Právní předpis byl sestaven k datu 22.06.2001.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
xx dne 16. října 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxx chemických xxxxx x přípravků
Ministerstvo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx podle §4 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx dalších zákonů:
§1
Tato xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx nebezpečných xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, senzibilizujících, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a toxických xxx xxxxxxxxxx (dále xxx "toxicita xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků").1)
§2
(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků se xxxxxxxx zkouškami xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v příloze této xxxxxxxx.
(2) Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxx xxx xxxxxx x jiné xxxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx metody xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx pokusných xxxxxx2) x metody xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx (OECD).3)
§3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. xxxxx 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. Xxxxx, XXx. x. x.
Xxxxxxx x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Metody xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
X. VŠEOBECNÝ XXXX
1. XXXXXXXX POJMY
1.1 XXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxxxx xx objeví xxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx podání xxxxx xxxxx nějaké xxxxx.
1.2 XXXXXX XXXXXXXX
xx xxxxxxxxx xxxxxx popisující xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx dostačující xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx by xxx xxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx očekáván xxxxx těžkých xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.
1.3 DÁVKA
xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Dávka xx vyjádřena jako xxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx), xxxx xxxx xxxxxxxxxx dietní xxxxxxxxxxx (xxxx xx xxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 DISKRIMINUJÍCÍ XXXXX
xx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx podat, xxxx xx xx způsobilo xxxxxxx (xxxxxx humánního xxxxxxxx) související x xxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXXXXX
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, frekvenci x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
1.6 XX50 (STŘEDNÍ XXXXXX DÁVKA)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx látky, která xxxxxxxxxxxxx způsobí xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 % zvířat, xxxxxx byla xxxxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx xxxx hmotnost xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (STŘEDNÍ XXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx do xxxxxx doby xx xxxxxxxx x 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx standardním xxxxxx xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 XXXXX
xx xxxxxxx xxx "xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) a xx xx nejvyšší v xxxxxx xxxxxxx dávka xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx x pokusných zvířat x xxxxxxxx opakovaného xxxxxxx podávání nebo xxxxxxxx chemické xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX (XXX - MAXIMUM XXXXXXXXX XXXX)
xx xxxxxxxx dávka, xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.
1.11 PODRÁŽDĚNÍ XXXX
je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
je xxxxxxxx změn xx xxx po aplikaci xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX KŮŽE (ALERGICKÁ XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)
je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx na testovanou xxxxx.
1.14 POLEPTÁNÍ XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 TOXIKOKINETIKA
xx studium xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.16 XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) aplikovaná xxxxx vstupuje xx xxxx.
1.17 EXKRECE
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx z xxxx.
1.18 XXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx xxxxx případně xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx.
1.19 XXXXXXXXXXXX
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) je xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity (xxxxxx X.1 - X.5), xx kterých může xxx po jediné xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
V xxxxxxxxxx xx toxicitě xxxxx xxx zvolit xxxxx postupy xx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XX50. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx není xxxxxxx xxxx navržen, xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx hodnotu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx nejmenší xxxxx zvířat a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx zvířete, xxxxxxxxx metoda pevné xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) x xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 xxxx). Xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx vyvozené z xxxxx studie. X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx standardní xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7, X.8 a X.9) xx xxxxxxxx xxxxxxx účinky xxxxxxxxxx x xxxxxxxx opakované xxxxxxxx. Důležité je xxxxxxxx pozorování xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx cílové xxxxxx xxxxxxxx x toxické x xxxxxxxxx dávky. Xx dlouhodobých studií xx vyžaduje zkoumání xxxxxx xxxxxxx do xxxxx hloubky (metody X.26 - X.30 x X.33).
3. XXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXX
Mutagenita xx vztahuje k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x množství xxxx xxxxxxxxx genetického xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx ("xxxxxx") mohou xxxxxxxxxx xxxxxx xxx nebo xxxxxxxx xxxx, blok xxxx nebo xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx na xxxx xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx aktivita xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx vitro xx xxxxxx (xxxxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v savčích xxxxxxx (xxxxxx X.10).
Xxxxxxxxxx xxxx také xxxxxxx xx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx B.12) xxxx xxxxxxx metafáze xxxxxxxxxx xxxxxx dřeně (metoda X.11). Je xxxx xxxxx dávat jednoznačně xxxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
Pro xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx xx zjištění xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx studie xxx využít x xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; zkoumání xxxxxx nezachycených xxxxxxxxx xxxxxxxx metod; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx.
Xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx B.15 xx X.25 jak xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x xx xxxxx, xxx rozšiřují rozsah xxxxxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x jiných účincích x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx baktérie používané x xxxxxxxxx souboru xxxxx.
Obecně xxxxx, xx další xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx relevantní xxxxxxxxxx informace o xxxxxxxxxx, xxxxxxxx karcinogenním xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx, vhodná xxx daný xxxxxx, xxxx xxxxxxx na xxxxxxx faktorech, včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, výsledků xxxxxxxxxx bakteriálních a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky, výsledků xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx způsobů xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx dědičných xxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx detekci xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxx organizmu, xx xx vyvolaných xxxxxxxx (bodovými) xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx locus xxxx x myší xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx příloze), xxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx. xxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx odhadování možného xxxxxxxxxxx rizika látky xxx člověka. Vzhledem xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxxx locus test, xx třeba xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx jen xx xxxxxxx závažných xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx protokolu xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xx projednání x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx látky xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx karcinogeny, v xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx působení.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x genotoxickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxxx nebo chronické xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx B.7, x xxxxxxxxxxxxx studie s xxxxxxxxxx podáváním xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x určitých tkáních, xxxxx xx mohly xxx xxxx významné. Xxxx studie x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx, podrobnější xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.32) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (metoda X.33).
X dispozici xxxx rovněž xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx určují xxxxxxxxx xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx chování xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx předpokládá xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx - in xxxx (xxxxxx B.21). Používá xx několika xxxxxxx xxxxxxxxx typů x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx.
5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Reprodukční xxxxxxxx se zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx podle nedědičných xxxxxxxxxx účinků xx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx laktace.
Xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx B.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vývojové toxicity xxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx xxxx podle xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx reprodukční xxxx (xxxxxx B.35) xxxxxxxx xxx, aby pokryl xxxxx xxxxxxxx.
6. NEUROTOXICITA
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx funkčních xxxx xxxx strukturních a xxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Předběžné xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx zkoumání xxxxxx aspektu. Navíc xx xxxxxxxx vzít x úvahu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx studiích xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx sloučeniny fosforu xxxxxxxxx xxxxxx toxicitu, xxxxx je posuzována xxxxxxxx X.37 x X.38 xx jednorázovém xxxx opakovaném podání xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx zjišťuje různými xxxxxxx, například podle xxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx imunitního xxxxxxx, xxxxx má xx xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Test xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx B.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinků. Xxxxxx xx měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x imunotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx další, xxxxxxxxx zkoumání tohoto xxxxxxx.
8. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x toxicitě, xxxxxxxxx specifické aspekty xxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx a výsledky xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se, xx bude x xxxxxx případě zapotřebí xxxxxxxx všechny xxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (studie xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). X některých xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx změny x xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx ukázat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx podáním (xxxxxx X.36).
Xxxxxxxxx x chemické xxxxxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx také poskytnout xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx absorpce xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx aplikace, xxxxxxxxxxx x distribuce xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx také xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x předcházejících xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nečistot, x její relevantní xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx studie x pro xxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxx skladování.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxxxxx médiu x xxxxxxxxxxx materiálu xx xxx předcházet xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx zprávě o xxxxx.
10. PÉČE X XXXXXXX
Pro xxxxxxxxxxxxx testy je xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, ve xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xx vhodná xxxxxxx xxxxxxxxx 22 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX xxx relativní xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx zvláště xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx tyto xxxxxxx xxxx podrobnosti o xxxxxxxxxxx podmínkách xxxxxxx x popisu xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx je x uvést xx x xxxxxxxxx zprávě x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx a xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jiný xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx v malých xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx více xxx 5 xxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x pokusech na xxxxxxxxx jsou xxxxx x xxxxxxx chovu x xxxxxxx x xxxxx zvířat chovaných x jedné xxxxx xxx xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx, tak xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX KRMENÍ
Xxxxxx xxxx vyhovovat všem xxxxxxxxxx výživy xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxxxxx studované xxxxx x xxxxxxx, může xx výživová xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx takové xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx výsledků. Používají xx konvenční xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx.
Příměsi x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx přítomny x xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX XXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx věnována xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx x omezení xxxxxxx x stresu zvířat xxx xxxxxxxxx např. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (X.1.xxx) nebo xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (B.1.tris). Xxxxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx menší xxxxx xxxxxx. Metoda xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x 70 % zvířat méně xxx metoda X.1.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx je známo, xx vyvolávají značnou xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivých xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx testů, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx toxicity (xxxxxx X.1, B.2 x X.3), xxx xxxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx X.11 a X.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxx testování xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx neprovést xxxx xxx omezit na xxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx to xxxxxxxxxx xxxxxxx zdůvodnitelné. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xx fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx xxxxx, na xxxxxxxxxx xxxxxx xxx provedených xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxxxx X.3) a xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx B.4) může xxx xxxxxxxx; látky, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx silné xxxxxxxxxx xxxx při xxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx B.4), xxxxxxx xxx dále testovány xx dráždění xxx.
Xx xxxxx neustále xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx stejnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx x budou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx méně xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx bez používání xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, musí být xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, následnou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx tam, xxx xx xx xxxxx.
12. XXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX
Při hodnocení x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx zvířatech a xxxxx xx vitro xx xxxxx mít xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx možná xxx x xxxxxxx xxxx; doklady o xxxxxxxxxxxx účincích x xxxx, pokud xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx testování.
Výsledky xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x označování xxxxxx x stávajících látek xxxxx účinků xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx vlastností xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx těmito xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxx na posuzování xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx byl xxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.1. AKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX)
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxx dávky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx orientačního xxxxx. Xxxxxxxxxx xx pozorované xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Tato xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Zvířata xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx dráždivých xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vehikulu. Doporučuje xx xxxx první xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx, další xxxxxx xx roztok x xxxxxxxxxx xxxxx, teprve xxxxx jako další xxxxxxx roztok x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx známy xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx něho xxxxxx relevantní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 tělesné hmotnosti; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx podávat xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxxxxxxx x xxxxxxx by xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, xxx xx zajistil xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxx xx xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx lokální xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx užívaných xxxxxxxxx kmenů. Xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx hodnoty.
1.2.2.2 Počet xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí. Xxxxx xx k xxxxxxxxx informace, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx hlodavci, mělo xx se xxxxxx xxxxxxx menšího počtu xxxxxx. Dávky je xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx testech xx xxxxx se vyvarovat xxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Volba xxxxx
Má xxx xxxxxxxxxx xxxxx hladin xxxxx, xxxxxxx tři, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx xxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků x mortality. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx vztahu xxxx dávkou x xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
S xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx limitní xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx skupinách 5 samců a 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud podaná xxxxx xxxxxxx uhynutí, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx studie.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx podle obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxx, xxx se projevy xxxxxx objeví a xxxxxx, a xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, xxx xx xxxxxx tendence k xxxxxxxx mortalitě.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx večer xxxx xxxxxx. X zvířat x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výměny xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; přístup x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx se xxxx xxxxxx orálně x xxxxx dávce. Xxxx-xx možno xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx aplikovanou dávku xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - podle xxxxx tohoto xxxxxx - xxxxxxx a xxxx zvířatům xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxx xx pozorování xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky, xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx samostatné xxxxxxx. Během prvního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx pozorování. Xx nezbytné sledovat x xxxxxxxxxx místní xxxxxx aplikované xxxxx x bezprostřední xxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx provádět xxxxxxx xxxxxxxx vyšetření. Xxxx pozorování xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx studii, xxxx. xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, slinění, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, odeberou xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
Xx dokončení xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx, podá xx xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx x pěti xxxxxxxxx druhého pohlaví x xxxxx zjistit, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrazně xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Pokud xx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx testovaného xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx na zvířatech xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx vynechat.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pak x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxx uhynutí. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx zvířat xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, která xxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxxx s ohledem xx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolané xxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx údajů xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, pokud xxxxxxxx, xxxx expozicí xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx chování, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, makroskopických xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- doba xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx jiná pozorování,
- xxxxxxx XX50 xxx to xxxxxxx, x kterého xxx xxxxxxxx xxxxx pokus, x xx pro 14xxxxx xxxxxxxxxx (s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx LD50, xxxxx xx lze xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx všech xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- rozbor výsledků (xxxxxxxx pozornost xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.1. xxx XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX OS) - XXXXXX XXXXX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací metody
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx účincích, xxxxx xxxxx následovat během xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx jedné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx s xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
X předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx se sekvenčním xxxxxxxx sledují účinky xxxxxxxx dávek xxx xxxxxx xxxxxxxx sondou x zvířat xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx na xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx odhadu minimální xxxxxxx xxxxx. Normálně xx v této xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx než xxxx xxxxxx.
V hlavní xxxxxx xx xxxxx xxxxxx orálně xxxxxx xxxxxxxx pěti samců x pěti xxxxx x jedné z xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Použitá xxxxx xx odvodí x předběžné xxxxxxxxxx studie, x xx jako xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxx" (viz xxxx X - Xxxxxxxxx úvod bod 1.2), xxx xx xxxxxxx.
Po podání xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx vybraná výchozí xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx žádné další xxxxxxxxx. Když na xxxxxxx úrovni dávky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, látka se xxxxx otestuje xx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxx xxxx když xxxxxxx toxická xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx znova xxxxxxxx xx nejbližší xxxxx úrovni xxxxx.
Xxxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx xxxxx" (xxx xxxx X - Všeobecný xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx možno xxxxx, aniž xx xxxxx x úhynu (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Zvířata xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx xx xxxxx, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivých xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx.
Xx xxxxx používat xxxxx xxxxxxx kmeny xxxxxxxxx zvířat. Na xxxxxxx xxxxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx orientační xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx stačí pro xxxxxx xxxxxx jedna xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Příprava x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx je xxxxx, xxxxxxxx xx roztok xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx uvážit xxxxxxx vodného xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx další xxxxxxx xxxxxx x jiných xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. U nevodných xxxxxxxx musí být xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem xxxx xxxxx něho jejich xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx by xxxxx neměl normálně xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx je možno xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx objemů xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xx xx xxxx minimalizovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx konstantní xxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx odebere xxxxx xxxx xxxxxx; xxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxx. X xxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látka se xxxx xxxxxx orálně x xxxxxx xxxxx. Xxxx-xx možno podat xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx podání xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se látka xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx období - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx poskytnout.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx se alespoň 24 xxxxx před xxxxxxx dávky xxxxxxx xxxxxxx. Všechna zvířata xx xxxxxxx pozorují x xxxxx zjistit xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx sedm dní; xxxxx přetrvávají xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, zvíře xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Jestliže zvolená xxxxxxx xxxxx nevyvolá xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx uhynutí, xxxxx xx nutné xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx vmezeřených xxxxxx dávek. Xxxxx xxxxxx by xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx xxxxxx, x x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkách. Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxx první xxxxx 500 xx.xx-1. Xxxxxxxx xx po výchozí xxxxx nepozorují xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx nedojde x xxxxxxx xxx 2000 xx.xx-1, je xxxxxxxxxx studie xxxxxxxx x hlavní xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx jsou xxx použití xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx těžké xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx nižší xxxxx (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx xxxx zvíře xxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx xxx další xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx určenými xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx je xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx více xxx 5 zvířat.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx a xxxxxx by být xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx dávky je xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx, xxxxx bude užita x testu, má xxx zvolena x xxxxx xx 4 xxxxxxx úrovní xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx výchozí úroveň xxxxx xx xxxx xxx xx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zřejmou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx utracení x xxxxxxxxx xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxxxxx, xxx xxxx xxx zaznamenána. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx nevyvolá zřejmou xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx znovu xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Zvířata xx však měla xxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx bylo xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xx projeví xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx být xxxxx xxxxx testována xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Opět xx zvířata, která xxxx xxxxx humánně xxxxxxx, xx měla xxx xxxxxxxxxx xx xxxx pozorovací období.
Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxx reakci zvířat xx xxxxxxxx.
Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, rychlosti xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx doba, xxx xx xxxxxxx xxxxxx projeví x xxxxxx a doba xx uhynutí, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx příznaků.
Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx den xx podání xxxxx x nejméně xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx vykazující xxxxxx známky xxxxxxx xxxx výrazné xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx utratit. Častější xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx několika xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx zvířata xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Test xxxx xxx ukončen x xxxxxxx, když xx xxxxxx, že byla xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Pozorování se xxxxxxxx na xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx látky, xxxxx xx xxxxx 3 xxx x xxxxx xxxxxx týdně. Zvířata, xxxxx uhynou xxxxx xxxxx, i xx, xxxxx xxxxxxxxx do xxxxx xxxxx, xx xxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx to indikováno, xxxxxxxx xx tkáně xxx histopatologické vyšetření.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky.
X xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5 xx.xx-1 (xxxx xxxxxxxx orientační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx akutní toxicitu xxxxxxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx x xxxxxxxxxx x hlavní studie xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx úroveň xxxxx. X xx xxxx xxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxx s příznaky xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; pro xxxxxx xxxxxx, xxx xxx pozorován xxxxxx xxxxxxx účinek, který xxx xxxxxxx testované xxxxx; časový xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx xxxx než xxx, je xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenat xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzhledem ke xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxxxxxxxxx úrovní xxxxx,
- xx formě xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx utracených xxxxx xxxxx; počet xxxxxx x příznaky toxicity; xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx účinků),
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx zvířata xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx x kritéria xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx utracení xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- všechny histopatologické xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkové hladiny xxxxxxxx x xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx
Xxxxx | Výsledky | Xxxxxxxxxxxx |
5 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % přežití; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, které xxxx xxxxx xxxxxxxx Látky, xxxxx xxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx xxx 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx | Látky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx velmi xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx 5 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx-1 | |
500 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx. Xxx výsledky x 50 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, které xxx považovat za xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx toxicity Xxx xxxxxxxx u 2000 xx.xx-1 | |
2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx s xxxx xxx zřejmé toxicity | Xxx xxxxxxxx x 500 mg.kg-1 Xxxxx, xxxxx nemají významnou xxxxxx xxxxxxxx |
X.1. tris XXXXXX XXXXXXXX (ORÁLNÍ) - XXXXXX XXXXXXXXX XXXXX XXXXXX TOXICITY
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxxxx rizika, xxx xxx účely xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx používá tří xxxxx stanovených dávek x xxxxxxxxxxx odstupech, xxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx toho xxxxxx popsaný xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx tří xxxxxxxxxxx pevně xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxx xxxxxx buď xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nebo xxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, pokud xx žádoucí xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxxx stanovené xxxxxxxxx xxxxx a xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx XX50. Xxxxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx smrt xxxxx xxxxxx xx x x xxxx xxxxxx xxxxxxx kritériem xxxxxx. Xxxxxxxx testu mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx trvání xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx B.1. Hlavní výhodou xxxx metody xx xxxxx xxxxxxxx zvířat xxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (orální)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Princip xxxxxxxxx metody
Látka xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx stanovených xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx kroku se xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Přítomnost xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx vztahu x xxxxxxxx xxxxx rozhodne x xxxxxx kroku, x.x.
- není xxxxxxxxx xxxxx další xxxxxxxxx;
- xxxxx krok xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxx druhého pohlaví;
- xxxxx krok bude xxxxxxxx x vyšší xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, označena tak, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mohla xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxx x klecích xx xxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx pozorování xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx zvířatům x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx kanylou.
Pokud xx xx třeba, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x jedlém xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x jiných xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxx xxxxxxx charakteristika; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx stanovena xxxxx xxxx testem.
Zvířata xxxx před aplikováním xxxxx po určitou xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. potkani xxxx xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx neomezuje.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx důvody proti xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí.
Na xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxx krok xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxx kterékoli xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxxxxx xx tří xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 x 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Výchozí úroveň xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx uhynutí alespoň xxxxxxxxx xxxxxx, jimž xxxx látka xxxxxx. X závislosti xx xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 1.
Xxx xxxxx xxxxxxx x výchozí xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx dostupné xxxxxxxxx, xxxxxx informací x xxxxxx struktury x xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx úmrtnost xx xxxxxxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxx úrovni dávky (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx se xxxxxxx limitní xxxx. Xxx xxxxxx žádné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx se - s xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata - xxxxxx výchozí xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx test x třemi xxxxxxx xxxxxxxxx úrovněmi xx xxxx 25, 200 x 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti. X xxxxxx případech se xxxx xxxxxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx aplikovat xxxxx, x kterých xx xxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx.
Xxxxxx interval mezi xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xx trvání x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Testování xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx další xxxxx je xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx test x xxxxxxx úrovní xxxxx xx xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx provádí xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví. Pokud xxxxx k uhynutí xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx, xxx další xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 mg.kg-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, xxxxx případů xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx pozorování by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxx xxxxxx xxxxxxx x délky xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dobu, xxx xx objeví x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx toxické příznaky. Xxxxxxx pozorování jsou xxxxxxxxxxxx zaznamenávána: záznamy xxxx xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé zvíře.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxxx jsou zvířata xxxx xxxxxxx zkušební xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx látky jsou xxxxxxx xxx potravy xx xxxx xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Xxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxx xxx - x závislosti xx délce xxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířatům potravu x xxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, který může xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxx. U hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx není xxxxx xxxxx dávku xxxxx xxxxxxxx, xx možné xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 hodin.
Podrobnosti xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxx den (den xxxxxxxx) xxxx častěji, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx zvířat na xxxxxx xxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, nebo xxxxxxx vykazující xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stresu, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxx zvířata xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xx xx xxxx zvířata xxxxxxxx x humánních xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx zvířata xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xx xxxx x xxxxx, na xxxxx x xxxxxxxxxx, x xxxx xx dýchacím, xxxxxxxx, vegetativním x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Pozornost xx xxxxx věnovat xxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargie, spánku x xxxxxx.
Xxxxxxx pozorování xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx každé xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxx hmotnost
Všechna xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx nejméně xxxxxx xxxxx. Počítají xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxx přežívající xxxxxxx zvážena xxxx xxx, než xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Xxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx získání xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx mikroskopické xxxxxxxxx orgánů vykazujících xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zvířat přežívajících 24 a xxxx xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ
K dispozici xxxx xxx xxxxx x každém xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxx xxxxx shrnuty xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, časový xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx poučení x xxxxxxxxxxxx výsledků xxx klasifikaci xx xxxxxxx x Dodatku 2.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x pokusu obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx stav xxxxxx, xx-xx xxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx jiné xxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (včetně xxxxx x xxxxxx);
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx dávky.
Výsledky:
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx každého xxxxxxx xx tabulek xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx (xxx. zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, charakter, xxxxxxxxx a trvání xxxxxx);
- xxxxxx x xxxxxx průběh xxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxxxxxxxxxx x každého xxxxxxx;
- pitevní xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx k xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx a interpretace:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 423.
DODATEK 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Jak xxxx uvedeno v xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xx ze xxx pevně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx úrovní, xxxxx xxxxxxxxxxxxx způsobí xxxxxxx xxxxx x některých xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx struktury x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx toxicity x
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.
2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx stanovují xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx dávku. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx zvířat postupuje xxxxxxxxx tak, jak xxxxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx uhyne pouze xxxxx zvíře druhého xxxxxxx, obvykle se xxx dále xxxxxxxxx. Xxxxx však xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx pitvou xxxxxx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx. Jestliže xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx pokračovat x xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx dávky.
4. Xxxxx xx dávce 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx uhyne jedno xxxxx xxxxxxx pohlaví, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx hodnota XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx reakce xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX50 ve xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx, xxxx xxxxx xxx podnětem xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
5. Xxxxxx xxxxxxxx testování x xxxxx doplňkovými xxxxx stanovenými xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx xx možno xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx dávky x daném xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx další xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx udána xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené jako xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu uhynulých xxxxxx xx x xxxxxxxxx pokračuje ve xxxxx šipek až xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Klasifikace xx provede xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti
V xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx zvířat xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx směru xxxxx xx do dosažení xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Pokračování xxxxx x příslušnou doplňkovou xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx provede xx xxxxxxx konečných hodnot xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x výchozí dávkou 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx jako druhé).
Pod xxxxxxx xx počet xxxxxxxxx nebo utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx uhynulých xxxxxx xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx šedého xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace se xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx vyhodnocení uvedeného x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x příslušnou xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx testovací xxxxxxxx 1
X rámečcích xx xxxxx dávka, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako první, 2 - pohlaví xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx je počet xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Šedé xxxxxxx xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" x xxxxxxxxxx tohoto dodatku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx XX50 xx větší xxx hodnota x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx dávkou 25 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
(b) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx postup s xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx tělesné hmotnosti
Interpretace xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx variantě 1
x) Xxxxxxx dávka 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
x) Xxxxxxx dávka 2000 xx/xx xxxxxxxxx
B.2. XXXXXX XXXXXXXX (INHALAČNÍ)
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx získat údaje x xxxxxxxxx velikosti xxxxxx, xxxxx xxx, xxxxxxx tání, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x výbušnosti (jsou-li xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Několik xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x xx xxxxx koncentraci x xxxxx skupině. Potom xx xxxxxxx xxxxxxxx x zjišťují se xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x takových xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých nebo xxxxxxxxxx vlastností.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a krmení, x jakých budou xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx to nevyžaduje xxx používaného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxxxx xx částice xxxxxxxxx velikosti. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx skupina x xxxxxxxxx. Xxxxx xx užije xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, je možno xx využít.
1.3.2 Experimentální xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xxxxxxx se xxxxx užívaných pokusných xxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx nejméně 10 xxxxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx musí xxx nullipary x xxxxx xxx březí.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vyšších xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, mělo xx xx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xx třeba xxxxxxx volit a xx xxxxx zaručit, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx toxické dávky. X těchto xxxxxxx xx třeba vyhnout xx podávání letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, a mají xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, aby xxx x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxxxxx x, xxxxx je xx xxxxx, musí umožnit xxxxxxxxx XX50 s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Nedojde-li po 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx plynu x koncentraci 20 xx.x-1 xxxx xxxxx xx aerosolu xxxxxx xxxx pevné xxxxx x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (xxxx - x případech, xxx xxxx xxxxxxxxxxx není xxxxx použít v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx maximální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx k xxxxx xxxxxxxxx vyvolané sledovanou xxxxxx, považují se xxxxx xxxxxx za xxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba expozice
Xxxxxxxxx xxxx expozice xx xxx 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxx zařízení, xxxxx xxxxxxxx dynamické xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx rozdělení xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx třeba xx konstruovat xxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x aby xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx by neměl x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx příjem xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx měla xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze ji xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx jejich vzniku x xx trvání xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx potřeby prodloužit. Xxxxxxxxxxx je xxxx, xxx xx xxxxxx x opět xxxxxx xxxxxxx otravy, xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx xx patrna xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Zvířata xx bezprostředně xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xx xxxx 4 hodin xx xxxxxxxx rovnováhy koncentrace xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx má xxx 22 oC ± 3 x X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Udržování xxxxx negativního xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx unikání xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Během xxxxxxxx xx xxxxxxxx potrava xxx voda.
Používají xx xxxxxx xxxxxxx xxx vytvoření x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx nejrychleji. Konstrukce x xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře.
Je xxxxx xxxxxxxx měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx),
(x) xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx alespoň xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx častější xxxxxxxxxxxx). Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx hodnoty x xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx regulace xxxx xxxxx dosáhnout, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx týká xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx distribuce velikosti xxxxxx tak často, xxx to pokus xxxxxxxx (ale xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu),
(x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx skončení xx xxxxxxxxxx provádějí x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxx individuální protokol. Xxxxx xxxxxxx dne xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Minimálně xxxxxx každý pracovní xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat nebo xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, dýchání x krevního xxxxx, xxxxx funkce autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x kómatu. Xxxxxxx uhynutí xx xxxxx zachytit xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x v xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx, která xxxxx pokusu uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xx zvláštním xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx i xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají x odeberou xx xxxxxxxxx tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
2. XXXXX
Xxxxx se sestaví xx xxxxxxx. Z xx musí xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx přežijí xxxx xxx jeden xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx stresu xxxx x bolestem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxx. LC50 se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxxxxxxx aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx systému x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx je xxxxxxxx. Xx xxxxx popsat xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx vzduchu, xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx hodnotami a xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxx:
a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx;
x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu;
x) xxxxxxxxx koncentrace (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Xxxx.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látek x roztoku (xxxx. xx xxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, xxxxx je xx xxxxx, koncentraci xxxxxx látky xx xxxxxxxx.
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx;
e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx;
x) hmotnostní xxxxxx aerodynamického průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD);
x) xxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx;
h) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (tj. xxxxx zvířat, xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx);
- xxxx xxxxxxx xxxxx expozice xxxx xx jejím xxxxxxxx, xxxxxx x kritéria xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx;
- všechna xxxxxxxxxx;
- xxxxxxx XX50 pro každé xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x uvedením metody xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (pokud je xxxxx xxx stanovit);
- křivka závislosti xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) x její xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx);
- pitevní xxxxxx;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- diskuse xxxxxxxx (xx zvláštním xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnotu LC50);
- interpretace výsledků.
B.3. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xx účinky x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se nemají xxxxxxx v takových xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx následkem xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Nejméně 5 xxx před xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxx 24 xxxxx xxxx zahájením testu xx xxxx xxxxxx xx zádech xxxxxxx xxxx oholí. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx se xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) kůže, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Při xxxxxxxx x pevnými xxxxxxx, případně připravenými x práškové formě, xx xxxxx látku xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx vehikula xx xxxxx xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xx měl xxxxx xxx, x xxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx dostat xx xxxxx x xxxxxxx xxxx, x xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx kůží. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx dospělých xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxx použít x xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xx důvody. Xx xxxxx volit xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx začátku xxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % střední xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx samic, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx toxicity xxxxxxx xxxxxxx druhů, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx zvolit x je třeba xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testované xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Má být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx vznikly xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x mortality. Xxx xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx nebo leptavé xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx xx znázornění xxxxxx mezi xxxxxx x účinkem, x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Lze xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx skupinách 5 xxxxx x 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx postupů. Xxxxx látka xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx úplnou studii.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx má xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx však xxxxxxxx xxxxxxxxx. Měla xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu otravy, xxxxxxxxx vývoje otravy x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx příznak xxxxxx xxxxxxx x vymizí x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx patrná xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx uhynutí.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx plochu, xxxxx xxxx asi 10 % celkového povrchu xxxx. Xxx vysoce xxxxxxx látky může xxx xxxx xxxxxx xxxxx; mělo xx xx xxxx aplikovat xxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx část této xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x testovaná látka xxxxxxxx a xxx xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx pro omezení xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx nelze xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky testované xxxxx, pokud možno xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx systematicky zaznamenávat. Xxx xxxxx xxxxx xx třeba vést xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xx zvířata xxxxxxxx xxxxx. Nejméně xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další každodenní xxxxxxxxxx x odpovídající xxxxxxxx xxxx sloužit xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. pitvou nebo xxxxxxxxx uhynulým xxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zvířat.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxxx, xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx x sliznic, x také xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, spánku x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxxx až xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx tkáně xx xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého xxxxxxx
Xx dokončení studie xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x pěti xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, aby xx zjistilo, zda xxxxxxx druhého pohlaví xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx případech xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví do xxxxxxx. Z ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku pokusu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx projevy xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a pitevních xxxxxx. Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx. Změny xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx x zaznamenat, přežijí-li xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxxxx xxxxxxxx utracena x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx touto látkou. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, klinických xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, změn xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx způsobu xxxxxxxx xxxx a xxxx xxxxxx: okluzivní xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx je xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx pokusných xxxxxx,
- tabulky xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx humánně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx exponovaných xxxxxx),
- doba xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx látky, xxxxxx x kritéria pro xxxxxxx utracení xxxxxx,
- všechna pozorování,
- xxxxxxx LD50 xxx to xxxxxxx, x kterého byl xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx metody xxxxxxx),
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro XX50 (xxxxx xxx lze xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx mortality na xxxxx x její xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx testů xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vypočtené xxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx z humánních xxxxxx xxxxx testu),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.4. XXXXXX XXXXXXXX (KOŽNÍ DRÁŽDIVOST)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxx
Xx třeba xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx informace x xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx reakce. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx je vhodný xxxxx test, xxxxxx xx xxxxxxx zvířeti xxxx xxx není xxxxxxxxx další xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX rovné či xxxxx 2 nebo xX rovné xx xxxxx 11,5) není xxxxx testovat xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx třeba xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
x) Jestliže xxxx dostupné xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vitro xxxxx, xxxx vyžadován xxxxx test.
x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx látka x xxxxx xxxxxx toxicity xxx xxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x nebylo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, není xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx dráždivost. Xxxxxx xxxx třeba xxxxxxxx xxxxx vysoce toxické xxx dermální xxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx dávce xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx jako xxxxx vlastní xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx x následně xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx a bolesti xx xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zvířat xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx dbát xx to, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. abrazí). Xx xxxxx xxxxxx pouze xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx mají xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx obdobích xxxx. Testované xxxxx xx xxxxx nanášet xx xxxx zóny xxxxx xxxxx srsti.
Xxx pokusech x xxxxxxx látkami, případně xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxx xxxxxxx x kůží. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx brát x úvahu vliv xxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxx testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx x xx xxxxx screeningových testů xxxx jiných xxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx vyvolávat nekrózu (xxxx. je leptavá), xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx tohoto xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxx tři xxxxxx xxxxxxx zvířata. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Pokud xxxxxx xxxxx zvláštní xxxxxx xxx xxxx postup, xxxxxx xx na xxxxxxxxx místo xxxx 0,5 xx kapaliny xxxx 0,5 g xxxx nebo polotuhé xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx dostatečně dlouhá, xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vratnost xxxx xxxxxxxxxx účinků. Xxxxxxxx xxxx třeba xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx xx aplikaci.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x klecích. Testovaná xxxxx xx xxxxxx xx malou plochu (xxx 6 xx2) xxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx mulu xxxxxxxxxxxx nedráždivou náplastí. X xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxx nanést xxxxxxx xxxxxxxxxx látku xx mul, x xxx xxx xxxxxxxxx xx kůži. Xx xxxx xxxxxx expozice xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx tomu, aby xx xxxxx xxxxxxx x xxxx x xxxxx přijmout testovanou xxxxx orálně xxxx xx xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx expozice xx třeba xxxxxxxxx xxxxxx testovanou látku xxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx rozpouštědlem, xxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Doba xxxxxxxx xx xxxxxxx 4 xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx zkrátit délku xxxxxxxx (xxxx. na 1 xxxxxx nebo 3 minuty). Při xxxxxxx testování je xxxxx použít xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 plátky xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx akutní xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. První plátek xx odstraní po 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx pozorována xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx druhý plátek xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx v xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx neodporuje principu xxxxxxxxx zacházení, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx, že xxxx xxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx s xxxxxxxx xxxxxxx dvou xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xx xxxx kontraindikováno x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. jestliže po 4 hodinách xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).
Xxxxxxxx je xxxxxxx xxxxx reakce (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxxx, xx test xxxxxxxx ukončen.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx delší xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx očekávanému xxxxxxx použití x xxxxxxxx x člověka.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x stupeň xxxxxx xxxx xx 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 hodin xx odstranění plátku x testovanou xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx klasifikuje x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 1. Xxxxxxxx nebylo xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx dále. Vedle xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx podrobně xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx léze xxxx xxxxxxxxx (nevratná xxxxxxxxx kožní xxxxx) x jiné toxické xxxxxx. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx zabarvením xxxx testovanou látkou, xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx měření tloušťky xxxxx řasy.
2. ÚDAJE
Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx rovněž xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx stupně x povahy podráždění xxxx, reverzibilitu nebo xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx chovu, krmení xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxx obvazu: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxx tabulky xxxxx x xxxxx reakci xxx každé jednotlivé xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (za 1, 24, 48 x 72 hodin atd. xx odstranění xxxx),
- popis xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- popis xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx podráždění xxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
4. XXXXXXX
4.1 Stupnice xxxxxx xxxx
Xxxxxxx | |
1. Xxxxxxxxx erytému x xxxxxxxxx | |
1.1 Xxxxx erytém | 0 |
1.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx erytém | 2 |
1.4 Xxxxx xx výrazný xxxxxx | 3 |
1.5 Xxxxx xxxxxx (silné zrudnutí) xxxx tvorba příškvaru (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx erytému | 4 |
2. Hodnocení xxxxx | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
2.3 Lehký edém (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx je ohraničena xxxxxxxxx vyvýšením) | 2 |
2.4 Xxxxx edém (xxxxxx xxxxxxxx asi x 1 xx) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (zduření xxxx xxx 1 mm x xxxx přesahujíce xxxxxxx exponované xxxxxx) | 4 |
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx indexu kožní xxxxxxxxxxx (IKI)
XXX xx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx erytém x xxxx x jednotlivých xxxxxxxxxxx odečtu x xxxxxxx xxxxxxx a x takto získaných xxxxxx u všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx aritmetický xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; IKI ≤ 3 |
xxxxxxx dráždí | 3 &xx; XXX ≤ 5 |
xxxxx xxxxxx | XXX &xx; 5 |
X.5. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXX DRÁŽDIVOST)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
1.1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx látce x xxxxx snížit xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx podmínek, které xxxxx vyvolat xxxxx xxxxxx. X tomu xxxxx být užitečné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx. xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx látky, xxxxx - xxx xx xxxxx očekávat - xxxxxxxx v xxx xX xxxxx či xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5, není xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxx závažná xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx validizovaných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x prokázanými xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx silně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx dále xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, protože lze xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx budou mít xxxxxxx xxxxxx na xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx metodou.
x) Xxxxxxxx ze studií xxxxx dráždivosti. Xxxxx, xxxxx vykazovaly zřejmé xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx ve xxxxxx xxxxx dráždivosti, není xxxxx xxxx testovat xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx lze xxxxxxxxxxxx, xx budou xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx se x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx oka xxxxxxxx xxxxxxxx zvířatům, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x reakce xx xxxx popíše, xxx xxxx xxxxx provést xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx možné xxxxxxxxxxx zhodnotit xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
24 hodin xxxx xxxxxx se x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx provede xxxxxxxxx xxxx očí. Xxxxxxx, x xxxxxxx se xxxxxx podráždění očí, xxxx defekt nebo xxxxxxxxx rohovky, se x xxxxxxxxxxx vyloučí.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Ačkoliv xx xxxxxxxxx xxxxx druhy xxxxxxxxx zvířat, doporučuje xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet xxxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx test xx jediném xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx naznačují, že xxxxx má výrazně xxxxxxxx (reverzibilní xxxxxx) xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxx xxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx postupu, xxxx xxxxx další xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aspektů xxxxx xxx případně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx případech xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx použití xxxxxxx zvířat.
1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx
Při testování xxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,1 xx. X tuhých látek, xxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx objem 0,1 xx xxxx xxxxxxxx xxx 0,1 x (xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx). Xxxxx-xx xx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx na xxxxx prášek. Xxxxx xxxxxxxxx látky se xxxxxxx xx xx xxxxxxxx zhutnění, xxxx. xxxxxxxxxxxx xx měrnou xxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nádobkách xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx 0,1 xx xxxxx x xxxxxxxxxx xx do xxx xxxxx xxxxxx xxx kapaliny.
1.2.2.4 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků. Xxxxxxxx xxxx stačí 21 xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x klecích. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx spojivkového xxxx xxxxxxx xxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx odchlípne xx xxxx bulvy. Xxxxx xx xxx xxx na 1 xxxxxxx lehce k xxxx xxxxxxx, xxx xx žádná xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, slouží xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, lze xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Aby xxxx xxxxxxxxx, xx následkem xxxxxxxxxx nedojde k xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx na testovanou xxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxx typ, xxxxxxxxxxx a dobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx oko.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 24 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 hodinách xx xxxxx oči xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
U některých xxxxx, které xxx xxxx testovací metodě xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x použitím xxxxxxx, xxxxxx se xxxx po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx. X těchto xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx xx instilaci xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxx x použitím xxxxxxxx objemu xxxxxxxx x xxxxxxxxx průtoku, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx
Xxx xx xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 a 72 hodinách. Xxxxxxxxxxx-xx xx xx 72 xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxxxxx postižení xxxxxxx xxxx xxxx příznaky xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx vývoj xxxx x xxxxxx vratnost xx xxxxxxxxxx. Vedle xxxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xx třeba zaznamenat x xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx.
Intenzitu xxxxxx xxx xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x příloze x xxxxxxxxxx. (Klasifikace xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx možnosti xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xx, kdo xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je možno xxxxxx ilustrovanou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx usnadnit xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, ruční xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx zařízení. Xx xxxxxxxxxxx pozorování po 24 hodinách je xxxxx oči některých xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx mimoto xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx pro xxxxx pokusné zvíře xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x daném intervalu xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx popis xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu obsahuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),
- x xxxxxxxxx xxxxx výčet xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)
- xxxxx všech xxxxxxxxxx závažných xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, charakteru a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx,
- xxxxx metody xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 a 72 xxx.), xxxx. xxxxxxxxxx lampa, oční xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx atd.,
- xxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. DODATEK
4.1 Xxxxxxxx xxxx xx oku
Hodnota | |
X. Xxxxxxxx - otok | |
Xxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx mžurku | 1 |
Xxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx | 2 |
Edém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxx | 3 |
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xx polovinu xxxx xxxxx | 4 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxx | |
Slzení xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx vnitřním xxxxxx) | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček a xxxxx x xxxxxxxxx xxx | 2 |
Slzení xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx okolí xxx | 3 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxxx | |
Xxxxx xxxxxx normální | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxx cévní xxxxxx, xxxxxxxxx jednotlivých xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx | 2 |
Difuzní xxxxx xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Duhovka - xxxxxxxx | |
Xxxxxxxx nejsou xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, překrvení, xxxxx, xxxxxxxxxxx cév xxxxx xxxxxxx (jedna xxxx více xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx | 1 |
Xxxxxx na xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx | 2 |
x duhovce (xxxxx nebo xxxx xxxxxx charakteristik) | |
X. Rohovka - xxxxxx neprůhlednosti | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx diseminovaného charakteru, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx, snadno xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxx xxxxxxxx | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx opalescence, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxxxx stěží viditelný | 3 |
Úplná neprůhlednost xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx neviditelná | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xx pozorovatelná, ale xxxx plocha je ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; plocha xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx rohovky | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx dráždivosti (XXX)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx oční xxxxxxxxxxx (IOI) xxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vypočte podle xxxxxx
XXX = 2.(X + B + C) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx xxxxx oční xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx xxxxxxxx hodnocení xx vypočte xxx xxxxx interval xxxxxxxxx xxxx xxxxxx z XXX.
Xxxxxx xxxxx xxxx dráždivosti XXX xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX zjištěnému v xxxxxxx xxxxx
4.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx xxxxxx | 30 - 59,9 |
xxxxx xxxxx xxxxxx | 60 - 79,9 |
extrémně xxxxxx | 80 – 110 |
B.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. METODA
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx zjišťování xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxx jsou považovány xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x oblasti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Neexistuje xxxxxx xxxxxxxxx metoda, která xx dostatečně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxx x xxxxx xx xx xxxxxx xxx všechny látky.
Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx schopnosti průniku xxxx.
Xxxxx na xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx s xxxxxxxx, ve kterých xx alergický stav xxxxxxxxxx rozpuštěním xxxx xxxxxxxxxxxxx testované látky xx Xxxxxxxxx kompletním xxxxxxxx (FCA), x xx xxxxx bez xxxxxxxx.
Xxxxx x xxxxxxxx xx zdají xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx senizibilizačního xxxxxx xxx lidskou xxxx než xxxxxx xxx Freundova xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) je velmi xxxxxxxxx test x xxxxxxxx. Xxxxxxx k xxxxxxxx schopnosti látky xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dalších xxxxx, xx GPMT xxxxxxxxx za preferovanou xxxxxxxx s adjuvans.
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx bez xxxxxxxx (xxxxxxxx se xxxx Xxxxxxxxxx testu) xxxxxxxxxx xx xxxx citlivé.
X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx zdůvodnit xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx aplikací xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x maximizačním xxxxx xx morčatech. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx důvody.
X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxxx (GPMT) x Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx x jiných xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx jsou odborné xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx uznávanou xxxxxxx xx pozitivní xxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx senzibilizátor xxx xxxxxxx testování xx morčatech. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxx x této xxxxxxxxx kapitole.
1.2 Definice
Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx. X člověka xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx (velkými puchýři) xxxx xxxxxxxxx těchto xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx druhů xx xxxxx xxxxxx lišit x xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx zarudnutí xxxx otok.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxx navodit xxxx přecitlivělosti.
Xxxxxxxx xxxxxx: období nejméně xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx kterého xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Provokační expozice (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx přecitlivělosti.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Citlivost x xxxxxxxxxxxx použité xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx šest xxxxxx s použitím xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx.
X správně xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na mírné/střední xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % u xxxxxx x adjuvans x xxxxxxx 15% x xxxxxx bez xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx XXX | Číslo EINECS | xxxxxxxx název | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | alfa-hexylcinnamaldehyd |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | kaptax |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Mohou xxxxxx xxxxxxxxx, xxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx použity xxxx kontrolní látky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx případně xxxxxxxxxxx aplikací (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx období 10 až 14 xxx (indukční období), x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx provokační xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx kožní xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x testovaných xxxxxx xx porovnán x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x kontrolních xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozici x xxxx xxxxxxx a xx xxx aplikována xxxxxxxxxx dávka.
1.5 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxx, xxxxxxx xx xx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx rozpouštědla xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.1 Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (GPMT)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxxxxxx srsti xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx depilací, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx třeba dbát xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx a na xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Počet x pohlaví
Lze xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Samice musí xxx nullipary a xxxxx xxx březí. Xxxxxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxxx 10 zvířat x xxxxxxx 5 xxxxxx xx třeba x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx xxxxx než 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxxxxx, doporučuje xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 kontrolních xxxxxx.
1.5.1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx expozici se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, kterou zvířata xxxxxxx dobře xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx působící xxxxx xx střední xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx zvířatech. Xxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx použití xxxxxx, xxxxxx bylo xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Popis xxxxxxx
1.5.1.3.1 Indukce
Xxx 0 - Testovaná xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx linie:
Xxxxxxx 1: Freundovo xxxxxxxxx adjuvans (XXX) xxxxxxx x vodou xxxx xxxxxxxxxxxxx roztokem x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx připravená xx xxxxx XXX x vodou xxxx xxxxxxxxxxxxx roztokem v xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxx xxxxxxx 3 se xxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x XXX xx xxxxx fázi. Xxxxx rozpustné v xxxxxxxx xxxx látky xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx FCA. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 3 xx být xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 2.
Xxxxxxx 1 a 2 xx aplikují xxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx xxxxx, zatímco xxxxxxx 3 xxxxxx xx kaudální xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx x testovaných xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Injekce 2: xxxxxxxx xxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) se xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. den - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx dvacet xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx aplikací, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxx kůži, xx na xxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx sodného xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx místního xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx xx napuštěn filtrační xxxxx (2 x 4 xx), který xx xxx xxxxxxx xx testovací xxxxxx x fixuje xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx látky xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx plocha xx xxxxx xxxxx srsti. Xxxxxxx vehikulum xx xxxxxx x zafixuje xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 48 xxxxx.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. den - Xxxxxxxxx a kontrolní xxxxxxx
Boky exponovaných x xxxxxxxxxxx zvířat xxxx zbaveny xxxxx. Xx jeden bok xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx xx třeba). Xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx obvazu xxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx: testované a xxxxxxxxx xxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 hodin xx odstranění xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxxxx, xxxxxxxx ostříhá xxxxxxxx oholí x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx dalších třech xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx od xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx dávky) xx xxxxxxxx kožní xxxxxx x zaznamenává xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx;
- přibližně 24 xxxxx po tomto xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorování a xxxxxx reakce kůže (72 xxxxx).
Xxxxxxxxxx xx systém "xxxxxxx xxxxxx" x testovaných x kontrolních xxxxxx, xxx pozorující xxxxx xxxx, xxxxx zvíře xxxx senzibilizováno x xxxxx je kontrolní.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx výsledků xxxxx xxxxx provokace (tj. xxxxxxxxx provokace), provede xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx potřeby znovu x kontrolní xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx xxx také xxxxxxx xx původní xxxxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx nálezů xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx řas.
1.5.2 Buehlerův xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx dospělá albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx laboratorní xxxxxxxx xx dobu xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx zvířata xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Odstranění xxxxx xx provede xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, v xxxxxxxxxx xx použité xxxxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kůže. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx testu x xx xxxxx xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx morčat.
1.5.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxx a/nebo xxxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxxxx xx minimálně 20 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Koncentrace xxxxxxxxx xxxxx použitá xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx upraví xx xxxxxxx úroveň, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, ale xx velmi silné xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x nesenzibilizovaných xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X případě xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx koncentrace xxxxxxxx x xxxxxxxxxx pokusu xx dvou nebo xxxxx zvířatech.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx rozpustné xx vodě je xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx nedráždící xxxxxx xxxxxxxxxx jako xxxxxxxx. Xxx jiné xxxxx xx preferován 80% xxxxxx xxxxxx/xxxx xxx indukci x xxxxxx xxx provokaci.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Testovaná xxxxxxx
Jeden xxx xx zbaven srsti (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx xxxx odbornými xxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx na testovací xxxxxx a přidržován x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
Xxxxxx plátkového xxxxx xxxx xxx okluzivní. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx, x plochou xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Xx preferováno xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx zajistila okluze. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxxx, mohou být xxxxx xxxxx expozice.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Jeden xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx, a xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx test je xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx překrývacím xxxxxxx xxxx komůrkou x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx možno xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupina xxxx xxxxx, xxx použít xxxxx kontrolní xxxxxxx xxx aplikace.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní skupina
Xxxxxx aplikace xxxx x xxx 0 xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx plochu xx xxxxxx boku (xxxxxxxx xxxxxxxx srsti) 6. - 8. xxx a xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxx xxxx neošetřeného xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plátky xxxx komůrky xxxx xxxxxxxxxxx x kontaktu x xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu 6 hodin.
1.5.2.3.3 Pozorování x hodnocení
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx o tři xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxx kožní xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx uvedené x dodatku;
- xxxxxxxxx po xxxxxxx 24 hodinách (tj. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx aplikaci provokačního xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Doporučuje xx systém "slepého xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx zvíře xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx je xxxxxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx nutná xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx znovu x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx původní xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx reakce x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx postupů, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). K xxxxxxxxx xxxxxxxx nálezů xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření nebo xxxxxx xxxxxxxx kožních xxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX (GPMT X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx se sestaví xx xxxxxxx, ze xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx reakce xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx screeningový, xx třeba xxxxx xxxxx xxxxxx testu xxxx jeho xxxxxx (xxxx. XXXX - xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx) včetně xxxxx xxxxxxxxxxx postupu x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx (XXXX x Buehlerův xxxx)
Xxxxxx o xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx zvířat;
- xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Experimentální podmínky:
- způsob přípravy xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx;
- podrobné xxxxxxxxx o xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- výsledek xxxxxxx studie se xxxxxxx x indukčních x provokačních xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx testované xxxxx;
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxx xxx indukci x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, její xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx včetně xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků;
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
4. LITERATURA
Tato xxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Stupnice Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx xxxx skvrnité xxxxxxxxx kůže;
2 = xxxxxxx výrazné x splývající xxxxxxxxx xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx senzibilizace
Xxxxx xxxxxxxxx pozitivity při xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx
xxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
mírný xxxxxxx (XX. st.) - 9 - 28 % xxxxxx
xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx
xxxxxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 81 - 100 % zvířat
X.7. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx pozorují, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx provede x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx pokusu; xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx konec xxxxxx, xx utratí a xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá mladá xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx do kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx tak, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx klece. Xxxxx xxxxxxxxxx zvíře xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxx studie jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, v jakých xxxxx během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx sondou xxxx x potravě xxxx x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xx třeba, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx xx nejprve xxxxxx použití vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, pak xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxxxxxxx) x pak xxxxxxx x jiných xxxxxxxx. Xxx nevodná xxxxxxxx musí xxx xxxxx jejich xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; pokud není xxxxx, musí být xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx. Xx nezbytné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zvoleném xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, ale xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xxxxxx musí být xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xx nejdříve xx xxxxxxx x x každém případě xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx věku 9 xxxxx.
Xx začátku xxxxxx by nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Pokud xx xxxx studie xxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, je třeba x xxxx studiích xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx zdroje.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx hladinu xxxxx xx xxxxxxx nejméně 10 zvířat (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx účinků. Používá xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupinu. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx se se xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx skupina, xxxxx xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx.
Pokud xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx očekávat xxxxxx xxx denní xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx-xx taková xxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vyhledávací xxxxxx za účelem xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx vzít v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, ale nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx dávky x xxxxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky by xxxxxx vyvolat žádné xxxxxxxx xxxxxxxx (NOAEL). Xxxxxxx xx xxxxxx xxxx- xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; pokud je xxxxx pokrýt větší xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx mezi xxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxx xxx 10).
Pokud xx testovaná xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx vodě, xx důležité xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx rovnováhu. Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx v potravě, xxxx se použít xxx konstantní koncentrace (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx dávkování ve xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; použitou xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Aplikuje-li se xxxxx xxxxxx, xxxx xx se tak xxx každý den xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Pokud xx xxxx studie sloužit xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dlouhodobou xxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx použít xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx-xx test xxxxxxxxx xxx popisovaným xxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx za xxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x potravě xxxx xxxx, která xxxx dávce xxxxxxxx, x pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx provedení xxxxxxxxxxx testování xxx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxxx. Toto pravidlo xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx nenaznačují, xx xx xxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx 28 xxx. Zvířata xxxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 dnů xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zpožděné xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx účinku.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 dní x xxxxx po xxxx 28 xxx, xx xxxxxxxxxxxx případech 5 dní v xxxxx. Xxxxx dávka xx xxxxxx jednorázově xxxxxxxxx sondou nebo xxxxxxx intubační kanylou. Xxxxxxxxx objem tekutiny, xxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx, závisí xx xxxxxxxxx zvířete. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx přesáhnout 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x případě xxxxxxx xxxxxxx lze xxxxx x 2 ml xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x podávaném objemu xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx podáván xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxx to u xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx obvykle xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně, nejlépe x xxxxx xxxxx xxxx x x xxxxxxxx doby xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx stav zvířat. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx zběžná xxxxxxxxx všech zvířat xx xxxxxx zjištění xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx moribundní a xxxxxxx xxxxxxxxxxx silnou xxxxxx nebo xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx způsobem x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx provede xxxx xxxxx aplikací (xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a nejlépe xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx dobu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxxxxxxx, nejlépe x xxxxxxxx skórovacího xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx pozorování měnily xx xxxxxxx; xxxxx, xxxxxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x exkretů, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx, zježení xxxxx, xxxxxxxx zornic) x případně xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx pohybů, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx) nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxx, pohyb pozadu).
Xx čtvrtém xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx různé xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx se síla xxxxxx a celková xxxxxxxxx aktivita. Další xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxx x literatuře (viz Xxxxxxxxx xxxx, xxxx X).
Xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx ve xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx vynechat, xxxxx 28xxxxx studie xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxxxxxx (90denní); x xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx do této xxxxxxxxxx studie. Xxxxx x x xxxxx xxxxxxx jsou xxxxx x xxxxxxxxx poruchách xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx pro subchronickou xxxxxx.
Výjimečně xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx by xxx posuzování funkčního xxxxx xxxxxxx vadily.
1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx potravy a xxxx
Zvířata xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Spotřeba potravy x xxxx xx xxxx nejméně xxxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě.
1.2.3.3 Hematologie
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů, počtu xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx nebo v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxx.
1.2.3.4 Biochemická xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxických účinků xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxx, xx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxx xxxx xxxx x průběhu xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených během xxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxx zvířata xxx xxxxxxx přes xxx xxxxxxx xxxx1). Xxxxxxxxx xxxxxx x séra xxxxxxxx xxxxxxxxx sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx proteinů, albuminu, xxxxxxxx alespoň xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx jaterní xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, aspartátaminotransferáza, xxxxxxxxx fosfatáza, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx původu) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx užitečné xxxxxxxxx.
Další možnost xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx a vyšetření xxxx xxxxx posledního xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx xxxxx vzhled, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, pH, xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxx xxxx. xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx poškození xxxxx x xxxx.
Další xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx x látek xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx látek xxxx xxxxxx od případu.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, brát x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1) Xxxxxxxxx xx xxxxx je xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxx, zvláště xxx xxxxxxx. Hlavní xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx je xx, xx u nehladovějících xxxxxx je vyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx mohla xxxxxxxx xxxxx změny x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, hladovění xxxx xxx by xxxxx mít vliv xx xxxxxxx metabolismus x x aplikace x xxxxxxx xx xxxxxxx do pravidelnosti xxxxxxxx testované látce. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provést až xx pozorování xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx testu.
1.2.3.5 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, zahrnující xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxx, a xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxx a srdce xxxxx xxxxxx se xxxxx očistí xx xxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxxx xx xxxxx se xxxxx xx vlhkém stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx tkáně xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu x ohledem xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickými xxxxxxx, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxx i xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, brzlík, štítnou xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (konzervované xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxx ponořením), xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. dělohu, xxxxxxxx), xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx pro oblast xxxxxxxx x jedna xxxxxxxx pro pokrytí xxxxxxxxxxx xxxxxx), periferní xxxx (n. xxxxxxxxxxx xxxx n. xxxxxxxx), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, řez xxxxxx xxxxx (nebo čerstvý xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Každý xxxxx, xxxxx xx xxxx xxx cílovým orgánem xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Histopatologické xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx uchovaných orgánů x xxxxx. Xxxxx xx v xxxxxxxx x tkáních ve xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx nutno xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxx xxxx xx xxxxxx zařazeny, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXX A ZÁZNAM XXXXX
K xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x každém xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x průběhu xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x humánních xxxxxx, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx každého xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx lézí x procento xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx.
Výsledky x xxxxxxx formě xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistickou metodu xx xxxxx xxxxxx xxx při xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x pokusu obsahuje xxxx informace, pokud xxxxx být získány:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh/kmen;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx atd.;
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a na xxxxx testu.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxx než xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxx testované xxxxx xxx aplikaci, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x dosažených koncentracích, xxxxxxxxx x homogenitě xxxxxxxxx;
- podrobné xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx látky x xxxxx xxxx xxxx (xxx) na skutečnou xxxxx dávku x xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx x aplikaci x xxxxx nebo xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx hmotnost x xxxx změny;
- xxxxxxxx potravy x xxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxx xxxxxxxx toxicity;
- xxxxxx, xxxxxxxxx x trvání xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx síly x xxxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxx hematologického xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx a hmotnosti xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx XXXX XX 407.
B.8. AKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX (28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxx pokusem xx xxxxx získat xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx částic, xxxxx xxx, xxx xxxx, bod xxxx, xxx vzplanutí x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx denně xx xxxxxxx xxxx, v xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to po 28 dní. Xxxxxxx-xx xx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx v atmosféře xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zjišťují xx xxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx, která během xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx v podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, přidá xx k testované xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, aby x xxxxxxx vznikla příslušná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, musí být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Pracuje xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x běžně xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx začátku xxxxxx xxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 samců). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx exponovat xxxxxx xxxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Používá xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx).
1.3.2.3 Expoziční xxxxxxxxxxx
Použijí xx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx u skupiny x xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx aplikace testované xxxxx xx se xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx zachází stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx počtu. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, mají xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxx s nízkou x střední xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxx 6 xxxxx denně; x případě specifických xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xx zvířaty se xxxxxxx xxxxxxxxx expoziční xxxxxxxx, xxxxx zaručuje xxxxxxxx vzduchu x xxxxxxx nejméně 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se expoziční xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx byla xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx boxu xxxxx xx x zásadě xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové expozice; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.6 Xxxx pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx během xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, ve xxxxxx xx objeví a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Zvířata v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx určena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx dalších 14 xxx bez xxxxxxxx, x posouzení zotavení x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx během xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % x 70 %, s xxxxxxxx xxxxxxx, kde xx xxxx možné (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx uvnitř xxxxxx (≤ 5 xx vodního xxxxxxx) xxxxxxx unikání xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx boxu xxxx xxxxxx. Systém xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx dosaženo co xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx expozice:
x) Měření xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
b) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx se měří x xxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx xx střední xxxxxxx o více xxx ± 15 %. X některých xxxxxx a xxxxxxxx, xxx této úrovně xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx celou dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx částic týdně x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Teplota x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx jejím skončení xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně pozorovat xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx a zaznamenávat xxxxxx výskyt, xxxxxx x trvání. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx týdně x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx ztrátám xxxxxx, jako xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Po xxxxxxxx studie se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, s výjimkou xxxxxxxxxxx skupin, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x těžkém xxxxxx xx trpící xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.
Xx konci xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů x xxxxxxxxxxx krve.
2. Xxxxxxxxxxx analýza krve: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx alespoň xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří stanovení: xxxxxxx, fosforu, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy xx lačno, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity cholinesterasy.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků.
1.3.3.1 Xxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx provede pitva. Xxxxx xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, plíce x xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, x xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx) je xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Plíce xx třeba vyjmout xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x fixovat vhodným xxxxxx, tak xxx xx xxxxxxxxx struktura.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
U xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx byla podána xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx histologické vyšetření xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X zvířat xxxxxxxxxxx skupin je xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se zvláštním xxxxxxx xx orgány x xxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k tomu xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx statistickou metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, systému přípravy xxxxxx a aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxx je xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx teploty, xxxxxxxx xxxxxxx, popřípadě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx sestaví xx tabulky x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx odchylkou). Mají xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx; x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx užito; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně; x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, případně xxxx x xxxxxxx xxxxxx do konce xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX OPAKOVANÁ XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období podávání xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, která přežijí xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata chována x podmínkách ustájení x krmení, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx srst na xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx možné, mělo xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx xx to, xxx xx nepoškodila xxxx (např. abrazí). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx těla. Xx xxxxx vzít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x tuhými látkami, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx látku xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Testované kapaliny xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx možno xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx i xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx však xxxx být xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx variační xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx každé pohlaví xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 samců) xx xxxxxxx xxxx. Samice xxxx být xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Pokud se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno zvýšit xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx se také xxxxxxxxx skupiny 10 xxxxxxxxxxx zvířat (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx třeba xxxxxx nejméně tři xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xx xxx nejméně 6 hodin xxxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx den xx xxxxxxx dobu. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, xxx xx udržovala xxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se vehikulum xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx se kontrolní xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x to ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx aplikuje xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit žádné xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx účinek na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx více xxx 3 úrovně dávek, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx tak, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxx s nízkou x xxxxxxx xxxxxx x v kontrolní xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
Xxxx-xx aplikace testované xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx u xxxxxx xxxxxxx úrovně xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx vyloučení xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxx-xx x xxxxxxx poškození xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pokus xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 mg.kg-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Je třeba xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxxxxxx opět xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx xx studované xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny, xxxxx xxxx xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx dalších 14 xxx xxx expozice, xxx xx mohla xxxxxxxxx reparace xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx. Doba expozice xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Testovanou xxxxx xx xxxxx xxxxxxx rovnoměrně xx xxxxx plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx xxxx; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx menší. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx největší xxxx pokusné plochy xxxxxxxxxx x co xxxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mulového xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu xx xxxx třeba xxxxxxx způsobem xxxxxxx, xxx se mulový xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx fixovaly x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx volnosti pohybu, xxxxxx immobilizaci xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx metody xx xxxxx xxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxx".
Xx xxxxxxxx xxxx expozice se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxx xxxxx nebo s xxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxx očištění pokožky.
Xxxxxxx zvířata je xxxxx denně pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx, stupně x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x sliznic x také xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx i xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx přežila, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx a xxxxxxx x těžkém xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně utratit x xxxxxx.
Na xxxxx xxxxxx xx x všech xxxxxx xxxxxx kontrolních provedou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx xxxxxx jater x xxxxxx stanovit xxxxxxx jeden x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx xxxxx jako glutamátpyruvát-transamináza), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamát-oxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx.
Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, chloridů, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx, lipidů, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx širšího spektra xxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx studii se xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxx x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx vlhkém stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx, ledviny, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, srdce x všechny xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, a x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx způsobená xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X zvířat xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx provést histologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx formami xxxxxxxxx.
Xxxxxxx zjištěné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- údaje x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, podmínkách xxxxx, krmení xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxx jiné xxxxxx,
- doba, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx další xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.10. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X SAVCŮ XX XXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 473, Xx Xxxxx Mammalian Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx analýzy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx je nalézt xxxxx, jež x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Strukturální xxxxxxx xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou většinou xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx však xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Vznik xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x běžně xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chorob x xxxxxxx x existují xxxxxxxxxxx doklady xxxx, xx chromozómové xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx změny x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, hrají úlohu xxx vzniku xxxxxxxx x člověka a xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx x odhalení možných xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx chemických xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx testu xxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx o xxx, xx existují xxxxxxxx látky, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nezjistí, xxxxxxx xxxxxx působí xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx XXX.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx mohou použít xxxxxxx stabilizovaných xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx buňky xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, počtu chromozómů, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx spontánních xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx in xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zdroj metabolické xxxxxxxx. Tento systém xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x savců xx xxxx. Xx třeba xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx aberace xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).
Zlom chromatidy: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx struktuře chromatidy xx xxxxx, než xx xxxxx poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx v xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (xxxx mimo xxx chromatidy), případně xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx delece.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx jádro xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx než šířka xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk v xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx buněk x xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx haploidního xxxxx xxxxxxxxxx (x) jiný xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4n xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroskopickou analýzou xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xxxxxxx se vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx kultury xxxxxxxxx látce, xx xxxxxxxx xxxxxxx například Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, buňky xx xxxxxx, xxxxxx xx x x metafázických xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx linií, kmenů xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx periferní krve xxxxxxx či xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
K udržování xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, teplota x vlhkost). X xxxxxxxxx linií x xxxxx xx třeba xxxxxx způsobem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx modálního počtu xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx. X případě xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx třeba xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx kultur
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxx: buňky xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxx nedosáhly xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 xX.
Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxx xxx plná xxxx x xxxxxxx antikoagulantem (xxxx. xxxxxxxxx), nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx získané xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx se xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Na xxxxx se testovanou xxxxxx působí x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx suplementovaná xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (S9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy xxxx xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx a ß-naftoflavonu (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx použity x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx linií xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x metabolismu testované xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle x xxxxxxxx naředí. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx mohou xx xxxxxxx přidávat přímo xxxx xx xxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx čerstvé preparáty, xxxxxx xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX XXXXX
1.6 XXXXXXXXXXXX
X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx existovat xxxxxxxxx, xx xx mohlo x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxx přežívání xxxxx x xxxxxxxx X9. Používá-li xx xxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx podpořeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx všem xxx, xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx rozpouštědla xxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx organické xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.6.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, jež xx xxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x systému x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x hlavním xxxxxxxxxxx, přičemž se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx, nebo mitotický xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. To xxxxxxx xxxxxxx, xx xx jednotlivé xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx násobkem, xxxxx xxxx mezi hodnotami 2 x √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx x xxxx než 50%). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx a xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kultury, xxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx byla xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx použít také xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jako xx průměrný xxxxxxxxx xxx; xxx ovšem xxxxxxxxxxx celkový průměr, xxxxx xx vždy xxxxxx existenci x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. A xxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx značný xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx optimálního xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 µl/ml, 5 xx/xx nebo 0,01 M.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx jsou netoxické x xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx látka xxxxxxxxxxx, xx xxx nejvyšší xxxxxxx koncentrace xxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx kultivace x xxxxxxxxxx látkou. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx dochází-li x xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, než xx nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx koncentracích s xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx počátku x xx konci xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx změnit x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x prostým okem. Xxxxxxxxx nesmí xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.6.2 Xxxxxxxxx x pozitivní kontroly
Xx každého xxxxxxxxxxx, xx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací nebo xxx xx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx). Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mutagenního xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x to xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx, xx xxxxxxxx reprodukovatelný x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx pozadí, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxx byl xxxxxx, ale neodhaloval xxxxxxxxxxx xxxxx identitu xxxxxxxxxxxx preparátů. Mezi xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Xx | methyl xxxxxxxxxxxxxx xxxxx methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx C 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Ano | xxxx[x]xxxxx cyklofosfamid xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx pozitivní xxxxxxxx xx mohou xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Tam, xxx je xx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látku xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx sklízení xxxxxx xx xxxxx použít x negativní kontrolu, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Xxxxxxxx testovanou xxxxxx
Xx proliferující xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx 48 hodin xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxx xxxxxxx; a xxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Pokud lze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx minimální (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx se xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.
X případě xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx neprodyšně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (15).
1.6.3.2 Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky vystaví xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx ní po xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx odebírají x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Pokud xxxx xxx xxxxxxx aktivačního xxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se další xxxxxxxxxx bez aktivace, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx doby xxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídají xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx 1,5násobek xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Negativní xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx případu. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx třeba xxxx xxxxxxxxxx zdůvodnit.
1.6.3.3 Příprava chromozómů
Xx xxxxxxx kultury xx xxxxxx Colcemidem® xxxx kolchicinem obvykle xx xxxx 1 - 2 hodin xxxx xxxxxxxxx kultivace. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx roztokem, xxxxxx x xxxxxxxxx.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Všechny preparáty, xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx mikroskopickou analýzou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jelikož xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, musí xxx x všech xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxx xxxxxxxxx číslu ± 2. Xxx xxxxxx koncentraci a xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x obou xxxxxx, xxxxx byly xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xx počet xxxxxxx vysoký, xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
I xxxx účelem xxxxx xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxx důležité xxxxxxxxxx xxxxxxxxx polyploidii x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxx experimentální xxxxxxxxx xx buňka, xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi. Xx xxxxx registrovat xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx x četnosti x xxxxxxxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx v testu xxxxxxxxxxxx také xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kulturách.
Xxxxxxx se data xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx pozitivních xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxx potvrdit xxxxxxxxx výsledky xxxx xxxxxxxxx x xxxx. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx modifikaci xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, xxxxx lze xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx je xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx indikovat, xx testovaná látka xx schopnost inhibovat xxxxxxxxx procesy a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx (17) (18).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jasně xxxxxxxxx, nebo negativní xxxxxxxx, xx výjimečných xxxxxxxxx získaná xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx, xxxx diskutabilní xxx ohledu xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky testu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vitro ukazují, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx v kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx v xxxxxxx xxxxxxx somatických buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxx nevyvolává.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
XXXXXX X XXXXXXX POKUSU
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.
Buňky:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- karyotyp x vhodnost daného xxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx o délce xxxxxxxxx cyklu,
- xxxxxxx xxxxx xxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, použitý xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxx, xx-xx xx nutné - xxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxx, je-li xx xxxxx
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx koncentrace a xxxx xxxxxxxx xx xxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x počtu kultur, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xx-xx to xxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx vehikula a xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx kultivace,
- xxxx působení,
- xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx kultivace, je-li xx nutné
- xxx a složení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx kritérií akceptovatelnosti,
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxxx přípravy xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx toxicity,
- xxxxxxxx, jimiž se xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxx srážení,
- xxxxx x xX x osmolalitě xxxxxxxxxxxx xxxxx, jsou-li stanoveny,
- definice xxxxxxx, xxxxxx xxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxxxxx aberací xxx každou xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx, včetně rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.11. XXXXXXXXXX - TEST CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X KOSTNÍ XXXXX XXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x savců xx xxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx hlodavců (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx polyploidie může xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx látka je xxxxxxx vyvolávat numerické xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx jevy jsou xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx x člověka x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, že xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x tumorsupresorových xxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxx je xxxxxx xxxx, xxxxxxx se xxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, obsahující xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxx, xxx xx dají xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx tkáně xx v tomto xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx brát v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x procesů reparace XXX, x xxxx xxx mohou xxx xxxx živočišnými xxxxx x mezi tkáněmi xxxxxxx. Test in xxxx je xxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx byl předtím xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, že xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, není xxxxxx použití tohoto xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: strukturální xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx projevuje jako xxxx jedné, případně xxxx chromatid, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatidami.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx obou xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx v xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX nepřechází jádro xx mitózy, xxxxx xxxxxx další X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... chromatidami.
Xxx: achromatická léze xxxxx xxx xxxxx xxxxx chromatidy x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx dělený xxxxxxxx xxxxxx buněk x xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x atd.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx jako xxxxxx x fragmenty x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx vystaví xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx působení xx xxxxxx. Před xxxxxxxxx xx na xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). X xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx buňkách se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x čínští xxxxxx, xxx ovšem xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx savčí druh. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Hmotnostní xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a x xxxxxxx pohlaví xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B, vlhkost xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x experimentální xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx umístěny. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx dobu xxxxxxxxx xxxx dní xx zvířata aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx podmínkách.
1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx, xxxx xxxxxxx zvířatům xx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Kapalné testované xxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxx s xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet se xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx podávat xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx odebírat v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu:
Látka | XXX | EINECS |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
mitomycin C | 50-07-7 | 200-008-6 |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, pokud nejsou x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Xxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx pouze xxxxx odběr vzorků, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx interval xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx použít i xxxxxxxxxxxxx kontrol, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx nepříznivé xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. Xxxxx v xxxx, xxx se studie xxxxxxx, existují údaje x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, je testování xxxxx na jednom xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx závislá xx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx farmaceutických přípravků, xxxxxxx se test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x objemnou dávku, xxxx xx x xxxxxxxxx aplikace xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxx dávky xx xxx podané x xxxxxxx nanejvýše několika xxxxx. Jiné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxx různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po podání xxxxx xxx. X xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normální xxxxx xxxxxxxxx cyklu (xxxxx xxxx xxxxxxx 12 - 18 hodin) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx potřebná xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx vliv xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx další xxxxx xxxxxx xx 24 xxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxx. Pokud xx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx vícekrát xxx xxxxxx xx den, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx odběr vzorků 1,5xxxxxxxx xxxxx normálního xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx dávka Xxxxxxxxx® xxxx kolchicinu x xxxxxxxx xx x xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3 - 5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4 - 5 hodin. X xxxxxx dřeně xx xxxxxxxx buňky x zjišťují xx x nich xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx ji xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx interval odběru xxxxxx tři xxxxx xxx, xxx pokrývaly xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxx x toxicitě xxxxx nebo xxxxxx. Xxx pozdější xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx třeba xxxxxx jenom xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx takové xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx účinky xxxx xxxxxxx. Xxxxx, jež x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx hormony nebo xxxxxxxx, xxxxx představovat x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxxx individuálně případ xx případu. Nejvyšší xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx vede x xxxxxxx známkám xxxxxxxx x kostní xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx než 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x látkách s xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx genotoxicita, nemusí xxx provedena xxxx xxxxxx za xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx dlouhodobé xxxxxx xxxx limitní xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 dnů, a 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx testu xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx se xx sondou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx překročit 2 xx/100x hmotnosti; vyšší xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při vyšších xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba upravit xxxxxxxxxxx látky tak, xxx xxxxx byl xx xxxxx dávkových xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se tak xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx buněk xx xxxxxx na podložní xxxx x xxxxxx xx.
1.5.7 Analýza
Xxxxxxx xxxx cytotoxicity xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx xx analyzuje xxxxxxxxx 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx ztrátou xxxxxxxxxx, xxxx xxx počet xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx od xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X experimentálních x kontrolních skupin xx zaznamenají xxxxxxxxxx xxxx strukturálních xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet x xxxxxxx. Gapy xx zaznamenávají xxxxxx x registrují xx, xxx xxxxxxx se xx xxxxxxx frekvence xxxxxxx nezahrnují. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx x xxx, xx obě xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx údaje xx xxx xxxxxxx xxx statistickou xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků
Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xx používá několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence buněk x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx x jednorázovou xxxxxx xxx jednom xxxxxxx xxxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxx použít statistické xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx numerické xxxxxxxxxxxx aberace. Nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx má schopnost xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx dat vyvodit x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx na chromozómové xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx vyvolává x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx x xxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx vehikula,
- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud je xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- původ, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx testované xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, že se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx cílové tkáně,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti/den),
- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx a vody,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- metody hodnocení xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx metafázi, její xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx analyzovaných buněk xx xxxxx zvíře,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx index,
- typ x xxxxx aberací pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx počet xxxxxxx x dané xxxxxxx, jejich xxxxxx x směrodatná xxxxxxxx,
- případné xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,
- údaje xx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx rozpětí, průměrů x směrodatných odchylek.
- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
Xxxxxxx výsledků.
Závěry.
B.12. XXXXXXXXXX - IN VIVO XXXXXXXXXXXX XXXX X XXXXXXX ERYTROCYTECH
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Micronucleus Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxx in xxxx x savců slouží xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x chromozómech xxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx x tom, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxx hlodavců.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx látky, jež xxxxxxxxx cytogenetické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx představujících xxxxxxxxxxxx fragmenty nebo xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx je x buňky vyloučeno; xxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx vzniklé mikrojádro. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx buňkám xxxxx xxxxx. Nárůst xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxx se xxxxxx xxxx hlodavců xxxxxxx běžně xxxxx, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx tvoří. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx jeho xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx strukturální xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx centromerické XXX x xxxxxxxxxx. Konečným xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxx nezralých (polychromních) xxxxxxxxxx x mikrojádry. Xxxx počet xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x rámci xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx mikronukleus xxxx x xxxxx xx zvláště xxxxxx x xxxxxxxxx rizika xxxxxxxxxx, protože umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vivo, farmakokinetiky x procesů reparace XXX, x xxxx xxx mohou xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxxxx pro další xxxxxx mutagenního efektu, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x systému xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx metabolit do xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx použití xxxxxx xxxxx vhodné.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx kterými xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx dělícího xxxxxxxx xxxxxxxxxx organizovaný xxxxx xxxxxxxxx chromozómů x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) vytvářená xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx fragmenty xxxxxxxxxx xxxx celými chromozómy.
Xxxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a jenž xx xx od xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx lze odlišit xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro ribozómy.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované látce. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx ve xxxxxxx xxxx xx působení xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xx izoluje x xxxxxxxx se xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx (1-7). Xxxxx xx používá xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx se xx vhodné xxxx xx xxxxxxxx látky x připraví xx xxxxxx, xxx xx xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx od poslední xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx. X preparátech xx xxxxxxxx přítomnost mikrojader.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx druhu
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx jako pokusná xxxxxxx xxxx nebo xxxxxxx; xxxx xxxx xxx xxxxxx jiný xxxxxx savčí xxxx. Xxxxxxx-xx xx periferní xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Xxx ovšem xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx, že se x něj xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx nebo že x něj xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx citlivost xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx B.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jedinci xx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx jednoznačně xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx zvířata aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx minimalizovaly případné xxxxx toho, xxx x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx v pevném xxxxx a je-li xx možné, látka xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx připraví její xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou podávat xxxxx nebo se xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.
1.4.2 Podmínky testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x používaných dávkách xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx a nesmí x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx nepříliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx se, aby xxx xx to xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx testu xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
U xxxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx in xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole xx volí tak, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx testovanou xxxxx x vzorek odebírat x jednom xxxxxxx xxxxxxxxx. Kde xx xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxxxxx skupiny, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | EINECS |
xxxxx methansulfonát | 62-50-0 | 200-536-7 |
X-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x zpracované xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx skupiny xxxx xx xxx zařazeny xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxx buněk x mikrojádry x x xxxxxxxxxxxxxxxxx variabilitě xxxx zvířaty. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx jeden xxxxx vzorků, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxx, může xxx xxxx souběžná xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx působením látky, xxxxx xxxxx x xxxxx krátkodobých xxxxxx x periferní xxxx (xxxx. 1 - 3 xxxxx), xxx xxxxxxxx údaje xxxx x očekávaném rozmezí xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx
V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví (11). Xxxxx v xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx pohlavími xxxxxx x toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx zvířatech odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx se doporučit xxxxx xxxxxxxxxx rozvrh (xxxx. xxxxx, xxx xxxx xxxx dávek x 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxx použít xxxxx xxxxxxxxx schémata, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx použita limitní xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxx odběru vzorků. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx dávku xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxx dávky xx den xxxxxx x xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
(x) Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx látkou působí xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxx xx odeberou xxxxxxxxx dvakrát, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx x celkově xx xxxxxxx xxx po 48 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx vzorky xxxxxxxx xxxxx než xx 24 xxxxxxxx, musí xxx odůvodněné. Xxxxxx xxxxxxxxx krve xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx ne xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx od xxxxxx xxxxx, xx vhodnými xxxxxxxxx xx prvním xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx nikoli xxxx xxx 72 hodiny. Xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx pozitivní xxxxxxx, xxxx xxx další xxxxx xxxxxxxxx.
(b) Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx den (xxxx. xxx nebo xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx dřeně xxxxxx mezi 18 x 24 xxxxxxxx xx posledním xxxxxx xxxxx x v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (12).
Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx mimoto xxxxxx x další xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Provádí-li xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x pokusného režimu, xxxx se xxxxxxx x hlavní studii (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx maximální xxxxxxxx x toxicitě nízké, xxxx xxxxxx. Pro xxxxxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx xx xxx třeba použít xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx definována xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo mitogeny, xxxxx xxxxxxxxxxxx výjimky x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx dávek x vyhodnocují se xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xxxx xxx xxxx definována xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x určitým xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx (např. xxxxxx podílu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx resp. xxxxxxxxx xxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx dávce xxxx xx dvou xxxxxxx podaných x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx a jestliže xx na xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být provedena xxxx xxxxxx za xxxxxxx xxx dávkových xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx za xxx xxx době xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx při xxxx xxxxxx delší než 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x limitním xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx sondou, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx případech xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx nebo injekcí xxxxxxxx xxxxxxx, závisí xx velikosti pokusného xxxxxxx x nemá xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem xxx xx všech dávkových xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx / xxxx
Buňky xxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx dřeň xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx se xxxxxxx x obarví xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Periferní xxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxx jiné xxxxxx xxxx. Xxxxxx buňky xx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxx obarví (8) (9) (10), xxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (např. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x artefaktů xxxxxxxxxxxx xxx použití xxxxxxx, xxxxx xxxx DNA xxxxxxxxxx. Xxxx výhoda xxxxxxxxx, xx by xx nedala použít xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Lze použít x další xxxxxxx - xxxxxxxxx kolony xx sloupcem celulózy x xxxxxxxxxx xxxxx x jádrem (16) - xxxxx xxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx rutinně používány xxx analýzu xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (nezralé + xxxxx). X xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx minimálně 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Všechny xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx před mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. X xxxxxxx xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxxxxxx 2000 nezralých erytrocytů x xxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů s xxxxxxxxxx. Doplňující informace xxx xxxxxx tak, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx analýze xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % xxxxxxx x kontrole. Pokud xxxx xxxxxxx exponována xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx nebo xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x minimálně 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jedince. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx x manuálnímu xxxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (analýza xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx cytometry), xxxxx xxxx zdůvodněny x xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Údaje z xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální jednotkou xx xxxxx. U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx x xxxxx nezralých xxxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx kontinuálně xx xxxx xxxx týdnů xxxx xxxx, je xxxxx xxxxx také xxxxx x zralých xxxxxxxxxxxx (pokud xxxx xxxxxxxxxx). Xxxxx nezralých xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů a xxxxxxxx procento erytrocytů x mikrojádry se xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx. Nejsou-li žádné xxxxxxx x xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx analýzu sloučit.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku se xxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx dávkou xxx xxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické metody (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x tomto xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx experimentů sice xxxxxxxxx jednoznačně pozitivní xxxx negativní výsledky, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx tvorbu xxxxxxxxxx, xxxx důsledek xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aparátu x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířecího xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx uvažovat, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx zprávě x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby vehikula
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x rozpouštědle/vehikulu, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx, věk x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx počátku xxxxx, xxxxxx hmotnostního rozpětí, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dávky,
- xxxxxxxxxxx o přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx o podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx cesty podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx dostala xx celkového xxxxx xxxx xx cílové xxxxx,
- případný xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- podrobný xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,
- metody xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry xxx každou xxxxxxx,
- xxxxx dávka - xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx x historických xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací xx xxxxxxxxx x detekci xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx Escherichia xxxx (xxxxxxxxxx ve vztahu x xxxxxxxxxxxxx tryptofan). Xxxxxx uvedených systémů xxx xxxxxxxxx genové xxxxxx vzniklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx několika xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bakteriálních xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx bakteriálního testu xxxxxxxxxx mutací xxxxxxx x xxx, xx xx zjišťují xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx přítomné x xxxxxxxxxx kmenu do xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx bakterie xxxxxxxxxxxx xxxxxxx základní aminokyselinu. Xxxxx změněná xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx základě xxx xxxxxxxxxx růst xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxx x člověka xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx a existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx genové mutace x onkogenech x xxxxxxxx supresorových xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk hrají x xxxxxxx x xxxxxxxxx zvířat xxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx test na xxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, díky xxxx jsou citlivější xxx detekci xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx sekvencí XXX x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxxx x eliminace xxxxxxx xxxxxxxx DNA xx posílení xxxxxxxx xxxxxxx reparace XXX, xxx xxxx xxxxxxxx x chybám. Specifita xxxxxxxxxxx xxxxx umožňuje xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx x dispozici xxxxx xxxxxxxx databáze xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metody xxx testování xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, včetně chemikálií xxxxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxx xxxxxxxxxx mutací x xxxxxxxx kmenů Salmonella xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (histidinu xxxx. tryptofanu), xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, který xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx jsou látky xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x XXX. Při xxxxxxxxx testu xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx xx místě xxxxxxx mutace xxxx xx jiném xxxxx xxxxxxxxxxxxx genomu.
Frameshift xxxxxxxx (mutageny vyvolávající xxxxxxxx mutace) jsou xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxx nebo odebrání xxxxxxx xxxx více xxxx bází v XXX, xxxx xx xxxx čtecí xxxxx x XXX.
1.3 XXXXXXX XXXXX
V xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx struktuře x xxxxxxxxx opravy XXX. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xx vitro ovšem xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx informace x xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx jako xxxxxxx screenin xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx genové xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx prokázalo, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx v xxxxx xxxxx pozitivní, xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx neodhalí; xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx veličin, xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx reverzní xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, jakými xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx sloučeniny (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx systém xxxxxxx buněk (xxxxxxxxx xxxxxxx inhibitory xxxxxxxxxxxxx xxxx některá xxxxxxx xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx x savců.
Xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxx tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx karcinogenní xxx xxxxx, ovšem korelace xxxx xxxxxxxxx; závisí xx xxxxxxxx xxxxx, x existují karcinogeny, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x bakteriálních xxxxxxx neprobíhá.
1.4 PRINCIP XXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx se vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx klasické xxxxxxx xxxxxx "plate incorporation" xx suspenze xxxxx x vrchním agarem x xxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx metodě xx xxxxxxx xxxx inkubuje x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx se xxxxxx na minimální xxxxxx xxxx. Při xxxx xxxxxxxx xx xxx xx xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx revertujících kolonií xx kontrolních xxxxxxx x rozpouštědlem.
Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx testu. X xxxx nejběžnější xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ["xxxxx incorporation"] (1) (2) (3) (4), preinkubační xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx metoda (9) (10) a xxxxxxxxx xxxxxx (11). Jsou xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxx (12).
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx týkají xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx preinkubační. Xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx jak x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Některé xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou; xxxxx se o xxxxxxxx třídy, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx x diazosloučeniny, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, alylové xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx (3). Xxxx bylo xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx třídy mutagenů, xxxxx se pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx neodhalí. Xx xx xx třeba xxxxxxxx jako xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", k xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx jiných xxxxx. Byly xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "speciální xxxxxxx" (xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx se xxxx pro xxxxxx xxxxxxx použít): azobarviva x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x těkavé xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. XXXXX XXXXXX
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Bakterie
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stadia xxxxx (zhruba 109 xxxxx/xx). Kultury v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stadiu xx xxxxxxxxxxx. Důležité xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx experiment xxxxxxxxxx vysoký xxxx xxxxxxxxxxxxxxx bakterií. Xxxx xx xx xxxxxxxx xxx z historických xxxxx xxxxxxxxx křivek, xxxx v jednotlivých xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx očkováním xx xxxxxxx.
Doporučená xxxxxxxxx xxxxxxx činí 37xX.
Použije se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; XX 1537 xxxx XX97x nebo 1X97; TA98; x XX100); x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx laboratořemi. Xxxx čtyři xxxxx X. xxxxxxxxxxx mají xxxxxxxxx reverzním místě xxxx xxxx XX x je xxxxx, xx nemusejí xxxxxxxxx xxxxxx oxidační xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x hydraziny. Xxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx X. xxxx XX2 nebo S. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx xxxx na xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxx xxxx XX. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx:
- X. typhimurium XX1535 x
- X. typhimurium XX1537 xxxx TA97 xxxx XX97x a
- X. typhimurium XX98 x
- S. xxxxxxxxxxx XX100 x
- X. coli XX2 xxxX xxxx X. coli WP2 xxxX (pKM101) xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx křížové vazby xxxx xxx nejvhodnější xxxxxx XX102 nebo xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kmen E. xxxx (např. X. xxxx XX2 xxxx X. coli XX2 (xXX101)).
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx postupů xxxxxxxx xxxxxxx kultury, xxxxxxx markeru x xxxxxxxxxx. Xxx každý xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx závislost na xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx kmenů X. xxxx). Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x to: xxxxxxxxxx xx nepřítomnost X-xxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx přichází v xxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu x xxxxx XX98, XX100 x TA97a xxxx XX97, WP2 xxxX (xXX101) x xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu + xxxxxxxxxxxx x xxxxx XX 102); přítomnost xxxxxxxxxxxxxxxxxx mutací (tj. xxx xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxX xxxxxx x X. xxxx xxxx xxxX xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx citlivosti xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Použité xxxxx mají mít xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx očekávaném xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dat xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx x x xxxxxxx uvedeném x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx (např. x Vogelovým-Bonnerovým xxxxxxxxxx xxxxxx E a xxxxxxxx) a xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx, tak xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx post-mitochondriální xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxx látkami, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx fenobarbitalu x ß-naftoflavonu (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 30 % x/x xx směsi X9. Xxxxx x podmínky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxxx záviset na xxxxx testované xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx případech xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x několika xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx může být xxxxxxxxx použít redukční xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).
1.5.1.4 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx rozpustí xxxx xx připraví xxxxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx ředí. Je xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (viz 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Koncentrace
Xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxx se x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x nerozpustnost x předběžném xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx kolonií, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx růstu xx pozadí nebo xxxxxx xxxxxx přežití xxxxxxxxx kultur. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx posuzuje xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x pouhým xxxx.
Xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 xx/xxxxx resp. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx látek, xxx x těchto koncentracích xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx několik xxxxxxxxxxx xxxx být x konečné pokusné xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Testované xxxxx, jež xxxx xxxxxxxxxxx již xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx, se xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Sraženina xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx pěti xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx intervalem (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx závislost, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx menší. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µl/misku xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxx podstatné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxx zahrnovat i xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx) xxxxxxxx, jak s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx takové xxxxxxxxxxx, xxx prokazují efektivnost xxxxxx testu.
X xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx x testech x xxxxxxxxxxxx aktivací, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx kontrolou xxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Xxxxx červeň | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-aminoantracen xx nepoužívá xxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinnosti xxxxx X9. Pokud xx 2-xxxxxxxxxxxxx použije, xx třeba xxxxxx xxxxx X9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx mutagenem, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx enzymy, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, dimethylbenzantracenenm.
Příklady xxxxx, xxx xxxx xxxxxx pro kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX | |
Xxxx xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 a XX 100 |
2-nitrofluoren | 607-57-8 | 210-138-5 | TA 98 |
9-aminoakridin | 90-45-9 | 201-995-6 | XX 1537, XX 97 x XX 97x |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, TA 97 x XX 97x |
kumen-hydroperoxid | 80-15-9 | 201-254-7 | TA 102 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 | WP xxxX x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, WP2uvrA x XX2xxxX (xXX101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX x WP2uvrA (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (XX2) | 3688-53-7 | xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
X xxxxxxxxx kontrole xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx referenční xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx použití xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x chemické třídě.
Xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, se kterými xx jinak xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx testované látky. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Xxx xxxxxxxx miskové metodě (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx bakteriální xxxxxxx (xxxxxxxxxx zhruba 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 xx xxxxxxxxxx xxxxx a 2,0 xx vrchního agaru. X xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx mísí 0,5 xx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxx obsahující přiměřené xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x rozmezí 5 - 30 % x/x v metabolické xxxxxxxxx xxxxx) s 2,0 ml xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx /testovaným xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx zkumavky xx promísí x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx s minimálním xxxxxx. Xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx ztuhnout.
Při xxxxxxxxxxxx metodě (2) (3) (5) (6) xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 xxx xxxx xxxx xxx 30 - 37 xX; potom xx xxxxx s vrchním xxxxxx a xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx agarem. Xxxxxxx xx mísí 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx látky / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx bakterií x 0,5 xx směsi X9 xxxx sterilního xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx agaru. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx adekvátní xxxxx xxxxxxx se pro xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx náhodně xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Plynné nebo xxxxxx látky xx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, například x zatavených xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 INKUBACE
Xxxxxxx xxxxx v rámci xxxxxx testu xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX xxx xxxx 48 - 72 xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx misku. Xxxxxx xx xxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx jak x xxxxxxxxx kontroly (xxxxxxxxxxxx, popřípadě xxxxxxxx xxx působení, byla-li xxxxxxx), xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontrolu (xxxx. xxx xxxxxxxx rozpouštědlo) xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx misky x průměrný xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Verifikace xxxxxx pozitivní xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx testováním, nejlépe xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx musejí xxxxxxxx xxxxxx od případu. Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx rozsah posuzovaných xxxxxxxx. Xx studijním xxxxxxxxxx, které xx xxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx ("plate xxxxxxxxxxxxx" xxxx preinkubace x xxxxxxx prostředí) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx dávkově xxxxxxx xxxxxx xx sledovaném xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na jednu xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx jednoho xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xxx (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx biologická xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jako xxxxxxx xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (24), statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným určujícím xxxxxxxx xxx pozitivní xxxxxx.
Testovaná xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxxxx, xx x tomto xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo problematické, x když se xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky bakteriálního xxxxx na reverzní xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx genové xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx nebo posuzovaných xxxxxx v xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx coli. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx daných zkušebních xxxxxxxx není testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx rozpouštědla,
- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxx buněk x kultuře,
- xxxxxxxxxxxxxxx kmene.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- množství xxxxxxxxx xxxxx na xxxxx misku (v xx xxxx μx) xx zdůvodněním xxxxx xxxxx x počtu xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,
- použitá xxxxx,
-xxx x xxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxxxx (zpracování).
Xxxxxxxx:
- známky toxicity,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx revertantních xxxxxxx na xxxxx xxxxx a směrodatná xxxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných odchylek,
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků.
Závěry.
X.15. GENOVÉ XXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxx haploidní x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae mohou xxx užity xxx xxxxxx xxxxxxxx genových xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x x xxxxxxxxxxxx aktivací.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, jako xx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx vyžadující mutant (xxx-1, xxx-2) xx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxx rezistence xx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx.
Nejlépe xxxxxxx xxxxxxxx mutační systém xxxxxxxx využití haploidního xxxxx XX 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) nonsense xxxxxxxx xxx 2-1, arg 4-17, lys 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx jsou vratné xxxxxxxxx xxxxxxxx typu xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx mutace xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X nese xxxxxx xxx 1-7 marker, xxxxxxxx xxxxxx, revertovanou xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx a xxxxxx xxx 3-10, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny.
X xxxxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxx využívaným kmenem X7, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxx ilv 1-92.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X organických xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxx xxxx xxxxxx vyšší xxx 2 xxxxxxxx % x organických xxxxxxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO). Finální xxxxxxxxxxx vehikula xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristiky růstu.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkám xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x doplněná kofaktory. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, postmitochondriálních xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx rovněž xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Testovací xxxxx
Haploidní xxxx XX 158-14X x xxxxxxxxx xxxx X7 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx genových xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx určení xxxxx xxxxxxxxxxxxx x mutovaných xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx současně. Xxx xxxxxx specifickou mutační xxxxx xxxx xxx xxxxxxx odpovídající pozitivní xxxxxxxxx chemické látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má být xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Látky xx vodě relativně xxxxxxxxxxx mají být xxxxxxxxx až po xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx vodě xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Misky xxxx xxxxxxxxxx po xxxx xxx xxx 28 xx 30 xX xx tmě.
1.2.2.6 Frekvence xxxxxxxxxxx mutací
Frekvence xxxxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxx xx být x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnot.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxx x prototrofními buňkami x x životnosti xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 3-10 x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x zahrnuje xxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx rostoucích xxxxxxx: 1-5 x 107 xxxxx/xx je xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx dobu xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX za třepání. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x průběhu xxxxxxxxx, xxxxx xx xx potřebné. Xx xxxxxxxx ovlivnění jsou xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxx médium. Xx inkubaci jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx buňky x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x buňkami xx stacionární fázi. Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx mají být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx a zahrnují xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx mají xxx vyhodnoceny xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x:
- použitých xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, teplota x xxxxxx inkubace, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém,
- podmínkám vlastního xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x trvání xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci mutací, xxxxxx xxxxx a xxxxxx, xxxxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.16. MITOTICKÁ XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae xxxx xxx xxxxxxxxxx mezi xxxx (xxxxxxxx mezi xxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. Xxxxx případ xx xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx produkty, xxxxxx xxxxx případ xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx nazýván xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií nebo xxxxxxx vzniklých x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xx základě tvorby xxxxxxxxxxxxx revertant xxxxxxxxx x auxotrofního xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxx xxx různé defektní xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx detekci xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx X4 (heteroalelický x xxx 2 x xxx 5), X7 (xxxxxxxxxxxxxx x trp 5), BZ34 (heteroalelický x xxx 4) x JD1 (xxxxxxxxxxxxxx x his 4 x xxx 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxxxxxx x X5 xxxx D7 (xxxxx xxxxxx xxxx mitotickou xxxxxxx konversi x xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx komplementární alely xxx 2.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx vehikula. X xxxxxxxxxxx látek ve xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx užít roztok xxxxx než 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx etanol, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx x charakteristiky xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx mají xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxxxxxx, tak x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xxxxxxxxxx užívaným systémem xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx z jater xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx jiných druhů, xxxxx, postmitochondriálních frakcí xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Nejužívanější xxxx xxxxxxxxx xxxxx D4, X5, D7 x XX1. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Média
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx užívána xxx xxxxxx přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Pozitivní, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx specifickou xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx chemické látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má být xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx koncentrací. Xxxx xxx xxxx xxxxx xx cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx. Nejnižší xxxxxxxxxxx nesmí xxx xxxx xx životnost xxxxx. U toxických xxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx až xx mez xxxxxxxxxxxx xxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx od xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx být xxxxxxxxx působení testované xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxx během xxxxx xx xxxx xx 18 x. Xxxxxxx dlouhodobě xxxxxxxxxxx xxxx být mikroskopicky xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx tmě xx xxxxx xx xxxx dní xxx 28 - 30 xX. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (cca 4 xX) po xxxxx 1 - 2 xxx xxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx rekombinace
Xxxx xxx užity xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Počet replikací
Xx nutno použít xxxxxxx tří xxxxx xx jednu xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mitotickou xxxxxxx konverzí x xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx mitotickým xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx kolonií.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx S. cerevisiae xxxxxxx obvykle xxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxx prostředí x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx pokusy mají xxx provedeny na xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx vystaveno testované xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX xx xxxxxxx. Odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému xx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx.
Xx skončení xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx a vyočkovány xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx pokus xxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxx xx stacionární xxxx. Jestliže xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx potvrzen xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xxxx xxx prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- použité xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: buňky xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- podmínky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx ovlivnění, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvence xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx xx možné, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- vyhodnocení xxxxxxxx.
B.17. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXX MUTACÍ X SAVČÍCH BUŇKÁCH XX VITRO
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX TG 476, Xx Vitro Mammalian Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx genových xxxxxx xx vitro xx xx xxxxxxxx xx zjišťování xxxxxxxx xxxxxx vyvolaných chemickými xxxxxxx. Xxxx vhodné xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx buňky X5178X, xxxxx XXX, XXX-XX52 x X79 xxxxx čínského xxxxxx x xxxxxx lymfoblastoidní xxxxx TK6 (1). X těchto xxxxxxxxx xxxxx se nejčastěji xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zjišťují xxxxxx x thymidinkináze (TK) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x v xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxx mutací x XX, HPRT x XXXX xx xxxxxxxx různá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Autosomální xxxxxxxxxx XX a XXXX xxxx xxxxxxx xxxxxxx i takové xxxxxxxxx změny (xxxx. xxxxx xxxxxx), které xx na xxxxxx XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
X xxxxx na xxxxxx xxxxxx v savčích xxxxxxx xx vitro xx xxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx buněčných xxxxx. Xxx volbě xxxxx se berou x xxxxx růstové xxxxxxxxxx dané kultury x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxx vyžadují xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx dokonale. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx by výsledky xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxx důsledkem xxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx vysoké cytotoxicity (7).
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x karcinogenů. Xxxx xxxxxxxxx, které xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx stále xxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx zřejmě xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx buňkách nepůsobí (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx mutace: genová xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx formy, xxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx enzymatické xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: látky xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx mutageny (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx přidání xxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxx x XXX.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, během xxxxxxx jsou x xxxx zmutovaných xxxxx xxxxxxxxxxxx nezměněné genové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx mutací: počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx počtem xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx růst: xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxx v xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; vypočítává xx jako xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou) x xxxxxxx klonovací xxxxxxxxx xxxxxxx efficiency (v xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou.
Životnost (xxxxxxxxx): klonovací účinnost (xxxxxxx efficiency) ovlivněných xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x selekčních podmínkách xx xxxxxx exprese.
Přežití: xxxxxxxxx xxxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx konci xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx (XX) x důsledku xxxxxx XX+/- → XX-/-, xxxx xxxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxxxxx působení pyrimidinového xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (TFT). Xxxxx xxxxxxxxxxx thymidinkinázu xxxx vůči XXX xxxxxxx, což způsobuje xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x zastavuje xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx XXX xxxxx xxxxx proliferovat xxxxxxx xxxxx, zatímco normální xxxxx, obsahující xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx XXXX nebo XXXX selekčně xxxxxxxxxxx xxxx 6-xxxxxxxxxxx (TG) xxxx 8-azaguaninu (AG). Xxxxx xx xxxxxx xxxx nebo sloučenina xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx zvážit. Xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx každé xxxxxxxxx xx xxxxxxxx toxicitu xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxx nich. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxxxxx strukturně xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx, xx třeba potvrdit, xx xx selekční xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Buňky x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx x metabolickou xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxxxx xx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x k xxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (přežití) (cloning xxxxxxxxxx) xxxx relativního xxxxxxxxx nárůstu kultur xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x růstovém xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx x xxx xxxxx, aby mohlo xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx bez xxxxxx xxxxxxx, xx stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Po xxxxxx inkubační době xx kolonie xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx xxxxx x x počtu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx
Xx se xxxxxx xxxx řada xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x XX6. X xxxxxxxxx xxxx používaných x tomto testu xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx chemickým xxxxxxxxx, xxxxxx klonovací xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x stabilní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. U xxxxx se xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx buňky xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx třeba naplánovat xxx, aby měl xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx parametrům xxxxxxxxx (14). Minimální počet xxxxxxxxx buněk, které xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx se x xxxxxxxxxxxx stadiích xxxxx, xx xxx frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xx xxxxx xxxxx xx xxx minimálně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnoty xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 106 xxxxx. Xxxx xx být x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx podmínky (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x vlhkost). Xxxxx xx xxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx systému x xxxx buňky. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx tvořit xxxxxxx.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxx xx namnoží xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx a inkubují xxx teplotě 37 xX. Xxxx provedením xxxxx, je třeba xxxxxxx zbavit xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx působí x přítomnosti i x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx indukujícími xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx a β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10% v/v. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx typu xx testovaná xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx účely xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx použity i xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx exprimující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx enzymy. Xxxxx xxxxxxxxx linií xx xxx xxx vědecky xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx, látka xx xxxx působením xx buňky xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx naředí. Kapalné xxxxxxxxx látky se xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x jejich xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vlastnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx xx mohlo x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx reagovat, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx X9. Používá-li xx xxxx známé rozpouštědlo xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx, xxx xxxxx xxx, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Voda xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxx kritéria, xxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x bez xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, jako xx xxxxxxxxx klonovací xxxxxxxx (přežití) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx růst. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x rozpustnost x xxxxxxxxxxx experimentech.
Použijí xx minimálně xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx jednotlivé koncentrace xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 a √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x cytotoxicity, xxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx přežití (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx celkovému xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X relativně xxxxxxxxxxx xxxxx xx maximální xxxxxxxxx xxxxx měla xxx xxxxxxxx z xxxxxx 5 mg/ml, 5 μx/xx a 1,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx koncentrace, xxx xxxxx xx xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx finálním xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx s testovanou xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozpustnost xx začátku x xx xxxxx působení, xxxxxxx xx rozpustnost xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx přítomnosti xxxxx, S9, séra xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx dá zjistit x prostým xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx překážku xxx xxxxxxxxx buněk.
1.4.2.3 Kontroly
V xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx provést x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, a xx xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx aktivaci k xxxxxxxx mutagenního xxxxxx. Xxxx látkami xxx xxxxxxxxx kontrolu patří xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx methansulfonát ethyl nitrosomočovina | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
TK (xxxx a xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (malé x xxxxx kolonie) | cyklofosfamid monohydrát xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx koncentrace S-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
benzo[a]pyren | 50-32-8 | 200-028-5 |
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx použít x xxxx vhodné xxxxx; xxxxxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (CAS 59-14-3, xxxxx EINECS 200-415-9), xxx použít x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx to možné, xx xxxxxx použít xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx x negativní xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum v xxxxxxxxxxx médiu, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx kontrolu bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx nevykazuje xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx buňky xx působí testovanou xxxxxx jak s xxxxxxxxxxxx aktivací, tak xxx xx. Xxxxxxxx xxxxxxx xx vhodnou xxxx (obvykle je xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx. Používá-li se xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxx koncentrací xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x analýze (xx. xxxxxxxxx osm xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Kultury x xxxxxxxxx kontrolou (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek je xxxxx xxxxxxxx v xxxxx vhodné xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx přežívání, viability x xxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx expozice se xxxxx promyjí x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx xx obvykle začíná x xxxxxxxx cytotoxicity xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx má xxxxxxx minimální časový xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx mutantů (XXXX x XXXX vyžaduje xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 dny). Xxxxx xx xxxxxxx x médiu s x xxx selekčního xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx mutantů a xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx doby exprese xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (používané x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx) inokulací buněk xx selekční xxxxxx.
Xxxxx xx látka v xxxxx X5178X XX+/- xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxx na jedné x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx pozitivní koncentrace) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx x XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx cytotoxicity x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx pozitivní xxxxxx x xxxxx X5178XX+/- se kolonie xxxxxxx pomocí kritérií xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx (nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x negativní x pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx a cytogenetické xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx TK+/- xx kolonie xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxx xxxxx (velké) x xxxxxxxx růstu (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxx tvoří xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxx xxxx od xxxxxx xxxxxx xxxx po xxxxxxxxxxxx viditelné chromozómové xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mutanty xxxxxx podobnou rychlostí xxxx buňky xxxxxxxxxx x vytvářejí xxxxx xxxxxxx.
Xx třeba uvádět xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnost - xxxxxxxx xxxxxxx efficiency) xxxx relativní celkový xxxx. Mutační xxxxxxxxx xx vyjadřuje xxxx xxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx x kultivačních xxxxxxxxxx; nakonec xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx xxxx potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxx, je třeba xxxxx zdůvodnění. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx koncentraci testované xxxxx závislý xxxxxx xxxx reprodukovatelný nárůst xxxxxxx frekvence. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.
Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za nemutagenní. Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx negativní výsledky, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, i xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na genové xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx dávka - xxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxxxxxx xxxxxx mutace.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x zdroj xxxxx,
- xxxxx buněčných kultur,
- xxxxxxxx počet xxxxxx,
- xxxxxxxx metody xxxxxxxxx xxxxxxx kultury,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých koncentrací x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx k xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, koncentrace XX2,
- xxxxxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x přidané xxxxxxxxx xxxxx,
- inkubační teplota,
- xxxx xxxxxxxx,
-xxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxx působení xxxxx,
- xxx a složení xxxxxxx metabolické aktivace, xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx činidla,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, negativní nebo xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx zjišťování xxxxx živých x xxxxxxxxxx xxxxx,
- definice xxxxxxx, x nichž xx hodnotí xxxxxxxx x typ (xxxxxx xxxxxxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxxxx xxxx "malými" x "xxxxxxx" xxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- údaje o xX x xxxxxxxxxx xxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx, jsou-li stanoveny,
- xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zjistit xxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxx X5178X XX+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních kontrol, xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX SYNTÉZA DNA - XXXXX XXXXX XX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx neplánované xxxxxxx XXX (XXX) xxxxxxxx xxxxx reparační xxxxxxx DNA po xxxxxx x odstranění xxxxx DNA xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3H-TdR) xx XXX xxxxxxx xxxxx, které xxxxxx x X xxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx 3X-XxX xx stanoven xxxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x exponovaných xxxxxxx. Xxxxxxxxx se primární xxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx x systému xx xxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kontrolní xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx jenom xxxxxxxxxxx médiem. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx linií (xxxxxx xxxxxxxxx fibroblasty).
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx experimentální bod xx potřeba xxxxxxx xxxx buněčných xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx kultur (xxxx xxxx, xx-xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX XXX.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
X xxxxxx experimentu xxxx být současně xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx pozitivní xxxxxxxx lze pro xxxxxxx hepatocyty xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-DMBA) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Xxxx xxxxxxxxx kontrolu pro xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxx xxx autoradiografii, xxx i xxx XXX xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx testované xxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx ve xxxx xxxxxx rozpustné xxxx xxx testovány x xxxxxxxxxxxxx až xx xxxxxxx rozpustnosti xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx netoxické xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx koncentrace testované xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx kultur xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx růstové xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, teplota x xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx musí xxx pravidelně xxxxxxxxxxxx xx přítomnosti Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx a lymfocyty xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx se připravuje xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo setřepáním xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx nádoby), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx ve vhodné xxxxxxx x inkubuje xxx 37 oC.
Xxxxxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx, že se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Kultury lidských xxxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx metody.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur testované xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Čerstvě izolované xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x médiu xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxx. Po ukončené xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, buňky xxxxxxx, xxxxxxxx x sušeny. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx autoradiografické xxxxxx (xxxxxxxxxxxx může být xxxxxx stripping xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
Autoradiografické xxxxxxxx: Xxxxxxx kultury xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxx dobu x pak jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx 3H-TdR. Xxxx působení xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxx buněk. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxx 3H-TdR přidat xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo několik xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx těmito xxxxxxx je ovlivněn xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx látkou x 3X-XxX. X odlišení xxxx UDS x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx séra xxxx xxxxxxxx hydroxyurey xx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx inhibici semikonzervativní xxxxxxxxx XXX.
Stanovení XXX xxxxxx LSC: Xxxx expozicí xxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx vstup buněk xx X-xxxx, xxx xxxx xxxxx uvedeno. Xxxxx xxxx pak xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxx xxxx xxxxxxx xxx autoradiografii. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx XXX extrahována x xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx obsah XXX x xxxxx rozsah xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx uvedených xxxxxxxx xxxxxx lymfocyty, xx x nestimulovaných xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx replikace XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxx
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx x S-fázi xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx 50 buněk x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vybraných xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 3X-XxX v cytoplazmě xx určí x xxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.4.2 Vyhodnocení XXX
Xxx xxxxxxxxx LSC XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxxx.
Výsledky xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx experimentech.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Xxxxxxxxxxx autoradiografie
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx buněčné xxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx průměru, mediánu x xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx zaznamenává jako xxx/μx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx/μx DNA xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultury, médiu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jejich xxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx aktivačním xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx blokování xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxx XXX a x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahu XXX xxx metodě XXX,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li to xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
X.19. XXX - XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
XXX xx xxxxxxxxxx xxxx xxx detekci xxxxxxxxxxxx xxxxx DNA xxxx xxxxx sesterskými chromatidami xxxxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx identických xxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v identických (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx vyžaduje xxxx x opětovné spojení, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Toho xx dosahuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) do xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Savčí buňky xx vitro jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx x přítomnosti i xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xx-xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx BrdU. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx ovlivní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx) k akumulaci xxxxx x c-metafázi xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou buňky xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (xxxxxx lymfocyty) xxxx xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx křečka). Xxxxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.
Používají xx xxxxxx kultivační xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentrace XX2 x xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx významně ovlivnit xxxxxxxxx buněk, xxxxxxxx xxxxx xxxx frekvenci XXX.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxx xx použití xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx (xxxxxxx) metabolickou xxxxxxxxx, xxxxxxxx úroveň x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx chemických xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx použijí xxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Negativní x pozitivní kontroly
X každém xxxxxxxxxxx xxxx být zařazeny xxxxxxxxx kontroly s xxxxxxx s přímým xxxxxxxxxx účinkem x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx musí xxx použita negativní xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx mutageny: xxxxxxxxxxxxx
Je-li třeba, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx signifikantní xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xx hranici xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx kultur
Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx zásobní xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx hustotě a xxxxxxxx při 37 oC. Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx v kultivační xxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx z 50 % konfluentní xxxxxx. Lze také xxxxxx suspenzních kultur. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx běžnými xxxxxxx a inkubují xxx 37 xX.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x exponenciální xxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxx případů xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxx cykly, xx-xx xx třeba. Xxxxx, xxxxx xxxxxx dostatečnou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx je testovaná xxxxx x média xxxxxxxxxx, buňky xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x BrdU dva xxxxxxxxxx xxxxx. Alternativně xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x XxxX xx xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx, dokud jsou x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx analyzovány x druhém xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x XxxX je xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zabránilo xxxxxxxx XXX, xx které xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Jednu xx čtyři hodiny xxxx ukončením kultivace xx xx xxxxxx xxxxx inhibitor xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx samostatně.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx preparátů ke xxxxxxxxxx SCE může xxx provedeno několika xxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxx).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx frekvenci SCE x xxxxxxxx. Xxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx 25 dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx před xxxxxxxx. V lidských xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x 46 xxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, které xx xxxx x ± 2 centromery od xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx třeba stanovit, xxx xx budou xxxxxxxxxx SCE v xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxxxxxxx tabulkovou formou. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxxxx x xxxxx XXX/xxxxxxxxx zvlášť xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, metodách xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- kultivačních xxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, koncentraci CO2, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádobách, xxxxx expozice, xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx i jeho xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxx každý xxxxxxxxxxxxxx xxx,
- způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (odděleně xxx xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxx počtu XXX/xxxxx x XXX/xxxxxxxxx (odděleně xxx xxxxxx xxxxxxx),
- kritériích xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx koncentrací,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx vyhodnocení,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX VÁZANÉ XX XXXXXXX X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Test xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx pohlaví (XXXX) na Drosophila xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxx, v zárodečných xxxxxxx xxxxx. Je xx xxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x přibližbě 800 xxxxxxxx chromozómu X. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxx 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx genomu.
Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx gen. Když xx xxxxxx letální x xxxxxxxxxxxx stavu, xxx xx její xxxxxxxxxx usuzovat x xxxxxxx jednoho xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. XXXX xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx vzhledu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxx
Používají xx xxxxx xxxxx definované xxxxxx xxxxx a xxxxxx linie Xxxxxx-5. Xxxxx být xxxxxxx x xxxx vhodné xxxxx xxxxxxx linie xxxxx s vícenásobnou xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Testované xxxxx
Testované xxxxx xx rozpouštějí ve xxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx suspendují xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxx etanolu x Xxxxxx-60 xxxx 80), před xxxxxxxx xx xxxx ředí xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dimetylsulfoxid (DMSO) xxxx xxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Test xx xxxxxx určenou citlivost. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx mutací x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nutný xxxxx ovlivněných xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx uskutečňuje per xx, injekčně xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx. Zkrmování xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx v 0,7% xxxxxxx XxXx x xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
V xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x pozitivní xxxxxxxx. Jestliže xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx historické kontrolní xxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.6 Dávkování
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx maximální tolerované xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Netoxické xxxxx xx testují x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
Xxxxx xxxxxxxx xxxx (xx xxxxx 3-5 xxx) xxxx ovlivněni xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Muller-5 nebo x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx linie (vícenásobná xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxx xxx, xxx xxx pokryt xxxx xxxxxxx cyklus xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx efekt xxxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx xx xxxxx spermie, xx xxxxxxxxxx xx středním xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x spermatogonie.
Xxxxxxxxxxxxx X1 xxxxxx narozené x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kříženy xxxxxxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) se svými xxxxxx. X X2 xxxxxxxx xx v xxxxx kultuře xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx samců xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v rodičovském X-xxxxxxxxxx (nejsou xxxxxxxx xxxxx samci s xxxxxxxxxx chromozómem), xxxxx xxxxxx samic xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx hodnocených X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x počet xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx křížení x xxx každého xxxxxxxxxxx xxxxx. Zaznamenává xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx potvrdit x xxxxxxxxxx experimentu.
Údaje xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx letálních mutací xxxxxxxxx x jednom xxxxx xx xxx xxxxx x úvahu x xxxxxxxxxx vhodným xxxxxxxxxxxx způsobem.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kmenech Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxx F2 xxxxxx, xxxxx X2 kultur xxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- kritériích xxx xxxxxxxx ovlivněných skupin,
- podmínkách testu: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx dávek, xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x rozpouštědlem) x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- kritériích počítání xxxxxxxxx mutací,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx možné,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.21. TEST XXXXXXXXXXXX SAVČÍCH XXXXX - XX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
Savčí xxxxx lze xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkami xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx X3X10X1/2, 3X3, XXX, Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx se xxxxx o xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, tvorbu xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx agaru. Méně xx xxxxxxxxx systémy xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx morfologické změny x buňkách xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx karcinogenity. Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxx zjištěna xxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xx schopnost xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) nebo ovlivněním xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx cytotoxicity xx xxxxxxx ze xxxxxxxxxxx, xx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx relevantní, ale xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x určení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx mohlo xxxxx k prodloužení xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x primokultur xxxxxxxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx buňky použité x testu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx karcinogenem x xx xxxx používaný xxxxxxxxxx je ověřen x xx je xxxxxxxxxxxxx xxxx oprávněnost x spolehlivost.
1.2.1.2 Médium
Xxxxxxx média x xxxxxxxxxxxxxx podmínky xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx test xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx ovlivněním xxxxx. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxxxxx rychlost nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx testované látce x xxxxxxxxxxx a xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx buňky s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivitou, xxxxxxxx její vlastnosti xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x vyžadujících metabolickou xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx (s rozpouštědlem).
Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-dimetylaminoazobenzen, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx třeba, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx látka.
1.2.2.2 Koncentrace
Xxxxxxx xx nejméně xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxx efekt závislý xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nízkou xxxxxx přežívání buněk, x nejnižší xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx vodě relativně xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx testovat xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxx rozpustné netoxické xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxx být exponovány xxxxxxxxxxx xxxx závislou xx použitém xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx může xxxxxxxxx i opakovanou xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx x výměnou xxxxx (ev. výměnou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx testované látce x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxx xx x buněk xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx transformace. Xxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx být prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx vyjadřovat xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x frekvenci xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx o:
- použitých buňkách, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,
- kultivačních xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, metabolickém aktivačním xxxxxxx, pozitivních x xxxxxxxxxxx kontrolách, xxxxxxx xxxxx xxxxx expozice, xxxxxxxxxxx sledovaného xxxxxxxx, xxxxxxx selektivního systému (xx-xx to vhodné), xxxxxxxxxx xxxxxx koncentrací,
- metodách xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX TEST X XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx letalita xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx dominantních xxxxxxxxx mutací xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, že tato xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx exponovaného xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx, xx dominantní xxxxxxx mutace xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxx). Xxxx embrya xxxxxxxxxx samice xxxx xxx xxxx výsledkem xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na samičku x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx vyjadřuje postimplantační xxxxxx. Preimplantační xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx součet xxx- x postimplantačních xxxxx. Xxxxxxx celkové xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxx xx srovnání xxxxxx xxxxxxxxxx xx samici x exponované skupině x živým implantacím xx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx intervalu může xxx xxxxxxxxx zánikem xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx rozpustit xxxx xxxxxxxxxxx ve fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx xxxx se xxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Způsob aplikace
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx informací xx xxxxx podávat xxxxx xxxxxxxxx. Obvyklý xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx nebo intraperitoneální xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Pro test xx doporučují xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, xxxxxxxx dospělá xxxxxxx jsou náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny.
1.2.2.3 Xxxxx a xxxxxxx
Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x ohledem xx spontánní variabilitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky. Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx detekční xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxx 30 - 50 březích xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly
Xxxxxxxxx x negativní (x xxxxxxxxxxxxx) kontroly xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxxxx experimentu. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivních xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx použity. Xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx citlivost xxxxx (např. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 mg.kg-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Nejčastěji se xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx je postačující xxxxx vysoká xxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxx test
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x jedné dávce 5 g.kg-1 xxxx x dávce 1 x.xx-1.xxx-1 při xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Existuje xxxxxxx postupů. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx.
Jeden samec xx xxxxxxxxx křížen x xxxxxx nebo xxxxx neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxx u xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx jednoho cyklu xxxx, nebo pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vagině či xxxxxxxxx xxxxx.
Počet xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx schématem xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx všechna xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx dělohy xx xxxxxxxx k určení xxxxx xxxxxxx x xxxxxx implantací. Xxxxxxxxx xxxx být vyšetřeny x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx x xxxxx xxxxx, xxxxx březích xxxxx a počtu xxxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx x tabulkách. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxx samostatně. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx záznam o xxxxx páření, o xxxxx podané samci, x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx živých implantací xx samici x xxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxx implantací x xxxxxxxxx skupině. Xxxxx mrtvých ku xxxxx implantacím x xxxxxxxxxx skupině xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
V xxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxxxx x preimplantační ztráty. Xx mohou být xxxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx počtem xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Údaje xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu obsahuje, xx-xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxx, xxxxx, věku x xxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx jejich xxxxxx, negativních a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x toxicitě,
- xxxxxxx podání a xxxxxxxx expozice,
- xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx,
- doba xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx dávka/odpověď,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX V XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx OECD XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Aberration Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx testu je xx vivo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx většinou xxxxxxxxxxxx, ovšem k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x analýze xxxxxxxxxxx xxxxxxx x běžně xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chorob.
Tímto xxxxxx xx analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx předpokládá, že xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx testem xx xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx.
Aby xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx chromatidového xxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx poškození xxxxxx x následujícím buněčném xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x ovlivněných spermatogonií xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu x xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx buňky xxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx test xx xxxx xx určen xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x somatických xxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx význam xxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx in xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX.
X xxxxxx je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, kde xxxxxxxxxx diferencované xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pak xxxxx generace xxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale nemusejí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx kvůli anatomické x xxxxxxxxxxxx bariéře Xxxxxxxxx buněk a xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx obou chromatid, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyjádřená xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx a opětovné xxxxxxx xxxx chromatid xx stejném xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx hodnotit xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx v xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx zlomu xx dislokovaný (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x důsledku xxxxxx.
Gap: achromatická xxxx menší xxx xxxxx jedné xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx haploidního počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx (3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx metafáze, pozorovaná xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x ve xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx usmrtí. Před xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx pak xxxxxxxx xxxxxxxxx a xx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxx samci xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxx jakéhokoliv xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx rozdíly xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Všeobecném úvodu x xxxxx B.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí x xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba uspořádat xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx klece xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky se xxxxx podávat přímo xxxx xx xxxx xxxxxxxxx ředí. xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Rozpouštědlo/vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, aby xxx xx to xxxxx, bylo na xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx testu xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx stejně.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxx xxxxxxx, kdy xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad spontánní xxxxxx.
Dávky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Xxx xx to xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx látka. Příklady xxxxx vhodných xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
akrylamid xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx intervalů zpracování, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxx x xxxxxxxxx x o xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx je třeba xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, nebo xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x pohlaví zvířat
X xxxxx zkušební x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx samců.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jednorázově nebo xx dvou dávkách. Xxxxx se jedná x xxxxxxxx dávku, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x rozmezí xxxxxxxxx několika hodin. Xxxxxx xxxxxx dávkování xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Jelikož xxxxxxxxx látka může xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 24 x 48 xxxxx po xxxxxxxx. X ostatních xxxxx (xx. xxxx xxxxx xxxxxxxx) se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xxxx xx 1,5násobku xxxxx buněčného cyklu xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx účinku (6).
Xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx intervaly odběru xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx o látku xxxxxxxxxxx pohyb xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, nebo xxxxx x účinky xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx doba xxxxxx xxxxxx (1).
Zda xx vhodné xxxxxx xxxxx působit xxxxxxxxx, xx posuzuje xxxxxx xx případu. Xxxxx xx provádí aplikace xxxxx opakovaně, xxxxxxxx xx zvířata xx 24 xxxxxxxx (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Odběry xxx provádět i x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx xx xx účelné.
Xxxx xxxxxxxxx xx zvířatům xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje vhodná xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx z xxxx xx xxxxxxx intervalu xxxxxxxx xxxxxx. U xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Provádí-li xx studie xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx třeba xx provádět x xxxx laboratoři xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene a xxxxxxxxx xxxxxx, jaké xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx tak, aby xxxxxxxxx rozmezí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx nízké xxxx xxxxxx. Pro xxxxxxxx xxx odběru vzorků xx pak xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, že xxx xxxxxxx dávkách ve xxxxxxx xxxxxx podávání xx účinky byly xxxxxxx.
Látky, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xxxx být xxxx xxxxxxxxxx jako xxxxx, xxxxx xxxx k xxxxxxx známkám toxicity xx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx meiotické xxxxxxxx( xxxxx xxxxxx xxxx xxx vyšší xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx x jedné xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx podaných x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx úrovní. Podle xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx xx může použít x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx žaludeční xxxxxx, xxxx intraperitoneální injekcí. X xxxxxxxxxxxx případech xxxxx xxx přijatelné x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx najednou vpravit, xxxxxx na velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x hmotnosti; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx třeba xxxxxxx koncentrace látky xxx, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx úrovních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Okamžitě xx xxxxxxxx xxxxxxx xx z xxxxxxx xxxx x obou xxxxxx xxxxxxxx buněčná xxxxxxxx, xx kterou xx xxxxxx hypotonickým xxxxxxxx x xxxxxx xx. Buněčná suspenze xx xxxxxx xx xxxxxxxx sklo x xxxxxx.
1.5.7 Analýza
X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx xx xxxxxx, xx-xx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx preparáty (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx fixační xxxxxxx xxxxx vedou x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx roven xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx. U každého xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxxx xx jednu xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť, xxxxxxx xx, ale xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nezahrnují.
Xx-xx analyzována xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxxxxx míra xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx meiotické xxxxxxxx, x xx xxx, xx xx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx pouze mitóza, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx 1000 xxxxx z xxxxxxx jedince.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x chromozómovými xxxxxxxxx, xxxx zřetelný xxxxxx xxxxx xxxxx x aberacemi xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx je možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx dalším xxxxxxxxxx, xxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx považuje xx nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pozitivní, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx případech xxxxxxx xxxx nedovolují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx bez xxxxxx xx xxxxx opakovaných xxxxxxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxxxx živočišného druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx určitou xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x věk xxxxxx,
-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, včetně hmotnostního xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxx xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx koncentrace xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx / den),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- počet analyzovaných xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx a xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxx počet aberací x dané skupině,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
- historické xxxxx x negativních kontrol xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Závěry.
B.24. SPOT XXXX X XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Je xx xx vivo xxxx na xxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx embrya xxxxxxxxxx chemickým xxxxxx. Xxxxxxxx buňkami x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx geny xx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx genů xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx ztráty xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fenotypem x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (spots) xxxxxxxxx xxxxx srsti narozených xxxx. Počet potomků x xxxxxx skvrnami, xxxxxxxx, je xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x embryonálních xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx vodě jsou xxxxxxxxxx nebo suspendovány xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx rozpouštědla nesmí xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Používají xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxxx xxxxx X (nonagouti, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, xxx x/xxx x; xxxxx, x/x; xxxxxx, xxxxx xxx, x xx/x se; xxxxxxx xxxxxxxx, x/x) xxxx xxxxxxx xxx x xxxxxx XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, brachypody, xx x xx/xx x xx; leaden xxxxx, xx fz/ /xx xx; xxxxx xx/xx) nebo x xxxxxx C57 XX (xxxxxxxxx, x/x).
Xxxxx xxx použita x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx potomci. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx XXXX (xxxxxxxxx, x/x; albino, x/x) x DBA (nonagouti, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx byl zajištěn xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx a x xxxxxxxxxxx myší. Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Negativní x pozitivní xxxxxxxx
Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx kontroly). Xx xxxxxxx citlivosti xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx účinkem xxxxx být v xxxxx testu xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mutagenita xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxx xx používá xxxxxx xxxxxxxx sondou xxxx intraperitoneální xxxxxxx xxxxx xxxx. Xx-xx xx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiný xxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.5 Dávkování
Xxxxxxxxx xx nejméně xxx xxxxx, z xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx vrhu.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pouze jednou 8., 9. nebo 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx den xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 x 9.25 xxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxx provést xxxxx xxxxxx xxx.
Analýza
X mláďat xx xxxxxxx a zaznamenáván xxxxx skvrn xxxx xxxxxx x čtvrtým xxxxxx xx porodu. Xxxxxxxxx se xxx xxxxx xxxxx:
(x) xxxx skvrny x xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, o kterých xx předpokládá, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);
(x) xxxxx xxxxxx xxxx agouti xx vyskytují v xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx, hrdla, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx čela x xxxxxxxxxxx se, že xxxxxxxx x důsledku xxxxxx xxxxxxxxxxxx (XXX);
(x) zbarvené x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x srsti xxxx výsledek xxxxxxxxxxx xxxxxx (RS).
Xxxxxxx xxx skupiny jsou xxxxxxxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxxx, RS, xx xxxxxxxxx relevantní. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx XXX x XX xx xxxxx vyřešit xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Získaná data xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx počet sledovaných xxxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx více skvrn xxxxxxxxxx somatickými xxxxxxxx. Xxxxx získané x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx také xxxxxxx xxxx získané xxxxxxx xx xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx o:
- xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx skupině,
- xxxxxxxx velikosti xxxx x experimentální x x kontrolní xxxxxxx při xxxxxx x xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx aplikována,
- x způsobu podání xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxx počtu sledovaných xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx x XXXX, XXX x XX x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x RS, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX U XXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx detekuje xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx změny v xxxxxxx zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx potomků. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx potomků ještě xxxxxx X-chromozómu. Nositelé xxxxxxxxxxx x XO-samice xxxxxxxx xxxxxxxx fertilitu, xxxxx se xxxxxxx xxx výběr X1 xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Úplná xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx translokací (X-xxxxxxx x x-x xxx). Xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx I, nebo X1 xxxxx či xxxxxxx potomků F1 xxxxx. Samice XX xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pouze 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x kostní xxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx nerozpustné, xxxx xxxxxxxxxx nebo suspendovány xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxx xxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Aplikuje xx obvykle orálně xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx aplikace.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx křížení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx provádí xx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx kmen. Xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xx xxxx xxx xxxxx xxx xxx x xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx zvířata.
1.2.1.3 Xxxxx zvířat
Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx frekvenci spontánních xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyžadovaném pro xxxxxxxxx kontrolu.
Test xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx samců F1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx v F1 xxxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxx exponované xxxxxxx. Jestliže budou xxxxxxxxxxx xxxx samice X1 xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx 300 xxxxx x 300 xxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx z předchozích xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx se jedna xxxxx, obyčejně xxxxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Pro stanovení xxxxxx xxxxx/xxxxxxx je xxxxx dvou dalších, xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxxxxx xxxxxxxx dosažitelná xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxx x oplodnění
Xxxxxxxxx se xxx xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dní x xxxxx xx 35 xxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xx expozici xx řízen schématem xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx zárodečných xxxxx xxxxx analyzována. Xx xxxxx období xxxxxxxxxxx jsou samice xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, velikost xxxx x xxxxxxx mláďat. Xx xxxx xxxx xxxxx x samičí xxxxxxx odděleni xx xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Používá xx xxxxx xx xxxx možných metod. Xxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxxx x následná xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx cytogenetickou xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx analýza xxxxx xxxxx X1 xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Test xxxxxxxxx
Xxxxxxx fertilita xxxxxx x X1 xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxx dělohy samic. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx stanovena xxx xxxxx kmen xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx: F1 samci xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx samostatně xx xxxxx xx xxxxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx. Klece jsou xxxxxxxxxxxx denně počínaje 18. dnem xx xxxxxxxxx. Velikost xxxx x pohlaví X2 xxxxxxx jsou zaznamenány xxx porodu, hned xxxx xxxx odděleni. Xxxxxxxx xxxx testovány X1 xxxxxx, F2 xxxxxxx xxxxxx vrhů xxxx uchováváni xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxx xxxxxxx. XO-samice xxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx x 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx vs. xxxxxx. X následném xxxxx xxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx první X2 xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx. X1 xxxxxxx, která xxxxxxx být klasifikována xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxxx tří F2 xxxx, jsou dále xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx podrobena xxxxxxxxxxxxx analýze.
Xxxxxxx xxxxxx dělohy: Redukce xxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx vysoký xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx X1 xxxxx jsou xxxxxxxxxxx každý xx 2 - 3 xxxxxxx. Oplodnění xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zátky. Xxxxxx xxxx usmrceny 14. - 16. xxx a jsou xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx zárodky.
(x) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx multivalentních xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx - metafáze I x primárních spermatocytech. Xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x multivalentními xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xx nositelem xxxxxxxxxxx. Jestliže xxx xxxxxxxx výběr no xxxxxxxx, xxxxxxx F1 xxxxx xxxx vyšetřeni xxxxxxxxxxxxx. Na každého xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx v xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx meiozy xxxx xxxxxxxxxx nebo x X1 samic suspektních XX. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx samčí translokační xxxxxxxxx (c-t xxx). Xxxxxxx X-autosomální translokace xxxxxxxxxxx samčí sterilitu xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mitotických xxxxxxxxxx. Přítomnost 39 xxxxxxxxxx ve xxxxx 10 mitózách xx xxxxxxx pro XO xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx průměrná xxxxxxxx xxxx a xxxxx pohlaví (xxx xxxxx).
Xxx xxxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx F1 nosičů xxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x individuální počty xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxx každé xxxxxxxxxxx F1 nosičů xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X xx xxxxx počet xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx translokací.
Xxx X1 sterilní jedince xx zaznamenává počet x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
U XO xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx trhu, xxx xxxxx F2 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx analýzy.
X xxxxxxx, že pomocí xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxxxxxx, xx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů.
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x pozitivních kontrolách.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, informace x:
- kmenu xxxx, xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx zvířat,
- počtu rodičovských xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách,
- xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- počtu x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx potomků xxxxxxxxx pro analýzu xxxxxxxxxxx,
- době x xxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx translokací xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x obsahu xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.26. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX ORÁLNÍ
(90denní xxxxxxxxx podávání per xx, xxxxxx na xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx zvířat, a xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx příznaky toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, která přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx x potravě, xxxxxx, v xxxxxxxx xxxx x pitné xxxx. Xxxx xxxxxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx pokusu stejnou xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx aditiva, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx dřívější xxxx, xx možno je xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx proti tomu. Xx xxxxx používat xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx by xx počátku xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 6 týdnů, v xxxxxx případě starší xxx 8 týdnů. Xx xxxxxxx studie xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx test xxxx dlouhodobým xxxxxx, x obou xxxxxxxx se má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx použít nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx musí xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit celkový xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx podávat xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 dnů nejvyšší xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Dávkování
Je xxxxx xxxxxx nejméně xxx úrovně dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně jako x xxxxxxxxx. Používá-li xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, které se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx existují xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx nejnižší xxxxx xxxx hodnotu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx toxický účinek xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx být xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxx x v kontrolní xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx se použít xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx sondou, mělo xx xx tak xxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx, x dávkování x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx xx 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx-xx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxx (nebo xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné expozici xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx dalšího testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, xx xxxxx zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx množství xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx dobu xxxxxxxx, xxxxxx a trvání. Xx třeba zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.2.3 Popis postupu
X xxxxxxxx případě xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx dobu 90 xxx. Zvířata v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx dalších 28 xxx bez aplikace, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxx potravy (a xxxxxx vody xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x pitné vodě) x xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají týdně.
Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx jako xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx včetně kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx přístrojem xx xx provést xxxx podáváním testované xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx alespoň u xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx pokusu xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx stanovovat vápník, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, glukózu na xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx pro úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: lipidů, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx toxicity.
Xxxxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, hrudní x břišní xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx se xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx vysychání.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny tkáně x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, štítná xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx brzlíku, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, aorta, (slinné xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (xxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, lymfatické xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx), páteřní xxxxx xx xxxxx úrovních - xxxxx, střed xxxxxx a xxxxxxx, x (slzné xxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxx, xxxxx xxx xx jejich postižení xxxxxxxx z příznaků xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx podána nejvyšší xxxxx, a x xxxxxx kontrolní xxxxxxx.
(x) Je xxxxx xxxxxxxx všechna xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx skupinách.
(d) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx mají histopatologicky xxxxxxxxxx x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx histopatologická xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx však provést xxxx xx orgánech, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx.
(e) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x orgánech, x xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat s xxxxxxxxxxxx typy xxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx dávek,
- úroveň xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx zvířat xx konce xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx nálezy,
- detailní popis xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx), x to xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Během období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x kapslích. Mohou xxx xxxxxxx xxxx xxxx způsoby xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xx xxxxx xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, je xxxxx xx využít.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx používá pes: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx zdravých xxxxxxxxx; v xxxxxxx xxx xx má x podáváním začít xx xxxx od 3 xx 6 xxxxxx x xx xxxxxxx než 9 xxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx předběžný xxxx před dlouhodobým xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx použít nejméně 8 zvířat (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx zvířat xx xxxxx pokusu xxxx xxx takový, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
1.2.2.3 Dávkování
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx x jednu kontrolní xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx úroveň xx neměla xxxxxxx xxxxx příznaky toxicity. Xxxxx existují xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx nejnižší xxxxx xxxx hodnotu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx by xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxx xxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Podává-li xx málo xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx, xxx xxx aplikované xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
Podává-li xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx konstantní xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Podává-li xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x kapslích, xxxx xx xx xxx dít xxxxx xxx xx stejnou xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx intervalech xxxxxxxxxxxxx změnám tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.
Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx xxxxxxxxx test xxxx dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx dieta.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx den (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, je možno xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxx aplikované xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky nebránily xxxxxxxx výživě zvířat.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx dobu objevení, xxxxxx a xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx a xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis postupu
X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx látku 5 dní x xxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje (xxx není na xx omezeno) změny xxxx, srsti, očí, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx potravy (x příjem xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pitné xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Nejméně xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx pečlivá klinická xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x minimalizaci xxxxx zvířat pro xxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx pitvají xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx. Umírající xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Na xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo uprostřed x xxxx xx xxxxx pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů x testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxxxx testu, x xxxxx buď x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x dále xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx transamináza xxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (dříve glutamát-oxalacetát xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků. Před xxxxxxx vzorků xxxx xx nehlodavci měli xxxxxxxx (xx více xxx 24 xxxxx).
(x) Xxxxxxx moče xx nevyžaduje xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo pozorované xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx zahrnující zevní xxxxxxxxx povrchu těla, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx dutiny xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (s příštítnými xxxxxxx) x xxxxxxx xx co nejdříve xx sekci zváží xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx je xxxxx přechovávat ve xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), žlučník, jícen, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx a slepé xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, reprezentativní lymfatické xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (oči), xxxxxx kost x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) a (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx poškození x xxxxxxx s nejvyšší xxxxxx, nebo xxxx xx to xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat s xxxxxxxxxx, xxxx poškození x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx k tomu xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx má pokud xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx nebo xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, potrava,
- xxxxxxxxxxxxxx podmínky,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) a koncentrace,
- údaje o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- úroveň xxx xxxxxx, pokud xx lze xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx klinické xxxxxx),
- doba, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření a xxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxx analýz xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX DERMÁLNÍ
(90denní xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx hlodavcích)
1. METODA
1.1 Princip xxxxxxxxx metody
Testovaná xxxxx se aplikuje xxxxx xx xxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxxx denně pozorují, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x podmínkách ustájení x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá mladá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.
Krátce xxxx xxxxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo oholení xx potřeba xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx je třeba xxxx na xx, xxx xx nepoškodila xxxx (např. xxxxxx). Xxx nanášení se xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxx x úvahu hmotnost xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Při xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx formy, xx xxxxx zkoušenou xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, králíky xxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, jejich xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro každé xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx použít nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) se xxxxxxx xxxx. Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx se zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, která xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx a během xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx podávání sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt toxických xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba expozice xx xxx nejméně 6 hodin xxxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx. X intervalech xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx zvířete. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx se xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x to xx xxxxxxx množství, které xxxxxx skupina, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Nejvyšší xxxxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx účinky, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx jen v xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx toxický účinek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx skupině x xxxxxx x střední xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx uhynutí xxx xxx nízký, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx testované látky x těžkému podráždění xxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx, což x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx může vést x omezení nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxx-xx k xxxxxxx poškození kůže, xx dokonce za xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 nebo vyšší xxxxx, která odpovídá xxxxx expozici xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, není xxxxx xxxxxxx nutná.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx třeba denně xxxxxxxxx x zaznamenávat xxxxxxx účinky. Je xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a čas, xx kterém se xxxxxx x opět xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 28 dnů bez xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx přetrvávání. Xxxx xxxxxxxx xxxx nejméně 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx rovnoměrně xx xxxxx xxxxxx, xxxxx představuje xxx 10 % xxxxxxx xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxx látek xxxx xxx xxxx plocha xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pokusné xxxxxx xxxxxxxxxx v xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx pomocí xxxxxxxxx mulového xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxx plochu xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, aby xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X zamezení xxxxxx látky je xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx xxx omezení xxxxxxxx xxxxxx, úplnou xxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxxx nebo jiným xxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx otravy xxxxxx xxxxxx počátku, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v kleci xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xxx x xxxxxxx, a také xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx týdně x spotřebu xxxxxxx. Xx třeba zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx jako xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chybného xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, xxxxx přežila, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, které xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx čas či xxxxx trombocytů.
(c) Xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx látky. Doporučuje xx stanovovat vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx transamináza xxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x celkové bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další biochemické xxxxxxx xxxxx být x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx spektra xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx historická xxxxxxxxx xxxx, má xx xxxxxx stanovení hematologických x xxxxxxxxxxxxx parametrů xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, všech tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx dutiny xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx vysychání.
Následující xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx místě xxxxxxx, (průdušnice), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (slinné xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx (xx-xx přítomen), jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx x kostní xxxxx), (xxxx stehenní xxxxxx kloubních ploch), (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx úrovních - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx) a (xxxxx xxxxx). Xxxxx x závorkách xx xxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x exponované kůže, xxxxxx x tkání xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx skupiny.
(x) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx cílové xxxxxx x ostatních xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, plíce xxxxxx xx skupinách x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, protože to xxxxxxxxx xxxxx zdravotního xxxxx zvířat. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx provádět xxxxxxx, xxxx se xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, na xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x vysokou dávkou.
(x) Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx tkáních x xxxxxxxx, u xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx x procentuálně počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx dávek (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx ji xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx případných xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - studie xx hlodavcích)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to xx 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx pro xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupinu xxx vehikulum. Xxxxx xxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se zdravá xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné vehikulum xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x nich xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx je xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx mladých xxxxxxxx zvířatech z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Na začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx stejný xxxx a kmen.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx je třeba xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 samců). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx budou xxxxxxx v průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která budou xxxxxx xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx nejvyšší koncentraci x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx po xxxxxxxx expozic xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt toxických xxxxxx.
1.2.2.3 Expoziční koncentrace
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx skupiny s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - pokud xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x skupiny s xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx). X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx v xxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx koncentrace tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx střední koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x nízkou x střední koncentrací x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx expozice.
1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx proudění xxxxxxx x výměnou xxxxxxx 12xxxx za xxxxxx, xxx byl xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx v xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxx. Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx individuální xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx celého xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x čas, ve xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3. Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x otravy nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx být 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx případů, xxx xx není možné (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx voda.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolou koncentrace. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx pokus pro xxxxxxx potřebných koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx xxxxx xxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx x celém xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:
a) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx této xxxxxx xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx rozsah xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx je xx prakticky xxxxx. Xxx xxxxxx generátoru xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx, jak je xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx.
c) Xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx
x) Xxxxx xxxxxxxx x xx xx se zvířata xxxxxxxxxxxx pozorují a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, stupeň x xxxxxx. Pozorování x kleci zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické aktivity x xxxxxxx. Hmotnosti xxxxxx x spotřeba xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx nedocházelo ke xxxxxxx zvířat jako xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata je xxxxx vyřadit x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx přístrojem xx xx provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx nejlépe x všech zvířat, xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se oční xxxxx, vyšetří se xxxxxxx zvířata.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx trombocytů.
(c) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx pozorováním způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, chloridy, sodík, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx se xxxx xxxxx živočišného xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx charakteristiky, které xxxxx xxx potřebné xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další biochemické xxxxxxx mohou xxx x případě potřeby xxxxxxx xxx rozšíření xxxxxxx pozorovaných účinků.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx začátkem xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých xx studii xx xxxxxxx pitva zahrnující xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, hrudní x břišní xxxxxx x xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba přechovávat xx vhodném xxxxx x xxxxxxx na xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny tkáně x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx x fixovat xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx zachovala struktura xxxx - perfusní xxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, mozek - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx místě xxxxxxx, xxxxxxxxxx, srdce, xxxxx, xxxxxx žlázy, xxxxx, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx střevo, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, reprezentativní xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx žláza), (xxxxxxxx xxxx), periferní xxxx, (xxx), xxxxxx kost x kostní xxxxx, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx ploch), (páteřní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx). Tkáně v xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx příznaků xxxxxxxx nebo pokud xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x ostatních xxxxxx x xxxxx je xxxxx provést x xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx exponována xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx kontrolní xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx orgány v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx histopatologická xxxxxxxxx xx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(e) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx byly zjištěny xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sestaví xx tabulky. X xx musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x lézemi, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx počet zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- živočišný druh, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx pokusu: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx vzduchu, systému xxxxxxxx částic x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx systému, xxxxx likvidace odpadního xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrací x xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x expozici xx sestaví xx xxxxxxx x uvedou xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristikou xxxxxxxxxxx (např. směrodatnou xxxxxxxxx). Mají obsahovat xxxx xxxxx:
x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením,
x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,
c) nominální xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přiváděné xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
x) povaha vehikula, xxxxx xxxx xxxxx,
x) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, kdy byly xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- oftalmologické nálezy,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.30. TESTOVÁNÍ XXXXXXXXX TOXICITY
1. XXXXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx sedm dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na xxxxxxx, xx xxxxx část xxxxxx xxxxxx. Během x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx chována xxx standardních xxxxxxxxxx xxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxxx testu. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Preferovaným xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx x další xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxx). Xx třeba xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx běžně xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx by xxxx být xxxxxxxx xx nejdříve xx xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx rozdíl xx xxxx xxxxxx činit xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx použít xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 samců), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx skupinu. Samice xx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testu, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
X případě xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxx než 4 xx xxxxxxx pohlaví xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Dávky x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxx tři dávky x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxx vyvolat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Střední xxxxx by xxxx xxx xxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxxx x nízkými xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx měl xxxx x úvahu výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx vodě nebo x potravě, je xxxxx xxxxxxxx, xxx x ní xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x exponované skupině, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx zvláštních xxxxxxxxx, jako jsou xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx orální xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx ani vehikulu.
1.2.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx xxxxxx xxxxxxx aplikace xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pravděpodobném xxxxxxx xxxxxxxx člověka.
Použití xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicita x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx orálního xxxxx x znalosti xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x předchozích xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx
Xxx, kde xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx může xxx exponován člověk, xxxx se přednost xxxxxx aplikaci, pokud xxxxxx proti xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v potravě, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx nebo podanou x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx sedm xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx pět xxx x týdnu xxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx v xxxxxx xxx xxxxxxxx, a xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, především x xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx považováno xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx podrobněji xxxxxxxxx x této cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x specifických situacích.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx lidské xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx pět dnů x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), s přibližně xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx zvířat xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx exponována fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx studia x xx xxxxxx xxxxxxxx, která xx xxx xxxxxxxxxx. Nicméně, xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx prostředí mohou xxx narušeny xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) generace aerosolu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx a technik xxxxxxxxxxxx.
Expoziční xxxxxx
Xxxxxxx se exponují x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx přísun xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Kontrolní x xxxxxxxxx xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované látce. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx udržuje xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaných zvířat. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxx neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx komorou xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx by xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx xxxx než 15 % xxxxxxx xxxxxxx;
(x) xxxxxxx a xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx měla xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 xX x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx xx měly xxx kontrolovány xxxxxxxx;
(x) xxxxxx velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se odebírají x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx vzduchu xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by gravimetricky xxxxxxxxx celému suspendovanému xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx aerosolu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx stabilitu distribuce xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx exponována.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 měsíců.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxx. xxxxx nebo xxxxxxx xx lednice u xxxxxx, která xxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxx. Xxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx spolehlivě xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx toxických xxxxxx, x také xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x důsledku xxxxxx, xxxxxxxx xxxx kanibalismu.
Xxxxxxxxxx xx klinické xxxxxxxx xxxxxx neurologických x xxxxxx změn x xxxxx xxxxxx, x dále xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx objevení a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx.
Hmotnost xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx jednou xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx xxxxxx xxxxx a aspoň xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx tomto xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, kde xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x pitné xxxx) xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx intervalech, ledaže xx xxxxxxxxx stav xxxx xxxxx tělesné xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx sledování.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx destiček xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx měla xxx xxxxxxxxx za xxx měsíce, šest xxxxxx x poté x přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. xx 10 potkanů xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx to xxxxx, xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx být xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx měl být xxxxxxx xxxxxx před xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x u xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxx xx i x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxx moči
Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx intervalech xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx směsném xxxxxx xxx skupiny xxxxx xxxxx a xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, ketolátky, okultní xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx (xxxx- kvantitativně).
1.2.3.4 Biochemické xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx závěr xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx,
- koncentrace xxxxxxxx,
- testy xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx bázické xxxxxxxxx, aktivita glutamát xxxxxxx transaminázy1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ornithin xxxxxxxxxxxxx,
- metabolismus xxxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,
- testy xx xxxxxx ledvin, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx sérová xxxxxx aminotransferáza
2) xxxx známá jako xxxxxx xxxxxxxx aminotransferáza
1.2.3.5 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx provede x xxxxx zvířat xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx byla utracena x xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx xxxxxx nebo léze, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx být xxxxxx, xx třeba xxxxxxx. Xxxx by xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx. To se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a tkání:mozku3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, kory mozkové), xxxxxxxx mozkového, xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, thymu, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, žaludku, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, ilea, xxxxxxx xxxxxx, tračníku, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx mléčné xxxxx, xxxx, svaloviny, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, hrudní a xxxxxxx), sterna s xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x očí. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx respirační xxxxx xxxxxx nosu, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxx-xx provedena jiná xxxxxxxx xxxxxxxxx, informace xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou dát xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx xxxxxxx a xx skupinu x xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) ze xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx
1.2.3.6 Histopatologie
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxx léze xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(x) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx uchovaných xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx nalezených:
1. x všech xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx studie,
2. x xxxxx xxxxxx xx skupiny s xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxx či xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx způsobené xxxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxx xxxx ve xxxxxxxxx s nižšími xxxxxxx,
(x) xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx nebo vyvolání xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx vyšetří popsaným xxxxxxxx,
(x) informace x incidenci xxxx, xxxxx se normálně xxxxxxxxx v použitém xxxxx xxxxxx, ve xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxx správné posouzení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx zvířat vykazujících xxxx x procento xxxxxx vykazujících jednotlivé xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxx odpovídající statistickou xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, dieta,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího z xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, kde je xx žádoucí, stability xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx aerosolu. Xxxxx x expozici: xx xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) a měly xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx průtoku vzduchu xxxxxxxxxx zařízením
(b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(x) nominální xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx inhalační aparatury xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx)
(x) xxxxxx vehikula, xx-xx použito
(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx
(f) xxxxxxx xxxxxxxxx částic (xx-xx xx xxxxxxxxxx)
- dávkové úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx
- údaje x xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxx a xxxxx
- xxxxxxxx (dávková) xxxxxx
- xxxx xxxxx xxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx
- xxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxx
- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
- oftalmologické nálezy
- xxxxxxx hematologické xxxxx x xxxxxxxx
- xxxxx klinické xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (včetně výsledků xxxxxxx moči)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.31. STUDIE XXXXXXXXXXXX - HLODAVCI X XXXXXXXXXX
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx podává x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x tom xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx před xxxxxxxxxx datem porodu xxxx xxxxx samice xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx metoda xxxxxxxx studium xxxxxx- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, dospělé xxxxxx, xxxxx xxxxx nebyly xxxxx, xxxxxxxx věku x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Potom xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx plodností. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Oplodnění může xxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx. Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx samicím xxxxx. Aplikace xxxxxx xxxxx xx implantaci x pokračuje xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Den xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx vyjmuty xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx do xxxxxx.
1.2.2 Testovací xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Běžně xxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx, xxx, křeček x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x králík. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx neměl xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xxx x xxx xxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 20 březích potkanů, xxxx xxxx křečků xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx studované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx dostatečný xxxxx xxxx a xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Xx třeba xxxxxx xxxxx tři xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx, že xx xxxxxxxxx látka podána xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx i xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vehikula: xxxxx být xxxxxxxxxxx xxx mít vliv xx xxxxxxxxxxx schopnosti. Xx zvířaty x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx x výjimkou aplikace xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxx toxicity, xxxx xx xxxxx snížení xxxx, ale už xx xxxx xxx 10 % xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxx geometricky xxxxxxxxx xxxx nízkou x xxxxxxx dávkou.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
V xxxxxxx, že xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryotoxicity xxx xxxxxxxxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxx xx xxx, xxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zátka x/xxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xx měla zahrnovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 6. až 15. xxx x xxxxxxx x myši, 6. xx 14. xxx x xxxxxx a 6. až 18. xxx x xxxxxxx. X xxxxxxx, že xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx bylo xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx připočítat x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx den. Podle xxxx alternativy končí xxxxxxxx jeden xxx xxxx xxxxxxxxxx porodem.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x opatření xxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx ztrát xxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx ve xxxxxxx xxxx.
Testovaným xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx období xxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xx počátku xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx periodicky xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx posledního xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx ihned xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, stupně x xxxxxx. Xxxxxx vykazující xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X pozorování xx xxxxx xxxxxxxxxx i xx ukončení podávání xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx porodem. Xxxxxxx účelem xx xxxxxxxxxx xxxxxxx období xxxxxxxx, xxx vyhnout xx komplikacím xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx porodu. Xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xx mělo zahrnovat xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Každý xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vážit xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
Pokud dojde x uhynutí xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xx třeba x xxxxx makroskopicky xxxxxxxx na morfologické xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohly xxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx dobu xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. X potkanů x xxxxxxx xx xxxxx stanovit xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx pohlaví xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxxx. Xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx každý zárodek. X potkanů, xxxx x křečků je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x x zbytku xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pitvou z xxxxxxxx abnormit xxxxxxxxxx x skeletu.
2. XXXXX
Xxxxx je xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, počet xxxxxx, xxxxx zabřezla, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx a vztah xxxxxxx abnormit x xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxx. Výsledky xx xxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx možno xxxxxx jakékoliv uznávané xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZPRÁVA
3.1. Xxxxxx x testu
Xxxxxx x xxxxx by xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- dávky (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx účinku (pokud xx xxxx xxxxx xxxxxxxx),
- dobu xxxxx během xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx potravy,
- xxxxx březosti x xxxxx o xxxx (xxxxxx historických xxxxx),
- údaje x xxxxxxxxx (živé/mrtvé, xxxxxxx, defekty xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx vrzích (živé/mrtvé xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.32. TEST XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx sedm xxx x týdnu, xxxxxxx cestou, několika xxxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxx xxxxx na xxxxxxx, xx xxxxx xxxx života xxxxxx. Xxxxx a po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx denně xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx podmínkách xxxxxxxx x krmení xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx testu. Xxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních x exponovaných xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx je xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx x další xxxxx (hlodavce x xxxxxxxxxx). Používají xx xxxxxx mladá xxxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx ve xxxx xxxxxx činit xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. V případě, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx test subchronické xxxxxx toxicity, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx x kmen x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx hlodavce se xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xxx každou úroveň xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx zvýšit x počet zvířat, xxxxx xxxxx takto xxxxxxxx před xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx by xxxx vyvolat příznaky xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xx mírný pokles xxxxxxxx přírůstků (méně xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx účinky xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxxxx interferovat x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx života xxxxxxx nebo vyvolat xxxxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxx by neměla xxx xxxxx než 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx středním pásmu xxxx xxxxxxx x xxxxxx dávkou.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx x xxxxx předchozí xxxxx x studie toxicity.
Xxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx xx být xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná kontrolní xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinou, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Ve zvláštních xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo použije-li xx xxx orální xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita není xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx, která není xxxxxxxxxx xxx vehikulu.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, dermální x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx podání xxxxxx xx fyzikálních x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice u xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx studie
Xxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx traktu x je-li xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx orální xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx mohou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, rozpuštěnu x pitné vodě xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx dnů x xxxxx může xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x tudíž xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx aspekty, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx studie
Xxxxxxxx přímo xx xxxx může být xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx a xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx studie
Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx cestě podání. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx xxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo v xxxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně po xxxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx krmení xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx případech xxxx zvířata obvykle xxxxxxxxxx xxxxxx koncentracím xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx expozicí xx x xxx, xx x xxxxx xx zvíře 17 - 18 hodin xx ústup xxxxxx xxxxx expozice x xxxxx delším xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx vzít x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxx zevního xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nutnosti xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx par x technik monitorování.
Xxxxxxxxx komory
Zvířata xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx aby xxxx xxxxxxxxx podmínky xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx atmosféry x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) Xxxxxx vzduchu: rychlost xxxxxxx xxxxxxx komorou xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontinuálně.
(x) Xxxxxxxxxxx: během xxxxx expozice xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxx více xxx ± 15 % xxxxxxx hodnoty.
(x) Teplota a xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X a xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Oba xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány xxxxxxxx.
(x) Xxxxxx velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic v xxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x respirabilní xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým je xxxxx exponováno, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část aerosolu xxxx respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx během xxxxxxx xxx xxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxx, kterým jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx testu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx zvířete použitého xxx xxxx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x 24 měsících u xxxxxxx. Nicméně, pro xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx dobou xxxxxx xxxx. s xxxxxx spontánním výskytem xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxxx xxx xxxx x křečky x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx zřetelný xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx uhyne xxxxxxxxx xxx skupina x xxxxxxx dávkou xx xxxxxxxx toxických příčin, xxxxxx xx nutné xxxx x ukončení xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, nesmí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem nebo x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nesmí být xxxxx než 50 % v 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x potkanů.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Denní xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx x srsti, xxx a xxxxxxx, xxxxx x dýchacího, xxxxxxxxx, autonomního a xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx xx nutná, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x mortalita by xxxx být zaznamenány x všech zvířat. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx vývoji xxxxxx: doba xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, rozměry, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx hmatného xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx tam, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě) xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx by xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx tělesné xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx sledování.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx čtyři xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Klinická xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Pokud xxxxxxxxxx xxxxxx x klecích xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Xx 12 xxxxxx, xx 18 měsíců x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx ve xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx utracením, xxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx i x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx nižší, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx u xxxxx zvířat, xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx utracena, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx, nebo xxxx, xxxxx by xxxxx xxx tumory, je xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx měly být xxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření: xxxxx (xxxxxx řezů xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, mozečkové xxxx, kory mozkové), xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx x příštítná xxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, slinné xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx, xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, representativní xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx s xxxxxx xxxxx, stehenní kost xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx třech úrovních (xxxxx, střední hrudní x xxxxxxx) x xxx.
Xxxxxxxx plic x močového xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxx respirační xxxxx včetně nosní xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
1.3.2.3 Histopatologické xxxxxxxxx
(x) Xxxxx histopatologie xx provede v xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx testu, x x všech xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x nevyšší xxxxxx.
(x) Všechny xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx orgánu xx xxxxx x x xxxxxxx skupinách.
(x) Xx-xx přežití xx skupině x xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x skupina x xxxxxxxxx xxxxx dávkou.
(x) Je-li ve xxxxxxx x vysokou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, které xx mohly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx kompletně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx dávkovou xxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx xxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, ukazujících xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx počet xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxx utracení. Xxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx statistické xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxx
Zpráva x xxxxx bude, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx ustájení, dieta,
- xxxxxxxx xxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx konstrukce, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx zvířat v xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x expozici: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatná xxxxxxxx) x xxxx xx zahrnovat:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x inhalačním zařízení,
(x) teplotu x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx děleno objemem xxxxxxx),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx použito,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx,
(x) mediány velikosti xxxxxx (tam kde xx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (včetně xxxxxxxx, je-li užito) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx tumorů xxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxx tumoru,
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx konce,
- xxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- popis xxxxxxxxx x jiných xxxxxx,
- doba, xxx xxx pozorován xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx další xxxxx,
- xxxx x spotřebě potravy x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxx patologicko-anatomické,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx metod,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.33. XXXXXXXXXXX XXXX CHRONICKÉ XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Cílem xxxxxxxxxxxxx xxxxx chronické xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx je určit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky x xxxxxxxxx druhu xxxxx xx dlouhodobé expozici.
Xxx xxxxx xxxx xx test xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x kontrolní xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx tuto xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxx než nejvyšší xxxxx xxxxxxx při xxxxx karcinogenity. Zvířata x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jak xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx.
Testovaná xxxxx se xxxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx skupinu, xx xxxxx xxxx xxxxxx zvířat. Xxxxx x po xxxxxxxx xxxxxxxxx látce jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity x xxxxxx tumorů.
1.2 Popis xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x pokusných xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx nejméně xxx xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx studií xx xxxxx xxxxxx x xxxxx druhy (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx odstavení xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx neměl xxxxxx xx váze zvířat xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx třeba použít xxxxxx druh x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Pro xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 zvířat (50 xxxxx a 50 xxxxx) na xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx (xxxxxxx) xxx xxxxxxxxx patologie xxxx, xxx xxxx xxxxxx, xx každá xxxx xxxxxxxxx 20 zvířat xxx každé xxxxxxx, xxxxxxx satelitní xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx 10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Dávkové xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Pro xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx tumory. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx interferovat s xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x délkou xxxxxx xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx nižší xxx 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx dávku/dávky xx xxxxx stanovit xx xxxxxxxx pásmu xxxx vysokou x xxxxxx dávkou.
Při xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.
Pro xxxxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx satelitní xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx denně. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx xx xxx stále x xxxxxxxxx.
1.2.4 Kontroly
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx případech, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx charakterizována, zařadí xx xxxxx negativní xxxxxxxxx skupina, která xxxx exponována xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx orální, xxxxxxxx a inhalační. Xxxxx způsobu xxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Orální xxxxxx
Xxx, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx z xxxx, xxxxx xxxx xxx exponován xxxxxx, xxxx se přednost xxxxxx aplikaci, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx dostat testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx podanou x tobolce.
Ideálně xx xx měla xxxxx podávat xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx v xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, dávkování xxxxxxx xxxxx je považováno xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx u xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx vyvolání kožního xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx studie
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx způsoby xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x této xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx xxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x návaznosti na xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin denně xx xxxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x přibližně xxxxxx hodinou pro xxxxxx zvířat xxxxx xx stejnou dobu xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. V obou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x stálou xxxxxxxx je x xxx, xx x xxxxx má xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx expozice závisí xx xxxxxx xxxxxx x xx lidské xxxxxxxx, která má xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx obtíže. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxx nutností xxxx x xxxxxx xxxxx expozice a xxxxxxxx komplikovanější (a xxxxxxxxxx) generace xxxxxxxx xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx xx exponují x inhalačních komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proud xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx za xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x rovnoměrná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx komory xx xxxx mít xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx srovnatelné xx xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx udržení stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(b) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx expozice xx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx neměla xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxx x vlhkost: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °X x vlhkost x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, kdy je xxxx používána x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x atmosféře komory. Xxx parametry xx xxxx být kontrolovány xxxxxxxx,
(x) měření xxxxxxxxx částic: měla xx xxx stanovena xxxxxxxxxx velikosti částic x xxxxxxxxx komor x tekutých xxxx xxxxxxx aerosolů. Aerosolové xxxxxxx xx měly xxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx reprezentativní xxx xxxxxxxxxx částic, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aerosolu, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx generujícího xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx posoudit stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx část normální xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro test. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx v 18 xxxxxxxx x xxxx x křečků x 24 měsících x xxxxxxx. Nicméně xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxx xxxxx xxxxxx resp. x xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 měsíců xxx xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx nebo x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx ukončení testu, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, každé pohlaví xx xxxxxxxx zvlášť. Xxx, kde xxxxx xxxxxxxxx xxx skupina x xxxxxxx xxxxxx xx zjevných toxických xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx celého xxxxx, xxxxx ostatní xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx by xxxxxx xxxxxxxx. Aby xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx ztráty použitelných xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx obsluhy) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx skupinách nesmí xxx nižší než 50 % x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxx skupiny 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxx pohlaví x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro testování xxxxxxxxx toxicity xx xxxx být x xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. U xxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx k xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Pozorování
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx (skupin) xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, aby xx zabránilo xxxxxxx xxxxxx xx studie xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a očních xxxxxx x xxxxxxxxx xx zaznamenávají x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx vývoji xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, vzhled x xxxxxxxx každého xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Je xxxxx provádět xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx zdravotní xxxx nebo změny xxxxxxx xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Tělesné hmotnosti xx zaznamenávají individuálně x xxxxx xxxxxx xxxxxx týdně během xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Klinická xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. obsah xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx tři xxxxxx, xxxx xxxxxx x xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech, x na xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 potkanů xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx xx xxxxx, xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxx potkanů.
Pokud xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx svědčí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx během studia, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx má xxxxx bílých krvinek xx provede xx xxxxxxxx ze xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou a x kontrol. Pokud xxxx xxxx nebo xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x u xxxxxxx x dávkou xxxxxxxx nižší, xxx xx xxxxxx dávka.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Vzorky xxxx xx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxx pokud xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Následující stanovení xxxx provedena xxx xx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xxxx xx xxxxxxx vzorku xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx krvácení (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech x xx xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx biochemická xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví, pokud xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx vedle xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:
- xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx,
- koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), glutamát xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx aspartát aminotransferáza
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx včetně xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx všech xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx nebo xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx mohly xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.
Xxxxxxx xxxxxx x tkáně xx měly xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), podvěsku xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, jater3), sleziny, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterníku, xxxxxx, xxxx, slepého xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, lymfatických xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí xxxxxx žlázy, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nervu, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x bederní), xxxxxx x xxxxxx dření x stehenní kosti xxxxxx xxxxxx, x xxx. Naplnění plic x močového xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxx tkání; xxxxxxxx xxxx v inhalačních xxxxxxxx xx zásadní xxx odpovídající xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie, má xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx provedena xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx procedur by xxxx být x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx patologovi xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x na xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx vyšetření se xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx satelitní xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxxx skupině xxxxxxxxxx nevyšší xxxxx xxxxxx patologické xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, vyšetří xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x ze xxxxx xxxxxxxxxxxx skupin xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
(x) xxxxx histopatologie xx xxxxxxx x xxxxxxxx x tkáních xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x s xxxxxxx xxxxxx;
(x) xxxxxxx xxxxxx viditelné okem x léze, které xxxx podezřelé xxxx xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx;
(x) xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx tkáni i x xxxxxxx skupinách;
(x) xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, měla xx xxx kompletně zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší xxxxxx;
(x) je-li ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad o xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx dávkovou xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx s tumory xxx xxxxxxxx. Výsledky xx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxx xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxx
Zpráva x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx testu: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx používá. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) xx měly xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx inhalační aparatury xxxxxx objemem vzduchu),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx zóně,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xxxxxxxxxx),
- dávkové xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- data incidence xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx a xxxx xxxxxx,
- doba xxxxx xxxxx studie xxxx xxx zvířata xxxxxxx až xx xxxxx včetně xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- výskyt xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx ,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx potravy x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické xxxxxx,
- použité xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx,
- testy klinické xxxxxxxxx x všechny xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx v odstupňovaných xxxxxxx.
Xxxxx dostávají xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx a xxxxxxx v průběhu xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx u xxxx x 70 xxx x xxxxxxx), xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx xxxxx na spermatogenezu.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx dobu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx cyklů, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx nepříznivý účinek xxxxxxxxx látky xx xxxxxx. Zvířata xxxx xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx připouštění se xxxxxxxxx látka podává xxxxxxxx xxxx pohlaví, x xxxx gravidity x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Příprava
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xxxx chována xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx pokusu x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx jsou také xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx dostávají stejným xxxxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditivum, xxxx být o xxxx známo, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx zvířata
1.2.2.1 Xxxxx druhu
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx zdravá xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx x nízkou xxxxxxxxx. Xxxx být xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx co xx druhu, xxxxx, xxxxxxx x xxxx x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx být odstavena xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx stejným termínem xxxxxx. Xxxxx je xxxxxx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxxx x potomstva, x xxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxx, xxxxxx gravidity a xxxxxxxx xxxxxxx x X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx početí xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx testu
Xxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvláštních xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x je xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Použijí se xxxxxxx xxx exponované xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vehikulum x nejvyšším xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx co xx výživy.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx to není xxxxxxx jejími xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo povahou xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxx xx xx xxxx připsat xxxxxxxxx látce, a xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolávat xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxx u rodičů xxx x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxxxxxxxxxx se každý xxxxx xxxxx xxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx samic dávky xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx hmotnosti x 0. nebo 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx xxxx
X případě látek x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx ani xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na reprodukci, xxxxxx xx provádět xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ukáže, xx xxxxxx dávka, xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity, xxxx nepříznivé xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Popis postupu
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx samcům xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxxx týdnů, xx xxxxxxx pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx deset týdnů xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 týdnů xxx xxxx). Xxxxx xx xxx utratí x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx připouštění, nebo xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx pak xxxxxxxx a vyšetřeni xxxxx před xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx aplikace xxxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxx po xxxxxxxxx aklimatizaci x xxxxxxxxx aspoň dva xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Denní xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx připouštění, v xxxx xxxxxxxxx xx xx odstavení F1 xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx studované xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx a/nebo bioakumulaci.
1.3.2 Xxxxxx xxx připouštění
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (jedna samice x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx samicím).
X xxxxxxx 1 : 1 párování, xxxxxx xx ponechá x týmž samcem xx xxxxxxxx kleci xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Každé xxxx xxxx xxxxxx vyšetřeny xx xxxxxxxxxx spermatu xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo spermatu.
Xxxxxxx, u xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx neplodnosti páru. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx jedinci xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo vyšetřením xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx vrhů
Xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx porodit xxxxxxxx a xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx okamžiku xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx třeba dodržet xxxxxxxxxxx xxxxxx: mezi 1. a 4. xxxx xx xxxxxx xx velikost xxxxx xxxx upraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jedinců xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx vrh; xxxxx xx není proveditelné, xx xxxxx standardizovat xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 xxxxx x 3 samice. Xxxx xxxxx než 8 nelze standardizovat.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx zvíře xx xxx pozorováno xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Významné xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx prodlouženého xxxxxx x všechny příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx se měří xxxxx jak xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx porodu a x průběhu laktace xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (a vody, xxxxx se látka xxxxxx v pitné xxxx) ve stejný xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X zvířata se xxxx xxxxx den xxxxxxxx x xxx xxxxx. Všechna xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx dospělé xxxxx.
Xxxx gestace xx počítá od xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx vrh xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx vyšetří x xxxxxxx se xxxxx x pohlaví xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx dnu xx xxxxxxxx xxx vyšetření xx xxxxx defekty. Xxxx mláďata se xxxxxxxxx x xxxx xxxx se xxxxx xxxx xx porodu, xx 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx týden xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx jsou zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx matek x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx
1.3.5.1 Xxxxx
Xx xxxxxxxx nebo xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx abnormality xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx váčky, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxxxx xxx mikroskopické xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx orgány xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku x xxxx u xxxxxx, která xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxxxx u těchto xxxxxx zvířat, xx xxxxxxx x x X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx již bylo xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx podrobit mikroskopické xxxxxxx.
2. XXXXX
Data xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx na začátku xxxxxx, xxxxx plodných xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx změn x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxx xx použít xxxxxxxxxx obecně přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxxxxxx
Zpráva x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje:
- xxxx/xxxx použitých zvířat,
- údaje x xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxx x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gestace x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx studie xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,
- tabulka uvádějící xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx hmotnost xxxxxxx,
- xxxxxxx a xxxxx účinky xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx růst,
- xxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud je xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - DVOUGENERAČNÍ XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx rodičovské (X) xxxxxxxx dostávají xxxxxxxxxx látku x xxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx x 70 xxx x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nepříznivý xxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx generace (P) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx cyklů, xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na estrus.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx zvířatům xxxx pohlaví x xxxxx, x době xxxxxxxxx a kojení, xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx je látka xxxxxxxx zvířatům filiální xxxxxxxx X1 x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx a až xx xxxx odstavení X2 xxxxxxxx.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Před zahájením xxxxx xxxx zdravá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx - kontrolní x xxxxxxxxxx skupiny. Rodičovská xxxxxxx (X) xxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx v těch xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, v jakých xxxxx xxxxx experimentu. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx nebo v xxxxx vodě. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiné xxxxxxxx, xxxx xxx x nich xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 dní x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxx P xxxxxxx, xx té doby xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx s nízkou xxxxxxxxx. Musí být xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x váhy xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Počet x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx zaručeno xxx 20 xxxxxxx xxxxx x přibližně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Cílem xx xxxxxx dostatečný xxxxx těhotenství a xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx spolehlivé xxxxxxxxx xxxxx látky xx xxxxxxxx, průběh xxxxxxxxx x mateřské xxxxxxx, xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx početí xx xxxxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx F2 až xx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx dostávají xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx těhotné xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro vytvoření xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx kontrolní. Pokud xx používá xxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx látka snižuje xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx do xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx koncentraci xx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx biologické xxxxxx, xxxxxxxxx toxicitu x xxxxxx xxxxxxxxx x rodičovské populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx účinky, které xx xx daly xxxxxxx testované xxxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx u xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.
Xxx podání xxxxxx nebo x xxxxxxxxx xx dávka xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx týden podle xxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx těhotných xxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx hmotnosti x 0. nebo 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx účinkem xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx studie xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx jasnou xxxxxxxxx xxxxxxxx, nemá xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Plán xxxxxx
Denní xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X začne xx xxxx xxxx až xxxxxx xxxxx, xxxxx xx pětidenní xxxxxxxxxxxx xx odstavení. U xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx připouštění (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx konci xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx x aplikaci x xxxx použiti xxx xxxxxxxxx produkci xxxxxxx vrhů x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx pokusu.
Denní xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx týdny před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx pokračuje xxx xx celé xxx xxxxx xxxxxx připouštění, x xxxx gravidity xx xx xxxxxxxxx X1 xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx dávkovacího xxxxx xxxxx xxxxxxxx x vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx, např. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xx odstavu x xxxxx jejich xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Je možno xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx a jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, samice se xxxxxxx s xxxx xxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx do otěhotnění xxxxx xx dobu 3 týdnů. Xxxxx xxxx xxxx samice xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx den nálezu xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.
Vzhledem k xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, zvířata xxxxxxxx X1 se xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx x xxxx x 13 týdnů x potkanů. Xxx xxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxxx X1 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx vrhů xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx.
Dvojice, x xxxxxxx nedojde x xxxxxxxxx, je xxxxx vyšetřit x xxxxx zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx páru. To xx možné xxx xxxxxxxxxxx xxxxx příležitosti x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx obou xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx normálně x xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx se velikost xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: mezi 1. x 4. xxxx xx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx vyřazením xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx počtu 4 xxxxx x 4 xxxxx na xxx; pokud xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 samců a 3 samice. Xxxx xxxxx než 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Standardizace xxxx xxxxxxxx X2 xx xxxxxxx obdobně.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, příznaky ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx xx měří xxxxx xxx před, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx denně. Xx xxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X x X1 xxxxxxx xx xxxx xxxxx den xxxxxxxx x xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx dne 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx se co xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx x stanoví xx xxxxx a xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x přítomnost xxxxxxx anomálií.
Xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx ve čtvrtém xxx xx uchovají xxx vyšetření na xxxxx defekty. Xxxx xxxxxxx xx spočítají x celé vrhy xx xxxxx xxxx xx xxxxxx, ve 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx x zaznamenávají xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Pitva
Všechna xxxxxxx zvířata xxxxxxxx X a X1 xx utrácejí, jakmile xxxx xxxxx je xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx reprodukci. Zvířata xxxxxxxx X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X2 xx xxxxxx xx odstavení.
Xx xxxxxxxx xxxx úmrtí xx všechna xxxxxxxxxx xxxxxxx X x X1 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx strukturní xxxxxxxxxxx xxxxx patologické xxxxx, xx zvláštní pozorností x orgánům xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx na defekty.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, epididymis, xxxxxxx xxxxxxx, koagulační xxxxxx, prostata, xxxxxxxx x další cílové xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X x X1 xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření. X xxxxxxx, že xxxx orgány nebyly xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u všech X x F1 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x skupiny dostávající xxxxxxxx dávku, xxxxx xxxx vybrána xxx xxxxxxxxxxx, x dále x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx zvířat, xx xxxxxxx x x xxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxx případech se xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zpracovány příslušnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x experimentu by xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- údaje x xxxxxxx xxxxxx x závislosti xx xxxxx x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- dobu xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx vrhu, průměrnou xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x individuální xxxxxxxx xxxxxxx xxxx utracením,
- xxxxxxx x xxxxx účinky xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx hmotnost zvířat X a F1 xxxxxxxx, vybraných xxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech údajů, xxxxx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- interpretace xxxxxxxx.
X.36. TOXIKOKINETIKA
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx testovací metody
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx vhodnou cestou. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx podávána xxxxxxxxxxx nebo opakovaně x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, jedné xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx jsou xxx podle xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx s "neznačenou" xx "značenou" formou xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx se tak, xxx xxxxxxxx co xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nejméně xx xxxx pěti xxx xxxx xxxxxxxxxx. Před xxxxxxxxx testování xxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx otázek xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx se xxxxxxxx na druzích xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se testovanou xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx používáni xxxxxxxx, neměla xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro studium xxxxxxxx a vylučování xx užije xxxxxxx 4 xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx není xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx podmínek xxxx xxxxxxxxx potřeba xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx odpovědi x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx třeba xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxxxxxx druhů xxxxxx (xxxxxx xxx xxxxxxxx) je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx distribuce, xxx xxx xxxxxx počáteční xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx utracena v xxxxxx časovém xxxx, xxx počet xxxxxxxx xxxx, v xxxxx xxxx xxxxxxxxx prováděno.
Xx-xx studován xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx skupiny xxxxxx xx úměrná xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx a sledovaných xxxxxxxx xxxxxxxxx, pak xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx měla xxxxxxx x xxxxxx časových xxxxxxxxx a plánovaným xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx nesmí xxx xxxx xxx 2 xxxxxxx. Velikost xxxxxxx zvířat xx xxxx xxx dostatečná xx xx, xxx xxx xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx poskytla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, rovnovážného xxxxx x deplece.
1.2.2.3 Xxxxx
V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 různé xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx by to xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx pozorovány xxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx změny x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx podání xxxxxxx xxxxx látky. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxxx vysoké xxxxx.
1.2.2.4 Způsob aplikace
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx prováděny xxxxxxx způsobem aplikace x je-li xx xxxxxx i xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx používány x ostatních xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Intravenózní xxxxxx testované xxxxx xxxx být užitečné xxx stanovení relativního xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Navíc xxxxxx po intravenózní xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx vehikula x xxxxxxxxxx xxxxxx. Pozornost xx xxxx být xxxxxx xxxxxxxx rozdílům xx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx, xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx, x potřebě přesného xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx sledována denně x příznaky xxxxxxxx x xxxxx relevantní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x údaji x xxxxxx počátku, xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx testovaná xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přiměřeným xxxxx. Xx zdůvodněných xxxxxxxxx je možno xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Absorpce
Ke xxxxxxxxx rychlosti x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx1), a xx xxxx.:
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx např. x xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx biologické xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) mezi testovanou x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ledvinami xxxx testovanou x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx látky x xx. jejích xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx x porovnání x xxxx získanými x xxxxxxxxxx skupině.
1) X xxxx xxxxxx xx referenční xxxxxxxx rozumí ta, xx které xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávky.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
V současné xxxx jsou xxxxxxxx 2 přístupy, x xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxx:
- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx kvalitativní informace;
- xxxxxxxxxxxxx informace xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a ev. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx moč, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx xx x xxxxxx exkretech xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx podání xxxxx, x xx xxx do xxxxxxxxx 95 % x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx 7 xxx xx počátku xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxx případech xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
K xxxxxx xxxxxxx x schématu xxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx metabolitů x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metabolické xxxxxx xxx, xxx xx xxxxx odpovědět xx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx získání xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vitro studií.
Xxxxx informace o xxxxxx xxxx metabolismem x toxicitou xxxxx xxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxx studií xxxx. xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx metabolického xxxxxxx, sledováním xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx studie xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxxxx možno xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu xx xxxxxx xxxxxxx x charakteristiky xxxxxxxxxxx xx vztahu k xxxx, xxxxx, xxxxx x orgánům (pokud xx xx xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metabolitů x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxx typu xxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx údaje:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, jestliže xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx podání,
- xxxxxx(x) xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx a x ostatní pozorované xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- tabulky xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, dávky, xxxxxx, xxxx, tkání a xxxxxx,
- uvedení xxxxxxx vstřebávání x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx čase,
- xxxxxx užité xxx xxxxxxxxxxxxxx x identifikaci xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx týkající xx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX - XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx specifický xxx xxxxxxxxxxxxx, který xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx toxicity. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx vitro xxxxx xxx použity pro xxxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x in xxxxx xxxxxx však xxxx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx látka xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Definice
Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x názvu xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu" xxxxx elektricky neutrální xxxxxxxxx estery, xxxxxxxxxx xxxx anhydridy xxxxxxxx xxxxxxxxxx, fosfonové xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx thiofosforečných, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, pozorovanou x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx neurotoxicita xx syndrom projevující xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, změnami v xxxx a xxxxxxxxxx xxxxx x pozdním xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x dále xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx esterase) x nervové xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Xxxxxxxxxx xxxxx může být xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupině k xxxxxxx, že x xxxxxxxxxxxxx podmínkách se xxxxxx testovaných xxxxx xxxxxxxxx nezměnila.
Příkladem xxxxxx používané xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx tri-o-tolylfosfát (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (XXXX).
1.4 Xxxxxxx testovací metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx orálně v xxxxxx xxxxx slepicím, xxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky. Xxxxxxx se xx xxxx 21 dnů xxxxxxxx, zaznamenává xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, obvykle 24 x 48 xxxxx xx xxxxxx xxxxx. 21 xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Příprava
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx chůzí xx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejméně 5 dní xxxx xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx xxxxxx umožňující volný xxxxx slepic x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx tobolkami nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx nebo rozpuštěné xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx olej, xxxxx xx xxxxxxxxxx rozpustit, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx tobolkách xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx se xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx volný xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxx z nich xxxxx být utraceno xxx biochemické xxxxxxxxx (xx třech xxxx x xxxxx xxx xx podání) x xxxx xxxxxxx 21xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se může xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx historie. Xx xxx aspoň xxxx xxxxxx, kterým se xxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxx slepice xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, když xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx).
1.6.1.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx stanovit xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx úmrtnost xx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx nezbytná xxx stanovení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxx se xxxxxxxxx úmrtí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx jiný ochranný xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinky. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx typů testovacích xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx xxxxx xxx slepice xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx informace xxxxx být xxxx xxxxxxxxx při výběru xxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx studii by xxxx xxx co xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx předběžné xxxxxx xxxxxx dávky x hornímu limitu xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx neměly xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 dnech xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx xxxx jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx xx xxxxx, xx neinterferuje x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx má použít xxxx ochrana xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.6.1.4 Xxxxxxx test
Jestliže xxxx s dávkou xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx údajů x látek s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx není třeba xxxxxxxx o studii x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Limitní test xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx naznačuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.1.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx je 21 xxx.
1.6.2 Popis postupu
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx akutního xxxxxxxxxxxxx účinku, je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x jediné xxxxx.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx začít xxxxxxxx xx podání xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx několikrát x průběhu prvních xxxx dnů a xxx aspoň jednou xxxxx xx xxxx 21 xxx xxxx xxxxx nebudou utraceny xxxxx xxxxx. Veškeré xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx nástupu, xxxx, xxxxxx a xxxxxx abnormálního xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx slepice xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx a xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx usnadnilo xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a pitvat.
1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Všechny xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx náhodně vybraných x xxxxx xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx a xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny (xx-xx xxxxxxx xxxxxxx) xx usmrtí v xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx látky. Xxx xxxxxxx inhibice XXX xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jeho xxxx xx xxxxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxxxxx xxx slepice x xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx skupiny xx 24 xxxxxxxx x xxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxx xx nástup xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx dvakrát ze xxx xxxxxx, x xx xxxx 24 xx 72 hodinami xx podání xxxxx.
X xxxxxx vzorků xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx reaktivace XXxX, xxx xxxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxx inhibitoru XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx x xxxxx zvířat (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x utracených xxx xxxxxx celkový xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx xxx biochemické xxxxxx) xx histologicky xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx situ xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx xx provádějí x horní krční xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx nervů xx xxxxxxx xxxxxxxx část x n. tibialis (x xxxx větve x x. gastrocnemius) x x n. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx chování) xxxxx xxxxxxxxxx další xxxxxxxxx xx pozdní neurotoxicitu. Xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx sledování.
Uvádějí xx xxxxx pro xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx tabulky. X xx musí být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx jevících xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx účinky, typy x xxxxxx těchto xxxxxxxxx xxxx účinků x procento xxxxxx xxxxxxxxxxxx každý xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx účinku.
Výsledky xxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x korelace xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a histopatologickými xxxxxx a dalšími xxxxxxxxxxxx jevy x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx metody xx xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx tyto xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx;
- počet x xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, podmínky xxxxxxxx xxx.;
- hmotnosti xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx x přípravě, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx výběru vehikula;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx a xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- specifikace podávaných xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx a fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- podrobné xxxxx x podání xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx klinických xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx);
- xxxxxxxx xxxxx biochemických xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky;
- pitevní nálezy;
- podrobný xxxxx xxxxx histopatologických nálezů;
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, u kterých xx to xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX XX 418.
X.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX 28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých organických xxxxxxxxx fosforu byly xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx mohou xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx však xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx látka xxxx neurotoxická.
Xxxxx 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Poskytne xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx odpovědi xx dávce x xxxx poskytnout xxxxx xxxxxxx dávkových úrovní, xx kterém xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx úroveň xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" patří xxxxxxxxxx xxxxxxxxx organické xxxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx kyselin xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx jiné xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x některých xxxxx xxxx skupiny.
Xxxxxx neurotoxicita xx xxxxxxx projevující se xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x míše x xxxxxxxxxx nervu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx inhibicí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) v xxxxxxx tkáni.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx orálně xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Zvířata xxxx sledována xxxxxxx xxxxxx denně, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx dávce. Xxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxxxx xxxxxxxx NTE, xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Dva xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nervových xxxxx.
1.4 Xxxxx xxxxxx testování
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx zdravé xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx virových onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x normální xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách chovu x krmení, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx xxxxxx umožňující xxxxx xxxxx xxxxxx x snadné pozorování xxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx podává orálně, xxxxx 7 dní x týdnu, xxx xxxxxx, želatinovými tobolkami xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tekutiny xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,
jako xx xxxx. xxxxxxxxx olej. Xxxxx xx doporučuje xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx pevných látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx nemusely xxxxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx nosičů xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx nosnice xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx domesticus) xx xxxx 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx velikosti a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, které dovolují xxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x jednu kontrolní xxxxxxx s xxxxxxxxx. X výjimkou aplikace xxxxxxxxx xxxxx se xx zvířaty v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.
X každé xxxxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx šest x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (po xxxxx v xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx) a xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx ukončení expozice.
1.4.2.3 Xxxxx xxxxx
Dávkové xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, nejlépe příznaky xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx dávek xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx. Nejnižší xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti a xxx, xx xxxxxxx xxxxxxx popsaných pro xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxx u xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx důvod xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xxxx xxxxx xxxxxxxx x studii x xxxxxxx vyšší xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx potřebu xxxxxxx ještě vyšší xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně xx xxxx xxxxxxxx a 14 dnů xx xx, xxxx do xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxx xxx v xxxxx po 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Xxxxxxxxxx xx začít xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x dalších 14 dnů xx xxxxxxxx aplikace, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx včetně xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx xx xx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stupnice, xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx slepice xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxx po xxxxxxx, xxx xx usnadnilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx vyloučit, humánním xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.4.3.2 Tělesná hmotnost
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx těsně před xxxxxx xxxxxxx testované xxxxx x pak xxxxxxx xxxxxx týdně.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Šest slepic xxxxxxx vybraných x xxxxx testované a xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx xx usmrtí x prvních xxxxx xx xxxxxxxx poslední xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX se xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx mícha. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. ischiadicus a xxxxxxxxxx xxxx tkáň xx xxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a každé xxxxxxxxx skupiny xx 24 xxxxxxxx a xxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání látky. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxx uvést x xxxxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx acetylcholinesterázy (XXxX). Xx vivo xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx vést k xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Xxxxx
Xxxxx všech zvířat (xxxxxxxxx usmrcených i xxxxxxxxxx xxx špatný xxxxxxx stav) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx x přeživších xxxxxx (nepoužitých xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx vyšetří. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx za použití xxxxxxxxxx xxxxxxx. Odebírá xx: xxxxxxx (střední xxxxxxx řez), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), z xxxxxxxxxxx nervů se xxxxxxx xxxxxxxx část x n. xxxxxxxx (x xxxx větve x m. xxxxxxxxxxxxx) x z n. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxx fixované xxxxx xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou. Xxxxx xx najdou x xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou xxxxxx xxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x na xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx dávku xxxxxxx x xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxx jsou výsledky xxxxxxx xxxxx metodou (xxxxxxxxx, histopatologie a xxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx neurotoxicitu. Xxxxxxxxxx xxxx neurčité xxxxxxxx xxxxx vyžadovat další xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxxx poškození, změny xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx zvířat vykazujících xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x korelaci xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x stáří xxxxxx,
- zdroj, xxxxxxxx ustájení atd.,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx začátku xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, stabilitě x xxxxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x kvalitě xxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx dávek,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x vehikulu, xxxxxx x xxxxxxxxx formě xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je-li xxxx xxx 24 x 48 xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- úroveň xxx xxxxxx (NOAEL),
- xxxxxxxxx, stupeň a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- podrobný xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, u kterých xx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Hodnocení x Interpretace
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 419.
X.39. Test xxxxxxxxxxx syntézy DNA x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx DNA Synthesis (XXX) Test Xxxx Xxxxxxxxx Xxxxx Xxxxx Xx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Účelem xxxxx xxxxxxxxxxx syntézy DNA (xxxxxxxxxxx DNA xxxxxxxxx, XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx pokusných zvířat (1) (2) (3) (4).
Xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinků xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxx testu indikuje xxxxxxxxx DNA v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx metabolismu xxxxxxxxxxxxx sloučenin; xxxx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxx detekci xxxxxxxxx XXX xx vivo.
Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, xx xx xxxxxxxxx látka do xxxxxx tkáně xxxxxxxxx, xxxx tento test xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (XXX) xx xxxxxxx tak, xx xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x buňkách, xxxxx xxxxxxxxxxxx plánovanou (X-xxxx) xxxxxxxx DNA. Nejběžnější xx metoda, při xxxxx se xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (3X-XxX). Xxx xxxxx UDS xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxx xx xxxx xxxx mohou použít, xxxxxx xxxx předmětem xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx XXX, xxx jsou x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Proto xx xxxxxx XXX xxxxxxx vhodná k xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx pro látky xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx repair" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Xxxx může xxxxxxxx k xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx replikace lézí XXX. Xxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxx xxx x přesnosti xxxxxxx xxxxxxxx. Mimoto xx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxx s XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx XXX není xxxxxxxx xxxxxxxx reparačním xxxxxxxx. To, xx XXX xxxx neposkytuje x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x celém xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Buňky x reparaci: xxx xxxxxxx xxxxx (XXX) xxxxx xxx určitá, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx test.
Xxx xxxxxxx xxxxxx (XXX): xxxxxxxxxxxxx míra XXX xxxxxxxx buněk xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxx x xxxxx (XX) x průměrným počtem xxx x xxxxxxxxxx (XX): XXX = XX - CG. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx apod.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx xxxxxxx XXX xx excizi x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx UDS x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx indikuje xxxxxxxxx syntézu DNA xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou látkou xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx vychází xxxxxxx x inkorporace 3X-XxX xx XXX xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx nízkým xxxxxx buněk x X-xxxx buněčného cyklu. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx tato xxxxxxxx xxxx tak náchylná x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x X-xxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx druhu
Běžně xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx dospělých xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při zahájení xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Všeobecném xxxxx x části X.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx umístěny.
1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx v xxxxxx xxxxx a je-li xx možné, látka xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx podáváním xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ji neovlivní.
1.4.3 Podmínky xxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx ne xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být jeho xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, aby kde xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxx je třeba xxx každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxx, xxx lze očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx aktivaci se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxx xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx látky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxx xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 hodin) | N-2-fluorenylacetamid (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Xx možná xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, než xx podávána xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx zvířat
X každé skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx jedinci. Xxxxx xxxxxxxx historická xxxxxxxx, pak pro xxxxxxxx skupiny negativní x pozitivní kontroly xxxxxxxxx xxxxx, nebo xxx jedinci.
Pokud x xxxx, xxx xx studie xxxxxxx, xxxxxxxx údaje ze xxxxxx s xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx využívajících xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx testování xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxxxx. Xxx, kde xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx pohlavně xxxxxxxxxx, jak xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx podává xxxxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Obvykle xx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxx xxxxx ve stejném xxxxxx xx xx xxxxxxxx letální xxxxxx. Xxxxx xxxxx představuje xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.
Xxxxx, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, jako xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx pro stanovení xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx údaje xxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xx realizovat x xxxx xxxxxxxxxx x za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx režimu, jaké xx xxx xxxxxxx x hlavní xxxxxx.
Xxxx nejvyšší xxxxx xxx také xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx v xxxxx den nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx základě xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkách neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx může xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx vyšší xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx žaludeční xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx však xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx by xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, závisí xx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x hmotnosti organismu; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx objemová xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx jaterních xxxxx
Jaterní xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx obvykle 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx odběr (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx xx xxxxxx látky), xxxxxx xx xx 12 - 16 hodinách xxxxxxxxx xxxxxx zjevná. Xx xxxxx možno xxxxxx x xxxx xxxx odběru vzorků, xx-xx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx toxokinetických xxxxx.
Krátkodobé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xx obvykle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx kolagenázou. Je xxxxx zajistit, xxx xx xxxxxxx disociované xxxxxxx xxxxx mohly xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Čerstvě xxxxxxxxx savčí jaterní xxxxx se xx xxxxxxx dobu (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx obsahujícím 3X-XxX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxx odstraní( xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx snížila neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Xxxxx xx xxx xxxxxxx, fixují x xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx intervalech xxxxxx se "cold xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x preparáty se xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx ve xxx (xxxx. xx xxxx jednoho xxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxxxx), vyvolají, xxxxxx x počítají se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx dva xxxx xxx preparáty.
1.5.8 Xxxxxxx
Mikroskopické preparáty xxxx obsahovat xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxx morfologií, aby xxxx xxxxx UDS xxxxxxxxxx. Mikroskopicky xx xxxxxxx zjevné xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. pyknóza, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Preparáty xx xxxx počítáním zrn xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x každého jedince xx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxx xxx 100 xx xxxxxxx jedince, xxxx xx xxx zdůvodněné. Xxx xxxxxxxx xxx xx nevyhodnocují jádra x X-xxxx, xxx xxxxx xxxxx x X-xxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx podle depozice xxxxxxxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxx shrnou x tabelární xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx dávku x xxx xx stanoví xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (NNG) odečtením xxxxx CG xx xxxxx XX. Počítají-li xx "xxxxx x xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx buňky xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x historických xxxx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami; xxxxx xx statistické testy xxxxxxx, xx xxxxx xx vybrat a xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xxxxxxxx pro xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx zahrnují:
xxxxxxxxx | (X) xxxxxxx XXX xxx xxxxxx xxxxxxxxxx prahem, xxxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx | |
xxxx | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxx kontroly | |
xxxxxxxxx | (X) xxxxxxx XXX na xxxxxx/xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x kontrol | |
xxxx | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxx signifikantně xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx. |
Je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat, xxx xxxxxxx, že xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx variabilita mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx statistické metody; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx být xxx pozitivní reakci xxxxxxxxxxxx faktorem.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek testu XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx buňkami xx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx XXX, které xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx DNA in xxxxx. Xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxx poškození DNA, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx vzít x xxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx dosáhne xxxxxxxx xxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- původ, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx i xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, xx xx xxxxx dostala do xxxxxxxx xxxxx xxxx xx cílové xxxxx,
- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxx/xxxxx vodě (ppm) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x vody,
- xxxxxxxx schéma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x odběru vzorků,
- xxxxxx zjišťování xxxxxxxx,
- metoda xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx metoda,
- počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxx analýzy,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx a "xxx nuclear xxxxxx" xxx jednotlivé xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx,
- statistické xxxxxxxxx, bylo-li xxxxxxxxx,
- známky xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx,
- xxxxx "xxxxx x opravě", xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x X-xxxx, xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
Xxxxxx X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.40. XXXXXXX XXXXXX XX XXXX
1. METODA
1.1 XXXX
Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx alternativních xxxxx (Xxxxxxxx Centre for xxx Validation of Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, XXXXX, Xxxxx Research Xxxxxx, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) schválilo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx in xxxxx na xxxxxxx xxxxxx na kůži: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx resistance, XXX) x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx lidské xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX prokázala, xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozlišovat xxxx xxxxxxx látkami xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx vycházející x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx správně xxxxxxxxxx jednotlivé stupně xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kůže X35, x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, X34). Xx uveden xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx; xxxxx xxxx xxxxx testy xxxxxx xx konkrétních xxxxxxxxxxx x na xxxxxxxxxxxx uživatele.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxx: způsobení xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX XXXXXX - XXXX XXX XX KŮŽI XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx odebrané x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobem. Xxxxx, xxxxx xxxx leptavé xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x bariérové funkce xxxxxx xxxxxxx.Xxxx schopnost xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx určitou xxxxxxxx xxxxxxx (5kΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx prahovou xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxx a neutrálních xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxx v xxx. (6)) xx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxx zařadit xxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx se x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx vyskytují (2) (7).
1.5 XXXXX METODY - TEST XXX XX KŮŽI XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mladí (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx xxxx srovnatelný xxxx. Malými xxxxxxx xx zvířata se xxxxxxx odstraní xxxx x dorzální x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx antibiotika, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, penicilinu, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx amfotericinu, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx čtvrtý xxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx omyjí xxxxxxxxxxx znovu x xxxxx 3 xxx xx použijí. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx terčíků xxxx
Xxxxxxx xx humánním xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx a x xx xx xxxxxxx sloupne xxxxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxx, x to epidermální xxxxxxx x trubici. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx přetáhne xxxxxx X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx připne, x xxxxxxxxxx tkáň xx xxxxxxx. Xxxxxxx trubice x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Gumový X-xxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxx ke xxxxx TPFE xxxxxxx xxxxxx vazelínou. Trubice xx ponoří do xxxxxx obsahující roztok xxxxxx hořečnatého (154 xX), xxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sponou (xxx. 2).
1.5.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x tekutém stavu, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx povrch xxxxxx xxxxxxx (obr. 2). Xx-xx xx stavu xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx epidermis, xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx vody x xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx. Testovaná xxxxx xxxx xxx x xxxx maximální možný xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx toho xxx xxxxxxxxx zahřátím xxxxx xx 30 xX, xxx se xxxxxxxxx, nebo rozetřením xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxx každou xxxxx. Xxxxx se xxxxxx xx xxxx 24 hodin (viz xxx 1.5.3.4) a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx vodovodní xxxx xxxxx maximálně 30 xX xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx v xxxxxxx ztuhla, xx xx xxxxxxxx vymýváním xxxxxxx proudem xxxx xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Měření TER
Transkutánní xxxxxxxxxx odpor (TER) xx měří xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx střídavý proud (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Před xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx povrchové xxxxxx xxxx přídavkem xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx se pokryje xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx otočí, x xxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 mM xxxxxxx xxxxxx hořečnatého. Xxxxxxxxx můstku xx xxxxxxx xx obě xxxxxx kůže a xxxxx xx xxxxx x xΩ/xxxxxx (xxx. 2). Rozměry xxxxxxxx x xxxxx holé xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx navrch XXXX trubice xxx, xxx byla xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vždy xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) elektroda se xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xx xxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx pružinové xxxxxx a xxxxxxx XXXX xxxxxxx (xxx. 1), xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx naměřený xxxxx vyšší xxx 20 xΩ, xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx překrývá epidermální xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx možno xx xxxxxxx xxxxx povlak xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx, xx xx XXXX xxxxxxx utěsní xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx 10 xxxxxx xx xxxxxxxxxx, roztok xxxxxx hořečnatého se xxxxxx a xxxxxx xxxxxx se opakuje x xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx hodnota XXX xx akceptována, pokud xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a aparaturu xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 M xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
10 – 25
|
1.5.3.3 Modifikovaný xxxxxx xxx povrchově xxxxxxx xxxxx a neutrální xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx je xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) xxxx neutrálních organických xxxxx xxxxxxx TER xxxxx nebo rovná 5 xΩ, lze xx xxxx tkáni xxxxxxx hodnocení průniku (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx zjistí, xxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Nanesení x odstranění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx na epidermální xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx na 2 xxxxxx po 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx kůže se xxx xxxxxx po xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx prudkým xxxxxxx xxxxxxxxx vody, xxxxx xx xxxxxxx pokojovou xxxxxxx. Xxx xx xx xxxxxxxxx přebytečné (xxxxxxxxxx) barvivo. Xxxxx xxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx sejme x XXXX xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx (např. do 20 ml xxxxxxxxxx xxxxx pro scintilaci) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx 5 xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zbytky xxxxxxxxxxxx (nenavázaného) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Pak se xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx x 5 ml 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx sodného (XXX) x destilované xxxx, xxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx teplotě 60 xX. Po xxxxxxxx xx terčíky vyjmou x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxx 8 minut při xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx odstředivá xxxx ∼ 175). Vzorek 1 xx xxxxxxxxxxxx xx pak xxxxx 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX v xxxxxxxxxxx vodě x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (v/v) (xx. 1 ml xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx xxxxxxx (XX) xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxx xx xxxxxxxx z hodnoty XX (xxxxxxx extinkční xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Obsah xxxxxxxxxxxxxx X xx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx zvlášť x stanoví xx xxxxxxxx hodnota. Xxxxxxxx xxxxxxx navázaného barviva xx xxxxxxxxxxx za xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx hodnoty spadají xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx uspořádání považují:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X kyselina chlorovodíková
|
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx zvolit xxxxxx xxxx působení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx kůže (xxxx. 2 xxxxxx) xx xxxxxx xxxxxxxxx silně xxxxxxxxxxx látek. Ve xxxxxxxxxxx studii však xxxx xxxxxxxx, xx xxxx XXX přeceňuje xxxxxxx schopnosti některých xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx xx terčíky xxxx xx 2 xxxxxx (2), jakkoliv umožňuje xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxx xxxxxxxxx vlastnostmi x rozměry xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx leptavé xxxxxx 5 xΩ xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx získaných xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx výrazně xxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, jež xxxx xxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 PRINCIP XXXXXXXX METODY - XXXX X MODELEM XXXXXX KŮŽE
Testovaný xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx až 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx model xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx schopnosti xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx stanovené například xxxxxx "XXX xxxxxxxxx xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xxx prahovou xxxxxxx definovanou xxx xxxxx expoziční dobu. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x předpokladu, že xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx nebo erozí) x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx přivodily xxxx buněk v xxxxxxxx buněčných xxxxxxxx.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX S XXXXXXX XXXXXX XXXX
1.7.1 Modely xxxxxx xxxx
Xxxxxx lidské xxxx mohou xxxxxxxx x xxxxxxx zdrojů, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx kritéria. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx corneum x xxxxxxxxxxx vrstvou živých xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx lze prokázat xxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxxxx xx nanesení xxxxx, x xxxxx xx xxxxx, že xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Model xxxx xx definovaných xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky.
Životnost xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxx, xxx xx dalo xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xx. XX hodnotou) xx xxxxxxxx xxxxx použité xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx látky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx s xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) musí xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx model xxxxxxxx mezinárodnímu validačnímu xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx kůže (minimální xxxxxxxx 25 (μ/cm2). Xx-xx pevná, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx kůži, x xxxxxxxx xx zvlhčí, xxx xx s xxxx zajistil xxxxx xxxx. Xxxxx xx xx třeba, pevné xxxxx se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. U metody xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx doby xxxxxxxx se xxxxxxxx x povrchu xxxx xxxxxxx xxxxx fyziologickým xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx životnosti xxxxx
X měření životnosti xxxxx xx dá xxxxxx jakákoliv xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx redukce XXX, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx přesné x xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky (2). Xxxxxx xxxx xx xx xxxx 3 xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20 - 28 oC. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx (extrakce rozpouštědlem) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XX xxx xxxxxx xxxxx 545 x 595 xx.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx kůže x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. xxxx xx životnost buněk xxxxxxxx vliv. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx i xxxxxxxxx model xxxxxxxxxxx xx použití xxxx xxxxxxxxxxxx standardů xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xx validizační xxxxxx XXXXX (3). Je xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx prokázáno, xx xx použitá xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx látek xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx standardů xxx x rámci xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx různými laboratořemi. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx vědeckém xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odbornou xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
1.8.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (x xΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní kontrolu x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx formě, x xx xxxx xxx xxxxxxx replikace x xxxxxxxxx experimenty, xxxxxxxx xxxxxxx x x xxxx xxxxxxxx klasifikace.
1.8.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX x vypočtené procento xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, x to xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x x nich xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX
1.9.1 Xxxx XXX na xxxx potkana
Pokud je xxxxxxxx xxxxxxx XXX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx než 5 xΩ, je xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx-xx hodnota XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx xx xxxxxx o povrchově xxxxxxx látku (detergent) xx neutrální xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx leptavé xxxxxx xx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx hodnoty XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, lze provést xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrole x 36 % XXx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxx účinky, kdežto xx-xx obsah barviva x xxxxxxx menší, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx účinky xxxx.
1.9.2 Test x xxxxxxx xxxxxx kůže
Hodnota XX xxx negativní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Z xxxxxx XX pro xxxxxxxxxx zkušební xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx procentický xxxxx životaschopných xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx nezpůsobují xxxxxxxxx xxxx, od xxxx, xxxxx poleptání způsobují, xxxxxxxxxx odlišuje jednotlivé xxxxx leptavých vlastností, xxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, než xx metoda xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx validační xxxxxx xx musí xxxxxxxx, xx je xxxx xxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti; xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx x xxx xx.
Xxxxxxxx pokusu
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx hodnot xxxxxx (xxxx XXX) xxxx xxxxxxxxxxxx podíl xxxxxxxxxxxxxxx buněk (xxxx x modelem lidské xxxx) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx resp. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;
- popis všech xxxxxx xxxxxxxxxxxx efektů.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2
Metoda X.40. byla xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx od 22.6.2001
B.41. FOTOTOXICITA - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX XX VITRO
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), x xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x následně xxx xxxxxx, xxxx je-li xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx celkovém xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx testu xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testované xxxxx, xxxx xx xxxxxxxx, zda xxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx možné nebezpečí xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx kombinovaným působením xxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxx, x xxxxxxxxxx, jež xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx byl xxxxxxxxxx x validován x xxxxx xxxxxxxxxx projektu XX/XXXXXX z xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vůči xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Xxxxxxxx xxxxx fototoxicity 3T3 XXX xx xxxxx xxxx porovnávány x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx u xxxxxx x lidí x xxxx zjištěno, xx xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxx, xxx předpovídal jiné xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx fotokarcinogenita, x xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx umožňoval hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx fototoxicity x xxxxxxxxxx látek je xxxxxxxx xxx dodatek.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: intenzita xxxxxxxxxxxxxx (XX) či xxxxxxxxxxx xxxxxx dopadajícího na xxxxxx; měřená xx X/x2 nebo x XX/xx2.
Xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, vyjádřené v xxxxxxx (= W x x) xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 xxxx X/xx2.
Xxxxx xxxxxxxx délek xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx XXX (Commission International xx L'Eclairage) xx xxxxxxx označení XXX (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxx: za xxxxxxx xxxx xxxxx XXX a XXX xx často xxxxxxxx 320 nm x XXX se někdy xxxx xx UV-A1 x XX-X2 x xxxxxxx zhruba u 340 nm.
Životaschopnost (xxxxxxxxx) xxxxx: parametr, kterým xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. příjem barviva xxxxxxxxxxxx xxxxx buňku, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx lysozomů), xxx xxxxx parametrů xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx koreluje x xxxxxxxx počtem xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx procedurou xxxxx (xxx + UV xxxx - XX), xxxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx predikce xxxxxxxxx potenciálu. X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx vitro x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx veličin XXX x XXX.
XXX (photo xxxxxxxxxx factor, fotoiritační xxxxxx): xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx dvou stejně xxxxxxxx cytotoxických xxxxxxxxxxx (XX50) testované xxxxx xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+XX) necytotoxického XXX/XXX ozáření.
MPE (mean xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx: akutní xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), xxxxx vzniká po xxxx expozici xxxx xxxxxx látce x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx látky.
Fotoiritace: nižší xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxx xxxx, xx xx xx xxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxx přijatá) xxxxxx xxxxx. Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (reakce xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx působení xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx, x kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx indukční xxxxxxx k xxxx, xxx se reaktivita xxxx projevila.
Fotogenotoxicita: xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx dochází xxxx, xx byly xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX záření a xxxxxxxxxxxxx látky.
Fotokarcinogenita: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovanou aplikací xxxxxx x látky. Xxxxx xx tumorogeneze xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx chlorpromazinu xxxx xxxxx pro pozitivní xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx testována při xxxxx studii, se xxx zavedení testu xx fototoxicitu 3X3 XXX xxxxxxxxxx použít xxxx referenční látky xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx byly použity xxx xxxxxxxxxxxxxxxx porovnávání xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).
1.4 PRVOTNÍ XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxx x řady xxxxx (5) (6) (7) (8), jejichž xxxxxxx xxxxxxxxx rysem xx xx, xx xxxxxx absorbovat světelnou xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx fotochemie (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx dostatečnou xxxxxxxx světelných kvant. Xxxxx by xx xxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx testování podle xxxxxx xxxxxxxxxxx návodu, xxxx by se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x XX/XXX oblasti (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX x. 101). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x xx-1, nemá xxxxx fotoreaktivní xxxxxxxxx x není xxxxx xx xx škodlivé xxxxxxxxxxxx účinky xxxxxxxx xxx testem xx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx dodatek).
1.5 XXXXXXX METODY
Byly zjištěny xxxxx mechanismy, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx reakci (7), xxxxxxx všechny xxxxx k xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx je xxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx necytotoxické xxxxx XXX/XXX xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx při tomto xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx závislý xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx barviva, xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx, XX) (9), 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxxxxxx xx dobu 24 xxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx kultura xxxxx v xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx). Pro xxxxxx testovanou látku xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx po 96 xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx po xxxx 1 hodiny. Xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX záření x xxxxx 5 X/xx2 UVA (+XX xxxxxxxxxx), druhá destička xx xxxxxxxx x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X obou xxxxxxxxxx xx xxx médium xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx xxxxxx, NRU) xx xxxx 3 xxxxx xxxxxxx životaschopnost xxxxx. Xxx každou x xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, vyjádřená xxxx procento hodnot x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. X posouzení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se porovnají xxxxxxxxxxxx závislé reakce xxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XX) x x xxxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxx, xxxxxxx na xxxxxx XX50, tj. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x 50 % x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.6 XXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX, xxxxxxxxxx údaje: x buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxx XXX. Buňky xx xxxxxx v xxxxxxx, která xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro, xxxxxx xxx se vystaví xxxxxx XXX v xxxxx 1 - 9 X/xx2 x xxxxx xxx se xxxxxx XXX stanoví xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX záření 5 X/xx2 xxxx nižší xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx nejvyšší xxxxx XXX xxxxxx 9 X/xx2 xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx uchovávaných v xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx provádí xxxxxx xx každé desáté xxxxxx buněk.
Citlivost xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vůči xxxxxx UVA, xxxxx xxxx: test xxxxxxx xxxxxxxx jakosti, jestliže xxxxxxxxx xxxxxxxx (buňky x Xxxxxxx vyváženém xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx solution, XXXX] x 1 % roztokem dimethylsulfoxidu (XXXX) nebo xxxxxxxx (XxXX) xxxx bez xxxx vykazují x xxxxxxxxxxx (+UVA) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx x neozářenými xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx v rámci xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: absolutní optická xxxxxxx (XX540 XXX) xxxxxx x NR xxxxxxxx negativních xxxxxxx xxxxxxx, xxx oněch 1 x 104 xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx jamce xxxxxx xxxxx dvou dnů xxxxx s normální xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxx xxxxxxx XX540 NRU x xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: při xxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx známou xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx studii XX/XXXXXX xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (CPZ); xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxx XXX testovaný xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx definována xxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti: XXX xxxxxxx (+UVA): XX50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (PIF), tzn. xxxxx xxxxxxx XX50, xx xxx xxxxxxxxx 6.
Xxxxx XXX xx xxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx dají xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxx testované (xxxxxxxxx) látky. X xxxxxxx případě xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jako kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx rozsahy xxxxxx XX50 x XXX xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XXXXX XXXXXX
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Buňky
Při validační xxxxxx xxxx použita xxxxxxxxxxxxx buněčná xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x to xxx x XXXX xxxx x XXXXX; ta xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dají x xxxxxxxx xxxxxx i xxxx buňky xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx potřeb; xx xxxx třeba xxxxxxxx, xx jsou xxxxxx xxxxxx.
X buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxx xxx x xxxxxxx, že xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxxx xxxx x počtem xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3X3 x xxxxxx x nejnižším xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx XXX xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxx popsaným x xxxxx metodickém xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x během xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxx x XXXX obohacený 10 % xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 oC / 7,5 % XX2. Xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxx. buněčnou xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx kultur
Buňky xx xxxxxxxxxx zásobních xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx jednou xx xxxx použitím x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx pasážují.
Pro xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x kultivačním xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, aby na xxxxx testu (tj. xxx xx stanovuje xxxxxxxxxxxxxxx buněk 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx xx xxxxxxxxxx (xx splynutí x xxxxxxxxx, jednolitou vrstvu xxxxx). X xxxxxxx xxxxx Balb/c 3T3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 x 104 xxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxx každou testovanou xxxxx xx buňky xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx s 96 xxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx doby, xxx xx xxxxx z xxxxxxxx ozařována (+XXX/XXX) x druhá je xxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxx xxxxx testech xx vitro xxx xxxxxxxxx genotoxického xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx požadavkem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, není x případě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx k xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx fotoxin in xxxx xxxx xx xxxxx, bylo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx proto xxx xx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx tento xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.1.5 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx prokazují, xx xx xx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xx by xxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx pod xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx x pufrovaném solném xxxxxxx, například x Xxxxxxx vyváženém xxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fosfátem (xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, PBS), xxxxx - xxx xxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx během ozařování - nesmí obsahovat xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xX, pohlcující xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, x následně xx xxxxx v poměru 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx roztokem. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) ve xxxxx xxxxxxxxx, xx. ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx testované xxxxx i x xxxxxxxxxxx kontrolách.
Jako rozpouštědlo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo xxxxxxx (XxXX). Vhodná xxxxx xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx s nízkou xxxxxxxxxxxxx, například xxxxxx, xx však třeba xxxx xxxxxxx zvážit xxxxxx xxxxxxxxxx vlastnosti, xxxx je xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vychytávání xxxxxxxx.
Xxx se napomohlo xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxx míchání xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 oC.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx UV světlem / xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx je xxx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxx. Záření x XXX x xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx XXX xx x tomto xxxxx xxxx relevantní, xx xxxxx vysoce xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx od 313 xx k 280 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx zdroje xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxx testovaná xxxxx absorbuje, a xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx xxxx) postačující xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Xxxx xxxxxxx xxx použité xxxxxx délky x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx optimální xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx simuluje xxxxxxxx xxxxxx. Jako tyto xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx mají tu xxxxxx, že vyzařují xxxx tepla x xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Jelikož všechny xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxx XXX, xx xxxxx xxxxxx filtrovat xxx, xxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx test xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx validační studii xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx x xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) se xxxx xxxxxxxxxx před xxxxxx xxxxxx fototoxicity xxxxxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxx xx doporučuje xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx typu x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx, když xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx spektrální iradiance xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x kontroluje xx xxxxxxxxx širokopásmového UV-metru xxxxxx spektroradiometru; taková xxxxxxxxxxxxx xxxxx vyžaduje xxxxxxxxxxxxxx obsluhu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx validační studii xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx XXX xxxxxx 5 J/cm2 xx xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx silná, xxx xxxxxxxxxx i xxxxx fototoxické xxxxx. Xxx xx této xxxxx dosáhlo během 50 minut, musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 xX/xx2. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx linie xxxx xxxx zdroj xxxxxx, xxxx se dávka xxxxxx UVA xxxxxxx xxx, aby xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx x průkazu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx vzorce:
|
dávka xxxxxx (X/xx2) x 100
|
&xxxx; | |
| &xxxx;
x (xxx) =
|
&xxxx;
________________________
|
&xxxx;
(1 X = 1 X x)
|
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxxx (xX/xx2) x 60
|
&xxxx; |
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx koncentrace testované xxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx všechny fototoxické xxxxx byly detekovány xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pozitivních xxxxxxxx (13). Xxxxxxx pH xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxxx (+UVA) a xxx xxx (-UVA) xx třeba stanovit x rámci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rozsah x xxxxxx xxxxxxxxxxxx řady xx zvolí xxx, xxx xxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx údaji. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx geometrická xxxx (s konstantním xxxxxxxx ředění).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx suspenze 1 x 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx médiu. Xx periferních xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx destičky xxx tkáňové xxxxxxx xx odpipetuje xx 100 μl xxxxxxxxx xxxxx (= slepý xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx 100 μl xxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxx 1 x 105 buněk/ml (= 1 x 104 xxxxx xx xxxxx). Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxx xx připraví xxx xxxxxxxx - xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx (-XXX), xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx xx xxxxxxxx xx dobu 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX), xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx doba xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx inkubaci xx xxxxxxxxxx médium z xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl EBSS/PBS xx xxxxxx xxxxx. Xxxxx se 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (negativní xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx. Buňky x testovanou látkou xx xxxxxxxx x xxxxx po xxxx 60 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx xxxxx s XXX (+UVA) xx xxxxxxx tak, že xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 50 xxxxx skrz xxxxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / xx2). Xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx ventilátoru. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-UVA) xx xx dobu 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx se promyjí xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Poté xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) xx inkubují (7,5 % CO2, 37 xX).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x fázovým kontrastem. xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx způsobené xxxxxxxxxxxx účinkem xxxxxxxxx xxxxx. Tato xxxxxxxx xx doporučuje, xxx xx eliminovaly xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx červeně (XX)
Xxxxx xx xxxxxxx objemem 150 μl xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se 100 μl média x NR x xxxxxxxx xx xxx 37 xX xx xxxxxxxx atmosféře xx 7,5 % CO2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx xx xxxxxx s XX xxxxxxxx x buňky xx promyjí xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX, xxxx se xxx xxxxx x důkladně xxxxxxxx (je xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx poloze).
Přidá xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx na xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx směs xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx třepou xx třepačce, xxxxx xx NR x xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 xx za xxxxxxx slepého xxxxxx xxxx srovnávacího roztoku. Xxxxx xx uchovají xx vhodném xxxxxxx (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
1.8 XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu vztahu xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx xxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx a xxx xx. Je-li xxxxxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx, xxx xx experimntální údaje xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxx xx xx definované xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl/ml x experimentu xx xxx (-UVA) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx cytotoxická, xxxx xxxxx k xxxx, že xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Xxxxx xxxx cytotoxicita xxxxxxxx x žádné x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxx xxx -XXX, xxx xxx +UVA), xxxxxxxxx testování x xxxxxx rozestupem xxxx xxxxxxxxxxxx dávkami až xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, může xxx xxxxxxxx pozměnit xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Klíčovou xxxxxxxxx x tomto xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, nejvhodnější xxx xxxx opakování xx variace xxxxxx xxxxxxxx (spolurozpouštědlo, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Xxx xxxx xxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx doby xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx jsou xx xxxx nestálé, xxxx xxx významný xxxx xxxxxxxx xxxx.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xx xxxxx, stanoví se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x 50 % xxxxxxxx buněčného xxxxxx NR (XX50). Xx xxx učinit xxx, xx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx použije xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx regrese (xxxxxxx Xxxxxxx funkce xxxx xxxxxxxxxx regrese) nebo xx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Než xx xxxxxxx XX50 použije xxx další xxxxxxx, xx třeba zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx EC50 xx také možno xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X tomto xxxxxxx xx xxxxxxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (osa x: xxx, osa x: probit), protože xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx mnohdy xxxxx xxxxxxxx.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX MODELY)
1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, verze 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxx xx xxxxxxxxxxx (+XXX), xxx xx xxxxxxxxxxxxx (-XXX) světla, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx podle xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) PIF =
|
____________
|
|
EC50 (+XX)
|
XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx fototoxický xxxxxxxxx, xxxxxx XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx pouze při +XXX, xxxxxx xxx -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx PIF xxxxxxxxx, x když xx jedná o xxxxxxxx, který xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xx vypočítat tzv. "&xx; XXX", když xx test xxxxxxxxxxxx (-XX) provede až xx xxxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx (Cmax) x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx vzorce:
|
Cmax (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) > XXX =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+UV)
|
Pokud se xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", pak xxxxx xxxxxxx &xx; 1 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx ani XX50 (-XX), xxx EC50 (+XX), xxxxxxx látka xxxxxxxxxx cytotoxicitu až xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx to xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx nemá xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx případě se xxxxxxx xxxxxxxx "XXX = *1", xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "PIF = *1", xxxxxxxxxx xx, že není xxxxxxxx xxxxx fototoxický xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (x) x (x) xx xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzít xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx, jichž xx xxx xxxxx xxxxxxx.
1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: xxxxxxx fotoefekt (XXX)
Xx xxxxx také xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxx studie stanovení xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x látek XX xxxxxx (13). V xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx modelu XXX x xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx XX50. X xxxxx modelu xx používá veličina "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx průběhu xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx XXX xxx na Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx software, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx.
1.11 Xxxxxxxxxxxx výsledků
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) ukazuje, xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx k xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx koncentracích xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx pravděpodobné, xx xxxxx bude působit xxxx fototoxin xxxx xx xxxxxxx expozičních xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci (100 (x/xx), bude xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx nejspíše xxxxxxxxx xxxxxxx informací. Xxx mohou spadat xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x možné xxxxxxxxx látky x xxxx, xxxx údaje x xxxxxxxxx xxxx xxxxx x jiném xxxxxxxxxxxx alternativním xxxxx, xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxx lidské kůže xx xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx XXX < 0,1) ukazuje, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy by xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x při xxxxxxxx koncentraci 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx látka xxxx žádný fototoxický xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx vivo xx xx považovat xx xxxxxxxxxxxxxxxx. V případech, xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrační xxxxxxxxxx xxxxxxx reakce (XX50 + UV a XX50 - UV), xx interpretace dat xxxxxx. Naproti xxxx xxxxx nebyla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+XX xxx -XX) x xxx omezenou xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, je xxxxx xxxxxxxxx tento test xxx danou látku xx ne xxxxx xxxxxx x xxxx xx xx xxxxxxxx x jiném, xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx s xxxxxxxx modelu xxxx xx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xx xxxx nebo xx xxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx údaje x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,
- fyzikální xxxxxx a xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx x provedení xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x fotostabilita, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx médiu (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x zdroj xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jež xx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (a) - xxxxxxxx před xxxxxxxxxx x xx něm:
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx média,
- podmínky xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxx xxxxxxxx (zpracování před xx x po xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxxx látkou:
- xxxxxxxxxx xxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx a xxx xxx,
- x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a absence xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- typ x složení působícího xxxxx (pufrovaný xxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (x) - ozařování:
- xxxxxxxxxx xxxxx daného světelného xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (filtrů),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx světelného xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx UVA (x x X/xx2) xxx xxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,
- xxxxx xxxxxx XXX (xxxxxxxxx x xxx) x J/cm2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx uchovávaných x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - test XXX:
- xxxxxxx xxxxx x XX,
- xxxx xxxxxxxx x XX,
- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, vlhkost),
- xxxxxxxx xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx, při xxxxx se spektrofotometricky xxxxxxxxx xxxxxxx hustota XX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx-xx xxxxxxx,
- složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), pokud xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- životaschopnost xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená x procentech vůči xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kontrol,
- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx νx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx experimenty +XXX x -XXX,
- analýza xxxxxx koncentrace - xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX50 (+XXX) x EC50 (-XXX),
- xxxxxxxxx obou xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx - výpočtem xxx fotoiritačního xxxxxxx (XXX) xxxx středního xxxxxxxxxx (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (a) - xxxxxxxx negativní xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX) ozářených x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx negativních xxxxxxx, xxxxxx x směrodatná xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-UVA) a XXX xxxxx xxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-UVA) x PIF, xxxxxxx x xxxxxxxxxx odchylky.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. xxxx xxxxxxx právním předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.
Ve xxxxx tohoto právního xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx a doplnění xxxxxxxxxxx xxxxxxx předpisem x.:
208/2001 Xx., kterým xx xxxx xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., kterou xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků - xxxxxx bude xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx od 22.6.2001
Xxxxxx předpis x. 251/98 Xx. byl xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. s xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jiných xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx není aktualizováno, xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx uvedeného xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 písm. x) xx x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
2) Zákon č. 246/1992 Sb., xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx zákonů x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Sb. x č. 30/1998 Xx.
3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxx zkoušení xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx na xxxxxx (XXXX Guidelines xxx Xxxxxxx xx Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Effects).