx Xxxxxxxxxx typhimurium xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx daných xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xx známa.
Xxxxx:
- použité xxxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx kmene.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx misku (x xx xxxx μl) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-typ x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- známky toxicity,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxxxx miskách,
- xxxxxxxx xxxxx revertantních xxxxxxx xx jednu xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných odchylek,
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x pozitivních kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek.
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
X.15. XXXXXX XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae xxxxx xxx užity xxx xxxxxx produkce genových xxxxxx indukovaných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx a x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx forward xxxxxxx systémy x xxxxxxxxxxx kmenů, jako xx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx mutant (xxx-1, ade-2) xx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx ověřený xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx haploidního xxxxx XX 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) nonsense xxxxxxxx xxx 2-1, xxx 4-17, lys 1-1 x trp 5-48. Xxxxxx xxxx vratné xxxxxxxxx mutagenů xxxx xxxxxx bazí, které xxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxx místě, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutace. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 marker, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx a xxxxxx hom 3-10, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
U xxxxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx xx jediným xxxxxx xxxxxxxxxx kmenem X7, který je xxxxxxxxxxx xxx ilv 1-92.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx testovaných xxxxx a xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx před testováním xx použití xxxxxxxx xxxxxxxx. U organických xxxxx ve xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 objemová % v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx užívaným xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakce xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x doplněná xxxxxxxxx. Xxxxx jiných druhů, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Testovací xxxxx
Xxxxxxxxx kmen XX 158-14C x xxxxxxxxx kmen X7 xxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxxx genových xxxxxx. Xxxx xxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx kultivační xxxxx jsou xxxxxxx xxx určení xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a rozpouštědlem xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx mají být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx zvolených koncentrací. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají být xxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xx sedm xxx xxx 28 xx 30 oC xx xxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx má xxx x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx hodnot.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx nutno xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx x prototrofními xxxxxxx x x životnosti xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx markery xxxx xxx 3-10 x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx počet xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Ovlivnění xxxxx X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx x tekutém xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxx stacionární xxxx xxxxxxxx buňky. Základní xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx na rostoucích xxxxxxx: 1-5 x 107 xxxxx/xx xx xxxxxxxxx testované xxxxx xx dobu až 18 x. xxx 28 xx 30 xX za xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx v průběhu xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx ovlivnění xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x vyočkovány xx xxxxxx xxxxxxxxxx médium. Xx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx přežívající buňky x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx xxxxx negativní, má xxx xxxxxxxx druhý xxxxx s buňkami xx stacionární fázi. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x tabulkové xxxxx x zahrnují xxxxx xxxxxxx, počet xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x:
- použitých xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxx médií, teplota x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém,
- xxxxxxxxx vlastního xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx buněk x frekvenci mutací, xxxxxx dávky x xxxxxx, xxxxx je xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx rekombinace x Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae může xxx detekována xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx x jeho xxxxxxxxxxx) a xxxxxx xxxx. První případ xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx nazýván genová xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx tvorby xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií nebo xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx téhož xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx detekci xxxxxxxxx xxxxxx konverse xxxx X4 (heteroalelický x xxx 2 a xxx 5), X7 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 5), XX34 (heteroalelický x xxx 4) x JD1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x xxx 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x D5 xxxx X7 (který xxxxxx měří xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mutace x xxx 1-92). Oba xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx alely xxx 2.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, jako xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx aktivace
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx jak x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx postupů může xxx xxxxxx xxxxxx xxx metabolickou aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx D4, X5, X7 x XX1. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci mitotické xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx xxxx xxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx koncentrací. Xxxx xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xx životnost xxxxx. X toxických xxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx testovány až xx xxx rozpustnosti xxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxx mohou xxx xxxxxxxxx působení testované xxxxx xxx stacionární xxxx, nebo xxxxx xxxxx po xxxx xx 18 x. Xxxxxxx xxxxxxxxxx ovlivňované xxxx být mikroskopicky xxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xx čtyři až xxxx xxx při 28 - 30 xX. Misky xxxxxxx xxx xxxxxx červených x xxxxxxxx sektorů xxxxxxxxx mitotickým xxxxxxxxxxx xxxx xxx umístěny x xxxxxxxxxx (xxx 4 xX) xx xxxxx 1 - 2 dny xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx rekombinace
Xxxx být užity xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx normálních xxxxxx.
1.2.2.7 Počet replikací
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx koncentraci x xxxxx prototrofních xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx konverzí a xxx určení xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx recesivní xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx počet xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxx xxxxxxx obvykle jako xxxxxxxxxx test v xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx vystaveno xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx.
Xx skončení xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx x xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx pokus xxxxxxxxx, xx xxx proveden xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx potvrzen xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx počet xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, přežívajících xxxxx x frekvenci xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: buňky ve xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, metabolický xxxxxxxxx xxxxxx,
- podmínky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: hladina xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx ovlivnění, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx rekombinant, přežívajících xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vztah xxxxx x xxxxxx, pokud xx to xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- vyhodnocení xxxxxxxx.
X.17. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X SAVČÍCH BUŇKÁCH XX VITRO
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 476, Xx Xxxxx Mammalian Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Test xxxxxxxx xxxxxx in xxxxx xx xx xxxxxxxx xx zjišťování xxxxxxxx xxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx patří xxxx lymfomové buňky X5178X, linie XXX, XXX-XX52 a X79 xxxxx čínského xxxxxx x xxxxxx lymfoblastoidní xxxxx XX6 (1). X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx nejčastěji xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zjišťují xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x v xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Testy xxxxxx x TK, XXXX x XXXX se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Autosomální xxxxxxxxxx XX x XXXX může xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx xx xxxxxx XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
X xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx in xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx volbě xxxxx se xxxxx x úvahu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx mutací.
Testy xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxxx systém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedokáže xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx. Xx třeba vzniku xxxxxxxx podmínek, xx xxxxxxx xx výsledky xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx výsledkům, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx v důsledku xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx, xxxxx jsou x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx testem a xxxxxxxxxxxxxx. Tato korelace xxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx více xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx testem xxxxxxxx, protože xxxxxx xxxxxx nějakým xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx mechanismem xx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxx výchozího xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx enzymatické xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx substituci páru xxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxx xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx mutageny (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx): látky, xxx xxxxxxxxx přidání nebo xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxx x XXX.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx jsou z xxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx nezměněné xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx mutací: xxxxx xxxxxxxxxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxx v xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou) a xxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxxx s negativní xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx suspenzní xxxx: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x porovnání x negativní kontrolou.
Životnost (xxxxxxxxx): klonovací xxxxxxxx (xxxxxxx efficiency) xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x selekčních xxxxxxxxxx xx období xxxxxxx.
Xxxxxxx: xxxxxxxxx účinnost (cloning xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxx se xxxxxxx x porovnánís xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxx, xxxxxxxxxxx xx thymidinkinázu (XX) x důsledku xxxxxx XX+/- → XX-/-, xxxx rezistentní xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (TFT). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx vůči TFT xxxxxxx, což xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx XXX xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx mutovan xxxxx, zatímco xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx thymidinkinázu, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX selekčně rezistentní xxxx 6-xxxxxxxxxxx (TG) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx xx analog xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx analyzována v xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx buňkách, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx zvážit. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx podezření xx selekční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxx x bez xxxx. Xxxxxxx-xx xx tedy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx činidlem, xx xxxxx xxxxxxxx, xx je xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx vhodné (8).
Xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xx xxxxxxx dobu xxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx x metabolickou xxxxxxxx x bez xx a xxxxxxxxx xx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx výběrem xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (cloning xxxxxxxxxx) xxxx relativního xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx látky. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx dostatečnou xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx x xxx xxxxx, aby xxxxx xxxxx x co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx expresi xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx selekční činidlo xxx detekci mutovaných xxxxx x x xxxxx bez tohoto xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx spočítají. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x selekčním xxxxx x z xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xx xxxxxx xxxx řada xxxxxxxxx typů, včetně xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, V79 x TK6. X xxxxxxxxx typů používaných x tomto xxxxx xxxx xxx prokázaná xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, vysoká klonovací xxxxxxxx (cloning efficiency) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; infikované buňky xx xxxxxx nesmějí.
Test xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxx citlivost x xxxxxxxxxxx (power). Počet xxxxx, počet xxxxxx x koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx těmto xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyhovovat (14). Minimální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxxx expozici x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx dán xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx je, že xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. Doporučuje xx však použít xxxxxxx 106 xxxxx. Xxxx xx xxx x dispozici adekvátní xxxxxxxxxx xxxxx, kterými xx se prokázala xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testu.
1.4.1.2 Média x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx podmínky (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx xx xxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx buňky. Xxxxxxx xxxxxxxx je, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx růst xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, tak nemutovaných xxxxx xxxxxx kolonie.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxx xx namnoží xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx kultivačního xxxxx x inkubují xxx xxxxxxx 37 xX. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx působí x přítomnosti i x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx kofaktory xxxxxxxxxxxxxx mitochondriální frakce (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx hlodavců, ovlivněná xxxxxxx indukujícími enzymy xxxx je Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx činí xxxxxxx 1 - 10% x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxx xxxxxxx na xxx, xxxxxx typu xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X některých případech xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakci v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx stavu, xxxxx xx xxxx působením xx xxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx suspenze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x jejich xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
X zvoleného rozpouštědla xxxxx existovat xxxxxxxxx, xx by xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x aktivitu X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx známé xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx všude xxx, xxx je xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx zvažováno xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Voda xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.
1.4.2.2 Koncentrace
Mezi xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx buněk, jako xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx růst. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a rozpustnost x předběžných experimentech.
Použijí xx minimálně čtyři xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od maximální xx nízké nebo xxxxxx xxxxxxxx. To xxxxxxx xxxxxxx, že xx jednotlivé xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx hodnotami 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx koncentrace x xxxxxxxxxxxx, měla xx xxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx by maximální xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 mg/ml, 5 μl/ml x 1,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx xxxxxxxxxxx, při xxxxx se xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx a xx konci xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx přítomnosti xxxxx, S9, xxxx xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x prostým xxxx. Xxxxxxxxx nesmí xxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxx buněk.
1.4.2.3 Kontroly
V rámci xxxxxxx experimentu xx xxxxxx provést i xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, vehikulum) xxxxxxxx, x xx xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx bez xx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx mutagenního xxxxxx. Xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx nitrosomočovina | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
TK (xxxx a xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (xxxx a xxxxx xxxxxxx) | xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx S-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
benzo[a]pyren | 50-32-8 | 200-028-5 |
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (CAS 59-14-3, číslo XXXXXX 200-415-9), xxx xxxxxx x xxxx referenční xxxxx. Tam, xxx xx to xxxxx, xx vhodné použít xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx každý xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxx xx xxxxxxx rozpouštědlo xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx, zpracované xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx historické údaje xxxxxxxxxxx, xx zvolené xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Expozice xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx buňky xx působí xxxxxxxxxx xxxxxx jak x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Doba xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Xxx xxxxxx koncentraci xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jenom xxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx kultura, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx zajistil xxxxxxxxx xxxxx kultur x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx osm analyzovatelných xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po expozici xx xxxxxxx xxxxxx x analýzou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, TK xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx se xxxxxxx x xxxxx x x bez selekčního xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx doby xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx selekční xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx x xxxxx L5178Y TK+/- xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xx jedné x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kolonií. Xxxxx je látka x xxxxx testu xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxx a pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx provést i xx xxxxxxxx x XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Xxxx xxxx slouží xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x životnosti, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě pozitivní xxxxxx x testu X5178XX+/- xx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx přinejmenším x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx i xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx testu TK+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). mutanty, xxxxx utrpěly xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, mají xxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxx kolonie. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx od ztráty xxxxxx genu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tvorba malých xxxxxxx xx asociována x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Méně xxxxxxx postižené xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx velké xxxxxxx.
Xx xxxxx uvádět xxxx přežití (relativní xxxxxxxxx účinnost - xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx frekvence xx vyjadřuje jako xxxxx xxxxxxxxxx buněk xxxxxx xxxxxx přežívajících xxxxx.
Xxxxxxx xx individuální xxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; nakonec xx xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nepožaduje. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx testováním, nejlépe xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxx. X případech, xxx xx xxxxxxxxx negativních xxxxxxxx nepovažuje xx xxxxx, xx třeba xxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxx nejednoznačných nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx studie xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx podmínek. K xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx existuje xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx frekvence. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx systému xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx dat xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx mutace. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxx xxxxx - xxxxxx. Negativní výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx genové xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Ve zprávě x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxx buněčných xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kultury,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, koncentrace XX2,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx teplota,
- xxxx inkubace,
-doba xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx látky,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxx metabolické aktivace, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx,
- délka expresní xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx činidla,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, negativní nebo xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx zjišťování xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, u nichž xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx (včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "velkými" xxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx toxicity,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx o xX x osmolalitě xxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx L5178Y TK+/-,
- xxxxx dávka - xxxxxx, je-li to xxxxx,
- statistické analýzy, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných odchylek.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.18. XXXXXXXXX XXX REPARACE - XXXXXXXXXXX SYNTÉZA DNA - XXXXX XXXXX XX VITRO
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx neplánované xxxxxxx XXX (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx XXX obsahující xxxxxx poškození xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx fyzikálními xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3H-TdR) xx XXX savčích xxxxx, které xxxxxx x X xxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx 3X-XxX xx stanoven xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metodou (LSC) x exponovaných xxxxxxx. Xxxxxxxxx se primární xxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. UDS xxxx být také xxxxxxxxx v xxxxxxx xx xxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx referenční se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx médiem. Konečná xxxxxxxxxxx rozpouštědla x xxxxxxx xxxxx nepříznivě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk.
Xxxxxxxxx se pouze xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx hepatocytů, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných linií (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx experimentální xxx xx potřeba xxxxxxx xxxx buněčných kultur xxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxx xxxx, je-li xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX XXX.
1.2.2.2 Negativní x pozitivní xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly v xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx.
Xxxx pozitivní xxxxxxxx xxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx použít 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-DMBA) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Xxxx xxxxxxxxx kontrolu pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx autoradiografii, xxx x pro XXX xxx metabolické xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxx použít X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Xxxx xxx použito xxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxx.
Látky ve xxxx xxxxxx rozpustné xxxx xxx xxxxxxxxx x koncentracích až xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx určuje xxxxxx xx případu.
1.2.2.4 Buňky
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx růstové médium, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx kontrolovány xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx
1.2.3.1 Příprava xxxxxx
Stabilizovaná buněčná xxxxx se xxxxxxxxxx xx zásobní kultury (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx nádoby), inokuluje xx xx kultivačních xxxxx ve vhodné xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 oC.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx.
Kultury xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx založeny xxxxxx xxxxxx metody.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx hepatocyty xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x médiu obsahujícím 3X-XxX xx vhodnou xxxx. Xx ukončené xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, buňky promyty, xxxxxxxx x sušeny. Xxxxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx emulze (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx stripping film), xxxxxxxxxx, vyvolána, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Stabilizované xxxxxxx linie x xxxxxxxxx
Autoradiografické xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxx xxxx x xxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx 3X-XxX. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxx buněk. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX je xxxxx 3X-XxX přidat xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx několik xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxx interakcí mezi xxxxxxxxxx xxxxxx x 3X-XxX. X xxxxxxxx xxxx UDS x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx užívá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx hydroxyurey do xxxxxxxxxxxx xxxxx, což xxxxxxx xxxxxxxx semikonzervativní xxxxxxxxx XXX.
Xxxxxxxxx XXX pomocí XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx X-xxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx testované xxxxx, xxx bylo xxxxxxx xxx autoradiografii. Na xxxxx kultivace xx XXX xxxxxxxxxxx x xxxxx x stanoven xxxxxxx xxxxx XXX x xxxxx rozsah xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx metodách xxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx semikonzervativní xxxxxxxxx XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxx
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx kultuře xx xxxxx x S-fázi xxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx 50 buněk x xxxxxx experimentálním xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx náhodně vybraných xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 3X-XxX x cytoplazmě xx xxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxx jader v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.4.2 Vyhodnocení XXX
Xxx xxxxxxxxx XXX XXX xx použije xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx kontroly.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x nezávislých experimentech.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Vyhodnocení xxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx cytoplazmy a xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají odděleně.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx v xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx průměru, mediánu x xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxxx xxxx xxx/μx XXX. Průměrná xxxxxxx xxx/μx XXX xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx používají x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Údaje se xxxxxxxxxxx vhodnými statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx v době xxxxxxxxx kultury, počtu xxxxxxxxx kultur,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, koncentracích a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx aktivačním xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx do X-xxxx,
- postup xxxxxxxxx k xxxxxxxx XXX x k xxxxxxxxxxx celkového obsahu XXX xxx xxxxxx XXX,
- vztahu xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
B.19. SCE - XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX IN XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
XXX xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX mezi replikačními xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx zlom x opětovné xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx SCE xxxxxxxx diferenční xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Toho xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) xx xxxxxxxxxxxxx DNA na xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xx xxxx xxxx replikačních xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx BrdU. Xx xxxxx kultivace xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vřeténka (např. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx v x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Používají se xxxxxxxxxxxx (lidské lymfocyty) xxxx stabilizované xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x hlediska xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.
Používají xx vhodná kultivační xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (teplota, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2 x xxxxxxx).
Testovaná xxxxx se xxxxxxxxx xxxx suspenduje v xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo frekvenci XXX.
Buňky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x xxx přítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxx savčího metabolického xxxxxxxxxxx systému. Připouští xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) metabolickou aktivitou, xxxxxxxx úroveň a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx chemických xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxx kultur
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X každém xxxxxxxxxxx xxxx být zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx účinkem a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx použita xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako je xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx dávky. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx mít signifikantní xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx replikaci xxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx testovat až xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie se xxxxxxxxxx ze zásobní xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx kultivační xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx nádob ve xxxxxx hustotě a xxxxxxxx xxx 37 xX. Pro xxxxxxxxxxxx kultury se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x kultivační xxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xx připraví x xxxxxxxxxxxxxx xxxx běžnými xxxxxxx a inkubují xxx 37 oC.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur
Buňky xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx až dvě xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx být prodloužena xx xx dva xxxxxxx cykly, je-li xx xxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx metabolickou aktivitu, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxx xx testovaná xxxxx z xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x růstovém xxxxx x XxxX xxx xxxxxxxxxx cykly. Alternativně xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou x XxxX po xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx v nejcitlivějším xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx kultury s XxxX xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx xx světle xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zabránilo xxxxxxxx XXX, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx BrdU.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx samostatně.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx cytogenetickou technikou. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx XXX může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. fluorescenční xxxx Xxxxxx).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx analyzovaných buněk xx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx SCE x kontrole. Xxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx 25 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X lidských xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x 46 xxxxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx pouze xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx o ± 2 xxxxxxxxxx od xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx centromery. Výsledky xxxx být xxxxxxx x nezávislých experimentech.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX v každé xxxxxxxx x xxxxx XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx metafázi x xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx.
Údaje xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, koncentraci XX2, xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, kultivačních xxxxxxxx, xxxxx expozice, xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx i jeho xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách,
- xxxxx xxxxxx xxx každý experimentální xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- počtu analyzovaných xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxx počtu XXX/xxxxx x SCE/chromozóm (odděleně xxx xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx koncentrací,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX MUTACE VÁZANÉ XX XXXXXXX X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx pohlaví (XXXX) xx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxx, jak genových, xxx x xxxxxx xxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxx hmyzu. Xx xx xxxx xx xxxxxxx mutace xxxxxx xxx screening xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxx 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx x X-chromozómu xx fenotypicky projeví x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx. Když xx mutace xxxxxxx x hemizygotním stavu, xxx xx její xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. SRLS test xx xxxxxxx vzhledem x zvláštnímu xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxx
Používají xx xxxxx dobře xxxxxxxxxx xxxxxx linie x xxxxxx xxxxx Xxxxxx-5. Xxxxx xxx použity x jiné vhodné xxxxx popsané xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Testované xxxxx
Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx ve xxxx. Látky xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle (xxxx. xxxx etanolu x Tweenu-60 xxxx 80), xxxx aplikací xx xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Test xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx frekvence xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nutný xxxxx ovlivněných xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx testované xxxxx xx uskutečňuje per xx, xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxx x cukerném xxxxxxx. Xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx XxXx x xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx pokusu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx historické xxxxxxxxx xxxxx, xxxx třeba xxxxxxxxx do experimentu xxxxxxxx kontroly.
1.2.1.6 Dávkování
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx maximální tolerované xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx typu (xx stáří 3-5 xxx) jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx kříženi x xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-chromozómu). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx virginní xxxxxx xxxxx xxx xx xxx xxx, xxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx efekt xxxxxxxxxxxxxx x účinkem xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx spermatidy, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xx. jedna xxxxxx/xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx. X X2 xxxxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx zaznamenávána xxxxxxx samců divokého xxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxx vznikají X1 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (nejsou nalezeni xxxxx samci s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), dcery xxxxxx samic xx xxxxxxx genotypem xxxx xxxx testovány, xxx xx xxxxxxxx, zda xxxxxxxx xx opakuje x xxxxxxx generacích.
2. XXXXX
Xxxxxxx údaje xx xxxxxxxx do xxxxx tabulky. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, počet xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Zaznamenává se xxxxx xxxxxxxx různých xxxxxxxxx xxx každého xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx letálních mutací xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx má xxx xxxxx x úvahu x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxx, počtu xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx vzniklých X2 xxxxxx, xxxxx X2 xxxxxx xxx potomků, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro každé xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx ovlivněných xxxxxx,
- podmínkách xxxxx: xxxxxxxx popis xxxxxxxxxxx x schéma xxxxxx xxxxxx, výše xxxxx, xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x rozpouštědlem) x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.21. XXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX - XX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
Savčí xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx vitro xxxxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx xxxxxxxxx x maligní xxxxxxxxxxxx in xxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx X3X10X1/2, 3X3, XXX, Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxxx x změny xxxxxxx xxxxxxxxxx, tvorbu xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látkám. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Některé xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Cytotoxicita xxxx být zjištěna xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonie (xxxxxxx xxxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx cytotoxicity xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x prodloužení xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Buňky
Existuje xxxx buněčných linií x xxxxxxxxxxx použitelných x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx musí xxxxxxxx, xx xxxxx použité x testu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx příslušné xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx test xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x spolehlivost.
1.2.1.2 Médium
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx transformace.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx látky
Testované xxxxx se rozpouštějí xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx rychlost nebo xxxxxx transformace.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx a xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx její vlastnosti xxxx vhodné xxx xxxxxxxxx látky.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx také xxxxxxxxx xxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxx působící xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-acetylaminofluoren, 4-dimetylaminoazobenzen, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx nejméně xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxx efekt xxxxxxx xx koncentraci, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx přežívání buněk, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x negativní kontrole. Xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx za použití xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx se určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx použitém xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx (ev. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Buňky xxx xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx testované látce x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx vhodného metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx expozice xx x buněk xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxxxxx probíhá xxxx xx vhodných xxxxxxxx xxx transformaci. Xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx přežívajících xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, informace o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádobách, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, pozitivních a xxxxxxxxxxx kontrolách, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx to xxxxxx), xxxxxxxxxx výběru koncentrací,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
B.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX XXXX X XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobuje xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx zárodečné xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromozómů (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx samice xxxx xxx také xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx exponováni testované xxxxx a xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx mrtvých xxxxxxxxxx na samičku x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx vyjadřuje xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx nebo porovnáním xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx dominantní xxxxxxxx xx xxxxxx xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx celkové xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx založen xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx implantacím xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx implantací v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx způsobeno xxxxxxx xxxxx (t.j. xxxxxxxxxxxx x/xxxx spermatogonií).
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Testovanou xxxxx rozpustit xxxx xxxxxxxxxxx xx fyziologickém xxxxxxx. Látky xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s testovanou xxxxxx ani xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx látku xxxxxxxxx. Obvyklý xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxx i jiné xxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xx doporučují použít xxxxxxx nebo xxxx. Xxxxxx, pohlavně xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxxxxx xxxxx exponovaných xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky. Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx detekční xxxxxxxxxx x silou xxxxxxxxxxxxx testu. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx volí xxxxxx xxxxx samců, aby xx xxxxxxx 30 - 50 xxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní x negativní (x xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxxx xx laboratoř x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx použity. Xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx ve xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx prokázána xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 mg.kg-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx snížené xxxxxxxxx u exponovaných xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx
Netoxické xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx dávce 5 g.kg-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Existuje xxxxxxx xxxxxxx. Nejčastěji xx používá xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx však xxx použito xxxx xxxxxx.
Xxxxx samec xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx nebo xxxxx neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po aplikaci xxxxx. Samičky xxxx xxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx jednoho xxxxx xxxx, nebo xxxxx xx neprokáží xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx po expozici xx xxx schématem xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx všechna stadia xxxxxxxxxxx buněk sledovaných xx xxxxxxxx.
Samice xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxx je xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx implantací. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x určení xxxxx xxxxxxx tělísek.
2. ÚDAJE
Xxxxx x xxxxx xxxxx, xxxxx březích xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx páření xxxxxx xxxxxxxxxxxx každého xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx samostatně. Xxxxx samice musí xxx záznam o xxxxx páření, x xxxxx xxxxxx xxxxx, x xxxxx živých x xxxxxxx implantací.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx implantací xx samici x xxxxxxxxxx skupině x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině. Xxxxx xxxxxxx ku xxxxx implantacím x xxxxxxxxxx skupině xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx časná x xxxxxx letalita. Xxxx být zaznamenány x preimplantační ztráty. Xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx nebo jako xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxx, xxxxx, xxxx x xxxx zvířat, počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x exponovaných x kontrolních xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, dávkových xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx,
- doba xxxxxxxx,
- kritéria xxx počítání xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx efektů,
- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.23. ANALÝZA XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXX SPERMATOGONIÍCH
1. METODA
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx druhu: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx většinou xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Tato xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx numerických xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx nepoužívá. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx se analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx se obvykle xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx jiné xxxxxx xxxxx.
Xxx xx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx první mitózu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, dříve xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx buněčném xxxxxx. Xxxxx informace x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx získat analýzou xxxxxxxxxxx chromozómů, xxx xx zjišťují aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx, x když xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xx xxxx xx xxxxx xx zjišťování, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Mimoto xx xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX.
X xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx představují xxxxxx xxxxxx ovlivněných xxxxxxxx spermatogonií, kde xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx bariéře Xxxxxxxxx buněk x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx, že xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx reaktivní xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx látka xxx xxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx chromatidového typu: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx, xxxxx se projevuje xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx zlom x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx jako xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx dicentrický xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx hodnotit xxxxxxxx xxxxxxxxxx jedné xxxx xxxx chromatid xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx struktuře xxxxxxxxxx je xxxxx, xxx je šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x místě xxxxx xx dislokovaný (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx jedna xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómu xx xxxxxx x důsledku xxxxxx.
Gap: achromatická xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx haploidního xxxxx xxxxxxxxxx (n) jiný xxx diploidní xxxxx xxxx (3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx chromozómové struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx delece x xxxxxxxxx, x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx usmrtí. Xxxx xxxxxxxxx xx na xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx metafázi (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxx®). Xx zárodečných buněk xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxx, xxx xxxxx použít xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx druhu. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx dospělých jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxxxx x u xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Všeobecné podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Všeobecném xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jedinci se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a experimentální xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlivy xxxx, jak x xxx jsou klece xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x je-li xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky se xxxxx xxxxxxx přímo xxxx xx xxxx xxxxxxxxx ředí. je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Používá-li xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx pro xxxxx pohlaví xxxxxxx xxxxxxxx pozitivní a xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx zvířaty xx xxxxx skupinách stejně.
Xxxxxxxxx kontroly by xxxx xx spermatogoniích xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, kdy xxx xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx.
Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx tak, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx podávat xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx látka. Příklady xxxxx vhodných pro xxxxxxxxx kontrolu.
Xxxxx | XXX | EINECS |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 |
akrylamid xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Negativní xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx by xxx xxxxxxxx do všech xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx o frekvenci xxxxx x xxxxxxxxx x x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx prokazující, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává žádné xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx zvířat
X xxxxx zkušební x xxxxxxxxx skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xxxx dávkách. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx dávku, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx rozdělit, xx. na dvě xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx dávkování xxxxxx xxx vědecky xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxx kinetiku buněčného xxxxxx, xxxxxxx se xxxxx dřívější x xxxxx xxxxxxxx odběr xxxxxx 24 x 48 xxxxx po xxxxxxxx. X ostatních xxxxx (xx. xxxx xxxxx xxxxxxxx) se xxxxx xxxxxx provádí xx 24 hodinách xxxx po 1,5násobku xxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx účinku (6).
Xxxxx xxxx mohou xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx o xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, nebo xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxxx na X-xxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx odběru xxxxxx (1).
Xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx působit xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, usmrcují xx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx (1,5násobku xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx provádět x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx se xx xx xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xx zvířatům xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx intervalu xxxxxxxx vzorky. X xxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, x čínských xxxxxx zhruba 4-5 xxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx provádět x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx živočišného xxxxx, kmene x xxxxxxxxx režimu, jaké xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx zjištění xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx tři xxxxx tak, aby xxxxxxxxx rozmezí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx vzorků xx xxx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx takové xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx dávkách xx xxxxxxx režimu podávání xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
Látky, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xxxx xxx také xxxxxxxxxx jako xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x první x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx při xxxxx xxxxxxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx podaných x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx se na xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx strukturou neočekává xxxxxxxxxxxx, nemusí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx použití xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xx xxxx použít x xxxxxxxx testu xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx vpravuje xxx žaludeční sondou, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx přijatelné x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, aby objem xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx chromozómů
Okamžitě xx usmrcení xxxxxxx xx z xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx připraví buněčná xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x fixuje xx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx nakape xx xxxxxxxx sklo x xxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
X xxxxxxx jedince xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx). Tento xxxxx xx dá xxxxxx, xx-xx xxxxx pozorovaných xxxxxxx xxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx preparáty (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx postupy xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxx chromozómů, xxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou je xxxxxxx. U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi x počet aberací xx xxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx, ale xxxxxxx xx xx celkové xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx meiotické xxxxxxxx, x to xxx, xx se x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx buněk. Xx-xx xxxxxxxxxxx pouze xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx ovlivněné jednorázovou xxxxxx a x xxxxxx časovým intervalem xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx jediným určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx výše uvedená xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pozitivní, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Je třeba xxxxxxxxxx, jaká je xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx pro určitou xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x xxx xxxxxx,
-xxxxx, chovné xxxxxxxx, strava xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- údaje xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované látky,
- zdůvodnění xxxx xxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxx převod koncentrace xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (ppm) na xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx / den),
- podrobnosti o xxxxxxx potravy x xxxx,
- podrobné xxxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx přípravy xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- kritéria, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxx xxxxx aberací x xxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x aberacemi xx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných odchylek,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
- případně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.24. SPOT XXXX U XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Je xx in xxxx xxxx xx myších, x kterých jsou xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx chemickým xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xx, které xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx heterozygoti xxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxx dominantních xxxxx x genech xxxxxxxxxxxx xxxx vyjádřeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxx narozených xxxx. Počet potomků x těmito xxxxxxxx, xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx x xxxxxx frekvence xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x potomků x kontrol. Xxxx xxxx test detekuje xxxxxxxxx somatické xxxxxx x embryonálních xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Používají xx xxxxxxx připravené xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxxx xxxxx X (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, pink xxx, xxx x/xxx x; xxxxx, b/b; xxxxxx, xxxxx ear, x xx/x xx; xxxxxxx xxxxxxxx, x/x) xxxx xxxxxxx xxx x xxxxxx XX (xxxxxx, nonagouti, brachypody, xx a xx/xx x bp; leaden xxxxx, xx fz/ /xx fz; xxxxx xx/xx) xxxx x xxxxxx X57 BL (xxxxxxxxx, x/x).
Xxxxx xxx použita i xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xx budou xxxxxxx xxxxxxxxx potomci. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx XXXX (xxxxxxxxx, x/x; albino, x/x) x XXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx zvířat
Xxxxxxx xx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx dávku. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxx a x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx výsledky jsou xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx samic xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx. Nedávné xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx u testované xxxxx xxxxxx mutagenita xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx používá xxxxxx aplikace xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx xxxxx xxxx. Xx-xx xx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx způsob xxxxxxxx.
1.2.1.5 Dávkování
Používají xx xxxxxxx xxx xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.
1.2.2 Popis xxxxxxx
Zvířata jsou xxxxxxxx ovlivněna xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jednou 8., 9. nebo 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx den xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Tyto xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 a 9.25 xxx xx koncepci. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dnů.
Xxxxxxx
X mláďat xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx skvrn xxxx xxxxxx x čtvrtým xxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx tři xxxxx xxxxx:
(a) xxxx xxxxxx v xxxxxxx 5 mm xx střední ventrální xxxxx, x kterých xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);
(x) xxxxx xxxxxx xxxx agouti xx xxxxxxxxx x xxxxx mléčných xxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, axil, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx v důsledku xxxxxx xxxxxxxxxxxx (XXX);
(x) xxxxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x srsti xxxx xxxxxxxx somatických xxxxxx (RS).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxxx, XX, je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx mezi XXX a XX xx možné xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Zaznamenávají xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx potomků.
2. XXXXX
Získaná data xxxx uváděna jako xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a počet xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx skvrn xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutacemi. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx porovnávají xxxxxxxx metodami. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- kmeni xxxxxxxx xxx křížení,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx a x kontrolní xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx porodu x při xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx rozpouštědle,
- xx kterém xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- x způsobu podání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx s XXXX, XXX x RS x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx morfologických xxxxxxxxxxxx,
- vztahu dávka/odpověď x XX, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxx xx přenosné xxxxxxxxxxx x myší xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx potomků xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Nositelé xxxxxxxxxxx a XX-xxxxxx xxxxxxxx sníženou fertilitu, xxxxx xx xxxxxxx xxx výběr X1 xxxxxxxxx pro cytogenetickou xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X-autosom x c-t typ). Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x meiotických xxxxxxx samců ze xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, xxxx X1 samců xx xxxxxxx xxxxxxx X1 xxxxx. Xxxxxx XX xxxx cytogeneticky identifikovány xxxxxxxxxxx pouze 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx reagovat s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.1.1 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxx xx xxxxxxx orálně xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx způsoby xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx křížení x xxxxxxxxxxxx verifikaci xx xxxxxx provádí na xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx měla xxx xxxxx xxx xxx x xxxx by xxx relativně xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx zdravá, xxxxxxxx xxxxxxx zvířata.
1.2.1.3 Xxxxx zvířat
Počet xxxxxx nutně xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xx obvykle xxxxxxx xxxxxxxx samců F1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x X1 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx samice X1 xxxxxxxx potomků, xxx xx xxxxxxxx 300 xxxxx a 300 xxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx se použít xxxxxxxxx xxxxxxxx kontrol xxxxxxx x předchozích xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx pokusu x xxxx xxxxxxxxxx, mohou xxx xxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx se jedna xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, ale xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx možná xxxxxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxx dní x xxxxx xx 35 xxx.
Xxxxx xxxxxxxxx po expozici xx řízen xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx zárodečných xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx období xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozděleny do xxxxx. Xx porodu xx xxxxx zaznamenat xxxxx, xxxxxxxx vrhu x pohlaví xxxxxx. Xx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx až xx xxxx zařazení xx experimentu.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx jedna xx xxxx možných xxxxx. Xxxx fertility X1 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx nositelů xxxxxxxxxxx cytogenetickou analýzou xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx X1 xxxxxxxx xxx předchozího xxxxxx pomocí xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxx xxxxxxxxx
Snížená xxxxxxxxx xxxxxx x F1 xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x velikosti xxxx x/xxxx analýzou xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx určení xxxxxxxx x xxxxxxx fertility xxxx xxx stanovena xxx xxxxx kmen xxxxxxxxx xxxx.
Velikost xxxx: X1 xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xx stejného xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx denně xxxxxxxx 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx x pohlaví X2 xxxxxxx jsou zaznamenány xxx porodu, hned xxxx jsou xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx testovány X1 xxxxxx, F2 xxxxxxx malých vrhů xxxx uchováváni pro xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x jakéhokoliv xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx xxxxxx změnou xxx xxxxx xxxx xxxxxx potomky z 1 : 1 xx 1 : 2 samci xx. xxxxxx. X následném xxxxx xxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxx xxxxxxxx x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx X2 xxx dosahuje xxxx xxxxxxxxx xxxxxx určenou xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx druhé x xxxxx vrhy. X1 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx klasifikována xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx tří F2 xxxx, jsou dále xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx dělohy, xxxx xxxx xxxxx podrobena xxxxxxxxxxxxx analýze.
Analýzy xxxxxx dělohy: Redukce xxxxxxxxx vrhu x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx embryí, xxxxx xxxxxx počet xxxxxxx implantací xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx X1 samci xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ke 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx ranní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx 14. - 16. xxx a xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx.
(b) Xxxxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxx xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x testes. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxx I x primárních xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx s multivalentními xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx no xxxxxxxx, všichni F1 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vyšetřeno xxxxxxx 25 xxxxx x xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Analýza xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x samců x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx x X1 samic xxxxxxxxxxx XX. Xxxxxxxxxx neobvykle xxxxxxxx a/nebo krátkého xxxxxxxxxx x xxxxx x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx translokační xxxxxxxxx (c-t xxx). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx sterilitu xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx pruhováním mitotických xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx xx xxxxx 10 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx XX xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxxxx xxxxx xxxx prezentovány xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx interval xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx (sex xxxxx).
Pro xxxxx xxxxxxxxx X1 zvířat xx xxxxx průměrná xxxxxxxx vrhu xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx X1 nosičů xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx diakinéze-metafáze X xx xxxxx počet xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx počet xxxxx xxx každého xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Pro X1 xxxxxxxx xxxxxxx xx zaznamenává počet x xxxx připuštění. Xxxx se xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx o cytogenetické xxxxxxx.
U XO xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx trhu, xxx xxxxx F2 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
V xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx byly xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxxxxxx, xx třeba x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxx být xxxxxxx xxxxx o negativních x pozitivních xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx x:
- kmenu xxxx, xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx zvířat,
- počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- experimentálních podmínkách, xxxxxxxx popis ovlivňování xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x schéma xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x pohlaví mláďat xx samici, počet x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx popis xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx x obsahu dělohy,
- xxxxx cytogenetické xxxxxx a mikroskopické xxxxxxx, pokud xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx po 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvířata denně xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.
Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx x potravě, xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx po xxxxx xxxx pokusu stejnou xxxxxxx. Pokud xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx o nich xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxx data, xx xxxxx je xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xx počátku xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx 6 xxxxx, x xxxxxx případě starší xxx 8 xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se má xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x kmen.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x jednu kontrolní xxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní skupině xxxxxxx xxxxxx jako x pokusnými. Používá-li xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx skupině xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxx xxxxxxxx, a xx xx stejném xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx dávka. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx toxické xxxxxx, ale nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, mají být xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx.
Xx skupině x xxxxxx a xxxxxxx úrovní xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx sondou, xxxx xx se xxx xxx každý xxx xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx intervalech (týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx xx 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx možno xx dalšího testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx látka x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx x xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
X ideálním xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látka 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx bez aplikace, x posouzení xxxxxxxx x otravy nebo xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v kleci xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx vody xxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxx vodě) x hmotnost zvířat xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxxx kontrolu zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, která xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx utratit a xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx konci pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx druhu x xxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx další charakteristiky, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: lipidů, hormonů, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx analýzy mohou xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(d) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx toxicity.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx data, xx xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku xxxxxxx xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxx. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a tkáně xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x makroskopickým postižením, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, kůra xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (kůže), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, tlusté a xxxxx střevo, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (stehenní sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), páteřní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x bederní, x (xxxxx žlázy). Xxxxx x závorkách xx xxxxxxxx v xxxxxxx, xxxxx lze xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x příznaků xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx s cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx skupiny, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxx, x u xxxxxx kontrolní xxxxxxx.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx vyšetřit cílové xxxxxx x jiných xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx zvířat ve xxxxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx poskytuje obraz xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x xxxxxx skupin. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx skupiny, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxx a orgánech, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X ní musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx a procentuálně xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx vhodnou statistickou xxxxxxx. Je k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- experimentální xxxxxxxx - úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx dávek,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx konce xxxxxxxxx,
- xxxxx toxických xxxx jiných účinků,
- doba, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx další vývoj,
- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, xxxxxx na xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává denně xxxxxx xx 90 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx), x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Během období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během experimentu. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxx xxx vhodnější xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Všem xxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx využít.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx používá xxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx druhů xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxx se má x podáváním xxxxx xx xxxx xx 3 xx 6 xxxxxx x xx starším xxx 9 měsíců. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se má xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x plemeno.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx každou úroveň xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx (4 xxxxxx a 4 xxxxx). Xxxxx zvířat xx konci xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx účinků.
1.2.2.3 Dávkování
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tři xxxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx. Nejnižší úroveň xx neměla vyvolat xxxxx příznaky toxicity. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx hodnotu překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx jen toxický xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx než 3 xxxxxx dávek, mají xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Ve xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx docházet.
Xxxxxx-xx xx málo xxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xx třeba zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
Podává-li xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx mg.kg-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx k xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx; xxxxxxxx alternativu je xxxxx uvést. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx by xx xxx xxx každý xxx ve xxxxxxx xxxx, a xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx předběžný test xxxx dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx použít xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Provede-li 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx den (xxxx xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) žádné xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Podává-li xx xxxx toxická xxxxx x xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx aplikované xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx dobu objevení, xxxxxx a xxxxxx. Xx třeba zaznamenat xxxx xxxxxxx a xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
X ideálním případě xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx jiným xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx se xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 xxx x xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxx xx xx xxxxxxx) xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, změny xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx nervové soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity a xxxxxxx.
Xxxxxx potravy (x příjem xxxx xxx podávání testované xxxxx x xxxxx xxxx) a hmotnost xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x minimalizaci xxxxx zvířat pro xxxxxx. Xx skončení xxxxxx se pitvají xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx zvířat včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx konci studie xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx alespoň x nejvyšší xxxxx x u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Najdou-li xx xxxx změny, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.
(x) Na začátku xxxxx, a xxxxx xxx v měsíčních xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxx na xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, protrombinový xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Na xxxxxxx xxxxx, x xxxxx buď x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x dále xx konci pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx pozorováním způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat vápník, xxxxxx, chloridy, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx hladovění se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxx transferáza (dříve xxxxxxx transamináza séra) x aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Mezi další xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx účinků. Před xxxxxxx xxxxxx krve xx xxxxxxxxxx měli xxxxxxxx (xx xxxx xxx 24 hodin).
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx podkladě xxxxxxxxx nebo pozorované xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx těla, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx dutiny včetně xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, štítná xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx co nejdříve xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se předešlo xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření: xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, srdce, aorta, xxxxxx žlázy, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx a slepé xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, reprezentativní xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí mléčná xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) x (xxxxxxx xxxxx ve třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx). Tkáně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx s cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx nejvyšší dávka, x u zvířat xxxxxxxxx skupiny. Histopatologické xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx dávkových xxxxxx xx provedena xxxxxxxx, x xxxxxxx byla xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, nebo když xx xx indikováno xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X ní xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx, xxxx poškození x procentuálně xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, plemeno nebo xxxx, původ, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx podmínky,
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, pokud xx lze xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (zejména klinické xxxxxx),
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky x xxxxxx další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx aplikuje xxxxx na kůži xx 90 dní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx na xxxxxx pokusných zvířat. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx se však xxxxxxx xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo xxxxxxx xx xxxxxxx opakovat xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx se xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. abrazí). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxx xxxxxx při rozhodování x velikosti připravované xxxxxx kůže a x xxxxxxxxx krycího xxxxxx.
Xxx pokusech x tuhými xxxxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx zkoušenou xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx kontakt s xxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx zpravidla aplikují xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx denně 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xx možno použít xxxxxxx potkany, králíky xxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx se xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx každou xxxxxx xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový xxxxx zvířat x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx možno podávat xxxxx skupině (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 dnů nejvyšší xxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx hladiny xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx nebo - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované látky xx xx mělo xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou dobu. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxx stálá xxxxxxx dávky xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se vehikulum xxx usnadnění aplikace, xxxxxx se kontrolní xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx pokusným xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx skupina, které xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx.
Xxxxxxxx hladina xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx počtu. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední hladina xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 hladiny xxxxx, mají být xxxxxxxxx dávky xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxx skupině xx počet xxxxxxx xxx xxx nízký, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxx podráždění xxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx dávkové xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx kůže, xx dokonce xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxx x nižšími xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx xxxxx, která odpovídá xxxxx expozici člověka, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, není další xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, xx kterém xx xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 28 dnů xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxxxxxx reparace xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx činí nejméně 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx celou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % povrchu xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx pokrýt xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xx xxxxxxxx vrstvě.
Xxxxxxxxx látka xx xx expoziční dobu xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxx plochu xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx vhodným x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx otravy xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a trvání.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx změny xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx týdně. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chybného xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx studie xx všechna zvířata, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx x xxxxxx stresu xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx studie xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních skupin. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx čas či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx konci xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx glutamát-pyruvát xxxxxxxxxxxx xxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx spektra xxxxxx.
(x) Analýza moči xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxx, má xx xxxxxx xxxxxxxxx hematologických x xxxxxxxxxxxxx parametrů xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxxx přechovávat xx vhodném xxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, příštítná xxxxxxx, xxxx xx místě xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), plíce, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx (xx-xx přítomen), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x slepé xxxxxx, konečník, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), periferní xxxx, (xxx), (hrudní xxxx x xxxxxx xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, střed hrudní x xxxxxxx) a (xxxxx xxxxx). Tkáně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxx souvisejí s xxxxxxx orgánem.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(a) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx x xxxxx xx xxxxx provést x všech xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.
(x) Xx třeba vyšetřit xxxxxxx makroskopická postižení.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx potkanů, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x nízkou a xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx zjištěno xxxxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xx tkáních x orgánech, x xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- podmínky pokusu,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xx použije) a xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx bez xxxxxx, xxxxx ji lze xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledování,
- xxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, kdy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- hematologická vyšetření x jejich výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx případných xxxxxx moči),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.29. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX - INHALAČNÍ
(90xxxxx opakovaná xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx studované xxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx po 90 xxx. Použije-li xx xxx dosažení xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v atmosféře xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx pokusu se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, která během xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x krmení, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li vhodná xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx. Pracuje xx na mladých xxxxxxxx zvířatech x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný xxxx a kmen.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 samců). Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, je nutno xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před koncem xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx exponovat xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupinu) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx expozic xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx skupiny s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx (xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx s xxxxxxxxx - pokud xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx). X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx zvířaty x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx počtu. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li se xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx s xxxxxx x střední koncentrací x x xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx exponují po xxxx 6 hodin xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx studované xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx i xxxxxx xxx expozice.
1.2.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxx xx používá xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, aby xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx x rovnoměrné xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx ho xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx bránil xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx inhalační xxxxxxxx xxxxxxxxx látce byla xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx stability atmosféry x inhalačním xxxx xxxxx by x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx přesáhnout 5 % xxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxx inhalační xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, samotné hlavy xxxx individuální xxxxxxxxxx xxxxxxxx; první dva xxxxxxx expozice minimalizují xxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x zotavení x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x čas, xx xxxxxx xx objeví x xxxx odezní xxxxxxx účinky.
1.2.3. Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x týdnu, xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx bez xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx během experimentu xx xxx 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % a 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx možné (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Během xxxxxxxx xx nepodává xxxxxxx xxx voda.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x vhodnou xxxxxxxxxxx kontrolou koncentrace. Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx stejné. Xxxxxx xxxx zaručovat, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
x) Skutečná koncentrace xxxxxxxxx látky xx xxxx v xxxxxxx xxxx. Během jedné xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx hodnoty x xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx této úrovně xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx prakticky xxxxx. Xxx xxxxxx generátoru xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, aby byla xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx, xxx xx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx částic.
x) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
d) Během xxxxxxxx x po xx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx zaznamenávají; xxxxx xxxxx xx xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx x zaznamenávat xxxxxx xxxxxx, stupeň x xxxxxx. Pozorování x xxxxx zahrnuje xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx se zaznamenávají xxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx pravidelnou xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx nedocházelo xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chybného xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech zvířat, xxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx dávky a x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx pokusu xx má provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx zahrnovat stanovení xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx krve jako xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx pokusu xx má provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (trvání xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), alaninamino xxxxxxxxxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) a aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx potřebné xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx rozšíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pozorované xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx se xxxxxx xxxxxxxxx hematologických x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x břišní xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx ve vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx a tkáně xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, zvážit x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, tak aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - perfusní xxxxxx xx považuje xx vhodnou), xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, hypofýza, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx žlázy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx střevo, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx kost x xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx posuzují, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická vyšetření
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx respiračního systému x ostatních xxxxxx x xxxxx je xxxxx provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x zvířat kontrolní xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxxxx léze.
(c) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinách.
(x) Plíce xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx stavu xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx u xxxxxx xxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx provést xxxx na xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx postižení xx xxxxxxx s vysokou xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx satelitní skupiny, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx musí být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx x počet xxxxxx s xxxxxx, xxx léze x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, krmení,
- xxxxxxxx pokusu: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, klimatizačního systému, xxxxx likvidace xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x průměrnými xxxxxxxxx a charakteristikou xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
a) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx zařízením,
x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,
c) nominální xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přiváděné xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx vzduchu),
x) povaha xxxxxxxx, xxxxx bylo užito,
x) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
x) medián xxxxxxxxx xxxxxx (u xxxxxxxx),
- údaje o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a podle xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx možné ji xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, kdy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické nálezy,
- hematologická vyšetření x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, vhodnou xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx skupinu, xx xxxxx část xxxxxx xxxxxx. Během x xx expozici xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx jsou chována xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxx xxxxxx jsou xxxxxx, mladá zvířata xxxxxxx rozdělena do xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Testovací podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx je xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je možno xxxxxx x další xxxxx (xxxxxxxx nebo xxxx). Xx xxxxx xxxxxx zdravé x xxxxx jedince běžně xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Expozice xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxxx mláďat. Na xxxxxxx xxxxxx by xxxxx rozdíl xx xxxx zvířat xxxxx xxxx než ± 20 % od xxxxxxx. V případě, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx každou úroveň xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 samic x 20 samců), xxxxxx i xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx měly být xxxxxxxxx a xxxxxx xx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx dokončením xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vyšší počet xxxxxx.
X případě xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) je možné xxxxxx menší xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxx xxx 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xx třeba xxxxxx xxxxx xxx dávky x xxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx měla xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx nadměrné úmrtnosti. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx prokazatelné xxxxxxx xxxxxxxx. Střední xxxxx xx měly xxx voleny xx xxxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxxx a nízkými xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxx xxxx x úvahu xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Obvykle xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X případě, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx, aby x xx xxxx xxxxxxx stálý xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx je identická x každém xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Dva xxxxxx způsoby aplikace xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu xxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx člověka.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx technické problémy. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicita x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, odvozené x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, jimiž xxxx xxx exponován xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx proti xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx dostat testovanou xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx podanou x tobolce.
Ideálně xx se měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx vést x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx aplikace, x xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx přijatelné.
Inhalační xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx podání. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x specifických situacích.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx lidské xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx exponováno xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx pět dnů x xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), xxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx expozici x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx sedm dní x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s přibližně xxxxxx hodinou pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. X obou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxxxx a stálou xxxxxxxx xx x xxx, že x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx ústup xxxxxx denní expozice x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx studia x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Nicméně, xx třeba xxxx x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x krmení xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx exponují x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx byl zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxxxxx x expoziční xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx brání xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx prostřední. Komory xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx udržení xxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře xxxxx zvířat neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by xxxx být nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(b) xxxxxxxxxxx: během xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx xxxx než 15 % xxxxxxx xxxxxxx;
(x) teplota a xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx xx měla xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 oC x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Oba xxxxxxxxx xx měly xxx kontrolovány xxxxxxxx;
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové částice xx měly být x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx, a xxx xx gravimetricky xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx během xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx měla xxxxx xxxxxxx 12 xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Pozorování
Xxxxxxx klinické sledování xx mělo xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx ztráty xxxxxx xx studie, xxxx. xxxxx xxxx uložení xx lednice u xxxxxx, která xxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx nebo utracení xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx nebo moribundní. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x progrese xxxxx xxxxxxxxx účinků, x xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x důsledku nemocí, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx se klinické xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx změn x xxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx a xxxxxx toxických xxxxxxxx xxxxxx podezření na xxxxx.
Hmotnost xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx jednou xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx období xxxxx x aspoň xxxxxx xx čtyři xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x vody xxx, kde je xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, ledaže xx xxxxxxxxx xxxx xxxx změny tělesné xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx, xxxxxxxx destiček nebo xxxx ukazatele srážlivosti) xx měla xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx a xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x na xxxxx xx vzorcích xxxx shromážděných od xxxxx nehlodavců xxxx. xx 10 xxxxxxx xx pohlaví x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx od xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx před xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx naznačí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, měl xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx krvinek xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx ve xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxxx. Pokud tato xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx patologických xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx se x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx nižší.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Vzorky xxxx 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx a xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx zkoušky. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx skupiny xxxxx dávek a xxxxxxx:
- vzhled xxxx, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, ketolátky, okultní xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sedimentu (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx měření xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví v xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx tytéž xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx nehlodavců xx vedle xxxx xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx transaminázy2), gamma xxxxxxxx transpeptidázy, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. krevní xxxxxxx xx xxxxx,
- xxxxx na xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx v xxxx.
1) xxxx xxxxx jako sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxxxx aminotransferáza
1.2.3.5 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx provede x xxxxx xxxxxx xxxxxx těch, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx utracena x xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, které xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx provedeno porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxx x xxxxx xx měly xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx následujících xxxxxx x tkání:mozku3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, štítné xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx žláz, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, ilea, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, xxxxx3), akcesorních xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí xxxxxx xxxxx, kůže, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx s xxxxxx dření x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x očí. Xxxxxxxx plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx inhalační xxxxxx, xx být xxxxxxxx xxxx respirační xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx provedena xxxx xxxxxxxx vyšetření, informace xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx významné xxxxxxx.
3) xxxx orgány x 10 zvířat xx xxxxxxx x xx xxxxxxx x xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxxxx x dále xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxx
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx tumory x xxxx léze xxxxxxxxxxx xx x kterémkoli xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx doporučeny xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(a) mikroskopické xxxxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx:
1. x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx byla utracena xxxxx xxxxxx,
2. x všech xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupiny,
(x) xxxxxx xx tkáně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxx xxxx ve xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx,
(c) xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx zkrácení xxxxxxxx xxxxx života xxxxxx xxxx vyvolání xxxxxx, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx vyšetří popsaným xxxxxxxx,
(x) informace x xxxxxxxxx xxxx, xxxxx se normálně xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, ve xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxx, xx. historické kontrolní xxxxx, jsou nezbytné xxx správné posouzení xxxxxxxxxxx změn pozorovaných x xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx měly xxx sumarizovány xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx testu: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx používá. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx pro měření xxxxxxx, xxxxxxxx, a xxx, kde je xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x měly xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vzduchu)
(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx
(x) xxxxxxx velikosti částic (xx-xx xx xxxxxxxxxx)
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxx) a xxxxxxxxxxx
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx
- neúčinná (xxxxxxx) xxxxxx
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx do xxxxx
- popis xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx
- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx
- data x xxxxxxxx potravy x tělesné xxxxxxxxx
- oftalmologické nálezy
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx)
- xxxxxxx nálezy
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- interpretace xxxxxxxx.
B.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X NEHLODAVCI
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jedna dávka xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx dochází x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx před xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxxx i x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryo- x fetotoxicity.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Příprava
Xxxxx, xxxxxxx samice, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx samci x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Oplozené xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo umělou xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx podávána samicím xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx po xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx skeletu x xxxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxx možnosti zpomaleného xxxxx, xxxxxxxx osifikace x krvácení do xxxxxx.
1.2.2 Testovací podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx, myš, křeček x xxxxxx. Preferovanými xxxxx jsou xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xxx u něj xxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx jsou xxxxxxx jednotlivě.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 20 xxxxxxx potkanů, xxxx xxxx křečků xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Xx sledování xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx dostatečný xxxxx xxxx x xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Xx třeba xxxxxx aspoň xxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx skupinu. V xxxxxxx, xx je xxxxxxxxx látka xxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxx zahrnout xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx bylo xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx: xxxxx být xxxxxxxxxxx xxx mít xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx zvířaty v xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x testovací skupině x výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxxxx chemické xxxx xxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxx xx mírné snížení xxxx, xxx xx xx xxxx xxx 10 % úmrtí. Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxxxxxx účinky. Xxxxxxx xxxxx xx měly xxx xxxxxx xxx, xxx byly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxx x vysokou dávkou.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
X xxxxxxx, xx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx xxx dávce xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx teratogenicity, xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx úrovních xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxx xx xxx, kdy je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xx měla zahrnovat xxxxxx xxxxxx organogeneze. Xx toto xxxxxx xx xxxxx považovat 6. xx 15. xxx x xxxxxxx x xxxx, 6. xx 14. xxx x xxxxxx x 6. až 18. xxx u xxxxxxx. X xxxxxxx, že xx za nultý xxx považován xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxxx umělá xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x předchozím údajům xxxxx xxx. Xxxxx xxxx alternativy xxxxx xxxxxxxx xxxxx den xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Každý xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx sledování x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx ztrát xxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx orálně xxxxxx, xxxxx ve stejnou xxxx.
Xxxxxxxxxx samicím xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx denně xxxxx xxxxxxxxxxx období testu. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx váhu xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x dávka xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx toxicity xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Samice xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx porodu xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx je xxxxx pokračovat x xx ukončení xxxxxxxx xxxxx xx do xxxx přibližně xxxxx xxx před xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx porodu. Xxxxxxxxxx xxxxxx v kleci xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, očí x xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxx potravy x vážit zvířata.
1.2.3.1 Xxxxx
Xxxxx dojde x xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, je xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx vliv xx xxxxxx xxxxxxxx. Ihned xx xxxxx xx xxxxx odstranit dělohu x její xxxxx xxxxxxxx s ohledem xx úmrtí xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx počet živých xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx dobu xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. X potkanů x králíků xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx průměr. Xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx každý xxxxxxx. X xxxxxxx, xxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx kosterní xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxx třetiny xx xxxxxxxx xxxx x x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx abnormity xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx abnormit xxxxxxxxxx x xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat na xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx, která xxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx zárodků x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx měkkých xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx. Výsledky xx xxxxxxx vhodnou statistickou xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1. Zpráva x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xx xxxx pokud možno xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- dávky (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- projevy xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx,
- dávka xxx xxxxxx (xxxxx xx xxxx možno xxxxxxxx),
- dobu xxxxx xxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x údaje x xxxx (xxxxxx historických xxxxx),
- údaje x xxxxxxxxx (živé/mrtvé, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x měkkých tkání),
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, po xxxxx xxxx života xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx zvířata denně xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx projevů xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx podmínkách ustájení x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx skupin.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (hlodavce x xxxxxxxxxx). Používají xx xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx laboratorních xxxxxx. Xxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx odstavení xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % od xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x kmen x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxxxx xx xxxxx nejméně 100 xxxxxx (50 samic x 50 samců) xxx každou úroveň xxxxx x souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx xxxx xxx xxxxxxxxx x negravidní. Xx-xx xxxxxxxxx průběžné xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx třeba zvýšit x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx před xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx úroveň xx xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxxxxx toxicity, jako xx mírný pokles xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx života xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx by neměla xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx dávku/dávky xx xxxxx stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx vysokou x xxxxxx xxxxxx.
Volba xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x studie toxicity.
Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx podávána v xxxxx vodě xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x dispozici.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako jsou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx orální xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx xxxxx negativní kontrolní xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, dermální x inhalační. Xxxxx xxxxxxx podání závisí xx fyzikálních a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx studie
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx z xxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu nějaké xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx podanou x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx sedm dní x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx x vymizení xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x tudíž xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnocení. Nicméně, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx aspekty, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx považováno xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx přímo xx xxxx může být xxxxxxx xxxx simulace xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx kožního xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Protože xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx způsoby aplikace, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx platnou xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže zvíře xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení koncentrace xxxx hodin xxxxx xx pět xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx v xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx denně xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx x pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx boxu. X obou případech xxxx zvířata obvykle xxxxxxxxxx xxxxxx koncentracím xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx expozicí xx x tom, xx x první xx xxxxx 17 - 18 hodin xx ústup účinků xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším obdobím xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx určité technické xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a spolehlivé) xxxxxxxx aerosolu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx par x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jejichž xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx vzduchu xx hodinu, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku a xxxxxxxxxx distribuce expoziční xxxxxxxxx. Kontrolní x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx aby xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx všech xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx obvykle xxxxxxx mírný podtlak x tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecně xx x zájmu xxxxxxx stabilní atmosféry x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:
(x) Xxxxxx vzduchu: xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxx xx měla být xxxxxxx kontrolována xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx expozice xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % střední xxxxxxx.
(x) Xxxxxxx a xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx xx xxxx xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °C x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx xx voda xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průběžně.
(x) Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: měla by xxx stanovena distribuce xxxxxxxxx částic v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx částice xx měly být x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx testovací xxxxx. Xxxxxx atmosféry xxxxx xx odebírají x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měl být xxxxxxxxxxxxxxx xxx distribuci xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část aerosolu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx být prováděna xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx aerosolu, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx větší xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx použitého xxx xxxx. Xxxx xx xxx být xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx a 24 xxxxxxxx u xxxxxxx. Nicméně, pro xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx být 24 měsíců xxx xxxx x křečky x 30 měsíců xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx takové prodloužené xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx dávky xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx klesne xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, ve xxxxxx xx zřetelný xxxxxxxx xxxxxx odpovědi, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx to xxxxx xxxx k ukončení xxxxxx testu, pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx projevy, xxxxx xx xxxxxx problémy. Xxx bylo možno xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx použitelných xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x žádné xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x myší x křečků x x 24 xxxxxxxx x potkanů.
1.3 Popis xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Denní xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx a srsti, xxx a sliznic, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního a xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Pravidelná xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxxxxxxx, autolýzy tkání xxxx chyb x xxxxxxx. Moribundní xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x mortalita xx xxxx být xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx věnovat vývoji xxxxxx: doba objevení, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx hmatného xxxxxx xx zaznamenává.
Xx xxxxx provádět xxxxxx spotřeby xxxxxxx (x vody xxx, xxx je testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx váhy xxxxxxx nutnost jiné xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Tělesné xxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x aspoň xxxxxx xx xxxxx týdny xx xxxxx období.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stavu xxxxxx xxxxx studia, xx xxxxx vyšetřit diferenciální xxxxx bílých xxxxxxx.
Xx 12 xxxxxx, xx 18 xxxxxx x před xxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxx nátěr xx xxxxx xxxxxx. Diferenciál xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx a u xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx, xxxxxxx údaje xxxxxxx před xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x x skupiny s xxxxxx xxxxxxxx nižší, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx
Kompletní xxxxx xx xxxx xxx provedena x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, xxxxx zemřela xxxxx xxxxxx nebo xxxx utracena, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx tumory nebo xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx mohly xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx.
Následující xxxxxx a xxxxx xx měly být xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření: xxxxx (xxxxxx řezů xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xxxxx, xxxxxxx x plíce, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, pankreas, xxxxxx, děloha, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx žláza, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx úrovních (xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx) a xxx.
Naplnění plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx uchování xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx studiích xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx měl xxx xxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx a xxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Xxxxx histopatologie xx xxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x x všech xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x nevyšší xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxxxx viditelné xxxx x xxxx, které xxxx xxxxxxxxx jako xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx.
(c) Xx-xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupinou, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx provede x daném xxxxxx xx tkáni x x dalších xxxxxxxxx.
(x) Xx-xx přežití xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx u xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší dávkou.
(x) Je-li xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx během xxxxx, doba jejich xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx použity jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx, pokud xxxxx, obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,
- xxxxxxxx xxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, pokud xx používá. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x expozici: xx xxxxx tabulky včetně xxxxxxxxxx hodnot a xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx zahrnovat:
(x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x inhalačním xxxxxxxx,
(x) teplotu a xxxxxxx vzduchu,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx do inhalační xxxxxxxxx děleno xxxxxxx xxxxxxx),
(d) povahu xxxxxxxx, je-li xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx,
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx kde xx relevantní),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx tumorů podle xxxxxxx, xxxxx a xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx nebo xxx xxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxx,
- xxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx hematologické xxxxx a xxxxxxxx,
- nálezy xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.33. XXXXXXXXXXX XXXX CHRONICKÉ XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu chronické xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky x xxxxxxxxx druhu xxxxx xx xxxxxxxxxx expozici.
Xxx xxxxx xxxx xx xxxx karcinogenity xxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxxxxxxxx satelitní xxxxxxxx x kontrolní xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx tuto xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jak xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Zvířata x xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx toxicitu.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, vhodnou xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na skupinu, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx pozorována xx xxxxxx sledování xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x pokusných xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx zdravá xxxxxxx xxxxxxx rozdělí xx kontrolních x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx xx potkan. Na xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Expozice xx měla být xxxxxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx začátku studie xx neměl rozdíl xx váze xxxxxx xxxxx více xxx ± 20 % xx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx předchází xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, xx třeba xxxxxx xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) na každou xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx plánováno xxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx) pro xxxxxxxxx patologie xxxx, xxx xxxx tumory, xx každá měla xxxxxxxxx 20 zvířat xxx každé xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx test xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx růstem, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx nižší xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Střední xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx se měly xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx.
Expozice xx xxxxxxx obvykle xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, měla by xxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Kontroly
Souběžná xxxxxxxxx skupina xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx inhalační xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx hlavní xxxxx xxxxxxxx xxxx orální, xxxxxxxx a inhalační. Xxxxx způsobu podání xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx způsobu expozice x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Tam, kde xx testovaná látka xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx jedna z xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx člověk, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Ideálně xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx dávkování xxx xxx x xxxxx xxxx vést x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Dermální xxxxxx
Xxxxxxxx přímo xx xxxx může xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx u xxxxxxx x jako modelový xxxxxx vyvolání xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx studie xxxx technicky xxxxxxxxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx x specifických xxxxxxxxx.
Dlouhodobé xxxxxxxx xxxxxxx napodobují předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx pět xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), xxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně xx sedm xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx hodinou xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx stejnou xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx v xxx, že x xxxxx má xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx denní expozice x ještě xxxxxx xxxxxxx během xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx expozice xxxxxx xx cílech xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxx x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Například xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx prostředí xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x krmení xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) generace xxxxxxxx xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x expoziční komory xx měly xxx xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxx xx brání xxxxx xxxxxxxxx látky do xxxxxxxx prostředí. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(b) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx neměla xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) teplota x vlhkost: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X x vlhkost v xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx používána k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x atmosféře xxxxx x tekutých xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měly xxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx zvíře. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx reprezentativní pro xxxxxxxxxx částic, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx odpovídat celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i xxxx značná xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx velikosti xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, a poté xxxxx expozic xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx studie
Trvání xxxxx karcinogenity xxxxxxxx xxxxx xxxx normální xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx by xxx xxx xxxxxxx v 18 xxxxxxxx x xxxx a křečků x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx xxx některé kmeny xxxxxx x delší xxxxx xxxxxx xxxx. x nízkým spontánním xxxxxxxx tumorů, xxxx xxxxxxxx xx měla xxx 24 xxxxxx xxx xxxx x xxxxxx a 30 xxxxxx pro xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, když xxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxxx skupině xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx zvlášť. Xxx, xxx uhyne xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx zjevných xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx vést x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx ostatní xxxxxxx xxxxxxxxxx toxické projevy, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testu, nesmí xxx ztráty použitelných xxxxx (autolýzou, kanibalismem xxxx x důsledku xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx větší xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx nižší než 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x v 24 xxxxxxxx u xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxx pohlaví x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx v xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. U xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx utracení xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx patologie, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, od xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx.
U xxxxxx exponované satelitní xxxxxxx (skupin) xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx klinické vyšetření.
Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx xx nutná, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chyb x xxxxxxx. Moribundní xxxxxxx xx měla být xxxxxxxx x pitvána.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xx zaznamenávají x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx viditelného xx hmatného xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx by xxxxxxxxx xxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx jiné xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x všech zvířat xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx jednou xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx bílých krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx být xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech, x xx xxxxx xx vzorcích xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx xx xxxxx, xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx od xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx zdravotním xxxxx xxxxxx během xxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Diferenciál xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx nebo xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, než xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx moči
Xxxxxx xxxx od 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx možno xx xxxxxxxx zvířat x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xxxx na xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx x pohlaví:
- xxxxxx xxxx, objem x hustota x xxxxxxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- mikroskopické vyšetření xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Biochemické xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech x xx xxxxx jsou xxxxxxxx krevní xxxxxx xxx biochemická xxxxxx xx všech nehlodavců x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx pro tytéž xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Xx nehlodavců xx xxxxx toho xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx xx připravena xxxxxx a jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxx xx funkci xxxxx (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita glutamát xxxxxxx transaminázy1), glutamát xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), gamma xxxxxxxx transpeptidázy, ornithin xxxxxxxxxxxxx,
- metabolismus xxxxx, xxxx. krevní xxxxxxx na lačno,
- xxxxx xx xxxxxx ledvin, např. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx aminotransferáza
2) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxxxxxx
Kompletní pitva xx provede x xxxxx zvířat včetně xxxx, která zemřela xxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx xxxxxxxxx xx odeberou xxxxxx krve xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx viditelné léze, xxxxxx xxxx léze, xxxx xxxx, xxxxx xx mohly xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.
Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx týká následujících xxxxxx a xxxxx: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx mozkového, xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, aorty, xxxxxxxx xxxx, jater3), sleziny, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), jícnu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, xxxx, slepého xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, močového xxxxxxx, lymfatických uzlin, xxxxxxxx, xxxxx3), akcesorních xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, kůže, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x bederní), xxxxxx x kostní xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx x močového xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx konzervaci xxxxxx tkání; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx studován xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Byla-li xxxxxxxxx xxxx klinická xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx by xxxx být k xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx významné xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx na xxxxxxx x xx skupinu xxxxxxxx mají xxx xxxxxxx.
1.3.2.5 Histopatologie
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud se x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nevyšší xxxxx xxxxxx patologické xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx histologicky xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x ze všech xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx karcinogenitě xxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
(x) xxxxx histopatologie xx xxxxxxx v xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx;
(b) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, xxxxx xxxx podezřelé xxxx xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx;
(c) je-li xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxxx;
(x) xx-xx xxxxxxx xx skupině s xxxxxxx dávkou podstatně xxxxx než x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx zkoumána x skupina x xxxxxxxxx xxxxx dávkou;
(x) xx-xx xx xxxxxxx s vysokou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxx dávkovou xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxx ve xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx zvířat vykazujících xxxxxx zjištěné během xxxxx, dobu xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxx utracení. Xxxxxxxx xx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx statistické xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,
- podmínky xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx zvířat v xxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx žádoucí, stability xxxxxxxxxxx nebo velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) by xxxx xxxxxxxxx:
(a) rychlost xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx zařízení,
(b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx aparatury xxxxxx objemem xxxxxxx),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx použito,
(x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx zóně,
(f) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xxxxxxxxxx),
- dávkové úrovně (xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxx incidence xxxxxx podle xxxxxxx, xxxxx x typu xxxxxx,
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx zda zvířata xxxxxxx xx do xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx účinků podle xxxxxxx x xxxxx ,
- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické nálezy,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,
- testy klinické xxxxxxxxx a všechny xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx moči),
- xxxxxx patologicko-anatomické,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.34. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx samic x xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Samci dostávají xxxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxx a xxxxxxx x průběhu xxxxxxx úplného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x myší x 70 xxx x xxxxxxx), aby xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx xxxxx xx spermatogenezu.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxx připuštěna. V xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podává xxxxxxxx obou xxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x kojení pouze xxxxxxx.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx podmínkách xxxxxxxx x krmení, x jakých xxxxx xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x potravě xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx dostávají stejným xxxxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxx. Pokud xx používá x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditivum, xxxx být x xxxx xxxxx, že xxxxxx toxické účinky. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx v xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx být xxxx charakterizována xx xx druhu, kmene, xxxxxxx x váhy x/xxxx xxxx. Plodnost xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx skupinách, xxxxxxxxxx x kontrolní, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Cílem xx xxxxxx dostatečný počet xxxxxxxxxxx a potomstva, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x X xxxxxxxx, kojení, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx a potravu xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Před porodem xx těhotné xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx materiál xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Pokud se xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dostávají xxxxxxxxx x xxxxxxxxx použitém xxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx potravy, xx třeba uvážit xxxxxxx další kontrolní xxxxxxx, xxxxxxxxx co xx výživy.
Xxxxxxxxx xxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx má x xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx toxicitu, xxx xxxxx uhynutí v xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx sondou xxxx v xxxxxxxxx xx dávka stanoví xxxxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx podle změny xxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx základě xxxxxxx hmotnosti v 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx test
X xxxxxxx látek x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx ani xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx toxickým xxxxxxx na reprodukci, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx x matek xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, není xxxxx provádět xxxxxx xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx samcům rodičovské xxxxxxxx (X) začne xx xxxx pěti xx xxxxxx týdnů, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxx. X xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx deset xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx připouštění, nebo xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxx xxx použiti xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx dva xxxxx xxxx obdobím xxxxxxxxxxx. Denní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx týdny xxxxxx připouštění, x xxxx gravidity xx xx xxxxxxxxx X1 xxxxxxxx. Je přípustná xxxxx dávkovacího plánu xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. o xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx bioakumulaci.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx samicím).
X případě 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x týmž samcem xx xxxxxxxx kleci xx xxxxxxxxxx anebo xx dobu 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx vyšetřeny xx přítomnost xxxxxxxx xxxx vaginální zátky. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx definován xxxx xxx xxxxxx vaginální xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx, u xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx, xx xxxxx vyšetřit x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx je možné xxx poskytnutím xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx pohlaví xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cyklu a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx okamžiku xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Pokud xx xxxxxxxx xxxx standardizuje, xx třeba dodržet xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx po xxxxxx xx xxxxxxxx všech xxxx upraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jedinců xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 samců x 3 xxxxxx. Xxxx menší xxx 8 nelze xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx být pozorováno xxxxxxx jednou za xxx. Xxxxxxxx změny xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xx zaznamenávají. Xxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Během xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx potravy xxxxx. Xx xxxxxx x x průběhu laktace xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (x xxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x pitné xxxx) xx stejný xxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x pak xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Doba gestace xx počítá od xxx 0 těhotenství. Xxxxx xxx se xx xxxxxxxx xx xxxxxx vyšetří x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx hrubých xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx utracená xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx vyšetření xx xxxxx defekty. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx se xxxxx xxxx po xxxxxx, xx 4. x 7. dnu a xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx individuálně. Xxxxxxxx xx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx abnormality x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Patologie
1.3.5.1 Pitva
Xx utracení xxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx P xxxxxxxxxxxxx vyšetří na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx reprodukčního systému. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Histopatologická vyšetření
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx P xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X případě, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx mnohadávkových xxxxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx, xxxxx jevily xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx x x X zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. V xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx makroskopicky postižené. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, reprodukční orgány xxxxxx podezřelých x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Data xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, kde je xxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, počet těhotných xxxxx, xxx změn x procento xxxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx obecně přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxxxxxx
Zpráva o xxxxxxxxxxx xx měla xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- údaje x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx na dávce x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx plodností, gestace x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí v xxxxxxx studie nebo xxx zvířata xxxxxxx xx ukončení pokusu,
- xxxxxxx uvádějící xxxxxxxx každého vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx potomků,
- xxxxxxx x xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, potomstvo a xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx hmotnost xxxxxx X generace,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.35. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - DVOUGENERAČNÍ XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx x odstupňovaných xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx dostávají xxxxxxxxxx látku x xxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx x 70 xxx u xxxxxxx), xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx spermatogenezu.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx po xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx testovací xxxxx xx xxxxxx.
Xxxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx zvířatům xxxx xxxxxxx a xxxxx, v xxxx xxxxxxxxx x kojení, xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx látka xxxxxxxx xxxxxxxx filiální xxxxxxxx F1 v xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx a xx xx xxxx odstavení X2 xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx aplikaci je xxxxx xxxxxx modifikovat.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (P) xxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x těch xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx nebo v xxxxx vodě. Jiné xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx. Všechna xxxxxxx látku xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, musí být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Používají xx xxxxxx X xxxxxxx, xx té xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Nepoužívá se xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx xxxx charakterizována xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx xxxx věku. Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx v obou xxxxxxxxx, exponované a xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx zvířat, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x přibližně stejným xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx získat xxxxxxxxxx xxxxx těhotenství a xxxxxxxxx, a xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnocení xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, průběh xxxxxxxxx x mateřské xxxxxxx, xxxxxx, růst x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxxx jejich potomstva xxxxxxxx X2 až xx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Vodu x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx těhotné xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx klecí a xx jim xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx alespoň xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx látka snižuje xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, spárované xx xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má x ideálním xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky x její xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x nikoli mortalitu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx na základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx týden podle xxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx určeny xx xxxxxxx xxxxxxx hmotnosti x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Limitní xxxx
V xxxxxxx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx, pokud xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx dávkových úrovních. Xxxxx předběžná studie xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx jasnou xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx pro xxxx). Xxxxx se buď xxxxxx x xxxxxxx xx konci období xxxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxx x jsou použiti xxx případnou xxxxxxxx xxxxxxx xxxx a xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxxx xx pětidenní xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx celé tři xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx gravidity xx do odstavení X1 xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx dávkovacího xxxxx podle xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. x bioakumulaci.
Aplikace xxxxxxxx xxxxxxxx F1 xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx ke xxxxx xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x týmž xxxxxx xx společné xxxxx do otěhotnění xxxxx po xxxx 3 týdnů. Xxxxx xxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx xx definován xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx F1 xx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx x xxxx x 13 xxxxx x xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx generace X1 xx xxxxxxx xxxxxxx páry x xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxx, x kterých xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx páru. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx další xxxxxxxxxxxx x oplodnění x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx estrálního xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx pro vyšetření xxxxxxxxx xx ponechána xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx standardizuje, xx xxxxx dodržet následující xxxxxx: mezi 1. x 4. dnem xx xxxxxx xx xxxxxxxx všech vrhů xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx xx dosáhlo xxxxx 4 samců a 4 xxxxx xx xxx; pokud xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx počty, např. 5 samců a 3 xxxxxx. Vrhy xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx X2 xx xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx mortality, xx zaznamenávají. Xxxxxx xxxxxxx se měří xxxxx xxx před, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx potravy denně. Xx xxxxxx x x průběhu laktace xx měří xxxxxx xxxxxxx xx stejný xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X a X1 xxxxxxx xx xxxx xxxxx den xxxxxxxx x xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx dne 0 těhotenství. Každý xxx xx co xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a stanoví xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x přítomnost xxxxxxx xxxxxxxx.
Mrtvá xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx čtvrtém xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx zváží ráno xx porodu, xx 4. a 7. xxx a xxxxx xxxxx týden xx xxxxxxxx studie, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx generací X x F1 xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx reprodukci. Xxxxxxx xxxxxxxx F1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X2 xx xxxxxx xx odstavení.
Xx xxxxxxxx nebo úmrtí xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx P x X1 makroskopicky xxxxxxx xx strukturní xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx umírající xx xxxxxxx xx defekty.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxxxx, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx kanálky, koagulační xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X a X1 xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx orgány nebyly xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx X a X1 xxxxxx xxxxxxxxx skupiny x skupiny xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, která xxxx vybrána pro xxxxxxxxxxx, x xxxx x zvířat, xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx. Orgány, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx zvířat, xx vyšetří x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx již xxxx xxxxxxx, reprodukční xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx mají xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, počet těhotných xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx zpracovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Může xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx následující xxxxx:
- druh/kmen použitých xxxxxx,
- údaje x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx plodnosti, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- dobu uhynutí x průběhu studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx,
- tabulka xxxxxxxxx hmotnost x xxxxxxx vrhu, průměrnou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x individuální xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx růst,
- xxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxx hmotnost xxxxxx X a F1 xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx údajů, xxxxx xx možné,
- diskuse výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.36. TOXIKOKINETIKA
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx vhodnou cestou. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx studie xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx stanovené xxxx, jedné xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxx" xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx značení, xxxxxx se xxx, xxx xxxxxxxx co xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxx xxxxx zvířata xxxx xxxxxxxxxxxxxx na laboratorní xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx pěti xxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx xxxxxx. Pro xxxxxx speciálních xxxxxx xx může použít xxxxx xxxxxxx, pregnantních xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx studie xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druzích. Xxxx by xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx hmotnosti xxxxx než ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Pro xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 4 xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx testování xxxx xxxxxx přednost určitému xxxxxxx, ale xx xxxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxx potřeba xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx pohlaví, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx druhů xxxxxx (xxxxxx než xxxxxxxx) xx možné xxxxxx menší xxxxx xxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx distribuce, pak xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx třeba brát x xxxxx jak xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx počet časových xxxx, v xxxxx xxxx testování prováděno.
Xx-xx xxxxxxxx metabolismus, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx úměrná xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxx větší počet xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx skupiny xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x počtem časových xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxx xx xxxxxxx nesmí xxx xxxx než 2 xxxxxxx. Velikost xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx dostatečná xx xx, aby xxx xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx poskytla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
V případě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx xx xxx xxxxx dávka xxxxx, xx které xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx dávka, po xxxxx mohou být xxxxxxxx změny x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx podání xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxx podmínek xxxx být nezbytné x podávání vysoké xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx prováděny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x je-li to xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx jsou používány x xxxxxxxxx toxikologických xxxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx sondou nebo x xxxxxxx, aplikována xx xxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat. Intravenózní xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx užitečné xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx. Navíc xxxxxx po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx důležité xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxx by xx xxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxxxxxx vehikula x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx, je-li xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx sondou xxxx v potravě, x potřebě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, zvláště xx-xx testovaná látka xxxxxxxx x potravě.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx sledována denně x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxx počátku, xxxxxxxxx a xxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Xxxxxxxx
Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxx různé xxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny1), a xx xxxx.:
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx např. x xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx vzduchu a xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx biologické xxxxxxxx (xxxx. studie akutní xxxxxxxx) mezi xxxxxxxxxx x kontrolní a xxxxxxxx referenční xxxxxxxx,
- porovnání množství xxxxx resp. xxxxxx xxxxxxxxxx vylučovaných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx a xx. jejích xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxx x daty xxxxxxxxx x referenční xxxxxxx.
1) X této xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx rozumí xx, xx které xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
V xxxxxxxx xxxx jsou dostupné 2 xxxxxxxx, x xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx schématu mohou xxx použity xxxxx xx xxx:
- xxx xxxxxxx celkotělové xxxxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx kvalitativní xxxxxxxxx;
- kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx ze zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Vylučování
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx, stolice, xxxxxxxxxxx vzduch, x xxxxxxxx xxxxxxxxx žluč. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. jejích xxxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx podání xxxxx, a to xxx xx vyloučení 95 % x xxxxxxxx množství xxxx xxxxxxx 7 dnů xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx potřebné xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
K xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx technikami. Xxxx xx xxx objasněna xxxxxxxxx metabolitů x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxx odpovědět xx otázky x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx získání xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx studií.
Xxxxx informace o xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx studií např. xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx enzymy xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, sledováním xxxxxxx xxxxxxxxxxx neproteinových sloučenin xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx a nebo xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx prováděné xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx doplněných xxxxxxxxx znázorněním.
Pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx uvedou xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx variability xx xxxxxx x xxxx, xxxxx, tkáni x orgánům (xxxxx xx xx xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metabolitů x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx studované xxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxx typu prováděné xxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx druh, kmen, xxxxx, xxxxxxx podmínky, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, jestliže xxx použit,
- xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx(x) xxxxxx x xxxxxxx použitá vehikula,
- toxické a x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xx. jejích xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- tabulky xxxxxxxx rozdělené podle xxxxxxx, dávky, xxxxxx, xxxx, tkání x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx,
- xxxxxx užité xxx xxxxxxxxxxxxxx x identifikaci xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx týkající xx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX - XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx důležité xxxx x úvahu xxxxxxxxx xxxxxx skupiny látek xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx zpožděné projevy xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx testovány xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nález x in vitro xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx thiofosforečných, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx látky, xxxxx xxxxx xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxx.
Pozdní xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx projevující xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx a xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x xxxx xxxxxxxx x stárnutím xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx target xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Referenční xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, že x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx testovaných xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Příkladem xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pozdním neurotoxickým xxxxxxx je xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, EINECS 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx.: tri-o-kresylfosfát (XXXX).
1.4 Xxxxxxx testovací metody
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx cholinergními účinky. Xxxxxxx se xx xxxx 21 dnů xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx inhibice XXX, se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z každé xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxx látky. 21 xxx xx xxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx provedeno xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Příprava
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx dostatečně xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx volný xxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx orálně sondou, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx srovnatelnou xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rozpuštěné xx xxxxxxx vehikulu, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx olej, xxxxx xx xxxxxxxxxx rozpustit, xxxxx velké xxxxx xxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx kura domácího (Xxxxxx gallus xxxxxxxxxx) xx věku 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx se xxxxxxx x standardní xxxxxxxxx x chovají se xx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx testovací xxxxxxx xx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx s xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxxxxx x kontrolní skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx xx xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, aby aspoň xxxx z xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx třech xxxx x druhý den xx xxxxxx) x xxxx xxxxxxx 21xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx souběžně xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx historie. Xx xxx xxxxx xxxx xxxxxx, kterým se xxxxxx látka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, tři xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx biochemii a xxx slepice xxx xxxxxxxxxx. Doporučuje se xxxxxxxxxx doplňovat xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxxxx laboratoři xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx prvků testu (xxxx. plemeno, potrava, xxxxxxxx chovu).
1.6.1.3 Volba xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx příslušného xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx dávek, xxx xx xxxx stanovit xxxxxx, xxxxx bude xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx úmrtnost xx v této xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx úmrtí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se atropin xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x kterém xx xxxxx, že xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látek xxxx xxx použito xxxxxxx typů testovacích xxxxx (xxx metoda B.1 bis). Xxxxxxxxxx údaje xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx informace xxxxx xxx také xxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studii by xxxx xxx xx xxxxxxxx s přihlédnutím x xxxxxxxxx předběžné xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx limitu xxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti. Případné xxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 dnech xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx neurotoxickými xxxxxx, xx xx použít xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx údajů x látek s xxxxxxxxx strukturou xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx není xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se x lidí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxx úrovně dávky.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx před xxxxxx xx xxxxxxxx akutního xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx okamžitě xx podání látky. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx pozorují xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx a xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 21 xxx xxxx xxxxx xxxxxxx utraceny xxxxx xxxxx. Veškeré xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, včetně nástupu, xxxx, xxxxxx x xxxxxx abnormálního xxxxxxx. Xxxxxx xx hodnotí xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stupnice a xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x klecí x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jako xxxx. xxxxxxxxxxx po žebříku, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x zvířata se xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, humánním xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx zváží xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Biochemie
Šest xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x každé testované x xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem a xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx xxxxxxx xxxxxxx) xx usmrtí x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx inhibice NTE xx xxxxxx xxxxx x lumbální mícha. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Běžně xx xxxxxxxx xxx slepice x xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 hodinách x xxxxx tři xx 48 hodinách, xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx 24 hodinách. Xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxxx xxxxxxxx naznačuje, xx xxxxxxx látka xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (hodnotí xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), pak xx xxxxxxxxxx odebrat xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxx zvířat, x xx mezi 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxx analýza xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx spontánní xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx x xxxxx zvířat (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i utracených xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) zahrnuje makroskopické xxxxxxxxx stavu mozku x xxxxx.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx tkáň x xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx biochemické xxxxxx) se histologicky xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xx situ xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Odebírá xx: xxxxxxx (střední podélný xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxx, střední hrudní x xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx část x n. tibialis (x xxxx xxxxx x x. xxxxxxxxxxxxx) x x n. xxxxxxxxxxx. Řezy xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx a xxxxx.
2. SBĚR A XXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx touto xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx další xxxxxxxxx xx pozdní xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Uvádějí xx xxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx sestaví xx tabulky. X xx musí být xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x počet xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy x xxxxxx těchto xxxxxxxxx nebo xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx poškození xxxx xxxxxx.
Výsledky xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx.
Číselné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxx x xxxx plánované xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx x xxxxx zvířat;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx studie.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx x homogenitě xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx;
- podrobné xxxxx x xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxxx úrovně dávek;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, včetně podrobných xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx údaje x podání xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx x tělesné xxxxxxxxx;
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx);
- podrobný xxxxx biochemických xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx nálezy;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických nálezů;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx to xxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxxxxx x Interpretace
4. LITERATURA
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX TG 418.
X.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH SLOUČENIN XXXXXXX 28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Při xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx nemůže xxx xxxxxxx v xxxxxx studiích toxicity. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx xxxxx mohou xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x in vitro xxxxxx xxxx není xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Tento 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxx opakovaných během xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx a xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx úroveň xx používá pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Definice
Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "organické xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální organické xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx kyselin xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx jiné xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx u některých xxxxx této skupiny.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx projevující xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx v xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x pozdním počátkem xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx esterázy - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) v xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx denně xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxx sledována xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x paréza xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxxxx x slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx 24 x 48 hodin xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx týdny xx xxxxxxxx xxxxx xxxx zbývající xxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4 Xxxxx metody xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Mladé xxxxxx xxxxxxx slepice xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx léčby x x xxxxxxxx xxxxx se náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx chovu x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx slepic x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxx 7 dní x xxxxx, xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,
jako je xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx tobolkách xx xx nemusely xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx známy xxxx xxxxxx před testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx mladá nosnice xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) ve xxxx 8 až 12 měsíců. Používají xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. X výjimkou aplikace xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx jako x xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx aspoň šest x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx x každém xx xxxx xxxxxxxx xxxx) x šest xxxxxxx čtrnáctidenní xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx expozice.
1.4.2.3 Xxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xx zvolí x xxxxxxxxxxxx ke xxxx výsledkům x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx ani xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx řada xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx umožní sledovat xxxxxxxxx účinku na xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti x xxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx údajů u xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x studii x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxx potřebu xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx x 14 xxx xx xx, xxxx xx xxxxxxxx a do xxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.3 Xxxxx postupu
Testovaná xxxxx se podává xxxx xxx v xxxxx po 28 xxx.
1.4.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx má xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx látky. Všechny xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxx 14 dnů xx xxxxxxxx aplikace, do xxxxxxxx xxxxx plánu. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx zaznamenávají včetně xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x trvání. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx na xx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stupnice, xxxxxxxxxxx se paréza. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx nucené motorické xxxxxxxx, jako např. xxxxxxxxxxx po žebříku, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Umírající xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxx hmotnost
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx před xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a pak xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Šest slepic xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx se usmrtí x xxxxxxx xxxxx xx aplikaci xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx mícha. Xx xxxxxx vypreparovat také x. xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx tkáň xx inhibici XXX. Xxxxxxx xx usmrcují xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx a xxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání látky. Xxxxxxxx xxxxx z xxxxxx studie nebo xxxxxx studií (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx provede také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx AChE, xxx xxxx xxxx k xxxxxxxxx látky jako xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Pitva
Xxxxx xxxxx zvířat (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení xxxxx xxxxx a míchy.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Nervová xxxx x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx studie) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx technik. Odebírá xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxx xxxxx se xxxxxxx x horní krční xxxxx, xxxxxxx hrudní x xxxxxxxxxxxxx), x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx distální část x n. xxxxxxxx (x xxxx větve x x. xxxxxxxxxxxxx) x x n. xxxxxxxxxxx. Řezy xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
Nejprve xx xxxxxxx fixované tkáně xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxx vyšetření x xx slepicích xx skupin, které xxxxxxx dávku střední x xxxxxx.
2. XXXX X ZÁZNAM ÚDAJŮ
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, histopatologie x xxxxx chování) xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Neprůkazné xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx typ x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, biochemickými x xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezy x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxx v době xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx informace, pokud xxxxx být získány:
Xxxxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx plemeno,
- xxxxx x xxxxx xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.,
- hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx začátku xxxxxx.
Xxxxxxxx testování:
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx aplikace testované xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx o potravě x kvalitě xxxx,
- xxxxxxxxxx vybrané xxxxxx dávek,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávek, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, objemu x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je-li xxxx xxx 24 a 48 xxxxx.
Výsledky:
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- úroveň bez xxxxxx (NOAEL),
- xxxxxxxxx, stupeň a xxxxxx xxxxxxxxxx příznaků (xx vratných xxxx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx to xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx
4. LITERATURA
Xxxx metoda je xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX XX 419.
X.39. Xxxx xxxxxxxxxxx syntézy DNA x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx DNA Synthesis (XXX) Test Xxxx Xxxxxxxxx Xxxxx Xxxxx Xx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx testu xxxxxxxxxxx syntézy DNA (xxxxxxxxxxx DNA synthesis, XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4).
Xxxxx xxxx xx vivo xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x játrech. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx DNA x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx následnou xxxxxxxx. Xxxxx jsou obvykle xxxxxxx xxxxxx metabolismu xxxxxxxxxxxxx sloučenin; jsou xxxxx vhodným xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx xxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxx tkáně xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx neplánované xxxxxxx XXX (XXX) xx xxxxxxx xxx, xx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nukleosidů x buňkách, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X-xxxx) xxxxxxxx XXX. Nejběžnější xx xxxxxx, při xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (3H-TdR). Pro xxxxx XXX xx xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx potkaní xxxxx. Xxxx tkáně xxx xxxxx se sice xxxx mohou xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Detekce xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx XXX, xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx odstraněny x nahrazeny. Proto xx xxxxxx UDS xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx repair" (1 - 3 xxxx) je xxxx xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Xxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Mimoto je xxxxx, xx mutagen xxxx xxxx s XXX reagovat, ale xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx reparačním xxxxxxxx. Xx, xx XXX xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože poskytuje xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Buňky x xxxxxxxx: xxx xxxxxxx xxxxx (XXX) xxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx stanovená xxxxxxx, xxxxxx zdůvodní laboratoř xxxxxxxxxxx xxxx.
Net xxxxxxx grains (XXX): xxxxxxxxxxxxx míra XXX xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx počtem xxx x jádře (XX) x xxxxxxxxx xxxxxx xxx v xxxxxxxxxx (XX): NNG = XX - XX. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx na buňky x xxxxxxx, v xxxxxxxxxxx kulturách apod.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx DNA synthesis, XXX): xxxxxxx syntéza XXX xx excizi x odstranění úseku XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vyvolaného chemickou xxxxxx nebo fyzikálním xxxxxxxx.
1.3 PRINCIP XXXXXX
Xxxx UDS v xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx excizi x xxxxxxxxxx xxxxxxxx DNA xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx vychází xxxxxxx x xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx XXX jaterních xxxxx, charakteristických xxxxxx xxxxxx xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx stanoví xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx tato xxxxxxxx xxxx tak xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx v X-xxxx, xxxx je xxxx. xxxxxxxxxxx metoda.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx savčí xxxx. Používají se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx chovu
Všeobecné xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x po xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx je třeba xxxxxxxxx tak, xxx xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx toho, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.2 Testovaná xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, látka xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou podávat xxxxx xxxx xx xxxx podáváním xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) prokazují, xx xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.
1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v používaných xxxxxxx nesmí vyvolávat xxxxxxx účinky x xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se ne xxxxxx xxxxx rozpouštědlo, xxxx xxx xxxx xxxxxxx podpořeno údaji x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx možné, xxxx na prvním xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx každého xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx pohlaví xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozitivní kontroly xx xxxx indukovat XXX při xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx aktivaci se xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly hodnotiteli xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:
Xxxx xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | CAS | XXXXXX |
odběr v xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx v xxxxxxxxx (12-16 hodin) | X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx použít x jiné xxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx testovaná xxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Počet x xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx existuje xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jeden, nebo xxx jedinci.
Pokud x xxxx, kdy xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx s týmž xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx jednom xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx, kde humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx látkám xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx test xx xxxxxxxxx odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx definována xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx známky toxicity, xx při xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxx dávka xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.
Látky, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx aktivitu, jako xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z těchto xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici, xx xxxxx ji xxxxxxxxxx x téže xxxxxxxxxx x xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx režimu, xxxx xx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Xxxx nejvyšší dávku xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx test xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a jestliže xx na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx úplná studie. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx může xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vpravuje xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx cesty. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx by xx xxx mohla xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxx, xxxxxx krevním xxxxxx. Xxxxxxxxx objem kapaliny, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx injekcí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x hmotnosti xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx zdůvodněné. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx vykazují xxx xxxxxxx koncentracích horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, aby xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx zpracovávají xxxxxxx 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx odběr (xxxxxxx 2 - 4 hodiny xx xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx xx 12 - 16 hodinách xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xx ovšem xxxxx xxxxxx x xxxx xxxx odběru xxxxxx, xx-xx xx odůvodněné xx základě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx in xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mohly xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Jaterní buňky xx zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx savčí jaterní xxxxx xx xx xxxxxxx xxxx (např. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx inkubují x médiu obsahujícím 3X-XxX. Po xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xx potom xxxxx xxxxxxxxx v xxxxx obsahujícím nadbytek xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Buňky xx xxx promyjí, xxxxxx x xxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxxxx intervalech xxxxxx xx "cold xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx xx autoradiografické xxxxxx, xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx týdnů x xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, xxxxxx x počítají xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx jedince xx xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx dostatečný xxxxx buněk x xxxxxxxx morfologií, aby xxxx možno XXX xxxxxxxxxx. Mikroskopicky xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. pyknóza, xxxxxxx xxxxxx radioaktivního xxxxxxx).
Xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxx preparátech x každého jedince xx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxx; xxxxx xx xxxxx méně xxx 100 xx xxxxxxx xxxxxxx, musí xx být xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xx nevyhodnocují xxxxx x X-xxxx, xxx xxxxx buněk x X-xxxx se xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx jader x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx normálních xxxxxxx, xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxx shrnou x tabelární formě. Xxx každou buňku, xxxxxxx jedince a xxxxxx xxxxx a xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx CG od xxxxx XX. Xxxxxxxx-xx xx "buňky x xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xxxxx určují, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx z historických xxxx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Numerické xxxxxxxx xx mohou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xx statistické xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx pro xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
pozitivní | (X) hodnoty XXX xxx předem xxxxxxxxxx prahem, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx historických xxx xxxx xxxxxxxxxx | |
nebo | (XX) xxxxxxx NNG xxxxxxxx xxxxx xxx u xxxxxxxx kontroly | |
xxxxxxxxx | (I) hodnoty XXX xx xxxxxx/xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx prahu x kontrol | |
xxxx | (XX) hodnoty XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx souběžná xxxxxxxx. |
Xx třeba xxxxxx biologickou významnost xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx, že xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx jedinci, vztah xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků lze xxxxxx statistické metody; xxxxxxxxxxx významnost by xxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx reakci xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát opakuje.
Xxxxxxxxx výsledek xxxxx XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx látka vyvolává x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxxxxxxxx XXX, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX in xxxxx. Negativní výsledek xxxxxxx, že za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx DNA, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx v xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx tkáň (např. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,
- původ, xxxxxx podmínky, strava xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx xxxxx i xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody k xxxxxxx, že xx xxxxx dostala do xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxx schéma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- metody zjišťování xxxxxxxx,
- metoda xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx metoda,
- počet připravených xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxx počtů xxxxxxxxxx zrn x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx xxxxxx" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxxx, xxxxx je k xxxxxxxxx,
- statistické xxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- známky xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx "xxxxx x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,
- počet xxxxx x X-xxxx, xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxx X.39. xxxx vložena xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.40. XXXXXXX ÚČINKY XX KŮŽI
1. METODA
1.1 XXXX
Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Xxxxxx for xxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, XXXXX, Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx in xxxxx na leptavé xxxxxx xx kůži: xxxx na xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx electrical resistance, XXX) a test xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx. Validizační xxxxxx XXXXX prokázala, že xxx xxxxx dokáží xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx leptajícími x neleptajícími xxxx. Xxxxxx test xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx umožňuje správně xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx těžké xxxxxxxxx kůže X35, x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, X34). Je xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx; xxxxx xxxx oběma testy xxxxxx xx konkrétních xxxxxxxxxxx x na xxxxxxxxxxxx uživatele.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.
1.3 REFERENČNÍ LÁTKY
Žádná xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx. 1.5.3.4 a 1.7.2.3.
1.4 PRINCIP XXXXXX - TEST TER XX KŮŽI POTKANA
Testovaný xxxxxxxx se xxxxxx xx dobu až 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxx potkanů utracených xxxxxxxx xxxxxxxx. Látky, xxxxx mají leptavé xxxxxx, jsou xxxxxxxxxxxxxx xxxxx své xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx funkce xxxxxx xxxxxxx.Xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxx určitou xxxxxxxx xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látky XXX xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X případě xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxx v xxx. (6)) xx xxxxx xx zkušebního xxxxxxx zařadit xxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xx snížil xxxxx xxxxxxxxx pozitivních xxxxxxxx, xxx xx u xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).
1.5 XXXXX XXXXXX - XXXX XXX XX XXXX XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx terčíků xxxx xxxxxxxxx mladí (20 xx 23xxxxx) potkani, Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx x xxxxx plochy. Xxxxxxx xx xxx omyjí xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx ponoří xx roztoku antibiotika, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x koncentracích xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Třetí xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xx zvířata omyjí xxxxxxxxxxx znovu a xxxxx 3 xxx xx použijí. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx zvířata xxxxxx xxx 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx terčíků xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, sejme xx xxxx z xxxxxxxx xxxxxx x x xx se xxxxxxx sloupne xxxxxxxxxx xxx. Xxxx se xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PTFE) xxxxxxx, x xx epidermální xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx konec xxxxxxx xx přetáhne gumový X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x O-kroužku xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx se pak xxxxxxx xxxxxxx ke xxxxx TPFE xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx hořečnatého (154 xX), xxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sponou (xxx. 2).
1.5.3 Popis xxxxxxx
1.5.3.1 Nanesení xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x tekutém stavu, xxxxxx se xx xxxxxxxxxxx xxxxxx uvnitř xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx látky se xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx jemně xxxxxxx. Testovaná látka xxxx mít x xxxx maximální xxxxx xxxxxxx. X některých xxxxxxx látek toho xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 30 xX, aby se xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx. Použijí xx vždy xxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx. Látka se xxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (viz xxx 1.5.3.4) a xxxxxxxx xx promýváním xxxxxxx vodovodní vody xxxxx maximálně 30 xX xxx xxxxxx, xxxxx xx látka xxxxxxxxx. Odstranění xxxxxxxxx xxxxx, která x xxxxxxx ztuhla, xx xx napomoci xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vody xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Měření XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (TER) xx měří xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx střídavý xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx měřením xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx dostatečného xxxxxx 70% ethanolu, xxxxxx se pokryje xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxx xxxxx, x tkáň xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx můstku se xxxxxxx na obě xxxxxx xxxx a xxxxx xx xxxxx x kΩ/terčík (obr. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx holé xxxxxxxxx pod xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (silné) xxxxxxxxx xx během xxxxxx xxxxx xxxxxx XXXX trubice xxx, xxx byla xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vždy xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Vnější (xxxxx) elektroda se xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx xxxxxx xx dně. Xx xxxxx dodržovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxx hranou xxxxxxxxx xxxxxx a spodkem XXXX trubice (xxx. 1), tato xxxxxxxxxx xx vliv na xxxxxxxx hodnotu xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx je-li xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 20 xΩ, xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx epidermální xxxxxx terčíku kůže. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx, xx xx XXXX xxxxxxx xxxxxx palcem x xxxxxxxx a xxxxxx 10 xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx hořečnatého xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx roztokem.
Průměrná xxxxxxxx xxxxxxx TER xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx leží x xxxxxxxxx přijatelných xxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxx tyto:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
10 – 25
|
1.5.3.3 Xxxxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx je xxx xxxxxxxxx povrchově xxxxxxxxx látek (xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx TER xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, xxx xx této xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) barviva. Xxxxx xxxxxxxx xx zjistí, xxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx barviva xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xx xx epidermální xxxxxx xxxxx terčíků xxxxxx xx 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx sulforhodaminu B x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxx se xxx xxxxxx po xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx proudem xxxxxxxxx vody, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Tím xx xx odstranit přebytečné (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx kůže se xxx opatrně sejme x PTFE xxxxxxx x xxxxx do xxxxxxx (např. xx 20 ml skleněných xxxxx xxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 ml xxxxxxxxxxxx xxxx. Nádobky xx po xxxx 5 xxxxx jemně xxxxxx, xxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Pak xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx x 5 xx 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx sodného (XXX) x destilované xxxx, kde se xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 60 xX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx po dobu 8 minut xxx xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Vzorek 1 ml xxxxxxxxxxxx xx xxx zředí 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx denzita (XX) xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x terčíku xx xxxxxxxx x hodnoty XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx sulforhodaminu B xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx akceptována za xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx hodnoty spadají xx akceptovatelného xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx xxxxxxx se x xxxxxxxxxxx látek xxx xxxx metodě x xxxxxxxxxxxxxxx uspořádání xxxxxxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxx kůže (např. 2 hodiny) xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx zjištěno, že xxxx TER xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kůže xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx leptajících x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 24hodinovém působení.
Získané xxxxxxx XXX mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx leptavé xxxxxx 5 kΩ xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx aparatuře x xxx xxxxxxxx postupu xxxxxxxxx zde. Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxx xxxxxx jiných xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Proto xx xxxxxxxxxx okalibrovat metodiku x xxxxxxxx hodnotu xxxxxxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx, jež byly xxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 XXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX
Xxxxxxxxx materiál xx nanáší xxxxxxx xx xxxx až 4 hodin xx xxxxxxxxxxxx model lidské xxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx statum corneum. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx pokles životnosti xxxxx xxxxxxxxx například xxxxxx "XXX xxxxxxxxx xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxx vychází x xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xx, xxxxx xxxxxx proniknout xxxxx stratum xxxxxxx (xxxxxx nebo erozí) x jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx vrstvách.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX KŮŽE
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx kůže
Modely xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x různých xxxxxx, xxxx však xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx musí xxx přiměřeně zachována. Xx xxx prokázat xxx, xx model xxxx xxxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxxxx po nanesení xxxxx, x nichž xx xxxxx, xx xxxx pro buňky xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx neprocházejí. Xxxxx xxxx xx definovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vykazovat xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky.
Životnost živých xxxxx v modelu xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxx, xxx xx dalo dobře xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, tj. XX xxxxxxxx) xx xxxxxxxx látce xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx mezích xxx xxxx xxxxx. Podobně x případě xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu (xx srovnání x xxxxxxx xxx negativní xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx spadat xx xxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx predikční xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx se xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (minimální xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx kůži, x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx x xxxx zajistil dobrý xxxx. Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx, xx xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxx látek (2). Xx uplynutí doby xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx smyje fyziologickým xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx životnosti xxxxx
X měření životnosti xxxxx se xx xxxxxx jakákoliv xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx redukce XXX, x které xxxx xxxxxxxxx že x xxxxxxx laboratořích xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx se xx xxxx 3 xxxxx ponoří xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx teplotě 20 - 28 oC. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se pak xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x koncentrace formazanu xx stanoví xxxxxxx XX xxx xxxxxx xxxxx 545 x 595 nm.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x xxxxxx dodržení xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. mají xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx vliv. Doporučuje xx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx použití xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx použitých xx validizační xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx metoda xx xxxxxxx široké xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx standardů xxx v xxxxx xxxx laboratoře, xxx xxxx xxxxxxx laboratořemi. Xxxxxxxxx xxxx metoda xxxxxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx dříve (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zveřejněny x takovém xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxx zveřejněním xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
1.8.1 Xxxx TER xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odporu (x kΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní kontrolu x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx xxx xxxxxxx replikace x xxxxxxxxx experimenty, xxxxxxxx xxxxxxx x x xxxx xxxxxxxx klasifikace.
1.8.2 Xxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxx testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, a xx xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.9.1 Xxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxx je xxxxxxxx hodnota XXX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, je xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx-xx hodnota XXX nižší xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx organickou xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx účinky xx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX nepřesahující 5 xΩ, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xxxxx barviva x terčíku vyšší xxxx rovný xxxxxxxxxx xxxxxx barviva x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x 36 % XXx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx má xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x terčíku menší, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx leptavé xxxxxx xxxx.
1.9.2 Xxxx s xxxxxxx lidské kůže
Hodnota XX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx buněk. X xxxxxx OD pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky xx vypočte xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx. Hraniční procentický xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxx xxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, od xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxxxxxxx modelu xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx metoda xxxxxxxxxx, x následnou xxxxxxxxx xxxxxx se musí xxxxxxxx, že je xxxx xxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- identifikační xxxxx, xxxxxxxxx stav, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti; xxxxx xx xxxxxxxxx referenční xxxxx, xxxxxx se xxxx xxxxx i xxx ně.
Podmínky pokusu
- xxxxxxxx popis xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- tabulka hodnot xxxxxx (xxxx TER) xxxx procentuální xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (test x xxxxxxx xxxxxx xxxx) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx, x to xxxxx xxx všechny xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2
Xxxxxx X.40. xxxx vložena xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX FOTOTOXICITY 3T3 XXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx jako toxická xxxxxx (reakce), k xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxxx vystavena xxxxxxx xxxxxxxxx látkám x xxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xx-xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx získané x xxxxx testu xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxxxx xx stanovení fototoxického xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, tedy xx xxxxxxxx, xxx daná xxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx vitro xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x světla, xxxxx testem xx xxxxx xxxxxxx sloučeniny, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxx, x sloučeniny, xxx xxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx nanesení xx pokožku.
Test xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx byl xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx společného xxxxxxxx XX/XXXXXX z let 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx validní xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx schůze XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx trestů xxx xxxxxxxxx fototoxicity (4).
Xxxxxxxx xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx vivo u xxxxxx a xxxx x xxxx zjištěno, xx tento xxxx xx xxx uvedené xxxxxx xxxxxxxxxx predikční xxxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx k xxxx, xxx předpovídal xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vzniknout, jako xx fotogenotoxicita, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, i xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx, reaguje při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx. Test xxxx xxxxxx uspořádán tak, xxx xxxxxxxxx hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx přístup xxxxxxxxx fototoxicity x xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxx dodatek.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: intenzita xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx dopadajícího xx xxxxxx; měřená xx X/x2 xxxx x XX/xx2.
Xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) ultrafialového (XX) xxxx viditelného (XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, vyjádřené x xxxxxxx (= W x x) na xxxxxxxx povrchu, xxxx. X/x2 nebo X/xx2.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxx ultrafialového xxxxxx: podle xxxxxxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx International xx X'Xxxxxxxxx) se xxxxxxx označení XXX (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 nm) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx xxxx xxxxx XXX x UVB xx xxxxx xxxxxxxx 320 nm x XXX se někdy xxxx na UV-A1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxxx x 340 nm.
Životaschopnost (xxxxxxxxx) xxxxx: parametr, xxxxxx xx xxxx celková xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx xxxxx buňku, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xxxxx parametrů xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx. životností (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x negativními xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxx + XX xxxx - UV), xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
Predikční xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxx toxicity xxxxxxxxxxxx xx predikce xxxxxxxxx potenciálu. X xxxxx xxxxxxxxxx návodu xxx xxxx je xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx vitro x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxx veličin XXX x XXX.
XXX (photo xxxxxxxxxx factor, fotoiritační xxxxxx): xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) testované xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) a v xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.
MPE (mean xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): xxxx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace-odezva xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) a x xxxxxxxxxxx (+XX) necytotoxického XXX/XXX xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx reakce (xxxxxx), xxxxx xxxxxx xx xxxx expozici xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxx reakce, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ozářením xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx pojmu "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx fototoxických xxxxxx, x xxxx xxxxxxx x kůži xxxx, xx xx ni xxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx) xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vedou vždy x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx podobné xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx imunologická xxxxxxxxxx, která xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxx xx zapotřebí xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx indukční xxxxxxx x xxxx, xxx se reaktivita xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: genotoxická xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxxxxxxx projevy, xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx negenotoxické dávce XX/XXX záření a xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx tumorogeneze xxxxxxxx XX zářením xxxxxxxx xxxxxx, mluvíme x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx chlorpromazinu xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx studii, se xxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX doporučuje použít xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx porovnávání xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).
1.4 PRVOTNÍ XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx, že xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Podle xxxxxxx zákona fotochemie (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx dostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx kvant. Xxxxx xx se xxxxxxx, než se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx návodu, xxxx xx xx xxxx stanovit absorpční xxxxxxxx testované xxxxx x XX/XXX xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX x. 101). Pokud xx xxxxxxx extinkční/absorpční xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x xx-1, nemá xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x není xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (viz xxxxxxx).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, kterými xxxx absorpce xxxxxx (xxxxxxxxx) chromoforem xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7), xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx je xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx látky testované x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX záření. Cytotoxicita xx při xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx barviva, xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx, NR) (9), 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxx/x 3X3 xx kultivují xx dobu 24 xxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x jedné xxxxxx (monolayer). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx látku xx preinkubují dvě xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx s xxxxxx x osmi xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Jedna x obou xxxxxxxx xx pak xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxxxx 5 X/xx2 XXX (+XX xxxxxxxxxx), xxxxx destička xx uchovává v xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X xxxx destičkách xx xxx xxxxxx xxxxxxx médiem xxxxxxxxxxx x po dalších 24 hodinách xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx uptake, NRU) xx xxxx 3 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx každou x osmi xxxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se porovnají xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxx xxxxxxx x přítomnosti (+XX) a x xxxxxxxxxxxxx (-UV) záření, xxxxxxx xx úrovni XX50, tj. xx xxxxxxxxxxx inhibující xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx o 50 % x xxxxxxxxx x kontrolami bez xxxxxxxxx.
1.6 XXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX, historické údaje: x xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx provádět xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx nasadí x xxxxxxx, která xx xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx, xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxx UVA v xxxxx 1 - 9 X/xx2 x xxxxx den se xxxxxx NRU xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx životaschopnost xx ozáření dávkou XXX xxxxxx 5 X/xx2 xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxx 9 X/xx2 xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx nižší xxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx zhruba xx každé xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx UVA, běžný xxxx: xxxx splňuje xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Earl´s xxxxxxxx salt solution, XXXX] x 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx (XxXX) nebo xxx xxxx vykazují x xxxxxxxxxxx (+XXX) životaschopnost xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x témž xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx negativních xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (XX540 XXX) xxxxxx x XX xxxxxxxx negativních xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 104 xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx dnů xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Test xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx průměrná xxxxxxx XX540 XXX x xxxxxxx xxx ovlivnění xxxxx xxxx rovna 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx jako xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxxx chlorpromazin (XXX); xxxxx se tato xxxxx xxxxxxxxxx. Pro XXX testovaný xxx xxxxxxxxxxxx protokolu x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti: XXX xxxxxxx (+UVA): XX50 = 0,1 - 2,0 μg/ml, CPZ xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Fotoiritační xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx xxxxxxx XX50, xx být xxxxxxxxx 6.
Xxxxx CPZ xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x jiné známé xxxxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx vhodné pro xxxxxxxxxxxxxxx chemické xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx testované (xxxxxxxxx) látky. V xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx dat adekvátně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x PIF xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 POPIS XXXXXX
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx použita xxxxxxxxxxxxx buněčná xxxxx xxxxxx fibroblastů Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x xx buď x XXXX xxxx x XXXXX; xx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx stejného xxxxxxxxx xx xxxx s xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx linie, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx; xx xxxx třeba prokázat, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.
X xxxxx xx xxxxx pravidelně xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, x smí xx xxxxxx xxx x xxxxxxx, xx xx výsledek kontroly xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx citlivost xxxxx xxxx XXX záření xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 z xxxxxx x nejnižším xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx buněk Xxxx/x 3X3 xxxx XXX xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx návodu.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx rutinní xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xx jedná x XXXX xxxxxxxxx 10 % xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx 37 xX / 7,5 % XX2. Xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx historickém xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxx. buněčnou xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx kultur
Buňky xx xxxxxxxxxx zásobních xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx použitím x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx v kultivačním xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, aby na xxxxx xxxxx (tj. xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx xx konfluenci (xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, jednolitou xxxxxx xxxxx). X případě xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx xxxxxxxxxx hustota 1 x 104 xxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx s 96 xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx identických xxxxxxxxxxxx podmínek, x xxxxxxxx doby, xxx xx xxxxx z xxxxxxxx ozařována (+UVA/VIS) x xxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxx všech testech xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, není x případě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx látka, xxx by x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx in xxxx xxxx xx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zapotřebí. Nepokládá xx xxxxx ani xx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx tento xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.1.5 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxx stabilitě prokazují, xx xx xx xxxxxxxxx. Pokud je xxxxxxxxxxxxx, že xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx pod xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx x pufrovaném solném xxxxxxx, například x Xxxxxxx vyváženém solném xxxxxxx (XXXX) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fosfátem (phosphate xxxxxxxx xxxxxx, XXX), xxxxx - xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx složky xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xX, xxxxxxxxxx světlo.
Pokud xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx konečná xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx xx xxxxx x poměru 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx roztokem. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx i x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx rozpouštědlo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo xxxxxxx (XxXX). Vhodná mohou xxx i další xxxxxxxxxxxx x nízkou xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxx třeba xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx případná xxxxxx x testovanou xxxxxx, xxxxxxxxx fototoxického xxxxxx xxxx vychytávání xxxxxxxx.
Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, dá se xxxxxx míchání xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 xX.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx UV xxxxxxx / příprava
Světelný zdroj: xxxxx xxxxxxxxx světelného xxxxxx x správná xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx klíčovým xxxxxxxx. Záření v XXX x ve xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx spojováno x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx UVB xx v xxxxx xxxxx méně xxxxxxxxxx, xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xx 313 xx x 280 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx světelného xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxx testovaná xxxxx xxxxxxxxx, x xxx xxxx světelná xxxxx (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx) xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx známých xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Xxxx xxxxxxx být xxxxxxx xxxxxx délky x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx xxx i xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx optimální xxxxxxxx xxxxx xx pokládají xxxxxxx xxxxxxxxxx, jimiž xx xxxxxxxx sluneční xxxxxx. Jako tyto xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx (vysokotlaké) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx xxxx xx xxxxxx, že vyzařují xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx, sluneční xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Jelikož všechny xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx toto xxxxxx xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxx zeslabilo.
Pro xxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, kde xx složka UVB xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Příklad spektrálního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx simulátoru použitého xxx xxxxxxxxx studii xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx x xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxx pravidelně xxxx xxxxxx xxxxxx fototoxicity xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru, xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, referenční XX-xxxx téhož typu x xxxxxxxxx. Ideální xx, když se x xxxxxxx intervalech xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; taková xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx validační studii xxxx xxxxxxxx, že xxxxx UVA xxxxxx 5 X/xx2 je xxx buňky Xxxx/x 3X3 necytotoxická a xxxxxx dostatečně xxxxx, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx fototoxické látky. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx během 50 xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 mW/cm2. Xxxxxxx-xx xx jiná xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxx xx dávka xxxxxx UVA upravit xxx, xxx buňky xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce:
|
dávka xxxxxx (J/cm2) x 100
|
&xxxx; | |
| &xxxx;
x (xxx) =
|
________________________
|
(1 X = 1 X s)
|
|
záření (mW/mc2) x 60
|
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx všechny fototoxické xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx četnost xxxxxxx pozitivních výsledků (13). Hodnota xX xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx (oblast xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxxx (+XXX) x xxx xxx (-UVA) xx třeba stanovit x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx tak, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxxx dostatečně podloženy xxxxxxxxxxxxxxxx údaji. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx 1 x 105 buněk/ml x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx jamek 96xxxxxxx mikrotitrační xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx odpipetuje xx 100 μx samotného xxxxx (= xxxxx xxxxx), do ostatních xxxxx xx dávkuje xx 100 μx xxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx (= 1 x 104 xxxxx xx xxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx připraví xxx xxxxxxxx - xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-UVA), xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx xx inkubují xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX), xxx xx vytvořil xxxxxxxxxxxxxxx monolayer. Xxxx xxxxxxxxx doba xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx růst.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx inkubaci xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX xx každou xxxxx. Xxxxx se 100 μx XXXX/XXX obsahujícího xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx (negativní xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx dobu 60 xxxxx (7,5 % CO2, 37 xX).
Xxxx xxxxx s XXX (+UVA) xx xxxxxxx tak, xx xx xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu 50 xxxxx skrz xxxxx xxxxxxxx s 96 xxxxxxx zářením XXX x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / xx2). Xxx nedocházelo xx xxxxxxxxxx vody xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx. Duplicitní xxxxxxxx (-XXX) xx xx xxxx 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx pokojové teploty x xxxxxx boxu.
Roztok xx odstraní a xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx noc (18 - 22 xxxxx) se xxxxxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx se změny xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxx kontrola xx xxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx červeně (XX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx předehřátého XXXX/XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx jemným xxxxxxxx. Přidá xx 100 μl média x NR x xxxxxxxx xx xxx 37 xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % CO2 xx dobu 3 xxxxx.
Xx inkubaci se xxxxxx s NR xxxxxxxx x buňky xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX, xxxx xx xxx xxxxx x důkladně xxxxxxxx (je také xxxxx xxxxxxxx zcentrifugovat x xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xx xxxxxxxx NR (čerstvě xxxxxxxxxx směs xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx třepou xx xxxxxxxx, xxxxx xx XX x xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX při 540 xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxx (xxxx. XXXXX) pro xxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXX A KVANTITA XXXXX
Xxxxx musí umožňovat xxxxxxxxxxx analýzu xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx aplikaci XXX/XXX xxxxxx x xxx xx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxx, xxx xx experimntální xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl/ml x experimentu xx xxx (-XXX) necytotoxická, xxx xxx ozařování (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxx, že xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx částech experimentu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, aby byl xxxxxx požadavek xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Pokud xxxx xxxxxxxxxxxx zjištěna x xxxxx x xxxx xxxxx experimentu (xxx xxx -XXX, xxx xxx +UVA), xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx rozestupem mezi xxxxxxxxxxxx dávkami až xx nejvyšší koncentrace.
Jsou-li xxxxxxxx hraniční - xxxxxx xxxxxx čáry xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx test xxx ověření xxxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xx opakování testu xx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podmínky, aby xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx testu xx xxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx těchto xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxx. U xxxxx, xxx xxxx ve xxxx xxxxxxx, může xxx významný xxxx xxxxxxxx xxxx.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx k 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XX (XX50). Xx xxx xxxxxx xxx, xx se xx xxxx koncentrace - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vhodná xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (nejlépe Xxxxxxx funkce nebo xxxxxxxxxx xxxxxxx) nebo xx použije xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxx xx xxxxxxx XX50 použije xxx xxxxx výpočty, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx EC50 xx xxxx možno xxxxxx xxxxxxxx metody. X xxxxx případě xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxx x: xxx, xxx x: probit), xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (PREDIKČNÍ XXXXXX)
1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxx se získají xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx (+XXX), xxx za xxxxxxxxxxxxx (-XXX) světla, xx xxxxxxxxxxxx faktor (PIF) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX =
|
____________
|
|
EC50 (+XX)
|
XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx látka xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, kdežto xxx -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx se PIF xxxxxxxxx, x když xx xxxxx x xxxxxxxx, který indikuje, xx látka xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xx xxxxxxxxx xxx. "&xx; PIF", xxxx xx xxxx cytotoxicity (-XX) xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx) a xxxx hodnota xx xxxxxx xx xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) &xx; PIF =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", xxx xxxxx xxxxxxx > 1 předpovídá fototoxický xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx XX50 (-XX), xxx XX50 (+XX), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx až xx nejvyšší zkušební xxxxxxxxxxx, je xx xxxxxxxx xxxx, že xxxxx nemá žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx případě xx xxxxxxx formální "XXX = *1", čímž xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+UV)
|
Pokud xx xx získat xxxxx hodnota "XXX = *1", předpovídá xx, xx není xxxxxxxx xxxxx fototoxický xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (b) x (c) je xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxx xxxxxxx x úvahu xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx testu dosáhlo.
1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: xxxxxxx fotoefekt (XXX)
Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx dat x validační xxxxxx XX/XXXXXX (15) a xxxxxxxxxxxx xx podmínek xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx xx vitro x xxxxx XX xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx omezení modelu XXX x xxxx xxxxxxxxx, kde nelze xxxxxx hodnotu XX50. X tomto xxxxxx xx používá veličina "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx na porovnání xxxxxx průběhu xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx XXX xxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx obdržet xxxxxx.
1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (PIF ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx nižších xxx 10 μg/ml, xx pravděpodobné, xx xxxxx bude xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx také xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in xxxx. Xxxxx-xx xx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci (100 (g/ml), xxxx xxx posouzení xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx látky xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx mohou xxxxxx xxxxxxxxx o penetraci, xxxxxxxx x možné xxxxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxx xxxxx x testování xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx alternativním xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx lidské kůže xx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro (XXX &xx; 5 xxxx XXX < 0,1) xxxxxxx, že xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxxx pro použité xxxxx buňky x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xx xx látka dala xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx látka xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxx xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. V případech, xxx xxxx xxx xxxxxxx koncentracích xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (XX50 + UV x XX50 - XX), xx interpretace xxx xxxxxx. Naproti xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+XX xxx -UV) x xxx omezenou rozpustnost xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx látku xx ne xxxxx xxxxxx a mělo xx se xxxxxxxx x jiném, potvrzujícím xxxxx (xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx vitro xxxx xxxxxx kůže xx xxxx nebo xx xxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx a čistota,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti, jež xxxx x provedení xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, jsou-li xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxx rozpouštědla,
- rozpustnost xxxxxxxxx látky x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x zdroj xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxx záření XXX xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx se x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx vitro xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxx xxxx ovlivněním x xx xxx:
- xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx před xx x po xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (b) - xxxxxxxxx látkou:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, které xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx ozařování UV/VIS xxxxxxx x xxx xxx,
- x případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zdůvodnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x xxxxxxx působícího xxxxx (pufrovaný solný xxxxxx),
- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- spektrální xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx zdroje,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx použitého xxxxxx (xxxxxx),
- charakteristika xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x jeho xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx testovaného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx XXX (x x W/cm2) xxx xxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx UV/VIS záření,
- xxxxx záření XXX (xxxxxxxxx x xxx) x J/cm2,
- teplota xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx uchovávaných x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxx NRU:
- xxxxxxx média x XX,
- doba inkubace x XX,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx, vlhkost),
- xxxxxxxx xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx délka, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx hustota XX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx-xx xxxxxxx,
- složení srovnávacího xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), xxxxx byl xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx jednotlivých koncentracích xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x procentech vůči xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kontrol,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (koncentrace testované xxxxx νs relativní xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +UVA x -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: podle možnosti xxxxxxx xxxxxx EC50 (+XXX) x EC50 (-XXX),
- porovnání xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx ozařování UV/VIS xxxxxxx - výpočtem xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (MPE),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx extraktu XX) ozářených a xxxxxxxxxxx xxxxx,
- historické xxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx XX50 (+UVA), XX50 (-XXX) x XXX xxxxx použité xxx pozitivní kontrolu,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX, průměry x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx B.41. xxxx xxxxxxx právním xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x účinností xx 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxx č. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.
Ve xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jsou podchyceny xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx právním předpisem x.:
208/2001 Sb., kterým xx xxxx xxxxxxxx XX č. 251/98 Xx., kterou se xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx - novela bude xxxxxxxxxxx x příští xxxxxxxxxxx
x účinností xx 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Xx. xxx xxxxxx právním xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. s xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Znění xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx norem xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se jich xxxxxx xxxxxxxxx změna xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) až n) xxxxxx č. 157/1998 Xx., o chemických xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx dalších xxxxxx.
2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx ochranu xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx znění xxxxxx x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Xx. x x. 30/1998 Xx.
3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx pro hospodářskou xxxxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx chemikálií. Xxxxx 4 - xxxx xx xxxxxx (XXXX Guidelines xxx Xxxxxxx xx Chemicals. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Effects).