Právní předpis byl sestaven k datu 05.01.2025.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 01.02.2018.
Předmět úpravy §1
Pojmy §2
Průzkum výskytu původce kroužkovitosti a původce hnědé hniloby §3
Opatření při zjištění podezření z výskytu původce kroužkovitosti nebo původce hnědé hniloby §4
Opatření při potvrzení výskytu původce kroužkovitosti nebo původce hnědé hniloby §5
Testování klonově příbuzných partií hostitelských rostlin §6
Opatření proti šíření původce kroužkovitosti a původce hnědé hniloby §7
Testování rozmnožovacího materiálu bramboru §8
Účinnost §9
Příloha č. 3 - Způsob provádění odborného šetření a stanovení rozsahu pravděpodobného zamoření původcem kroužkovitosti nebo původcem hnědé hniloby a rozsahu jejich možného rozšíření a náležitosti oznámení potvrzeného výskytu původce kroužkovitosti nebo původce hnědé hniloby
Příloha č. 4 - Opatření po potvrzení přítomnosti původce kroužkovitosti nebo původce hnědé hniloby
Příloha č. 5 - Požadavky na zneškodňování odpadů při průmyslovém zpracování partie hostitelské rostliny označené za zamořenou podle §5 odst. 1 písm. a) nebo pravděpodobně zamořenou podle §5 odst. 1 písm. b)
Příloha č. 6 - Očista a dezinfekce objektů a předmětů zamořených nebo podezřelých ze zamořeni původcem kroužkovitosti nebo původcem hnědé hniloby
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §88 xxxx. 2 xxxxxx x. 326/2004 Xx., x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx a x změně některých xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, (dále xxx "xxxxx") x xxxxxxxxx §71 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx:
§1
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx vyhláška xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxx unie1) x xxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxxxxxx xx xxxxx České xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (Xxxxx) Xxxxx xx al. xxxxx. xxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxx) Xxxxx et xx., původci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, a Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (Xxxxx) Xxxxxxxx xx xx., xxxxxxx bakteriální xxxxx xxxxxxx, xxx se
a) xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx,
x) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x
x) při xxxxxxxx výskytu se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
§2
Xxxxx
Xxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx:
x) xxxxxxxx kroužkovitosti - xxxxxxxx Clavibacter xxxxxxxxxxxxx (Xxxxx) Davis xx xx. xxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx xx Kotthoff) Xxxxx xx xx.,
x) původcem xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (Xxxxx) Xxxxxxxx xx xx.,
x) xxxxxxxxxxxxx rostlinami -
1. původce xxxxxxxxxxxxxx - xxxxxxx (Xxxxxxx xxxxxxxxx X.) x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxx), u xxxxx xxxx xxxxxxxxx možnost xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx podmínkách,
2. xxxxxxx hnědé xxxxxxx - brambor (Xxxxxxx xxxxxxxxx L.) x xxxxxxxx semen bramboru, xxxxx xxxxx (Solanum xxxxxxxxxxxx X.) kromě xxxxx x plodů, xxxxx xxxxxxxxx (Solanum xxxxxxxxx X.) x xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxx lilkovitých (Solanaceae), x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx x přirozených xxxxxxxxxx,
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx zaměřený xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxx x určité xxxxxx,
x) xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx x určení xxxxxxx x původu xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx původcem xxxxx xxxxxxx, x xxxxxx xxxxxxx šíření xxxxxxx x k určení xxxxxx území, xx xxxxx se vztahují xxxxxxxxx rostlinolékařská xxxxxxxx xxxxx §76 xxxxxx,
x) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx původcem xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx hniloby - xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, stroji, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, skladu xxxx jejich xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx §11 xxxx. 1 xxxxxx,
x) xxxxxx rozšířením xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx anebo v xxxxx, xxxxx §11 xxxx. 1 zákona,
h) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx původcem hnědé xxxxxxx - výskyt xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §11 xxxx. 1 zákona,
i) xxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxx, xx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx opatření xxxxx §76 xxxx. 1 xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti nebo xxxxxxx xxxxx hniloby,
j) xxxxxxxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxx, xx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx §76 xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x výskytu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx,
x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - partie hostitelské xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxx xxxxxxx xxxxxx; xxxxxx xx xx:
1. xxxxxxxxx klonově xxxxxxxx xxxxxx považují xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxx vegetativním xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx rostliny, které xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx,
2. rodičovskou xxxxxxx příbuznou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx klonově xxxxxxxxx partiím, které x xx bezprostředně xxxxxxx.
§3
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x původce xxxxx xxxxxxx
(1) Xxxxx xxxxxxx každoročně x xxxxxxx x §10 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx výskytu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx hnědé hniloby x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 2 až 7.
(2) Detekčnímu xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x původce xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx
x) rozmnožovací xxxxxxxx xxxxxxxx2) xxxxxxx x Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx §8 xxxx. 2,
x) xxxxxxxxx xxxxxxx partie xxxxxxxxxxxxxx materiálu bramboru2) xxxxxxx xx členských xxxxx Xxxxxxxx unie (xxxx jen "členský xxxx"),
x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x České xxxxxxxxx a z xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
x) xxxxxxx partie xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v bezpečnostní xxxx vymezené xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. c).
(3) Vymezovacímu xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx označené xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx a všechny xxxxxx hostitelských rostlin xxxxxxxxxxx x karanténním xxxxx xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x).
(4) Zjišťování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx
x) všechny xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx2) x xxxxxxxxx vybrané partie xxxxxxxxx xxxxxxx,
x) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x vývozu xx xxxxxxx xxxx.
(5) Detekčnímu xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx
x) porosty xxxxxxx xxxxxxx určených x xxxxxxx xxxxxxxxx,
x) xxxxx zdroje používané x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx původce hnědé xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx vody xx xxxxxxxxxxxxxxxx podniků, které xxxxxxxxxx zpracovávají hlízy xxxxxxxx, popřípadě xxxx xxxxx odpady z xxxxxx podniků.
(6) Vymezovacímu xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx z výskytu xxxx xxxxxxxxx jeho xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxx x plevelné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx pěstební xxxxxxxx x xxxxxxx produkce, xxxxx tyto xxxxxx xxxxxxxxx.
(7) Výskyt původce xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx
x) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx hlíz xxxxxxxx xxxxxxxxxx x případech xxxxxxxxx v xxxxxxxx 2 xxxx. x) x b), odstavci 3 a v xxxxxxxx 4 písm. x) x xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx uvedeném x odstavci 4 xxxx. x) z xxxxxxxxxx xxxxxx,
x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx, v xxxxxxxxx xxxx ve skládkách, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, v případech xxxxxxxxx x xxxxxxxx 2 xxxx. c) x x),
x) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxx s xxxxxxxxx laboratorním testováním xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx 5 písm. x),
x) xxxxxxxxxxxx testováním xxxxxx vody, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, pevných xxxxxx xxxx hostitelských xxxxxxx xxxxxxxx vegetace x xxxxxxx uvedeném x xxxxxxxx 5 xxxx. x) x x xxxxxxxx 6.
(8) Způsob xxxxxxxxx partie x xxxxx, původ, xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxx při xxxxxxxx, xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx 2 až 7, xxxxxx xxxxxx průzkumu x způsob předávání xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vzorcích xxxxxxxxx x xxxxxxx x §10 xxxx. 1 xxxxxx Ústav xx základě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx x biologie xxxxxxx kroužkovitosti x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, x přihlédnutím x xxxxxxxx xxxxxxxx brambor x xxxxxxx hostitelských xxxxxxx x x xxxxxxxxxx na aktuální xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xx Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx kontrolního a xxxxxxxxxx xxxxxx zemědělského (xxxx jen "Věstník"). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx zjištění x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x příloze č. 1 nebo xxxxxxxxxx Xxxxxxx x xxxxxxx x §10 xxxx. 1 zákona a xxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxx.
(9) X xxxxxxxx prováděnému xxxxx odstavců 2 x 4 lze xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx anebo xxxxxxxxx xxxxxx, pověřenou x xxxx činnosti Xxxxxxx, pokud bude xxxxxxxxx na základě xxxxxxxxxxxx dohledu této xxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx odstavce 8.
(10) Xxxxxxxx xxxxxxxx prováděného xxxxx xxxxxxxx 2 xx 6 oznamuje xxxxxxx Xxxxx xxx xxxxxxxxxx odkladu xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx bramboru nebo xxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx na trh xxxx ji xxxxxxx xxxx pěstovala.
(11) Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 2 xx 8 xxxxxxxxx Xxxxx x souladu x §10 xxxx. 5 xxxxxx xxxxxx xxxxx v rozsahu xxxxxxxxxx v příloze č. 2 xxxxx A xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx úrovně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx státy. Výsledky xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx odstavců 2 xx 6 xxxxxxxx Xxxxx jednou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxx, x xx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bramboru,2) xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xx pozemcích xxxxxxxxx, xx 1. xxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1. června. Xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx, týkající xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx x produkci xxxxxxxxxxx xxxx. Podrobnosti xxxxxx xxxxxxxx jsou důvěrné.
§4
Opatření při zjištění xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx hnědé xxxxxxx
(1) Xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx x §11 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxxxx
x) Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx škodlivými xxxxxxxxx x v xxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx přílohy č. 1 oddílu X číslo 1 x xxxxxx XX, xxxx
x) xxxxxxxxx výsledek xxxxxxxxxxxxxx xxxxx provedeného Xxxxxxx nebo xxx xxxxx dohledem způsobem xxxxxxxxxx x příloze č. 1.
(2) X xxxxxxx podezření x výskytu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx Xxxxx x xxxxx odborného xxxxxxx podle §76 xxxx. 7 xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx3) zajistí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 8 a xxx dodržení podmínek xxxxxxxxxxx v příloze č. 2 xxxxx X, s xxxxx toto podezření xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
(3) Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx hniloby xxxxxxx xxxxxxx xxxxx §76 xxxx. 2 zákona xx účelem xxxxxxxx xxxxxx podezřelého výskytu x x xxxxxxx x §11 xxxx. 1 xxxxxx
x) xxxxxx xxxxxx xxxxx partií xxxx xxxxxxx, ze xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, x výjimkou xxxx, které jsou xxxxxxxxx opatření xxx xxxxxxxx Ústavu, xxxxx xxxxxxxx zjistitelné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, x
x) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx založená xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx možného xxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxx šíření xxxxxxxx xxxxxx zákazu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx přesunem xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx rostlin xx xxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
(4) Při xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, v xxxxxxx xxxxxxx hnědé hniloby, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx Xxxxx xxxxxxxxxx úřední xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx členského xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxx x xxxxx státem xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
(5) Pokud xxxx x podezření x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx mít xxxxx x České republice xxxx xxxxx xxxx Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx Xxxxx republika, xxxxxx Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxxx 2 x 3.
§5
Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx xxxxxxx
(1) Xxxxx úřední xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 8 xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, Xxxxx v souladu x §76 odst. 2 xxxxxx a x přihlédnutím x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x ke xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
x) xxxxxx xx xxxxxxxx rostliny, xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx, xxxxxx, dopravní xxxxxxxxxx, sklady xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx objekty xxxxxx obalového xxxxxxxxx, x něhož xxx xxxxxx xxxxxxx, a xxxxx přišly xx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxx vzorek xxxxxxx, x místo xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx, kde xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x pozemek, xx xxxxx byly xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxx vzorek xxxxxxx,
x) provede xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x prvotního xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxx 1 přílohy č. 3 xxxxxx testování xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx podle §6 x xxxxxxx x xxxxxxx x ustanovením xxxx 2 přílohy č. 3 xxxxxx pravděpodobného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx kontaktu, a xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx pěstitelské xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x),
x) xxxxxx karanténní území xx základě xxxxxxxx xxxxxxxxxx předmětů nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x) x bezpečnostní xxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxxx pravděpodobného xxxxxxxx podle xxxxxxx x) a možného xxxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx xxxxxxx x souladu x ustanovením bodu 3 přílohy č. 3.
(2) X xxxxxxx xxxxxxxxx výskytu xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x ohledem na xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx a x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx rostliny z xxxxxx lilkovitých x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx by xxx xxxxxxxxxxx, zalévání xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, Xxxxx
x) xxxxxxx úřední laboratorní xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx rostlin x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x příloze č. 1 xx vhodných xxxxxxxxx s xxxxx xxxxx rozsah xxxxxxxx,
x) xxxxxx x souladu x pozitivními xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x) xxxxxxxxxx vodu, z xxx byly xxxxxxxxx xxxxxx, za xxxxxxxxx,
x) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx za xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x) a xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx rozsahu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a jeho xxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxx 3 přílohy č. 3.
(3) Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x Komisi v xxxxxxx x ustanovením xxxx 4 přílohy č. 3 xxxxxxxxx výskyt původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxxxxxx 1 xxxx. x), xxxxxxxxx xxxxxxxx 2 písm. b), x sdělí xxxxxxxxxxx x vymezení xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx podle xxxxxxxx 1 písm. c), xxxxxxxxx odstavce 2 xxxx. x). Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
(4) Pokud xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, zásilce xxxxx xxxxxx xxxxxxx x Xxxxx republiky x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 3, Xxxxx odpovídajícím xxxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 1 x 2 xxxxxx zamořené předměty x xxxxxxx, stanoví xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x vymezí xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx bezpečnostní xxxx.
(5) Ústav stanoví xxxxxxx sdělením xx Xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx odborného xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 xxxx. x) x xxx stanovení rozsahu xxxxxxxxxxxx území x xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 xxxx. x), xxxxxxxx 2 xxxx. x) x odstavce 4.
§6
Xxxxxxxxx xxxxxxx příbuzných xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
(1) Xxxxx zajistí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle §4 xxxx. 2 xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx hostitelských xxxxxxx klonově příbuzných x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x), x každém xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx2), a xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx možného xxxxxxxx s cílem xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx šíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx xxxxxxx.
(2) Xxxxx xxxxxxxx testování xxxxx xxxxxxxx 1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx další xxxxxxxx x xxxxxxx za xxxxxxxx, rozšíří xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxx karanténní xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x), b) a x).
§7
Xxxxxxxx proti xxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti a xxxxxxx xxxxx xxxxxxx
(1) Xxxxx x xxxxxxx x §11 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx §76 xxxx. 2 xxxxxx:
x) xxxxxx xxxxxxxxxxxxx rostlin xxxxxxxx xx zamořenou xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x) xxxxx xxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx Xxxxxx xx x xx naloží xxxxxxxx xxxxxxxx x bodě 1 přílohy č. 4, xxxxx Xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxx rozpoznatelné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx hniloby x xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx zneškodňování xxxxxx, xxxxxxxxx x příloze č. 5, x případě xxxxxxxxxxxx zpracování xxxx xxxxxx,
x) partie xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. b) smí xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx Ústavu xxxxxxxx xxxxxxxx x bodě 2, xxxxxxxxx 3 přílohy č. 4, pokud Xxxxx xxxxxx xxxxx, že xxxxxxxxxx rozpoznatelné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce hnědé xxxxxxx x že xxxx splněny xxxxxxxxx xx zneškodňování odpadů, xxxxxxxxx x příloze č. 5, x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, x pokud xxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx výsledku xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §6 xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x),
x) xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx prostředky, sklady xxxx jejich části x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 písm. x) xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx zamořené xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x), xx xxx zničí xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxx metod xxxxxxxxx x příloze č. 6 x xxx, že xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx tyto xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xx pravděpodobně xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
x) x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x), xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 xxxx. c), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx výskytu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v xxxx 4 přílohy č. 4 a x případě xxxxxxx xxxxxxx hnědé hniloby x bodě 5 přílohy č. 4.
(2) Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx §11 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx proti xxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti nebo xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxx opatření xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxxx o xxxxxx xxxxxxxxxx x o xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx 1 xxxx. x) uvnitř xxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx Xxxxx ostatním členským xxxxxx a Komisi xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx dotčených povinných xxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §12 xxxx. 1 xxxxxx.
(3) Xxxxx xxxxx xxxxx §76 xxxx. 4 písm. x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nařízená xxxxx xxxxxxxx 1 x xxxxxxxx 2 po xxxxxx xxxxxxx x xx uplynutí doby xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx.
(4) Xxxxxxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx hniloby xx x souladu x §7 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x vědeckým, xxxxxxxxxxxxxx xxxx diagnostickým účelům, xxxxx povoluje Xxxxx xxxxx §8 odst. 1 zákona, xxxxx xxx nebudou xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx jejich xxxxxx.
§8
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx materiálu2) xxxxxxxx
(1) Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx2) xxxxxxxx, vypěstovaný xx xxxxx České republiky x xxxxxxx na xxx, xxxx xxx xxxxxxxx laboratornímu xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx §3 odst. 2, x rozsahu podle xxxxxxxx 2 a x xxxxxxx s §3 odst. 8 x 9, x xxxxxxx prostým xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx hniloby.
(2) Xxxxxxxxx xxxxx odstavce 1 xx x příslušném xxxxxxxxxx xxxx podrobí
a) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx4) xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx sklizňovém roce x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx2) bramboru původem x Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx, a nebo
b) xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx materiálu2) xxxxxxxx xxxxxxx z České xxxxxxxxx potvrzen výskyt xxxxxxx hnědé hniloby, xxx
1. xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx materiálu4) bramboru x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx vzorky všech xxxxxx základního xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bramboru v xxxxxxxxx xxxxxxxxx klonové xxxxxxxxxxx xx zaměřením xx tuto xxxxxxxxxx, xxxx
2. xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx materiálu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx xxxxxxxx4) x xxxxxxxxx, x xxxxx prokazatelně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx xxxxxxxx4) xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx všech xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x množení x xxxxxxxxxxxx roce, xxxxx xxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x posledním xxxxxxxxx xxxxxxxxxx roce xxxxxxxx x xxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx2) bramboru xxxxxxx x České republiky.
§9
Xxxxxxxx
Xxxx vyhláška xxxxxx xxxxxxxxx dnem xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx x. 1 x vyhlášce x. 331/2004 Sb.
A. XXXXXX XXXXXXXX, DETEKCE A XXXXXXXXXXXX PŮVODCE XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx:
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x hlízách xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
xx) xxxxxxx Clavibacter xxxxxxxxxxxxxx subsp. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx,
xxx) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus.
OBECNÉ XXXXXX
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxx přípravu testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x dodatcích. Xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx protokolů, je x dodatku č. 1.
Protože protokoly xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx kultur Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx jako kontrolních xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx zařízením na xxxxxxxxxxxx odpadů a xx xxxxxxxx příslušných xxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx úrovní Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx nezbytná xx xxxxxxxx pozitivních xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx požadovaných xxxxx také zahrnuje xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx zacházení s xxxxxxx a jejich xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxx. xxxxxxxx pozitivních xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx administrativním x xxxxx chybám, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx x xxxxxxx, jak xx xxxxxxx x §4 xxxx. 1, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, jak xx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xx první screeningový xxxx (XX xxxx XXX/XXXX) xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx screeningový xxxx. Xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pak xx xxxxxxxxx x výskytu xxxxxxxxx a xxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx je xxxxx screeningový xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
X xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx XX test xxxxx §4 xxxx. 1 xxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxxxx XX xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX/XXXX).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx izolaci x xxxxxxxxxxxx čisté xxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.1. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kroužkovitosti x xxxxxxx bramboru x x rostlinách xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxx xxxxx x rostliny xxxxxxxx x podezřením z xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kroužkovitosti. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pletiva xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x x případě xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Clavibacter xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx.
&xxxx;
|
Xxxxx/xxxxx nebo xxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx s příznaky xxxxxxxxxxx z výskytu bakteriální xxxxxxxxxxxxxx (1)
|
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
RYCHLÉ XXXXXXXXXXXX XXXXX (2)
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXX (3)
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Kolonie x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4)
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
NE (5)
|
|
C.m. xxxxx. xxxxxxxxxxx nebyl xxxxxxx
xxxxxx xxxx infikován X. m. xxxxx. xxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXX
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx xxxxx kultury
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
IDENTIFIKAČNÍ XXXXX (6)
|
|
|
|
TEST PATOGENITY (7)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XX
|
&xxxx;
|
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx X. x. subsp. xxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; |
XXX
|
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | |
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; |
&xxxx; | &xxxx; |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx X. x. subsp. xxxxxxxxxxx
|
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | |||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
(1) Xxxxx xxxxxxxx xx x xxxxxx 2.
(2) Xxxxxx testy xxxx:
- XX xxxx (oddíl 4),
- PCR test (xxxxx 6),
- XXXX xxxx (oddíl 5).
(3) Xxxxxx izolace xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx materiálu x typickými příznaky xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx komplikovaná, xxxxxxxxx v pokročilých xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx podařit. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx patogena xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx používat xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx XXXX (xxxxx 8) nebo xxxxxxx (xxxxx 7).
(4) Xxxxx typické morfologie xxxxxxx je x xxxxxx 8.
(5) Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx, xxxx být izolace xxxxxxxxx znovu.
(6) Spolehlivé xxxxxxxxxxxx xxxxx kultury Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx testů xxxxxxxxx x xxxxxx 9.
(7) Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxx 10.
1.2. Xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx bezpříznakových xxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx ke zjištění xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx z xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx každý xx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx principu, xxxx xxx doplněn xxxxxxx patogena, a xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledek xxxxx xxxxxxx screeningového testu xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx, xxx xxx xxxxxx považován xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx a izolační xxxxx musí xxxxxxx xxxxxxxx práh 103 xx 104 buněk/ml xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx pozitivní kontroly x xxxxx xxxxx xxxxx.
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx (1)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXXXXXXXX XXXXX XXXXXXXX PLETIVA (3)
XX xxxx (4)/XXX xxxx (5)/XXXX xxxx (6)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (3)
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
negativní
|
|
C.m. xxxxx. sepedonicus xxxxx xxxxxxx
xxxxxx xxxx xxxxxxxxx X. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
||||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
xxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx (3)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
xxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
X.x. subsp. xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx
xxxxxx xxxx xxxxxxxxx X. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
xxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx (7) x biotest (8)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx s typickou xxxxxxxxxx (9)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XX (10)
|
&xxxx;
|
X.x. xxxxx. xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx
xxxxxx xxxx xxxxxxxxx X. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXX
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx xxxxx kultury
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
IDENTIFIKAČNÍ XXXXX (11)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXX PATOGENITY (12)
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Oba xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx C. x. xxxxx. sepedonicus
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
NE
|
|
Vzorek xxxx xxxxxxxxx X. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; |
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; |
XXX
|
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | |
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxx xx xxxxxxxxx C. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
(1) Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je 200 xxxx, ačkoli xxxxxx xxx xxxxxx x na xxxxx xxxxx, xxxxxxxx 200 xxxx není x xxxxxxxxx.
(2) Metody xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx patogena xxxx popsány v xxxxxx 3.1.
(3) Xxxxx xxxx alespoň xxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx je xxxxx xxxx negativní, xx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx je xxxxx test xxxxxxxxx, xx xxx ověření xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx více xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx biologických principech. Xxxxx je xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx vzorek xxxxxxxxx na negativní. Xxxxx testy xxxxxx xxxxx.
(4) Test imunofluorescence (XX).
Xxx xxxxxxxxx IF xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, další xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx umožní xxxxx přesnost (viz xxxxx 4).
(5) XXX xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx XXX xxxxxxx x xxxxxxxxx (xxx xxxxx 6).
(6) FISH xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx (xxx xxxxx 5).
(7) Xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxx x mnoha xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx izolaci Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx XXXX xxxxx nebo XXX-88 média x xxxxxx resuspendované pelety 1/100. Xxxxxxx kolonie xxx xxxxxx xxxxx 3-10 dní xx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx test xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx kultivační xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x rostlin xxxxxxxxx xxx xxxxxxx (viz xxxxx 8).
(8) Biotest xx xxxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus z xxxxx bramborových extraktů xxxxxx xxxxxxxxxxxx obohacení x rostlinách lilku xxxxxxxxxxxx (Solanum xxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stanovené xxx tuto xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx subsp. xxxxxxxxxxx xx XXXX nebo XXX-88 xxxxx pravděpodobně xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx 7).
(9) Typická morfologie xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx 8.
(10) Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx selhat x xxxxxx konkurence xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bakteriemi. Xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx testy xxxxxxxxx, opakují xx xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx konce hlíz xxxxxxxx xxxxxx x x případě xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx vzorků.
(11) Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx subsp. xxxxxxxxxxx xx dosáhne použitím xxxxx popsaných x xxxxxx 9.
(12) Test xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxxxx 10.
1.3. Xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx bakteriální xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx bramboru
|
|
|
|
Vzorek xxxxx xxxxxx (1)
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2)
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXXXXXXXX XXXXX VODIVÉHO XXXXXXX (3)
xxxxxxxxxx xxxxxxx (4)/XX xxxx (5)/XXX xxxx (6)/XXXX test (7)
xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: biotest (8)
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4) xx xxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx xxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XX (9)
|
&xxxx;
|
X. x. xxxxx. sepedonicus xxxxx xxxxxxx
Xxxxxx není xxxxxxxxx X. m. xxxxx. xxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXX
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXXXXXXXXX XXXXX (10)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXX PATOGENITY (11)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxx xxxxx potvrzují xxxxxx xxxxxxx X. x. subsp. xxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XX
|
&xxxx;
|
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx C. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXX
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxx xx infikován C. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
(1) Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - viz xxxxx 3.2.
(2) Metody extrakce x koncentrace patogena xxxx xxxxxxx v xxxxxx 3.2.
(3) Xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxx založené na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx principech xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx izolace x xxxxxxxxx. Provede se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxx test xxxxxxxxx, xx xxxxxx považován xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx biologických principech. Xxxxx je xxxxx xxxx další xxxx xxxxxxxxx, xx vzorek xxxxxxxxx xx negativní. Xxxxx testy nejsou xxxxx.
(4) Selektivní izolační xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx 8.
(5) XX xxxx xx popsán v xxxxxx 4.
(6) PCR xxxx xx popsán x oddílu 6.
(7) XXXX xxxx xx xxxxxx x xxxxxx 5.
(8) Xxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxx 7.
(9) Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx mohou xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx inhibice saprofytickými xxxxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx test xxxxxxx xxxxxx.
(10) Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xx jedná x Clavibacter michiganensis xxxxx. xxxxxxxxxxx, se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx 9.
(11) Xxxx patogenity xx xxxxxx x xxxxxx 10.
2. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx kroužkovitosti
2.1. Xxxxxxxx xxxxxxxx
X evropských xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx pak xx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx se zamění x xxxxxxxx jiných xxxxxx, xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx odlišné xx xxxxxxxx xxxxx hniloby; xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a zpočátku xxxxxxx na xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx často x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx neobvykle xxxxxxxxx listy. Xxxxx xxxxxxxxx ucpáním xxxxxxxx xxxxxx xx spodní xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx mezižeberní xxxxxx. Xxxxxxxxxx děložní xxxxxx, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx odumřít. Xxxxx xxxx xxxxx a xxxxx pouze menší. Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou xx internetové xxxxxxx xxxx://xxxxx.xxxxxx.xx.xxx/Xxxxxx/xxx/xxxxx/Xxxx/xxxx.
2.2. Xxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Prstenec xxxxxx xxxxxxx xx pupkovém xxxxx xxxxx může xxx nepatrně tmavší xxxxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx identifikovaným xxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx prstence cévních xxxxxx a stav, xxx při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxx sloupky xxxxxxxx xxxxx. Tento xxxxxxx obsahuje xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx pletiva xxxxx zhnědnout x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx v tomto xxxxxx xxxxxxx příznakům xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Zpočátku xxxxx xxx tyto xxxxxxxx omezeny xx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xx postupně šířit xx celý xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx k destrukci xxxxxxxx pletiv: xxxxxx xxxxxx xxxx se xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx části. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx se objevují xx xxxxxxx hlízy xxxxxxxxx, často x xxxxxxxxxxxxxx okraji. V xxxxxxxx xxxx xx x Evropě xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, kdy xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx svazků xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx poškození xx vznikem xxxxxxxxx xxxxx a nekrózy. Xxxxxxxx houbová nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx být xxxxxxx, xx-xx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx příznaky kroužkovitosti xx xxxxxx hnilob xxxxxxxx. Xxxxx xxxx x atypické xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx řady xxxxxxxx jsou na xxxxxxxxxxx stránce xxxx://xxxxx.xxxxxx.xx.xxx/ Xxxxxx/xxx/xxxxx/Xxxx/xxxx.
3. Příprava xxxxxx
3.1. Xxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx:
- Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx 200 xxxx xx 1 xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx velikosti. Xxxxx xxxxxxxx xxxx ve xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Postup xxxx xxx xxxxxx xxxxxx x pro xxxxxx s méně xxx 200 xxxxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx menší množství xxxx.
- Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx testování xxxxxx x velikosti 200 xxxx.
- Xxxx popsaný xxxxxxxxxx extrakt xxx xxxxxx také xxx xxxxxxxx původce hnědé xxxxxxx, Ralstonia solanacearum.
Nepovinné xxxxxxxx xxxx přípravou xxxxxx:
Xxxxx se xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx XXX xxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx XXX) x xxxx xxxxxxxxxx mezi každým xxxxxxx. Hlízy xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx x případě, xx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx se xx xxxxxxxx XXX xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx.
3.1.1. Xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx či xxxxxxxx na xxxxxxxx xx odstraní xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx hlízy. Opatrně xx xxxxxxxx konické xxxxxxxx vodivého xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xx minimum xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx svazky. Po xxxxxxxx musí být xxxxxxxx x pupkových xxxxx zpracovány do 24 xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxx -20 °X xx xxxx xxxxxxx xxxx týdnů.
Všechny xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx x testují xx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx výkrojku x xxxxxxxxx konce xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, provede xx vizuální xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx konci. Xxxxxxx xxxxxxxxx hlízy s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 2 xxx xxx xxxxxxxx teplotě x xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4 - 10 °C xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx přílohy č. 2.
3.1.2. Xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nádobách xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx x dezinfikovány xxxxxxxxxx x obsahem xxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, uchovávají se x nádobě bez xxxxxxx xxxxx, v xxxxxx xx dobu xxxxxxxxx 72 xxxxx xxxx při pokojové xxxxxxx xxxxxxxxx 24 xxxxx. Xxxxxxx a xxxxxxxxxx výkrojků x xxxx saprofytů x xxxxxxx skladování může xxxxxx xxxxxxxx přítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
3.1.3. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxx x následujících xxxxxxx.:
x) výkrojky xx xxxxxx xxxxxxxxxxx množstvím (xxxxxxxxx 40 ml) xxxxxxxxxxx pufru (dodatek 3) x xxxxxxx xx x xxxxxxx třepačce (50-100 ot/min) xx xxxx 4 xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxx 24 °C xxxx po xxxx 16-24 hodin chlazené;
nebo
b) xxxxxxxx xx homogenizují x xxxxxxxxxxx množstvím (xxxxxxxxx 40 ml) xxxxxxxxxxx xxxxx (dodatek 3), xxx x mixéru xxxx rozdrcením x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx mixéru xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx křížové xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx aerosolu xxxx xxxxxxx xxxxx extrakce. Xxx každý xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx) x nádoby. Xxxxx má xxx xxxxxx XXX xxxx, xx xxxxx zamezit xxxxxxx XXX xx xxxxxx nebo mlecí xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxx v sáčcích xx jedno xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx jedno xxxxxxx.
3.1.4. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx nadměrně xxxxxxxx, pročistí xx xxx xxxxxxx odstředěním (xxx xxxxxxxxx 180 x xx xxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxx 4-10°X) nebo xxxxxxxx xxxxxxxx (40-100µx), xxxxx se omyje xxxxxxxxx (10 xx) xxxxxxxxxxx xxxxx (dodatek 3).
3.1.5. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx 7000 x xx xxxx 15 xxxxx (xxxx 10&xxxx;000 g xx dobu 10 xxxxx) při xxxxxxx 4-10°X a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
3.1.6. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxx x 1,5 xx xxxxxxxxxx xxxxx (dodatek 3). Xxxxxxx xx 500 µx pro xxxx na Clavibacter xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus, 500 µx xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a 500 µx xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx sterilní glycerol xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10-25 % (x/x) x 500 µ1 xxxxxxxxxx xxxxxxx části x xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx vířením x xxxxx xxx xxxxxxx -16 až -24°X (xxxxx) xxxx xxx xxxxxxx -68 až -86°X (xxxxxx). Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxx 4-10°X.
Xxxxxxxxx zmrazení a xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx nutný transport xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxx v chladícím xxxx xx 24 xx 48 hodin.
3.1.7. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxx se se xxxxx pozitivními xxxxxxxxxx x vzorky Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx odděleně, xxx xx předešlo xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx x xxx sklíčka xx XX xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx kombinovaných xxxxxx. Postup je xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx až 200 xxxxx stonků. (Xxxxx xx provádí xxxxxxxx xxxxxxxx, měly xx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.)
3.2.1 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx zahradnických xxxxx xx xxxxxxxx xxxx o xxxxxxxxx 1-2 xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxx stonků xx krátce xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 70 %, xxxxxxxx xxxxx savým xxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
3.2.2. Xxxxx stonků xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x) xxxxx xx zalijí xxxxxxxxxxx množstvím (xxxxxxxxx 40 ml) xxxxxxxxxxx xxxxx (dodatek 3) x xxxxxxx v rotační xxxxxxxx (50-100 xx/xxx) xx dobu 4 xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxx 24 °X xxxx xx xxxx 16-24 xxxxx xxxxxxxx,
xxxx
x) xxxxx xx xxxxxxxx rozdrtí v xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přiměřeným xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (dodatek 3) xx použití gumového xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 72 hodin xxxx xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3.2.3. Xx xxxxxxx, xxxxx má xxxxx 15 minut, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2.4 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx bakteriální frakce xxxxxxx není xxxxx, xxx lze xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx 3.1.3.-3.1.6.
3.2.5 Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx 2 xxxxxx xxxxx, Jedna xxxxxxxx xx udržuje xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4-10 °X x xxxxx polovina xx xxxxxxxx s 10-25 % (x/x) xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx -16 až -24 °C (xxxxx) xxxx xxx xxxxxxx -68 xx -86 °X (měsíce), pokud xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
4. xX test
XXXXXXX
Xxxxxxxxxx xx použít xX test jako xxxxxx screeningový test, xxxxxxx xxxx prokázána xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx práhů.
Použije-li se xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx XXX xxxx XXXX. Xxxxxxxx xx xxxx IF xxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx a xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xx xX xxxx používán xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X případě pozitivního xxxxxxxx xX xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx další xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx protilátkou xxxxxxxxx, xxx méně citlivé.
Používají xx protilátky proti xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx - XXXX33113 (XXXXX 2137) xxxx XXXXX 2140. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx každou xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx suspenze xxxxxxxxxx 105 xx 106 xxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx isothiokyanatanu (XXXX) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Nezpracované xxxxxxxxxxxx xxxx monoklonální xxxxxxxxxx xx měly xxx XX titr xxxxxxx 1:2000. Během xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx ředěni (WD) x xxxxxxxxx titru xxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (viz internetovou xxxxxxx xxxx://xxxxx.xxxxxx. eu.int/Public/irc/sanco/Home/main).
Test xx provádí xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X případě xxxxxxx může být xxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxx skladovaných xxx - 68 xx - 86 °X x xxxxxxxxx. Glycerol xxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1 xx peletového xxxxx (dodatek 4), xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx dobu 15 xxxxx xxx 7&xxxx;000 x a xxxxxxxxxx xx stejném xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxx nutné, xxxxxxx pokud xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx plamenem (xxx 4.2).
Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx kmenem xxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx dodatku 2 x xxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cestou (xxxxxxxxxx lyofilizací nebo xxxxxxxxx při xxxxxxx -16 xx -24 °X) xx se xxxx xxxxx možnosti xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejném xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx negativní xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx okénky, xxxxxxx x 10 okénky x xxxxxxx nejméně 6 xx.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx vzorků.
4.1. Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x) Xxx xxxxxx x relativně xxxxxx xxxxxxxxx škrobového xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx množství (xxx xxxxxx x průměru 6 mm xx xxxxxx 15 µx - xxx větší xxxxxx xxxxx xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bramborové xxxxxx 1/100 xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx stejné xxxxxxxx xxxxxxxxx pelety (1/1) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x řadě. Xxxxxx xxxx lze xxxxxx xxxx duplikát xxxx pro xxxxx xxxxxx podle xxxxxxx 1.
x) Pro xxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xx desetinná xxxxxx (1/10 x 1/100) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxx o xxxxxxx 6 xx je xxxxxx 15 µx - xxx xxxxx xxxxxx objem xxxxx) xxxxxxxxxxxxxx pelety 1/100 x každého roztoku xx řady okének. Xxxxxx xxxx lze xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxx druhý xxxxxx podle xxxxxxx. 2.
4.2. Xxxxxx se xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 40 xx 45 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx (15 xxxxx xxx teplotě 60 °X), xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx 95 % xxxxxxx xxxx podle zvláštních xxxxxx dodavatelů protilátek.
V xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx použitím xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx (maximálně 3 xxxxxx).
4.3. Postup XX xxxxx:
x) Podle xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x xxxxxx 4.1 xxxx. x):
Xxxxxxxx se xxxx dvojnásobných xxxxxxx xxxxxxxxxx x XX xxxxx. V xxxxx xxxxx xx xxx xxx xxxx 1/2 (X/2), x xxxxxxxxx xxxx 1/4 (X/4), xxxx 1/2 (X/2), xxxx (X) x xxxxxxxxxxx xxxx (2X).
x) Xxxxx xxxxxxxx sklíčka xx xxxx x xxxxxx 4.1 písm. x):
Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxxxx x XX xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx 1: Příprava xxxxxxx na test xxxxx xxxxxx 4.1. xxxx. x) x xxxxxx 4.3. xxxx. x)
&xxxx;
|
&xxxx;
Xxxxxx resuspendované xxxxxx
|
&xxxx;
|
||||
&xxxx;
|
&xxxx;
1/100
|
&xxxx;
1/1
|
&xxxx;
1/1
|
&xxxx;
1/1
|
&xxxx;
1/1
|
&xxxx;
□ Xxxxxx resuspendované pelety
|
(T = xxxx)
|
&xxxx;
X/2
|
&xxxx;
X/4
|
&xxxx;
X/2
|
&xxxx;
X
|
&xxxx;
2X
|
&xxxx;
□ Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxx 1
|
•1
|
•2
|
•3
|
•4
|
•5
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Duplikát xxxxxx 1 xxxx xxxxxx 2
|
&xxxx;
•6
|
&xxxx;
•7
|
&xxxx;
•8
|
&xxxx;
•9
|
&xxxx;
•10
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
Xxxxxxxx xxxxxx antiséra/protilátky
|
|
||||
|
1/1
|
1/10
|
1/100
|
prázdné
|
prázdné
|
□ Xxxxxxxxx xxxxxx resuspendované xxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxx 1
|
&xxxx;
•1
|
&xxxx;
•2
|
&xxxx;
•3
|
&xxxx;
•4
|
&xxxx;
•5
|
&xxxx;
|
&xxxx; | &xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
Xxxxxxxx vzorku 1 xxxx vzorek 2
|
&xxxx;
•6
|
&xxxx;
•7
|
&xxxx;
•8
|
&xxxx;
•9
|
&xxxx;
•10
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
4.3.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xx uspořádají na xxxxxxxxx papír. Xxxxx xxxxxxxxx okénko xx xxxxxxx kompletně ředěním xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx každém xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx konkrétní xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx:
4.3.2. Xxxxxxxx xxxxxxx xx inkubují xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx (18-25 °X).
4.3.3. Xxxxxxxx xx kapky xx všech xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxxxxx opláchnou xxxxxx IF. Xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxx 5 xxxxx x xxxxx XX Xxxxx (dodatek 3) x xxxxxxxx x xxxxx XX. Je xxxxx xxxxxxxx vzniku aerosolu xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vlhkost jemným xxxxxxxx.
4.3.4. Sklíčka xx xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Testovací okénka xx pokryjí ředěním xxxxxxxxx XXXX, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx konjugátu naneseného xx xxxxxx xxxx xxx stejné xxxx xxxxxxxx použité protilátky.
4.3.5. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx na vlhkém xxxxxx po dobu 30 xxxxx při xxxxxxxx teplotě (18-25 °X).
4.3.6. Xxxxx konjugátu xx xxxxxxxx xx xxxxxxx x tato xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx (4.3.3.).
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.3.7. Xxxxxxxxxx xx 5-10 µx 0,1X fosfátového xxxxx x xxxxxxxxxx (dodatek 3) xxxx xxxxxxxx krycí xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
4.4. Vyhodnocení XX testu
4.4.1. Xxxxxxxxx xxxxxxx se prohlížejí xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx FITC xxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx při xxxxxxxx 500x xx 1000x. Xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx obvodu. U xxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx 40 xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx obarvené v xxxxxxx titru xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx ředění. Xxxxx je barevnost xxxxxxxx, xxxx být xxxx XX xxxxxxxx (xxxxx 4).
4.4.2. Pozorují xx xxxxx fluoreskující xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx://xxxxx.xxxxxx.xx.xxx/Xxxxxx/xxx/xxxxx/Xxxx/xxxx). Intenzita xxxxxxxxxxxx xxxx být xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kmenem xx xxxxxxx xxxxxx protilátky xxxxxx nebo xxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxx nelze xxxx x úvahu.
Při podezření x xxxxxxxx kontaminace xxxx xxx test xxxxxxxxx. Xx xx xxxx stát, když xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk (xxxx xxxxxx sklíček) xx povrchu sklíček.
4.4.3. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx testu. X xxxxxxxx x pupkové xxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx reagující xxxxxxxxxxxx bakterie x xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx Clavibacter xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus.
4.4.4. Xxxxx xx x xxxxx xxxxx fluoreskující buňky x typickou xxxxxxxxx x morfologií v xxxxx nebo pracovním xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 4.3.
4.4.5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX testu:
a) Xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx průměrný xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v 1 xxxxxxxxxxxxxx poli x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 1 xx resuspendované xxxxxx (dodatek 4).
Výsledek IF xx xxxxxxxxx x xxxxxx, kde xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxxx pelety nejméně 5x103. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x je xxxxxxx další testování.
b) Xxxxxxxx XX testu xx negativní pro xxxxxx, které obsahují xxxx xxx 5x103 xxxxx na 1 xx resuspendované pelety x vzorek se xxxxxxxx za xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
5. Xxxx XXXX
XXXXXXX
Xxxx xx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx XXXX test a xx pozitivní, musí xxx xxxx druhý xxxxxxx xxxxxxxxxxxx test xxxxxxxx XX test. Xxxx xx XXXX xxxx xxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xx pozitivní, xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx validované xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pro Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx (dodatek 7). Úvodní xxxxxxxxx touto xxxxxxx xx mělo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 103-104 buněk Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus xx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx výsledkem.
Následující postup xx měl xxx xxxxx možno xxxxxxxx x čerstvě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, ale xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx s extraktem, xxxxx xxx uchován x xxxxxxxxx při xxxxxxx -16 xx -24 nebo -68 xx -86 °X.
Xxxx xxxxxxxxx kontrola se xxxxxxx xxxxxxxxx část xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx byl xxxxxxx xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus x xxxxxxxxxx výsledkem.
Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx suspenze xxxxxxxxxx 105 až 106 xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx na xx (xxxx. xxxx XXXXX 4053 xxxx XX 406) x 0,01 X fosfátového xxxxx (XX) x 3-5 xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxx dodatek 2). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx dodatku 2.
Použití xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XXXX xxxxxxxxx kontrolu xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx všechny eubakterie xxxxxxxx xx xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx x xxxxxx.
5.1. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.1.1. Xxxxxxxx se fixační xxxxxx (viz dodatek 7)
5.1.2. Xxxxxxxxxx xx 100 µx každého vzorkového xxxxxxxx do Eppendorfovy xxxxxxxxxxxxx x odstřeďujte xx xxxx 8 xxxxx xx 7 000 x.
5.1.3. Odstraní se xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx x 500 µl fixačního xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx. 24 xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx a xxxxxxxx xx xxxx xxx xxx xxxxxxx 4 °C.
Alternativním xxxxxxxx xxxxxxxx je 96 % etanol. Xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx z xxxxx 5.1.2. x 50 µx 0,01 X XX x 50 µl 96 % xxxxxxx. Promíchá xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 4 °X xx xxxx 30-60 xxxxx.
5.1.4. Xxxxxxxxxx xx xx dobu 8 xxxxx xx 7&xxxx;000 x, xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx x resuspenduje xx xxxxxx x 75 µx 0,01 X PB (xxx dodatek 3).
5.1.5. Xxxxx xx 16 µx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxx 10 okénkové xxxxxxx, xxx xxxxxxx obrázek 3, xxxxxxx xx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxxx na xxxxx xxxxxxx, x to xxxxxxxx x xxxxxxx 1:100 x použitím 10 µl (x 0,01 X PB). Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx (49 µx) může xxx xxxxxx xxx xxxxxxx -20 °X xx přidání 1 xxxxxxxxxx xxxxxxxx 96 % etanolu. V xxxxxxx, že xx xxxxx XXXX xxxxxx xxxxxxxx, odstraní xx xxxxxx xxxxxxxxxxx, přidá xx xxxxxx množství 0,01 X XX x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx 3. Rozmístění xx sklíčku XXXX
5.1.6. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx 37 °C) x xxxxxx xx xxx xxxxxxxx.
X xxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx přerušit x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx den. Sklíčka xx xxxx být xxxxxxxxxx chráněna před xxxxxxx x x xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.2. Xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx
5.2.1. Xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx (Xxxxx L-6876) x 10 xx xxxxx (100 xX Xxxx-XXX, 50 mM XXXX, xX 8,0). Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xxx by xx xxxxx jednou xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Každý xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 50 µx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx dobu 10 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx demineralizované xxxx, xxxxx xxxxxx, a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxx místo xxxxxxxx 50 µl xxxxxxxxxx X 40-400 µx.xx-1 x xxxxx (20 mM Xxxx-XXx, 2 xX CaCl2, xX 7,4) xx xxxxx jamky a xxxxxxxx se xxx xxxxxxx 37 °X xx dobu 30 xxxxx.
5.2.2. Buňky xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 50 %, 80 % a 96 % xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 1 minuty. Xxxxxxx xx xxxxxxx uschnout xx xxxxxxx x xxxxxx sklíček.
5.2.3. Připraví xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dna xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx filtračním xxxxxxx xxxxxxxxx x 1x xxxxxxx (dodatek 7). Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx peci xxx xxxxxxx 55 °X xx xxxx alespoň 10 xxxxx.
5.2.4. Xxxxxxxx xx hybridizační xxxxxx (dodatek 7) s 45 µx na 1 xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xx xx dobu 5 xxxxx xxx xxxxxxx 55 °C.
5.2.5. Xxxxxxx se xxxxxx xx horkou xxxxxx xxx xxxxxxx 45 °X a xx xxxxxxx xx 4 xxxxxx na xxxxxxx / xxxxxxxxx se xxxxx 10 µx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.2.6. Každé xxxxxxx xx přikryje 2 krycími sklíčky (24 x 24 xx) xxx, aby xxx ně xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx se 14 - 18 x x xxxx xxx xxxxxxx 55 °C x temnu.
5.2.7. Xxxxxxxx xx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxx 1 x xxxxxxxx xxxx (Ultra xxxx xxxxx = XX), 1 l 1x xxxxxxx (334 xx 3x hybmix x 666 xx XXX) x 1 x 1/2 x xxxxxxx (167 xx 3x xxxxxx x 833 xx XXX). Xxxxx x xxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx lázni při xxxxxxx 55 °X.
5.2.8. Xxxxxx se krycí xxxxxxx x podložní xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx sklíček.
5.2.9. Xxxxxxxx xx nadbytek xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 15 minut x xxxxxxx s 1x xxxxxxxx xxx xxxxxxx 55 °X.
5.2.10. Xxxxx sklíček xx xxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxx 1/2 xxxxxx x nechá xx xxxxxxxxx xxxxxxx 15 xxxxx.
5.2.11. Xxxxxxx se xxxxxx xxxxxx xx XXX a položí xx filtrační xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx lehkým xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx 5-10 µx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxxxxxxx, Vecta Xxxxxxxxxxxx, CA, USA xxxx podobný) xx xxxxx xxxxx a xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (24 x 60 xx).
5.3. Xxxxxxxxx XXXX xxxxx
5.3.1. Sklíčka xx prohlížejí xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 630x xxxx 1 000x pod xxxxxxxx xxxxxx. S xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (FITC) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) ve xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx filtru xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx-5-xxxxxxxxxxxxx xx buňky Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx subsp. xxxxxxxxxxx xxxxxxxx Cy3 xxxx fluorescenčně xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolních vzorků. Xxxxx xxxx xxx xxxxx fluoreskující x xxxxx zbarveny. Test XXXX (xxxxx 9.4) xxxx být xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Prohlíží xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x pravých xxxxxx x kolem xxxxxx. X xxxxxx, xxx nejsou pozorovány xxxxx nebo xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx 40 xxxx xxxxxxxxxx.
5.3.2. Xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx buňky x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx sklíček (xxx xxxxxxxxxxx stránka xxxx:/xxxxx.xxxxxx.xx.xxx/Xxxxxx/xxx/xxxxx/Xxxx/xxxx). Intenzita fluorescence xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx lepší xxx x xxxxxxxxxxx kontrolního xxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxxxx zcela zbarveny xxxx xxxxxxxx slabou xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx x xxxxx.
5.3.3. Xxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Při xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx musí být xxxx zopakován. Xx xx xxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pufru xxxx xxx zjištění xxxxxxxxxxx xxxxx (mimo xxxxxx xxxxxxx) na xxxxxxx xxxxxxx.
5.3.4. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx podstatných pro xxxxxxxx XXXX xxxxx. X peletách z xxxxxxx části bramboru x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx populace xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x atypickou xxxxxxxxxx a křížově xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus, xxxxxx mnohem méně xxxxx než u XX xxxxx.
5.3.5. X xxxxx xx xxxxx xxxxx fluoreskující xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x morfologií, xxx 5.3.2.
5.3.6. Xxxxxxxxxxxx výsledku xxxxx XXXX:
x) Xxxxxxxx XXXX testu xxxx xxxxxx, pokud xxxx xxx xxxxxxx XXXX xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx x morfologií xxxxxxxx pro Clavibacter xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx x při použití xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx fluoreskující buňky xxxxxxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx pozorovány v xxxxxxx negativních kontrolách. Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx fluoreskující xxxxx x typickou xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx typických xxxxx x 1 xxxxxxxxxxxxxx xxxx a vypočítá xxxxx typických xxxxx x 1 xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (dodatek 4). Xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 5 x 103 xxxxxxxxx xxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxxx pelety, xx xxxxxxxx xx pravděpodobně xxxxxxxxxx Clavibacter michiganensis xxxxx. sepedonicus. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx 5 x 103 xxxxxxxxx xxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxxx pelety, xx xxxxxxxx za xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxx FISH xxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jasně xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx subsp. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx jsou tyto xxxxxxx xxxxx červeně xxxxxxxxxxxxx buňky xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. XXX xxxx
XXXXXXX
Xxxxxxx-xx xx XXX xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x je xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx XX test. Xxxxx xx XXX xxxx xxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx a xx pozitivní, xx xxx dokončení xxxxxxxx xxxxx další testování xxxxx postupového diagramu.
Využití xxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxx , je-li xxxxxxxxxx specializovaná xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxx umožnit xxxxxxxxxxxxxxxx zjištění 103 xx 104 xxxxx Xxxxxxxxxxx michiganensis xxxxx. xxxxxxxxxxx xx 1 xx přidaných xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx předtím testovány x xxxxxxxxxx výsledkem. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x přesnosti xx všech laboratořích xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx XXX xxxxxxx x protokoly. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxxx x xxxxxxx kontrolou.
Je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx zabránilo xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX. XXX xxxx by xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA.
S negativními xxxxxxxxxx (x průběhu xxxxxxxx XXX a XXX) xx xx xxxx xxxx zacházet xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, aby bylo xxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx XXX.
XXX xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- extraktu ze xxxxxx, xxxxx byl xxxxxxx xxxxxxxx na Xxxxxxxxxxx michiganensis xxxxx. xxxxxxxxxxx s negativním xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxx a XXX xx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxx XXX.
Xxxx by xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- alikvotní xxxxx resuspendovaných xxxxx, x xxxx byl xxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus (příprava xxx dodatek 2),
- suspenze 106 xxxxx xx 1 xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxxx izolátu (xxxx. XXXXX 2140 xxxx XXXXX 4053),
- xxxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxxxxx XXX xxxxx xxxx DNA extrahovanou x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, připraví xx pozitivní xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx ze xxxxxx xx xxxx xxx pokud xxxxx xxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx.
6.1 Metody xxxxxxxxxx XXX
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx pozitivní x negativní kontrolní xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxx DNA x komplexních xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx inhibitory XXX x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx PCR, xxxxxxxx x dodatku. 6.
6.1.
a) Xxxxxx xxxxx Xxxxxxxx (2000)
1. Xxxxxxxxxx se 220 µx lýzového pufru (100 xX NaCl, 10 xX Tris-HCl [xX 8,0], 1 xX XXXX [xX 8,0]) do xxxxxxxxxxxxx x objemu 1,5 xx.
2. Xxxxx xx 100 µl extraktu xx xxxxxx a xxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxx vodní xxxxx o xxxxxxx 95 °X xx xxxx 10 minut.
3. Xxxxxxxxxxxxx xx vloží xx 5 xxxxx xx ledu.
4. Xxxxx xx 80 µx xxxxxxxxx xxxxxxx lyzozymu (50 xx xxxxxxxx xx 1 xx x 10 xX Xxxx XXx, pH 8,0) x xxxxxxxx xx při xxxxxxx 37 °X po xxxx 30 minut.
5. Xxxxx se 220 µx Xxxx DNAR xxxxxx X (Xxxxxxxxxx), xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx při xxxxxxx 65 °X po xxxx 30 xxxxx.
6. Xxxxx se 100 µx Xxxx DNAR xxxxxx B (Invitrogen)a xxxxx xx promíchá xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x vzorek xxxxx xxx stejnoměrně xxxxxxxx.
7. Xxxxx xx 500 µx xxxxxxxxxxx x míchá xx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xx stane xxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxx xx xx 15 000 x xx dobu 20 xxxxx xxx 4 °X xxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
9. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx do xxxxx mikrozkumavky.
10. Přidá xx 1 xx 100 % xxxxxxx (-20 °C), xxxxxx xx xxxxxxxx třepáním x inkubuje xx xx xxxx xx xxxx 10 xxxxx.
11. Xxxxxxxx se na 15&xxxx;000 g xx xxxx 20 xxxxx xxx 4 °C x odstraní xx x xxxxxx xxxxxx.
12. Xxxxx se 500 µx 80 % xxxxxxx (-20 °X) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
13. Xxxxxxxxxx xx xx 15&xxxx;000 x xx xxxx 10 xxxxx xxx 4°X, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
14. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx vzduchu xxxx x XXX xxxxx xxx.
15. Peleta xx resuspendujte x 100 µl sterilní xxxx (XXX) x xxxxx xxxx nejméně 20 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
16. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx -20 °C xx xx xxxxxxxxxx při XXX.
17. Jakákoliv xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxx XXX xx xxxxxxx 5 µx supernatantu xxxxxxxxxxxx DNA.
6.1.
b) Xxxx xxxxxx
Xxxx metody xxxxxxxx XXX xx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx se xxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 103 až 104 xxxxxxxxxxx xxxxx na 1 xx xxxxxx xxxxxxxxx.
6.2 PCR
6.2.1. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx vzorky x xxxxxxxx pro XXX xxxxx validovaného xxxxxxxxx (dodatek 6). Xxxxxxxx xx jeden desetinný xxxxxx xxxxxx DNA (1:10 ve sterilní xxxx).
6.2.2. Připraví se xxxxxxxxx reakční xxxx xxx XXX x xxxxxxxxx, kde nehrozí xxxxxxxxxxx, podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (dodatek 6). Xxxxxxxxxx xxxxxxxx PCR xx xxxxxxxxxxxx reakce, která xxxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxx XXX.
6.2.3. Do xxxxxxxxxx XXX mikrozkumavek xx xxxxx 5 µx extraktu XXX xx 25 µl XXX xxxxxx.
6.2.4. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx obsahující xxxxx xxxxxxx xxxx XXX x xxxxx se xxxxxx xxxxxxxx xxxx XXX, xxxxx byla xxxxxxx do xxxxx XXX xxxxxxx xxxxxx.
6.2.5. XXX xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx do stejného xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxx při počátečním xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (dodatek 6)
6.3. Xxxxxxx xxxxxxxx XXX
6.3.1. Xxxxxxx se xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx. Nanese xx xxxxxxx 12 µx xxxxxxxxxxxxx reakční xxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x 3 µx xxxxxxxxxx xxxxx (dodatek 6) xx 2,0 % (x/x) xxxxxxxxxxx gelu x Trisacetát-EDTA (XXX) xxxxx (dodatek 6) xxx 5-8 X na xx. Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx DNA, xxxx. 100 xx xxxxxx.
6.3.2. Xxxxxxxx xx xxxxxxx XXX barvením x xxxxxxxx bromidu (0,5 mg na x) po dobu 30-45 minut, xx xxxxxxx vhodných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx zacházení x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.3. X xxxxxxxxx x XX (krátké vlnové xxxxx, xxxx. 302 xx) xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xx zdokumentuje.
6.3.4. X xxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx PCR xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx (xxx dodatek 6). Xxxxxxx xx naštěpené xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xx charakteristický vzor xxxxxxxxxxxx fragmentu xxx XX xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx a štěpenou xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx výsledku XXX xxxxx:
XXX xxxx xx negativní, pokud xxxxxxxx typický xxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx očekávané xxxxxxxxx xxxxx zjištěn v xxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x daným xxxxxxx).
XXX xxxx xx pozitivní, xxxxx byl xxxxxxx xxxxxxxx typický pro Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx očekávané xxxxxxxxx x vzoru (xxxxx xx požaduje), za xxxxxxxxxxx, xx nebyl xxxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testu x xxxxxx xxxxx XXX xxxxxxx (oddíl 9.3).
Xxxxxxxx:
Xxx xxx podezření xx xxxxxxxx XXX, xxxxx xxx očekávaný xxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxx kontrolního xxxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx ve xxxx, ale x xxxxxxxxx kontroly s Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXX x xxxxxxxx reakce xxxxx, xxxxx xxxxx získán xxxxx x xxxx xxxxxxxxx.
Xxx mít xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx z xxxxx xxxx více negativních xxxxxxx.
7. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx testování xxxxx xxxxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 103 xx 104 xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx na 1 xx xxxxxxx x extraktům xx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx (xxxxxxxx xxx dodatek 2).
Nejvyšší xxxxxxxxx zjištění xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx připraveného xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx růstových xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx použít x xx extrakty, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx -68 xx -86 °X.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx poskytují xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx subsp. sepedonicus xxxxxxx v případě xxxxxxxxxxxxx příznaků a xxxxxxxxx také vynikající xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxx xxxxxxx nebezpečí xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx růstové podmínky.
Podrobnosti x xxxxxxxxx jsou xxxxxxx x Dodatku 8.
7.1. Xxxxxx xxxxx 3.1.5. xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx (7.2, 7.3, 7.4). Používají se xxxxx xxxxxxxx xx xxxx 2-3 listů xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pravého xxxxx. Xxx xx zajistilo xxxxx využití xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx i efektivní xxxxxxxxx, bude pro xxxx uvedené xxxxxxx xxxxxxx 15-25 xxxxx xx xxxxxx.
7.2. Xxxxxxxxx xxxxxxx I
7.2.1. Xxxxx xxxxxxxx se horizontálně xxxxxxx (xxx květináče x průměru 10 xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx částí x rozměrech 5 xx hloubky, 10 xx xxxxx x 15 cm délky). Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx a blok xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx fólie. Rostlinu xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx bloku.
7.2.2. Xxxxxx skalpelu xx xxxxxxx xxxx děložními xxxxxx a xxxxxx xxxxxx listem podélný xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx 0,5 xx 1,0 cm x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtiny xxxxxxx stonku.
7.2.3. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx linky xxxx xxxxxx malířským xxxxxxxxx xxxxxxxxx do pelety. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
7.2.4. Xxx se překryje xxxxxxxx xxxxxxxxx aplikovanou xxxxxxxx stříkačkou x xxxxxx 2 xx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxxxx II
7.3.1. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx napipetuje xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx pravý xxxx xxxxx (xxxxxxxxx 5 xx 10 µl) xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
7.3.2. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx sešikmený zářez (x xxxx xxxxxxxxx 5°), xxxxxx 1,0 xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 2/3 xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x řezem se xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx pelety.
7.3.3. Xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx stříkačkou
7.4.1 Pro xxxxxxx vnitřního xxxxxx xxxxx (turgoru) se xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.4.2 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx inokulují těsně xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx injekční xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (xx xxxx než 23 X). Peleta xx rozdělí xxxx xxxxxxxxx rostliny xxxxx xxxxxxxxxxxx.
7.5. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx 5 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (7.2, 7.3 nebo 7.4) xxxxx xxxxxxxx 105 xx 106 buněk xx 1 xx xxxxx kultury xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxx xx to xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx infikovaných xxxx xxxxxxxx.
7.6. Xxxx negativní xxxxxxxx xx inokuluje 5 xxxxxxx xxxxxxxxx 0,05 X PBS xxxxxxx inokulační xxxxxxx (7.2, 7.3 xxxx 7.4).
7.7. Xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (dodatek 8) xx dobu xx 4 týdnů xxx teplotě 18-24 °X. Rostliny xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (70-80%) a xxxxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx nedostatku xxxx. Xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx xxx 30 °X x optimální teplota xx 21 °X. Xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx nedostatku xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxxx s xxxx. Xxxxx xxxx být xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx blízko xxxx, oddělí xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Při xxxxxxx, xxxxxxxx, kontrole x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx maximální xxxxxxxxx tomu, xxx xxxxxxx ke xxxxxxxxxxx. Xx nezbytné, xxx xxxxxxxx i xxxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx hmyzem, xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx bakterie z xxxxxxx vzorku xx xxxxx.
7.8. Xxxxxxxxxx po xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Původce xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx u lilku xxxxxxxxxxxx vadnutí listů, xxxxx může xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx být xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxx před znekrotizováním xxxxxxxx. Xxxxxxx místa xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx mastně xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx často xxxxx xxxxx xxxxx. Rostliny xxxx xxxxxxxxxxx; čím xxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx se xxxxxxxx, tím xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Rostliny xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx lilku xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx nízkým xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx používat xxxxxxxx xx fázi xxx xxxxx a xxxx xxxxxx xxxx xx. Vadnutí xxxxx xxxx způsobovat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx přítomných x xxxxxx x pletiv xxxxx. Xxxxx x xxx Erwinia xxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxx x X. xxxxxxxxxx subsp. xxxxxxxxxxx, Xxxxx xxxxxx xxx. xxxxxxx, xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx vadnutí lze xxxxxxx xx případů xxxxxxxxxxx původcem xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx rychle xxxxxx xxxx listy xxxx xxxx rostliny. Xxxx xx xxxx xxxxxxxxx Xxxxxxx barvení: xxxxx xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xx Xxxxxxx spp
7.9. Xxxxxxx se na xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, měla xx xxx provedena xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx x xxxxxx lilku vejcoplodého xx vydezinfikuje xxxxxxx 70 % xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xX nebo XXX xx xxxxx x xxxxx a xxxxxxx xx xx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx (xxx xxxxx 8). Xxxx xx také xxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxx (dodatek 9). Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx Clavibacter xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xx identifikují x xxxxxxx se xxxxxxxxxx (xxx xxxxx 9 x 10).
7.10. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxx, xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx lilku vejcoplodého xxxx xxxxxxxx infekce xxxxxxx x xx xxxxxxxx inkubační xxxx xx 4 týdnů. Xxxxx xxxxxx xx 4 týdnech xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, provede xx xxxx IF/PCR xx složeném xxxxxx xxxxx stonků x xxxxx 1 cm x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 8. Čisté xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x potvrdí se xxxxxxxxxx (xxx xxxxx 9 x 10).
8. Xxxxxxx Clavibacter xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x pletiv xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x proto se xxxxxxxxxxxx provádět izolaci xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx (3.1.5) xxxx stonku (3.2). Xxxxx izolace Clavibacter xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus xx možná xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx média x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx pelety z xxxxxxx části xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx částí xxxxxx x x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx nevykazují xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx x xxxxx byl pozitivní xxxxxxxx v testu XX/XXX xxxxxxxxx vzorků (xxx xxxxx 7.9). Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx podle xxxxxx 3.l.2.
Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx suspenze 106 xxx na xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx (např. XXXXX 4053 xxxx XX 406). Xxx xx vyloučilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxx obvyklých xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx se testuje xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxx.
8.1. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx médium
8.1.1. Ze 100 µx xxxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx šťávy x xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx pufru (dodatek 3).
8.1.2. xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx náročným xxxxxxxx xxxxxxxxx Clavibacter michiganensis xxxxx. sepedonicus x xxxxxxxxxx saprofytů. Xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xx obvykle x infikovaných xxxxxxxxx xxxxxxxx xx vysokých xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx 100 µx x xxxxxxx xxxxxx, x xxxxxx 1/100 xx 1/10&xxxx;000 xx XXXX médium nebo XXX-88 xxxxxx (dodatek 5), xx xxxxxxx pomůcek xxxxxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxx) a xxxxxxxx xxxxxxx.
8.1.3. Xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxx 21-23 °X.
8.1.4. Počáteční xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx miskami x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx podobných Clavibacter xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, s xxxxxx xxxxxxxxx xx 5,7 a 10 xxxxx.
8.2. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxx identifikaci xx xx xxxx xxxxxxxx xx YGM médiu; xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx dříve, xxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx. xxxxxxx xx 3-5 xxxxx.
8.2.1. Xxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xx rozetřou na xxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxx x dodatku 5):
- živný xxxxxxxxxx agar (xxxxx xxx subkultury),
- kvasničný xxxxxx xxxxxxxxx xxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx probíhá xxx xxxxxxx 21-24 °X xx xxxx maximálně 10 xxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx vytváří xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx, smetanově xxxxxxxx.
8.2.2. Xxxxxxxx xx provede xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xx rychlost xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx kolonie xxxx smetanově xxxx xxxx barvy xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx tekuté, x xxxxxxx xxxxxx x obvykle xxxx x xxxxxxx 1 - 3 mm.
Jednoduché Xxxxxxx xxxxxxx (dodatek 9) xxxx pomoci xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx.
8.2.3 Podezřelé xxxxxxx xx identifikují (viz xxxxx 9) x xxxxxxx xx zkouška xxxxxxxxxx (viz xxxxx 10).
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxx kultury xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx následujících testů xxxxxxxxxx xx různých xxxxxxxxxxxx principech.
V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
9.1. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testy
Zjišťují xx následující xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Veškerá xxxxx xx se měla xxxxxxxxx xxx 21 °X x po xxxxx dnech xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx růstu, xxxxxxxx xx po xxxx xxxxxxx 20 xxx.
Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx musí provádět xx xxxxxxx inokula xx xxxxxxxxx živného xxxxx. Xxxxxxxxxxxx srovnání xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx-xxxxxxxxxxx (X/X) xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx -
Aktivita xxxxxxxx +
Xxxxxxx xxxxxxx -
Xxxxxxxx xxxxxx -
Tvorba X2X -
Xxxxxx xxxxxx -
Xxxxxxxxx xxxxxxx -
Hydrolýza xxxxxx - nebo xxxxx
Xxxx xxx 37 °X -
Xxxx x 7% NaCI -
Hydrolýza xxxxxxxx -
Xxxxxxxxx xxxxxxxx +
Xxxxxx xxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx -
- laktózy - xxxx xxxxx
- xxxxxxxx -
- salicinu -
Xxxxxxx xxxxxxx (dodatek 9)
9.2. xX xxxx
x) Xxxxxxxx xx xxxxxxxx přibližně 106 xxxxx/xx x xxxxx xx xX (dodatek 3).
x) Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx ředění xxxxxxxx xxxxxxxx.
x) Provede xx xX xxxxxx (xxxxx 4).
x) Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xX xxxxx xx dosaženo, xxxxxxxx xX xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
9.3. XXX test
a) Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx 106 xxxxx xx xx ve xxxxxxxx xxxx (XXX)
x) Xxxxxxx xx 100 µx suspenze xxxxx x uzavřených xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx bloku xxxx vřící xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 100 °C xx xxxx 4 xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx přidáním xxxxxxx xxxxxxxxxxxx NaOH xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 X. Xxxxxx xxx potom xxxxxx xxx xxxxxxx -16 xx -24 °C xx do xxxxxxx.
x) Xxx xxxxxxxxxxx Clavibacter xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx vhodné xxxxxxx XXX (xxxx. Xxxxxxx, 2000; viz dodatek 4; Li x de Xxxx, 1995; Xxxxx x xxx., 1997; Xxxxxxx x Xxxxxx, 1999; Xxxxxx a kol., 1999).
x) Xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xx pozitivní, xxxxx xxxx xxxxxxxxx PCR xxxxxx velikosti x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmen.
9.4. XXXX xxxx
x) Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx 106 xxxxx na xx x XXX.
x) Xxxxxxx xx postup XXXX (xxxxx 5)
x) Xxxx XXXX xx xxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxx reakce xxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly.
9.5. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (XXX)
x) Kultura se xxxxxxx xx xxxxxxxxxx-xxxxxxx xxxxx (Xxxxx) xx xxxx 72 hodin xxx xxxxxxx 21 °X (+/- 1°C).
b) Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx XXX (Janse, 1991; Xxxxx, 1992).
x) Xxxx FAP xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x profilem xxxxxxxxx kontroly. Přítomnost xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kyselin 15:1 Anteiso X, 15:0 lso, 15:0 Xxxxxxx, 16:0 lso, 16:0 a 17:0 Xxxxxxx jasně xxxxxx x přítomnosti Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx subsp. xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxx jako Xxxxxxxxxxxxxx, Xxxxxxxxxxxx a Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxx, ale 15:1 Xxxxxxx X je xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx Xxxxxxxxxxx xxx. v xxxxxxx 1-5 %. X Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx subsp. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx pohybuje xxxxx 5 %.
9.6. XXX-XXX
x) Xxxxxxxx se suspenze xxxxxxxxx 106 xxxxx xx xx v XXX.
x) Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx Xxxxx a kol., 2001.
10. Xxxx xxxxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxx xxxxxxxxx virulence kultur xxxxxxxxxxxxxxxx jako Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
10.1. Xxxxxxxx xx inokulum přibližně 106 xxxxx na xx x 3-xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx izolované xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kmene Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx.
10.2. Xxxxxxxx se 5-10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx ve xxxx 3 pravých xxxxx..
10.3. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 18-24 °X xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx vlhkosti x xxxxxxxxxx zaléváním, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. U xxxxxxx xxxxxx by xxxx během 2 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxx, xx se xxxx xxxxxxxxx xx 3 xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx vejcoplodého, xxx xxxxxxxxxxxxxxx 25 °X. Xxxxxxxx se po 3 xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, nemůže xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx patogenní xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx.
10.4. Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 2 xx nad xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx nebo 50 xX xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na XXXX x YPGA, inkubuje xx xx xxxx. 3-5 dní xxx xxxxxxx 21-23 °X x xxxxxxx xx xxxxx kolonií xxxxxxxxx xxx Clavibacter xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx na xxxxxxxxxxxx a validaci xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx (1) |
Místo |
Země |
Agentur xüx Xxxxxxxxxx xxx Ernährangssicherheit |
Vídeň x Linec |
Rakousko |
Departement Gewasbescherming |
Merelbeke |
Belgie |
Plantedirektoratet |
Lyngby |
Dánsko |
Central Xxxxxxx Xxxxxxxxxx |
Xxxx |
Xxxxxx |
Xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxx |
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx National xx xx Protection Xxxxxxxx, Xxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xx xx Protection Xxxxxxxx, Xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xx la Pomme xx Xxxxx |
Xx Xxxx |
Xxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxx |
Xxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxxxxxx Hannover |
Hannover |
Německo |
State Xxxxxxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxx |
Xxxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxxxxxxx, Plant Xxxxxxxxxx Xxxxxx |
Xxx |
Xxxxxx |
Xxxxxçãx-Xxxxxxx de Xxxxxxçãx xxx Xxxxxxxx |
Xxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx biologijo |
Ljubljana |
Slovinsko |
Centro de Xxxxxxxxxxx de Xxxxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
(1) Xxxxxxxxx xxxxx: xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main |
Dodatek 2
Xxxxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx kontrol xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testy XXX/XX a XXXX
Xxxxxxxxx xx 72 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx X. m. xxxxx. xxxxxxxxxxx (XXXXX 4053 xxxx PD 406) xx xxxxxxxxx médiu XXXX a suspenduje xx v 10 xX xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx hustoty xxxxxxxxx 1 xx 2 x 108 xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx/xx. Xxxx xx xxxxxxx dosáhne xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 0,20 - 600 xx.
Xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx 200 xxxx xxxxxxxxxx x produkce xxxxxx s xxxxx xxxxxxx, x xxxxx xx jisté, xx xx xxxxxx C. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx se zpracují xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x 10 ml.
Připraví xx 10 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx o xxxxxx 1,5 xx x 900 µx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx 100 µx suspenze C. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx xx první xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx. X následujících xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx provedou xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx kontaminovaných xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kontrola. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kontroly. Xxxxxxxxxxxxx xx opatří xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x 100 µx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x objemu 1,5 xx, xxxx xx xxxxx 9 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx probíhá při xxxxxxx -16 xx-24 °X až xx xxxx použití.
Přítomnost x xxxxxxxx X. x. xxxxx. sepedonicus x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx nejprve xxxxxxxxx prostřednictvím xxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxx XXX xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx XX x XXXX xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pozitivních a xxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxx xxxxxx sérii xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX, FISH x XXX musí xxx X. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx v 106 x 104 xxxxx/xx xxxxxxxxxxx kontrol x xxxxx xxx xxxxxxx x žádné x xxxxxxxxxxx kontrol.
Dodatek 3
Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx
XXXXXX: Xxxxxxxxxx sterilizované xxxxx xxx xxxxxxxxx xx dobu xx xxxxxxx xxxx.
1. Pufry xxx extrakci
1.1. Extrakční xxxx(50 xX xxxxxxxxx xxxx, xX 7,0)
Xxxxx xxxx xx používá x extrakci xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
Xx2XXX4 (xxxxxxx) 4,26 g
KH2PO4 2,72 x
Xxxxxxxxxxx voda 1,00 x
Xxxxxx xx xxxxxxxx, zkontroluje se xX x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx při 121 °X xx xxxx 15 xxx.
Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxx |
Xxxxxxxx (xx litr) |
|
Lubrolové vločky |
Protisrážlivý xxxxxxxxxx (*) |
0,5 x |
XX xxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxx xxxxxxx (*) |
1,0 ml |
Tetrasodiumpyrofosfát |
Antioxidační xxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx-40&xxxx;000 (XXX ‒ 40) |
Xxxxxx xxxxxxxxxx XXX |
50 x |
(*) xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx homogenizací |
1.2. Xxxxxxxx xxxx (10 xX xxxxxxxxx pufr, xX 7,2)
Xxxxx xxxx xx používá xxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx částí xxxxxxxxxxxx xxxx poté, xx byly odstřeďováním xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx.
Xx2XXX4.12X2X 2,7 x
XxX2XX4. 2X2X 0,4 g
Destilovaná voda 1,00 l
Složky xx xxxxxxxx, zkontroluje se xX a provede xx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx při 121 °X xx dobu 15 xxx.
2. Xxxxx xxx XX test
2.1. Xxxxx pro IF (10 xX xxxxxxxxx xxxx ve xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX), xX 7,2)
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx2XXX4.12X2X 2,7 x
XxX2XX4. 2X2X 0,4 g
NaCl 8,0 g
Destilovaná xxxx 1,00 x
Xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xX x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx při 121 °X po xxxx 15 min
2.2. XX-xxxx-Xxxxx
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. Xxxxx se 0,1 % Tween 20 x xxxxx xxx XX.
2.3. Xxxxxxxxx pufr x xxxxxxxxx, xX 7,6
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx jako xxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx xx IF xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xx2XXX4.12X2X 3,2 x
XxX2XX4. 2X2X 0,15 g
Glycerol 50 xx
Xxxxxxxxxxx xxxx 100 xx
Xxxxx roztoky xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. Xxxxxxxxxxx® (Vector Xxxxxxxxxxxx) nebo Citifluor® (Xxxxx).
Xxxxxxx 4
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xX x XXXX xxxxxxxxxxx xxxxx
1. Xxxxxxxx xx průměrný xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (x).
2. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
X = c x X/x,
xxx X = xxxxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxxx x xxxx jamkami x
x = plocha xxxx objektivu.
s = πx2/4X2X2,
xxx x = xxxxxxxxxx xxxx (x xxxxxxx xx 8 - 24 xxxxx xxxx xxxxxxx),
X = xxxxxxxx koeficient (1 xxxx 1,25),
X - xxxxxxxx xxxxxxxxx (100 x, 40 x xxx.).
3. Xxxxxxxx se xxxxx charakteristických xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 1 xx resuspendované xxxxxx (X).
X = X x 1&xxxx;000/x x X,
xxx y = xxxxx resuspendované xxxxxx x každém xxxxxx x
X = zřeďovací xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx 5
Xxxxx pro xxxxxxx x kultivaci X. x xxxxx. xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxx růstová xxxxx
Xxxxx xxxx (Xxxxxxxx agar = NA)
Živný agar (Xxxxx) |
23 x |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
1,00 x |
Xxxxxx se xxxxxxxx x provede xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx 121 °X xx dobu 15 xxx.
Xxxxx dextrózový xxxx (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx = NDA)
Difco bakto xxxxx xxxx obsahující 1 % X(+) xxxxxxx (xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxx 121 X xx xxxx 20 xxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxx-xxxxxxxxx agar (Xxxxx peptone glucose xxxx = XXXX)
Xxxxxxxxxx xxxxxxx (Xxxxx) |
5,0 g |
Baktopepton (Xxxxx) |
5,0 x |
X(+) glukóza (xxxxxxxxxx) |
10,0 x |
Xxxxxxxxx (Xxxxx) |
15,0 x |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
1,00 l |
Složky xx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx 121 °X xx xxxx 15 xxx.
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx extraktem x xxxxxxxxxxx solemi (Xxxxx extract xxxxxxx xxxxx xxxxxx = XXX)
Xxxxxxxxxx extrakt (Xxxxx) |
2,0 x |
X(+) xxxxxxx (monohydrát) |
2,5 x |
X2XXX4 |
0,25 g |
KH2PO4 |
0,25 x |
XxXX4 . 7X2X |
0,1 x |
XxXX4 . X2X |
0,015 |
XxXx |
0,05 g |
FeSO4 . 7H2O |
0,005 |
Baktoagar (Xxxxx) |
18,0 x |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
1,00 x |
Xxxxxx xx xxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx 0,5 1 média x autoklávu při 115 °X xx xxxx 20 xxx.
x) Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx růstová xxxxx
Xxxxxx XXXX
Xxxxx není xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx složky médií x XXX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx (Xxxxx) |
2,0 x |
Xxxxx |
2,5 x |
X2XXX4 |
0,25 x |
XX2XX4 |
0,25 x |
XxXX4 . 7X2X |
0,1 x |
XxXX4 . X2X |
0,015 x |
XxXx |
0,05 g |
FeSO4 . 7X2X |
0,005 x |
Xxxx (Xxxxx č. 1) |
16,0 x |
Xxxxxxxxxxx voda |
1,00 x |
Xxxxxx xx rozpustí, xX xx xxxxxx xx 7,2. Xx xxxxxxxxxxxxx (xxx 121 °X xx dobu 15 xxx.) x xxxxxxxxx xx 50 C xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxx 0,06 x, xxxxxxxxx xxxx 0,002 x, amphotericin B 0,01 x.
X xxxxxx xx xxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxx (Xxxxx) x nalidixic acid (Xxxxx) (xxx 5 xx/xx) v 96 % xxxxxxxx, amphotericin X (Xxxxx) (1 xx/xx) x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Zásobní xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx 3 xxxxxx. Po xxxxxxx antibiotik je xxxxxxxxxxx 1 měsíc xxx xxxxxxxxxx v xxxxxx do 8 +/- 2 °C.
Médium XXX-88
Xxxxx xxxx (Xxxxx) |
23,0 x |
Xxxxxxxxxx extrakt (Xxxxx) |
2,0 x |
X-xxxxx |
5,0 g |
K2HPO4 |
2,0 g |
KH2PO4 |
0,5 x |
XxXX4 . 7X2X |
0,25 x |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
1,00 x |
Xxxxxx xx xxxxxxxx,xxxxxx xx xX na 7,2. Xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 50 °X xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx antibiotika: xxxxxxxxx X xxxxxxxx (Sigma) 0,003x, nalidixic acid (Xxxxx) 0,008 g, xxxxxxxxxxxxx (Sigma) 0,2 x.
Xxxxxxxxxxx xx rozpustí xxx xxxxxxxx zásobních xxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxx x 0,01 X XxXX, cykloheximid x 50% etanolu, xxxxxxxxx X xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vodě. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx 3 xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx 1 xxxxx xxx xxxxxxxxxx v xxxxxx xx 8 +/- 2 °C.
Dodatek 6
Validované xxxxxxxxx x činidla xxx XXX
Xxxxxxxx:
Xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zjištění xxxxxxx 103 xx 104 xxxxx X. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx testování xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx žádné falešné xxxxxxxxx výsledky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxx.
1. Xxxxxxxxxxx PCR xxxxxxxx x interní XXX xxxxxxxxx (Pastrik, 2000)
1.1. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
xxxxxx XXX-1 5'- xxx ctt gtg xxx tgg xx xx -3'
primer PSA-R 5'- tac xxx xxx gtt xxx xxx ccc x -3'
xxxxxx XX-7-X 5'- xxx xxx ata xxx ggt xxx xxx tgc -3'
xxxxxx XX-8-X 5'- xxx xxx xxx xxx xxx acg xx -3'
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx amplikonu x DNA C. xx. xxxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx = 502 xx (sada PSA-primer(i).
Předpokládaná xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx XXX xxxxxxxx 18X rRNA 377 xx (xxxx XX-xxxxxxx).
1.2. Xxxxxxx xxxx XXX
Xxxxxxx |
Xxxxxxxx xx xxxxxx |
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx |
Xxxxxxxx xxxx (XXX) |
15,725 μl |
|
10x XXX pufr (1) (15 xX MgCl2) |
2,5 μx |
1x(1,5 xX XxXx2) |
XXX (xxxxxx V) (10 %) |
0,25 μx |
0,1 % |
Směs x-x XX (20 xX) |
0,125 μl |
0,1 mM |
Primer XXX-1 (10 μX) |
0,5 μx |
0,2 μM |
Primer PSA-R (10 μX) |
0,5 μx |
0,2 μX |
Xxxxxx XX-7-X(10 μM) (2) |
0,1 μx |
0,04 μX |
Xxxxxx XX-8-X (10 μM) (2) |
0,1 μx |
0,04 μX |
Xxx xxxxxxxxxx (5 U/μl) (1) |
0,2 μl |
1,0 X |
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
5,0 μx |
|
Xxxxxxx objem |
25,0 μx |
(1) Xxxxxx byly xxxxxxxxxx za xxxxxxx Xxx xxxxxxxxxx Perkin Xxxxx (AmpliTaq xxxx Xxxx) x Xxxxx XXX.
(2) Koncentrace xxxxxxx XX-7-X a XX-8-X xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx XXX podle Xxxxxxxx (2000) (xxx xxxxx 6.1 xxxx. x) a 6.2). Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx jinými xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx nutná xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx činidla.
1.3. Xxxxxxx podmínky xxx XXX
Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
1 cyklus: x) 3 xxxxxx xxx teplotě 95 °X (denaturace DNA xxxxxxx)
10 cyklů xx) 1 xxxxxx xxx xxxxxxx 95 °X (xxxxxxxxxx XXX xxxxxxx)
xxx) 1 minuta xxx xxxxxxx 64 °X (xxxxxxxxx primerů)
iv) 1 xxxxxx xxx teplotě 72 °C (xxxxxxxxxxxx xxxxx)
25 xxxxx x) 30 sekund xxx xxxxxxx 95 °X (xxxxxxxxxx XXX xxxxxxx)
xx) 30 sekund xxx xxxxxxx 62 °C (xxxxxxxxx xxxxxxx)
xxx) 1 xxxxxx xxx xxxxxxx 72 °X (prodlužování xxxxx)
1 xxxxxx xxxx) 5 xxxxx xxx xxxxxxx 72 °C (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
xx) Xxxxxxx xx při teplotě 4 °C
Poznámka:
Tento xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx XX Research XXX 200. Xxx xxxxxxx xxxxxx modelů xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx), xxx), iv), x), vi) x xxx).
1.4. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxxx x XXX X. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx produkuji xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx fragmentu x enzymem Xxx XX po xxxxxxxx xxx teplotě 37 °X xx xxxx 30 xxxxx. Fragmenty xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx C. x. xxxxx. xxxxxxxxxxx xxxx rozměry 282 xx a 220 xx.
2. Xxxxxxxx nanášecího xxxxx
2.1. Xxxxxxxxxxxx modř (10 % xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxxxxxxx xxxx 5 x
Xxxxxxxxxxx xxxx 50 xx
Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx (86 %) 3,5 xx
Xxxxxxxxxxxx xxxx 300 µl
Destilovaná xxxx 6,2 ml
3. Xxxx 10x TRIS-acetát-EDTA (XXX), xX 8,0
XXXX 48,4 x
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 11,42 ml
EDTA (xxxxx xxx) 3,72 x
Xxxxxxxxxxx xxxx 1,00 x
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xx 1x.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx).
Xxxxxxx 7
Xxxxxxxxxx činidla xxx XXXX test
1. Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx pro Xxx XXX-XX3-01: 5'- ttg xxx ggc xxx xxx ctc xxx xxx -3'
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX-338-XXXX: 5'- xxx xxx xxx xxx xxx xxx-3'
2. Xxxxxxx roztok
[UPOZORNĚNÍ: FIXAČNÍ XXXXXX XXXXXXXX PARAFORMALDEHYD, XXXXX JE XXXXXXX! XXXXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXXXXXX. DOPORUČUJE SE XXXXXXXX X XXXXXXXXX.]
x) Xxxxxxx xx 9 xx molekulárně xxxxx xxxx (např. Xxxxx xxxx xxxxx = (XXX)) xx xxxxxxx xxxxxxxxx 60 °C x přidá xx 0,4 x parafonnaldehydu. Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx přidání 5 xxxxx 1X XxXX x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
xx) Upraví se xX xx 7,0 xxxxxxxx 1 ml xxxxxxxxxxx xxxxx 0,1 X (XX; xX 7,0) x 5 xxxxx HCl 1N. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xX x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx XXx nebo NaOH.
[UPOZORNĚNÍ: X XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX xX!]
xxx) Xxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx 0,22 µm x skladuje xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx teplotě 4 °X xx dalšího xxxxxxx.
xx) Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx fixační xxxxxx: 96 % xxxxxx.
3. 3x Xxxxxx
XxXx 2,7 X
Xxxx-XXx 60 xX (xX 7,4)
EDTA (xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx) 15 xX
Xxxxx se xx 1x, xxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxxxxx roztok
1x Xxxxxx
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (XXX) 0,01 %
Xxxxx XXX 338 5 xx/µx
Xxxxx XXXXX301 5 ng/µl
Připraví xx množství hybridizačního xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx 2 xxxxx xxxxxx) xx xxxxx 90 µx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx: Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
2 xxxxxxx |
8 sklíček |
|
Sterilní xxxxx xxxxx xxxx |
50,1 |
200,4 |
3x xxxxxx |
30,0 |
120,0 |
1 % SDS |
0,9 |
3,6 |
sonda XXX 338 (100 xx/μx) |
4,5 |
18,0 |
xxxxx XXXXX301 (100 xx/μx) |
4,5 |
18,0 |
Xxxxxxx xxxxx (μx) |
90,0 |
360,0 |
Xxxxxxxx.:
Xxxxxxx xxxxxxx obsahující xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx uchovávají x xxxxx xxx xxxxxxx -20 °X. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo elektrickým xxxxxxx.
5. 0,1 X xxxxxxxxx xxxx, xX 7,0
Xx2XXX4 8,52 x
XX2XX4 5,44 x
Xxxxxxxxxxx xxxx 1,00 x
Xxxxxx se xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xX x xxxxxxxxxxx xx autoklávováním xxx xxxxxxx 121 °X xx xxxx 15 xxxxx.
Xxxxxxx 8
Xxxxxxxxx lilku xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Semenáčky x plně rozvinutými xxxxxxxxx xxxxxx (10 xx 14 xxx) xx přepichují do xxxxxxxxxxxxxxx pěstebního xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx následujících podmínek:
Délka xxx: 14 hodin xxxx přirozená xxxxx xxx, pokud xx xxxxx;
Xxxxxxx: xxx: 21 xx 24 °X,
xxx: 15 °X.
Xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "Xxxxx Xxxxxx",
"Xxxx Tom",
"Rima",
"Balsas".
Dodavatel: viz xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx://xxxxx.xxxxxx.xx.xxx/Xxxxxx/xxx/xxxxx/Xxxx/xxxx
Xxxxxxx 9
Xxxxxxx xxxxxxx v Xxxxxxxxx modifikaci (Xxxxxxx, 1981) (1)
Xxxxxx krystalové xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 2 x xxxxxxxxxx violeti x 20 ml 95 % xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx 0,8 x xxxxxxxxx xxxxxxxx x 80 xx destilované xxxx.
Xxx xxxxxxx se xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx roztok
Jód 1 x
Xxxxx draselný 2 g
Destilovaná xxxx 300 ml
Pevné xxxxx xx xxxxxxxx rozetřou xxxxxx xxxxxxx x xxxxx. Xxxxxxx xx xx vody a xxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx O 2,5 x
95 % xxxxxx 100 xx
Xxxxxxx xx x uloží xx.
Xxxxxx: 1:10 xxx xxxxxxxx pracovního roztoku.
Postup xxxxxxx
1. Xxxxxxxx se xxxxxxx, xxxxxx se xx xxxxxxx a xxxxxx se xxxxxxxx.
2. Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx violeti x xxxxx xx xxxxxxx 1 xxxxxx.
3. Xxxxxx xx omyje xxx tekoucí xxxxx.
4. Xxxxxx se Xxxxxxxxx xxxxxxx roztokem x xxxxx xx působit xx xxxx jedné xxxxxx.
5. Xxxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx barvivo, xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx do etanolu xx xxxx 30 xxxxxx.
7. Xxxxxxxx se xxx tekoucí vodou x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx se xxxxxxx 10 x.
9. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
(1) Xxxxx xx xxxx použít xxxxxxxx dostupné roztoky xxxx barvicí xxxxxxxx.
XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxxxx, 1987. Xxxxxx xx the xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx of xxx xxxx xxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxx sepedonicum xx xxxxxxx of xxxxxx tubers. Xxxxxxxxxx xx xxx European Xxxxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx. Xxxx XXX 11&xxxx;288 XX, 21 pp.
2. Xxxxxxxx, X. X., 1970. Xxxxxxxxx xxx preliminary xxxxx of xxxxxxxx xxxx plants. Rev. Xx. Xxxx., 49, 213-218.
3. Xxxxxxx, I. X., 1984. Xxx xxxxxxxxxx and xxxxxxxxx xx Corynebacterium sepedonicum xxxx xxxxxxxx potato xxxxxx. XXXX Xxxx. 14 (2), 147-152.
4. Xxxxxxx, X. X., 1981. Determinative xxxxxxx xx xxxxx microscopy. X: Manual of xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, American Xxxxxxx xxx Microbiology, Xxxxxxxxxx, 21-23.
5. Hugh, R. x Xxxxxxx, X., 1953. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx of xxxxxxxxxxxx xxxxxx oxidative xxxxxxxxxx xx carbohydrates xx xxxxxxx xxxx-xxxxxxxx bacteria. X. Xxxx., 66, 24-26.
6. Xxxxx, X. X., 1991. Xxxxx- xxx xxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx whole xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 14; 335-345.
7. Xxxxx, X. X. x X. Van Xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxx xx the EC xxxxxx for xxx xxxxxxxxx of xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxx. XXXX Bull., x. 17, 1987, xx. 1-10.
8. Jansing, X. x X. Xxxxxxx, 1998. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx of x xxxx-xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx of Xxxxx Xxxxxxxx and Xxxxxxxxxx, 105, 590-601.
9. Xxxxxx, X., 1956. Xxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx the xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx, Xxxx., 178, 703.
10. Klement X.; Xxxxxxx, X x X. C. Xxxxx, 1990. Methods xx Xxxxxxxxxxxxxxxxx. Akadémiai Xxxxx, Xxxxxxxx, 568 xx.
11. Lelliott, X. X., 1966. Xxx xxxxx xxxxxxxxxx coryneform xxxxxxxx. J. xxxx. Xxxx., 29, 114-118.
12. Xxxxxxxx, X. A., X. Xxxxxxx x X. X. Hayward, 1966. X xxxxxxxxxxxxx xxxxxx for the xxxxxxxxxxx xxxxx pathogenic xxxxxxxxxxxx X. appl. Xxxx., 29, 470-489.
13. Xxxxxxxx, R. A. x P. W., Xxxxxx, 1976. Xxx xxxxxxxxx xx latent xxxx rot (Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx onicum (Spiek. xx Kotth.) Skapt. xx Xxxxx.) xx xxxxxx xxxxxx. EPPO Xxxx., 6 (2), 101-106.
14. Xx, X. x X.X. xx Xxxx, 1995. Xxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxx Chain Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx XXX intergenic xxxxxx xxxxxx for xxxxxxxx xxxxxxxxx of Clavibacter xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx, 85, 837-842.
15. Xxxxx, X., Russell, X., W. a X., X. Xxxxx, 1997. Specific detection xx Xxxxxxxxxxx michiganensis xxxxx. xxxxxxxxxxx by xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxx xx subtraction xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx, 87, 8, 853-861.
16. Pastrik, X. -H. x X.X. Rainey. 1999. xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx polymerase xxxx xxxxxxxx-xxxxx techniques. X. Xxxxxxxxxxxxxx 147; 687-693.
17. Xxxxxxx, K.-H., 2000. Xxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx michiganensis xxxxx. xxxxxxxxxxx xx potato xxxxxx xx xxxxxxxxx XXX xxxx coamplification xx xxxx XXX. Xxxxxxxx Xxxxxxx xx Xxxxx Xxxxxxxxx, 106, 155-165.
18. Ramamurthi, X. X., 1959. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx some Xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx their xxxxxxxxxxxx xx xxx Xxxxxxxxxxxxxx. Xxx. Cornell xxxxx. Xxx. Sta., 366, 52 xx.
19. Xxxxxx, X., Xxxxxxxx-Xxxxxx, Y., Xxxxxxx, A. x Xxxxx, D. (1999) Xxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xx X1X-XXX xxx xx automated xxxx-xxxx xxxxxxxxxxxx detection xxxxxx. Xxxxx Xxxxxxx 83; 1095-1100.
20. Schaad, W. 2001. Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx [Xxxx.]. - 3. xx.; Xx. Xxxx, Xxxxxxxxx:, 373 xx.
21. Skerman, V. X. X., 1967. X guide xx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxx genera of xxxxxxxx. 2nd ed., Xxxxxxx xxx Xxxxxxx Xxxxxxx, Xxxxxxxxx.
22. Xxxxx, X. X.; Hemiesy, X; Xxxxx, XX., 2001. Xxxxxxxxxx sequence-derived XXX xxxxxxxxx xxxxx xxx XXX-X1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx primer xxx xxxxx identification xx xxxxx xxxxxxxx Clavibacler xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx Journal xxXxxxxXxxxxxxxx, 107 (7), 739-748.
23. Xxxxxx, X. H. X. and V. X. Xxxxxxx, 1974. X xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx: xxxxxx of Xxxxxxxxxxx working xxxxx. Xxxxxxx xxx Xxxxxxxxxxxx, 40, 481-527.
24. Stead, X.X. 1992. Grouping xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx Xxxxxxxxxxx xxx. xxxxx xxxxxxxx xxxxx-xxxx profiles. Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 42; 281-295.
25. Wullings, X. X.; van Beuningen, X. X.; Xxxxx, X. X. x X. D. X. Xxxxxxxxx, 1998. Xxxxxxxxx xx Ralslonia xxxxxxxxxxxx, xxxxx causes xxxxx xxx xx xxxxxx, xx fluorescent xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx 23x xXXX-xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx. Xxxxxxx. Microbiol. 64, 4546-4554.
X. XXXXXX XXXXXXXX, DETEKCE X XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx:
x) xxxxxxxx hnědé xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vadnutí xxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
xx) xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x jiných hostitelských xxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxx x xxxx,
xxx) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (X. xxxxxxxxxxxx)
XXXXXX XXXXXX
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x podrobnosti xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedeny x dodatcích. Seznam laboratoří, xxxxx xx podílely xx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx protokolů, xx x dodatku 1.
Xxxxxxx protokoly xxxxxxxx xxxxxxxx karanténního xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx životaschopných xxxxxx X. solanacearum jako xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx pracovat xx xxxxxxxx karanténních podmínek x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx povolením Xxxxxx.
Xxxxxxxxx parametry musí xxxxxxxxxx stálé a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx úrovní X. solanacearum xxxx xxxxxxxxx xxxxx vybraných xxxxx.
Xxxxx nezbytná je xxxxxx xxxxxxxx pozitivních xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx zahrnuje xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx zacházení x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi xxxxxx, xxxx. oddělení xxxxxxxxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx řízení xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx chybám, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx z xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx x §4 xxxx. 1, naznačuje xxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx provedených xx xxxxxx, xxx je xxxxxxxxxx x níže xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx diagramech. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx (test XX, XXX/XXXX, selektivní izolace) xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx jiném xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx x musí xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx i xxxxx xxxxxxxxxxxx test pozitivní, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx vzorek xxxx považován za xxxxxxxxxx X. solanacearum.
Potvrzená xxxxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 vyžaduje xxxxxxx x identifikaci xxxxx kultury X. xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1. Použití xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.1. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx x bakteriálního xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, rajčete x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx hniloby nebo xxxxxxxxxxxxx vadnutí
Postup testování xx xxxxx xxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx bakteriálního xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pletiva xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x x případě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
&xxxx;
|
Xxxxx (xxxxx) xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx, rajčete xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx hnilobu xxxx bakteriální vadnutí (1)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXX DIAGNOSTICKÉ TESTY (2)
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx slizu (3)
- poly-β-hydroxybutyrátový test (4)
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (5)
- xxxx XX(6)/XXXX(7)/XXXXX(8)/XXX(9)
|
&xxxx;
|
||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXX (10)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx s typickou morfologií (11)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XX (12)
|
|
R. solanacearum xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx infikován X. xxxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXX
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXXXXXXXXX XXXXX (13)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXX XXXXXXXXXX (14)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X. solanacearum
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
NE
|
|
Vzorek není xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; |
XXX
|
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | |
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; |
&xxxx; | &xxxx; |
Xxxxxx xx infikován X. xxxxxxxxxxxx
|
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | |||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
1) Xxxxx příznaků xx xxxxxxx v xxxxxx 2.1.
2) Xxxxxx xxxxxxxxxxxx testy xxxxxxxxx xxxxxxxxxx diagnózu, ale xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx patogenu.
3) Xxxx xx xxxxx xxxxx xx svazků xxxxxxx xxxxxx je xxxxxx x xxxxxx 6.1.1.
4) Xxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx-β-xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx 6.1.2.
5) Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx popsány x xxxxxx 6.1.3.
6) Test XX xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx extraktech pletiva xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxx x oddíle 6.1.5.
7) Xxxx XXXX xxxxxxxxxxxxx slizu suspendovaného xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je popsán x xxxxxx 6.1.7.
8) Xxxx XXXXX bakteriálního xxxxx suspendovaného ve xxxx xxxx extraktech xxxxxxx vykazujícího příznaky xx xxxxxx v xxxxxx 6.1.8.
9) Test XXX bakteriálního xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx pletiva xxxxxxxxxxxx příznaky xx xxxxxx x xxxxxx 6.1.6.
10) Xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x rostlinného xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metodou xxxxxxxxxxx roztěrů (xxxxxxxxx xxxxxxx) (xxx x xxxxxx 2.3.).
11) Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxx 2.3.x.
12) Kultivace může xxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx infekce typické, xxx izolační xxxx xx negativní, xxxx xx izolace xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx půdách.
13) Xxxxxxxxxx identifikace čistých xxxxxx X. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx popsaných x xxxx 6.2. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxx doporučuje xx xxx každý xxxx xxxxxx.
14) Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxx 6.3.
1.2. Xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx x identifikaci Xxxxxxxxx solanacearum xx xxxxxxxx hlíz xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx příznaky
Testování je xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx infekcí x xxxxxxx bramboru. Xxxxxxxxx xxxxxxxx alespoň xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx testů (xxx poznámka v xxxxxxxx 3), x xxxxx každý xx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx principu, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, potvrzením, xx xxxxx xxxxxxx xx X. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx pouze x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xx podezřelý. Screeningové xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxx umožnit xxxxxxxx práh 103 xx 104 xxxxx/xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx zahrnutý xxxx pozitivní kontroly x xxxxx xxxxx xxxxx.
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx (1)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxxx x koncentrace xxxxxxxx (2)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXXXXXXXX TESTY XXXXXXXX PLETIVA (3)
Xxxx XX (4)/ selektivní xxxxxxx (5) / xxxx PCR (6) / xxxx XXXX (7)
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: XXXXX (8)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxx screeningový xxxx (3)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
X. xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx X. solanacearum
|
|||
|
|
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Pozitivní
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Druhý screeningový xxxx (3)
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Negativní
|
|
R. xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxxxxx izolace (5) x/xxxx biotest (9)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx s typickou morfologií (10)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XX (11)
|
&xxxx;
|
X. xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXX
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXXXXXXXXX XXXXX (12)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXX XXXXXXXXXX (13)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxx testy xxxxxxxxx xxxxxx kulturu X. xxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XX
|
&xxxx;
|
Xxxxxx není xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; |
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; |
XXX
|
&xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | &xxxx; | |
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxx xx xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
1) Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx 200 xxxx, ačkoli postup xxx xxxxxx x xx xxxxx počet, xxxxxxxx 200 xxxx xxxx k xxxxxxxxx.
2) Xxxxxx extrakce x xxxxxxxxxxx patogenu xxxx xxxxxxx x xxxxxx 3.1.1.
3) Xxxxx xxxx xxxxxxx dva testy xxxxxxxx xx různých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx screeningový xxxx. Xx-xx test negativní, xx xxxxxx xxxxxxxxx xx negativní. V xxxxxxx, xx je xxxx xxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx prvního xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, je xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxxxx testy xxxxxx xxxxx.
4) Xxxx XX xx xxxxxx x oddíle 6.1.5.
5) Xxxx xxxxxxxxxx izolace xx xxxxxx x xxxxxx 6.1.4.
6) Xxxxx XXX jsou popsány x xxxxxx 6.1.6.
7) Xxxx XXXX xx xxxxxx x xxxxxx 6.1.7.
8) Xxxxx XXXXX xxxx popsány v xxxxxx 6.1.8.
9) Xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx 6.1.9.
10) Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx 2.3.x.
11) Kultivace xxxx xxxxxxx xxxxx selhat x xxxxxx konkurence xxxx inhibice xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx-xx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx získány xxxxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx stejné xxxxxx xxxx dodatečným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx test x dalšími xxxxxx.
12) Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistých xxxxxx podezřelých xx X. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx 6.2.
13) Xxxx patogenity xx xxxxxx x xxxxxx 6.3.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx detekci x xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxx části xxxxxx (1)
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2)
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXXXXXXXX XXXXX XXXXXXXX XXXXXXX (3)
Xxxxxxxxxx izolace (4) / xxxx IF (5) / xxxx XXX (6) / xxxx FISH (7)
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: ELISA (8), xxxxxxx (9)
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Kolonie x&xxxx;xxxxxxxx morfologií (10) xx xxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XX (11)
|
|
R. xxxxxxxxxxxx nezjištěn
Vzorek xxxx xxxxxxxxx R. xxxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXX
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXXXXXXXXX XXXXX (12)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXX XXXXXXXXXX (13)
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Oba xxxxx potvrzují xxxxxx xxxxxxx X. solanacearum
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
NE
|
|
Vzorek xxxx xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXX
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxx xx infikován X. xxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
1) Xxx xxxxx 3.2.1., kde xxxx uvedeny doporučené xxxxxxxxx vzorků.
2) Xxxxxx xxxxxxxx a koncentrace xxxxxxxx jsou xxxxxxx x oddíle 3.2.1.
3) Xxxxx xxxx alespoň xxx xxxxx xxxxxxxx xx různých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pozitivní, xxxx xxx provedena xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Je-li xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. V případě, xx xx xxxx xxxxxxxxx, vyžaduje xx xxx xxxxxxxx prvního xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx více xxxxxxxxxxxxxx testů xxxxxxxxxx xx různých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx-xx druhý xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4) Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx popsán x xxxxxx 6.1.4.
5) Xxxx XX je xxxxxx x oddíle 6.1.5.
6) Testy XXX xxxx xxxxxxx v xxxxxx 6.1.6.
7) Test XXXX xx xxxxxx x oddíle 6.1.7.
8) Xxxxx XXXXX xxxx xxxxxxx v oddíle 6.1.8.
9) Xxxxxxx je xxxxxx v xxxxxx 6.1.9.
10) Xxxxxxx morfologie xxxxxxx je xxxxxxx x xxxxxx 2.3.x.
11) Xxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx selhat z xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx-xx xx screeningových xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx izolační xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx.
12) Xxxxxxxxxx identifikace xxxxxxx kuItur, x xxxxxxx je xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x X. xxxxxxxxxxxx, xx dosáhne pomocí xxxxx popsaných v xxxxxx 6.2.
13) Test xxxxxxxxxx je popsán x xxxxxx 6.3.
2. Xxxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx
2.1. Příznaky
2.1.1. Xxxxxxxx u xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxx vysokých xxxxxxxxx xxxxx dne, xxxxxxx x xxxx dochází x xxxxxxxx. X xxxxxx fázích xxxxxxx xxxxxxxxx listy xxxxxx, xxx později žloutnou x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Dochází xxxx x ohýbání xxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx výhonku xxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx nevratným x končí xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx obvykle xxxxxx hnědý x xxxxxx bakteriální xxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx vody xx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx bramboru. Hlízy xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx napříč x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. X rané xxxx xx infekce xxxxx xxxxx láhvově xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, ze xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx sliz. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx stává xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X pokročilejších xxxxxx xx infekce xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx a x xxxx může xxxxxxx bakteriální xxxx, xx který xx xxxxxxxxx částice xxxx. Xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx červenohnědá, xxxxx propadlá místa xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx cévního xxxxxxx. X pokročilejších fázích xxxxxxx je obvyklý xxxxxxxxxx rozvoj xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx původu.
2.1.2. Xxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx příznakem xx xxxxxxx vzhled xxxxxxxxxxx xxxxx. Za xxxxxxxxxx podmínek pro xxxxxxxx (teplota xxxx xxxxx 25 °X, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xx jedné xxxxxx rostliny xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Za méně xxxxxxxxxx podmínek xxx xxxxxxxx (teplota xxxx xxxx než 21 °X) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx se xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx výhonů.. Xx xxxxx pozorovat vodou xxxxxxx pruhy od xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx dokladem xxxxxxxxx xxxxxxx systému. Xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx zbarvená xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx bakteriální xxxx.
2.1.3. Xxxxxxxx u xxxxxx hostitelů
Rostliny Xxxxxxx xxxxxxxxx a X. xxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx zřídkakdy xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxxxx xxxx nepřevyšují 25 °C xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. x xxxxxxxx X. xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rajčete). Xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Nevadnoucí xxxxxxxx X. dulcamara, xxxxx má xxxxxx x kořeny xx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx hnědé xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx příčném xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxx. X xxxx xxxxxxx svazků xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx mohou xxxxxx xxxxxx slizu, jestliže xx řez xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx, x xx x xxx absenci xxxxxxxx xxxxxxx.
2.2. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxx diagnóze, ale xxxxxx dostačující. Použije xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx:
2.2.1. Xxxx na výtok xxxxx ze xxxxxx
(Xxx 6.1.1.)
2.2.2. Test na xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx-x-xxxxxxxxxxxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx PHB x xxxxxxx R. xxxxxxxxxxxx xxxx zviditelněny xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx bakteriálního slizu x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx mikroskopickém xxxxxxx xxxxxxx modří A xxxx xxxxxxxxx černí (xxx xxxxx 6.1.2.).
2.2.3. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testy (Xxx xxxxx 6.1.3.) 2.2.4. Xxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx rychlými xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx XX (xxx oddíl 6.1.5.), test XXXX (xxx xxxxx 6.1.7.), xxxxx ELISA (xxx xxxxx 6.1.8.) xxxxxx XXX (xxx xxxxx 6.1.6.).
2.3. Xxxxxx při xxxxxxx
x) Xxxxxxx xx xxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx prstence hlízy xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx vláken xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx jiné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Suspenduje xx x malém xxxxxxxx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 xX fosfátového pufru (dodatek 4) x xxxxx xx 5-10 minut xxxx.
x) Připraví xx xxxx desetinásobných ředění xxxxxxxx.
x) Xxxxxxx xx 50-100 xx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx živnou půdu (XX, XXXX xxxx XXX; xxx dodatek 2) x/xxxx Xxxxxxxxx tetrazolové xxxxxx (dodatek 2) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. XXXX, xxx dodatek 2). Rozetře se xxxxxxx zřeďovacích xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx misky s xxxxxxxxxx buněčnou xxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx xxxxxx 2 k xxxxxxxxx xxxxxxxx.
x) xxxxxxxx se 2-6 xxx při xxxxxxx 28°C.
- Xx xxxxxxxxxxx xxxxx půdě xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx bílé, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx x fluidní xxxxxxx, xxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxx. Aviruletní xxxxx X. solanacearum xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx.
- X Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx SMSA jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxx zcela xxxxx xxxxxxx.
2.4 Identifikační xxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxx potvrzující xxxxxx X. xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx 6.2.
3. Detekce x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx xxxx bramboru
3.1. Xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx
3.1.1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx:
- Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx 200 hlíz xx jeden xxxx. Xxxxxxxxxxxxx vzorkování vyžaduje xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx x pro xxxxxx s méně xxx 200 hlízami, xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxx množství xxxx.
- Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx založená xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 200 xxxx.
- Extrakt xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx subsp. xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxx
x) Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 2-30 °X xx xxxx xx 2 xxxxx před xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx populací X. xxxxxxxxxxxx.
x) Hlízy xx xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxx desinfekční xxxxxxxxxx (x obsahem xxxxxx, xxxxxxxx má xxx xxxxxxxx XXX xxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX) a xxxx xxxxxxxxxx xxxx každým xxxxxxx. Hlízy xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Tento xxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxx xx ve xxxxxxxx příliš xxxxxx xxxx jestliže xx xxx xxxxxxxx test XXX nebo xxxxx xxxxxxx.
3.1.1.1. Xxxxxx xxxxxxx x dezinfikovaného xxxxxxxx xxxx xxxx na xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx xxxxx xxxxx hlízy, xxx xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vodivých xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Množství xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx na xxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx (xxxxxxx) hlízy x podezřelými xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxx stranou a xxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxx nejméně 2 xxx při xxxxxxxx teplotě, aby xxxxx dojít xx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxx xx xxxxxxxxxx x chladu (4-10 °X) za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podmínek. Xxxxxxx xxxxx včetně xxxx x xxxxxxxxxxx příznaky xx měly xxx xxxxxxxx podle xxxxxxx XXX.
3.1.1.2. Xxxxxxxx x xxxxxxx části xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx na jedno xxxxxxx, které jsou xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (x případě, xx xxxxxx xxxx znovu xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx vyčištěny x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxxxxxx výkrojky x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxxx xx x xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx; v xxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx teplotě (18 -25 °X) xxxxxxx 24 hodin.
Výkrojky x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx jedním z xxxxxxxxxxxxx postupů:
a) Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 40 xx) xxxxxxxxxxx xxxxx (dodatek 4) x xxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxx (50-100 xx./xxx) 4 xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxx 24 °X xxxx 16-24 xxxxx xxxxxxxx,
xxxx
x) homogenizují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 40 xx) xxxxxxxxxxx xxxxx (dodatek 4) xxx x xxxxxx (xxxx. Xxxxxx xxxx Xxxxx Thurax) xxxx xxxxxxx x utěsněném xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxx (např. xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx nebo Bioreba, 150xx x 250mm, xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxxxx xxxxxxxx tloučku xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxx).
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorků. Xx xxxxx zamezit xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx každý xxxxxx se použijí xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx) a xxxxxx. Xxx testu XXX xx nutno xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxxxx nebo x xxxxxx xxxxxxxxx. U xxxxx XXX xx xxxxxxxxxx použít drcení x sáčcích xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx.
3.1.1.3. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Je-li xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx 180 x xx xxxx 10 xxxxx při xxxxxxx 4-10 °C) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (40-100 µx), xxxxx xx omyje přídavkem (10 xx) xxxxxxxxxxx xxxxx.
3.1.1.4. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, 7&xxxx;000 x xx xxxx 15 xxxxx (xxxx 10 000 g xx dobu 10 xxxxx) při teplotě 4-10 °X x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
3.1.1.5. Peleta xx xxxxxxxxxxxx x 1,5 xx xxxxxxxxxx xxxxx (dodatek 4). Xxxxxxx xx 500 µx xxx X. solanacearum, 500 µx xxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx x 500 µx pro referenční xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx glycerol xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10 - 25% (v/v) x 500 µx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xx zbývající xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx vířením a xxxxx se xxx xxxxxxx -16 až -24 °X (týdny) xxxx -68 až -86 °C (xxxxxx). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx testování xxx xxxxxxx 4-10 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx nedoporučuje.
Je-li xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxx xx 24 xx 48 xxxxx.
3.1.1.6. Xx nezbytně nutné, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx X. solanacearum xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx pro xxxxxxx XX x xxxxxxx xxxxx.
3.1.2. Testování
Postupové xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx izolace (xxx xxxxx 6.1.4.)
XX xxxx (viz xxxxx 6.1.5.)
Xxxxx XXX (xxx xxxxx 6.1.6.)
Test XXXX (xxx oddíl 6.1.7.)
Xxxxx XXXXX (xxx xxxxx 6.1.8.)
Xxxxxxx (xxx oddíl 6.1.9.)
3.2. Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, rajčete xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
3.2.1. Příprava xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorky. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx 200 stonkových xxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxx, xxx by xxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxx reprezentativním xxxxxx xxxxxxxx rostlinné populace.
3.2.1.1. Xx uzavřené xxxxxxxx xxxxxx se xxxxx 1-2 xx dlouhé xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxx z předpěstírny: Xxxxxx dezinfikovaným nožem xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx hned nad xxxxxx země.
Rostliny z xxxx xxxx skleníku: Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx odebere xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, 1 xx xxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx nůžkami xx odebere 1 xx xxxxxx xxx x xxxx každého xxxxxx hned xxx xxxxxx země. U xxxxx xxxxxxxxxx (X. xxxxxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx rostoucích xx xxxx xx xxxxxxxx 1-2 cm xxxx xx stonku xxx xxxxx nebo xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x počtu xxxxxxx 10 xxxxxxx xx 1 xxxxxxxxxx xxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx nejspolehlivější x xxxxxx pozdního xxxx, xxxx x xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx infekci xx xxxxx zjistit xx xxxx xxx x víceleté Xxxxxxx xxxxxxxxx rostoucí xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx plevelné xxxxxxxx xxxxxxxx, Solanum xxxxxxxxx, X. nigrum, Xxxxxx xxxxxxxxxx a další xxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx rostliny rodu Xxxxxxxxxxx spp. x Xxxxxxxxx oleracea. Xxxxxxx xxxxxxxx plevelné xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx R. xxxxxxxxxxxx xxxxxx 2/Race 3 x xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxx xx specifických xxxxxxxx, zahrnují Xxxxxxxx xxxxxxx, Bidens pilosa, Xxxxxxxxx glomeratum,
Chenopodium xxxxx, Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, Xxxxxxx spp, Xxxxx xxx., Xxxxxx xxxx. X. xxxxxx., Xxxxxxxxx xxxxxxxx x Xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
X této xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vnitřních xxxxxxxx (xxxxxxxx cév xxxx bakteriální xxxx). Xxxxxxxx xxx stonku x příznaky xx xx stranou xxxxxxxx xx xxxxxxxx (xxx xxxxx 2.).
3.2.1.2. Části xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx 70% xxxxxxxx x ihned xxxxxx xxxxx papírem. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxx postupů:
a) zalijí xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 40 xx) xxxxxxxxxxx xxxxx (dodatek 4) x xxxxxx xx xxxxxxx třepačce (50-100 xx./xxx) 4 xxxxxx při teplotě xx 24 °X xxxx 16-24 xxxxx xxxxxxxx,
xxxx
x) se ihned xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. Stomacher xxxx Xxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (dodatek 4) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx zařízení (xxxx. Xxxxx). Xxxx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx v xxxxxx nejdéle xx 72 xxxxx nebo xxx xxxxxxxx xxxxxxx (18-25 °X) xx 24 xxxxx.
3.2.1.3. Po xxxxxxx, které xx xxxxx 15 xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2.1.4. Xxxxx pročišťování xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, xxx xxx xx xxxxxxx filtrací xxxxx odstřeďováním popsaným x oddíle 3.1.1.3. xx 3.1.1.5.
3.2.1.5. Xxxxx xxxx koncentrovaný xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxx. Jeden xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx 4-10 °X x xxxxx díl xx skladuje x 10-25% (v/v) xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx teplotě -16 xx -24 °X (xxxxx) nebo -68 xx -86 °X (xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3.2.2. Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx diagramy a xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx 6.1.4.)
Xxxx XX (xxx xxxxx 6.1.5.)
Xxxxx PCR (xxx xxxxx 6.1.6.)
Xxxx XXXX (viz xxxxx 6.1.7.)
Xxxxx XXXXX (xxx xxxxx 6.1.8.)
Xxxxxxx (xxx xxxxx 6.1.9.)
4. Detekce x xxxxxxxxxxxx původce xxxxx hniloby ve xxxx
4.1 Postupový xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx X. solanacearum xx xxxx
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxx xxxx (1)
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxxxxxx patogenu (2)
|
&xxxx;
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXXXXXXXX XXXX
Xxxxxxxxxx xxxxxxx (3)
Xxxxxxxxx xxxxxxx testy: bioesej (4) / xxxxxxxxx XXX (5) / xxxxxxxxx ELISA (6)
|
||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Kolonie x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx (7) xx xxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XX (8)
|
|
R. xxxxxxxxxxxx nezjištěn
Vzorek xxxx xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXX
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx xxxxx kultury
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
IDENTIFIKAČNÍ XXXXX (9)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXX XXXXXXXXXX (10)
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Oba xxxxx potvrzují R. xxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XX
|
&xxxx;
|
Xxxxxx není xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXX
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxx infikován X. solanacearum
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
(1) Xxx xxxxx 4.2.1., xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
(2) Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxx x xxxxxx 4.2.1. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx patogenu, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a doporučuje xx xxx tehdy, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
(3) Selektivní izolační xxxx xx xxxxxx x xxxxxx 6.1.4.
(4) Xxxxxxx xx popsán x xxxxxx 6.1.9.
(5) Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxx popsány x xxxxxx 6.1.4.2. x 6.1.6.
(6) Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu XXXXX xxxx xxxxxxx x xxxxxx 6.1.4.2. x 6.1.8.
(7) Typická morfologie xxxxxxx je xxxxxxx x xxxxxx 2.3.x.
(8) Xxxxxxxxx může xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx saprofytickými xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx sterilní xxxxx.
(9) Spolehlivá xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx kultur X. solarcacearum xx xxxxxxx pomocí xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx 6.2.
(10) Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx 6.3.
4.2. Xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx xx xxxx
Princip
Validované schéma xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x detekci xxxxxxxx xx vzorcích xxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x testování xxxxxx odpadní vody xx zpracování brambor x xxxxxxx vody. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx x závislosti na xxxxxxxxx. Citlivost xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx konkurenčních xxxxxxxxxxxxxx bakterií, kterých xx xxxxxx mnohem xxxx x odpadní xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxx v xxxxxxxxx vodě. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx detekci asi 103 xxxxx/xxxx povrchové xxxx, citlivost detekce x xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X tohoto xxxxxx se doporučuje xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx provedení xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx), xxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx saprofytických xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Omezení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx x úvahu xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx získání xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Vzhledem x xxxx, xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx úspěšně x xxxxxxxx výskytu xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx si xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xx zpracování xxxxxxx a x xxxxxxx vodě.
4.2.1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx:
- Xxxxxxxx R. xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx pozdního xxxx, xxxx a xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx 15 °X.
- Xxxxxxxxx vzorkování x xxxxx xxxx xxxxx výše xxxxxxxxx xxxxxx xx určených xxxxxxxxxxxx xxxxxxx zvýší xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx toku xxxx xxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx a tím x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
- Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx.
4.2.1.1. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx 30 xx xxx xxxxxxxx x 2 x xx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx ze zpracování xxxxxxx x xxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxxxx x místa xxxxxx odpadní vody. Xxxxxxxxxx velikost xxxxxx xx 500 xx. Xx-xx upřednostňována xxxxx xxxxxxxx, doporučuje xx xxxxxxx vzorky xxxxxxx 3xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, z xxxxx xxxxx bude xxxxxxxxx 2 opakované xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx nejméně 30 xx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx 3 vzorkovací xxxxx xx každé 3 xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xx rovněž xxxxxxx.
4.2.1.2. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx x chladu a xxxxx (4-10 °X) xxxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2.1.3. Xx-xx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx bakteriální frakce xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx:
x) Xxxxxxxxxx xx 30-50 xx xxxxx xxxxxx xxx 10&xxxx;000 x xx dobu. 10 xxxxx (nebo 7000 x xx dobu 15 minut), xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 4-10 °X, xxxxx xx kapalina nad xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x 1 xx xxxxx (dodatek 4).
x) Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx pórů 0,45 µx) s xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x 5-10 ml xxxxxxxxxx pufru x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Tato xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx objemy xxxx, xxxxx obsahují xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx nedoporučuje x xxxxxx vody xx zpracování xxxxxxx xxxx u vzorků xxxxxxx xxxx, protože xxxxxxx xxxxxxxx konkurenčních xxxxxxxxxxxxxx bakterií xxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxx solanacearum.
4.2.2. Xxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx testů x příslušných xxxxxxxxx.
5. Xxxxxxx x identifikace xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx
5.1. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx x xxxx
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxx xxxx (1)
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Extrakce xxxxxxxx
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXXXXXXXX XXXX
Xxxxxxxxxx izolace (2)
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: obohacení XXX (3) / xxxxxxx (4)
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Kolonie s typickou xxxxxxxxxx (5) xx xxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XX (6)
|
&xxxx;
|
X. xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx R. xxxxxxxxxxxx
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXX
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx čisté xxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXXXXXXXXXXX XXXXX (7)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XXXX XXXXXXXXXX (8)
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|||||
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxx testy potvrzují xxxxxx kulturu X. xxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
XX
|
&xxxx;
|
Xxxxxx není infikován X. solanacearum
|
|||
|
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ANO
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Vzorek infikován X. xxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
(1) Viz xxxxx 5.2.1., xxx xxxx uvedeny xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorkování
(2) Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx je xxxxxx x xxxxxx 6.1.4.
(3) Xxxxxxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx 6.1.4.2. x 6.1.6.
(4) Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxx 6.1.9.
(5) Typická xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx 2.3.x.
(6) Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x důvodů xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(7) Spolehlivá xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx X. solanacearum xx xxxxxxx pomocí xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx 6.2.
(8) Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx 6.3.
5.2. Xxxxxx pro xxxxxxx x identifikaci X. xxxxxxxxxxxx x xxxx
Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx patogenu ve xxxxxxxx xxxx, xxx xxxx být xxxxxx xxxxxxx k testování xxxxxx pevného odpadu xxx zpracování brambor xxxx kalu x xxxxxxx xxxx. Xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx metody xxxxxx dostatečně citlivé, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx nepravidelně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Ralstonia xxxxxxxxxxxx, které xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx substrátů.
Při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx získaných xxxxxxxxxxx výsledků x xxxx při sestavování xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x půdě xxxx xxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx citlivost xxxxxx testovacího xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx testem přítomnosti xxxxxxxx x xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx sledování, xxx xxxx xxxxxxxxxx, xxx x xxx xxxxxxx xxxx metody xxxxxx nízký xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2.1. Příprava xxxxxx
5.2.1.1. Xxxxxxxxxx polní xxxx by xx xxxx řídit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx používanými pro xxxxxxxxxx hlístů. Xx xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx 0,5 xx 1 xx půdy xx 60 míst xx xxxxx 0,3 xx x xxxxxxx 10-20 cm. Je-li xxxxxxxxx na výskyt xxxxxxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxxxx míst xx 120 x xxxxxx 0,3 ha. Xxxx testováním xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 12-15 °X. Xxx xx zpracování xxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 1 kg x míst reprezentujících xxxxxxx objem testovaného xxxx. Xxxx testováním xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
5.2.1.2. Dílčí xxxxxx 10-25 g xxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (250 ot./min) x 60-150 ml xxxxxxxxxxx pufru (dodatek 4) xx xxxx 2 xxxxx. Je-li xxxxx, xxxxxxx 0,02% sterilního Xxxxx-20 a 10-20 x xxxxxxxxxx kamínků xxxx napomoci xxxxxxxx.
5.2.2. Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx dodatku.
6. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx detekci x xxxxxxxxxxxx R. xxxxxxxxxxxx
6.1. Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx
6.1.1. Xxxx xx xxxxx xxxxx xx stonku
Přítomnost X. solanacearum xx xxxxxxxx vadnoucích xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxx hostitelských xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxx. Řez xxxxxx xx xxxxxx xx zkumavky x xxxxxx vodou. Sleduje xx, xxx xx xx několika xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx z přeříznutých xxxxxxx xxxxxx.
6.1.2. Xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx-β-xxxxxxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx ze 48 xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx půdě YPGA xxxx SPA (dodatek 2) xx xxxxxxxxxxxxx sklíčko.
2. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx 2 X. xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx roztěr x xxxxxx XXX xxxxxxxxxx sp.
3. Roztěry xx nechají uschnout x spodní xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxx nad xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx modří xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxx nilskou xxxxx:
x) Obě xxxxxxx xx xxxxxxxx 1 % xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx modři x xxxxxxx xx inkubovat 10 xxxxx xxx xxxxxxx 55 °C.
b) Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx z xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxx xx zakápne 8% xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx 1 xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
x) Krátce xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx z xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxx sklíčko.
f) Zkoumá xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx mikroskopem při 450 xx xxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx xx zvětšením 600x xx 1000x x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx.
x) Pozoruje xx, xxx se xxxxxx xx XXX xxxxxxxxx xxxxx oranžová xxxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x zda je xxxxxxxxxx buněk xxxxxxx xxx X. xxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx:
x) Xxxxxxxx xx všechna xxxxxxx 0,3% roztokem xxxxxxxx xxxxx B v 70% etanolu x xxxxxxxx se 10 xxxxx xxx pokojové xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx tekoucí vodou x xxxxxxxx a xxxxxx xx přebytečná xxxx xxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x vysají xx xxxxx xxxxxxx. Upozornění: Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x digestoři.
d) Sklíčka xx xxxxxxxx 0,5% (x/x) xxxxxx roztokem xxxxxxxxx x xxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě. Xxxxxxxxxx: xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx dodržet nezbytná xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx v digestoři.
e) Xxxxxxx xx opláchnou xxxxx tekoucí xxxxx x xxxxxxxx, odsaje xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx světlem xxx olejovou imersí x při zvětšení 1&xxxx;000x.
x) Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxx x buňkách X. xxxxxxxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
6.1.3. Sérologické aglutinační xxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx R. xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx nebo v xxxxxxxxxx z pletiv x příznaky xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (viz dodatek 3) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx značkovači, xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz dodatek 3) xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxxx xxxxxxx. Jinak xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:
x) Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 5 µx xxxxx látky) xx xxxxxx testovacího xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 X. solanacearum x xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxxx xx, xxx se x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx jemném xxxxxxx xx dobu 15 xxxxxx objeví xxxxxxxxxx.
6.1.4. Xxxxxxxxxx xxxxxxx
6.1.4.1. Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx
Xxxxxxxx:
Xxx xx použije tato xxxxxx xxxxxx, provede xx xxxxxxxxx xxxx x zajištění xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 103 až 104 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx vzorků, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxx. XXXX (xx xxxxx Elphinstone xx xx., 1996; xxx dodatek 2).
Xxxxxxxxx R. solanacearum xx xxxxxx bakterií xxxxxxxxx na živné xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Dále, xxxxxxx X. solanacearum xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx otestován xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx přípravených xxxxxxxx ze xxxxxx xxx xxxxxxxx, že xxxxxxxxx detekce xxxxx xxxxxxx xxxx velmi xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx teplotě xx -68 xx -86 °C.
Pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx 106 xxx/xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 2 X. xxxxxxxxxxxx (xxxx. XXXXX 4156 = XX 2762 = XXXX 3857). X xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx od xxxxxx x testování.
U xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx by měla xxx před jejím xxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorků nejdříve xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx kultivaci patogenu. Xxxxxxxxx materiál xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (xxxxxx).
1. Xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx populace xxxxxxxxxxxxxx bakterií byly xxxxxxxxx. Xxxxxx se 50-100 µl xxxxxxxx xxxxxx xx 1 xxxxx pro xxxxx xxxxxx.
2. Misky se xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 28 °C. Xx 48 hodinách xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 6 xxx. Typické xxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx xx xxxxx půdě XXXX xxxx mléčně xxxx, xxxxxx, nepravidelné a xxxxxxx a xx 3 dnech xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx červené xxxxxxxx ve xxxxxx x vnitřními xxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X. solanacearum. Xxxxx xxx malé, kruhové, xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx jen xxxxxxxx xxxxxxx, a xxxxx xxxxxxx rozeznatelné xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kolonie.
3. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx R. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx nebo xxxxxx metodou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx., xxx xx xxxxxxx izolované xxxxxxx (xxx dodatek 2).
4. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx krátkodobě xx xxxxxxxx xxxx (xX 6-8, xxx xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx -68 xx -86 °C xxxx xxxxxxxxxxxxx.
5. Provede xx identifikace xxxxxxxxxxx xxxxxx (viz xxxxx 6.2.) x xxxx xxxxxxxxxx (xxx oddíl 6.3).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx očkování na xxxxxxxxxx média xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx 6 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx nejsou nalezeny xxxxx podezřelé xxxxxxx xxxxxxx pro X. xxxxxxxxxxxx , xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx typické kolonie X. solanacearum.
Test očkování xx selektivní média xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx X. solanacearum.
6.1.4.2. Xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx médium xxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxx (xxx dodatek 2).
Xxxxx postup xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx R. xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx způsobem xxxxx x ke xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx PCR xxxxx (1:100). Obohacení X. xxxxxxxxxxxx však xxxx xxx neúspěšné x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xxxxxx xxxxx současně xxxx xxxxxxxxx. X tohoto xxxxxx xxxx být xxxxxxx X. solanacearum x xxxxxxxxx kultury xxxxxxx. Xxxxx xxxx, xxxxxxx může xxxxx x xxxxxxx populací xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxx test XXXXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx polyklonálních protilátek xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1. X obohacovacího xxxxx XXX xx xxxxxxx 100 ul extraktu xx vzorku do 10 xx obohaceného xxxxxx (dodatek 2), xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx sterilních xxxxxxxx xxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxxx testu XXXXX xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxx extraktu xx xxxxxx xx xxxxxx (xxxx. 100 xx x 1,0 xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx).
2. Inkubuje xx 72 xxxxx xxx xxxxxxx 27 xx 30 °C x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
3. Před zahájením xxxxx ELISA xxxx XXX xx xxxxx xxxxx promíchá.
4. X xxxxxxxxxx bujónem xx xxxxxxx týmž xxxxxxxx xxxx se xxxxxx xx výše xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx-xx xx inhibice xxxxxxxxx X. solanacearum x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, lze xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx jakýmkoli xxxxxxxxxxxxx xxxx jinými postupy xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
6.1.5. Test xX
Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx XX xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx spolehlivosti x dosažení xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxx XX xxxx xxxxxx x xxxxxxxx XX xxxxx xx pozitivní, xxxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx izolace, XXX nebo XXXX. Xxxxxxxx xx xxxx XX xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xx xxxxxxxxx, xx nutné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx úplná.
Poznámka:
Použije xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx pro xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx reakci xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 105 až 106 xxxxx/xx homologického xxxxx X. solanacearum x xxxxxxxx vhodného xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx isothiokyanatanu (XXXX) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx polyklonální xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xX nejméně 1:2&xxxx;000. Xxxxx xxxxxxxxx xx měly být xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxx by měl xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorků. Xxxxxxxx xx xx nutné, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx na vzorcích xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx - 68 až - 86 °X x glycerolu. Xxxxxxxx xxxx být xx xxxxxx odstraněn přidáním 1 xx xxxxx (dodatek 4), 15xxxxxxxxx odstřeďováním xxx 7000 g x resuspenzí ve xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Často to xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx j xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxx kmenem X. xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx extraktu, xxx xx xxxxxxx v dodatku 3 X, a xxxxxxxxx v pufru.
Pletivo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx lyofilizací nebo xxxxxxxxx xxx xxxxxxx - 16 xx 24 °C) xx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx kontroly xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx lze xxxxxx pro xxxxx xxxx, xxxx uvedeny x dodatku 3.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxx okénky, xxxxx xxxxx s 10 xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx 6 xx.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxx způsobem xxxx xxxx xxxxxx.
6.1.5.1. Xxxxxxxx se sklíčka x xxxxxxxxx xxxxxx x následujících xxxxxxx:
x) Xxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx škrobu:
Napipetuje se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (15 µx je xxxxxx pro xxxxxx xxxxxx 6 mm - x xxxxxxx xxxxxx je množství xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxxxxxxx bramborové xxxxxx x ředění 1/100 do prvního xxxxxx.
Xxxxxxxx xx napipetuje xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (1/1) do xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx vzorek, xxx xxxxxxx xxx. 1.
xx) Xxx jiné xxxxxx:
Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx (1/10, 1/100) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx odměřené standardní xxxxxxxx (15 µx xx vhodné xxx xxxxxx xxxxxx 6 xx - u xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxx větší v xxxxxxxxxx xxxxxx) resuspendované xxxxxx xxx každé xxxxxx xx xxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx být xxxxxxx xxxx rezervní xxxx xxx xxxxx vzorek, xxx xxxxxxx xxx. 2.
6.1.5.2. Xxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 40 xx 45 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx (15 xxxxx při teplotě 60 °X), plamenem, 95 % xxxxxxxx xxxx xxxxx konkrétních xxxxxxxxx od dodavatele xxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxx sklíčka xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx stavu v xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxxxxxxx 3 xxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.5.3. Xxxxxx xX
x) Podle xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx v xxxx. 5.1.x):
Xxxxxxxx se sada xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxx xxx 1/2 titru (X/2), xxxxxxx 1/4 xxxxx (X/4), 1/2 xxxxx (T/2), titr (X) x xxxxxxxxxxx xxxxx (2X).
xx) Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x odst. 5.1.xx):
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx (XX) protilátek x xxxxx XX. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxx. 6.1.5.1.i) x 6.1.5.3.x)
&xxxx;
|
&xxxx;
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
|
&xxxx;
|
||||
&xxxx;
|
&xxxx;
1/100
|
&xxxx;
1/1
|
&xxxx;
1/1
|
&xxxx;
1/1
|
&xxxx;
1/1
|
&xxxx;
□ Ředění resuspendované xxxxxx
|
&xxxx;
(X = xxxx)
|
&xxxx;
X/2
|
&xxxx;
X/4
|
&xxxx;
X/2
|
&xxxx;
X
|
&xxxx;
2X
|
&xxxx;
□ Xxxxxxxxxxx ředění antiséra/protilákty
|
Vzorek 1
|
&xxxx;
•1
|
&xxxx;
•2
|
&xxxx;
•3
|
&xxxx;
•4
|
&xxxx;
•5
|
&xxxx;
|
&xxxx; | &xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
Xxxxxxxx vzorku 1 xxxx vzorek 2
|
&xxxx;
•6
|
&xxxx;
•7
|
&xxxx;
•8
|
&xxxx;
•9
|
&xxxx;
•10
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
Xxxxxxx 2. Xxxxxxxx sklíčka xx xxxx xxxxx xxxx. 6.1.5.1.xx) a 6.1.5.3.xx)
&xxxx;
|
&xxxx;
Xxxxxxxx ředění xxxxxxxx/xxxxxxxxxx
|
&xxxx;
|
||||
&xxxx;
|
&xxxx;
1/1
|
&xxxx;
1/10
|
&xxxx;
1/100
|
&xxxx;
xxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxx
|
&xxxx;
□ Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxx 1
|
&xxxx;
•1
|
&xxxx;
•2
|
&xxxx;
•3
|
&xxxx;
•4
|
&xxxx;
•5
|
&xxxx;
|
&xxxx; | &xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
Xxxxxxxx xxxxxx 1 xxxx xxxxxx 2
|
&xxxx;
•6
|
&xxxx;
•7
|
&xxxx;
•8
|
&xxxx;
•9
|
&xxxx;
•10
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
&xxxx;
|
1. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx papír. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx kompletně xxxxxxx protilátek. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxx musí být xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx použitého extraktu.
Pokud xxxxxx x dispozici xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx:
2. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx vlhkém xxxxxx xxxxxxxx xx dobu 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx (18-25 °X).
3. Xxxxxxxx se xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx pečlivě xxxxxxxxx xxxxxx IF. Xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxx 5 xxxxx x xxxxx XX Xxxxx (dodatek 4) x xxxxxxxx v xxxxx IF. Je xxxxx xxxxxxxx vzniku xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vlhkost xxxxxx xxxxxxxx.
4. Sklíčka xx xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Testovací xxxxxx xx pokryjí xxxxxxx konjugátu XXXX, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx. Množství konjugátu xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xx xxxx 30 xxxxx xxx pokojové xxxxxxx (18-25 °X).
6. Setřesou xx kapky xxxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx (3.).
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Napipetuje xx 5-10 xx 0,1X xxxxxxxxxxx pufru x xxxxxxxxxx (dodatek 4) xxxx komerční xxxxx xxxxxxxx do každého xxxxxx x přiloží xx xxxxx xxxxxxx.
6.1.5.4. Xxxxxxxxxxx XX xxxxx
1. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx vhodnými xxx xxxxxxxx XXXX xxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxxxx 500x xx 1&xxxx;000x. Xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx kolmých průměrech x xxxxx xxxxxx. X xxxxxx x xxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx 40 xxxx mikroskopu.
Nejdřív xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxx. Xxxxx xxxx xxx jasně xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxx IF xxxxxxxx (odst. 6.1.5).
2. Xxxxxxxx xx jasně xxxxxxxxxxxxx buňky x xxxxxxxxxxxxxxxxx morfologií X. xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx být xxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx stejném ředění xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx fluorescencí nelze xxxx x xxxxx.
Xxx xxxxxxxxx x jakékoli xxxxxxxxxxx musí xxx xxxx xxxxxxxxx. Xx xx může xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buňky xxxx xxxxxxxxxxx pufru xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (mimo xxxxxx xxxxxxx) na povrchu xxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx podstatných pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx testu. X xxxxxxxx x xxxxxxx části xxxxxxxx x částí xxxxxx xx mohou vyskytnout xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx saprofytické bakterie x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx podobnou R. xxxxxxxxxxxx.
4. Xxxxx xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx buňky x xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx pracovním ředění xxxxxxxxxx xxxxx oddílu 6.1.5.3.
5. Xxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx XX:
x) Xxx xxxxxxxx jasně xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx typických xxxxx x 1 xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx typických xxxxx xx 1 xx resuspendované pelety (dodatek 5).
Xxxxxxxx IF xx xxxxxxxxx x xxxxxx, xxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 1 xx resuspendované xxxxxx xxxxxxx 5 x 103. Vzorek xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx infikovaný a xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
xx) Xxxxxxxx XX xxxxx je negativní xxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx než 5 x 103 xxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x vzorek se xxxxxxxx xx negativní. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
6.1.6. Testy XXX
Xxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx xxxx XXX xxxx xxxxxx screeningový xxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxx xxx povinně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, x xxxx xxxxxxx xxxx IF. Jestliže xx PCR xxxxxxx xxxx druhý xxxxxxxxxxxx xxxx x xx xxxxxxxxx, xx nutné xxxxxxx další xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx rozsahu xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx tehdy, xx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx touto metodou xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 103 xx 104 xxxxx X. xxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxx xx xxxxxx extraktů, xxxxx xxxx předtím xxxxxxxxx xxxx negativní. Xxxxxxxx xxxxxxxxx citlivosti x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx může xxxxxxxxx optimalizační pokusy.
Použijí xx schválená xxxxxxx x protokoly PCR (xxx dodatek 6). Pokud xxxxx, xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx bezpečnostní xxxxxxxx x zabránění xxxxxxxxxxx xxxxxx cílovou XXX. Xxxx PCR xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx biologii, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX.
X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx extrakce XXX x XXX) by xx xxxx vždy xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx x přenosu XXX.
XXX xxxx xx xxx zahrnovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx testován xx X. solanacearum x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x XXX ze xxxxxx,
- reakční směs XXX.
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx pelet, do xxxxxxx xxxx xxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxx xxx dodatek 3 X);
- xxxxxxxx 106 buněk xx 1 xx X. xxxxxxxxxxxx xx xxxx z virulentního xxxxxxx (např. XXXXX 4156 = PD 2762 = CFBP 3857; xxx dodatek 3 X);
- xxxxx xxxxx, xxx PCR použít xxxx XXX extrahovanou x xxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx.
Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorků, které xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxx by xxxx xxx pokud xxxxx xxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx použít xxx xxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx x dodatku 3.
6.1.6.1. Xxxxxx purifikace XXX
Xxxxxxxxx xx výše xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx dodatek 3). Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxx způsobem jako xxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx XXX z xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx k dispozici xxxxx metody odstraňující xxxxxxxxxx PCR a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x koncentrující cílovou XXX ve vzorku. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx použití xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxxxx x dodatku. 6.
x) Xxxxxx xxxxx Xxxxxxx (2000)
1. Xxxxxxxxxx xx 220 µl xxxxxxxxxx xxxxx (100 xX XxXX, 10 xX Xxxx-XXX (xX 8,0), 1 xX XXXX (xX 8,0)) xx 1,5 xx Xxxxxxxxxxxx mikrozkumavky.
2. Xxxxx xx 100 µx xxxxxxxx xx vzorku x mikrozkumavka se xxxxxx do termobloku xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx 95 °X na 10 xxx.
3. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx na 5 xxx. do xxxx.
4. Xxxxx se 80 µx zásobního xxxxxxx xxxxxxxx (50 xx xxxxxxxx/xx 1 ml 10 xX XxxxXXx, xX 8,0) a xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 °C xx xxxx 30 xxxxx.
5. Xxxxx xx 220 µx xxxxxxx Xxxx XXX® X (Invitrogen), xxxxx promíchá xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxx teplotě 65 °X po xxxx 30 minut.
6. Přidá xx 100 µx xxxxxxx Xxxx XXX® X (Invitrogen), důkladně xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7. Xxxxx xx 500 µx xxxxxxxxxxx a promíchá, xx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xx stane xxxxxxxxx.
8. Xxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx odstřeďuje xxx 15 000 x xx xxxx 20 xxx. xxx xxxxxxx 4 °X.
9. Xxxxx xxxx xx převede xx xxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
10. Přidá xx 1 xx 100 % xxxxxxx (- 20 °C), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx xx xxxx xx xxxx 10 xxx.
11. Odstřeďuje xx xxx 15&xxxx;000 x xx xxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 4 °X x odstraní xx xxxxxx z pelety.
12. Xxxxx xx 500 µx 80 % xxxxxxx (- 20 °X) x xxxxxxxx xx překlápěním xxxxxxxxxxxxx.
13. Xxxxxxxxxx se xxx 15&xxxx;000 x po xxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxx 4 °X, xxxxxxx xx xxxxxx a odstraní xxxxxx.
14. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx nebo x XXX xxxxxxx.
15. Peleta xx xxxxxxxxxxxx x 100 µx xxxxxxxx XX a xxxxx xx stát xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxx.
16. Skladuje xx xxx xxxxxxx - 20 °X xx xx použití xxx XXX.
17. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. 5 µx supernatantu obsahujícího XXX xx xxxxxxx xxx test XXX.
x) Xxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx DNA, např. Xxxxxx XXxxxx Xxxxx Xxx, by xx xxxxx xxxxxx, pokud xx xx prokázalo, xx xxxx xxx xxxxxxxxxx DNA x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 103 xx 104 xxxxxxxxxxx xxxxx na 1 xx xxxxxx xxxxxxxxx.
6.1.6.2. XXX
1. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x kontroly xxx XXX xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.1.6). Xxxxxxxx xx desetinásobné xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx XXX (1:10 ve xxxxxxxx xxxx).
2. Připraví se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx PCR x xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx protokolů (dodatek 6). Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxx multiplexní xxxxxxxx XXX, xxxxx xxxxxx zahrnuje xxxxxxx xxxxxxxx PCR.
3. Xx xxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx 5 µx extraktu XXX xx 25 µx XXX reakce xxxxx xxxxxxxxx PCR (xxx dodatek 6).
4. Přidají xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx pouze xxxxxxx xxxx PCR a xxxxx xx xxx xxxxx XX jako xxx ten, xxxxx xxx použit xx xxxxx XXX xxxxx xxxxxx.
5. XXX xxxxxxxxxxxxx xx umístí do xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx testování, a xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx PCR (dodatek 6).
6.1.6.3. Xxxxxxx xxxxxxxx XXX
1. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx elektroforézou x xxxxxxxxxx gelu. Nanese xx nejméně 12 µx xxxxx xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxx x 3 µx nanášecího pufru (dodatek 6) xx 2,0 % (x/x) xxxxxxxxxxx xxxx x Xxxx-xxxxxx-XXXX (XXX) xxxxx (dodatek 6) xxx 5-8 X/xx. Xxxxxxx se xxxxxx XXX xxxxxx, xxxx. (xxxxxx) 100 bp.
2. Xxxxxxxx xx xxxxxxx XXX xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx (0,5 xx/x) xx xxxx 30-60 xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx s xxxxx mutagenem.
3. X xxxxxxxxx x XX (xxxxxx xxxxxx délky xxxx. 302 xx) xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x očekávané xxxxxxxxx x výsledek xx xxxxxxxxxxxx.
4. X xxxxx xxxxxx nálezů/případů xx zkontroluje xxxxxxx xxxxxxxxx PCR xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx enzymové analýzy xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx teplotě x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx enzymem a xxxxxx (viz dodatek 6). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx restrikčních xxxxxxxxx xxx UV světlem xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x porovnává xx x neštěpenou x xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu XXX
Xxxx XXX xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx PCR xxxxxxxxxx pro X. xxxxxxxxxxxx očekávané xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxx XXX s xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx rostlinu: xxxxx xxxxxxx PCR xxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx vzorkem).
Test PCR xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx zjištěn xxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxx X. xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x (případně) xxxxx, xx xxxxxxxxxxx, xx není xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xxx xxxx získat xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxx xxxxx xxxxxxx XXX dodatek 6).
Xxxxxxxx:
Xxx xxx xxxxxxxxx xx inhibici XXX, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx ve xxxx, xxxxxxx ze vzorku xxxxxxxxx xxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. V xxxxxxxxxxxxx protokolech PCR x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXX nasvědčuje inhibici xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx žádný xx xxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx získán x xxxxxxx xxxx více xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
6.1.7. Xxxx XXXX
Xxxxxxx
Xxxx xx xxxx první xxxxxxxxxxxx test xxxxxxx XXXX test x xx xxxxxxxxx, xxxx xxx jako druhý xxxxxxx screeningový xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx XX xxxx. Xxxx xx FISH xxxx xxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx a xx pozitivní, xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx další testování xxxxx postupového xxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx X. xxxxxxxxxxxx (dodatek 7). Úvodní xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx mělo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx alespoň 103-104 buněk X xxxxxxxxxxxx na xx xxxxxxx do extraktů xx xxxxxx, které xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx výsledkem.
Následující xxxxxx by xxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx v glycerolu xxx xxxxxxx - 16 xx - 24 °X xxxx - 68 xx - 86 °C.
Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vzorku, xxxxx byl předtím xxxxxxxx xx R. xxxxxxxxxxxx s negativním xxxxxxxxx.
Xxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxxxx suspenze xxxxxxxxxx 105 xx 106 xxxxx xx 1 xx R. xxxxxxxxxxxx xxxxxx 2 (xxxx. kmen XXXXX 4156 = XX 2762 = CFBP 3857, xxx dodatek 3) x 0,01X xxxxxxxxxx xxxxx (XX) ze 3-5 xxxxx kultury. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorky homologického xxxxx xxxx jiného xxxxxxxxxxxx xxxxx R. xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx extraktu, xxx xx xxxxxxx v dodatku 3 X.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XXXX xxxxxxxxx kontrolu xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vzorku.
Standardizovaný xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx, xx xxxxxx x dodatku 3 xxxx X.
Xxxx kontrolního materiálu xx provede xxxxxxx xxxxxxxx jako u xxxxxx(x).
6.1.7.1. Xxxxxx bramborového xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vychází x Xxxxxxxxx et xx. (1998).
1 Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (xxx dodatek 7).
2. Xxxxxxxxxx xx 100 µx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxx mikrozkumavky x odstřeďuje se xx xxxx 7 xxxxx xx 7 000 x.
3. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x rozpustí xx peleta xx 200 µl fixačního xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx. 24 xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx se x xxxxxxxx 1 xxxxxx x chladícím xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxxx xx 7 xxxxx xxx 7&xxxx;000 x, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x 75 µ10,01X XX (xxx dodatek 7).
5. Xxxxx xx 16 µl xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxx 10 xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx 7.1, xxxxxxx xx xxxxxxx 2 xxxxx vzorky xx xxxxx xxxxxxx, x xx xxxxxxxx x xxxxxxx 1:100 x xxxxxxxx 10 µl (x 0,01 M XX). Zbývající roztok xxxxxx (49 µx) xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx - 20 °X xx xxxxxxx 1 xxxxxxxxxx xxxxxxxx 96 % xxxxxxx. X případě, xx xx xxxxx XXXX metodu xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx 0,01 PB (xxxxxxx xx protřepáním).
Obrázek 7.1 Xxxxxxxxxx na xxxxxxx XXXX
6. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx (nebo x xxxxxxx xxxxxxx xxx teplotě 37 °X) a fixují xx nad xxxxxxxx.
X xxxx xxxx je xxxxx postup přerušit x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx. Xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx a x suchu xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.1.7.2. Xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxxxxxx se xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 50 %, 80 % x 96 %, xxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Osuší xx xxxxxxxx x držáku xxxxxxx.
2. Připraví se xxxxx inkubační xxxxxx xxxxxxxxx dna xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx papírem xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (1x xxxxxx, dodatek 7). Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx v xxxxxxxxxxxx xxxx při teplotě 45 °C xx xxxx nejméně 10 xxxxx.
3. Xxxxxxx xx 10 µl xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (dodatek 7) xx 8 xxxxxx (xxxxxx 1, 2, 4, 5, 6, 7, 9 x 10; xxx xxx. 7.1) xx každém xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx (3 a 8) xx xxxxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx (24 x 24 xx) xx první x xxxxxxxx 4 xxxxxx, x xx xxx, xxx pod ně xxxxxxx xxxxxx. Sklíčka xx umístí do xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 5 xxxxx x xxxxxx při xxxxxxx 45 °X x xxxxx.
5. Připraví xx 3 kádinky xxxxxxxxxx 1 x xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xxxxx X), 1 x 1x hybmix (334 ml 3x xxxxxx x 666 xx vody s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx) x 1 l 1/8x xxxxxxx (42 xx 3x xxxxxx a 958 xx vody x molekulární xxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxx 45 °X.
6. Xxxxxx se xxxxx sklíčka a xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxx xx držáku xxxxxxx.
7. Spláchne xx xxxxxxxx xxxxxx inkubací xx xxxx 15 xxxxx x xxxxxxx x 1 x xxxxxxxx při xxxxxxx 45°X.
8. Xxxxx sklíček xx přemístí xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx 1/8 xxxxxx a nechá xx inkubovat dalších 15 xxxxx.
9. Sklíčka xx xxxxxx xxxxxx xx XXX (xxxx. Xxxxx Q xxxxx) x položí na xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx nadbytečná vlhkost xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Napipetuje xx 5-10 µl xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxxxxxxx, Xxxxx Xxxxxxxxxxxx, XX, XXX nebo xxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xx zakryje xxxxxx xxxxxx sklíčkem (24 x 60 xx).
6.1.7.3. Hodnocení XXXX xxxxx
1. Sklíčka se xxxxx prohlížejí xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx mikroskopii xx xxxxxxxxx 630 x xxxx 1 000 x xxx xxxxxxxx imerzí. X filtrem xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) ve xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Použitím xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx-5-xxxxxxxxxxxxx se xxxxx R. xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xx3 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx buněčná morfologie x morfologií pozitivních xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxx jasně xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx FISH (xxxx. 6.1.7) musí xxx xxxxxxxxx, pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx úhlech x xxxxx xxxxxx. X xxxxxx, xxx xxxxxx pozorovány xxxxx xxxx xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx 40 xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx se jasně xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx charakteristickou pro X. solanacearum x xxxxxxxx testovacích xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxx než x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx, které xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx fluorescenci, xx xxxxxxx v xxxxx.
3. Xxx podezření xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxx v xxxxxxx, xxx všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxx sklíčka) xx xxxxx sklíčka.
4. Xxxxxxxxxxxx testu XXXX x sebou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxx, že x xxxxxx z bramborových xxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx fluorescenčních xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx velikostí x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx R. xxxxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx x xxxxx XX.
5. X úvahu xx xxxxx pouze xxxxxxxxxxxxx buňky x xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx.
6. Interpretace výsledků xxxxx XXXX
x) Xxxxxxxx XXXX xxxxx jsou xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxx FITC xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx R. xxxxxxxxxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx červeně xxxxxxxxxxxxx xxxxx pozorovány ve xxxxx pozitivních xxxxxxxxxx x nejsou xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxx jasně xxxxxxxxxxxxx xxxxx x typickou xxxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v 1 xxxxxxxxxxxxx poli a xxxxxxxx xxxxx typických xxxxx x 1 xx resuspendované pelety (dodatek 4).
Xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxxx 5 x 103 typických xxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Nutné je xxxxx testování. Xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx 5 x 103 xxxxxxxxx xxxxx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx za negativní.
ii) Xxxxxxxx XXXX testu xx xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx rhodaminového xxxxxx nejsou pozorovány xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx X. xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx tyto xxxxxxx xxxxx červeně xxxxxxxxxxxxx buňky xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx filtru xxxxxxxxxx x pozitivních xxxxxxxxxx.
6.1.8. Xxxxx ELISA Xxxxxxx
Xxxxx XXXXX xxx xxxxxx pouze xxxx xxxxxxxxx xxxx kromě xxxxx IF, XXX xxxx FISH xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx XXX ELISA je xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx povinné. Xxxxxxxxx xxxxxx před xxxxxxxx testu XXXXX xxxx zvýšit xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xx xxxxxx setkat x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx jiných organismů xx vzorku.
Poznámka:
Použije xx xxxxxxxxxx xxxxx protilátek X. xxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxx titru xxx každou novou xxxxx protilátek. Titr xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx suspense xxxxxxxxxx 105 až 106 xxxxx xx 1 xx homologického kmene X. solanacearum a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx použity protilátky x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xx xxxx protilátek xxx suspenzi 105 xx 106 buněk xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx, který byl xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx X. solanacearum xxxxxxxxx x xxxxxxxx bakterií xxx vzájemného působeni x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (PBS) xx použijí xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx 103 xx 104 xxxxx xx 1 ml xxxxxxx 2 R. xxxxxxxxxxxx (např. xxxx XXXXX 4X56 = XX 2762 = XXXX 3857, xxx dodatek 2 X x X). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx každé xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx suspenze 105 xx 106 xxxxx xx 1 xx x XXX R. xxxxxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx odděleny od xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx x dodatku 3 xxxx X.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx jako xxxx xxxxxx(x).
Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx XXXXX.
x) Nepřímý xxxx XXXXX (Xxxxxxxx Xxxxx et xx., 1995)
1) Použije se 100-200 µx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxxxxx xx 100 °X na 4 minuty xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nespecifických xxxxxxxx).
2) Xxxxx se xxxxxx xxxxxxxx dvojnásobně xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (dodatek 4) x xxxx xx xxxxxxxx.
3) Xxxxxx xx 100 µx do xxxxx xxxxx mikrotitrační destičky (xxxx. Xxxx-Xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx) a xxxxx xx inkubovat 1 xxxxxx xxx teplotě 37 °C xxxx 14 - 18 x xxx teplotě 4 °C.
4) Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx. Jamky se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx XXX-Xxxxx (dodatek 4) x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx 5 xxxxx.
5) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx protilátek xxxxx X. xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx pufru (dodatek 4). X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx protilátek xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx je xxxx).
6) Xxxxx xx 100 µx xx každé xxxxx a xxxxx xx xxxxxxxxx 1 xxxxxx xxx xxxxxxx 37 °X.
7) Roztok xxxxxxxxxx se vylije x jamek a xxxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxx 4.).
8) Připraví se xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx fosfatázy v xxxxxxxxx pufru. Xxxxx xx 100 µx xx xxxxx jamky x xxxxx xx xxxxxxxxx 1 xxxxxx xxx xxxxxxx 37 °X.
9) Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx x xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxx 4).
10) Xxxxx xx 100 µx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (dodatek 4) do xxxxx xxxxx. Nechá xx inkubovat x xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x odečítá xx xxxxxxxxxx xxx 405 nm x xxxxxxxxxxxx 90xxxxxxxxxx intervalech.
b) XXX-XXXXX
1) Xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v uhličitanovém xxxxx pH 9.6 (dodatek 4). Xxxxx xx 200 µx xx xxxxx xxxxx. Xxxxx xx inkubovat xxx xxxxxxx 37 °X 4 xx 5 xxxxx xxxx 4 ° X po xxxx 16 hodin.
2) Xxxxx se třikrát xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX-Xxxxx (dodatek 4). Xxxxx xx 190 µl xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxx pozitivní a xxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xx dvou xxxxx xx každé xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx 16 hodin při xxxxxxx 4 °X.
3) Xxxxx se xxxxxxx xxxxx vypláchnou xxxxxxxx XXX-Xxxxx (dodatek 4).
4) Připraví xx xxxxxx ředění xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx protilátek X. solanacearum x XXX (dodatek 4) x xxxxxxx 0,5 % xxxxxxxx sérového xxxxxxxx (XXX), xxxxx se 190 µx do xxxxx xxxxx x xxxxx xxxx 2 xxxxxx xxx xxxxxxx 37 °C.
5) Jamky xx xxxxxxx dobře xxxxxxxxxx xxxxxxxx PBS-Tween (dodatek 4).
6) Připraví xx xxxxxx protimyšího xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x XXX. Přidá xx 190 µl xx každé jamky x xxxxx se xxxxxxxxx 2 hodiny xxx xxxxxxx 37 °X.
7) Xxxxx xx xxxxxxx dobře xxxxxxxxxx xxxxxxxx PBS-Tween (dodatek 4).
8) Xxxxxxxx xx roztok 1 xx p-NPP/ml xxxxxxxxx fosfatázy x xxxxxxxxxxxx xxxxx (dodatek 4). Xxxxx xx 200 µx do každé xxxxx x xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx při 405 xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 90 xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx ELISA
Test XXXXX xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (XX) z xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx menší xxx dvojnásobek OH x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx všechny xxxxxxx OH xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 1,0 (xx 90 xxxxxxxx xxxxxxxx xx substrátem) x xxxx xxxxx xxx dvojnásobek XX xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx XXXXX xx xxxxxxxxx, jestliže xxxxxxxx xxxxxxx OH x jamek xx xxxxxxx vzorkem xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx XX v negativním xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx hodnoty XX xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorcích xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorcích.
Negativní xxxxxxx XXXXX x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorcích xxxxxxx, xx xxxx nebyl xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx byl inhibován. Xxxxxxxxx hodnoty XXXXX x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xxxxx x vzájemné xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.9. Biotest
Poznámka.:
Předběžné xxxxxxxxx xxxxx metodou xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 103 xx 104 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx R. xxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxx předtím xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxx x dodatku 3).
Nejvyšší citlivost xxxxxxxx lze očekávat xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x v xxxxxxxxxxx růstových podmínkách. Xxxxxx xxx však xxxx úspěšně xxxxxx xx xxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx x teplotě - 68 až - 86 °C.
Následující xxxxxxxx vychází x Xxxxxxx (1988):
6.1.9.1. Xxxxxxx xx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxxx citlivé xxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x rovnocennou xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx) xx fázi třech xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx vzorku. Podrobnosti xxxxxxxxx viz x dodatku 8. Xxxx se xxxxxxx xxxxx (např. xxxxxxxx Xxxxx Beauty xxxx kultivary x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx xx xxxx 2. xx 3. xxxxx až xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx u xxxxx xxxx méně xxxxxxx x vyvíjejí se xxxxxxxx. Xxxxx možno, xxxxxxxxxxxx proto použít xxxxxxxx xxxxxx.
6.1.9.2. Xxxxxxx xx 100 µl xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx rostliny.
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx stonky xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (xx méně xxx 23X). Xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxxx zářezem
Rostlina xx xxxxxxx xxxx xxxxx prsty a xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx 5-10 µl xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx příčný řez xxx 1 xx xxxxxx x hluboký xxxxxxxxx 2/3 tloušťky xxxxxx, xxxxxxx xxx xx začne x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xx utěsní xxxxxxxx vazelínou x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.1.9.3. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 5 xxxxxxx vodní xxxxxxxx 105 až 106 xxxxx na 1 xx, připravenou xx 48 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 2 R. xxxxxxxxxxxx xxxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxx (dodatek 4) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx vzájemné xxxxxxxxxxx.
6.1.9.4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx růst x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 4 týdny při xxxxxxx 25 - 30 °X x xxxxxx xxxxxxxxx vlhkosti x xxxxxxxxxx zavlažováním, xxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, tak xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx vody. Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx rostliny ve xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxx jinak xxxxxx xxxxxxxxx. Musejí-li xxx rostliny x xxxxxxx vzorků xx xxxx xxxxxxxx drženy xxxxxx xxxx, xxxxxx xx vhodnými xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx, zalévání, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx hmyzích xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
6.1.9.5. Z infikovaných xxxxxxx xx provede xxxxxxx (odst. 2.3) x identifikují xx xxxxxxxxx čisté kultury (xxx 6.2.).
6.1.9.6. Jestliže xxxxx 3 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx IF/PCR/izolace na xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx stonků xxxxxxxx 1 xx x xxxxx testovací xxxxxxxx, xxxxxxxxxx nad xxxxxx xxxxxxxxx. Xx-xx test xxxxxxxxx, provedou se xxxxxxxxx xxxxxxx (bod 4.1).
6.1.9.7. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx X. xxxxxxxxxxxx (xxx 6.2.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx biotestu
Platné xxxxxxxx biotestu xxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx rostliny xxxxxxxx typické příznaky, xxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx rostliny xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx negativní, jestliže xxxxxxxx xxxxxx infikovány xxxxxxxxxx R. solanacearum, xxxxx byl xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rostlin.
Biotest xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx rostliny xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx.
6.2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx podezřelého organismu X. solanacearum použitím xxxxxxx xxxx následujících xxxxx založených xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxx známé xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx provedený test (xxx dodatek 3).
6.2.1. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx naopak chybí x X. solanacearum, xxxxxxxx Lelliott x Xxxxx (1987), Klement xx xx. (1990), Xxxxxx (2001).
Xxxx Očekávaný xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pigmentu -
Xxxxxxx PHB +
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx test O+/F-
Katalázová xxxxxxxx +
Oxidázový test xxxxx Xxxxxxx +
Redukce xxxxxxxxx +
Xxxxxxx citrátů +
Xxxx xxx 40 °X -
Růst x 1% NaCl +
Xxxx x 2% XxXx -
Xxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx aktivita -
Ztekucení xxxxxxxx -
Xxxxxxxxx škrobu -
Xxxxxxxxx xxxxxxxx -
Xxxxxxxx xxxxxx -
Xxxxx x xxxxxx xxx Xxxxxxx&xxx;Xxxxx (1987).
6.2.2. Xxxx IF
6.2.2.1. Xxxxxxxx se suspenze xxxxxxxxx 106 xxxxx xx 1 xx x pufru XX (dodatek 4).
6.2.2.2. Připraví xx xxxx dvojnásobných zředění xxxxxxxx antiséra.
6.2.2.3. Použije xx XX xxxxxx (6.1.5.).
6.2.2.4. Xxxx XX xx pozitivní, xxxxxxxx xxxx IF xxxxxxx xxxxxxxx titru pozitivní xxxxxxxx.
6.2.3. Xxxx XXXXX
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx xxxxx 2 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx jiný sérologický xxxx.
6.2.3.1. Xxxxxxxx se xxxxxxxx přibližně 108 xxxxx na 1 xx v 1X XXX (dodatek 4).
6.2.3.2. Xxxxxxx xx test XXXXX xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx k R. xxxxxxxxxxxx.
6.2.3.3. Test XXXXX xx pozitivní, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x porovnání x xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.4. Xxxxx XXX
6.2.4.1. Připraví xx xxxxxxxx přibližně 106 xxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx (XXX = xxxxx xxxx xxxxx).
6.2.4.2. Ohřeje xx 100 µx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx zkumavkách v xxxxxxxxx bloku xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxx 100 °C 4 xxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx - 16 až - 24 °X xx xxxxxxx použití.
6.2.4.3. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro X. xxxxxxxxxxxx (xxxx. Xxxx xx al. (1993); Xxxxxxx x Xxxxx (2000); Xxxxxxx xx al. (2002); Xxxxxxxx et al. (1999); Xxxxx et xx. (1997), Xxxxxx xx xx. (1999).
6.2.4.4. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx PCR xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x mají xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx délky xxxxxxxxx xxxx pozitivní xxxxxxxxx xxxx.
6.2.5. Xxxx XXXX
6.2.5.1. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx 106 xxxxx xx 1 xx x XX.
6.2.5.2. Použije xx metoda FISH (6.1.7) x xxxxxxx 2 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx X. xxxxxxxxxxxx (dodatek 7).
6.2.5.3. Xxxx XXXX xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
6.2.6. Xxxxxxx xxxxxxxx kyselin (XXX)
6.2.6.1. Pěstuje xx xxxxxxx xx tryptikázo-sójovém xxxxx (Xxxxx) 48 xxxxx xxx xxxxxxx 28 xX.
6.2.6.2. Použijte xx xxxxxx XXX (Xxxxx, 1991; Stead, 1992).
6.2.6.3. Test XXX xx pozitivní, xxxxxxxx xx xxxxxx podezřelé xxxxxxx xxxxxx jako xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx: 14:0 3XX, 16:0 2XX, 16:1 2XX x 18:1 2XX a xxxxxxx 16:0 3XX xxxxxxxxx xx Xxxxxxxxx sp.
6.2.7. Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxx xxxxx nový xxxxxx xxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx metod.
U xxxxxxx provedeného testu xx xxxxxxx případně xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxx dodatek 3).
6.2.7.1. Stanovení xxxxxxx
X. xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxx tří xxxxxxxxxxx x tří xxxxxxxxxx xxxxxxxx (Hayward, 1964 x Xxxxxxx et xx., 1990). Xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x dodatku 2. Test xxx úspěšně xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx X. solanacearum x xxxxxxxx při xxxxxxx 28 °X. Xx-xx xxxxx půda xxxxxxxxx xx sterilní xxxxxxxx x 96 xxxxxxx (200 µl xx 1 xxxxx), xxxxxxxx xx xxxx xxxxx 72 xxxxx xx olivově xxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx |
|||||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
Xxxxxxx: |
|||||
Xxxxxxx |
- |
+ |
+ |
- |
+ |
Xxxxxxx |
- |
+ |
+ |
- |
+ |
X(+) Xxxxxxxxxx |
- |
+ |
+ |
- |
+ |
Xxxxxxxx |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
Xxxxxxxx |
- |
- |
+ |
+ |
- |
Xxxxxxxx |
- |
- |
+ |
+ |
- |
Xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx dílčích xxxxxxxx biovaru 2
Xxxxxx 2X |
Xxxxxx 2X |
Xxxxxx 2T |
|
(světové xxxxxxxx) |
(Xxxxx x Xxxxxxxx) |
(xxxxxxxx xxxxxxx) |
|
Xxxxxxx xxxxxxxxx |
- |
+ |
+ |
Xxxxxxx meso-inositu |
+ |
- |
+ |
Využití X xxxxxx |
- |
- |
+ |
Xxxxxxxxxxxx aktivita (1) nízká xxxxx xxxxxx |
(1) Viz Xxxxxxxx x Xxxxx (1987).
6.2.7.2. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx technikami, mezi xxx patří:
1. Xxxxxxx xxxxxxxxx polymorfismu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXXX (Xxxx xx al., 1989).
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxx primerů XXX, BOX x XXXX (Xxxxx et xx., 1995; Smith xx al., 1995).
3. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXXX (Xxx xxx Xxxx xx xx., 1998).
6.2.7.3. Xxxxxx XXX
Xxxxxxxxxx primery XXX (Xxxxxxx xx xx, 2002; viz dodatek 6) lze xxxxxx x diferenciaci xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 1 (xxxxxxx 3, 4 x 5) x skupiny 2 (xxxxxxx 1, 2X x 2X) R. xxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx definováno xxxxxxxx XXXX (Xxxx xx xx., 1989) a xxxxxxxxxxxx 16X xXXX (Xxxxxxx et al., 1996).
6.3. Konfirmační test (xxxx xxxxxxxxxx)
Xxxx závěrečné xxxxxxxxx diagnózy X. xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx jako X. xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
1) Xxxxxxxx xx inokulum x xxxxxxx přibližně 106 xxxxx na 1 xx xx 24 xx 48 xxxxxxxxxx kultur x xxxxxxxxx x příslušný xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx (xxxx. XXXXX 4156 = XX 2762 = XXXX 3857; xxx dodatek 3).
2) Xxxxxxxxx se 5 xx 10 xxxxxxxxxx sazenic xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxxxx xxxxx (xxx odst. 6.1.9).
3) Sazenice xx xxxxxxx xxxxxxxxx až 2 týdny xxx xxxxxxx 25-28 °C x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx zaléváním, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxx by xxxxxxx xxxxxxx mělo xxxxxx xxxxx 14 xxx. Xxxxxxxx-xx xx xx této xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxx považována jako xxxxxxxxx forma R. xxxxxxxxxxxx.
4) Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxx, chlorózy xxxx xxxxxx.
5) Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stonku xxx 2 xx xxx místem xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx rozmělní x suspenduje x xxxxx xxxxxxxx sterilní xxxxxxxxxxx vody xxxx 50 xX xxxxxxxxxxx xxxxx (dodatek 4). Xxxxxxx xx xxxxxxxx se xxxxxxx zřeďovacím xxxxxxxx xxxxx možno xx xxxxxxxxxx živné xxxx (dodatek 2). Xx xxxxxxxx 48 xx 72 xxxxx při xxxxxxx 28 °X xx xxxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxxx xxx X. xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx 1
Laboratoře xxxxxxxxxx xx xx optimalizaci x validaci protokolů
Laboratoř (1) |
Xxxxx |
Xxxx |
Xxxxxxx für Xxxxxxxxxx xxx Xxxäxxxxxxxxxxxxxxxx |
Xxxxx x Xxxxx |
Xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxxxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxx |
Xxxx |
Xxxxxx |
Xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxx |
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx National xx xx Protection Végétaux, Xxxxx de Xxxxxxxxxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxx de xx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxx, Station xx Xxxxxxxxxxx de xx Pomme xx Xxxxx |
Xx Xxxx |
Xxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx Bundesanstalt |
Kleinmachnow |
Německo |
Pflanzenschutzamt Xxxxxxxx |
Xxxxxxxx |
Xxxxxxx |
Xxxxx Laboratory |
Dublin |
Irsko |
Dipartimento xx Xxxxxxx x Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxxxx Xxxxxx Unita Xxxxxxxxxx xxx i Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxxxxxxxx Algemene Xxxxxxxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx Dienst |
Wageningen |
Nizozemsko |
Direcção-General xx Xxxxxxçãx das Culturas |
Lisabon |
Portugalsko |
Centro xx Diagnóstico xx Xxxxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx |
Xxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx |
Xxxxxxx |
Xxxxxxx |
(1) Xxxxxxxx: xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main |
Dodatek 2
x) Živné xxxx xxx izolaci x xxxxxxxxx
Xxxxx xxxx (XX)
Xxxxx xxxx (Xxxxx) 23,0 x
Xxxxxxxxxxx xxxx 1,00 x
Xxxxxxxx xx xxxxxx x sterilují xxxxxx xxx xxxxxxx 121 °X po xxxx 15 minut.
Kvasnično-pepton-glukózový xxxx (XXXX)
Xxxxxxxxxx xxxxxxx (Xxxxx) 5,0 g
Bacto-Pepton (Xxxxx) 5,0 g
D(+) Xxxxxxx (xxxxxxxxxx) 10,0 x
Xxxxx-Xxxx (Xxxxx) 15,0 g
Destilovaná xxxx 1,00 x
Xxxxxxxx xx složky x xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 121 °X xx dobu 15 xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (XXX)
Xxxxxxxxx 20,0 x
Xxxxx-Xxxxxxx (Xxxxx) 5,0 g
K2HPO4 0,5 x
XxXX4. 7X2X 0,25 x
Xxxxx-Xxxx (Xxxxx) 15,0 x
Xxxxxxxxxxx voda 1,00 x
xX 7,2-7,4
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx x autoklávu xxx xxxxxxx 121 °X xx xxxx 15 xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx
xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxx) 1,0 x
Xxxxx-Xxxxxx (Difco) 10,0 x
Xxxxxxxx 5,0 g
Bacto-Agar (Xxxxx) 15,0 g
Destilovaná xxxx 1,00 x
Xxxxxxxx xx složky x xxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxx teplotě 121 °X po xxxx 15 xxxxx.
Xxxxxxx xx xx 50 °C x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztok 2,3,5-xxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx), až xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 50 xx xx xxxx.
x) Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx půdy
Živná xxxx XXXX (Xxxxxxxxxxx 1994 ve znění Xxxxxxxxxxx xx xx., 1996)
Xxxxxxxx živná xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx (Difco) 1,0 x
Xxxxx-Xxxxxx (Difco) 10,0 x
Xxxxxxxx 5,0 xx
Xxxxx-Xxxx (Xxxxx) (viz pozn. 2) 15,0 x
Xxxxxxxxxxx xxxx 1,00 l
Rozpustí xx xxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx teplotě 121 °X xx dobu 15 minut.
Ochladí se xx 50 °C x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx koncentrace:
Krystalová violeť (Xxxxx) 5 xx/x
Xxxxxxxxx-X-xxXxxx (Xxxxx P1004) 600 000 X (xxxxxxxxx 100 xx)/x
Xxxxxxxxxx (Signa B-0125) 1&xxxx;250 X (xxxxxxxxx 25 xx)/x
Xxxxxxxxxxxxxx (Signa X-3175) 5 mg/l
Penicilín-G (Xxxxx X-3032) 825 X (přibližně 0,5 xx)/x
2,3,5-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (Xxxxx) 50 xx/x
Xxxxxxxx:
1. Použití xxxxxx než výše xxxxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxx růst X. xxxxxxxxxxxx.
2. Xxxxx Bacto-Agar (Xxxxx) xxxx xxx xxxxxx Xxxxx Xxxx #1. V takovém xxxxxxx bude růst X. xxxxxxxxxxxx pomalejší, xxx xxxx xx xxxx xxxxxx růst xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x 1-2 dny xxxx a červené xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxx při použití Xxxxx-Xxxxx.
3. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxx xx 2&xxxx;500 X/x xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx bakterií xxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx x skladují xxx xxxxxxx 4 °X v xxxxx x musí se xxxxxxxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx x xxxxxx xx xxxx xxx před xxxxxxxx xxxxxxx povrchové kondenzace. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx nově xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xx měla xxx podrobena xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx půdy xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 3) x xxxxxxxxxxx, xxx se xx 2 až 5 xxxxx xxx xxxxxxx 28 °X xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx
Xxxxx xxxx XXXX (Elphinstone xx xx., 1996)
Xxxxxxx xx xxxxxxxx jako xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX, xxx xxxxxxx se Xxxxx-Xxxx x 2,3,5- xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx xxxx Xxxxxxxx (Caruso xx xx., 2002)
Xxxxxxxxx 10 x
Xxxxxxxxxx pepton 5 x
X2XXX4 0,5 x
XxXX4 0,25 x
XxXX3 0,25 x
Xxxxxxxxxxx xxxx 1,00 x
Xxxxxxxxx se xxxxxx xxx xxxxxxx 121 °X po dobu 15 minut x xxxxxxx xx xx 50 °X. Xxxxx xx antibiotický xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxx XXXX.
Xxxxxxx 3
X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx
x) Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx standardní xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx' x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx 1) xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (tabulka 2). Xxxxxxx kmeny xxxx xxxxxxxx dostupné x xxx xx xxxxxx x těchto xxxxxx:
1. Národní sbírka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx rostlin (XXXXX), Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx York, XX.
2. Xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (PD), Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (XXXX), ústav xxxxxxxxxxxxxxxxx XXXX, Xxxxxx, Xxxxxxx.
Xxxxxxx 1: Referenční xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx XXX R. xxxxxxxxxxxx
Xxx XXXXX
|
XXX #
|
Jiné xxxx
|
Xxxx xxxxxx
|
Xxxxxx
|
XXXXX 4153
|
6
|
CFBP 4582, Xx 3020, XXXX11
|
Xxxxx
|
2
|
XXXXX 4154
|
10
|
XXXX 4585, 550, XXXX21
|
Xxxxxxx
|
|
XXXXX 3857
|
12
|
XXXX 4587, Pr 1140, XXXX26
|
Xxxxxx
|
2
|
XXXXX 1584
|
23
|
CFBP 4598 XXXX49
|
Xxxx
|
2
|
XXXXX 2505
|
24
|
XXXX 4599, XXXX50
|
Xxxxxxx
|
2
|
XXXXX 4155
|
26
|
XXXX 4601, 502, XXXX55
|
Xxxxxx
|
2
|
XXXXX 4156 (*)
|
71 (*)
|
PD 2762, XXXX 3857
|
Xxxxxxxxxx
|
2
|
XXXXX 4157
|
66
|
XXXX 15.59
|
Xxxxxxx
|
2
|
XXXXX 4158
|
39
|
CFBP 4608, Xxxx 448, EURS80
|
Portugalsko
|
2
|
NCPPB 4160
|
69
|
XXXX-1632-2
|
Xxxxxxxxx
|
2
|
XXXXX 4161
|
76
|
X3X
|
Xxxxxxx
|
2
|
XXXXX 325
|
41
|
XXXX 2047, XXX60-1, X842
|
XXX
|
1
|
XXXXX 3967
|
42
|
XXXX 4610, X285, XXXx7
|
Xxxxxxxxx
|
1
|
XXXXX 4028
|
43
|
XXXX 4611, X303/571, C1P310, SEQ205
|
Kolumbie
|
2
|
NCPPB 3985
|
44
|
XXXX 4612, X578, XXX312
|
Xxxx
|
2X
|
XXXXX 3989
|
45
|
XXXX 4613, X568, CIP226
|
Brazílie
|
2T
|
NCPPB 3996
|
46
|
CFBP 3928, R276/355, XXX72, XXX225
|
Xxxx
|
3
|
XXXXX 3997
|
47
|
XXXX 4614, X280/363, XXX49, XXX0131
|
Xxxxxxxxx
|
3
|
XXXXX 4029
|
48
|
XXXX 4615, X297/349, XXX121, XXXx2861
|
Xxx Xxxxx
|
4
|
XXXXX 4005
|
49
|
XXXX 4616, X470
|
Xxxxxxxx
|
4
|
XXXXX 4011
|
50
|
XXXX 4617, X288, XXxxx2
|
Xxxx
|
5
|
(*) Xxxx standardní xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx X. solanacearum xxxxxx 2 (rod 3).
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx xxxx uvedených xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pouze v xxxxxxx, xx xxxxxxxxx x původních xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx 2: Referenční xxxxx XXX sérologicky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxx XXXXX
|
XXX #
|
Xxxx xxxx
|
Xxxxxxxxxxxx
|
XXXXX 4162
|
51
|
XXXX 1954
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx (1)
|
XXXXX 4163
|
52
|
XXXX 1538
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx. xxxxxxxxxx (1)
|
XXXXX 4164
|
-
|
XXXX 2227
|
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (2)
|
XXXXX 4165
|
-
|
CFBP 2459
|
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx (2)
|
XXXXX 4166
|
58
|
XXXX 3567, XXX Xx1150
|
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx (1)
|
NCPPB 4167
|
60
|
XXXX 4618, XX 2778
|
Xxxxxxxxx xx. (1)
|
XXXXX 1127
|
53
|
CFBP 3575
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1)
|
NCPPB 353
|
54
|
XXXX 3572
|
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (1)
|
XXXXX 945
|
55
|
CFBP 3569
|
Burkholderia xxxxxxx (1)
|
XXXXX 3708
|
56
|
XXXX 3574
|
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (1)
|
XXXXX 3590
|
57
|
XXXX 3573
|
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (1)
|
XXXXX 3726
|
59
|
XXXX 3568
|
Xxxxxx Xxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx (1)(2)(3)
|
XXXXX 4168
|
61
|
XXXX 4619, XXX S339
|
Enterobacter xx. (1)
|
XXXXX 4169
|
62
|
1X01695
|
Xxxxxxxxxxxx xx. (1)
|
NCPPB 4170
|
63
|
XXXX 4621, XXX X306
|
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (1)(2)
|
XXXXX 4171
|
64
|
XXXX 4622, XXX 1693
|
Curlobaclerium xx. (1)(2)
|
XXXXX 4172
|
65
|
XXX 1696x
|
Xxxxxxxxxxx xx. (1)
|
XXXXX 4173
|
-
|
XX 2318
|
Xxxxxxxxxxxxxx xx. (2)
|
XXXXX 4174
|
81
|
XXXX 1844.06
|
Xxxxxxxxxxxxxx xx. (1)(2)
|
(1) Potencionální xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x sérologických testech (XX x/xxxx XXXXX) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
|
|||
(2) Xxxx, ze xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx amplifikovat xxxxxxx XXX xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx velikost při xxxxxxx specifických primerů XXx-1 a Y-2 (xxx xxxxxxx 6).
|
|||
(3) Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx reakce xx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxx u xxxxxx x Indonésii.
|
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx extraktu xx 200 xxxxxxxx hlíz xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx ze 200 xxxxxxxx xxxx bramboru xxxxxxxxxx 103 až 104 x 104 xx 106 xxxxx xxxxxxx 2 X. xxxxxxxxxxxx (xxxx NCPPB 4156 = XX 2762 = XXXX 3857) jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a XXX xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, nejsou xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 X. xxxxxxxxxxxx (xxxx XXXXX 4156 = XX 2762 = XXXX 3857) x 106 buňkami xx 1 xx x xxxxxxxxx kontrole sérologických xxxxx.
X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX/XX x XXXX
Xxxxxxxxx se 48xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxxx xxxx 3/biovaru 2 (xxxx. kmen XXXXX 4156 = PD 2762 = XXXX 3857) xx XXXX xxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xx x 10 xX fosfátovém xxxxx, xxx xx xxxxxxx buněčná xxxxxxx xxxxxxxxx 2 x 108 buněk xxxxxxxxx xxxxxxx xx 1 xx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx jemně xxxxxxxxx suspenzí xxxxxxxxx xx optické xxxxxxx 0,15 xxx 600 xx.
Xxxxxxx xx dřeň x pupkových konců 200 xxxx x xxxxxxxx odrůdy x xxxxx xxxxxxx, o xxxxx xx xx, xx xx xxxxxx X. solanacearum.
Zpracují xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx se xxxxxx x 10 xx. Xxxxxxxx se 10 xxxxxxxxxx mikrozkumavek x xxxxxx 1,5 xx x 900 µl xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Přenese xx 100 µx xxxxxxxx X. xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x protřepe xx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Čtyři xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se použijí xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Mikrozkumavky musí xxx řádně xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x 100 N1 xx sterilních zkumavkách x xxxxxx 1,5 xx, čímž xx xxxxx 9 kopií xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx -16 xx - 24 °X xx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxxxxx X. solanacearum x xxxxxxxxxxx vzorcích xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx testem XX.
Xxx XXX test se xxxxxxx xxxxxxxx DNA x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorků xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx XX x XXXX xxxxx xx xxxxxxx test xxxxxxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx kontrolních vzorků xxx každou sérii xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx kvantitativních xxxxxxxxx XX, XXXX x PCR musí xxx X. xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x 106 a 104 buněk/ml xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx 4
XXXXXX: Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx dobu xx xxxxxxx xxxx.
1. Xxxxx xxx xxxxxxxx
1.1 Xxxxxxxxx pufr (50 xX fosfátový xxxx, xX 7,0)
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx homogenizací xxxx protřepáním.
Na2HPO4 (xxxxxxx) 4,26 g
KH2PO4 2,72 x
Xxxxxxxxxxx voda 1,00 x
Xxxxxxxx xx složky, xxxxxxxxxxx xX a xxxxxxxxxxx v autoklávu xxx 121 °C xx dobu 15 xxx.
Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxx |
Xxxxxxxx (xx xxxx) |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (*) |
0,5 x |
XX xxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxx činidlo (*) |
1,0 xx |
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxx činidlo |
1,0 x |
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx-40&xxxx;000 (XXX -40) |
Xxxxxx xxxxxxxxxx XXX |
50 x |
(*) xxx xxxxxxx při extrakci xxxxxxxxxxxx |
1.2. Peletový xxxx (10 xX xxxxxxxxx xxxx, pH 7,2)
Xxxxx xxxx xx používá xxx resuspenzi a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx hlíz xxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx.
Xx2XXX4.12X2X 2,7 x
XxX2XX4. 2X2X 0,4 g
Destilovaná xxxx 1,00 x
Xxxxxxxx xx složky, xxxxxxxxxxx xX a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx při 121 °C xx xxxx 15 xxx.
2. Xxxxx pro XX xxxx
Xxxx xxx XX (10 xX xxxxxxxxx xxxx ve xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (PBS), xX 7,2)
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx2XXX4.12X2X 2,7 x
XxX2XX4. 2X2X 0,4 x
XxXx 8,0 x
Xxxxxxxxxxx xxxx 1,00 l
Rozpustí xx xxxxxx, zkontroluje pH x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx 121 °X po dobu 15 min.
IF-pufr-Tween
Tento pufr xx xxxxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx 0,1 % Xxxxx 20 k xxxxx pro XX.
Xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx, xX 7,6
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx jako xxxxx xxxxxx xx xxxxxx sklíček xx XX testy x xxxxxxx fluorescence.
Na2HPO4.12H2O 3,2 x
XxX2XX4. 2H2O 0,15 x
Xxxxxxxx 50 xx
Xxxxxxxxxxx xxxx 100 xx
Xxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxx, např. Vectashield® (Xxxxxx Laboratories) xxxx Xxxxxxxxx® (Leica).
3. Xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ELISA
3.1. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xX 9,6.
Xx2XX3 6,36 x
XxX CO3 11,72 x
Xxxxxxxxxxx xxxx 1,00 x
Xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xX x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při xxxxxxx 121 °X xx dobu 15 xxxxx.
Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx podíl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx antioxidant xxxxxx xxxxxxxxx sodný (0,2 %).
3.2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx sodného pufrovaný xxxxxxxx (10 x XXX), xX 7,4
NaCI 80,0 x
XX2XX4 2,0 x
Xx2XXX4. 12X2X 29,0 x
XXX 2,0 g
Destilovaná xxxx 1,00 x
3.3. XXX-Xxxxx
10xXXX 100 xx
10 %Xxxxx 20 5 xx
Xxxxxxxxxxx xxxx 895 xx
3.4. Xxxxxxxx xxxx (xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx).
10 x XXX 10,0 xx
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx-44000 (XXX-44) 2,0 x
10 % Xxxxx 20 0,5 xx
Xxxxxx xxxxx 0,5 x
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx 100 ml
3.5. Xxxxxx pro substrát xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xX 9,8
Xxxxxxxxxxxxx 97 xx
Xxxxxxxxxxx xxxx 800 xx
Xxxxxxxx xx x koncentrovanou XXx xx xxxxxx xX xx 9,8.
Xxxxxx xx xx 1 x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx 0,2 x XxXX2.
Xxxxxxxx xx xxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxx) x 15 ml xxxxxxx.
4. Pufry xxx xxxxx testu DASI XXXXX
4.1. Potahovací xxxx, xX 9,6.
Xx2XX3 1,59 g
NaH XX3 2,93 x
Xxxxxxxxxxx xxxx 1&xxxx;000 xx
Xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxxxx xX 9,6.
4.2. 10 x xxxxxxxxxxxx pufr (XXX) pH 7,2 - 7,4
XxXx 80,0 x
Xx2XXX4 .12H2O 27 x
XxX2XX4 . 2X2X 4 g
Destilovaná xxxx 1&xxxx;000 ml
4.3. PBS-Tween
10xPBS 50 xx
10 %Xxxxx 20 5 ml
Destilovaná xxxx 950 xx
4.4 Xxxxxxxxxxx xxxx, xX 9,8
Xxxxxxxxxxxxx 100 xx
Xxxxxxxxxxx xxxx 900 ml
Smíchá xx x nastaví xx xxxxxxx pH 9,8 koncentrovanou XXx.
Xxxxxxx 5
1. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx pozorovacím xxxx (x).
2. Xxxxxxxx xx xxxxx typických xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx sklíčka (X).
X = x x X/x,
xxx X = xxxxxx jednoho xxxx xx xxxxxxx x xxxx okénky x
x - plocha xxxx xxxxxxxxx.
x = πx2/4X2X2,
xxx x = xxxxxxxxxx xxxx (x xxxxxxx 8 - 24 xxxxx xxxx xxxxxxx),
X = xxxxxxxx koeficient (1 nebo 1,25),
G = xxxxxxxx objektivu (100 x, 40 x xxx.).
3. Xxxxxxxx xx xxxxx charakteristických xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 1 ml resuspendované xxxxxx (N).
N =X x 1&xxxx;000/x x X,
xxx y = xxxxx xxxxxxxxxxxxxx pelety x xxxxxx xxxxxx x
X = xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx pelety.
Dodatek 6
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx XXX
Xxxxxxxx:
Xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 103 xx 104 xxxxx X. xxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxx extraktu. Xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů bakterií (xxx xxxxxxx 3).
1. Xxxxxxxx XXX Seal xx xx. (1993)
1.1. Xxxxxxxxxxxxxxxxx primery
Přímý xxxxxx XXX-1 : 5'-GGG XXX AGC XXX XXX XXX XXX-3'
Xxxxxxxx xxxxxx Y-2: 5'-XXX XXX GCT GCC XXX XXX AGG XXX-3'
Xxxxxxxxx velikost amplikonu xxxxxxxxxx DNA X. xxxxxxxxxxxx = 288 xx
1.2. Xxxxxxx xxxx XXX
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxx x xxxxxx |
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx |
Xxxxxxxx XXX |
17,65 x |
|
10x xxxx XXX (1) (15 xX MgCl2) |
2,5 μx |
1x (1,5mM XxXx2) |
Xxxx xXXX (20xX) |
0,25 μl |
0,2 xX |
Xxxxxx XXX-1 (20 μX) |
1,25 μx |
1μX |
Xxxxxx Y-2 (20 μM) |
1,25 μx |
1μX |
Xxx xxxxxxxxxx (5U/μl) (1) |
0,1 μx |
0,5 X |
Xxxxxxxx xxxxxx |
2,0 μx |
|
Xxxxxxx xxxxxxxx |
25 μl |
|
(1) Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxx polymerázy Xxxxxx Xxxxx (AmpliTaq) x Gibco XXX. |
1.3. Xxxxxxx podmínky PCR
Provede xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx:
1 cyklus: x) 2 xxxxxx při 96 °C (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXX)
35 xxxxx: xx) 20 xxxxxx xxx 94 °X (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXX)
xxx) 20 xxxxxx při 68 °X (xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx XXX)
xx) 30 sekund xxx 72 °X (xxxxxxx kopie)
1 xxxxxx: x) 10 xxxxx xxx 72 °X (xxxxxxxxx xxxxxxx)
xx) xxxxxxx xx při teplotě 4 °X.
Xxxxxxxx:
Xxxxx program xxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx termocykleru Xxxxxx Xxxxx 9600. Použití xxxxxx přístrojů xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx), xxx) x iv).
1.4. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx XXX vzniklé xxxxxxxxxxx z R. xxxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx délky xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x enzymem Xxx XX po xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 °X.
2. Xxxxxxxx XXX Pastrika x Xxxxxx (2000)
2.1. Xxxxxxxxxxxxxxxxx primery
Přímý xxxxxx Xx-1: 5'-agt cga xxx gca xxx xxx x -3'
Xxxxxxxx xxxxxx Ps-2: 5'-xxx xxx xxx xxx xxx xxx xxx xx -3'
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXX X. solanacearum XXX = 553 xx.
2.2. Xxxxxxx směs XXX
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxx x xxxxxx |
Xxxxxxx koncentrace |
Sterilní XXX |
16,025 μl |
|
10x pufr XXX (1) |
2,5 μl |
1x (1,5 mM XxXx2) |
XXX (xxxxxx V) (10 %) |
0,25 μx |
0,1 % |
Xxxx xXXX (20xX) |
0,125 μx |
0,1 xX |
Xxxxxx Xx-1 (10 μX) |
0,5 μx |
0,2 μX |
Xxxxxx Xx-2 (10 μM) |
0,5 μx |
0,2 μM |
Taq xxxxxxxxxx (5X/μx) (1) |
0,1 μx |
0,5 X |
Xxxxxxxx xxxxxx |
5,0 μx |
|
Xxxxxxx xxxxxxxx |
25,0 μx |
|
(1) Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxxxx Perkin Xxxxx (XxxxxXxx) a Xxxxx XXX. |
2.3 Xxxxxxx xxxxxxxx PCR
Provede xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx:
1 xxxxxx x) 5 xxxxx xxx 95 °X (denaturace xxxxxxxxxx XXX)
35 xxxxx: xx) 30 xxxxxx xxx 95 °C (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXX)
xxx) 30 xxxxxx xxx 68 °X (hybridizace primerů x xxxxxxxxxxx DNA)
iv) 45 sekund xxx 72 °C (syntéza xxxxx)
1 cyklus: v) 5 xxxxx při 72 °X (xxxxxxx xxxxxxx)
xx) xxxxxxx xx xxx teplotě 4 °X.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxxxxxx byl xxxxxxxxxxxxx xxx použití xxxxxxxxxxxx MJ Xxxxxxxx XXX 200. Použití xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx vyžadovat xxxxxx xxxxxxxxxxxx kroků cyklu xx), iii) a xx).
2.4. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxx x X. xxxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx restrikčních xxxxxxxxx x xxxxxxx Taq X xx inkubační xxxx 30 xxxxx xxx teplotě 65 °X. Restrikční xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx X. xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx 457 bp x 96 xx.
3. Protokol xxx multiplexní XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxx xx xx., 2002)
3.1. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx XX-1-X: 5'-XXX XXX XXX XXX XXX XXX XXX XX-3'
Xxxxxxxx primer XX-1-X: 5'-XXX XXX XXX GGC AGA XXX T-3'
Přímý xxxxxx XX-5-X: 5'-XXX TTA XXX GAA TTG XXX XXX X-3'
Xxxxxxxx xxxxxxXX-6-X: 5'-XXX TCA XXX XXX XXX XXX XXX XXX-3'
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx templátové XXX X. xxxxxxxxxxxx = 718 xx (xxxx xxxxxxx RS). Xxxxxxxxx xxxxxxxx amplikonu xxxxxxx xxxxxxxx PCR 18X xXXX = 310 xx (xxxx xxxxxxx XX).
3.2. Reakční xxxx PCR
Reagencie |
Množství x xxxxxx |
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx |
Xxxxxxxx XXX |
12,625 μx |
|
10x pufr XXX (1) (15 xX XxXx2) |
2,5 μx |
1x (1,5 xX MgCl2) |
BSA (xxxxxx X) (10 %) |
0,25 μx |
0,1 % |
Xxxx dNTP (20xX) |
0,125 μl |
0,1 xX |
Xxxxxx XX-1-X (10 μX) |
2,0 μx |
0,8 μX |
Xxxxxx XX-1-X (10 μX) |
2,0 μl |
0,8 μX |
Xxxxxx XX-X-X (10 μX)(2) |
0,15 μx |
0,06 μM |
Primer XX-6-X (10 μX)(2) |
0,15 μx |
0,06 μM |
Taq xxxxxxxxxx (5X/μx)(1) |
0,2 μl |
1,0 X |
Xxxxxxxx xxxxxx |
5,0 μx |
|
Xxxxxxx množství |
25,0 μx |
|
(1) Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxxxx Xxxxxx Elmer (XxxxxXxx) x Xxxxx XXX. |
3.3. Xxxxxxx xxxxxxxx XXX
Xxxxxxx xx následující cyklický xxxxxx:
1 cyklus: x) 5 xxxxx xxx 95 °C (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXX)
35 xxxxx: xx) 30 xxxxxx xxx 95 °C (xxxxxxxxxx templátové XXX)
xxx) 30 xxxxxx xxx 58 °X (hybridizace xxxxxxx s xxxxxxxxxxx XXX)
xx) 45 xxxxxx xxx 72 °C (xxxxxxx xxxxx)
1 cyklus: x) 5 xxxxx xxx 72 °C (xxxxxxx syntéza)
vi) nechá xx při xxxxxxx 4 °C.
Poznámka:
Tento xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx termocykleru XX Xxxxxxxx XXX 200. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx), xxx) x xx).
3.4. Restrikční xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx PCR xxxxxxx amplifikací z XXX X. solanacearum xxxxxxxxx zřetelný polymorfismus xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x enzymem Xxx 1 xxxx Xxxxxxxxxxxxx (xxxx. Xxx 1269 X) po xxxxxxxxx xxxx 30 xxxxx xxx teplotě 65 °X.
4. Xxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxx xxxxxx X. xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxx xx xx, 2001)
4.1. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx Rs-1-F: 5'-ACT XXX XXX XXX XXX XXX XXX XX-3'
Xxxxxxxx primer Rs-1-R: 5'-XXX XXX CAC XXX XXX XXX X-3'
Xxxxxxxx xxxxxx Xx-3-X: 5'-XXX XXX XXX XXX TCG CTC-3'
Očekávaná xxxxxxxx amplikonu templátové XXX X. solanacearum:
s Xx-1-X/Xx-1-X = 718 xx
x Xx-1-X/Xx-3-X = 716 xx
4.2. Reakční xxxx PCR
a) Xxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxx xxxxxx 1/2
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxx v xxxxxx |
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx |
Xxxxxxxx UPW |
12,925 μx |
|
10x pufr PCR(1) |
2,5 μx |
1x (1,5 mM XxXx2) |
XXX (frakce V) (10 %) |
0,25 μx |
0,1 % |
Xxxx xXXX (20xX) |
0,125 μx |
0,1 xX |
Xxxxxx Xx-1-X (10 μX) |
2,0 μx |
0,8 μX |
Xxxxxx Rs-1-R (10 μX) |
2,0 μx |
0,8 μM |
Taq xxxxxxxxxx (5X/μx)(1) |
0,2 μx |
1,0 X |
Xxxxxxxx vzorku |
5,0 μl |
|
Celkové xxxxxxxx |
25,0 μl |
|
(1) Xxxxxx xxxx validována použitím Xxx xxxxxxxxxx Xxxxxx Xxxxx (AmpliTaq) a Xxxxx XXX. |
x) Xxxxxxxx XXX specifický xxx Xxxxxx 3/4/5
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxx x xxxxxx |
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx |
Xxxxxxxx UPW |
14,925 μx |
|
10x xxxx XXX (1) |
2,5 μl |
1x (1,5 xX MgCl2) |
BSA (frakce X) (10 %) |
0,25 μx |
0,1 % |
Xxxx xXXX (20xX) |
0,125 μx |
0,1 xX |
Xxxxxx Xx-1-X (10 μX) |
1,0 μx |
0,4 μX |
Xxxxxx Xx-3-X (10 μX) |
1,0 μl |
0,4 μX |
Xxx xxxxxxxxxx (5X/μx) (1) |
0,2 μx |
1,0 X |
Xxxxxxxx xxxxxx |
5,0 μl |
|
Celkové xxxxxxxx |
25,0 μx |
|
(1)Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxxxx Xxxxxx Elmer (XxxxxXxx) x Gibco BRL. |
4.3. Xxxxxxx xxxxxxxx XXX
Xxxxxxx xx následující xxxxxxxx xxxxxx pro xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 1/2- a xxxxxxx 3/4/5:
1 cyklus: x) 5 xxxxx xxx 95 °X (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXX)
35 xxxxx: ii) 30 xxxxxx xxx 95 °X (denaturace xxxxxxxxxx XXX)
xxx) 30 xxxxxx xxx 58 °X (xxxxxxxxxxx primerů s xxxxxxxxxxx DNA)
iv) 45 xxxxxx xxx 72 °X (xxxxxxx kopie)
1 xxxxxx: x) 5 xxxxx při 72 °X (konečná xxxxxxx)
xx) xxxxxxx xx xxx xxxxxxx 4 °X.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxxxxxx xxx optimalizován xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx XX Research XXX 200. Použití jiných xxxxxxxxx xxxx vyžadovat xxxxxx jednotlivých xxxxx xxxxx xx), xxx) x xx).
4.4. Restrikční xxxxxxxx analýza amplikonu.
Produkty XXX vzniklé xxxxxxxxxxx XXX X. xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx Xx-1-X x Xx-1-X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx Xxx I xxxx Xxxxxxxxxxxxx (xxxx. Xxx 1269 1) xx xxxxxxxxx xxxx 30 minut xxx xxxxxxx 65 °X. Xxxxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxx x XXX X. solanacearum xxxxxx xxxxxxx Rs-1-F x Xx-3-X nemají xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
5. Příprava xxxxxxxxxx pufru
5.1. Bromfenolová xxxx (10 % xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxxxxxxx xxxx 5 x
Xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxx 50 xx
5.2. Xxxxxxxx pufr
Glycerol (86 %) 3,5 ml
Bromfenolová xxxx (5,1) 300 µx
Xxxxxxxxxxx (redestilovaná) xxxx (xxxxxxxxxx) 6,2 ml
6. Xxxx 10x XXXX-xxxxxx-XXXX (XXX), xX 8,0
XXXX 48,4 g
Ledová kyselina xxxxxx 11,42 xx
XXXX (xxxxx xxx) 3,72 x
Xxxxxxxxxxx xxxx 1,001
Před xxxxxxxx xx zředí xx 1 X.
Xxxx xxxxxxxx dostupné (xxxx. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx).
Xxxxxxx 7
Xxxxxxxxxx činidla pro XXXX test
1. Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxx R. xxxxxxxxxxxx XXx-1-XX3: 5'-xxx xxx xxx xxx xxx acc xxx-3'
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx EUB-338-FITC: 5'-xxx xxx xxx xxx xxx xxx-3'
2. Xxxxxxx xxxxxx
[XXXXXXXXXX: XXXXXXX XXXXXX OBSAHUJE XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXX JE TOXICKÝ. XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX. XXXXXXXXXX XX XXXXXXXX V XXXXXXXXX.]
x) Xxxxxxx xx 9 xx xxxxxxxxxxx čisté xxxx (např. Ultra xxxx xxxxx = (XXX)) xx teplotu xxxxxxxxx 60 °C x xxxxx xx 0,4 x parafonnaldehydu. Xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx 5 xxxxx 1X NaOH x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
xx) Xxxxxx xx xX xx 7,0 xxxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxx 0,1 X (XX; xX 7,0) a 5 xxxxx HCl 1X. Xxxxxxxxxxx xx pH xxxxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xx upraví pomocí XXx nebo XxXX. [XXXXXXXXXX: X XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXXX NEPOUŽÍVAT XXXXX PH!]
iii) Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx 0,22 µx a xxxxxxxx xx chráněný xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 4 °X xx xxxxxxx xxxxxxx.
3. 3x Xxxxxx
XxXX 2,7 X
Xxxx-XXX 60 mM (xX 7,4)
XXXX (xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx) 15 xX
Xxxxx se xx x, podle xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxxxxx roztok
1x Xxxxxx
Xxxxxx xxxxxxx sulfát (XXX) 0,01 %
Formamid 30 %
Xxxxx EUB 338 5 xx/µx
Xxxxx XXX-1 xxxx XXX2 5 xx/µx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx hybridizačního roztoku xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1. Xxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx 2 xxxxx xxxxxx) je xxxxx 90 µx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. XXXXXXXXXX: XXXXXXXX XX XXXXX JEDOVATÝ, XXXXX POUŽÍVAT XXXXXXXX X XXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX!
Xxxxxxx 1. Xxxxxxxxxx množství xxx xxxxxxxx hybridizační xxxxx
Xxxxx xxxxxxx |
1 |
4 |
6 |
8 |
10 |
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx |
23,1 |
92,4 |
138,6 |
184,8 |
231,0 |
3 x Xxxxxx |
30,0 |
120,0 |
180,0 |
240,0 |
300,0 |
1 % SDS |
0,9 |
3,6 |
5,4 |
7,2 |
9,0 |
Formamid |
27,0 |
108,0 |
162,0 |
216,0 |
270,0 |
Sonda EUB 338 (100 xx/μx) |
4,5 |
18,0 |
27,0 |
36,0 |
45,0 |
Xxxxx XXX-1 xxxx XXX2 (100 ng/μl) |
4,5 |
18,0 |
27,0 |
36,0 |
45,0 |
Celkové xxxxxxxx |
90,0 |
360,0 |
540,0 |
720,0 |
900,0 |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx světlocitlivé xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxx -20 °C. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. 0,1X xxxxxxxxx xxxx, xX 7,0
Xx2XXX4 8,52 g
KH2PO4 5,44 x
Xxxxxxxxxxx xxxx 1,00 l
Rozpustí xx xxxxxx, xxxxxxxxxxx pH x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 121 °X xx xxxx 15 xxxxx.
Xxxxxxx 8
Pěstování xxxxx a xxxxxxx
Xxxxxx xx semena xxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxx (Xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx děložními xxxxxx (10 až 14 dní) xx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx substrátu.
Rostliny lilku x xxxxxxx by xx měly pěstovat xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx xxx: 14 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxx xx xxxxx;
Xxxxxxx: xxx: 21 xx 24 °C,
noc: 14 xx 18 °C.
Vhodná xxxxxx xxxxx vejcoplodého: "Xxxxx Xxxxxx"
Xxxxxx odrůda xxxxxxx: "Xxxxxxxxxx"
Xxxxxxxxxx: xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx://xxxxx.xxxxxx.xx.xxx/Xxxxxx/xxx/xxxxx/Xxxx/xxxx.
XXXXXXXXXX
1. Xxxxx, R.i., L. Xxxxxxxx and X.X. Xxxxx. 1990. Xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxx enviromnental xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. X. Xxxxxxxxx. 172-.762-770.
2. Xxxx. 1998. Council Xxxxxxxxx 98/57/XX xx 20 July 1998 xx xxx control xx Ralstonla solanacearum (Xxxxx) Xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx L235, 1-39.
3. Xxxxxxxx, X., X.X. Le Xxxx, X. Xxxx, P. Xxxxxxx xxx X. Xxxxx. 1999. Design xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx and application xx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx Journal xx Xxxxx Xxxxxxxxx 105;373-380.
4. Xxxxxx, P., Gorris, X.X., Cambra, M., Xxxxxx, X.X., Xxxxxx, X xxx Xxxxx, X.X. 2002. Xxxxxxxxxx Xxxxxx-Xxxxxxxx Xxxxxxxx Indirect Xxxxxx-Xxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Assay Xxxx Uses x Xxxxxxxx Monoclonal Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx Detection xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx Asymptomatic Xxxxxx Xxxxxx. Xxxxxxx xxx Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, 68, 3634-3638.
5. Cook, X., Xxxxxx, E. and Xxxxxxxx, X. 1989. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xx restriction xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx with XXX probes xxxx xxxxxxx virulence xxx xxx xxxxxxxxxxxxxx response. Xxxxxxxxx Plant-Microbe Interactions 1:113-121.
6. Xxxxxxxxxxx, J.G., Xxxxxxxx, J., Xxxxxx, X.X. xxx Stead, X.X. 1996. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. XXXX Xxxxxxxx 26; 663-678.
7. Xxxxxxxxxxx, X.X. (1994) Modification of x semi-selective xxxxxx xxx xxx isolation xxx xxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx: X.X. Xxxxxxx (xx.) Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxxxxxx 10, 3-5. Australian Xxxxxx xxx huternational Xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx, Xxxxxxxx, Xxxxxxxxx.
8. Xxxxxxx, X.X. 1964. Characteristics xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 27; 265-277.
9. Xxxxxxx, X.X., Xx-Xxxxxxx, X.X., Xxxxxxxx, X. and Xx Xxxxx, L. 1990. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx in xxxxxxx ofYseudomonas solanacearum. Xxxxxxx of Applied Xxxxxxxxxxxx 69; 269-280.
10. Xxx, X., Y. Xxxxxxxx, X. Fujii, X. Tanaka, X. Xxxxxx-xxxxx, X. Xxxxxxxxx xxx X. Xxxxx. 1998. Xxxxxxxxx xx xxxxxx cells xx Xxxxxxxxx solanacearum xx xxxx xxxxx a xxxx-xxxxxxxxx medium and x PCR xxxxxxxxx. X. Xxxxxxxxxxxxxxx 146-1379-384.
11. Xxxxx, X.X. (1988) X xxxxxxxxx method xxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx symptomless xxxxxx xxxxxx and xxxx xxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxx specificity. Xxxxxxxx XXXX/XXXX Xxxxxxxx 18, 343-351.
12. Xxxxx, X.X. 1991. Xxxxx- xxx xxxxx-xxxxxxxx classification xxXxxxxxxxxxxx solanacaerum xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx-xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx Microbiology 14; 335-345.
13. Xxxxxx, X. 1954. Xxx xxxxxxxxxxxx xx pathogenicity xx Xxxxxxxxxxx solanacearum xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx x tetrazolium xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx 44; 693-695.
14. Xxxxxxx Z.; Xxxxxxx, X xxx X.X. Sands, 1990. Xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx Kiadó, Xxxxxxxx, 568 xx.
15. Lelliott, X.X. and Stead, X.X. 1987. Methods xxx the xxxxxxxxx xx bacterial xxxxxxxx xx plants. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Ltd., Xxxxxx. 216 pp.
16. Xxxxx, M.M., Gorris, X.X., Llop, X., Xxxxxx, X., Vicedo, X., Xxxxxx, M., 1997. Selective xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx bacteria. In: X.X. Xxxxx xx xx., (eds). Klewer Xxxxxxxx Publishers. pp. 117-121.
17. Louws, X.X., Xxxxxxxxx, D.W., Stephens, X.X. xxx Xx Xxxxxx, X.X., 1994. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx phytopathogenic Xxxxxxxxxxx xxx Pseudomonas xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx XXX. Applied xxx Xxxxxxxxxxxxx Microbiology, 60, 2286-2295.
18. Louws, X.X., Xxxxxxxxx, X. X., Xxxxxxxx, X.X. xxx De Bruijn, X.X. 1995. Differentiation xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx-XXX fingerprinting xx xxxxxxx classify Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx. xxxxxxxxxxx. Phytopathology 85; 528-536.
19. Xxxxx, X., X. Tavner, X. Xxxxxxxx, J.-F Wang, X.-X Li, X. Xxxxxxxxx, X. Fegan, X.X. Hayward, X. Xxxxxxxxxxxxx, X.X. Hong, X.X. Xxxxxxxx, X.X. Xxxxxxx. 1997. X xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx-xxxxxxxx XXX xxxxxx xxx XXX xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx solanacearum (xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Xx Xxx. J. Xxx. Xxxx. Biotechnol. 5; 19-33.
20. Xxxxxxx, X.X. xxx Xxxxx, X. 2000. Xxxxxxxxx xx X. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx by xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X. Xxxxxxxxxxxxxx 148; 619-626.
21. Xxxxxxx, K.H., Xxxxxxxxxxx, X.X. and Xxxxxx, X. 2002. Xxxxxxxx xxxxxxxx and xxxxxxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxxx xx 16X-23X ribosomal xxxxxxxxxx xxxxxx region with xxxxxxxx positive xxxxxxx. Xxxxxxxx Xxxxxxx of Xxxxx Xxxxxxxxx 108, 831-842.
22. Xxxxxxxx-Xxxxx, X., Xxxxx, X., Xxxxxxxxxxx, X.X. and Xxxxx, X.X.X. (1995) Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx of xxxxxxxxx wilt. Food xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx 7, 67-79.
23. Xxxxxx, X. 2001. Xxxxxxxxxx xxxxx for xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Schaad [Xxxx.]. - 3. ed.; Xx. Xxxx, Minnesota: 373 xx.
24. Xxxx, X.X., X.X. Xxxxxxx, X.X.X. Xxxxx, xxx X.X. Daniels. 1993. Xxxxxxxxx of Pseudomonas xxxxxxxxxxxx, Xxxxxxxxxxx sy xxxx, Xxxxxxxxxxx pickettii xxx Xxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx by xxxxxxx 16X xXXX xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxx xx oligonucleotide xxxxxxx for xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. X. Xxx. Microbiol. 139: 1587-1594.
25. Xxxxx, X.X., Xxxxxx, X.X., Holderness, X. and Xxxxxxx, X.X. 1995. Genetic xxxxxxxxx of Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx) xxxx 3 xx Xxxxx. Xxxxxxx xxx Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 61; 4262-4268.
26. Xxxxx, X.X. 1992. Grouping xx xxxxx pathogenic xxx xxxx other Xxxxxxxxxxx xxx. using xxxxxxxx xxxxx-xxxx xxxxxxxx. xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxx of Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 42; 281-295.
27. Xxxxxxx, M., Xxxxxxx, X.X., Sly, XX, Xxxxx, X. 1996. Xxxxxxxxx of xxx phylogenetic xxxxxxxxxxxxx xx strains xx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, Xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx the xxxxx disease xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 16S xXXX xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 46; 10-15.
28. Xxx Xxx Xxxx, X.X., Xxxxxxx, X.X.X., Xxxxx, X.X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxx, E., Xxx Xxxxxxxxx, X.X.X., Xxxxxxx, X.X., Trigalet, X., Feuillade, X. 1998. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxx 3 xx Xxxxxxx Europe xx xxxxxxxxxx xx AFLP, XX-XXXX xxx xxx-XXX. Xx: Xxxxx, X., Xxxxx, X. xxx Xxxxxxxxxxx, X. (xxx.) Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx: Xxxxxxxxx and Ecological Xxxxxxx. Xxxxxxxx (Berlin) xx. 44-49.
29. Xxxxxx, X.X., Xxxxxxxxxxx, X.X., Xxxxx, X., Xxxxx, X.X. xxx Xxxxxxx, X. 1999. Xxxxxxxxx xx Ralstonia xxxxxxxxxxxx xxxxxxx using xx xxxxxxxxx and xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5' xxxxxxxx XxxXxx assay. Xxxxxxx xxx Environmental Xxxxxxxxxxxx 66; 2853-2858.
30. Xxxxxxxx, X.X., X.X. van Xxxxxxxxx, X.X. Xxxxx xxx X.X.X. Xxxxxxxxx. 1998. Detection xx X. solanacearum, which xxxxxx brown rot xx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxx in sihl xxxxxxxxxxxxx with 23x xXXXxxxxxxxx xxxxxx. Appl. Xxxxxxx. Microbiol. 64: 4546-4554.
Xxxxxxx x. 2 x vyhlášce x. 331/2004 Xx.
X. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 11
Informace x xxxxxxxxxx průzkumu xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 11 obsahuje:
a) xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx hniloby x xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- rozdělení xx rozmnožovací materiál1) (xxxxxxxxx podle xxxxxxxxx) x ostatní brambory (xxxxxxxxx xx brambory xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx),
- celková xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx brambor x hektarech,
- xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x vzorkovaných xxxxxxx x xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx x vzorkovaných xxxxxx v XX xxxxxxxxxx xxxx do XX xxxxxxxxxx hlíz,
- xxxx odběru x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x porostů xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx hlíz x xxxxxxxx xxxxxxxxx;
x) xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby x xxxxxxxxx xxxxxxx:
- počet xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- počet xxxxxxx x prohlédnutých xxxxxxx (x odhad),
- xxxxx odebraných xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx;
x) xxx zjišťování xxxxxxx xxxxxxx hnědé hniloby x porostech jiných xxxxxxxxxxxxx rostlin xxx xx xxxxxxx a xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxx kontrolovaných xxxxxxx, xxxx a xxxxx (x odhad) xxxxxxxxxxxxx rostlin,
- počet xxxxxxxxxx xxxxxx rostlin, xxxx xxxxxxxxxxx testů x xxxxxxxx testování,
- xxxxx a označení xxxxxxx xxxxxx, odkud xxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxxxx;
x) při zjišťování xxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx rostlin x v xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxx, xxxxx průmyslově xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
- počet a xxxxxxxx xxxxxxx útvarů x xxxxx podniků, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx vzorků vody, xxxx odběru, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx testování;
B. Uchováni xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
1. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx přílohy č. 1, musí xxx xx xx potvrzení xxxx vyvrácení xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx postupem xxxxx přílohy č. 1 xxxxxxxx x vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:
- celá xxxxxx xxxxxxx, x xxx xxx odebrán xxxxxx, xxxx xxxx této xxxxxx v xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx extrakt x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx(x) xxxx(x), xxxx. xxxxxxx xxx imunofluorescenční xxxx, x
- xxxxxxx příslušné xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx testování xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
2. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx minimálně xx xxxx jednoho xxxxxx od xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx stanoveným x §5 xxxx. 3 xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx 1.,
- vzorek infikovaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxx rostlin (v xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xx to xxxxxx), x
- izolovaná xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx hnědé xxxxxxx.
Xxxxxxx č. 3 x xxxxxxxx x. 331/2004 Xx.
Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx původcem xxxxxxxxxxxxxx xxxx původcem xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx rozšíření x xxxxxxxxxxx oznámení xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx xxxxxxx
1. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x) je xxxxxxxx xx
- místo produkce,
- x xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx partie xxxxxxxx, xx které xxxx potvrzeno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
- x xxxx byly xxxx xxxx pěstovány xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
- v xxxx byly xxxx xxxx pěstovány rostliny xxxxxxxx, a v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx xxxxxxx podrobeny odbornému xxxxxxx xxxxx §4 xxxx. 3,
- x xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx, x xxxxx leží x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx produkce, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zemědělské xxxxxx nebo xxxxxxxx,
- xx němž xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx použita xxxxxxxxx xxxx ze zdroje, x něhož bylo xxxxxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxx xxxxx xx ze xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xx xxxx xxxx k xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx ze xxxxxx, xxxxxxxxxxx v xxxx xxxx k xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx pro xxxx xxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx zamořeno xxxxxxxx hnědé xxxxxxx, xxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx hniloby xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxx povrchovou xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vodou x xxxxxx xxxxxxxx podezřelou,
a
- xxxxxxxxxx vodu, která xxxx použita x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx místa xxxxxxxx, u xxxxx xxxx potvrzeno, xx xxxx zamořeny xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Při xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx zamoření xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx hniloby xxxxx §5 odst. 1 písm. x) xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x),
- místo produkce xxxx xxxxxxx x xxxxxxx pěstitelským xxxxxxxxxx xx hostitelské xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. a), xxxxxx xxxx, které xxxx xxxxxxxx pěstitelské xxxxxxxx a vybavení x ve xxxxxxx xxxx xxxxxxxx používány xxxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx společného smluvního xxxxxxxx,
- hostitelské xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx(-xxx) xxxxxxxx xxxxxxxx(-xxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxx(-xxx) místě(-ech) během xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx produkce xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx uvedených xxxx produkce,
- xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx nebo jeho xxxxx x xxxxxxx xxxx předměty xxxxxx xxxxxxxxx materiálu, které xxxxx přijít do xxxxx x hostitelskými xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 12 měsíců xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx,
- hostitelské rostliny, xxxxx xx skladují xxxx xxxx v xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxx předměty xxxxxxxxxxxxx x předcházející xxxxxxx, x xx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx objektů xxxxxxxx xxxxxxxxxx v příloze č. 6,
- xxxxxxxxxxx rostliny, xxxxx xxxx na základě xxxxxxxxx xxxxx §6 xxxxxx xxxxxxx původ xxxx xxxxxxxxxxx rostliny xxxxxxxx xx zamořené xxxxx §5 xxxx. 1 písm. x), x u xxxxxxx Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §76 odst. 2 xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx souvislosti xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, x to xxxxxx xxxxxxx testovaných x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx pochybností x xxxxxxxx zamořených a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxx hostitelské xxxxxxxx uvedené v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx skladovány,
- xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 písm. x) za zamořený xxxxxxxx hnědé hniloby,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx původce xxxxx hniloby xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx podle §5 xxxx. 2 xxxx. b) xx xxxxxxxxx původcem xxxxx xxxxxxx.
3. Při xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx hnědé hniloby xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. c) xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxx ostatních xxxx xxxxxxxx, kde xx xxxxxxx xxxxxxxx xx jiné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx výsadby xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx brambor,
- xxxxx xxxxxxxx, na xxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zavlažovány xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx existuje xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx voda xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x) xx zamořené xxxxxxxx xxxxx hniloby,
- xxxxx xxxxxxxx, na xxxx xxxx hostitelské xxxxxxxx xxxxxxxxx bezprostředně xxxxx xxxxxxxxx vody xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 xxxx. b) xx zamořenou původcem xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nádrž, která xx spojena s xxxxxxxxxx xxxxx označenou xxxxx §5 odst. 2 písm. b) xx zamořenou původcem xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 xxxx. b) za xxxxxxxxx původcem xxxxx xxxxxxx, s přihlédnutím xx xxxxx toku x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x x planě rostoucím xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby x xxxxxx xxxxxxxxxxx.
4. Náležitosti xxxxxxxx potvrzeného výskytu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 3.
4.1. Xxxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx hnědé xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx metod xxxxxxxxxxx v příloze č. 1 xx xxxxxx Komisi x xxxxxxxx státům xxxxxxx:
- x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx (xxxxxxxx, sadba xxx.), x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx materiálu,
- x xxxxxxx název odrůdy xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx oznámení xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti nebo xxxxx xxxxxxx xxxxx §4 odst. 4, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx x jiného xxxxxxxxx státu(jiných xxxxxxxxx xxxxx) xxxx hrozí xxxxxx zamoření xxxxxxxx xxxx rajčete v xxxxx členském xxxxx(xxxxxx xxxxxxxxx státech), xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx(xxxxxxxx státům) xxxxxxxxx nezbytné ke xxxxxxx xxxxxxxx xxx §5 xxxx. 4, xxxxxxx:
- název odrůdy xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx doručené xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx §21 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, nebo xxxxxxxxxxx číslo xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx listu.
4.2. Xx ukončení všech xxxxxxx xx xxxxxx: - xxxxx potvrzení xxxxxxxx,
- xxxxxxx popis xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx rozsahu xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx zdroji(zdrojích) xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxx partií s xxxxxxxx xxxxxx x x sadbových xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxx míst produkce, xxxxx nebyla xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx se x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x bezpečnostní zóně,
- x případě xxxxxxx xxxxx hniloby xxxxxxxxxxx x určení vodního xxxxxx, včetně názvu x umístění vodního xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxxxxxx rostlinolékařské osvědčení xxxxx §21 odst. 1 xxxx. x) xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pasu;
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx(x) xxxxxxx(xxxxxx) zamoření, xxxxx xx Komise xxxxxxxx vyžádá.
Xxxxxxx x. 4 x xxxxxxxx x. 331/2004 Sb.
Opatření po xxxxxxxxx přítomnosti xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx
1. Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx rostliny xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx zamořenou xxxxx §5 odst. 1 xxxx. a), xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx xxxxx §7 odst. 1 písm. x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx:
x) xxxxx xx řízené skládky x okamžité xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx, xxx' xxxx.) xxx, xxx xxxxxxx xxxxx xx zcizení hlíz x k xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx původce xxxxx xxxxxxx; mohou být xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, x xxxxx xx vyloučeno xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ornou xxxx xxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx půdy;
b) v xxxxxxx xxxx bramboru xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx jsou hlízy xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 75 °X xx xxxx xxxxxxx deseti xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxx hospodářskými xxxxxxx;
x) x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx prostřednictvím xxxxx x okamžité xxxxxxx xxxxxx do zpracovatelského xxxxxxx tepelné zpracování xxxx pro průmyslové xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx jsou xxxxx vystaveny teplotě xxxxxxx 75 °X xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxx Xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx takovým technologickým xxxxxxxx, schváleným Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx hnědé xxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxx xxx xx podniků xxxxx xxxxxxx písemně x tomu xxxxx xxxxxxxxxxx, x to xx základě xxxxxxx, xx x podniku xxxxxxx systém xxxxxx x xxxxxxxxxx skladovacích xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x že xxxxxx xxxxxxx požadavky xx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx x příloze č. 5,
x) x xxxxxxx původce kroužkovitosti xxxxxxxxxx hlíz xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx a jejich xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; Ústav xxxxxxx xxxxxxxxx podmínky xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx tohoto xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx šíření xxxxxxx kroužkovitosti,
e) xxxx xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxxx písemně xxxxxxxxx Xxxxxxx, xxxxx bylo xxxxxxxxx, xx neexistuje xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ani xxxxx hniloby, takové xxxxxxxx xxxx být Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx naložení x xxxxxx,
x) xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx ke zvláštnímu xxxxxx1).
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx splněny xxxxxxxxx xx zneškodňování xxxxxx xxxxxxxxx v příloze č. 5.
Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x) xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, kdy xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx postup x xxxxxxxxx x) xx x). Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx d) a x) xxxxxxx Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx má xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x) xx x) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxx informuje Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxx xxxxxxxx s partií xxxxxxxxxxx rostliny xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx zamořenou
S xxxxxx hostitelské xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x), xxxx xxx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx xxxxx §7 odst. 1 xxxx. x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx:
x) xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx přímé xxxxxx xx místa xxxxxxxx x použití bez xxxxxxxxxxx xxxx konzumní xxxxxxxx, x místě x xxxxxxx zařízením xx likvidaci xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x příloze č. 5; xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx Xxxxx xxx do míst Xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to xx xxxxxxx ověření, že x podniku xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x odvozových xxxxxxx a xx xxxxxx xxxxxxx požadavky xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx v příloze č. 5,
b) x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx zpracování x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxx vystaveny xxxxxxx xxxxxxx 75 °C xx xxxx nejméně xxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx zkrmení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) v xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx partie do xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxx vystaveny xxxxxxx xxxxxxx 75 °X xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxx Xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx Xxxxxxx, xxxxx vylučuje xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx Ústav xxx xx podniků xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xx xxxxx České xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a xx xx xxxxxxx xxxxxxx, xx x xxxxxxx xxxxxxx systém xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx vozidel x xx podnik xxxxxxx požadavky xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx x příloze č. 5,
d) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hlíz xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxx objemu silážované xxxxxxxx; Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx podmínky silážování xxxx použitím xxxxxx xxxxxxxx x stanoví xxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxx možnost xxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti,
e) v xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výsadba xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 písm. x) xx xxxxxxxx, xx:
- xxxxx xxxx x tomto karanténním xxxxx vypěstovány x xxxx prokázáno, že xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zamořenou,
- xx xxxxxxxxxx xxxxx nenachází x uzavřené xxxxxxxx xxxxxxx xxx výrobu xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bramboru xxxxx zvláštního xxxxxx2),
- xxxxxx xxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxx přílohy č. 1 na xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx porostu xxxxx xxxxxxx xxxxx způsobem xxxxx písmene x) xxxx. d), xxxxx xxxxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx zamořenou,
f) jiné xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx schváleno Xxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx rozšíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, takové xxxxxxxx xxxx xxx Xxxxxxx xxxxxxxx určité xxxxxxx osobě xxxxxx xxxxxxxxx podmínek xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx souvisejícího x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx zneškodňování xxxxxx xxxxxxxxx x příloze č. 5.
Xxxxxxxx nařízená x xxxxxxx x xxxxxxx x), x) a x) sděluje Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx má být xxxxxxxx xxx xxxxxxx x) xx x) xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx členského státu, xxxxxxx osoba x xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx sdělí xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx členského xxxxx tak, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx celých rostlin x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxx do xxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xx zněním x xxxx 1. xxxx. x) xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Tento xxxxxx xx doporučuje xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx partie xxxxxxxxx xx zamoření xxxx zamořené xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx 1. x 2. nebo xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx Ústav xxxxxxxxxx Xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti
4.1. V xxxxxxxxxxx území, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx zamořené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x), Xxxxx xx xxxxxxxxx výskytu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nařídí xxxxx §7 xxxx. 1 xxxx. x), xx uživatel pozemků x xxxxx xxxxx:
4.1.1. xx pozemku označeném xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x):
x) nesmí po xxxx xxx vegetačních xxxxxx xxxxxxxxxxxxx po xxxx potvrzení xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx pěstovat xxxxxxx xxxxxx osiva, x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx původce kroužkovitosti (§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 2. xxxxxx)
xxxx
xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx udržovat xxxx xxxxx úhor xxxx xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, vojtěškou xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx něm xxxxxxxx sekáním jako xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx na xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx rostoucí xxxxxxxxxxx rostliny původce xxxxxxxxxxxxxx (§76 xxxx. 1 xxxx. a) xxx 2. xxxxxx);
x) xxx xxxxxxxx xxxxxxx x prvém roce, xxxxx následuje po xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. x), xxx xxx x xxxxxxxxx, že
- xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxx Xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx rostlin xxxxxxxx x ostatních planě xxxxxxxxxx hostitelských xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx,
- x xxxxxxx bude použit xxxxxxxxxxxx materiál3) nebo xxxxxxxxx xxxxx4) xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx Xxxxxx x xxxxxxxxx xxx přílohy č. 1 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, a
- xxxxxxx xxxx určena xxxxx ke konzumním xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (§76 xxxx. x xxxx. x) xxx 1. xxxxxx);
x) x) xx xxxxxxx xxxxxxxxx mimořádných xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x karanténním území xxxxx xxxx 4 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx konzum s xxxxxxxxx, xx Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx průzkum xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 3 [§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 1 xxxxxx], x výsadbě xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx3) xxxx xxxxxxxxx xxxxx4) xxxxxxxxxxx pod xxxxxxxxx Xxxxxx a xxxxxxxxx xxx přílohy č. 1 xx xxxxxx původce kroužkovitosti x výsledkem xxxxxxxxxx, x xxxxxxxx hlízy xxxxx testovány dle přílohy č. 1 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, případné xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xx xxxxxxxx dvou xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx.
4.1.2. xx xxxxxxx jiném xxx xxxxxxxxx xx zamořený xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. a), na xxxxxx byl x xxxx potvrzení xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxxxxxx xxxxxxx, nesmí po xxxx dvou následujících xxxxxxxxxxx období pěstovat xxxxxxx; /§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/;
4.1.3. xx xxxxxxx xxxxx xxx označeném xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 xxxx. a), xx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx brambor, xxx xx vegetačním xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxxx, xx
- Xxxxx protokolárně xxxxxxxx xxxxx xxxxxx šíření xxxxxxx kroužkovitosti xxxxx xxxxxxxxxx rostlinami xxxxxxxx xxx xxxxxx planě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, a
- xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx ke konzumním xxxxxx nebo x xxxxxxxxxxxx zpracování /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 1. xxxxxx/;
4.1.4. musí po xxxx čtyř xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx vyhledávat x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx planě rostoucí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx /§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/ x xxxxxxxx brambory xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x. 1 [§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx];
4.1.5. xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x oddělené xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx materiálu3) bramboru x xxxxxxxxx xxxxx4) xxxxxxxxxxx xxx kontrolou Xxxxxx a xxxxxxxxx xxx přílohy č. 1 xx xxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx negativním xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. zákona/;
4.1.6. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x příloze č. 6:
- jednorázově xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx, které xxxxxx xx kontaktu se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx xxxxxxxxxx xx té xxxx, xxx xxxxxxx xx styku x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx/;
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, dopravních xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, třídicích xxxxx, xxxxx, palet x jiných xxxxxxxx xx každém xxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx po xxxx xxxxxxxxxx Ústavem [§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 2. xxxxxx]; očista xxxxxx xx xxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, očista xxxxxxxxxxxx prostorů, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx vždy po xxxxxxxxxxx jedné partie xxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx po xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx od potvrzení xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx a dezinfekci xxxxx strojů, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, třídících xxxxx, xxxxx, xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx posklizňové xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxx musí být xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx /§76 odst. 1 písm. x) xxx 2. xxxxxx/;
4.1.7. xxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx let xxxxxxxxxxxxx xx roce potvrzení xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx rozmnožovací xxxxxxxx3) xxxx xxxxxxxxx xxxxx4) xxxxxxxxxxx pod xxxxxxxxx Ústavu a xxxxxxxxx dle xxxxxxx x. 1 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x výsledkem xxxxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. zákona/;
4.1.8. nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx vysazovat xxxxx bramboru xxxxxx xxxxxxxxxxxxx sazečů /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 1. xxxxxx/;
4.1.9. xxxxx množit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx3) xxxxxxxx xxx xxx vlastní xxxxxxx xx vegetačním xxxxxx bezprostředně následujícím xx xxxxxxxxxx xxxxxx, x němž nebo x xxxxx sklizně xxx výskyt xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx zjištěn /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/;
4.1.10. xxx xxxxxxxxxxx xxxx toto xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx úředním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx shledány xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxx zamořené xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx /§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/.
Xxxxxxxx xxxxx bramboru balením xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx do místa xxxxxxxx na xxxxx Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x použití xxx přebalování jako xxxxxxxx brambory xxx xxxxxxxxxxx mimo xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx po xxxxxx xxxxxxxx vzorku, xxxxx xxxx příslušná xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx sklizně Xxxxxxx xx xxxxxx příznaků xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxx dužniny xxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.11. smí xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx dovozní xxxxxxxxxx podmínky, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 1. xxxxxx/;
4.1.12. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nářadí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, sklizni, xxxxxxxxxxx úpravě, přepravě x xxxxxxxxxx brambor, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx dobu xxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx mimo xxxx xxxxx bez xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx provedené způsobem xxxxxxxx x příloze č. 6 /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 2. xxxxxx/;
4.2. Při xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx systémech, xxx xx možná xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxx pěstování minihlízek, xxxxxxxxx x xxx.) xxxxxxxx xxxxxxx:
x) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, pokud xxxxxxx xxx kontrolou Ústavu x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx rostlin bramboru xxxx jiných xxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx pěstebního xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx objektů, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx způsobem xxxxxxxx x příloze č. 6 /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx/;
x) xxxx xxxxx pěstování xxxxxxxx xxxxxxx x rozmnožovacího xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx testovaných xx xxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx X. xxxxxx/.
4.3. Zjištění xxxxx xxxxxxxxxx rostlin xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx 4.1.4. musí uživatel xxxxxxx v tomto xxxxx xxxxxxx Ústavu x před xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx musí xxxxxxx jejich xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxx xx příslušný xxxxxxx považuje za xxxxxxx xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/.
4.4. Xxxxx provádí xxxxxxxxx xxxxxx nad xxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxx či skladují xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx prováděním xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x jiných xxxxxxx xxxxxxxx.
4.5. X xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx x xxxxx produkce na xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx zamoření x xxxx možného xxxxxxxxx původce kroužkovitosti xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x), Xxxxx nařídí xxxxx §7 xxxx. 1 xxxx. x), xx xxxxxxxx pozemků x xxxxx xxxxx xxxx xx dobu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx potvrzení výskytu xxxxxxx kroužkovitosti:
a) provádět xxxxxxxxxx xxxxxx sklizňové xxxxxxxx po ukončení xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx strojů, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, třídících xxxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxx předmětů použitých xxx posklizňové úpravě, xxxxxxxxxxx a vyskladnění, xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx /§76 odst. 1 xxxx. x) bod 2. xxxxxx/;
x) xxxx xxxxxxxxxx oddělenou manipulaci x oddělené xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx materiálu xxxxxxxx3) x farmářské xxxxx4) xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx Xxxxxx x testované xxx přílohy x. 1 xx výskyt xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx negativním od xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx [§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx];
x) xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jen rozmnožovací xxxxxxxx3) nebo xxxxxxxxxx xxxxx4) xxxxxxxxxxxx pod xxxxxxxxx Xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx přílohy č. 1 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x výsledkem xxxxxxxxxx /§76 odst. 1 písm. x) xxx 1. xxxxxx/.
5. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx
5.1. X xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle §5 odst. 1 xxxx. x) xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 xxxx. b), Xxxxx xx potvrzení xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxxx podle §7 xxxx. 1 xxxx. x), xx xxxxxxxx xxxxxxx x tomto xxxxx:
5.2.1. xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx zamořený xxxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 písm. a):
a) xxxxx xx dobu xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxx rodu Xxxxxxxx, x xxxxxxx prokazatelně xxxxx xxxxxx přežití xxxxxxx, xxxx rostliny xxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx riziko xxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby (xxxx. pokud xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx přenosu xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx) [§76 xxxx. 1 xxxx. a) xxx 1 xxxxxx], x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rostoucí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 2 xxxxxx]
xxxx
x) xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx úhor xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx intenzívně xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx trávy xx xxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 2. zákona/ x x dalších xxxx letech xx xxx smí xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx přežití xx přenos xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, a xxxx se xx xxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx let xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx rostoucí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxx /§76 odst. 1 xxxx. x) xxxxxx/;
x) xxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x) pěstovat xxxxxxx xxxx rajče x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx písmenem x), xxx jen s xxxxxxxxx, xx
- během xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxx Ústavem ověřeno, xx xxxxxxx byl xxxxxxx prostým xxxxx xxxxxxxxxx rostlin xxxxxxxx, xxxxxxx x jiných xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx z čeledi xxxxxxxxxxx, x
- x xxxxxxx xxxxxxxxx brambor xxxx k xxxxxxx xxxxxx rozmnožovací xxxxxxxx3), x
- xxxxxxx xxxx xxxxxx pouze xx xxxxxxxxx účelům xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx budou xxxxxxxx bramborové xxxxx xx xxxxxxxx rajčete xxxxxxxxx xxxxxxxx podle přílohy č. 1;
x xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx bramboru xxxx rajčete xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx výskytu xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 3 [§76 xxxx. 1 xxxx. a) bod 1 zákona] x x xxxxxxx pěstování xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx3) x xxxxxxx musí xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx sadbových xxxxxxx je možné xx xx uplynutí xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx;
x) xxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x) xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxx v prvním xxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx x), ale xxx s xxxxxxxxx, xx
- xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxx Xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx byl xxxxxxx xxxxxxx planě xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, rajčete x jiných xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx plevelů x xxxxxx lilkovitých, x
- x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx3), x
- xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x průmyslovému xxxxxxxxxx, x v xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, případně xxxxxxxx rajčete, testovány xxxxxxxx xxxxx přílohy č. 1 [§76 xxxx. 1 xxxx. a) xxx 1. zákona];
e) smí xx xxxxxxx ostatních xxxxxxxxxxx rostlinolékařských xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxx 5 xxxxxx xx xxxxx pozemku xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx, pouze xxxxxxx-xx rozmnožovací materiál3), xxxxx byl xxxxxx xxxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxx5), x xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx rostlin na xxxxx pozemku xxxxxxxxxx xxxxxxx rostlinolékařskou správu xxxxxxxxxx jeden xxxxx xxxx sklizní těchto xxxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 3.
x) xxxxx provádět umělou xxxxxxx x roce xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx smí provádět xxxxxxx jen xx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxxx Xxxxxx x xx předpokladu, že xx vyloučeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx šíření xxxxxxx xxxxx xxxxxxx [§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 2 xxxxxx].
5.2.2. xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x):
x) xxxxx xx xxxxxxxxxx období xxxxxxxxxxxx xx vegetačním xxxxxx, x němž xxxx x xxxxx xxxxxxx byl zjištěn xxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx, xxxxxxxx brambor xxxx xxxx hostitelské xxxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x rajčete, x xxxx cíleně xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx hostitelských xxxxx xxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. a) xxx 2. xxxxxx/, xxxx
- smí pěstovat xxxxxxx xx xxxxxxxx, xx x xxxxxxx xxxx použit pouze xxxxxxxxxxxx materiál3), který xxx xxxxxx xxxxx xxxxx zvláštního zákona5), x xxxxxxxx xxxx xxxxxx výlučně xxx xxxxxxxx účely xxxx x xxxxxxxxxxxx zpracování [§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 2. xxxxxx],
- smí xxxxxxxx xxxxx xxxxx x osiva, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx právního xxxxxxxx6), x to xxxxx xxx xxxxxxxx plodů [§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx];
x) smí xx xxxx xxxx xxx následujících po xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a)
- x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jen xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx3) xxxx farmářskou xxxxx4) xxxxxxxxxxxx pod xxxxxxxxx Xxxxxx a xxxxxxxxxx xxx přílohy č. 1 xx výskyt xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx negativním,
- x xxxxxxxxx xxxxxxx používat xxxxx osivo, xxxxx xxxxxxxx požadavkům podle xxxxxxxxxx právního předpisu6), xxxx rostliny xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxx Xxxxxx [§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx];
x) xxxx ihned xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx zamořené x xxxxxxxx xx do xxxx xxxxxx přípustného xxxxxxxxx bramboru nebo xxxxxxx xxxxxxxxxx provádět xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx strojů a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx používaných xxx xxxxxxxxx bramboru xxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx x příloze č. 6 [§76 odst. 1 xxxx. x) bod 2. xxxxxx];
x) smí xxxxxxxx závlahu xxxxx xx podmínky, že xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx označena Xxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx [§76 odst. 1 xxxx. a) xxx 2 xxxxxx];
x) musí xx dobu xxx xxxxxxx vegetačních xxxxxx xx xxxxxxxxx výskytu xxxxxxx xxxxx hniloby xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rostoucí xxxxxxxx xxxxxxxx a ostatní xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx [§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 2. zákona].
5.3. xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx hlízy bramboru xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/;
5.4. xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx pouze xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx testováním xxxxxxxx xxxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxx zamořené nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx opatření /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 1. zákona/.
Sklizené xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx dodání xx xxxxx spotřeby xx xxxxx České xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxx xxxxxxx Xxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby, xxxxxx xxxxxxxxx řezu xxxxxxx xxxx, s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.5. xxx vyvážet xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxx zemí, xxxxx xxxxx budou xxxxxxxx úřední dovozní xxxxxxxxxx xxxxxxxx, stanovené xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 1. xxxxxx/;
5.6. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nářadí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, sklizni, xxxxxxxxxxx xxxxxx, přepravě x xxxxxxxxxx brambor, xxxxx přišly xx xxxxxxxx se zamořenými xxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxx od xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxx řádné očisty x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v příloze č. 6 /§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/;
5.7. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, kde xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xx sklenících xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx minihlízek, xxxxxxxxx x xxx.) xxxxxxxx xxxxxxx:
x) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx jiné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx, pokud xxxxxxx xxx xxxxxxxxx Ústavu x eradikaci xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, včetně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x rajčete, xxxxx výměně pěstebního xxxxxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v příloze č. 6 /§76 odst. 1 xxxx. a) bod 2. xxxxxx/;
x) xxxx xxxxx xxxxxxxxx bramboru xxxxxxx po xxxxxxxx Xxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx3) úředně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx5) xxxx získaného z xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx původce xxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. a) xxx 1. xxxxxx/;
x) xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx6), xxxx xxxxxxxx rajčete xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx Ústavu [§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 2. xxxxxx];
x) xxx xxxxx xxxxxxxxxx porosty xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxx se xxxxxxxxx Xxxxxx x xxxxxx Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zavlažovacích xxxxxxx x xxxxxxxxxxx území /§76 xxxx. 1 xxxx. a) xxx 2. xxxxxx/.
5.8. Zjištění xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx rajčete x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx 5.2.2. xxxx. x) xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx ohlásit Xxxxxx x před xxxxxxxxx těchto rostlin xxxx umožnit xxxxxx xxxxxx testování xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Při xxxxxxxxx xxxxxxx původce hnědé xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx považuje xx xxxxxxx xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/.
5.9. Ústav xxxxxxx xxxxxxxxx dohled xxx xxxxxxx a xxxxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxx xx skladují xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xx x xxxxxx rostlinami xxxxxxx, zejména nad xxxxxxxxxx očisty a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, která xx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x ve xxxxxxxxxx xxxxxxx bramboru xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
5.10. V xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx rozšíření xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. c), Xxxxx xxxxxx podle §7 xxxx. 1 xxxx. x), že uživatel xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx tří úplných xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx:
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxx očistu xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x závěrečnou xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx strojů, dopravních xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxx musí xxx xxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx sezóny /§76 odst. 1 xxxx.x) xxx 2. xxxxxx/;
x) xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx3) xxxxxxxx a farmářské xxxxx4) vypěstované pod xxxxxxxxx Ústavu x xxxxxxxxx xxx přílohy č. 1 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx negativním xx xxxxxxxxx rostlin xxxxxxxx [§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx];
x) x xxxxxxxxx bramboru používat xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx3) xxxx xxxxxxxxxx sadbu4) xxxxxxxxxxx xxx kontrolou Xxxxxx a xxxxxxxxx xxx přílohy č. 1 na xxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx [§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx];
x) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx osivo, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zvláštního xxxxxxxx xxxxxxxx6), xxxx xxxxxxxx xxxxxxx vypěstované x xxxxxxxxx osiva xxx xxxxxxxxx Xxxxxx [§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 2. xxxxxx].
5.11. V karanténním xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx §5 odst. 2 xxxx. x) xx xxxxxxx xxxxxxxx povrchové xxxx xx zamořenou xxxxxxxx xxxxx hniloby xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx podle §5 xxxx. 2 xxxx. x) Xxxxx:
x) xxxxxxx každoročně průzkum xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx x dotyčných xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx x xxxxxxxxx testováním xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x příloze č. 1;
b) xxxxxxx xxxxxxxx zavlažovacích x xxxxxxxxxxxx systémů x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx umělého zavlažování xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xx zabránilo xxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxx hniloby. Xxxxx xxxxx může xxx xxxxxxx v xxxxxxx, xxx je na xxxxxxx xxxxxxxx prováděného xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx, nebo xx jsou používány x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x jeho xxxxxx;
x) v xxxxxxx xxxxxxxx odpadních vod xxxxxxx kontrolu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx závodů, xxxxx manipulují x xxxxxxxxxx.
Příloha x. 5 x xxxxxxxx č. 331/2004 Xx.
Xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx zpracování partie xxxxxxxxxxx rostliny xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x) nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x)
Xxxxxx x xxxxx zneškodňování xxxxxx xxx průmyslovém xxxxxxxxxx xxxxxx hostitelské xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx1) Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx přílohy č. 4 xxxxxxxx 1 písm. x) a xxxxxxxx 2 xxxx. x) xxxx splňovat následující xxxxxxxxx xx zneškodňování xxxxxx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
1. Xxxxx odpad ze xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx rajčete
Vyhozené xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx vzniklý xxx zpracování xxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx, xxxxxx xxxx.) x xxxxxxx rajčete musí xxx:
x) xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx, xxx apod.). Xxxxx xxxx xxx přivezen xxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxx xxx, xxx xxxx během xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x dopravního xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxx přitom xxxxxxx xxx takové xxxxxxx, x nichž xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx hnědé hniloby xx xxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx xx zemědělsky xxxxxxxxx xxxx půdy xxxx, v xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, do xxxxxxxxxxx vod využívaných x zavlažování xxxxxxxxxx xxxx, xxxx
x) xxxxxxx x přihlédnutím xx xxxxxxxxxx xxxxxx2), xxxx
x) xxxxxxxxxxx jiným xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx schváleno Xxxxxxx x xxxxx bylo xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx riziko xxxxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxx xxxxx xxxxxxx. Tato xxxxxxxx xxxxxxx Xxxxx Xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx vyvézt xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx3) xxxx xxxx xxxxxxx xx trvalé xxxxxx xxxxxxx4) x xxxxxxx, xx Xxxxx posoudí, xx nehrozí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx rozšíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo hnědé xxxxxxx.
2. Xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxx je xxxxx odpadní vody, xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx pevný plovoucí xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxx vody xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Usazeniny xxxx být zneškodněny xxxxxxxx xxxxxxxx pod xxxxx 1.
Xxxxxxx vody xx pak nutno
- xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxx minimálně 60 xX uvnitř xxxxxx,
xxxx
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx Ústavem xxx, xxx xxxx xxxxxxxxx riziko, že xxxxx xxxxxx xx xxxxx xx zemědělskou xxxxx nebo xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zemědělské xxxx; xxxxxxxxxxx x xxxxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxx.
Příloha č. 6 x xxxxxxxx č. 331/2004 Xx.
Xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xx zamořeni xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx hnědé hniloby
1. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x předmětů a xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx rostlin x xxxx xx shromáždí (xxxxxxxx, vysátím xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, popřípadě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx strojů x zařízení stlačeným xxxxxxxx) x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx1). Xxx bezpečnější likvidaci xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx asanovat xxxxx xxxx uvedeného xxxxxxx xxxx jej xxxx xxxxxxxxxxxx zeminou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx 5 xx xx 1 m3.
Způsob x xxxxx likvidace xxxx být x xxxxxxx se zvláštním xxxxxxx xxxxxxxxx1) a xxxx xx xxxxxxxx Xxxxx.
2. Xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx anebo xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx důkladná xxxxxxxxxx očista dezinfikovaných xxxxxxx a předmětů xxxxx xxxx 1 xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx objekty, stroje x zařízení xxxxx xxxxxxxx vodou xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a nechají xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxx dostupnými x x xxxxxxx proti xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx hnědé hniloby Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxx schváleným xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx předmětů xxxxxx xxxxx x xxxxx
Xxxxxxx xx máčením xx xxxx xxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 65 °X xxxx 15 xxxxx při xxxxxxx xxxx 80 °X.
X xxxxxxx horkou xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, teplota tlakové xxxx musí dosahovat xxxxxxx 80 °X xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 minut. Xxx xxxxxxx xxx 100 °X xxx xxxx expozice xxxxxx xx 15 minut.
4. Xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx při xxxxxxx 120 °X xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxx 70 - 80 °C, xxxx xxxxx x tekuté xxxx x xxxxx.
Právní předpis x. 331/2004 Xx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx 31.5.2004.
Xx xxxxx tohoto xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx předpisem x.:
328/2008 Xx., kterým xx xxxx xxxxxxxx x. 331/2004 Xx., x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a původce xxxxxxxxxxx hnědé hniloby
s xxxxxxxxx xx 2.9.2008
4/2018 Xx., xxxxxx se xxxx xxxxxxxx č. 331/2004 Xx., x xxxxxxxxxx x zabezpečení xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bramboru x původce xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x. 328/2008 Sb.
s xxxxxxxxx xx 1.2.2018
Znění xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jiných xxxxxxxx předpisů x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx jich xxxxxx derogační změna xxxxx xxxxxxxxx právního xxxxxxxx.
3) §1 odst. 2 zákona x. 334/1992 Xx., o xxxxxxx zemědělského xxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4) §3 odst. 5 xxxxxxxx xxxxx x. 307/2014 Xx., x stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vztahů, xx znění xxxxxxxxxx xxxxxxxx.